JPH0597876A

JPH0597876A - リン脂質およびその中間体の製造法

Info

Publication number: JPH0597876A
Application number: JP26214291A
Authority: JP
Inventors: Fumiko Kii; 史子紀伊; Hideki Fukuda; 秀樹福田
Original assignee: Kanegafuchi Chemical Industry Co Ltd
Current assignee: Kanegafuchi Chemical Industry Co Ltd
Priority date: 1991-10-09
Filing date: 1991-10-09
Publication date: 1993-04-20

Abstract

(57)【要約】（修正有）【目的】リン脂質である1,2-ジ- Ｏ- フィタニル- グ
リセロ- ホスホリピド類似体を高収率でえる工業化に適
した製造法を提供する。【構成】 (a) フィトールを接触水素添加反応により還
元する工程、(b) ハロゲン化またはトシル化する工程、
(c) 3-ベンジルグリセロールを反応させる工程、(d) 水
素化分解する工程、(e)2-ブロモエチルホスホロ２塩化
物と反応させ工程および(f)アンモニアまたはアミン類
を反応させる工程からなる一般式（Ｉ）：（式中、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３はそれぞれ水素原子または炭
素数１〜１０のアルキル基を示す）で示される1,2- ジ-
Ｏ- フィタニル- グリセロ- ホスホリピド類の製造
法。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は医薬・化粧品・食品分野
などに応用可能な一般式(I) ：

【０００２】

【化６】

【０００３】（式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³はそれぞれ水素
原子もしくは低級アルキル基を表わす）で示されるＲ-
またはＳ- 立体異性形態またはラセミ形態のリン脂質、
1,2-ジ- Ｏ- フィタニル- グリセロ- ホスホリピド類の
製造法に関する。

【０００４】

【従来の技術】疎水性基と親水性基を同一分子内に有す
る両親媒性化合物であるリン脂質は広く天然に分布し、
多種多様の物質、たとえば、主としてホスファチジルコ
リン、ホスファチジン酸、ホスファチジルエタノールア
ミンなどが知られている。これらリン脂質は天然の界面
活性剤として広く使用されており、また、それらによっ
て形成されるリポソームに薬品や酵素などを封入して、
ドラックキャリアーとして応用する試みが種々なされて
いる。現在、天然より単離されたり、もしくは合成によ
り得られる一般式(VI)：

【０００５】

【化７】

【０００６】（式中、Ｒ⁴、Ｒ⁵は直鎖あるいは分岐鎖
のアルキルまたはアルケニル基、Ｒ⁶、Ｒ⁷、Ｒ⁸はそ
れぞれ水素もしくは炭素数１〜10の低級アルキル基を表
わす）で示されるような二鎖のアシル基を疎水基とする
通常のリン脂質に代表される天然型リン脂質が一般に検
討されている。しかし、これらリン脂質を利用して作っ
たリポソームは保存安定性が悪くこわれやすいため、使
用できる温度、イオン濃度、pHなどの範囲が非常に限定
されており、物質保持能も悪いという問題点がある。

【０００７】近年、極限環境下に生息する古細菌の細胞
膜が非常に安定であり、その膜脂質として、普通のリン
脂質のアシル基の代りにフィタニル基がエーテル結合し
たリン脂質で構成されていることが見出された。この特
異なリン脂質、すなわち、一般式(I) で示される1,2-ジ
- Ｏ- フィタニル- グリセロ- ホスホリピド類似体を原
料として作成したリポソームは安定性が高く、耐熱性、
耐塩性などの点で非常に優れているという報告（山内
ら、′90春日本化学会年会要旨集 2 D9 42）が最近な
されており、このリポソームの医薬、化粧品、食品分野
への応用が期待されている。

【０００８】

【発明が解決しようとする課題】しかしこのリン脂質1,
2-ジ- Ｏ- フィタニル- グリセロ- ホスホリピド類は天
然に存在する範囲が非常に限られているため、天然物の
抽出によりえることは極めて困難である。一方、従来の
同リン脂質の化学合成法では、収率がかなり低くなり、
また、複雑な反応を用いるために工業化を企てる上で大
きな障害となっていた。

【０００９】したがって、本発明の目的は、前記一般式
(I) で示されるリン脂質の、高収率でしかも容易な、大
量合成・工業化に適した製造法を提供することにある。

【００１０】

【課題を解決するための手段】本発明は(a) フィトール
を接触水素添加反応により還元し、化学式(II)：

【００１１】

【化８】

【００１２】で示されるジヒドロフィトールとする工
程、(b) ジヒドロフィトールをハロゲン化またはトシル
化する工程、(c) ハロゲン化またはトシル化したジヒド
ロフィトールと3-ベンジルグリセロールを反応させ、化
学式(III) ：

【００１３】

【化９】

【００１４】で示される1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3-ベ
ンジルグリセロールとする工程、(d) 1,2-ジ- Ｏ- フィ
タニル-3- ベンジルグリセロールを水素化分解し、化学
式(IV)：

【００１５】

【化１０】

【００１６】で示される1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3-グ
リセロールを製造する工程、(e) 1,2-ジ- Ｏ- フィタニ
ル-3- グリセロールを2-プロモエチルホスホロ２塩化物
と反応させ、化学式(V) ：

【００１７】

【化１１】

【００１８】で示される1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3-（2
-ブロモエチル）ホスホグリセロールとする工程および
(f)1,2- ジ- Ｏ- フィタニル-3- （2-ブロモエチル）ホ
スホグリセロールとアンモニアまたはアミン類を反応さ
せ、一般式(I)：

【００１９】

【化１２】

【００２０】（式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³はそれぞれ水素
原子または炭素数１〜10のアルキル基を示す）で示され
る1,2-ジ- Ｏ- フィタニル- グリセロ- ホスホリピド類
似体とする工程からなる前記一般式(I) で示される1,2-
ジ- Ｏ- フィタニル- グリセロ- ホスホリピド類の製造
法に関する。

【００２１】

【実施例】本発明では一般式(I) で示されるリン脂質を
製造するにあたり、入手の容易なイソプロピリデングリ
セロールおよびフィトールを出発原料とする。ここで、
イソプロピリデングリセロールは不斉炭素を有し、光学
異性体が存在するが、いずれも市販されていて入手可能
なＲ- またはＳ- 立体異性形態もしくは、ラセミ形態の
イソプロピリデングリセロールを出発原料とすることに
より、それぞれ対応するＲ- またはＳ- 立体異性形態も
しくは、ラセミ形態の一般式(I) で示されるリン脂質を
優先的に製造することができる。

【００２２】まずＲ- またはＳ- 立体異性形態もしく
は、ラセミ形態のイソプロピリデングリセロール(VII)
を公知の方法（ケイ・ヤマウチら、ジャーナルオブ
ケミカルソサイエティパーキントランザクション
(K.Yamauchi et al.,J.Chem.Soc.Perkin Trans.) 765頁
(1986)参照）により、たとえば臭化ベンジルなどと反応
させて水素基が保護されたイソプロピリデングリセロー
ルベンジルエーテル(VIII)へと変換し、次に酸などによ
って加水分解し、ベンジルグリセロール(IX)とする（ル
ートＩ）。

【００２３】

【化１３】

【００２４】一方、古細菌細胞膜脂質の特徴の一つ、疎
水基部分であるフィタニル基の基剤は、フィトールを原
料として誘導される。フィトールの二重結合の還元は、
接触水素添加反応により行なわれる。還元触媒としては
ニッケル系、パラジウム系、白金系などが、溶媒として
はエタノール、メタノールなどが使用できるが、とくに
ラネーニッケルを用いることにより、副反応や分解など
が起こることもなく、定量的にジヒドロフィトール(I
I)：

【００２５】

【化１４】

【００２６】をうることができるので、きわめて好都合
である。この反応は室温・常圧下で容易に進行するが、
必要により加温・加圧してもよい。触媒量はラネーニッ
ケルの活性度にもよるが、市販の活性化ラネーニッケル
を用いた場合はフィトールに対して10重量％以上が適当
である。反応時間は触媒量および触媒の活性度などに依
存するが、たいてい10〜12時間も反応させれば充分であ
る。反応の終結はガスクロマトグラフィーなどにより確
認できる。反応はほぼ定量的に進むためえられたジヒド
ロフィトールは精製せずそのまま次の反応に用いること
が可能であるが、できればシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィーにより精製するのが好ましい。

【００２７】ジヒドロフィトール(II)のハロゲン化には
種々のハロゲン化物、たとえばハロゲン化水素、ハロゲ
ン化水素酸、ハロゲン化リンの使用が可能であり、具体
的には臭化水素、塩化水素、臭化水素酸、塩酸、臭化リ
ンなどがあげられる。ジヒドロフィトール(II)は過剰量
のハロゲン化物、たとえば過剰量の臭化水素酸と反応さ
せると、フィタニルブロマイド(X) ：

【００２８】

【化１５】

【００２９】へと誘導される。これらの反応は触媒量の
濃硫酸の存在下、約２〜５時間加熱還流して行なうこと
が好ましい。また、ジヒドロフィトール(II)を１〜1.5
当量の塩化p-トルエンスルホン酸と、クロロホルム、ジ
クロロメタンまたは塩化メチレンなどの溶媒中、０℃か
ら室温で５〜24時間程度反応させ、フィタニルトシレイ
ト(XI)：

【００３０】

【化１６】

【００３１】へと誘導してもよい。この反応は塩基存在
下、たとえばトリエチルアミンなどの存在下で行なうこ
とが好ましい。

【００３２】以上の方法を用いれば、フィタニルブロマ
イド(X) または、フィタニルトシレイト(XI)を90％以上
ときわめて高収率でえることができ、またそのスケール
アップも容易である。

【００３３】前記のベンジルグリセロール(IX)を、これ
に対して２〜５当量の金属ナトリウムまたは水素化ナト
リウムと、無水溶媒中、たとえば、ジチメルスルホキシ
ド（DMSO）、ジメチルホルムアミド（DMF ）、ジメトキ
シエタン（DME ）、テトラヒドロフラン（THF ）などの
溶媒中、室温で約20分〜１時間反応させアルコキシドと
したのちに、上述のたとえばフィタニルブロマイド(X)
などのハロゲン化フィタニルまたはフィタニルトシレイ
ト(XI)と加熱下に２〜６時間縮合反応させ、1,2-ジ- Ｏ
- フィタニル-3- ベンジル- グリセロール(III) ：

【００３４】

【化１７】

【００３５】とする。ここで、このフィタニルブロマイ
ド(X) またはフィタニルトシレイト(XI)との反応の前
に、アルコキシド生成の際に用いた溶媒を除去しておけ
ば、溶媒の沸点にかかわらず縮合反応における反応温度
を高めることができる。このばあいの反応温度は100 〜
160 ℃が好ましい。薄膜クロマトグラフィー（TLC ）な
どにより、反応の進行程度を調べ、必要ならさらに塩基
とフィタニルブロマイド(X) または、フィタニルトシレ
イト(XI)を加えて同様の操作を繰り返すことにより、1,
2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- ベンジル- グリセロール(II
I) の収量を高めることができる。

【００３６】1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- ベンジル- グ
リセロール(III) をえるもう一つの方法として、ベンジ
ルグリセロール(IX)とフィタニルブロマイド(X) または
フィタニルトシレイト(XI)を塩基の存在下に直接、前述
の溶媒中で反応させてもよい。この際塩基としては、ナ
トリウムアミド、炭酸カリウム、トリエチルアミン、水
酸化ナトリウム、酸化バリウム、水素化ナトリウムなど
を用いることができる。このばあいの反応温度は室温〜
120 ℃が好ましく、反応時間は約１〜５時間である。

【００３７】これらの反応においてベンジルグリセロー
ルに対するハロゲン化フィタニルまたはフィタニルトシ
レイトの使用量は、２〜４当量、好ましくは2.5 〜３当
量である。

【００３８】次に、1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- ベンジ
ル- グリセロール(III) をパラジウム系またはニッケル
系の触媒、とくにパラジウム／炭素またはラネーニッケ
ルなどの触媒の存在下、室温・常圧、または若干の加温
・加圧下すなわち約30〜60℃、約１〜３気圧で約30分〜
12時間水素化分解することにより、1,2-ジ- Ｏ- フィタ
ニル-3- グリセロール(IV)：

【００３９】

【化１８】

【００４０】を77％以上と従来にない高収率でえること
ができる。触媒量は用いる触媒の種類により適当に決め
ればよいが、たとえば、５％のパラジウム／炭素を用い
るばあいは1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3-ベンジルグリセ
ロール(III) に対して20〜25重量％を用いれば、反応は
１〜２時間で終了する。反応溶媒としてはエタノール、
メタノールなどが用いられるが、溶媒量に対し0.1 ％〜
2.5 ％、とくに0.5 ％〜１％の塩酸または過塩素酸を反
応溶媒中に添加するのが好ましい。また、酢酸もしくは
酢酸とエタノールの混合物を反応溶媒としてもよい。

【００４１】公知の方法（エイチ・エイブル(H.Eibl)
ら，ケミストリーアンドフィジクスオブリピッ
ズ(Chemistry and Physics of Lipids),１頁(1978)参
照）により合成される2-ブロモエチルホスホロ２塩化物
(XII) ：

【００４２】

【化１９】

【００４３】をこの1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- グリセ
ロール(IV)と加熱下、好ましくは100〜140 ℃で40分か
ら１時間30分反応させリン酸エステル化したのち、水を
加えて室温で10〜24時間加水分解し、リン脂質前駆体1,
2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- （2-ブロモエチル）- ホスホ
グリセロール(V) ：

【００４４】

【化２０】

【００４５】とする。なお、この反応における2-ブロモ
エチルホスホロ２塩化物(XII) は、1,2-ジ- Ｏ- フィタ
ニル-3- グリセロール(IV)に対して過剰量使用する。

【００４６】この1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- （2-ブロ
モエチル）- ホスホグリセロール(V) をトリエチルアミ
ン、ジメチルアミン、メチルアミンなどのアミン類また
は、アンモニアのうちのいずれかと反応させることによ
り、それぞれ対応するリン脂質1,2-ジ- Ｏ- フィタニル
- グリセロ- ホスホリピド類似体（一般式(I) ）をえる
ことができる。

【００４７】ここで、反応させるアミン、またはアンモ
ニアを選択することにより、えられるリン脂質の極性基
部分の構造、すなわち置換基Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³を自由に
決定できる。Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³は水素または炭素数１か
ら10の低級アルキル基がよいが、なかでも、炭素数１か
ら２のものがとくに好ましい。たとえば、トリメチルア
ミンと反応させれば1,2-ジ- Ｏ- フィタニル- グリセロ
- ホスホコリン（一般式(I) においてＲ¹＝Ｒ²＝Ｒ³
＝ＣＨ₃）を、メチルアミンと反応させれば1,2-ジ- Ｏ
- フィタニル- グリセロ-N- メチル- ホスホエタノール
アミン（一般式(I) においてＲ¹＝Ｒ²＝Ｈ、Ｒ³＝Ｃ
Ｈ₃）を、ジメチルアミンと反応させれば1,2-ジ- Ｏ-
フィタニル- グリセロ-N,N- ジメチル- ホスホエタノー
ルアミン（一般式 (I) においてＲ¹＝Ｈ、Ｒ²＝Ｒ³
＝ＣＨ₃）を、エチルアミンと反応させれば1,2-ジ- Ｏ
- フィタニル- グリセロ-N- エチル- ホスホエタノール
アミン（一般式(I) においてＲ¹＝Ｒ²＝Ｈ、Ｒ³＝Ｃ
Ｈ₃ＣＨ₂）を、アンモニアと反応させれば1,2-ジ- Ｏ-
フィタニル- グリセロ- ホスホエタノールアミン（一
般式 (I) においてＲ¹＝Ｒ²＝Ｒ³＝Ｈ）をえること
ができる。反応は通常反応させたいアミンまたはアンモ
ニアを大過剰含む極性溶媒（たとえば水、アセトニトリ
ル、DMF など）中に、室温または若干の加温条件下、す
なわち約30〜60℃で1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- （2-ブ
ロモエチル）- ホスホグリセロール(V) を加えて約30〜
60時間撹拌することにより行なわれる。

【００４８】えられたリン脂質はシリカゲルカラムクロ
マトグラフィーなどにより精製したのち必要であればゲ
ルカラムクロマトグラフィーを用いてさらに精製し、よ
り純粋なリン脂質とすることができる。

【００４９】また、えられた1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-
グリセロ- ホスホリピド類似体を、ホスホリパーゼなど
の酵素による加水分解、もしくは塩基交換反応を用い
て、さらに様々なリン脂質およびその誘導体（たとえ
ば、ホスファチジン酸、ホスファチジルセリン、ホスフ
ァチジルイノシトールなど）へと変換することも可能で
ある。

【００５０】以下、実施例にもとづいて本発明を具体的
に説明するが、本発明はこれに限定されるものではな
い。なお、分析値の表示はつぎのように略記する。沸
点：bp.、薄膜クロマトグラフィー：Rf、赤外吸収スペ
クトル：IR、プロトン核磁気共鳴スペクトル：¹H-NMR
、¹³Ｃ- 核磁気共鳴スペクトル：¹³C-NMR 。

【００５１】合成例１イソプロピリデングリセロール
ベンジルエーテル窒素雰囲気下で60％水素化ナトリウム11.035g (275.9mm
ol) を、乾燥テトラヒドロフラン（THF ）150ml に懸濁
させ、そこへ撹拌しながらイソプロピリデングリセロー
ル21.364g (161.7mmol) を少しづつ滴下した。室温で15
分間撹拌反応後、臭化ベンジル27ml (227.0mmol)を加え
15時間加熱還流した。反応混合物を冷却し、それに水を
加えてベンゼンで３回抽出し、有機層を飽和食塩水で洗
浄、続いて硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下に留
去した。残留物を減圧蒸留し、イソプロピリデングリセ
ロールベンジルエーテル33.021g （92％）をえた。

【００５２】bp. ：140 ℃／９mmHg IR(neat)：2984,2930,2860,1453,1370,1254,1212,1096,
1054,737,698cm^-1 ¹ H-NMR(90MHz CDCl₃) ：1.36(3H),1.41(3H),3.47-4.4
8(5H),4.53(2H),7.25-7.50(5H) 合成例２ベンジルグリセロールイソプロピリデングリセロールベンジルエーテル25.042
g (112.7mmol) をエタノール180ml と水20mlの混合溶媒
に溶かし、そこへ濃塩酸６mlを加えて一晩撹拌し加水分
解した。反応混合物を炭酸水素ナトリウムで中和後、ク
ロロホルムで抽出し、硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を
減圧下に留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグ
ラフィー（ヘキサン：エーテル＝１：４→エーテル）で
精製し、ベンジルグリセロールを白色固体として18.913
g （92.1％）えた。

【００５３】Rf：0.31（エーテル） IR(neat)：3388,2930,2860,1455,1365,1255,1100,1070,
1030,740,700cm^-1 ¹ H-NMR(90MHz CDCl₃) ：2.50(2H),3.38-3.98(5H),4.4
8(2H),7.31(5H), 実施例１ジヒドロフィトールラネーニッケル（FLUKA 社（レディーフォーユーズ
(ready for use) ，フルカ社(FLUKA Chemie.AG) （スイ
ス）製）約3.5gをエタノール100ml に懸濁させ、そこへ
フィトール25.085g(84.59mmol)を加え、水素雰囲気下、
室温・常圧で10時間撹拌し水素添加した。セライト545
（商品名、マンビルセールス社(Manville Sales Cor
p.)（米国）製）を用いて反応混合物より触媒をろ別
し、ろ液を減圧下濃縮した。残渣をシリカゲルカラムク
ロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝５：１）で
精製し、ジヒドロフィトール25.121g （99.5％）をえ
た。

【００５４】IR(neat)：3342,2952,2924,2866,1462,137
8,1057,760cm^-1 ¹ H-NMR(90MHz CDCl₃) ：0.70-0.80(15H),1.08-1.63(2
4H),3.55(2H) 実施例２フィタニルブロマイドジヒドロフィトール4.684g (15.69mmol)に47％臭化水素
酸60mlおよび濃硫酸0.1ml を加え、４時間加熱還流し
た。反応混合物を冷却し、炭酸水素ナトリウムを加え、
ヘキサンで３回抽出した。有機層を飽和炭酸水素ナトリ
ウム水溶液、続いて飽和食塩水で洗浄し、硫酸ナトリウ
ムで乾燥後、溶媒を減圧下に留去した。残渣をシリカゲ
ルカラムクロマトグラフィー（ヘキサン）で精製し、フ
ィタニルブロマイド5.103g（90％）をえた。

【００５５】Rf：0.74（ヘキサン） IR(neat)：2954,2924,2864,1463,1378cm^-1 ¹ H-NMR(90MHz CDCl₃) ：0.84-0.92(15H),1.23-1.96(2
4H),3.45(2H) 実施例３フィタニルトシレイト窒素雰囲気下で、ジヒドロフィトール2.031g(6.803mmo
l) を乾燥塩化メチレン25mlに溶かし、そこへ０℃でト
リエチルアミン２ml、塩化p-トルエンスルホン酸1.5g
(7.868mmol)を加え、０℃で３時間、続いて室温で４時
間撹拌し反応させた。反応混合物に水を加えクロロホル
ムで３回抽出し、有機層を水で洗浄後硫酸ナトリウムで
乾燥し、溶媒を減圧下に留去した。残渣をシリカゲルカ
ラムクロマトグラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝20：
１）で精製し、フィタニルトシレイト3.053g（99％）を
えた。

【００５６】Rf：0.39（ヘキサン：酢酸エチル＝20：
１） IR(neat)：2952,2924,1463,1379,1367,1189,1177,946,8
14,663,656cm^-1 ¹ H-NMR(90MHz CDCl₃) ：0.82-0.89(15H),1.11-1.76(2
4H),2.47(3H),4.07(2H),7.26-7.99(4H) 実施例４ 1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- ベンジル- グリ
セロール（その１）窒素雰囲気下で60％水素化ナトリウム4.397g (109.9mmo
l)を、乾燥THF 85mlに懸濁させ、そこへ撹拌しながらベ
ンジルグリセロール3.629g (20.14mmol)を少しずつ５分
間かけて加えた。室温で25分間撹拌反応後、常圧下にTH
F を留去した後にフィタニルブロマイド17.711g(49.00m
mol)を加え145 ℃で４時間反応させた。これを冷却し再
びTHF 25ml、60％水素化ナトリウム1.134g(28.5mmol)を
加え、室温で15分間撹拌反応、常圧下にTHF を留去した
のちにフィタニルブロマイド3.159g(8.74mmol)を加え14
5 ℃で1.5 時間さらに反応させた。反応混合物を冷却
し、それにまずエタノール、次に水を加え塩化アンモニ
ウムで中和してクロロホルムで３回抽出し、有機層を飽
和食塩水で洗浄、続いて硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒
を減圧下に留去した。残渣をシリカゲルカラムクロマト
グラフィー（ヘキサン：酢酸エチル＝40：１→20：１）
で精製し、1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- ベンジルグリセ
ロール8.364g（57％）をえた。

【００５７】IR(neat)：2952,2924,2862,1462,1377,136
6,1114,697cm^-1 ¹ H-NMR(400MHz CDCl₃) ：0.836-0.874(30H),0.969-
1.364(44H),1.441-1.690(4H),3.442-3.634(9H),4.525(2
H),7.168-7.365(5H)¹³ C-NMR(400MHz CDCl₃) ：14.1,19.7,19.8,20.2,22.
6,22.7,24.4,24.5,24.6,24.8,28.0,29.7,29.8,29.9,31.
6,32.5,32.6,32.7,32.8,33.0,36.7,36.8,36.9,37.0,37.
1,37.2,37.3,37.4,37.5,37.7,37.9,39.4,68.8,68.9,70.
0,70.4,70.8,70.9,72.9,73.4,76.6,77.2,78.0,125.9,12
7.4,127.5,127.7,127.8,128.3,128.4,138.4,138.7 実施例５ 1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- ベンジル- グリ
セロール（その２）窒素雰囲気下で60％水素化ナトリウム467mg(11.68mmol)
を、乾燥THF 20mlに懸濁させ、そこへ撹拌しながらベン
ジルグリセロール413mg(2.266mmol)を少しずつ５分間加
えた。室温で30分間撹拌反応後、常圧下にTHF を留去し
た後にフィタニルトシレイト2.311g(5.105mmol) を加え
150 ℃で４時間反応させた。反応混合物を冷却し、それ
にまずエタノール、次に水を加え塩化アンモニウムで中
和してクロロホルムで３回抽出し、有機層を水で洗浄、
続いて硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を減圧下に留去し
た。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキ
サン：酢酸エチル＝20：１）で精製し、1,2-ジ- Ｏ- フ
ィタニル-3- ベンジルグリセロール1.306g（79％）をえ
た。

【００５８】実施例６ 1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- グ
リセロールパラジウム／炭素触媒（アルドリッチ社(Aldrich Chemi
calCompany,Inc.) （米国）製）493gをエタノール60ml
に懸濁させ、そこへ1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- ベンジ
ルグリセロール7.322g(10.04mmol) をエタノールに溶か
して加え、濃塩酸を0.3ml 添加し水素雰囲気下、室温・
常圧で４時間撹拌し水素添加した。セライト545 を用い
て反応混合物より触媒をろ別し、ろ液を減圧下濃縮し
た。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキ
サン：酢酸エチル＝５：１→２：１）で精製し、1,2-ジ
- Ｏ- フィタニル-3- グリセロール 4.909g（77％）を
えた。

【００５９】Rf：0.25,0.39 （ヘキサン：酢酸エチル＝
５：１） IR(neat)：3354,2952,2924,2864,1462,1377,1367,1117,
1054cm^-1 ¹ H-NMR(400MHz CDCl₃) ：0.837-0.903(30H),1.048-
1.383(44H),1.475-1.634(4H),3.425-3.741(9H) 合成例３ 2-ブロモエチルホスホロ２塩化物オキシ塩化リン50ml(536.4mmol) をトリクロロエチレン
20mlに溶かし、撹拌しながら０℃で2-ブロモエタノール
43.701g(349.7mmol)を加えた。反応溶液に窒素を通じな
がら（12.5ml/min）０℃で30分、続いて室温で15時間撹
拌し反応させた。反応混合物にトルエン25mlを加え、溶
媒を減圧下に留去し、残留物を減圧蒸留して2-ブロモエ
チルホスホロ２塩化物52.516g（62.1％）をえた。

【００６０】bp. ：79℃／４mmHg IR(neat)：1306,1071,1016,758cm^-1 ¹ H-NMR(90MHz CDCl₃) ：3.61(2H),4.53(1H),4.64(1H) 実施例７ 1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- （2-ブロモエチ
ル）- ホスホ- グリセロール 1,2-ジ- Ｏ- フィタニル- グリセロール4.909g(7.516mm
ol) に2-ブロモエチルホスホロ２塩化物19.515g(80.70m
mol)を加え、封管中125 ℃で50分間反応させたのちに水
を加えて室温で一晩撹拌した。反応混合物を静置して油
状部分と水層部分とを分離し、水層をクロロホルムで３
回抽出した。このクロロホルム層と先ほどの油状部分と
を合わせ、溶媒を減圧下に留去した。残渣をシリカゲル
カラムクロマトグラフィー（クロロホルム：メタノー
ル：濃アンモニア水＝165 ：35：１→65：35：１）で精
製し、1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- （2-ブロモエチル）
- ホスホ- グリセロール4.759g（75.5％）をえた。

【００６１】¹H-NMR(400MHz CDCl₃: CD₃OD=2:1) ：
0.851-0.903(30H),1.063-1.385(44H),1.502-1.637(4H),
3.486- 3.585(6H),3.629-3.673(3H),3.902-3.941(2H),
4.121-4.172(2H) 実施例８ 1,2-ジ- Ｏ- フィタニル- グリセロ- ホスホ
コリン 1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- （2-ブロモエチル）- ホス
ホ- グリセロール4.577g(5.455mmol) に30％トリメチル
アミン水溶液100ml を加えて50℃で52時間撹拌し反応さ
せた。反応混合物に塩化アンモニウムおよびクロロホル
ムを加え、二層に分離するまでメタノールを加えたの
ち、クロロホルムで３回抽出し、有機層を減圧下に留去
した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ク
ロロホルム：メタノール：濃アンモニア水＝67：25：８
→17：25：８）で精製し、さらにゲルカラムクロマトグ
ラフィー（カラム：セファデックス(Sephadex) LH-20
（ファルマシア社(Farmacia Inc.) （米国）製）クロロ
ホルム：メタノール＝２：１）で精製して1,2-ジ- Ｏ-
フィタニル- グリセロ- ホスホコリン3.885g（87％）を
えた。

【００６２】IR(KBr) ：2955,2927,2869,1465,1228,122
8,1088,971cm^-1 ¹ H-NMR(400MHz CDCl₃: CD₃OD=2:1) ：0.846-0.890
(30H),1.087-1.377(44H),1.516-1.549(4H),3.219(9H),
3.361-3.394(2H),3.492-3.500(2H),3.595(3H),3.641(2
H),3.901-3.915(2H),4.300(2H)¹³ C-NMR(400MHz CDCl₃) ：19.73,19.82,22.61,22.71,
24.43,24.52,24.84,28.00,29.83,29.92,30.03,32.83,3
6.85,36.94,37.33,37.49,38.06,38.24,39.39,54.24,64.
94,66.37,68.75,68.95,70.10,71.03,77.56,78.25 有機元素分析Ｃ₄₈Ｈ₁₀₀Ｏ₆・３Ｈ₂Ｏ理論値Ｃ66.90 Ｈ12.25 Ｎ1.61％測定値 66.30 13.09 1.98％

【００６３】

【発明の効果】本発明の製造法によれば、古細菌脂質モ
デルのリン脂質1,2-ジ- Ｏ- フィタニル- グリセロ- ホ
スホリピド類似体（一般式(I) ）をきわめて高収率でえ
ることができる。また、本発明の製造法において反応の
スケールを大きくしても収率の低下はみられなかったこ
とより、本発明により、リン脂質1,2-ジ- Ｏ- フィタニ
ル- グリセロ- ホスホリピド類似体（一般式(I) ）の大
量合成および工業化生産が可能である。

─────────────────────────────────────────────────────

【手続補正書】

【提出日】平成４年１月２１日

【手続補正１】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００５８

【補正方法】変更

【補正内容】

【００５８】実施例６ 1,2-ジ- Ｏ- フィタニル- グリ
セロールパラジウム／炭素触媒（アルドリッチ社(Aldrich Chemi
calCompany,Inc.) （米国）製）1.493gをエタノール60m
lに懸濁させ、そこへ1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- ベン
ジルグリセロール7.322g(10.04mmol) をエタノールに溶
かして加え、濃塩酸を0.3ml 添加し水素雰囲気下、室温
・常圧で４時間撹拌し水素添加した。セライト545 を用
いて反応混合物より触媒をろ別し、ろ液を減圧下濃縮し
た。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（ヘキ
サン：酢酸エチル＝５：１→２：１）で精製し、1,2-ジ
- Ｏ- フィタニル- グリセロール 4.909g（77％）をえ
た。

【手続補正２】

【補正対象書類名】明細書

【補正対象項目名】００６２

【補正方法】変更

【補正内容】

【００６２】IR(KBr) ：2955,2927,2869,1465,1228,122
8,1088,971cm^-1 ¹ H-NMR(400MHz CDCl₃: CD₃OD=2:1) ：0.846-0.890
(30H),1.087-1.377(44H),1.516-1.549(4H),3.219(9H),
3.361-3.394(2H),3.492-3.500(2H),3.595(3H),3.641(2
H),3.901-3.915(2H),4.300(2H)¹³ C-NMR(400MHz CDCl₃) ：19.73,19.82,22.61,22.71,
24.43,24.52,24.84,28.00,29.83,29.92,30.03,32.83,3
6.85,36.94,37.33,37.49,38.06,38.24,39.39,54.24,64.
94,66.37,68.75,68.95,70.10,71.03,77.56,78.25 有機元素分析Ｃ₄₈Ｈ₁₀₀Ｏ₆ ＮＰ・３Ｈ₂Ｏ理論値Ｃ 66.09 Ｈ12.25 Ｎ1.61％測定値 66.30 13.09 1.98％

Claims

【特許請求の範囲】

【請求項１】 (a) フィトールを接触水素添加反応によ
り還元し、化学式(II)：【化１】で示されるジヒドロフィトールとする工程、 (b) ジヒドロフィトールをハロゲン化またはトシル化す
る工程、 (c) ハロゲン化またはトシル化したジヒドロフィトール
と3-ベンジルグリセロールを反応させ、化学式(III) ：【化２】で示される1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- ベンジルグリセ
ロールとする工程、 (d) 1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- ベンジルグリセロール
を水素化分解し、化学式(IV)：【化３】で示される1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- グリセロールを
製造する工程、 (e) 1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- グリセロールを2-ブロ
モエチルホスホロ２塩化物と反応させ、化学式(V) ：【化４】で示される1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- （2-ブロモエチ
ル）ホスホグリセロールとする工程および (f)1,2- ジ- Ｏ- フィタニル-3- （2-ブロモエチル）ホ
スホグリセロールとアンモニアまたはアミン類を反応さ
せ、一般式(I) ：【化５】（式中、Ｒ¹、Ｒ²、Ｒ³はそれぞれ水素原子または炭
素数１〜10のアルキル基を示す）で示される1,2-ジ- Ｏ
- フィタニル- グリセロ- ホスホリピド類似体とする工
程からなる前記一般式(I) で示される1,2-ジ- Ｏ- フィ
タニル- グリセロ- ホスホリピド類の製造法。
【請求項２】フィトールを接触水素添加反応により還
元することを特徴とするジヒドロフィトールの製造法。
【請求項３】 1,2-ジ- Ｏ- フィタニル-3- ベンジルグ
リセロールを水素化分解することを特徴とする1,2-ジ-
Ｏ- フィタニル-3- グリセロールの製造法。