JPH06261780A - フルクトース ２，６−ビスリン酸の製造方法およびその精製方法 - Google Patents
フルクトース ２，６−ビスリン酸の製造方法およびその精製方法Info
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- JPH06261780A JPH06261780A JP5084102A JP8410293A JPH06261780A JP H06261780 A JPH06261780 A JP H06261780A JP 5084102 A JP5084102 A JP 5084102A JP 8410293 A JP8410293 A JP 8410293A JP H06261780 A JPH06261780 A JP H06261780A
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- Y02P—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES IN THE PRODUCTION OR PROCESSING OF GOODS
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- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【構成】 フルクトース ６−リン酸 ２−キナーゼお
よびアデノシン ５’−ジリン酸をアデノシン ５’−
トリリン酸に変換する酵素の存在下に、フルクトース
６−リン酸、ＡＴＰおよびリン酸供与体と作用させるこ
とを特徴とするフルクトース ２，６−ビスリン酸の製
造方法、およびフルクトース ２，６−ビスリン酸含有
液に亜鉛塩を添加し、生じた不溶物を除去した後、さら
に亜鉛塩を加えることにより生じた沈澱を分取すること
を特徴とするフルクトース ２，６−ビスリン酸の精製
方法。 【効果】 高価なＡＴＰを少量しか使用せずに、容易に
高収率でフルクトース２，６−ビスリン酸を製造するこ
とが可能となり、さらに容易に高収率で高純度のフルク
トース ２，６−ビスリン酸を精製することができる。
よびアデノシン ５’−ジリン酸をアデノシン ５’−
トリリン酸に変換する酵素の存在下に、フルクトース
６−リン酸、ＡＴＰおよびリン酸供与体と作用させるこ
とを特徴とするフルクトース ２，６−ビスリン酸の製
造方法、およびフルクトース ２，６−ビスリン酸含有
液に亜鉛塩を添加し、生じた不溶物を除去した後、さら
に亜鉛塩を加えることにより生じた沈澱を分取すること
を特徴とするフルクトース ２，６−ビスリン酸の精製
方法。 【効果】 高価なＡＴＰを少量しか使用せずに、容易に
高収率でフルクトース２，６−ビスリン酸を製造するこ
とが可能となり、さらに容易に高収率で高純度のフルク
トース ２，６−ビスリン酸を精製することができる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、フルクトース ２，６
−ビスリン酸（以下ＦＢＰと略記する）の製造方法およ
びその精製方法に関するものであり、さらに詳しくは、
糖尿病および糖尿病合併症治療剤として用いられるＦＢ
Ｐの製造方法およびその精製方法に関するものである。
−ビスリン酸（以下ＦＢＰと略記する）の製造方法およ
びその精製方法に関するものであり、さらに詳しくは、
糖尿病および糖尿病合併症治療剤として用いられるＦＢ
Ｐの製造方法およびその精製方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】生体における糖代謝の調節には生化学的
な機序が多く知られている。たとえば、インスリンホル
モンによる調節や、別のホルモンであるグルカゴン、ア
ドレナリンによる調節、またはいわゆるセカンドメッセ
ンジャーと呼ばれるサイクリック アデノシン ５’−
モノリン酸による調節、さらにアデノシン ５’−モノ
リン酸（以下ＡＭＰと略記する）、アデノシン ５’−
トリリン酸（以下ＡＴＰと略記する）、クエン酸による
調節、およびＦＢＰによる調節などが報告されている。
生体における糖代謝は解糖系と呼ばれる一連の経路によ
り行われるが、この経路においてはホスホフルクトキナ
ーゼ（［Ｅ．Ｃ．２．７．１．１１］、以下ＰＦＫと略
記する）と呼ばれる酵素が重要な調節因子である。ＦＢ
Ｐは、まさにこのＰＦＫを活性化する因子であり、この
ことにより、糖代謝の調節をおこなっている。このよう
に、ＦＢＰは糖代謝に関する因子として非常に重要であ
ることが、近年、確認されている。
な機序が多く知られている。たとえば、インスリンホル
モンによる調節や、別のホルモンであるグルカゴン、ア
ドレナリンによる調節、またはいわゆるセカンドメッセ
ンジャーと呼ばれるサイクリック アデノシン ５’−
モノリン酸による調節、さらにアデノシン ５’−モノ
リン酸（以下ＡＭＰと略記する）、アデノシン ５’−
トリリン酸（以下ＡＴＰと略記する）、クエン酸による
調節、およびＦＢＰによる調節などが報告されている。
生体における糖代謝は解糖系と呼ばれる一連の経路によ
り行われるが、この経路においてはホスホフルクトキナ
ーゼ（［Ｅ．Ｃ．２．７．１．１１］、以下ＰＦＫと略
記する）と呼ばれる酵素が重要な調節因子である。ＦＢ
Ｐは、まさにこのＰＦＫを活性化する因子であり、この
ことにより、糖代謝の調節をおこなっている。このよう
に、ＦＢＰは糖代謝に関する因子として非常に重要であ
ることが、近年、確認されている。
【０００３】ＦＢＰの製造法としては、原料となるフル
クトース １，６−ジリン酸（以下ＦＤＰと略記する）
から、ジシクロヘキシルカルボジイミドを触媒として用
いてフルクトース １，２−サイクリック，６−ビスリ
ン酸（以下ＦＣＰと略記する）を得、さらに、このＦＣ
Ｐをアルカリで部分分解する方法（ファン・シャフチン
ゲン、ハーズ著、ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・バ
イオケミストリー誌、１１７巻、３１９頁（１９８１
年）、植田、古谷、シェリー著、ジャーナル・オブ・バ
イオロジカル・ケミストリー誌、２５６巻、８６７９頁
（１９８１年）、および特開昭６０−１６１９９４な
ど）が知られている。ＦＢＰおよびＦＣＰの単離法とし
て、高収率で高純度な粉末として単離された例は、本発
明者らの調査によれば今までに見あたらない。この理由
は、ＦＢＰおよびＦＣＰが水溶液中で極めて不安定なこ
と、ＦＣＰからＦＢＰへの加水分解による変換が数％と
低く、かつこの工程で副成するＦＤＰとの分離が極めて
困難なことにあるものと考えられる。
クトース １，６−ジリン酸（以下ＦＤＰと略記する）
から、ジシクロヘキシルカルボジイミドを触媒として用
いてフルクトース １，２−サイクリック，６−ビスリ
ン酸（以下ＦＣＰと略記する）を得、さらに、このＦＣ
Ｐをアルカリで部分分解する方法（ファン・シャフチン
ゲン、ハーズ著、ヨーロピアン・ジャーナル・オブ・バ
イオケミストリー誌、１１７巻、３１９頁（１９８１
年）、植田、古谷、シェリー著、ジャーナル・オブ・バ
イオロジカル・ケミストリー誌、２５６巻、８６７９頁
（１９８１年）、および特開昭６０−１６１９９４な
ど）が知られている。ＦＢＰおよびＦＣＰの単離法とし
て、高収率で高純度な粉末として単離された例は、本発
明者らの調査によれば今までに見あたらない。この理由
は、ＦＢＰおよびＦＣＰが水溶液中で極めて不安定なこ
と、ＦＣＰからＦＢＰへの加水分解による変換が数％と
低く、かつこの工程で副成するＦＤＰとの分離が極めて
困難なことにあるものと考えられる。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】本発明は、容易に高収
率でＦＢＰを製造する方法および容易に高収率で高純度
のＦＢＰを精製する方法を提供することを目的とするも
のである。
率でＦＢＰを製造する方法および容易に高収率で高純度
のＦＢＰを精製する方法を提供することを目的とするも
のである。
【０００５】
【課題を解決するための手段】本発明者等は、このよう
な課題を解決するために鋭意研究を行った結果、ＦＢＰ
を大量かつ容易に製造する方法および容易に高純度で精
製する方法を見いだし、本発明を完成した。すなわち本
発明は、フルクトース ６−リン酸 ２−キナーゼおよ
びアデノシン ５’−ジリン酸をアデノシン ５’−ト
リリン酸に変換する酵素の存在下に、フルクトース ６
−リン酸、ＡＴＰおよびリン酸供与体を作用させること
を特徴とするフルクトース ２，６−ビスリン酸の製造
方法、フルクトース ６−リン酸 ２−キナーゼ、アデ
ノシン ５’−ジリン酸をアデノシン ５’−トリリン
酸に変換する酵素、ヘキソキナーゼまたはグルコキナー
ゼおよびグルコース６−リン酸イソメラーゼの存在下
に、ブドウ糖、ＡＴＰおよびリン酸供与体を作用させる
ことを特徴とするフルクトース ２，６−ビスリン酸の
製造方法、フルクトース ６−リン酸 ２−キナーゼ、
アデノシン ５’−ジリン酸をアデノシン ５’−トリ
リン酸に変換する酵素、ヘキソキナーゼまたはグルコキ
ナーゼおよびグルコース ６−リン酸イソメラーゼの存
在下に、果糖、ＡＴＰおよびリン酸供与体を作用させる
ことを特徴とするフルクトース ２，６−ビスリン酸の
製造方法およびフルクトース ２，６−ビスリン酸含有
液に亜鉛塩を添加し、生じた不溶物を除去した後、さら
に亜鉛塩を加えることにより生じた沈澱を分取すること
を特徴とするフルクトース ２，６−ビスリン酸の精製
方法を要旨とするものである。
な課題を解決するために鋭意研究を行った結果、ＦＢＰ
を大量かつ容易に製造する方法および容易に高純度で精
製する方法を見いだし、本発明を完成した。すなわち本
発明は、フルクトース ６−リン酸 ２−キナーゼおよ
びアデノシン ５’−ジリン酸をアデノシン ５’−ト
リリン酸に変換する酵素の存在下に、フルクトース ６
−リン酸、ＡＴＰおよびリン酸供与体を作用させること
を特徴とするフルクトース ２，６−ビスリン酸の製造
方法、フルクトース ６−リン酸 ２−キナーゼ、アデ
ノシン ５’−ジリン酸をアデノシン ５’−トリリン
酸に変換する酵素、ヘキソキナーゼまたはグルコキナー
ゼおよびグルコース６−リン酸イソメラーゼの存在下
に、ブドウ糖、ＡＴＰおよびリン酸供与体を作用させる
ことを特徴とするフルクトース ２，６−ビスリン酸の
製造方法、フルクトース ６−リン酸 ２−キナーゼ、
アデノシン ５’−ジリン酸をアデノシン ５’−トリ
リン酸に変換する酵素、ヘキソキナーゼまたはグルコキ
ナーゼおよびグルコース ６−リン酸イソメラーゼの存
在下に、果糖、ＡＴＰおよびリン酸供与体を作用させる
ことを特徴とするフルクトース ２，６−ビスリン酸の
製造方法およびフルクトース ２，６−ビスリン酸含有
液に亜鉛塩を添加し、生じた不溶物を除去した後、さら
に亜鉛塩を加えることにより生じた沈澱を分取すること
を特徴とするフルクトース ２，６−ビスリン酸の精製
方法を要旨とするものである。
【０００６】以下に、本発明を詳細に説明する。ＦＢＰ
は、近年動物組織中に微量物質として発見され下記一般
式で表される糖リン酸である。
は、近年動物組織中に微量物質として発見され下記一般
式で表される糖リン酸である。
【０００７】
【化１】
【０００８】本発明におけるＦ６ＰからＦＢＰを合成す
る方法は、Ｆ６Ｐにフルクトース６−リン酸 ２−キナ
ーゼ（［Ｅ．Ｃ．２．７．１．１０５］、以下ＰＦＫ２
と略記する）を作用させてリン酸化をおこないＦＢＰを
得るものである。
る方法は、Ｆ６Ｐにフルクトース６−リン酸 ２−キナ
ーゼ（［Ｅ．Ｃ．２．７．１．１０５］、以下ＰＦＫ２
と略記する）を作用させてリン酸化をおこないＦＢＰを
得るものである。
【０００９】本発明に用いられるＰＦＫ２は、ＰＦＫ２
活性を有する限り、市販の酵素であっても、精製された
酵素であっても、部分精製された酵素であっても、さら
に微生物または組織そのもの、またはその破砕液であっ
てもよい。しかし、微生物または組織の破砕液を用いた
場合、合成されたＦＢＰが分解される場合があることか
ら、好ましくは部分精製された酵素、さらに好ましくは
精製された酵素を用いるのがよい。
活性を有する限り、市販の酵素であっても、精製された
酵素であっても、部分精製された酵素であっても、さら
に微生物または組織そのもの、またはその破砕液であっ
てもよい。しかし、微生物または組織の破砕液を用いた
場合、合成されたＦＢＰが分解される場合があることか
ら、好ましくは部分精製された酵素、さらに好ましくは
精製された酵素を用いるのがよい。
【００１０】また、酵素の由来については、特に制限は
なく、その例としては、ラット組織由来、ニワトリ血細
胞由来、タイ筋肉由来、大麦種子由来、タバコ葉由来、
大豆幼生由来、サッカロマイセス属由来、アスペルギル
ス属由来、ユーグレナ属由来、トリパノソーマ属由来な
どである。
なく、その例としては、ラット組織由来、ニワトリ血細
胞由来、タイ筋肉由来、大麦種子由来、タバコ葉由来、
大豆幼生由来、サッカロマイセス属由来、アスペルギル
ス属由来、ユーグレナ属由来、トリパノソーマ属由来な
どである。
【００１１】さらに、酵素の使用量についても特に制限
はなく、その合成高に応じて適宜必要量を決定すればよ
い。通常の反応では、０．００１〜１００００ユニット
／Ｌ、さらに好ましくは０．１〜１００ユニット／Ｌを
用いる。
はなく、その合成高に応じて適宜必要量を決定すればよ
い。通常の反応では、０．００１〜１００００ユニット
／Ｌ、さらに好ましくは０．１〜１００ユニット／Ｌを
用いる。
【００１２】本発明ではＦ６Ｐリン酸化のリン酸源にア
デノシン ５’−トリリン酸（以下ＡＴＰと略記する）
を用いる。リン酸化に用いられたＡＴＰはアデノシン
５’−ジリン酸（以下ＡＤＰと略記する）となるが、こ
れにＡＤＰをＡＴＰに変換し得る酵素およびリン酸供与
体をそれぞれ作用させることでＡＴＰに再度変化させる
ことが可能である。この方法により高価なＡＴＰの使用
量を触媒量まで低減させることが可能となった。
デノシン ５’−トリリン酸（以下ＡＴＰと略記する）
を用いる。リン酸化に用いられたＡＴＰはアデノシン
５’−ジリン酸（以下ＡＤＰと略記する）となるが、こ
れにＡＤＰをＡＴＰに変換し得る酵素およびリン酸供与
体をそれぞれ作用させることでＡＴＰに再度変化させる
ことが可能である。この方法により高価なＡＴＰの使用
量を触媒量まで低減させることが可能となった。
【００１３】本発明に用いるＡＤＰをＡＴＰに変換する
酵素としては、ＡＤＰをＡＴＰに変換し得る活性を有す
るものであればいかなるものでもよく、アセテートキナ
ーゼやピルベートキナーゼなどが挙げられる。これらの
酵素は市販の酵素であっても、精製された酵素であって
も、部分精製された酵素であっても、さらに微生物また
は組織そのもの、またはその破砕液であってもよい。し
かし、微生物または組織の破砕液を用いた場合、特にＡ
ＴＰが分解される場合があることから、好ましくは部分
精製された酵素、さらに好ましくは精製された酵素を用
いるのがよい。
酵素としては、ＡＤＰをＡＴＰに変換し得る活性を有す
るものであればいかなるものでもよく、アセテートキナ
ーゼやピルベートキナーゼなどが挙げられる。これらの
酵素は市販の酵素であっても、精製された酵素であって
も、部分精製された酵素であっても、さらに微生物また
は組織そのもの、またはその破砕液であってもよい。し
かし、微生物または組織の破砕液を用いた場合、特にＡ
ＴＰが分解される場合があることから、好ましくは部分
精製された酵素、さらに好ましくは精製された酵素を用
いるのがよい。
【００１４】また、酵素の由来についても制限はなく、
その例としては、サッカロマイセス属由来、アスペルギ
ルス属由来、バチルス属由来、エキリシア属由来などで
ある。
その例としては、サッカロマイセス属由来、アスペルギ
ルス属由来、バチルス属由来、エキリシア属由来などで
ある。
【００１５】本発明に用いるリン酸供与体としては、ア
セチルリン酸やホスホエノールピルビン酸などが挙げら
れる。
セチルリン酸やホスホエノールピルビン酸などが挙げら
れる。
【００１６】この反応で用いられるアセテートキナーゼ
やピルベートキナーゼなどの酵素は、ＡＤＰをＡＴＰに
変換し得る活性を有する限り、市販の酵素であっても、
精製された酵素であっても、部分精製された酵素であっ
ても、さらに微生物または組織そのもの、またはその破
砕液であってもよい。しかし、微生物または組織の破砕
液を用いた場合、特にＡＴＰが分解される場合があるこ
とから、好ましくは部分精製された酵素、さらに好まし
くは精製された酵素を用いるのがよい。
やピルベートキナーゼなどの酵素は、ＡＤＰをＡＴＰに
変換し得る活性を有する限り、市販の酵素であっても、
精製された酵素であっても、部分精製された酵素であっ
ても、さらに微生物または組織そのもの、またはその破
砕液であってもよい。しかし、微生物または組織の破砕
液を用いた場合、特にＡＴＰが分解される場合があるこ
とから、好ましくは部分精製された酵素、さらに好まし
くは精製された酵素を用いるのがよい。
【００１７】また、酵素の由来についても制限はなく、
その例としては、サッカロマイセス属由来、アスペルギ
ルス属由来、バチルス属由来、エキリシア属由来などで
ある。
その例としては、サッカロマイセス属由来、アスペルギ
ルス属由来、バチルス属由来、エキリシア属由来などで
ある。
【００１８】さらに、この酵素またはリン酸供与体およ
びＡＴＰの使用量についても特に制限はなく、その生成
量に応じて適宜必要量を決定すればよい。通常の反応で
は、アセテートキナーゼやピルベートキナーゼなどの酵
素は、０．００１〜１００００ユニット／Ｌ、さらに好
ましくは０．５〜５００ユニット／Ｌを用い、アセチル
リン酸やホスホエノールピルビン酸などのリン酸供与体
は、必要とするＦＢＰモル数の１当量〜５０当量、さら
に好ましくは１当量〜５当量を用いる。
びＡＴＰの使用量についても特に制限はなく、その生成
量に応じて適宜必要量を決定すればよい。通常の反応で
は、アセテートキナーゼやピルベートキナーゼなどの酵
素は、０．００１〜１００００ユニット／Ｌ、さらに好
ましくは０．５〜５００ユニット／Ｌを用い、アセチル
リン酸やホスホエノールピルビン酸などのリン酸供与体
は、必要とするＦＢＰモル数の１当量〜５０当量、さら
に好ましくは１当量〜５当量を用いる。
【００１９】本発明に用いられるＦ６Ｐは、Ｆ６Ｐとし
て単離されたものを用いても、同一の反応液中で他の反
応により合成されるものであってもよい。
て単離されたものを用いても、同一の反応液中で他の反
応により合成されるものであってもよい。
【００２０】単離されたものを用いる場合、その使用量
に特に制限はなく、必要とするＦＢＰ合成高に応じて適
宜必要量を決定すればよい。通常の反応では、Ｆ６Ｐ
は、０．００１〜１０００ｍｍｏｌ／Ｌ、好ましくは
０．０１〜１００ｍｍｏｌ／Ｌ、さらに好ましくは０．
１〜１０ｍｍｏｌ／Ｌを用いる。また、他の反応により
合成される場合、原料としてはブドウ糖または果糖が用
いられる。
に特に制限はなく、必要とするＦＢＰ合成高に応じて適
宜必要量を決定すればよい。通常の反応では、Ｆ６Ｐ
は、０．００１〜１０００ｍｍｏｌ／Ｌ、好ましくは
０．０１〜１００ｍｍｏｌ／Ｌ、さらに好ましくは０．
１〜１０ｍｍｏｌ／Ｌを用いる。また、他の反応により
合成される場合、原料としてはブドウ糖または果糖が用
いられる。
【００２１】ブドウ糖を原料として用いる場合、さらに
ヘキソキナーゼまたはグルコキナーゼおよびグルコース
−６−リン酸イソメラーゼを共存させる必要がある。用
いる酵素は、これらの活性を有する限り、市販の酵素で
あっても、精製された酵素であっても、部分精製された
酵素であっても、さらに微生物または組織そのものであ
ってもよい。しかし、微生物または組織の破砕液を用い
た場合、特にグルコースが分解される場合があることか
ら、好ましくは部分精製された酵素、さらに好ましくは
精製された酵素を用いるのがよい。
ヘキソキナーゼまたはグルコキナーゼおよびグルコース
−６−リン酸イソメラーゼを共存させる必要がある。用
いる酵素は、これらの活性を有する限り、市販の酵素で
あっても、精製された酵素であっても、部分精製された
酵素であっても、さらに微生物または組織そのものであ
ってもよい。しかし、微生物または組織の破砕液を用い
た場合、特にグルコースが分解される場合があることか
ら、好ましくは部分精製された酵素、さらに好ましくは
精製された酵素を用いるのがよい。
【００２２】また、酵素の由来についても制限はなく、
その例としては、サッカロマイセス属由来、アスペルギ
ルス属由来、バチルス属由来、エキリシア属由来などで
ある。原料として用いるブドウ糖、および酵素の使用量
に特に制限はなく、生成量に応じて適宜必要量を決定す
ればよい。また、リン酸源としてＡＴＰを用いるが、上
述したのと同じように、これにＡＤＰをＡＴＰに変換す
る酵素およびアセチル燐酸を作用させることでＡＴＰの
使用量を触媒量まで低減させることが可能である。
その例としては、サッカロマイセス属由来、アスペルギ
ルス属由来、バチルス属由来、エキリシア属由来などで
ある。原料として用いるブドウ糖、および酵素の使用量
に特に制限はなく、生成量に応じて適宜必要量を決定す
ればよい。また、リン酸源としてＡＴＰを用いるが、上
述したのと同じように、これにＡＤＰをＡＴＰに変換す
る酵素およびアセチル燐酸を作用させることでＡＴＰの
使用量を触媒量まで低減させることが可能である。
【００２３】酵素またはリン酸供与体およびＡＴＰの使
用量についても特に制限はなく、その生成量に応じて適
宜必要量を決定すればよい。通常の反応では、ブドウ糖
は、０．００１〜１０００ｍｍｏｌ／Ｌ、好ましくは
０．０１〜１００ｍｍｏｌ／Ｌ、さらに好ましくは０．
１〜１０ｍｍｏｌ／Ｌを用いる。
用量についても特に制限はなく、その生成量に応じて適
宜必要量を決定すればよい。通常の反応では、ブドウ糖
は、０．００１〜１０００ｍｍｏｌ／Ｌ、好ましくは
０．０１〜１００ｍｍｏｌ／Ｌ、さらに好ましくは０．
１〜１０ｍｍｏｌ／Ｌを用いる。
【００２４】ヘキソキナーゼまたはグルコキナーゼおよ
びグルコース−６−リン酸イソメラーゼ、アセテートキ
ナーゼやピルベートキナーゼなどの酵素は、０．００１
〜１００００ユニット／Ｌ、さらに好ましくは０．５〜
５００ユニット／Ｌを用い、アセチルリン酸やホスホエ
ノールピルビン酸などのリン酸供与体は、必要とするＦ
ＢＰ生成量の２当量〜５０当量、さらに好ましくは２当
量〜１０当量を用いる。
びグルコース−６−リン酸イソメラーゼ、アセテートキ
ナーゼやピルベートキナーゼなどの酵素は、０．００１
〜１００００ユニット／Ｌ、さらに好ましくは０．５〜
５００ユニット／Ｌを用い、アセチルリン酸やホスホエ
ノールピルビン酸などのリン酸供与体は、必要とするＦ
ＢＰ生成量の２当量〜５０当量、さらに好ましくは２当
量〜１０当量を用いる。
【００２５】果糖を原料として用いる場合、さらにヘキ
ソキナーゼまたはグルコキナーゼを共存させる必要があ
る。用いる酵素は、これらの活性を有する限り、市販の
酵素であっても、精製された酵素であっても、部分精製
された酵素であっても、さらに微生物または組織そのも
のであってもよい。しかし、微生物または組織の破砕液
を用いた場合、特に果糖が分解される場合があることか
ら、好ましくは部分精製された酵素、さらに好ましくは
精製された酵素を用いるのがよい。また、酵素の由来に
ついても制限はなく、その例としては、サッカロマイセ
ス属由来、アスペルギルス属由来、バチルス属由来、エ
キリシア属由来などである。
ソキナーゼまたはグルコキナーゼを共存させる必要があ
る。用いる酵素は、これらの活性を有する限り、市販の
酵素であっても、精製された酵素であっても、部分精製
された酵素であっても、さらに微生物または組織そのも
のであってもよい。しかし、微生物または組織の破砕液
を用いた場合、特に果糖が分解される場合があることか
ら、好ましくは部分精製された酵素、さらに好ましくは
精製された酵素を用いるのがよい。また、酵素の由来に
ついても制限はなく、その例としては、サッカロマイセ
ス属由来、アスペルギルス属由来、バチルス属由来、エ
キリシア属由来などである。
【００２６】原料として用いる果糖、および酵素の使用
量に特に制限はなく、生成量に応じて適宜必要量を決定
すればよい。また、リン酸源としてＡＴＰを用いている
が、上述したのと同じように、これにＡＤＰをＡＴＰに
変換する酵素およびアセチル燐酸を作用させることでＡ
ＴＰの使用量を触媒量まで低減させることが可能であ
る。
量に特に制限はなく、生成量に応じて適宜必要量を決定
すればよい。また、リン酸源としてＡＴＰを用いている
が、上述したのと同じように、これにＡＤＰをＡＴＰに
変換する酵素およびアセチル燐酸を作用させることでＡ
ＴＰの使用量を触媒量まで低減させることが可能であ
る。
【００２７】酵素またはリン酸供与体およびＡＴＰの使
用量についても特に制限はなく、その合成高に応じて適
宜必要量を決定すればよい。通常の反応では、果糖は、
０．００１〜１０００ｍｍｏｌ／Ｌ、好ましくは０．０
１〜１００ｍｍｏｌ／Ｌ、さらに好ましくは０．１〜１
０ｍｍｏｌ／Ｌを用いる。
用量についても特に制限はなく、その合成高に応じて適
宜必要量を決定すればよい。通常の反応では、果糖は、
０．００１〜１０００ｍｍｏｌ／Ｌ、好ましくは０．０
１〜１００ｍｍｏｌ／Ｌ、さらに好ましくは０．１〜１
０ｍｍｏｌ／Ｌを用いる。
【００２８】ヘキソキナーゼまたはグルコキナーゼ、ア
セテートキナーゼやピルベートキナーゼなどの酵素は、
０．００１〜１００００ユニット／Ｌ、さらに好ましく
は０．５〜５００ユニット／Ｌを用い、アセチルリン酸
やホスホエノールピルビン酸などのリン酸供与体は、必
要とするＦＢＰ出来高の２当量〜５０当量、さらに好ま
しくは２当量〜１０当量を用いる。
セテートキナーゼやピルベートキナーゼなどの酵素は、
０．００１〜１００００ユニット／Ｌ、さらに好ましく
は０．５〜５００ユニット／Ｌを用い、アセチルリン酸
やホスホエノールピルビン酸などのリン酸供与体は、必
要とするＦＢＰ出来高の２当量〜５０当量、さらに好ま
しくは２当量〜１０当量を用いる。
【００２９】上述した全ての反応において、反応をスム
ーズに進行させるために、マグネシウム、マンガン、カ
ルシウム等の２価の金属イオン、カリウム、ナトリウ
ム、リチウム等の１価の金属イオンを添加することもで
きる。これらの使用量については特に制限はなく、単独
もしくは複数で用いることができ、その合成に応じて適
宜必要量を決定すればよい。通常の反応では、２価の金
属イオンでは、用いるＡＴＰの１倍当量から２倍当量が
用いられる。また、１価の金属イオンでは、触媒量から
２価の金属イオンと同量が用いられる。
ーズに進行させるために、マグネシウム、マンガン、カ
ルシウム等の２価の金属イオン、カリウム、ナトリウ
ム、リチウム等の１価の金属イオンを添加することもで
きる。これらの使用量については特に制限はなく、単独
もしくは複数で用いることができ、その合成に応じて適
宜必要量を決定すればよい。通常の反応では、２価の金
属イオンでは、用いるＡＴＰの１倍当量から２倍当量が
用いられる。また、１価の金属イオンでは、触媒量から
２価の金属イオンと同量が用いられる。
【００３０】また、反応をスムーズに進行させるため
に、反応を緩衝液中でおこなうこともできる。この場
合、用いる緩衝液は、特に制限はないが、通常グッドの
緩衝液が用いられる。
に、反応を緩衝液中でおこなうこともできる。この場
合、用いる緩衝液は、特に制限はないが、通常グッドの
緩衝液が用いられる。
【００３１】また、上述した全ての反応において、反応
温度としては０〜８０℃が適当であり、好ましくは２０
〜６０℃、さらに好ましくは２５〜５０℃であり、反応
時間としては目的とするＦＢＰが得られる時間であれば
特に制限はないが、好ましくは２〜３０時間である。
温度としては０〜８０℃が適当であり、好ましくは２０
〜６０℃、さらに好ましくは２５〜５０℃であり、反応
時間としては目的とするＦＢＰが得られる時間であれば
特に制限はないが、好ましくは２〜３０時間である。
【００３２】本発明のＦＢＰの精製方法は、ＦＢＰ含有
液に亜鉛を添加することにより、Ｆ６ＰとＦＤＢやＦＢ
Ｐの分別沈澱をおこない、高純度精製をおこなうもので
ある。
液に亜鉛を添加することにより、Ｆ６ＰとＦＤＢやＦＢ
Ｐの分別沈澱をおこない、高純度精製をおこなうもので
ある。
【００３３】ＦＢＰ含有液が、上述したＦ６Ｐ、ブドウ
糖、果糖を原料として得られたものである場合、第一回
目に添加する亜鉛の量は、残存しているＦ６Ｐの２分の
１当量から、Ｆ６Ｐ初期添加量当量の範囲である。この
操作により、残存しているＦ６ＰおよびＦ６ＰやＦＢＰ
が分解して生じたと考えられる遊離リン酸が沈澱として
分取される。
糖、果糖を原料として得られたものである場合、第一回
目に添加する亜鉛の量は、残存しているＦ６Ｐの２分の
１当量から、Ｆ６Ｐ初期添加量当量の範囲である。この
操作により、残存しているＦ６ＰおよびＦ６ＰやＦＢＰ
が分解して生じたと考えられる遊離リン酸が沈澱として
分取される。
【００３４】生じた沈澱を除去した後、第二回目の亜鉛
添加をおこなうが、このときの亜鉛添加量はＦＢＰ含有
液中に含まれるＦＢＰと当量以上とする。この操作によ
り、ＦＢＰが沈澱として分取される。得られたＦＢＰ亜
鉛塩の沈澱は、目的に応じて塩変換や脱塩などの操作を
行ってもよい。
添加をおこなうが、このときの亜鉛添加量はＦＢＰ含有
液中に含まれるＦＢＰと当量以上とする。この操作によ
り、ＦＢＰが沈澱として分取される。得られたＦＢＰ亜
鉛塩の沈澱は、目的に応じて塩変換や脱塩などの操作を
行ってもよい。
【００３５】塩変換は、たとえばイオン交換樹脂を用い
る場合、ＯＨ型のＤＥＡＥ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ等の陰
イオン交換樹脂を用いて一旦遊離の酸をなし、滴定等の
方法によりＮａ塩へ変換する方法、Ｎａ型の陰イオン交
換樹脂を用いて直接Ｎａ塩へ変換する方法、ＣＭ−Ｓｅ
ｐｈａｒｏｓｅ等の陽イオン交換樹脂を用いて一旦遊離
の酸をなし、滴定等の方法によりＮａ塩などへ変換する
方法、などがあげられる。
る場合、ＯＨ型のＤＥＡＥ−Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ等の陰
イオン交換樹脂を用いて一旦遊離の酸をなし、滴定等の
方法によりＮａ塩へ変換する方法、Ｎａ型の陰イオン交
換樹脂を用いて直接Ｎａ塩へ変換する方法、ＣＭ−Ｓｅ
ｐｈａｒｏｓｅ等の陽イオン交換樹脂を用いて一旦遊離
の酸をなし、滴定等の方法によりＮａ塩などへ変換する
方法、などがあげられる。
【００３６】脱塩は、たとえば膜濾過による方法があげ
られる。ＲＯ膜を用いることにより容易に、大量の脱塩
が可能である。
られる。ＲＯ膜を用いることにより容易に、大量の脱塩
が可能である。
【００３７】しかし、反応条件などによっては上述し
た、分別沈澱による第一回目の亜鉛添加によりＦ６Ｐや
ＦＤＰが完全には沈澱として取り除けない場合がある。
この場合、第一回目の亜鉛添加の後の濾液を陰イオン交
換樹脂に供することによりこれらの不純物を完全に取り
除くことが可能である。この場合、用いる陰イオン交換
樹脂は陰イオン交換基を有するものであれば特に制限は
なく、樹脂径の小さな物が望ましく、弱塩基性の交換基
を有するものが好ましい。例えば、Ｄｏｗｅｘ（ダウケ
ミカル社）、ダイアイオン、ＦＰシリーズ（三菱化成
社）、アンバーライト（オルガノ社）、ＤＥＡＥ−Ｓｅ
ｐｈａｒｏｓｅ（ファルマシア社）などの商品名で市販
されているものである。樹脂の使用法、使用量、および
溶出法については、各樹脂の取扱説明書等に記載されて
いる通常の使用法に準じて行えばよく、特に制限はな
い。
た、分別沈澱による第一回目の亜鉛添加によりＦ６Ｐや
ＦＤＰが完全には沈澱として取り除けない場合がある。
この場合、第一回目の亜鉛添加の後の濾液を陰イオン交
換樹脂に供することによりこれらの不純物を完全に取り
除くことが可能である。この場合、用いる陰イオン交換
樹脂は陰イオン交換基を有するものであれば特に制限は
なく、樹脂径の小さな物が望ましく、弱塩基性の交換基
を有するものが好ましい。例えば、Ｄｏｗｅｘ（ダウケ
ミカル社）、ダイアイオン、ＦＰシリーズ（三菱化成
社）、アンバーライト（オルガノ社）、ＤＥＡＥ−Ｓｅ
ｐｈａｒｏｓｅ（ファルマシア社）などの商品名で市販
されているものである。樹脂の使用法、使用量、および
溶出法については、各樹脂の取扱説明書等に記載されて
いる通常の使用法に準じて行えばよく、特に制限はな
い。
【００３８】
【実施例】以下に、本発明を実施例により具体的に説明
する。
する。
【００３９】実施例に用いた試薬類のうち、Ｆ６Ｐ、ブ
ドウ糖、果糖は、それぞれ石津製薬より購入したナトリ
ウム塩を用いた。その他の試薬については総て市販のも
のを用いた。
ドウ糖、果糖は、それぞれ石津製薬より購入したナトリ
ウム塩を用いた。その他の試薬については総て市販のも
のを用いた。
【００４０】実施例に用いたＰＦＫ２は、フランコイ
ス、ファン・シャフチンゲン、ハーズら記載の方法（ヨ
ーロピアン・ジャーナル・オブ・バイオケミストリー
誌、１４５巻、１８７頁（１９８４年））に従い、酵母
菌の抽出液（酵母はオリエンタル酵母社製，オリエンタ
ルイーストを用いた）に、ＤＥＡＥ−Ｓｅｐｈａｒｏｓ
ｅカラムクロマトグラフィー、Ｂｌｕｅ−Ｓｅｐｈａｒ
ｏｓｅカラムクロマトグラフィーを行い、部分精製した
ものを用いた。アセテートキナーゼ、グルコキナーゼ、
グルコース−６−リン酸イソメラーゼはユニチカ株式会
社が市販のものを用いた。
ス、ファン・シャフチンゲン、ハーズら記載の方法（ヨ
ーロピアン・ジャーナル・オブ・バイオケミストリー
誌、１４５巻、１８７頁（１９８４年））に従い、酵母
菌の抽出液（酵母はオリエンタル酵母社製，オリエンタ
ルイーストを用いた）に、ＤＥＡＥ−Ｓｅｐｈａｒｏｓ
ｅカラムクロマトグラフィー、Ｂｌｕｅ−Ｓｅｐｈａｒ
ｏｓｅカラムクロマトグラフィーを行い、部分精製した
ものを用いた。アセテートキナーゼ、グルコキナーゼ、
グルコース−６−リン酸イソメラーゼはユニチカ株式会
社が市販のものを用いた。
【００４１】ＦＢＰを含む糖類の検出は、ＬＣモジュー
ル１（ウオーターズ社製）、４１０示差屈折計を用いた
高速液体クロマトグラフィーによっておこなった。分析
用カラムはケムコパックＮＵＣＬＥＯＳＩＬ（ケムコ社
製、４．６×２５０ｍｍ）を用いた。移動相は５０ｍＭ
酢酸アンモニウム溶液を０．５ｍＬ／ｍｉｎで用いた。
ル１（ウオーターズ社製）、４１０示差屈折計を用いた
高速液体クロマトグラフィーによっておこなった。分析
用カラムはケムコパックＮＵＣＬＥＯＳＩＬ（ケムコ社
製、４．６×２５０ｍｍ）を用いた。移動相は５０ｍＭ
酢酸アンモニウム溶液を０．５ｍＬ／ｍｉｎで用いた。
【００４２】実施例１ Ｆ６Ｐを１ｍｍｏｌ／Ｌ、アセチルリン酸を３ｍｍｏｌ
／Ｌ、ＡＴＰを０．２ｍｍｏｌ／Ｌ含む５０ｍｍｏｌ／
ＬのＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．０）１００ｍＬ中に、
ＰＦＫ２を１０ユニット／Ｌ、アセテートキナーゼを５
０ユニット／Ｌとなるように添加し、３７℃で８時間の
反応を行った。また、比較例として、Ｆ６Ｐを１ｍｍｏ
ｌ／Ｌ、ＡＴＰを２ｍｍｏｌ／Ｌ含む５０ｍｍｏｌ／Ｌ
のＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．０）１００ｍＬ中に、Ｐ
ＦＫ２を１０ユニット／Ｌとなるように添加し、３７℃
で８時間の反応を行った（従来法）。これらの実験の結
果を、図１に示した。
／Ｌ、ＡＴＰを０．２ｍｍｏｌ／Ｌ含む５０ｍｍｏｌ／
ＬのＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．０）１００ｍＬ中に、
ＰＦＫ２を１０ユニット／Ｌ、アセテートキナーゼを５
０ユニット／Ｌとなるように添加し、３７℃で８時間の
反応を行った。また、比較例として、Ｆ６Ｐを１ｍｍｏ
ｌ／Ｌ、ＡＴＰを２ｍｍｏｌ／Ｌ含む５０ｍｍｏｌ／Ｌ
のＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．０）１００ｍＬ中に、Ｐ
ＦＫ２を１０ユニット／Ｌとなるように添加し、３７℃
で８時間の反応を行った（従来法）。これらの実験の結
果を、図１に示した。
【００４３】図１から分かるように、反応液に、ＡＤＰ
をＡＴＰに変換する酵素であるアセテートキナーゼと、
リン酸供与体であるアセチルリン酸を添加した場合、こ
れらを添加しない比較例に比べて、ＡＴＰが１０分の１
の使用量にもかかわらず、高い変換率で、ＦＢＰが効率
よく合成されることが示された。
をＡＴＰに変換する酵素であるアセテートキナーゼと、
リン酸供与体であるアセチルリン酸を添加した場合、こ
れらを添加しない比較例に比べて、ＡＴＰが１０分の１
の使用量にもかかわらず、高い変換率で、ＦＢＰが効率
よく合成されることが示された。
【００４４】実施例２ ブドウ糖を２ｍｍｏｌ／Ｌ、アセチルリン酸を３ｍｍｏ
ｌ／Ｌ、ＡＴＰを０．２ｍｍｏｌ／Ｌを含む５０ｍｍｏ
ｌ／ＬのＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．０）１００ｍＬ中
に、ＰＦＫ２を２０ユニット／Ｌ、アセテートキナーゼ
を１００ユニット／Ｌ、グルコキナーゼおよびグルコー
ス−６−リン酸イソメラーゼを２０ユニット／Ｌとなる
ように添加し、３７℃で８時間の反応を行った。この実
験の結果を図２に示した。
ｌ／Ｌ、ＡＴＰを０．２ｍｍｏｌ／Ｌを含む５０ｍｍｏ
ｌ／ＬのＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．０）１００ｍＬ中
に、ＰＦＫ２を２０ユニット／Ｌ、アセテートキナーゼ
を１００ユニット／Ｌ、グルコキナーゼおよびグルコー
ス−６−リン酸イソメラーゼを２０ユニット／Ｌとなる
ように添加し、３７℃で８時間の反応を行った。この実
験の結果を図２に示した。
【００４５】図２から分かるように、ブドウ糖を原料と
した場合でも、本発明に記載した方法でＦＢＰの合成が
可能であることが示された。
した場合でも、本発明に記載した方法でＦＢＰの合成が
可能であることが示された。
【００４６】実施例３ 果糖を２ｍｍｏｌ／Ｌ、アセチルリン酸を３ｍｍｏｌ／
Ｌ、ＡＴＰを０．１ｍｍｏｌ／Ｌを含む５０ｍｍｏｌ／
ＬのＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．０）１００ｍＬ中に、
ＰＦＫ２を１０ユニット／Ｌ、アセテートキナーゼを１
００ユニット／Ｌ、グルコキナーゼを２０ユニット／Ｌ
となるように添加し、３７℃で８時間の反応を行った。
この実験の結果を図３に示した。
Ｌ、ＡＴＰを０．１ｍｍｏｌ／Ｌを含む５０ｍｍｏｌ／
ＬのＨＥＰＥＳ緩衝液（ｐＨ７．０）１００ｍＬ中に、
ＰＦＫ２を１０ユニット／Ｌ、アセテートキナーゼを１
００ユニット／Ｌ、グルコキナーゼを２０ユニット／Ｌ
となるように添加し、３７℃で８時間の反応を行った。
この実験の結果を図３に示した。
【００４７】図３から分かるように、果糖を原料とした
場合でも、本発明に記載した方法でＦＢＰの合成が可能
であることが示された。
場合でも、本発明に記載した方法でＦＢＰの合成が可能
であることが示された。
【００４８】実施例４ 実施例１に記載した反応で得られたＦＢＰを含む溶液を
用い、この溶液に塩化亜鉛を添加することでＦＢＰの分
別沈澱を行った。ＦＢＰを含む溶液１００ｍＬに、塩化
亜鉛の粉末０．２ｍｍｏｌを添加し、３０分間、室温で
かくはんした後、生じた沈澱をフィルター濾過により取
り除いた。得られた上清に再度、塩化亜鉛の粉末２．８
ｍｍｏｌを添加し、３０分間、室温でかくはんした後、
生じた沈澱をフィルター濾過により採取した。この結果
を表１に示した。
用い、この溶液に塩化亜鉛を添加することでＦＢＰの分
別沈澱を行った。ＦＢＰを含む溶液１００ｍＬに、塩化
亜鉛の粉末０．２ｍｍｏｌを添加し、３０分間、室温で
かくはんした後、生じた沈澱をフィルター濾過により取
り除いた。得られた上清に再度、塩化亜鉛の粉末２．８
ｍｍｏｌを添加し、３０分間、室温でかくはんした後、
生じた沈澱をフィルター濾過により採取した。この結果
を表１に示した。
【００４９】表１から分かるように、１度目の塩化亜鉛
添加により生じた沈澱は遊離リン酸とＦ６Ｐに由来する
ものであり、２度目の塩化亜鉛添加により生じた沈澱を
採取することで高純度のＦＢＰが容易に取得できること
が示された。
添加により生じた沈澱は遊離リン酸とＦ６Ｐに由来する
ものであり、２度目の塩化亜鉛添加により生じた沈澱を
採取することで高純度のＦＢＰが容易に取得できること
が示された。
【００５０】
【発明の効果】本発明の製造方法によれば、高価なＡＴ
Ｐを少量しか使用せずに、容易に高収率でＦＢＰを製造
することが可能となり、さらに本発明の精製方法によれ
ば、容易に高収率で高純度のＦＢＰを精製することがで
きる。
Ｐを少量しか使用せずに、容易に高収率でＦＢＰを製造
することが可能となり、さらに本発明の精製方法によれ
ば、容易に高収率で高純度のＦＢＰを精製することがで
きる。
【図１】本発明のＦＢＰ合成反応の結果を示した図であ
る。
る。
【図２】本発明のＦＢＰ合成反応の結果を示した図であ
る。
る。
【図３】本発明のＦＢＰ合成反応の結果を示した図であ
る。
る。
Claims (4)
- 【請求項１】 フルクトース ６−リン酸 ２−キナー
ゼおよびアデノシン５’−ジリン酸をアデノシン ５’
−トリリン酸に変換する酵素の存在下に、フルクトース
６−リン酸、アデノシン ５’−トリリン酸およびリ
ン酸供与体と作用させることを特徴とするフルクトース
２，６−ビスリン酸の製造方法。 - 【請求項２】 フルクトース ６−リン酸 ２−キナー
ゼ、アデノシン ５’−ジリン酸をアデノシン ５’−
トリリン酸に変換する酵素、ヘキソキナーゼまたはグル
コキナーゼおよびグルコース ６−リン酸イソメラーゼ
の存在下に、ブドウ糖、アデノシン ５’−トリリン酸
およびリン酸供与体を作用させることを特徴とするフル
クトース ２，６−ビスリン酸の製造方法。 - 【請求項３】 フルクトース ６−リン酸 ２−キナー
ゼ、アデノシン ５’−ジリン酸をアデノシン ５’−
トリリン酸に変換する酵素、ヘキソキナーゼまたはグル
コキナーゼおよびグルコース ６−リン酸イソメラーゼ
の存在下に、果糖、アデノシン ５’−トリリン酸およ
びリン酸供与体を作用させることを特徴とするフルクト
ース ２，６−ビスリン酸の製造方法。 - 【請求項４】 フルクトース ２，６−ビスリン酸含有
液に亜鉛塩を添加し、生じた不溶物を除去した後、さら
に亜鉛塩を加えることにより生じた沈澱を分取すること
を特徴とするフルクトース ２，６−ビスリン酸の精製
方法。
Priority Applications (5)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5084102A JPH06261780A (ja) | 1993-03-17 | 1993-03-17 | フルクトース ２，６−ビスリン酸の製造方法およびその精製方法 |
| EP94104091A EP0616036B1 (en) | 1993-03-17 | 1994-03-16 | Process for producing fructose 2,6-disphosphate and purification process thereof |
| DE69419639T DE69419639T2 (de) | 1993-03-17 | 1994-03-16 | Verfahren zur Herstellung von Fructose-2,6-diphosphat und Reinigungsverfahren hierfür |
| US08/213,738 US5501965A (en) | 1993-03-17 | 1994-03-16 | Process for producing fructose 2,6-bisphosphate and purification process thereof |
| US08/562,739 US5968787A (en) | 1993-03-17 | 1995-11-27 | Process for producing fructose 2,6,-bisphosphate and purification process thereof |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP5084102A JPH06261780A (ja) | 1993-03-17 | 1993-03-17 | フルクトース ２，６−ビスリン酸の製造方法およびその精製方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06261780A true JPH06261780A (ja) | 1994-09-20 |
Family
ID=13821165
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP5084102A Pending JPH06261780A (ja) | 1993-03-17 | 1993-03-17 | フルクトース ２，６−ビスリン酸の製造方法およびその精製方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06261780A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE10112925A1 (de) * | 2001-03-13 | 2002-10-02 | Erich Eigenbrodt | Verwendung von Zuckerphosphaten, Zuckerphosphatanalogen, Aminosäuren, Aminosäureanalogen zur Modulation von Transaminasen und/oder der Assoziation p36/Malat Dehydrogenase |
-
1993
- 1993-03-17 JP JP5084102A patent/JPH06261780A/ja active Pending
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE10112925A1 (de) * | 2001-03-13 | 2002-10-02 | Erich Eigenbrodt | Verwendung von Zuckerphosphaten, Zuckerphosphatanalogen, Aminosäuren, Aminosäureanalogen zur Modulation von Transaminasen und/oder der Assoziation p36/Malat Dehydrogenase |
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