JPH03264535A

JPH03264535A - ヒト免疫不全ウィルス感染症治療剤

Info

Publication number: JPH03264535A
Application number: JP2061804A
Authority: JP
Inventors: Isao Kaneko; 勲金子; Kenji Momota; 百田　憲司
Original assignee: Sankyo Co Ltd
Current assignee: Sankyo Co Ltd
Priority date: 1990-03-13
Filing date: 1990-03-13
Publication date: 1991-11-25

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】（産業上の利用分野）本発明はコンプレスタチン（Ｃｏｍｐｌｅｓｔａｔｉｎ
）類およびその薬理上許容される塩を有効成分とするヒ
ト免疫不全ウィルス感染症治療剤に関する。

（従来の技術）ヒト免疫不全ウィルス感染症はヒト免疫不全ウィルスが
宿主の免疫能を著しく低下させるため間接的に種々の病
原菌による感染を引き起こし、患者を死に至らしめる疾
患である（Ｒ，Ｃ，Ｇａ１ｌｏ、　５ｃｉｅｎｔｉｆｉ
ｃ　Ａｍｅｒｉｃａｎ、　３．５１−６３　（１９８７
））。

そこでヒト免疫不全ウィルス感染症患者に対し、直接ヒ
ト免疫不全ウィルスの細胞内での増殖を阻害するか、ま
たはヒト免疫不全ウィルスのターゲット細胞への吸着を
阻害し感染を阻止する治療薬の研究が続けられている。

現在までヒト免疫不全ウィルスの増殖を阻害する代表的
な治療薬としてはアジドチミヂン（ＡＺＴ）（Ｈ，Ｍｉ
ｔｕｙａ　ａｔ　ａｌ、、　Ｐｒｏ、　Ｎａｔｌ。Ａｃ
ａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ。

８２．７０９６−７１００　（１９８５））があげられ
る。また、ヒト免疫不全ウィルスのターゲット細胞への
吸着を阻害する代表的な治療薬としてはデキストラン硫
酸（Ｈ，Ｍｉｔｕｙａ　ｅｔ　ａｌ、、　５ｃｉｅｎｃ
ｅ、２４０．６４６−６４９（１９８８））および可溶
性ＣＤ４　　（ＭＪａｔａｎａｂｅ　ｅｔ　ａｌ、。

Ｎａｔｕｒｅ、３３７．２５７−２７０　（１９８９）
）などがあげられる。

しかしながら、これらの治療薬は一定の治療効果は認め
られるものの毒性も強く決定的な治療薬とはなっていな
い。

（発明が解決しようとする課Ｍ）本発明者等はヒト免疫不全ウィルス感染症の予防および
治療を目的として種々の化合物について鋭意研究した結
果、コンプレスタチン類がヒト免疫不全ウィルスの感染
を阻害することを見出して本発明を完成した。

（課題を解決するための手段）本発明は式か、またはＲ１が水素原子を示し、Ｒ２が水酸基を示す
。）を有するコンプレスタチン類およびその薬理上許容
される塩を有効成分とするヒト免疫不全ウィルス感染症
治療剤に関する。

上記式中、Ｒ１とＲ２が一緒になって酸素原子を示す化
合物を以下、「コンプレスタチン（Ｃｏｍｐｌｅｓｔａ
ｔｉｎ）　Ｊと称し、Ｒ１が水素原子を示し、Ｒ２が水
酸基を示す化合物を以下、「ジヒドロコンプレスタチン
（Ｄｉｈｙｄｒｏｃｏｍｐｌｅｓｔａｔｉｎ）　Ｊと称
する。

本発明の前記式を有するコンプレスタチン類は薬理上許
容される無毒性の塩の形で使用することができる。その
ような塩としては、例えばナトリウム、カリウムのよう
なアルカリ金属；リジン、アルギニンのような塩基性ア
ミノ酸；などとの塩をあげることができる。更に、本発
明の前記式を有するコンプレスタチン類は薬理上許容さ
れる無毒性の酸付加塩の形で使用することができる。そ
のような酸付加塩としては、例えば塩酸、硫酸、硝酸、
リン酸のような無機酸；酢酸、コハク酸、マレイン酸、
フマール酸、リンゴ酸、グルタミン酸、アスパラギン酸
、ｐ−トルエンスルホン酸、メタンスルホン酸のような
有機酸；などとの酸付加塩をあげることができる。

しかしながら、本発明の薬理上許容される塩はこれらに
限定されるものではない。

本発明の前記式を有するコンプレスタチン類は種々の異
性体を有する。前記式においては、これらの異性体およ
びこれら゛の異性体の混合物がすべて単一の式で示され
ている。従って、本発明においてはこれらの異性体およ
びこれらの異性体の混合物をもすべて含むものである。

コンプレスタチンおよびジヒドロコンプレスタチンはい
ずれも公知の化合物であり、例えばコンプレスタチンは
Ｊ、　Ａｎｔｉｂｉｏｔｉｃｓ、４２．２３６−２４１
（１９８９）およびＴｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ　Ｌｅｔｔ
ｅｒｓ、３０．４９８７−４９９０　（１９８９）に記
載されており、ジヒドロコンプレスタチンはＮ１ｐｐｏ
ｎ　Ｎｏｕｇｅｉｋａｇａｋｕ　Ｋａｉｓｈｉ、６２．
５７６　（１９８８）に記載されている。

コンプレスタチンおよびジヒドロコンプレスタチンの抗
ヒト免疫不全ウィルス活性測定はＲ，Ｐａｕｗｅｌらの
方法に従って測定できる（Ｒ，Ｐａｕｗｅｌ　ｅｔａｌ
、、　Ｊ、　Ｖｉｒｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｍｅｔｈｏｄｓ
、２０．３０９−３２１　（１９８８））。すなわち、
検体化合物添加のヒト免疫不全ウィルス感染ＭＴ−４細
胞（ヒトリンパ球系細胞、以下同様）および検体化合物
添加のヒト免疫不全ウィルス感染症ス同様に、検体化合物無添加のヒト免疫不全ウィルス感染
ＭＴ−４細胞および検体化合物無添加のヒト免疫不全ウ
ィルス非感染ＭＴ−４細胞をそれぞれ培養する。次いで
、ＭＴＴ法（Ｌ、Ｍ、Ｇｒｅｅｎ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ
。

Ｉｍｍｕｎｏｌｏ、　Ｍｅｔｈｏｄｓ、７０．２５７−
２６８　（１９８４））に従って生細胞を測定してヒト
免疫不全ウィルスによる細胞障害活性を求める。これに
より検体化合物の抗ヒト免疫不全ウィルス活性を測定す
ることができる。

本発明の前記式を有する化合物は種々の形態で投与され
る。その投与形態としては例えば錠剤、カプセル剤、顆
粒剤、散剤、シロップ剤等による経口投与または注射剤
（静脈内、筋肉内、皮下）、点滴剤、廃剤等による非経
口投与をあげることができる。これらの各種製剤は、常
法に従って生薬に賦形剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、矯
味矯臭剤、溶解補助剤、懸濁剤、コーティング剤などの
医薬の製剤技術分野において通常使用しうる既知の補助
剤を用いて製剤化することができる。その使用量は症状
、年令、体重、投与方法および剤形等によって異なるが
、通常は底入に対して１日５０　ｍｇ乃至５，０００　
ｍｇを投与することができる。

（実施例）以下に実施例、試験例、製剤例および参考例をあげて本
発明を更に具体的に説明するが、本発明はこれらに限定
されるものではない。

実施例１．抗ヒト免疫不全ウィルス活性抗ヒト免疫不全
ウィルス活性測定は常法に従って測定した（Ｒ，Ｐａｕ
ｗｅｌ　ｅｔ　ａｌ、、　Ｊ、　Ｖｉｒｏｌｏｇｉｃａ
ｌＭｅｔｈｏｄｓ　２０．３０９−３２１　（１９８８
））。

すなわち、対数増殖期にあるＭＴ−４細胞を１５０×ｇ
で５分間遠心し、得られたセルペレットにヒト免疫不全
ウィルス１型を１０　　ＣＣＩＤ５ｏの濃度で３７℃で
１時間感染させた。その後、牛胎児血清１０　％添加Ｒ
ＰＭＩ−１６４０培地（以下、「血清培地」と称する）
で遠心し、洗浄することによりヒト免疫不全ウィルス感
染ＭＴ−４細胞を得た。ヒ１〜免疫不全つィルス感染Ｍ
Ｔ−４細胞およびヒト免疫不全ウィルス非感染ＭＴ−４
細胞をそれぞれ４×１０”細胞／ｍｌになるように血清
培地に懸濁した。

９６穴プラスチツクマイクロタイタープレート中に、あ
らかじめ段階希釈した検体化合物溶液（血清培地に懸濁
したもの）を各式に１００μｍづつ入れ、次いでこの各
式に上記細胞を各々１００μｍづつ添加し、５％の炭酸
ガスの存在下で３７℃で６日間静置培養した。

同様に、検体化合物無添加のヒト免疫不全ウィルス感染
ＭＴ−４細胞および検体化合物無添加のヒト免疫不全ウ
ィルス非感染ＭＴ−４細胞を培養した。

培養終了後、ＭＴＴ　（３−（４，５−ｄｉｍｅｔｈｙ
ｌｔｈｉａｚｏｌ−２−ｙｌ）−２，５−ｄｉｐｈｅｎ
ｙｌｔｅｔｒａｚｏｌｉｕｍ　ｂｒｏｍｉｄｅ）法に基
づき生細胞を測定しくり、Ｍ、Ｇｒｅｅｎ　ｅｔ　ａｌ
、、　Ｊ、　Ｉｍｍｕｎｏｌｏ、　Ｍｅｔｈｏｄｓ、７
０．２５７−２６８　（１９８４））　、ヒト免疫不全
ウィルスによる細胞障害活性を求めた。検体化合物無添
加のヒ１〜免疫不全つィルス感染肘４細胞の細胞障害活
性を１００　％とし、検体化合物無添加のヒト免疫不全
ウィルス非感染ＭＴ−４細胞の細胞障害活性を０％とし
て、ヒト免疫不全ウィルス感染ＭＴ−４細胞の細胞障害
活性を５０％抑制する検体の濃度（ＥＤ５゜）を求めた
。

また、検体化合物の細胞毒性活性としてヒト免疫不全ウ
ィルス非感染ＭＴ−４細胞の増殖を５０　％抑制する濃
度（ＣＤ５．）を求め、ＣＤ５ｏ／ＥＤ５゜値を抗ヒト
免疫不全ウィルス活性の選択係数（Ｓ、　Ｉ）とした。

結果を表に示す。

化合物ＥＤｓｏ　　　　ＣＤ５ｏ　　　　　Ｓ、Ｉ（μｇ／ｍ
ｌ）　　（μｇ／ｍｌ）コンプレスタチン　　　　　　　　　　　　　　　１．
６２　　　　　＞２５０　　　　　　＞１５４シ゛ヒト
■コンプレスタチン　　　　　　　　１．９４　　　　
　＞２５０　　　　　　＞１２８７シ゛ドチミチ゛ン　
　　　　　　　　　　　　　０．０３６　　　　　２４
　　　　　　６６６テ゛キストラン硫酸　（ＭＷ、５０
０Ｋ）　　１０　　　　　　　　＞５００　　　　　　
＞　　５０その結果、コントロールのヒト免疫不全ウィ
ルス感染ＭＴ−４細胞はヒト免疫不全ウィルスによりす
べて死滅したが、コンプレスタチンおよびジヒドロコン
プレスタチンはその濃度に依存してヒト免疫不全ウィル
ス感染細胞の生存率を高めた。すなわち、表のＥＤ５゜
値から明らかなように、著明な抗ヒト免疫不全ウィルス
活性を示した。

更に、コンプレスタチンおよびジヒドロコンプレスタチ
ンのヒト免疫不全ウィルス非感染ＭＴ−４細胞に対する
細胞毒性活性（ＣＤｇｏ）はともに弱かっ０た。

したがって、同時に試験した逆転写酵素阻害剤のアジド
チミヂンおよびヒト免疫不全ウィルス吸着阻害剤のデキ
ストラン硫酸と比べて、コンプレスタチンおよびジヒド
ロコンプレスタチンは抗ヒト免疫不全ウィルス活性にお
いてアジドチミヂンより弱いが、デキストラン硫酸より
も強かった。

しかし、細胞毒性活性（ＣＤ５ｏ）はアジドチミヂンよ
り弱かった。

以上の結果より、コンプレスタチンおよびジヒドロコン
プレスタチンはデキストラン硫酸と同等もしくはそれ以
上の強い抗ヒト免疫不全ウィルス活性を示し、かつ高い
選択係数を有することが明らかになった。

試験例１．急性毒性急性毒性はｄｄｙマウス（雄）５匹を用いて、常法に従
って４１す定した。すなわち、コンプレスタチ’、ｉヲ
３００　ｍｇ／ｋｇ経口投与して５日間観察したが、毒
性は認められなかった。ジヒドロコンプレスタチンにつ
いても同様に毒性は認められなかった６１製剤例工、カプセル剤処方コンプレスタチン　　　　　　　１００　　　ｍｇ乳糖
　　　　　　　　　　　　　１００　　　ｍｇトウモロ
コシ澱粉　　　　　　　１４８．８　　ｍｇステアリン
酸マグネシウム　　　　］、、２　　ｍｇ全量　　　　
３５０　　ｍｇ上記処方の粉末を混合し、２０メツシユのふるいを通し
た後、この粉末を３５０　ｍｇを２号ゼラチンカプセル
に入れ、カプセル剤とした。

参考例１．ジヒドロコンプレスタチンの製造コンプレス
タチン１１０　ｍｇをメタノール１０　ｍｌに懸濁させ
、それに０．１規定の水酸化ナトリウム水溶液０．５　
ｍｌを加えて完全に溶解した後、水素化ホウ素ナトリウ
ムの粉末５０　ｍｇを加えて室温で３０分間攪拌した。

反応終了後、反応混合物に水１００　ｍｌを加え、更に
１規定の塩酸で酸性（ｐＨ３，０）にして過剰の水素化
ホウ素ナトリウムを分解した。次いで、反応混合物をダ
イアイオンＨＰ−２０（商品名；三菱化成■製）　３０
　ｍｌのカラ２ムに付し、順次水洗、２０　％アセトン水で洗浄した後
、４０　％アセトン水（アンモニア水でアルカリ性にし
たもの）で溶出した。溶出液よりアセトンを留去した後
、得られた残渣を凍結、乾燥すると粉末の標記目的化合
物が８０　ｍｇ得られた。

本化合物は高分解能ＦＡＢ−ＭＳで測定するとＭｌのＭ
／Ｚ値として１３２７．１２６０が得られ、この値から
分子式としてＣ６□Ｈ４７Ｎ　７０１５Ｃ１６（計算値
１３２７、１２６６）が決定された。図１に本化合物の
ＨＭＢＣ（Ｈｅｔｅｒｏｎｕｃｌｅａｒ　Ｍｕｌｔｉｐ
ｌｅ　Ｂｏｎｄ　Ｃｏｒｒｅｌａｔｉｏｎ）スペクトル
（δ；　ＰＰｍ）を示す。図中、Ａは重ジメチルスルホ
キシド中、内部基準にテトラメチルシランを使用して測
定した１３Ｃ−核磁気共鳴スペクｌ〜ル（４００ＭＨｚ
）を示す。Ｂは重ジメチルスルホキシド中、内部基準に
テトラメチルシランを使用して測定した１Ｈ−核磁気共
鳴スペクトル（４００ＭＨｚ）を示す。

（発明の効果）本発明のコンプレスタチンおよびジヒドロコンプレスタ
チンはヒト免疫不全ウィルス感染症に対し優れた治療効
果を示し、かつ毒性の低い化合物であり、ヒト免疫不全
ウィルス感染症の治療および予防に有用である。

【図面の簡単な説明】

図工はジヒドロコンプレスタチンの核磁気共鳴スペクト
ルを示す。

Claims

【特許請求の範囲】式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、Ｒ＾１とＲ＾２が一緒になって酸素原子を示す
か、またはＲ＾１が水素原子を示し、Ｒ＾２が水酸基を
示す。）を有するコンプレスタチン類およびその薬理上
許容される塩を有効成分とするヒト免疫不全ウィルス感
染症治療剤。