JPH0469339B2 - - Google Patents
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- JPH0469339B2 JPH0469339B2 JP58247433A JP24743383A JPH0469339B2 JP H0469339 B2 JPH0469339 B2 JP H0469339B2 JP 58247433 A JP58247433 A JP 58247433A JP 24743383 A JP24743383 A JP 24743383A JP H0469339 B2 JPH0469339 B2 JP H0469339B2
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- electrolyte
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Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N27/00—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means
- G01N27/26—Investigating or analysing materials by the use of electric, electrochemical, or magnetic means by investigating electrochemical variables; by using electrolysis or electrophoresis
- G01N27/416—Systems
- G01N27/447—Systems using electrophoresis
- G01N27/44704—Details; Accessories
- G01N27/44747—Composition of gel or of carrier mixture
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
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Description
【発明の詳細な説明】
(イ) 産業上の利用分野
この発明は電気泳動装置に関し、特に電気浸透
流防止のために電解液に混入される防止剤と試料
との干渉をさけるための改良構成に関する。
流防止のために電解液に混入される防止剤と試料
との干渉をさけるための改良構成に関する。
(ロ) 従来技術
従来から電気泳動における電気浸透流
（Electro osmotic flow）の影響をさけるため、
トリトン、ハイドロキシプロビルメチルセルロー
ス（HPMC）、ポリビニルアルコール（PVA）
などの電気浸透防止剤が電解液に混入して使用さ
れている。しかしそれらの電気浸透防止剤が試料
に混在していると、試料に何らかの干渉をもたら
すことが考えられる。特にトリトンは界面活性剤
の一種であり、試料が細胞の場合に、細胞の電荷
に変化をもたらすことになる。
（Electro osmotic flow）の影響をさけるため、
トリトン、ハイドロキシプロビルメチルセルロー
ス（HPMC）、ポリビニルアルコール（PVA）
などの電気浸透防止剤が電解液に混入して使用さ
れている。しかしそれらの電気浸透防止剤が試料
に混在していると、試料に何らかの干渉をもたら
すことが考えられる。特にトリトンは界面活性剤
の一種であり、試料が細胞の場合に、細胞の電荷
に変化をもたらすことになる。
一方泳動管の内面に電気浸透防止剤をコーテイ
ングすることも提案されているが、耐久性に問題
がある（特開昭57−30940号公報参照）。
ングすることも提案されているが、耐久性に問題
がある（特開昭57−30940号公報参照）。
(ハ) 目的
この発明は、これらの事情に鑑みなされたもの
で、その主要な目的の一つは、電気浸透防止剤の
試料との干渉を防止できる電気泳動装置の提供に
ある。
で、その主要な目的の一つは、電気浸透防止剤の
試料との干渉を防止できる電気泳動装置の提供に
ある。
(ニ) 構成
この発明は、１対の電極槽と、これらの電極槽
を結び、検出器を具備した泳動路とを備え、更に
この泳動路の一端附近に、電気浸透防止剤を含む
電解液供給路と電気浸透防止剤を含まない電解液
供給路とを、切換弁を介して接続し、且つ泳動路
の他端附近に電解液排液路を接続してなる電気泳
動装置である。
を結び、検出器を具備した泳動路とを備え、更に
この泳動路の一端附近に、電気浸透防止剤を含む
電解液供給路と電気浸透防止剤を含まない電解液
供給路とを、切換弁を介して接続し、且つ泳動路
の他端附近に電解液排液路を接続してなる電気泳
動装置である。
(ホ) 実施例
以下図に示す実施例に基づいてこの発明を詳述
する。なお、これによつてこの発明が限定される
ものではない。
する。なお、これによつてこの発明が限定される
ものではない。
第１図において細胞電気泳動装置１は、１対の
電極槽２，３と、これら両電極槽を結び、検出器
４を具備した泳動管５とを備え、更にこの泳動管
は、入口側に、電気浸透防止剤を含む電解液と電
気浸透防止剤を含まない電解液に試料を混入した
試料液との切換供給手段６を、出口側に排液手段
７をそれぞれ備えている。
電極槽２，３と、これら両電極槽を結び、検出器
４を具備した泳動管５とを備え、更にこの泳動管
は、入口側に、電気浸透防止剤を含む電解液と電
気浸透防止剤を含まない電解液に試料を混入した
試料液との切換供給手段６を、出口側に排液手段
７をそれぞれ備えている。
而して前記切換供給手段６は、電気浸透防止剤
を含む電解液供給管８と、試料を含むが電気浸透
防止剤を含まない電解液からなる試料液供給管９
とを切換弁１０を介して切換供給管１１に接続し
て構成されている。なお、１２は試料を含み電気
浸透防止剤を含まない試料液容器、 １３は電気浸透防止剤を含む電解液容器であ
る。
を含む電解液供給管８と、試料を含むが電気浸透
防止剤を含まない電解液からなる試料液供給管９
とを切換弁１０を介して切換供給管１１に接続し
て構成されている。なお、１２は試料を含み電気
浸透防止剤を含まない試料液容器、 １３は電気浸透防止剤を含む電解液容器であ
る。
一方排液手段７は、排液管１４と、前記切換供
給手段６の供給動力源を兼ねる排液用しごきポン
プ１５とからなる。なお、１６は排液容器、１
７，１８は隔膜である。
給手段６の供給動力源を兼ねる排液用しごきポン
プ１５とからなる。なお、１６は排液容器、１
７，１８は隔膜である。
次に以上の構成からなる細胞電気泳動装置１の
作動を説明する。なお、細胞電気泳動装置１は、
細胞の分析を目的とするもので、他の電気泳動
（例えば実験例の細管式等速電気泳動）のように
分離分析（イオン種を分離して定量する）を目的
とするものではなく、電圧が印加された状態にお
いて細胞が移動する速度を測定することにより、
細胞の性質を解明する（例えば正常細胞か特定の
病気の影響を受けたものかの判定）ことが主目的
のものである。
作動を説明する。なお、細胞電気泳動装置１は、
細胞の分析を目的とするもので、他の電気泳動
（例えば実験例の細管式等速電気泳動）のように
分離分析（イオン種を分離して定量する）を目的
とするものではなく、電圧が印加された状態にお
いて細胞が移動する速度を測定することにより、
細胞の性質を解明する（例えば正常細胞か特定の
病気の影響を受けたものかの判定）ことが主目的
のものである。
まず切換弁１０を第１図の状態とし、しごきポ
ンプ１５を作動させると、電気浸透防止剤を含む
（添加する）電解液（泳動バツフアー）が泳動管
５内を流れて洗浄する。
ンプ１５を作動させると、電気浸透防止剤を含む
（添加する）電解液（泳動バツフアー）が泳動管
５内を流れて洗浄する。
次いで切換弁１０を切換えると、同じくしごき
ポンプ１５の作動によつて、試料液、つまり電気
浸透防止剤を含まない（添加しない）電解液（泳
動バツフアー）と試料との混合液が泳動管５内全
体にわたつて電気浸透防止剤を含む電解液を押し
のけて導入される（試料液は泳動管の大部分に充
填されれば、泳動速度を測定するだけなので、分
析可能である）。なお、泳動管に試料液を導入す
る前に区画用空気を導入してもよい。
ポンプ１５の作動によつて、試料液、つまり電気
浸透防止剤を含まない（添加しない）電解液（泳
動バツフアー）と試料との混合液が泳動管５内全
体にわたつて電気浸透防止剤を含む電解液を押し
のけて導入される（試料液は泳動管の大部分に充
填されれば、泳動速度を測定するだけなので、分
析可能である）。なお、泳動管に試料液を導入す
る前に区画用空気を導入してもよい。
かくしてしごきポンプ１５が停止され、泳動が
開始される。試料の泳動速度は、泳動中の試料に
光を照射し、その散乱光の検出器４による検出に
よつて測定される。測定結果は、使用する電解液
が実質的に電気浸透防止剤を含まないものである
にもかかわらず、電気浸透の影響が除去されてい
る。これは試料液が泳動管５内に供給される前
に、電気浸透防止剤を含む電解液が供給されてお
り、この電解液が泳動管５内面にコーテイング状
態に残留しているためと考えられる。もちろん試
料の荷電量の変化なしに測定できる。
開始される。試料の泳動速度は、泳動中の試料に
光を照射し、その散乱光の検出器４による検出に
よつて測定される。測定結果は、使用する電解液
が実質的に電気浸透防止剤を含まないものである
にもかかわらず、電気浸透の影響が除去されてい
る。これは試料液が泳動管５内に供給される前
に、電気浸透防止剤を含む電解液が供給されてお
り、この電解液が泳動管５内面にコーテイング状
態に残留しているためと考えられる。もちろん試
料の荷電量の変化なしに測定できる。
泳動後は再び切換弁１０を切換え、しごきポン
プ１５を作動させて電気浸透防止剤を含む電解液
で泳動管５内を洗浄する。なお、この洗浄には、
試料液の５回分程度の電解液を使用するのが好ま
しい。また上記のごとく泳動測定を１回行なうご
とに洗浄するのではなく、複数回、例えば、10回
程度まで泳動測定を繰り返した後、洗浄するよう
にしてもよい。
プ１５を作動させて電気浸透防止剤を含む電解液
で泳動管５内を洗浄する。なお、この洗浄には、
試料液の５回分程度の電解液を使用するのが好ま
しい。また上記のごとく泳動測定を１回行なうご
とに洗浄するのではなく、複数回、例えば、10回
程度まで泳動測定を繰り返した後、洗浄するよう
にしてもよい。
ここで参考までに第１図に示した細胞電気泳動
装置１とは異なる細管式等速電気泳動装置によつ
て行つた実験例を示す。
装置１とは異なる細管式等速電気泳動装置によつ
て行つた実験例を示す。
なお、細管式等速電気泳動装置は、リーデイン
グ電極槽とターミナル電極槽との間に泳動路を設
け、かつその泳動路の途中に試料注入口兼電解液
排出口を設けて構成される。そしてまず排出口を
開放してリーデイング電極槽側からリーデイング
電解液を電解液排出口から排出できるまで供給
し、次いでターミナル電極槽側からターミナル電
解液を電解液排出口から排出できるまで供給し、
試料注入口符近に両電解液の境界面を形成する。
かくして電解液排出口を閉じ、かつ試料注入口を
通じて前記境界面に一定試料を注入する。
グ電極槽とターミナル電極槽との間に泳動路を設
け、かつその泳動路の途中に試料注入口兼電解液
排出口を設けて構成される。そしてまず排出口を
開放してリーデイング電極槽側からリーデイング
電解液を電解液排出口から排出できるまで供給
し、次いでターミナル電極槽側からターミナル電
解液を電解液排出口から排出できるまで供給し、
試料注入口符近に両電解液の境界面を形成する。
かくして電解液排出口を閉じ、かつ試料注入口を
通じて前記境界面に一定試料を注入する。
リーデイング電解液：
モルホリノエタンスルフオン酸〔５ミリモル〕
２−アミノ−２−メチル−１、３−プロパンジオ
ール（アメジオール）〔10ミリモル〕 ターミナル電解液： イプシロン−アミノカプロン酸〔５ミリモル〕
２−アミノ−２−メチル−１、３−プロパンジオ
ール（アメジオール）とBa（OH）2〔10ミリモル〕 泳動電流：150μA（９分）−（変更）→75μA 泳動管：１mm〓×４cm、検出器：電位勾配検出器 試料：有機酸（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ） 使用電解液： 電気浸透剤無添加、 電気浸透剤添加、ハイドロキシプロピルメチ
ル（HPMC）〔0.1％重量〕 の電気浸透剤添加電解液を導入後、その電
解液を押しのけながらと同じ無添加電解液を
導入、 実験結果 、、の電気泳動図を、第２図、第３図、
第４図にそれぞれ示す。第４図により、予め電気
浸透剤添加電解液を導入しておけば、その後その
添加電解液を押しのけて電気浸透剤無添加の電解
液を導入し電気泳動させても、電気浸透の影響を
防止できることがわかる。
２−アミノ−２−メチル−１、３−プロパンジオ
ール（アメジオール）〔10ミリモル〕 ターミナル電解液： イプシロン−アミノカプロン酸〔５ミリモル〕
２−アミノ−２−メチル−１、３−プロパンジオ
ール（アメジオール）とBa（OH）2〔10ミリモル〕 泳動電流：150μA（９分）−（変更）→75μA 泳動管：１mm〓×４cm、検出器：電位勾配検出器 試料：有機酸（Ａ、Ｂ、Ｃ、Ｄ） 使用電解液： 電気浸透剤無添加、 電気浸透剤添加、ハイドロキシプロピルメチ
ル（HPMC）〔0.1％重量〕 の電気浸透剤添加電解液を導入後、その電
解液を押しのけながらと同じ無添加電解液を
導入、 実験結果 、、の電気泳動図を、第２図、第３図、
第４図にそれぞれ示す。第４図により、予め電気
浸透剤添加電解液を導入しておけば、その後その
添加電解液を押しのけて電気浸透剤無添加の電解
液を導入し電気泳動させても、電気浸透の影響を
防止できることがわかる。
(ヘ) 効果
この発明は、泳動管に、電気浸透剤添加電解液
を導入後、電気浸透剤無添加電解液を導入できる
ように構成することによつて、電気浸透流の防止
と、電気浸透剤及び試料の干渉の防止とを併せ行
なうことができる。
を導入後、電気浸透剤無添加電解液を導入できる
ように構成することによつて、電気浸透流の防止
と、電気浸透剤及び試料の干渉の防止とを併せ行
なうことができる。
第１図はこの発明に係る電気泳動装置の一実施
例を示す機能説明図、第２図は電解液が電気浸透
剤無添加の場合の電気泳動図、第３図は同じく電
気浸透剤添加の場合の電気泳動図、第４図は電気
浸透剤添加電解液を使用後、電気浸透剤無添加の
電解液を使用した場合の電気泳動図である。 １……細胞電気泳動装置、２，３……電極槽、
４……検出器、５……泳動管、７……排液手段、
８……電気浸透剤を含む電解液供給管、９……試
料液供給管、１０……切換弁。
例を示す機能説明図、第２図は電解液が電気浸透
剤無添加の場合の電気泳動図、第３図は同じく電
気浸透剤添加の場合の電気泳動図、第４図は電気
浸透剤添加電解液を使用後、電気浸透剤無添加の
電解液を使用した場合の電気泳動図である。 １……細胞電気泳動装置、２，３……電極槽、
４……検出器、５……泳動管、７……排液手段、
８……電気浸透剤を含む電解液供給管、９……試
料液供給管、１０……切換弁。
Claims (1)
- １ １対の電極槽と、これらの電極槽を結び、検
出器を具備した泳動路とを備え、更にこの泳動路
の一端附近に、電気浸透防止剤を含む電解液供給
路と電気浸透防止剤を含まない電解液供給路と
を、切換弁を介して接続し、且つ泳動路の他端附
に電解液排液路を接続してなる電気泳動装置。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58247433A JPS60138447A (ja) | 1983-12-27 | 1983-12-27 | 電気泳動装置 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP58247433A JPS60138447A (ja) | 1983-12-27 | 1983-12-27 | 電気泳動装置 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS60138447A JPS60138447A (ja) | 1985-07-23 |
| JPH0469339B2 true JPH0469339B2 (ja) | 1992-11-05 |
Family
ID=17163364
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP58247433A Granted JPS60138447A (ja) | 1983-12-27 | 1983-12-27 | 電気泳動装置 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPS60138447A (ja) |
Families Citing this family (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5232565A (en) * | 1988-09-27 | 1993-08-03 | The Board Of Trustees Of The Leland Standford Junior University | Capillary electrophoretic system |
| US5354440A (en) * | 1988-11-29 | 1994-10-11 | Isco, Inc. | Capillary electrophoresis technique |
| US5326445A (en) * | 1989-05-01 | 1994-07-05 | Hewlett-Packard Company | Vacuum injection capillary electrophoresis |
| US4906344A (en) * | 1989-06-22 | 1990-03-06 | Bio-Rad Laboratories, Inc. | Thermal technique for bulk fluid movement in capillary electrophoresis |
-
1983
- 1983-12-27 JP JP58247433A patent/JPS60138447A/ja active Granted
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPS60138447A (ja) | 1985-07-23 |
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