JPH0334931A - 抗レトロウイルス剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 （産業上の利用分野） 本発明は新規な抗レトロウィルス剤に関する。

（従来の技術） 近年世界的な広がりを見せている後天性免疫不全症候群
（以下、エイズと記す）は感染性でなおかつ死亡率の高
い疾患であり、有効なワクチンや治療薬の開発が急がれ
ている。

エイズ発症者の治療或はその原因ウィルスであるヒト免
疫不全ウィルス（以下、ＨＩＶと記す）感染者のエイズ
発症を予防するために開発されている薬剤については幾
つかのものが報告されている。

それらの殆どはＨＩＶの増殖を阻害する働きを持つもの
で３′−アジド−３′−デオキシチミジン（以下、ＡＺ
Ｔと記す）、インターフェロン、グリチルリチンなどが
主なものとして知られている。更に、最近ではデキスト
ラン、カードラン、コンドロイチン、リポフラナン、キ
シロフラナン等の多糖類の硫酸化したものも抗ＨＩＶ効
果があるとの報告がある。

また、本発明者らはカンジダ症の治療にも用いられてい
る抗真菌剤である抗生物質、アンホテリシンＢを硫酸化
することにより、抗ＨＩＶ効果を増強させかつ、正常細
胞に対する毒性が低いことを確認し、第２回エイズ研究
会及び第５回国際工イズ会議（モントリオール、１９８
９　）で発表した。

（発明が解決しようとする問題点） エイズ治療剤として現在、唯一認可されているＡＺＴは
作用機序も解明され優れた抗ＨＩ　Ｖ作用を持ち、患者
の延命効果も確認されているが、造血機能に対する副作
用が強く、エイズ発症予防のため長期間、ＨＩＶ感染者
に投与すると、′冒軸に障害が現われ、重度の貧血を起
こしたり、頭痛、けいれん等の症状が起こるといわれて
いる。ＨＩ■に感染した患者は体内からウィルスを完全
に取り除くのは困難であることから、治療薬を生涯投与
し続けなければならない。そのため長期間の使用に耐え
られる副作用の極力少ない薬剤の開発が望まれている。

これに対して、両性イオン体であるベタインは伝染性の
肝臓炎の治療、解毒作用等があるといわれるが、本願発
明者らの研究でも細胞膜の浸透圧調整を有することが明
らかになった。一方、タングステン酸ナトリウムはアル
カロイドの沈殿剤、収れん剤、酸化反応の触媒として用
いられる物質であるが、癌の直接治療に用いられた例も
ある。

そこで、本願発明者らはこれらベタインとタングステン
酸塩に着目し、これら両成分を水溶液中で混和した結果
、抗ＨＩ　Ｖ作用を有する組成物が得られることを見出
した。

（問題点を解決するための手段） 本発明は、以上の知見に基づいてベタインまたはその塩
とタングステン酸塩を水溶液中で混和して得られた組成
物を主成分とする抗レトロウィルス剤を提案するもので
ある。

ベタインは甜菜大根中に通常、０２〜０３％含まれてい
る。甜菜糖製造工場では通常の場合糖蜜に全量移行する
。但し、脱塩工場では一部、排水にも移行する。ベタイ
ンを回収する場合、糖蜜をイオンクロマト法により分離
　回収することち可能である。

本発明に用いるベタインは、脱塩工場の樹脂再生廃液か
ら回収した。即ち、脱塩工程における強酸性カチオン交
換樹脂のアルカリ再生廃液を濃縮し、塩酸または硫酸に
て酸性とすると、ベタイン塩酸塩（下記■式）またはベ
タイン硫酸塩（下記１１式）の結晶として得られる。ま
た、これらの結晶を溶解し、強塩基性アニオン交換樹脂
を通して塩素イオン、硫酸イオンを外し、濃縮して遊離
のベタイン（下記Ｉｌ１式〕として得ることもできる。

１１３ Ｈ３ 本発明においては、」１記（１）〜（Ｉｌｌ　）式のベ
タイン塩乃至ベタインなどを原料として使用することが
できる。

また、タングステン酸塩は酸化タングステン（Ｖｌ）と
陽イオン性金属の酸化物から成る塩であるが、特に本発
明ではタングステン酸ナトリウム、タングステン酸カリ
ウム、タングステン酸アンモニウム等などの水溶性のタ
ングステン酸塩を使用することができる。

これらのベタイン塩乃至ベタインとタングステン酸塩は
水溶液中で超音波処理等により混和することにより、目
的とする組成物が得られる。

具体的にはベタイン塩酸塩水溶液とタングステン酸ナト
リウム水溶液とを混和し、タングステン酸と思われる不
溶性沈殿を除去した後、得られる組成物は抗ＨＩＶ作用
確認試験法に従って試験した結果、有効な薬理作用を有
し、かつ毒性が認められず、抗レトロウィルス剤として
有効であることを確認した。

（実施例） 以下、この発明の実施例及び試験例を挙げて、この発明
を具体的に説明する。

実施例１ ベタイン塩酸塩１５．４ｇ（０，１ｍａｌｌ　、及び市
販のタングステン酸ナトリウム１６．５ｇ（０，０５ｍ
ｏ１．）をそれぞれ水に溶解し、両液を混合して５００
ｍ１にメスアップし、超音波処理後、冷蔵庫内（５℃）
に放置した。１部タングステン酸と思われる約１３％相
当の水不溶性の白色沈殿が析出した。この白色沈殿を濾
別し４９０　ｍｌの清澄液（試料１）を得た。

実施例２ ベタイン硫酸塩ＩＴ、　２ｇ　ｔＤ、　Ｈｍｏｌ）　、
及び市販のタングステン酸ナトリウム１．３．２ｇ１０
．０４ｍｏ１．）をそれぞれ水に溶解し、実施例１と同
様に処理して４９０ｍ］の清澄液（試料２）を得た。

実施例３ ベタイン塩酸塩１５．４ｇ　［０，］ｍｏＬｌ及び市販
のタングステン酸カリ１７．３ｇ　（０，０５ｍｏ１．
）をそれぞれ水に溶解し、実施例１と同様に処理して４
９０ｍ１の清澄液（３式才４３）を得た。

実施例４ ベタイン１１．７ｇ　（０，１ｍｏ］ｊ　及び市販のタ
ングステン酸ナトリウム１６．５ｇ　ｉｏ、０５ｍｏ１
．）をそれぞれ水に溶解し、実施例１と同様に処理した
。この場合は冷蔵しても沈殿は析出せず、そのままの７
ｍ５００ｍ１を得た。

」１記実施例にて作製した試料の内、試料１．２につい
て抗ＨＩ　Ｖ作用効果の確認試験を行なった。

試験例１（ＨＩＶ増殖抑制作用試験） ヒトＴ細胞白血病つィルス■型（ＨＴＬＶ−Ｉ）に持続
感染しているＴ細胞株であるＭＴ−４細胞にＨＩＶ（Ｌ
ＡＶ株）を０．００１ＴＣＩＤ５．／ｃｅｌｌとなるよ
うに３７°Ｃで１時間感染させた後洗浄し、試料１．２
を下記表１に示す各濃度とした液を含むＲＰＭＩ−１６
４０培地（牛胎児血清ｌＯ％及び抗生物質を含む）に１
　ｘ　１．ｏ５ｃｅｌｌｓ／ｍｌ５ｃｅｌｌｓ／た。こ
の細胞浮遊液を２４穴のカルチャープレートに１ｍ１／
ウエル量ずつ入れ、３７°Ｃ，５％ＣＤ□存在下で５日
間培養した。培養後、ウィルス増殖による細胞変性効果
の観察を行ない。ＭＴ−４細胞の生細胞数をトリバンブ
ルー染色法により算定した。試料１．２のＨＩ　Ｖ増殖
抑制作用は下記の式から算出される細胞障害抑制率（％
）を指標として評価した。

細胞障害抑制率（％） 下記表１に示すように試料１は６７〜６０２μｇ／ｍｌ
膿度て８０％１フ、上の細胞障害抑制率を示し、２２＋
１＋：／ｍ１の濃度でも２６％の抑制率を示し、抗１−
１１　’ｔ／活・１（１が４２められ／二。また、試料
２　（＞７１ｉ〜ｆｉ８４　ｌＬｔ；／ｍｌｔ；Ｕ以て
試１１１に同しり８（］％以十、の５４１）胞障ｌ′ｉ
’　ｌ’ｌｌｌ制・−二を杓、し、２５１１１Ｈ／ｍｌ
＆ｔｉ度でも４０％の抑制十を不し、ｂ’Ｌ１−Ｉ　Ｔ
　Ｖ活性が認められた。

表 実ｈｈ例にて作製した清澄液中の固形分量をン則足した
その固ｊじ分ＷＡ　Ｌ試験例２（巨細皿形成抑制作用試
験） ＭＯ＋、’ｌ’−４細胞とｌ−Ｉ　Ｉ　Ｖに持続感染し
ているＭＯＬｉ’−４７１１１’ＬＶ−ＩＩ＋細胞を試
ｉ４１．２を下記表２に示１−　、ｆＭ度としたｌルを
含む尾池中で１１の割合で（［コ合しく４１１１胞濃度
ｉ：ｌ：　５　ｘ　１０５ｃｅｌｌｓ／ｍｌ）、　２４
穴のカルチャプレー１・に１．　ｍ　ｌ　／ウェル量ず
つ入れ２４時間培養した。培養後、鏡検にて巨細胞形成
の有無を観察した。その４ｉ’；果、１・記表２に示す
ように試Ａ−１１は［＋７〜Ｉｉ　ＩＩ　２　ｊｚ　＋
４　／　ｍ　ｌ　Ｏ）　ｉｉ’＋Ｈ度で巨４１１１胞を
ｌ　ｆｌ　１１　％　ｌｌ’ｌ制した７、このことより
木試４−１がＨＴＶとＴａ２０５胞の結合を抑制する作
用を有することが判明した。

表−２ 巨細胞形成を認めず。

試験例３　（Ｍ’ト４細胞に対する毒性試験）試料１に
ついて下記表３に示す各濃度とした液を含も培地にＭＴ
−４細胞をｌ　ｘ　ｌｏ’ｃｅｌｌｓ／ｍｌ　ｍ度て（
４社させ、２４穴のカルチャープレート（こ１ｍｌ／つ
Ｊル量ずつ入れ、３７°Ｃ１５％Ｃ０２存在下で５日間
培養した。培養後、生細胞数を算定した。その紀果、１
８０ＧＬｉｇ／ｍｌで（」細胞毒性が示されたが、１１
〜１．００５１ｒ　ｇ／ｍｌ濃度の範囲ではＭ　ｉ’−
４細胞は１に常に増殖し、毒性がないことが明らかとな
った。

表−３

Claims (3)

【特許請求の範囲】
1. （１）ベタインまたはその塩とタングステン酸塩を水溶
   液中で混和して得られた組成物を主成分とする抗レトロ
   ウイルス剤。
2. （２）ベタイン塩がベタイン塩酸塩または硫酸塩である
   特許請求の範囲第１項記載の抗レトロウイルス剤。
3. （３）タングステン酸塩がタングステン酸ナトリウム、
   タングステン酸カリウム、タングステン酸アンモニウム
   の１種または２種以上である特許請求の範囲第１項記載
   の抗レトロウイルス剤。