JPH05508403A - 調節された放出ビヒクル - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 れた　ビヒクル 及旦」どえ量 本発明は、閉じ込められた分子を、水和する際に時間をかけて放出する調節され た放出系に関する。一層特には、本発明は調節された放出ビヒクル及びセルロー スペースの系を用いることによってそれらを製造する方法に関する。閉じ込めら れた分子の放出は、セルロースを分解する酵素のような放出（ｒｅｌｅａｓｅ） 剤を使用してセルロースを分解することによって行なわれる。これらの調節され た放出ビヒクルは、水和するまで活性化されないように、乾燥或は脱水形態で貯 蔵することができる。閉じ込めるビヒクルを放出剤と別にする場合がいくつかあ り、例えばセルロース分解酵素を別の粒子に付着して運ぶことができ或は後に加 えて系を活性化することができる。

調節された放出ビヒクルは何年も前から利用可能であった。調節された放出ビヒ クルは２つの一般的なタイプ、すなわち閉じ込められた物質を一連の細孔を通す あるタイプの篩分は機構によって放出するもの、及びビヒクルを分解する際に物 質を放出するものがある。第一のクラスの調節された放出ビヒクルは、マイクロ カプセル及び実質的に非晶質の中心を囲む多孔質シェルを有する他のビヒクルを 含む、閉じ込められた分子の放出は、シェルを貫通する細孔を通る拡散或は流れ によって、閉じ込められた分子が放出されるまで行なわれる。放出の調節は、細 孔寸法及びシェル厚みを、膜を容易に通過することができる粒子寸法を制限する ように変更し、それで通過時間を調節することによって達成される。

第二のクラスの調節された放出ビヒクルは、分解して物質を放出するものである 。いくつかのマイクロカプセルはまたこの範晴に属するが、このクラスは主にリ ポソーム或は分子、例えば酵素によって開裂されることができるある他のタイプ の生分解性物質のようなビヒクルに関する。ビヒクルは、血液流中の酵素、移植 部位、或は消化管が宿主中でビヒクルを分解することができる場所に注入或は取 り入れるのに特に有用である０例えば、はとんどのリン脂質はホスホリパーゼ及 び脂質を攻撃する他の酵素に敏感である。他の系はアルギネート或はゼラチンの ような物質で造られ、かかる物質は糖反応性・酵素或はプロテアーゼによって分 解される。これらの分解性ビヒクルは関心のある分子を閉じ込めることができる が、放出すべき分子はビヒクルを形成する物質に化学的か或はイオン的のいずれ かで結合されるのが一層普通である。ビヒクルを分解する際に、結合された物質 がビヒクル物質から放出され、調節された放出は結合の強さ及び物質が結合され ている位置により達成される。シェル様ビヒクル、例えばマイクロカプセル或は 単層状脂質ビヒクルを用いるならば、壁構造の分解は内部に閉じ込められた物質 をすべて直ちに放出させることになる。その情況での調節された放出は、単に分 解の期間を調節することによって達成することができるだけである。真の調節さ れた放出を達成するために、異なる分解速度を有する種々のビヒクルの混合物を 同じサンプルにおいて用いることができる。

シェルタイブか或は分解のいずれかのビヒクルを所定の情況で用いることができ るが、各々のタイプのビヒクルは付随する問題を有する。シェルタイブのビヒク ルは、かかるビヒクルが乾燥する際に分解を受け得るので、水性環境を必要とす るのが普通である１分解タイプのビヒクルの内のいくつかは、乾燥形態で使用す ることができるが、宿主或は構造を分解して作動させるある他の添加物質を必要 とするのが普通である。更に、分解タイプのビヒクルは分解速度に関して調節す るのが容易でないのが普通である。

それ故に、発明の目的は、脱水形態で使用することができかつ水和する際にのみ 活性化される調節された放出ビヒクルを提供するにある。

発明の別の目的は、脱水形態で使用することができる調節された放出ビヒクルを 製造する方法を提供するにある。

発明のそれ以上の目的は、ビヒクルタイプのキャリヤー及び水和する際にビヒク ルを分解して閉じ込められた分子を放出する別の脱水形態の放出剤を有する系を 提供するにある。

発明のなおそれ以上の目的は、酵素を閉じ込めかつ水和する際に放出するビヒク ルを提供するにある。

発明のこれらや他の目的及び特徴は下記の記述から明らかになるものと思う。

ｌ豆立４１ 本発明は、分子を閉じ込め、水和する際に閉じ込められた分子の放出をもたらす 実質的に乾燥した系を特徴とする０発明は、更に、水和する際に酵素或はたんば く質を放出することができる脱水形態の酵素或はたんばく質キャリヤーを特徴と する０発明のなおそれ以上の特徴は発明の系を製造する方法である。

発明は、所定の物質、好ましくは改質されたセルロース系物質が種々の分子を閉 じ込めることができることに基づく、これらのセルロース系物質は、閉じ込めら れた物質の相当の部分を維持しながら、完全に或は一部脱水させることができる 。これらのビヒクルは、再び水和する際に、物質を分解されるまで依然持ち続け る１発明において用いるのに好ましいセルロース系物質は一部架橋されたカルボ キシル化セルロース系化合物である。好ましいセルロース系化合物はカルボキシ メチルセルロース、特にアルミニウム或は第一鉄イオンで一部架橋されたカルボ キシメチルセルロースを含む、これらの物質は疎水性剤（ｈｙｄｒｏｐｈｏｂｉ ｃｉｔｙａｇｅｎｔ）、例えば錯酸、プロピオン酸、酪酸、イソ酪酸、コハク酸 、アジピン酸、フタル酸、クエン酸、並びにこれらの塩、塩化物、無水物、及び 混合物からなる群より選ぶもので処理するのが好ましい、架橋をもたらすための 好ましいアルミニウム化合物は錯酸アルミニウム、アルミニウムイソプロポキシ ド、水酸化アルミニウム及びこれらの混合物を含む、加えて、塩化第一鉄のよう な第一鉄塩を用いることができる。多種類のカルボキシメチルセルロース物質を 用いることができるが、カルボキシメチルセルロースは置換度（ｒＤＳＪ　）０ ．５又はそれ以上を有するのが好ましく、置換度０．７又はそれ以上を有するの が最も好ましい、このＤＳ値を有するカルボキシメチルセルロース化合物は、全 架橋が実施不能な物質を生じ、それで単に一部架橋を用いるように架橋に利用し 得る相当数の部位を有する。

セルロース系化合物を用いて閉じ込め用ビヒクルを形成し、該ビヒクルは放出さ れることになる分子を閉じ込める。分子は水溶液で運ばれることができるのが好 ましく、それでセルロース系化合物に、架橋する前に、閉じ込めるべき分子の溶 液を飽和させる。このソーキングの後に、架橋及び好ましくは疎水性剤による処 理を行なわせ、それで分子を一部閉じ込める。この段階で、閉じ込めるべき分子 を中に有する膨潤されたセルロース系化合物を乾燥させるのが普通である。

第一の乾燥の後に、コーティング剤を用いて閉じ込め用ビヒクルの回りにバリヤ ーを形成するのがよい、コーティング剤は、閉じ込め用ビヒクルと共に分解され 得るように、またセルロースをベースにするのが好ましい。

好ましいコーティング剤はヒドロキシプロピルセルロースであるが、その他のセ ルロース化合物、主にヒドロキシアルキルセルロース系統が好ましい、コーティ ング剤は、予備乾燥した閉じ込めビヒクルをコーティング剤の希釈溶液に浸漬し て置くことによって加えるのが普通である。このソーキング工程のためにソーキ ング剤をイソプロピルアルコールのようなアルコールに溶解するのが好ましい。

発明の系は、乾燥状態で不活性或は非活動性であるが、水和する際にコーティン グ剤（存在する場合）及び閉じ込め用ビヒクルそれ自体の両方を分解することが できる放出剤に依存する。放出剤はセルラーゼ、ヘミセルラーゼ、及び関連のあ るセルロース分解酵素からなる群より選ぶ酵素にするのが好ましい、放出剤につ いての重要な一要因は、閉じ込められた分子を活性化するのに必要な程度にする 以外は、閉じ込められた分子を分解すべきでないことである０発明の好ましい一 実施態様では、放゛出剤をコーティング剤を含有する溶液に加え、故にコーティ ング剤と共に閉じ込め用ビヒクルの表面に被覆させる。コーティング剤によって 形成されるバリヤーは、閉じ込め用ビヒクルを被覆させた後に乾燥するので、放 出剤は、再水和されるまで閉じ込め層剤を分解する機会を得ない、別の好ましい 実施態様では、放出剤を別の粒子によって運ばせる。この別の粒子は、閉じ込め られる分子を含有しない外は、コーティング剤のバリヤーフィルムを有すること を含めて、閉じ込め用ビヒクルと実質的に同じにするのが最も好ましい０発明の なお別の実施態様では、放出剤を粉末或は他の乾燥した脱水形態として加える。

発明のその他の実施態様及びそれ以上の特徴は、下記の記述から明らかになるも のと思う。

Ｂの　ｔｔｌ、 本発明は、閉じ込められた分子の放出を維持することを供する系及び維持される 放出系を形成する方法の両方を特徴とする。この系は完全に生分解性であり、イ ンビボか或はインビトロのいずれかで用いることができる。

系は脱水状態で自蔵されており、任意の水性ベースの溶媒、例えば水、尿或は塩 類の添加が系を活性化して閉じ込められた分子の調節された放出をもたらすこと ができる。系は、多数の異なる要因を調節して所望の放出特性をもたらすことが できる点で、適応性がある。

簡潔に言うと、系は一部架橋されており、好ましくは疎水性剤で処理するカルボ キシメチルセルロースのようなカルボキシル化セルロース系化合物から成る。高 い、好ましくは０．５を越えるＤＳ値を有するカルボキシメチルセルロースが最 も有用である。アルミニウムのような多価金属を用いて部分架橋を達成して安定 な水和可能な構造をもたらすのが普通である。−塩基酸或は二塩基酸もしくはこ れらの塩、無水物或は塩化物のような疎水性剤を加えて更に安定性をもたらして もよい、好ましい疎水性剤は錯酸、プロピオン酸、酪酸、イソ酪酸、アジピン酸 、フタル酸、クエン酸、及びコハク酸並びにそれらの塩、無水物及び塩化物であ る。−塩基酸が好ましいが、所定の多塩基酸もまた用いることができる。好まし い架橋剤及び疎水性剤に関するそれ以上の詳細は、米国特許出願第４９０，３５ ６号に見ることができる。

閉じ込めるべき分子は、分子を水溶液に加入しかつセルロース物質を溶液中に浸 漬して膨潤させることによってセルロース物質中に吸収させるのが普通である。

膨潤は、架橋或は疎水性剤で処理する前に行なわれるのが最も好ましい、一旦疎 水性剤及び架橋剤の両方による処理を終了したら、分子を乾燥させるのが普通で ある。

乾燥した後に、閉じ込められた分子を含有するセルロース物質を、セルロース化 合物の回りにバリヤーを形成するコーティング剤で処理し、更に放出すべき分子 を閉じ込めるのが普通である。このコーティング剤もまた放出剤によって分解さ れることができるべきである。放出剤はヒドロプロピルセルロース或は関連した 化合物にするのが好ましい、ヒドロプロピルセルロースをイソプロピルアルコー ルに溶解し、ビヒクルを溶液に浸漬してセルロース粒子に被覆するのが普通であ る。

通常コーティング及びセルロースビヒクルの両方を分解する酵素の形態の放出剤 は系の必要な部分である。セルラーゼ或はヘミセルラーゼのような酵素をこの放 出剤として用いるのが好ましい、セルラーゼをヒドロプロピルセルロースコーテ ィングについて用いるイソプロピルアルコール溶液に入れ、それでセルラーゼを カルボキシメチルセルロースペースの粒子の外側に被覆するのが普通である。し かし、酵素は、閉じ込められた物質を含む別の粒子に付着してもよく、ビヒクル に閉じ込めてもよく、或はある乾燥形態で加えてもよい。

この方法を用いて閉じ込めることができるタイプの分子は、寸法が広い範囲に及 ぶ。薬剤のような小さい分子（分子量およそ１００〜３００ダルトン）を、大き い酵素及び他の分子（分子量３０．０００ダルトン及びそれ以１）のように用い ることができる。この広い範囲の使用は、閉じ込めることができる分子寸法の点 から見て限られた範囲の有効性を有する多孔質の閉じ込め系と極めて異なる。

下記の例は発明及びその用途を更に説明する働きをするものであり、限定するも のではない。

本例では、低分子染料であるＢｒ１ｌｌｉａｎｔＢｌｕｅ　Ｒ（分子量８２５ダ ルトン）を用いて一連の試験を行なって、小さい分子についての本発明の効力を 示した。

初めに、ＤＳｏ、７を有するカルボキシメチルセルロース（Ａｑｕａｌｏｎ　Ｃ ｏｍｐａｎｙからのＣＭＣ７ＨＣ）１０ｇをイソプロパツール５ｇと混合した。

Ｂｒ１ｌｌｉａｎｔ　Ｂｌｕｅ　Ｒ（ＡｌｄｒｆｃｈＣｏ、）８ｍｇを含有する ＮａＣ１溶液（ＮａＣ１９０ｍｇ／ＣＭＣＩ　ｇ）（３５ｍｌ）をカルボキシメ チルセルロースに２分かけて加えた。カルボキシメチルセルロース粒子はこの時 間の間に膨潤する。１ｏ分した後に、初めの溶液をデカントし、ＮａＣ１９０ｍ ｇ／カルボキシメチルセルロースＩｇを含有する溶液３５ｍ１を加えた。溶液は また架橋剤であるアルミニウムアセテート：ボレート、及び疎水性剤である酢酸 も含有した。この溶液を撹拌しながら同じ２分の時間かけて加えた。表１に示す 通りに、アルミニウムアセテート：ボレート架橋剤及び酢酸疎水性剤を種々の濃 度で試験した。

次いで、膨潤した粒子を室温で一晩乾燥させた。

乾燥した後に、コーティング剤としてのヒドロプロピルセルロース及び放出剤と してのセルラーゼをイソプロパツールに溶解して含有する溶液を用いて粒子を被 覆した。イソプロパツール溶液およそ０．６ｍｌを試験し、各々のサンプルはヒ ドロプロピルセルロース及びセルラーゼを異なる濃度で含有した（表工参照）、 ヒドロプロピルセルロース（タイプＥＦ　ＮＦ）はＡｑｕａｌｏｎＣｏｍｐａｎ ｙから入手し、セルラーゼはＳ　ｉ　ｇｍａＣｏｍｐａｎｙから入手した（Ｎｏ 、Ｃ−０９０１）。

イソプロパツール溶液をＢｒ１ｌｌｉａｎｔ　ＢｌｕｅＲを含有するカルボキシ メチルセルロース１ｇと混合し、次いで生成した物質を冷風を吹きつけて乾燥さ せた、物質は約２０分以内で乾燥した。

下記の放出研究を用いてセルロースが水和する際に染料を放出するかどうかをめ た。各々の試験物質のサンプル５０ｍｇを水Ｌｏｇを収容する試験チューブに加 えた０分析する前に、溶液全体を２回逆さまにして振盪して酵素で開始される放 出機構と単純な拡散支配のプロセスとを区別した。ターナ−分光光度計で、５８ ５ｎｍにおける吸光度を測定した０表■はこれらの実験の結果を表−工 １　１０／２０　１２　０　０．０３０　０．０５０　０．０６０２　２０／４ ０　１２　０　０．０２０　０．０４２　０．０５０３　３０／６０　１２　０ 　０．０９５　０．１３２　０．１４２４　１０／２０　１２　２．５　０．１ １０　０．１３０　（Ｌ１２０５　２０／４０　１２　２．５　０．１１５　０ ．１４２　０．１４０６　３０／６０　１２　２．５　０．０８０　０．１２０ 　０．１４５７　１０／２０　１８　０　０．０２０　０．０３０　０．０３２ ８　２０／４０　１８　０　０．０２０　０．０４５　０．０５０９　３０／６ ０　１８　０　０．０８０　０．１１０　０．１３３１０　１０／２０　１８　 ２．５　０．１１５　０．１３０　０．１２０１１　２０／４０　１８　２．５ 　０．１１７　０．１４０　０．１３５１２　３０／６０　１８　２．５　０． ０９２　０．１１６　０．１３０全ての濃度はカルボキシメチルセルロース１グ ラム当たりのものである。

各々の実験で用いた対照は、セルラーゼの濃度（１〜３及び７〜９対４〜６及び ｌｏ〜１２）及びコーティング剤の濃度（１〜６対７〜９）の他は全て同じ変数 を有した。各々の実験はセルラーゼの存在しない試験を有して効果の差異が単に 拡散性に基づくものでないことを示した。

表工に示す結果を参照すると、対照と３つの濃度のセルラーゼ、例えば２．５ｍ ｇ、５．０ｍｇおよび１０ｍｇ／カルボキシメチルセルロース１ｇのすべてとの 間に明瞭な放出特性の差異がある。３つの異なる濃度のセルラーゼの間に差異は 殆ど無いので、必要とするセルラーゼの量が用いる最も少ない量よりずっと少な くなることは明らかである。加えて、異なる濃度のアルミニウム架橋剤を用いる ことの間に有意な影響は殆ど無い。しかし、最も小さい濃度のセルラーゼについ て、用いる架橋剤の量を少なくする程、架橋剤の量が多い場合に得られるのに比 べて、放出速度は速くなる。これは、ビヒクルの架橋度が高くなる程、ビヒクル の細隙に入ってセルロースの分解を触媒することができるセルラーゼが少なくな るので、予期される結果である。故に、架橋剤の濃度が高い程、放出速度は遅く なる。

試験１〜６対７〜１２では、試験した主要な変数はコーティング剤であるヒドロ キシプロピルセルロースの濃度であった。試験した値はヒドロプロピルセルロー ス６ｍｇ及び１２ｍｇ／ＣＭＣ１ｇである。実験１〜３は実験４〜６と比較して 対照として働くようにヒドロプロピルセルロース６ｍｇを有して酵素を有しない 、実験４〜６はヒドロキシプロピルセルロースを同じ＜　６ｍｇ有するが、セル ラーゼを２．５ｍｇ／ＣＭＣ１ｇ有する０表工から分かる通りに、低い濃度の架 橋剤において、対照と試験サンプルとからの放出速度の間に有意の差異がある。

架橋度の高い（３０ｍｇ／ＣＭＣ１ｇ）試験（実験３及び６）だけが同じパター ンに従わない、ヒドロキシプロピルセルロースの量を１２ｍｇ／カルボキシメチ ルセルロース１ｇに増やす場合に、同じ結果が統く：すなわち低い濃度の架橋剤 において、放出速度に有意の差異がある。高い濃度の架橋剤においてだけ、差異 が無い。

コーティング剤の濃度は有意であるようには思われない。

試験結果はすべて５８５ｎｍにおける吸光度に基づく。セルラーゼはこの波長に おいて最小の吸光度を有するので、このことは、吸光度の差異が、明らかにカル ボキシメチルセルロースを分解して染料を放出することの効果であることを示す 。

故に、酵素及び架橋剤のような要因の内のいくつかの濃度を変更することにより 、調節された性質を変えることができることは明らかである。

五名 本例では、大きい分子であるヘモグロビン（分子量６８．０００ダルトン）を用 いて反応体の濃度を変更することがたんばく質の放出に与える影響を示した。ヘ モグロビン０．８ｍｇ／ＣＭＣ１ｇをＢｒ１ｌｌｉａｎｔＢｌｕｅ　Ｒｏ、８ｍ ｇ／ＣＭＣ１ｇに変えて使用した外は例１で用いたのと同じ手順に従って試験系 を形成した。架橋剤であるアルミニウムアセテート：ボレート２０ｍｇ、疎水性 剤である酢酸４０ｍｇ／カルボキシメチルセルロース１ｇ及びコーティング剤で あるヒドロキシプロピルセルロース１８ｍｇ／ＣＭＣ１ｇの単一の濃度だけを用 いた。この実験の結果を表Ｈに示す。

ヘモグロビンをマーカーとして使用したので、例１で用いた波長５８５　、ｎ　 ｍの代わりに４００ｎｍにおける吸光度を用いた。セルラーゼは実質的に４００ ｎｍにおける吸光度を持たない（０，００５より小さい）ので、すべての吸光度 は直接ヘモグロビンの放出に関係する。結果から明らかな通りに、対照と３つの 酵素試験のすべてとの間に実質的に有意な差異がある。これは、セルラーゼ０． ０２５ｍｇ／カルボキシメチルセルロース１ｇを用いてさえ、有意な酵素作用が 示されることを示す、実際、酵素濃度を１００倍変えても、効果の差異は殆ど無 い。

表−」。

ヘモグロビン（Ｈｂ）の放出に及ぼすセルラーゼの濃度作用 ＣＭＣ５０ｍｇ＋Ｈｂ、Ｈ＊　０　１０ｇ１　０　０．０１３　０．［＋２４　 ０．０２６２　０．０２５　０．０５３　０．０９５　０．１１５３　０．２５ 　０．０６５　０．０９０　０．１１２４　２．５　０．０９０　０．１１２　 ０．１２８この実験は、大きい分子、例えばヘモグロビンを本カルボキシメチル セルロース系によって閉じ込めることができかつ放出剤であるセルラーゼを適用 した際にのみ放出されることを明瞭に示す。

医ユ 本例では、酵素グルコースオキシダーゼを閉じ込める外は例２と実質的に同じ閉 じ込め手順を用いる。グルコースオキシダーゼ試験の目的は、閉じ込められる酵 素グルコースオキシダーゼが閉じ込め手順の間活性を維持しかつ閉じ込めビヒク ルから放出することになるを示すにある。

正確な手順は下記の通りである。

カルボキシメチルセルロース（ＣＭＣ７Ｈ）　およそｌｏｇをインプロパツール ５ｇと混合した。酵素グルコースオキシダーゼ（２ｍｇ／ＣＭＣ１ｇ）を含有す るＮ　ａ、　Ｃｌ溶液（ＮａＣ１４５ｍｇ／ＣＭＣ１ｇ）を２分かけて加＾た。

カルボキシメチルセルロース粒子は膨潤し、酵素を閉じ込める。１０分した後に 、初めの溶液をデカントしかつ架橋剤であるアルミニウムアセテート：ボレート （２０ｍｇ／ＣＭＣ１ｇ）及び疎水性剤である酢酸（４０ｍ　ｇ　／　ＣＭ　Ｃ １ｇ　）を含有するＮａＣ１（４５ｍｇ／ＣＭＣＩ　ｇ）３５ｍｌを加えた。こ の溶液もまた２分かけて加えた。１０分した後に、溶液をデカントしかつ粒子を 一晩自然乾燥させた。

乾燥した後に、粒子にコーティング剤及び放出剤を被覆した。コーティング剤と してヒドロキシプロピルセルロース（１８ｍｇ／ＣＭＣ１ｇ）及び放出剤として 種々の濃度のセルラーゼ（表ｍａ及び表■ｂ参照）を含有するイソプロパツール およそ０．６ｍｌを試験した。このインプロパツール溶液をグルコースオキシダ ーゼを含有するカルボキシメチルセルロースＩｇと混合し、次いで生成した粒子 を強制冷風によって乾燥させた０粒子は約２０分で乾燥した。

粒子からのグルコースオキシダーゼの放出を吸光測定によってめた。一層特には 、各々のサンプル５０ｍｇをＨ＊０１０ｇに加えた。溶液を２回振盪し、次いで ２　ｌ／２時間（表ＩＩＩａ）か或は４１７２時間（表ｍｂ）のいずれかの間イ ンキュベートさせた。インキュベート期間の後に、上澄み１グラムを、ペルオキ シダーゼ（Ｓｉｇｍａ）１０ｍｇ、ｏ−ＤｉａｎｉｓｉｄｆｎｅＤｉＨＣｌ　０ ．９ｍｇ及びグルコース１８０ｍｇをＨｉ０９ｇに溶解させて含有する溶液に加 えた。ターナ−分光光度計で、反応が４５０　ｎｍにおいて進行するにつれて、 吸光度を種々の時間（１０，２０，３０及び４５分〕において測定した。

表ｍａ及び表ｍｂは、共に、セルラーゼのレベルを増大するにつれて、粒子から 放出されるグルコースオキシダーゼの量もまた増大することを示す、更に、反応 を進行させるにつれて、グルコースは一層多く酸化され、これはグルコースオキ シダーゼが活性を維持することを示す、実際、同じ試薬を用いて、グルコースオ キシダーゼは１０分した後にＯＤｏ、２３０を生じかつ２０分した後にＯＤｏ、 ３９０を生じる。

１−皿ｌ ＣＭＣから２１／２時間放出した後のグルコースオキシダーゼの活性研究 セルラーぞ　ＯＤ４５ｎｍ／時間　（分）シジＬｊユ　１０　２０　３０　４５ ０　０．００８　０．００９　０．０１２　０．０１６０．０２５　０．０１０ 　０．０１５　０．０１８　０．０２５０．２５　０．０８０　０．１４０　０ ．１９５　０．２７０２．５　０．１１０　０．２００　Ｇ、２８０　０．３９ ５乏−」Ｌ旦 ＣＭＣから４１７２時間放出した後のグルコースオキシダーゼの活性研究 セルラーぞ　ＯＤ４５ｎｍ／時間　（分）カシｉ　１０　２０　３０　４５ ０　０．０２０　０．０２７　０．０３２　０．０４１０．０２５　０．０４２ 　０．０６８　０．０８６　０．１１５０．２５　０．１５０　０．２６０　０ ．３５５　０．５００２．５　０．１９５　０．３２５　０．４５０　０．６０ ０当業者ならば本明細書中上述した物質及び手順のその他の変更をめることがで きよう、このような他の変更は下記の請求の範囲により包含される。

要　約　書 閉じ込め用物質を、水和する際に分解することによって作用する新規な調節され た放出ビヒクルを開発した。

好ましい放出ビヒクルは、カルボキシル化セルロース、例えばカルボキシルメチ ルセルロースをアルミニウムイオンのような架橋剤及び好ましくは鎖酸のような 疎水性剤で処理して造る。ビヒクルは、コーティング剤と共にビヒクルに被覆す ることができる放出剤、例えばセルラーゼによって分解される。ビヒクルは乾燥 させ、閉じ込めるべき分子、例えば酵素を閉じ込め、カルボキシルメチルセルロ ースを分解するセルラーゼを水和活性化し、閉じ込められた分子を放出する。

国際調査報告

Claims (29)

【特許請求の範囲】
1. １．水和する際に、閉じ込められた分子の放出をもたらすための系であって、 部分架橋たカルボキシル化セルロース系化合物で形成され、分子を中に閉じ込め させた閉じ込め用ピヒクル、及び 乾燥状態で非活動性であるが、水和する際に閉じ込め用ピヒクルを分解して閉じ 込められた分子の放出をもたらす放出剤 を含む系。
2. ２．前記セルロース系化合物が脱水された請求項１の系。
3. ３．更に閉じ込め用ピヒクルの回りにバリヤーを形成するコーティング剤を含む 請求項１の系。
4. ４．コーティング剤がセルロース系物質を含む請求項３の系。
5. ５．前記コーティング剤がヒドロキシアルキルセルロースを含む請求項３の系。
6. ６．前記ヒドロキシアルキルセルロースがヒドロキシプロピルセルロースを含む 請求項５の系。
7. ７．前記放出剤をセルラーゼ、ヘミセルラーゼ、その他のセルロース分解酵素、 及びこれらの混合物からなる群より選ぶ請求項１の系。
8. ８．前記放出剤を前記閉じ込め用ピヒクルに被覆する請求項７の系。
9. ９．前記放出剤を前記閉じ込め用ピヒクルと別の粒子によって運ばせる請求項７ の系。
10. １０．前記粒子が疎水性剤で処理した脱水された部分架橋されたカルボキシル化 セルロース系物資を含む請求項９の系。
11. １１．前記粒子が、炭素原子２〜１６を有する一塩基性及び二塩基性カルボン酸 並びにこれらの塩、塩化物、無水物、及び混合物からなる群より選ぶ疎水性剤で 処理した架橋されたカルボキシルメチルセルロースを含む請求項１０の系。
12. １２．前記疎水性剤を錯酸、プロピオン酸、酪酸、イソ酪酸、コハク酸、アジピ ン酸、フタル酸、クエン酸、並びにこれらの塩、塩化物、無水物、及び混合物か らなる群より選ぶ請求項１１の系。
13. １３．前記セルロース系化合物をアルミニウムイオン、第一鉄イオン、及びこれ らの混合物からなる群より選ぶ多価金属イオンにより架橋させる請求項１の系。
14. １４．前記セルロース系化合物がカルボキシルメチルセルロースを含む請求項１ ３の系。
15. １５．カルボキシルメチルセルロースを炭素原子２〜１６を有する一塩基性及び 二塩基性カルボン酸並びにこれらの塩、塩化物、無水物、及び混合物からなる群 より選ぶ疎水性剤で処理する請求項１４の系。
16. １６．前記疎水性剤を錯酸、プロピオン酸、酪酸、イソ酪酸、コハク酸、アジピ ン酸、フタル酸、クエン酸、並びにこれらの塩、塩化物、無水物、及び混合物か らなる群より選ぶ請求項１５の系。
17. １７．カルボキシル化セルロース系物質を閉じ込めるべき分子の溶液に浸漬して 置き、 該浸漬させた物質を架橋剤で処理し、及び乾燥状態で非活動性であるが、水和す る際に該処理した物質を分解することができる放出剤を供することの工程を含む 分子を閉じ込めかつ放出するための系を製造する方法。
18. １８．前記処理工程が、更に疎水性剤で処理することを含む請求項１７の方法。
19. １９．前記疎水性剤を炭素原子２〜１６を有する一塩基性及び二塩基性カルボン 酸並びにこれらの塩、塩化物、無水物、及び混合物からなる群より選ぶ請求項１ ８の方法。
20. ２０．前記疎水性剤を錯酸、プロピオン酸、酪酸、イソ酪酸、コハク酸、アジピ ン酸、フタル酸、クエン酸、並びにこれらの塩、塩化物、無水物、及び混合物か らなる群より選ぶ請求項１９の方法。
21. ２１．前記放出剤を供する前に、前記処理した物質を乾燥させる請求項１７の方 法。
22. ２２．更にコーティング剤で被覆することの工程を含む請求項１７の方法。
23. ２３．前記コーティング剤がヒドロキシアルキルセルロースを含む請求項１４の 方法。
24. ２４．前記コーティング剤がヒドロキシプロピルセルロースを含む請求項１６の 方法。
25. ２５．前記放出剤を前記コーティング剤と共に前記処理した物質に被覆する請求 項２２の方法。
26. ２６．前記放出剤をセルラーゼ、ヘミセルラーゼ、その他のセルロース分解酵素 、及びこれらの混合物からなる群より選ぶ請求項１７の方法。
27. ２７．前記架橋剤をアルミニウムイオン、第一鉄イオン、及びこれらの混合物か らなる群より選ぶ請求項１７の方法。
28. ２８．前記セルロース系化合物がカルボキシルメチルセルロースを含む請求項１ ７の方法。
29. ２９．前記カルボキシルメチルセルロースがＤＳ少なくとも０．５を有する請求 項２８の方法。