JPH0292274A - 脂肪族塩素化合物の微生物的分解方法及びその微生物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 ［産業上の利用分野］ 本発明は微生物による飽和及び／又は不飽和脂肪族塩素
化合物の分解方法及びその方法に用いる新規微生物に関
するものである。

更に詳しくは工場からの排水又は排ガス中、或いは土壌
中等に含まれるトリクロロエチレンのような揮発性脂肪
族塩素化合物の微生物による分解除去方法に関するもの
である。

［従来の技術］ 工場からの排水又は排ガス、或いは土壌中には各種白°
機塩素化合物が混入されており、近時、環境汚染等の問
題から、これらの有効な除去が注目されるとことなって
いる。

殊にトリクロロエチレン（ＴＣＥ）は、ＩＣ産業等で用
いられている難分解性化合物であり、発ガン性を有し、
地下水汚染物質として問題になっている。

従来、排水中或いは排ガス中から、トリクロロエチレン
のような有機塩素化合物を除去するには、活性炭による
吸着除去法等が行われてきたが、これらは多量の吸着剤
や特別の装置及び設備を必要とするものであり、必ずし
も効率的かつ経済的な除去手段とはなっていない。

一方、Ｈ機塩素系化合物の効率的かつ簡便な分解除去手
段として、微生物を用いる方法もいくつか試みられ報告
されている。

例えば、ロドトルラ属、クラドスポリウム属、キャンデ
イダ属、サツカロミセス属及びストレプトミセス属の微
生物等を用いてポリクロル化されたビフェニルのような
有機塩素化合物を分解除去する例（特開昭４８−９８０
８５号、特開昭４８９８０８６号、特開昭４９−６１８
０号）、及びメチロシナス属、メチロシスチス属、メチ
ロコツカス属及びメチロバタテリウム属の細菌のような
メタン資化性細菌を用いて、ｍ−クロルトルエンのよう
なハロゲン置換ベンゼンを分解する例（特開昭５５−１
２７１９Ｇ号）が報告されている。

しかしながらトリクロロエチレン及びその類縁化合物の
ような脂肪族塩素化合物を有効に分解除去する微生物に
ついては報告されていない。

［発明の解決しようとする課題］ そこで、トリクロロエチレンのような脂肪族塩素化合物
を効果的に分解除去し、無害化するためには、微生物を
用いるような手段が望まれていたが、そのためには、ま
ずそれらの化合物を白°効に分解する微生物が必要であ
り、したがって、そのような新規微生物の提供とそれを
用いた有害化合物の分解除去方法の開発とが強く要望さ
れていた。

［課題を解決するための手段］ 本発明者は、トリクロロエチレンのような脂肪族塩素化
合物を分解する微生物を鋭意探索の結果、土壌中より、
トリクロロエチレンを好気的に分解する菌を単離し、こ
の微生物を用いて、前記化合物を分解除去する方法を発
明するに至った。

すなわち、本発明は、 （１）メチロシナス属に属し、脂肪族塩素化合物分解能
を有する微生物を、脂肪族塩素化合物又はその含有物と
接触させることを特徴とする脂肪族塩素化合物の分解方
法、及び（２）メタンおよびメタノールを唯一炭素源と
して生育し、トリクロロエチレンを分解するメタン資化
性菌であるメチロシナス−トリコスポリウム命ＴＳＵＫ
ＵｎＡからなるものである。

本発明の微生物は、各種土壌に広く分布しこれから採取
し得られるが、その採取の方法としては、例えば次のよ
うな方法を用いる。

すなわち、培養はブチルゴム栓及びアルミシールで密閉
したバイアル瓶を用い、３０℃にて振とつする。トリク
ロロエチレン量はヘッドスペースより気相を一定量取り
、ガスクロマトグラフィーにより定量し、ヘンリーの法
則式より液相濃度を算出する。

前記手段を用い、例えば採取した土壌を１ｐｐａ＋トリ
クロロエチレン及びメタンの存在下で馴養培養を繰り返
し、トリクロロエチレンをよく分解する混合微生物系を
得る。トリクロロエチレンの分解には酸素及びメタンが
必須であることから、混合微生物系からメタノドローフ
の単離を行う。

本発明において単離された菌は、公知のメチロシナス・
トリコスポリウムに属するメチロシナス・トリコスポリ
ウム・ＴＳＵＫＵＢＡである。

この菌を顕微鏡で観察すると、巾　０．６〜１μ１１長
さ　１〜５μＩの短桿菌で以下の表に示すような特性を
有するものである。

Ｃｈｒａｅｉｃｒｌｓｔｉｅｓ　　ｏｆ　　ＩＩｌｅｔ
ｈａｎｅ−ｕｔｉｌｌｚｌｎｇ　　ｂａｃｔｅｒｉａＧ
ｒａｍ　　５ｔａｉｎ Ｃｅｌｌ　　ｓｌ＋ａｐｃ ＮｕＩＩｂｂｅｒ　　ｏ「　ｒｌａｇｅｌｌａＭｏＬｉ
ｌｉＬｙ ＧｒｏｖＬｈ　　ｏｎ ｍｅｔｈａｎｅ Ｌｈａｎｅ ｐｒｏｐａｎｅ ｎ−ｂｕｔａｎｅ ｄｌａ＋ｅｔｈｙｌｅｔｈｅｒ ｇ＋ｃｔｈｙｌａｍｉｎｅ ＮｃｇａｔＩｖｃ Ｓｈｏｒｔ　　ｒｏｄ ＋ ｍｅｔｈａｎｏｌ　　　　　　　　　　　　　　　　　
＋ｅｔｈａｎｏｌ ｎｕｔｒｉｅｎｔ　　ｂｒｏｔｈ Ｇｒｏｗｔｈ　　ａｔ　　３０℃　　　　　　　　　　
　　　　　　＋３７℃　　　　　　　　　　　　　　　
　＋４５℃ Ｍｏ１％　ｃ＋ｃ　　ＯＦ　　ＤＮＡ　　　　　　　　
　　　　　　８４．５Ｍａｊｏｒ　　Ｉ’ａｔｔｙ　　
ａｃｉｄ　　　　　　　　　　Ｃ＋ｓ、＋　　（９６，
５％）１１ｙｄｒｏｘｙ　　ｒａｔｔｙ　　ａｃｉｄ　
　ｔｙｐｅ　　　　　２−　ＯＨＱｕｉｎｏｎｅ　　Ｌ
ｙｐｅ　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　Ｑ
　　ｓ以上の菌学的性質に基づき、本発明のメチロシナ
ス菌株の同定を行った。

本発明のメチロシナスの菌株は、菌の形態、ダラム染色
などの顕微鏡的所見、生理学的諸性質などから、公知菌
メチロシナス・トリコスボリウム０Ｂ３ｂの性状につい
て記載した文献（１，Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆＧｅｎｅｒ
ａｌ　Ｍｌｃｒｏｂｌｏｌｏｇｙ　６１゜２０５−２１
８（１９７０）　、２．旧ｃｒｏｂｌａｌ　Ｇｒｏｗｔ
ｈ　ｏｎ　Ｃ＋Ｃｏｍｐｏｕｎｄｓ　ｐ、　１２３〜１
３３（１９Ｂ４）　、３．Ｊｏｕｒｎａｌ　ｏｆ’Ｇｅ
ｎｅｒａｌ　　Ａｐｐｌｉｅｄ　　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ
ｏｇｙ　　３３．１３５〜１６５（＋９８７）］に記さ
れているνＨＬＬｅｎｂｕｒｙら、オヨび駒形らの分類
に基づき、メチロシナス・トリコスボリウム０Ｂ３ｂに
近縁の株と同定された。

しかしながら、鞭毛を有せずＣ１０の飽和脂肪酸もＨせ
ず、また、ロゼツトを形成しない点で、メチロシナス・
トリコスボリウム０Ｂ３ｂとは明らかに相違し、新菌株
と同定され、メチロシナス・トリコスボリウム・ＴＳＬ
ＩＫＵＢＡと命名された。

本発明の菌は工業技術院微生物工業技術研究所に微工研
菌寄第１０００４号として寄託されている。

本発明の菌はトリクロロエチレン及びその各種類縁化合
物、すなイ）ち、シス−１，２−ジクロロエチレン、ト
ランス−１，２−ジクロロエチレン、　１．１−ジクロ
ロエチレン、　１．１，２．２−テトラクロロエタン、
１．１．２−　トリクロロエタン、１．２−ジクロロエ
タン、クロロホルムを分解する性質を有し、１０ｐｐｍ
の高ａ度トリクロロエチレンを１０８間で約半分に分解
する能力を持つ。

本発明の方法を実施するに当っては、本発明の微生物を
予め適当な培地にて培養し、それをトリクロロエチレン
或いは該化合物を含有する排水或いは排ガス等と溶液状
態で接触させることによって行われる。

実施例（分解実験例） ＫＨ２ＰＯ４ に２　ＨＰＯ４ Ｈ４Ｃｌ Ｃａ　（ＮＯ３）２ ＭｇＳＯ＋　　　７Ｈ２ ＦｅＳＯ４７Ｈ２ ＭｎＳ０４　５Ｈ２ ３ＢＯ３ ＺｎＳＯ４７Ｈ２０ ＣｕＳＯ４５Ｈ２Ｏ ＮａｚＭｏ０４　２８２０ Ｃｏ　　（ＮＯ３）　　２　　　　６Ｈ２０ＮｉＳＯ４
７Ｈ２０ ０，４５ｇ １．１７ｇ ２．１４ｇ ４．８ｍｇ ２１ｍｇ ８Ｂ ０．８ｍｇ ０．（１５＊ｇ Ｏ，ｌＩｌｇ ｏ。０６ｍｇ ０６月１ｇ ０．８＋ａｇ ０．０８ｍｇ Ｈ２Ｓ　Ｃｏ４　　　　　　　　　　　　［１，［１４
ｍｇＤ、Ｗ、　　　　　　　　　　　　ｐＨ７１，２を
蒸溜水１０１００Ｏに溶解し、トリクロロエチレン、（
クロロホルム又はその他の脂肪族塩素化合物）及びメタ
ンと空気の存在下、１〜１ｏ日間３０　’Ｃで培養、接
触させ分解を行った。

その結果を次表に示す。

トリクロロエチレンの分解（パーセント）他の脂肪族塩
素化合物の分解（パーセント）［発明の効果］ 以上説明したように、本発明の新規微生物を使用するこ
とにより、難分解性の汚染物質を効率的に分解すること
ができる。

Claims (4)

【特許請求の範囲】
1. （１）メチロシナス（Ｈｅｔｈｙｌｏｓｉｎｕｓ）属に
   属し、脂肪族塩素化合物分解能を有する微生物を、脂肪
   族塩素化合物又はその含有物と接触させることを特徴と
   する脂肪属塩素化合物の分解方法。
2. （２）微生物がトリクロロエチレンを分解するメタン資
   化性細菌である請求項（１）記載の方法。
3. （３）微生物がメチロシナス・トリコスポリウム・ＴＳ
   ＵＫＵＢＡ（微工研菌寄Ｎｏ．１０００４）である請求
   項（１）又は（２）に記載の方法。
4. （４）メタン資化性であり、トリクロロエチレンを分解
   するメチロシナス・トリコスポリウム・ＴＳＵＫＵＢＡ
   （微工研菌寄Ｎｏ．１０００４）。