JPH03505872A

JPH03505872A - 化粧用および皮膚処置用組成物

Info

Publication number: JPH03505872A
Application number: JP1506933A
Authority: JP
Inventors: ピッカート，ローレン　アール．
Original assignee: プロサイト　コーポレイション
Priority date: 1988-06-16
Filing date: 1989-06-14
Publication date: 1991-12-19
Anticipated expiration: 2014-09-20
Also published as: EP0420914A1; NO905421L; GR890100404A; MX170285B; AU633005B2; GR1002802B; EP0420914B1; CA1335568C; DK295190D0; AU3768789A; JP2951345B2; DE68913739D1; DK295190A; NO179195C; FI906183A0; NO179195B; KR900701250A; NO905421D0; DE68913739T2; WO1989012441A1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】化粧用および皮膚処置用組成物孜王立互本発明は一般に化粧品に関し、より詳しくは皮膚処置用および化粧用組成物におけるグリシル−し−ヒスチジル−Ｌ−リジン：銅（Ｕ　）　（ＧＨＬ−Ｃｕ）の誘導体の用途に関する。

尤■坐宣量個体における皮膚障害は様々な原因：環境の急襲（例えば日光や風）、内的病気（例えば糖尿病、アテローム性動脈硬化症）または正常な老化の結果として生じ得る。老化と共に多くの構造的および機能的皮膚変化が起こる。更に、皮膚の構造と機能との間の相互関係のため、老化過程から生じる構造的変化が同時に機能的障害を引き起こし得る。

老化に関連する変化は、表皮において容易に明らかであり、水庖形成および／またはびらんの傾向が高まる。微視的には、老化した皮膚の表皮基底細胞は、若い皮膚から得られるものよりもサイズ、形および染色性質の変動性が大きいことが観察されている。加えて、角質層の含水量が減少し、そして特に角質細胞の末梢において、細胞凝集力が弱まる。

臨床的には、荒れたまたは乾燥した皮膚の問題は、エフリン汗腺および脂腺の減少を伴った、角質層の水分の減少を含む、幾つかの形態的変化の現われである。

人は老化するにつれて、特に５０才以降は、表皮の交替時間が増加する。臨床的には、表面創傷は治癒するのにより時間がかかり、老人は小さな外傷を受けた後に二次感染にかかりやすくなる。

皮膚が老化すると、真皮は密度が減少して比較的無細胞および無血管になる。− 生を通じて、コラーゲンの全量は１年につき約１％ずつ減少する。コラーゲン繊維は太くなり、不溶性になり、膨張能力が小さくなり、そしてコラ−ゲナーゼによる消化に対してより耐性になる。皮膚のたるみおよび負傷に対する素因の一因となる網状真皮の弾性繊維にも構造的異常が生じる。

表皮下の弾性網状構造の退化は、高齢者の日の当たらない皮屑上のいたるところに見られる皮膚のたるみと微細なしわの原因となり得る。真皮および皮下脂肪の萎縮も、しわの形成に重要な役割を果たす。

加えて、高齢者の真皮は、若者のものよりも約り０％少ないマスト細胞を有する。臨床的には、これは美容的および生理的意味を有する。美容的には、老化が進行するにつれて皮膚は青白くなる。生理的には、高齢患者は表面的には取るに足らない周囲温度の変化に従って、高体温および低体温にかかりやすい。根本的には、体のコア温度の上昇後、少量の血液が乳頭状真皮の減少した毛管網状構造に供給され、よって冷却が減り、そして高体温を生じ得る。

逆に、低体温は、周囲温度が低下した時に体熱を保温するために皮膚から血液を有効に転換させることができないことに起因する。この問題は、高齢者に一般的に生じる断熱性皮下組織の欠乏によりさらに悪化する。

上記に簡単に記載した構造的変化に対抗するため、または単に皮膚の出現を一時的に増大させるための努力において、ヒトの皮膚を処置する目的で多数の調製物が開発されている。

そのような調製物の多くは、皮膚の給温、従って乾燥に対する皮膚の保護に向けられている。一般に、皮膚の老化を防ぐ目的の多数の化粧品が市場に存在し、それらは様々な種類の化合物、例えば生物抽出物、例えば胎盤抽出物、コラーゲン、ポリビタミン混合物、および必須脂肪酸を含有する。

し、かじながら、それらの化粧品は一般的に効果的でないため、構造的および外観的見地の両方から、皮膚をより健康にするだめの改良された組成物への要望が当業界に存在する。

ｌ貝９澗示簡単に言えば、本発明は、皮膚の健康を維持および改善するために有用である皮膚処置用および化粧用組成物に関する。

本発明の組成物は、一般に、有効量のＧＨＬ−Ｃｕ、または次の式：（上式中、Ｒは１〜１８個の炭素原子を含むアルキル成分、６〜１２個の炭素原子を含むアリール成分、１〜１８個の炭素原子を含むアルコキシ成分、および６〜１２個の炭素原子を含むアリールオキシ成分から成る群から選択されるか、またはＲはＬ−プロリル−し−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンもしくはＬ−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンである）を有するにＨ１，− Ｃｕ誘導体を含んで成る。好ましい態様によれば、アルコキシ成分の炭素部分は直鎖、例えばｎ−オクチル成分である。更に、アルコキシ成分の炭素部分は、ｎ −ステアリル成分またはｎ−バルミチル成分であることができる。

本発明の組成物は、それらの皮膚の健康促進性質のため、皮膚を軟らかく快的なみずみずしい外観にする顕著な美容効果を有する。

本発明の１つの観点によれば、温血動物において皮下脂肪を増加させる方法が開示される。この方法は、次の一般式を有するＧＨＬ−Ｃｕ誘導体を含んで成る組成物の有効量を動物に投与することを含んで成る：（上式中、Ｒは１〜１８個の炭素原子を含むアルキル成分、６〜１２個の炭素原子を含むアリール成分、１〜１８個の炭素原子を含むアルコキシ成分、および６〜１２個の炭素原子を含むアリールオキシ成分から成る群から選択されるか、またはＲはＬ−７”ロリルーし一バリルーし一フェニルアラニルーＬ−バリンもしくはＬ−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンである）。

本発明の別の観点によれば、皮膚の健康を改善および／または維持する方法が開示される。この方法は、ＧＨＬ−Ｃｕまたは次の一般式を有するＧＨＬ　−Ｃｕ誘導体を含んで成る組成物の有効量を皮膚に投与することを含んで成る：（上式中、Ｒは１〜１８個の炭素原子を含むアルキル成分、６〜１２個の炭素原子を含むアリール成分、１〜１８個の炭素原子を含むアルコキシ成分、および６〜１２個の炭素原子を含むアリールオキシ成分から成る群から選択されるか、またはＲはＬ−７”ロリルーし一バリルーし一フェニルアラニルーＬ−バリンもしくはＬ −バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンである）。

上記の誘導体に加えて、他の化学的修飾を行って本発明の誘導体の生物活性を変えることができる。例えば、ヒスチジル残基は、Ｎ　ｔ　ａ　ｕ−メチル−ヒスチジンまたは（３−メチル）−ヒスチジンの置換により修飾することができる。

また、グリシンは様々な別の小さいアミノ酸、例えばアラニン、セリンおよびバリンにより置き換えることができる。更に、分子の銅（ｎ）結合親和力は、グリシンのようなＮ−末端アミノ酸の付加により、グリシル−し−ヒスチジル−し− リジンをグリシル−Ｌ−グリシル−Ｌ−ヒスチジル−し−リジンに変換することにより増加させることができる。加えて、上記の誘導体にグリシンを付加し、対応するテトラペプチドを作ることができる。

本明細書中に記載の組成物は、皮肉注射または局所適用することができ、そして該組成物を皮肉注射または局所適用用に適合させる賦形剤と前記誘導体とを組合せることにより、本発明の目的での温血動物への投与に適当である。適当な局所製剤は、皮膚用のクリーム、ローション、スプレー、液体、本発明の他の観点は、下記の詳細な説明と添付図面を参照することにより明白になるだろう。

Ｍ皿■囚車星皮豆第１図は、図面の右側の方に示されるように、大きな皮下脂肪細胞の厚手領域の形成を示す生検切片標本の顕微鏡写真である。

第２図は、注射部位の近くの領域における皮下脂肪細胞層の形成を示す生検切片標本の顕微鏡写真である。

第３図は、対照領域（下）および本発明の代表的誘導体の使用から生じた増加した皮下脂肪細胞の領域（上）の顕微鏡写真である。

第４図は、本発明の代表的誘導体で処理された動物から採取した生検材料のアルカリホスファターゼ活性の増加を示す。

光泗Ｗ動λ膝胆上記に簡単に記載したように、皮膚の性質はヒトの老化と共に変化し、そして傷害に抵抗し且つ自己回復する能力は滅少する。皮膚は柔軟性および軟かさを失い、皮膚中のコラーゲンと皮下脂肪の損失のために薄くなり、荒れた表面となり、しばしば損傷した皮膚領域（「老化斑」）が集まり、そしてしわが多くなる。第１表は、ヒトの皮膚の老化の組織学的特徴を示す。

第−上−ｌ老化したヒト皮膚の組織学的特徴不定の厚さ　　　　　少ない繊維芽細胞　　脱毛時折の核異型性　　　少ないマスト細胞　　少ない原本明細書に記載のように、ＧＨＬ　−Ｃｕおよび様々なＧＨＪ、−Ｃｕ誘導体は、ヒトまたは他の温血動物の皮膚の健康を改善するために使用することができる。加えて、それらの誘導体は、脂肪溶解度を増加させるために、薬用および化粧用クリームおよびゲルの形成により有用である分子の形を生じるように製造することができる。

本発明の組成物は、部分的には、皮膚の防御および健康の維持において重要な細胞、例えばマクロファージ、単核細胞およびマスト細胞の潜在的生体内化学誘引剤として作用することにより、皮膚の健康を改善するために機能する。それらの白血球は、侵略性生物から皮膚を保護し、そして健康な皮膚細胞の維持において機能する増殖因子、例えば表皮増殖因子、繊維芽細胞増殖因子、血小板由来増殖因子および形質転換増殖因子を分泌する。

本発明の組成物は血管形成性であり、十分な血流を欠く高齢者の皮膚において新しい毛管の成長を誘導することができる。若者の皮膚の魅力的外観は、皮膚表面近くの毛管を通る大量の血流のためである。これは皮膚の色に赤味を与え、皮膚の魅力を増加させる。ヒトは老化すると、この赤味が減少し、血の気のない皮膚になる。

本発明の組成物は、おそらく皮膚に損傷を与える酸素ラジカルを解毒することにより作用する抗炎症作用と関連した、有意なスーパーオキシドジスムターゼ様活性も有する。

本発明の組成物は、更に、繊維芽細胞による主要な皮膚タンパク質であるコラーゲンの生産を刺激する。老人の皮膚のしわの多くは、皮膚のコラーゲン含量の減少のためである。

本発明の誘導体は、ヨーロッパ特許公開第２８８．２７８および１９０、７３６号並びに米国特許第４．６６５．０５４号中に詳細に記載されており、これらの文書は引用により本明細書中に組込まれる。本発明の誘導体は、ＧＨＬのカルボン酸末端のエステル化、水分子の除去、または基（アルコール、例えばオクタツール、メタノール、ベンジルアルコール、またはＮｆｈのいずれか）の付加により、親水性誘導体の形成をもたらすことにより調製することができる。これは、（１）カルボン酸基に関連した電荷の除去および（２）分子中への親水基の導入により、脂肪溶解度を増加させる。

この変換の化学反応は、次式により特徴づけることができる。

ＧＨＬ　　ＯＨ＋Ｒ＃−−−−−＝→ＧＨＬ　　Ｒ＋ＨｔＯ実際にこの反応は、他の２個のアミノ酸をリジンと結合させてＧＨＬを形成させる前に、アミノ酸リジンにＲ基を付加することにより最も容易に行われる。ＧＨＬ　−Ｈの形成および単離後、この分子に銅（ＩＩ）をキレート化して生物活性錯体を形成させる。

ＧＨＬ　−Ｃｕ親水性誘導体を形成する全反応は、次のように特徴づけることができる。

１）リジン−ＯＨ＋　ＲＨ−・−−−−−リジン−Ｒ＋ＬＯ２）リジン−Ｒ十保護し一ヒスチジンー・−→　保ＩＬ−ヒスチジジーＬ−リジン−Ｒ３）保ｉＬ−ヒスチジン−し一すジジーＲ十保護グリシン・・・−・・−保護グリシル−Ｌ−ヒスチジン−し− リジン−Ｒ４）　保ｉクリシルーＬ−ヒスチジン−し一すジジーＲ−−−−−− −　グリシル−し−ヒスチジン−し−リジン−Ｒ５）グリシル−し−ヒスチジン −し−リジン−Ｒ十銅（ＩＩ）−一一一〜・−◆　グリシル−Ｌ−ヒスチジン− し−リジン−Ｒ：銅（ＩＩ）好ましい態様によれば、ＧＨＬ誘導体と銅は１：１または２：１の比で存在する。

本発明の誘導体は、少なくとも３つの主要領域において臨床用途を有する：　（１）皮膚の健康を改善および／または維持すること、（２）皮下脂肪含量を増加させること、および（３）一般的な化粧用途。それらの化粧用途としては、次のものが挙げられる＝　（ａ）皮膚の軟かさと柔軟性を改善すること、（ｂ）皮膚の厚さを増加させそしてしわを減らすこと、（ｃ）老化斑を減少させること、（ｄ）皮膚の小節および丘疹を減少させること、および（ｅ）皮膚表面から微出血および点状出血を無くすこと。

本発明によれば、処置すべき領域の中心に、０．１　ｄの賦形剤あたり約５０ｎの濃度において、適当な賦形剤と共に本明細書に記載の誘導体を皮肉または局所投与することが通常好ましい。処置すべき領域１ｄあたり約９■の用量を用いることが好ましいが、９　ｔａｒ　／　ｃｔＡより多く約４０ｘ／ｃ４までの用量を用いてもよい。この点で適当な賦形剤としては塩溶液が挙げられる。クリームまたはゲルの形態で使用しそして局所適用する場合には、組成物に適当な浸透剤、例えばＤＭＳＯ（米国特許第３，５２７，８６４号）またはオイカリプトール（米国特許第４、５６０．５５３号）を添加することが好ましい。化粧用途における使用に適当な賦形剤は、当業者に明白であろう。

局所適用のためには、本発明の組成物は皮膚用クリーム、ゲル、ミルク、ローションまたはオイルの形態であることができる。更に、該組成物は、顔および首への適用に適合した適当な賦形剤と組合せることができる。適当な賦形剤は、皮膚に対して高い親和性を有し、寛容性であり、安定であり、そして容易で且つ好ましい使用を可能にする適度な濃度を与えるべきである。この点で適当な賦形剤の例としては、イソプロピルミリステート、グリセロールステアレート、スィートアーモンド油および多価アルコール（それぞれ、１００戚の蒸留水につき５ｇ、１５ｇ、６ｇおよび５ｇ）である。

製剤の質感、濃度、粘度および外観を変えるために、当業者の取り決めに従って追加の成分を添加することができる。

それらの追加の成分としては、乳化剤、例えば非イオン性エトキシル化および非エトキシル化界面活性剤、脂肪アルコール、脂肪酸、有機または無機塩基、防腐剤、ワックスエステル、ステロイドアルコール、トリグリセリドエステル、リン脂質、例えばレシチンおよびセファリン、多価アルコールエステル、脂肪アルコールエーテル、親水性ラノリン誘導体、親水性ミツロウ誘導体、炭化水素油、例えばパーム油、ヤシ油、鉱油、カカオ脂ワックス、シリコーン油、ｐＨ１Ｊｌ整剤並びにセルロース誘導体が挙げられる。

本発明の組成物は、少量の日射防止剤または遮光剤、例えばＵ　Ｖ−ＡおよびＵＶ−Ｂ照射防止剤、例えばヒドロキシ−２−メトキシ−４−ベンゾフェノン、およびジメｉ・キシ−３゜４−フェニルグリオキシル酸ナトリウム塩が挙げられる。本発明の組成物は、皮膚の水分補給に好ましい湿潤剤、例えば尿素、ピロリドンカルボン酸およびその塩、ビタミンエキス、香料、防腐剤並びに着色剤を更に含むことができる。

下記に記載の実施例を要約すると、実施例■はグリシル−し−ヒスチジル−し− リジンベンジルエステル：銅（ｎ）の合成を説明する。実施例■はグリシル−Ｌ −ヒスチジル−し−リジンｎ−オクチルエステル：＆Ｍ（ＩＴ）の合成を説明する。

実施例■は（Ａ）グリシル−し−ヒスチジル−し−リジンｎ−ステアリルエステル：銅（ＩＩ）の合成、および（Ｂ）別法によるそれの合成を説明する。いずれかの方法に基づいて、当業者はｎ−ステアリルアルコール（炭素数１８）の代わりにｎ−バルミチルアルコール（炭素数１６）を用いてグリシル−Ｌ−ヒスチジル−し−リジンｎ−ステアリルエステル：銅（ＩＩ）を得ることができる。実施例■はグリシル−し−ヒスチジル−し−リジル−し−プロリル−し−バリル−Ｌ −フェニルアラニル−Ｌ−バリン：銅（■）、およびグリシル−し−ヒスチジル −し−リジル−し−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリン：銅（ｎ）の合成を説明する。実施例Ｖ。

■および■は、皮下脂肪層の形成を刺激または増加させるための本発明の様りな誘導体の使用を証明する。実施例■は、皮膚表面からの微出血の除去における本発明の代表的組成物の使用を証明する。実施例■は、皮膚小節を減少させることにおける本発明の代表的組成物の使用を証明する。実施例Ｘは、しわの深さを減少させるための本発明の代表的組成物の使用を証明する。実施例ＸＩは、湿疹様表面により特徴づけられる皮膚を処置するための本発明の代表的組成物の使用を証明する。実施例Ｘ■は、老化斑を減少させるための本発明の代表的組成物の使用を証明する。実施例Ｘ■は、丘疹の処置における本発明の代表的組成物の使用を証明する。実施例ＸＩＶは、グリシル−Ｎ　ｔ　ａ″′−メチル−Ｌ−ヒスチジル−し−リジンの合成を説明する。実施例Ｘ■は、若齢ブタにおける血管形成およびコラーゲン合成を刺激するためのグリシル−（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−し−リジン：銅（ｎ）の使用を証明する。実施例ＸＶＩは、温血動物における真皮、表皮および内皮成分の厚さを増加させるためのグリシル−Ｌ−ヒスチジル−し−リジン：銅（■）、グリシル−（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−１５−リジン：銅（■）、およびグリシル−し−ヒスチジル−し−リジル−し−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリン：銅（ＩＩ）の使用を説明する。実施例Ｘ■は、グリシル−（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−し−リジン：銅（Ｉｔ）を含有するクリームで処置された被検者における乳頭状および網状真皮の変化を説明する。実施例Ｘ■は、グリシル−（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−し− リジン、銅（ＩＩ）を含有するクリームで処置されたヒト表皮における細胞交替速度の増加を説明する。

次の実施例は例示の目的で与えられ、決して限定のためではない。

尖−施一孤化、−Ｗ入王蓬　下記実施例において使用する化学物質およびペプチド中間体は、次の供給者から購入することかできる：　Ｓｉｇ＋＋＋ａ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ、　（Ｓｔ、　Ｌｏｕｉｓ、　Ｍｏ、）；　Ｐｅｎ１ｎｓｕｌａＬａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ　（Ｓａｎ　Ｃａｒｌｏｓ、　Ｃａ１ｉｆ、）；　Ａｌｄｒｉｄｇｅ　ＣｈｅｍｉｃａｌＣｏ、　（Ｍｉｌｗａｕｋｅｅ、　Ｗｉｓ、）；　Ｖｅｇａ　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ　（Ｔｕｃｓｏｎ、　Ａｒ１ｚ、）；Ｐｉｅｒｃｅ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ　Ｃｏ、　（Ｒｏｃｋ　ｆｏｒｄ＋　Ｉｌｌ、）；　ＲｅｓｅａｒｃｈＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌｓ　（Ｃ１ｅｖｅｌａｎｄ、　０ｈｉｏ）；　Ｖａｎ　Ｗａｔｅｒｓ　ａｎｄ　Ｒｏｇｅｒｓ（Ｓｏｕｔｈ　Ｓａｎ　Ｆｒａｎｃｉｓｃｏ、　Ｃａ１ｉｆ、）；　Ｂａｃｂｅ＊、　Ｉｎｃ、　（Ｔｏｒｒａｎｃｅ。

Ｃａ１ｉｆ、）　　。

亥ＩＬ−１グリシル−し−ヒスチジル−し−リジンベンジルエステル＝ｍｌ工り坐豆底ヘキサン／酢酸エチル（１：１）中にＮ２−ベンジルオキシカルボニル−Ｌ−リジンベンジルエステルを溶解し、そしてカップリング剤としてジシクロへキシルカルボジイミドを使ってＮ”　−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎ　ｉ　ＩＩ− ベンジルオキシカルボニル−し−ヒスチジンにカップリングさせた。

炭酸水素ナトリウム（１０％）を添加し、そして有機相中に生成物を抽出した。

生成物Ｎ′″−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎ　１　ｍ−ベンジルオキシカルボニル−し−ヒスチジル−Ｎ”−ベンジルオキシカルボニル−し−リジンベンジルエステルを溶液から結晶化させた。ジクロロメタン中の５０％トリフルオロ酢酸中で３０分間撹拌することにより、保護ジペプチドのＮ−末端基を除去し、次いで減圧蒸発せしめた。生成物Ｎ　ｕｓ−ベンジルオキシカルボニル−し−ヒスチジル−Ｎ”−ベンゾイルカルボニル−し−リジンベンジルエステルを、カップリング剤としてジシクロへキシルカルボジイミドを用いてベンジルオキシカルボニルグリシンにカップリングさせた。氷酢酸中での１０％パラジウム／炭素を使った接触水添により、保護基を除去した。凍結乾燥後、生成物であるグリシル− し−ヒスチジル−し−リジンベンジルエステルを水に溶かし、Ｄｏｗｅｘ　５０Ｘ　４カチオン交換樹脂上でのイオン交換クロマトグラフィーおよびＯ，ｌ　Ｍ水酸化アンモニウムでの溶出により精製し、溶出液を酢酸で即座に中和した。中性ｐＨにおけるアニオン交換カラムＢｉｏＲｅｘ　６３に更に通過させることにより、遊離カルボン酸基を有する分解生成物を除去した。

グリシル−し−ヒスチジル−し−リジンベンジルエステルを水に溶解し、等モル量の酢酸銅を添加した。水酸化ナトリウムでｐＨを中性まで上げた。溶液を２０．０００Ｘ　ｇで３℃にて１時間遠心し、不溶性物質を除去した。上清を凍結乾燥し、グリシル−し−ヒスチジル−し−リジンベンジルエステル：銅（ｎ）を得た。

犬上班−エグリシル−し−ヒスチジル−Ｌ−リジンｎ−オクチ／ｌ、ｚｌＸｊル：　　■　のム。

Ｎ”−ベンジルオキシカルボニル−し−リジン、ｎ−オクタツール、ベンゼンおよびｐ−）ルエンスルホン酸−水和物の混合物を、水分除去のためＤｅａｎ−５ｔａｒｋ　）ラップを用いて一晩還流させた。冷却後、乾燥エチルエーテルを添加した。次に溶液を０°Ｃで一晩沈澱させた。沈澱した固体の部分を５０ｍ１の炭酸カリウム溶液と５０ｄのジクロロメタンに添加した。抽出後、層を分離し、有機相を水およびブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウム上で乾燥した。濾過、蒸発およびフラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製により、Ｎ”−ベンジルオキシカルボニル−し−リジンｎ−オクチルエステルを得た。この生成物をテトラヒドロフラン中に溶解し、そしてＮ”−ｔ−７’チルオキシカルボニル −し−Ｎ１ｍ−ベンジルオキシカルボニル−し−ヒスチジン、イソブチルクロロホルメートおよびＮ−メチルモルホリンと混合した。蒸発後、水と酢酸エチルを添加した。生成物を有機相中に抽出し、有機相を無水硫酸マグネシウム上で乾燥した。濾過、蒸発およびフラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製により、Ｎ’−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎｉ１１−ベンジルオキシカルボニル− し−ヒスチジル−Ｎ”−ベンジルオキシカルボニル−し−リジンｎ−オクチルエステルを得た。

この生成物をジクロロメタン中の５０％トリフルオロ酢酸中に３０分間溶解し、次いで蒸発してＮ−１−ベンジルオキシカルボニル−１５−ヒスチジル−Ｎｏ− ペンジルオキンカルボニルーＬ−リジンｎ−オクチルエステルを得た。これをテトラヒドロフラン中に溶解し、そしてイソブチルクロロホルメート、Ｎ−メチルモルホリンおよびベンジルオキシカルボニルグリシンを添加し、ベンジルオキシカルボニルグリシル−Ｎ　Ｉ　Ｍ−ベンジルオキシカルボニル−し−ヒスチジル −Ｎ”−ベンジルオキシカルボニル−し−リジンｎ−オクチルエステルを形成させた。これを氷酢酸に溶解し、そして−晩水素化した。

生じたグリシル−し−ヒスチジル−し−リジンｎ−オクチルエステルを、等モル量の酢酸第二銅の添加により、銅錯体に変換した。水酸化ナトリウムでｐ［（を中性に上げた。溶液を２０．０ＯＯＸ　ｇで３°Ｃにて１時間遠心し、不溶性物質を除去した。

上清を凍結乾燥し、グリシル−し−ヒスチジル−Ｌ−リジンｎ−オクチルエステル：Ｆ（ＩＩ）を得た。

スＩＬ−皿Ａ、グリシル−し−ヒスチジル−し−リジンｎ−ステアリルエステル：　　（■ 　のＡＮＩＩ−ベンジルオキシカルボニル−し−リジン、ｎ−ステアリルアルコール、ベンゼンおよびｐ−）ルエンスルホン酸−水和物の混合物を、水分除去のためＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋ　）ラップを使って一晩還流させた。冷却後、乾燥プロピルエーテルを添加し、全量を６倍増加させた。生成物をＯ″Ｃで一晩沈澱させ、濾過した。濾液の部分を５０ｄの炭酸カリウム溶液と５０ｄのジクロロメタンに添加した。蒸発後、層を分離し、有機相を水とブラインで洗浄し、次いで無水硫酸マグネシウムで乾燥した。濾過、蒸発およびフラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製により、Ｎ”−ベンジルオキシカルボニル−１，−リジンｎ−ステアリルエステルを得た。この生成物をテｔ・ラヒドロフラン中に溶解し、そしてＮ’　−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎ　ｉ　ｗｍ−ベンジルオキシカルボニル−し−ヒスチジン、イソブチルクロロホルメートおよびＮ−メチルモルホリンと混合した。蒸発後、水と酢酸プロピルを添加した。生成物を有機相中に抽出し、有機相を無水硫酸マグネシウム上で乾燥した。濾過、蒸発およびフラッシュカラムクロマトグラフィーによる精製により、Ｎ”　−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎ■−ベンジルオキシカルボニル−し−ヒスチジル−Ｎ’−ベンジルオキシカルボニル−し−リジンｎ−ステアリルエステルを得た。

この生成物をジクロロメタン中の５０％トリフルオロ酢酸中に３０分間溶解し、次いで蒸発してＮ　ｉｓ−ベンジルオキシカルボニル−し−ヒスチジル−Ｎ”− ベンジルオキシカルボニル−し−リジンｎ−ステアリルエステルを得た。これをテトラヒドロフラン中に溶解し、そしてイソブチルクロロホルメート、Ｎ−メチルモルホリンおよびベンジルオキシカルボニルグリシンを添加し、ベンジルオキシカルボニルグリシル−Ｎ　ｉ　ａ−ベンジルオキシカルボニル−し−ヒスチジル−Ｎ”−ベンジルオキシカルボニル−し−リジンｎ−ステアリルエステルを形成させた。この生成物をジクロロメタン中の５０％トリフルオロ酢酸中に３０分間溶解し、次いで蒸発せしめ、グリシル−し−ヒスチジル−し−リジンｎ−ステアリルエステルヲ形成せしめた。

生じたグリシル−し−ヒスチジル−し−リジンｎ−ステアリルエステルを、等モル量の酢酸第二銅の添加により、銅錯体に変換した。水酸化ナトリウムでｐＨを中性に上げ、動物実験に有用な生成物を得た。

ｎ−ステアリルアルコールの代わりにｎ−パルミチルアルコールを用いることにより、同様にしてグリシル−し−ヒスチジル−し−リジンｎ一式ルミチルエステルを合成することＮ（ε）−ベンジルオキシカルボニル−し−リジン、ｎ−ステアリルアルコール、Ｐ−トルエンスルホン酸−水和物およびベンゼンの混合物を、生成する水を共沸により除去するためにＤｅａｎ−Ｓｔａｒｋ　）ラップを使って一緒に還流させた。室温まで冷却し、そして乾燥エチルエーテルを添加した後、濾過によりＮ（ε）−ベンジルオキシカルボニル−し−リジンｎ−ステアリルエステルＰ−トルエンスルホン酸塩を集め、２Ｍ炭酸水素カリウム水溶液で処理し、そしてジクロロメタン中に抽出した。蒸発により遊離アミンを得、これを乾燥テトラヒドロフラン中に再溶解し、そして−１５°Ｃにおいて乾燥ＴＨＦ中のＮ（α）−１−ブチルオキシカルボニル−Ｎ（ｆｍ）−ベンジルオキシカルボニル−し−ヒスチジン、Ｎ−メチルモルホリンおよびイソブチルクロロホルメートの撹拌溶液に添加した。生成した完全に保護されたジペプチドエステルを室温でトリフルオロ酢酸／ジクロロメタン（１：　１）で処理し、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で中和し、そして酢酸エチル中に抽出した。蒸発後、部分的に脱保護されたジペプチドを乾燥ＴＨＦ中に再溶解し、そして−１５°Ｃにおいて乾燥ＴＨＦ中のベンジルオキシカルボニルグリシン、Ｎ−メチルモルホリンおよびイソブチルクロロホルメートの撹拌溶液に添加した。生成した完全に保護されたトリペプチドエステルを、Ｐｄ−Ｃ触媒の存在下において室温にて氷酢酸中での水素ガスでの処理により、全部脱保護した。濾過、蒸発および微結晶セルロースカラム上での精製に次いで凍結乾燥により、三酢酸塩として所望のトリペプチドエステルを得た。

生成した分子グリシル−し−ヒスチジル−し−リジンｎ　−ステアリルエステルを、等モル量の酢酸第二銅の添加により銅錯体に変換した。水酸化ナトリウムでｐＨを中性まで上げ、動物実験に有用な生成物を得た。

ｎ−ステアリルアルコールの代わりにｎ−パルミチルアルコールを用いることにより、同様にしてグリシル−し−ヒスチジル−し−リジンｎ一式ルミチルエステルを合成することそれらのペプチドは、ペプチド分野においてよく知られている標準的な固相法（Ｊ、　ＳｔｅｗａｒｔおよびＪ、　Ｙｏｕｎｇ、　５ｏｌｉｄＰｈａｓｅ　Ｐｅ　ｔｉｄｅ　Ｓ　ｎｔｈｅｓｉｓ＋　Ｐｉｅｒｃｅ　Ｃｈｅ＋ｗｉｃａｌ　Ｃｏ、＋　１９８４）により合成する。略述すると、Ｂｏｃ−Ｖａｌ−０−樹脂に、反応試薬としてジシクロへキシルカルボジイミドを使って他のアミノ酸を順次カップリングさせた。保護アミノ酸、固相合成用樹脂およびカップリング試薬は、Ｐｅｎ１ｎｓｕｌａ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ＋　５ａｎＣａｒｌｏｓ、　Ｃａ１ｉｆｏｒｎｉａから入手した。保護アミノ酸を順番に添加して所望のペプチドを得た。フン化水素を使って最終ペプチドを脱保護した。これを０．５％酢酸中に溶解し、そしてセファデックスＧ−１５カラム（Ｐｈａｒｍａｃｉ訝モ通過により精製した。等モル量の酢酸銅の添加、次いで凍結乾燥により、活性分子を得た。

実施斑−茎２　　の７　を　　させるためのグリシル−し−ヒスチジル−し−リジンｎ−オクチルエステルの５０１１ｇのグリシル−し−ヒスチジル−し−リジンｎ−オクチルエステルの一回量を８匹のマウスの皮下に浸潤させた。皮下脂肪の増加量を観察した。

別の実験シリーズにおいて、マウスあたり５００１ｔｇの用量でグリシル−Ｌ− ヒスチジル−Ｌ−リジンｎ−オクチルエステル：ＧＲ（ｎ）をマウスに１回注射した。

投与領域において、皮下脂肪層の厚さが有意に増加した。

この皮下脂肪の増加は、該領域から２１日ロー生検試料を取りそして組織学的標本のために切片化することにより証明される。第１図は、脂肪層の増加を示す。

注射領域は写真の右側でありそして近隣の非注射領域は左側である。脂肪細胞の数と大きさの両方が増加した。測定は、注射部位付近の皮膚において皮下脂肪層が約３倍増加したことを証明する。

２五五−■ ８　　のノ　を刺゛するためのグリシル−し−ヒスチジル−し−リジン−゛シルエステルＪ　　−Ｌ房侠亙１０匹のマウスのグループにマウスあたり５００■の用量のグリシル−し−ヒスチジル−し−リジンデシルエステル：銅（ｎ）を１回注射した。顕微鏡検査は、注射部位の周囲の領域における脂肪細胞層の増加の証拠を与えた。第２図は、注射領域における皮下脂肪層の顕著な増加を示す。注射部位から離れた皮膚の検査は、正常な組織学を示した。

災施開−匪ｆｆｉの多　を　　させるためのグリシル−Ｌ−ヒスチジル−し−リジンバルミチルエステ／Ｌ＝　：　　　（ＩＩ　）　（朋１０匹のマウスのグループにマウスあたり５００ｊｔｇの用量のグリシル−し−ヒスチジル−Ｌ−リジンパルミチルエステル：銅（ｎ）を１回注射した。注射領域からの組織切片は、実施例■に記載のものと同様であった。第３図は、グリシル−し−ヒスチジル−し−リジンデシルエステル：Ｃｕ注射後に見られたものと同様に、皮下脂肪層の増加を証明する写真である。

実１１Ｙ！Ｌ８２才の女性は、荒れた皮膚表面の下に真赤な微出血斑が散在したパターンにより覆われた皮膚を有していた。１ｇあたり４■のＧＨＬ　−Ｃｕを含有する軟膏（９７％Ｕｎｉｂａｓｅおよび３％ｎｏｎｏｘｙｎｏｌ−９）の９日間１日１回の適用は、赤い斑点の完全な除去および改善された皮膚の外観をもたらした。

１施曇−■ ７３才の女性は、赤く盛り上がった多数の小さな小節（丘疹よりわずかに小さい）のある皮膚を有してした。実施例■で使用した軟膏での処置は、１０日以内に顕著な小節の減少をもたらした。２０日後までに、皮膚は完全にきれいになり、滑らかで健康で且つ魅力的な外観になった。

災施貫−入深いしわで覆われた皮膚を有する７２才の女性において、実施例■で使用したクリームを最初の５日間は１日１回、次の２３日間は１日おきに適用すると、しわの深さが明らかに減り、そしてより滑らかな皮膚の外観を与えた。

スｌ側［−１上７７オの女性は、落屑性湿疹様表面で覆われた皮膚を有していた。実施例■で使用した軟膏で最初の５日間は１日１回、次の４０日間は１日おきに処置すると、落屑性皮膚が脱は落ち、そして新しいより美しい皮膚の層により置き換わった。

災１班−人工毛がなくそして多数の色素斑（「老化斑」）を有する４８才の男性を、Ｉｇあたり４■のＧＨＬ　−Ｃｕオクチルを含有する軟膏（９４％Ｕｎｉｂａｓｅおよび６％ジメチルスルホキシドから成る）で彼の頭の上を処置した。処置の開始から３０日後、老化斑の数の顕著な減少および残りの斑の大きさの減少が認められた。

頭を覆っている皮膚は著しく軟らかな怒触となり、そしてより厚みを増した。

災施皿−久１４０才の男性は、多数の丘疹を有する荒れた皮膚を有していた。実施例■で使用した軟膏での５日間の１日１回の処置は、皮膚をきれいにし、そして丘疹の大きさを減らした。処置の開始から８日後、丘疹は完全に無（なり、きれいで魅力的な皮膚表面になった。

裏庭■−人Ｎグリシル−Ｎｔ″Ｕ−メチル−Ｌ−ヒスチジル−し−リジンの主成Ｎ”−ベンジルオキシカルボニル−し−リジンベンジルエステル塩酸塩をテトラヒドロフラン（ＴＨＦ）中に懸濁し、そして１当量のＮ−メチルモルホリンで中和した。次いでＴＨＦ中のイソブチルクロロホルメートとＮ−メチルモルホリンを使って、それをＮ”　−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎ　ｔ　ａ　ａ−メチル−Ｌ−ヒスチジンとカップリングさせた。−２０°Ｃで２時間および室温で更に１時間後、反応液を２Ｎ水性炭酸水素カリウムでクエンチングした。生成物を酢酸エチル中に抽出し、１Ｍ水性クエン酸および飽和炭酸水素ナトリウムで洗浄した。有機相を無水硫酸ナトリウム上で乾燥した。濾過および蒸発後、Ｎ”　− ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｎ　Ｌ　ｍ　ＩＩ−メチル−Ｌ−ヒスチジル−Ｎ ”−ベンジルオキシカルボニル−し−リジンベンジルエステルを得た。

この生成物をジクロロメタン中の３０％トリフルオロ酢酸中に３０分間溶解し、次いで蒸発せしめ、Ｎ　ｔ＋″馴−メチル−Ｌ−ヒスチジル−Ｎｍ−ベンジルオキシカルボニル−し−リジンベンジルエステルを形成させた。これをテトラヒドロフラン中に溶解し、そしてイソブチルクロロホルメート、Ｎ−メチルモルホリンおよびベンジルオキシカルボニルグリシンを添加し、ベンジルオキシカルボニルグリシル−Ｎ　ｔ　ａ　ｕ−メチル−Ｌ−ヒスチジル−Ｎ”−ベンジルオキシカルボニル−し−リジンベンジルエステルを形成させた。この生成物を次いで酢酸中に溶かし、１０％Ｐｄ　−Ｃ触媒の存在下で一晩水素化した。生じたグリシル−Ｎ　ｔ　ａ　ａ−メチル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−リジンを水から数回凍結乾燥し、次いでＣ−１８逆相カラム上での液体クロマトグラフィーにより精製すると、二酢酸塩として所望のトリペプチドが得られた。

ス１」［−泣兄典型的実験において、若齢ブタを１２日間１日１回、グリシル−（３−メチル） −Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−リジン：銅（ｎ）を含むクリームまたはブラシーボーリームで局所処置した。

０ローと１２日ローパンチ生検材料（直径６ｍｍ）を採取した。

この生検材料を、全湿潤重量、アルカリホスファターゼ、全タンパク質およびヒドロキシプロリン含量について分析した。

アルカリホスファターゼは、毛管内皮細胞についての酵素マーカーであり、新車管形成の指標である。ヒドロキシプロリンはコラーゲンの成分であり、ヒドロキシプロリン含量の増加はコラーゲン含量の増加を示す。パンチ生検材料は、基本的にはＣｏｕｎｔｓらの方法（Ｄ、　Ｃｏｕｎｔｓ、　Ｐ、　ＫｎｉｇｈｔｅｎおよびＧ、　Ｈｅｇｒｅｂｅｒｇ、　　Ｊ、　Ｉｎｖｅｓｔ、　Ｄｅｒｍ、　６９：５２１−２６．１９７７）により、生化学的分析用に調製した。

第一の実験において、グリシル−（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−し−リジン：Ｃｕ（ＩＩ）で処置された皮膚から取った生検材料において、ブラシーボ処置領域に比較したアルカリホスファターゼ活性およびヒドロキシプロリン含量の増加を１２日ロー検出した。この実験の結果を第２表に示す。

】−」し−表ブタ皮膚生検材料のコラーゲン含量および血管形成活性対照３．２±０．２　　　　０．０１０±０．００１第二の実験において得られた結果を、第４図にグラフにより示す。この実験では、０．１０および１３日ローブタから生検材料を採取し、そしてアルカリホスファターゼ活性について分析した。グリシル−（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−し−リジン：銅（ｎ）で処置された領域から取った生検材料は、ブラシーボクリームで処置された領域に比較して増加したアルカリホスファターゼを有する。

３１匹の５ｗ１ｓｓ−Ｗｅｂｓｔｅｒ雌マウス（平均年齢：１８ケ月）からの皮膚を、ブラシーボーおよびペプチド−含有クリームの数回通用後、皮膚構造の変化の証拠について組織学的に評価した。１００倍の接眼鏡を使って、真皮、表皮および内皮の厚さの測定を行った。

マウスの体毛を短く刈ることにより脱毛し、そして０，１゜３．４および５日目にグリシル−し−ヒスチジル−Ｌ−リジ７：銅（ＩＩ）、代表的誘導体であるグリシル−（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−し−リジン：銅（ｎ）もしくはグリシル−Ｌ−ヒスチジル−し−リジル−し−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ− バリン：銅（■）、またはプラシーボクリームのいずれかで処置した（ｎ＝５／グループ）。各グループからの個々の動物において、６．１０．Ｉ２および１４４日目生検を行った。加えて、１１匹の未処置のマウスにおいて０日目に生検を行った。

クリーム製剤での処置は、真皮、表皮および内皮成分の厚さの測定可能な増加を引き起こした。６日目には、クリームで処置された全てのマウス（ブラシーボクリームで処置されたマウスを含む）において表皮層が約１３−から約４２廂まで増加した。１４４日目でに、ブラシーボにおける表皮の厚さの増加作用は逆転し、未処置の対照とほぼ同じになった。しかしながら、グリシル−Ｌ〜ヒスチジル −し−リジル−し−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリン：銅（Ｕ）またはグリシル−（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−し−リジン：銅（Ｕ）を含有するクリームで処置されたマウスは、増加した表皮の厚さを維持した。

ス１」［−ん■ 表皮および真皮における代表的組成物グリシル−（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−し−リジン：銅（■）（活性物質）の効果を、超音波により評価した。超音波法は、２０メガヘルツの高周波数を用いて、皮膚の反響信号を生じさせる。この信号を処理して、反響信号の強度により皮膚の構造に関連づけられる皮膚の図示を作成する。

グリシル−（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−リジン：銅（ｎ）を含有する局所クリームまたは対照クリームを、平均年齢３１．７オの１０人の女性被検者の前腕の表面に３週間の間１日２回適用した。各クリームごとに任意形式で右側および左側の両方を使った。１，７．１４および２１１日目被検者を超音波スキャンにより評価した。

超音波により測定した時の処置後の真皮密度を次の採点法：変化なし＝０、わずかな変化＝１、中程度の変化−２、および顕著な変化＝３、において評価した。

クリーム士活性物質で処置された１０人の女性では平均密度得点は１．７であり、一方ブラシーボクリームのみの平均得点は０．７であった。この差はｐ　＝０．０２９の確率で有意である。

細胞交替の速度は、染色層からのダンシルクロリドのクリアランスの日数により測定される。平均年齢が５０．４　（±３）才である７人の女性被検者を研究に使った。各被検者を、上腕の内側の４部位において石油中３％ダンシルクロリドで処理した。各腕の１部位は未処置の対照として働き、そして他の部位は処置部位として働いた。上腕の左か右かについて、および近位領域か遠位領域かについて、コンピューターにより部位を無作為化した。２４時間吸藏後、部位を暴露したまま、ダンシルクロリドの蛍光について紫外光下で撮影した。この写真を１日目とした。ダンシルクロリド色素の最終的消失により決定した時、全ての被検者が実験を終えるまで、次の４週間に渡り写真を撮影した。次に、代表的組成物であるグリシル−（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−し−リジン：銅（ＩＩ）を含有する局所クリームまたは対照クリームで部位を毎日処置した。クリームで処置された部位からのダンシル色素の完全消失に要する日数を、対応する未処置の部位と比較した。

グリシル−（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−し−リジン：銅（ＩＩ）を含有する局所クリームで処置された皮膚部位において、平均皮膚交替速度が３０．０％増加した。対して、ブラシーボクリームは皮膚部位においてわずか１７．７％交替を増加させただけであった。この差は、グリシル−（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−リジン：銅（ＩＩ）での処置により、細胞交替の速度が増加したことを示す。

今まで本発明の特定態様を例示の目的で記載してきたけれども、本発明の精神および範囲から逸脱することなく様々な変更を行い得ることは明らかであろう。従って、本発明は、添付の請求の範囲による以外には決し゛で限定されない。

ｊ￥１し刀りげ、スフパービ°の漕カロ補正書の翻訳文提出書（特許法第１８４条の８）平成２年１２月１７日特許庁長官　植　松　　　敏　殿１　特許出願の表示ＰＣＴ／ＵＳ８９１０２５９０２　発明の名称化粧用および皮膚処置用組成物３　特許出願人浄書（内容に変更なし）請求の範囲１、化粧用および皮膚科学的に許容される担体または希釈剤と共に、ＧＨＬ　　Ｃｕまたは次の一般式を有するＧＨＬ　−Ｃｕ誘導体：〔グリシル−し−ヒスチジル−し−リジン−Ｒ〕　：銅（ＩＩ＞（上式中、Ｒは、１〜１８個の炭素原子を含むアルキル成分、６〜１２個の炭素原子を含む了り −ル成分、１〜１８個の炭素原子を含むアルコキシ成分、および６〜１２個の炭素原子を含むアリールオキシ成分から成る群から選択されるか、またはＲはＬ− プロリル−し−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンもしくはＬ−バリル −Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンである）を含んで成る、皮膚処置用組成物。

２、前記アルコキシ成分の炭素部分が直鎖である、請求項１に記載の組成物。

３、　前記直鎖がｎ−オクチル成分である、請求項２に記載の組成物。

４、前記アルコキシ成分の炭素部分がｎ−ステアリル成分である、請求項１に記載の組成物。

５、前記アルコキシ成分の炭素部分がｎ−パルミチル成分である、請求項１に記載の組成物。

６、前記アリールオキシ成分の炭素部分がベンジル成分である、請求項１に記載の組成物。

７、化粧用および皮膚科学的に許容される担体または希釈剤と共に、次の一般式を有するＧＨＬ　−Ｃｕ誘導体：〔グリシル−（３−メチル）−Ｉ、−ヒスチジル−し−リジン−Ｒ〕：銅（ｎ）（上式中、Ｒは、１〜１８個の炭素原子を含むアルキル成分、６〜１２個の炭素原子を含むアリール成分、１〜１８個の炭素原子を含むアルコキシ成分、および６〜１２個の炭素原子を含むアリールオキシ成分から成る群から選択されるか、またはＲはＬ−プロリル−し−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンもしくはＬ−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンである）を含んで成る皮膚処置組成物。

８、化粧用および皮膚科学的に許容される担体または希釈剤と共に、グリシル− （３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−し−リジン：銅（ｎ）を含んで成る皮膚処置用組成物。

９、　温血動物において皮下脂肪を増加させる方法において使用される、グリシル−（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−し−リジン：６Ｍ（ｎ）を含んで成る組成物。

１０、皮膚の真皮、表皮および内皮成分の厚さを増加させる方法において使用される、次の一般式を有するＧＨＬ　−Ｃｕ誘導体二〔グリシル−し−ヒスチジル−し−リジン−Ｒ〕　：銅（ｆｆ）（上式中、Ｒは、１〜１８個の炭素原子を含むアルキル成分、６〜１２個の炭素原子を含むアリール成分、１〜１８個の炭素原子を含むアルコキシ成分、および６〜１２個の炭素原子を含むアリールオキシ成分から成る群から選択されるか、またはＲはＬ− プロリル−し−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンｔ、Ｌ＜はＬ−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンである）を含んで成る組成物。

１１、皮膚の真皮、表皮および内皮成分の厚さを増加させる方法において使用される、グリシル−（３−メチル）　−Ｌ−ヒスチジル−し−リジン：銅（ＩＩ）を含んで成る組成物。

１２、皮膚の真皮密度を増加させる方法において使用される、次の一般式を有するＧＨＬ　−Ｃｕ誘導体：〔グリシル−し−ヒスチジル−し−リジン−Ｒ〕　：銅（ＩＩ）（上式中、Ｒは、１〜１８個の炭素原子を含むアルキル成分、６〜１２個の炭素原子を含むアリール成分、１〜１８個の炭素原子を含むアルコキシ成分、および６〜１２個の炭素原子を含むアリールオキシ成分から成る群から選択されるか、またはＲはＬ−プロリル−し−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ− バリンモジ＜はＬ−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンである）を含んで成る組成物。

１３、皮膚の真皮密度を増加させる方法において使用される、グリシル−（３− メチル）−Ｌ−ヒスチジル−し−リジン：銅（Ｉｒ）を含んで成る組成物。

１４、ヒトの表皮中の細胞交替速度を増加させる方法において使用される、次の一般式を有するＧＨＬ　−Ｃｕ誘導体：〔グリシル−し−ヒスチジル−し−リジン−Ｒ〕　：銅（ＩＴ）（上式中、Ｒは、１〜１８個の炭素原子を含むアルキル成分、６〜１２個の炭素原子を含むアリール成分、１〜１８個の炭素原子を含むアルコキシ成分、および６〜１２個の炭素原子を含むアリールオキシ成分から成る群から選択されるか、またはＲハＬ　−７”ロリルーし一バリルーし一フェニルアラニルーＬ−バリンもしくはＬ−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンである）を含んで成る組成物。

１５、ヒトの表皮中の細胞交替速度を増加させる方法において使用される、グリシル−（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−リジン：銅（ＩＩ）を含んで成る組成物。

１６、ヒトの皮膚の美容処置方法であって、次の一般式を有するＧＨＬ　−Ｃｕ誘導体：〔グリシル−し−ヒスチジル−し−リジン−Ｒ〕：銅（ＩＩ）（上式中、Ｒは、１〜１８個の炭素原子を含むアルキル成分、６〜１２個の炭素原子を含むアリール成分、１〜１８個の炭素原子を含むアルコキシ成分、および６〜１２個の炭素原子を含むアリールオキシ成分から成る群から選択されるか、またはＲはＬ−プロリル−し−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンもしくはＬ−バリル− Ｌ、−フェニルアラニル−Ｌ−バリンである）を含んで成る組成物を皮膚に適用することを含んで成る方法。

１７、ヒトの皮膚の美容処置方法であって、グリシル−（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−し−リジン：銅（ＩＩ）を含んで成る組成物を皮膚に適用することを含んで成る方法。

手続補正書（方式）平成３年　９月２Ｌ日特許庁長官　深　沢　　　亘　殿 ■、事件の表示ＰＣＴ／ＵＳ８９１０２５９０平成１年特許願第５０６９３３号２、　発明の名称化粧用および皮膚処置用組成物３、補正をする者事件との関係　　　特許出願人名称　プロサイト　コーボレイション４、代理人住所　〒１０５東京都港区虎ノ門−丁目８番１０号６、補正の対象（１）特許法第１８４条の５第１項の規定による書面の「特許出願人の住所及び代表者」の欄（２）明細書及び請求の範囲の翻訳文（３）委任状７、補正の内容（＋）［３）　　別紙の通り（２）明細書、請求の範囲の翻訳文の浄書（内容に変更なし）８、　添付書類の目録（１）訂正した特許法第１８４条の５第１項の規定による書面　　　　　　　　　　　　１通（２）明細書及び請求の範囲の翻訳文　　各１通（３）委任状及びその翻訳文　　　　　　各１通（４）証明書及びその翻訳文　　　　　　各１通手続補正書（方式）１、事件の表示ＰＣＴ／ＵＳ８９１０２５９０平成１年特許願第５０６９３３号２、発明の名称化粧用および皮膚処置用組成物３、補正をする者事件との関係　　　特許出願人名称　プロサイト　コーボレイション４、代理人住所　〒１０５東京都港区虎ノ門−丁目８番１ｏ号５、補正命令の日付６、Ｍ正の対象特許法第１８４条の８の規定による補正書の翻訳文７、補正の内容補正書の翻訳文の浄書（内容に変更なし）８、添付書類の目録（１〕　　補正書の翻訳文　　　　　　　　　　ｆｉｌｌ（２）上申書　　　　　　　　　　　　　１通国際調査報告ＩＩＩ＋−−１町ｊｌｌｅＮ蟲−＾−１１−Ｉヒ１舅−情拳−・ＰＣＴ／ＵＳ８９１０２５９０国際調査報告ＩＪｓ　８９１ＸＳ９０ＳＡ　　　　２９４６３

Claims

【特許請求の範囲】

１．化粧用および皮膚科学的に許容される担体または希釈剤と共に、ＧＨＬ−Ｃｕまたは次の一般式を有するＧＨＬ−Ｃｕ誘導体：［グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−リジン▲数式、化学式、表等があります▼〕：銅（ＩＩ）（上式中、Ｒは、１〜１８個の炭素原子を含むアルキル成分、６〜１２個の炭素原子を含むアリール成分、１〜１８個の炭素原子を含むアルコキシ成分、および６〜１２個の炭素原子を含むアリールオキシ成分から成る群から選択されるか、またはＲはＬ−プロリル−Ｌ−パリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ −バリンもしくはＬ−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンである）を含んで成る、皮膚処置用組成物。
２．前記アルコキシ成分の炭素部分が直鎖である、請求項１に記載の組成物。
３．前記直鎖がｎ−オクチル成分である、請求項２に記載の組成物。
４．前記アルコキシ成分の炭素部分がｎ−ステアリル成分である、請求項１に記載の組成物。
５．前記アルコキシ成分の炭素部分がｎ−パルミチル成分である、請求項１に記載の組成物。
６．前記アリールオキシ成分の炭素部分がベンジル成分である、請求項１に記載の組成物。
７．温血動物において皮下脂肪を増加させる方法において使用される、次の一般式を有するＧＨＬ−Ｃｕ誘導体：［グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−リジン▲数式、化学式、表等があります▼〕：銅（ＩＩ）（上式中、Ｒは、１〜１８個の炭素原子を含むアルキル成分、６〜１２個の炭素原子を含むアリール成分、１〜１８個の炭素原子を含むアルコキシ成分、および６〜１２個の炭素原子を含むアリールオキシ成分から成る群から選択されるか、またはＲはＬ−プロリル−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンもしくはＬ−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンである）を含んで成る組成物。
８．化粧用および皮膚科学的に許容される担体または希釈剤と共に、グリシル− （３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−リジン：銅（ＩＩ）を含んで成る組成物。
９．温血動物において皮下脂肪を増加させる方法において使用される、グリシル −（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−リジン：銅（ＩＩ）を含んで成る組成物。
１０．皮膚の真皮、表皮および内皮成分の厚さを増加させる方法において使用される、次の一般式を有するＧＨＬ−Ｃｕ誘導体：［グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−リジン▲数式、化学式、表等があります▼〕：銅（ＩＩ）（上式中、Ｒは、１〜１８個の炭素原子を含むアルキル成分、６〜１２個の炭素原子を含むアリール成分、１〜１８個の炭素原子を含むアルコキシ成分、および６〜１２個の炭素原子を含むアリールオキシ成分から成る群から選択されるか、またはＲはＬ−プロリル−Ｌ−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ −バリンもしくはＬ−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンである）を含んで成る組成物。
１１．皮膚の真皮、表皮および内皮成分の厚さを増加させる方法において使用される、グリシル−（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−リジン：銅（ＩＩ）を含んで成る組成物。
１２．皮膚の真皮密度を増加させる方法において使用される、次の一般式を有するＧＨＬ−Ｃｕ誘導体：［グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−リジン▲数式、化学式、表等があります▼〕：銅（ＩＩ）（上式中、Ｒは、１〜１８個の炭素原子を含むアルキル成分、６〜１２個の炭素原子を含むアリール成分、１〜１８個の炭素原子を含むアルコキシ成分、および６〜１２個の炭素原子を含むアリールオキシ成分から成る群から選択されるか、またはＲはＬ−プロリル−Ｌ−バリル−Ｌ −フェニルアラニル−Ｌ−バリンもしくはＬ−バリル−Ｌ−フェニルアラニル− Ｌ−バリンである）を含んで成る組成物。
１３．皮膚の真皮密度を増加させる方法において使用される、グリシル−（３− メチル）−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−リジン：銅（ＩＩ）を含んで成る組成物。
１４．ヒトの表皮中の細胞交替速度を増加させる方法において使用される、次の一般式を有するＧＨＬ−Ｃｕ誘導体：［グリシル−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−リジン ▲数式、化学式、表等があります▼〕：銅（ＩＩ）（上式中、Ｒは、１〜１８個の炭素原子を含むアルキル成分、６〜１２個の炭素原子を含むアリール成分、１〜１８個の炭素原子を含むアルコキシ成分、および６〜１２個の炭素原子を含むアリールオキシ成分から成る群から選択されるか、またはＲはＬ−プロリル−Ｌ −バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンもしくはＬ−バリル−Ｌ−フェニルアラニル−Ｌ−バリンである）を含んで成る組成物。
１５．ヒトの表皮中の細胞交替速度を増加させる方法において使用される、グリシル−（３−メチル）−Ｌ−ヒスチジル−Ｌ−リジン：銅（ＩＩ）を含んで成る組成物。