JPH05153861A - Ｖａ菌根菌製剤の製造方法 - Google Patents
Ｖａ菌根菌製剤の製造方法Info
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- JPH05153861A JPH05153861A JP34847191A JP34847191A JPH05153861A JP H05153861 A JPH05153861 A JP H05153861A JP 34847191 A JP34847191 A JP 34847191A JP 34847191 A JP34847191 A JP 34847191A JP H05153861 A JPH05153861 A JP H05153861A
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- Japan
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- mycorrhizal
- soil
- mycorrhizal fungi
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Abstract
(57)【要約】
【構成】 ＶＡ菌根菌含有用土を減圧乾燥処理すること
を特徴とするＶＡ菌根菌製剤の製造方法。 【効果】 本発明の方法によれば、減圧乾燥を行なって
いるため、ＶＡ菌根菌の活性を長期間維持したＶＡ菌根
菌製剤を製造することができる。従って、本発明の方法
で得られるＶＡ菌根菌製剤は、乾燥下で長期保存しても
活性が保持でき、農業，園芸業等の分野で有効に用いる
ことができる。
を特徴とするＶＡ菌根菌製剤の製造方法。 【効果】 本発明の方法によれば、減圧乾燥を行なって
いるため、ＶＡ菌根菌の活性を長期間維持したＶＡ菌根
菌製剤を製造することができる。従って、本発明の方法
で得られるＶＡ菌根菌製剤は、乾燥下で長期保存しても
活性が保持でき、農業，園芸業等の分野で有効に用いる
ことができる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、ＶＡ菌根菌の菌糸や胞
子を活性を落とさずに乾燥し、活性の高いＶＡ菌根菌製
剤を製造する方法に関するものである。
子を活性を落とさずに乾燥し、活性の高いＶＡ菌根菌製
剤を製造する方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術及び発明が解決しようとする課題】ＶＡ菌
根菌（Vesicular Arbuscular Mycorrhizae )は種々の作
物に感染して、生長促進や植物の耐病性を向上させるこ
とが知られている（「農業及び園芸」，第６２巻，第８
号，９３０〜９３７頁，１９８７年；「植物防疫」，第
４２巻，第５号，２５９〜２６６頁，１９８８年）。し
かしながら、ＶＡ菌根菌の大量培養は非常に難しく、ま
た培養した菌糸を有効に保存する方法がないために、こ
れまでは産業的に充分に利用されるまでに至っていな
い。
根菌（Vesicular Arbuscular Mycorrhizae )は種々の作
物に感染して、生長促進や植物の耐病性を向上させるこ
とが知られている（「農業及び園芸」，第６２巻，第８
号，９３０〜９３７頁，１９８７年；「植物防疫」，第
４２巻，第５号，２５９〜２６６頁，１９８８年）。し
かしながら、ＶＡ菌根菌の大量培養は非常に難しく、ま
た培養した菌糸を有効に保存する方法がないために、こ
れまでは産業的に充分に利用されるまでに至っていな
い。
【０００３】そのため、顆粒状担体にＶＡ菌根菌の胞子
を結合させ、一定の乾燥操作を行なうことにより、室温
での保存性を向上させる方法が提案されている（特開平
１−１６５３６９号公報）。しかしながら、この方法は
操作が煩雑であるという欠点があった。
を結合させ、一定の乾燥操作を行なうことにより、室温
での保存性を向上させる方法が提案されている（特開平
１−１６５３６９号公報）。しかしながら、この方法は
操作が煩雑であるという欠点があった。
【０００４】一方、微生物を保存する方法としては、液
体窒素を用いたり、−８０℃の超低温条件下で保存する
方法が一般に行われている。しかしながら、ＶＡ菌根菌
は０℃以下の温度に暫く置くと死滅するため、低温での
保存が難しいという欠点があった。さらに、ＶＡ菌根菌
の胞子は、凍結保存が困難であると共に、常温で保管す
ると急速に活性の低下をきたすために、従来は４〜１０
℃という低温で保管しており、低温設備を必要とするな
ど、流通面で甚だ不便であり、より簡便な方法が望まれ
ていた。
体窒素を用いたり、−８０℃の超低温条件下で保存する
方法が一般に行われている。しかしながら、ＶＡ菌根菌
は０℃以下の温度に暫く置くと死滅するため、低温での
保存が難しいという欠点があった。さらに、ＶＡ菌根菌
の胞子は、凍結保存が困難であると共に、常温で保管す
ると急速に活性の低下をきたすために、従来は４〜１０
℃という低温で保管しており、低温設備を必要とするな
ど、流通面で甚だ不便であり、より簡便な方法が望まれ
ていた。
【０００５】
【課題を解決するための手段】そこで、本発明者らは、
上記従来の問題点を解消し、ＶＡ菌根菌を安定に長期間
保存できる技術を開発すべく鋭意研究を進めた結果、予
想外にも減圧乾燥することにより、この問題を解決する
ことができることを見出し、この知見に基づいて本発明
を完成するに到った。すなわち本発明は、ＶＡ菌根菌含
有用土を減圧乾燥処理することを特徴とするＶＡ菌根菌
製剤の製造方法を提供するものである。
上記従来の問題点を解消し、ＶＡ菌根菌を安定に長期間
保存できる技術を開発すべく鋭意研究を進めた結果、予
想外にも減圧乾燥することにより、この問題を解決する
ことができることを見出し、この知見に基づいて本発明
を完成するに到った。すなわち本発明は、ＶＡ菌根菌含
有用土を減圧乾燥処理することを特徴とするＶＡ菌根菌
製剤の製造方法を提供するものである。
【０００６】本発明で用いるＶＡ菌根菌は、菌糸、胞
子、或いはこれらの混合物である。このような菌糸、胞
子、或いはこれらの混合物としては、例えば、以下のよ
うにして得られるものが用いられる。
子、或いはこれらの混合物である。このような菌糸、胞
子、或いはこれらの混合物としては、例えば、以下のよ
うにして得られるものが用いられる。
【０００７】すなわち、ＶＡ菌根菌を感染させる植物
（宿主植物）を、用土（基材）上で栽培するに際し、Ｖ
Ａ菌根菌を施用して、これにＶＡ菌根菌を感染させ、宿
主植物の生長と共に伸長した菌糸を用いたり、或いは胞
子形成を誘導し、得られた胞子を用いたりしてもよい
し、さらにはこの胞子を回収して用いてもよい。
（宿主植物）を、用土（基材）上で栽培するに際し、Ｖ
Ａ菌根菌を施用して、これにＶＡ菌根菌を感染させ、宿
主植物の生長と共に伸長した菌糸を用いたり、或いは胞
子形成を誘導し、得られた胞子を用いたりしてもよい
し、さらにはこの胞子を回収して用いてもよい。
【０００８】ここでＶＡ菌根菌について述べると、ＶＡ
菌根菌は、土壌中に存在する接合菌の一種であり、その
菌糸が様々な植物の根について菌根を形成し、両者が共
生することが知られている。本発明において用いるＶＡ
菌根菌としては、種々のものがあり、例えばグロムス
（ Glomus ) 属，スカテロスポラ（ Scutellospora )
属，ギガスポラ ( Gigaspora )属, アカウロスポラ（ A
caulospora )属, エントロフォスポラ（ Entrophospora
)属, スクレロシスティス（ Sclerocystis ) 属などに
属する微生物がある。特にグロムス（ Glomus ) 属，ス
カテロスポラ（ Scutellospora )属, ギガスポラ ( Gig
aspora )属等に属するＶＡ菌根菌が好適である。
菌根菌は、土壌中に存在する接合菌の一種であり、その
菌糸が様々な植物の根について菌根を形成し、両者が共
生することが知られている。本発明において用いるＶＡ
菌根菌としては、種々のものがあり、例えばグロムス
（ Glomus ) 属，スカテロスポラ（ Scutellospora )
属，ギガスポラ ( Gigaspora )属, アカウロスポラ（ A
caulospora )属, エントロフォスポラ（ Entrophospora
)属, スクレロシスティス（ Sclerocystis ) 属などに
属する微生物がある。特にグロムス（ Glomus ) 属，ス
カテロスポラ（ Scutellospora )属, ギガスポラ ( Gig
aspora )属等に属するＶＡ菌根菌が好適である。
【０００９】より具体的には、例えば、グロムス・モセ
アエ（ Glomusmosseae )，グロムス・ファシキュレータ
ム（ Glomus fasciculatum ），グロムス・イントララ
ディセス（ Glomus intraradicies ），グロムス・カレ
ドニウム（ Glomus caledonium ) ，ギガスポラ・マル
ガリタ（ Gigaspora margarita ),スカテロスポラ・グ
レガリア（ Scutellospora gregaria )などを挙げるこ
とができる。
アエ（ Glomusmosseae )，グロムス・ファシキュレータ
ム（ Glomus fasciculatum ），グロムス・イントララ
ディセス（ Glomus intraradicies ），グロムス・カレ
ドニウム（ Glomus caledonium ) ，ギガスポラ・マル
ガリタ（ Gigaspora margarita ),スカテロスポラ・グ
レガリア（ Scutellospora gregaria )などを挙げるこ
とができる。
【００１０】本発明で用いるＶＡ菌根菌の菌糸、胞子、
或いはこれらの混合物（菌糸など）は、上記のように、
ＶＡ菌根菌を感染させる植物（宿主植物）を、用土（基
材）上で栽培するに際し、ＶＡ菌根菌を施用して、これ
にＶＡ菌根菌を感染させ、宿主植物の生長と共に伸長し
た菌糸などである。最初に施用するＶＡ菌根菌は、天然
界から集める（鈴木達彦，ＶＡ菌根に関する諸問題５，
農業および園芸，第６２巻，第３号，ｐ２８〜３３，１
９８７）他、栄養薄膜培養法（特開昭５５−１１８３９
０号公報）や器官培養した根を使用する方法（特公昭６
２−４９０３７号公報）等により増殖させたものを用い
ることができる。なお、グロムス・イントララディセス
は、米国ＮＰＩ社よりＮｕｔｒｉ−Ｌｉｎｋ（商標名）
として販売されている。
或いはこれらの混合物（菌糸など）は、上記のように、
ＶＡ菌根菌を感染させる植物（宿主植物）を、用土（基
材）上で栽培するに際し、ＶＡ菌根菌を施用して、これ
にＶＡ菌根菌を感染させ、宿主植物の生長と共に伸長し
た菌糸などである。最初に施用するＶＡ菌根菌は、天然
界から集める（鈴木達彦，ＶＡ菌根に関する諸問題５，
農業および園芸，第６２巻，第３号，ｐ２８〜３３，１
９８７）他、栄養薄膜培養法（特開昭５５−１１８３９
０号公報）や器官培養した根を使用する方法（特公昭６
２−４９０３７号公報）等により増殖させたものを用い
ることができる。なお、グロムス・イントララディセス
は、米国ＮＰＩ社よりＮｕｔｒｉ−Ｌｉｎｋ（商標名）
として販売されている。
【００１１】本発明においては、用土（基材）の上で植
物を栽培し、該植物の根を用いて上記の如きＶＡ菌根菌
を増殖させて得たＶＡ菌根菌の菌糸や胞子を使用するこ
とができる。すなわち、用土（基材）の上で上記の如き
ＶＡ菌根菌を感染させた植物を栽培し、ＶＡ菌根菌を増
殖させ、得られたＶＡ菌根菌の菌糸や胞子を使用するわ
けである。
物を栽培し、該植物の根を用いて上記の如きＶＡ菌根菌
を増殖させて得たＶＡ菌根菌の菌糸や胞子を使用するこ
とができる。すなわち、用土（基材）の上で上記の如き
ＶＡ菌根菌を感染させた植物を栽培し、ＶＡ菌根菌を増
殖させ、得られたＶＡ菌根菌の菌糸や胞子を使用するわ
けである。
【００１２】ここでＶＡ菌根菌を感染させる植物、すな
わちＶＡ菌根菌培養のための宿主植物としては、生長が
速く、根がよく張る植物であって、かつ、ＶＡ菌根菌が
感染しやすい植物であれば特に制限はなく、例えば実生
苗、播種して育苗後、移植して栽培するもの、栄養繁殖
させるもの、挿し芽，挿し木，接ぎ木，球根等により増
殖，栽培されるものがある。
わちＶＡ菌根菌培養のための宿主植物としては、生長が
速く、根がよく張る植物であって、かつ、ＶＡ菌根菌が
感染しやすい植物であれば特に制限はなく、例えば実生
苗、播種して育苗後、移植して栽培するもの、栄養繁殖
させるもの、挿し芽，挿し木，接ぎ木，球根等により増
殖，栽培されるものがある。
【００１３】これらの植物は、具体的には大豆，カラス
ノエンドウ，アルファルファ，クローバーなどの豆科植
物、メヒシバ，ムギ，トウモロコシ，ソルゴー（別名ソ
ルガム又はモロコシ），芝草などのイネ科植物、ナス，
ピーマン，トマト，ジャガイモなどのナス科植物、ネ
ギ，玉ネギなどのユリ科植物等がある。
ノエンドウ，アルファルファ，クローバーなどの豆科植
物、メヒシバ，ムギ，トウモロコシ，ソルゴー（別名ソ
ルガム又はモロコシ），芝草などのイネ科植物、ナス，
ピーマン，トマト，ジャガイモなどのナス科植物、ネ
ギ，玉ネギなどのユリ科植物等がある。
【００１４】さらに、植物にＶＡ菌根菌を感染させる場
合に用いる用土（基材）としては、植物が生長する用土
（基材）ならば特に制限はないが、無機質であり、か
つ、水を含むことにより崩壊しにくいもの、例えば土、
砂，（焼成）赤玉土，鹿沼土，ゼオライト，バーライ
ト，バーミキュライト，（焼成）珪藻土などの他、腐葉
土，軽石，石炭灰，コークス，貝がら、石灰岩などを用
いることが好ましい。
合に用いる用土（基材）としては、植物が生長する用土
（基材）ならば特に制限はないが、無機質であり、か
つ、水を含むことにより崩壊しにくいもの、例えば土、
砂，（焼成）赤玉土，鹿沼土，ゼオライト，バーライ
ト，バーミキュライト，（焼成）珪藻土などの他、腐葉
土，軽石，石炭灰，コークス，貝がら、石灰岩などを用
いることが好ましい。
【００１５】ＶＡ菌根菌は、上記の如き宿主植物の発根
前或いは発根後に、用土（基材）に施用すればよい。植
物は播種，挿し木，挿し芽，接木，球根，植物組織など
様々な態様で用土に植えられるが、ＶＡ菌根菌は植物を
植えつける前、或いは植えつけと同時に施用され、具体
的には用土と混合したり、種，芽等の下に層状に施用し
たり、定植時の植穴中に施用することなどにより行われ
る。また、植物が移植により栽培するものであるとき
は、移植時に施用することも可能である。ＶＡ菌根菌の
植物への感染は、既知の手法により行えばよく、例えば
温度５〜６０℃、好ましくは１０〜４０℃、土壌ｐＨ４
〜９．５、好ましくは４．５〜８の条件で行なわれる。
前或いは発根後に、用土（基材）に施用すればよい。植
物は播種，挿し木，挿し芽，接木，球根，植物組織など
様々な態様で用土に植えられるが、ＶＡ菌根菌は植物を
植えつける前、或いは植えつけと同時に施用され、具体
的には用土と混合したり、種，芽等の下に層状に施用し
たり、定植時の植穴中に施用することなどにより行われ
る。また、植物が移植により栽培するものであるとき
は、移植時に施用することも可能である。ＶＡ菌根菌の
植物への感染は、既知の手法により行えばよく、例えば
温度５〜６０℃、好ましくは１０〜４０℃、土壌ｐＨ４
〜９．５、好ましくは４．５〜８の条件で行なわれる。
【００１６】このようにして、宿主植物に施用するＶＡ
菌根菌は、植物に対して感染できる程度の量を用いれば
よいが、通常、１植物体に対して、１０〜２０００個の
胞子を投与すればよい。このようにしてＶＡ菌根菌の感
染した植物を栽培し、該植物の根を用いてＶＡ菌根菌を
増殖させる。すなわち、植物根にＶＡ菌根菌を共生させ
て、該植物を栽培することにより、ＶＡ菌根菌を増殖さ
せる。宿主植物の生長につれて、ＶＡ菌根菌の菌糸も伸
長する。本発明においては、このようにして伸長したＶ
Ａ菌根菌の菌糸を用いてもよいが、通常、１．５〜７ケ
月程度経過して、宿主植物が充分に生育したところで、
水等の供給を絶ち、暫く放置すると、ＶＡ菌根菌は胞子
を形成するため、ＶＡ菌根菌の胞子を形成した栽培土壌
から、ＶＡ菌根菌を分離，回収して、ＶＡ菌根菌製剤と
して用いてもよい。しかし、そのまま分離し、放置する
と、菌糸が活性を失ったり、胞子が不安定となる。そこ
で、以下の処理を行なう。
菌根菌は、植物に対して感染できる程度の量を用いれば
よいが、通常、１植物体に対して、１０〜２０００個の
胞子を投与すればよい。このようにしてＶＡ菌根菌の感
染した植物を栽培し、該植物の根を用いてＶＡ菌根菌を
増殖させる。すなわち、植物根にＶＡ菌根菌を共生させ
て、該植物を栽培することにより、ＶＡ菌根菌を増殖さ
せる。宿主植物の生長につれて、ＶＡ菌根菌の菌糸も伸
長する。本発明においては、このようにして伸長したＶ
Ａ菌根菌の菌糸を用いてもよいが、通常、１．５〜７ケ
月程度経過して、宿主植物が充分に生育したところで、
水等の供給を絶ち、暫く放置すると、ＶＡ菌根菌は胞子
を形成するため、ＶＡ菌根菌の胞子を形成した栽培土壌
から、ＶＡ菌根菌を分離，回収して、ＶＡ菌根菌製剤と
して用いてもよい。しかし、そのまま分離し、放置する
と、菌糸が活性を失ったり、胞子が不安定となる。そこ
で、以下の処理を行なう。
【００１７】すなわち、本発明では、ＶＡ菌根菌含有用
土、換言すればＶＡ菌根菌の菌糸や胞子、或いはこれら
を含む根や用土を、減圧下に乾燥する。この場合、ＶＡ
菌根菌含有用土は、乾燥させない程度まで予め水分を減
らしておくことが好ましい。実際にはＶＡ菌根菌製剤を
製造する最終段階で、植物への灌水を停止することなど
の操作を行なうことで充分に目的を達し得る。ここで水
分が多いと、乾燥までに時間がかかり、また、減圧条件
下では、水の気化熱によりＶＡ菌根菌含有用土が凍る危
険が高いからである。この減圧乾燥では、少なくとも８
０ｍｍＨｇ・ａｂｓ．（絶対圧）以下、好ましくは３０
ｍｍＨｇ・ａｂｓ．以下の真空度で乾燥する。また、減
圧容器内の温度は５０℃を超えないように維持すること
が好ましい。さらに、乾燥開始時或いは乾燥中に窒素ガ
ス等の不活性ガスで容器内をパージすれば、より保存性
のよいものができる。
土、換言すればＶＡ菌根菌の菌糸や胞子、或いはこれら
を含む根や用土を、減圧下に乾燥する。この場合、ＶＡ
菌根菌含有用土は、乾燥させない程度まで予め水分を減
らしておくことが好ましい。実際にはＶＡ菌根菌製剤を
製造する最終段階で、植物への灌水を停止することなど
の操作を行なうことで充分に目的を達し得る。ここで水
分が多いと、乾燥までに時間がかかり、また、減圧条件
下では、水の気化熱によりＶＡ菌根菌含有用土が凍る危
険が高いからである。この減圧乾燥では、少なくとも８
０ｍｍＨｇ・ａｂｓ．（絶対圧）以下、好ましくは３０
ｍｍＨｇ・ａｂｓ．以下の真空度で乾燥する。また、減
圧容器内の温度は５０℃を超えないように維持すること
が好ましい。さらに、乾燥開始時或いは乾燥中に窒素ガ
ス等の不活性ガスで容器内をパージすれば、より保存性
のよいものができる。
【００１８】このようにして得られた、ＶＡ菌根菌の菌
糸，胞子、或いはこれらを含む根や用土（ＶＡ菌根菌含
有用土）から、或いは必要に応じてこれを粉砕して、Ｖ
Ａ菌根菌製剤を得る。ＶＡ菌根菌の菌糸や胞子などを含
む根や用土を粉砕する場合には、減圧乾燥する前と減圧
乾燥後の２通りあるが、乾燥前に粉砕すると菌糸の切断
により、菌体中の原形質が流失し易いため、ある程度乾
燥するか、或いは完全に乾燥してから粉砕する方法が好
ましい。以上のようにして、目的とするＶＡ菌根菌製剤
を得ることができる。
糸，胞子、或いはこれらを含む根や用土（ＶＡ菌根菌含
有用土）から、或いは必要に応じてこれを粉砕して、Ｖ
Ａ菌根菌製剤を得る。ＶＡ菌根菌の菌糸や胞子などを含
む根や用土を粉砕する場合には、減圧乾燥する前と減圧
乾燥後の２通りあるが、乾燥前に粉砕すると菌糸の切断
により、菌体中の原形質が流失し易いため、ある程度乾
燥するか、或いは完全に乾燥してから粉砕する方法が好
ましい。以上のようにして、目的とするＶＡ菌根菌製剤
を得ることができる。
【００１９】
【実施例】次に本発明を実施例により詳しく説明する。
【００２０】実施例１および比較例１，２ １ｍ×２ｍ×３０ｃｍのプラスチック製のコンテナー
に、粒径１〜７ｍｍの珪藻土を２５ｃｍの厚さに敷きつ
めた。なお、珪藻土には１リットル当り３ｇの緩効性肥
料オスモコートを混合した。次に、ＶＡ菌根菌〔グロム
ス・モセアエ（ Glomus mosseae ）〕（なお、本菌は工
業技術院微生物工業技術研究所において受託拒否され
た。）の胞子を、１ｇ当り６４０含む珪藻土５００ｇを
表面に均一に播いた。この上にスーダングラスの種子６
００粒を撒き、さらに珪藻土を５ｃｍの厚さに敷き、適
宜灌水を行ないながら、７０日間栽培を続けた。この状
態では胞子は形成されていなかった。その後、スーダン
グラスの地上部の下から２ｃｍの所から切除し、珪藻土
と根を取り出した。この珪藻土を網底のプラスチックバ
ットに２ｋｇづつ入れ、第１表に示す３つの方法〔減圧
乾燥（実施例１），凍結乾燥（比較例１），通風乾燥
（比較例２）〕で乾燥した。乾燥が終了した後、乾燥処
理物を目開き５ｍｍの篩で篩い、根と珪藻土を分離し
た。分離した根は裁断機にて１〜５ｍｍの長さに切り、
再び珪藻土と混合した。この混合物（ＶＡ菌根菌製剤）
を用いて植物への感染力試験を行なった。結果を以下
に、応用例および比較応用例として示す。
に、粒径１〜７ｍｍの珪藻土を２５ｃｍの厚さに敷きつ
めた。なお、珪藻土には１リットル当り３ｇの緩効性肥
料オスモコートを混合した。次に、ＶＡ菌根菌〔グロム
ス・モセアエ（ Glomus mosseae ）〕（なお、本菌は工
業技術院微生物工業技術研究所において受託拒否され
た。）の胞子を、１ｇ当り６４０含む珪藻土５００ｇを
表面に均一に播いた。この上にスーダングラスの種子６
００粒を撒き、さらに珪藻土を５ｃｍの厚さに敷き、適
宜灌水を行ないながら、７０日間栽培を続けた。この状
態では胞子は形成されていなかった。その後、スーダン
グラスの地上部の下から２ｃｍの所から切除し、珪藻土
と根を取り出した。この珪藻土を網底のプラスチックバ
ットに２ｋｇづつ入れ、第１表に示す３つの方法〔減圧
乾燥（実施例１），凍結乾燥（比較例１），通風乾燥
（比較例２）〕で乾燥した。乾燥が終了した後、乾燥処
理物を目開き５ｍｍの篩で篩い、根と珪藻土を分離し
た。分離した根は裁断機にて１〜５ｍｍの長さに切り、
再び珪藻土と混合した。この混合物（ＶＡ菌根菌製剤）
を用いて植物への感染力試験を行なった。結果を以下
に、応用例および比較応用例として示す。
【００２１】応用例１および比較応用例１，２（ネギへ
の感染） 赤玉土，腐葉土，ピートモスを、３：３：１（重量比）
の割合で混合した用土をクロルピクリンで消毒し、充分
にガス抜きを行なった。この用土１００ｇ当たり、１ｇ
の割合で、実施例１および比較例１，２で得られたＶＡ
菌根菌製剤を混合した後、４×４×４ｃｍのプラスチッ
クポット２０個に詰め、これに予め発芽させておいたネ
ギの種子３粒を播いた。このプラスチックポットを２５
℃の人工気象器の中に入れ、１００００ルクスの照明を
用いて、明（１００００ルクス）１４時間，暗（０ルク
ス）１０時間のサイクルで４０日間栽培した。栽培期間
中は灌水を適宜行なった。その後ネギを取り上げ、下記
の方法で感染率を測定した。結果を第１表に示す。
の感染） 赤玉土，腐葉土，ピートモスを、３：３：１（重量比）
の割合で混合した用土をクロルピクリンで消毒し、充分
にガス抜きを行なった。この用土１００ｇ当たり、１ｇ
の割合で、実施例１および比較例１，２で得られたＶＡ
菌根菌製剤を混合した後、４×４×４ｃｍのプラスチッ
クポット２０個に詰め、これに予め発芽させておいたネ
ギの種子３粒を播いた。このプラスチックポットを２５
℃の人工気象器の中に入れ、１００００ルクスの照明を
用いて、明（１００００ルクス）１４時間，暗（０ルク
ス）１０時間のサイクルで４０日間栽培した。栽培期間
中は灌水を適宜行なった。その後ネギを取り上げ、下記
の方法で感染率を測定した。結果を第１表に示す。
【００２２】〔感染率の測定方法〕 まず、次の手順により、トリパンブルーを用いて染
色した。 （ア）採取した植物根を水洗いし、土を落とす。 （イ）水を切った根をビーカーに入れ、１０％ＫＯＨ溶
液に浸し、１時間弱く煮沸する。このとき、上部を覆
う。また、煮沸は湯煎でもよい。 （ウ）ＫＯＨ溶液を捨て、１０倍に薄めた過酸化水素
（約３％）液で３０分間程度漂白する。なお、根の色素
が少ないときには省略してもよい。 （エ) 下記に示す組成を有するラクトフェノール−トリ
パンブルー染色液に根を浸し、５〜３０分間弱く沸騰さ
せて染色する。 ＊ラクトフェノール−トリパンブルー染色液の組成 石炭酸( フェノール) ２００ｍｌ 蒸留水 ２００ｍｌ 乳酸 ２００ｍｌ グリセリン ４００ｍｌ トリパンブルー １ｇ 合計 １０００ｍｌ （オ）染色した根を水洗いし、染色液を洗い流す。 （カ）水を張ったシャーレに根を入れ、実体顕微鏡で観
察する。 次に、以下の如くして感染率を算出した。 １ｃｍ間隔のグリッドの上にサンプルを載せ、実体顕微
鏡によりグリッド上１００箇所の中、染色した箇所を計
数して感染率とした。
色した。 （ア）採取した植物根を水洗いし、土を落とす。 （イ）水を切った根をビーカーに入れ、１０％ＫＯＨ溶
液に浸し、１時間弱く煮沸する。このとき、上部を覆
う。また、煮沸は湯煎でもよい。 （ウ）ＫＯＨ溶液を捨て、１０倍に薄めた過酸化水素
（約３％）液で３０分間程度漂白する。なお、根の色素
が少ないときには省略してもよい。 （エ) 下記に示す組成を有するラクトフェノール−トリ
パンブルー染色液に根を浸し、５〜３０分間弱く沸騰さ
せて染色する。 ＊ラクトフェノール−トリパンブルー染色液の組成 石炭酸( フェノール) ２００ｍｌ 蒸留水 ２００ｍｌ 乳酸 ２００ｍｌ グリセリン ４００ｍｌ トリパンブルー １ｇ 合計 １０００ｍｌ （オ）染色した根を水洗いし、染色液を洗い流す。 （カ）水を張ったシャーレに根を入れ、実体顕微鏡で観
察する。 次に、以下の如くして感染率を算出した。 １ｃｍ間隔のグリッドの上にサンプルを載せ、実体顕微
鏡によりグリッド上１００箇所の中、染色した箇所を計
数して感染率とした。
【００２３】応用例２および比較応用例３（大豆への感
染） 実施例１および比較例２で得られたＶＡ菌根菌製剤をボ
ールミルに入れ、３０分間粉砕した。粉砕物を目開き
０．２５ｍｍの篩に通し、通過した粉末を用いて試験し
た。この粉末１００ｇに対し、ビニルピロリドン／酢酸
ビニルコポリマー混合物の粉末〔前者：後者＝６０：４
０（重量比）〕を混合し、さらに水３０ｍｌを加えた。
この中に大豆の種子５０粒を入れ、ＶＡ菌根菌製剤を付
着せしめ、ＶＡ菌根菌が付着した大豆の種子を得た。赤
玉土，腐葉土，ピートモスを、３：３：１（重量比）の
割合で混合した用土を、４０×２０×２０ｃｍのプラン
ターに入れ、ここにＶＡ菌根菌が付着した大豆の種子を
植穴に１粒ずつ、プランター当り５粒播いた。このプラ
ンターを２５℃の人工気象器に入れ、１２０００ルクス
の照明を用いて、明（１２０００ルクス）１４時間，暗
（０ルクス）１０時間のサイクルで６０日間栽培した。
その後、大豆の根を水で洗浄し、応用例１および比較応
用例１，２に示す方法で感染率を測定した。結果を第１
表に示す。
染） 実施例１および比較例２で得られたＶＡ菌根菌製剤をボ
ールミルに入れ、３０分間粉砕した。粉砕物を目開き
０．２５ｍｍの篩に通し、通過した粉末を用いて試験し
た。この粉末１００ｇに対し、ビニルピロリドン／酢酸
ビニルコポリマー混合物の粉末〔前者：後者＝６０：４
０（重量比）〕を混合し、さらに水３０ｍｌを加えた。
この中に大豆の種子５０粒を入れ、ＶＡ菌根菌製剤を付
着せしめ、ＶＡ菌根菌が付着した大豆の種子を得た。赤
玉土，腐葉土，ピートモスを、３：３：１（重量比）の
割合で混合した用土を、４０×２０×２０ｃｍのプラン
ターに入れ、ここにＶＡ菌根菌が付着した大豆の種子を
植穴に１粒ずつ、プランター当り５粒播いた。このプラ
ンターを２５℃の人工気象器に入れ、１２０００ルクス
の照明を用いて、明（１２０００ルクス）１４時間，暗
（０ルクス）１０時間のサイクルで６０日間栽培した。
その後、大豆の根を水で洗浄し、応用例１および比較応
用例１，２に示す方法で感染率を測定した。結果を第１
表に示す。
【００２４】
【表１】
【００２５】
【発明の効果】本発明の方法によれば、減圧乾燥を行な
っているため、ＶＡ菌根菌の活性を長期間維持したＶＡ
菌根菌製剤を製造することができる。従って、本発明の
方法で得られるＶＡ菌根菌製剤は、乾燥下で長期保存し
ても活性が保持でき、農業，園芸業等の分野で有効に用
いることができる。
っているため、ＶＡ菌根菌の活性を長期間維持したＶＡ
菌根菌製剤を製造することができる。従って、本発明の
方法で得られるＶＡ菌根菌製剤は、乾燥下で長期保存し
ても活性が保持でき、農業，園芸業等の分野で有効に用
いることができる。
Claims (1)
- 【請求項１】 ＶＡ菌根菌含有用土を減圧乾燥処理する
ことを特徴とするＶＡ菌根菌製剤の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP34847191A JPH05153861A (ja) | 1991-12-05 | 1991-12-05 | Ｖａ菌根菌製剤の製造方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP34847191A JPH05153861A (ja) | 1991-12-05 | 1991-12-05 | Ｖａ菌根菌製剤の製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH05153861A true JPH05153861A (ja) | 1993-06-22 |
Family
ID=18397236
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP34847191A Withdrawn JPH05153861A (ja) | 1991-12-05 | 1991-12-05 | Ｖａ菌根菌製剤の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH05153861A (ja) |
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2015019585A (ja) * | 2013-07-16 | 2015-02-02 | 関西電力株式会社 | 植物育成資材及びその製造方法 |
-
1991
- 1991-12-05 JP JP34847191A patent/JPH05153861A/ja not_active Withdrawn
Cited By (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2015019585A (ja) * | 2013-07-16 | 2015-02-02 | 関西電力株式会社 | 植物育成資材及びその製造方法 |
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Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A300 | Withdrawal of application because of no request for examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A300 Effective date: 19990311 |