JPH04182500A - 小麦からα―アミラーゼ阻害物質を取得する方法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、小麦または小麦粉の水抽出液からα−アミラ
ーゼ阻害物質を取得する方法に関する。

〔従来の技術〕

小麦または小麦粉中には多種のσ−アミラーゼ阻害物質
が含まれていることが知られている。

このα−アミラーゼ阻害物質はａ−アミラーゼの活性を
阻害するものであるから、σ−アミラーゼ阻害物質を効
率的Ｉコ取り出すことができたならば、これを抗肥満の
ためのダイエツト剤、高血糖症の治療剤、糖泳病の治療
剤、および虫、　　歯の予防剤などとしての宵月性が期
待されるものである。

これまでにσ−アミラーゼ阻害物質を種々の原料物質か
ら抽出して取得することが試みられており、例えば小麦
中に含まれる、−アミラーゼ阻害物質を抽出する方法（
特開昭５７−１４０７２７号公報）が知られている。さ
らＩこ小麦からのグルテンおよび小麦澱粉製造工業にお
いて発生する洗液（廃液）からの限外が過膜によるσ−
アミラーゼ阻害物質の濃縮方法（特開平２−１５７２９
６号公報）も知られている。

〔発明が解決しようとする技術的課題〕上記従来技術に
よればａ−アミラーゼ阻害物質を小麦または小麦粉から
取り出すには、小麦または小麦粉の水抽出液を加熱処理
し、有機溶媒で分画沈澱させ、沈澱部分を採取してその
溶液を吸着剤処理し、塩溶液で溶出し、クロマトグラフ
ィーによって分画するというきわめて複雑な操作を要す
るため簡便で実用的なσ−アミラーゼ阻害物質の取得方
法が求められていた。

一方、小麦からのグルテン製造および小麦澱粉製造工業
にあっては、小麦粉と水とを混練して生成するドウ（ｄ
ｃｕｇｂ）またはバッター（ｂａｔｔｅｒ）からの澱粉
の洗い出しに伴い多量の洗液（廃液）が発生し、この処
理には多大の経費と手数を要する。この廃液の処理を兼
ねて限外濾過の手段でσ−アミラーゼ阻害物質を濃縮す
る上記従来技術の方法は、廃液処理と有用物の回収とい
う一石二鳥の効果を奏するものではあるがなお限界濾過
という高度な技術と器材とを要する。従って、かかる廃
水の処理を簡便な手段で行ない得、しかも所望のα−ア
ミラーゼ阻害物質を容易に得る方法が求められていた。

〔課題を解決するだめの手段〕

上記した課題を解決すべく本発明者らは鋭意研究の結果
、小麦または小麦粉の水抽出液中のα−アミラーゼ阻害
物質がａ−アミラーゼ阻害物質と複合体形成能を有する
多糖類とは複合体を形成しうるものであり、生成した水
不溶性複合体（ＳＳ）を分離することによりα−アミラ
ーゼ阻害物質を上記水抽出液から取り出しうろことを見
出して本発明を完成したのである。

すなわち、本発明は、 小麦または小麦粉の水抽出液を加熱処理し、水抽出液に
夾雑する不要蛋白質を変性させ、この変性蛋白質を除去
して得られるσ−アミラーゼ阻害物質含有の水溶液を必
要に応じてろ過および除菌処理に付し、この水溶液にσ
−アミラーゼ阻害物質と複合体形成可能な多糖類を添加
してこの多糖類とα−アミラーゼ阻害物質の複合体を形
成させ、生成した水不溶性複合体を分離することにより
多糖類とσ−アミラーゼ阻害物質の複合体を取り出すか
、または必要に応じて分離した上記複合体を水に再分散
させ、多糖類をゲル化して除き、得られるσ−アミラー
ゼ阻害物質含有の水溶液を濃縮または乾燥させることか
ら成る、σ−アミラーゼ阻害物質を取得する方法に関す
る。

本発明はまた、小麦または小麦粉を水で抽出し、必要に
応じてろ過および除菌処理に付して得られる、σ−アミ
ラーゼ阻害物質含有の水溶液に、α−アミラーゼ阻害物
質と複合体形成可能な多糖類を添加してこの多糖類とα
−アミラーゼ阻害物質の複合体を形成させ、生成した水
不溶性複合体を分離し、分離した水不溶性複合体を水に
再分散させ、得られた多糖類とα−アミラーゼ阻害物質
の混液を加熱処理して混液に夾雑する不要蛋白質を変性
させ、この変性蛋白を除去して得られるσ−アミラーゼ
阻害物質含有の水溶液を濃縮または乾燥させるか、また
は必要に応じて上記の変性蛋白を除去して得られるａ−
アミラーゼ阻害物質含有の水溶液中の多糖類をゲル化し
て除き、得られるａ−アミラーゼ阻害物質含有の水溶液
を濃縮または乾燥させることから成る、σ−アミラーゼ
阻害物質を取得する方法にも関する。

本発明は更にまた、小麦まｌ：は小麦粉を水で抽出し、
必要に応じてろ過および除菌処理に付して得られる、α
−アミラーゼ阻害物質含有の水溶液に、α−アミラーゼ
阻害物質と複合体形成可能な多糖類を添加してこの多糖
類とσ−アミラーゼ阻害物質の複合体を形成させ、生成
した水不溶性複合体を水に再分散させ、得られた多糖類
とａ−アミラーゼ阻害物質の混液中の多糖類をゲル化し
て除き、得られるａ−アミラーゼ阻害物質含有の水溶液
に夾雑する不要蛋白質を変性させ、この変性蛋白を除去
して得られる１−アミラーゼ阻害物質含有の水溶液を濃
縮または乾燥させることから成る、σ−アミラーゼ阻害
物質を取得する方法にも関する。

この発明の小麦または小麦粉の水抽出液からのα−アミ
ラーゼ阻害物質の取得は具体的には次のような工程によ
って達成されうる。

（ａ）小麦または小麦粉に充分量の水を加えて０°〜４
０°の温度で撹拌処理し、遠心分離または静置により水
抽出液をうる。この水抽出液には可溶性蛋白、可溶性糖
質、無機塩類、色素などの可溶性物質および所望のα−
アミラーゼ阻害物質が含まれている。この水抽出液の取
得源としては小麦粉からグルテンおよび澱粉を採取する
際のドウまたはバッターの水洗廃液であっても良い。

（ｂ）α−アミラーゼ阻害物質含有液を７０〜９０℃、
好ましくは８５〜９０℃に加熱するかｐＨを２以上４未
満に保ち放置するか、あるいはｐＨ２〜６で４０〜８０
°Ｃに加熱することにより不要蛋白質を変性させる。こ
の際α−アミラーゼ阻害物質はこれらの処理に対して極
めて安定であるのでほとんど変性することはないが、他
の蛋白質の多くは変性され水不溶性となる。このように
して生成した水不溶性の変性蛋白は遠心分離または静置
により除去される。

（Ｃ）変性蛋白を分離した液あるいは（ａ）工程で得ら
れる水抽出物は必要に応じて精密濾過膜を通過させて除
菌を行う。

（ｄ）得られたσ−アミラーゼ阻害物質含有液にσ−ア
ミラーゼ阻害物質と複合体形成能を有する多糖類を添加
する。び−アミラーゼ阻害物質は酸性領域において水溶
性多糖類と複合体、すなわちＳＳを形成する。

（ｅ）上記（ｄ）工程により形成されたＳＳは濾過また
は遠心分離により分離され、α−アミラーゼ阻害物質は
多糖類と結合した形態で取り出される。

（ｆ）このようにして取り出されたα−アミラーゼ阻害
物質の多糖類複合体はアンモニア水、炭酸水素アンモニ
ウム等ｐＨ調節剤によって中和され、σ−アミラーゼ阻
害物質と多糖類は解離状態におかれる。本工程は加温に
よって更に効果的に行いうる。

（ｇ）解離状態の多糖類とα−アミラーゼ阻害物質の混
液に金属イオン、例えばに＋、Ｃａ“、Ｍｇ＋″′の添
加により多糖類をゲル化させ、このゲル化した多糖類を
濾過または遠心分離のような手段により分離してσ−ア
ミラーゼ阻害物質を溶解してなる水溶液を取得する。

（ｈ）多糖類を除去したσ−アミラーゼ阻害物質を含有
する水溶液は直接、または限外濾過に付して濃縮したの
ち乾燥することによりα−アミラーゼ阻害物質を高度に
濃縮された形で含有する製品とする。

この発明によれば、上記した工程による他に別法として
次の工程によってもσ−アミラーゼ阻害物質の取得の目
的が達成される。

すなわち、上記（ａ）工程で得られた水抽出液について
、上記（ｂ）、（Ｃ）工程を経由することなく直接（ｄ
）、（ｅ）および０）工程に付する。

（ｉ）得られた多糖類とα−アミラーゼ阻害物質とが解
離状態となっｌ；混液を７０〜９５℃、好ましくは８５
〜９０°Ｃに加熱して不要蛋白質を変性させる。このよ
うにして生成した水不溶性の変性蛋白は遠心分離または
静置により除去される。

（Ｄ変性蛋白を除去した多糖類とσ−アミラーゼ阻害物
質の混液に金属イオン、例えば「、Ｃａ”、Ｍｇ”＋の
添加により多糖類をゲル化させ、このゲル化した多糖類
をか過または遠心分離のような手段により分離してα−
アミラーゼ阻害物質を溶解してなる水溶液を取得する。

（ｋ）多糖類を除去したσ−アミラーゼ阻害物質を溶解
してなる水溶液について上記（ｈ）の工程に付する。

更に本発明によれば、上記別法において（ｉ）および（
ｊ）の工程を逆にした他の別法によってもσ−アミラー
ゼ阻害物質の取得の目的が達成される。

すなわち、上記（ａ）工程で得られた水抽出液について
、上記（ｂ）および（Ｃ）工程を経由することなく直接
（ｄ）、（ｅ）および（Ｄ工程に付する。

（１）得られた多糖類とα−アミラーゼ阻害物質とが解
離状態となった混液に金属イオン、例えばに゛、Ｃａ＋
″、Ｍｇ−の添加により多糖類をゲル化させ、このゲル
化した多糖類をか過または遠心分離のような手段により
分離する。

（ｍ）得られたα−アミラーゼ阻害物質を溶解してなる
水溶液を７０〜９５°Ｃ１好ましくは８５°〜９０°Ｃ
に加熱して不要蛋白質を変性させ、生成した水不溶性の
変性蛋白は遠心分離または静置により除去される。

（ｎ）得られた変性蛋白が除去されたσ−アミラーゼ阻
害物質を溶解してなる水溶液について上記（ｈ）の工程
に付する。

上記した（ａ）工程におけるσ−アミラーゼ阻害物質含
有の水抽出液としては小麦粉からグルテンおよび澱粉を
採取する際に発生する廃液であっても良いことは上記し
たとおりである。すなわち、グルテンおよび小麦澱粉製
造工業では現在多くの工場でマーチン法、またはバッタ
ー法が採用されている。この方法で使用する水の−ｆｆ
ｉ分についてはグルテンが湿麩状態で保持する水分とし
て、および澱粉ケーキ中に含まれる水分として製造系外
に持ち去られるが、これは僅少量にすぎず大部分の水は
廃水として排出されている。かかる廃水には、炭水化物
、蛋白質などの高分子を機動が多量に含まれており、そ
の有効利用を図ることは廃水処理の上から有用である。

上記マーチン法およびバッター法は、小麦粉に水を加え
て混練してドウ（生地）またはパンターをつくり、これ
をねかせてグルテンを充分に水和させた後に、加水しな
がら生地の洗浄を繰返し、グルテンと澱粉乳（グルテン
洗液）とに分離し、この澱粉乳から機械的分離なとによ
って澱粉を得る方法である。この際発生する廃液中には
小麦粉に含まれていたα−アミラーゼ阻害物質が含まれ
ることになり、この廃液が本発明における有力な原料物
質となりうるものである。

本発明で得ようとするα−アミラーゼ阻害物質は耐熱性
かつ、耐酸性の蛋白質であるから、本発明方法ではこの
性質を巧みに利用して夾雑し！＝他の蛋白質を除去する
ものである。すなわち上記した（ｂ）の工程ｌ二おいて
水抽出液を７０〜９０°Ｃに加熱あるいは酸処理、また
は両者を併用するが、この際に水に可溶性であった他の
蛋白質は変性をうけてその多くが水溶性を失いモロモロ
の沈澱となるので、このものは容易に静置、濾過、また
は遠心分離などの手段により分離しうるのである。この
工程によってσ−アミラーゼ阻害物質の損失を伴うこと
なく、夾雑する蛋白質量を１７２〜′への程度に減少さ
せることができる。

σ−アミラーゼ阻害物質含有液は任意的に（ｃ）工程に
付される。この工程は例えば０．２μｍの開口を有する
精密フィルターを通過させて行なわれる。ここで用いる
フィルターには多孔性高分子膜、セラミックフィルター
など除菌のために使用されているフィルターの何れもが
使用可能である。

本発明方法の著しい特徴をなすのが（ｃ１）および（ｅ
）工程である。これら工程においてａ−アミラーゼ阻害
物質を吸着するために多糖類が用いられる。この多糖類
は水溶性であるか水不溶性のいずれのものであっても良
いが、σ−アミラーゼ阻害物質と結合した状態で水溶液
（すなわち水）から不溶性物質として機械的手段、例え
ば濾過、遠心分離、または静置沈降の手段によって分離
しうるものであることが必要である。

そして水溶性の多糖類を使用した場合、温度、およびｐ
Ｈ条件の調整によって水不溶性複合体の状態に変化させ
ることができる。ここで用いうる多糖類の典型的なもの
として、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセル
ロース、に−゛カラギーナン、１−カラギーナンおよび
λ−カラギーナンなどのカチオン交換能を有する多糖類
が挙げられる。その他、使用し得るものとしてペクチン
、キサンタンガム、デユランガム等の多糖類とポリアク
リル酸ナトリウムを挙げることができる。

これらの多糖類はσ−アミラーゼ阻害物質含有液に５０
ｐｐｍ〜６００ｐｐｍの量になるように添加される。

多糖類へのσ−アミラーゼ阻害物質の結合は加温下にお
いても起るが、室温または冷却下において行うことが好
ましい。そして充分な撹拌と充分な時間の接触が望まし
いが、通常、数十分〜数時間の接触で充分である。生成
した不溶性物質は（ｅ）工程において濾過、遠心分離そ
の他の公知手段で取り出される。

上記の（ｅ）工程のあとで得られた不溶性物質は（ｆ）
工程において水に再溶解される。この溶解は加熱、また
はｐＨの調節もしくはこの両者の操作の併用によって行
なわれ、得られた溶液には（ｇ）工程において金属イオ
ン例えばＫ”、Ｃａ←、Ｍｇ”が添加されて多糖類をゲ
ル化させる。このような操作でゲル化しうるものの例に
はアルギン酸ナトリウム、に−カラギーナン、および。

−カラギーナンがある。生成したゲルを濾過で除去し、
多糖類を含まないか液を直接または限外が過に付して濃
縮しｌ；のち凍結乾燥またはスプレー乾燥に付すことに
より多糖類を含まない０−アミラーゼ阻害物質製品をう
ろことができる。

ここで使用する限外濾過膜としては、ポリアクリロニト
リル系、ポリオレフィン系、ポリスルフォン系、ポリイ
ミド系、ポリプロピレン系、またはセルロース系の素材
よりなる分画分子量力５０００．６０００．８０００．
１０，０００．１３，０００．２０，０００．３０　、
０００．５０，０００．１００，００１　ヨび２００．
０００ノモノが挙げられる。

上記した本発明におけるヌｊ１法の（」）および（＋）
工程は、（ｇ）工程と同様に行なわれる。

また上記した本発明における別法の（１）および（ｍ）
工程の加熱によって夾雑する水に可溶性であった他の蛋
白質は熱変性をうけ、容易にσ−アミラーゼ阻害物質の
損失を伴うことなく分離除去しうるのである。

このようにして得られたσ−アミラーゼ阻害物質を含有
する製品は、そのままでダイエツト剤その他の用途に使
用しうるが、その他、液剤化、顆粒剤化もしくは錠剤化
のための公知の助剤と共に製剤化されうる。これらの製
剤化のだめの助剤としては、例えは公知の賦形剤、増量
剤、滑沢剤、結合剤、香料、着色料などを使用すること
ができる。

以下に本発明を実施例によって説明するがこれらは説明
のだめのものであって本発明がこれらによって限定され
るものではない。

なお、本明細書に記載した方法におけるアミラーゼ阻害
活性は以下のようにして測定される。

アミラーゼ活性は市販のアミラーゼ測定キットすなわち
ネオ・アミラーゼ活性ｌ−ｒ　第一　Ｊ（第−化学薬品
株式会社製）によるブルースターチ法で測定した。測定
法は同キットのプロトコールに従った。

ヒト・ダ液アミラーゼ（シグマ社製）約０．０２国際単
位を含有する水溶液４ｒｔｒＱに０．１ｍＱのアミラー
ゼ阻害物質溶液を添加し、３７°Ｃにて３０分間保温後
、ネオ・アミラーゼテスト「第一」の錠剤１錠を加え、
充分に混合する。３７°Ｃで３０分間保温後、０．５Ｎ
　　ＮａＯＨ１ｍＱを加え反応を停止、濾過後６２０ｎ
ｍの吸光度を測定し反応液中の存在アミラーゼ活性を算
出する。２ユニツトのアミラーゼを上記条件下でＪユニ
ット阻害する活性量をもって阻害活性Ｊユニットと定義
した。

実施例　１ 小麦粉２００ｋｇｊ二ＩＩＨの水を加え、混練してドウ
を形成させ、このドウをＪ８９０Ωの水を用いて洗い、
グルテン９６ｋｙ、小麦澱粉１２６ｋｇを回収したが、
このとき１８００Ωの廃液が発生した。この廃液に蒸気
を吹き込んで加熱して８０℃とし、１５分間保持したの
ち、遠心分離機にかけ不溶性物質を取り出し、このよう
にして不溶性物質が除去された廃液を冷却し、３μフイ
ルターを用いて濾過して１９００Ｑ（７）炉液を得た。

この炉液は、糖分を３．６２ｍｇ７　ｍＱ、σ−アミラ
ーゼ阻害物質を４７Ｕ／ｍＱ、蛋白質を１．４７ｍｇ／
ｒｎａ含有した。

このように処理して用意した炉液の４個の試料に、アル
ギン酸ナトリウム、に−カラギーナン、λ−カラギーナ
ン、および１−カラギーナンを夫々５００ｐｐｍ、３０
０ｐｐｍ、　１１００ｐｐおよび１１００ｐｐの量で添
加し、そしてｐＨを夫々３．４．４および４に調整し、
３０分間緊密に接触させ、生成する不溶性物質をドラパ
ル型遠心分離機で回収した。回収物に３倍量の水を添加
して分散させ、３％ＮＨ，ＨＣ０，５１２を加えて中和
した。このようにして中和した分散物を凍結乾燥に付し
、乾物をそれぞれ２．６ｋｇ、２．２ｋｇ、１．２ｋｇ
および１．２ｋｇを得！こ。

これらの乾物のσ−アミラーゼ阻害物質、蛋白質および
糖分の含有量は以下の通りであっｌこ　。

アルギン酸ナトリウム　　　　２９　　　　　４９　　
１６え一カラギーナン　　　　　　３２　　　　　６４
　　２３λ−カラギーナン　　　　　　３２　　　　　
７７　　１４１−カラギーナン　　　　　　６２　　　
　　７９　　１２また上記した多糖類の夫々で処理した
液の上澄液のα−アミラーゼ阻害物質、蛋白質および糖
分の分析結果は以下の通りである。

アルギン酸ナトリウム　　　　１．１　　　　０．４０
　３．６４に一カラギーナン　　　　　０．２　　　　
０．６２　３．９７λ−カラギーナン　　　　　０．５
　　　　０，８４　３．８１１−カラギーナン　　　　
　１．６　　　　０．８２　３．６６多糖類で処理前の
が液と、処理後の液のα−アミラーゼ阻害物質の含有量
の差からσ−アミラーゼ阻害物質の回収率を計算すると
以下の通りである。

吸着物質　　回収率（％） アルギン酸ナトリウム　　８５ に−カラギーナン　　　　８３ λ−カラギーナン　　　　４３ １−カラギーナン　　　　８６ 実施例　２ 実施例１と同様に小麦粉に水を加えてドウを形成させ、
このドウを水洗し、得られた廃液を蒸気加熱し、不溶性
物質を濾過して得たか液の３個の試料に、アルギン酸ナ
トリウム、に−カラギーナンおよび１−カラギーナンを
夫々５００ｐｐｍ、　３００ｐｐｍ、　１１００ｐｐの
量で添加し、そしてｐＨを夫々３．０．４．０および４
．０に調整し３０分間緊密に接触させ、生成した不溶性
物質をノズルセパレーターで回収した。このように回収
した不溶性物質に９０Ｑの水、２０％ＣａＣＱ２１９Ｑ
（アルギン酸ナトリウムの場合）　、９ＣＩＱの水、２
０％ＣａＣｌ２２１４０（に−カラギーナンの場合）お
よび９０Ｑの水、２０％ＣａＣＱ２５　Ｑ＜　ｉ−力ラ
ギーナンの場合）を加えて不溶性物質を分散させ、ＩＮ
アンモニア水でｐＨ７，０に調整して生成するカルシウ
ムゲルを遠心分離機を用いて除去し、夫々１０６Ｌ　９
９ｆｆおよび９２Ｑ、の回収液を得た。この回収液を分
析したところ、全固体分、蛋白質、糖分およびα−アミ
ラーゼ阻害物質含量は以下の通りであった。

ラムから溶出 に−カラギーナン　　２’、４　　　９．６　１．１　
　　　７２０から溶出 １−カラギーナン　　１．９　　　６．９　０．６８　
　　７５０から溶出 これらの回収液の夫々を凍結乾燥したところ、ａ−アミ
ラーゼ阻害物質含有量が夫々２３．ＯＵ　／ｍｇ、３０
Ｕ／ｍｇおよび３９Ｕ／ｍｇの乾燥物が得られｔこ。

実施例　３ 実施例２の操作で得られた】−カラギーナンを用いた回
収液１００Ｑを限外濾過モジュール（日東電工（株）製
ＮＴＬＩ−３２５０ＣＩＲ（２万分画））を用い、カラ
ギーナン−〇ａミーゲル成に過剰に用いたＣａ塩の除去
と、蛋白質およびσ−アミラーゼ阻害物質の濃縮とを行
った。体積で２５倍の濃縮を行った結果、全固体分９．
２％、蛋白質７．４％、糖分０．６８％、σ−アミラー
ゼ阻害物質１ｓｏｏｏｕ／ｍＱの濃縮液５ｇを得た。

この濃縮液を凍結乾燥して４６０ｇの固型物を得た。こ
のものは１６０Ｕ／ｍｇの高力価のσ−アミラーゼ阻害
物質を含有していた。

実施例　４ 実施例１と同様に小麦粉を処理して得られる１８００１
２の排水をケイ藻土てか遇した。炉液は０−アミラーゼ
阻害物質を５５Ｕ／＋＋ｌ、糖分を３．７ｍ　ｇ　／　
ｍ　Ｑ　、蛋白質を１９ｍ９／ｍＱ含有しティた。この
炉液にアルギン酸ナトリウム、に−カラギーナン、λ−
カラギーナンおよび１−カラギーナンを各々３００ｐｐ
ｍ添加しｐＨ４、０で３０分間処理したあと、生成した
不溶性物質をデカンタで回収した。この際分離された液
中のα−アミラーゼ阻害物質、蛋白質および糖分の含有
量は以下の通りである。

アルギン酸ナトリウム　　　　０．７　　　　０，９２
　３．６４に一力うギーナン　　　　　３．０　　　　
０．８５　３．７２λ−カラギーナン　　　　　０．６
　　　　０．８３　３．５６１−カラギーナン　　　　
　０．７　　　　０．８７　３．６８このようにして回
収した不溶性物質に水１８０Ｑヲ加エテ分散サセ、次イ
テｌＯ％ＮＨ，ＨＣＯ３Ｔ　ｐＨ７，０に中和した。こ
の中和液を８０°Ｃに加熱して１０分間保持しｊ；後に
生成する不溶性物質をドラパル型遠心分離機で分離し、
上澄部を凍結乾燥した。

得られた乾燥物の量、乾燥物中のα−アミラーゼ阻害物
質含量および回収率は以下の通りである。

アルギン酸ナトリウム　　　　２６　　　　　２．３　
　　６１９−カラギーナン　　　　　　２７　　　　　
２．２　　　６３λ−カラギーナン　　　　　　２０　
　　　　２．４　　　４９１−力ラギーナン　　　　　
　２８　　　　　２．５　　　７１寅施例　５ 実施例４と同様にアルギン酸ナトリウム、え−カラギー
ナンおよびｉ−カラギーナンの３種の多糖類で複合体を
形成し、得られた不溶性物質にそれぞれ１８０Ｑの水を
加えて分散させ、続いてｌＯ％ＮＨ、ＨＣＯ、でｐＨ７
，０に中和し溶解した。それぞれの溶液９０Ｑにつき以
下の操作を行った。９Ｈの各溶液を８０℃で加熱後、遠
心分離によって得た上澄液に２０％ＣａＣＱ、を１０Ｑ
（アルギン酸ナトリウムの場合）、７Ｑ（に−カラギー
ナンの場合）、３Ｑ（１−力ラギーナンの場合）を加え
た。生成するカルシウムゲルを遠心分離機を用いて除去
し、得られる上澄液を実施例３と同様に限外濾過モジュ
ールを用いて約５Ｑに濃縮後、凍結乾燥した。アルギン
酸ナトリウム、に−カラギーナン、ｉ−カラギーナンで
、それぞれ２９０９．３１３ｇ、２６２ｇの乾燥物が得
られ、α−アミラーゼ阻害物質含有量はそれぞれ、１４
５Ｕ　／　ｒｎｇ、１１３Ｕ／ｍｇ、１６２Ｕ　／　ｍ
ｇであった。

実施例　６ 実施例５で得られた中和溶液各９０１２に２０％ＣａＣ
Ｑ２を１０１２　（アルギン酸ナトリウムの場合）、７
ＱＣに一カラギーナンの場合）、３４（ｉ−カラギーナ
ンの場合）を加え、生成するカルシウムゲルを遠心分離
により除去した。上澄液を８０℃加熱処理後、遠心分離
で得られる上澄液を実施例３と同様に限外が過モジュー
ルを用いて約５Ｑに濃縮した。この濃縮液を凍結乾燥し
て得られる乾燥物はアルギン酸ナトリウムで２６７ｇ、
に−カラギーナンで２８１ｙ、ｉ−力ラギーナンで２８
５ｇであり、σ−アミラーゼ阻害物買含有量はそれぞれ
１５７　Ｕ　／　ｍ　ｇ、１４６　Ｕ　／　ｍ　ｇ、１
４９Ｕ／ｍｙであった。

実施例　７ 本発明において実施されるａ−アミラーゼ阻害物質含有
液の加熱あるいは酸処理の夾雑蛋白変性工程・有効性を
α−アミラーゼを指標として以下に示す。小麦粉１０ｇ
に水２０ｍＱを加え小麦粉中のσ−アミラーゼを抽出し
、２１０Ｕ／ｍＱのσ−アミラーゼ含有液を得た。これ
をｐＨ６，０で６０．７０．８０°Ｃで１０．２０．３
０分間保温した後ブルースターチ法で測定したσ−アミ
ラーゼ残存活性（Ｕ　／　ｍ１２）は以下の通りであっ
た。

６０℃　７０℃　　８０°Ｃ １Ｏ分　　　１００　　　４５　　　　１２０分　　　
５５　　　２７　　　０ ３０分　　　４５　　　１０　　　　０上述のσ−アミ
ラーゼ含を液を２５°ＣでｐＨ２，０，３，０，４，０
，８，０，９，０，１０，０で１Ｏ１２０，３０分間保
温した時のａ−アミラーゼ残存活性（Ｕ／ｒＲＩ２）は
以下の通りであった。

ユｌ（２，且　も１４．０　　Ｂ、亙　貼Ａ　戸し１１
０分　　０　　０　　１４２　１７０　１６９　　９５
２０分　０　　０　１２０　１７４　１７９　８８３０
分　　０　　０　　１３１　１８０　１６１　　５９実
施例　８ 実施例７と同様の目的でβ−アミラーゼを指標とした加
熱あるいは酸処理の有効性を以下に示す。実施例７の方
法で小麦粉を抽出し、７５Ｕ／ｍＱのβ−アミラーゼ含
有液を得た。これをｐＨ６，０で６０．７０．８０°Ｃ
で１０．２０．３０分間保温した後のβ−アミラーゼ残
存活性（Ｕ／ｍ１２）を測定しブニ。

β−アミラーゼの活性測定は［澱粉科学）＼ンドブック
」二国二部編、朝食書店　５５２年版、２６５頁の方法
に従い、反応液１ｍ（ｌ当り１分間に１ｕ１のマルトー
スを遊離する酵素量を１ユニツトとしｌ：。

６０℃　　７０°０　　８０℃ １０分　　　２．３　　　０．１　　　０２０分　　２
．３　　　０　　　　０ ３０分　　　０．３　　　０　　　　０上述のβ−アミ
ラーゼ含有液を実施例６と同一の条件下に保温した時の
β−アミラーゼ残存活性（Ｕ／ｍ１２）は以下の通りで
あった。

ユＬ　こ　３．０　４．０　８．０　９．０　　則鵬１
０分　０．２　０．４　７５　　７１　　６７　　２７
２０分　０　　０　　７３　　６９　　５８　　２３３
０分　０　　０　　７２　　５８　　５８　　１８実施
例　９ 加熱および酸処理のσ−アミラーゼ阻害物質の活性に及
ぼす影響を以下に示す。

６０Ｕ／ｍｆ２のσ−アミラーゼ阻害物質を含有する小
麦粉抽出液をｐＨ６、０で６０．７０．８０″Ｃで１０
．２０．３０分間保温した際のσ−アミラーゼ阻害物質
の残存活性（Ｕ　／　ｍＱ）は以下の通りであった。

６０°０　　７０°０８０℃ １０分　　　５６　　　５８　　　５６２０分　　　５
８　　　５７　　　５４３０分　　　５５　　　５７　
　　５５ｐＨ２、０，３，０，４，０，９，０，１０，
０で１Ｏ１２０，３０分間２５°Ｃに保温した際のσ−
アミラーゼ阻害物質の残存活性（Ｕ／ｍＱ）は以下の通
りであった。

ユＨ２，０３，刈　Ｕ　％四　則Ｊ １０分　５４　　５７　　６２　　５５　　５６２０分
　５３　　６１　　６０　　６０　　５４３０分　５６
　　６２　　５９　　６０　　６１実施例　１０ 異なったｐＨにおける多糖類のα−アミラーゼ阻害物質
に対する複合体形成性能を試験した。

すなわち、小麦粉に水を加えてドウを形成させ、ドウを
水洗し、得られた廃液を蒸気加熱し、不溶性物質を遠心
分離により除き、上澄液を得た。この上澄液はσ−アミ
ラーゼ阻害物質の含有量が５１Ｕ／ｍ（２、蛋白質の含
有量が１　、５　ｍ　９　／　＋１１０であった。

この上澄液に複合体形成能を有する多糖類としてアルギ
ン酸ナトリウム、カルボキシメチルセルロース、Ｋ−カ
ラギーナン、λ−カラギーナン、または１−カラギーナ
ンを用い、ｐＨを調整した後生成する不溶性物質を遠心
分離し、上澄液中のα−アミラーゼ阻害物質含有量およ
び蛋白質含有量を測定した。多糖類を１１００ｐｐ添加
の場合と３００ｐｐｍ添加の場合の結果を示すと以下の
通りである。

多糖類１１００ｐｐ添加 ｐＨ３ｐＨ４ｐＨ５ｐＨ６ アルギン酸ナトリウム　　１２（１，１）　　１２（１
，０）　　１９（０，９）　　４７（１，５）カルボキ
シメチルセル　　３６（１，５）　　２６（１，５）　
　４３（Ｌ５）　　５０（Ｌ５）ロース に−カラギーナン　　　　２８（１，６）　　２５（１
，３）　　３７（１，４）　　４６（１，４）λ−カラ
ギーナン　　　　１４（１，５）　　　２（１，０）　
　１６（１，０）　　５０（１，５）ｉ−カラギーナン
　　　　１１（１，４）　　　４（０，９）　　１５（
０，９）　　４９（１，５）数字はσ−アミラーゼ阻害
物質Ｕ／＋ｎｆｆ、（）内は蛋白質ｍｇ／ｍｃ多糖類３
００ｐｐｍ添加 ｐＨ３ｐＨ４ｐＨ５ｐＨ６ アルギン酸ナトリウム　　６（０，７）　　　７（０，
７）　　４８（１，５）　　５１（１，５）カルボキシ
メチルセル　　２８（１，４）　　４３（１゜３）　　
４３（１，５）　　４６（１，５）ロース に−カラギーナン　　　　ｌ（０，５）　　　Ｏ（０，
６）　　　８（０，８）　　４６（１，４）λ−カラギ
ーナン　　　　２８（１，１）　　　４（１，３）　　
５０（１，６）　　５１（１，５）】−カラギーナン　
　　　３３（１，２）　　　４（１，２）　　５０（１
，４）　　４９（１，５）数字はα−アミラーゼ阻害物
質Ｕ／蛯、（）内は蛋白質ｍｇ／ｍ（２以上の結果から
多糖類の複合体形成能力は多糖類の添加量およびｐＨ条
件によって相違することが認められ、添加量と形成能力
との間には比例関係は認められず、各多糖類における最
適添加量と最適ｐＨは多糖類によって異なることが分る
。しかしながら−数的傾向として多糖類としてに一力う
ギーナンがすぐれ、次にλ−カラギーナン、ｉ−カラギ
ーナン、アルギン酸ナトリウム、カルボキシメチルセル
ロースの順となる°　　ことが分る。

実施例　１１ 実施例１と同様に小麦粉を処理して得られる１８００１
２の排水をＩ　Ｎ　−ＨＣ（ｌを用イテｐＨ２−５１：
　Ｉｌｌ　ＪＩＳし、常温で２０分間保持し、生成する
不溶物をドラパル型遠心分離機で除去した。次いで、こ
の処理液をＩＮのＮＨ４ＯＨでｐＨ４−０に調整し、４
００Ｑを分取し、夫々に、アルギン酸ナトリウム、に−
カラギーナン、λ−カラギーナン、および１−カラギー
ナンの２％溶液を１．５％添加、２０分間撹拌すること
によって生成する不溶性物質をデカンタで回収した。

回収物に３倍量の水を添加して分散させ３％ＮＨ，ＯＨ
１，２ｆｆを加えて中和した。

このようにして中和した分散物を凍結乾燥に付し乾物を
それぞれ７１０ｇ、６８０ｇ、７５０ｙ、および６８０
ｇを得た。これらの乾物のａ−アミラーゼ阻害物質含量
は］８Ｕ／ｍｇ、１７Ｕ／ｍｇ、１４Ｕ／７１１ｙおよ
び２０Ｕ／ｍｇであった。

実施例　Ｉ２ 実施例５で得られた中和溶液各９ｉに２０％ＣａＣｆｆ
、水溶液を１０Ｑ（アルギン酸ナトリウムの場合）、７
β（に−カラギーナンの場合）、３ｇ（］−力ラう−ナ
ンの場合）を加え、生成するカルシウムゲルを遠心分離
により除去した。上澄液を１ＮＨＣＱを用いてｐＨ２，
５に調節し、常温で３０分間保存し、生成する不溶物を
デｈンタで除去し、得られる上澄液をｐＨ７，０に調整
後、実施例３と同様に限外濾過モジュールを用いて約５
Ωに濃縮した。この濃縮液を凍結乾燥して得られる乾燥
物はアルギン酸ナトリウムで４１０ｇ、に−カラギーナ
ンで３６０９、ｉ−カラギーナンで２８０ｇであり、σ
−アミラーゼ阻害物質含量はそれぞれ９００／ｍｇ、８
６Ｕ／ｍｇ、１０８Ｕ　／　ｍｇであった。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）小麦または小麦粉の水抽出液を加熱処理するか、酸
   処理するか、または両者の処理を組み合わせることによ
   り水抽出液に夾雑する不要蛋白質を変性させ、この変性
   蛋白質を除去して得られるα−アミラーゼ阻害物質含有
   の水溶液を必要に応じてろ過および除菌処理に付し、こ
   の水溶液にα−アミラーゼ阻害物質と複合体形成可能な
   多糖類を添加してこの多糖類とα−アミラーゼ阻害物質
   の複合体を形成させ、生成した水不溶性複合体を分離す
   ることにより多糖類とα−アミラーゼ阻害物質の複合体
   を取り出すか、または必要に応じて分離した上記複合体
   を水に再分散させ、多糖類をゲル化して除き、得られる
   α−アミラーゼ阻害物質含有の水溶液を濃縮または乾燥
   させることから成る、α−アミラーゼ阻害物質を取得す
   る方法。 ２）小麦または小麦粉を水で抽出し、必要に応じてろ過
   および除菌処理に付して得られる、α−アミラーゼ阻害
   物質含有の水溶液に、α−アミラーゼ阻害物質と複合体
   形成可能な多糖類を添加してこの多糖類とα−アミラー
   ゼ阻害物質の複合体を形成させ、生成した水不溶性複合
   体を分離し、分離した水不溶性複合体を水に再分散させ
   、得られた多糖類とα−アミラーゼ阻害物質の混液を加
   熱処理して混液に夾雑する不要蛋白質を変性させ、この
   変性蛋白を除去して得られるα−アミラーゼ阻害物質含
   有の水溶液を濃縮または乾燥させるか、または必要に応
   じて上記の変性蛋白を除去して得られるα−アミラーゼ
   阻害物質含有の水溶液中の多糖類をゲル化して除き、得
   られるα−アミラーゼ阻害物質含有の水溶液を濃縮また
   は乾燥させることから成る、α−アミラーゼ阻害物質を
   取得する方法。 ３）小麦または小麦粉を水で抽出し、必要に応じてろ過
   および除菌処理に付して得られる、α−アミラーゼ阻害
   物質含有の水溶液に、α−アミラーゼ阻害物質と複合体
   形成可能な多糖類を添加してこの多糖類とα−アミラー
   ゼ阻害物質の複合体を形成させ、生成した水不溶性複合
   体を水に再分散させ、得られた多糖類とα−アミラーゼ
   阻害物質の混液中の多糖類をゲル化して除き、得られる
   α−アミラーゼ阻害物質含有の水溶液に夾雑する不要蛋
   白質を加熱処理するか、酸処理するかまたは両者の処理
   を組み合わせることにより変性させ、この変性蛋白を除
   去して得られるα−アミラーゼ阻害物質含有の水溶液を
   濃縮または乾燥させることから成る、α−アミラーゼ阻
   害物質を取得する方法。