JPH05186354A - 抗癌剤及び免疫賦活剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】 【構成】 ５−デオキシ−５−メチルチオリボースを有
効成分として含有する抗癌剤及び免疫賦活剤 【効果】 上記薬剤は優れた抗癌作用及び免疫賦活作用
を有しており、しかも毒性が低く、各種の癌や免疫低下
疾患の治療、処置に有用である。

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は５−デオキシ−５−メチ
ルチオリボースを有効成分とする抗癌剤及び免疫賦活剤
に関する。

【０００２】

【従来技術及び課題】Schroeder et al.，Can．J．Micr
obiol.，１９，１３４７（１９７３）には、E coli 中
の５−デオキシ−５−メチルチオリボース（以下ＭＴＲ
という）の産生と、原核生物において５′−デオキシ−
５′−メチルチオアデノシン（以下ＭＴＡという）がＭ
ＴＲの前駆体であることについて開示されており、ま
た、Shapiro et al.，Biochem．Biophys．Res．Comm.，
１０２，３０２（１９８１）には、ＭＴＲが原核微生物
においてメチオニンの前駆体であることが報告されてい
る。

【０００３】このように、ＭＴＲはＭＴＡから誘導さ
れ、自然界に存在する化合物であり、また、ある種の細
胞ではメチオニンへリサイクルされることが知られてい
る。

【０００４】しかし、ＭＴＡの生理学的作用についての
報告は少なく、Riscoe et al.，J Biol Chem.，２５９
５４６５（１９８４）には、ＭＴＲがＢＷ−５１４７，
Ｌ１２１０等の細胞系に対し成長速度、飽和細胞密集度
及び生存率の増加効果を有することが報告されており、
また、ＭＴＲは５′−デオキシ−５′−メチルチオアデ
ノシンホスホリラーゼを含んだ血清培地でＭＴＡより生
成され、この生成は哺乳動物細胞の成長に不可欠である
ことが示唆されているにすぎず、抗癌作用及び免疫賦活
作用については記載されていない。

【０００５】本発明者等は、自然界に存在し、細胞への
メチルチオ基供与体として哺乳動物の細胞増殖作用に関
与すると考えられる生理活性物質であるこのＭＴＲにつ
いて、新しい生理活性作用を見い出すべく、鋭意検討を
重ねた結果、今回、ＭＴＲは、エーリッヒ癌及び Meth-
A fibrosarcoma 等の腫瘍細胞移植マウスにおいて単独
で抗癌作用を示し、また、ザルコーマ１８０肉腫、Meth
-A fibrosarcoma 及びＬ１２１０ leukemia 等の腫瘍細
胞に対しマイトマイシンＣ（ＭＭＣ）、アドリアマイシ
ン（ＡＤＭ）、５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）及び
シトシンアラビノシド（Ａｒａ−Ｃ）等の抗癌剤と併用
効果を有することを見い出だした。

【０００６】更に、ＭＴＲがリンパ球の運動性を活発に
する作用を有すること、各種抗癌剤投与動物における白
血球、リンパ球及び免疫担当細胞の減少を抑制し、免疫
抑制物質投与動物におけるリンパ球の活性を賦活し、ま
た、細菌感染時における免疫低下も抑制し、免疫低下状
態にある動物をより正常状態に戻す作用（免疫賦活作
用）を有することを確認した。

【０００７】これらの作用に加え、ＭＴＲはＬＤ₅₀値
が、ｄｄ系マウスの場合、経口投与で５０００ｍｇ／ｋ
ｇ以上、静脈内投与で２０００ｍｇ／ｋｇ以上といずれ
の投与経路においても低毒性であることを確認し、本発
明を完成するに至った。

【０００８】かくして、本発明によれば、ＭＴＲを有効
成分として含有することを特徴とする抗癌剤及び免疫賦
活剤（以下本発明薬剤という）が提供される。

【０００９】上記本発明薬剤を用いて処置しうる対象と
しては、急性白血病、慢性白血病、悪性リンパ腫、多発
性骨髄腫、骨・軟部腫瘍、消化器癌（胃癌、食道癌、結
腸・直腸癌等）、肝臓癌、胆道癌、膵臓癌、肺癌、子宮
癌、乳癌、卵巣癌、膀胱癌、前立腺癌、皮膚癌、脳腫瘍
等の悪性腫瘍及び結核、日和見感染、後天性免疫不全症
候群（ＡＩＤＳ）、自己免疫疾患、骨髄機能障害等の免
疫機能の低下に関連した疾患群を例示することができ
る。

【００１０】このような病気の処置に際して、本発明薬
剤は単独で用いてもよく、或いは、ＭＭＣ、ＡＤＭ、５
−ＦＵ、Ａｒａ−Ｃ、アクチノマイシンＤ、ビンクリス
チン等の抗癌剤；レンチナン、クレスチン、シゾフィラ
ン等の免疫賦活剤；他の医薬成分及び／又は放射線治療
等他の治療法と併用することもできる。

【００１１】本発明薬剤を上記の疾患の治療、処置等に
用いる場合、ＭＴＲの投与経路、投与量及び投与スケジ
ュール等は、患者の性別や体重、疾患の種類、症状の軽
量、剤形、医師の診断等を勘案して適宜選択することが
できる。

【００１２】例えば、ＭＴＲの投与経路としては、経
口、経直腸、非経口（例えば、静脈内投与、筋肉内投
与、皮下投与など）等が挙げられ、また、ＭＴＲの投与
量は、投与経路、投与時間、併用薬剤、患者又はその病
気の程度に応じて異なることは勿論であるが、通常、経
口投与で０.０５〜５００ｍｇ／ｋｇ ｂｏｄｙ／ｄａ
ｙ、好ましくは０.１〜２００ｍｇ／ｋｇ ｂｏｄｙ／ｄ
ａｙの範囲内であり、静脈内投与で０.０２〜２００ｍ
ｇ／ｋｇ ｂｏｄｙ／ｄａｙ、好ましくは０.０５〜１０
０ｍｇ／ｋｇ ｂｏｄｙ／ｄａｙの範囲内が適当であ
る。

【００１３】本発明薬剤は、有効成分であるＭＴＲの含
有量を剤形によって適当に変更することができるが、例
えば、薬剤の全重量に基づいて０.１〜９０重量％の範
囲内でＭＴＲを含有することが好ましい。

【００１４】また、該薬剤は、製薬学的に許容し得る担
体もしくは希釈剤と組合わせて投与単位形態に製剤化す
ることができ、その剤形は適宜に選択できる。

【００１５】例えば、経口投与製剤に調製する場合は、
錠剤、顆粒剤、散剤、カプセル剤、コーティング剤、液
剤、懸濁剤等に調製し、非経口投与製剤にする場合は、
注射剤、点滴剤、座薬等に調製することができる。

【００１６】製剤化の方法はそれ自体よく知られてお
り、例えば、ＭＴＲと製薬学的に許容し得る担体もしく
は希釈剤、更には、安定剤その他所望の添加剤を配合
し、所望の剤形とすることができる。

【００１７】使用しうる担体もしくは希釈剤は、例え
ば、エステル類、ポリエチレングリコール誘導体、ソル
ビタン脂肪酸エステル類、硫酸化脂肪アルコール類等の
界面活性剤；アラビヤガム、ゼラチン、ソルビット、ト
ラガカントガム、ポリビニルピロリドン等の結合剤；蔗
糖、澱粉類、乳糖、ブドウ糖、デキストリン、結晶セル
ロース、マンニット、ソルビット、軽質無水ケイ酸、ア
ルミン酸マグネシウム、メタケイ酸アルミン酸マグネシ
ウム、合成ケイ酸アルミニウム、炭酸カルシウム、炭酸
水素ナトリウム、リン酸水素カルシウム、カルボキシメ
チルセルロースナトリウム等の賦形剤；ステアリン酸マ
グネシウム、タルク、硬化油等の滑沢剤；食塩、サッカ
リンオレンジ油、カンゾウエキス、クエン酸、メン−ト
ール、ユーカリ油、リンゴ酸等の矯味剤；ココナッツ
油、オリーブ油、ゴマ油、落花生油、乳酸カルシウム、
ベニバナ油、大豆リン脂質等の懸濁剤；酢酸フタル酸セ
ルロースなどのセルロース、糖類等の炭水化物誘導体、
アクリル酸メチルメタアクリル酸共重合体、メタアクリ
ル酸メチルメタアクリル酸共重合体等のアクリル酸系共
重合体、ポリビニル誘導体その他の被膜形成剤又はコー
ティング助剤；等が挙げられる。

【００１８】なお、粘膜適用の製剤、特に座剤を調製す
る場合には、基剤としてカカオ脂、ラウリン脂、ポリエ
チレングリコール、グリセロゼラチン、ステアリン酸ナ
トリウム又はそれらの混合物が用いられる。

【００１９】更に、注射剤も慣用の方法によって調製す
ることができるが、その際に用いうる担体もしくは希釈
剤としては、注射用蒸留水が一般に使用されるが、懸濁
あるいは乳化させる場合は、懸濁剤としてソルビットシ
ロップ、メチルセルロース、ゼラチン、ヒドロキシエチ
ルセルロース、ステアリン酸アルミニウムルゲル等が使
用でき、また、乳化剤としてモノオレイン酸ソルビタ
ン、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油、レシチン等を使
用することができる。

【００２０】本発明のＭＴＲを有効成分として含有する
薬剤は、下記の試験例から明らかなように、優れた抗癌
作用及び免疫賦活作用を有しており、従って、本発明薬
剤は、人または人以外の動物（例えば、家畜、犬、猫、
ウサギ、ラット、家禽など）に投与することにより、前
述した如き疾患の治療、処置のために有利に使用するこ
とができる。

【００２１】以下、本発明薬剤の有効性を試験例によっ
てさらに具体的に説明する。

【００２２】

【試験例】試験例１ ：エールリッヒ癌に対する抗腫瘍効果（腹腔内
投与） エールリッヒ癌細胞５×１０⁶個をＩＣＲ−ＪＣＬ系雄
性マウスの鼠径部皮下に移植し、移植２４時間後からＭ
ＴＲ １０ｍｇ／ｋｇを１日１回２０日間連続して腹腔
内に投与し、３５日目に腫瘍を摘出し、その重量を測定
し、次式により腫瘍抑制率を求めた。

【００２３】

【数１】

【００２４】

【表１】 ＭＴＲ腹腔内投与で、腫瘍抑制率は７５％と効果が認め
られた。

【００２５】試験例２：エールリッヒ癌に対する抗腫瘍
効果（経口投与） エールリッヒ癌細胞５×１０⁶個をＩＣＲ−ＪＣＬ系雄
性マウスの鼠径部皮下に移植し、移植２４時間後からＭ
ＴＲ ２５ｍｇ／ｋｇを１日１回２０日間連続して経口
投与し、３５日目に腫瘍を摘出し、その重量を測定し、
試験例１と同様にして腫瘍抑制率を求めた。

【００２６】

【表２】 ＭＴＲ経口投与で腫瘍抑制率は７１％と効果が認められ
た。

【００２７】試験例３：Meth-A fibrosarcoma に対する
抗腫瘍効果（静脈内投与） Meth-A fibrosarcoma 細胞２５×１０³個をＢＡＬＢ／
ｃ系雌性マウスの鼠径部皮下に移植し、移植２４時間後
からＭＴＲ １０ｍｇ／ｋｇを隔日に１０回静脈内投与
した。判定は移植後６０日目に腫瘍の有無を調べ、治癒
例数の発現率により行った。

【００２８】

【表３】 治癒例数をｘ²検定し、ＭＴＲに有意（Ｐ＜０.０５）な
腫瘍の治癒効果が認められた。

【００２９】試験例４：Meth-A fibrosarcoma に対する
抗腫瘍効果（腹腔内投与） Meth-A fibrosarcoma 細胞２５×１０³個をＢＡＬＢ／
ｃ系雌性マウスの鼠径部皮下に移植し、移植２４時間後
からＭＴＲ １０ｍｇ／ｋｇを連日２０日間腹腔内に投
与した。判定は、試験例３と同様にして６０日目の治癒
例数の発現率により行った。

【００３０】

【表４】 治癒例数をｘ²検定し、ＭＴＲに有意（Ｐ＜０.０５）な
治癒効果が認められた。

【００３１】試験例５：ザルコーマ−１８０腹水腫瘍に
対するＭＭＣとの併用効果 ザルコーマ−１８０腫瘍細胞５×１０⁶個をＩＣＲ−Ｊ
ＣＬ系雌性マウスの腹腔内に移植し、移植２４時間後に
ＭＭＣを１.０、２.５又は１０.０ｍｇ／ｋｇ、そして
ＭＴＲは移植２４時間後から１日１回連続１０日間、１
０ｍｇ／ｋｇを腹腔内投与した。

【００３２】移植後６０日間にわたって生死を観察し、
平均生存日数及び延命率を求めた。

【００３３】

【数２】

【００３４】

【表５】 ＭＭＣとの併用効果は大きく、延命率はＭＭＣ各投与群
で９５，１７３及び８７％であるのに対し、ＭＴＲ １
０ｍｇ／ｋｇ併用群では１４６，２５９及び３０８％と
併用効果が認められた。

【００３５】試験例６：Meth-A fibrosarcoma に対する
Adriamycin（ＡＤＭ）との併用効果 Meth-A fibrosarcoma 細胞１×１０⁶個をＢＡＬＢ／ｃ
系雌性マウスの腹腔内に移植し、移植３日後にＡＤＭ
０.１ｍｇ／ｋｇを腹腔内に投与した。

【００３６】ＭＴＲは移植後４日目から連日１０日間、
１０ｍｇ／ｋｇまたは５０ｍｇ／ｋｇを腹腔内に投与し
た。移植後６０日間にわたって生死を観察し、平均生存
日数及び延命率を求めた。

【００３７】

【表６】 延命率は、ＡＤＭ単独投与群で４６％であるのに対し、
ＭＴＲ併用群ではそれぞれ６１％及び６８％と併用効果
が認められた。

【００３８】試験例７：ザルコーマ−１８０腹水腫瘍に
対する５−フルオロウラシル（５−ＦＵ）との併用効果 ザルコーマ−１８０腫瘍細胞５×１０⁶個をＩＣＲ−Ｊ
ＣＬ系雌性マウスの腹腔内に移植し、移植２４時間後か
らＭＴＲ５０ｍｇ／ｋｇを毎日１回連続１０日間経口投
与した。５−ＦＵは移植後３日目及び７日目に４０ｍｇ
／ｋｇ腹腔内に投与した。移植後６０日間にわたって生
死を観察し、平均生存日数及び延命率を求めた。

【００３９】

【表７】 延命率は、５−Ｆｕ単独投与で８６％であるのに対し、
ＭＴＲ併用では１２２％と、併用効果が認められた。

【００４０】試験例８：Ｌ１２１０ leukemia に対する
各種制癌剤との併用効果 Ｌ１２１０ leukemia 細胞１×１０⁶個をＢＤＦ₁系雌性
マウスの腹腔内に移植し、移植２４時間後から、ＭＭＣ
０.５ｍｇ／ｋｇ、５−ＦＵ ５.６ｍｇ／ｋｇ及び Cyt
osine Arabinoside（Ａｒａ−Ｃ）５.０ｍｇ／ｋｇを隔
日に５回腹腔内に投与した。（ＭＦＣ群） ＭＴＲは１０ｍｇ／ｋｇを移植２４時間後から隔日に１
０回静脈内投与した。移植後６０日間にわたって生死を
観察し、平均生存日数及び延命率を求めた。

【００４１】

【表８】 延命率は、ＭＦＣ群では約３４８％となったが、ＭＴＲ
を併用すると、４７８％と更に延長された。

【００４２】試験例９：リンパ球の運動性に及ぼす影響 Boyden の方法により、上室にリンパ球、人工血液、Ｍ
ＴＲ（５ｍｇ／ｍｌ）の混合液を入れ、下室には上室の
液からリンパ球を除いた液を満たし、３７℃５５分間反
応させ、上室及び下室のリンパ球数を測定し、Migratio
n index を求めた。

【００４３】

【数３】

【００４４】

【表９】 上記の結果から明らかなように、ＭＴＲはリンパ球の運
動性を活発にする作用を示した。

【００４５】試験例１０：白血球とリンパ球の減少防止
作用 wistar 系雄性ラットにマイトマイシンＣ（ＭＭＣ）２
ｍｇ／ｋｇを１回腹腔内投与し、その日を０日目とし、
０、１、３、５及び７日目にＭＴＲを１０ｍｇ／ｋｇ腹
腔内投与した。これらラットにつき、０、２、４、６及
び８日目に採血し、白血球数とリンパ球数を測定した。

【００４６】

【表１０】 上記の結果から明らかなように、ＭＴＲはＭＭＣ投与に
より発現する白血球とリンパ球の減少を防止する作用を
示す。

【００４７】試験例１１：リンパ球賦活作用 ＢＡＬＢ／ｃ系雄性マウスにＭＭＣ ３ｍｇ／ｋｇを腹
腔内投与し、その直後にＭＴＲを２０又は５０ｍｇ／ｋ
ｇ腹腔内投与した。その４日後に採血し、Ｔリンパ球を
分離し、フイトヘモアグルニチン（ＰＨＡ）又はコンカ
ナバリンＡ（ＣｏｎＡ）により刺激し、Ｔリンパ球の活
性をＨ³ラベルチミジンのＤＮＡへの取り込みによって
測定した。

【００４８】

【表１１】 上記の結果によれば、ＭＭＣ投与により、Ｔリンパ球の
活性は大幅に低下するが、ＭＴＲを投与することによ
り、その低下は有意に抑制されることがわかる。 試験例１２ ：免疫低下マウスに対する作用 ５週齢のＩＣＲ−ＪＣＬ系雄性マウス１群１２匹を用
い、免疫低下群にはシクロホスフアミド（ＣＰＡ）を２
０ｍｇ／ｋｇを、また、正常群には生理食塩水を１日１
回連続２日間経口投与し、その直後にＳＲＢＣ １０⁸個
を静脈内注射し、続けてＭＴＲを１日１回連続４日間腹
腔内投与した。ＭＴＲの最終投与の翌日脾臓を摘出し、
ＰＦＣの数を測定した。

【００４９】

【表１２】 ＭＴＲは正常動物の免疫機能に対しては作用を示さない
が、低下した免疫機能を正常に戻す作用が認められた。

【００５０】試験例１３：Candida 感染マウスにおける
ＭＴＲの延命効果 ８週齢のＩＣＲ系雄性マウスを１群１０匹、３群用意
し、各マウスにエンドキサン２００ｍｇ／ｋｇを腹腔内
投与した。エンドキサン投与の翌日からＭＴＲ２５又は
５０ｍｇ／ｋｇを１日１回連続２０日間腹腔内投与し
た。対照群には生理食塩水０.１ｍｌ／マウスを同様に
投与した。また、エンドキサン投与１１日目に Candida
albica を６.０×１０ ＣＦＵ／マウス静脈内投与して
感染させた。感染後１０日目までの生存マウス数により
延命効果を求めた。

【００５１】

【表１３】 対照群マウスでは Candida albican 感染後１０日目ま
でに全例死亡したが、ＭＴＲの２５及び５０ｍｇ／ｋｇ
投与群では６匹及び全例生存し、延命効果が認められ
た。

【００５２】製剤例１ 錠剤 下記成分を混合し、湿式法によって顆粒状としたのち、
圧縮打錠し錠剤とする。

【００５３】 ＭＴＲ ５０部 乳糖 ２５部 ポリビニルピロリドン １０部 タルク １０部 澱粉 ５部製剤例２ 散剤 下記成分をよく混合して散剤とする。

【００５４】 ＭＴＲ ５０部 メタケイ酸アルミン酸マグネシウム １０部 乳糖 ４０部製剤例３ カプセル剤 下記成分をよく混合し、カプセルに充填して経口用カプ
セル剤とする。

【００５５】 ＭＴＲ ７５部 ステアリン酸マグネシウム ５部 乳糖 ２０部製剤例４ シロップ剤 下記成分を精製水に溶解し全量を１００部（容量）とし
てシロップ剤とする。 ＭＴＲ ２部 白糖 １５部製剤例５ 注射剤 下記成分を注射用蒸留水に溶解し全量を１００部（容
量）とする。得られた溶液をメンブランフィルターにて
除菌濾過した後、アンプルに充填して注射剤とする。

【００５６】 ＭＴＲ ５部 ブドウ糖 ５部

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 長江 英夫 愛知県春日井市東野町２−８−７ (72)発明者 広瀬 公男 岐阜県岐阜市粟野西１−433 (72)発明者 棚橋 英治 愛知県海部郡蟹江町源氏２−25 (72)発明者 山下 泰治 三重県津市高茶屋小森町2779−３

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ５−デオキシ−５−メチルチオリボース
   を有効成分として含有することを特徴とする抗癌剤及び
   免疫賦活剤。