JPH06313118A - 標識色素及び標識色素の中間物 - Google Patents
標識色素及び標識色素の中間物Info
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- JPH06313118A JPH06313118A JP5104055A JP10405593A JPH06313118A JP H06313118 A JPH06313118 A JP H06313118A JP 5104055 A JP5104055 A JP 5104055A JP 10405593 A JP10405593 A JP 10405593A JP H06313118 A JPH06313118 A JP H06313118A
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- polymethinecyanine
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- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
- C09B—ORGANIC DYES OR CLOSELY-RELATED COMPOUNDS FOR PRODUCING DYES, e.g. PIGMENTS; MORDANTS; LAKES
- C09B23/00—Methine or polymethine dyes, e.g. cyanine dyes
- C09B23/02—Methine or polymethine dyes, e.g. cyanine dyes the polymethine chain containing an odd number of >CH- or >C[alkyl]- groups
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- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【目的】 ポリメチンシアニン系色素及びメロシアニン
系色素に化学結合能を有するカルボキシル基を導入し、
化学結合による標識を可能とする。 【構成】 下記式（化１）で示されるポリメチンシアニ
ン誘導体からなる標識色素（ただし、Ｘ-は陰イオンを
示す）。例えばビス−｛１−（２−カルボキシエチル）
−ベンゾチアゾリン｝−ペンタメチンシアニン過塩素酸
塩である。ポリメチンシアニン系色素にカルボキシル基
を導入することによって、アミノ基やアルコール性水酸
基を有する物質を化学結合により標識することが可能と
なる。すなわち、アミノ基とはアミド結合を、アルコー
ル性水酸基とはエステル結合を生成できる。特に、細胞
内あるいは細胞表面上に存在するアミノ基を有する物質
を標識することができ、細胞についての分光学的分析を
能率良く行うことができる。 【化１】
系色素に化学結合能を有するカルボキシル基を導入し、
化学結合による標識を可能とする。 【構成】 下記式（化１）で示されるポリメチンシアニ
ン誘導体からなる標識色素（ただし、Ｘ-は陰イオンを
示す）。例えばビス−｛１−（２−カルボキシエチル）
−ベンゾチアゾリン｝−ペンタメチンシアニン過塩素酸
塩である。ポリメチンシアニン系色素にカルボキシル基
を導入することによって、アミノ基やアルコール性水酸
基を有する物質を化学結合により標識することが可能と
なる。すなわち、アミノ基とはアミド結合を、アルコー
ル性水酸基とはエステル結合を生成できる。特に、細胞
内あるいは細胞表面上に存在するアミノ基を有する物質
を標識することができ、細胞についての分光学的分析を
能率良く行うことができる。 【化１】
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はポリメチンシアニン系色
素、メロシアニン系色素及びこれを合成するための中間
物に関する。さらに詳しくは、分析化学あるいは生化学
などの分野において、色素を用いて物質を標識し化学変
化や溶液の状態変化を追跡する際に、好適な化学結合能
を有する標識化合物であるポリメチンシアニン系色素、
メロシアニン系色素及びこれを合成するための中間物に
関する。
素、メロシアニン系色素及びこれを合成するための中間
物に関する。さらに詳しくは、分析化学あるいは生化学
などの分野において、色素を用いて物質を標識し化学変
化や溶液の状態変化を追跡する際に、好適な化学結合能
を有する標識化合物であるポリメチンシアニン系色素、
メロシアニン系色素及びこれを合成するための中間物に
関する。
【０００２】
【従来の技術】ポリメチンシアニン系色素及びメロシア
ニン系色素はいずれもインドール及びその類似物のイン
モニウム塩から合成される色素である。以下に示すよう
な多くの特徴から、写真用増感材、色素レーザー発振用
色素などの工業材料として知られている。すなわち、 （１）吸収帯のピークが狭く純粋な色が出る。 （２）高い吸光度係数を有する。 （３）蛍光の量子収率が高い。 （４）比較的単純な構造で長波長の吸収をする。などが
挙げられる。
ニン系色素はいずれもインドール及びその類似物のイン
モニウム塩から合成される色素である。以下に示すよう
な多くの特徴から、写真用増感材、色素レーザー発振用
色素などの工業材料として知られている。すなわち、 （１）吸収帯のピークが狭く純粋な色が出る。 （２）高い吸光度係数を有する。 （３）蛍光の量子収率が高い。 （４）比較的単純な構造で長波長の吸収をする。などが
挙げられる。
【０００３】これらの特徴が注目されて、近年は前述の
工業用途のみならず、光電子移動研究（例えば、D.L.Mo
rel et al, J. Phys. Chem.,１９８４，８８，９２３−
９３３) の材料や生化学における膜電位測定（例えば、
Biochemistry，１９８５，２４，２２１）の蛍光プロー
ブとしても用いられている。
工業用途のみならず、光電子移動研究（例えば、D.L.Mo
rel et al, J. Phys. Chem.,１９８４，８８，９２３−
９３３) の材料や生化学における膜電位測定（例えば、
Biochemistry，１９８５，２４，２２１）の蛍光プロー
ブとしても用いられている。
【０００４】
【発明が解決しようとする問題点】色素を蛍光プローブ
として用いる場合、被標識物と色素を物理的に吸着させ
る方法がある。この物理吸着による方法は手軽な点、標
識化合物に化学的制約があまりない点が長所であるが、
反面標識色素が被標識物から分離して溶液内で拡散して
しまう欠点がある。
として用いる場合、被標識物と色素を物理的に吸着させ
る方法がある。この物理吸着による方法は手軽な点、標
識化合物に化学的制約があまりない点が長所であるが、
反面標識色素が被標識物から分離して溶液内で拡散して
しまう欠点がある。
【０００５】本発明は、前記従来の課題を解決するた
め、ポリメチンシアニン系色素及びメロシアニン系色素
に化学結合可能な官能基であるカルボキシル基を導入し
た物質及びこれらを合成する際に有用な中間物を提供す
ることを目的とする。
め、ポリメチンシアニン系色素及びメロシアニン系色素
に化学結合可能な官能基であるカルボキシル基を導入し
た物質及びこれらを合成する際に有用な中間物を提供す
ることを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】前記問題点を解決するた
めに、本発明は次の構成を有する。 （１）前記式（化１）で示されるポリメチンシアニン誘
導体からなる標識色素（ただし、Ｘ-は陰イオンを示
す）。
めに、本発明は次の構成を有する。 （１）前記式（化１）で示されるポリメチンシアニン誘
導体からなる標識色素（ただし、Ｘ-は陰イオンを示
す）。
【０００７】（２）前記式（化２）で示されるポリメチ
ンシアニン誘導体からなる標識色素（ただし、Ｘ-は陰
イオンを示す）。 （３）前記式（化３）で示されるメロシアニン誘導体か
らなる標識色素。
ンシアニン誘導体からなる標識色素（ただし、Ｘ-は陰
イオンを示す）。 （３）前記式（化３）で示されるメロシアニン誘導体か
らなる標識色素。
【０００８】（４）前記式（化４）で示されるメロシア
ニン誘導体からなる標識色素。 （５）前記式（化５）で示されるポリメチンシアニン誘
導体またはメロシアニン誘導体の中間物（ただし、Ｘ-
は陰イオンを示す）。
ニン誘導体からなる標識色素。 （５）前記式（化５）で示されるポリメチンシアニン誘
導体またはメロシアニン誘導体の中間物（ただし、Ｘ-
は陰イオンを示す）。
【０００９】
【作用】本発明の前記化学式（化１）で示されるポリメ
チンシアニン誘導体からなる標識色素によれば、カルボ
キシル基を有するのでアミノ基やアルコール性水酸基を
有する物質を化学結合により標識することが可能とな
る。すなわち、アミノ基とはアミド結合を、アルコール
性水酸基とはエステル結合を生成できる。特に、細胞内
あるいは細胞表面上に存在するアミノ基を有する物質を
標識することができ、細胞についての分光学的分析を能
率良く行うことができる。
チンシアニン誘導体からなる標識色素によれば、カルボ
キシル基を有するのでアミノ基やアルコール性水酸基を
有する物質を化学結合により標識することが可能とな
る。すなわち、アミノ基とはアミド結合を、アルコール
性水酸基とはエステル結合を生成できる。特に、細胞内
あるいは細胞表面上に存在するアミノ基を有する物質を
標識することができ、細胞についての分光学的分析を能
率良く行うことができる。
【００１０】また、前記化学式（化２）で示されるポリ
メチンシアニン誘導体からなる標識色素も同様に、アミ
ノ基やアルコール性水酸基を有する物質を化学結合によ
り標識することが可能となる。特に、細胞についての分
光学的分析を能率良く行うことができる。
メチンシアニン誘導体からなる標識色素も同様に、アミ
ノ基やアルコール性水酸基を有する物質を化学結合によ
り標識することが可能となる。特に、細胞についての分
光学的分析を能率良く行うことができる。
【００１１】また、前記化学式（化３）及び（化４）で
示されるメロシアニン誘導体からなる標識色素も同様
に、アミノ基やアルコール性水酸基を有する物質を化学
結合により標識することが可能となる。特に、細胞につ
いての分光学的分析を能率良く行うことができる。
示されるメロシアニン誘導体からなる標識色素も同様
に、アミノ基やアルコール性水酸基を有する物質を化学
結合により標識することが可能となる。特に、細胞につ
いての分光学的分析を能率良く行うことができる。
【００１２】次に、本実施例の前記化学式（化５）で示
されるポリメチンシアニン誘導体またはメロシアニン誘
導体の中間物によれば、ポリメチンシアニン誘導体また
はメロシアニン誘導体からなる標識色素を合成するのに
有用な中間物を提供できる。
されるポリメチンシアニン誘導体またはメロシアニン誘
導体の中間物によれば、ポリメチンシアニン誘導体また
はメロシアニン誘導体からなる標識色素を合成するのに
有用な中間物を提供できる。
【００１３】
【実施例】前記化学式（化５）で示されるポリメチンシ
アニン誘導体またはメロシアニン誘導体の中間物は、例
えば、約１ｍｏｌ／ｌのメチルベンゾチアゾールの有機
溶媒溶液、例えば、ベンゼン溶液に、約１〜１．３当量
モルに相当するヨードプロピオン酸を加え、約８０℃で
約４〜４８時間加熱することによって得ることができ
る。
アニン誘導体またはメロシアニン誘導体の中間物は、例
えば、約１ｍｏｌ／ｌのメチルベンゾチアゾールの有機
溶媒溶液、例えば、ベンゼン溶液に、約１〜１．３当量
モルに相当するヨードプロピオン酸を加え、約８０℃で
約４〜４８時間加熱することによって得ることができ
る。
【００１４】また、前記化学式（化１）で示されるポリ
メチンシアニン誘導体からなる標識色素は、例えば、約
０．３３ｍｏｌ／ｌの前記化学式（化５）で示されるポ
リメチンシアニン誘導体またはメロシアニン誘導体の中
間物の塩基性の有機溶媒溶液、例えば、ピリジン溶液
に、約０．５〜１当量モルに相当するテトラメトキシプ
ロパンを加え、約１２０℃で約１５〜１２０分間加熱し
た後、テトラメトキシプロパン添加量の約３当量モルに
相当する過塩素酸ナトリウムを添加することによって得
ることができる。
メチンシアニン誘導体からなる標識色素は、例えば、約
０．３３ｍｏｌ／ｌの前記化学式（化５）で示されるポ
リメチンシアニン誘導体またはメロシアニン誘導体の中
間物の塩基性の有機溶媒溶液、例えば、ピリジン溶液
に、約０．５〜１当量モルに相当するテトラメトキシプ
ロパンを加え、約１２０℃で約１５〜１２０分間加熱し
た後、テトラメトキシプロパン添加量の約３当量モルに
相当する過塩素酸ナトリウムを添加することによって得
ることができる。
【００１５】また、前記化学式（化２）で示されるポリ
メチンシアニン誘導体からなる標識色素は、例えば、約
０．３３ｍｏｌ／ｌの前記化学式（化５）で示されるポ
リメチンシアニン誘導体またはメロシアニン誘導体の中
間物の塩基性の有機溶媒溶液、例えば、ピリジン溶液
に、約０．５〜１当量モルに相当するトリエチルオルト
ホルメートを加え、約１２０℃で約１５〜１２０分間加
熱した後、トリエチルオルトホルメート添加量の約３当
量モルに相当する過塩素酸ナトリウムを添加することに
よって得ることができる。
メチンシアニン誘導体からなる標識色素は、例えば、約
０．３３ｍｏｌ／ｌの前記化学式（化５）で示されるポ
リメチンシアニン誘導体またはメロシアニン誘導体の中
間物の塩基性の有機溶媒溶液、例えば、ピリジン溶液
に、約０．５〜１当量モルに相当するトリエチルオルト
ホルメートを加え、約１２０℃で約１５〜１２０分間加
熱した後、トリエチルオルトホルメート添加量の約３当
量モルに相当する過塩素酸ナトリウムを添加することに
よって得ることができる。
【００１６】また、前記化学式（化３）で示されるメロ
シアニン誘導体からなる標識色素は、例えば、約０．３
３ｍｏｌ／ｌの前記化学式（化５）で示されるポリメチ
ンシアニン誘導体またはメロシアニン誘導体の中間物の
塩基性の有機溶媒溶液、例えば、ピリジン溶液に、約１
〜１．３当量モルに相当するエトキシメチレンシアノ酢
酸エチルエステルを加え、約１２０℃で約１５〜１２０
分間加熱することによって得ることができる。
シアニン誘導体からなる標識色素は、例えば、約０．３
３ｍｏｌ／ｌの前記化学式（化５）で示されるポリメチ
ンシアニン誘導体またはメロシアニン誘導体の中間物の
塩基性の有機溶媒溶液、例えば、ピリジン溶液に、約１
〜１．３当量モルに相当するエトキシメチレンシアノ酢
酸エチルエステルを加え、約１２０℃で約１５〜１２０
分間加熱することによって得ることができる。
【００１７】また、前記化学式（化４）で示されるメロ
シアニン誘導体からなる標識色素は、例えば、約０．３
３ｍｏｌ／ｌの前記化学式（化５）で示されるポリメチ
ンシアニン誘導体またはメロシアニン誘導体の中間物の
塩基性の有機溶媒溶液、例えば、ピリジン溶液に、約１
〜１．３当量モルに相当するエトキシメチンマロノニト
リルを加え、約１２０℃で約１５〜１２０分間加熱する
ことによって得ることができる。
シアニン誘導体からなる標識色素は、例えば、約０．３
３ｍｏｌ／ｌの前記化学式（化５）で示されるポリメチ
ンシアニン誘導体またはメロシアニン誘導体の中間物の
塩基性の有機溶媒溶液、例えば、ピリジン溶液に、約１
〜１．３当量モルに相当するエトキシメチンマロノニト
リルを加え、約１２０℃で約１５〜１２０分間加熱する
ことによって得ることができる。
【００１８】前記化学式（化１）及び（化２）で示され
るポリメチンシアニン誘導体からなる標識色素構造式
中、Ｘの陰イオンは、例えばハロゲン、ｐ−トルエンス
ルフォン酸またはＣｌＯ4 のアニオンである。ハロゲン
としては、塩素、臭素、ヨウ素が好ましい。
るポリメチンシアニン誘導体からなる標識色素構造式
中、Ｘの陰イオンは、例えばハロゲン、ｐ−トルエンス
ルフォン酸またはＣｌＯ4 のアニオンである。ハロゲン
としては、塩素、臭素、ヨウ素が好ましい。
【００１９】また、前記化学式（化５）で示される本実
施例の標識色素の中間物の構造式中、Ｘの陰イオンは、
例えばハロゲン、ｐ−トルエンスルフォン酸のアニオン
である。ハロゲンとしては、塩素、臭素、ヨウ素が好ま
しい。
施例の標識色素の中間物の構造式中、Ｘの陰イオンは、
例えばハロゲン、ｐ−トルエンスルフォン酸のアニオン
である。ハロゲンとしては、塩素、臭素、ヨウ素が好ま
しい。
【００２０】以下、具体的実施例を挙げて、本発明をさ
らに詳しく説明する。 実施例１ １−（２−カルボキシエチル）−２−メチルベンゾチア
ゾール（以下ＰＡＭＢＳ）の作製 前記化学式（化５）（ただしＸ-はＩ- ）の構造を持つ
本実施例の標識色素の中間物であるＰＡＭＢＳを以下に
示す方法で合成した。
らに詳しく説明する。 実施例１ １−（２−カルボキシエチル）−２−メチルベンゾチア
ゾール（以下ＰＡＭＢＳ）の作製 前記化学式（化５）（ただしＸ-はＩ- ）の構造を持つ
本実施例の標識色素の中間物であるＰＡＭＢＳを以下に
示す方法で合成した。
【００２１】１４．９ｇの２−メチルベンゾチアゾール
（MW＝１４９．２２、０．１ｍｏｌ）と２０．０ｇの３
−ヨードプロピオン酸（MW＝１９９．９８、０．１ｍｏ
ｌ）をベンゼン（１００ｍｌ）中で窒素気流下４８時間
リフラックスした。その後、反応液を室温に冷却すると
白色の固体が析出した。これをろ過後、ベンゼンで２度
洗浄した。ＮＭＲの結果より目的物であることを確認し
た。この生成物の収量及び収率は、それぞれ８．５ｇ、
２４．３％であった。以下に得られたＰＡＭＢＳの 1Ｈ
- ＮＭＲの特徴的なピークのケミカルシフトを示す。
（MW＝１４９．２２、０．１ｍｏｌ）と２０．０ｇの３
−ヨードプロピオン酸（MW＝１９９．９８、０．１ｍｏ
ｌ）をベンゼン（１００ｍｌ）中で窒素気流下４８時間
リフラックスした。その後、反応液を室温に冷却すると
白色の固体が析出した。これをろ過後、ベンゼンで２度
洗浄した。ＮＭＲの結果より目的物であることを確認し
た。この生成物の収量及び収率は、それぞれ８．５ｇ、
２４．３％であった。以下に得られたＰＡＭＢＳの 1Ｈ
- ＮＭＲの特徴的なピークのケミカルシフトを示す。
【００２２】1Ｈ- ＮＭＲ( ＣＤ3 ＯＤ) ：δ(ppm) ＝
４．８５（２Ｈ，ｔ，ＮＣＨ2 ）、７．７−８．６（４
Ｈ、ｍ，aromatic）、３．３（３Ｈ，ｓ，Ｎ＝ＣＣ
Ｈ3 ） 実施例２ ビス−｛１−（２−カルボキシエチル）−ベンゾチアゾ
リン｝−ペンタメチンシアニン過塩素酸塩の作製 前記化学式（化１）（ただしＸ-はＣｌＯ4 -）の構造を
持つ本実施例のポリメチンシアニン誘導体からなる標識
色素を以下に示す方法で合成した。
４．８５（２Ｈ，ｔ，ＮＣＨ2 ）、７．７−８．６（４
Ｈ、ｍ，aromatic）、３．３（３Ｈ，ｓ，Ｎ＝ＣＣ
Ｈ3 ） 実施例２ ビス−｛１−（２−カルボキシエチル）−ベンゾチアゾ
リン｝−ペンタメチンシアニン過塩素酸塩の作製 前記化学式（化１）（ただしＸ-はＣｌＯ4 -）の構造を
持つ本実施例のポリメチンシアニン誘導体からなる標識
色素を以下に示す方法で合成した。
【００２３】２．０ｇのＰＡＭＢＳ（MW＝３４９．１
９、５．７２ｍｍｏｌ）と０．４７ｇのテトラメトキシ
プロパン（MW＝１６４．２０、２．８６ｍｍｏｌ）をピ
リジンに溶解し、窒素気流下１５分間リフラックスし
た。数分後反応液は濃青色に変化した。その後、過塩素
酸ナトリウム(MW=１４０．４６，１．７６ｇ，１２．５
４ｍｍｏｌ）水溶液及び約１０ｍｌの過塩素酸を添加し
た。深青色の固体が析出したのでこれをろ過し、純水で
洗浄後乾燥した。ＮＭＲの結果より目的物であることを
確認した。この生成物の収量及び収率は、それぞれ０．
７ｇ、４２．３％であった。以下に得られた目的物の 1
Ｈ- ＮＭＲの特徴的なピークのケミカルシフトを示す。
９、５．７２ｍｍｏｌ）と０．４７ｇのテトラメトキシ
プロパン（MW＝１６４．２０、２．８６ｍｍｏｌ）をピ
リジンに溶解し、窒素気流下１５分間リフラックスし
た。数分後反応液は濃青色に変化した。その後、過塩素
酸ナトリウム(MW=１４０．４６，１．７６ｇ，１２．５
４ｍｍｏｌ）水溶液及び約１０ｍｌの過塩素酸を添加し
た。深青色の固体が析出したのでこれをろ過し、純水で
洗浄後乾燥した。ＮＭＲの結果より目的物であることを
確認した。この生成物の収量及び収率は、それぞれ０．
７ｇ、４２．３％であった。以下に得られた目的物の 1
Ｈ- ＮＭＲの特徴的なピークのケミカルシフトを示す。
【００２４】1Ｈ- ＮＭＲ( ＤＭＳＯ−ｄ6 ) ：δ(ppm)
＝４．７（４Ｈ，ｔ，ＮＣＨ2 ）、７．３−８．６
（８Ｈ、ｍ，aromatic） 実施例３ ビス−｛１−（２−カルボキシエチル）−ベンゾチアゾ
リン｝−トリメチンシアニン過塩素酸塩の作製 前記化学式（化２）（ただしＸ-はＣｌＯ4 -）の構造を
持つ本実施例のポリメチンシアニン誘導体からなる標識
色素を以下に示す方法で合成した。
＝４．７（４Ｈ，ｔ，ＮＣＨ2 ）、７．３−８．６
（８Ｈ、ｍ，aromatic） 実施例３ ビス−｛１−（２−カルボキシエチル）−ベンゾチアゾ
リン｝−トリメチンシアニン過塩素酸塩の作製 前記化学式（化２）（ただしＸ-はＣｌＯ4 -）の構造を
持つ本実施例のポリメチンシアニン誘導体からなる標識
色素を以下に示す方法で合成した。
【００２５】２．０ｇのＰＡＭＢＳ（MW＝３４９．１
９、５．７２ｍｍｏｌ）と０．４２ｇのトリエチルオル
トホルメート(MW=１４８．２０、２．８６ｍｍｏｌ）を
ピリジンに溶解し、窒素気流下１５分間リフラックスし
た。数分後反応液は赤色に変化した。その後、過塩素酸
ナトリウム(MW=１４０．４６，１．７６ｇ，１２．５４
ｍｍｏｌ）水溶液及び約１０ｍｌの過塩素酸を添加し
た。赤色の固体が析出したのでこれをろ過し、純水で洗
浄後乾燥した。ＮＭＲの結果より目的物であることを確
認した。この生成物の収量及び収率は、それぞれ０．６
ｇ、３７．９％であった。以下に得られた目的物の 1Ｈ
- ＮＭＲの特徴的なピークのケミカルシフトを示す。
９、５．７２ｍｍｏｌ）と０．４２ｇのトリエチルオル
トホルメート(MW=１４８．２０、２．８６ｍｍｏｌ）を
ピリジンに溶解し、窒素気流下１５分間リフラックスし
た。数分後反応液は赤色に変化した。その後、過塩素酸
ナトリウム(MW=１４０．４６，１．７６ｇ，１２．５４
ｍｍｏｌ）水溶液及び約１０ｍｌの過塩素酸を添加し
た。赤色の固体が析出したのでこれをろ過し、純水で洗
浄後乾燥した。ＮＭＲの結果より目的物であることを確
認した。この生成物の収量及び収率は、それぞれ０．６
ｇ、３７．９％であった。以下に得られた目的物の 1Ｈ
- ＮＭＲの特徴的なピークのケミカルシフトを示す。
【００２６】1Ｈ- ＮＭＲ( ＤＭＳＯ−ｄ6 ) ：δ(ppm)
＝４．４（４Ｈ，ｔ，ＮＣＨ2 ）、７．２−８．１
（８Ｈ、ｍ，aromatic） 実施例４ ３，３−ジメチル−１−（２−カルボキシエチル）−２
−（３−エトキシカルボニル−３−ジシアノ−アリリデ
ン）−ベンゾチアゾリンの作製 前記化学式（化３）の構造を持つ本実施例のメロシアニ
ン誘導体からなる標識色素を以下に示す方法で合成し
た。
＝４．４（４Ｈ，ｔ，ＮＣＨ2 ）、７．２−８．１
（８Ｈ、ｍ，aromatic） 実施例４ ３，３−ジメチル−１−（２−カルボキシエチル）−２
−（３−エトキシカルボニル−３−ジシアノ−アリリデ
ン）−ベンゾチアゾリンの作製 前記化学式（化３）の構造を持つ本実施例のメロシアニ
ン誘導体からなる標識色素を以下に示す方法で合成し
た。
【００２７】２．０ｇのＰＡＭＢＳ（MW＝３４９．１
９、５．７２ｍｍｏｌ）と０．９７ｇの２−（エトキシ
メチレン）−２−シアノ酢酸エチルエステル(MW=１６
９．１８、５．７２ｍｍｏｌ）をピリジンに溶解し、窒
素気流下１５分間リフラックスした。数分後反応液は赤
色に変化した。この反応液を１００ｍｌ水中に添加し、
室温まで冷却した。赤色の固体が析出したのでこれをろ
過し、純水で洗浄した。この固体をエタノールで再結晶
した。ＮＭＲの結果より目的物であることを確認した。
この生成物の収量及び収率は、それぞれ０．５ｇ、２
５．４％であった。以下に得られた目的物の 1Ｈ- ＮＭ
Ｒの特徴的なピークのケミカルシフトを示す。
９、５．７２ｍｍｏｌ）と０．９７ｇの２−（エトキシ
メチレン）−２−シアノ酢酸エチルエステル(MW=１６
９．１８、５．７２ｍｍｏｌ）をピリジンに溶解し、窒
素気流下１５分間リフラックスした。数分後反応液は赤
色に変化した。この反応液を１００ｍｌ水中に添加し、
室温まで冷却した。赤色の固体が析出したのでこれをろ
過し、純水で洗浄した。この固体をエタノールで再結晶
した。ＮＭＲの結果より目的物であることを確認した。
この生成物の収量及び収率は、それぞれ０．５ｇ、２
５．４％であった。以下に得られた目的物の 1Ｈ- ＮＭ
Ｒの特徴的なピークのケミカルシフトを示す。
【００２８】1Ｈ- ＮＭＲ( ＣＤＣｌ3 ) ：δ(ppm) ＝
４．３（４Ｈ，ｔ，ＮＣＨ2 ）、７．０−７．７（４
Ｈ、ｍ，aromatic）、５．９４（１Ｈ，ｄ，−ＣＨ
＝）、８．１（１Ｈ，ｄ，−ＣＨ＝）、１．３（３Ｈ，
ｔ，ＣＨ3 ）、４．３（２Ｈ，ｑ，ＣＨ2 ） 実施例５ ３，３−ジメチル−１−（２−カルボキシエチル）−２
−（３，３−ジシアノ−アリリデン）−ベンゾチアゾリ
ンの作製 前記化学式（化４）の構造を持つ本実施例のメロシアニ
ン誘導体からなる標識色素を以下に示す方法で合成し
た。
４．３（４Ｈ，ｔ，ＮＣＨ2 ）、７．０−７．７（４
Ｈ、ｍ，aromatic）、５．９４（１Ｈ，ｄ，−ＣＨ
＝）、８．１（１Ｈ，ｄ，−ＣＨ＝）、１．３（３Ｈ，
ｔ，ＣＨ3 ）、４．３（２Ｈ，ｑ，ＣＨ2 ） 実施例５ ３，３−ジメチル−１−（２−カルボキシエチル）−２
−（３，３−ジシアノ−アリリデン）−ベンゾチアゾリ
ンの作製 前記化学式（化４）の構造を持つ本実施例のメロシアニ
ン誘導体からなる標識色素を以下に示す方法で合成し
た。
【００２９】２．０ｇのＰＡＭＢＳ（MW＝３４９．１
９、５．７２ｍｍｏｌ）と０．７０ｇのエトキシメチン
マロノニトリル（MW＝１２２．１３、５．７２ｍｍｏ
ｌ）をピリジンに溶解し、窒素気流下１５分間リフラッ
クスした。数分後反応液は赤色に変化した。この反応液
を１００ｍｌ水中に添加し、室温まで冷却した。赤色の
固体が析出したのでこれをろ過し、純水で洗浄した。こ
の固体をエタノールで再結晶した。ＮＭＲの結果より目
的物であることを確認した。この生成物の収量及び収率
は、それぞれ０．５ｇ、２９．４％であった。以下に得
られた目的物の 1Ｈ- ＮＭＲの特徴的なピークのケミカ
ルシフトを示す。
９、５．７２ｍｍｏｌ）と０．７０ｇのエトキシメチン
マロノニトリル（MW＝１２２．１３、５．７２ｍｍｏ
ｌ）をピリジンに溶解し、窒素気流下１５分間リフラッ
クスした。数分後反応液は赤色に変化した。この反応液
を１００ｍｌ水中に添加し、室温まで冷却した。赤色の
固体が析出したのでこれをろ過し、純水で洗浄した。こ
の固体をエタノールで再結晶した。ＮＭＲの結果より目
的物であることを確認した。この生成物の収量及び収率
は、それぞれ０．５ｇ、２９．４％であった。以下に得
られた目的物の 1Ｈ- ＮＭＲの特徴的なピークのケミカ
ルシフトを示す。
【００３０】1Ｈ- ＮＭＲ( ＣＤＣｌ3 ) ：δ(ppm) ＝
４．５（４Ｈ，ｔ，ＮＣＨ2 ）、７．１−７．８（４
Ｈ、ｍ，aromatic）、５．８（１Ｈ，ｄ，−ＣＨ＝）、
８．２（１Ｈ，ｄ，−ＣＨ＝）
４．５（４Ｈ，ｔ，ＮＣＨ2 ）、７．１−７．８（４
Ｈ、ｍ，aromatic）、５．８（１Ｈ，ｄ，−ＣＨ＝）、
８．２（１Ｈ，ｄ，−ＣＨ＝）
【００３１】
【発明の効果】以上説明した通り、ポリメチンシアニン
系色素及びメロシアニン系色素にカルボキシル基を導入
することによって、アミノ基やアルコール性水酸基を有
する物質を化学結合により標識することが可能となる。
すなわち、アミノ基とはアミド結合を、アルコール性水
酸基とはエステル結合を生成できる。特に、細胞内ある
いは細胞表面上に存在するアミノ基を有する物質を標識
することができ、細胞についての分光学的分析を能率良
く行うことができる。これによりこれらの色素に新たな
応用展開を与えることができるものである。
系色素及びメロシアニン系色素にカルボキシル基を導入
することによって、アミノ基やアルコール性水酸基を有
する物質を化学結合により標識することが可能となる。
すなわち、アミノ基とはアミド結合を、アルコール性水
酸基とはエステル結合を生成できる。特に、細胞内ある
いは細胞表面上に存在するアミノ基を有する物質を標識
することができ、細胞についての分光学的分析を能率良
く行うことができる。これによりこれらの色素に新たな
応用展開を与えることができるものである。
Claims (5)
- 【請求項１】 下記式（化１）で示されるポリメチンシ
アニン誘導体からなる標識色素（ただし、Ｘ-は陰イオ
ンを示す）。 【化１】 - 【請求項２】 下記式（化２）で示されるポリメチンシ
アニン誘導体からなる標識色素（ただし、Ｘ-は陰イオ
ンを示す）。 【化２】 - 【請求項３】 下記式（化３）で示されるメロシアニン
誘導体からなる標識色素。 【化３】 - 【請求項４】 下記式（化４）で示されるメロシアニン
誘導体からなる標識色素。 【化４】 - 【請求項５】 下記式（化５）で示されるポリメチンシ
アニン誘導体またはメロシアニン誘導体の中間物（ただ
し、Ｘ-は陰イオンを示す）。 【化５】
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5104055A JPH06313118A (ja) | 1993-04-30 | 1993-04-30 | 標識色素及び標識色素の中間物 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5104055A JPH06313118A (ja) | 1993-04-30 | 1993-04-30 | 標識色素及び標識色素の中間物 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06313118A true JPH06313118A (ja) | 1994-11-08 |
Family
ID=14370517
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5104055A Pending JPH06313118A (ja) | 1993-04-30 | 1993-04-30 | 標識色素及び標識色素の中間物 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06313118A (ja) |
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2008013260A1 (fr) * | 2006-07-28 | 2008-01-31 | Shinichiro Isobe | Spécimen biologique et procédé de préparation de celui-ci |
| JP2008096437A (ja) * | 1995-05-19 | 2008-04-24 | Molecular Probes Inc | メロシアニン染料タンパク質染色 |
-
1993
- 1993-04-30 JP JP5104055A patent/JPH06313118A/ja active Pending
Cited By (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2008096437A (ja) * | 1995-05-19 | 2008-04-24 | Molecular Probes Inc | メロシアニン染料タンパク質染色 |
| WO2008013260A1 (fr) * | 2006-07-28 | 2008-01-31 | Shinichiro Isobe | Spécimen biologique et procédé de préparation de celui-ci |
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