JPH03284695A - 新規なテトラペプチド、その中間体、それらの製造法並びに抗アレルギー剤、血管拡張剤もしくは免疫調節剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野コ 本発明は、新規なテトラペプチド、その中間体、それら
の製造法並びに抗アレルギー剤、血管拡張剤もしくは免
疫調節剤に関する。

［従来の技術］ 各種アレルギー疾患の予防及び治療のために種々の薬物
が提案され、開発が行われ、既にいくつかが市販に供さ
れている。

アレルギー症状のうち、即時型アレルギー反応である気
管支喘息、じんＷｉ疹、アレルギー性鼻炎などは■型ア
レルギー反応として分類される。このＩ型アレルギー反
応は、発症機序および抗アレルギー剤の作用機序から一
般に次の三段階から成るものと考えられている。すなわ
ち、最初体内に侵入した外来性抗原に対して、マクロフ
ァージ、Ｔ細胞及びＢ細胞の相互作用によってＩｇＥ抗
体が産生され、このＩｇＥ抗体が組織の肥満細胞や血中
ｄ好塩基球のＦｃレセプターに固着して感作が成立する
ことになる。この過程が第１段階である。つぎに、再び
外来抗原が体内に侵入すると、細胞のＦｅレセプターに
固着したＩｇＥ抗体と外来性抗原が結合し、抗原抗体反
応が引き金となって細胞膜酵素の活性化、細胞内へのカ
ルシウムイオンの流入などが起こり、それによって酵素
反応などの生化学的変化、脱顆粒などの組織学的変化が
引き起こされる。その結果、ヒスタミンや５ＲＳ−Ａな
どのケミカルメデイエータ−（化学伝達物質）が細胞外
へ遊離される。この過程が第２段階である。第２段階で
細胞外に遊離したケミカルメデイエータ−は、平滑筋の
収縮、毛細血管透過性の亢進及び粘液の分泌を促進し、
種々のアレルギー症状を惹起する。この過程が第３段階
である。

従来から知られている抗アレルギー剤のうち、非特異的
減感作療法剤及び抗体産生抑制剤は第１段階に作用する
薬物である。この第１段階のろに特異的に作用する薬物
は市販されていない。第２段階に作用する薬物としては
、タロモグリク酸ナトリウム（以下、ＤＳＣＧと略す）
、トラニラストなどのケミカルメデイエータ−抑制剤か
ある。第３段階に作用する薬物としては抗ヒスタミン剤
及び気管支拡張剤がある。

更に特公昭６０−２３１８号公報には抗アレルギー性ペ
プチドについての開示がなされている。上記公報によれ
ばこのペプチドは下記の一次構造式％式％ によって示されるように、ＩｇＥ抗体のＦｃ領域のアミ
ノ酸残基５個から成るｒｇＥ抗体由来のペンタベブチド
である。

このペプチドは第１段階のＩｇＥ抗体産生を抑制する作
用は確認されていないが、第２段階の最初に起こる肥満
細胞へのＩｇＥ抗体の結合を阻止すると共に、第２段階
の既に結合したＩｇＥ抗体をこのペプチドで置換するこ
とによって、アレルギー反応を遮断するものと考えられ
る。

［発明が解決しようとする課題］ 従来の抗アレルギー剤の開発は、上記のアレルギー症状
発症の３つの段階のうちの１つの段階に作用する薬物の
開発に向けられ、この３つの段階の連鎖をいずれかの段
階で遮断することによってアレルギー症状発症を予防し
、又は治療しようとしてきた。そしてこのような方法に
よって一応の効果が期待される療法が開発されてきた。

しかしながら、既知のこうした化学療法剤は上記の３つ
の段階の連鎖を完全に遮断するものではない。そのため
、３つの段階の１つに作用する薬剤と他の１つに作用す
る薬剤とを組み合わせて用いることによって、連鎖の遮
断を完全なものとする発想のものに複数個の薬剤を組み
合わせて使用することも行われているが、その効果は必
ずしも期待通りのものではない。

そこで、単一の薬剤で上記のアレルギー症状発症の３つ
の段階のうちの複数の段階に作用しうる薬剤が開発され
た場合には、抗アレルギー剤としての効果が一層高まる
ことが期待され、このような薬剤の開発が望まれている
のである。

また上記のアレルギー症状発症のメカニズムから、Ｉｇ
Ｅ抗体のＦｃ領域由来のペプチド又はそれと類似するペ
プチドを開発することによって優れたアレルギー剤が入
手できる可能性も考えられ、このようなアプローチから
の新規なペプチドの開発も期待されていたのである。

本発明は、ＩｇＥ抗体のＦｃ領域のペプチド部分又はそ
の類似ペプチドを種々合成し、優れた薬理活性をもつ抗
アレルギー性ペプチドを提供することを目的とする。

［課題を解決するための手段］ 上記目的を達成するため、本発明者らはＩｇＥ抗体のＦ
ｃ領域にみられるペプチドに着目し、従来液相法では困
難とされた一Ａｓｐ−Ｇｌｙ−を有すペプチド又はその
誘導体を副反応を抑えながら収率良く合成する方法を見
出し、種々の−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−結合を含むオリゴペプ
チドを合成して、その抗アレルギー活性を検討した結果
、Ｈ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨで表わさ
れるテトラペプチドがヒスタミン遊離を抑制するととも
にＩｇＥ抗体産生を抑制することを見出した。

すなわち本発明は、 （１）次の式〔Ｉ〕 Ｈ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨ（Ｉ　）（
ただし、ＳｅｒはＬ−セリン残基、ＡｓｐはＬ−アスパ
ラギン酸残基、Ｇｌｙはグリシン残基、ＬｙｓはＬ−リ
ジン残基を示す）で表されるテトラペプチド又はその薬
学的に許容される塩。

（２）次の式〔■〕 Ｚ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ
）−ＯＢｚｌ　　　〔ＩＩ〕（ただし、ＳｅｒはＬ−セ
リン残基、ＡｓｐはＬ−アスパラギン酸残基、Ｇｌｙは
グリシン残基、ＬｙｓはＬ−リジン残基、２はベンジル
オキシカルボニル基、Ｂｚｌはベンジル基を示す）で表
されるＬ−セリンーＬ−アスパラギン酸−グリシン−Ｌ
−リジン誘導体。

（３）次の式　［Ｉ［Ｉ） Ｂｏｃ−Ａｓｐ　（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ　（Ｚ
）−ＯＢｚｌ　　　　（ＩＩＩ　）（ただし、Ａｓｐは
Ｌ−アスパラギン酸残基、Ｇｌｙはグリシン残基、Ｌｙ
ｓはＬ−リジン残基、Ｂｏｃはｔ−ブチルオキシカルボ
ニル基、Ｂｚｌはベンジル基、２はベンジルオキシカル
ボニル基を示す）で表されるＬ−アスパラギン酸−グリ
シン−Ｌ−リジン誘導体。

（４）　Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（ただし、Ｇｌｙはグリ
シン残基、Ｂｏｃはｔ−ブチルオキシカルボニル基を示
す）で表されるグリシン誘導体とＨ−Ｌｙｓ（Ｚ）−Ｏ
Ｂｚｌ　（ただし、ＬｙｓはＬ−リジン残基、Ｚはベン
ジルオキシカルボニル基、Ｂｚｌはベンジル基を示す）
で表されるＬ−リジン誘導体を、脱水縮合させて、Ｂｏ
ｃ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ　（Ｚ）−ＯＢｚｌとし、次いで酸
でＢｏｃ基を外し、これにＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）
−ＯＨで表されるＬ−アスパラギン酸誘導体を加え、脱
水縮合させてＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌ
ｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌとし、次いで酸でＢｏｃ基を外し
、これにＺ−８ｅｔ−ＯＨで表されるＬ−セリン誘導体
を加え、脱水縮合させたのち、接触還元することを特徴
とする上記（］）の］Ｈ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌ
ｙｓＯＨの製造法。

（５）　Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（ただし、ｃｉｙはグリ
シン残基、Ｂｏｃはｔ−ブチルオキシカルボニル基を示
す）で表されるグリシン誘導体とＨ−Ｌｙｓ（Ｚ）−Ｏ
Ｂｚｌ　（ただし、ＬｙｓはＬ−リジン残基、Ｚはベン
ジルオキシカルボニル基、Ｂｚｌはベンジル基を示す）
で表されるＬ−リジン誘導体を、脱水縮合させてＢｏｃ
−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ　（Ｚ）ＯＢｚｌとし、次いで酸でＢ
ｏａ基を外し、これにＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｏ
Ｈで表されるＬ−アスパラギン酸誘導体を加え、脱水縮
合させてＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ
（Ｚ）−ＯＢｚｌとし、酸でＢｏａ基を外し、これにＺ
−Ｓｅｒ−ＯＨで表されるＩ５−セリン誘導体を加え、
脱水縮合させることを特徴とする上記（２）のＺ−Ｓｅ
ｒ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｉｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢ
ｚｌの製造法。

（６）　Ｂｏｃ−Ｇｕｙ−ＯＨ（ただし、Ｇ２）＋はグ
リシン残基、Ｂｏａはｔ−ブチルオキシカルボニル基を
示す）で表されるグリシン誘導体とＨ−Ｌｙｓ（Ｚ）−
ＯＢｚｌ　（ただし、ＬｙｓはＬ−リジン残基、Ｚはベ
ンジルオキシカルボニル基、Ｂｚｌはベンジル基を示す
）で表されるＬ−リジン誘導体を、脱水縮合させてＢｏ
ｃ−Ｇｕｙ−Ｌｙｓ　（Ｚ）　−０Ｅｚｌとし、次いで
酸でＢｏａ基を外し、これにＥｏｅＡｓｐ（ＯＢｚｌ）
−ＯＨで表されるＬ−アスパラギン酸誘導体を加え、脱
水縮合させることを特徴とする」−記（３）のＢｏｃ−
Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌ
の製造法。

（７）上記（１）のテトラペプチド又はその薬学的に許
容される塩を有効成分として含有する抗アレルギー剤。

に関するものである。

更に、本発明者らは、式［Ｉ］で表されるテトラペプチ
ドの薬理作用を鋭意検討したところ、意外にもこれが血
管拡張作用や免疫調節作用をも有することを見出し、本
発明を完成した。

すなわち、本発明は、 （８）上記（１）のテトラペプチド又はその薬学的に許
容される塩を有効成分として含有する血管拡張剤。

（９）上記（１）のテトラペプチド又はその薬学的に許
容される塩を有効成分と１７で含有する免疫調節剤。

に関するものでもある。

本発明のＨ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨで
表されるテトラペプチドの薬学的に許容される塩として
は、ナトリウム塩、カリウム塩等のアルカリ金属塩及び
カルシウム塩、マグネシウム塩等のアルカリ土類金属塩
のような金属塩、アンモニウム塩、有機塩基類、有機酸
塩、無機酸塩等が挙げられる。

本発明のＺ−３ｅｔ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌ
ｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌで表されるＩ、−セリン−Ｌ−ア
スパラギン酸−グリシン−Ｌ−リジン誘導体はＨ−Ｓｅ
ｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨで表されるテトラペ
プチドの中間体である。

本発明のＢｏｃ−Ａｓｐ　（ＯＢｚｌ）−Ｇｕｙ−Ｌｙ
ｓ　（Ｚ）−ＯＢｚｌで表されるＬ−アスパラギン酸−
グリシン−Ｌ−リジン誘導体はＺ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−（
ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌで表され
るＬ−セリンーＬ−アスパラギン酸−グリシン−１、−
リジン誘導体の中間体である。

本発明の式〔Ｉ〕で表されるテトラペプチドＨ−Ｓｅｒ
−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨは下記の第１〜６の工
程を経て製造することができる。

第１の工程： 第２の工程： Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌ−Ｈ−Ｇｌｙ
−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌ第３の工程： 第４の工程： Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−
ＯＢｚｌ−”Ｈ−Ａｓｐ　（ＯＢｚｌ　）−Ｇ　１ｙ−
Ｌｙｓ　（Ｚ）−０Ｂｚ　１第５の工程ニ ーＺ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｕｙ−Ｌｙｓ（
Ｚ）−ＯＢｚｌ第６の工程： Ｚ−Ｓｅｔ−Ａｓｐ　（ＯＢｚｌ　）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ
　（Ｚ）−ＯＢｚｌ−Ｈ−８ｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌ
ｙｓ−ＯＨただしＳｅｒ、　Ａｓｐ、　Ｇｌｙ、　Ｌｙ
ｓ、　Ｂｏａ、　Ｚ及びＢｚｌは上記と同じで次の意味
を表わす。

Ｓｅｒ：Ｌ−セリン残基 Ａｓｐ：Ｌ−アスパラギン酸残基 Ｇｕｙ　ニゲリシン残基 Ｌｙｓ：Ｌ−リジン残基 Ｂｏｃ：　ｔ−ブチルオキシカルボニルＺ：ベンジルオ
キシ力ルボニル Ｂｚｌ　：ベンジル 第１の工程で用いるα−アミノ基をＢｏａ基で保護した
グリシン誘導体Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ，及びα−カルボ
キシル基はＢｚｌ基で保護し、β−カルボキシル基はＺ
基で保護したリジン誘導体Ｈ−Ｌｙｓ　（Ｚ）−ＯＢｚ
ｌはＬ体のものを用いる。これらは遊離形又は塩の形の
ものが市販されており、容易に入手できる。

Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨとＨ−Ｌｙｓ　（Ｚ）−０Ｂｚ　
１の脱水縮合反応は次のようにして行なうことができる
。Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨをジメチルホルムアミド、テト
ラヒドロフラン、塩化メチレン、アセトニトリル等から
選ばれる溶媒（混合溶媒でもよい）に溶かし、０℃以下
、好ましくは一８℃以下、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨに対し
モル比で１．０〜１．４倍量のジシクロへキシルカルボ
ジイミド（以下ＤＣＣと略す）及び１−ヒドロキシベン
ゾトリアゾール（以下ＨＯＢｔと略す）を加えて攪拌し
、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨに対して等モルのＨ−Ｌｙｓ　
（Ｚ）−ＯＢｚｌを加え、０℃以下、好ましくは一８℃
以下、１〜１０時間、好ましくは４〜６時間攪拌する。

引き続き室温で１〜ｌＯ時間、好ましくは４〜６時間攪
拌する。この段階で温度を初めに０℃以下とするのは副
生物（アシル尿素）の生成を抑えるためであり、次いで
温度を室温とするのはペプチド結合の形成を促進させる
ためである。

反応により生成する副生物及び未反応の原料は濾過、ア
ルカリ洗浄等の適当な方法で除き、溶媒は減圧蒸発等の
方法で除いたのち、再結晶等により、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−
Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌを得る。

第２の工程で、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ　（Ｚ）−ＯＢ
ｚｌから、Ｂｏａ基を外すために用いる酸としてはトリ
フルオロ酢酸（以下、ＴＦＡと略す）、塩酸、臭化水素
酸、ギ酸等がある。これらの酸と共に、アニソール、チ
オアニソール、フェノール、メタクレゾール等のカチオ
ン除去剤を加えてもよい。Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−Ｌ）’Ｓ　
（Ｚ）−ＯＢｚｌの１０〜３０倍量（モル比）のＴＦＡ
等の酸と１〜１．３倍量（モル比）のアニソール等のカ
チオン除去剤を加え、Ｂｏａ基が外れるまで攪拌する。

反応後、酸及びカチオン除去剤を除くためエーテル、石
油エーテル等の溶媒を加える。沈殿物をとり、真空乾燥
等の適当な方法で乾燥し、Ｈ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ　（Ｚ）
−ＯＢｚｌを得る。

第３の工程で、反応に用いる原料の一つ、α−アミノ基
をＢｏａで保護し、β−カルボキシル基をＢｚｌで保護
したアスパラギン酸誘導体Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）
−ＯＨはＬ体のものを用いる。これらは遊離形又は塩ρ
形のものが市販されており、容易に入手できる。

Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨとＨ−Ｇｌｙ−Ｌｙ
ｓ　（Ｚ）−ＯＢｚｌの脱水縮合反応は次のようにして
行なうことができる。

Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨをジメチルホルムア
ミド等の極性の大きい溶媒に溶かし、０℃以下、好まし
くは一８℃以下、Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨに
対しモル比で１．０〜１４倍量１７）ＤＣＣ及びＨＯＢ
ｔを加え、１〜ｌｏ時間、好ましくは４〜６時間攪拌す
る。次いで、第２の工程で得たＨ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ
）−ＯＢｚｌをＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨに対
して等モルとり、ジメチルホルムアミド等の溶媒に溶か
して加え、更に１０℃以下で１〜２４時間攪拌する。こ
の反応を１０℃以下で行うのはＡｓｐ−Ｇｌｙのあいだ
で起こる副反応（イミド体の生成）を抑えるためである
。

反応終了後、副生物及び未反応の原料の除去は第１の工
程と同様に行い、再結晶等によりＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢ
ｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌを得る。

第４の工程では、第３の工程で得たＢｏｃ−Ａｓｐ（Ｏ
Ｂｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ　（Ｚ）−ＯＢｚｌを、第２
の工程と同様な条件で、酸によりＢｏａ基を外す。

第５の工程で、反応に用いる原料の一つ、α−アミノ基
をＺ基で保護したセリン誘導体、Ｚ−Ｓｅｒ−ＯＨはＬ
体のものを用いる。これらは、遊離形のものが市販され
ており３、容易に入手できる。

Ｚ−８ｅｒ−ＯＢとＨ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−
Ｌ３’５（Ｚ）−ＯＢｚｌの脱水縮合反応は第２の工程
の脱水縮合反応の場合と同材に行なう。

第６の工程では、第５の工程で得たＺ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ
（ＯＢｚり−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌを接触還
元により、保護基を外Ｉ７て、目的とするテトラペプチ
ドＨ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨを得る。

触媒として、Ｐｄ黒や炭素粉末を担体としたＰｄ炭素触
媒等を用い、Ｚ−ＳｅｒＡｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−
Ｌｓｙ（Ｚ）−ＯＢｚｌを、例えばメタノール、酢酸、
水の混液等の溶媒に溶かし、水素ガスを通じ攪拌すれば
よい。

反応終了後、触媒をろ過により除く。ろ液は液が少量に
なるまで減圧濃縮し、エーテル等の有機溶媒を加えて振
り混ぜ、未反応の原料及び不純物等を除く。水層から、
ゲルクロマトグラフィー等の通常の精製手段により、精
製されたＨ−８ｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨを
得る。

弐［）で表されるテトラペプチドの薬学的に許容される
塩は、上記第６の工程において保護基を外したのちに、
水酸化すトリウム、水酸化カリウム等の塩基又は塩酸、
酢酸等の酸を加え、相当する塩どすることもできる（２
、式（Ｉ）で表されるテトラペプチドを１ｌ１３離した
のぢ、上記と同様に塩基又は酸を加えて塩とすることも
できる。

本発明物質の構造、純度の確認は高速液体り［ｙマドグ
ラフィー、元素分析、アミノ酸分析等により行う。

本発明の抗アレルギー剤、血管拡張剤又は免疫調節剤は
製薬的に許容される担体又は希釈剤と本化合物又は医薬
品と１．で許容されるその塩からなる製剤を包含する。

塩の好ましい例はす（・リウム塩、カリウム塩等のアル
カリ金属塩及びカルシウム塩、マグネシウム塩等のアル
カリ土類金属塩のような金属塩、アンモニウム塩、有機
塩基類、６機酸塩、無機酸塩等が挙げられる。本製剤は
、患者への投薬後、活性成分が迅速に、持続的に又は遅
延的に遊離するように製剤化することかできる。

本発明の抗アレルギー剤、血管拡張剤又は免疫調節剤は
経口的又は非経口的に投与するための形態を適宜に採り
得る。代表的な投与方法としては経口、直腸、皮膚透過
、皮下、静脈内、筋肉内、吸入または奔腔内紅路を含む
種々の紅路により投与することができる。

これらの投与方法では、本発明の抗アレルギー剤、血管
拡張剤又は免疫調節剤は種々の薬学的製剤の形態で投与
されうる。これらの薬学的製剤の形態とＬ２ては、錠剤
、硬カプセル剤、軟カプセル剤、顆粒剤、散剤、ｌ・ロ
ーチ剤、平削、シロラフ剤、クリーム剤、軟膏剤、ハツ
ブ剤、注射剤、懸濁剤、吸入剤、エアロゾール剤などが
ある。また他の抗アレルギー剤、血管拡張剤、免疫調節
剤又はその他の医薬と共に二重層錠、多重層錠などとす
ることもできる。さらに錠剤の場合には必要に応じて通
常の剤皮を施し、例えば糖衣錠、腸溶被錠とすることも
できる。

錠剤、顆粒剤、散剤などの固体製剤とする場合は、製剤
化に当って公知の添加剤、例えば乳糖、ショ糖、ブドウ
糖、結晶セルロース、コーンスターチ、リン酸カルシウ
ム、ソルビトール、グリシン、カルボキシメチルセルロ
ース、ヒドロキシフロビルセルロース、アラビアゴム、
ポリビニルピロリドン、ポリエチレングリコール、ステ
アリン酸マグネシウム、タルク等を添加することかでき
る。

半固体製剤とする場合は、植物性ワックス、ミクロクリ
スタリンワックス、脂肪例えばタローラノリンなどの材
料を添加することができる。

液体製剤とする場合は、添加剤、例えば塩化すｌ・リウ
ム、ソルビトール、グリセリン、オリーブ油、アーモン
ド油、プロピレングリコール、エチレングリコール、エ
チルアルコール 添加することができる。

式〔■〕で表されるペプチドの投与量は、患者の年令、
体重、症状などにより適宜増減することができるが、経
口投与の場合の投−’４ｍは１［１当／こり０．０１　
〜１０ｍｇ／ｋｇ，鼻腔内では１回の投与ｎは０１〜１
００ｒｎｇである。非経り投与の場合の量は１日当たり
１０〜１，０００μｇ／ｋｇである。

［実施例］ 以下に記載する実施例によって本発明を具体的に説明す
る。

（実施例１） Ｂｏｃ−Ａｓ　（ＯＢｚｌ）−Ｇｌ　−Ｌ　ｓ（Ｚ　−
ＯＢｚｌのＨ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌ−ＨＣＩ　（国
産化学製）　２０．３５ｇをジメチルホルムアミド（以
下、ＤＭＦと略す）　３５ｍ１に溶解し、水冷下トリエ
チルアミン７ｍｌを加え中和したのち、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ
−ＯＨ（国産化学製）　８．７６ｇ。

ＨＯＢｔ　（国産化学製）　７．４３ｇ及びＤＣＣ（国
産化学製）１１．３５ｇを加えて３時間、更に４℃で１
６時間攪拌した。副生物のジシクロヘキシル尿素をろ過
により除去後、酢酸エチル３００ｍ１を加え、順次飽和
食塩水、８ｗｔ％炭酸ナトリウム、飽和食塩水、８ｗｔ
％クエン酸、そして飽和食塩水で洗浄した。酢酸エチル
層を無水硫酸ナトリウムで乾燥後、溶媒を留去し、再び
少量の酢酸エチルに溶かし、ろ過したのち、溶媒を完全
に留去し、オイル状物質（Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ
）−ＯＢｚｌ）　２１．１ｇ　（収率８０％）を得た。

上記のＢｏｃ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−０Ｂｚ１１３．
９８ｇにアニソール２ｍｌ及びＴＦＡ２０ｍｌを加えて
溶かし、室温で１時間攪拌しＢｏｃ基を切断した。エー
テル／石油エーテル混合溶液（容量比１　：　１）　８
０ｍ１を加え沈澱させたのち、残渣［Ｈ−Ｇｌｙ−Ｌｙ
ｓ（Ｚ）−０Ｂｚ１４ＦＡ、］を水酸化ナトリウムを含
むデシケータ−で吸引乾燥した。

別にＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨ（国産化学製）
　８．４１ｇ。

ＨＯＢｔ　３．９２ｇ及びＤＣＣ５，９８ｇをとり、Ｄ
ＭＦ２０ｍｌに溶解し、水冷下３時間攪拌し、次いで先
のＨ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−０Ｂｚ１４ＦＡのトリエ
チルアミン３．６４ｍ１を含むＤＭＦ　（１５ｍｌ）溶
液を加え、４℃で一晩攪拌した。

ジシクロヘキシル尿素をろ過で除去後、酢酸エチル４０
０ｍ１を加え、次いで飽和食塩水、８ｗｔ％Ｎａ２ＣＯ
３、飽和食塩水、８ｗｔ％クエン酸、飽和食塩水及び水
で順次洗浄した。酢酸エチル層を無水流酸ナトリウムで
乾燥し、溶媒を留去した。石油エーテルで沈澱させ、更
に酢酸エチル／石油エーテルで再沈澱させＢｏｃ−Ａｓ
ｐ　（ＯＢｚｌ）　−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ　（Ｚ）　−０Ｂ
ｚ１１４．７５ｇ　（収率７６．９％）を得た。

融点＝７０〜７２℃ ［αコ２　　：　　−１９，０′″　（ｃ＝１．ｏ、Ｄ
ＭＦ）薄層クロマトグラフィーのＲｆ値：　０．８０元
素分析値；　　（Ｃ３９Ｈ２Ｓ　Ｎ４０１０・１／２Ｈ
２０として）（％） ＨＮ 理論値：　　６３．１４　　６，６６　　７．５５実測
値：　　６３．１３　　６．６４　　７．７２酸分解後
のアミノ酸分析値：　（モル比）アスパラギン酸　　０
．８ グリシン　　　　　０．８ リジン　　　　　　１．０ なお、薄層クロマトグラフィーｃｔプレートとしてシリ
カゲル６０（メルク社製）を用（Ｘ１展開溶媒はクロロ
ホルム／メタノール／水（容量比で８：３：１）混液で
行った。

（実施例２） Ｚ−Ｓｅｒ−Ａｓ　（ＯＢｚｌ）−Ｃ１−Ｌ　ｓ（Ｚ　
−ＯＢｚｌの実施例Ｉ　Ｔ：　得りＢｏｃ−Ａｓｐ（Ｏ
Ｂｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌ　２．４０
ｇにアニソール０．４３ｍ１及びＴＦＡ４　、２４ｍ１
を加えて溶かし、室温で１時間攪拌しＢｏｃ基を切断し
た。エーテル／石油エーテル混合溶液（容量比１　：　
１）　８０ｍ１を加え沈澱させたのち、残渣［Ｈ−Ａｓ
ｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−０Ｂｚ１４Ｆ
Ａコを水酸化ナトリウムを含むデシケータ−で吸引乾燥
した。

別にＺ−Ｓｅｒ（ＯＢｚｌ）−ＯＨ（国産化学製）　０
．８４ｇ。

ＨＯＢｔ　Ｏ，５４ｇ及びＤＣＣ０，８３ｇをとり、Ｄ
ＭＦｌｏｍｌに溶解し、水冷下３時間攪拌し、次いで先
のＨ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−０
Ｂｚ１４ＦＡのトリエチルアミン０．４９ｍ１を含むＤ
ＭＦ　（１０ｍｌ）溶液を加え、４℃で一晩攪拌した。

ジシクロヘキシル尿素をろ過で除去後、酢酸エチル２０
０ｍ１を加え、次いで飽和食塩水、８ｗｔ％Ｎａ２ＣＯ
３、飽和食塩水、０．１Ｎ　ＨＣＩ及び飽和食塩水で順
次洗浄した。酢酸エチル層を無水流酸ナトリウムで乾燥
し、溶媒を留去した。石油エーテルで沈澱させ、更に酢
酸エチル／石油エーテルで再沈澱させＺ−Ｓｅｒ−Ａｓ
ｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−０Ｂｚ１１．
２０ｇ　（収率４３％）を得た。

融点ニア０〜７２℃ ［α］２Ｄ６：−１６．８°（ｃ＝０　、７５、ＤＭＦ
）薄層クロマトグラフィーのＲｆ値＋０．８３元素分析
値：　　（Ｃ４５Ｈ５１Ｎ５０１２・Ｈ２Ｏとして）（
％） ＨＮ 理論値：　　６１．９９　　６．１２　　８．０３実測
値：　　６１．９９　　５．９９　　８．３０酸分解後
のアミノ酸分析値：　（モル比）アスパラギン酸　　０
．９ セリン　　　　　１，１ グリシン　　　　　０．８ リジン　　　　　　１．０ （実施例３） 七と二匙二皿り打と郊ｐ１４ 実施例２で得たＺ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌ
ｙ−Ｌｙｓ　（Ｚ）−ＯＢｚｌ　４００ｍｇにメタノー
ル２０ｍ１、酢酸８ｍｌ及び水１２ｍ１を加えて溶かし
、５％Ｐｄ−炭素８００ｍｇを加え、水素ガスを４時間
通じ、すべての保護基を切断した。Ｐｄ−炭素をろ過に
より除去し、ろ液に水を加え、溶媒を減圧下で留去し、
エーテルで洗浄した。

再び水を加え、約２ｍｌに減圧濃縮したのち、セファデ
ックスＧ−１０（ファルマシア社製、２．５Ｘ４２ｃｍ
）カラムにかけ、０．５ｗｔ％酢酸水溶液で展開し、フ
ラクション４ｍｌずつ分取した。２４〜２９番目のフラ
クションに単一性のピークを認め、この部分を集め凍結
乾燥し、テトラペプチドＨ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−
Ｌｙｓ−ＯＨ６０，８ｍｇ　（収率３２％）を得た。

［α］ｖ：　　８．６°　（ｃ＝０．１６、）１２０）
薄層クロマトグラフィーのＲｆ値、　０．５３高速液体
クロマトグラフィー：第１図 元素分析値： （Ｃ１５ＨＩ３　Ｎ５０Ｂ・１／２　ＣＨ３ＣＯＯＨ・
３Ｈ２０として）（％） Ｈ 理論値：　　３８．７１　　７．３１ 実測値：　　３８．８０　　７．１３ 酸分解後のアミノ酸分析値： アスパラギン酸　　０，９ セリン　　　　　０．９ グリシン　　　　　０．８ リジン　　　　　　１０ なお、薄層クロマトグラフィ １４．１４ １４．１２ （モル比） −は、展開溶媒を ｎ−ブタノール／ピリジン／酢酸／水（容量比で１：１
　：　１　：　１）混液としたほかは実施例１と同様に
行った。また高速液体クロマトグラフィーはウォーター
ズ社の高速液体クロマトグラフィー装置Ｍ６００型で、
カラムとしてＹＭＣバックＡ−３０２０ＤＳ（山村化学
研究断裂、４．６Ｘ１５０ｍｍ）を用い、溶媒は０．０
５％ＴＦＡを含む水溶液と０，０５％ＴＦＡを含むアセ
トニトリルの９５：５　（容量比）混合液、続いて７０
３０（容量比）混合液を段階的に用い、流速は０　、５
ｍ１７ｍ１ｎ　、検出波長２２０ｍｍで行った。

［実験例］ 以下の薬理実験例で、式（Ｉ）で表されるペプチドがヒ
スタミン遊離抑制作用とともにＩｇＥ抗体産生抑制作用
を有するため、抗アレルギー剤として利用しうろこと、
また、このペプチドが血管拡張作用を有するため、心不
全、高血圧症等の疾患の治療に利用しうろこと、更にほ
このペプチドがマイト−ジエンで刺激したリンパ球の活
性化反応を抑制し、インターロイキン（ＩＬ）−１、Ｉ
Ｌ−６、ＴＮＦ等の液性因子の産生能を高める作用を有
するため、慢性関節リウマチ、全身性エリテマトーデス
等の自己免疫疾患の治療に有用な免疫調節剤として利用
しうろことを説明する。

（実験例１） 体重３００〜３５０ｇの雄性ウィスター系ラットを受動
感作し、その腹腔内肥満細胞を用いて試験を行った。受
動感作に用いるラット抗血清はＭｏｔａの方法［１ｍｍ
ｕｎｏｌｏｇｙ、　　？、　ｐ、６８１　　（１９６４
）コおよびＨａｍａｏｋａの方法　［Ｊ　、　Ｉｍｍｕ
ｎｏｌｏｇｙ　、川、　ｐ、９５８　（１９７４）コに
準じて作製した。すなわち、卵白アルブミン（１０ｍｇ
／ｋｇ）をウィスター系雄ラット（体重２００〜２５０
ｇ）の両大腿部筋肉内に５ｍｌ／ｋｇを注射し、同時に
２Ｘ１０１０個の百日咳死菌（Ｋｉｌｌｅｄ　Ｂｏｒｄ
ｅｔｅｌｌａＰｅｒｔｕｓｓｉｓ）を腹腔内に投与して
免疫した。初回感作から１２日目にエーテル麻酔下に腹
部大動脈から採血し、抗血清を分離し７た。抗血清は一
２０℃で凍結保存した。抗血清の力価は４８ｈｒラット
ＰＣＡ反応により測定し、その力価が１２８〜２５６倍
のものを実験に供した。得られた卵白アルブミンラット
ＩｇＥ血清を２倍希釈し、その１ｍｌを腹腔内に投与し
て感作した。感作４８ｈｒ後にラットを出血致死させ、
腹腔内にリン酸緩衝化液（ＮａＣ１８ｇ、　ＭＣＩ　０
．２ｇ、　ＮａｚＨＰＯ４４２ＨｚＯ２，８８ｇ、　Ｋ
Ｈ２ＰＯ４０，２ｇ、　ＥＤＴＡ・２Ｎａ　０．２ｇ及
びウシ血清アルブミンＩｇを精製水に溶かして１リツト
ルとした溶液、ｐＨ７，４、以下ＰＢＳ（−）と略記す
る）１５ｍｌを注入し、約２分間軽く腹部をマツサージ
後、開腹して腹腔内細胞を採取した。この細胞浮遊液を
遠心分離（１，００Ｏｒｐｍ、　１０分間）シ、更にＰ
ＢＳ（−）で再懸濁し、アラビアゴム比重液（比重１．
０７５）で重層し、遠心分離（２、５０Ｏｒｐｍ。

１０分間）した。沈殿した細胞をＰＢＳ（−）で２回洗
浄し、新たにＰＢＳ（＋）［ＰＢＳ（−）のうちＥＤＴ
Ａ・２Ｎａに代えてＣａＣｌ２０．１ｇを添加した溶液
、ＰＢＳ（＋）と略記するコに浮遊させ、ｌＸ１０５個
／ｍｌに調整した後、シリコンで処理した試験管にその
細胞浮遊液を０．８ｍｌずつ分注し、３７℃で１０分間
プレインキユベートシた。細胞浮遊液を入れた試験管に
ＰＢＳ（＋）で希釈した種々の溶液の検体溶液を０．１
ｍｌ添加し、３７℃で１５分間インキュベート後、肥満
細胞からヒスタミンを浮遊させるために抗原である卵白
アルブミン（最終濃度１ｍｇ／ｍｌ）とフォスフアジチ
ル−し−セリン（最終濃度１００μｇ／ｍｇ）の混合溶
液０　、１ｍｌを加え、さらに１５分間インキュベート
してヒスタミンを遊離させた。ただし、比較薬剤の一つ
のＤＳＣＧは抗原添加３０秒前に加え、抗原添加後更に
１５分間インキュベートした。氷冷したＰＢＳ（十）１
加１を加え反応を停止させ、２．５０Ｏｒｐｍで１０分
間遠心分離した。上清２ｍｌをとり、４ｗｔ％過塩素酸
溶液１ｍｌを加え、遊離ヒスタミン量を定量する試料と
した。全ヒスタミン量を定量する試料は無処置の肥満細
胞浮遊液（ＩＸ１０５個／ｍｌ）　０．８ｍｌを１０分
間沸騰水中に置き、次いで４ｗｔ％過塩素酸を添加して
、試料とした。

各試料のヒスタミン量は蛍光法により測定し、次式によ
り、ヒスタミン遊離率（％）を算出した。

ヒスタミン遊離率（％）＝ （遊離ヒスタミン量／全ヒスタミンＪｉ）　Ｘ１００式
［ＩＥで表わされるペプチドと比較薬剤のヒスタミン遊
離率（％）を第２図に示した。第２図から明らかなよう
に、式［ＩＥで表わされるペプチドは１叶５Ｍ以上の濃
度で明らかにヒスタミン遊離抑制作用を示し、その作用
は比較薬剤のＨ−Ａｓｐ−Ｓｅｔ−Ａｓｐ−Ｐｒｏ−Ａ
ｒｇ−ＯＨより強＜、ＤＳＣＧと同程度又はそれ以上の
強さであった。

（実験例２） ［■　のペプチドのＩＥ　　　産生 免疫動物は、１群５匹のＢＡＬＢ／ｃ雄マウス（６週令
）とし、抗原のジニトロフェニルアスカリス（ＤＮＰ−
Ａｓｃａｒｉｓ）　１０　μｇを免疫増強剤の水酸化ア
ルミニウムゲル４ｍｇに吸着させて、下記に示す２通り
の実験を行った。

一方の実験では式［１］のペプチド１ｍｇを腹腔内に投
与し、３０分間後にＤＮＰ−Ａｓｃａｒｉｓと水酸化ア
ルミニウムゲルを腹腔内に投与し、その後１４４日目採
血して血清を得た。

他方の実験ではＤＮＰ−Ａｓｃａｒｉｓと水酸化アルミ
ニウムゲルを腹腔内に投与し、７日目、１４４日目び２
１１日目計３回、式［ＩＥのペプチド１ｍｇを腹腔内に
投与し、２８８日目採血して血清を得た。

両実験で得られた血清はラットの４８時間ＰＣＡ反応を
行い、抗体価を測定した。

すなわち、Ｗｉｓｔａｒ系雄ラット（２００〜２５０ｇ
）の背部の皮内に血清を感作し、４８時間後に０．５ｗ
ｔ％エバンスブルーを含むＤＮＰ−Ａｓｃａｒｉｓ溶液
を尾静脈内に注射し、現われる色素斑を３０分後に測定
してＩｇＥ抗体価を求めた。なお、ＰＣＡ反応で得られ
た抗体価がＩｇＥ抗体であることを確認するために、血
清をあらかじめ５６°Ｃで３時間加熱処置したもので感
作し、同様に操作して、ＰＣＡ反応によって抗体価を測
定した。

式［ＩＥのペプチドを１ｍｇ／ｋｇ投与したときのＩｇ
Ｅ抗体産生量をＰＣＡ反応で求めた抗体価で表わしたも
のが第３図及び第４図である。第３図及び第４図から明
らかなように、式［１］のペプチドはＩｇＥ抗体産生を
強く抑制した。なお、加熱処理血清の抗体価は一方の実
験（第３図の斜線部分）ではほとんどＯであったが、他
方の実験（第４図の斜線部分）では、わずかではあるが
抗体価を示した。

（実験例３） ■　のペプチドの血 体重２，５〜３Ｋｇの雄の家兎の胸部大動脈を摘出し、
幅４ｍｍ、長さ２５〜３０ｍｍの大動脈ラセン条片標本
を作成した。Ｔｙｒｏｄｅ液１０ｍ１中、３７±１℃で
９５容量％酸素及び５容量％炭酸ガスの混合ガスを通気
しながら大動脈ラセン条標本を２ｇ重の負荷をかけて懸
垂し、ｌｈ保って安定させた。次いで塩化カリウムを最
終濃度が１０４ｍＭとなるように、又はノルエピネフリ
ンを最終濃度が１０−６Ｍとなるよう加えて血管収縮を
惹起させ、それぞれに式（１）のベブチドトＳｅｒ−Ａ
ｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨを累積投与して、血管の弛
緩反応を観察した。なお、比較薬剤としてはニトロプル
シド（ナトリウム塩）及びベラパミルを用いた。

第１表及び第２表は、それぞれ塩化カリウムで収縮させ
た血管及びノルエピネフリンで収縮させた血管を用いた
ときの、式〔Ｉ〕のペプチド及び比較薬剤の血管拡張作
用を弛緩率で表した結果である。

第１表及び第２表の結果から、式［１）のペプチドはカ
リウムで引き起こした血管収縮に対してほとんど弛緩作
用を示さないが、ノルエピネフリンで引き起こした血管
収縮に対しては用量依存的に弛緩作用を示し、その作用
はベラパミルよりもニトロプルシドに類似していること
がわかった。

第１表　カリウムで惹起した血管収縮に対する式〔Ｉ〕
のペプチド及び比較薬剤の作用式［１）の　　％　％　
％　　％ ペプチド　　　０　０　０　７゜２　１８．６ベラバミ
ル　　７，１　６８，３　９７．１１００　１００第２
表　ノルエピネフリンで惹起した血管収縮に対する式（
１）のペプチド及び比較薬剤の作用 ニトロプル シド　　　　　１６．１　５９．４　８６．０　９３．
８　９８．８（実験例４） ■　のペプチドの　環　、へ　ぼ 式（１）で表されるペプチドの循環器系へ及ばず影響を
調べるため、本ペプチドをラットの静脈内に投与して血
圧、心拍数及び心電図を観察した。

体重３００〜３５０ｇのウィスタ系雄ラットをウレタン
（１，５ｇ重Ｋｇ静注）で麻酔したのち、左側大腿動脈
に挿入したカニユーレからトランスジューサを介して動
脈圧を測定し、また心拍数は心電図（第■誘導）のＲ波
をトリが−として心拍数量針により測定した。

なお、本ペプチドはラットの体重ＩＫｇ当り３０ｍｇを
生理食塩水に溶かし大腿静脈から投与した。第５図は本
ペプチドを投与したのちのラットの血圧（平均血圧）及
び心拍数を示したグラフである。

投与直後から血圧の降下か起こり、１分後で血圧は最小
値（投与前の平均血圧に比へ８％減少）を示した。しか
し投与３分後には投与前の血圧を回復した。いっぽう、
心拍数は投！Ｅｊ直後に６％減少し、その減少は６０分
間持続した。また心電図では、投与直後にＱＴ間に軽度
の延長が認められたものの、ＱＲ８の幅は変化がなかっ
た。

（実験例５） ヘパリン存在下採血した健常人から、フィコール−ハイ
パキュー　（Ｆｉｃｏｌｌ−Ｈｙｐａｑｕｅ）比重遠心
法にて単核細胞を採取し、ウシ胎児血清（Ｆ　Ｂ　Ｓと
略す、大日本製薬製）を１０容囲％添加したＲＰＭｌ−
１６４０培養液（ギブコ社製）にこれを浮遊した。細胞
数の濃度をｌＸ１０６個／ｍｌに調整し、これを９６穴
マイクロプレート（ファルコン社製）の各ウェルに１０
０μｍずつ分注した。

次いでＰ　ＨＡ　（Ｐｈｙｔｏｈｅｍａｇｇｌｕｔｉｎ
ｉｎ）　１　ｕ　ｇ　／　ｍ　１５Ｃｏｎ−Ａ（Ｃｏｎ
ｃａｎａｖａｌｉｎ　Ａ）　１０　ｐ　ｇ　／　ｍ　ｌ
もしくはＰ　ＷＭ（Ｐｏｋｅｗｅｅｄ　ｍｉｔｏｇｅｎ
）　１５　μｇ　／　ｍ　Ｉの各レクチン（いずれも第
−化学薬品源）、及び所定濃度のペプチド〔Ｉ〕を添加
し、１０％ＦＢＳ添加ＲＰＭＩ−１６４０培地を加えて
最終液量を２００μｍとしたのち、５容量％ＣＯ２イン
キュベータ内、３７℃で７２時間培養した。培養終了２
４時間前に３Ｈ−チミジン０．５μＣｉを加え、セル−
ハーベスタ−（Ｂｉｏ−Ｌａｂ社製）にて細胞を回収し
、液体シンチレーションカウンターで３Ｈ−チミジン取
込量を測定した。第３表はその測定結果を示し、表中の
数字は平均カウント数（ｃｐｍ）士標準誤差を示す。

第３表の結果から、式〔Ｉ〕のペプチドは、マイトーゲ
ンを添加しない場合、リンパ球の３Ｈ−チミジン取込量
にあまり影響を及ぼさないが、各レクチン、特にＣｏｎ
−Ａで刺激したリンパ球の３Ｈ−チミジン取込量を強く
抑制することがわかる。

第３表　各種レフＤで刺激した斡バ球の３Ｈ−チミジン
取込量 以下余白 第３表（つづき） （実験例６） ヘパリン存在下採血した健常人から、フィコール−ハイ
パキュー比重遠心法で分離した単核細胞を、ＦＢＳＩＯ
容量％を容量口たＲＰＭＩ−１６４０培養液に浮遊した
。これを培養チューブ（ファルコン２０５４チューブ）
にＩ　Ｘ　１０６個／ｍｌずつ分注し、式〔Ｉ〕で表さ
れるペプチドを添加して、インキュベータにて一週間培
養を行った。

培養終了後、遠心して（１，５００ｒｐｍ、　１０分間
）、上清を採取し、培養上清中の液性因子を測定した。

インターロイキン１　（ＩＬ−１）及び腫瘍壊死因子（
ＴＮＦ）はそれぞれアマジャム社及びメドジニックス社
のラジオイムノアッセイキットで測定した。インターロ
イキン６　（ＩＬ−６）は抗ＩＬ−６抗体（ジェンザイ
ム社製）を用いた酵素免疫測定法（ＥＬＩＳＡ）で行っ
た。測定結果を第４表に示した。なお数値は平均値士標
準誤差を表す。

第４表　リンパ球の液性因子産生能 第４表の結果から、式〔Ｉ〕のペプチドはＩＬ−１、Ｉ
　Ｌ−６及びＴＮＦの産生を促進することかわかる。

［発明の効果コ 本発明により、抗アレルギー剤として優れた性質をもつ
ほかに、血管拡張剤及び免疫調節剤としても有用な新規
ペプチドを提供することができた。

また、式［ｎ）及び式〔■〕で表されるペプチド誘導体
は、式〔Ｉ〕で表されるペプチドを製造する際の中間体
として重要で、この化合物を経由することにより、式〔
Ｉ〕で表されるペプチドを容易に製造することができた
。

【図面の簡単な説明】

第１図は本発明のＨ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ
−ＯＨの高速液体クロマトグラムを示す。縦軸は２２０
ｎｍの紫外線吸収の強度、横軸は溶出時間（分）である
。 第２図は、本発明のＨ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙ
ｓ−ＯＨ及び比較薬剤（Ｈ−Ａｓｐ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−
Ｐｒｏ−Ａｒｇ−ＯＨ及びＤＳＣＧ）のヒスタミン遊離
率（％）を示したグラフである。 縦軸はヒスタミン遊離率（％）、横軸は化合物及び濃度
（Ｍ）である。 第３図は、本発明のＨ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙ
ｓ−ＯＨの前投与によって産生されたＩｇＥ抗体価を示
したグラフで、斜線の部分は加熱処理した血清の抗体価
である。 第４図は、ＩｇＥ抗体産生の持続期に本発明のＨ−８ｅ
ｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨを投与した場合に産
生されたＩｇＥ抗体価を示したグラフで、斜線の部分は
加熱処理した血清の抗体価である。第３図及び第４図は
それぞれ縦軸に抗体価、横軸に化合物及びその投与：ｊ
ｌ（ｍｇ／ｋｇ）を示している。 第５図はＨ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｕｙ−Ｌｙｓ−ＯＨの
循環器系（血圧及び心拍数）へ及ばず影響を示すグラフ
である。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、次の式〔 I 〕 Ｈ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨ〔 I 〕（
   ただし、ＳｅｒはＬ−セリン残基、ＡｓｐはＬ−アスパ
   ラギン酸残基、Ｇｌｙはグリシン残基、ＬｙｓはＬ−リ
   ジン残基を示す）で表されるテトラペプチド又はその薬
   学的に許容される塩。 ２、次の式〔II〕 Ｚ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ
   ）−ＯＢｚｌ〔II〕（ただし、ＳｅｒはＬ−セリン残基
   、ＡｓｐはＬ−アスパラギン酸残基、Ｇｌｙはグリシン
   残基、ＬｙｓはＬ−リジン残基、Ｚはベンジルオキシカ
   ルボニル基、Ｂｚｌはベンジル基を示す）で表されるＬ
   −セリン−Ｌ−アスパラギン酸−グリシン−Ｌ−リジン
   誘導体。 ３、次の式〔III〕 Ｂｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＧＩｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−
   ＯＢｚｌ〔III〕（ただし、ＡｓｐはＬ−アスパラギン
   酸残基、Ｇｌｙはグリシン残基、ＬｙｓはＬ−リジン残
   基、Ｂｏｃはｔ−ブチルオキシカルボニル基、Ｂｚｌは
   ベンジル基、Ｚはベンジルオキシカルボニル基を示す）
   で表されるＬ−アスパラギン酸−グリシン−Ｌ−リジン
   誘導体。 ４、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（ただし、Ｇｌｙはグリシン
   残基、Ｂｏｃはｔ−ブチルオキシカルボニル基を示す）
   で表されるグリシン誘導体とＨ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚ
   ｌ（ただし、ＬｙｓはＬ−リジン残基、Ｚはベンジルオ
   キシカルボニル基、Ｂｚｌはベンジル基を示す）で表さ
   れるＬ−リジン誘導体を、脱水縮合させてＢｏｃ−Ｇｌ
   ｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌとし、次いで酸でＢｏｃ基
   を外し、これにＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨで表
   されるＬ−アスパラギン酸誘導体を加え、脱水縮合させ
   てＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）
   −ＯＢｚｌとし、次いで酸でＢｏｃ基を外し、これにＺ
   −Ｓｅｒ−ＯＨで表されるＬ−セリン誘導体を加え、脱
   水縮合させたのち、接触還元することを特徴とする請求
   項１記載のＨ−Ｓｅｒ−Ａｓｐ−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ−ＯＨ
   の製造法。 ５、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（ただし、Ｇｌｙはグリシン
   残基、Ｂｏｃはｔ−ブチルオキシカルボニル基を示す）
   で表されるグリシン誘導体とＨ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚ
   ｌ（ただし、ＬｙｓはＬ−リジン残基、Ｚはベンジルオ
   キシカルボニル基、Ｂｚｌはベンジル基を示す）で表さ
   れるＬ−リジン誘導体を、脱水縮合させてＢｏｃ−Ｇｌ
   ｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌとし、次いで酸でＢｏｃ基
   を外し、これにＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨで表
   されるＬ−アスパラギン酸誘導体を加え、脱水縮合させ
   てＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）
   −ＯＢｚｌとし、酸でＢｏｃ基を外し、これにＺ−Ｓｅ
   ｒ−ＯＨで表されるＬ−セリン誘導体を加え、脱水縮合
   させることを特徴とする請求項２記載のＺ−Ｓｅｒ−Ａ
   ｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＧＩｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌの
   製造法。 ６、Ｂｏｃ−Ｇｌｙ−ＯＨ（ただし、Ｇｌｙはグリシン
   残基、Ｂｏｃはｔ−ブチルオキシカルボニル基を示す）
   で表されるグリシン誘導体とＨ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚ
   ｌ（ただし、ＬｙｓはＬ−リジン残基、Ｚはベンジルオ
   キシカルボニル基、Ｂｚｌはベンジル基を示す）で表さ
   れるＬ−リジン誘導体を、脱水縮合させてＢｏｃ−Ｇｌ
   ｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌとし、次いで酸でＢｏｃ基
   を外し、これにＢｏｃ−Ａｓｐ（ＯＢｚｌ）−ＯＨで表
   されるＬ−アスパラギン酸誘導体を加え、脱水縮合させ
   ることを特徴とする請求項３記載のＢｏｃ−Ａｓｐ（Ｏ
   Ｂｚｌ）−Ｇｌｙ−Ｌｙｓ（Ｚ）−ＯＢｚｌの製造法。 ７、請求項１記載のテトラペプチド又はその薬学的に許
   容される塩を有効成分として含有する抗アレルギー剤。 ８、請求項１記載のテトラペプチド又はその薬学的に許
   容される塩を有効成分として含有する血管拡張剤。 ９、請求項１記載のテトラペプチド又はその薬学的に許
   容される塩を有効成分として含有する免疫調節剤。