JP3475787B2 - 電気泳動用部材 - Google Patents
電気泳動用部材Info
- Publication number
- JP3475787B2 JP3475787B2 JP14189398A JP14189398A JP3475787B2 JP 3475787 B2 JP3475787 B2 JP 3475787B2 JP 14189398 A JP14189398 A JP 14189398A JP 14189398 A JP14189398 A JP 14189398A JP 3475787 B2 JP3475787 B2 JP 3475787B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- electrophoretic
- separation
- flow path
- reservoir
- flow
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Landscapes
- Investigating, Analyzing Materials By Fluorescence Or Luminescence (AREA)
- Optical Measuring Cells (AREA)
Description
【０００１】
【発明の属する技術分野】本発明は、極微量のタンパク
や核酸などを高速かつ高分解能に分析する場合に利用さ
れる電気泳動装置に用いられる電気泳動用部材に関す
る。
や核酸などを高速かつ高分解能に分析する場合に利用さ
れる電気泳動装置に用いられる電気泳動用部材に関す
る。
【０００２】
【従来の技術】ガラスキャピラリーを用いた電気泳動装
置では、ガラスキャピラリーの両端が泳動バッファを満
たした２つの泳動バッファ溜めに、ガラスキャピラリー
の両端と、高圧電源に接続された高電圧印加用の電極が
浸されており、ガラスキャピラリーの両端に高電圧を印
加することで、分析対象物をキャピラリー内で展開させ
て検出器で検出している。しかしながら、ガラスキャピ
ラリーを用いた電気泳動装置では、ガラスキャピラリー
の外径が１０〜数１０μｍと細く破損しやすいため、ユ
ーザが行うガラスキャピラリー交換時の取扱が容易では
なく、装置の小型化が行えないという問題があった。
置では、ガラスキャピラリーの両端が泳動バッファを満
たした２つの泳動バッファ溜めに、ガラスキャピラリー
の両端と、高圧電源に接続された高電圧印加用の電極が
浸されており、ガラスキャピラリーの両端に高電圧を印
加することで、分析対象物をキャピラリー内で展開させ
て検出器で検出している。しかしながら、ガラスキャピ
ラリーを用いた電気泳動装置では、ガラスキャピラリー
の外径が１０〜数１０μｍと細く破損しやすいため、ユ
ーザが行うガラスキャピラリー交換時の取扱が容易では
なく、装置の小型化が行えないという問題があった。
【０００３】そこで、２枚の基板を接合して形成された
プレート状のキャピラリー部材が提案されている。図３
に従来のプレート状キャピラリーを用いた電気泳動用部
材を示す。
プレート状のキャピラリー部材が提案されている。図３
に従来のプレート状キャピラリーを用いた電気泳動用部
材を示す。
【０００４】フォトファブリケーション技術を用いて、
互いに交差する分析用流路溝５及び試料注入用流路溝３
が形成された基板１ａと、さらにそれらの溝５、３の両
端に位置するリザーバ７が形成された基板１ｂを接合す
ることで、プレート状キャピラリー電気泳動用部材を構
成している。
互いに交差する分析用流路溝５及び試料注入用流路溝３
が形成された基板１ａと、さらにそれらの溝５、３の両
端に位置するリザーバ７が形成された基板１ｂを接合す
ることで、プレート状キャピラリー電気泳動用部材を構
成している。
【０００５】そして、２つのリザーバ７に電位差を与え
て、分析用流路溝５に液体試料が混ざった泳動液を展開
して、光を照射して分析を行っている。
て、分析用流路溝５に液体試料が混ざった泳動液を展開
して、光を照射して分析を行っている。
【０００６】
【発明が解決しようとする課題】ところで、上記従来技
術では、泳動液の種類によっては、液体試料液の分析が
終了する時間までに、リザーバ7の泳動液が分析精度を
悪化させる程度にイオン化してしまうため、リザーバ7
での電気分解により形成されるイオン成分の影響を受
け、分析用流路溝５に試料液が一定の速度で泳動するこ
とができず、泳動速度が変化し、同じ試料を同条件で分
析した時の分析再現性がなくなり、正確な測定を行うこ
とができない。
術では、泳動液の種類によっては、液体試料液の分析が
終了する時間までに、リザーバ7の泳動液が分析精度を
悪化させる程度にイオン化してしまうため、リザーバ7
での電気分解により形成されるイオン成分の影響を受
け、分析用流路溝５に試料液が一定の速度で泳動するこ
とができず、泳動速度が変化し、同じ試料を同条件で分
析した時の分析再現性がなくなり、正確な測定を行うこ
とができない。
【０００７】例えば、リン酸バッファのような、電気伝
導度の高い泳動液を用いた場合には、１０μＡの泳動電
流が流れていると、１秒間に１０-11 モルものイオンが
新たに生じ、泳動バッファ溜めを１μｌとすると１０秒
間で１０-4Ｍの濃度となり、無視できない影響を与えて
しまう。
導度の高い泳動液を用いた場合には、１０μＡの泳動電
流が流れていると、１秒間に１０-11 モルものイオンが
新たに生じ、泳動バッファ溜めを１μｌとすると１０秒
間で１０-4Ｍの濃度となり、無視できない影響を与えて
しまう。
【０００８】本発明は、上記課題を解決するために創案
されたもので、試料液の分析が終了するまでにリザーバ
で電気分解により形成されるイオン成分の影響を抑え、
電気泳動液の泳動速度を一定にすることができる電気泳
動用部材を提供することを目的としている。
されたもので、試料液の分析が終了するまでにリザーバ
で電気分解により形成されるイオン成分の影響を抑え、
電気泳動液の泳動速度を一定にすることができる電気泳
動用部材を提供することを目的としている。
【０００９】
【課題を解決するための手段】上記の目的を達成するた
め、本発明の電気泳動用部材は、基板内部に少なくとも
２本の流路が交差するように形成されているとともに、
それら流路の一端には泳動液または試料を入れるリザー
バが形成されており、それら流路およびリザーバに泳動
液を充填し、各流路の両端に設けた電極により電位差を
印加することで電気泳動による試料の移動や分離分析を
行う部材であって、少なくとも泳動液導入側の流路の一
部を分離流路よりも断面積の大きな流路としたことを特
徴としている（図２）。
め、本発明の電気泳動用部材は、基板内部に少なくとも
２本の流路が交差するように形成されているとともに、
それら流路の一端には泳動液または試料を入れるリザー
バが形成されており、それら流路およびリザーバに泳動
液を充填し、各流路の両端に設けた電極により電位差を
印加することで電気泳動による試料の移動や分離分析を
行う部材であって、少なくとも泳動液導入側の流路の一
部を分離流路よりも断面積の大きな流路としたことを特
徴としている（図２）。
【００１０】電極により泳動液が電気分解して形成され
たイオンが分離流路に流入した場合、泳動速度を変化さ
せ分析の再現性と正確性を損ねるという悪影響を与える
が、本発明構成に係る該断面積の大きな流路部分はバッ
ファの役割を果たし、生じたイオンが分離流路に達する
までには相当の時間を要し、イオンが一度に大量に分離
流路に流れ込むことがない。
たイオンが分離流路に流入した場合、泳動速度を変化さ
せ分析の再現性と正確性を損ねるという悪影響を与える
が、本発明構成に係る該断面積の大きな流路部分はバッ
ファの役割を果たし、生じたイオンが分離流路に達する
までには相当の時間を要し、イオンが一度に大量に分離
流路に流れ込むことがない。
【００１１】また、本発明のより好ましい構成では、こ
の分離流路よりも断面積の大きな流路部分の容積が分離
流路の容積と同等以上とされる。
の分離流路よりも断面積の大きな流路部分の容積が分離
流路の容積と同等以上とされる。
【００１２】また、本発明の他の構成によれば、泳動液
導入側のリザーバを十分大きな容積のものとすると同時
に、電極がリザーバの内部上面の一部に形成されている
ことを特徴とする（図１）。
導入側のリザーバを十分大きな容積のものとすると同時
に、電極がリザーバの内部上面の一部に形成されている
ことを特徴とする（図１）。
【００１３】このような構成とすることにより、電極で
の電気分解により泳動液全体がイオン化されるまでには
相当の時間を要し、また電極は分離流路の入り口から離
れた場所に小さく形成されているので、電気分解による
イオンが一度に大量に分離流路に流れ込むことがなく、
分離流路内におけるイオンの悪影響を小さくすることが
でき、泳動速度を一定にすることができる。
の電気分解により泳動液全体がイオン化されるまでには
相当の時間を要し、また電極は分離流路の入り口から離
れた場所に小さく形成されているので、電気分解による
イオンが一度に大量に分離流路に流れ込むことがなく、
分離流路内におけるイオンの悪影響を小さくすることが
でき、泳動速度を一定にすることができる。
【００１４】
【発明の実施の形態】以下、図面を参照しつつ本発明の
一実施例について述べる。
一実施例について述べる。
【００１５】図１は本発明の電気泳動用部材の構成を示
す図である。１は十分な泳動液の量を確保するためのリ
ザーバ、２は液体試料導入口、３は液体試料排出口、４
は泳動液排出口、５は試料液導入流路、６は液体試料を
分離する分離流路、７ａ〜７ｄは電極である。
す図である。１は十分な泳動液の量を確保するためのリ
ザーバ、２は液体試料導入口、３は液体試料排出口、４
は泳動液排出口、５は試料液導入流路、６は液体試料を
分離する分離流路、７ａ〜７ｄは電極である。
【００１６】電気泳動用部材は、石英、ガラス、Si、プ
ラスチックなどからなる基板ａ、ｂを２枚張り合わせて
構成されており、基板ａ側には、リザーバ１、液体試料
導入口２、液体試料排出口３、泳動液排出口４、電極７
ａ〜７ｂが形成されており、基板ｂ側には、試料液導入
流路５、分離流路６が形成されている。
ラスチックなどからなる基板ａ、ｂを２枚張り合わせて
構成されており、基板ａ側には、リザーバ１、液体試料
導入口２、液体試料排出口３、泳動液排出口４、電極７
ａ〜７ｂが形成されており、基板ｂ側には、試料液導入
流路５、分離流路６が形成されている。
【００１７】電極７ａ〜７ｄはスパッタ成膜等でＣｒを
２００〜３００オングストローム程度成膜し、その上に
Ａｕを２０００〜３０００オングストローム程度成膜す
る。リザーバ１は図に示すように十分な泳動液の量を確
保するために必要な大きさの容積を備えているととも
に、電極７ａをリザーバ１の内部全面に形成せずに、リ
ザーバ１の内部の所定深さまでの小さな面積で構成され
ている。
２００〜３００オングストローム程度成膜し、その上に
Ａｕを２０００〜３０００オングストローム程度成膜す
る。リザーバ１は図に示すように十分な泳動液の量を確
保するために必要な大きさの容積を備えているととも
に、電極７ａをリザーバ１の内部全面に形成せずに、リ
ザーバ１の内部の所定深さまでの小さな面積で構成され
ている。
【００１８】また、電極７ｂ〜７ｄは、液体試料排出口
３、液体試料導入口２、泳動液排出口４の各々の貫通孔
内部の全面に形成せずに、上部内面一部だけに形成され
ている。
３、液体試料導入口２、泳動液排出口４の各々の貫通孔
内部の全面に形成せずに、上部内面一部だけに形成され
ている。
【００１９】電気泳動を行わせる場合には、リザーバ
１、液体試料導入口２、液体試料排出口３、泳動液排出
口４の各々に適切な関係の電圧を印加し、試料液導入流
路５と分離流路６の交差部分に存在する液体試料を泳動
液排出口４の方向へ泳動させ、分離流路６に展開させ
る。そして、例えば、上方より検出光を分離流路６に展
開させられた液体試料に照射し、その透過光をセンサで
検出して分析を行う。
１、液体試料導入口２、液体試料排出口３、泳動液排出
口４の各々に適切な関係の電圧を印加し、試料液導入流
路５と分離流路６の交差部分に存在する液体試料を泳動
液排出口４の方向へ泳動させ、分離流路６に展開させ
る。そして、例えば、上方より検出光を分離流路６に展
開させられた液体試料に照射し、その透過光をセンサで
検出して分析を行う。
【００２０】本発明では、リザーバ１の容積を十分大き
くするとともに、電極７ａの位置をリザーバ１の内部上
面に一部形成した構成としているので、泳動液全体が電
気分解によりイオン化されるまでには相当の時間を要
し、また、電極７ａは分離流路６の入り口から離れた場
所に小さく形成されているので、電気分解によるイオン
が一度に大量に分離流路６に流れ込むこともなく、電気
分解により形成されるイオンの影響が分析流路内（分離
流路６）で非常に小さいものとなり、電気泳動液の泳動
速度を一定にすることができる。
くするとともに、電極７ａの位置をリザーバ１の内部上
面に一部形成した構成としているので、泳動液全体が電
気分解によりイオン化されるまでには相当の時間を要
し、また、電極７ａは分離流路６の入り口から離れた場
所に小さく形成されているので、電気分解によるイオン
が一度に大量に分離流路６に流れ込むこともなく、電気
分解により形成されるイオンの影響が分析流路内（分離
流路６）で非常に小さいものとなり、電気泳動液の泳動
速度を一定にすることができる。
【００２１】次に、図２に流路の一部を泳動液の溜めと
して利用し、電気分解により形成されるイオン成分の影
響を分析流路内で受け難い構造としたものを示す。
して利用し、電気分解により形成されるイオン成分の影
響を分析流路内で受け難い構造としたものを示す。
【００２２】図１と同様な構成については同じ符号を付
している。泳動液導入口１ａは、通常の容積をもつ構成
となっているが、この泳動液導入口１ａに断面積が大き
な泳動液導入流路１７が接続され、この泳動液導入流路
１７が断面積の小さな分離流路６に接続されており、泳
動液導入流路１７の体積は、分離流路６の検出部までの
体積と同等か、それ以上が望ましい。
している。泳動液導入口１ａは、通常の容積をもつ構成
となっているが、この泳動液導入口１ａに断面積が大き
な泳動液導入流路１７が接続され、この泳動液導入流路
１７が断面積の小さな分離流路６に接続されており、泳
動液導入流路１７の体積は、分離流路６の検出部までの
体積と同等か、それ以上が望ましい。
【００２３】例えば、泳動液導入流路１７は幅５００μ
ｍ、深さ２０μｍで構成されており、分離流路６は幅５
０μｍ、深さ２０μｍで構成されている。
ｍ、深さ２０μｍで構成されており、分離流路６は幅５
０μｍ、深さ２０μｍで構成されている。
【００２４】このような構成とすることで、泳動液導入
流路１７がバッファの役割を果たし、泳動液導入口１ａ
で生じたイオンが電気浸透流により分離流路６に達する
までには相当の時間を要し、また、電極７ｅは泳動液導
入流路１７からは遠方に小さく形成されているので、電
気分解によるイオンが一度に大量に分離流路６に流れ込
むこともなく、電気分解により形成されるイオンの影響
が分析流路内（分離流路６）で非常に小さい。
流路１７がバッファの役割を果たし、泳動液導入口１ａ
で生じたイオンが電気浸透流により分離流路６に達する
までには相当の時間を要し、また、電極７ｅは泳動液導
入流路１７からは遠方に小さく形成されているので、電
気分解によるイオンが一度に大量に分離流路６に流れ込
むこともなく、電気分解により形成されるイオンの影響
が分析流路内（分離流路６）で非常に小さい。
【００２５】
【発明の効果】本発明によれば、電極と分離流路入り口
との間に十分な容積と距離とを確保することにより、電
極部で流動液を電気分解することにより形成されたイオ
ンが分離流路に一度に大量に流入することを防止するこ
とができ、分離流路におけるイオン濃度の変動を十分小
さく抑えることができ、泳動速度を一定とし、分析再現
性が向上し、正確な測定を行うことができる。
との間に十分な容積と距離とを確保することにより、電
極部で流動液を電気分解することにより形成されたイオ
ンが分離流路に一度に大量に流入することを防止するこ
とができ、分離流路におけるイオン濃度の変動を十分小
さく抑えることができ、泳動速度を一定とし、分析再現
性が向上し、正確な測定を行うことができる。
【図１】本発明の一実施例の構成を示す図である。
【図２】本発明の他の構成を示す図である。
【図３】従来の電気泳動用部材の構成を示す図である。
フロントページの続き
(56)参考文献 特開 平11−142355（ＪＰ，Ａ)
特開 平11−271273（ＪＰ，Ａ)
特開 平10−10088（ＪＰ，Ａ)
特開 平８−178897（ＪＰ，Ａ)
(58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名)
G01N 27/447
G01N 37/00
Claims (3)
- 【請求項１】基板内部に少なくとも２本の流路が交差す
るように形成されているとともに、それら流路の一端に
は泳動液または試料を入れるリザーバが形成されてお
り、それら流路およびリザーバに泳動液を充填し、各流
路の両端に設けた電極により電位差を印加することで電
気泳動による試料の移動や分離分析を行う部材であっ
て、少なくとも泳動液導入側の流路において、電極と分
離流路との間の流路の一部を分離流路よりも断面積の大
きな流路としたことを特徴とする電気泳動用部材。 - 【請求項２】分離流路よりも断面積の大きな流路部分の
容積が分離流路の容積と同等以上に構成されていること
を特徴とする請求項１記載の電気泳動用部材。 - 【請求項３】基板内部に少なくとも２本の流路が交差す
るように形成されているとともに、それら流路の一端に
は泳動液または試料を入れるリザーバが形成されてお
り、それら流路およびリザーバに泳動液を充填し、各流
路の両端に設けた電極により電位差を印加することで電
気泳動による試料の移動や分離分析を行う部材であっ
て、泳動液導入側のリザーバを泳動に必要な泳動液の量
を確保するために必要な大きさの容積を備えたものとす
ると同時に、電極を該リザーバの内部上面の一部に形成
したことを特徴とする電気泳動用部材。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14189398A JP3475787B2 (ja) | 1998-05-22 | 1998-05-22 | 電気泳動用部材 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP14189398A JP3475787B2 (ja) | 1998-05-22 | 1998-05-22 | 電気泳動用部材 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH11337521A JPH11337521A (ja) | 1999-12-10 |
| JP3475787B2 true JP3475787B2 (ja) | 2003-12-08 |
Family
ID=15302625
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP14189398A Expired - Fee Related JP3475787B2 (ja) | 1998-05-22 | 1998-05-22 | 電気泳動用部材 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3475787B2 (ja) |
Families Citing this family (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2001188061A (ja) * | 1999-12-28 | 2001-07-10 | Shimadzu Corp | 分析用マイクロチップ |
| JP2007506092A (ja) * | 2003-09-22 | 2007-03-15 | 株式会社島津製作所 | 電気泳動装置及び方法、並びに電気泳動部材及び試料分注プローブ |
| JP5551036B2 (ja) * | 2010-09-27 | 2014-07-16 | アークレイ株式会社 | 電気泳動分析装置および電気泳動分析用マイクロチップ |
| EP2998732B1 (en) | 2014-09-11 | 2023-12-13 | ARKRAY, Inc. | Analysis method |
| JP6571444B2 (ja) * | 2014-09-11 | 2019-09-04 | アークレイ株式会社 | 分析方法、分析チップおよび分析システム |
| JP6382699B2 (ja) | 2014-11-28 | 2018-08-29 | 株式会社東芝 | マイクロ分析チップ |
| JP6619286B2 (ja) * | 2015-05-13 | 2019-12-11 | アークレイ株式会社 | 分析用具および分析システム |
| EP3093656A1 (en) | 2015-05-13 | 2016-11-16 | ARKRAY, Inc. | Analytical tool and analytical system |
| US10775345B2 (en) | 2016-10-27 | 2020-09-15 | Arkray, Inc. | Analytical method and analytical system |
| JP2019028021A (ja) | 2017-08-03 | 2019-02-21 | アークレイ株式会社 | 分析デバイス |
| CN110823987A (zh) | 2018-08-08 | 2020-02-21 | 爱科来株式会社 | 分析芯片器件 |
-
1998
- 1998-05-22 JP JP14189398A patent/JP3475787B2/ja not_active Expired - Fee Related
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH11337521A (ja) | 1999-12-10 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Jacobson et al. | Effects of injection schemes and column geometry on the performance of microchip electrophoresis devices | |
| US6159353A (en) | Capillary electrophoretic separation system | |
| EP1296134B1 (en) | Sampling device and its use for controlling sample introduction in microcolumn separation techniques | |
| JP2537142B2 (ja) | 電気化学検出器 | |
| Gavin et al. | Continuous Separations with Microfabricated Electrophoresis− Electrochemical Array Detection | |
| EP0530754B1 (en) | Method for controlling electroosmotic flow | |
| JP3475787B2 (ja) | 電気泳動用部材 | |
| US20030089605A1 (en) | Microfluidic system for proteome analysis | |
| US8293088B2 (en) | Direct determination of carbohydrates, amino acids and antibiotics by microchip electrophoresis with pulsed amperometric detection | |
| CA2207541A1 (en) | Protein separations by capillary electrophoresis using amino acid-containing buffers | |
| HANNIG et al. | Free-flow electrophoresis III. An analytical version for a rapid, quantitative determination of electrophoretic parameters | |
| JPH10185870A (ja) | マイクロカラムによる動電分離用のオンカラム式電導度検出器 | |
| Britz-Mckibbin et al. | Sensitive and high-throughput analyses of purine metabolites by dynamic pH junction multiplexed capillary electrophoresis: a new tool for metabolomic studies | |
| EP0558233A1 (en) | Improved electrophoretic analysis method and apparatus | |
| Liénard et al. | Modular instrumentation for capillary electrophoresis with laser induced fluorescence detection using plug-and-play microfluidic, electrophoretic and optic modules | |
| JP2002310858A (ja) | マイクロチップ電気泳動におけるサンプル導入方法 | |
| Slater et al. | On-chip microband array electrochemical detector for use in capillary electrophoresis | |
| US6843901B1 (en) | Potential gradient detector for electrophoresis | |
| Feng et al. | On‐chip potential gradient detection with a portable capillary electrophoresis system | |
| JPH09210960A (ja) | キャピラリー電気泳動装置 | |
| Xu et al. | Optimization of the electrokinetic supercharging preconcentration for high‐sensitivity microchip gel electrophoresis on a cross‐geometry microchip | |
| JP3048345B2 (ja) | 毛細管電気泳動装置 | |
| JPH0894578A (ja) | キャピラリー電気泳動装置 | |
| JPH0666769A (ja) | キャピラリー電気泳動装置 | |
| Kubáň et al. | Sampling and quantitative analysis in capillary electrophoresis |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080926 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20080926 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090926 Year of fee payment: 6 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20090926 Year of fee payment: 6 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20100926 Year of fee payment: 7 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110926 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20110926 Year of fee payment: 8 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120926 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20120926 Year of fee payment: 9 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20130926 Year of fee payment: 10 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |