JPH06199698A - 抗菌剤とこの抗菌剤を用いて物品を処理する方法 - Google Patents
抗菌剤とこの抗菌剤を用いて物品を処理する方法Info
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- JPH06199698A JPH06199698A JP4105469A JP10546992A JPH06199698A JP H06199698 A JPH06199698 A JP H06199698A JP 4105469 A JP4105469 A JP 4105469A JP 10546992 A JP10546992 A JP 10546992A JP H06199698 A JPH06199698 A JP H06199698A
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Abstract
(57)【要約】
【目的】 ラクトフェリン類の分解物および／またはそ
の抗菌性ペプチドの抗菌性が更に増強された抗菌剤を提
供する。 【構成】 （Ａ）ラクトフェリン類の分解物および／ま
たはその抗菌性ペプチドと、（Ｂ）リゾチ−ムとを有効
成分とする抗菌剤。
の抗菌性ペプチドの抗菌性が更に増強された抗菌剤を提
供する。 【構成】 （Ａ）ラクトフェリン類の分解物および／ま
たはその抗菌性ペプチドと、（Ｂ）リゾチ−ムとを有効
成分とする抗菌剤。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】この発明は、抗菌剤と、この抗菌
剤を用いて物品を処理する方法に関するものである。さ
らに詳しくは、この発明は、ラクトフェリン類の分解物
および／またはこの分解物の抗菌性ペプチドの抗菌性が
更に増強された抗菌剤と、この抗菌剤を用いて物品を処
理する方法に関するものである。
剤を用いて物品を処理する方法に関するものである。さ
らに詳しくは、この発明は、ラクトフェリン類の分解物
および／またはこの分解物の抗菌性ペプチドの抗菌性が
更に増強された抗菌剤と、この抗菌剤を用いて物品を処
理する方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】ラクトフェリンは、生体内では、涙、唾
液、末梢血、乳汁等に含まれている天然の鉄結合蛋白質
であり、大腸菌、カンジダ菌、クロストリジウム菌等の
有害微生物に対して抗菌作用を示すことが知られている
［ジャ−ナル・オブ・ペディアトリクス（Journal of P
ediatrics ）、第９４巻、１頁：１９７９年］。また、
ブドウ球菌及び腸球菌に対して、０．５〜３０ｍｇ／ｍ
ｌの濃度で抗菌作用を有することが知られている［ノネ
ッケとスミス；ジャ−ナル・オブ・デアリ−・サイエン
ス（Nonnecke,B.J. & Smith,K.L.;Journal of Dairy Sc
ience ）６７巻、６０６頁：１９８４年］。
液、末梢血、乳汁等に含まれている天然の鉄結合蛋白質
であり、大腸菌、カンジダ菌、クロストリジウム菌等の
有害微生物に対して抗菌作用を示すことが知られている
［ジャ−ナル・オブ・ペディアトリクス（Journal of P
ediatrics ）、第９４巻、１頁：１９７９年］。また、
ブドウ球菌及び腸球菌に対して、０．５〜３０ｍｇ／ｍ
ｌの濃度で抗菌作用を有することが知られている［ノネ
ッケとスミス；ジャ−ナル・オブ・デアリ−・サイエン
ス（Nonnecke,B.J. & Smith,K.L.;Journal of Dairy Sc
ience ）６７巻、６０６頁：１９８４年］。
【０００３】一方、従来より種々の微生物に対して抗菌
作用を有するペプチドについては多数の発明、例えばグ
ラム陽性菌およびグラム陰性菌に有効なホスホノトリペ
プチド（特開昭５７−１０６６８９号公報）、ホスホノ
ジペプチド誘導体（特開昭５８−１３５９４号公報）、
環状ペプチド誘導体（特開昭５８−２１３７４４号公
報）、抗菌及び抗ウイルス作用を示すペプチド（特開昭
５９−５１２４７号公報）、酵母に有効なポリペプチド
（特開昭６０−１３０５９９号公報）、グラム陽性菌に
有効な糖ペプチド誘導体（特開昭６０−１７２９９８号
公報、特開昭６１−２５１６９９号公報、特開昭６３−
４４５９８号公報）、グラム陽性菌に有効なオリゴペプ
チド（特開昭６２−２２７９８号公報）、ペプチド系抗
生物質（特開昭６２−５１６９７号公報、特開昭６３−
１７８９７号公報）その他北米産カブトガニの血球から
抽出した抗菌性ペプチド（特開平２−５３７９９号公
報）、蜜蜂の血リンパから単離した抗菌性ペプチド（特
表平２−５０００８４号公報）等が知られている。
作用を有するペプチドについては多数の発明、例えばグ
ラム陽性菌およびグラム陰性菌に有効なホスホノトリペ
プチド（特開昭５７−１０６６８９号公報）、ホスホノ
ジペプチド誘導体（特開昭５８−１３５９４号公報）、
環状ペプチド誘導体（特開昭５８−２１３７４４号公
報）、抗菌及び抗ウイルス作用を示すペプチド（特開昭
５９−５１２４７号公報）、酵母に有効なポリペプチド
（特開昭６０−１３０５９９号公報）、グラム陽性菌に
有効な糖ペプチド誘導体（特開昭６０−１７２９９８号
公報、特開昭６１−２５１６９９号公報、特開昭６３−
４４５９８号公報）、グラム陽性菌に有効なオリゴペプ
チド（特開昭６２−２２７９８号公報）、ペプチド系抗
生物質（特開昭６２−５１６９７号公報、特開昭６３−
１７８９７号公報）その他北米産カブトガニの血球から
抽出した抗菌性ペプチド（特開平２−５３７９９号公
報）、蜜蜂の血リンパから単離した抗菌性ペプチド（特
表平２−５０００８４号公報）等が知られている。
【０００４】この発明の発明者等は、望ましくない副作
用等（例えば、抗原性等）がなく、耐熱性があり、かつ
強い抗菌作用を有する物質を自然界から安価に単離する
ことを企図し、ラクトフェリン類を酸または酵素により
加水分解した分解物が未分解のラクトフェリン類よりも
強い耐熱性および抗菌性を有することを見出し、すでに
特許出願を行った（特願平３−１７１７３６号）。
用等（例えば、抗原性等）がなく、耐熱性があり、かつ
強い抗菌作用を有する物質を自然界から安価に単離する
ことを企図し、ラクトフェリン類を酸または酵素により
加水分解した分解物が未分解のラクトフェリン類よりも
強い耐熱性および抗菌性を有することを見出し、すでに
特許出願を行った（特願平３−１７１７３６号）。
【０００５】また、従来からラクトフェリンの抗菌性を
増強する研究が種々行われてきており、かかる生理活性
増強補助剤としてはリゾチ−ム、ＩｇＡおよびグリコペ
プチドが知られている。例えば、ラクトフェリンとリゾ
チ−ムとの共存により相乗的に抗菌作用を増強する方法
［特開昭６２−２４９９３１号公報］、ラクトフェリン
と分泌型ＩｇＡとの共存により相乗的に抗菌作用を増強
する方法［ステフェンス等；イムノロジ−（Stephens,
S.,et al;Immunology）；４１巻、５９７頁：１９８０
年］等が報告されている。更に、スピック等は［エ−・
エフ・ウイリアムスおよびジェ−・ディ−・バウム（A.
F.Williams & J.D.Baum ）編、「ヒュ−マン・ミルクバ
ンキング」（Human Milk Banking）、ネッスル・ヌ−ト
リション・ワ−クショップ・シリ−ズ、第５巻、（Nest
le Nutrition Workshop Series Volume 5 ）、１３３
頁、レ−ベン・プレス・ブック社（Raven Press Books,
Ltd.）、１９８４年］に、ラクトフェリンには細菌が粘
膜表面に付着するのを防止する作用があり、この作用は
リゾチ−ムまたはグリコペプチドの存在で強化されるこ
とを報告している。
増強する研究が種々行われてきており、かかる生理活性
増強補助剤としてはリゾチ−ム、ＩｇＡおよびグリコペ
プチドが知られている。例えば、ラクトフェリンとリゾ
チ−ムとの共存により相乗的に抗菌作用を増強する方法
［特開昭６２−２４９９３１号公報］、ラクトフェリン
と分泌型ＩｇＡとの共存により相乗的に抗菌作用を増強
する方法［ステフェンス等；イムノロジ−（Stephens,
S.,et al;Immunology）；４１巻、５９７頁：１９８０
年］等が報告されている。更に、スピック等は［エ−・
エフ・ウイリアムスおよびジェ−・ディ−・バウム（A.
F.Williams & J.D.Baum ）編、「ヒュ−マン・ミルクバ
ンキング」（Human Milk Banking）、ネッスル・ヌ−ト
リション・ワ−クショップ・シリ−ズ、第５巻、（Nest
le Nutrition Workshop Series Volume 5 ）、１３３
頁、レ−ベン・プレス・ブック社（Raven Press Books,
Ltd.）、１９８４年］に、ラクトフェリンには細菌が粘
膜表面に付着するのを防止する作用があり、この作用は
リゾチ−ムまたはグリコペプチドの存在で強化されるこ
とを報告している。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】しかしながら、上記の
ラクトフェリン類の分解物、あるいはその抗菌性ペプチ
ドの抗菌活性を増強する方法、特に多成分系の製品、物
品（例えば、牛乳等）に上記のラクトフェリン類の分解
物またはその抗菌性ペプチドを使用する際に、その抗菌
活性を増強する方法については知られていない。
ラクトフェリン類の分解物、あるいはその抗菌性ペプチ
ドの抗菌活性を増強する方法、特に多成分系の製品、物
品（例えば、牛乳等）に上記のラクトフェリン類の分解
物またはその抗菌性ペプチドを使用する際に、その抗菌
活性を増強する方法については知られていない。
【０００７】この発明は、この発明の発明者等が既に発
明した上記のラクトフェリン類の分解物および／または
その抗菌性ペプチドを、特に多成分系の製品、物品（例
えば、牛乳等）に使用する際に、ラクトフェリン類の分
解物および／またはその抗菌性ペプチドの抗菌性が更に
増強された抗菌剤を提供すること、およびこの抗菌剤を
用いて物品を処理する方法を提供することを目的として
いる。
明した上記のラクトフェリン類の分解物および／または
その抗菌性ペプチドを、特に多成分系の製品、物品（例
えば、牛乳等）に使用する際に、ラクトフェリン類の分
解物および／またはその抗菌性ペプチドの抗菌性が更に
増強された抗菌剤を提供すること、およびこの抗菌剤を
用いて物品を処理する方法を提供することを目的として
いる。
【０００８】
【課題を解決するための手段】この発明の発明者らは上
記の課題について鋭意研究を重ねた結果、ラクトフェリ
ン類の分解物および／またはその抗菌性ペプチドと、特
定の化合物とを組み合わせることによって、ラクトフェ
リン類の分解物および／またはラクトフェリン関連抗菌
性ペプチドを単独使用した場合に比し、抗菌性を増大さ
せ得ることを発見し、この発明を完成した。
記の課題について鋭意研究を重ねた結果、ラクトフェリ
ン類の分解物および／またはその抗菌性ペプチドと、特
定の化合物とを組み合わせることによって、ラクトフェ
リン類の分解物および／またはラクトフェリン関連抗菌
性ペプチドを単独使用した場合に比し、抗菌性を増大さ
せ得ることを発見し、この発明を完成した。
【０００９】すなわちこの発明は、（Ａ）ラクトフェリ
ン類の分解物および／またはその抗菌性ペプチドと、
（Ｂ）リゾチ−ムとを有効成分とする抗菌剤を提供す
る。さらにこの発明は、（Ａ）ラクトフェリン類の分解
物および／またはその抗菌性ペプチドと、（Ｂ）リゾチ
−ムとを有効成分とする抗菌剤を用いて物品を処理する
方法を提供する。
ン類の分解物および／またはその抗菌性ペプチドと、
（Ｂ）リゾチ−ムとを有効成分とする抗菌剤を提供す
る。さらにこの発明は、（Ａ）ラクトフェリン類の分解
物および／またはその抗菌性ペプチドと、（Ｂ）リゾチ
−ムとを有効成分とする抗菌剤を用いて物品を処理する
方法を提供する。
【００１０】次にこの発明について詳しく説明する。こ
の発明においてラクトフェリン類とは、市販のラクトフ
ェリン、哺乳類（例えば人、牛、羊、山羊、馬等）の初
乳、移行乳、常乳、末期乳等、またはこれらの乳の処理
物である脱脂乳、ホエ−等から常法（例えば、イオン交
換クロマトグラフィ−）により分離したラクトフェリ
ン、それらを塩酸、クエン酸等により脱鉄したアポラク
トフェリン、アポラクトフェリンを鉄、銅、亜鉛、マン
ガン等の金属でキレ−トさせた金属飽和または部分飽和
ラクトフェリン、もしくはこれらの混合物であり、市販
品を使用し、或いは公知の方法により調製して使用する
ことができる。
の発明においてラクトフェリン類とは、市販のラクトフ
ェリン、哺乳類（例えば人、牛、羊、山羊、馬等）の初
乳、移行乳、常乳、末期乳等、またはこれらの乳の処理
物である脱脂乳、ホエ−等から常法（例えば、イオン交
換クロマトグラフィ−）により分離したラクトフェリ
ン、それらを塩酸、クエン酸等により脱鉄したアポラク
トフェリン、アポラクトフェリンを鉄、銅、亜鉛、マン
ガン等の金属でキレ−トさせた金属飽和または部分飽和
ラクトフェリン、もしくはこれらの混合物であり、市販
品を使用し、或いは公知の方法により調製して使用する
ことができる。
【００１１】この発明において使用するラクトフェリン
の分解物は、例えば上記のラクトフェリン類を酸または
酵素で加水分解する、特願平３−１７１７３６号の発明
に記載された方法によって得ることができる。即ち酸に
より加水分解を行う場合は、ラクトフェリン類を水溶液
とし、これに無機酸または有機酸を添加し、所定温度に
所定時間加熱して加水分解する。酵素により加水分解を
行う場合は、ラクトフェリン類を水溶液とし、使用する
酵素の至適ｐＨに調整し、これにペプシン、トリプシン
等の酵素を加え、所定温度に所定時間保持して加水分解
する。加水分解後は酵素を常法により失活させる。酸ま
たは酵素による加水分解で得られた分解物は、抗菌性を
有するペプチドを含有する、種々の分子量を有する分解
物の混合物である。上記加水分解による分解度は、６〜
２０％の範囲が望ましい。なお、上記分解度は、ケルダ
−ル法により試料の全窒素を、またホルモ−ル滴定法に
より試料のホルモ−ル態窒素を測定し、これらの値から
次式により算出した。
の分解物は、例えば上記のラクトフェリン類を酸または
酵素で加水分解する、特願平３−１７１７３６号の発明
に記載された方法によって得ることができる。即ち酸に
より加水分解を行う場合は、ラクトフェリン類を水溶液
とし、これに無機酸または有機酸を添加し、所定温度に
所定時間加熱して加水分解する。酵素により加水分解を
行う場合は、ラクトフェリン類を水溶液とし、使用する
酵素の至適ｐＨに調整し、これにペプシン、トリプシン
等の酵素を加え、所定温度に所定時間保持して加水分解
する。加水分解後は酵素を常法により失活させる。酸ま
たは酵素による加水分解で得られた分解物は、抗菌性を
有するペプチドを含有する、種々の分子量を有する分解
物の混合物である。上記加水分解による分解度は、６〜
２０％の範囲が望ましい。なお、上記分解度は、ケルダ
−ル法により試料の全窒素を、またホルモ−ル滴定法に
より試料のホルモ−ル態窒素を測定し、これらの値から
次式により算出した。
【００１２】 分解度＝（ホルモ−ル態窒素量／全窒素量）×１００ 上記、酸または酵素によって加水分解して得られた反応
液（ラクトフェリン類分解物の溶液）は、常法により冷
却し、必要に応じて常法により中和、脱塩、脱色し、更
に必要に応じて常法により分画し、得られた溶液をその
まま、または濃縮した液状で、或いは濃縮後乾燥した粉
末状で、リゾチ−ムと混合する。
液（ラクトフェリン類分解物の溶液）は、常法により冷
却し、必要に応じて常法により中和、脱塩、脱色し、更
に必要に応じて常法により分画し、得られた溶液をその
まま、または濃縮した液状で、或いは濃縮後乾燥した粉
末状で、リゾチ−ムと混合する。
【００１３】この発明において使用するラクトフェリン
分解物の抗菌性ペプチドは、ラクトフェリン類の分解物
から分離手段によって得られる抗菌性を有するペプチド
である。この抗菌性ペプチドは、溶液をそのまま、また
は濃縮した液状で、或いは濃縮後乾燥した粉末状で、リ
ゾチ−ムと混合する。
分解物の抗菌性ペプチドは、ラクトフェリン類の分解物
から分離手段によって得られる抗菌性を有するペプチド
である。この抗菌性ペプチドは、溶液をそのまま、また
は濃縮した液状で、或いは濃縮後乾燥した粉末状で、リ
ゾチ−ムと混合する。
【００１４】ラクトフェリン類の分解物および／または
その抗菌性ペプチドをリゾチームとどのように組み合わ
せるかは、使用目的によって適宜選択することができ
る。また、混合割合は、それらの成分の種類によって、
或いは使用目的によって適宜選択することができる。上
記の混合は、前記のように液状で、または粉末状で混合
することができ、この場合適宜公知の希釈剤、賦形剤を
添加してもよい。
その抗菌性ペプチドをリゾチームとどのように組み合わ
せるかは、使用目的によって適宜選択することができ
る。また、混合割合は、それらの成分の種類によって、
或いは使用目的によって適宜選択することができる。上
記の混合は、前記のように液状で、または粉末状で混合
することができ、この場合適宜公知の希釈剤、賦形剤を
添加してもよい。
【００１５】リゾチ−ムは市販品を使用することがで
き、或いは公知の方法によって調製し使用してもよい。
この発明の抗菌剤は、各種の細菌、酵母、カビに対して
強い抗菌性を有し、医薬品としてのみならず、食品、飼
料、化粧品等のように人または動物の体内に取り入れら
れ、或いは体表面に適用される製品、その他一般に細菌
の増殖を防止または抑制することが望まれるあらゆる製
品に配合して使用することができ、またこの発明の抗菌
剤でそれらの製品或いは原料素材を処理することができ
る。即ちこの発明の抗菌剤は、そのまま人または動物に
投与することができ、或いは食品（例えば、チュウイン
ガム等）、医薬品（例えば、目薬、乳房炎治療剤、下痢
防止剤、水虫薬等）、医薬部外品（例えば、口中洗浄
剤、制汗剤、養毛剤等）、各種化粧品（例えば、整髪
料、クリ−ム、乳液等）、各種歯磨用品（例えば、歯
磨、歯ブラシ等）、各種生理用品、各種ベビ−用品（例
えば、オムツ等）、各種高齢者用品（例えば、入れ歯固
定剤、オムツ等）、各種洗剤（例えば、石鹸、薬用石
鹸、シャンプ−、リンス、洗濯用洗剤、キッチン用洗
剤、住宅用洗剤等）、各種除菌用品（例えば、キッチン
用除菌ペ−パ−、トイレット用除菌ペ−パ−等）、飼料
（例えば、ペットフ−ド等）、それらの原料となる素
材、その他一般に微生物の増殖の防止、抑制が望まれる
あらゆる物品に添加、配合、噴霧、付着、被覆、含浸等
を行なってもよく、またその他一般に微生物の増殖の防
止、抑制が望まれるあらゆる物品の処理に用いることが
できる。
き、或いは公知の方法によって調製し使用してもよい。
この発明の抗菌剤は、各種の細菌、酵母、カビに対して
強い抗菌性を有し、医薬品としてのみならず、食品、飼
料、化粧品等のように人または動物の体内に取り入れら
れ、或いは体表面に適用される製品、その他一般に細菌
の増殖を防止または抑制することが望まれるあらゆる製
品に配合して使用することができ、またこの発明の抗菌
剤でそれらの製品或いは原料素材を処理することができ
る。即ちこの発明の抗菌剤は、そのまま人または動物に
投与することができ、或いは食品（例えば、チュウイン
ガム等）、医薬品（例えば、目薬、乳房炎治療剤、下痢
防止剤、水虫薬等）、医薬部外品（例えば、口中洗浄
剤、制汗剤、養毛剤等）、各種化粧品（例えば、整髪
料、クリ−ム、乳液等）、各種歯磨用品（例えば、歯
磨、歯ブラシ等）、各種生理用品、各種ベビ−用品（例
えば、オムツ等）、各種高齢者用品（例えば、入れ歯固
定剤、オムツ等）、各種洗剤（例えば、石鹸、薬用石
鹸、シャンプ−、リンス、洗濯用洗剤、キッチン用洗
剤、住宅用洗剤等）、各種除菌用品（例えば、キッチン
用除菌ペ−パ−、トイレット用除菌ペ−パ−等）、飼料
（例えば、ペットフ−ド等）、それらの原料となる素
材、その他一般に微生物の増殖の防止、抑制が望まれる
あらゆる物品に添加、配合、噴霧、付着、被覆、含浸等
を行なってもよく、またその他一般に微生物の増殖の防
止、抑制が望まれるあらゆる物品の処理に用いることが
できる。
【００１６】次に試験例を示してこの発明をさらに詳し
く説明する。試験例１ １．試料の調製 (1) ラクトフェリン分解物（粉末）：実施例２記載の方
法により調製して使用した。 (2) リゾチーム：市販のヒトリゾチーム（生化学工業社
製）を使用した。 ２．試験菌株の培養 以下の３株を、各々１％バクトペプトン培地に培養し
た。 (1) Ｅ．ｃｏｌｉ ＣＬ９９−２ (2) Ｓ．ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ ＳＬ６９６ (3) Ｓ．ｍｏｎｔｅｖｉｄｅｏ ＳＬ５２２２ ３．試験方法と結果 上記試験菌株の各々の培地にラクトフェリン分解物を２
×１０-5Ｍの濃度で添加し、各菌株から放出されるＬＰ
Ｓを3Ｈで標識して測定した。
く説明する。試験例１ １．試料の調製 (1) ラクトフェリン分解物（粉末）：実施例２記載の方
法により調製して使用した。 (2) リゾチーム：市販のヒトリゾチーム（生化学工業社
製）を使用した。 ２．試験菌株の培養 以下の３株を、各々１％バクトペプトン培地に培養し
た。 (1) Ｅ．ｃｏｌｉ ＣＬ９９−２ (2) Ｓ．ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ ＳＬ６９６ (3) Ｓ．ｍｏｎｔｅｖｉｄｅｏ ＳＬ５２２２ ３．試験方法と結果 上記試験菌株の各々の培地にラクトフェリン分解物を２
×１０-5Ｍの濃度で添加し、各菌株から放出されるＬＰ
Ｓを3Ｈで標識して測定した。
【００１７】その結果、3Ｈで標識した全ＬＰＳのう
ち、２７〜７７％ものＬＰＳが、ラクトフェリン分解物
により各菌株から放出した。この結果から、ラントフェ
リン分解物の抗菌作用が、グラム陰性菌に対する外膜損
傷効果によるものであることが判明した。次に、各試験
菌株の培地に、ラクトフェリン分解物とリゾチームとを
併せて添加し、各菌株の生菌数から、ラクトフェリン分
解物の最小増殖阻止濃度を決定した。
ち、２７〜７７％ものＬＰＳが、ラクトフェリン分解物
により各菌株から放出した。この結果から、ラントフェ
リン分解物の抗菌作用が、グラム陰性菌に対する外膜損
傷効果によるものであることが判明した。次に、各試験
菌株の培地に、ラクトフェリン分解物とリゾチームとを
併せて添加し、各菌株の生菌数から、ラクトフェリン分
解物の最小増殖阻止濃度を決定した。
【００１８】その結果、リゾチームと併用したラクトフ
ェリン分解物の最小増殖阻止濃度は、いずれの菌株に対
しても３〜２１μｇ／ｍｌ（２×１０-6Ｍ）以下の低濃
度で強い抗菌作用を示した。この結果から、この発明の
ラクトフェリン分解物は、リゾチームと併用することに
よってグラム陰性菌に対する抗菌作用をさらに増強する
ことが判明した。
ェリン分解物の最小増殖阻止濃度は、いずれの菌株に対
しても３〜２１μｇ／ｍｌ（２×１０-6Ｍ）以下の低濃
度で強い抗菌作用を示した。この結果から、この発明の
ラクトフェリン分解物は、リゾチームと併用することに
よってグラム陰性菌に対する抗菌作用をさらに増強する
ことが判明した。
【００１９】なお、この発明のラクトフェリン分解物か
ら得られる抗菌生ペプチドについても、ほぼ同様の結果
が得られた。試験例２ １．試料の調製 (1) ラクトフェリン分解物（粉末） 実施例１記載の方法により調製して使用した。
ら得られる抗菌生ペプチドについても、ほぼ同様の結果
が得られた。試験例２ １．試料の調製 (1) ラクトフェリン分解物（粉末） 実施例１記載の方法により調製して使用した。
【００２０】(2) リゾチ−ム：市販のリゾチ−ム（生化
学工業社製）を使用した。 ２．試験方法 (1) ブドウ球菌の前培養液の調製 ブドウ球菌（Staphylococcus aureus JCM-2151）の保存
スラントから１白金耳を採取し、標準寒天培地（日本製
薬社製）に塗沫して３７℃で１６時間培養し、標準寒天
培地の表面に育成したコロニ−を白金耳でかき取り、１
％ペプトン（ディフコ社製）培地に３７℃で数時間培養
し、３×１０8 ／ｍｌの菌濃度に増殖した対数期の菌液
を前培養液とした。
学工業社製）を使用した。 ２．試験方法 (1) ブドウ球菌の前培養液の調製 ブドウ球菌（Staphylococcus aureus JCM-2151）の保存
スラントから１白金耳を採取し、標準寒天培地（日本製
薬社製）に塗沫して３７℃で１６時間培養し、標準寒天
培地の表面に育成したコロニ−を白金耳でかき取り、１
％ペプトン（ディフコ社製）培地に３７℃で数時間培養
し、３×１０8 ／ｍｌの菌濃度に増殖した対数期の菌液
を前培養液とした。
【００２１】(2) 基本培地（牛乳培地）の調製 市販の牛乳に、上記試料を加え、精製水で牛乳の濃度を
１／２に希釈し、１１５℃で１５分間滅菌し、基本培地
とした。 (3) 試験培地及び対照培地の調製 (3-1) 試験培地の調製 ラクトフェリン分解物の水溶液、およびリゾチームの水
溶液を滅菌フィルタ−（アドバンテック社製）で除菌
し、ラクトフェリン分解物は、最終濃度を１ｍｌ辺り０
ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇおよび４０ｍｇに、リゾチー
ムは、最終濃度をｌｍｌ当り、０．０５ｍｇ、０．１ｍ
ｇおよび０．５ｍｇに調整し、試験培地を調製した。
１／２に希釈し、１１５℃で１５分間滅菌し、基本培地
とした。 (3) 試験培地及び対照培地の調製 (3-1) 試験培地の調製 ラクトフェリン分解物の水溶液、およびリゾチームの水
溶液を滅菌フィルタ−（アドバンテック社製）で除菌
し、ラクトフェリン分解物は、最終濃度を１ｍｌ辺り０
ｍｇ、１０ｍｇ、２０ｍｇおよび４０ｍｇに、リゾチー
ムは、最終濃度をｌｍｌ当り、０．０５ｍｇ、０．１ｍ
ｇおよび０．５ｍｇに調整し、試験培地を調製した。
【００２２】(3-2) 対照培地１の調製 市販の牛乳を精製水で２倍に希釈し、１１５℃で１５分
間滅菌して、対照培地１とした。 (4) 抗菌効果試験 (4-1) 生存率試験 ブドウ球菌の前培養液２０μｌを、上記試験培地２ｍｌ
に添加し、３７℃で１時間培養し、培養液から２００μ
ｌを採取し、１％ペプトン水溶液で１０n 倍に希釈した
後、普通寒天培地プレ−ト上に１１０μｌ塗布し、３７
℃で２４時間培養して菌数（試験菌数）を測定した。
間滅菌して、対照培地１とした。 (4) 抗菌効果試験 (4-1) 生存率試験 ブドウ球菌の前培養液２０μｌを、上記試験培地２ｍｌ
に添加し、３７℃で１時間培養し、培養液から２００μ
ｌを採取し、１％ペプトン水溶液で１０n 倍に希釈した
後、普通寒天培地プレ−ト上に１１０μｌ塗布し、３７
℃で２４時間培養して菌数（試験菌数）を測定した。
【００２３】別に対照として、ブドウ球菌の前培養液２
０μｌを、上記対照培地の２ｍｌに添加し、上記試験菌
数の測定の場合と同様にして菌数（対照菌数１）を測定
した。生存率は次式で計算した。 生存率＝（試験菌数／対照菌数）×１００ ３．試験結果 この試験の結果は表１に示すとおりである。表１から明
らかなように、リゾチ−ムがラクトフェリン分解物の殺
菌効果を増強することが確認された。上記の殺菌効果の
増強は抗菌性ペプチドとリゾチ−ムとの相乗効果である
ことは明らかである。
０μｌを、上記対照培地の２ｍｌに添加し、上記試験菌
数の測定の場合と同様にして菌数（対照菌数１）を測定
した。生存率は次式で計算した。 生存率＝（試験菌数／対照菌数）×１００ ３．試験結果 この試験の結果は表１に示すとおりである。表１から明
らかなように、リゾチ−ムがラクトフェリン分解物の殺
菌効果を増強することが確認された。上記の殺菌効果の
増強は抗菌性ペプチドとリゾチ−ムとの相乗効果である
ことは明らかである。
【００２４】
【表１】
【００２５】次に実施例を示してこの発明を更に具体的
かつ詳細に説明するが、この発明は以下の実施例に限定
されるものではない。
かつ詳細に説明するが、この発明は以下の実施例に限定
されるものではない。
【００２６】
実施例１ 牛乳から分離したままの市販のラクトフェリン（ベルギ
−のオレオフィナ社製）５０ｇを精製水９５０ｇに溶解
し、得られた溶液に１規定の塩酸を添加してｐＨを２に
調整し、１２０℃で１５分間加熱し、冷却して、ラクト
フェリン分解物溶液（ラクトフェリン分解物濃度：５
％）約１０００ｇを得た。このラクトフェリン分解物の
分解度は９％であった。
−のオレオフィナ社製）５０ｇを精製水９５０ｇに溶解
し、得られた溶液に１規定の塩酸を添加してｐＨを２に
調整し、１２０℃で１５分間加熱し、冷却して、ラクト
フェリン分解物溶液（ラクトフェリン分解物濃度：５
％）約１０００ｇを得た。このラクトフェリン分解物の
分解度は９％であった。
【００２７】上記のラクトフェリン分解物溶液を減圧濃
縮し、凍結乾燥し、ラクトフェリン分解物の粉末約４９
ｇを得た。このラクトフェリン分解物粉末１０ｇにリゾ
チーム（生化学工業社製）１ｇを均一混合し、抗菌剤を
調製した。 実施例２ 牛乳から分離したままの市販のラクトフェリン（ベルギ
−のオレオフィナ社製）１ｋｇを精製水９ｋｇに溶解
し、２モル濃度のクエン酸を添加してｐＨを２．５に調
整し、市販の豚ペプシン（１：１０，０００。和光純薬
工業社製）３０ｇを添加して均一に混合し、３７℃に１
８０分間保持し、８５℃で１０分間加熱して酵素を失活
させ、のち冷却し、ラクトフェリン分解物溶液（ラクト
フェリン分解物濃度：１０％）約１０ｋｇを得た。この
ラクトフェリン分解物の分解度は１１．３％であった。
縮し、凍結乾燥し、ラクトフェリン分解物の粉末約４９
ｇを得た。このラクトフェリン分解物粉末１０ｇにリゾ
チーム（生化学工業社製）１ｇを均一混合し、抗菌剤を
調製した。 実施例２ 牛乳から分離したままの市販のラクトフェリン（ベルギ
−のオレオフィナ社製）１ｋｇを精製水９ｋｇに溶解
し、２モル濃度のクエン酸を添加してｐＨを２．５に調
整し、市販の豚ペプシン（１：１０，０００。和光純薬
工業社製）３０ｇを添加して均一に混合し、３７℃に１
８０分間保持し、８５℃で１０分間加熱して酵素を失活
させ、のち冷却し、ラクトフェリン分解物溶液（ラクト
フェリン分解物濃度：１０％）約１０ｋｇを得た。この
ラクトフェリン分解物の分解度は１１．３％であった。
【００２８】上記のラクトフェリン分解物溶液を減圧濃
縮し、凍結乾燥して、ラクトフェリン分解物の粉末約９
６０ｇを得た。このラクトフェリン分解物粉末１００ｇ
にリゾチーム（生化学工業社製）３０ｇを均一混合し
て、抗菌剤を調製した。 実施例３ 常法により次の組成の点眼薬（水溶液）を製造した。
縮し、凍結乾燥して、ラクトフェリン分解物の粉末約９
６０ｇを得た。このラクトフェリン分解物粉末１００ｇ
にリゾチーム（生化学工業社製）３０ｇを均一混合し
て、抗菌剤を調製した。 実施例３ 常法により次の組成の点眼薬（水溶液）を製造した。
【００２９】 ホウ酸 １．６０（％） 実施例１の抗菌剤 ０．１５ メチルセルロ−ス ０．５０ 実施例４ 常法により次の組成のチュ−インガムを製造した。
【００３０】 ガムベ−ス ２５．００（％） 炭酸カルシウム ２．００ 香料 １．００ 実施例２の抗菌剤 ０．０２ ソルビト−ル粉末 ７１．９８ 実施例５ 常法により次の組成の歯磨を製造した。
【００３１】 第二リン酸カルシウム・２水和物 ３６．９３（％） ソルビト−ル ４５．００ グリセリン １５．００ カルボオキシメチルセルロ−ス・ナトリウム １．５０ ソルビタン脂肪酸エステル ０．５０ サッカリンナトリウム １．００ 実施例１の抗菌剤 ０．０７ 実施例６ 常法により次の組成の皮膚洗浄液を製造した。この皮膚
洗浄液は、使用時には水で５０倍に希釈して使用する。
洗浄液は、使用時には水で５０倍に希釈して使用する。
【００３２】 塩化ナトリウム ８．０（％） 実施例３の抗菌剤 ０．８ 精製水 ９１．２
【００３３】
【発明の効果】この発明によって奏せられる効果は次の
とおりである。 (1) 広範囲の微生物に対し優れた抗菌作用を有する抗菌
剤が提供される。 (2) 食品および医薬品に使用して、極めて安全な抗菌剤
が提供される。 (3) この発明の抗菌剤は、少量で抗菌効果を呈するの
で、食品等の物品の処理に使用した場合にも風味への影
響がほとんどない。
とおりである。 (1) 広範囲の微生物に対し優れた抗菌作用を有する抗菌
剤が提供される。 (2) 食品および医薬品に使用して、極めて安全な抗菌剤
が提供される。 (3) この発明の抗菌剤は、少量で抗菌効果を呈するの
で、食品等の物品の処理に使用した場合にも風味への影
響がほとんどない。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (51)Int.Cl.5 識別記号 庁内整理番号 ＦＩ 技術表示箇所 // Ａ６１Ｋ 37/14 8314−4Ｃ
Claims (2)
- 【請求項１】 （Ａ）ラクトフェリン類の分解物および
／またはこの分解物の抗菌性ペプチドと、（Ｂ）リゾチ
−ムとを有効成分とする抗菌剤。 - 【請求項２】 （Ａ）ラクトフェリン類の分解物、およ
び／またはこの分解物の抗菌性ペプチドと、（Ｂ）リゾ
チ−ムとを有効成分とする抗菌剤を用いて物品を処理す
る方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4105469A JPH06199698A (ja) | 1992-03-30 | 1992-03-30 | 抗菌剤とこの抗菌剤を用いて物品を処理する方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP4105469A JPH06199698A (ja) | 1992-03-30 | 1992-03-30 | 抗菌剤とこの抗菌剤を用いて物品を処理する方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH06199698A true JPH06199698A (ja) | 1994-07-19 |
Family
ID=14408450
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP4105469A Pending JPH06199698A (ja) | 1992-03-30 | 1992-03-30 | 抗菌剤とこの抗菌剤を用いて物品を処理する方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH06199698A (ja) |
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN100403897C (zh) * | 2006-06-07 | 2008-07-23 | 南京医科大学 | 胰蛋白酶作为有机杀虫剂降解剂的应用 |
| WO2012015037A1 (ja) | 2010-07-30 | 2012-02-02 | 森永乳業株式会社 | 抗菌活性増強剤 |
| WO2013018169A1 (ja) | 2011-07-29 | 2013-02-07 | 森永乳業株式会社 | 抗菌活性増強剤 |
-
1992
- 1992-03-30 JP JP4105469A patent/JPH06199698A/ja active Pending
Cited By (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN100403897C (zh) * | 2006-06-07 | 2008-07-23 | 南京医科大学 | 胰蛋白酶作为有机杀虫剂降解剂的应用 |
| WO2012015037A1 (ja) | 2010-07-30 | 2012-02-02 | 森永乳業株式会社 | 抗菌活性増強剤 |
| WO2013018169A1 (ja) | 2011-07-29 | 2013-02-07 | 森永乳業株式会社 | 抗菌活性増強剤 |
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