JPH04505332A - エイズウイルスの複製を抑制するビタミンｄ化合物の新規な用途 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 エイズウィルスの複製を抑制するビタミンＤ化合物の新規な用途発明の背景 本発明は、ビタミンＤ化合物に関し、より詳細には、後天性免疫不全症候群（Ａ ＩＤＳ、エイズ）を治療するためにビタミンＤ化合物を使用すること（ビタミン Ｄ化合物は後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）ウィルスの複製を抑制するため） に関する。

免疫系へのビタミンＤ化合物の作用はつい最近認識されたことである。リグビー のイミュノロジー・ツブ−（Ｒｉｇｂｙ、　Ｉｍｍｕｎｏｌｏｇｙ　Ｔ。

ｄａｙ）、第９巻、第５４〜５７頁、１９８８年及びマノラガスらのアナルス・ オブ・インターナル・メディシン（Ｍａｎｏ３．ａｇａｓ　ａｔ　ａｌ、、　Ａ ｎｎａｌｓ　ｏｆ　Ｉｎｔｅｒｎａｌ　Ｍｅｄｉｃｉｎｅ）、第１００巻、第１ ４４〜１４．６頁、１９８４年、この一群の化合物は、カルシウムと骨格の代謝 障害でのその使用で最もよく認められている。マノラガスらのアナルス・オブ・ インターナル・メディシン、第１００巻、第１４４〜１４６頁、１９８４年及び マノラガスらのジャーナル・オブ・クリニカル・エンドクリノロジー・アンド・ メタボリズム（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃ：１ｉｎｉｃａｌ　Ｅｎｄｏｃｒｉｎ ｏｌｏｇｙ　ａｎｄ　Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ）　、第６３巻、第３９４〜４００ 頁、１９８６年。活性なビタミンＤ代謝産物である１α、２５−ジヒドロキシコ レ力ルシフエロール（１，２５ＤＨＣＣ）は、試験管内システムの多くで免疫機 能を支持する。マノラガスらのアナルス・才ブ・インターナル・メディシン、第 １００巻、第１４４〜１４６頁、１９８４年及びブロベジニらのボーン（Ｐｒｏ ｖｖｅｄｉｎｉ　ａｔ　ａｌ、、　Ｂｏｎｅ）、第７巻、第２３〜２８頁、１９ ８６年、その作用は多相遺伝的であり、はとんどの種類の免疫細胞及び多くのそ の免疫調整シトキンを含む。リグビーのイミュノロジー・ツブ−、第９巻、第５ ４〜５７頁、１９８８年およびブロベジニらのボーン、第７巻、第２３〜２８頁 、１９８６年。１．２５ＤＨＣＣの１つの作用は、マクロファージへの単球の分 化を促進することであり、したがって免疫システムのエフェクター細胞としてそ の活性を増加する。ブロベジニらのボーン、第７巻、第２３〜２８頁、１９８６ 年。１．２５ＤＨＣＣの他の類似体は同様な効果もっている。ゾウらのブラッド （Ｚｈｏｕ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｂｌｏｏｄ）　、第７４巻、第８２〜９３頁、１ ９８９年。単球及びマクロファージは、感染に対し保菌宿主を構成し、ヒト免疫 不全ウィルス（ＨＩ　Ｖ）の感染の展開で重要な一員である。

バウザのセルラー・イミュノロジー（Ｐａｕｚａ、　Ｃｅ１ｌｕｌａｒ　Ｉｍｍ ｕ、ｎｏ１ｏｇｙジャーナル・オブ・ピロロジー（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｖｉ ｒｏｌｏｇｙ）、第６２巻第３５５８〜３５６４頁、１９８８年。したがって、 一連のビタミンＤ化合物がヒト単球／マクロファージ細胞ライン（系統）すなわ ちＵ９３７細胞ラインでのこのウィルスへのその効果について評価されるべきで ある。このラインは、ある種ビタミンＤ代謝産物の前分化（ｐｒｏｄｉｆｆｅｒ ｅｎｔｉａｔｉｏｎ）の効果に応答し、ＨＩＶ感染に対するヒトモデルを与える 。パウザらのジャーナル・オブ・ピロロジー、第６２巻、第３５５８〜３５６４ 頁、１９８８年。

発明の概要 ヒト細胞でのヒト免疫不全ウィルス（ＨＩＶ）の複製へのビタミンＤ化合物の効 果を説明する。生理学的に活性な代謝産物である１α、２５−ジヒドロキシコレ カルシフェロール（１，２５ＤＨＣＣ）及びその類似体の２つであるｌα、２５ −ジヒドロキシ−２４，２４−ジフルオロコレカルシフェロール（１，２５ＤＨ ＦＣＣ）及び１α、２５−ジヒドロキシ−２６，２７−ヘキサジューテロコレカ ルシフェロール（１，２５ＤＨＨＤＣＣ）は、投与量に依存するようにしてウィ ルスの複製を抑制した。この働きは、細胞の成長と表現型へのこれら化合物の前 分化効果を伴なった。この結果は、これらのビタミンＤ化合物及び細胞分化活性 を有する他のものが後天性免疫不全症候群の治療で有用であり得ることを示して いる。

したがって、１α−ヒドロキシビタミンＤ同族体化合物、１９−ツルービタミン Ｄ化合物およびセコステロール化合物からなる群から好ましくは選択される細胞 分化活性を有する１種またはそれ以上の３種のビタミンＤ化合物を、ヒト免疫不 全ウィルス感染及び後天性免疫不全症候群の治療に有用な適当なキャリヤーと共 に含む組成物について説明する。治療は、局所的、経口的または非経口的であっ てよい。組成物の使用方法も説明する。化合物は、組成物に対し約０．Ｏｌ　ｕ ｇ／ｇｍ〜約１００μｇ／ｇｍの量で組成物に存在し、約０．０１μｇ／日〜約 １００μｇ／日の投与量で経口的にまたは非経口的に投与される。

本発明の１態様では、ヒト免疫不全ウィルス感染及び後天性免疫不全症候群の治 療用の一種またはそれ以上の側鎖不飽和１α−ヒドロキシビタミンＤ同族体化合 物を含む組成物が提供される。これら組成物の使用方法も提供される。

本発明のもう１つの態様では、ヒト免疫不全ウィルス感染及び後天性免疫不全症 候群の治療用の一種またはそれ以上の側鎖飽和１α−ヒドロキシビタミンＤ同族 体化合物を含む組成物が提供される。

これら組成物の使用方法も提供される。

本発明のさらにもう１つの態様では、ヒト免疫不全ウィルス及び後天性免疫不全 症候群の治療用の一種またはそれ以上の１９−ツルービタミンＤ化合物を含む組 成物が提供される。これら組成物の使用方法も提供される。

本発明のさらにもう１つの態様では、ヒト免疫不全ウィルス及び後天性免疫不全 症候群の治療用の一種またはそれ以上のセコステロール化合物を含む組成物が提 供される。これら組成物の使用方法も提供される。

ここに開示した化合物は望ましくない全身性または局所性の副作用を生ずること なく高度に効果的な治療を予想外にももたらす。

図面の簡単な説明 第１図は、１．２５−ジヒドロキシビタミンＤ、（１，２５０ＨＣＣ）の３つの 異なる濃度についてのＨＩＶ感染Ｕ９３７細胞のリバーストランスクリブターゼ 活性対時間のグラフである。

第２図は、６種の異なるビタミンＤ化合物についてのＵ９３７細胞中のＨＩＶ複 製の百分率抑制対濃度のグラフである。

第３図は、３種の異なるビタミンＤ化合物についてのＵ９３７細胞中のＨＩＶ複 製の百分率抑制及び百分率細胞分化対濃度のグラフである。

第４図は、ビタミンＤ、処理Ｕ９３７細胞中のウィルスＲＮＡの混成分析を示し ている。

第５図は、１．２５−　（ＯＨ）ｔ　Ｄａ及びその同族体の３種についての百分 率細胞分化ウィルス対濃度のグラフである。

第６図は、試験をしたビタミンＤ代謝産物と類似体の各種構造を示す。

第７図は、ニトロブルーテトラゾリウム還元により測定されるようなＨＬ−６０ 細胞分化を誘導するＯＨ類似体の能力を示す。

第８図は、一連の２５−０Ｈ−Ｄ、及び２５−０Ｈ−Ｄ、代謝産物及び類似体に よるＨＬ−６０細胞の食作用活性の誘導を示す。

第９図は、ＨＬ−６０細胞中での非特異的酸エステラーゼ活性を誘導する１、２ ５−　（ＯＨ）２　Ｄ３類似体の活性への側鎖の伸長（ｅｌｏｎｇａｔｉｏｎ） 及び／または切断（ｔｒｕｎｃａｔｉｏｎ）及び５，６−異性化の効果を示す。

第１０図は、４日間の温室の後、ＨＬ−６０細胞中にＮＢＴ還元活性を誘導する ｌ、２５−　（ＯＨ）！　Ｄ、の短鎖の第一アルコール類似体の活性を示す。

第１１図は、ＨＬ−６０細胞中に１，２４Ｒ，２５−（ＯＨ）＊Ｄ、及び１．２ ５−　（ＯＨ）　ｔＤ、により誘導される非特異性酸エステラーゼ活性を示す。

発明の詳細な説明 ビタミンＤ、の以下の類似体（を髄形成異常症候群、ウチノら版エルセピア（Ｅ ｌｓｅｖｉｅｒ）　、第１３３〜１３８頁、１９８８年）を、感染Ｕ９３７細胞 培養物でのＨＩＶ複製へのその効果について評価した。Ａ：１，２５−ジヒドロ キシコレカルシフェロール（１，２５ＤＨＣＣ）　、Ｂ　：　１，２５−ジヒド ロキシ−２４，２４ジフルオロコレカルシフエロール（１，２５ＤＨＦＣＣ）　 、Ｃ：　１，２５−ジヒドロキシ−２６，２７−ヘキサジューテロコレカルシフ ェロール（１，２５ＤＨＨＤＣＣ）、Ｄ　：　２５−ヒドロキシコレカルシフェ ロール（２５ＨＣＣ）　、Ｅ　：　２４Ｒ，２５−ジヒドロキシコレカルシフェ ロール（２４Ｒ，２５ＤＨＣＣ）及びＦ：２５Ｓ、２６−ジヒドロキシコレカル シフェロール（２５Ｓ、２５ＤＨＣＣ）。

細胞を含まない上澄を、ウィルス複製の手段としてリバーストランスクリブター ゼ活性について測定した。第１図は、１．２５−ジヒドロキシコレカルシフェロ ール（１，２５ＤＨＣＣ）が、０９３７細胞中のＨＩＶ−１複製を抑制すること を示している。成長しているＵ９３７細胞に、前記のバウザのジャーナル・オプ ・ピロロジー、第６２巻、第３５５８〜３５６４頁、１９８８年に記載したよう に１細胞当たり１．０組織培養感染投与量の感染多重度でＨＩＶ−１のＬＡＶＩ 株を感染させた。ＨＩＶに２．５時間さらした後、細胞を洗浄して細胞外ウィル スを除去し、次に、１０％熱不活性化ウシつ児血清及び１．２５ＤＨＣＣで補足 したＲＰＭｒ−１６４０媒体中で培養した。感染のこれらの条件下で、細胞の約 ７０％が１．２ｓＤＨＣＣの不在下の３日のポスト感染（ｄａｙ　３　ｐｏｓｔ −ｉｎｆｅｃｔｉｏｎ）でウィルスｇｐ１２０またはｐ２４に対し免疫蛍光法に 陽性であった。試料は、様々な間隔のポスト感染の後除去し、細胞の含まないリ バーストランスクリブターゼ活性を、パウザのジャーナル・オブ・ピロロジー、 第６２２巻、第３５５８〜３５６４頁、１９８８年に記載したようにして測定し た。２日目にサンプリングした後、培養物に、適当な濃度の１．２５ＤＨＣＣを 含む同じ容量の借地を補足した。黒丸は、未処理の対照感染についてのデータを 示す。丸は、１０−”　Ｍ、黒三角は、１０−”Ｍ、三角は、１０−”Ｍ（７） １．２５ＤＨＣＣにそれぞれ対応する。これらの結果は、５つの独立した測定の 平均を示すものである。

第１図に示すように、１．２５ＤＨＣＣは、試験したすべての投与量でウィルス の複製を抑制した。効果は投与量に依存し、ウィルス生産の時間経過を示す曲線 は右にずれた（第１図）、１０−’Ｍの薬剤濃度で、ウィルス生産のピークが３ 日目に観察され、これは未処理培養物の２日目のピークに比較されるものであり 、約３倍減ぜられた。１０−”Ｍの試料では、ＨＩＶ生産の証拠はほとんど観察 されなかった。１０−ｌ０Ｍで、ウィルス複製は、対照培養物と、同様に２日目 で制限されるが、このピークの大きさは急激に減少した。したがって、Ｕ９３７ 細胞での１．２５ＤＨＣＣ処理とＨＩＶ複製との間の容量一応答関係は、この薬 剤の２つの独立した活性を明らかにした：すなわち、ウィルス成長の定量的抑制 とウィルス複製のバタンの定性的変化。これらの特徴の両者は、Ｕ９３７細胞の 急性ＨＩＶ感染を抑制する１、２５ＤＨＣＣの能力を証明する。

１．２５ＤＨＣＣ処理培養物でのＨＩＶ複製のこのバタンに基づき、２日のポス ト感染を用いて、Ｕ９３７細胞のＨＩＶ複製へのビタミンＤ化合物の効果を比較 した。細胞は２．５時間バッチで感染させ、次に、洗浄してから、適当な濃度の 薬剤を含む個々のフラスコに分配した。第２図は、Ｕ９３７細胞でのＨＩＶ複製 を抑制する能力について試験したビタミンＤの６つの類似体の投与量一応答の曲 線の比較を示す。この場合、試料は、２日のポスト感染で集めた。ＨＩＶ感染と リバーストランスクリブターゼの分析は第１図に示すようであった。

第２図は、２種類の１．２５ＤＨＣＣ類似体、すなわち、１．２５ＤＨＤＦＣＣ および１，２５ＤＨＨＤＣＣが、ｌ、２５ＤＨＣＣ自体よりもよりＨＩＶ複製を 抑制したことを示している。ＨＩＶ複製の有意的な抑制は、これらの化合物の１ ０−１０Ｍの低濃度でも観察された。化合物２５ＨＣＣ及び２４Ｒ，２５ＤＨＣ Ｇは、試験した最大濃度でもＨＩＶ生産の減少に僅かに有効なだけであった。２ ５Ｓ、２６ＤＨＣＣ類似体は、抑制性が最低であるが、その有効濃度は、１．２ ５ＤＨＣＣの有効濃度より約２オーダはと高い。

ビタミンＤのこれらの６つの類似体の比較に基づ（と、初、めの３つだけが、さ らに調べるに値するに十分な活性を有すると考えられた。したがって、Ｕ９３７ 細胞の分化を減少させるこれら類似体の能力を調べ、ウィルス生産の抑制につい ての投与量一応答曲線と比較した。第３図は、０９３７分化及びＨＩＶ複製に対 する１、２５−ジヒドロキシコレカルシフェロール（１，２５ＤＨＣＣ）、１゜ ２５−ジヒドロキシヘキサデエーテロコレカルシフェロール（１゜２５ＤＨＨＤ ＣＣ）及び１．２５−ジヒドロキシジフルオロコレカルシフェロール（１，２５ ＤＨＤＦＣＣ）の効果を示している。第３図は、細胞分化の２つの処置、すなわ ち、テトラゾリウムリダクターゼの発現及び細胞増殖の抑制へのこれら代謝産物 の効果を示している。第３図の結果は、３つの別個の実験の平均を表している。

黒丸は、２日ポスト感染での細胞を含まないリバーストランスクリブターゼ活性 により分析されるようなＨＩＶ複製を抑制するこれら化合物の能力を示している 。黒画角は、原位置細胞学分析（ｉｎ　５ｉｔｕ　ｃｙｔｏｌｏｇｉｃ　ａｓｓ ａｙ）　（ブロベジニらのボーン、第７巻、第２３〜２８頁、１９８６年を参照 ）により評価されるようなテトラゾリウムリダクターゼ活性に陽性な細胞の百分 率を示している。細胞増殖もこれらの化合物により抑制された。抑制の程度は、 薬剤のそれぞれに対しほぼ同じであった。１．２５ＤＨＣＣについてのデータを ここに示してあり、これらのデータは、他の２つの類似体の効果を表している。

これらの分析で半最大限応答（ｈａｌｆ−ｍａｘｉｍａｌ　ｒｅｓｐｏｎｓｅ） を与える薬剤濃度がこのグラフから評価された。最大応答と最小応答の平均が、 計算され、この効果を減少させるのに必要な薬剤濃度が決定され、第１表にまと めである。

これらの結果は、ビタミンＤ化合物の前分化の効果がＨＩＶ複製のその抑制に匹 敵することを証明する。しかしながら、抗ウイルス性効果及び前分化効果は、各 効果に必要な半最大限類似体濃度を計算することにより区別できた。ＨＩＶ複製 または細胞分化に影響を与えるのに同様な濃度が必要とされた。ＨＩＶ複製の抑 制が、細胞分化への効果に関連づけられる機構により達成されたようである。

第１表 半最大限細胞分化＊を誘導するまたはＵ９３７細胞中のＨＩＶ複製複製上＊導す るのに必要な投与量 化合物抑制　リダクターゼ活性　成長抑制　ＨＩＶｌ、２５−ＤＨＣＣ１，４ｘ ｌＯ−１０Ｍ　１．ＯＯｘｌｏ−ＩＤ　５．４ｘｌＯ−’Ｍ１．２５ＤＨＨＤＣ Ｃ２，６ｘｌＯ”′。Ｍ　２．３ｘｌＯ−”Ｍ　５．０ｘｌＯ−”Ｍｌ、２５− ＤＨＤＦＣＣ４，７ｘｌＯ−’Ｍ　７．６ｘｌＯ−”Ｍ　１．２ｘｌＯ−＠Ｍ＊ 分化は、原位置でテトラゾリウム染料を還元する能力の獲得として測定した（ブ ロベジニらのボーン、第７巻、第２３〜２８頁、１９８６年に記載のようにした ）、半最大限濃度は１０−８Ｍ薬剤で処理した細胞と未処理細胞との間の５０％ の差を誘導できろ薬剤の濃度として決定した。細胞分化の抑制に対する値は同様 に計算した。

急性的に感染したＵ９３７細胞でのウィルス複製の程度を評価するため、細胞中 のウィルスＲＮＡ蓄積の分析を、ノーザン混成により行った。第４図は、ビタミ ンＤ３処理Ｕ９３７細胞でのウィルスＲＮＡの混成分析を示す。感染は、第１図 に関して記載したように行った。時間経過分析は、ウィルスＲＮＡ生産のピーク が２日ポスト感染で起ったことを示しており、したがって、このサンプリング間 隔を選んだ。合計細胞ＲＮＡは、グアニジニウムーイソチオシアネート抽出と勾 配精製により得た。精製したサンプルは、水に溶解させ、核酸の濃度を、２６０ ｎｍでの光学濃度から決定した。各ＲＮＡ２０マイクログラムをル−ン当たりに 充填した。９，２．４．３及び２．０ｋｂＨＩＶ−ＲＮＡ種が、ＬＴＲ−特異性 フラグメントによる混成により検知され、その位置を第４図に示した。ＨＩＶ− １遺伝子発現のバタンを明らかにするためのオートラジオグラフ照射（ａｕｔｏ ｒａｄｉｏｇｒａｐｈｉｃ　ｅｘｐｏｓｕｒｅ）の後、フィルターを取り、マウ スβ−アクチンプローブ（ｍｏｕｓｅβ−ａｃｔｉｎ　ｐｒｏｂｅ）で再混成さ せた。β−アクチンｍＲＮＡの強度を対照とさせる。

このように試験したビタミンＤ化合物は、処理ずみ細胞のＨＩＶリボ核酸（ＲＮ Ａ）の減少をもたらす、すなわち、ビタミンＤ処理培養物の混成の強度は、未処 理対照培養物に観察されるものの約１／２であった。この値は、第１図に示す減 少したウィルス生産と一致する。

上記評価の結果として、また細胞分化とＨＩＶ複製の抑制との間の説明した関係 に基づき、各種の他のビタミンＤ化合物が、同じまたは同様な治療学的な活性を 有すると予期される。本発明の組成物中で有用でありまた後天性免疫不全症候群 の治療に有用なビタミンＤ化合物は、細胞分化を誘導するビタミンＤ化合物であ り、好ましくは、腸カルシウム吸収または骨カルシウム代謝に最小の影響でまた は全く影響を与えず細胞分化を誘導するビタミンＤ化合物である。したがって、 上記の機能により定義されるビタミンＤ化合物の具体的な好ましい例は、１α− ヒドロキシビタミンＤ同族体化合物、１９−ノルビタミンＤ化合物及びセコステ ロール化合物からなる群から選択されるものである。

本発明で有用な１α−ヒドロキシビタミンＤ同族体化合物は、ビタミンＤの側鎖 不飽和及び側鎖飽和の同族体として構造的に特徴づけられ、好ましくは、側鎖が 炭素６位で鎖に１つまたはそれ以上のメチレン単位を挿入して伸長した１、２５ −　（ＯＨ）＊　Ｄ−の側鎖不飽和および側鎖飽和の同族体として構造的に特徴 づけられる。したがって、これらは、式１ （式中、Ｒ４及びＲ６は水素、デユーチリウムまたはフッ素を示すか、またはＲ ４及びＲＩｌが一緒になって、炭素−炭素二重結合または炭素−炭素三重結合を 示し、Ｒｒｓは水素、デユーチリウム、ヒドロキシ、保護したヒドロキシ、フッ 素またはアルキル基を示し、Ｚは水素、ヒドロキシまたは保護したヒドロキシを 示し、Ｒ３は水素、ヒドロキシ、保護したヒドロキシ、フッ素またはアルキル基 を示し、Ｘ及びＹは、同じでも異なっていてもよ（、水素またはヒドロキシ保護 基であり、Ｒ１は基−ＣＦ、　、−ＣＤ、または−（ＣＨｚ）ｑ−Ｈな示し、そ してＲ２は、基−ＣＦ、　、−ＣＤｓまたは−（ＣＨ，）、−Ｈを示し、ここで 、ｎ、ｑ及びｐは、相互に無関係な値１〜５の整数であり、Ｒ３とＲ２が一緒に なったときは、基−（ＣＨｌ）＋−−（式中、ｍは、２〜５の値の整数である） を示す）の−殻構造式により示すことができる。

ここで述べた１９−ツルービタミンＤ化合物は、１α−ヒドロキシル化ビタミン Ｄ化合物（ここで、すべてのビタミンＤに典型的であるリングＡエキソ環メチレ ン基（炭素１９）が、除去されていで、２つの水素原子により置換されている） の種類である。構造的には、これら新規類似体は、次の一般式（式中、ｘ′及び Ｙｌは水素、アシル、アルキルシリル及びアルコシキアルキルからなる群からそ れぞれ選択され、基ＵはビタミンＤ化合物に公知の典型的な側鎖のいずれかを示 す）により特徴づけられている。Ｕは、アルキル、水素、ヒドロキシアルキルま たはフルオロアルキル基であってよく、またはりは、次の側鎖（式中、Ｚｌは、 水素、ヒドロキシまたはＯ−アシルな示し、Ｒ６及びＲ７は、アルキル、ヒドロ キシアルキル及びフルオロアルキル、デユーテロアルキルからなる群からそれぞ れ選択され、または−緒になって、基−（ＣＨｚ　）−−（ここで、ｍは２〜５ の値を有する整数である）を示し、Ｒｏは水素、デユーチリウム、ヒドロキシ、 フッ素、０−アシル、アルキル、ヒドロキシアルキル及びフルオロアルキルから なる群から選択され、Ｒ９は水素、デユーチリウム、フッ素、アルキル、ヒドロ キシアルキル及びフルオロアルキルからなる群から選択され、またはＲ，及びＲ ９は一緒になって、二重結合した酸素または二重結合した炭素を示し、Ｒ３゜及 びＲＩ＋は水素、デユーチリウム、ヒドロキシ、０−アシル、フッ素及びアルキ ルからなる群からそれぞれ選択されるかまたはＲ，。及びＲＩｌが一緒になって 炭素−炭素二重結合または炭素−炭素三重結合を形成し、ｎが、１〜５の値を有 する整数であり、側鎖中の２０位、２２位または２３位のいずれか１つの炭素が Ｏ，ＳまたはＮ原子により置換されていてもよい）を示していてよい。

１９−ノル化合物の側鎖の具体的な重要な例は、下記の式（ａ）、（ｂ）、（ｃ ）、（ｄ）及び（ｅ）により示される構造である：すなわち、側鎖が次のように ＝２５−ヒドロキシビタミンＤｓ（ａ）；ビタミンＤ＊　（ｂ）；２５−ヒドロ キシビタミンＤａ　（ｃ）；ビタミンＤｉ　（ｄ）；及び２５−ヒドロキシビタ ミンＤ、（ｅ）のＣ−２４−エピマーのものである。

純粋に構造的に、ここで述べる種類のセコステロール化合物は、公知のビタミン Ｄ化合物の幾つかと類似性をもっている。しかしながら、公知のビタミンＤとは 異なり、本発明で用いられるセコステロールは、生体内で古典的ビタミンＤ活性 を表さない、すなわち、腸のカルシウム輸送の刺激または骨カルシウムの流通代 謝を表さなく、したがってそれらは、機能的見地からはビタミンＤ誘導体として 分類できない。従来技術に照らし、これらセコステロールが、ＡＩＤＳの治療で 顕著に効果的であることの発見は、それだけ驚くべきことでまた予想外のことで あった。この知見はエイズの治療に対する有効な方法を提供するものであり、そ の理由は、前記のセコステロールが、高く毒性の血液カルシウムレベルを同時に 非生理的に生ずることなくＨＩＶ複製を抑制するのに十分な投与量で被験者に投 与できるからである。

この独特で、したがって認められていながった活性バタンを発揮する一群のセコ ステロールは、下記の一般構造式てＸ２及びＹ２は、それぞれ独立に、水素、ア シル基またはヒドロキシ保護基を示す）により特徴づけられる。

明細書の説明及び請求の範囲で用いた用語ｒヒドロキシ保護基１は後続する反応 中にヒドロキシ機能の保護のために通常用いられる基を指すものであり、例えば 、アシル基またはアルキルシリル基、例として、トリメチルシリル基、トリエチ ルシリル基、ｔ−ブチルジメチルシリル基及び類似のアルキル化シリル基または アルコキシアルキル基、例えば、メトキシメチル、エトキシメチル、メトキシエ トキシメチル、テトラヒドロフラニルまたはテトラヒドロピラニルである。ｒ保 護したヒドロキシｊは上記のヒドロキシ保護基の１つにより誘導されるヒドロキ シ機能である。「アルキル」は炭素数１〜１０の直鎖または分岐の炭化水素基で あり、すべての異性体を含むものであり、例えば、メチル、エチル、プロピル、 イソプロピル、ブチル、イソブチル、ペンチル等であり、用語ｒヒドロキシアル キルｊ及び「フルオロアルキルｊは１つまたはそれ以上のヒドロキシ基により置 換されたアルキル基及び１つまたはそれ以上のフルオロ基により置換されたアル キル基をそれぞれ指す。アシル基は１〜６個の炭素を有するアルカノイル基であ り、すべての異性体を含むものであり、あるいは、アロイル基、例えば、ベンゾ イル基または八日置換した、ニトロ置換したまたはアルキル置換したベンゾイル 基またはジカルボキシルアシル基例えばオキサリル、マロニル、サクシノイル、 グルタロイルまたはアジポイルである。用語ｒアリールＪはフェニル基またはア ルキル置換した、ニトロ置換したまたは八日置換したフェニル基を意味する。

ここでの説明で、用語「２４−ジホモ」は側鎖中の炭素２４位での２個のメチレ ン基の付加を意味し、用語ｌトリホモ１は同じ位置での３つのメチレン基の付加 を意味し、よって、両方の付加は、側鎖の長さを延長する効果を有することにな る。また用語ｒ２６，２７−ジメチルＪは炭素２６位及び２７位でのメチル基の 付加を意味し、したがって、たとえばＲ１及びＲ２はエチル基である。同様に用 語ｒ２６，２７−ジエチル」は、Ｒ１及びＲ２がプロピル基であるように２６位 及び２７位でのエチル基の付加を意味する。側鎖が不飽和である（したがってＲ ４及びＲ６が二重結合を表す）ときのこれら化合物の具体的な好ましい例を以下 に示す＝２４−ジホモ−１，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤａ 、すなわちＸ及びＹが水素であり、Ｚがヒドロキシであり、ｎが３であり、そし てＲ３及びＲ２がそれぞれメチル基である上記の化合物；２６゜２７−シメチル ー２４−ジホモ−１，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロビタミＤｓ、すなわ ち、Ｘ及びＹが水素であり、Ｚがヒドロキシであり、ｎが３であり、そしてＲ１ 及びＲ３がそれぞれエチル基である上記の化合物：２４−トリホモ−１，２５− ジヒドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤｓ、すなわち、Ｘ及びＹが水素であり 、Ｚがヒドロキシであり、ｎが４であり、そしてＲ１及びＲ２がそれぞれメチル 基である上記の化合物、２６．２７−シメチルー２４−トリホモ−１，２５−ジ ヒドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤｓ、すなわち、Ｘ及びＹが水素であり、 Ｚがヒドロキシであり、ｎが４であり、そしてＲ，及びＲ３がそれぞれエチル基 である上記の化合物；２６，２７−ジエチル−２４−ジホモ−１，２５−ジヒド ロキシ−２２デヒドロビタミンＤｓ、すなわち、Ｘ及びＹが水素であり、Ｚがヒ ドロキシであり、ｎが３であり、そしてＲ１及びＲ２がそれぞれプロピル基であ る上記の化合物、２６．２７−シエチルー２４−トリホモ−１，２５−デヒドロ ビタミンＤｓ、すなわち、Ｘ及びＹが水素であり、２がヒドロキシであり、ｎが ４であり、モしてＲ，及びＲ２がそれぞれプロピル基である上記の化合物；２６ ，２７−ジプロビルー２４−ジホモ−１，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロ ビタミンＤｓ、すなわち、Ｘ及びＹが水素であり、Ｚがヒドロキシであり、ｎが ３であり、そしてＲ１及びＲ２がそれぞれブチル基である上記の化合物；及び２ ６．２７−ジブロビル−２４−トリホモ−１，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒ ドロビタミンＤ８、すなわち、Ｘ及びＹが水素であり、Ｚがヒドロキシであり、 ｎが４であり、そしてＲ３及びＲ２がそれぞれブチル基である上記の化合物。

側鎖が飽和している（すなわちＲ４及びＲ３がそれぞれ水素を示す）これらの化 合物の具体的な好ましい例を次に示す：２４−ジホモー１．２５−ジヒドロキシ ビタミンＤａ、すなわち、Ｘ及びＹが水素であり、Ｚがヒドロキシであり、ｎが ３であり、そしてＲ，及びＲ２がそれぞれメチル基である上記の化合物；２６， ２７−シメチルー２４−ジホモ−１，２５−ジヒドロキシ−ビタミンＤａ、すな わち、Ｘ及びＹが水素であり、２がヒドロキシであり、ｎが３であり、そしてＲ ＋及びＲ２がそれぞれエチル基である上記の化合物；２４−）リボモー１．２５ −ジヒドロキービタミンＤｓｔすなわち、Ｘ及びＹが水素であり、Ｚがヒドロキ シであり、ｎが４であり、そしてＲ３及びＲ２がそれぞれメチル基である上記の 構造の化合物、２６．２７−シメチルー２４−トリホモ−１，２５−ジヒドロキ シ−ビタミンＤ１、すなわち、Ｘ及びＹが水素であり、Ｚがヒドロキシであり、 ｎが４であり、そしてＲ１及びＲ２がそれぞれエチル基である上記の化合物、２ ６．２７−ジエチル−２４−ジホモ−１，２５−ジヒドロキシ−ビタミンＤｓ、 すなわち、Ｘ及びＹが水素であり、Ｚがヒドロキシであり、ｎが３であり、そし てＲ１及びＲ２がそれぞれプロピル基である上記の化合物、２６．２７−ジエチ ル−２４−トリホモ−１，２５−ジヒドロキシ−ビタミンＤ。

すなわち、Ｘ及びＹが水素であり、Ｚがヒドロキシであり、ｎが４であり、そし てＲ２及びＲ２がそれぞれプロピル基である上記の化合物；２６，２７−ジプロ ビルー２４−ジホモ−１，２５−ジヒドロキシ−ビタミンＤ１、すなわち、Ｘ及 びＹが水素であり、Ｚがヒドロキシであり、ｎが３であり、そしてＲ３及びＲ２ がそれぞれブチル基である上記の化合物；及び２６．２７−ジプロビルー２４− トリホモ−１，２５−ジヒドロキシ−ビタミンＤ１、すなわち、Ｘ及びＹが水素 であり、Ｚがヒドロキシであり、ｎが４であり、そしてＲ３及びＲ２がそれぞれ ブチル基である上記の化合物。

石　７、の　Ｉ電　Ａ　びＸ１５　Ａ　の１′告：側鎖が飽和した本発明の化合 物の例は「細胞分化の誘導で効果的な化合物及び該化合物の製造方法（Ｃｏｍｐ ｏｕｎｄｓ　Ｅｆｆｅｃｔｉｖｅ　Ｉｎ　Ｉｎｔｒ。

ｄｕｃｉｎｇ　Ｃｅ１ｌ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　Ａｎｄ　Ｐｒｏｃ ｅｓｓ　Ｆｏｒ　Ｐｒｅｐａｒｉｎｇ　Ｓａｍｅ）」とタイトルのついた１９９ ０年５月２２日付米国特許第４，９２７．８１５号（参考としてここに記載した ）に記載の一般的な方法に従って製造できる。側鎖が不飽和な本発明の化合物の 例は「ビタミンＤ関連化合物及びその製造方法（Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｄ　Ｒｅ１ａ ｔｅｄ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ａｎｄ　Ｐｒｏｃｅｓｓ　Ｆｏｒ　Ｔｈｅｉｒ　 Ｐｒｅｐａｒａｔｉｏｎ）　Ｊとタイトルのついた１９８９年６月１１日付米国 特許第４，８４７，０１２号（参考としてここに記載した）に記載の一般的な方 法に従い製造できる。Ｒ８及びＲ２が一緒になってシクロペンタノ基を示す本発 明の化合物の例は［新規シクロペンタノ−ビタミンＤ類似体（Ｎｏｖｅｌ　Ｃｙ ｃｌｏｐｅｎｔａｎ。

−Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｄ　ａｎａｌｏｇｓ）　Ｊとタイトルのついた１９８９年６ 月２５日付米国特許第４，８５１，４０１号（参考としてここに記載した）に記 載の一般的方法に従い製造できる。

１α、２５−ジヒドロキシエルゴカルシフェロールの側鎖修飾類似体の製造のも う１つの合成方法は、カトナーらのザ・ジャーナル・オブ・オーガニック・ケミ スト！Ｌ：　（Ｔｈｅ　Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　ｏｒｇａｎｉｃ　Ｃｈｅｍｉｓ ｔｒｙ）　、１９８８年、第５３巻、第３４５０〜３４５７頁に記載されている 。さらに、２４−ホモおよび２６−ホモビタミンＤ類似体の製造は、「優先的抗 癌活性を有する側鎖ホモ−ビタミンＤ化合物（Ｓｉｄｅｃｈａｉｎ　Ｈｏｍｏ− Ｖｉｔａｍｉｎ　Ｄ　Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　Ｗｉｔｈ　Ｐｒｅｆｅｒｅｎｔｉａ ｌ　Ａｎｔｉ−Ｃａｎｃｅｒ　Ａｃｔｉｖｉｔｙ）　Ｊとタイトルのついた１９ ８８年１月５日付米国特許第４．’７１７，７２１号（参考としてここに記載し た）に開示されている。

１９−ノルービ　ミンＤ　Ａ　の　 式　で上記した基本構造を有する１α−ヒドロキシ−１９−ツルービタミンＤ化 合物の製造は、出発原料として公知のビタミンＤ化合物を用い、通常の一般的方 法により達成できる。ｌα、２５−ジヒドロキシ−１９−ツルービタミンＤ３の 合成については、バールマンらのテトラヘドロン・し　−ズＰｅｒ１ｍａｎ　ｅ ｔ　ａｌ、、　ＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎＬｅｔｔｅｒｓ）、１９９０年、第３１ 巻、第１８２３〜１８２４頁を参考としてあげる。適当な出発原料は、たとえば 、−殻構造（式中、Ｕは、上記に定義した側鎖のいずれかである）のビタミンＤ 化合物である。これらのビタミンＤ出発原料は、公知の化合物または公知の方法 により製造できる化合物である。　・デル−力らの米国特許第４．１９５，０２ ７号の手順を用い、出発原料は、下記の一般構造式（ここで、ｘ３は水素を示し 、Ｑはアルキル好ましくはメチルを示す）を有する対応する１α−ヒドロキシ− ３，５−シクロビタミンＤ誘導体に変換する：α 後続段階で、１α−ヒドロキシ基の望ましくない反応を排除するために、ヒドロ キシ基は標準的なアシル化手順を用いたとえば室温でまたは僅かに高められた温 度（３０〜７０℃）でピリジン中で無水アシルまたはアシル化手順による処理に より対応するアシル誘導体すなわちＸ３がアシル基である上記の化合物Ｖに変換 する０本発明の方法をヒドロキシ機能のアシル保護について説明しためＳ、標準 的なヒドロキシ保護基たとえばアルキルシリル基またはアルコキシアルキル基も 用いることができることを理解すべきである。そのような保護基は、本技術分野 で周知であり（たとえば、トリメチルシリル、トリエチルシリル、ｔ−ブチルジ メチルシリルまたはテトラヒドロフラニル、メトキシメチル）、その使用は、本 発明の方法の範回内での実験的詳細の常套的な変更と見なされる。

上記のように得られる誘導体は、四酸化オスミウムと反応させて１０．１９−ジ ヒドロキシ同族体Ｖｌ（ここでＸ３はアシルである）を生じさせ、これを、メタ 過沃素酸ナトリウムまたは同様なビシナルジオール裂開試薬（ｃｌｅａｖａｇｅ 　ｒｅａｇｅｎｔ）　（たとえば、四酢酸鉛）を用いたジオール裂開にかけて下 記の構造Ｖ１１（ここで、Ｘ３は、アシルである）を有する１０−オキソ−中間 体を得る：これらの２つの連続する段階は、パアアレン（Ｐａａｒｅｎ）ら（ジ ャーナル・オブ・オーガニック・ケミストリー（Ｊ、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｍ、） 　４８．３８１９　（’１９８３）　）により与えられた手順に従って行うこと ができる。側鎖ユニットＵが、ビシナルジオールな有する場合（たとえば、２４ ．２５−ジヒドロキシまたは２５．２６−ジヒドロキシ等）、当然これらも過沃 素酸塩裂開反応に先立ちたとえばイソプロピリデン誘導体としてまたはアシル化 、シリル化を介して保護される必要がある。

はとんどの場合、前記のような１α−ヒドロキシ基のアシル化は、側鎖ヒドロキ シ機能のアシル化を同時的に行い得、また、当然、これらのアシル化条件は、側 鎖ビシナルジオール基の完全な保護を確保するために適当に調節され得る（たと えば、高めた温度、長い反応時間）。

プロセスの次の段階は、１０−オキソ基を、下記構造式（ここで、Ｘ３はアシル であり、Ｙｌはヒドロキシを示す）を有する対応□　する１０−アルコールへの 還元を含む。Ｘ３がアシルであるとき、この還元は、エステル機能を裂開するこ となくカルボニル基の還元に選択的なＮ　ａ　Ｂ　Ｈ４または均等な水素化物還 元剤を用いて約り℃〜室温で有機溶剤中で有利に行われる。当然、Ｘ３が、還元 剤に安定なヒドロキシ保護基であるなら、他の水素化物還元剤のいずれか（たと えばＬｉＡｌＨ４または類似薬剤）を用いてもよい。

次に、このｌＯ−ヒドロキシ中間体を適当な溶剤（たとえばピリジン）中でアル キルスルホニルハライドまたはアリールスルホニルハライド（例えばメタンスル ホニルクロリド）で処理をして対応する１０−０−アルキルスルホニルまたは１ Ｏ−０−アリールスルホニル中間体（Ｙ３がアルキル−８０２０−またはアリー ル−８Ｏ２０−である前記構造Ｖｌｌｌｔ−有する化合物）を得て、次にこのス ルホネート中間体を水素化アルミニウムリチウムまたは類似の公知の水素化アル ミニウムリチウムアルキルにより、エーテル溶剤中で、Ｏ℃〜溶剤の沸点で、直 接還元し、スルホネート基を置換して、ｘ３およびＹ３が両者とも水素である上 記構造Ｖ川で示される１０−デオキシ誘導体を得る。上記構造により示されるよ うに、先駆化合物　の１−０−アシル基もこの還元段階で裂開して遊離の１α− ヒドロキシ基を生じ、側鎖中のＯ−アシル保護基が、本分野で理解されるように 、同様に、対応する遊離のアルコール官能基に還元される。所望なら、Ｃ−１の ヒドロキシ基（または側鎖中のヒドロキシ基）は、アシル化またはシリル化また はエーテル形成により再保護されて対応するアシル、アルキルシリルまたはアル コキシ誘導体としてもよいが、このような保護は必要ではない。別法として、ア ルキルシリル基またはアルコキシアルキル基のようなヒドロキシ保護基を、この 還元段階で保持してもよいが、所望により本分野で公知の標準的な方法によりプ ロセスのこの段階または後の段階で所望のようにして除去してもよい。

構造式■で示されるスルホネート（Ｙ″がアルキル−ＳＯ，Ｏ−またはアリール −３Ｏｗ　Ｏ−である前記構造式）、次にこのスルホネート中間体を水素化アル ミニウムリチウムまたは類似の公知の水素化アルミニウムリチウムアルキルによ り、エーテル溶剤中で、０℃〜溶剤の沸点で、直接還元し、スルホネート基を置 換して、Ｘ３及びＹ３が両者とも水素である上記構造式で示される１０−デオキ シ誘導体を得る。上記構造式により示されるように、先駆化合物Ｖｌｌの１−〇 −アシル基もこの還元段階で裂開して遊離の１α−ヒドロキシ基を生じ、側鎖中 のＯ−アシル保護基が、本分野で理解されるように、同様に、対応する遊離のア ルコール基に還元される。所望なら、Ｃ−１のヒドロキシ基（または側鎖中のヒ ドロキシ基）は、アシル化またはシリル化またはエーテル形成により再保護され て対応するアシル、アルキルシリルまたはアルコキシ誘導体としてもよいが、こ のような保護は必要ではない、別法として、アルキルシリル基またはアルコキシ アルキル基のようなヒドロキシ保護基を、この還元段階で保持してもよいが、所 望により本分野で公知の標準的な方法によりプロセスのこの段階または後の段階 で所望のようにして除去してもよい。

上記１α−ヒドロキシ−１０−デオキシシクロビタミンＤ中間体を次にデル−力 らの米国特許第４，１９５，０２７号および同第４．２６０，５４９号の条件を 用いて低分子量有機酸の存在下で加溶媒分解する。ソルボシスを酢酸中で行う場 合、たとえば、１α−ヒドロキシ−１９−ツルービタミンＤ　３アセテートと１ α−ヒドロキシ−１９−ツルービタミンＤ１アセテート（下記化合物■とＸ）と の混合物が得られ、ソルボシスに代わりの酸を用いると、類似体１−アシレート と３−アシレートが生じる。

上記の１α−ヒドロキシ−１０−デオキシシクロビタミンＤ中間９体を次に低分 子量有機酸の存在下で、デル−力ら（ＤｅＬｕｃａ　ｅｔ　ａｔ、）米国特許第 ４，１９５，０２７号及び同第４，２６０，５４９号の条件を用いてソルボリシ スした。ソルボリシスを、例えば、酢酸中で行えば、１α−ヒドロキシ−１９− ツルービタミンＤ３−アセテートと１α−ヒドロキシ−１９−ツルービタミンＤ １−アセテート（下記化合物ＩＸ及びＸ）の混合物が得られ、代わりの酸をソル ボリシスに用いると類似の１−及び３−アシレートが得られる。

次にこの混合物を標準条件下で塩基性加水分解すれば目的の上記構造ｎ（Ｘ’及 びＹｌがともに水素）の】α−ヒドロキシ−１９−ツルービタミンＤ化合物が作 られる。代りに、上記モノアセテート混合物は分離すること（例えば、高圧液体 クロマトグラフィーにより）もでき、得られるセテート及び３−アセテート異性 体は別々に加水分解に付され、それぞれから同じ最終生成物、すなわち、構造■ の１α−ヒドロキシ−１９−ツルービタミンＤ化合物が得られる。また構造■ま たはＸの分離したモノアセテートあるいは遊離の１．３−ジヒドロキシ化合物は 、もちろん、Ｘｌ及びＹｌが同じで−も異っていてもよいアシル基を表わす構造 Ｈの生成物が得られるよう所望のアシル基を用い標準的な操作に従って再アシル 化することができる。

本発明に有用な１９−ツルービタミンＤ化合物を下記の説明のための例によりさ らに詳しく説明する。これらの例において、ローマ数字とアルファベット、例え ば、ｎａ、ｎｂ、・・・で特定したそれぞれの生成物は上記の説明において特定 したそれぞれの構造及び側鎖結合に対比する。

１α、２５−ジヒドロキシ−１９−ツルービタミンＤ−（Ｉｌａ）の調製 （ａ）二Ｌ」ヨヒヱよ上三ヱ辷≦Ｌ」ユ之ｚ１白江し」エユ二乙立二二Σ工旦二 区±上王：ヱ基：出発物質として２５−ヒドロキシビタミンＤ、（ＩＶａ）を用 い公表された方法（デル−力ら、（ＤｅＬｕｃａ　ｅｔａｌ、）米国特許第４， １９５，０２７号及びバーシンら、ジャーナル・オブ・オルガニック・ケミスト リー（Ｐａａｒｅｎ　ｅｔ　ａｌ、。

Ｊ、　Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｍ、）土５．３２５２　（１９８０）　）に従って公知 の１α。

２５−ジヒドロキシ−３，５−シクロビタミン誘導体Ｖａ　（Ｘ”　＝Ｈ）を調 製した。次いでこの生成物を標準条件下でアシル化して対応する１−アセテート 誘導体Ｖａ　（Ｘ”　＝Ａｃ）を得た。

（ｂ）１０１’ヒヱよ上且ユ虹ａ　１０工１１工り辷Ｊひｊよドロキシ−３−シ クロビタミンＤ３１−アセテート　６−メチ止玉二ヱ五ユ旦Ａ）：中間体Ｖａ　 （Ｘ”　＝Ａｃ）をバーシンら（ジャーナル・オブ・オルガニック・ケミストリ ー（Ｐａａｒｅｎ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ。

Ｏｒｇ、　Ｃｈｅｗ、）生旦、　３８１９　（１９８３）　）の記載した一般的 な操作に従ってとリジン中僅か過剰モル量の四酸化オスミウムを用いて処理し、 １０．１９−ジヒドロキジル化誘導体ＶＴａを得た。質量スペクトルｍ／ｚ　（ 相対強度”）　、　５０６　（Ｍ”、　１）、　４８８　（２）、　４７４　（ ４０）、　４２５　（４５１゜３９６　（１５）、　２８５　（５）、　２２９ （３０）、　１３３　（４５）、　５９　（８０）、　４３　（１００）、　’ Ｈ。

ＮＭＲ（ＣＤＣＩｓ）　δ　０．５２　（３８，ｓ、　１８−ＣＨｓ）、　０． ５８　（ｌｈ、　ｒｎ、　３−Ｈ）、　０．９３（３Ｈ，ｄ、Ｊ＝６．１　Ｈｚ 、　２ｌ−ＣＨｓ）、１．２２　（６Ｈ，ｓ、２６−Ｃ）１．　および　２７− ＣＨｓ）。

２．１０　（３Ｈ，ｓ、　Ｃ０ＣＨｓ）、　３．２５　（３Ｈ，ｓ、　６−ＯＣ Ｈｓ）、　３．６３　（２Ｈ，ｍ、　ｌ９−ＣＨ，）、　４．６０　（ＩＨ，ｄ 、　Ｊ＝９．２　Ｈｚ、　６−Ｈ）、　４．６３　（ＬＨ，ｄｄ、　１β−Ｈ） 。

４．６７　（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝９．２　Ｈｚ、　７−Ｈ）。

（ｃ）よ旦、ｌ５二２よまＪコ」−ヨ」と≦ＬＬと１影、ｉユ乞２三−１９−ノ ルービ　ミンＤ、１−アセテート　６−メチルエーテル−０１互）　：　１０　 、　１９−ジヒドロキジル化中間体ＶＴａをパー・レンら（Ｐａａｒｅｎ　ｅｔ 　ａｌ、）　（ジャーナル・オブ・オルガニック・ケミストリー（Ｊ、　Ｏｒｇ 、　Ｃｈｅｗ、）土足、　３８１９　（１９８３）　）の記載した操作に従って メタ過ヨウ素酸ナトリウムの溶液を用いて処理し、１０−オキソ−。

シクロビタミンＤ誘導体（■ａ、Ｘ”　＝Ａｃ）を得た。質量スペクトルｍ／ｚ 　（相対強度）　、　４４２　（Ｍ”　−ＭｅＯＨ）　（Ｈｔ）、　４２４　（ ８）、　３６２（１５）。

３６４　（３５）、　２５３　（５５）、　２２５　（２５）、　１９７（５３ ）、　１５５　（８５）、　１３７　（１００）。

’Ｈ，ＮＭＲ（ＣＤＣ１，）　δ　０．５８　（３Ｈ，ｓ、　１８−ＣＨｘ）、 　０．９３　（３Ｈ，ｄ、　Ｊ’６．６［（ｚ、　２ｌ−ＣＨｎ）、１．２２　 （６Ｈ，ｓ、２６−ＣＨｓ　および　２７−ＣＨｉ）、２．１５　（ｓ、３−Ｏ ＣＯＣＨ−）、　３．３０　（３Ｈ，ｓ、６−ＯＣＨｓ）、　４．６１（ＬＨ， ｄ、　、Ｊ’９．１　Ｈｚ、　６−Ｈ）、　４．７１　（ＩＨ，ｄ、　Ｊ＝９． ６　Ｈｚ、　７−Ｈ）、　５．１８　（ＬＨ，ｍ、　１６−Ｈ）。

このジオール開裂反応は高温を必要としないことも発見され、事実反応は一般的 にほぼ室温で好適に行える。

＝Ａｃ、Ｙ”　＝ＯＨ）：　１０−オキソ誘導体ＶＩ［ａ　（Ｘ’　＝Ａｃ）（ ２，２ｍｇ、４．６μｍｏｌ）を０．５ｍｌのエーテル中に溶解し、この溶液へ ５０μｌ　（５，３μｍｏｌ）のＮ　ａ　Ｂ　Ｈ４溶液（２０ｍｇのＮａＢＨ， ，４，５ｍｌの水及び０．５ｍｌの０．０ＩＮ・ＮａＯＨ溶液から調製）を添加 し、その混合物を０℃で約１．５時間かきまぜ、その後０℃で１６時間保持した 。その混合物へエーテルを添加し、有機相をブラインで洗浄し、Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏ Ａ上で乾燥し、濾過し、蒸発させた。粗生成物を１５ｘ１ｃｍシリカゲルカラム 上のカラムクロマトグラフィーで精製し、アルコール■ａ　（Ｘ”＝Ａｃ、Ｙ” 　＝ＯＨ）を酢酸エチル・ヘキサン混合液で溶離して１．４ｍｇ　（３μｍ０１ ）の生成物を得た。質量スペクトル　ｍ／ｚ（相対強度）、　４７６　（Ｍ’） （１）、　４４４　（８５）、　４２６　（ｌｌｉ）、　３８４　（３０）、　 ３６６（４８）、２５１　（２１）、　２５５　（３５Ｌ　２３７　（４８）、 １９９（１００）、１３９　（５１）、５９（５８１゜ （ｅ）　１α、２５−ジヒドロキシ−１９−ツルービタミンＤ８（ＩＩａ、Ｘ’ 　＝＝Ｙ’　＝Ｈ）：１０−アルコール（■ａ、Ｘ”　＝Ａｃ。

Ｙ”　＝ＯＨ）（１，４ｍｇ）を１００μｌの無水ＣＨ，Ｃ１，及び１０μｌ　 （１４ｕｍｏｌ）のトリエチレンアミン溶液（１２ｍｇ（１４μｌ）のトリエチ レンアミンを１００μｌ無水ＣＨｔＣ１ｍで調製〕に溶解し、続いて７μｍ　（ ５，６μｍｏｌ）の塩化メチル（９ｍｇ塩化メシル、６．１ｕｌの１００μｍ無 水ＣＨｔＣ１，）溶液０℃で添加した。その混合物を０℃で２時間かきまぜた。

溶媒をアルゴン気流で除去し、残留物（化合物■ａ、Ｘ”　＝Ａｃ、Ｙ”＝ＣＨ ，Ｓｏ□０−を含んでなる）を０．５ｍｌの無水テトラヒドロフランに溶解し、 ０℃で５ｍｇのＬｉＡｌＨ４を添加し、混合物をＯ’Ｃで１６時間保持した。過 剰のＬｉＡＩＨ，を湿エーテルで分解し、エーテル相を水で洗浄し、Ｍ　ｇ　Ｓ 　ＯＡ上で乾燥し、濾過し、蒸発させて１９−ノル生成物■ａ　（Ｘ、”　＝Ｙ ”　＝Ｈ）を得た。

この生成物を０．５ｍｌの酢酸に溶解し、５５℃で２０分間かきまぜた。その混 合物を冷却し、氷水を添加してエーテルで抽出した。エーテル相を冷却した１０ ％炭酸水素ナトリウム溶液、ブラインで洗浄し、Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏ４上で乾燥し、 濾過し、蒸発させて所期の３−アセトキシ−１−α−ヒドロキシ−及びｌα−ア セトキシ−３−ヒドロキシ異性体の混合物を得た。それをＨＰＬＣ（ゾルパック スシル・カラム、　６−４　ｘ　２５　ｃ　ｍ　＋ヘキサン中２−プロパツール ）で分離、精製して化合物ＩＸａ及びＸａを各約７０μｇ得た。ＵＶ（エタノー ル中）え□、　２４２．５　（０００，７２）、　２５１．５　（０００，８６ ）、　２６０（ＯＤ　０．５７）。

１９−ツルー１，２５−ジヒドロキシビタミンＤ、アセテートＩＸａ及びＸａの 両方を同じ方法で加水分解した。各モノアセテートを０．５ｍｌのエーテルに溶 解し、０．５ｍｌのメタノール中０９ＩＮ−ＫＯＨを添加した。混合物をアルゴ ン雰囲気下で２時間かきまぜた。さらにエーテルを添加し、有機相をブラインで 恍浄し、無水Ｍ　ｇ　Ｓ　Ｏａ上で乾燥し、濾過し、蒸発させた。残留物を２− プロパツールとヘキサンの１：１の混合液に溶解し、セブ・パックカラム中を通 過させ、同じ溶媒で洗浄した。溶媒を蒸発させ、ＨＰＬＣ（ドルパックス・シル 、６．４ｘ２５ｃｍ、ヘキサ２９１０％２−プロパツール）で精製した。加水分 解生成物は同じであって、６６ｕｇのＩＩａ　（Ｘ’　＝Ｙ’　＝Ｈ）を得た。

質量スペクトル（ｍ／ｚ相対強度）　、　４０４　（Ｍ”）　（１００１，３８ ６（４１）、　３７１　（２０）、　２７５　（５３）、　２４５（５１）、　 １８０　（４３）、　１３５　（７２）、　１３３　（７２）、　９５　（８２ ）、　５９　（１ｇ）、精密質量（ＣｚａＨ４Ｊ−）　：計算値　４０４．３２ ９０　実測値　４０４．３２７２．　’ＨＮＭＲ（ＣＤＣＩｍ）　δ　０．５２ 　（３Ｈ，ｓ、　１８−ＣＨｓ）、　０．９２　（３Ｈ，ｄ、　Ｊ＝６．９　Ｈ ｚ、　２ｌ−ＣＨｓ）、１．２１　（６Ｈ，Ｓ、２６−ＣＨｓ　ｂよび　２７− ＣＨ，）、４．０２　（ＩＨ，ｍ、３　ａＨ）。

４．０６　（ＩＨ，ｍ、　ｌβ−Ｈ）、　５．８３　（ＩＨ，ｄ、　Ｊ：１１． ６　Ｈｚ、　７−Ｈ）、　６．２９　（］、ＩＨｄ、　ＪＪｏ、７　Ｈｚ、　６ −Ｈ）、ＵＶ（エタノール中）λ、、、　２４３　（ＯＤ　０．７２５）。

２５１．５　（０００，８２３）、　２６１　（ＯＤ　０．５９８）。

医−１ １α−ヒドロキシ−１９−ツルービタミンＤ、、（ｎｂ）の調製：（ａ）出発物 質としてビタミンＤｓ　（ＩＶｂ）を用い、例１ａの条件を用い公知の１α−ヒ ドロキシ−３，５−シクロビタミンＤ、１−アセテート、６−メチルエーテル、 化合物Ｖｂ　（Ｘ”　＝Ａｃ）が得られる。

（ｂ）上記例２ａのようにして得られた中間体Ｖｂ　（Ｘ”　＝Ａｃ）を例１の 条件に付すことによって、１０．１９−ジヒドロ−１ｃｚ。

１０．１９−）−リヒドロキシー３．５−シクロビタミン１−アセテート、６− メチルエーテルＶｌｂ　（Ｘ”　＝Ａｃ）が得られる。

（ｃ）中間体ＶＩｂ　（Ｘ”　＝Ａｃ）を上記例１ｃによってメタ過ヨウ素酸ナ トリウムでの処理によって、１α−ヒドロキシ−１０−オキソ−３，５−シクロ −１９−ツルービタミンＤｓｌ−アセテート。

６−メチルエーテル■ｂ　（Ｘ”　＝＝Ａｃ）が得られる。

（ｄ）１０−オキソ−中間体■ｂ　（Ｘ″＝Ａｃ）を上記例１ｄの条件下での還 元で１α−アセトキシ−１０−ヒドロキシ−３，５−シクロ−１９−ツルービタ ミンＤｓ６−メチルエーテル■ｂ　（Ｘ”　＝Ａｃ、Ｙ薯＝ＯＨ）が得られる。

（ｅ）中間体■ｂ　（Ｘ”　＝Ａｃ、Ｙ”　＝ＣＨ）を上記１ｅで示した操作に よって処理することにより１α−ヒドロキシ−１９−ツルービタミンＤｓ　（Ｉ ｌｂ、Ｘ’　＝Ｙ’　＝Ｈ）が得られる。

例−」。

１α、２５−ジヒドロキシ−１９−ツルービタミンＤ、の調製：（ａ）出発物質 として２５−ヒドロキシビタミンＤａ　（ｒＶｃ）を用い、例１ａのそれと類似 の実験条件を用いることによって、・１α。

２５−シトロキシ−３，５−シクロビタミンＤ、１−アセテート。

６−メチルエーテル、化合物Ｖｃ　（Ｘ”　＝Ａｃ）が得られる。

（ｂ）上記例３ａのようにして得られた中間体Ｖｃ　（Ｘ”　＝Ａｃ）を例１ｂ の反応条件に付すと、１０．１９−ジヒドロ−１α、１０．１９．２５−テトラ ヒドロキシ−３，５−シクロビタミンＤ。

１−アセテート、６−メチルエーテルＶＴｃ　（Ｘ”　＝Ａｃ）が得られる。

（ｃ）中間体Ｖｌｃ　（Ｘ”　＝Ａｃ）を上記例ＩＣの一般的な操作によるメタ 過ヨウ素酸ナトリウムでの処理によって、１α−ヒドロキシ−１０−オキソ−３ ，５−シクロ−１９−ツルービタミンＤ、１−アセテート、６−メチルエーテル ■ｃ　（Ｘ”　＝Ａｃ）が得られる。

（ｄ）１０−オキソ−中間体■ｃ　（Ｘ”　＝Ａｃ）を上記例１ｄの条件下での 還元により、１α−アセトキシ−１０，２５−ジヒドロキシ−３，５−シクロ− １９−ツルービタミンＤｚ６−メチルエーテル■ｃ　（Ｘ”　＝Ａｃ、Ｙ”　＝ ＣＨ）が得られる。

（ｅ）中間体■ｃ　（Ｘ”　＝Ａｃ、Ｙ”　＝ＣＨ）を上記１ｅで示した操作段 階で処理することにより１α、２５−ジヒドロキシ−１９−ツルービタミンＤ２ 　（ＩＩＣ，Ｘ’　＝Ｙ’　＝Ｈ）が得られる。

皿−Ａ １α−ヒドロキシ−１９−ツルービタミンＤ２の調製：（ａ）出発物質としてビ タミンＤ、（ＩＶｄ）を用い、例１ａの条件を用いて、公知の１α−ヒドロキシ −３，５−シクロビタミンＤ２１−アセテート６−メチルエーテル、化合物Ｖｄ 　（Ｘ”　＝Ａｃ）が得られる。

（ｂ）上記例４ａのようにして得られた中間体Ｖｄ、（Ｘ”　＝Ａｃ）を例１ｂ の反応条件に付すと、１０．１９−ジヒドロ−１α、１０．１９−）−リヒドロ キシー３．５−シクロビタミンＤ、１−アセテート、６−メチルエーテルＶＩｄ 　（Ｘ”　＝Ａｃ）が得られる。

（Ｃ）中間体ＶＩｄ　（Ｘ”　＝Ａｃ）を上記例１ｃによるメタ過ヨウ素酸ナト リウムでの処理によって、１α−ヒドロキシ−１０−オキソ−３，５−シクロ− １９−ツルービタミンＤ、１−アセテート、６−メチルエーテル■ｄ　（Ｘ”　 ＝Ａｃ）が得られる。

（ｄ）１０−オキソ−中間体■ｄ　（Ｘ”　＝Ａｃ）を上記例１ｄの条件下で− の還元により、１α−アセトキシ−１０−ヒドロキシ−３゜５−シクロ−１９− ツルービタミンＤ、６−メチルエーテル■ｄ（Ｘ”　＝Ａｃ、Ｙ’　＝ＯＨ）が 得うレル。

（ｅ）中間体■ｄ　（Ｘ”　＝Ａｃ、Ｙ”　＝ＯＨ）を上記１ｅで示した操作で 処理することにより１α−ヒドロキシ−１９−ツルービタミンＤ＊　（］Ｉｄ、 Ｘ’　＝Ｙ’　＝Ｈ）が得られる。

セコステロール　Ａ　の　： Ｒ１□が水素である構造ｍのセコステロールはステロイズ（Ｓｔｅｒｏｉｄｓ） ２６，４２２　（１９７５）、その記載はここに引用例として特に組み入れられ る、によって調製することができるａＲ＋ｚがメチル、エチルまたはプロピルで ある構造■のセコステロールは１９８９年１月２４日発行された「セコステロー ルを用いる悪性細胞の分化を誘発する方法Ｊ　（”Ｍｅｔｈｏｄ　ｏｆ　Ｉｎｄ ｕｃｉｎｇ　ｔｈｅ　Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ｍａｌｉｇｎａ ｎｔ　Ｃｅ１ｌｓ　Ｗｉｔｈ　５ｅｃｏｓｔｅｒｏド）と題する米国特許第４， ８００．１９８号、その記載はここに引用例として特に組み入れられる、に説明 され記載されいいる全般的な方法により調製することができ上記のエイズの処置 用に用いられる組成は有効量の上記の式により定義される１種以上のビタミンＤ 化合物及び適切な担体を含んでいる。好ましい化合物は活性成分としての１種以 上の側鎖不飽和または側鎖飽和の１α−ヒドロキシビタミンＤ同族体化合物、１ 種以上の１９−ツルービタミンＤ化合物または１種以上のセコステロール化合物 である。本発明によって使用されるそれら化合物の有効量は組成物ダラム当り約 ０．００１μｇから約１０．０μｇであり、は非経口的に投与される。濃度は組 成物ダラム当り０．０１μｇが好ましい。

その化合物はクリーム、ローション、局処バッチ、丸薬、カプセルまたは錠剤、 あるいは薬学的に無害もしくは許容される溶媒または油中の溶液、乳液、分散液 または懸濁液などの液体として処方することができ、その調製にはそのほかに薬 学的に無害もしくは有益［な成分、例えば、酸化防止剤、乳化剤、着色剤、結合 剤または塗布剤などが含まれる。

化合物は局処的に、経口剤として、あるいは適当な無菌溶液の注射または注入に より非経口的に投与することができる。化合物は前骨髄球の正常なマクロファー ジへの分化に影響するのに十分な量で有利に投与される。上記の用量は適当なも のであり、与えるべき量は、この技術分野で公知のように、病気の程度、対象体 の状態及び感度に応じて調整されると理解されよう。

１α−ヒドロキシビタミンＤ６　人　の　″式Ｉの範囲内の構造をもつ４種の２ ４−同族体化合物を、この技術分野で公知の確立された検定法を用い、分化活性 とカルセミツク（ｃａｌｃｅｍｉｃ）活性の両方について試験した。分化活性は 非特異酸エステル（ＮＳＥ）活性、ニトロブルー・テトラゾリウム（ＮＥＴ）還 元活性及びＨＬ６０細胞中の食細胞能力によって評価した。カルシウム流通活性 （ｍｏｂｉｌｉｚｉｎｇ　ａｃｔｉｖｉｔｙ）は腸内カルシウム輸送データ及び 血清カルシウムデータから評価した。

關：　１．２５−　（ＯＨ）！　Ｄｓ　、１．２５−ジヒドロキシビＤ、、（２ ４Ｅ）−２２−デヒドロ−２４，２４−ジホモ−１，２５−ジヒドロキシビタミ ンＤ、；△”−２４，２４，２４−）ジホモ−１，２５−（ＯＨ）＊　Ｄｓ　、 （２４Ｅ）−２２−デヒドロ−２４，２４，２４−トリホモ−１，２５−ジヒド ロキシビタミンＤ。

；２４−ホモ−１，２５−（ＯＨ）２　Ｄａ　、２４−ホモ−１，２５−ジヒド ロキシビタミンＤ。

区狭拉釆：データは種々の濃度の１．２５−　（ＯＨ）ＨＤ。

（比較標準として使用）及び４種の同族体ビタミンＤ試験化合物のそれぞれでの 処理から得られた分化した細胞のパーセントとして第２表に示す。第２表のデー タは第５表にも示す。化合物のカルセミツク活性は第３表に腸内カルシウム輸送 データ及び血清カルシウムデータとして示す。

１ｘｌＯ−’　３４±２　３８±３　３４±３５χ１０”　４３±２　４０±４ 　３９±２５ｘ１０”８　３６±４　３８±４　３７±４３２．５　４．８　＋ 　０．２”　４．３　ｆ　Ｏ，３”６５７．３　＋　１．９ｂ″　５．１　＋　 ０．９”６５　６．４±１．３”　４．０±０．３１”１１４０　３．６±０． １９” ２２８０　３、８±０．２ｅ４ ０　３．６±０．０２” １１４０　３．８±０．２” ２２８０　３、６±０．１” 第５図に示すように、２４．２４−ジホモ−１，２５−（ＯＨ）、Ｄ、　及び２ ４−＄モー１．２５−　（ＯＨ）ｆＤ、　はＨＬ−６０細胞の分化を生じさせる のに天然のホルモンより約１０倍もより活性である。このように、炭素２４の位 置に１個以上の炭素を添加することは分化活性をさらに増大させない、△”−２ ４，２４゜２４−　）　１ｊホモ　１．２５−　（ＯＨ）ｚＤｊ（Ｄｔ’Ａ合、 炭素２４の位置に１個以上の炭素を添加することは分化活性を天然ホルモンのそ れの半分にする。第２表は他の分化活性測定値が同じ結果を与えることを示す。

第２表に示す結果は、試験した４種の２４−同族体化合物が白血病細胞を正常な 単球細胞への分化を誘発するのに強力であることを明らかに示している０例えば 、１ｘｌＯ−”モルの濃度で、１，２５−　（ＯＨ）ｚＤｍは６０−６８％（７ ）分化細胞を生成させ、他方２４゜２４−ジホモ−１，２５（ＯＨ）ｔＤｓは同 じ濃度で８０＝８３％の分化を示す。濃度１ｘｌＯ−’モルのジホモ同族体によ って生成されるのとほぼ同程度の分化を得るのに１，２５−　（ＯＨ）ａＤ−で は１ｘｌ（１’モルの濃度が必要であることを考慮するとこの同族体は分化剤と して１　、２５−　（ＯＨ）ｔＤ　ｓの１０倍程度強カであると結論することが できる。

４種の２４−同族体化合物が１．２５−　（ＯＨ）、ＤＩに比較して明らかに対 称的に非常に低いカルセミツク活性を示す、この結論は第２表及び第３表の結果 により支持される。例えば、第３表に示す腸内カルシウム輸送検定は公知の活性 代謝体、１．２５−　（ＯＨ）。

比較して）を誘発する。疑いもなく、１．２５−　（ＯＨ）、Ｄ、はカルシウム を骨から流通させる点で優れた化合物である。１．２５−（ＯＨ）、Ｄ、は６５ ｐｍｏｌ／日投与でカルシウム流通活性を引き出すけれども、２４−ホモ−１， ２５（ＯＨ）ｔＤｌは６５ｐｍｏｌ／日投与では骨からのカルシウム流通活性を 示さない。有意の骨流通感応が１．２５−　（ＯＨ）ｔＤｌは３２ｐｍｏｌ／日 投与で見出されたけれども、２２８０ｐｍｏｌ／日の多量の投与でもとのジホモ 化合物も骨カルシウム流通感応を引き出さなかった。これらの結果はジホモ化合 物が１．２５−　（ＯＨ）ｔＤｌよりも骨カルシウム流通約１０００分の１の活 性であることを示している。したがって、△”−２４，２４，２４−ト’）＊　 モー１．２５−（ＯＨ）ｔＤ３　で何等骨カルシウム流通が見出されなかったの 驚くべきことではない。

腸内カルシウム輸送の場合、６．５−３２．５ｐｍｏｌ／日の１゜２５−　（Ｏ Ｈ）、Ｄ、がこの系を飽和すると思われる。この試験で２４−ホモ−１，２５− （ＯＨ）ｔＤｓはｌ　、　２５−（ＯＨ）ｔＤｌより低活性である。しかし、ジ ホモ化合物は２８５ｐｍｏｌ投与しても飽和しないから、ｌ　、　２５−　（Ｏ Ｈ）２Ｄｓの少な（とも１０分の１の低活性である。トリホモ化合物は１０９６ ｐｍｏ　ｌ／日でさえも僅かの活性を示すか無活性である。この系における正確 な活性評価は得られたデータからは不能であるが、ジホモ及びトリホモ化合物は 腸内カルシウム輸送において１．２５−　（Ｏ）Ｉ）ｔＤ、の少なくとも１０分 の１の低活性である。

要約すると、第５図及び第２表、第３表の結果から△”−２４。

利、２４−トリホモ−１、２５−（ＯＨ）、ＤｘではＨＬ−６０細胞の単球への 分化を生じさせるのに殆ど十分な活性（例えば、１゜２５−　（ｏＨＬｐｓのそ れの半分）が残存しているが、そのカルシウム流通活性の大部分が失われていた 。ホモ化合物の高用量では若干の腸内カルシウム輸送活性が示されるから、これ らの化合物は腸内にカルシウムが存在する時血清カルシウムを僅か増加させるは ずである。２４．２４−ジホモ−１，２５−（ＯＨ）２Ｄｓ化合物は、２４位で 飽和されていても不飽和でも、１　、２５−　（ＯＨ）ｘＤ　ｓよりも１０倍の ＨＬ−６０分化活性を有しているが、カルシウム流通活性は顕著に低下している 。２４−ホモ−１、２５−（ＯＨ）ｔＤｓはＨＬ−６０活性で１０倍の増加及び カルシウム流通活性で５−１０分の１への低下を示す、ここで示したデータが表 わすように、もし分化活性がエイズの処置に治療学的に重要であるならば、２４ −同族体化１．２　ｓ　−（ｏ　Ｈ）ｔＤｓ化合物が非常に有効であろう。

１α−ヒドロ　シー１９−ノルービ　ミンＤ　Ａ　の　゛本発明の１９−ノル化 合物はまた上記同族体化化合物と同様の生物学的活性、すなわち、悪性腫瘍細胞 分化促進での高度の能力及び骨組織カルシウム化での無能カバターンを示す、こ れはそれぞれ第４表及び第５表に要約した１α、２５−ジヒドロキシ−１９−ツ ルービタミンＤｓで得られた生物学的検定結果で説明される。第４表は公知の活 性代謝体１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤつと１９−ノル類似体ｌα、２５ −ジヒドロキシ−１９−ツルービタミンＤｓの培養中のヒトの白血病細胞（ＨＬ −６０細胞）の正常細胞（単球細胞）への分化誘発活性の比較を示す。分化活性 は３種の標準分化検定法、すなわち、第４表に略語で示すＮＥＴ　にトロブル− テトラゾリウム還元）、Ｎ５Ｅ（非特異性エステラーゼ活性）及びＰＨＡＧＯ（ 食細胞作用活性）で評価した。検定は公知の操作、例えば、デル−力ら（ＤｅＬ ｕｃａ　ｅｔ　ａｌ、）　（米国特許第４．７１７．７２１号及びオストレムら 、ジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（Ｏｓｔｒｅｍ　ｅｔ　ａ ｌ、、　Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｗ、）　２６２．１４１６４．１９８７）に 記載の方法に応じて行った。各検定において、試験化合物の分化活性はそれぞれ の与えられた濃度に応じた正常細胞に分化したＨＬ−６０細胞のパーセントで表 わした。

第４表に要約した結果は明らかに類似体１α、２５−ジヒドロキシ−１９−ツル ービタミンＤ、が白血病細胞分化促進において１０．２５−ジヒドロキシビタミ ンＤ１同様強力であることを示している。すなわち、３種の検定法すべてにおい て、約９０％の細胞が濃度１ｘｌＯ−’の１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ 、にょって分化を誘発されており、同程度の分化（すなわち、９０．．８４及び ９０％）が１９−ノル類似体によって達成される。

前述の結果とは対照的に、１９−ノル類似体はビタミンＤ化合物によって引き出 される典型的な応答である骨の石灰化を測定する検定で活性を示さない。ｌａ、 ２５−ジヒドロキシビタミンＤ、と１α、２５−ジヒドロキシ−１９−ツルービ タミンＤ、のラットにおける骨の石灰化を比較する検定試験結果を表わす関連デ ータを第５表に要約して示す。この検定はタナ力ら、エンドクリノロジー（Ｔａ ｎａｋａ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ）９２．４１７　（１ ９７３）に記載の方法に従って行った。

第５表に示す結果は骨の灰分パーセントの増加及びすべての用量レベルにおける 全灰分の増加によって示されるように１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ、の 予想された骨の石灰化活性を示す。それと対照的に、１９−ノル類似体はビタミ ンＤ欠乏（−Ｄ）コントロールグループに比較して３種の用量レベルすべてにお いて活性を示さない。

３２５．０　２８±０．９　４０±１．９このように、１９−ノル類似体は悪性 細胞の分化誘発の高い能力と非常に低度もしくは皆無の青石灰化活性の組合わさ れた選択的な活性の様相を示す。この新規な構造の化合物は、それゆえ、エイズ の処置の治療剤として有用なものとなり得る。

セコステロール　人　の　“ （告　■の　Ａ　のヒトの　におしる　“・ゞ弐■の範囲内にある構造を有する ２種のセコステロール化合物についてこの技術分野で公知の確立された検定法を 用い分化活性とカルセミツク活性の両方について試験した。分化活性の結果を第 ６表に報告する。

第６表 （Ｒ＋ｚ”ＣＨ＊、　Ｉ　Ｘ　１０−’　１４　２３　１１１ｘｌＯ−’　３９ 　６１　９０ １ｘｌＯ−’　８３　７６　９０ 上記の結果は一般構造式■のセコステロールのヒトの白血病細胞のマクロファー ジ（単球）への分化剤としての効力を説明している。この化合物は使用した分化 検定のすべてにおいて高度に有意の活性を示し、約１０−６モルの濃度において ５０％の分化を達成する。比較を目的として、この表にはまた強力な抗白血病作 用を有する２種の公知のビタミンＤ誘導体である１α−ヒドロキシビタミンＤ３ （１α−０Ｈ−Ｄ、）と１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ、（１α、２５− 　（ＯＨ）、ＤＩ　）によって示された細胞分化活性も含まれる０表示のデータ はセコステロールの活性レベルは１α、２５−　（ＯＨ）＊　Ｄ＊　（白血病細 胞の分化に最も強力なビタミンＤ−誘導体剤）によって示されたそれよりも低い が、ヒトの白血病の治療に有効であることが公知の化合物である１α−ヒドロキ シビタミンＤ、（スダら（Ｓｕｄａ　ｅｔ　ａｌ、）　、米国特許第４，３９１ ゜８０２号）によって示されたそれとほぼ同等である。

゛告式ｍのセコステロールの　のカルシ　ム、゛とカルシウム　゛ｑ挾エ ホルツマン社（Ｈｏｌｚｍａｎ　Ｃｏ、、　Ｍａｄｉｓｏｎ、　Ｗｌ、）から購 入したラットにスダら（Ｓｕｄａ　ｅｔ　ａｌ、、　［Ｊ、　Ｎｕｔｒ、　１０ ０．１０４９　（１９７０）］により記載された低カルシウム、ビタミンＤ−欠 乏食を随意に３週間与えた。その後、ラットを各６匹ずつの４グループに分けた 。第１のグループ（コントロールグループ）には頚静脈注射で０．０５ｍ１の９ ５％ＥｔＯＨを与えた。第２と第３のグループには同じ経路で０．０５ｍ１のＥ ｔＯＨに溶解したコントロールＩｎ　（Ｒ＋＊＝ＣＨ５、ｙ”　＝Ｘ”　＝Ｈ） をそれぞれ６２５ピコモル及び６２５０ピコモルずつ投与し、第４グループには ６２５ピコモルの１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤｓ　（０，０５ｍ１のＥ ｔＯＨ中）を頚静脈注射で与えた。投与後７時間にラットは斬首により殺害し、 その血液を集め、遠心分離して血清を得た。血清カルシウム濃度を常法により原 子吸光光度計で定量した。結果は下記の第７表に示す。

これらの同じラットの小腸を取り出し、洗浄し、マーチンとデル−力（Ｍａｒｔ ｉｎ　ａｎｄ　ＤｅＬｕｃａ　［Ａｍ、　Ｊ、　Ｐｈｙｓｉｏｌ、η、６．　１ ３５１　（１９６９）］　の方法に従ってカルシウム輸送測定のため腸を裏返し にした。測定した腸内カルシウム輸送活性データは紫膜／粘膜カルシウム濃度の 比率で表わし、これも第７表に示した。

第７表 血清カルシウム　腸内カルシウム輸送 投与化合物　量　濃度　［紫膜Ｃａ］／（ｐｍｏｌｅ）　（ｍｇ／１００ｍ１） 　［粘膜Ｃａ１ＥｔＯＨ（］ントｏ−ル）　−−２，６ｆ　Ｏ，１３，６±　０ ．１セコステロールＩＩＩ　６２５　２．９±０．１　３．４±０．１（Ｒ１２ ；ＣＨ８，ｙ２＝ｘ２＝Ｈ） セコステロールｍ　６２５０　３．０±０．１　３．４±０．１（Ｒ１ｚ＝ｃｌ （ｓ、　ｙ”＝Ｘ”＝Ｈ）１．２５−（ＯＨ）、Ｄ、　６２５　３．８±０．２ 　６．７±０．８上記の結果はセ’：１スｆ　ｌ］　−ル■（Ｒ１２＝　ＣＨｓ 、　５’　”　＝Ｘ”　＝　Ｈ）が高用量でも有意のカルセミツク活性を表わさ ないことを示している。この化合物は血清カルシウムレベルを上げず、そこで有 意のカルシウム流通活性に欠けている。さらに、その化合物は動物１匹当り６２ ５０ピコモルの用量レベルで腸内カルシウム輸送を刺激しない。同じ条件下で、 公知の活性ビタミンＤ代謝体、１．２５−（ＯＨ）２　Ｄ、は予想通り１０の１ の低用量レベルで十分活性である。

それゆえ、これら一般構造式ＩＩＩ（Ｒ，！は水素、メチル、エチル、プロピル である）のセコステロイドは、それらが骨のミネラル移動及び腸内カルシウム輸 送活性に関して有意の生体内における生物学的応答をひきおこさないから、生体 内で古典的なビタミンＤ機能を遂行しないと結論ずけることができる。

上記のデータは本発明のセコステロールが異常な予想外の活性を有していること を確証する。それらは、いくつかの公知のビタミンＤ関連化合物のように、高度 に有意の細胞分化活性を示すが、ビタミンＤ誘導体に典型的なカルセミツク活性 を示さない。それゆえ、公知の抗白血病ビタミンＤ化合物の望ましくないカルセ ミツク作用に欠けている本発明のセコステロイドはエイズのようなウィルス病の 治療として新規な好ましい方法を提供する。

１α　２５−　ＯＨ、−２６−ホモ−Ｄ３　Ａ　の　カルシウム蔓艶造立 オスの乳離れしたラットをホルッマン社（Ｈｏｌｔｚ＋ｓａｎ　Ｃｏ、、　Ｍａ ｄｉｓ。

ｎ、　Ｗｊｓ：）から購入し、スダら（Ｓｕｄａ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ−Ｎｕｔ ｒｉｔｉｏｎ　１００゜１０４９、１９７０）の記載した低カルシウム、ビタミ ンＤ欠乏餌を随意に与えた。その後、そのラットを各６匹ずつの４群に分け、そ れぞれ犠牲にする７時間前に０．０５ｍ１の９５％エタノールに溶解した６５０ ピコモルのｌａ、２５　（ＯＨ）ｘ−２６−ホモ−Ｄａ、１α、２５−　（ＯＨ ）、−（２２Ｅ）Δ１！−２６−ホモーＤ、または１α、２５−（ＯＨ）＊　Ｄ ａを頚静脈注射した。コントロールの群のラットには犠牲にする７時間前に０． ０５ｍ１の９５％エタノールを与えた。コントロールの群のラットには犠牲にす る７時間前に０．０５ｍ１の９５％エタノールベヒクルを同じ方法で与えた。そ れらは斬首により殺害し、血液を集め遠心分離して血清を得た。血清カルシウム 濃度を０．１％の塩化ランタンの存在下で原子吸光分光光度計で定量した。結果 を次表に示す：第８表 投与化合物　血清カルシウム濃度 エタノール　３．４±０．３°１ １　α、２５−　（ＯＨ）＊−２６−ホモ−〇、　４．６　±　Ｑ、２　′５＋ １　α、２Ｆｒ　（ＯＨ）＊　−（２２Ｅ）　△１−２６一本モー０．　４．６ 　±　０．３　″５１中平均値からの標準偏差 ｂ）はａ）から有意差あり　ｐ　０．００１上記のデータからビタミンＤ欠乏動 物のビタミンＤ応答系において本発明の化合物はビタミンの循環ホルモン形であ る１α、２５−（ＯＨ）、Ｄ、と同じ活性を示すと結論することができる。

１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤｔ（１α、２５−　（ＯＨ）。

Ｄ、）とその構造類似体である１α−ヒドロキシビタミンＤ、（１α−０Ｈ−Ｄ 、）は、上記した十分に確立されたカルセミツク作用（ｃａｌｃｅｍｉｃ　ａｃ ｔｉｏｎ）のほかに、効力のある抗癌活性を示すことが最近発見された。特に、 上記した名称の化合物は、培養における白血病細胞のようなヒトの悪性細胞の、 非悪性マクロファージへの分化を引き起こすうえで有効であり、生体外での細胞 に対する抗癌活性は、これらの化合物の投与が（対照に比べて）白血病のマウス の寿命を延ばすとともに、ヒト白血病患者の状態を著しく改善したことを示すこ とにより、生体内での有益な影響と相互に関連させることができることが示され た。これらの観察に基づいて、１α−ヒドロキシル化ビタミンＤ化合物は、白血 病治療用の治療剤として提案されている［スダ（Ｓｕｄａ）等の米国特許第４， ３９１，８０２号］。

キシビタミンＤ化合物、すなわち、１α−ヒドロキシビタミンＤ１（１α−０Ｈ −Ｄ、）と１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ。

（１α、２５−　（ＯＨ）ｓ　Ｄａ　）は実際に、白血病細胞の分化を引き起こ すうえで著しく有効であるが、これらを抗白血病剤として使用することに対して は本質的に重大な欠点があり、従って、これらの物質の高いカルセミツク活性は 不可避である。かくして、公知の最も有効なビタミン誘導抗白血病剤である１α 、２５−　（ＯＨ）。

Ｄ富もまた、最も効力のあるカルセミツク剤であり、１α−０Ｈ−Ｄ３の抗白血 病効力もまた抗カルセミツク活性と相互に関連している。抗白血病剤として有効 な投与レベル（例えば、スダ等の特許の実施例において特定されているようなｌ μｇ／日）でのこれらの化合物の投与は、特に既に衰弱病（ｄｅｂｉｌｉｔａｔ ｉｎｇ　ｄｉｓｅａｓｅ）に罹っている患者において、重大な医学的な合併症を 伴なう、高くて、著しく過剰なカルセミツクレベルを必然的に生ずる。カルシウ ムレベルを高めるうえでの公知の１α−ヒドロキシビタミンＤ化合物の本質的に 高い効力のために、抗白血病剤としてのこれらの使用は排除される場合がある。

ウィルス病の好ましい治療方法は、カルセミツク活性に対する高い抗白血病率に 特徴がある化合物、すなわち、血清カルシウムレベルを高める場合の効力に比較 して白血病細胞の分化を引き起こす場合に一層の効力を発揮する化合物を投与す ることであると明らかに考えられる。

本発明の化合物はまた、悪性細胞の非悪性細胞への分化を誘因する場合に、すな わち、白血病細胞の分化により測定される抗悪性形質活性において優先的に活性 を示すが、カルシウム代謝に対する影響においては１α、２５−ジヒドロキシビ タミンＤ、を越える活性は示さない。この独特かつ予想外の特性の組み合わせに より、本発明のこの新規な側鎖ホモビタミンＤ化合物は、白血病及びエイズのよ うなウィルス病の治療に優れたかつ好ましい薬剤を提供する。

本発明の側鎖ホモビタミンＤ化合物は、培養で成長したヒトの前骨髄球白血病細 胞（ＨＬ−６０細胞）に投与すると、これらの細胞のマクロファージ（単球）へ の分化を引き起こす。分化活性を測定するための幾つかの標準的な検定法におい ては、これらの化合物は、公知の最も活性のあるビタミンＤ誘導体である１α、 ２５−（ＯＨ）２　Ｄｓよりも有効であることが示された。

試験されたビタミンＤ誘導体により誘起される分化の程度は、単球に特徴がある 機能の及び酵素のマーカを示す細胞のパーセンテージとして示された。検定され た２つのマーカは、ａ）細胞が死んだ酵母の食作用を行う能力と、ｂ）細胞がホ ルボールエステルで刺激を受けたときに過酸化物を形成するにトロテトラザリウ ムブルーを還元する）能力であった。

この「％食細胞」は、試験化合物により誘起される分化のパーセントを示す。結 果は、下記の第９表に要約されている。

第９表の結果は、ホモ化合物が１．２５−　（ＯＨ）、Ｄｓよりも有意に大きい 効力を有することを示している。全ての濃度においてホモ化合物はこれまで公知 の最も活性のある化合物である１α、２５−　（ＯＨ）＊　Ｄ、よりも大きな白 血病細胞の分化度を達成してしする。例えば、１０−８モルの濃度では、ホモ化 合物は７０％の分化を達成し、一方、１．２５−　（ＯＨ）、Ｄ、はわずかに約 ４７％の分化された細胞を与えるに過ぎない。５０％の分化を達成するためには 、１ｘｌＯ−＠Ｍの濃度のホモ化合物を必要とするが、１α、２５−　（ＯＨ） ２　ＤＩは約１ｘｌＯ−’Ｍであり、すなわち、約１０倍の効力の差がある。Ｎ ＥＴ検定の結果は、下記の第１０表に示されている。

第１０表に掲げられている結果もまた、試験されたホモ化合物が生体外でヒトの 骨髄性白血病細胞の正常な細胞への分化を誘発するうえで１α、２５−　（ＯＨ ）、Ｄ、よりも活性が高いことを示している。このＮＢＴ還元により測定される 白血病細胞の６０％分化を達成するためには、２ｘｌＯ−’Ｍの濃度のホモ化合 物が必要であるが、ｌα、２５−　（ＯＨ）ｔ　Ｄ、で同程度の分化を達成する には、３．５ｘｌＯ−”Ｍの濃度を必要とし、効力の差は１７倍となっている。

かくして、上記検定の双方とも、ホモビタミンＤ化合物は白血病の分化を誘発す るうえで高い効力を有していることを示している。

更に、上記結果は、この分化活性において、これらのホモビタミンＤ化合物が１ α、２５−　（ＯＨ）−Ｄｓよりも有意に高い効力を有することを示しているや るので、これらのホモビタミンＤ化合物はヒト被験者における白血病に対して有 効に使用することができるのは明らかである。同時に、これらの化合物は高いカ ルセミツク活性を示すのではなく、１α、２５−　（ＯＨ）＊　Ｄ、と略同等の 活性を示している。かくして、これらのホモビタミンＤ化合物は、カルセミツク 活性に対する抗悪性形質活性率が高いことに特徴がある。この新規で所望の生物 学的特性により、これらの側鎖ホモ化合物はエイズ治療の優れた治療剤として機 能するものと考えられる。

ヒトの白血病またはエイズの治療には、本発明のホモビタミンＤ化合物は骨髄性 細胞のマクロファージへの分化を誘発するのに十分な投与量をもって被験者に投 与される。適宜の投与量は上記の通りであるが、投与量は、本技術分野において 周知であるように、疾病の程度または被験者の反応もしくは状態に従って調整す ることができる。

シクロベン　ノビ　ミンＤ　ｒ　の　２・ゞカルセミツク活性と分化特性の双方 に関して、ビタミンＤ類似体であるシクロペンタノ−１，２５−ジヒドロキシ− ビタミンＤ、とシクロペンタノ−１，２５−ジヒドロキシ−２２Ｅ−デヒドロ− ビタミンＤａの検定を行なった。検定手順と得られた結果は、以下の実施例に記 載されている。

化合物の腸カルシウム輸送 ２　と　カルシウム１パ 雄の乳離れした子供のラット［ウィスコンシン州、マジソン（Ｍａｄｆｓｏｎ） のバーラン・スプレーグ・ダウリー・カンパニー（Ｈａｒｌａｎ−Ｓｐｒａｇｕ ｅ　Ｄａｗｌｅｙ　Ｃｏ、　）から入手コに、スダら「ジャーナル・オブ・ニュ ートリツクＥｌ　”／　（Ｊ、　Ｎｕｔｒ、　）第１００巻、第１０４９−１０ ５２頁、１９７０年）」により説明されているように、低カルシウムのビタミン Ｄ欠乏食餌（０，２２％Ｃａ、０．３％Ｐ）の任意量を、全部で４週間に亘って 与えた。第３透口の終りに、動物をランダムに各６匹のラットからなるグループ に分けた。１つのグループ（対照グループ）は、全部で７日間腹膜内（ｉｎｔｅ ｒｐｅｒｉｔｏｎｅａｌ）　（ｉ　、　ｐ　、ン注入により溶媒ビヒクル（９５ ％プロピレングリコール１５％エタノールの０．１ｍ１）の投与を毎日受けた。

その他のグループは、同量の溶媒ビヒクルに溶解した、第１１表に示すような量 の試験化合物（即ち、１，２５　（ＯＨ）＊　Ｄｓ　、化合物Ｉまたは化合物Ｉ Ｉ）を、７日間に亘って注入により毎日受けた。動物は最後の注入後２４時間た ってから殺し、腸のカルシウム輸送を測定するために腸を取り出すとともに、骨 のカルシウム流通（ｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ）の検定（血清カルシウムレベル の測定）のために血液を集めた。腸のカルシウム輸送は、へロラン（Ｈａｌｌｏ ｒａｎ）及びデル−力（ＤｅＬｕｃａ）　ｒアーカイブズ・オブ・バイオケミス トリー・アンド・バイオフィジックス（Ａｒｃｈ、　Ｂｉｏｃｈｅａ＋、　Ｂｉ ｏｐｈｙｓ、　）第２０８巻、第４７７−４８６頁（１９８１年）」により説明 されているような外反腸管嚢技術（ｅｖｅｒｔｅｄ　ｇｕｔ　ｓａｃ　ｔｅｃｈ ｎｉｑｕｅ）　ｒマーチン（Ｍａｒｔｉｎ）及びデル−力（ＤｅＬｕｃａ）のア メリカン・ジャーナル・才ブ・フィジオロジ−（Ａｍ、　Ｊ、　Ｐｈｙｓｉｏｌ 、）第２１６巻、第１３５１頁（１９６９年）ｊにより測定した。紫膜／粘膜カ ルシウム濃度の比として通常の態様で表わされている結果が、下記の第１１表に 示されている。骨のカルシウム流通は、血清の０．１ｍｌアリコツトをＬ　ａ　 Ｃ１ｍの０゜１％水溶液］、、９ｍｌで希釈し、次にカルシウム濃度を原子吸光 分光分析法により直接定量するという標準的な手順を使用して血清カルシウムレ ベルを測定することにより検定した。ｍｇ％カルシウムとして表わした結果を下 記の第１１表に示す。

第１１表 シクロペンタノ−ビタミンＤ類似体の骨カルシウム輸゛と　カルシウム、゛　血 　カルシウムレベル　゛投与化合物　量　Ｃａ輸送　血清カルシウムｎ／　Ｃａ ”　／Ｃａ　ｍ　％ 平均上ＳＥｌ＋１　平均上ＳＥＭ なし　（対照）　０　２．４±０．２２　３．７±０．０６１，２５−（Ｏ）Ｉ ）Ｊｓ　５０　８．３　±０．４３　４．６±０．ｌＯシクロペンタノ−１，２ ５（ＯＨ）Ｄ、　２５　７．７　±０．３７　５．５±０．３１１２５　１０、 ４　±０．１０　７．４±０．０６シクロベンタノー１．２５−（ＯＨＩ！−５ ＣＩ　８．３　±０．８１　５．９±０．１４２２−デヒドロ−Ｄ。

シクロペン　）　４　の　ゞ 試験化合物に応答するＨＬ−６０細胞（ヒトの白血病細胞）の分化の程度を、Ｎ ＢＴ還元、エステラーゼ活性及び食作用活性の３つの異なる検定により評価した 。ＮＢＴ還元および食作用検定は、米国特許第４．７１７．７２１号においてデ ル−力（ＤｅＬｕｃａ）等により説明されているようにして行った。第３の検定 は、ミズーリー州（ＭＯ）、セントルイスのシグマ・ケミカル・コーポレーショ ン（Ｓｉｇｍａ　ＣｈｅｍｉｃａｌＣｏｒｐ、　）から入手することができるシ グマ・キット（Ｓｉｇｍａ　Ｋｉｔ）　Ｎｏ。

１０において与えられている方法に従ってマーカとして非特異性酸を測定した［ オストレム（ＯｓｔｒｅｌｌｌＩ）等のプロシーディングズ・オブ・ザ・ナショ ナル・アカデミ−・オブ・サイエンシズ・オブ・ザ・ユナイテッド・スティン・ オブ・アメリカ（Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ。

ＵＳＡ）第８４巻、第２６１０頁（１９８７年）、オストレム（ＯｓｔｒｅＩｌ ｌＩ）等のジャーナル・オブ・バイオロジカル・ケミストリー（Ｊ、　Ｂｉｏｌ 。

Ｃｈｅｍ、　）第２６２巻、第１４１６４頁（１９８７年）」。結果は第１２表 に示す、３つの検定のデータは、種々の濃度の（比較標準とし一ビタミンＤ相似 体を用いた処理により得られた分化細胞のパーセントとして表わされている。

第１２表 ＨＬ−６０細胞培養におけるシクロペンタノ〜１．２５−（ＯＨ）ｚ　Ｉ）ｓ及 びシクロヘンタ／　１．２５−　（ＯＨ）ｚ−２２−デヒドロ−Ｄｓの　ゞ ％ 投与化合物　濃度 モル　ＮＢＴ　ニステラー壬 １．２５−（ＯＨ）、Ｄ、　１ｘｌＯ−’　ｇ９±３　９３±２　８８±３１ｘ ｌＯ−”　５８±４　６３±４　５９±３１ｘ１０−＠　３４±３　３７±３　 ３４±２シクロペンタノ−１，２５−５ｘｌＯ−”　９０±４　８８±４　８６ ±３（ＯＨ）ｚＤ＊　１ｘｌＯ−’　８１４３　８ｏ±４　８２±４５ｘｌＯ− ”　６３±２　６６±４　６５±４１ｘｌＯ−’　４６±２　４５±３　４５± ３シクロペンタノ−１，２Ｆｒ　１ｘｌＯ−’　９５±３　９５±３　９２±６ （ＯＨ）２−２２−デヒドロ−Ｄｓ　５ｘｌＯ−”　９０±３　９１±２　８９ ±３１ｘｌＯ−”　８０±３　７６±４　７６±４５ｘｌＯ−”　６３±２　６ ７±４　６３±３１ｘｌＯ−’　４７±３　４５±２　４９±３５ｘｌＯ−”　 ３９±３　３９±３　４０±３前記試験結果は、新規なシクロペンタノ類似体は 高いカルセミツクおよび分化活性を有していることを示している。実際に、第１ １表及び第１２表に掲げられている検定結果は、カフミック活性及び分化活性に 関して、２つのシクロペンタノビタミンＤ類似体は、天然のホルモンである１、 ２５−　（ＯＨ）２　Ｄ−よりも大きい効力を有していることを示している。か くして、シクロペンタノ類似体により引き出されるカルシウム輸送応答は、骨か らのカルシウム流動に及ぼす影響において１．２５−　（ＯＨ）、Ｄ、により与 えられるものと略同じである（第１１表）。同様に、第１２表におけるデータは 、白血病細胞の分化においてシクロペンタノ類似体が１，２５−　（ＯＨ）　２ Ｄ、よりも約５倍も高い活性を有することを示している。これは、例えば、双方 のシクロペンタノ化合物が５ｘｌＯ−”Ｍの濃度において９０％の分化を達成す るのに対し、１．２５−（０Ｈ）２Ｄｓは同じ程度の分化を達成するのに５倍高 い濃度（ＩＸｌｏ−’Ｍ）を必要とすることを示す記載から明らかである。

これらの結果に基づき、双方のシクロペンタノ類似体ともカルシウム規制剤とし てまたは分化誘発剤として有効に使用することができると結論付けることができ る。かくして、新規な類似体は、腎性骨異栄養症、ビタミンＤ耐性くる病、骨粗 髭症及び関連する疾病のようなカルシウム代謝障害の予防または治療において使 用することができる。同様に、類似体の分化を誘発するうえでの高い効力により 、新生物形成疾病、特に、白血病及び今ではエイズの治療用の、１．２５−（Ｏ Ｈ）２　Ｄ、のような公知の化合物の代わりに使用することができる。

のビタミンＤ　゛　の　＾　・ ビタミンＤのホルモン形態であるｌ、２５−ジヒドロキシビタミンＤ３は、生体 外においてＨＬ−６０ヒトの前骨髄球の単球状細胞への分化を誘発する。ＨＬ− ６０において単球マーカの発育を誘発する場合における１、２５−ジヒドロキシ ビタミンＤ、の３０の類似体の相対的な活性の評価を行った。評価を行った３つ の分化マーカは、非特異性酸エステラーゼ活性、ニトロブルーテトラゾリウム還 元活性及び食作用能力であった。

活性比（ＡＲ）−一各検定からのデータを使用して、各類似体に関して３つの対 数投与量一応答曲線（ｌｏｇ　ｄｏｓｅ−ｒｅｓｐｏｎｓｅ　ｃｕｒｖｅ）をつ くった。ＥＤ、。、すなわち、４日後に５０％分化を達成するのに必要とされる 濃度を、各曲線から直接得た。平均値ＥＤｓ。は、各類似体に関する３つの検定 から算出した。相対活性（ＡＲ）は、類似体の平均ＥＤ、。の１，２５−　（Ｏ Ｈ）、ＤｓのＥＤ、。（即ち、１０−６Ｍ）に対する比である。従って、ＡＲ値 は上記した条件の下でＨし一６０細胞の成熟を誘発する類似体の、天然のホルモ ンに対する効力を示す。

第６図は、研究されたほとんどの類似体の構造を示す。第７乃至１１図は、種々 の類似体の代表的な対数投与量一応答曲線であり、各図は使用された検定の１つ に関する曲線を提供するものである。

同様の曲線が他の２つの検定について提供され、各類似体のＥ　Ｄ　ｓ。

を算出するのに使用した。第１３表は算出された活性比（ＡＲ）とともに、はと んどの類似体の３つの検定のそれぞれにより測定されたＥＤ、。を示す。

第７図は、側鎖ヒドロキシル基を含まない５つの１α−ヒドロキシル化類似体の 活性を示す。１α−ＯＨ−Ｄ　ｓ　リーＤは、１，２５−　（ＯＨ）　２Ｄ、（ 上りよりも１００倍活性が低く（それぞれ、Ｅ　Ｄ　、。＝　１０−＠Ｍ及ヒ１ ０−’Ｍ、第１３表）、２５−１：：ド０キシル基の損失は効力を２オーダの大 きさくｔｗｏ　ｏｒｄｅｒｓ　ｏｆ　ｍａｇｎｉｔｕｄｅすると、活性が６乃至 ７倍減少するだけである。△２２−トランス二重結合の導入は１−０Ｈ−Ｄ、の 活性を２倍改善し、△２２−二二２玉−１−ＯＨ−Ｄ、（上Ｘ）は飽和１−０Ｈ −ＤＩに必要とされる１０−’Ｍと比較して、５ｘｌＯ−’Ｍで５０％分化を誘 発する。１α−ＯＨの１β−ＯＨへのエピマー化とともに△２２−トランスの△ ２２−乞ス（１工）の異性化は、実際に全ての活性をなくし、１０−’Ｍにおい てさえも、これらの化合物はわずかに１０−２０％の分化を誘発するに過ぎなか った。

第８図は、１α−ヒドロキシル基を持たない一連の２５−ＯＨ類似体（２ａ−２ ｆ）の活性を比較する。２５−　ＯＨＤ　ｓ　（２ａ　）とともに示されるよう に、１α−ＯＨの損失は活性を８０倍減少される。２５−　ＯＨ−Ｄ　ｔ　（２ ｂ　）と２４−エビ−２５−ＯＨ−Ｄ。

（且）は、それぞれ４ｘｌＯ−’Ｍ及び３ｘｌＯ−’Ｍで５０％分化を誘発する ことができ、２５−０Ｈ−Ｄ、よりも活性が約２倍高い。この観察は、Ｃ−２２ でのトランス二重結合の導入が活性を２倍改善することを示す第７図の結果と一 致する。双方の２５−０Ｈ−Ｄ、異性体とも、Ｃ−２４におけるＲ−またはＳ− メチル立体化学のトレランスを示すこの系において略同じ活性を有している。２ ６．２７−Ｆ、−２５−ＯＨ−Ｄ２　（ス旦）の場合のように側鎖におけるフッ 素基の導入は２５−０Ｈ−Ｄ、の活性を２倍改善している。これは、２４位また は２６．２７位におけるフッ素化が骨髄性細胞の成熟を４乃至７倍誘発させるよ うに１．２５−　（ＯＨ）＊Ｄ、の能力を改善するというシイナ（Ｓｈｉｉｎａ ）ら及びコニフラー（Ｋｏｅｆｆｌｅｒ）らの以前の観察と一致する。Ｃ−２４ においてＳｐ２平面中心（ｐｌａｎａｒ　ｃｅｎｔｅｒ）を形成する△２！から △２３位（−２ｄ）への側鎖の二重結合の異性化は、２５−０Ｈ−Ｄ、の活性を ２倍減少させる。２４Ｒ，２５−（ＯＨ）！　Ｄ、（２ｆ）は２５−０Ｈ−Ｄｓ 　よりも活性が低く、２５−ヒドロキシル官能の存在の下での２４−ヒドロキシ ル基はこの系において活性を減じることを示している。同様に、１．２５−　（ ＯＨ）、Ｄ、の２４−ヒドロキシル化は、ＨＬ−６０細胞におけるその活性を減 じる。

響ととともに、側鎖の延長と切断の影響が、第９図において検討されている。一 般に、炭素１個の延長は、天然ホルモンの活性を１オーダの大きさで改善し、除 去される各炭素による側鎖の切断は活性を１オーダの大きさで減じる＝２４−ホ モ−１，２５−（ＯＨ）２Ｄ、（１上）と２６−ホモ−１，２５−（ＯＨ）２　 Ｄｓ　（１旦）は１．２５−　（ＯＨ）！　Ｄ、に必要とされる１０−”Ｍと比 較して１゜３ｘｌＯ−”ＭにおいてＨＬ−６０細胞の５０％成熟を誘発させるこ とができるので、天然ホルモンよりも活性が８倍高い。Ｃ−２２における不飽和 の導入により、８倍改善された効力を保持する相似体が得られた。これらの結果 は、１．２５−　（ＯＨ）、Ｄ、受容体のホモ類似体のアフィニティに基づいて 説明することはできない。競合する研究は、これらの化合物が天然ホルモンをＨ Ｌ−６０細胞とともにひよことラットの腸におけるその結合部位から変位させる 場合に、１．２５−　（ＯＨ）、Ｄａと同等の能力を有することを示している。

ステロイド側鎖から１炭素（２４−ツルー１，２５−（ＯＨ）ｚ　Ｄｓ　）（ｌ ｄ）または２炭素（２３，２４−／ＪＬ、−１，２５−（ＯＨ）　＝Ｄ、）（１ 旦）を除去すると、活性がそれぞれ１３倍及び２２０倍低下する。ひよこの腸の １．２５−（ＯＨ）ｔＤ、受容体を使用した変位の研究により明らかにされたよ うに、これらの切断された類似体の結合アフイニテイはＨＬ−６０系におけるそ れらの活性と密接に近似しており、１旦と１旦は、１．２５−（ＯＨ）、ＤＩ受 容体に関してそれぞれ１０倍及び１６０倍低いアフィニティを有している［ニス ・リー（Ｓ、　Ｌｅｅ）、エイチ・ケイ・シュノウズ（Ｈ，Ｋ、　５ｃｈｎｏｅ ｓ）およびエイチ・エフ・デル−力（Ｈ，Ｆ、　ＤｅＬｕｃａ）、未公表の結果 ）。

５．６−Σ之之スートリエン変異を有する誘導体は、５．６−Ｅ／区化合物より もわずか７倍だけ有効性が低くなる（第９図）。か（して、５０％分化を達成す るのに、５．６−Ｅ／ス誘導体（旦）は１．３ｘｌＯ−’　Ｗｉが必要となるの に比較して、２４−ツルー１゜２５−　（ＯＨ）、Ｄ、の５，６−トランス異性 体は７ｘｌＯ−’Ｍの濃度が必要となる。ＨＬ−６０系における有効性に関する １α−ヒドロキシ基の重要性を考慮すれば、５．６−トランス誘導体のこの相対 的に高い活性は３β−ヒドロキシ基の偽（ｐｓｅｕｄｏ）　−１α−ヒドロキシ 位置への転移の結果によるものと考えられる。同様に、１α−ヒドロキシル基を 欠＜２５−０Ｈ−６，１９−エポキシビタミンＤ、は、ＨＬ−６０系に３いて予 想外の高い活性を示している。

第１０図は、短鎖の類似体とともに種々の長さの第１アルコール側鎖の活性を示 す（化合物１旦−よヱ）。２６．２７−ビス−ツルー１，２５−　（ＯＨ）＊　 ＤＩ　（１旦）は、２５−ヒドロキシ置換基の側面にある２つのメチル基を欠く 点においてのみ天然ホルモンと異なる。更に、この化合物は、１．２５−（ＯＨ ）ｔ　Ｄ、よりも２オーダの大きさで有効性が低い、類似体上！−上工により表 わされる１旦の側鎖から炭素１個を逐次除去しても活性を低下させる場合に更に 影響を及ぼすことはな（，２３，２４，２５，２６，２７−ペンタノール−１， ２２−（ＯＨ）ｔ　Ｄｉ　（１工）もまた１、２５−　（ＯＨ）！　Ｄ、よりも ２オーダの大きさで有効性が低い。嵩及び極性がより少ないアルデヒド（１旦） へのＣ−２２−ヒドロキシルの酸化は、活性を２倍改善し、ＡＲは天然のホルモ ンよりも１７０乃至８０倍低下する。Ｃ−２２から酸素置換基を除去すると活性 が著しく改善され、１α−０Ｈ−ビスホモプレグナ（工１）およびｌα−０Ｈ− ホモプレグナコレカルシフェロール（工旦）は、１．２５−（ＯＨ）ｚ　Ｄａよ りも活性がわずかに２０倍低くなるに過ぎない。当初の長さのステロイダル（ｓ ｔｅｒｏｉｄａｌ）側鎖を保持するが、２５−ヒドロキシル置換基を失った類似 体である１α−０Ｈ−Ｄ。

は、１．２５　（ＯＨ）＊　Ｄｓよりも活性が１００倍低いという事実を考慮す れば、これらの結果は注目すべきものである。よ１と１旦の高活性は、１．２５ −　（ＯＨ）、Ｄ、受容体の驚くべき高いアフィニティに基づいて説明すること ができる。ｌα−０Ｈ−ホモブレグナコレカルシフェロールと１ａ−ＯＨ−ビス ホモプレグナコレカルシフェロールは、天然のリガンドをひよこの腸の受容体の 結合部位から変位させた場合に１．２５−　（ＯＨ）ａ　Ｄ−よりも有効性がそ れぞれ４倍および１１倍低いに過ぎない（２２）。

１．２４Ｒ−（ＯＨ）、Ｄ、（上ヱ）は、天然ホルモンと同等の活性を有するが 、その立体異性体である１、２４Ｓ−（ＯＨ）　２Ｄ、（工１）は活性が半分で ある（第１３表）、生体内では、１゜２４Ｓ−（ＯＨ）２　Ｄａは、カルシウム 運搬と骨のカルシウム流動を刺激するうえでは活性は低く、かつ、ｌ、２５−　 （ＯＨ）２　Ｄ。

と比較して受容体に関して同等のアフィニティを有している。マツイ（Ｍａｔｓ ｕｉ）等は、１，２４Ｒ−（ＯＨ）ｘ　Ｄａは単球／顆粒球関連形質膜抗原を誘 発するうえで１．２５−　（ＯＨ）、Ｄ、と同じ効力を示し、ｌ、２４Ｓ−（Ｏ Ｈ）＊　Ｄｓはほんのわずかに活性が低いだけであることを明らかにしている。

これは、Ｃ−２４Ｓ位置にメチル基を有する１、２５−　（ＯＨ）、Ｄａ　（土 工）は１．２５−　（ｏＨ）ｚＤｓよりも活性が２倍低いので、Ｃ−２４Ｓ−置 換基の立体効果によるものと考えることができる２４Ｓ−立体異性体に対する小 さな区別を示している（第１３図）。実際に、ｌ、２５−　（ＯＨ）、Ｄ、（エ ユ）と１．２４Ｒ，２５−（ＯＨ）３　Ｄｓ　（１上）は、２−３ｘｌＯ−＠Ｍ と９ｘｌＯ−”Ｍにおいて２ＥＤｓａを有する、予想外のかつ著しく再現性のあ る２段階（ｂｉｐｈａｓｉｃ）対数投与量一応答曲線（第１１図）をユニークに 形成する。

このように、ビタミンＤの公知の代謝物のうち、１．２５−ジヒドロキシビタミ ンＤａが最も活性があり、細胞の５０パーセントは１０−”Ｍの１，２５−ジヒ ドロキシビタミンＤ１で４日処理すると成熟した表現型を呈する。Ｃ−１または Ｃ−２５−ヒドロキシル基を除去すると、活性は２オーダの大きさまで低下する が、１α−乃至１β−ヒドロキシル基のエピマー化は実質上活性をなくす、Ｃ− ２４またはＣ−２６に３いて炭素１つを付加することにより１，２５−ジヒドロ キシビタミンＤ、のステロイダル側鎖を延長すると、１オーダの大きさで効力を 改善する。ステロイダル側鎖を切断すると、除去された各炭素につき活性が１０ 倍低くなる。Ｃ−２６及びＣ−２７メチル基を除去すると、活性は１００倍低く なる。ｌａ−ヒドロキシ−ホモ−及びビスホモプレグナコレカルシフェロールの ような短い脂肪側鎖を有する類似体は、驚くべき高い活性を示し、効力は天然ホ ルモンよりもわずかに２０倍低いだけである。ＨＬ−６０系におけるほとんどの 類似体の活性は、ひよこの腸における十分な特徴をなすｌ、２５−ジヒドロキシ ビタミンＤ、受容体に関する類似体の公知の相対アフィニテイに近似しており、 １．２５−ジヒドロキシビタミンＤ、のこの機能が受容体により媒介されるもの であることを更に証明している。

１α−ヒドロキシビタミンＤ、は、生体外においてＨＬ６０の分化を引き起こす うえで１α、２５−ジヒドロキシビタミンＤ、の活性（第１３表参照）の１００ 倍よりも低いことに特に注目すべきである。しかしながら、生体内においては、 １α−ヒドロキシビタミンＤ、は、ホリック（Ｈｏ１１ｉｃｋ）等のサイエンス （Ｓｃｉｅｎｃｅ）第１９０巻、第５７６−５７８頁（１９７５年）及びホリッ ク等のジャーナル・オブ・クリニカル・エンドクリノロジー・アンド・メタボリ ズム（Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ　Ｃ１１ｎｉｃａｌ　Ｅｎｄｏｃｒｉｎｏｌｏｇｙ 　＆　Ｍｅｔａｂｏｌｉｓｍ）第４４巻、第５９５−５９８頁（１９７７年）に 記載のように、ｌａ、２５−ジヒドロキシビタミンＤ、に素早く変換されること は周知であり、この化合物は、上記文献に示されるように、細胞分化において高 い効力を有する。かくして、人体が比較的活性のない１α−ヒドロキシル化ビタ ミンＤ化合物を、細胞の分化を引き起こすうえで高い活性を示す代謝物に素早く 変換することができることは明らかである。この生体内での能力により、悪性腫 瘍及びエイズのようなウィルス疾患を、側鎖の２４または２５炭素位置にヒドロ キシル基を当初は持たないｌａ−ヒドロキシル化ビタミンＤ化合物で処置するこ とが可能となる。

更に、本発明は、レンチウィルス（ｌｅｎｔｉｖｉｒｕｓ）感染症ならびに付隨 する免疫および感染障害を治療するための組成物および方法を提供する。レンチ ウィルスに関しては、これは、生体外で試験されたときにレンチウィルスの複製 を抑制することができる化合物であるビタミンＤ化合物の有効量を投与すること により達成することができる。レンチウィルスは周知であり、一般的には、この グループのウィルスに共通の遺伝構造を有する比較的緩慢な病状を持つレトロウ ィルスとして説明することができる。例えば、レンチウィルスはヒト免疫不全ウ ィルスタイプ１　（ＨＩＶ−１）、ヒト免疫不全ウィルスタイプ２　（ＨＩＶ− ２）、サル免疫不全ウィルス（Ｓ　Ｉ　Ｖ）、ウマ脳炎関節炎ウィルス（ＣＡＥ Ｖ）、ビスナーナエデイ（ｖｉｓｎａ−ｎａｅｄｉ）ウィルス、ウシ白血症ウィ ルス（ＢＬＶ）及びネコ免疫不全ウィルス（Ｆ　Ｉ　Ｖ）を含む。

第１３表 ＨＬ−６０分化の誘発における １、２５　０ＨａＤの　・２ ＥＤ、。

化合物　二トロブルーテ　食作用　非特異性酸二　活性比トラゾリウム還元　活 　性　ステラーゼ活性Ｍ　Ｍ　Ｍ　ＡＲ ｌｌ　３．０ｘｌＯ−”　２．７ｘｌＯ−”　１．７ｘｌＯ−”　２１ｊ　９． ３ｘｌＯ−’　１．０ｘｌＯ−’　１．０ｘｌＯ−’　１００２Ｊ２　７．０ｘ ｌＯ−’　６．０ｘｌＯ−’　１．０ｘｌＯ−’　８０１３　３．０ｘｌＯ−’ 　２．０ｘｌＯ−”　２．０ｘｌＯ−’　２２０ｌｒ　１．４ｘｌＯ−’　、　 １．８ｘｌＯ−”　２．０ｘｌＯ−’　１７０相似体の低濃度における投与量応 答曲線から得られなＥＤｓ、を表わす。

ＨＬ−６０細胞は、指示された濃度の１．２５−　（ＯＨ）！　Ｄ。

相似体の存在下で４日間培養した。これらの検定により５０％成熟を誘発するこ とができる類似体の濃度は、対数投与量一応答曲線から得られた。

ＡＲは１．２５−（ＯＨ）！　Ｄｓ　（１０−＠Ｍ）のＥ　Ｄ　ｓ。に対する類 似体の平均ＥＤＳ。の比であり、類似体の活性を天然ホルモンの活性と関連させ るものである。未処理の培養は、上記３つの検定により５−７％の単球細胞を一 貫して示した。

１．２５ＤＨＣＣはＵ９３７細胞におけるＨＩＶの複製を抑制する感染後の日数 第１図 ｔ１９３７ｍにおける＋ｉ　Ｌ　Ｖ　ｆｋ譚’７＋”ｐｎ＋ｉビタミンＤ、類似 体のモル 第４図 類似体濃度、　Ｍ 第６図 顕似体濃度、　Ｍ 第１１図 国際調査報告 −一１−−＾帥−メ馴”＠ＰＣＴ／ＵＳ　９０１０５１３４−一階一〜Ｉ＾帥に １馴−ＰＣＴ／Ｅｌｓ　９０１０５ｉ３４国際調査報告

Claims (95)

【特許請求の範囲】
1. １．ヒト免疫不全ウイルス感染及び後天性免疫不全症候群を治療する方法であっ て、下記式の化合物 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ４及びＲ５は水素、重水素を示し、あるいは一緒になった場合にはＲ ４及びＲ５は炭素−炭素二重結合または炭素−炭素三重結合を示し、Ｒ１３は水 素、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、フッ素、重水素またはアルキル基を示し、Ｚ は水素、ヒドロキシ、保護ヒドロキシを示し、Ｒ２は水素、重水素、ヒドロキシ 、保護ヒドロキシ、フッ素またはアルキル基を示し、同じであっても異なってい てもよいＸとＹは水素またはヒドロキシ保護基であり、Ｒ１は−ＣＦ３、−ＣＤ ２または−（ＣＨ２）ｑ−Ｈ基であり、Ｒ２は−ＣＦ２、−ＣＤ２または−（Ｃ Ｈ２）ｐ−Ｈ基であり、ｎ、ｑ及びｐは１乃至５の値を独立に有する整数であり 、Ｒ１及びＲ２は一緒になった場合には−（ＣＨ２）ｍ−基を示し、ｍは２乃至 ５の値を有する整数である。） を有効量、患者に投与することを特徴とする方法。
2. ２．前記化合物が１α，２５−ジヒドロキシ−ビタミンＤ２であることを特徴と する請求項１に記載の方法。
3. ３．前記化合物が１α，２５−ジヒドロキシ−２４，２４−ジフルオロ−ビタミ ンＤ２であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
4. ４．前記化合物が１α，２５−ジヒドロキシ−２６，２７−ヘキサジュウテロー ビタミンＤ２であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
5. ５．前記化合物が１α，２５−ジヒドロキシ−２６，２７−ヘキサフルオロビタ ミンＤ２であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
6. ６．前記化合物が１α−ヒドロキシビタミンＤ３であることを特徴とする請求項 １に記載の方法。
7. ７．前記化合物が２４−ホモ−１α，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロビタ ミンＤ３であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
8. ８．前記化合物が２４−ジホモ−１α，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロビ タミンＤ２であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
9. ９．前記化合物が２４−トリホモ−１α，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロ ビタミンＤ３であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
10. １０．前記化合物が２６，２７−ジメチル−２４−ジホモ−１α，２５−ジヒド ロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ３であることを特徴とする請求項１に記載の 方法。
11. １１．前記化合物が２６，２７−ジメチル−２４−トリホモ−１α，２５−ジヒ ドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ３であることを特徴とする請求項１に記載 の方法。
12. １２．前記化合物が２６，２７−ジエチル−２４−ジホモ−１α，２５−ジヒド ロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ３であることを特徴とする請求項１に記載の 方法。
13. １３．前記化合物が２６，２７−ジエチル−２４−トリホモ−１α，２５−ジヒ ドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ３であることを特徴とする請求項１に記載 の方法。
14. １４．前記化合物が２６，２７−ジプロピル−２４−ジホモ−１α，２５−ジヒ ドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ３であることを特徴とする請求項１に記載 の方法。
15. １５．前記化合物が２６，２７−ジプロピル−２４−トリホモ−１α，２５−ジ ヒドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ３であることを特徴とする請求の範囲第 １項に記載の方法。
16. １６．前記化合物が２４−ホモ−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３である ことを特徴とする請求項１に記載の方法。
17. １７．前記化合物が２４−ジホモ−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３であ ることを特徴とする請求項１に記載の方法。
18. １８．前記化合物が２４−トリホモ−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３で あることを特徴とする請求項１に記載の方法。
19. １９．前記化合物が２６，２７−ジメチル−２４−ジホモ−１α，２５−ジヒド ロキシビタミンＤ３であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
20. ２０．前記化合物が２６，２７−ジメチル−２４−トリホモ−１α，２５−ジヒ ドロキシビタミンＤ３であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
21. ２１．前記化合物が２６，２７−ジエチル−２４−ジホモ−１α，２５−ジヒド ロキシビタミンＤ３であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
22. ２２．前記化合物が２６，２７−ジエチル−２４−トリホモ−１α，２５−ジヒ ドロキシビタミンＤ３であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
23. ２３．前記化合物が２６，２７−ジプロピル−２４−ジホモ−１α．２５−ジヒ ドロキシビタミンＤ３であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
24. ２４．前記化合物が２６，２７−ジプロピル−２４−トリホモ−１α，２５−ジ ヒドロキシビタミンＤ３であることを特徴とする請求項１に記載の方法。
25. ２５．ヒト免疫不全ウイルス感染及び後天性免疫不全症候群を治療する方法であ って、下記式の化合物 ▲数式、化学式、表等があります▼ ［式中、Ｘ１及びＹ１はそれぞれ水素、アシル、アルキルシリル及びアルコキシ アルキルよりなる群から選ばれ、Ｕはアルキル、水素、ヒドロキシアルキル、フ ルオロアルキル及び下記式の側鎖▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｚ１は水素、ヒドロキシまたは０−アシルを示し、Ｒ６及びＲ７はそれ ぞれアルキル、シュウテロアルキル、ヒドロキシアルキル及びフルオロアルキル よりなる群から選ばれ、もしくは一緒になった場合には−−（ＣＨ２）ｍ−−基 を示し、ｍは２乃至５の値を有する整数であり、Ｒ５は水素、重水素、ヒドロキ シ、フッ素、０−アシル、アルキル、ヒドロキシアルキル及びフルオロアルキル よりなる群から選ばれ、Ｒ９は水素、重水素、フッ素、アルキル、ヒドロキシア ルキル及びフルオロアルキルよりなる群から選ばれ、もしくはＲ３及びＲ９は一 緒になった場合には二重結合酸素または二重結合炭素を示し、Ｒ１０及びＲ１１ はそれぞれ水素、重水素、ヒドロキシ、０−アシル、フッ素及びアルキルよりな る群から選ばれ、もしくはＲ１０及びＲ１１は一緒になった場合には炭素−炭素 二重結合または炭素−炭素三重結合を形成し、ｎは１乃至５の値を有する整数で あり、側鎖の２０、２２または２３位のいずれか１つにある炭素は０、Ｓまたは Ｎ原子により置換することができる。）から選ばれる。〕 を有効量、患者に投与ことを特徴とする方法。
26. ２６．前記化合物が１α，２５−ジヒドロキシ−１９−ノルービタミンＤ３であ ることを特徴とする請求項２５に記載の方法。
27. ２７．前記化合物が１α−ヒドロキシ−１９−ノルービタミンＤ２であることを 特徴とする請求項２５に記載の方法。
28. ２８．前記化合物が１α，２５−ジヒドロキシ−１９−ノルービタミンＤ２であ ることを特徴とする請求項２５に記載の方法。
29. ２９．前記化合物が１α−ヒドロキシ−１９−ノルービタミンＤ２であることを 特徴とする請求項２５に記載の方法。
30. ３０．前記化合物が１α−ヒドロキシ−１９−ノルー２４エピービタミンＤ２で あることを特徴とする請求項２５に記載の方法。
31. ３１．前記化合物が１α，２５−ジヒドロキシ−１９−ノルー２４エピービタミ ンＤ２であることを特徴とする請求項２５に記載の方法。
32. ３２．ヒト免疫不全ウイルス感染及び後天性免疫不全症候群を治療する方法であ って、式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （上記式においてＲ１２は水素、メチル、エチルまたはプロピルであり、Ｘ２及 びＹ２はそれぞれ水素、アシル基、またはヒドロキシ保護基を独立に表わす。） の化合物の有効量を患者に投与ことを特徴とする方法。
33. ３３．Ｒ１２が水素であることを特徴とする請求項３２に記載の方法。
34. ３４．Ｒ１２がメチルであることを特徴とする請求項３２に記載の方法。
35. ３５．Ｒ１２がエチルであることを特徴とする請求項３２に記載の方法。
36. ３６．Ｒ１２がプロピルであることを特徴とする請求項３２に記載の方法。
37. ３７．前記有効量が前記化合物の約０．０１μｇ／日乃至約１００μｇ／日から なることを特徴とする請求項１に記載の方法。
38. ３８．前記有効量が前記化合物の約０．０１μｇ／日乃至約１００μｇ／日から なることを特徴とする請求項２５に記載の方法。
39. ３９．前記有効量が前記化合物の約０．０１μｇ／日乃至約１００μｇ／日であ ることを特徴とする請求項３２に記載の方法。
40. ４０．式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （上記式において、Ｒ４及びＲ５は水素、重水素を示し、もしくは一緒になった 場合にはＲ４及びＲ５は炭素−炭素二重結合または炭素−炭素三重結合を示し、 Ｒ１２は水素、ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、フッ素、重水素またはアルキル基 を示し、Ｚは水素、ヒドロキシ、保護ヒドロキシを示し、Ｒ２は水素、重水素、 ヒドロキシ、保護ヒドロキシ、フッ素またはアルキル基を示し、同じであっても 異なっていてもよいＸとＹは水素またはヒドロキシ保護基であり、Ｒ１は−ＣＦ ３、−ＣＤ３または−（ＣＨ２）ｑ−Ｈ基を示し、Ｒ２は−ＣＦ３、−ＣＤ３ま たは−（ＣＨ２）ｐ−Ｈ基を示し、ｎ、ｑ及びｐは１乃至５の値を独立に有する 整数であり、Ｒ１及びＲ２は一緒になった場合には−（ＣＨ２）ｍ−基を示し、 ｍは２乃至５の値を有する整数である。） で表わされる化合物の有効量と更に適宜の担体を有してなることをを特徴とする ヒト免疫不全ウイルス感染及び後天性免疫不全症候群の治療に使用する組成物。
41. ４１．前記化合物が１α，２５−ジヒドロキシ−ビタミンＤ３であることを特徴 とする請求項４０に記載の組成物。
42. ４２．前記化合物が１α，２５−ジヒドロキシ−２４，２４−ジフルオロ−ビタ ミンＤ３であることを特徴とする請求項４０に記載の組成物。
43. ４３．前記化合物が１α，２５−ジヒドロキシ−２６，２７−ヘキサジュウテロ ービタミンＤ３であることを特徴とする請求項４０に記載の組成物。
44. ４４．前記化合物が１α，２５−ジヒドロキシ−２６，２７−ヘキサフルオロビ タミンＤ３であることを特徴とする請求項４０に記載の組成物。
45. ４５．前記化合物が１α−ヒドロキシビタミンＤ３であることを特徴とする請求 項４０に記載の組成物。
46. ４６．前記化合物が２４−ホモ−１α，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロビ タミンＤ３であることを特徴とする請求項４０に記載の組成物。
47. ４７．前記化合物が２４−ジホモ−１α，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒドロ ビタミンＤ３であることを特徴とする請求項４０に記載の組成物。
48. ４８．前記化合物が２４−トリホモ−１α，２５−ジヒドロキシ−２２−デヒド ロビタミンＤ２であることを特徴とする請求項４０に記載の組成物。
49. ４９．前記化合物が２６，２７−ジメチル−２４−ジホモ−１α，２５−ジヒド ロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ２であることを特徴とする請求項４０に記載 の組成物。
50. ５０．前記化合物が２６，２７−ジメチル−２４−トリホモ−１α，２５−ジヒ ドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ３であることを特徴とする請求項４０に記 載の組成物。
51. ５１．前記化合物が２６，２７−ジエチル−２４−ジホモ−１α，２５−ジヒド ロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ２であることを特徴とする請求項４０に記載 の組成物。
52. ５２．前記化合物が２６，２７−ジエチル−２４−トリホモ−１α，２５−ジヒ ドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ２であることを特徴とする請求項４０に記 載の組成物。
53. ５３．前記化合物が２６，２７−ジプロピル−２４−ジホモ−１α，２５−ジヒ ドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ３であることを特徴とする請求項４０に記 載の組成物。
54. ５４．前記化合物が２６，２７−ジプロピル−２４−トリホモ−１α，２５−ジ ヒドロキシ−２２−デヒドロビタミンＤ３であることを特徴とする請求項４０に 記載の組成物。
55. ５５．前記化合物が２４−ホモ−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３である ことを特徴とする請求項４０に記載の組成物。
56. ５６．前記化合物が２４−ジホモ−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３であ ることを特徴とする請求項４０に記載の組成物。
57. ５７．前記化合物が２４−トリホモ−１α，２５−ジヒドロキシビタミンＤ３で あることを特徴とする請求項４０に記載の組成物。
58. ５８．前記化合物が２６，２７−ジメチル−２４−ジホモ−１α，２５−ジヒド ロキシビタミンＤ２であることを特徴とする請求項４０に記載の組成物。
59. ５９．前記化合物が２６，２７−ジメチル−２４−トリホモ−１α，２５−ジヒ ドロキシビタミンＤ２であることを特徴とする請求項４０に記載の組成物。
60. ６０．前記化合物が２６，２７−ジエチル−２４−ジホモ−１α，２５−ジヒド ロキシビタミンＤ２であることを特徴とする請求項４０に記載の組成物。
61. ６１．前記化合物が２６，２７−ジエチル−２４−トリホモ−１α，２５−ジヒ ドロキシビタミンＤ２であることを特徴とする請求項４０に記載の組成物。
62. ６２．前記化合物が２６，２７−ジプロピル−２４−ジホモ−１α，２５−ジヒ ドロキシビタミンＤ３であることを特徴とする請求項４０に記載の組成物。
63. ６３．前記化合物が２６，２７−ジプロピル−２４−トリホモ−１α，２５−ジ ヒドロキシビタミンＤ２であることを特徴とする請求項４０に記載の組成物。
64. ６４．式 ▲数式、化学式、表等があります▼ 式中、Ｘ１及びＹ１はそれぞれ水素、アシル、アルキルシリル及びアルコキシア ルキルよりなる群から選ばれ、Ｕはアルキル、水素、ヒドロキシアルキル、フル オロアルキル及び▲数式、化学式、表等があります▼ なる式の側鎖よりなる群から選ばれ、この側鎖を示す式においてＺ１は水素、ヒ ドロキシまたは０−アシルを示し、Ｒ６及びＲ７はそれぞれアルキル、シュウテ ロアルキル、ヒドロキシアルキル及びフルオロアルキルよりなる群から選ばれ、 もしくは一緒になった場合には−−（ＣＨ２）ｍ−−基を示し、ｍは２乃至５の 値を有する整数であり、Ｒ８は水素、重水素、ヒドロキシ、フッ素、０−アシル 、アルキル、ヒドロキシアルキル及びフルオロアルキルよりなる群から選ばれ、 Ｒ９は水素、重水素、フッ素、アルキル、ヒドロキシアルキル及びフルオロアル キルよりなる群から選ばれ、もしくはＲ８及びＲ９は一緒になった場合には二重 結合酸素または二重結合炭素を示し、Ｒ１０及びＲ１１はそれぞれ水素、重水素 、ヒドロキシ、０−アシル、フッ素及びアルキルよりなる群から選ばれ、もしく はＲ１０及びＲ１１は一緒になった場合には炭素−炭素二重結合または炭素−炭 素三重結合を形成し、ｎは１乃至５の値を有する整数であり、側鎖の２０、２２ または２３位のいずれか１つにある炭素は０、ＳまたはＮ原子により置換するこ とができる。）で表わされる化合物と更に適宜の坦体とを有してなることを特徴 とするヒト免疫不全ウイルス感染及び後天性免疫不全症候群の治療において使用 する組成物。
65. ６５．前記化合物が１α，２５−ジヒドロキシ−１９−ノルービタミンＤ３であ ることを特徴とする請求項６４に記載の組成物。
66. ６６．前記化合物が１α−ヒドロキシ−１９−ノルービタミンＤ２であることを 特徴とする請求項６４に記載の組成物。
67. ６７．前記化合物が１α，２５−ジヒドロキシ−１９−ノルービタミンＤ２であ ることを特徴とする請求項６４に記載の組成物。
68. ６８．前記化合物が１α−ヒドロキシ−１９−ノルービタミンＤ２であることを 特徴とする請求項６４に記載の組成物。
69. ６９．前記化合物が１α−ヒドロキシ−１９−ノル−２４エピービタミンＤ２で あることを特徴とする請求項６４に記載の組成物。
70. ７０．前記化合物が１α，２５−ジヒドロキシ−１９−ノル−２４エピービタミ ンＤ２であることを特徴とする請求項６４に記載の組成物。
71. ７１．式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ１２は水素、メチル、エチルまたはプロピルであり、Ｘ２及びＹ２は それぞれ水素、アシル基、またはヒドロキシ保護基を独立に表わす。） で表わされる化合物と更に適宜の坦体を有してなることを特徴とするヒト免疫不 全ウイルス感染及び後天性免疫不全症候群の治療において使用する組成物。
72. ７２．Ｒ１２が水素であることを特徴とする請求項７１に記載の組成物。
73. ７３．Ｒ１２がメチルであることを特徴とする請求項７１に記載の組成物。
74. ７４．Ｒ１２がエチルであることを特徴とする請求項７１に記載の組成物。
75. ７５．Ｒ１２がプロピルであることを特徴とする請求項７１に記載の組成物。
76. ７６．前記有効量が前記組成物のグラム当たり約０．０１μｇ乃至約１００μｇ であることを特徴とする請求項４０に記載の組成物。
77. ７７．前記有効量が前記組成物のグラム当たり約０．０１μｇ乃至約１００μｇ であることを特徴とする請求項６４に記載の組成物。
78. ７８．前記有効量が前記組成物のグラム当たり約０．０１μｇ乃至約１００μｇ であることを特徴とする請求項７１に記載の組成物。
79. ７９．生体外で試験するとヒト細胞系の分化を刺激することができる化合物であ るビタミンＤ化合物の有効量を患者に投与することを特徴とするヒト免疫不全ウ イルス感染及び後天性免疫不全症候群を治療する方法。
80. ８０．前記細胞系がＵ９３７細胞系であることを特徴とする請求項７９に記載の 方法。
81. ８１．前記細胞系がＨＬ６０細胞系であることを特徴とする請求項７９に記載の 方法。
82. ８２．前記細胞系がＭ１細胞系であることを特徴とする請求項７９に記載の方法 。
83. ８３．人に投与すると代謝物に変換される化合物である１α−ヒドロキシル化ビ タミンＤ化合物の有効量を患者に投与する方法であって、前記代謝物は生体外で 人細胞系において分化を引き起こすことを特徴とするヒト免疫不全ウイルス感染 及び後天性免疫不全症候群を治療する方法。
84. ８４．前記細胞系がＵ９３７細胞系であることを特徴とする請求項８３に記載の 方法。
85. ８５．前記細胞系がＨＬ６０細胞系であることを特徴とする請求項８３に記載の 方法。
86. ８６．前記細胞系がＭ１細胞系であることを特徴とする請求項８３に記載の方法 。
87. ８７．生体外で試験するとレンチウイルスの複製を抑制することができる化合物 であるビタミンＤの有効量を患者に投与することを特徴とするレンチウイルス感 染並びに付随する免疫及び感染障害を治療する方法。
88. ８８．前記レンチウイルスがヒト免疫不全ウイルスタイプ１であることを特徴と する請求項８７に記載の方法。
89. ８９．前記レンチウイルスがヒト免疫不全ウイルスタイプ２であることを特徴と する請求項８７に記載の方法。
90. ９０．前記レンチウイルスが猿免疫不全ウイルスであることを特徴とする請求項 ８７に記載の方法。
91. ９１．前記レンチウイルスが馬感染性貧血ウイルスであることを特徴とする請求 項８７に記載の方法。
92. ９２．前記レンチウイルスがヤギ脳炎関節炎ウイルスであることを特徴とする請 求項８７に記載の方法。
93. ９３．前記レンチウイルスがピスナーナエディウイルスであることを特徴とする 請求項８７に記載の方法。
94. ９４．前記レンチウイルスがウシ白血症ウイルスであることを特徴とする請求項 ８７に記載の方法。
95. ９５．前記レンチウイルスがネコ免疫不全ウイルスであることを特徴とする請求 項８７に記載の方法。