JPH0363550B2 - - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新抗生物質Ｂ−41Hおよびその製法に
関する。

ストレプトミセス属のＢ−41−146菌株から単
離された一群のマクロライド系抗生物質は、特開
昭50−29742号公報にＢ−41と称され、そして
A₁，A₂，A₃，A₄，B₁，B₂，B₃，C₁及びC₂の９
種が述べられた。更に４種の化合物が単離されて
すべての13種の化合物の構造が決定され、ザ・ジ
ヤーナル・オブ・アンチバイオテツクス（J.
Antibiotics）29(3)の76−14〜76−16及び同誌29
(6)の76−35〜76−42頁に発表された。

本発明者らは今回新たにストレプトミセス属に
属するＢ−41−146菌株の培養物からＢ−41Hを
単離した。

本発明のＢ−41Hの構造式は次のとおりであ
る。

本発明のＢ−41Hは、ストレプトマイセス属に
属するＢ−41H生産菌、例えばＢ−41−146株を
好気的に培養し、その培養物から単離することに
より製造される。

ストレプトマイセス属Ｂ−41−146株の菌学的
性質については特開昭50−29742号に詳しく記載
され、ストレプトミセス・Ｂ−41−146株は工業
技術院微生物工業技術研究所に寄託されていて、
その微生物受託番号は微工研条寄第1072号であ
る。

衆知のとおり、放線菌は自然界において、また
人工的な操作（たとえば、紫外線照射、放射線照
射、化学薬品処理等）により、変異をおこしやす
く、本発明のＢ−41−146株もこの点は同様であ
る。本発明にいうＢ−41−146株はそのすべての
変位株を包含する。すなわち、本発明では抗生物
質Ｂ−41Hを生産し、Ｂ−41−146株及びその変
位株と明確に区別されない菌は、全てＢ−41−
146株に包含されるものである。

Ｂ−41−146株を培養するには、栄養源として
は、従来ストレプトマイセス属の菌の培養に利用
されている公知のものが使用できる。例えば、炭
素源としてグルコース、シユクロース、でんぷ
ん、グリセリン、水あめ、糖みつ、大豆油などが
使用できる。また窒素源としては、大豆粉、小麦
胚芽、肉エキス、ペプトン、酵母菌体、コーンス
チープリカー、硫酸アンモニウム、硝酸ナトリウ
ム等を使用しうる。このほか必要に応じて炭酸カ
ルシウム、食塩、塩化カリ、リン酸塩等の無機塩
類を添加するほか、菌の発育を助け、Ｂ−41Hの
生産を促進するような有機及び無機物を適当に添
加することができる。

培養法としては、一般の抗生物質を生産する方
法と同じく液体培養法、とくに深部培養法が最も
適している。培養は好気的条件下で行なわれ、培
養に適当な温度は22〜30℃であるが、多くの場合
28℃付近で培養する。Ｂ−41Hの生産は振盪培
養、タンク培養とも５〜10日で最高値に達する。

Ｂ−41Hの検出にあたつては次の方法が用いら
れる。すなわち、培養物３ｇを小試験管にとり、
アセトン７mlを添加、振盪して抽出し、遠心分離
する。ここで得られた上澄をアセトンで10mlまで
フイル・アツプする。このサンプルの10〜20μ
をTLC用板（メルク社製、Kieselgel 60 F₂₅₄）
上の所定の位置に吸着せしめ、これをジオキサ
ン：四塩化炭素（18：82）で４時間展開後、二波
長クロマトスキヤナを用いて237mμの波長（ブラ
ンクは380mμ）で測定し、その吸収量を標準物質
のそれと比較し、算出する。

Ｂ−41Hを培養物から採取するにあたつては活
性炭、アルミナ、シリカゲルなどの吸着剤、ダイ
ヤイオンHp−20（三菱化成社製）などの合成吸着
剤、アビセル（旭化成社製）、紙などの固定剤、
イオン交換樹脂、イオン交換ゲル過剤などが使
用されうるが、以下に示す採取方法が最も効果的
である。

培養物を、けいそう土などの過助剤を用いて
別し、ここで得られたケーキをメタノール抽出
することにより、目的物はメタノール水に溶解し
てくる。これに水を加えた後、ｎ−ヘキサンで抽
出し、これを減圧下で濃縮することにより、目的
物を含有するオイル状物質が得られる。これをシ
リカゲル（ワコーゲルＣ−200）のカラムに吸着
せしめ、ｎ−ヘキサン：アセトン（95：５）で溶
出し、目的物を含有するフラクシヨンを集め、減
圧下で濃縮し、再びオイル状となし、これに少量
のｎ−ヘキサンを加えて、シリカゲルカラムにか
けて、ｎ−ヘキサン：酢酸エチル＝95：５で展開
し、目的物を含有するフラクシヨンを集め、減圧
下で濃縮し、ここで得られた残査を少量のメタノ
ールに溶解し、室温に放置するとＢ−41Hが結晶
状に得られる。

製造例 １ シユークロス１％、ポリペプトン0.35％および
K₂HPO₄ 0.05％を含有する前培養培地600mlを含
む２容三角フラスコにストレプトマイセスＢ−
41−146株を１白金耳接種し、48時間27℃で培養
を行い、この２容三角フラスコ２本を30容ジ
ヤー・フアメンタに移植した。ジヤー・フアメン
タには、グルコース８％、大豆粉１％、コーンス
ターチ0.5％、スキムミルク１％、コーンスチー
プ・リカー0.2％及びNaCl0.3％を含有する培地20
を仕込み、PHを7.2〜7.5に調節し、十分に減菌
しておいた。培養期間中は、28℃、内圧0.5Kg／
cm²に保持した。

10日間培養後、培養物20のPHを硫酸で３と
し、セライト１Kgを加えて加圧過すると、約
1.8Kgのケーキが得られた。これを15のメタノ
ールで抽出し、別し、得られたメタノール溶液
15に水５を加え、20のｎ−ヘキサンで抽出
した。得られたｎ−ヘキサン層は芒硝で脱水後、
40〜45℃水溶中で減圧下濃縮すると34ｇのオイル
が得られた。これを、50mlのｎ−ヘキサンにとか
し、あらかじめ800ｇのシリカゲルをｎ−ヘキサ
ンでつめてあるカラムに吸着せしめ、ｎ−ヘキサ
ン：アセトン（95：５）で展開した。その結果、
目的物質を含有するフラクシヨン1.5を得た。
これを前述と同様の条件で濃縮し、250mgのオイ
ルを得た。これをｎ−ヘキサン５mlにとかし、あ
らかじめ50mlのシリカゲルをｎ−ヘキサンでつめ
てあるカラムにかけて、ｎ−ヘキサン：酢酸エチ
ル＝95：５で展開した。ここで、目的物を含有す
るフラクシヨンが得られた。これを減圧下、45℃
で濃縮し、ここで得られた残査を２mlのメタノー
ルに溶解し、室温に放置して無晶形の粉末Ｂ−
41H 14mgが得られた。

Ｂ−41Hは次の理化学的性質を有する。

１ 外観：無晶形粉末 ２ 分子量：540 ３ 紫外線吸収スペクトル：第１図に示す。

極大吸収；237mμ（肩、ε＝25200） ４ 赤外吸収スペクトル：Nujol mullで測定し
たスペクトルを第２図に示す。

3490，1715，1685cm^-1 ５ NMRスペクトル：重クロロホルム中内部基
準にTMSを使用して測定した核磁気共鳴スペ
クトル（100MHz）は第３図に示す。

1.59（14−CH₃ ｓ），1.74（８−CH₃ ｓ），1.84
（４−CH₃ br，ｓ），4.81（15−Ｈ ｍ，1H），
5.36（11−Ｈ，ｄ，ｄ，Ｊ＝９，14Hz），5.36
（２−Ｈ ｍ），6.0（10−Ｈ，ｄ，ｄ，Ｊ＝11，
14Hz），6.24（９−Ｈ ｄ，Ｊ＝11Hz），6.39（３
−Ｈ br，ｓ） ６ 薄層クロマトグラフイー：Rf値0.88、吸着
剤：メルク社製Kieselgel 60F₂₅₄、展開溶媒：
ジオキサン：四塩化炭素（20：80） 本発明のＢ−41Hは果樹、野菜及び花弁に寄生
するナミハダニ類（Tetranychus）、リンゴハダ
ニやミカンハダニ（Panonychus）及びサビダニ
等の成虫及び卵、動物に寄生するマダニ料
（Ixodidac）、ワクモ料（Dermanysside）及びヒ
ゼンダニ料（Sarcoptidae）等に対してすぐれた
殺ダニ活性を有している。

更にヒツジバエ（Oestrus）、キンバエ（Lu−
cilia）、ウシバエ（Hypoderma）、ウマバエ
（Gautrophilus）等及びのみ、しらみ等の動物や
鳥類の外部寄生虫；ゴキブリ、家バエ等の衛生害
中；その他アブラムシ類、鱗翅目幼虫等の各種農
園芸害虫に対して活性である。更にまた土壌中の
根こぶ線虫（Meloidogyne）、ネダニ
（Phizoglyphus）等に対しても活性である。

Ｂ−41Hを殺ダニ剤として使用するには、活性
化合物を担体で希釈し、必要に応じて他の補助剤
を加えることにより、粉剤、粗粉剤、粒剤、微粒
剤、水和剤、乳剤、油剤等の散布剤に調製して使
用することができる。

更に本発明のＢ−41Hは動物及び人間の駆虫剤
としてすぐれた殺寄生虫活性を有している。一般
に寄生虫症として説明されている病気は、蠕虫
（Helminth）として知られている寄生原虫による
動物宿主の感染による。寄生虫症は豚、羊、山
羊、牛、馬、犬、猫及び鶏のような家畜、家禽及
びペツトに流行して経済上重大な被害を与える。
蠕虫の内で線虫として説明されている寄生虫群は
種々の動物にはびこりしばしば重大な感染を引き
起す。前述した動物に感染する線虫の最も一般的
な属は、 ヘモンクス属（Haemonchus）， トリコストロンギルス属（Trichostrongylus）， オステルターギヤ属（Ostertagia）， ネマトデイルス属（Nematodirus）， クーペリア属（Cooperia）， アスカリス属（Ascaris）， ブノストム−ム属（Bunostomum）， エソフアゴストムーム属（Oesophagostomum）， チヤペルチア属（Chabertia）， トリキユリス属（Trichuris）， ストロンギルス属（Strongylus）， トリコネマ属（Trichonema）， デイクチオカウルス属（Dictyocaulus）， キヤピラリア属（Capillaria）， ヘテラキス属（Heterakis）， トキソカラ属（Toxocara）， アスカリデイア属（Ascaridia）， オキシウリス属（Oxyuris）， アンキロストーマ属（Ancylostoma）， ウンシナリア属（Uncinaria）， トキサスカリス属（Toxascaris）及び パラスカリス属（Parascaris）である。

ネマトデイルス属、クーペリア属及びエソフア
ゴストムーム属のある種のものは腸管を攻撃し、
一方ヘモンクス属及びオステルターギア属のもの
は胃に寄生し、テイクチオカウルス属の寄生虫は
肺に見い出される。

また、フイラリア科（Filariidae）やセタリヤ
科（Setariidae）の寄生虫は心臓及び血管、皮下
及びリンパ管組織のような体内の他の組織及び器
管に見い出される。

さらにまた、種々の動物における多くの内部寄
生虫に対して広いスペクトルの活性を有し、例え
ば犬のデイロフイラリア属（Dirofilaia）、ゲツ
シ類動物のネマトスピロイデス属（Nematos−
piroides）、シイフアシア属（Syphacia）及びア
スピキユラリス属（Aspiculuris）にも活性を示
す。

Ｂ−41Hはまた、人間に感染する寄生虫に対し
ても有用であり、人間の消化管の最も普通の寄生
虫は、 アンキロストーマ属（Ancylostoma）， ネカトール属（Necator）， アスカリス属（Ascaris）， ストロンギロイデス属（Strongyloides）， トリヒネラ属（Trichinella）， キヤピラリア属（Capillaria）， トリキユリス属（Trichuris）及び エンテロビウス属（Enterobius）である。

消化管の外に血液又は他の組織及び器管に見い
出される他の医学的に重要な寄生虫は、フイラリ
ア科のブツヘレリア属（Wuchereria）、ブルージ
ア属（Brugia）、オンコセルカ属（Onchocerca）
及びロア糸状虫属（Loa）並びに蛇状線虫科
（Dracunculidae）のドラクンクルス属
（Dracunculus）の寄生虫の外に、腸管内寄生虫
の特別な腸管外寄生状態におけるストロンギロイ
デス属及びトリヒネラ属である。

Ｂ−41Hを動物及び人における駆虫剤として使
用する場合は、液体飲料として経口的に投与する
ことができる。飲料は普通ベントナイトのような
懸濁剤及び湿潤剤又はその他の賦形剤と共に適当
な非毒性の溶剤又は水での溶液、懸濁液又は分散
液である。一般に飲料はまた消泡剤を含有する。
飲料処方は一般に活性化合物を約0.01〜0.5重量
％、好適には0.01〜0.1重量％を含有する。

Ｂ−41Hを動物飼料によつて投与する場合は、
それを飼料に均質に分散させるか、トツプドレツ
シングとして使用されるか又はペレツトの形態と
して使用される。普通望ましい抗寄生虫効果を達
成するためには、最終飼料中に活性化合物を
0.0001〜0.02％を含有している。

また、Ｂ−41Hを液体担体賦形剤に溶解又は分
散させたものは、前胃内、筋肉内、気管内又は皮
下に注射によつて非経口的に動物に投与すること
ができる。非経口投与のために、活性化合物は好
適には落花生油、棉実油のような適当な植物油と
混合する。このような処方は、一般に活性化合物
を0.05〜50重量％含有する。

Ｂ−41Hはまた、ジメチルスルホキシド又は炭
化水素溶剤のような適当な担体と混合することに
よつて局所的に投与し得る。この製剤はスプレー
又は直接的注加によつて動物の外部表面に直接適
用される。

最善の結果を得るための活性化合物の最適使用
量は、治療される動物の種類及び寄生虫感染の型
及び程度によつてきまるが、一般に動物体重１Kg
当り約0.01〜100mg、好適には0.5〜50.0mgを経口
投与することによつて得られる。このような使用
量は一度に又は分割した使用量で１〜５日のよう
な比較的短期間にわたつて与えられる。

【図面の簡単な説明】

第１図はＢ−41Hの紫外吸収スペクトル、第２
図は同物質の赤外吸収スペクトル、第３図は同物
質の核磁気共鳴スペクトルを示す。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 次の化学式を有する抗生物質Ｂ−41H ２ ストレプミセス属に属するＢ−41H生産菌を
   好気的に培養し、その培養物からＢ−41Hを採取
   することを特徴とするＢ−41Hの製造法。