JPH0383908A - 皮膚化粧料 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は、修飾トランスグルタミナーゼが皮膚の表面構
造を緻密化することにより、皮膚に柔軟性１弾力性など
の美肌効果を付与する、新規な皮膚化粧料に関する。

〔従来の技術〕

皮膚は、個体を外的環境から守る役割、即ち異物の侵入
を防ぎ、体液の喪失を防ぐ役割を果たしている。皮膚の
水分は、真皮から表皮の基底細胞層、有轢層、顆粒層と
外層に向かうにつれて減少し、角質層を通じて外部へ蒸
散している。この水分蒸散は、主に角質層の緻密な細胞
組織の防御機能によって制御されている。老化した皮膚
や非常に乾燥した皮膚は、滑らかさがなく、角質細胞の
剥離現象や荒れ肌状態が見られる。この時、皮膚の水分
保持機能の低下が認められるが、これは角質細胞の防御
機能の制？ｎ限界を越えた状態にあるか、あるいは防御
機能自体が衰えていることに由来する。

この様な皮膚の問題点を解決する方法として、皮膚表面
の角質層およびＮ仮顆粒の組織を緻密化し、その防御機
能を賦活することができれば、これによって皮膚の水分
保持ａ能が亢進され、皮膚は健常な状態に保持されると
共に、乾燥皮膚の改善ないしは修復が可能となると考え
られる。しかし実際的に皮膚表面の状態を改善し、老化
皮膚。

乾燥皮膚を改善するような皮膚化粧料はない。適当な水
分と油分を与えるように、親水性の皮膚保湿剤と油性の
皮膚柔軟剤を皮膚化粧料に配合することが行われている
が、いずれの成分も、皮膚老化防止効果や美肌効果を発
揮するには至らなかった。

近年、タンパク質修飾酵素の一つであるトランスグルタ
ミナーゼ（Ｅ　Ｃ２，３，２，１３，以下ＴＧａｓｅと
略す）が、角質細胞膜の形成に関与していることが明ら
かになり、注目されている。

ＴＧａ　ｓ　ｅは、タンパク質、ペプチド中のグルタミ
ン残基のγ−カルボキシアミド基と、リシン残基のε−
アミノ基との間を触媒し、ε−Ｃｒ−グルタミル）リシ
ン結合を形成させる。ＴＧａｓｅは動物の諸組織、血液
細胞などに存在しており、血液由来のフィブリン蛋白質
の凝固反応や、表皮細胞１毛髪の角化反応等に関与して
いる。特に、表皮の角化に際しては、ＴＧａｓｅは必須
の因子であり、角質細胞膜の形成を行い、非常に強固な
皮膚の最外層を構築する。ＴＧａｓｅは、ｉｎ　ｖｉｖ
。

において表皮由来のタンパク質の架橋反応を触媒するこ
とも分かっている。更に、ＴＧａｓｅは、２価のカルシ
ウムイオンやライソソーム系の酵素であるカテプシンＤ
により、活性化される。

先頃、このＴＧａｓｅによって架橋形成したタンパク質
を含有する化粧料が提案されているが、（特開昭６ｌ−
１７２８０７）これは、ＴＧａｓｅを直接化粧料に利用
するものではない。

〔発明が解決しようとする課題〕

すなはち本発明の目的は、水可溶性物質で修飾したＴＧ
ａｓｅを配合することによって、荒れ肌改善効果５保湿
効果などの皮膚老化防止効果や美肌効果に優れ、安全性
、経日安定性に優れた皮膚化粧料を提供することにある
。

〔課題を解決するための手段〕

本発明は、水溶性物質によって修飾された、修飾トラン
スグルタミナーゼを配合していることを特徴とする皮膚
化粧料である。

本発明に用いるＴＧａｓｅは、モルモット、ラット、ブ
タ、ウシ、ヒツジなどの哺乳動物の肝臓血清、血小板１
墨量２表皮などから、既知の方法により抽出、精製して
、使用することができる。

また、微生物由来の物も使用できる。

本発明で修飾に用いる水溶性物質としては、ポリエチレ
ングリコール、エチレングリコール、プロピレングリコ
ール、グリセリン、ポリくニルアルコール等の多価アル
コール、グルコース、シヨ糖、果糖等の糖類、アルギン
酸、カルボキシメチルセルロース、でんぷん、ヒドロキ
シプロピルセルロース等の多糖類等が挙げられるが、そ
れらに限定されるものではない。

ＴＧａｓｅと、修飾に用いる水溶性物質の割合はＴＧａ
ｓｅ１重量％に対して、水溶性物質が好ましくは０．２
〜５０重量％である。

ＴＧａ　ｓ　ｅを水溶性物質で修飾する方法は、後述の
如き一般に用いられている方法でよく、ＴＧａｓｓの活
性を著しく頃なわない方法であればよい０例えば、水溶
性物質の水酸基、アくノ基等に塩化シアヌルやグルタル
アルデヒドを結合する方法、カルボキシル基を活性エス
テルとして反応性基を導入し、酵素との結合を行う方法
、多糖類を臭化シアンで処理して活性基を導入したり、
過ヨウ素酸化でアルデヒド基を形成せしめたりしたのち
、酵素との結合を行う方法、更に、カルボジイミド類の
縮合剤を用いる方法等が挙げられる。

このようにして得られた修飾ＴＧａｓｅには、水不溶性
のものも水可溶性のものもあるが、本発明の皮膚化粧料
に配合する際には、感触（ざらつき等）を鑑み、水可溶
性の方がより好ましい。

本発明において、修飾ＴＧａｓｅの皮膚化粧料中の配合
量は、皮膚化粧料全体を１００重景％として、ｏ、ｏｏ
ｏｔ〜５重景％が好ましい。ｏ、ｏｏｏｔ重量％よりも
少ないと、皮膚化粧料におけるＴＧａｓｅの働きが、充
分でないことがある。また、５重量％を越えても配合量
に見合う効果はあまり期待できない。

本発明の皮膚化粧料には、保湿剤、水溶性高分子、界面
活性剤、水、油、ワックス、香料２着色剤、防腐剤、酸
化防止剤、殺菌剤、アミノ酸、ビタξン、ホルモン、紫
外線吸収剤など、通常化粧品に用いられる成分を、適宜
配合することができる。

本発明の皮膚化粧料は、スキンクリーム、スキンξルク
、クレンジングクリーム、クレンジングξルク、コール
ドクリーム、クリームソープ、メイクアップベース、ス
キンローション、ξルキイ−ローション、パック、カラ
ξンローション、Ｔゾーンエツセンス、ハンドクリーム
、エツセンスパウダー、ホワイトニングパウダー、パウ
ダーソープ、固形石鹸、ｉ３明石鹸、リップクリーム、
口紅、栄養エツセンス、クリーミーファンデーション、
フェースパウダー、パウダーアイシャドーパウダーファ
ンデーション、ネイルリムーバーサンオイル、サンスク
リーン、シェービングフオーム、シェービングクリーム
、ベビーオイルなどに適用される。

〔実施例〕

以下、実施例を上げて本発明を具体的に説明する。

なお、本発明において、皮膚化粧料の荒、れ肌改善効果
試験、角質改善効果試験、実用試験、経口安定性試験は
次のようにして行った。

（１）荒れ肌改善効果試験 荒れ肌、乾燥皮膚を訴える中高年被験者２０名の下脚を
対象として、４週間連続塗布効果を調べた。′４＆験者
の左側下＃試験部位に１日１回約１ｇの試料を塗布し、
試験開始前及び終了後の皮膚の状態を、下記の判定基準
により判定した。右側下脚は試料を塗布せず、対象とし
た。

皮膚乾燥後の判定基準 試験前後の試験部位と対照部位の判定結果を比較し、皮
膚乾燥度が２段階以上改善された場合（例えば、＋→−
１＋＋→±）を有効、１段階改善された場合をやや有効
、変化がなかった場合を無効とした。試験結果は、有効
、やや有効となった被験者の人数で示した。

（２）角質改善効果試験 前述の荒れ肌改善効果試験前後の被験者にメンディング
テープにチバン製）を接着し、これを剥離した時テープ
に付着した角質細胞の状態を走査型電子顕微鏡によって
詳細に調べた。そして、下記の基準によって皮膚角質細
胞抗剥離性を解析し、角質改善効果を求めた。

評価は、４週間連）Ｊ塗布後の試験部位と対照部位の評
価点の差が２点以上の場合を有効、１点の場合をやや有
効、０点の場合を無効とした０判定結果は、有効あるい
はやや有効と回答した被験者の人数で示した。

（３）実用試験 荒れ肌、小皺、乾燥肌等を訴える女子被験者（３５から
５５才）２０人に試料を１日朝タ２回連続３ケ月間塗布
した直後に、下記項目について評価を行った。

評価項目 湿潤性：皮膚に潤いが生じたと答えた人数平滑性：皮膚
が滑らかになったと答えた人数弾力性：皮膚に張りが生
じたと答えた人数刺激性：塗布時に刺激を感したと答え
た人数かぶれ：使用ｗ１間中に肌ががぶれたと答えた人
数 （４）経日安定性試験 試料を密封、遮光の条件下、４５℃の恒温槽に３ケ月間
放置した後、色と匂いの変化の有無を観察した。

実施例１ ポリエチレングリコール（平均分子ｌｌｌ　：　１９０
０）５．０　ｇ、　　Ｐ−ニトロフェニルクロロホルマ
ート０．６ｇをアセトニトリル３０ｄに溶解した後、こ
れに、トリエチルアミン０．３　ｇを加えた。この溶液
を室温で２４時間撹拌した後、ジエチルエーテル２００
−を加え、４℃で２４時間放置して結晶を析出させた。

この結晶を濾別し、活性化ポリエチレングリコール４，
５　ｇを得た。

一方、Ｊ、Ｃｏｎｎｅｌｌａｎらの方法で（ジャーナル
・オブ・バイオロジヵｌレケミストリー２４６巻、１０
９３頁、１９７１年）及び、特開昭５９−１７５８８４
に記載される方法に従い、モルモット肝臓よりＴＧａ　
ｓ　ｅを調製した０モルモットの新鮮な肝臓５００ｇに
０．２５Ｍシュークローズ溶液１．５Ｅを加えてポリト
ロン（キネマチカ社製）によりホモジネートを調製し、
遠心分離により上清中からＴＧａ　ｓ　ｅの粗分画を得
た。

この分画をＤＥＡＥセルロースカラムクロマトグラフィ
ー（２ｍＭ−ＥＤＴＡ、５ｍＭ）リス塩酸緩衝液ｐＨ７
，５）及び１０％アガロースゲルカラムクロマトグラフ
ィー　（Ｂ　ｉ　ｏ　ｇ　ｅ　Ｉ　；０．５　Ｍ）によ
り、精製を行った。最終的に限外濾過と凍結乾燥により
ＴＧａ　ｓ　ｅを得た。

このようにして得られた精製ＴＧａｓｅ５０■を０．１
　Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ８，０）２０−に溶解し、さら
に上記の活性化ポリエチレングリコール１００■を加え
、室温で２４時間撹拌した。得られた反応液にグリシン
０．５ｇを加え、未反応物の処理を行った後、溶液を限
外濾過により精製、濃縮し、凍結乾燥して水可溶性の修
飾ＴＧａｓｅを得た。

次に第１表の如き配合量の原料によりスキンクリームを
製造した。まず、油相成分を８０°Ｃで均一に撹拌し、
これに同じく８０°Ｃで均一に加熱溶解した水相成分を
加え、撹拌しながら冷却し、４０″Ｃで上記修飾ＴＧａ
　ｓ　ｅを加え、３０°Ｃまで冷却して本発明のスキン
クリームを得た。

得られたスキンクリームの各種特性を第７表に示す、第
７表から明らかな如く、本発明のスキンクリームは、荒
れ肌改善効果、角質改善効果、実用特性に優れ、経口保
存しても、品質は安定していた。

比較例１ 修飾ＴＣ；ａｓｅにかえて、精製ＴＧａｓｅ１．５重量
％を用いた。それ以外は、実施例１と同様にしてスキン
クリームを調製した。

得られたスキンクリームの各種特性を第７表に示す、第
７表から明らかな如く、修飾していないＴＣｙａ　ｓ　
ｅを用いたスキンクリーム（比較例１）ニ比べて、修飾
ＴＧａＳｅを用いたスキンクリーム（実施例１）は、あ
らゆる点でより効果的であった。

比較例２ 修飾ＴＧａｓｅにかえて、ポリエチレングリコール（平
均分子ｆｆ１１９００）　１．５重量％を用いた。それ
以外は、実施例１と同様にしてスキンクリームを調製し
た。

得られたスキンクリームの各種特性を第７表に示す、第
７表から明らかなごとく、ポリエチレングリコールを用
いたスキンクリーム（比較例２）に比べて、修飾ＴＧａ
ｓｅを用いたスキンクリーム（実施例Ｌ）は、あらゆる
点でより効果的であった。

実施例２ ポリエチレングリコール（平均分子１１１９００　）に
代えて、モノメトキシポリエチレングリコール（平均分
子１５０００）を用いた。それ以外は、実施例１の修飾
ＴＧａ　ｓ　ｅの調製と同様にして、水可溶性の修飾Ｔ
Ｇａｓｅを得た。

実施例１の修飾ＴＧａ　ｓ　ｅにかえて、上記の製法で
調製した修飾ＴＧａｓｅを用いた。それ以外は、実施例
１と同様にしてスキンクリームを調製した。

得られたスキンクリームの各種特性を第７表に示す、第
７表から明らかなごとく、この修飾ＴＧａｓｅを用いた
スキンクリーム（実施例２）の、各種特性は優れていた
。

実施例３ モノメトキシポリエチレングリコール（平均分子ｆｔ５
０００）１０ｇ、塩化シアヌル１．１ｇをベンゼン８０
ｍに溶解した後、これに無水炭酸ナトリウム２．０ｇを
加えた。この溶液を室温で４８時間撹拌し反応させ、不
溶物を濾別した後、石油エーテル１００ｄを徐々に滴下
し、白色沈澱物を得た。この沈澱物をベンゼン−石油エ
ーテル系で繰り返し再沈澱させて、２−０−ポリエチレ
ングリコール−４，６−ジクロル−３−）リアジンを得
た。

実施例１で得られた精製ＴＧａｓｅ２５■を、０、１　
Ｍ硼砂水溶液（ｐ　Ｈ９，５）　５　ｍｌに溶解し、上
記の２−０−ポリエチレングリコール−４，６ジクロル
ーＳ−トリアジン４００ｍｇを加えた。これを室温で１
時間撹拌した後、限外濾過ｉ４縮し、凍結乾燥して水可
溶性の修飾ＴＧａｓｅを得た。

第２表に示す如き原料を均一に混合して、スキンローシ
ョンを得た。その特性を第７表に示す。

第７表から明らかなごとく、この修飾ＴＧａｓｅを用い
たスキンローシラン（実施例３）の、各種特性は優れて
いた。

第２表 実施例４ モノメトキシポリエチレングリコール（平均分子１５０
００）５．０ｇを無水ベンゼン５０１１１に溶解した後
、これに無水炭酸ナトリウム２．５ｇを加えて３０分間
還流し、引き続き塩化シアヌル１８０１１ｇを加え、さ
らに２４時間還流した。不溶物を濾別した後、石油エー
テル１ＯＯＩ１１を徐々に加えて、生じた沈澱物を石油
エーテルで数回洗浄して２．４−ビス（０−メトキポリ
エチレングリコール）−６−クロル−５−）リアジンを
得た。

一方、実施例１で得られた精製ＴＧａｓｅ２５■を０．
１Ｍ硼砂水溶液（ｐＨ９，５）　５ａｌｌに溶解し、上
記の２，４−ビス（Ｏ−メトキポリエチレングリコール
）−６−クロル−５−トリアジン４００ｇを加えた。こ
れを室温で１時間撹拌したのち、限外濾過により精製、
濃縮し、凍結乾燥して水可溶性の修飾ＴＧａ　ｓ　ｅを
得た。

第３表に示す如き原料を均一に混合して、実施例１と同
様にして、ナイトクリームを調製した。

その特性を第７表に示す、第７表から明らかなごとく、
この修飾ＴＧａｓｅを用いたナイトクリーム（実施例４
）の、各種特性は優れていた。

第３表 実施例５ カルボキシメチルセルロース２ｇを１００−の水に溶解
した後、ＩＮ水酸化ナトリウム溶液にてｐＨ１Ｏに保ち
つつ１０％臭化シアン溶液５−を滴下し、２０分間反応
させた０反応後、４％炭酸水素ナトリウム溶液を加えて
ｐＨ９に調整した。

これに、実施例１で得られた精製ＴＧａ　ｓ　ｅを５ｆ
ｆｌ量％含有する０、０５Ｍリン酸緩衝液（ｐＨ８，５
）１００威を加え、−晩反応させ、グリシン５００■を
加え、２時間放置した後限外濾過−ａ縮し、凍結乾燥し
て水可溶性の修飾ＴＧａｓｅを得た。

次に、第４表に示す如き配合量の原料により、実施例と
同様にしてクレンジングミルクを調製した。

得られたクレンジングミルクの特性を第７表に示す、第
７表から明らかなごとく、この修飾ＴＧａｓｅを用いた
クレンジングミルク（実施例５）の、各種特性は優れて
いた。

第４表 実施例６ イヌリン１００■を０．１Ｍ過ヨウ素酸ナトリウム溶液
１０ｍに溶解し、室温で１６時間撹拌した。

限外濾過により精製濃縮したのち、リン酸緩衝液（ｐＨ
８）に置換し１０ｄとする。このｔ容液に、２５■の実
施例１で得られた精製ＴＧａｓｅを加え、室温にて一晩
反応させた後、水素化硼素ナトリウム０．５ｍＭを加え
、１時間撹拌して限外濾過濃縮、凍結乾燥して水可溶性
の修飾ＴＧａｓｅを得た。

次に、第５表に示す如き配合量の原料の水相を８０°Ｃ
で１時間均一に加熱溶解したのち、撹拌しながら冷却し
、４０″Ｃで上記修飾ＴＧａｓｅを加え、３０℃まで冷
却してクリームソープを得た。

得られたクリームソープの各種特性を第７表に示す、第
７表から明らかなごとく、この修飾ＴＧａｓｅを用いた
クリームソープ（実施例６）の、第５表 実施例７ カルボキシメチルセルロース２００ｇを水２０−に溶解
し、ＩＮ塩酸でＰＨ４，７に調整後、１−エチル−３−
（ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド塩酸塩３８
０■及び実施例１で得られた精製ＴＧａｓｅを２０■加
え、室温にて２時間撹拌した０反応後、酢酸１２０ＩＩ
ｆｆｉとモノエタノ−ルアξン１２０μｌを加え、２０
分間撹拌後、限外濾過濃縮し、更に凍結乾燥して水可溶
性の修飾ＴＧａ　ｓ　ｅを得た。

第６表に示す如き原料を均一に撹拌混合してバ第６表 得られたパウダーファンデーシゴンの特性を第７表に示
す、第７表から明らかなごとく、この修飾ＴＧａ　ｓ　
ｅを用いたパウダーファンデーション第 表 ○；変化なし。

Δ；やや着色（やや異り 〔発明の効果〕 以上に述べた様に、本発明の皮膚化粧料は修跨したＴＧ
ａ　ｓ　ｅを用いているため、皮膚に対する刺激が少な
くまた、経口によっても変色、変臭をひきおこすことな
く、使用時に優れた荒れ肌改善効果、保湿効果、美肌効
果を有するものである。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. 　水溶性物質によって修飾された、修飾トランスグルタ
   ミナーゼを配合していることを特徴とする皮膚化粧料