JPH06311882A

JPH06311882A - 海洋性微細藻類の脱臭方法

Info

Publication number: JPH06311882A
Application number: JP5104739A
Authority: JP
Inventors: Nobuyuki Sato; 藤信之佐; Toshihide Suzuki; 木利英鈴; Tokio Iizuka; 塚時男飯; Daizo Takeuchi; 内大造武
Original assignee: Kawasaki Steel Corp
Current assignee: JFE Steel Corp
Priority date: 1993-04-30
Filing date: 1993-04-30
Publication date: 1994-11-08

Abstract

(57)【要約】【目的】海洋性微細藻類の藻体の有臭成分のみを選択的
に抽出、除去し、無臭の藻体を回収する海洋性微細藻類
の脱臭方法の提供。【構成】ドコサヘキサエン酸を含有する海洋性微細藻類
を培養して得られた藻体の水分含有率を５〜２０重量％
に調製し、超臨界二酸化炭素により、該藻体から有臭成
分を抽出、除去する海洋性微細藻類の脱臭方法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、健康食品、医薬品原料
として開発が期待されているドコサヘキサエン酸の製造
方法に関する。さらに詳しくは、ドコサヘキサエン酸を
含有する海洋性微細藻類の脱臭方法に関する。ドコサヘ
キサエン酸は、近年、コレステロール低下作用、抗血液
凝固作用、学習機能向上など多彩な生理作用が報告され
ている高度不飽和脂肪酸である。

【０００２】

【従来の技術】多彩な生理作用が報告されている高度不
飽和脂肪酸であるドコサヘキサエン酸は、古くから魚油
中に含まれていることが知られている。しかし、魚油は
特有の魚臭を有するため、これを除去するために超臨界
抽出法、水蒸気蒸留法、分子蒸留法等が用いられている
が、これらの脱臭方法では、魚臭を完全に除去すること
が困難である。そのため、製品中に魚臭が残存し、製品
の用途が限られるという問題があった。

【０００３】一方、これとは別に、微生物などに選択的
にドコサヘキサエン酸を産生させる検討が行われてき
た。プラチマ・バッパイらによる検討では、下等な菌類
に属するスラウストキトリウム・オーレウム（Thrausto
chytrium aureum)にドコサヘキサエン酸を産生させるこ
とが報告されている（Appl.Microbiol.Biotechnol., 3
5, 706(1991) 参照）。また、アール・ジェームス・ヘ
ンダーソンらによる検討では、海洋性微細藻類のクリプ
テコディニウム・コーニーが、高度不飽和脂肪酸として
ほぼドコサヘキサエン酸のみを全脂肪酸に対して９％程
度産生させることが報告されている(Phytochemistry,27
(6),1679-1683(1988) ）。しかし、上記文献には、産生
物の臭気あるいは臭気除去方法に関する記述は見当たら
ない。

【０００４】一方、本発明者らは、海洋性微細藻類を液
体振盪培養や液体深部培養といった方法で培養すること
により、藻体の生産性を高めたばかりでなく、高度不飽
和脂肪酸としては、ほぼドコサヘキサエン酸のみを選択
的に産生させ、かつ、脂質中のドコサヘキサエン酸の含
有量を飛躍的に増大できることを見いだし、これを提案
している（特願平０４−０７７１８９号）。

【０００５】

【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、ドコ
サヘキサエン酸を産生する能力を有する海洋性微細藻類
を、振盪培養または深部通気攪拌培養して増殖させ、そ
の藻体から臭気成分を除去し、魚油を原料とした場合に
は製造が不可能な無臭の健康食品、医薬品向けドコサヘ
キサエン酸を製造する方法に関するものである。

【０００６】

【課題を解決するための手段】本発明者らは、これらの
問題点を解決するために鋭意努力した結果、海洋性微細
藻類を培養することによって得られるドコサヘキサエン
酸を含有する藻体の水分含有率を調製した後、超臨界二
酸化炭素で抽出処理すると、藻体中の有臭成分のみが選
択的に除去できることを見出し、本発明に至った。

【０００７】すなわち、本発明は、ドコサヘキサエン酸
を含有する海洋性微細藻類を培養して得られた藻体の水
分含有率を５〜２０重量％に調製し、超臨界二酸化炭素
により、該藻体から有臭成分を抽出、除去する海洋性微
細藻類の脱臭方法を提供する。さらに、その抽出を、温
度３１〜８０℃、圧力７．５〜３０ＭＰａで行うのが好
ましい。また、前記海洋性微細藻類が、クリプテコディ
ニウム・コーニー（Crypthecodinium cohnii) であるの
が好ましい。

【０００８】以下、本発明について詳細に説明する。本
発明において利用する微生物は、ドコサヘキサエン酸を
生成する海洋性微細藻類であればよく、たとえば、クリ
プテコディニウム（ Crypthecodinium cohnii ）属、特
に、クリプテコディニウム・コーニー種などがある。具
体的には、 Crypthecodinium cohnii ATCC 30021, 3054
3, 30556, 30571, 30572, 30775, 50051, 50053, 5005
5, 50056, 50058, 50060 等が挙げられる。特に、クリ
プテコディニウム・コーニーＡＴＣＣ３００２１株が好
ましい。これらは公知のものにもあり、たとえばＡＴＣ
Ｃ(American Type culture Collection)などの保存機関
より入手可能である。

【０００９】海洋性微細藻類の培養は、以下の培地およ
び方法を使用する。本発明において利用する藻類の培養
のための培地としては、この藻類が良好に成育できる培
地であればいかなる組成の培地も使用できる。培養方法
としては、静置培養、液体振盪培養（回転振盪培養）、
液体タンク培養、回分培養、流加培養、連続培養などい
かなる培養方法でもよいが、大量に生産できる液体振盪
培養、液体深部培養、深部通気攪拌培養あるいは連続培
養により製造するのが好ましい。液体振盪培養、深部通
気攪拌培養の方法は、特願平０４−０７７１８９号明細
書に記載の通りの方法を用いればよい。連続培養の方法
は、特願平０５−０９９６５６号明細書に記載の通りの
方法を用いればよい。

【００１０】培養終了後、藻体を培養液から濾過あるい
は遠心分離などにより回収後、蒸留水などで数回洗浄
し、さらに乾燥させて藻体の水分含有率が５〜２０重量
％になるように調製する。あるいは、回収した藻体を、
加熱乾燥、凍結乾燥あるいは噴霧乾燥などにより乾燥し
た後、藻体の水分含有率が、５〜２０重量％になるよう
に、水分を添加してもよい。この際、藻体の水分含有率
が、５重量％未満では、有臭成分は除去できるが、ドコ
サヘキサエン酸の損失量が増大し、好ましくない。ま
た、水分含有率が、２０重量％を超えると、有臭成分が
ほとんど除去できず、好ましくない。

【００１１】藻体の水分調節のために加える水分は、蒸
留水、イオン交換水等のいずれを用いてもよい。藻体の
水分を調製後、抽出剤として、超臨界二酸化炭素を用い
て藻体中の有臭成分を抽出、その後、圧力を下げるまた
は温度を上げることにより、藻体から水とともに有臭成
分を除去する。抽出に使用する超臨界二酸化炭素の温度
は、抽出圧力にもよるが、３１℃〜８０℃が好ましい。
この範囲の温度では、二酸化炭素の臨界温度が３１℃で
ある点、また、ドコサヘキサエン酸の一部が熱変性する
のを防ぐことができる点で好ましい。また、抽出圧力
は、抽出温度にもよるが、７．５〜３０ＭＰａが好まし
い。二酸化炭素の臨界圧力が、７．５ＭＰａである点、
また、経済性の点から好ましい。また、藻体の抽出処理
に用いられる超臨界二酸化炭素の量は、藻体（乾燥藻
体）に対して、１０〜１００重量倍であるのが好まし
い。さらに、抽出時間は、必要とする超臨界二酸化炭素
量および超臨界二酸化炭素流量より適宜定めればよい。

【００１２】上述のようにして抽出処理することによ
り、藻体中に存在する有臭成分を超臨界二酸化炭素相に
溶出させて藻体から分離、除去する。さらに、得られた
藻体を室温に放置するか、または３０〜８０℃に加温し
て乾燥させて無臭の海洋性微細藻類の藻体を得ることが
できる。このようにして得られた海洋性微細藻類の藻体
の脂質中のドコサヘキサエン酸の含有率は、総脂質に対
して、３８．３〜３８．５重量％である。また、本発明
の脱臭方法によって損なわれるドコサヘキサエン酸の量
は、抽出前の藻体中のＤＨＡの量に対して、３〜４重量
％である。上述の方法により得られる藻体は、臭気を有
さず、食品、医薬品などに用いるのに適している。

【００１３】

【実施例】以下に本発明の実施例に基づき具体的に説明
するが、これらの実施例が本発明の範囲を限定するもの
ではないことは言うまでもない。下記の実施例中、ドコ
サヘキサエン酸の損失率は、超臨界二酸化炭素を用いて
有臭成分を抽出した前後の藻体を三フッ化ホウ素エタノ
ール錯体でエステル化処理し、得られたエチルエステル
をガスクロマトグラフィーで定量することにより測定し
た。ドコサヘキサエン酸の損失率（％）は、下記式
（１）で定義した。

【００１４】

【数１】

【００１５】（実施例１）海洋性微細藻類としてクリプ
テコディニウム・コーニー３００２１株を使用し、液体
振盪培養により増殖させた。培養終了後、藻体を培養液
から遠心分離により回収した。回収された藻体の水分含
有率は、１５重量％であった。この藻体５０ｇを超臨界
抽出装置に仕込み、温度４０℃、圧力１０ＭＰａで超臨
界二酸化炭素を流通させ、１時間抽出処理した。抽出
後、超臨界抽出装置から藻体を回収した。回収した藻体
の量は、４２．６ｇ（水分含有率１重量％）であった。
また、この藻体は、無臭であった。さらに、本操作での
ドコサヘキサエン酸の損失率は、３重量％であった。

【００１６】（実施例２）海洋性微細藻類としてクリプ
テコディニウム・コーニー３００２１株を使用し、液体
振盪培養により増殖させた。培養終了後、藻体を培養液
から遠心分離により回収し、凍結乾燥した。凍結乾燥後
の藻体の水分含有率は、０．５重量％であった。この藻
体に水分含有率が７重量％になるように蒸留水を加えて
調製した。水分含有量を調製した藻体３０ｇを超臨界抽
出装置に仕込み、温度５０℃、圧力８ＭＰａで超臨界二
酸化炭素を流通させ、３０分間抽出処理した。抽出後、
超臨界抽出装置から藻体を回収した。回収した藻体の量
は、２７．９ｇ（水分含有率１重量％）であった。ま
た、この藻体は、実施例１と同様に無臭であった。さら
に、本操作でのドコサヘキサエン酸の損失率は、４重量
％であった。

【００１７】（実施例３）海洋性微細藻類としてクリプ
テコディニウム・コーニー３００２１株を使用し、液体
振盪培養により増殖させた。培養終了後、藻体を培養液
から遠心分離により回収し、凍結乾燥した。凍結乾燥後
の藻体の水分含有率は、１９重量％であった。この藻体
１００ｇを超臨界抽出装置に仕込み、温度７５℃、圧力
２８ＭＰａで超臨界二酸化炭素を流通させ、２時間抽出
処理した。抽出後、超臨界抽出装置から藻体を回収し
た。回収した藻体の量は、８１．７ｇ（水分含有率２重
量％）であった。また、この藻体は、実施例１と同様に
無臭であった。さらに、本操作でのドコサヘキサエン酸
の損失率は、４重量％であった。

【００１８】（比較例１）実施例１で得られた藻体に水
を添加し、藻体の水分含有率３０重量％となるように調
製した。その後、実施例１と同様に抽出処理した。回収
した藻体の量は、４９．６ｇ（水分含有率１５重量％）
であった。また、この藻体は、抽出処理前よりは脱臭さ
れていたが、満足できるものではなかった。さらに、本
操作でのドコサヘキサエン酸の損失率は、３重量％であ
った。

【００１９】（比較例２）実施例２で得られた藻体に水
を添加しない以外は、実施例２と同様に抽出処理した。
回収した藻体の量は、２６．４ｇ（水分含有率０．１重
量％）であった。また、この藻体は、抽出処理前よりは
脱臭されていたが、満足できるものではなかった。さら
に、本操作でのドコサヘキサエン酸の損失率は、１５重
量％であった。

【００２０】

【発明の効果】以上に説明したように、本発明の脱臭方
法によれば、海洋性微細藻類の藻体中の水分含有率を調
製することで有臭成分のみを選択的に抽出除去すること
が可能であり、かつ、ドコサヘキサエン酸の損失量を低
くおさえることができるため、経済的効果は極めて大き
い。さらに、得られた藻体は、無臭であり食品や医薬品
に用いるのに適している。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者飯塚時男千葉県千葉市中央区川崎町１番地川崎製鉄株式会社技術研究本部内 (72)発明者武内大造千葉県千葉市中央区川崎町１番地川崎製鉄株式会社技術研究本部内

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】ドコサヘキサエン酸を含有する海洋性微細
藻類を培養して得られた藻体の水分含有率を５〜２０重
量％に調製し、超臨界二酸化炭素により、該藻体から有
臭成分を抽出、除去することを特徴とする海洋性微細藻
類の脱臭方法。
【請求項２】前記抽出を、温度３１〜８０℃、圧力７．
５〜３０ＭＰａで行なう請求項１に記載の海洋性微細藻
類の脱臭方法。
【請求項３】前記海洋性微細藻類が、クリプテコディニ
ウム・コーニー（Crypthecodiniumcohnii) である請求
項１または２に記載の海洋性微細藻類の脱臭方法。