JPH0597873A - ホスフアチジルイノシトールの分離・精製及び濃縮方法 - Google Patents
ホスフアチジルイノシトールの分離・精製及び濃縮方法Info
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- JPH0597873A JPH0597873A JP28354591A JP28354591A JPH0597873A JP H0597873 A JPH0597873 A JP H0597873A JP 28354591 A JP28354591 A JP 28354591A JP 28354591 A JP28354591 A JP 28354591A JP H0597873 A JPH0597873 A JP H0597873A
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- Japan
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- phosphatidylinositol
- polar solvent
- liquid
- solvent
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- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
- Y02W30/00—Technologies for solid waste management
- Y02W30/50—Reuse, recycling or recovery technologies
- Y02W30/74—Recovery of fats, fatty oils, fatty acids or other fatty substances, e.g. lanolin or waxes
Landscapes
- Fats And Perfumes (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【構成】 ホスファチジルイノシトールを含有する物質
を非極性溶媒に溶かし、これを塩基性物質を含有する含
水極性溶媒と接触させ、かくして得られる非極性溶媒層
を、該塩基性物質を含まない新たな含水極性溶媒と接触
させ、ホスファチジルイノシトールを該含水極性溶媒層
に抽出し、これから純度の高いホスファチジルイノシト
ールを得る。さらに、上記の方法で得られる該含水極性
溶媒層に金属塩を添加することによって、より高純度の
ホスファチジルイノシトールを沈澱物として回収する。 【効果】 ホスファチジルイノシトールを含有する物質
から、安全性，汎用性の高い安価な溶媒を使用して、簡
便な液々分配操作のみで、容易に高純度のホスファチジ
ルイノシトールを収率よく分離できる。
を非極性溶媒に溶かし、これを塩基性物質を含有する含
水極性溶媒と接触させ、かくして得られる非極性溶媒層
を、該塩基性物質を含まない新たな含水極性溶媒と接触
させ、ホスファチジルイノシトールを該含水極性溶媒層
に抽出し、これから純度の高いホスファチジルイノシト
ールを得る。さらに、上記の方法で得られる該含水極性
溶媒層に金属塩を添加することによって、より高純度の
ホスファチジルイノシトールを沈澱物として回収する。 【効果】 ホスファチジルイノシトールを含有する物質
から、安全性，汎用性の高い安価な溶媒を使用して、簡
便な液々分配操作のみで、容易に高純度のホスファチジ
ルイノシトールを収率よく分離できる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、リン脂質含有物からホ
スファチジルイノシトールを、高純度で安全かつ安価に
製造する方法に関するものである。本願発明によって得
られる高純度ホスファチジルイノシトールは、食品，化
粧品，トイレタリー，農薬，飼料，水産などの分野で乳
化剤，栄養剤等として、また医薬分野では乳化剤，リポ
ソーム形成基剤等に幅広く利用される。
スファチジルイノシトールを、高純度で安全かつ安価に
製造する方法に関するものである。本願発明によって得
られる高純度ホスファチジルイノシトールは、食品，化
粧品，トイレタリー，農薬，飼料，水産などの分野で乳
化剤，栄養剤等として、また医薬分野では乳化剤，リポ
ソーム形成基剤等に幅広く利用される。
【０００２】
【従来の技術】リン脂質は、動物，植物，微生物，藻類
などの生体中に含まれ、主に細胞膜の構成成分として種
々の重要な働きをしている。天然物由来のリン脂質は、
通常、ホスファチジルコリン，ホスファチジルエタノー
ルアミン，ホスファチジルイノシトール，ホスファチジ
ルセリン，ホスファチジン酸，それらのリゾ体，スフィ
ンゴミエリンなどの混合物からなる。
などの生体中に含まれ、主に細胞膜の構成成分として種
々の重要な働きをしている。天然物由来のリン脂質は、
通常、ホスファチジルコリン，ホスファチジルエタノー
ルアミン，ホスファチジルイノシトール，ホスファチジ
ルセリン，ホスファチジン酸，それらのリゾ体，スフィ
ンゴミエリンなどの混合物からなる。
【０００３】これから特定のリン脂質を分画するため
に、メタノール，エタノール，２−プロパノール，アセ
トン，ヘキサン，クロロホルムなどの単一溶剤による抽
出や混合溶剤を用いた再結晶などの溶剤分別法、シリカ
ゲル，アルミナ，イオン交換樹脂などの吸着剤を用いた
カラムクロマト分画法、ＣｄＣｌ2 複合体やアセチル化
などの誘導体による分画法などが利用されている。
に、メタノール，エタノール，２−プロパノール，アセ
トン，ヘキサン，クロロホルムなどの単一溶剤による抽
出や混合溶剤を用いた再結晶などの溶剤分別法、シリカ
ゲル，アルミナ，イオン交換樹脂などの吸着剤を用いた
カラムクロマト分画法、ＣｄＣｌ2 複合体やアセチル化
などの誘導体による分画法などが利用されている。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】ホスファチジルイノシ
トールは、従来の溶剤分別法のみではホスファチジルエ
タノールアミンやホスファチジン酸等との分離が困難で
あり、多種類の溶剤と各種のカラム分画を組み合わせる
ことによって、はじめて高純度に精製することが可能で
ある。しかし、かかる方法では収率が極めて悪いという
欠点を有しており、また、使用する溶剤もクロロホルム
やジクロロメタンなど、作業上危険性が高く、残留など
の点においても好ましくないものが多く使用されてい
る。
トールは、従来の溶剤分別法のみではホスファチジルエ
タノールアミンやホスファチジン酸等との分離が困難で
あり、多種類の溶剤と各種のカラム分画を組み合わせる
ことによって、はじめて高純度に精製することが可能で
ある。しかし、かかる方法では収率が極めて悪いという
欠点を有しており、また、使用する溶剤もクロロホルム
やジクロロメタンなど、作業上危険性が高く、残留など
の点においても好ましくないものが多く使用されてい
る。
【０００５】本発明は、簡易に安価かつ安全な高純度ホ
スファチジルイノシトールを得られる分離・精製・濃縮
方法を提供することを目的とする。
スファチジルイノシトールを得られる分離・精製・濃縮
方法を提供することを目的とする。
【０００６】
【課題を解決するための手段】すなわち、本発明はホス
ファチジルイノシトールを含む原料を非極性溶媒に溶か
し、塩基性物質を含有する含水極性溶媒と接触させた
後、該非極性溶媒層を、該塩基性物質を含有しない新た
な含水極性溶媒と液々分配させ、ホスファチジルイノシ
トールを該含水極性溶媒層に抽出することを特徴とする
ホスファチジルイノシトールの分離・精製方法、および
上記の方法で該含水極性溶媒層として得られたホスファ
チジルイノシトール抽出液に金属塩を添加し、ホスファ
チジルイノシトールを沈澱物として回収することを特徴
とするホスファチジルイノシトールの濃縮方法である。
ファチジルイノシトールを含む原料を非極性溶媒に溶か
し、塩基性物質を含有する含水極性溶媒と接触させた
後、該非極性溶媒層を、該塩基性物質を含有しない新た
な含水極性溶媒と液々分配させ、ホスファチジルイノシ
トールを該含水極性溶媒層に抽出することを特徴とする
ホスファチジルイノシトールの分離・精製方法、および
上記の方法で該含水極性溶媒層として得られたホスファ
チジルイノシトール抽出液に金属塩を添加し、ホスファ
チジルイノシトールを沈澱物として回収することを特徴
とするホスファチジルイノシトールの濃縮方法である。
【０００７】本発明に用いるホスファチジルイノシトー
ル含有原料は、目的とするホスファチジルイノシトール
を含んでいれば、動物，植物，微生物，藻類などの起源
に限定はなく、また、化学的および酵素的方法で得られ
たものでもよい。
ル含有原料は、目的とするホスファチジルイノシトール
を含んでいれば、動物，植物，微生物，藻類などの起源
に限定はなく、また、化学的および酵素的方法で得られ
たものでもよい。
【０００８】このホスファチジルイノシトール含有原料
をそのまま、あるいは前処理としてメタノール，エタノ
ール，２−プロパノール，アセトンなどの極性溶媒を単
独もしくは混合溶媒として用い、ホスファチジルイノシ
トール以外の成分の一部を抽出分離したものを、ヘキサ
ンやヘプタンのような炭化水素等の非極性溶媒に溶かし
て用いる。
をそのまま、あるいは前処理としてメタノール，エタノ
ール，２−プロパノール，アセトンなどの極性溶媒を単
独もしくは混合溶媒として用い、ホスファチジルイノシ
トール以外の成分の一部を抽出分離したものを、ヘキサ
ンやヘプタンのような炭化水素等の非極性溶媒に溶かし
て用いる。
【０００９】一方、含水極性溶媒としては、上記の極性
溶媒を単独あるいは混合溶媒として用い、その含水率は
２０〜７０％，好ましくは４０〜６０％とするのがよ
い。本発明では、さらに、この含水極性溶媒に塩基性物
質を溶かすことを必須要件とする。かかる塩基性物質と
しては、水酸化ナトリウム，水酸化カリウム，リン酸水
素二ナトリウム，リン酸水素二カリウム，炭酸ナトリウ
ム，炭酸カリウム，酢酸ナトリウム，酢酸カリウム，ア
ンモニア水，炭酸水素ナトリウム，炭酸水素カリウム，
炭酸アンモニウムなどであり、水溶液が塩基性になるも
のならば何れも用いることができ、その濃度は特に限定
されないが、望ましくは原料１モル濃度に対して 1/2〜
４モル濃度がよい。また、緩衝液を用いても良い。ｐＨ
は７．５〜１２．０，好ましくは８．０〜１０．０の範
囲がよい。
溶媒を単独あるいは混合溶媒として用い、その含水率は
２０〜７０％，好ましくは４０〜６０％とするのがよ
い。本発明では、さらに、この含水極性溶媒に塩基性物
質を溶かすことを必須要件とする。かかる塩基性物質と
しては、水酸化ナトリウム，水酸化カリウム，リン酸水
素二ナトリウム，リン酸水素二カリウム，炭酸ナトリウ
ム，炭酸カリウム，酢酸ナトリウム，酢酸カリウム，ア
ンモニア水，炭酸水素ナトリウム，炭酸水素カリウム，
炭酸アンモニウムなどであり、水溶液が塩基性になるも
のならば何れも用いることができ、その濃度は特に限定
されないが、望ましくは原料１モル濃度に対して 1/2〜
４モル濃度がよい。また、緩衝液を用いても良い。ｐＨ
は７．５〜１２．０，好ましくは８．０〜１０．０の範
囲がよい。
【００１０】本発明では、ホスファチジルイノシトール
を含む原料を溶解した非極性溶媒と、塩基性物質を含有
する含水極性溶媒とを振とう，攪拌，向流などによって
接触させた後、静置または遠心操作によって２相分離さ
せる。次いで、この非極性溶媒層を分液ロート，向流抽
出装置あるいは遠心液々分配クロマトグラフィーなどを
用いて、塩基性物質を含まない上記と同じ新たな含水極
性溶媒と接触させ、ホスファチジルイノシトールを該含
水極性溶媒層に抽出する。抽出時の温度は、使用する溶
媒の沸点以下ならば特に限定されるものではないが、抽
出効率の点から１０〜７０℃，好ましくは３０〜５０℃
で行う。かかる方法によって、ホスファチジルイノシト
ールの純度は２〜１０倍に分離・精製することができ
る。
を含む原料を溶解した非極性溶媒と、塩基性物質を含有
する含水極性溶媒とを振とう，攪拌，向流などによって
接触させた後、静置または遠心操作によって２相分離さ
せる。次いで、この非極性溶媒層を分液ロート，向流抽
出装置あるいは遠心液々分配クロマトグラフィーなどを
用いて、塩基性物質を含まない上記と同じ新たな含水極
性溶媒と接触させ、ホスファチジルイノシトールを該含
水極性溶媒層に抽出する。抽出時の温度は、使用する溶
媒の沸点以下ならば特に限定されるものではないが、抽
出効率の点から１０〜７０℃，好ましくは３０〜５０℃
で行う。かかる方法によって、ホスファチジルイノシト
ールの純度は２〜１０倍に分離・精製することができ
る。
【００１１】本発明では、かかる方法によって該含水極
性溶媒層として得られるホスファチジルイノシトール抽
出液に、さらにカルシウム，マグネシウム，鉄，アルミ
ニウムなど陽イオンの荷電数が２価以上の金属の塩化
物，酢酸塩，硝酸塩，硫酸塩，有機酸塩等の塩類や錯体
化合物等を抽出液１００ml当り１０〜３０mg添加するこ
とによって、ホスファチジルイノシトールをさらに濃縮
して純度を高めることができる。すなわち、上記のホス
ファチジルイノシトール抽出液に該金属塩の水溶液を添
加し攪拌した後、必要に応じて冷暗所に放置し、生成し
てくる沈澱物を濾過あるいは遠心分離により回収し、減
圧，凍結などの処理で乾燥して、さらに高純度のホスフ
ァチジルイノシトールを得ることができる。
性溶媒層として得られるホスファチジルイノシトール抽
出液に、さらにカルシウム，マグネシウム，鉄，アルミ
ニウムなど陽イオンの荷電数が２価以上の金属の塩化
物，酢酸塩，硝酸塩，硫酸塩，有機酸塩等の塩類や錯体
化合物等を抽出液１００ml当り１０〜３０mg添加するこ
とによって、ホスファチジルイノシトールをさらに濃縮
して純度を高めることができる。すなわち、上記のホス
ファチジルイノシトール抽出液に該金属塩の水溶液を添
加し攪拌した後、必要に応じて冷暗所に放置し、生成し
てくる沈澱物を濾過あるいは遠心分離により回収し、減
圧，凍結などの処理で乾燥して、さらに高純度のホスフ
ァチジルイノシトールを得ることができる。
【００１２】
実施例１ 粉末大豆レシチン（日清製油（株）製）をエタノール処
理した不溶分（ホスファチジン酸（以下ＰＡという）
９．７％，ホスファチジルエタノールアミン（以下ＰＥ
という）２５．１％，ホスファチジルコリン（以下ＰＣ
という）１０．５％，ホスファチジルイノシトール（以
下ＰＩという）２１．１％）１ｇをヘキサン６０mlに溶
かし、酢酸ナトリウム０．３２５ｇを５５％含水エタノ
ール１００mlに溶かしたものとあわせて分液ロートに入
れ、室温で１分間振とう後、２０分間静置した。このヘ
キサン層と、塩基性物質を含まない新しい５５％含水エ
タノールとを同様な操作で接触させ抽出した。この結
果、含水エタノール層から回収した固形物は０．３ｇで
あり、そのＰＩ純度は４５％であった。一方、上記と同
様の操作をして得られたＰＩ含有含水エタノールに塩化
カルシウム２６mgを添加し、１５分間攪拌後、４℃で２
時間静置した。析出した沈澱物を遠心分離（２０００rp
m ，１０分間）し、真空乾燥して白色固形物０．１６ｇ
を分画物として得た。得られた分画物は、ＰＩ純度５
６．６％（油脂基準分析法による。以下同じ），ＰＩ回
収率４０．３％であった。
理した不溶分（ホスファチジン酸（以下ＰＡという）
９．７％，ホスファチジルエタノールアミン（以下ＰＥ
という）２５．１％，ホスファチジルコリン（以下ＰＣ
という）１０．５％，ホスファチジルイノシトール（以
下ＰＩという）２１．１％）１ｇをヘキサン６０mlに溶
かし、酢酸ナトリウム０．３２５ｇを５５％含水エタノ
ール１００mlに溶かしたものとあわせて分液ロートに入
れ、室温で１分間振とう後、２０分間静置した。このヘ
キサン層と、塩基性物質を含まない新しい５５％含水エ
タノールとを同様な操作で接触させ抽出した。この結
果、含水エタノール層から回収した固形物は０．３ｇで
あり、そのＰＩ純度は４５％であった。一方、上記と同
様の操作をして得られたＰＩ含有含水エタノールに塩化
カルシウム２６mgを添加し、１５分間攪拌後、４℃で２
時間静置した。析出した沈澱物を遠心分離（２０００rp
m ，１０分間）し、真空乾燥して白色固形物０．１６ｇ
を分画物として得た。得られた分画物は、ＰＩ純度５
６．６％（油脂基準分析法による。以下同じ），ＰＩ回
収率４０．３％であった。
【００１３】実施例２ 実施例１で使用した粉末大豆レシチンのエタノール不溶
分６５．７ｇをヘキサン４リットルに溶かし、酢酸ナト
リウム２１．３ｇを５５％含水エタノール６．５リット
ルに溶かしたものとあわせて分液ロートに入れ、室温で
１分間振とう後、２時間静置した。このヘキサン層を、
酢酸ナトリウムを含まない新たな５５％含水エタノール
で、連続式向流抽出装置を用いて４０℃で抽出を行っ
た。得られたＰＩ含有含水エタノール層から溶媒を減圧
留去し、白色固形物２４．５ｇを回収した。このＰＩ純
度は４８％であった。一方、上記と同様の操作をして得
られたＰＩ含有含水エタノール１２．５リットルに塩化
カルシウム３．５ｇを添加し、１５分間攪拌後、４℃で
一晩放置した。析出した沈澱物を濾別して分画物２１．
７ｇを得た。これを分析したところ、ＰＩ純度５６．７
％，ＰＩ回収率は６８．０％であった。
分６５．７ｇをヘキサン４リットルに溶かし、酢酸ナト
リウム２１．３ｇを５５％含水エタノール６．５リット
ルに溶かしたものとあわせて分液ロートに入れ、室温で
１分間振とう後、２時間静置した。このヘキサン層を、
酢酸ナトリウムを含まない新たな５５％含水エタノール
で、連続式向流抽出装置を用いて４０℃で抽出を行っ
た。得られたＰＩ含有含水エタノール層から溶媒を減圧
留去し、白色固形物２４．５ｇを回収した。このＰＩ純
度は４８％であった。一方、上記と同様の操作をして得
られたＰＩ含有含水エタノール１２．５リットルに塩化
カルシウム３．５ｇを添加し、１５分間攪拌後、４℃で
一晩放置した。析出した沈澱物を濾別して分画物２１．
７ｇを得た。これを分析したところ、ＰＩ純度５６．７
％，ＰＩ回収率は６８．０％であった。
【００１４】実施例３ 実施例１で使用した大豆粉末レシチンのエタノール不溶
分１ｇをヘキサン２０mlに溶かし、アンモニア水でｐＨ
９．０に調製した９０％含水エタノール２０mlとあわせ
て、共栓付コルベンに入れ、１分間振とうした。これを
遠心液々分配クロマトグラフィーを用いて分離を行っ
た。溶媒系は９０％エタノールを固定相，ヘキサンを移
動相とし、２５℃でＰＩを９０％エタノール層に保持さ
せた。得られたＰＩ含有含水エタノール２００ml中の固
形分のＰＩ純度は８５％であった。次いで、これに塩化
カルシウム３２mgを添加し、１５分間攪拌後、４℃で２
時間静置した。析出した沈澱物を遠心分離（２０００rp
m ，１０分間）し、真空乾燥して分画物０．２０ｇを得
た。これを分析したところ、ＰＩ純度９５．５％，ＰＩ
回収率９０．７％であった。
分１ｇをヘキサン２０mlに溶かし、アンモニア水でｐＨ
９．０に調製した９０％含水エタノール２０mlとあわせ
て、共栓付コルベンに入れ、１分間振とうした。これを
遠心液々分配クロマトグラフィーを用いて分離を行っ
た。溶媒系は９０％エタノールを固定相，ヘキサンを移
動相とし、２５℃でＰＩを９０％エタノール層に保持さ
せた。得られたＰＩ含有含水エタノール２００ml中の固
形分のＰＩ純度は８５％であった。次いで、これに塩化
カルシウム３２mgを添加し、１５分間攪拌後、４℃で２
時間静置した。析出した沈澱物を遠心分離（２０００rp
m ，１０分間）し、真空乾燥して分画物０．２０ｇを得
た。これを分析したところ、ＰＩ純度９５．５％，ＰＩ
回収率９０．７％であった。
【００１５】比較例 実施例１で使用した大豆粉末レシチンのエタノール不溶
分１ｇをヘキサン６０mlに溶かし、塩基性物質を含まな
い５５％含水エタノール１００mlと分液ロートに入れ、
室温で１分間振とう後、２０分間静置した。このヘキサ
ン層を、さらに新しい５５％含水エタノールで同様の操
作により接触させ、抽出した。この結果、含水エタノー
ル層から回収した固形物は０．２ｇであり、そのＰＩ純
度は２８．５％であった。
分１ｇをヘキサン６０mlに溶かし、塩基性物質を含まな
い５５％含水エタノール１００mlと分液ロートに入れ、
室温で１分間振とう後、２０分間静置した。このヘキサ
ン層を、さらに新しい５５％含水エタノールで同様の操
作により接触させ、抽出した。この結果、含水エタノー
ル層から回収した固形物は０．２ｇであり、そのＰＩ純
度は２８．５％であった。
【００１６】
【発明の効果】本発明によれば、液々分配の操作だけ
で、ホスファチジルイノシトールを容易に、かつ高純度
で収率よく分離できるようになった。従来、多種の混合
溶媒による分別，カラムクロマト分画，もしくはそれら
を組み合わせた技術によっても、極めて低い収率でしか
得られていなかったホスファチジルイノシトールを、高
価なカラムクロマト担体を用いずに、ヘキサン，エタノ
ールのような安全性の点で問題なく、汎用性の高い安価
な溶媒を使用するだけで、しかも簡便な操作で精製で
き、高純度かつ高収率で得られるという優れた利点を有
する。
で、ホスファチジルイノシトールを容易に、かつ高純度
で収率よく分離できるようになった。従来、多種の混合
溶媒による分別，カラムクロマト分画，もしくはそれら
を組み合わせた技術によっても、極めて低い収率でしか
得られていなかったホスファチジルイノシトールを、高
価なカラムクロマト担体を用いずに、ヘキサン，エタノ
ールのような安全性の点で問題なく、汎用性の高い安価
な溶媒を使用するだけで、しかも簡便な操作で精製で
き、高純度かつ高収率で得られるという優れた利点を有
する。
Claims (2)
- 【請求項１】 ホスファチジルイノシトール含有原料を
非極性溶媒に溶かし、塩基性物質を含有する含水極性溶
媒と接触させた後、該非極性溶媒層を、該塩基性物質を
含まない新たな含水極性溶媒と液々分配させ、ホスファ
チジルイノシトールを該含水極性溶媒層に抽出すること
を特徴とするホスファチジルイノシトールの分離・精製
方法。 - 【請求項２】 上記の方法で該含水極性溶媒層として得
られるホスファチジルイノシトール抽出液に、金属塩を
添加し、ホスファチジルイノシトールを沈澱物として回
収することを特徴とするホスファチジルイノシトールの
濃縮方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28354591A JPH0597873A (ja) | 1991-10-03 | 1991-10-03 | ホスフアチジルイノシトールの分離・精製及び濃縮方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP28354591A JPH0597873A (ja) | 1991-10-03 | 1991-10-03 | ホスフアチジルイノシトールの分離・精製及び濃縮方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH0597873A true JPH0597873A (ja) | 1993-04-20 |
Family
ID=17666915
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP28354591A Pending JPH0597873A (ja) | 1991-10-03 | 1991-10-03 | ホスフアチジルイノシトールの分離・精製及び濃縮方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH0597873A (ja) |
-
1991
- 1991-10-03 JP JP28354591A patent/JPH0597873A/ja active Pending
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