JPH03193711A - Cosmetic - Google Patents

Cosmetic

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JPH03193711A
JPH03193711A JP33289589A JP33289589A JPH03193711A JP H03193711 A JPH03193711 A JP H03193711A JP 33289589 A JP33289589 A JP 33289589A JP 33289589 A JP33289589 A JP 33289589A JP H03193711 A JPH03193711 A JP H03193711A
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JP
Japan
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cosmetic
conchiolin
pearl oyster
mucus
hydrolysate
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Kenji Shimomura
健次 下村
Kiyosuke Ueda
清資 上田
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Mikimoto Pharmaceutical Co Ltd
Original Assignee
Mikimoto Pharmaceutical Co Ltd
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Abstract

PURPOSE:To obtain a cosmetic having spread and a dampish feeling and improving texture and gloss of skin by combining a conchiolin hydrolysate and/or a hydrolysate of pearl oyster mucus with a polysaccharide obtained from cultivation of aureobasidium pullulan. CONSTITUTION:A hydrolysate of conchiolin obtained by finely crushing insoluble component obtained from shellfishes such as pearl oyster or hard-shelled mussel with ash-removing treatment of acid and/or a hydrolysate of pearl oyster mucus obtained from pearl oyster with hydrolyzing of mucus is mixed with a polysaccharide (a natural neutral mucopolysaccharide mainly having regular alpha-1,6 bonding of maltotriose) obtained from aureobasidium pullulan with cultivation and contained in the aimed cosmetic. Said cosmetic has excellent spread and a dampish feeling with making skin to have more finer texture and better gloss and also has excellent safety and stability.

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 化粧料にのび、しっとり感を付与し、肌のきめ、肌の艶
をよくする化粧料であって安全性、安定性に優れた化粧
料に関する。
[Detailed Description of the Invention] [Industrial Application Field] A cosmetic that spreads on the cosmetic, imparts a moist feeling, and improves the texture and luster of the skin, and has excellent safety and stability. Regarding.

〔従来の技術〕[Conventional technology]

コンキオリン加水分解物とアコヤ貝粘液加水分解物につ
いては、特開昭62−221612号公報、特開昭62
−223104号公報、特開昭63−57507号公報
等で化粧品原料として特筆すべき物質であることが示さ
れている。
Regarding conchiolin hydrolyzate and pearl oyster mucus hydrolyzate, JP-A-62-221612 and JP-A-62
It has been shown in Japanese Patent Application Laid-open No. 223104 and Japanese Patent Application Laid-Open No. 63-57507 that it is a substance worthy of special mention as a raw material for cosmetics.

コンキオリンはアコヤ貝、イガイ、ムラサキイガイ等の
貝類を酸によって脱灰処理して、不溶分を集め、これを
微粉砕したものであるが、更にこのコンキオリンを主成
分とした粉体を例えば2〜10%の塩酸水溶液により加
水分解した後、塩酸を除去してコンキオリンの加水分解
物を得る(これを単にコンキオリンということもある)
Conchiolin is made by decalcifying shellfish such as pearl oysters, mussels, and mussels with acid, collecting insoluble matter, and finely pulverizing this. % hydrochloric acid aqueous solution, and then remove the hydrochloric acid to obtain a hydrolyzate of conchiolin (this is also simply called conchiolin).
.

アコヤ貝粘液加水分解物も、成分的には、このコンキオ
リンの加水分解物と同一のものを主成分とするものであ
る。
The pearl oyster mucus hydrolyzate also has the same components as the conchiolin hydrolyzate as its main component.

オーレオバシデューム プルランを培養して得られる多
糖類は主としてマリトトリオース(グルコース3分子が
α−1,4結合したもの)が規則正しく、α−1,6結
合した天然中性粘質多糖類である。
The polysaccharide obtained by culturing Aureobasidum pullulan is a natural neutral viscous polysaccharide consisting mainly of malitotriose (3 molecules of glucose linked together with α-1,4 bonds) with regular α-1,6 bonds. It is.

この多糖類(プルランとも称される)は、広く食品分野
に於いて用いられている。その用途は、その性質である
接着性、固結力、粘着性、被膜性を活かして、賦形剤や
品質改良剤、フィルム形成剤、安定剤として用いられ、
化粧品に於いても一部用いられている。
This polysaccharide (also called pullulan) is widely used in the food field. It is used as an excipient, a quality improver, a film forming agent, and a stabilizer by taking advantage of its properties of adhesion, consolidation, tackiness, and film properties.
It is also used in some cosmetics.

化粧料に求められる機能としては様々なものがあるが大
きく分けて、次の4点がある。1.安全性、2.安定性
、3.官能面、4.有効性である。
There are various functions required of cosmetics, but they can be broadly divided into the following four points. 1. Safety, 2. Stability, 3. Sensual aspect, 4. It is effectiveness.

これらの課題は、過去において様々な検討が加えられて
きたが、まだまだ解決されているわけではない。
Although various studies have been conducted on these issues in the past, they have not yet been resolved.

〔発明が解決しようとする課題〕[Problem to be solved by the invention]

本発明の目的は化粧料にのび、しりとり感を付与し、肌
のきめ、肌の艶をよくする化粧料であって、安全性が高
く、安定性に優れた化粧料を提供することにある。
An object of the present invention is to provide a cosmetic that spreads on the cosmetic, gives a moisturizing feeling, improves the texture and luster of the skin, and is highly safe and has excellent stability. .

〔課題を解決するための手段〕[Means to solve the problem]

本発明者らは、有効性、安全性、安定性、官能面で質の
向上と新たな有効性のある化粧料の開発を鋭意研究した
結果、コンキオリン加水分解物及び/又はアコヤ貝粘液
加水分解物と、オーレオバシデュウム プルラン(Au
reobasidlum pullulans)を培養
して得られる多糖類とを組み合わせて化粧料に含有させ
ることによって、今までにない化粧料が得られた。
As a result of intensive research into the development of cosmetics with improved effectiveness, safety, stability, and sensory aspects and new effectiveness, the present inventors discovered that conchiolin hydrolyzate and/or pearl oyster mucus hydrolyzate Things and Aureobasidium pullulan (Au
An unprecedented cosmetic was obtained by incorporating it into a cosmetic in combination with a polysaccharide obtained by culturing S. reobasidlum pullulans.

即ち本発明はコンキオリン加水分解物及び/又はアコヤ
貝粘液加水分解物と、オーレオバシュデューム プルラ
ン(Aureobasidlum pullulans
 )を培養して得られる多糖類とを含有してなる化粧料
である。
That is, the present invention provides conchiolin hydrolyzate and/or pearl oyster mucus hydrolyzate, and Aureobasidlum pullulans.
) is a cosmetic containing a polysaccharide obtained by culturing.

コンキオリン加水分解物とアコヤ貝粘液加水分解物につ
いては、特開昭62−221612号公報、特開昭62
−223104号公報、特開昭63−57507号公報
等にその製法や内容が詳しく記載されているので、その
製法に従って必要な原料を得る。
Regarding conchiolin hydrolyzate and pearl oyster mucus hydrolyzate, JP-A-62-221612 and JP-A-62
The manufacturing method and content thereof are described in detail in JP-A-223104, JP-A-63-57507, etc., and the necessary raw materials are obtained according to the manufacturing method.

簡単に要約すると、アコヤ貝、イガイ、ムラサキイガイ
等の貝類を酸によって脱灰処理して、不溶分を集め、こ
れを微粉砕したものがコンキオリンであるが、更にこの
粉体を例えば0.5〜15%の塩酸水溶液を使用し0〜
130℃に温度コントロールしながら30分〜10日間
処理して加水分解する。この加水分解物から塩酸を除去
して、コンキオリンの加水分解物を得る(これを単にコ
ンキオリンということもある)。
To briefly summarize, conchiolin is obtained by decalcifying shellfish such as pearl oysters, mussels, and mussels with acid, collecting insoluble matter, and finely pulverizing this. 0~ using 15% hydrochloric acid aqueous solution
Hydrolysis is carried out by treatment for 30 minutes to 10 days while controlling the temperature at 130°C. Hydrochloric acid is removed from this hydrolyzate to obtain a hydrolyzate of conchiolin (sometimes this is simply called conchiolin).

アコヤ貝の粘液加水分解物は、アコヤ貝を脱殻し、デカ
ンテーション、濾過、遠心分離等により粘液を採取する
。通常は、この粘液を加圧下に約120〜150℃まで
加熱して沈澱処理を行う。
A pearl oyster mucus hydrolyzate is obtained by removing the shell of a pearl oyster and collecting the mucus by decantation, filtration, centrifugation, etc. Usually, this slime is heated to about 120 to 150° C. under pressure to carry out precipitation treatment.

この沈澱物を酸、アルカリ、又は酵素によって加水分解
処理して粘液加水分解物を得る。
This precipitate is hydrolyzed with acid, alkali, or enzyme to obtain a mucus hydrolyzate.

蛋白分解酵素例えばトリプシン、パパイン、プロナーゼ
等の酵素を利用すれば、酵素の特異性を利用して、必要
な分子量のペプチドが得られ、トリプトファン等の分解
もなく、副生物も少ないので好ましい。化粧品に使用す
る場合特にエマルジョンでは乳化の破壊が起る場合もあ
るので、更に脱塩することが好ましい。
It is preferable to use a proteolytic enzyme such as trypsin, papain, pronase, etc., because the specificity of the enzyme can be used to obtain a peptide of the required molecular weight, there is no decomposition of tryptophan, etc., and there are few by-products. When used in cosmetics, especially in emulsions, the emulsification may be broken, so further desalting is preferred.

一方、オーレオバシデューム プルラン(Aureob
asidlum pullulans )を培養して得
られる多糖類は、主としてマリトトリオース(グルコー
ス3分子がα−1,4結合)が規則正しくα−1,6結
合した天然中性粘質多糖類(プルランとも称する)であ
る。
On the other hand, Aureobacidium pullulan (Aureob
The polysaccharide obtained by culturing P. acidlum pullulans is a natural neutral viscous polysaccharide (also called pullulan) in which malitotriose (3 glucose molecules are linked with α-1,4 bonds) is regularly linked with α-1,6 bonds. It is.

このコンキオリンとプルラン夫々は別々に化粧料に用い
られた例はあるが、この両者を組み合わせて使用した化
粧料は知られていない。この両者を組み合わせて化粧料
に配合した所、両者夫々の効果の和ではなく、大きな相
乗効果が見い出された、これが本発明である。
Although conchiolin and pullulan have been used separately in cosmetics, there are no known cosmetics that use the two in combination. When these two were combined and blended into cosmetics, a large synergistic effect was found, rather than the sum of their respective effects. This is the present invention.

コンキオリン加水分解物及び/又はアコヤ貝粘液加水分
解物は0.01重量%〜10重量%、オーレオバシデュ
ーム プルランを培養して得られる多糖類は0.1重量
%〜10重量%を配合することによって所期の目的を達
することが判明した。
Conchiolin hydrolyzate and/or pearl oyster mucus hydrolyzate is 0.01% to 10% by weight, and polysaccharide obtained by culturing Aureobasidum pullulan is 0.1% to 10% by weight. It was found that the intended purpose could be achieved by doing so.

その他の原料としては特に限定はないが、液体油として
は流動パラフィン、スクヮラン、オリーブ油、ホホバ油
、サフラワー油、アボガド油、ミンク油、ミリスチン酸
ミリスチル、ミリスチン酸イソプロピル、ミリスチン酸
オクチルドデシル、パルミチン酸2−エチルヘキシル、
2−エチルへ牛すン酸セチル、2−エチルヘキサン酸ト
リグリセライド、カプリルカプロン酸トリグリセライド
、メチルフェニルポリシロキサン、ジメチルポリシロキ
サン、 固体油としてはパラフィン、セレシン、マイクロクリス
タリンワックス、みつろう、ゲイロウ、牛脂、ラウリン
酸、ミリスチン酸、バルミチン酸、ステアリン酸、ベヘ
ニン酸、オレイン酸、イソステアリン酸、セチルアルコ
ール、ステアリルアルコール、ベヘニルアルコール、 保湿剤としてはグリセリン、プロピレングリコール、ジ
プロピレングリコール、1,3ブチレングリコール、P
EG100O、ソルビトール、マンニトール、 増粘剤として、カルボキシメチルセルロース、ポリビニ
ルアルコール、カルボキシビニルポリマポリビニルピロ
リドン、 界面活性剤としては、非イオン、アニオン、両性いずれ
に於いても利用出来る。
Other raw materials are not particularly limited, but liquid oils include liquid paraffin, squalane, olive oil, jojoba oil, safflower oil, avocado oil, mink oil, myristyl myristate, isopropyl myristate, octyldodecyl myristate, and palmitic acid. 2-ethylhexyl,
Cetyl 2-ethyl hexanoate, 2-ethylhexanoic acid triglyceride, caprylic caproic acid triglyceride, methylphenyl polysiloxane, dimethyl polysiloxane, Solid oils include paraffin, ceresin, microcrystalline wax, beeswax, gay wax, beef tallow, and laurin. Acid, myristic acid, valmitic acid, stearic acid, behenic acid, oleic acid, isostearic acid, cetyl alcohol, stearyl alcohol, behenyl alcohol, moisturizers include glycerin, propylene glycol, dipropylene glycol, 1,3 butylene glycol, P
EG100O, sorbitol, mannitol; Thickeners such as carboxymethylcellulose, polyvinyl alcohol, carboxyvinyl polymer polyvinylpyrrolidone; Nonionic, anionic, and amphoteric surfactants can be used.

その他、エチルアルコール、ビタミン類、防腐剤、香料
、天然抽出物、酸化防止剤等を使用することができるが
、本発明の主旨に反するような安全性の低い原料を用い
ることは、当然さけるべきである。
In addition, ethyl alcohol, vitamins, preservatives, fragrances, natural extracts, antioxidants, etc. can be used, but the use of unsafe raw materials that go against the spirit of the present invention should of course be avoided. It is.

〔実施例〕〔Example〕

以下に実施例によって本発明を更に具体的に説明するが
、本発明はこの実施例によって何等限定されるものでは
ない。実施例で使用する単位は、特に記載しない限り、
重量%である。
The present invention will be explained in more detail below with reference to Examples, but the present invention is not limited to these Examples in any way. The units used in the examples are as follows, unless otherwise specified:
Weight%.

(実施例−1) A 流動パラフィン              24
.5ミツロウ                  5
.0ホホバ油                  7
.0ステアリルアルコール            2
.0ステアリン酸モノグリセライド        2
.0ソルビタンモノステアレート          
3.5ポリオキシエチレンソルビタン        
4.0モノステアレート(60E、  O,)B 精製
水                  45.41.
3ブチレングリコール           5.0オ
ーレオバシデユーム プルランを培養して  0.5得
られる多糖類 バラオキシ安息香酸メチル          0.2
C香料         0.2 コンキオリン加水分解物           0.2
AとBをそれぞれ計量し、80℃に加温溶解する。Bを
攪拌しながらAを徐々に加え60℃位で、Cを加え、室
温まで冷却する。
(Example-1) A Liquid paraffin 24
.. 5 Beeswax 5
.. 0 jojoba oil 7
.. 0 stearyl alcohol 2
.. 0 Stearic acid monoglyceride 2
.. 0 sorbitan monostearate
3.5 polyoxyethylene sorbitan
4.0 Monostearate (60E, O,)B Purified Water 45.41.
3 Butylene glycol 5.0 Polysaccharide obtained by culturing Aureobasiduum pullulan 0.5 Methyl roseoxybenzoate 0.2
C fragrance 0.2 Conchiolin hydrolyzate 0.2
Weigh A and B, respectively, and dissolve them by heating at 80°C. While stirring B, gradually add A and at about 60°C, add C and cool to room temperature.

(実施例−2) 乳 液 A 流動パラフィン               5
.0ミリスチン酸オクチルドデシル        2
.0トリー2−エチルへキサン酸グリセライド   2
.5ステアリルアルコール            1
.5セチルアルコール              0
.5モノステアリン酸グリセライド        1
.5ステアリン酸                 
1,5ミリスチン酸                
 1.5ソルビタンモノステアレート1.O B 精製水                  71
.91.3ブチレングリコール          5
.0グリセリン               2.0
NaOH0,2 オーレオバシデユーム プルランを培養して  3.0
得られる多糖類 バラオキシ安息香酸メチル          0.2
C香料         0.2 アコヤ貝粘液加水分解物           0.5
AとBをそれぞれ計量し、80℃に加温溶解する。Bを
攪拌しなからAを徐々に加え60℃位で、Cを加え、室
温まで冷却する。
(Example-2) Emulsion A Liquid paraffin 5
.. 0 Octyldodecyl myristate 2
.. 0-tri-2-ethylhexanoic acid glyceride 2
.. 5 stearyl alcohol 1
.. 5 cetyl alcohol 0
.. 5 Monostearic acid glyceride 1
.. 5 stearic acid
1,5 myristic acid
1.5 Sorbitan Monostearate 1. OB Purified water 71
.. 91.3 Butylene glycol 5
.. 0 glycerin 2.0
NaOH0,2 Aureobasidium pullulan cultured 3.0
Obtained polysaccharide rose methyl oxybenzoate 0.2
C fragrance 0.2 Akoya mucus hydrolyzate 0.5
Weigh A and B, respectively, and dissolve them by heating at 80°C. While stirring B, gradually add A and at about 60°C, add C and cool to room temperature.

(比較例) 有効性は原料で比較した。(Comparative example) Efficacy was compared based on raw materials.

安全性試験は他社品と比較した。The safety test was compared with other companies' products.

実施例1の比較として、A社りリーム(A−1)、8社
クリーム(B−1) 、実施例2の比較として、A社乳
液(A−2) 、C社乳液(C−1)を用いた。
As a comparison of Example 1, Company A's Rireme (A-1) and Company 8 Cream (B-1); as a comparison of Example 2, Company A's emulsion (A-2) and Company C's emulsion (C-1). was used.

官能、安定性は原料の一部を置き換えて以下のように実
験した。
Sensory properties and stability were tested as follows by replacing some of the raw materials.

比較例1−1は実施例−1より、オーレオバシデューム
 プルラン(Aureobasidiu* pullu
lans )を培養して得られる多糖類を除いたもの比
較例1−2は実施例−1より、コンキオリン加水分解物
を除いたもの 比較例1−3は実施例−1より、オーレオバシデューム
 プルラン(Aureobasidium pullu
lans )とコンキオリン加水分解物を培養して得ら
れる多糖類を除いたもの 比較例2−1は実施例−2より、オーレオバシデューム
 プルラン(Aureobasidlum pullu
lans )を培養して得られる多糖類を除いたもの比
較例2−2は実施例−2より、アコヤ貝粘液加水分解物
を除いたもの 比較例2−3は実施例−2より、オーレオバシデューム
 プルラン(AureobasidIum pullu
lans )を培養して得られる多糖類とアコヤ貝粘液
加水分解物を除いたもの 〔安全性試験〕 方  法 1)細胞毒性試験 ■)カバーガラスの入った6CI+のシャレーにEag
le M E M (牛脂児血清20%)培地を5 m
lづつ分注する。
Comparative Example 1-1 is a sample of Aureobasidium* pullulan from Example-1.
Comparative Example 1-2 is from Example 1, except for the polysaccharide obtained by culturing A. lans). Comparative Example 1-3 is from Example 1, except for the conchiolin hydrolyzate. Aureobasidium pullu
Comparative Example 2-1 is a sample obtained by culturing Aureobasidum pullulan and Conchiolin hydrolyzate, excluding the polysaccharide obtained from Example-2.
Comparative Example 2-2 is based on Example 2, except for the polysaccharide obtained by culturing A. Aureobasidium pullu
[Safety test] Method 1) Cytotoxicity test ■) Eag in a 6CI+ chalet with a cover glass
5 m of le MEM (20% beef tallow serum) medium
Dispense in liter portions.

2)JTC−17細胞浮遊液(30万個)を添加し5%
Co、36℃、48時間培養する。
2) Add JTC-17 cell suspension (300,000 cells) to 5%
Co, 36°C, culture for 48 hours.

3)緩衝液PBS (−)(NaC18g。3) Buffer PBS (-) (NaC 18g.

KCI  O,2g、Na  PO1,15g。KCI O, 2g, Na PO1, 15g.

4 KHPOO,2gを含む緩衝液)で2度4 洗浄 4)緩衝液PBS (−)で希釈した試料3mlを加え
、36℃、60分間培養する。
4 Wash twice with buffer containing 2 g of KHPOO 4) Add 3 ml of sample diluted with buffer PBS (-) and incubate at 36°C for 60 minutes.

5) Eagle M E M (牛脂児血清20%)
培地を7mlづつ分注し、5%C0,36℃、48時間
培養する。
5) Eagle MEM (20% beef tallow serum)
Dispense the medium into 7ml portions and culture at 5% CO, 36°C for 48 hours.

6)固定、染色し判定する。6) Fix, stain and judge.

判定基準 〔1〕細胞数による判定 5core O: Control と同じ5core
 1 : Controlとほぼ同じ(僅に染色濃度が
劣る) Score 2 : Controlの2/3位(肉眼
でも分かる程度に減少) Score 3 : Controlのほぼ半分(大幅
に減少) Score 4 : Controlの1/3位(細胞
数はごく僅か) Score 5 :細胞を認めない (全く、または殆ど認めない) 〔2〕細胞形態による判定 5core O:正常像 5core 1 :異常細胞が僅かに認められる(正常
細胞が80%以上) Score 2 :異常細胞が認められる(正常細胞が
50%〜80%位) Score 3 :異常細胞が多数認められる(正常細
胞が20%〜50%位) Score 4 :殆ど異常細胞である。
Judgment criteria [1] Judgment based on cell number 5 cores O: Same 5 cores as Control
1: Almost the same as Control (slightly inferior staining density) Score 2: 2/3 of Control (decreased enough to be visible to the naked eye) Score 3: Almost half of Control (significantly decreased) Score 4: 1/1 of Control 3rd place (very few cells) Score 5: No cells observed (no or almost no cells observed) [2] Judgment based on cell morphology 5core O: Normal image 5core 1: Slight abnormal cells observed (normal cells 80% or more) Score 2: Abnormal cells are observed (normal cells are about 50% to 80%) Score 3: Many abnormal cells are observed (normal cells are about 20% to 50%) Score 4: Most of the abnormal cells are observed be.

(正常細胞が10%位) Score 5 :正常細胞を認めない表示の仕方は最
初の数字は細胞数による判定結果を、括弧内の数字は細
胞形態による判定結果を示す。
(Normal cells are approximately 10%) Score 5: Normal cells are not recognized. The first number indicates the determination result based on cell number, and the number in parentheses indicates the determination result based on cell morphology.

2)人クローズドバッチテスト 1)プラスター(フィンチャンバー)に検体を塗布し、
上腕内側部に貼布し24時間放置する。
2) Human closed batch test 1) Apply the specimen to the plaster (fin chamber),
Apply it on the inside of your upper arm and leave it for 24 hours.

2)プラスターを剥離除去し1時間放置する。2) Peel off the plaster and leave it for 1 hour.

(判定方法) 虫眼鏡付蛍光燈を用いて肉眼で判定する。(Judgment method) Judgment is made visually using a fluorescent light with a magnifying glass.

(判定基準) 判定刺激点 0.00 反応なし 1   o、oo  疑わしい紅斑、僅な紅斑±  0
.50 軽い紅斑 +   1.00  紅斑 44  2.00  紅斑+浮腫 +++3.00  紅斑+浮腫+丘疹、漿液性丘疹、小
水庖 刺激率−刺激点の合計/総人数×1003)ウサギクロ
ーズドバッチテスト 日本白色種ウサギ6羽を用いる。背部皮膚を電気バリカ
ンで別宅し、動物用バッチテスト 創膏に検体を0.2
m1滴下し皮膚に24時間貼布する。
(Judgment criteria) Judgment irritation point 0.00 No reaction 1 o, oo Suspicious erythema, slight erythema ± 0
.. 50 Mild erythema + 1.00 Erythema 44 2.00 Erythema + edema + + + 3.00 Erythema + edema + papules, serous papules, vesicles Irritation rate - total irritation points / total number of people x 1003) Rabbit closed batch test Japanese white Six seed rabbits are used. Separate the back skin with electric clippers and apply 0.2 of the sample to the veterinary batch test plaster.
Add 1ml drop and apply it to the skin for 24 hours.

判定は貼布除去後、1.24.48.72時間目に以下
の基準で行う。
Judgment is made based on the following criteria at 1.24.48.72 hours after removal of the patch.

(判定基準) 紅  斑 5core 0 3core 1 紅斑なし ごく軽度な紅斑(やっと認められる程 度) 明らかな紅斑 中程度から強い紅斑 深紅色の強い紅斑に軽い癲皮形成(障 害は深部に) Score  2 Score  3 Score 浮 腫 Score Score Score Score 浮腫なし ごく軽度な浮腫(やっと認められる程 度) 明らかな浮腫(周囲と明らかに区分可 能) 中程度の浮腫(1■■程盛り上がっている) Score 4  強い浮腫(1ml11以上盛り上が
り、周囲にも広がる) 4)モルモット連続塗布試験 ■)ハートレー系白色モルモット6匹を用い、背部およ
び側腹部皮膚を電気バリカンおよびシェーバ−で除毛し
、綿棒で直径2a11の面積内に塗布する。
(Judgment criteria) Erythema 5 cores 0 3 cores 1 No erythema Very mild erythema (barely noticeable) Obvious erythema Moderate to strong erythema Strong crimson erythema with mild crust formation (disorder is deep) Score 2 Score 3 Score Edema Score Score Score Score No edema Very mild edema (barely noticeable) Obvious edema (clearly distinguishable from the surrounding area) Moderate edema (raised by about 1■■) Score 4 Strong edema (raised by 11 or more per ml) 4) Guinea pig continuous application test ■) Using 6 Hartley white guinea pigs, the skin on the back and flanks was removed with electric clippers and a shaver, and the skin was applied within an area of 2a11 in diameter using a cotton swab.

2)この塗布を1日1回3日間連続して実施する。2) Apply this application once a day for 3 consecutive days.

(判 定) (判定基準) 紅斑と浮腫を行うが、ウサギクローズドバッチテストと
同じ。
(Judgment) (Judgment criteria) Erythema and edema are measured, but it is the same as the rabbit closed batch test.

累積刺激指数は72tlr後、96H「後、168■「
後の5coreの平均値である。
The cumulative stimulation index was 72tlr, 96h, and 168h.
This is the average value of the latter 5 cores.

〔結 果〕[Results]

1)細胞毒性試験 3)ウサギクローズドバッチテスト 2)人クローズドバッチテスト 4)モルモット連続塗布試験 〔有効性試験〕 細胞賦活試験 ■)カバーガラスの入った6(至)のシャレーにEag
Io M E M (牛胎児血清20%)培地を5 m
lづつ分注する。
1) Cytotoxicity test 3) Rabbit closed batch test 2) Human closed batch test 4) Guinea pig continuous application test [Efficacy test] Cell activation test
Add 5 ml of IoMEM (20% fetal bovine serum) medium.
Dispense in liter portions.

2)JTC−17細胞浮遊液(20万個)を添加し5%
C0,36℃、48時間培養する。
2) Add JTC-17 cell suspension (200,000 cells) to 5%
Incubate at CO, 36°C for 48 hours.

3)緩衝液PBS (−)(NaC18g。3) Buffer PBS (-) (NaC 18g.

KCI  0.2g、Na  PO1,15g。KCI 0.2g, Na PO1.15g.

4 KHPO0,2gを含む緩衝液)で2度4 洗浄 4) Eagle M E M (無血清)培地で各濃
度に希釈した試料5 mlと牛胎児血清0.05m1を
加え、5%Co、36℃、6日間培養した。
4 Wash twice with a buffer solution containing 0.2 g of KHPO) 4) Add 5 ml of the sample diluted to each concentration with Eagle MEM (serum-free) medium and 0.05 ml of fetal bovine serum, and incubate in 5% Co, 36°C. , and cultured for 6 days.

5)固定、染色し判定する。5) Fix, stain and judge.

判定基準 〔1〕細胞数による判定 5core −3: Controlのほぼ1.5倍(
大幅に増加) Score −2: Controlの4/3位(肉眼
でも分かる程度に増加) Score −1: Control と同じ(僅に染
色濃度が勝る) Score O: Control と同じ5core
 1 : Control とほぼ同じ(僅に染色濃度
が劣る) Score 2 : Controlの2/3位(肉眼
でも分かる程度に減少) 〔2〕細胞形態による判定 5core O:正常像 5core 1 :異常細胞が僅かに認められる(正常
細胞が80%以上) Score 2 :異常細胞が認められる(正常細胞が
50%〜80%位) Score 3 :異常細胞が多数認められる(正常細
胞が20%〜50%位) Score 4 :殆ど異常細胞である。
Judgment criteria [1] Judgment based on cell number 5core -3: Approximately 1.5 times of Control (
Score -2: 4/3 of Control (increase to the extent that it can be seen with the naked eye) Score -1: Same as Control (slightly better staining density) Score O: Same 5 cores as Control
1: Almost the same as Control (slightly inferior staining density) Score 2: 2/3 of Control (decreased to the extent that it can be seen with the naked eye) [2] Judgment based on cell morphology 5 cores O: Normal image 5 cores 1: Few abnormal cells Score 2: Abnormal cells are observed (normal cells are around 50% to 80%) Score 3: Many abnormal cells are observed (normal cells are around 20% to 50%) Score 4: Almost all cells are abnormal.

(正常細胞が10%位) Score5:正常細胞を認めない 表示の仕方は最初の数字は細胞数による判定結果を、括
弧内の数字は細胞形態による判定結果を示す。ブランク
は0(3)であった。
(Normal cells are around 10%) Score 5: Normal cells are not recognized The first number indicates the determination result based on the number of cells, and the number in parentheses indicates the determination result based on cell morphology. The blank was 0(3).

〔官能試験と安定性試験〕[Sensory test and stability test]

官能試験は女性96名を8群に分け、それぞれ1ケ月づ
つランダムに4検体使用テストを行った。
In the sensory test, 96 women were divided into 8 groups, and each group was randomly tested using 4 samples for 1 month each.

(1検体当り48名) 評価は5段階評価した。(48 people per sample) The evaluation was done on a 5-level scale.

評価5は次の状態を表わす。Rating 5 represents the following condition.

〔発明の効果〕〔Effect of the invention〕

前記、有効性試験、安全性試験、官能試験、安定性試験
の何れの試験においても、コンキオリン加水分解物及び
/又はアコヤ貝粘液加水分解物と、オーレオバシデュー
ム プルランを培養して得た多糖類とを別々に配合した
場合に比較して、両者を含有する化粧料は格段に有効性
、安全性、官能、安定性が優れていることが明らかであ
る。これは、この両者を共に含有させたことによる組み
合わせ効果であって、これによって従来得られなかった
化粧料を得ることができた。
In all of the above-mentioned efficacy tests, safety tests, sensory tests, and stability tests, conchiolin hydrolysates and/or pearl oyster mucus hydrolysates were obtained by culturing Aureobasidum pullulan. It is clear that cosmetics containing both polysaccharides and polysaccharides are significantly superior in efficacy, safety, sensation, and stability compared to when they are blended separately. This is due to the combined effect of containing both of them, and as a result, it was possible to obtain a cosmetic that had not been previously available.

Claims (1)

【特許請求の範囲】[Claims] 1、コンキオリン加水分解物及び/又はアコヤ貝粘液加
水分解物とオーレオバシデュームプルラン(Aureo
basidium pullulans)を培養して得
られる多糖類とを含有してなる化粧料。
1. Conchiolin hydrolyzate and/or pearl oyster mucus hydrolyzate and Aureobasidum pullulan (Aureo
A cosmetic comprising a polysaccharide obtained by culturing basidium pullulans.
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