JPH04218360A - ラクトフェリン含有調製物の殺菌方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は、多様な生理的活性を持ちそれにより種々の生
理機能を発現するラクトフェリンを含む調製物−例えば
飲料などに適用される殺菌方法に関する。

［従来の技術］ ラクトフェリンは、哺乳動物の乳、唾液、血漿および精
液などの外分泌液、および多形核白血球の二次顆粒中に
存在している鉄結合性糖蛋白質である。

ラクトフェリンの生理作用としては静菌効果が広く知ら
れているが、腸管での鉄の吸収を促進したり（カワカミ
他「アグリカルチャルバイオロジカルケミストリイ」５
２巻、４号、９０３〜９０８頁、１９８８年）、リンパ
球の細胞増殖促進作用（ハシズメ他「バイオケミカバイ
オフィジカアクタ」７６３巻、３７７頁、１９８３）、
単核球からのＧＭ−ＣＳＦ（グラニュロサイトマクロフ
ァージコロニー刺激因子）産生の抑制作用（ブロキシメ
ーヤー他「ジャーナルオブエクスペリメンタルメディシ
ン」１４８巻、１０５２頁、１９７８年）などの生理機
能が明らかになってきており、生体の防御機構の中で重
要な役割を果たしていることが明らかである。従って最
近ではこれを各種疾患の治療への応用や、細胞培養に利
用することなども試みられている。

これらラクトフェリンの生理的機能性は、主として、ラ
クトフェリンの鉄結合力に由来しており、ラクトフェリ
ンの三次元的立体構造が保持されている時のみ、鉄をキ
レート結合する能力を発揮する。

しかし、上記のいづれの生理作用を利用する場合におい
てもその為のラクトフェリン含有調製物は雑菌に汚染さ
れていてはならず、滅菌手段の適用を避けることはでき
ない。

ところが、ラクトフェリンは、加熱によって三次元的立
体構造が破壊されて沈澱し失活する。実際、濃度の希薄
な０．５％程度であっても、６０℃、１５分間加熱した
だけで、ラクトフェリンは沈澱するといわれている。し
たがって、ラクトフェリン水溶液から細菌を除くには、
フィルター除菌しか方法がなかった。

また例えば、生理的機能性を付与した食品としてラクト
フェリンを利用する上で、ラクトフェリンの殺菌工程は
不可欠であり、食品衛生法の清涼飲料水製造基準には、
■ｐＨ４．０未満の場合、６５℃、１０分間の加熱又は
これと同等以上の効果を有する殺菌を、■ｐＨ４．０以
上の場合、８５℃、３０分間の加熱又はこれと同等以上
の効果を有する殺菌をそれぞれ行わなければならない。

［発明が解決しようとする課題］ 本発明は、叙上の状況に鑑みなされたものであって、種
々の生理的機能性を発現する基本となる鉄結合能を保持
したままで、ラクトフエリン含有調製物を滅菌するため
の方法を提供することを課題とする。

［課題を解決するための手段］ 本発明ではラクトフェリンを適当な媒体と混合物の形に
調製してラクトフェリン含有調製物とし、これに高圧力
を加える。

適用する圧力は、２０００気圧以上であるが、６０００
気圧を超えるとラクトフェリンの活性を損うことが無視
できなくなるので実用上はこの近傍に上限が設けられる
だろう。

加圧を適用する時間は例えば、水溶液であれば１０分間
もあれば充分であり当然のことながらこれより長い時間
を用いることに不都合はないが実用上意味がない。一方
これより短かい時間では効果の再現性に危惧を招き易く
なるので、殺滅すべき雑菌の種類及び量などに注意をは
らって加減することはできる。

液状媒体としては水性の真溶液、例えば生理的に受け入
れることができる塩類溶液は勿論、乳などの非水成分と
の懸濁系についても、本発明は適用可能である。

加圧に先立って一旦減圧することが滅菌効果を確実にす
る場合がある。おそらく栄養細胞の破壊を助けるものと
思われる。液体媒体でも減圧手段を適用できないことは
ないが、液の沸騰や乳化の破壊が起り易いので一般には
有効に適用することは困難である。

以下、実施例及び比較例を示して本発明の効果を実証す
る。

実施例１ 水媒体中でラクトフェリンを加圧してもその生理活性を
損うことがないことを示す例である。

アラファーム社製牛ラクトフェリン（ｂ−Ｌｆ）１ｇを
蒸留水９９ｍｌに溶解し、１％ｂ−Ｌｆ溶液とした。

上記溶液を高圧装置にて２０００、４０００、６０００
、８０００気圧で各々１０分間加圧を行い、加圧後の免
疫的活性の変化を補体結合法により測定した。測定結果
は表１に示す通りである。

なお補体結合法については、日本生化学会編、続生化学
実験講座５、５０−５７頁のＭａｙｅｒ変法を参考にし
た。

表１にみられるとおり、ｂ−Ｌｆの活性は６０００気圧
まで低下が認められず８０００気圧においても僅か５％
の活性減にとどまった。

実施例２ ラクトフェリン水溶液への加圧による殺菌効果を示す例
である。

実施例１と同様に調製したｂ−Ｌｆ溶液に、大腸菌、ブ
ドウ状球菌、酵母が各々１０６／ｍｌ含有される菌懸濁
液を得た。上記溶液を高圧装置にて２０００、３０００
、４０００、６０００気圧で各々１０分間加圧を行い、
加圧後の生菌数を測定した。測定結果は表２および図１
に示すとおりである。

この結果、大腸菌はすでに３０００気圧で、ブドウ状球
菌及び酵母も４０００気圧になるとすべて死滅したこと
が明らかである。

なお、この実施例においてもラクトフェリンの生理活性
が損なわれないことは次の表３で示す通りである。測定
方法は実施例１に同じである。

実施例３ ラクトフェリン牛乳溶解液への加圧によってもその生理
活性を損われないことを示す例である。

実施例１で用いたラクトフェリン（ｂ−Ｌｆ）１ｇを市
販の牛乳９９ｍｌに溶解し、１％ｂ−Ｌｆ牛乳溶解液を
得た。上記溶液を高圧装置にて２０００、４０００、６
０００、８０００気圧で各々１０分間加圧を行い、加圧
後の免疫的活性を実施例１と同様に測定した。測定結果
は表４に示すとおりである。

表４にみられるとおり、ｂ−Ｌｆの活性は４０００気圧
まで低下が認められず、６０００気圧でも８０％弱の活
性は残存していた。

比較例１ 加熱処理によってラクトフェリンの生理活性が低下する
ことを示す比較の為の例である。

食品衛生法における清涼飲料水製造基準で１％ｂ−Ｌｆ
溶液を殺菌した。しかし、■ｐＨ４．０未満の１％ｂ−
Ｌｆ溶液の殺菌には６５℃で１０分間の加熱を、■ｐＨ
４．０以上の１％ｂ−Ｌｆ溶液の殺菌には８５℃で３０
分間の加熱をそれぞれ行なわなければならないが１％ｂ
−Ｌｆ溶液は、そのままでは中性（ｐＨ５〜７）のため
■のｐＨ４．０未満という条件を満たすべく、■では蒸
留水のかわりにクエン酸バッファーでｂ−Ｌｆを溶解し
ｐＨ５．３１を３．７６に調整して行った。測定結果は
表５に示すとおりである。

表５にみられるとおり、食品衛生法による加熱殺菌条件
ではラクトフェリンの生理的活性は著しく低下してとう
てい実用的でないことが明らかである。

比較例２ 加熱処理によるラクトフェリン牛乳溶解液の免疫的活性
の低下を示す比較例である。実施例３と同様に調製した
１％ｂ−Ｌｆ牛乳溶解液を６０℃で１５分間（大腸菌、
酵母の死滅する時間）、８５℃で４分間、９０℃で５分
間（１２０℃、３秒と同等の殺菌効果を有す１／１０の
時間）で各々加熱処理した。処理物の免疫的活性の測定
結果は表６に示すとおりである。

表６にみられるとおり、牛乳にラクトフェリンを添加し
、加熱すると比較例１と同様にその生理的活性は著しく
低下し、牛乳を殺菌する条件（例えば１２０℃、２〜３
秒）では活性を保持しえないことは明らかである。

［発明の効果］ 本発明によると、生理機能を損うことなくラクトフェリ
ン含有調製物の殺菌が可能である。

【図面の簡単な説明】

第１図は、ラクトフェリン水溶液を加圧した場合の殺菌
効果を示す図である。 特許出願人　雪印乳業株式会社 代理人　若林忠

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】ラクトフェリン含有調製物に２０００気圧
   を超える圧力を加えることを特徴とするその殺菌方法。
2. 【請求項２】圧力が６０００気圧を越えない請求項１に
   記載の方法。
3. 【請求項３】調製物の媒体が水性液状物である請求項１
   に記載の方法。
4. 【請求項４】水性液状物が乳である請求項３に記載の方
   法。