JPH06336437A - 発癌プロモーション抑制組成物 - Google Patents

発癌プロモーション抑制組成物

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JPH06336437A JP5283101A JP28310193A JPH06336437A JP H06336437 A JPH06336437 A JP H06336437A JP 5283101 A JP5283101 A JP 5283101A JP 28310193 A JP28310193 A JP 28310193A JP H06336437 A JPH06336437 A JP H06336437A
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肇 大東
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明 村上
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Abstract

(57)【要約】 【目的】 発癌プロモーション抑制に有用な組成物の提
供。 【構成】 コブミカン抽出物を有効成分とする発癌プロ
モーションを抑制した組成物。 【効果】 コブミカン抽出物を用いることにより、有効
な発癌プロモーションの抑制が期待できる。

Description

【発明の詳細な説明】
【0001】
【産業上の利用分野】本発明は、発癌プロモーション抑
制作用を有する成分を含有する、腫瘍ないしは癌の発生
を抑制する食品や化粧料、抗腫瘍剤等の医薬のごとき発
癌プロモーション抑制組成物に関する。
【0002】
【従来の技術】近年、化学発癌の機構については、イニ
シエーションおよびプロモーションと呼ばれる2つの全
く異なった過程で成立する2段階発ガン説が広く認めら
れている。
【0003】イニシエーションとはイニシエーターとよ
ばれる物質が、正常細胞のDNAを不可逆的に損傷さ
せ、潜在的腫瘍細胞に変化させる過程である。この過程
ではガン化には至らないが、この潜在的腫瘍細胞にプロ
モーターとよばれる物質が働くと腫瘍が生じる。この過
程をプロモーションと言う。イニシエーションおよびプ
ロモーション過程の両方もしくは一方の過程を抑えるこ
とができれば、癌の発生を抑えることが可能であると考
えられる。しかし、不可逆的な過程であるイニシエーシ
ョンの抑制は、実効的な発癌抑制手段とはいえない。一
方、プロモーション過程は長期にわたる可逆的過程であ
るため、その間に発癌を抑制することが可能である。こ
の観点から、現在、プロモーション過程の抑制が発癌抑
制の有効な方策として注目されている。現在までに、プ
ロモーションを抑制する化合物として、ウルソール酸お
よびオレアノール酸[CancerLetters, 30, 143
−151(1986); Cancer Letters, 33,27
9−285(1986)]、その他モッコラクトンなど数
多くの化合物が見出だされている。
【0004】
【発明が解決しようとする課題】発癌物質は食品中や環
境中に広く散在しており、我々の体は常にこれらの物質
による危険にさらされていると考えられる。それ故、一
時的なプロモーションの抑制だけでは不十分である。今
後、常用性の点からみて、毒性の低いプロモーション抑
制物質を見いだすことが必要不可欠であると考えられ
る。そこで、我々は、安全性の面から食用可能な野菜、
果実、生薬などの天然物に注目した。本発明は、これら
可食素材の中から、プロモーション抑制作用を有する化
合物ないしは成分を見いだし、それらを利用し、発癌プ
ロモーション過程を抑制し、腫瘍や癌の発生を抑制する
食品や化粧料、抗腫瘍剤のような医薬等として適した組
成物を開発することを目的とする。
【0005】
【課題を解決するための手段】本発明者らはタイ産の食
用植物を中心にプロモーション抑制作用の検討を行っ
た。プロモーション抑制物質のスクリーニングには、短
時間に大量の試料について試験が可能なEBV−EA誘
導試験[Cancer Letters, 13, 29−37(19
81)]に準じて行った。この試験法は、12−O−テト
ラデカノイルホルボール−13−アセテート(TPA)、
テレオシジンなどの発癌プロモーターが、ラージ細胞
(Raji細胞)中に潜在するエプスタイン・バー・ウイル
ス(EBV)を活性化する事実に基づいた方法で、EBV
活性化抑制作用と発癌プロモーション抑制作用との高い
相関性は多くの化合物で明らかにされている。その結
果、ミカン科のコブミカン(Citrus hystrix)の抽出物
に強いEBV活性化抑制作用があることを見出だした。
【0006】すなわち、本発明は、(1)コブミカン
(Citrus hystrix)の抽出物を有効成分としてなる発癌
プロモーション抑制組成物、(2)抽出物が親水性有機
溶媒抽出物である上記(1)記載の組成物、(3)食用
である上記(1)記載の組成物、(4)抗腫瘍剤である
上記(1)記載の組成物、(5)発癌プロモーション抑
制剤としてコブミカンの抽出物を添加することを特徴と
する発癌プロモーション抑制食用組成物の製法、(6)
式(I):
【0007】
【化2】
【0008】[式中、R1およびR2は、同一または異な
って、α−リノレノイルまたはパルミトイルである]で
示される化合物を有効成分としてなる発癌プロモーショ
ン抑制組成物、(7)R1およびR2がそれぞれα−リノ
レノイルである上記(6)記載の組成物、(8)R1
パルミトイルおよびR2がα−リノレノイルである上記
(6)記載の組成物、および(9)R1がα−リノレノ
イルおよびR2がパルミトイルである上記(6)記載の
組成物に関する。
【0009】本発明で用いる抽出物は、タイ産のコブミ
カンとして入手できる植物の各部位、例えば、葉、果
実、花、樹皮、根等から抽出できるが、特に、葉からの
抽出が好ましい。
【0010】抽出は、常法に従い、極性有機溶媒(メタ
ノール、エタノール等)、非極性有機溶媒、水これらの
混合溶媒を用いて行うことができ、特に、極性有機溶媒
が好ましい。本発明においては、公知の方法で抽出溶媒
を除去して得られる抽出物をそのまま本発明の組成物に
使用でき、あるいはさらに、常法により、乾燥、粉末
化、顆粒化、溶液化等の加工を施して使用してもよい。
【0011】得られた抽出物に含まれる有効成分を検討
した結果、上記式(I)で表される化合物を有効成分と
して同定することができた。式(I)で表される化合物
としては、例えばR1およびR2がそれぞれα−リノレノ
イルである化合物(即ち、1,2−ジ−α−リノレノイ
ル−3−β−ガラクトシルグリセロール)、R1がパル
ミトイルおよびR2がα−リノレノイルである化合物
(即ち、2−α−リノレノイル−1−パルミトイル−3
−β−ガラクトシルグリセロール)、およびR1がα−
リノレノイルおよびR2がパルミトイルである化合物
(即ち、1−α−リノレノイル−2−パルミトイル−3
−β−ガラクトシルグリセロール)が挙げられる。これ
らはいずれも公知化合物である。
【0012】本発明の組成物は、得られた抽出物やその
加工品を自体公知の食品成分、化粧料成分あるいは医薬
担体または賦形剤と自体公知の方法で合して、腫瘍や癌
の発生を抑制する食品や化粧料、抗腫瘍剤のごとき医薬
とすることができる。用いる食品成分、化粧料成分、医
薬担体または賦形剤は特に限定するものではなく、当該
組成物の具体的用途に応じて当業者が適宜選択できる。
また、組成物の形態も特に限定するものではなく、具体
的用途に応じて、種々の固体や液体の形態とすることが
できる。
【0013】本発明の組成物は、食品としての摂取が最
も望ましいが、これに特に限定されるものではなく、経
口投与剤、外用剤等の医薬や化粧料とすることもでき
る。一般に、コブミカン抽出物として、成人1日当たり
の摂取量は、10mg〜4,000mgの範囲であり、これ
により、所望の効果がえられる。また、本発明で用いる
抽出物は、それ自体可食材料から得られるものであり、
その安全性は非常に高いものといえる。
【0014】
【実施例】以下に、試験例および実施例を挙げて、本発
明をさらに詳しく説明する。EBV−EA誘導試験について RPMI1640培地1ml中にラージ細胞(Raji細胞)
5×105個、n−酪酸3μmol、テレオシジンB−4
20ngおよび一定量の被検物質を加え37℃、5%CO
2気流下で48時間培養する。培養後、細胞密度および
生存率を測定する。つぎに、細胞を含む培養液をスライ
ドグラス上にスポットし、塗沫標本を作成する(スメア
ーの作成)。各スメアーに上咽頭癌患者血清(一次抗体)
をのせ、37℃で40分間反応を行う。スメアーを洗浄
後、フルオレセインイソチオシアネート標識抗ヒトIg
G(二次抗体)をのせ、37℃で40分間反応させる。洗
浄後、蛍光顕微鏡で検鏡する。その際、まず明視野で最
低500個の細胞を数え、ついで、EBVの活性化によ
り生じたEBV早期抗原(EBV−EA)を有する細胞を
蛍光観察により数える。全細胞数に対するEBV−EA
産生細胞の割合をEBV−EA誘導率とする。抑制率は
誘導物質のみによるEBV−EA誘導率(X%)、および
被験物質を加えた際のEBV−EA誘導率(Y%)から次
式により求める。
【0015】
【数1】抑制率=[(X−Y)/X]×100
【0016】実施例1 タイ産のコブミカン(Citrus hystrix)の新鮮葉1kgを
メタノール10リットルに2週間浸漬し、濾過後、濾液
の濃縮により溶剤を除去して、抽出物19.3gを得
た。このエキスのEBV活性化抑制活性を上記試験法に
従い測定したところ、99%以上の抑制率を示した。な
お、被検物質はテレオシジンB−4に対し、モル比で、
1,000倍量を試験に供した。被験物は発癌プロモー
ターであるテレオシジンB−4によるEBV活性化を抑
制したことから、発癌プロモーション抑制作用を持つ化
合物であることが明らかとなった。
【0017】実施例2 実施例1で得られた抽出物を酢酸エチルと水で分配し、
酢酸エチル画分より溶媒を除去してエキスを得た。この
エキスをトルエン:アセトンの溶媒系を用い、シリカゲ
ルカラムクロマトグラフィーにて分画を行い、80%ア
セトン溶出部を集めた。EBV−EA誘導抑制活性を指
標に、有効成分を含む画分を見いだし、その画分を更に
ODSカラムクロマトグラフィー(メタノール:水、
9:1)、ODSカラムクロマトグラフィー(メタノー
ル:アセトニトリル:水、16:4:5)、薄層クロマ
トグラフィー(クロロホルム:メタノール、9:1)に
て分画を行い、式(I)で表されるジ−α−リノレノイ
ル化合物およびα−リノレノイル−パルミトイル化合物
を各々82mgおよび44mg得た。これらの化合物をテレ
オシジンB−4に対しモル比でそれぞれ100、10倍
の量で測定した。その結果、両化合物ともに有意に抑制
活性を示した。その結果を表1に示す。
【0018】
【表1】 被検物質のEBV−EA誘導試験の結果 細胞 EBV−EA 被検物質 細胞密度 生存率 抑制率 ジ−α−リノレノイル化合物 ×100 1.0 71 93 ×10 0.8 86 47 α−リノレノイル−パルミトイル化合物 ×100 0.7 72 94 ×10 0.8 82 50
【0019】実施例3 脱脂乳1,000ml、砂糖1.3kg、75%酒造用乳酸
17ml、クエン酸3g、酒石酸3g、上記と同様にして得
られたコブミカン・エタノール抽出物2.5g、レモンエ
ッセンス5mlを混合し、これを殺菌した後、約50℃で
ホモゲナイザーにかけて均質化した。均質化後、エージ
ングとして1〜4℃で24時間冷蔵して、混合物の粘度
と泡立ちを良くさせた。ついで、アイスクリームフリー
ザーにいれ、撹拌しながら空気を吹き込み凍結させた。
容器に小分けした後、これを−28℃〜−18℃の冷凍
貯蔵室に6〜12時間保ち、硬化させることで、コブミ
カン・エタノール抽出物を1食当たり、50〜200mg
含む所望のアイスクリームを製造した。
【0020】実施例4 砂糖260g、クエン酸3.2g、防腐剤2.5mlに水を
加え、加熱して溶かした。これに蜜柑果汁200mlとコ
ブミカン・エタノール抽出物1,000mgを加えた。こ
れを布で濾過した後、乳化香料としてオレンジクラウデ
ィを3ml加え、瓶に小分けし、打栓後、80℃で殺菌し
た。これにより1mlあたり0.6mgのコブミカンエタノ
ール抽出物を含む所望のオレンジジュースを製造した。
【0021】実施例5 コブミカン・エタノール抽出物30mgに乳糖80mg、コ
ーンスターチ15mg、グアーガム0.9mgを加え、常法
に従い、一錠あたりコブミカン・エタノール抽出物を3
0mg含む錠剤を調製した。
【0022】
【発明の効果】本発明のコブミカン抽出液はプロモータ
ーであるテレオシジンB−4によるEBVの活性化を強
く抑制することから、発癌プロモーション抑制成分とし
て有用であり、かつ、可食材料由来のもので安全性が高
く、それを用いて、発癌プロモーション抑制に有用な食
品や化粧料、医薬等が得られる。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 村上 明 兵庫県尼崎市南塚口町5丁目14番20号 メ ゾンリバティー103号 (72)発明者 西田 勉 兵庫県伊丹市荻野1丁目71番地 ファミー ル荻野203号

Claims (9)

    【特許請求の範囲】
  1. 【請求項1】 コブミカン(Citrus hystrix)の抽出物
    を有効成分としてなる発癌プロモーション抑制組成物。
  2. 【請求項2】 抽出物が親水性有機溶媒抽出物である請
    求項1記載の組成物。
  3. 【請求項3】 食用である請求項1記載の組成物。
  4. 【請求項4】 抗腫瘍剤である請求項1記載の組成物。
  5. 【請求項5】 発癌プロモーション抑制剤としてコブミ
    カンの抽出物を添加することを特徴とする発癌プロモー
    ション抑制食用組成物の製法。
  6. 【請求項6】 式(I): 【化1】 [式中、R1およびR2は、同一または異なって、α−リ
    ノレノイルまたはパルミトイルである]で示される化合
    物を有効成分としてなる発癌プロモーション抑制組成
    物。
  7. 【請求項7】 R1およびR2がそれぞれα−リノレノイ
    ルである請求項6記載の組成物。
  8. 【請求項8】 R1がパルミトイルおよびR2がα−リノ
    レノイルである請求項6記載の組成物。
  9. 【請求項9】 R1がα−リノレノイルおよびR2がパル
    ミトイルである請求項6記載の組成物。
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