JPH0355781B2 - - Google Patents
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- JPH0355781B2 JPH0355781B2 JP61503776A JP50377686A JPH0355781B2 JP H0355781 B2 JPH0355781 B2 JP H0355781B2 JP 61503776 A JP61503776 A JP 61503776A JP 50377686 A JP50377686 A JP 50377686A JP H0355781 B2 JPH0355781 B2 JP H0355781B2
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Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N15/00—Investigating characteristics of particles; Investigating permeability, pore-volume or surface-area of porous materials
- G01N15/10—Investigating individual particles
- G01N15/14—Optical investigation techniques, e.g. flow cytometry
- G01N15/1404—Handling flow, e.g. hydrodynamic focusing
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
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- G01N15/1404—Handling flow, e.g. hydrodynamic focusing
- G01N2015/1413—Hydrodynamic focussing
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
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- G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
- G01N21/01—Arrangements or apparatus for facilitating the optical investigation
- G01N21/03—Cuvette constructions
- G01N2021/0346—Capillary cells; Microcells
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- G01N21/03—Cuvette constructions
- G01N21/05—Flow-through cuvettes
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Description
明細書
本発明はフロー・サイトメーターに用いられる
フロー・チヤンバー装置に係るものである。本装
置は、微細層流流体によつて搬送される生物細胞
或いは他の微細粒子が、30ｍ／秒に及ぶ高速から
１cm／秒の低速に及ぶ広汎な速さで板ガラス上を
１つづゝ搬送され、該細胞／粒子の放つ蛍光及び
散乱光を板ガラスのそれぞれの面に設けた光学系
を利用して測定できるようにしたものである。本
装置を更に発展させて、該細胞／粒子の電気量を
も同時に測定出来るようにした。
フロー・チヤンバー装置に係るものである。本装
置は、微細層流流体によつて搬送される生物細胞
或いは他の微細粒子が、30ｍ／秒に及ぶ高速から
１cm／秒の低速に及ぶ広汎な速さで板ガラス上を
１つづゝ搬送され、該細胞／粒子の放つ蛍光及び
散乱光を板ガラスのそれぞれの面に設けた光学系
を利用して測定できるようにしたものである。本
装置を更に発展させて、該細胞／粒子の電気量を
も同時に測定出来るようにした。
このような機器のフローチヤンバーの機能は、
粒子又は生物細胞をこの機器の測定域内で極めて
再現性のよい方法で１つづゝ流動させることにあ
る。
粒子又は生物細胞をこの機器の測定域内で極めて
再現性のよい方法で１つづゝ流動させることにあ
る。
本発明の目的は、従来のフローチヤンバーと比
較すると相当低い流速でも検知感度を相応に増加
出来、更に光度を測ると同時に該粒子／細胞の電
気量測定をも可能にすることにある。
較すると相当低い流速でも検知感度を相応に増加
出来、更に光度を測ると同時に該粒子／細胞の電
気量測定をも可能にすることにある。
フローサイトメーターは微細粒子の放つ蛍光及
び散乱光の特性を測る装置である。そして測定
は、微細な層流流体によつて搬送される粒子を励
起光束の焦点を１つづゝ通過させて行われる。各
微細粒子がこの焦点を通過する時に放つ蛍光のパ
ルスは該粒子の化学組成によつて決まり、この化
学組成に特有の値をとる。この蛍光のパルスは、
適当な光学系を通して光電検知管で検知し、該蛍
光パルスを等価の電気パルスに変換する。このパ
ルスは多通路パルス高さ解析器（MCA）
（multichannel pulse height analyzer）を通し
て、パルスの大きさを測り、粒子数を蛍光光度の
函数として表してヒストグラム化する。
び散乱光の特性を測る装置である。そして測定
は、微細な層流流体によつて搬送される粒子を励
起光束の焦点を１つづゝ通過させて行われる。各
微細粒子がこの焦点を通過する時に放つ蛍光のパ
ルスは該粒子の化学組成によつて決まり、この化
学組成に特有の値をとる。この蛍光のパルスは、
適当な光学系を通して光電検知管で検知し、該蛍
光パルスを等価の電気パルスに変換する。このパ
ルスは多通路パルス高さ解析器（MCA）
（multichannel pulse height analyzer）を通し
て、パルスの大きさを測り、粒子数を蛍光光度の
函数として表してヒストグラム化する。
一方、各粒子が励起光の焦点を通過する時該粒
子によつて散乱され、又該粒子の構造と大きさで
決まる光を別の検知器で同じ方法で検知して、構
造と大きさについて粒子を特性化したヒストグラ
ムを作る。
子によつて散乱され、又該粒子の構造と大きさで
決まる光を別の検知器で同じ方法で検知して、構
造と大きさについて粒子を特性化したヒストグラ
ムを作る。
フロー・サイトメーター中の流体は普通約20
ｍ／秒の流速を持ち、この装置の測定域を構成し
ている励起光の焦点はその大きさが約50ミクロン
である。このことは、各粒子が約３マイクロ秒で
測定されていることを意味し、換言すると１秒間
当り数1000個の粒子測定が可能であることを意味
している。検知出来る粒子１個当りの蛍光物質の
最低量は約１×10-16ｇである。１×10-2立方ミ
クロン（１×10-14c.c.）の大きさの粒子でも光散
乱法で測定できる。蛍光法でも光散乱法でも約１
％の精度で測定できる。フロー・サイトメーター
の極く一般的な用途は、これまでは、生物細胞の
大きさ及び、DNA、酵素、其の他蛋白質等の必
須成分含有量の測定であつた。
ｍ／秒の流速を持ち、この装置の測定域を構成し
ている励起光の焦点はその大きさが約50ミクロン
である。このことは、各粒子が約３マイクロ秒で
測定されていることを意味し、換言すると１秒間
当り数1000個の粒子測定が可能であることを意味
している。検知出来る粒子１個当りの蛍光物質の
最低量は約１×10-16ｇである。１×10-2立方ミ
クロン（１×10-14c.c.）の大きさの粒子でも光散
乱法で測定できる。蛍光法でも光散乱法でも約１
％の精度で測定できる。フロー・サイトメーター
の極く一般的な用途は、これまでは、生物細胞の
大きさ及び、DNA、酵素、其の他蛋白質等の必
須成分含有量の測定であつた。
フローチヤンバーはどのフロー・サイトメータ
ーでも最も重要な部分となつている。その理由
は、流速と同様に位置に関して粒子の流れの安定
性が測定精度を支配するからである。この流れ安
定性を高くするために、大抵のフローチヤンバー
では、粒子のハイドロダイナミツク・フオーカシ
ング法を採用している。この方法では、搬送流体
は円すい状ノズルの微細なオリフイスから層流ジ
エツトが出来るように押出される。ノズル軸、及
びノズル径が円筒管の直径よりもずつと大きくな
つているノズル開孔部の軸と一致した軸を持つ薄
い円筒管を通して、粒子は搬送流体中に入る。こ
うして、粒子はノズルを出た微細ジエツト流中に
集められる。
ーでも最も重要な部分となつている。その理由
は、流速と同様に位置に関して粒子の流れの安定
性が測定精度を支配するからである。この流れ安
定性を高くするために、大抵のフローチヤンバー
では、粒子のハイドロダイナミツク・フオーカシ
ング法を採用している。この方法では、搬送流体
は円すい状ノズルの微細なオリフイスから層流ジ
エツトが出来るように押出される。ノズル軸、及
びノズル径が円筒管の直径よりもずつと大きくな
つているノズル開孔部の軸と一致した軸を持つ薄
い円筒管を通して、粒子は搬送流体中に入る。こ
うして、粒子はノズルを出た微細ジエツト流中に
集められる。
フローチヤンバーの中にはノズルで発生する遊
離ジエツトのフロー・サイトメーターの測定域と
して使つているものもある。この装置では励起光
源にレーザーが好んで用いられている。他のフロ
ーチヤンバーでは、流体が測定域を通る円筒又は
角形直管に通されているものもある。励起光源と
して市販の高圧アーク灯を使つたフロー・サイト
メーターではこの管はもつと複雑な形をしてい
る。
離ジエツトのフロー・サイトメーターの測定域と
して使つているものもある。この装置では励起光
源にレーザーが好んで用いられている。他のフロ
ーチヤンバーでは、流体が測定域を通る円筒又は
角形直管に通されているものもある。励起光源と
して市販の高圧アーク灯を使つたフロー・サイト
メーターではこの管はもつと複雑な形をしてい
る。
フローチヤンバーが信号／ノイズ比を出来る限
り大きくするためには、フローチヤンバー自体の
蛍光及び散乱光をできる限り小さくするような光
学的性質を持たせることが極めて重要となる。
り大きくするためには、フローチヤンバー自体の
蛍光及び散乱光をできる限り小さくするような光
学的性質を持たせることが極めて重要となる。
元来フローチヤンバーは開口数の多い（N.A.
＝1.3）油浸漬光学系を通り、速度の励起強度と
蛍光検知能を与える入射光（エピ・イルミネーシ
ヨン）を持つた蛍光顕微鏡に取付けるものとして
開発された。このフローチヤンバーでは、ハイド
ロダイナミツク・フオーカシング性のノズルから
出た遊離のジエツト流は、顕微鏡カバーガラスの
表面に斜角で当り、その結果ガラス表面に層流が
出来、粒子はこの層流の狭い扇形中に留る。（ノ
ルウエー特許第144002号）。このカバーガラスの
裏面は蛍光顕微鏡の油浸漬対物面と光学的に組合
せられている。このようにして、この装置の測定
域即ち顕微鏡の焦点がカバーガラス表面に接した
流れの微細領域と符合する。この後、液体は吹込
口がカバーガラスに接している細い管でガラス面
から吸取られる。カバーガラス表面上を流れる流
体はこのように一方がカバーガラス表面と、他方
が大気に接する自由表面間の閉込められている。
この形は光を散乱する光学表面数を最小にしてい
る。更にこの表面はほゞ平坦で顕微鏡の光軸と直
角に位置している。この結果、この種のフローチ
ヤンバーだけが蛍光と散乱光を例外的に低くし、
粒子測定の信号／ノイズう比はそれだけ高くな
る。又このフローチヤンバーは開放状態にあり、
掃除が極めて容易という利点もある。
＝1.3）油浸漬光学系を通り、速度の励起強度と
蛍光検知能を与える入射光（エピ・イルミネーシ
ヨン）を持つた蛍光顕微鏡に取付けるものとして
開発された。このフローチヤンバーでは、ハイド
ロダイナミツク・フオーカシング性のノズルから
出た遊離のジエツト流は、顕微鏡カバーガラスの
表面に斜角で当り、その結果ガラス表面に層流が
出来、粒子はこの層流の狭い扇形中に留る。（ノ
ルウエー特許第144002号）。このカバーガラスの
裏面は蛍光顕微鏡の油浸漬対物面と光学的に組合
せられている。このようにして、この装置の測定
域即ち顕微鏡の焦点がカバーガラス表面に接した
流れの微細領域と符合する。この後、液体は吹込
口がカバーガラスに接している細い管でガラス面
から吸取られる。カバーガラス表面上を流れる流
体はこのように一方がカバーガラス表面と、他方
が大気に接する自由表面間の閉込められている。
この形は光を散乱する光学表面数を最小にしてい
る。更にこの表面はほゞ平坦で顕微鏡の光軸と直
角に位置している。この結果、この種のフローチ
ヤンバーだけが蛍光と散乱光を例外的に低くし、
粒子測定の信号／ノイズう比はそれだけ高くな
る。又このフローチヤンバーは開放状態にあり、
掃除が極めて容易という利点もある。
フローサイトメーターの測定域を通る微粒子に
よる蛍光及び散乱光の量は該測定域の微粒子の滞
留時間に比例し、従つて該微粒子の流速に逆比例
する。従つて、フロー・サイトメーターの感度は
流速に逆比例する。流速を小さくすると装置の感
度は大きくできることになる。前記（ノルウエー
特許第144002号）のフローチヤンバーでは、ノズ
ル空気中に水の極微ジエツト流を作り出してい
る。フローチヤンバーがこの目的に合うように機
能するためには、ジエツト流がカバーガラス表面
に届くまでその層流性を保持していなければなら
ない。ノズルがこのような層流ジエツトを作り出
すための条件は、流速が次式で与えられる最低値
（vmin）を越えることである。
よる蛍光及び散乱光の量は該測定域の微粒子の滞
留時間に比例し、従つて該微粒子の流速に逆比例
する。従つて、フロー・サイトメーターの感度は
流速に逆比例する。流速を小さくすると装置の感
度は大きくできることになる。前記（ノルウエー
特許第144002号）のフローチヤンバーでは、ノズ
ル空気中に水の極微ジエツト流を作り出してい
る。フローチヤンバーがこの目的に合うように機
能するためには、ジエツト流がカバーガラス表面
に届くまでその層流性を保持していなければなら
ない。ノズルがこのような層流ジエツトを作り出
すための条件は、流速が次式で与えられる最低値
（vmin）を越えることである。
vmin＝２（2σ／dp）1/2 (1)
こゝで、σは流体の表面張力を、ｐは流体の密
度を、ｄはオリフイスの直径を表わしている。こ
の条件は細胞／粒子が空気中のジエツト流で測定
域を運ばれるようにした凡てのフロー・サイトメ
ーターの感度について成立する。
度を、ｄはオリフイスの直径を表わしている。こ
の条件は細胞／粒子が空気中のジエツト流で測定
域を運ばれるようにした凡てのフロー・サイトメ
ーターの感度について成立する。
フロー・サイトメーターのノズルとしては極く
普通の直径70ミクロンのノズルオリフイスの場
合、vmin＝３ｍ／秒となり、この時の流速は約
10ｍ／秒であつた。このことは流速を小さくして
も検知感度が３以上に大きくできないことを意味
している。本発明の主目的の一つは流速を著るし
く小さくし、これによつて検知感度を相応に大き
くすることにある。
普通の直径70ミクロンのノズルオリフイスの場
合、vmin＝３ｍ／秒となり、この時の流速は約
10ｍ／秒であつた。このことは流速を小さくして
も検知感度が３以上に大きくできないことを意味
している。本発明の主目的の一つは流速を著るし
く小さくし、これによつて検知感度を相応に大き
くすることにある。
又本発明のもう一つの目的は、蛍光及び散乱光
の測定と同時に微粒子の電気量を測定可能とする
ことにある。極微粒子の電気量を測知する方法は
既に公知で、長年実用化されている。この方法で
は、微粒子は、例えば生理学塩溶液のような電解
液を入れた、例えば直径100ミクロンの微細な開
孔部を通過させている。この開孔部の一方に電極
を取付けると、開孔部を通して両電極間に一定の
電流が保たれる。この電極間の電位差は閉孔部の
電気抵抗から決定できる。電気電導性のない微粒
子が開孔部を通過すると、この抵抗は粒子量に比
例して増大する。従つて微粒子が開孔部を通過す
ると、該粒子量に比例して電極間に電位差パルス
が発生する。生物細胞の量をこうして測定するこ
とは、フロー・サイトメーターによる蛍光及び散
乱光測定と併せて極めて有益であることが立証さ
れた。従来のフローチヤンバーでは、ノズルで空
気中にジエツト流を作り出す他のフローシステム
と同じように、このような測定は不可能である。
の測定と同時に微粒子の電気量を測定可能とする
ことにある。極微粒子の電気量を測知する方法は
既に公知で、長年実用化されている。この方法で
は、微粒子は、例えば生理学塩溶液のような電解
液を入れた、例えば直径100ミクロンの微細な開
孔部を通過させている。この開孔部の一方に電極
を取付けると、開孔部を通して両電極間に一定の
電流が保たれる。この電極間の電位差は閉孔部の
電気抵抗から決定できる。電気電導性のない微粒
子が開孔部を通過すると、この抵抗は粒子量に比
例して増大する。従つて微粒子が開孔部を通過す
ると、該粒子量に比例して電極間に電位差パルス
が発生する。生物細胞の量をこうして測定するこ
とは、フロー・サイトメーターによる蛍光及び散
乱光測定と併せて極めて有益であることが立証さ
れた。従来のフローチヤンバーでは、ノズルで空
気中にジエツト流を作り出す他のフローシステム
と同じように、このような測定は不可能である。
本発明の装置の特徴は主として後述の特許請求
の範囲第１項と第２項から明らかである。本発明
に基づく本装置の他の特徴は、付記した図面に見
られるように、請求範囲の他項からも明らかであ
る。
の範囲第１項と第２項から明らかである。本発明
に基づく本装置の他の特徴は、付記した図面に見
られるように、請求範囲の他項からも明らかであ
る。
第１図 本発明に基づくフロー・チヤンバー装置
の概略図 第２図 本発明に基づくフロー・チヤンバー装置
の一部であるノズルの拡大図 本発明ではハイドロダイナミツク・フオーカシ
ング・ノズル１を採用した。このノズルで、他面
が光学的に顕微鏡３と組合せられたカバーガラス
２の表面に層流を形成させる。本発明の場合、ノ
ズルのオリフイス４はカバーガラス２の表面と直
接接触するように作られている（第１図参照）。
従つてノズルから出る流体は空気中にジエツト流
を作らないで、むしろオリフイス４とカバーガラ
ス２の表面を直結する流体メニスカスを作る。光
学的な必要性から、このメニスカスをできる限り
オリフイスに密着させ、平坦化するために、ノズ
ルの先端は、高さがオリフイス直径よりやゝ大き
く、巾は高さの数倍という長方形断面を持つよう
にする（第２図参照）。
の概略図 第２図 本発明に基づくフロー・チヤンバー装置
の一部であるノズルの拡大図 本発明ではハイドロダイナミツク・フオーカシ
ング・ノズル１を採用した。このノズルで、他面
が光学的に顕微鏡３と組合せられたカバーガラス
２の表面に層流を形成させる。本発明の場合、ノ
ズルのオリフイス４はカバーガラス２の表面と直
接接触するように作られている（第１図参照）。
従つてノズルから出る流体は空気中にジエツト流
を作らないで、むしろオリフイス４とカバーガラ
ス２の表面を直結する流体メニスカスを作る。光
学的な必要性から、このメニスカスをできる限り
オリフイスに密着させ、平坦化するために、ノズ
ルの先端は、高さがオリフイス直径よりやゝ大き
く、巾は高さの数倍という長方形断面を持つよう
にする（第２図参照）。
このようにして本発明の主目的の一つが果され
ると、前記の(1)式で与えられる制限速度はも早や
ノズルから出る流れの層流化の条件とはならな
い。本発明の装置により、１cm／秒の流速でも層
流性が保持できることが実験で保証された。この
場合、流速の低下が感度を著るしく増加させ、
我々の作つた従来のフローチヤンバーで可能な感
度と比較して約100にも達した。このような低速
度の層流をカバーガラス表面上で安定に保つ条件
としては、流体が重力方向に流れるようにカバー
ガラス２を垂直に配置することである。又、第１
図に示したチユーブ５でカバーガラス２を通過し
た流体が排出される。
ると、前記の(1)式で与えられる制限速度はも早や
ノズルから出る流れの層流化の条件とはならな
い。本発明の装置により、１cm／秒の流速でも層
流性が保持できることが実験で保証された。この
場合、流速の低下が感度を著るしく増加させ、
我々の作つた従来のフローチヤンバーで可能な感
度と比較して約100にも達した。このような低速
度の層流をカバーガラス表面上で安定に保つ条件
としては、流体が重力方向に流れるようにカバー
ガラス２を垂直に配置することである。又、第１
図に示したチユーブ５でカバーガラス２を通過し
た流体が排出される。
本発明のもう一つの主目的は電気量の測定で、
ノズルとカバーガラス表面の間に置いた厚さ10ミ
クロンの白金電極６を使う。ノズルのオリフイス
とカバーガラス表面を連結させているメニスカス
を通るこの電極を、ノズル１の流体供給口８の所
にある別の電極７と電気的に接続する。（第１図
参照）。両電極間で電源１０から電解電流を一定
に保つことによつて、微粒子が斉らす両電極間の
電位差パルスを電圧計１１で計測するとオリフイ
スを通過する微粒子の電気量が決定できる。
ノズルとカバーガラス表面の間に置いた厚さ10ミ
クロンの白金電極６を使う。ノズルのオリフイス
とカバーガラス表面を連結させているメニスカス
を通るこの電極を、ノズル１の流体供給口８の所
にある別の電極７と電気的に接続する。（第１図
参照）。両電極間で電源１０から電解電流を一定
に保つことによつて、微粒子が斉らす両電極間の
電位差パルスを電圧計１１で計測するとオリフイ
スを通過する微粒子の電気量が決定できる。
本発明では、我々の従来のフローチヤンバーと
比較すると、更に２つの重要な利点が認められ
る。即ち、１つは、流速が小さいため測定域を通
過する時の細胞／粒子の像の記録が可能となる。
１つの細胞／粒子の測光信号は次のようにして発
信される。(1)測定域に集中されたレーザー光のよ
うな適当な光源からの光パルス、(2)電子式カメ
ラ、もう１つの利点は、本発明ではノズルオリフ
イスとカバーガラス表面が完全に接触し、このた
め測定域を通る細胞／粒子の流路の正確さが増す
ことである。
比較すると、更に２つの重要な利点が認められ
る。即ち、１つは、流速が小さいため測定域を通
過する時の細胞／粒子の像の記録が可能となる。
１つの細胞／粒子の測光信号は次のようにして発
信される。(1)測定域に集中されたレーザー光のよ
うな適当な光源からの光パルス、(2)電子式カメ
ラ、もう１つの利点は、本発明ではノズルオリフ
イスとカバーガラス表面が完全に接触し、このた
め測定域を通る細胞／粒子の流路の正確さが増す
ことである。
Claims (1)
- 【特許請求の範囲】 １ 微細な層流によつて搬送される生物細胞又は
微粒子を、30ｍ／秒乃至0.01ｍ／秒の範囲内の速
さで板ガラス上に１つづゝ搬送することにより、
該細胞又は粒子の放つ蛍光及び散乱光を該板ガラ
スのそれぞれの側においた光学系で測知するこを
可能としたフロー・サイトメーター用のフローチ
ヤンバー装置において、該装置が、板ガラス２の
開放表面と接触して設けられ、その軸が板ガラス
２と斜角をなすように配置されたノズル１を持
ち、しかも該ノズルのオリフイス４がガラス表面
と直接接触するように配置され、且つノズルオリ
フイス４から出る流れによつて該オリフイスが流
速とは無関係に保持される流体メニスカスを経て
ガラス表面と接触するようにしたことを特徴とす
るフローチヤンバー装置。 ２ 微細な層流によつて搬送される生物細胞又は
微粒子を、30ｍ／秒乃至0.01ｍ／秒の範囲内の速
さで板ガラス上に１つづゝ搬送することにより、
該細胞又は粒子の放つ蛍光及び散乱光を該板ガラ
スのそれぞれの側においた光学系で測定し、同時
に該細胞又は粒子の電気量を決定可能としたフロ
ーサイトメーター用のフロートチヤンバー装置に
おいて、該装置が、板ガラス２の開放表面と接触
して設けられ、その軸が板ガラス２と斜角をなす
ように配置されたノズル１を持ち、しかも該ノズ
ルのオリフイス４がガラス表面と直接接触するよ
うに配置され、且つノズルオリフイス４から出る
流れによつて該オリフイスが流速とは無関係に保
持される流体メニスカスを経てガラス表面と接触
するようにし、且つ又、該板ガラス２と該ノズル
１の間の接触面に置かれた不活性金属製電極６
と、ノズル１の流体供給口８に置かれた電極７に
よつて該両電極６と７間の電解電流をノズルオリ
フイス部４で一定となるようにし、該ノズルオリ
フイス４を通過する微粒子の電気量測定を可能と
することを特徴とするフローチヤンバー装置。 ３ 特許請求範囲第１項又は第２項のいづれかに
記載された装置において、ノズル１の先端部が、
向合つた２平面を有し、且又該先端部の断面がノ
ズルオリフイス４の直径よりやゝ大きい高さと、
この高さの数倍も大きい横巾を持つことを特徴と
するフローチヤンバー装置。 ４ 特許請求範囲第１項又は第２項いづれかに記
載された装置において、ノズル１が、該ノズル先
端部の一方の平面でカバーガラス２表面上に置か
れていることを特徴とするフローチヤンバー装
置。 ５ 特許請求範囲第１項から第４項間でのいづれ
かの項に記載された装置において、搬送流体が円
すい形のオリフイス４で層流になるようにノズル
１に導かれ、且又細胞又は微粒子が、流体がノズ
ルオリフイス４を出た所で、流体の断面の中心に
くるようにし、且又該流体がカバーガラス２表面
で細い扇形となるようにノズルに導かれることを
特徴とするフローチヤンバー装置。 ６ 特許請求範囲第１項から第５項までのいづれ
かの項に記載された装置において、カバーガラス
２が、該ガラス表面の流体が重力方向に流れるよ
うに垂直に取付けられていることを特徴とするフ
ローチヤンバー装置。 ７ 特許請求範囲第１項から第６項までのいづれ
かの項に記載された装置において、チユーブ５が
該カバーガラス２の下端に取付けられ、フローチ
ヤンバーから流体を排出できるようにしたことを
特徴としたフローチヤンバー装置。 ８ 特許請求範囲第１項から第７項までのいづれ
かの項に記載された装置において、カバーガラス
２の裏面が、該ガラス２の表面を通る微粒子が顕
微鏡の焦点を通るように、エピ証明を備えた顕微
鏡に取付けられていることを特徴とするフローチ
ヤンバー装置。
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| NO852761 | 1985-07-10 | ||
| NO852761A NO156916C (no) | 1985-07-10 | 1985-07-10 | Stroemningskammer for vaeskestroemsfotometer. |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPS62503192A JPS62503192A (ja) | 1987-12-17 |
| JPH0355781B2 true JPH0355781B2 (ja) | 1991-08-26 |
Family
ID=19888388
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP61503776A Granted JPS62503192A (ja) | 1985-07-10 | 1986-07-10 | フロ−・サイトメ−タ−用のフロ−・チャンバ−装置 |
Country Status (7)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4737025A (ja) |
| EP (1) | EP0229814B1 (ja) |
| JP (1) | JPS62503192A (ja) |
| AT (1) | ATE43721T1 (ja) |
| DE (1) | DE3663744D1 (ja) |
| NO (1) | NO156916C (ja) |
| WO (1) | WO1987000282A1 (ja) |
Families Citing this family (29)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPS63262565A (ja) * | 1987-04-20 | 1988-10-28 | Hitachi Ltd | フロ−セル |
| US5275787A (en) * | 1989-10-04 | 1994-01-04 | Canon Kabushiki Kaisha | Apparatus for separating or measuring particles to be examined in a sample fluid |
| DE69025370T2 (de) * | 1989-10-04 | 1996-09-12 | Canon Kk | Gerät und Verfahren zur Trennung oder Messung von zu untersuchenden Teilchen in einer Flüssigkeitsprobe |
| NO894680L (no) * | 1989-11-24 | 1991-05-27 | Flowtech A S V Harald Steen | Pulsmodulasjon av eksitasjonslyskilden i vaeskestroemcytofotometere. |
| DK111990D0 (da) * | 1990-05-04 | 1990-05-04 | Biometic Aps | Apparat og fremgangsmaade til analyse af en vaeskesuspension |
| JP3232145B2 (ja) * | 1991-12-27 | 2001-11-26 | シスメックス株式会社 | 網赤血球測定方法 |
| US5818731A (en) * | 1995-08-29 | 1998-10-06 | Mittal; Gauri S. | Method and apparatus for measuring quality of frying/cooking oil/fat |
| JP4323571B2 (ja) | 1997-01-31 | 2009-09-02 | エックスワイ， インコーポレイテッド | 光学装置 |
| US5861950A (en) * | 1997-07-10 | 1999-01-19 | Particle Measuring Systems, Inc. | Particle detection system utilizing an inviscid flow-producing nozzle |
| US6149867A (en) | 1997-12-31 | 2000-11-21 | Xy, Inc. | Sheath fluids and collection systems for sex-specific cytometer sorting of sperm |
| US7208265B1 (en) | 1999-11-24 | 2007-04-24 | Xy, Inc. | Method of cryopreserving selected sperm cells |
| US6263745B1 (en) * | 1999-12-03 | 2001-07-24 | Xy, Inc. | Flow cytometer nozzle and flow cytometer sample handling methods |
| AU2002220018A1 (en) | 2000-11-29 | 2002-06-11 | Colorado State University | System for in-vitro fertilization with spermatozoa separated into x-chromosome and y-chromosome bearing populations |
| US7713687B2 (en) | 2000-11-29 | 2010-05-11 | Xy, Inc. | System to separate frozen-thawed spermatozoa into x-chromosome bearing and y-chromosome bearing populations |
| MX337304B (es) * | 2002-08-01 | 2016-02-24 | Xy Llc | Sistema de separacion de baja presion para celulas de esperma. |
| US8486618B2 (en) | 2002-08-01 | 2013-07-16 | Xy, Llc | Heterogeneous inseminate system |
| WO2004017041A2 (en) | 2002-08-15 | 2004-02-26 | Xy, Inc. | High resolution flow cytometer |
| US7169548B2 (en) | 2002-09-13 | 2007-01-30 | Xy, Inc. | Sperm cell processing and preservation systems |
| EP2306174B1 (en) | 2003-03-28 | 2016-05-11 | Inguran, LLC | Flow cytometry nozzle for orienting particles and corresponding method |
| NZ544103A (en) | 2003-05-15 | 2010-10-29 | Xy Llc | Efficient haploid cell sorting for flow cytometer systems |
| CN104974983A (zh) | 2004-03-29 | 2015-10-14 | 英格朗公司 | 用于授精的精子悬浮液 |
| AU2005266930B2 (en) | 2004-07-22 | 2010-09-16 | Inguran, Llc | Process for enriching a population of sperm cells |
| WO2009073649A1 (en) | 2007-12-04 | 2009-06-11 | Particle Measuring Systems, Inc. | Non-orthogonal particle detection systems and methods |
| US8589851B2 (en) * | 2009-12-15 | 2013-11-19 | Memoir Systems, Inc. | Intelligent memory system compiler |
| US8614793B2 (en) * | 2012-04-02 | 2013-12-24 | Ecolab Usa Inc. | Flow chamber for online fluorometer |
| CA3029050C (en) | 2012-09-19 | 2024-05-14 | Inguran, Llc | Nozzle assembly for a flow cytometer system and methods of manufacture |
| CA2885234C (en) | 2012-09-19 | 2019-08-06 | Inguran, Llc | Flow cytometer nozzle tip |
| US11668640B2 (en) | 2015-03-06 | 2023-06-06 | Inguran, Llc | Nozzle assembly for a flow cytometry system and methods of manufacture |
| CN109295185B (zh) * | 2018-09-05 | 2022-03-22 | 暨南大学 | 一种适用于单细胞真核藻类基因组大小的测定方法 |
Family Cites Families (7)
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|---|---|---|---|---|
| US3992103A (en) * | 1973-01-30 | 1976-11-16 | National Research Development Corporation | Devices for evaluating drop systems |
| DE2709399C3 (de) * | 1977-03-04 | 1980-07-24 | Goehde, Wolfgang, Dr., 4400 Muenster | Einrichtung zum Messen von Zelleigenschaften |
| DE2853703A1 (de) * | 1978-12-13 | 1980-07-03 | Leitz Ernst Gmbh | Kuevette zur mikroskopischen beobachtung und/oder optisch- elektrischen messung von in einer fluessigkeit suspendierten teilchen |
| US4408877A (en) * | 1979-04-10 | 1983-10-11 | Ernst Leitz Wetzlar Gmbh | Device for hydrodynamic focussing of a particle-suspension in a liquid flow cytophotometer |
| NO144002C (no) * | 1979-04-10 | 1981-05-27 | Norsk Hydro S Inst For Kreftfo | Anordning for anvendelse ved vaeskestroemsfotometri |
| NO145176C (no) * | 1979-11-23 | 1982-01-27 | Norsk Hydros Inst For Kreftfor | Anordning ved vaeskestroemsfotometer. |
| US4735504A (en) * | 1983-10-31 | 1988-04-05 | Technicon Instruments Corporation | Method and apparatus for determining the volume & index of refraction of particles |
-
1985
- 1985-07-10 NO NO852761A patent/NO156916C/no unknown
-
1986
- 1986-07-10 AT AT86904422T patent/ATE43721T1/de not_active IP Right Cessation
- 1986-07-10 WO PCT/NO1986/000050 patent/WO1987000282A1/en active IP Right Grant
- 1986-07-10 DE DE8686904422T patent/DE3663744D1/de not_active Expired
- 1986-07-10 JP JP61503776A patent/JPS62503192A/ja active Granted
- 1986-07-10 EP EP86904422A patent/EP0229814B1/en not_active Expired
- 1986-07-10 US US07/036,675 patent/US4737025A/en not_active Expired - Fee Related
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| Publication number | Publication date |
|---|---|
| NO156916B (no) | 1987-09-07 |
| US4737025A (en) | 1988-04-12 |
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| JPS62503192A (ja) | 1987-12-17 |
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| EP0229814B1 (en) | 1989-05-31 |
| ATE43721T1 (de) | 1989-06-15 |
| NO156916C (no) | 1987-12-16 |
| WO1987000282A1 (en) | 1987-01-15 |
| DE3663744D1 (en) | 1989-07-06 |
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