JP3478620B2 - 新規微生物ｔｌ２及びそれを用いた芳香族化合物及び／又は揮発性有機塩素化合物の生物分解処理方法 - Google Patents
新規微生物ｔｌ２及びそれを用いた芳香族化合物及び／又は揮発性有機塩素化合物の生物分解処理方法Info
- Publication number
- JP3478620B2 JP3478620B2 JP29932494A JP29932494A JP3478620B2 JP 3478620 B2 JP3478620 B2 JP 3478620B2 JP 29932494 A JP29932494 A JP 29932494A JP 29932494 A JP29932494 A JP 29932494A JP 3478620 B2 JP3478620 B2 JP 3478620B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cresol
- tce
- medium
- phenol
- strain
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Expired - Fee Related
Links
Classifications
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/20—Air quality improvement or preservation, e.g. vehicle emission control or emission reduction by using catalytic converters
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02W—CLIMATE CHANGE MITIGATION TECHNOLOGIES RELATED TO WASTEWATER TREATMENT OR WASTE MANAGEMENT
- Y02W10/00—Technologies for wastewater treatment
- Y02W10/10—Biological treatment of water, waste water, or sewage
Landscapes
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Treating Waste Gases (AREA)
- Biological Treatment Of Waste Water (AREA)
- Purification Treatments By Anaerobic Or Anaerobic And Aerobic Bacteria Or Animals (AREA)
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明はアルカリゲネス・スピー
シズに属する新規な微生物菌株及びそれを用いたフェノ
ールやクレゾールのような芳香族化合物及び／或いはト
リクロロエチレン（ＴＣＥ）やジクロロエチレン（ＤＣ
Ｅ）のような揮発性有機塩素化合物により汚染されたも
のの生物分解処理、特にそれを含む排水や廃液更には空
気の浄化に有用な生物分解処理による汚染物（汚染媒
体）の生物浄化方法に関する。
シズに属する新規な微生物菌株及びそれを用いたフェノ
ールやクレゾールのような芳香族化合物及び／或いはト
リクロロエチレン（ＴＣＥ）やジクロロエチレン（ＤＣ
Ｅ）のような揮発性有機塩素化合物により汚染されたも
のの生物分解処理、特にそれを含む排水や廃液更には空
気の浄化に有用な生物分解処理による汚染物（汚染媒
体）の生物浄化方法に関する。
【０００２】
【従来の技術】近年、生体に対し有害でありかつ難分解
性である有機塩素化合物による環境汚染が大きな問題と
なってきている。特に、国内外の紙・パルプ工業や精密
機械関連産業地域の土壌中にはテトラクロロエチレン
（ＰＣＥ）やトリクロロエチレン（ＴＣＥ）、ジクロロ
エチレン（ＤＣＥ）等の有機塩素化合物による汚染がか
なりの範囲で拡がっていると考えられており、実際に環
境調査等で検出された事例が多数報告されている。これ
らの有機塩素化合物は土壌中に残留したものが雨水等に
より地下水中に溶解して周辺地域一体に拡がるとされて
いる。このような化合物は発癌性の疑いがあり、また環
境中で非常に安定であるため、特に飲料水の水源として
利用されている地下水の汚染は大きな社会問題とされて
いる。
性である有機塩素化合物による環境汚染が大きな問題と
なってきている。特に、国内外の紙・パルプ工業や精密
機械関連産業地域の土壌中にはテトラクロロエチレン
（ＰＣＥ）やトリクロロエチレン（ＴＣＥ）、ジクロロ
エチレン（ＤＣＥ）等の有機塩素化合物による汚染がか
なりの範囲で拡がっていると考えられており、実際に環
境調査等で検出された事例が多数報告されている。これ
らの有機塩素化合物は土壌中に残留したものが雨水等に
より地下水中に溶解して周辺地域一体に拡がるとされて
いる。このような化合物は発癌性の疑いがあり、また環
境中で非常に安定であるため、特に飲料水の水源として
利用されている地下水の汚染は大きな社会問題とされて
いる。
【０００３】このようなことから、有機塩素化合物の除
去、分解による地下水等の浄化は、環境保全の視点から
重要な課題であり、浄化に必要な技術の開発が行われて
きている。
去、分解による地下水等の浄化は、環境保全の視点から
重要な課題であり、浄化に必要な技術の開発が行われて
きている。
【０００４】例えば、活性炭による吸着処理、光や熱に
よる分解処理等が検討されてきたが、コストや操作性の
面からかならずしも実用的であるとはいえない。
よる分解処理等が検討されてきたが、コストや操作性の
面からかならずしも実用的であるとはいえない。
【０００５】一方、環境中では安定なＴＣＥ等の揮発性
有機塩素化合物に対して近年微生物による分解が報告さ
れ、その実用化に向けた研究がなされ初めている。即
ち、微生物を用いた生物分解処理では用いる微生物を適
切に選択することで無害な物質までに有機塩素化合物を
分解できること、基本的に特別な薬品が不要であるこ
と、メンテナンスにかかる労力やコストを軽減できるこ
と等の利点がある。
有機塩素化合物に対して近年微生物による分解が報告さ
れ、その実用化に向けた研究がなされ初めている。即
ち、微生物を用いた生物分解処理では用いる微生物を適
切に選択することで無害な物質までに有機塩素化合物を
分解できること、基本的に特別な薬品が不要であるこ
と、メンテナンスにかかる労力やコストを軽減できるこ
と等の利点がある。
【０００６】このような状況下において、ＴＣＥ等の揮
発性有機塩素化合物に対して近年微生物による分解が報
告され、その実用化に向けた研究がなされ初めている。
このような手法はバイオレメディエーションと呼ばれ、
用いる微生物を選択することで無害な物質までに有機塩
素化合物を分解できること、基本的に特別な薬品が不要
であること、メンテナンスにかかる労力やコストを軽減
できること、低濃度でも完全に分解除去できること等の
利点がある。
発性有機塩素化合物に対して近年微生物による分解が報
告され、その実用化に向けた研究がなされ初めている。
このような手法はバイオレメディエーションと呼ばれ、
用いる微生物を選択することで無害な物質までに有機塩
素化合物を分解できること、基本的に特別な薬品が不要
であること、メンテナンスにかかる労力やコストを軽減
できること、低濃度でも完全に分解除去できること等の
利点がある。
【０００７】こういったバイオレメディエーションの実
用化に向けた開発が進むにつれて、この技術の核であ
る、土壌中で強力な揮発性有機塩素化合物分解能を発揮
する微生物が強く望まれている。
用化に向けた開発が進むにつれて、この技術の核であ
る、土壌中で強力な揮発性有機塩素化合物分解能を発揮
する微生物が強く望まれている。
【０００８】このような揮発性有機塩素化合物の除去手
段としては、土壌汚染では真空抽出法が最も一般的な方
法である。この方法は、汚染土壌中に抽出井を形成し、
真空ポンプで吸引することにより揮発性有機塩素化合物
を吸引、除去するものである。しかし、このようにして
吸引された揮発性有機塩素化合物は分解されているわけ
ではなく、そのまま気相中に存在する。すなわち、被汚
染物質が土壌から気相に移っただけであるといえ、この
ような処理後の揮発性有機塩素化合物の処置が大きな問
題となっている。またこれは、空気汚染の抱える問題で
もある。空気汚染は先に述べたハイテク工場内等で発生
した汚染を意味し、この場合も気相中の揮発性有機塩素
化合物の処理なくして大気・環境中へ放出することはで
きない。
段としては、土壌汚染では真空抽出法が最も一般的な方
法である。この方法は、汚染土壌中に抽出井を形成し、
真空ポンプで吸引することにより揮発性有機塩素化合物
を吸引、除去するものである。しかし、このようにして
吸引された揮発性有機塩素化合物は分解されているわけ
ではなく、そのまま気相中に存在する。すなわち、被汚
染物質が土壌から気相に移っただけであるといえ、この
ような処理後の揮発性有機塩素化合物の処置が大きな問
題となっている。またこれは、空気汚染の抱える問題で
もある。空気汚染は先に述べたハイテク工場内等で発生
した汚染を意味し、この場合も気相中の揮発性有機塩素
化合物の処理なくして大気・環境中へ放出することはで
きない。
【０００９】現在、気相中に存在する揮発性有機塩素化
合物を除去する手段としては、液化処理、活性炭への吸
着等が知られている。しかしながら、活性炭を使用する
場合はその再生が問題であり、液化処理においては、大
規模な装置を必要とするわりには気相中の汚染濃度が低
いので効率が非常に悪く、結果としてコスト高を招いて
しまうことが問題である。更には、これらの方法は単な
る揮発性有機塩素化合物の除去手段にしか過ぎず、化合
物の分解を伴うわけではないため、本質的な解決策であ
るとは言い難い。このように気相汚染の浄化に関してコ
スト性、操作性に優れ、なおかつ本質的に揮発性有機塩
素化合物を分解・無害化するような浄化手段が強く求め
られている。
合物を除去する手段としては、液化処理、活性炭への吸
着等が知られている。しかしながら、活性炭を使用する
場合はその再生が問題であり、液化処理においては、大
規模な装置を必要とするわりには気相中の汚染濃度が低
いので効率が非常に悪く、結果としてコスト高を招いて
しまうことが問題である。更には、これらの方法は単な
る揮発性有機塩素化合物の除去手段にしか過ぎず、化合
物の分解を伴うわけではないため、本質的な解決策であ
るとは言い難い。このように気相汚染の浄化に関してコ
スト性、操作性に優れ、なおかつ本質的に揮発性有機塩
素化合物を分解・無害化するような浄化手段が強く求め
られている。
【００１０】こういったバイオレメディエーションの、
例えば気相汚染に対するバイオリアクタとしての実用化
に向けた開発が進むにつれて、この技術の核である、土
壌中で強力な揮発性有機塩素化合物分解能を発揮する微
生物が強く望まれている。
例えば気相汚染に対するバイオリアクタとしての実用化
に向けた開発が進むにつれて、この技術の核である、土
壌中で強力な揮発性有機塩素化合物分解能を発揮する微
生物が強く望まれている。
【００１１】現在バイオリアクタ方式で気相中揮発性有
機塩素化合物の処理法が研究されている菌のほとんどが
メタン資化性菌であり、揮発性有機塩素化合物の分解に
メタンあるいはメタノールを要求するなど、気相処理を
行う観点から言えば現在の既知菌種の範囲では実用上十
分であるとは言えず、更なる新たな菌種の取得が必要で
ある。
機塩素化合物の処理法が研究されている菌のほとんどが
メタン資化性菌であり、揮発性有機塩素化合物の分解に
メタンあるいはメタノールを要求するなど、気相処理を
行う観点から言えば現在の既知菌種の範囲では実用上十
分であるとは言えず、更なる新たな菌種の取得が必要で
ある。
【００１２】しかし、揮発性有機塩素化合物分解能を有
する微生物で単離された報告は多くない。例えば、ＴＣ
Ｅ分解菌としては、Welchia alkenophila sero 5 (USP
4877736, ATCC 53570)、Welchia alkenophila sero 33
(USP 4877736, ATCC 53571)、Methylocystis sp. strai
n M (Agric. Biol. Chem., 53,2903(1989) 、Biosci. B
iotech. Biochem., 56,486(1992) 、同56,736(1992))
、Methylosinus trichosporium OB3b (Am. Chem. Soc.
Natl. Meet. Dev. Environ. Microbiol., 29,365(198
9)、Appl. Environ. Microbiol., 55,3155(1989)、App
l. Biochem. Biotechnol., 28,877(1991)、特開平02-92
274号公報、特開平03-292970 号公報）、Methylomonas
sp. MM2 (Appl. Environ. Microbiol., 57,236(199
1))、Alcaligenes denitrificans ssp. xylosoxidans J
E75 (Arch. microbiol., 154,410(1990))、Alcaligenes
eutrophus JMP134 (Appl. Environ. Microbiol., 56,1
179(1990)) 、Mycobacterium vaccae JOB5 (J. Gen. Mi
crobiol., 82,163(1974) 、Appl.Environ. Microbiol.,
54,2960(1989)、ATCC 29678) 、Pseudomonas putida B
H（下水道協会誌，24,27(1987))、Acinetobactor sp. s
train G4 (Appl. Environ. Microbiol., 52,383(198
6)、同53,949(1987)、同54,951(1989)、同56,279(199
0)、同57,193(1991)、USP 4925802, ATCC 53617 、この
菌は初めPseudomonas cepacia と分類されていたが、Ac
inetobactor sp. に変更された）、Pseudomonasmendoci
na KR-1 (Bio/Technol.,7,282(1989)) 、Pseudomonas p
utida F1(Appl.Environ. Microbiol., 54,1703(1988)、
同54,2578(1988))、Pseudomonas fluorescens PFL12 (A
ppl. Environ. Microbiol., 54,2578(1988))、Pseudomo
nas putida KWI-9（特開平06-70753号公報）、Pseudomo
nas cepacia KK01（特開平06-227769 号公報) 、Pseudo
monas sp. （特開平02-273599 号公報）、Nitrosomonas
europaea (Appl. Environ. Microbiol., 56,1169(199
0))、Lactobacillus fuctivorans RE (Int. J. Syst. B
acteriol., 30,313(1980)、J. Appl. Bacteriol., 34,5
41(1971))、Lactobacillus vaginalis sp. nov (Int.
J. Syst. Bacteriol.,39,368(1989) 、ATCC 49540) 等
があるにすぎない。
する微生物で単離された報告は多くない。例えば、ＴＣ
Ｅ分解菌としては、Welchia alkenophila sero 5 (USP
4877736, ATCC 53570)、Welchia alkenophila sero 33
(USP 4877736, ATCC 53571)、Methylocystis sp. strai
n M (Agric. Biol. Chem., 53,2903(1989) 、Biosci. B
iotech. Biochem., 56,486(1992) 、同56,736(1992))
、Methylosinus trichosporium OB3b (Am. Chem. Soc.
Natl. Meet. Dev. Environ. Microbiol., 29,365(198
9)、Appl. Environ. Microbiol., 55,3155(1989)、App
l. Biochem. Biotechnol., 28,877(1991)、特開平02-92
274号公報、特開平03-292970 号公報）、Methylomonas
sp. MM2 (Appl. Environ. Microbiol., 57,236(199
1))、Alcaligenes denitrificans ssp. xylosoxidans J
E75 (Arch. microbiol., 154,410(1990))、Alcaligenes
eutrophus JMP134 (Appl. Environ. Microbiol., 56,1
179(1990)) 、Mycobacterium vaccae JOB5 (J. Gen. Mi
crobiol., 82,163(1974) 、Appl.Environ. Microbiol.,
54,2960(1989)、ATCC 29678) 、Pseudomonas putida B
H（下水道協会誌，24,27(1987))、Acinetobactor sp. s
train G4 (Appl. Environ. Microbiol., 52,383(198
6)、同53,949(1987)、同54,951(1989)、同56,279(199
0)、同57,193(1991)、USP 4925802, ATCC 53617 、この
菌は初めPseudomonas cepacia と分類されていたが、Ac
inetobactor sp. に変更された）、Pseudomonasmendoci
na KR-1 (Bio/Technol.,7,282(1989)) 、Pseudomonas p
utida F1(Appl.Environ. Microbiol., 54,1703(1988)、
同54,2578(1988))、Pseudomonas fluorescens PFL12 (A
ppl. Environ. Microbiol., 54,2578(1988))、Pseudomo
nas putida KWI-9（特開平06-70753号公報）、Pseudomo
nas cepacia KK01（特開平06-227769 号公報) 、Pseudo
monas sp. （特開平02-273599 号公報）、Nitrosomonas
europaea (Appl. Environ. Microbiol., 56,1169(199
0))、Lactobacillus fuctivorans RE (Int. J. Syst. B
acteriol., 30,313(1980)、J. Appl. Bacteriol., 34,5
41(1971))、Lactobacillus vaginalis sp. nov (Int.
J. Syst. Bacteriol.,39,368(1989) 、ATCC 49540) 等
があるにすぎない。
【００１３】その上、微生物を用いた揮発性有機塩素化
合物の分解方法に用いる場合の実用上の諸条件を満た
し、なおかつ十分な分解能を持つという観点で眺めてみ
ると、現在既知の菌種の範囲では必ずしも十分であると
は言えない。そこで、実用上要求される特性を満足する
菌種の取得が強く要望されているのが現状である。
合物の分解方法に用いる場合の実用上の諸条件を満た
し、なおかつ十分な分解能を持つという観点で眺めてみ
ると、現在既知の菌種の範囲では必ずしも十分であると
は言えない。そこで、実用上要求される特性を満足する
菌種の取得が強く要望されているのが現状である。
【００１４】このような生物浄化に用いる菌種に要求さ
れる性質としては、揮発性有機塩素化合物に対する十分
な分解能を有することは勿論であるが、既知菌種と生育
条件が異なることにより、その応用範囲が拡大できるも
の、或いはその実施形態が豊富となるものが一層好まし
い。
れる性質としては、揮発性有機塩素化合物に対する十分
な分解能を有することは勿論であるが、既知菌種と生育
条件が異なることにより、その応用範囲が拡大できるも
の、或いはその実施形態が豊富となるものが一層好まし
い。
【００１５】例えば、ＴＣＥを含む廃液の処理を想定し
た場合、適用する微生物はＴＣＥの分解能もさることな
がら、廃液という劣悪な環境下でも生育し、かつ分解活
性を維持できることが要求される。
た場合、適用する微生物はＴＣＥの分解能もさることな
がら、廃液という劣悪な環境下でも生育し、かつ分解活
性を維持できることが要求される。
【００１６】このように、十分な揮発性有機塩素化合物
分解能を有し、かつ従来既知の菌種よりも実用上有利な
特性を有する菌種が強く求められている。
分解能を有し、かつ従来既知の菌種よりも実用上有利な
特性を有する菌種が強く求められている。
【００１７】
【発明が解決しようとする課題】本発明の目的は、この
ような、有害化学物質として問題となっている揮発性有
機塩素化合物の分解のための強力な新規微生物、および
その微生物を利用する揮発性有機塩素化合物の分解、特
に排水・廃液中、および地下水中等の水性媒体中更には
空気に含有される揮発性有機塩素化合物を分解処理する
方法を提供することである。
ような、有害化学物質として問題となっている揮発性有
機塩素化合物の分解のための強力な新規微生物、および
その微生物を利用する揮発性有機塩素化合物の分解、特
に排水・廃液中、および地下水中等の水性媒体中更には
空気に含有される揮発性有機塩素化合物を分解処理する
方法を提供することである。
【００１８】
【課題を解決するための手段】上記の目的は以下の本発
明によって達成される。
明によって達成される。
【００１９】即ち、本発明者らは揮発性有機塩素化合物
を分解する菌種を探索した結果、揮発性有機塩素化合物
で汚染された日本の関東ローム層土壌中から、高濃度の
揮発性有機塩素化合物分解能を有する新たな菌種を取得
し、この菌種株を揮発性有機塩素化合物を含む汚染され
た媒体例えば地下水などの水性媒体や汚染空気を接触さ
せることにより、汚染媒体中の揮発性有機塩素化合物を
分解する方法を見いだした。
を分解する菌種を探索した結果、揮発性有機塩素化合物
で汚染された日本の関東ローム層土壌中から、高濃度の
揮発性有機塩素化合物分解能を有する新たな菌種を取得
し、この菌種株を揮発性有機塩素化合物を含む汚染され
た媒体例えば地下水などの水性媒体や汚染空気を接触さ
せることにより、汚染媒体中の揮発性有機塩素化合物を
分解する方法を見いだした。
【００２０】本発明で新たに取得された菌株はグラム陰
性の桿菌であり、以下のような菌学的性質を示す。 Ｂ．各種寒天培地における生育状況 Ｓｔａｎｄａｒｄ ａｇａｒ：発育良好 ＭａｃＣｏｎｋｅｙ ａｇａｒ：発育不良 Ｃ．生育至適温度：２５℃＞３５℃ Ｄ．生理的性質 好気性・嫌気性の区別：好気性 ＴＳＩ（ｓｌａｎｔ／ｂｕｔｔ）：アルカリ／アルカ
リ、Ｈ2 Ｓ（−） オキシダーゼ：陽性 カタラーゼ：陽性 Ｏｘｉｄａｔｉｏｎ／ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｔｅ
ｓｔ：−／− 硝酸カリウムの還元性：陽性 Ｌ−トリプトファンからのインドールの生産性：陰性 ブドウ糖酸性化：陰性 アルギニンジヒドラーゼ：陰性 ウレアーゼ：陰性 エスクリン加水分解（β−グルコシダーゼ）：陰性 ゼラチン加水分解（プロテアーゼ）：陰性 β−ガラクトシダーゼ：陰性 チトクロームオキシダーゼ：陽性 Ｅ．糖・有機酸等の同化 ブドウ糖：陰性 Ｌ−アラビノース：陰性 Ｄ−マンノース：陰性 Ｄ−マンニトール：陰性 Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン：陰性 マルトース：陰性 グルコン酸カリウム：陽性 ｎ−カプリン酸塩：陽性 アジピン酸：陽性 ｄｌ−リンゴ酸：陽性 クエン酸ナトリウム：陽性 酢酸フェニル：陽性 以上の諸性質から本菌株は、アルカリゲネス（Ａｌｃａ
ｌｉｇｅｎｅｓ）属に属していることは明らかであり、
該当種が判明しないことから、アルカリゲネス・スピー
シズ（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ ｓｐ．）に属せしめる
のが適当であると認められた。
性の桿菌であり、以下のような菌学的性質を示す。 Ｂ．各種寒天培地における生育状況 Ｓｔａｎｄａｒｄ ａｇａｒ：発育良好 ＭａｃＣｏｎｋｅｙ ａｇａｒ：発育不良 Ｃ．生育至適温度：２５℃＞３５℃ Ｄ．生理的性質 好気性・嫌気性の区別：好気性 ＴＳＩ（ｓｌａｎｔ／ｂｕｔｔ）：アルカリ／アルカ
リ、Ｈ2 Ｓ（−） オキシダーゼ：陽性 カタラーゼ：陽性 Ｏｘｉｄａｔｉｏｎ／ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｔｅ
ｓｔ：−／− 硝酸カリウムの還元性：陽性 Ｌ−トリプトファンからのインドールの生産性：陰性 ブドウ糖酸性化：陰性 アルギニンジヒドラーゼ：陰性 ウレアーゼ：陰性 エスクリン加水分解（β−グルコシダーゼ）：陰性 ゼラチン加水分解（プロテアーゼ）：陰性 β−ガラクトシダーゼ：陰性 チトクロームオキシダーゼ：陽性 Ｅ．糖・有機酸等の同化 ブドウ糖：陰性 Ｌ−アラビノース：陰性 Ｄ−マンノース：陰性 Ｄ−マンニトール：陰性 Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン：陰性 マルトース：陰性 グルコン酸カリウム：陽性 ｎ−カプリン酸塩：陽性 アジピン酸：陽性 ｄｌ−リンゴ酸：陽性 クエン酸ナトリウム：陽性 酢酸フェニル：陽性 以上の諸性質から本菌株は、アルカリゲネス（Ａｌｃａ
ｌｉｇｅｎｅｓ）属に属していることは明らかであり、
該当種が判明しないことから、アルカリゲネス・スピー
シズ（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ ｓｐ．）に属せしめる
のが適当であると認められた。
【００２１】また、後述する実施例からも明らかなよう
に、本菌株は３０ｐｐｍという高濃度のＴＣＥでも完全
分解するといった卓越した揮発性有機塩素化合物分解能
を有している。アルカリゲネス・スピーシズにおいてＴ
ＣＥのような揮発性有機塩素化合物を好気的に分解する
菌はこれまで知られていないことから、本菌を新菌株と
認定し、アルカリゲネス・スピーシズＴＬ２株（Ａｌｃ
ａｌｉｇｅｎｅｓ ｓｐ．ＴＬ２）と命名し、通産省工
業技術院生命工学工業技術研究所に寄託した（受託番
号：ＦＥＲＭ Ｐ−１４６４２）。以下本菌株をＴＬ２
株と記する。
に、本菌株は３０ｐｐｍという高濃度のＴＣＥでも完全
分解するといった卓越した揮発性有機塩素化合物分解能
を有している。アルカリゲネス・スピーシズにおいてＴ
ＣＥのような揮発性有機塩素化合物を好気的に分解する
菌はこれまで知られていないことから、本菌を新菌株と
認定し、アルカリゲネス・スピーシズＴＬ２株（Ａｌｃ
ａｌｉｇｅｎｅｓ ｓｐ．ＴＬ２）と命名し、通産省工
業技術院生命工学工業技術研究所に寄託した（受託番
号：ＦＥＲＭ Ｐ−１４６４２）。以下本菌株をＴＬ２
株と記する。
【００２２】ＴＬ２株は後述する実施例に示されるよう
に、揮発性有機塩素化合物とならんでフェノールやクレ
ゾールといった芳香族化合物も分解し、必然的にこれら
の化合物に対する耐性を持ち合わせている。このような
化合物は通常殺菌剤として用いられていることからもわ
かるように、多くの微生物にとって有害であり、しかも
実際に廃液や土壌中の汚染成分として混入している場合
も多いが、ＴＬ２株はこれらの化合物が混入していて
も、死滅や活性阻害等の障害を受けることなく揮発性有
機塩素化合物の分解処理を実現することが可能である。
に、揮発性有機塩素化合物とならんでフェノールやクレ
ゾールといった芳香族化合物も分解し、必然的にこれら
の化合物に対する耐性を持ち合わせている。このような
化合物は通常殺菌剤として用いられていることからもわ
かるように、多くの微生物にとって有害であり、しかも
実際に廃液や土壌中の汚染成分として混入している場合
も多いが、ＴＬ２株はこれらの化合物が混入していて
も、死滅や活性阻害等の障害を受けることなく揮発性有
機塩素化合物の分解処理を実現することが可能である。
【００２３】本発明のＴＬ２株を培養するために用いら
れる培地の栄養源としては、通常の微生物の生育に必要
であって本菌が資化可能な栄養源であればいかなる炭素
源、窒素源及び無機塩類等でもよく、例えばＭ９培地に
若干の栄養源として酵母エキスを添加したもので培養す
ることも可能である。
れる培地の栄養源としては、通常の微生物の生育に必要
であって本菌が資化可能な栄養源であればいかなる炭素
源、窒素源及び無機塩類等でもよく、例えばＭ９培地に
若干の栄養源として酵母エキスを添加したもので培養す
ることも可能である。
【００２４】以下にＭ９培地の組成を示す。
【００２５】Ｎａ2 ＨＰＯ4 ：６．２ｇ
ＫＨ2 ＰＯ4 ：３．０ｇ
ＮａＣｌ：０．５ｇ
ＮＨ4 Ｃｌ：１．０ｇ （培地１ｌ中；ｐＨ７）
培養は好気条件下で行なうことができ、液体培養でも固
体培養でもよい。培養温度は３０℃前後が望ましい。
体培養でもよい。培養温度は３０℃前後が望ましい。
【００２６】本菌を自然に、もしくは人工的手段によっ
て変異させて得られる変異株であっても、良好な揮発性
有機塩素化合物分解活性を有する限りすべて本発明のス
コープに包含される。
て変異させて得られる変異株であっても、良好な揮発性
有機塩素化合物分解活性を有する限りすべて本発明のス
コープに包含される。
【００２７】本発明における揮発性有機塩素化合物の分
解処理は、例えば廃液等の汚染媒体中の揮発性有機塩素
化合物が上記ＴＬ２株と接触することによって行なわれ
る。微生物と揮発性有機塩素化合物の接触は、揮発性有
機塩素化合物を含有する汚染媒体中で該微生物を培養す
る、或いは該水性媒体を該微生物の培養系に添加する等
の方法によって行なうことができ、バッチ法、半連続
法、連続法等種々の方法を用いて実施できる。該微生物
は半固体状態で或いは適当な担体に固定化して用いるこ
ともできる。廃液や土壌更には空気などの被処理物は、
必要に応じて各種処理を行ってもよい。例えば、ＴＣＥ
の濃度、ｐＨ、各種栄養物質の補充等を行ってもよい。
ＴＣＥの分解処理領域内での濃度は、１０ｐｐｍ程度又
はそれ以下に調整するとよい。
解処理は、例えば廃液等の汚染媒体中の揮発性有機塩素
化合物が上記ＴＬ２株と接触することによって行なわれ
る。微生物と揮発性有機塩素化合物の接触は、揮発性有
機塩素化合物を含有する汚染媒体中で該微生物を培養す
る、或いは該水性媒体を該微生物の培養系に添加する等
の方法によって行なうことができ、バッチ法、半連続
法、連続法等種々の方法を用いて実施できる。該微生物
は半固体状態で或いは適当な担体に固定化して用いるこ
ともできる。廃液や土壌更には空気などの被処理物は、
必要に応じて各種処理を行ってもよい。例えば、ＴＣＥ
の濃度、ｐＨ、各種栄養物質の補充等を行ってもよい。
ＴＣＥの分解処理領域内での濃度は、１０ｐｐｍ程度又
はそれ以下に調整するとよい。
【００２８】本発明における気相中に存在する揮発性有
機塩素化合物の分解処理は、汚染空気と上記ＴＬ２株を
接触させることによって行なうことができる。以下に主
な利用形態を述べるが、これらの形態に限定されること
なく、本菌株はいかなる揮発性有機塩素化合物気相汚染
の浄化処理にも利用可能である。
機塩素化合物の分解処理は、汚染空気と上記ＴＬ２株を
接触させることによって行なうことができる。以下に主
な利用形態を述べるが、これらの形態に限定されること
なく、本菌株はいかなる揮発性有機塩素化合物気相汚染
の浄化処理にも利用可能である。
【００２９】例えば、培養槽を設けＴＬ２株を培養し、
この培養槽に揮発性有機塩素化合物で汚染された気体を
所定の流量で導入し、分解させる形態がある。気体の導
入法についてはなんら制限はないが、気体の導入により
培養液が攪拌されエアレーションが促進される形態がよ
り望ましい。気体の導入及び排気は連続して行ってもよ
いが、処理能力に応じて間欠的に、あるいはバッチ式で
処理することも可能である。このような制御を揮発性有
機塩素化合物の濃度に合わせてシステム制御し最適化を
図るとよい。
この培養槽に揮発性有機塩素化合物で汚染された気体を
所定の流量で導入し、分解させる形態がある。気体の導
入法についてはなんら制限はないが、気体の導入により
培養液が攪拌されエアレーションが促進される形態がよ
り望ましい。気体の導入及び排気は連続して行ってもよ
いが、処理能力に応じて間欠的に、あるいはバッチ式で
処理することも可能である。このような制御を揮発性有
機塩素化合物の濃度に合わせてシステム制御し最適化を
図るとよい。
【００３０】また別の利用形態としてはＴＬ２株を担
体、例えば土壌粒子等に付着させ、これを反応槽に充填
し、この反応槽内に揮発性有機塩素化合物汚染気体を導
入し分解処理を行う形態がある。この場合使用する担体
は、土壌粒子に限らずいかなるものでも利用可能である
が、微生物の保持能力に優れ、通気性を損なわないよう
なものがより望ましい。例えば、微生物の棲息空間を与
えるような材料として、従来より医薬品工業、食品工
業、廃水処理システム等で利用されているバイオリアク
タで汎用されているさまざまな微生物担体が利用でき
る。より具体的には、多孔質ガラス、セラミクス、金属
酸化物、活性炭、カオリナイト、ベントナイト、ゼオラ
イト、シリカゲル、アルミナ、アンスラサイト等の無機
粒子状担体、デンプン、寒天、キチン、キトサン、ポリ
ビニルアルコール、アルギン酸、ポリアクリルアミド、
カラギーナン、アガロース、ゼラチン等のゲル状担体、
イオン交換性セルロース、イオン交換樹脂、セルロース
誘導体、グルタルアルデヒド、ポリアクリル酸、ポリウ
レタン、ポリエステル等が挙げられる。また天然物とし
て、綿、麻、紙類といったセルロース系のもの、木粉、
樹皮といったリグニン系のものも利用可能である。
体、例えば土壌粒子等に付着させ、これを反応槽に充填
し、この反応槽内に揮発性有機塩素化合物汚染気体を導
入し分解処理を行う形態がある。この場合使用する担体
は、土壌粒子に限らずいかなるものでも利用可能である
が、微生物の保持能力に優れ、通気性を損なわないよう
なものがより望ましい。例えば、微生物の棲息空間を与
えるような材料として、従来より医薬品工業、食品工
業、廃水処理システム等で利用されているバイオリアク
タで汎用されているさまざまな微生物担体が利用でき
る。より具体的には、多孔質ガラス、セラミクス、金属
酸化物、活性炭、カオリナイト、ベントナイト、ゼオラ
イト、シリカゲル、アルミナ、アンスラサイト等の無機
粒子状担体、デンプン、寒天、キチン、キトサン、ポリ
ビニルアルコール、アルギン酸、ポリアクリルアミド、
カラギーナン、アガロース、ゼラチン等のゲル状担体、
イオン交換性セルロース、イオン交換樹脂、セルロース
誘導体、グルタルアルデヒド、ポリアクリル酸、ポリウ
レタン、ポリエステル等が挙げられる。また天然物とし
て、綿、麻、紙類といったセルロース系のもの、木粉、
樹皮といったリグニン系のものも利用可能である。
【００３１】また、本菌の増殖材料としては、先にも述
べたように一般に用いられる微生物培養用の培地を使用
できる。例えば、ブイヨン培地、Ｍ９培地、２ＸＹＴ培
地、Ｌ培地、あるいはポリペプトン、酵母エキスなどと
グルコースなどの炭素源を任意に混合した培地などが有
効である。また、これらの培地は液状、あるいはアガロ
ースを加えることによりゲル状に調製したもの、いずれ
も利用可能である。
べたように一般に用いられる微生物培養用の培地を使用
できる。例えば、ブイヨン培地、Ｍ９培地、２ＸＹＴ培
地、Ｌ培地、あるいはポリペプトン、酵母エキスなどと
グルコースなどの炭素源を任意に混合した培地などが有
効である。また、これらの培地は液状、あるいはアガロ
ースを加えることによりゲル状に調製したもの、いずれ
も利用可能である。
【００３２】さらに、菌の保持と栄養供給を兼用できる
材料としては、農林水産業関係で利用される堆肥などに
その例を多く挙げることができる。すなわち、麦わらな
どの穀物類の藁や大鋸屑、米糠、雪花菜、砂糖黍の絞り
かすなどの植物由来の乾燥物、またカニやエビの殻など
の海産廃棄物などが利用できる。
材料としては、農林水産業関係で利用される堆肥などに
その例を多く挙げることができる。すなわち、麦わらな
どの穀物類の藁や大鋸屑、米糠、雪花菜、砂糖黍の絞り
かすなどの植物由来の乾燥物、またカニやエビの殻など
の海産廃棄物などが利用できる。
【００３３】ＴＣＥ汚染気体の浄化は、担体になる物質
を予め充填した上で菌を導入してもよいし、前培養して
もかまわない。分解反応をより効率的に行わせるために
は、先に述べた栄養素や含水比、酸素濃度などを所望の
条件に保つとよい。また、反応槽内の担体と水分量の比
は微生物の生育と通気性から、反応槽の形態は処理する
気体の量、濃度などにより適宜選択すればよいが、気体
と担体に保持される微生物との接触が促進されるように
配慮するとよく、例えば、カラム、チューブ、タンク、
箱形のものを利用することができる。さらにこのような
形状のものを排気ダクトやフィルタなどとユニット化し
てもよいし、能力にあわせていくつかを連続させてもよ
い。
を予め充填した上で菌を導入してもよいし、前培養して
もかまわない。分解反応をより効率的に行わせるために
は、先に述べた栄養素や含水比、酸素濃度などを所望の
条件に保つとよい。また、反応槽内の担体と水分量の比
は微生物の生育と通気性から、反応槽の形態は処理する
気体の量、濃度などにより適宜選択すればよいが、気体
と担体に保持される微生物との接触が促進されるように
配慮するとよく、例えば、カラム、チューブ、タンク、
箱形のものを利用することができる。さらにこのような
形状のものを排気ダクトやフィルタなどとユニット化し
てもよいし、能力にあわせていくつかを連続させてもよ
い。
【００３４】汚染気体は、初め担体材料に吸着する場合
もあり、微生物利用の効果がうまく観察されない例も稀
にあるが、一定期間の後には担体材料に付着した汚染物
質が分解されて、また汚染物質の分解した材料表面に再
度汚染物質が吸着するということで、担体材料への吸着
性が再生される。このようにして、ＴＣＥ除去能は飽和
することなく常に一定の分解が期待できる。
もあり、微生物利用の効果がうまく観察されない例も稀
にあるが、一定期間の後には担体材料に付着した汚染物
質が分解されて、また汚染物質の分解した材料表面に再
度汚染物質が吸着するということで、担体材料への吸着
性が再生される。このようにして、ＴＣＥ除去能は飽和
することなく常に一定の分解が期待できる。
【００３５】人工的な改変を行った菌を除き、すべての
既知の揮発性有機塩素化合物（ＴＣＥ、ＤＣＥ及びビニ
ルクロライド）分解菌は分解活性を発現するために誘導
物質（ｉｎｄｕｃｅｒ）と呼ばれる化学物質の存在が必
要である。即ち、誘導物質を分解するために発現した酵
素によって目的とする揮発性有機塩素化合物を分解する
ことが可能となる。誘導物質の種類としては、例えばＭ
ｅｔｈｙｌｏｓｉｎｕｓ ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｉｕｍ
ＯＢ３ｂではメタンが、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃ
ｅｐａｃｉａ ＫＫ０１ではフェノール等のある種の芳
香族化合物が誘導物質となる。ＴＬ２株は後者の芳香族
化合物を誘導物質となしうるタイプの分解菌であり、現
在既知の物質としてフェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−
クレゾールを誘導物質として利用することができる。従
って、本菌を用いて揮発性有機塩素化合物を分解する場
合には、分解時においてこれら誘導物質によって分解酵
素が発現している状態にしておく。そのためには揮発性
有機塩素化合物を分解する前に誘導物質の存在下で培養
してもよいし、揮発性有機塩素化合物と誘導物質の共存
下で培養してもよい。このような誘導物質の適当かつ有
効な濃度は１０〜１０００ｐｐｍ、より好ましくは５０
〜４００ｐｐｍがよい。
既知の揮発性有機塩素化合物（ＴＣＥ、ＤＣＥ及びビニ
ルクロライド）分解菌は分解活性を発現するために誘導
物質（ｉｎｄｕｃｅｒ）と呼ばれる化学物質の存在が必
要である。即ち、誘導物質を分解するために発現した酵
素によって目的とする揮発性有機塩素化合物を分解する
ことが可能となる。誘導物質の種類としては、例えばＭ
ｅｔｈｙｌｏｓｉｎｕｓ ｔｒｉｃｈｏｓｐｏｒｉｕｍ
ＯＢ３ｂではメタンが、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃ
ｅｐａｃｉａ ＫＫ０１ではフェノール等のある種の芳
香族化合物が誘導物質となる。ＴＬ２株は後者の芳香族
化合物を誘導物質となしうるタイプの分解菌であり、現
在既知の物質としてフェノール、ｍ−クレゾール、ｐ−
クレゾールを誘導物質として利用することができる。従
って、本菌を用いて揮発性有機塩素化合物を分解する場
合には、分解時においてこれら誘導物質によって分解酵
素が発現している状態にしておく。そのためには揮発性
有機塩素化合物を分解する前に誘導物質の存在下で培養
してもよいし、揮発性有機塩素化合物と誘導物質の共存
下で培養してもよい。このような誘導物質の適当かつ有
効な濃度は１０〜１０００ｐｐｍ、より好ましくは５０
〜４００ｐｐｍがよい。
【００３６】これら誘導物質は、本菌によって大部分が
易分解性の物質に変換され、一般的な土壌棲息菌が接触
できる状況を保ったり一般的に用いられている廃液処理
槽等を経由させれば、問題なく完全に分解される。
易分解性の物質に変換され、一般的な土壌棲息菌が接触
できる状況を保ったり一般的に用いられている廃液処理
槽等を経由させれば、問題なく完全に分解される。
【００３７】本発明の方法は、閉鎖系、開放系いずれの
廃液処理、土壌処理、空気処理方法にも適用できる。な
お、微生物を担体等に固定して用いたり、生育を促進す
る各種の方法を併用してもよい。
廃液処理、土壌処理、空気処理方法にも適用できる。な
お、微生物を担体等に固定して用いたり、生育を促進す
る各種の方法を併用してもよい。
【００３８】
【実施例】実施例１．
ＴＬ２株によるフェノールの分解
寒天培地上のＴＬ２株のコロニーを、坂口フラスコ中の
酵母エキス０．２％を含むＭ９培地２００ｍｌに接種
し、３０℃で４８時間振盪培養を行った。
酵母エキス０．２％を含むＭ９培地２００ｍｌに接種
し、３０℃で４８時間振盪培養を行った。
【００３９】次にフェノール２００ｐｐｍ、４００ｐｐ
ｍ、６００ｐｐｍを含む０．１％酵母エキス含有Ｍ９培
地５０ｍｌをそれぞれ１００ｍｌ容坂口フラスコに注入
し、上記のように培養した菌液０．１ｍｌを各培地に接
種した後、３０℃振盪培養した。フェノール量は分光光
度計によって定量し、経時的にフェノールの減少を測定
した。結果を図１に示す。
ｍ、６００ｐｐｍを含む０．１％酵母エキス含有Ｍ９培
地５０ｍｌをそれぞれ１００ｍｌ容坂口フラスコに注入
し、上記のように培養した菌液０．１ｍｌを各培地に接
種した後、３０℃振盪培養した。フェノール量は分光光
度計によって定量し、経時的にフェノールの減少を測定
した。結果を図１に示す。
【００４０】２００ｐｐｍ、４００ｐｐｍ、６００ｐｐ
ｍのフェノールは、それぞれ１０時間、１５時間、２４
時間目までには完全分解された。
ｍのフェノールは、それぞれ１０時間、１５時間、２４
時間目までには完全分解された。
【００４１】実施例２． ＴＬ２株によるクレゾールの
分解 培地中のフェノールを、各１００ｐｐｍのｍ−クレゾー
ル及びｐ−クレゾールとした以外は、実施例１と同様に
して、ＴＬ２株によるクレゾールの分解を試みた。結果
を図２に示す。
分解 培地中のフェノールを、各１００ｐｐｍのｍ−クレゾー
ル及びｐ−クレゾールとした以外は、実施例１と同様に
して、ＴＬ２株によるクレゾールの分解を試みた。結果
を図２に示す。
【００４２】ｍ−クレゾールは３６時間目までに、ｐ−
クレゾールは３０時間目までにそれぞれ完全分解され
た。
クレゾールは３０時間目までにそれぞれ完全分解され
た。
【００４３】実施例３． ＴＬ２株によるＴＣＥの分解
（１５ｐｐｍ、誘導物質：フェノール１００ｐｐｍ） 寒天培地上のＴＬ２株のコロニーを、坂口フラスコ中の
酵母エキス０．２％を含むＭ９培地２００ｍｌに接種
し、３０℃で４８時間振盪培養を行った。
（１５ｐｐｍ、誘導物質：フェノール１００ｐｐｍ） 寒天培地上のＴＬ２株のコロニーを、坂口フラスコ中の
酵母エキス０．２％を含むＭ９培地２００ｍｌに接種
し、３０℃で４８時間振盪培養を行った。
【００４４】次にＴＣＥ１５ｐｐｍ及びフェノール１０
０ｐｐｍを含む０．１％酵母エキス含有Ｍ９培地５ｍｌ
をバイアル瓶に注入し、上記のように培養した菌液０．
１ｍｌを接種した後、ブチルゴム栓及びアルミキャップ
で完全密封し、３０℃振盪培養した。ＴＣＥ量はヘッド
スペース法によりガスクロマトグラフィーによって定量
し、経時的にＴＣＥの減少を測定した。結果を図３に示
す。
０ｐｐｍを含む０．１％酵母エキス含有Ｍ９培地５ｍｌ
をバイアル瓶に注入し、上記のように培養した菌液０．
１ｍｌを接種した後、ブチルゴム栓及びアルミキャップ
で完全密封し、３０℃振盪培養した。ＴＣＥ量はヘッド
スペース法によりガスクロマトグラフィーによって定量
し、経時的にＴＣＥの減少を測定した。結果を図３に示
す。
【００４５】初めの１４時間で顕著にＴＣＥが分解さ
れ、４０時間後までには１５ｐｐｍのＴＣＥは完全に分
解された。またこの時点でのフェノールを分光光度計に
よって定量したところ、完全に分解されていた。
れ、４０時間後までには１５ｐｐｍのＴＣＥは完全に分
解された。またこの時点でのフェノールを分光光度計に
よって定量したところ、完全に分解されていた。
【００４６】実施例４． ＴＬ２株によるＴＣＥの分解
（３０ｐｐｍ、誘導物質：フェノール２００ｐｐｍ） 培地中のＴＣＥ濃度を３０ｐｐｍ、フェノール濃度を２
００ｐｐｍとした他は実施例３と同様の方法で経時的に
ＴＣＥの減少を測定した。結果を図４に示す。初めの１
７時間で顕著にＴＣＥが分解され、その後も分解が進ん
で、４６時間後までには３０ｐｐｍのＴＣＥは完全に分
解された。またこの時点でのフェノールを分光光度計に
よって定量したところ、完全に分解されていた。
（３０ｐｐｍ、誘導物質：フェノール２００ｐｐｍ） 培地中のＴＣＥ濃度を３０ｐｐｍ、フェノール濃度を２
００ｐｐｍとした他は実施例３と同様の方法で経時的に
ＴＣＥの減少を測定した。結果を図４に示す。初めの１
７時間で顕著にＴＣＥが分解され、その後も分解が進ん
で、４６時間後までには３０ｐｐｍのＴＣＥは完全に分
解された。またこの時点でのフェノールを分光光度計に
よって定量したところ、完全に分解されていた。
【００４７】実施例５． ＴＬ２株によるＴＣＥの分解
（誘導物質：ｍ−クレゾール／ｐ−クレゾール１００ｐ
ｐｍ） それぞれの培地中のＴＣＥ濃度を５ｐｐｍ、誘導物質を
ｍ−クレゾールおよびｐ−クレゾール１００ｐｐｍとし
た他は実施例３と同様の方法で経時的にＴＣＥの減少を
測定した。結果を図５に示す。
（誘導物質：ｍ−クレゾール／ｐ−クレゾール１００ｐ
ｐｍ） それぞれの培地中のＴＣＥ濃度を５ｐｐｍ、誘導物質を
ｍ−クレゾールおよびｐ−クレゾール１００ｐｐｍとし
た他は実施例３と同様の方法で経時的にＴＣＥの減少を
測定した。結果を図５に示す。
【００４８】それぞれ３０時間程度の誘導期間の後、顕
著なＴＣＥの分解が始まり、４５時間後までには５ｐｐ
ｍのＴＣＥは完全に分解された。またこの時点でのｍ−
クレゾールおよびｐ−クレゾールを分光光度計によって
定量したところ、完全に分解されていた。
著なＴＣＥの分解が始まり、４５時間後までには５ｐｐ
ｍのＴＣＥは完全に分解された。またこの時点でのｍ−
クレゾールおよびｐ−クレゾールを分光光度計によって
定量したところ、完全に分解されていた。
【００４９】実施例６． ＴＬ２株によるＤＣＥの分解
（誘導物質：フェノール１００ｐｐｍ） 培地中の分解対象物質をｃｉｓ−１，２−ジクロロエチ
レン（ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥ）及びｔｒａｎｓ−１，
２−ジクロロエチレン（ｔｒａｎｓ−１，２−ＤＣＥ）
それぞれ１０ｐｐｍとした他は実施例３と同様の方法で
経時的にＤＣＥの減少を測定した。結果を図６に示す。
（誘導物質：フェノール１００ｐｐｍ） 培地中の分解対象物質をｃｉｓ−１，２−ジクロロエチ
レン（ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥ）及びｔｒａｎｓ−１，
２−ジクロロエチレン（ｔｒａｎｓ−１，２−ＤＣＥ）
それぞれ１０ｐｐｍとした他は実施例３と同様の方法で
経時的にＤＣＥの減少を測定した。結果を図６に示す。
【００５０】ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥははじめの１５時
間程度で顕著な分解が起こり、ｔｒａｎｓ−１，２−Ｄ
ＣＥは１５時間程度の誘導期間の後、顕著な分解が始ま
り、ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥは３０時間後までに、ｔｒ
ａｎｓ−１，２−ＤＣＥは４０時間後までに完全に分解
された。またこの時点でのフェノールを分光光度計によ
って定量したところ、完全に分解されていた。
間程度で顕著な分解が起こり、ｔｒａｎｓ−１，２−Ｄ
ＣＥは１５時間程度の誘導期間の後、顕著な分解が始ま
り、ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥは３０時間後までに、ｔｒ
ａｎｓ−１，２−ＤＣＥは４０時間後までに完全に分解
された。またこの時点でのフェノールを分光光度計によ
って定量したところ、完全に分解されていた。
【００５１】実施例７． ＴＬ２株による土壌中フェノ
ールの分解処理（褐色森林土） 寒天培地上のＴＬ２株のコロニーを、坂口フラスコ中の
酵母エキス０．２％を含むＭ９培地２００ｍｌに接種
し、３０℃で４８時間振盪培養を行った。
ールの分解処理（褐色森林土） 寒天培地上のＴＬ２株のコロニーを、坂口フラスコ中の
酵母エキス０．２％を含むＭ９培地２００ｍｌに接種
し、３０℃で４８時間振盪培養を行った。
【００５２】次にフェノール１００ｐｐｍ、２００ｐｐ
ｍ、４００ｐｐｍを含む０．１％酵母エキス含有Ｍ９培
地１ｍｌをそれぞれバイアル瓶に注入し、褐色森林土を
４ｇ加え、さらに上記のように培養した菌液０．１ｍｌ
を接種した後、綿栓をし、３０℃で静置培養した。フェ
ノール量はアミノアンチピリンを用いたＪＩＳ法による
検出法（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９９３，２８．１）
によって定量し、経時的にＴＣＥの減少を測定した。結
果を図７に示す。
ｍ、４００ｐｐｍを含む０．１％酵母エキス含有Ｍ９培
地１ｍｌをそれぞれバイアル瓶に注入し、褐色森林土を
４ｇ加え、さらに上記のように培養した菌液０．１ｍｌ
を接種した後、綿栓をし、３０℃で静置培養した。フェ
ノール量はアミノアンチピリンを用いたＪＩＳ法による
検出法（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９９３，２８．１）
によって定量し、経時的にＴＣＥの減少を測定した。結
果を図７に示す。
【００５３】１００ｐｐｍフェノールは２４時間目まで
に、２００ｐｐｍフェノールは３０時間目までに、４０
０ｐｐｍフェノールは３６時間目までにそれぞれ完全分
解された。
に、２００ｐｐｍフェノールは３０時間目までに、４０
０ｐｐｍフェノールは３６時間目までにそれぞれ完全分
解された。
【００５４】実施例８． ＴＬ２株による土壌中クレゾ
ールの分解処理（褐色森林土） 培地中の分解対象物質をｍ−クレゾール及びｐ−クレゾ
ール１００ｐｐｍとした他は実施例７と同様の方法で、
ＴＬ２株によるクレゾールの分解を試みた。クレゾール
量はｐ−ヒドラジドベンゼンスルホン酸を用いたＪＩＳ
法による検出法（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９９３，２
８．２）で行い、経時的にクレゾールの減少を測定し
た。結果を図８に示す。
ールの分解処理（褐色森林土） 培地中の分解対象物質をｍ−クレゾール及びｐ−クレゾ
ール１００ｐｐｍとした他は実施例７と同様の方法で、
ＴＬ２株によるクレゾールの分解を試みた。クレゾール
量はｐ−ヒドラジドベンゼンスルホン酸を用いたＪＩＳ
法による検出法（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９９３，２
８．２）で行い、経時的にクレゾールの減少を測定し
た。結果を図８に示す。
【００５５】ｍ−クレゾールは４２時間目までに、ｐ−
クレゾールは３６時間目までにそれぞれ完全に分解され
た。
クレゾールは３６時間目までにそれぞれ完全に分解され
た。
【００５６】実施例９． ＴＬ２株による土壌中ＴＣＥ
の分解処理（褐色森林土） 寒天培地上のＴＬ２株のコロニーを、坂口フラスコ中の
酵母エキス０．２％を含むＭ９培地２００ｍｌに接種
し、３０℃で４８時間振盪培養を行った。
の分解処理（褐色森林土） 寒天培地上のＴＬ２株のコロニーを、坂口フラスコ中の
酵母エキス０．２％を含むＭ９培地２００ｍｌに接種
し、３０℃で４８時間振盪培養を行った。
【００５７】次にＴＣＥ１０ｐｐｍ及びフェノール１０
０ｐｐｍを含む０．１％酵母エキス含有Ｍ９培地１ｍｌ
をバイアル瓶に注入し、褐色森林土を４ｇ加え、さらに
上記のように培養した菌液０．１ｍｌを接種した後、ブ
チルゴム栓及びアルミキャップで完全密封し、３０℃で
静置培養した。ＴＣＥ量はヘッドスペース法によりガス
クロマトグラフィーによって定量し、経時的にＴＣＥの
減少を測定した。結果を図９に示す。
０ｐｐｍを含む０．１％酵母エキス含有Ｍ９培地１ｍｌ
をバイアル瓶に注入し、褐色森林土を４ｇ加え、さらに
上記のように培養した菌液０．１ｍｌを接種した後、ブ
チルゴム栓及びアルミキャップで完全密封し、３０℃で
静置培養した。ＴＣＥ量はヘッドスペース法によりガス
クロマトグラフィーによって定量し、経時的にＴＣＥの
減少を測定した。結果を図９に示す。
【００５８】１２時間程度の誘導期間の後、顕著なＴＣ
Ｅの分解が始まり、３６時間後までには１０ｐｐｍのＴ
ＣＥは完全に分解された。またこの時点でのフェノール
は、アミノアンチピリンを用いたＪＩＳ法による検出法
（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９９３，２８．１）で、検
出されなかった。
Ｅの分解が始まり、３６時間後までには１０ｐｐｍのＴ
ＣＥは完全に分解された。またこの時点でのフェノール
は、アミノアンチピリンを用いたＪＩＳ法による検出法
（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９９３，２８．１）で、検
出されなかった。
【００５９】実施例１０． ＴＬ２株による土壌中ＴＣ
Ｅの分解処理（ローム土） 土壌サンプルをローム土とした他は実施例９と同様の方
法で経時的にＴＣＥの減少を測定した。結果を図１０に
示す。
Ｅの分解処理（ローム土） 土壌サンプルをローム土とした他は実施例９と同様の方
法で経時的にＴＣＥの減少を測定した。結果を図１０に
示す。
【００６０】１８時間程度の誘導期間の後、顕著なＴＣ
Ｅの分解が始まり、４２時間後までには１０ｐｐｍのＴ
ＣＥは完全に分解された。またこの時点でのフェノール
は、アミノアンチピリンを用いたＪＩＳ法による検出法
（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９９３，２８．１）で、検
出されなかった。
Ｅの分解が始まり、４２時間後までには１０ｐｐｍのＴ
ＣＥは完全に分解された。またこの時点でのフェノール
は、アミノアンチピリンを用いたＪＩＳ法による検出法
（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９９３，２８．１）で、検
出されなかった。
【００６１】実施例１１． ＴＬ２株による土壌中ＴＣ
Ｅの分解処理（細砂土） 土壌サンプルを細砂土（シルト含有率：約１０％）とし
た他は実施例９と同様の方法で経時的にＴＣＥの減少を
測定した。結果を図１１に示す。
Ｅの分解処理（細砂土） 土壌サンプルを細砂土（シルト含有率：約１０％）とし
た他は実施例９と同様の方法で経時的にＴＣＥの減少を
測定した。結果を図１１に示す。
【００６２】１２時間程度の誘導期間の後、顕著なＴＣ
Ｅの分解が始まり、３０時間後までには１０ｐｐｍのＴ
ＣＥは完全に分解された。またこの時点でのフェノール
は、アミノアンチピリンを用いたＪＩＳ法による検出法
（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９９３，２８．１）で、検
出されなかった。
Ｅの分解が始まり、３０時間後までには１０ｐｐｍのＴ
ＣＥは完全に分解された。またこの時点でのフェノール
は、アミノアンチピリンを用いたＪＩＳ法による検出法
（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９９３，２８．１）で、検
出されなかった。
【００６３】実施例１２． ＴＬ２株による土壌中ＴＣ
Ｅの分解（誘導物質：ｐ−クレゾール／ｍ−クレゾール
１００ｐｐｍ） ＴＣＥ濃度を５ｐｐｍ、培地中の誘導物質をそれぞれｐ
−クレゾール及びｍ−クレゾール１００ｐｐｍとした他
は実施例９と同様の方法で経時的にＴＣＥの減少を測定
した。結果を図１２に示す。
Ｅの分解（誘導物質：ｐ−クレゾール／ｍ−クレゾール
１００ｐｐｍ） ＴＣＥ濃度を５ｐｐｍ、培地中の誘導物質をそれぞれｐ
−クレゾール及びｍ−クレゾール１００ｐｐｍとした他
は実施例９と同様の方法で経時的にＴＣＥの減少を測定
した。結果を図１２に示す。
【００６４】ｐ−クレゾール添加系、ｍ−クレゾール添
加系共、２４時間程度の誘導期間の後顕著なＴＣＥの分
解が始まり、４８時間後までには５ｐｐｍのＴＣＥは完
全に分解された。またこの時点でのｐ−クレゾール及び
ｍ−クレゾールは、ｐ−ヒドラジドベンゼンスルホン酸
を用いたＪＩＳ法による検出法（ＪＩＳ Ｋ ０１０２
−１９９３，２８．２）で、検出されなかった。
加系共、２４時間程度の誘導期間の後顕著なＴＣＥの分
解が始まり、４８時間後までには５ｐｐｍのＴＣＥは完
全に分解された。またこの時点でのｐ−クレゾール及び
ｍ−クレゾールは、ｐ−ヒドラジドベンゼンスルホン酸
を用いたＪＩＳ法による検出法（ＪＩＳ Ｋ ０１０２
−１９９３，２８．２）で、検出されなかった。
【００６５】実施例１３． ＴＬ２株による土壌中ＤＣ
Ｅの分解 培地中の分解対象物質をｃｉｓ−１，２−ジクロロエチ
レン（ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥ）及びｔｒａｎｓ−１，
２−ジクロロエチレン（ｔｒａｎｓ−１，２−ＤＣＥ）
それぞれ５ｐｐｍとした他は実施例９と同様の方法で経
時的にＤＣＥの減少を測定した。結果を図１３に示す。
Ｅの分解 培地中の分解対象物質をｃｉｓ−１，２−ジクロロエチ
レン（ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥ）及びｔｒａｎｓ−１，
２−ジクロロエチレン（ｔｒａｎｓ−１，２−ＤＣＥ）
それぞれ５ｐｐｍとした他は実施例９と同様の方法で経
時的にＤＣＥの減少を測定した。結果を図１３に示す。
【００６６】ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥは１２時間程度の
誘導期間の後、ｔｒａｎｓ−１，２−ＤＣＥは１８時間
程度の誘導期間の後、顕著な分解が始まり、ｃｉｓ−
１，２−ＤＣＥは３０時間後までに、ｔｒａｎｓ−１，
２−ＤＣＥは４２時間後までに完全に分解された。また
この時点でのフェノールは、アミノアンチピリンを用い
たＪＩＳ法による検出法（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９
９３，２８．１）で、検出されなかった。
誘導期間の後、ｔｒａｎｓ−１，２−ＤＣＥは１８時間
程度の誘導期間の後、顕著な分解が始まり、ｃｉｓ−
１，２−ＤＣＥは３０時間後までに、ｔｒａｎｓ−１，
２−ＤＣＥは４２時間後までに完全に分解された。また
この時点でのフェノールは、アミノアンチピリンを用い
たＪＩＳ法による検出法（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９
９３，２８．１）で、検出されなかった。
【００６７】実施例１４． ＴＬ２株による培養液曝気
による気相中ＴＣＥの分解浄化処理（誘導物質：フェノ
ール１００ｐｐｍ） 寒天培地上のＴＬ２株のコロニーを、坂口フラスコ中の
酵母エキス０．２％を含むＭ９培地２００ｍｌに接種
し、３０℃で４８時間振盪培養を行った。
による気相中ＴＣＥの分解浄化処理（誘導物質：フェノ
ール１００ｐｐｍ） 寒天培地上のＴＬ２株のコロニーを、坂口フラスコ中の
酵母エキス０．２％を含むＭ９培地２００ｍｌに接種
し、３０℃で４８時間振盪培養を行った。
【００６８】この培養菌液０．１ｍｌを、１００ｐｐｍ
のフェノールを誘導物質として含むバイアル瓶（２０ｍ
ｌ容）中の５ｍｌのＭ９培地（酵母エキス０．１％含
有）に加えた。この溶液中にＴＣＥ飽和水溶液中で曝気
した空気を流量６０ｍｌ／分で１０分間導入した後、ブ
チルゴム栓及びアルミキャップで完全密封し、３０℃で
振盪培養した。ＴＣＥ量はヘッドスペース法によりガス
クロマトグラフィーによって定量し、経時的にＴＣＥの
減少を測定した。
のフェノールを誘導物質として含むバイアル瓶（２０ｍ
ｌ容）中の５ｍｌのＭ９培地（酵母エキス０．１％含
有）に加えた。この溶液中にＴＣＥ飽和水溶液中で曝気
した空気を流量６０ｍｌ／分で１０分間導入した後、ブ
チルゴム栓及びアルミキャップで完全密封し、３０℃で
振盪培養した。ＴＣＥ量はヘッドスペース法によりガス
クロマトグラフィーによって定量し、経時的にＴＣＥの
減少を測定した。
【００６９】対照として、同様の実験系において菌液の
替わりに滅菌培地のみを加えた系でのＴＣＥの定量も併
せて行い、対照のＴＣＥ量に対する残存率を求めた。結
果を図１４に示す。
替わりに滅菌培地のみを加えた系でのＴＣＥの定量も併
せて行い、対照のＴＣＥ量に対する残存率を求めた。結
果を図１４に示す。
【００７０】１２時間程度の誘導期間の後、急速なＴＣ
Ｅの分解が始まり、２４時間後までにはＴＣＥは完全に
分解された。またこの時点でのフェノールは、アミノア
ンチピリンを用いたＪＩＳ法による検出法（ＪＩＳ Ｋ
０１０２−１９９３，２８．１）で、検出されなかっ
た。
Ｅの分解が始まり、２４時間後までにはＴＣＥは完全に
分解された。またこの時点でのフェノールは、アミノア
ンチピリンを用いたＪＩＳ法による検出法（ＪＩＳ Ｋ
０１０２−１９９３，２８．１）で、検出されなかっ
た。
【００７１】実施例１５． ＴＬ２株による培養液曝気
による気相中ＴＣＥの分解浄化処理（誘導物質：ｐ−ク
レゾール１００ｐｐｍ） 培地中の誘導物質をｐ−クレゾール１００ｐｐｍとした
他は実施例１４と同様の方法で経時的にＴＣＥの減少を
測定した。結果を図１５に示す。
による気相中ＴＣＥの分解浄化処理（誘導物質：ｐ−ク
レゾール１００ｐｐｍ） 培地中の誘導物質をｐ−クレゾール１００ｐｐｍとした
他は実施例１４と同様の方法で経時的にＴＣＥの減少を
測定した。結果を図１５に示す。
【００７２】１２時間程度の誘導期間の後、顕著なＴＣ
Ｅの分解が始まり、３０時間後までにはＴＣＥは完全に
分解された。またこの時点でのｐ−クレゾールは、ｐ−
ヒドラジドベンゼンスルホン酸を用いたＪＩＳ法による
検出法（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９９３，２８．２）
で、検出されなかった。
Ｅの分解が始まり、３０時間後までにはＴＣＥは完全に
分解された。またこの時点でのｐ−クレゾールは、ｐ−
ヒドラジドベンゼンスルホン酸を用いたＪＩＳ法による
検出法（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９９３，２８．２）
で、検出されなかった。
【００７３】実施例１６． ＴＬ２株による培養液曝気
による気相中ＤＣＥの分解浄化処理 気相中の分解対象物質をｃｉｓ−１，２−ジクロロエチ
レン（ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥ）及びｔｒａｎｓ−１，
２−ジクロロエチレン（ｔｒａｎｓ−１，２−ＤＣＥ）
とした他は実施例１４と同様の方法で経時的にＤＣＥの
減少を測定した。結果を図１６に示す。
による気相中ＤＣＥの分解浄化処理 気相中の分解対象物質をｃｉｓ−１，２−ジクロロエチ
レン（ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥ）及びｔｒａｎｓ−１，
２−ジクロロエチレン（ｔｒａｎｓ−１，２−ＤＣＥ）
とした他は実施例１４と同様の方法で経時的にＤＣＥの
減少を測定した。結果を図１６に示す。
【００７４】ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥは１２時間程度の
誘導期間の後、ｔｒａｎｓ−１，２−ＤＣＥは１８時間
程度の誘導期間の後、顕著な分解が始まり、ｃｉｓ−
１，２−ＤＣＥは２４時間後までに、ｔｒａｎｓ−１，
２−ＤＣＥは３６時間後までに完全に分解された。また
この時点でのフェノールは、アミノアンチピリンを用い
たＪＩＳ法による検出法（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９
９３，２８．１）で、検出されなかった。
誘導期間の後、ｔｒａｎｓ−１，２−ＤＣＥは１８時間
程度の誘導期間の後、顕著な分解が始まり、ｃｉｓ−
１，２−ＤＣＥは２４時間後までに、ｔｒａｎｓ−１，
２−ＤＣＥは３６時間後までに完全に分解された。また
この時点でのフェノールは、アミノアンチピリンを用い
たＪＩＳ法による検出法（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９
９３，２８．１）で、検出されなかった。
【００７５】実施例１７． ＴＬ２株による土壌通気に
よる気相中ＴＣＥの分解浄化処理 実施例１４と同様にして調製した菌液０．１ｍｌを、１
００ｐｐｍのフェノールを誘導物質として含むバイアル
瓶（２０ｍｌ容）中の５ｍｌのＭ９培地（酵母エキス
０．１％含有）に加え、更に滅菌した褐色森林土を水面
まで加えた。ブチルゴム栓をして３０℃で終夜放置した
後、過剰の培養液をデカンテーションにより除去した。
この土壌中にＴＣＥ飽和水溶液中で曝気した空気を流量
６０ｍｌ／分で１０分間導入した後、ブチルゴム栓及び
アルミキャップで完全密封し、３０℃で振盪培養した。
ＴＣＥ量はヘッドスペース法によりガスクロマトグラフ
ィーによって定量し、経時的にＴＣＥの減少を測定し
た。
よる気相中ＴＣＥの分解浄化処理 実施例１４と同様にして調製した菌液０．１ｍｌを、１
００ｐｐｍのフェノールを誘導物質として含むバイアル
瓶（２０ｍｌ容）中の５ｍｌのＭ９培地（酵母エキス
０．１％含有）に加え、更に滅菌した褐色森林土を水面
まで加えた。ブチルゴム栓をして３０℃で終夜放置した
後、過剰の培養液をデカンテーションにより除去した。
この土壌中にＴＣＥ飽和水溶液中で曝気した空気を流量
６０ｍｌ／分で１０分間導入した後、ブチルゴム栓及び
アルミキャップで完全密封し、３０℃で振盪培養した。
ＴＣＥ量はヘッドスペース法によりガスクロマトグラフ
ィーによって定量し、経時的にＴＣＥの減少を測定し
た。
【００７６】対照として、同様の実験系において菌液の
替わりに滅菌培地のみを加えた系でのＴＣＥの定量も併
せて行い、対照のＴＣＥ量に対する残存率を求めた。結
果を図１７に示す。
替わりに滅菌培地のみを加えた系でのＴＣＥの定量も併
せて行い、対照のＴＣＥ量に対する残存率を求めた。結
果を図１７に示す。
【００７７】１２時間程度の誘導期間の後、顕著なＴＣ
Ｅの分解が始まり、３０時間後までにはＴＣＥは完全に
分解された。またこの時点でのフェノールは、アミノア
ンチピリンを用いたＪＩＳ法による検出法（ＪＩＳ Ｋ
０１０２−１９９３，２８．１）で、検出されなかっ
た。
Ｅの分解が始まり、３０時間後までにはＴＣＥは完全に
分解された。またこの時点でのフェノールは、アミノア
ンチピリンを用いたＪＩＳ法による検出法（ＪＩＳ Ｋ
０１０２−１９９３，２８．１）で、検出されなかっ
た。
【００７８】実施例１８． ＴＬ２株による培養液連続
曝気による気相中ＴＣＥの分解浄化処理 実施例１４と同様にして調製した菌液０．１ｍｌを、１
００ｐｐｍのフェノールを誘導物質として含むバイアル
瓶（２０ｍｌ容）中の５ｍｌのＭ９培地（酵母エキス
０．１％含有）に加え、ブチルゴム栓及びアルミキャッ
プデ完全密封した後、ＴＣＥ飽和水溶液中で曝気した空
気を流量０．５ｍｌ／分で溶液中に連続して流しながら
３０℃で静置培養した。ＴＣＥ量は、流出してきた空気
中のＴＣＥをガスクロマトグラフィーによって定量し、
経時的にＴＣＥの減少を測定した。
曝気による気相中ＴＣＥの分解浄化処理 実施例１４と同様にして調製した菌液０．１ｍｌを、１
００ｐｐｍのフェノールを誘導物質として含むバイアル
瓶（２０ｍｌ容）中の５ｍｌのＭ９培地（酵母エキス
０．１％含有）に加え、ブチルゴム栓及びアルミキャッ
プデ完全密封した後、ＴＣＥ飽和水溶液中で曝気した空
気を流量０．５ｍｌ／分で溶液中に連続して流しながら
３０℃で静置培養した。ＴＣＥ量は、流出してきた空気
中のＴＣＥをガスクロマトグラフィーによって定量し、
経時的にＴＣＥの減少を測定した。
【００７９】対照として、同様の実験系において菌液の
替わりに滅菌培地のみを加えた系でのＴＣＥの定量も併
せて行い、対照のＴＣＥ量に対する残存率を求めた。結
果を図１８に示す。
替わりに滅菌培地のみを加えた系でのＴＣＥの定量も併
せて行い、対照のＴＣＥ量に対する残存率を求めた。結
果を図１８に示す。
【００８０】１２時間程度の誘導期間の後、顕著なＴＣ
Ｅの分解が始まり、１８時間目から２１時間目程度の間
ではＴＣＥは完全に分解されており、その後トータル２
４時間程度までＴＣＥの分解が続いた。またこの時点で
のフェノールは、アミノアンチピリンを用いたＪＩＳ法
による検出法（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９９３，２
８．１）で、検出されなかった。
Ｅの分解が始まり、１８時間目から２１時間目程度の間
ではＴＣＥは完全に分解されており、その後トータル２
４時間程度までＴＣＥの分解が続いた。またこの時点で
のフェノールは、アミノアンチピリンを用いたＪＩＳ法
による検出法（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９９３，２
８．１）で、検出されなかった。
【００８１】実施例１９． ＴＬ２株による土壌連続通
気による気相中ＴＣＥの分解浄化処理 実施例１４と同様にして調製した菌液０．１ｍｌを、１
００ｐｐｍのフェノールを誘導物質として含むバイアル
瓶（２０ｍｌ容）中の５ｍｌのＭ９培地（酵母エキス
０．１％含有）に加え、更に滅菌した褐色森林土を水面
まで加えた。ブチルゴム栓をして３０℃で終夜放置した
後、過剰の培養液をデカンテーションにより除去した。
ブチルゴム栓及びアルミキャップで完全密封した後、Ｔ
ＣＥ飽和水溶液中で曝気した空気を流量０．５ｍｌ／分
で土壌中に連続して流しながら、３０℃で静置培養し
た。ＴＣＥ量は、流出してきた空気中のＴＣＥをガスク
ロマトグラフィーによって定量し、経時的にＴＣＥの減
少を測定した。
気による気相中ＴＣＥの分解浄化処理 実施例１４と同様にして調製した菌液０．１ｍｌを、１
００ｐｐｍのフェノールを誘導物質として含むバイアル
瓶（２０ｍｌ容）中の５ｍｌのＭ９培地（酵母エキス
０．１％含有）に加え、更に滅菌した褐色森林土を水面
まで加えた。ブチルゴム栓をして３０℃で終夜放置した
後、過剰の培養液をデカンテーションにより除去した。
ブチルゴム栓及びアルミキャップで完全密封した後、Ｔ
ＣＥ飽和水溶液中で曝気した空気を流量０．５ｍｌ／分
で土壌中に連続して流しながら、３０℃で静置培養し
た。ＴＣＥ量は、流出してきた空気中のＴＣＥをガスク
ロマトグラフィーによって定量し、経時的にＴＣＥの減
少を測定した。
【００８２】対照として、同様の実験系において菌液の
替わりに滅菌培地のみを加えた系でのＴＣＥの定量も併
せて行い、対照のＴＣＥ量に対する残存率を求めた。結
果を図１９に示す。
替わりに滅菌培地のみを加えた系でのＴＣＥの定量も併
せて行い、対照のＴＣＥ量に対する残存率を求めた。結
果を図１９に示す。
【００８３】１２時間程度の誘導期間の後、徐々にＴＣ
Ｅの分解が始まり、１８時間目から２４時間目にかけて
ほぼ完全にＴＣＥは分解され、その後トータル３０時間
程度までＴＣＥの分解が続いた。またこの時点でのフェ
ノールは、アミノアンチピリンを用いたＪＩＳ法による
検出法（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９９３，２８．１）
で、検出されなかった。
Ｅの分解が始まり、１８時間目から２４時間目にかけて
ほぼ完全にＴＣＥは分解され、その後トータル３０時間
程度までＴＣＥの分解が続いた。またこの時点でのフェ
ノールは、アミノアンチピリンを用いたＪＩＳ法による
検出法（ＪＩＳ Ｋ ０１０２−１９９３，２８．１）
で、検出されなかった。
【００８４】
【発明の効果】本発明によってもたらされる新規なＴＣ
Ｅ分解菌Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ ｓｐ．ＴＬ２によ
り、揮発性有機塩素化合物による汚染媒体例えば地下水
など各種の水性媒体や汚染空気の効率良い生物分解浄化
処理が可能となる。
Ｅ分解菌Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ ｓｐ．ＴＬ２によ
り、揮発性有機塩素化合物による汚染媒体例えば地下水
など各種の水性媒体や汚染空気の効率良い生物分解浄化
処理が可能となる。
【図１】ＴＬ２株によるフェノールの分解を示す図
【図２】ＴＬ２株によるクレゾールの分解を示す図
【図３】ＴＬ２株によるフェノール添加系におけるＴＣ
Ｅ分解を示す図
Ｅ分解を示す図
【図４】ＴＬ２株によるフェノール添加系におけるＴＣ
Ｅ分解を示す図
Ｅ分解を示す図
【図５】ＴＬ２株によるクレゾール添加系におけるＴＣ
Ｅ分解を示す図
Ｅ分解を示す図
【図６】ＴＬ２株によるフェノール添加系におけるＤＣ
Ｅ分解を示す図
Ｅ分解を示す図
【図７】ＴＬ２株による土壌中フェノールの分解処理を
示す図
示す図
【図８】ＴＬ２株による土壌中クレゾールの分解処理を
示す図
示す図
【図９】ＴＬ２株による土壌中ＴＣＥの分解処理を示す
図
図
【図１０】ＴＬ２株による土壌中ＴＣＥの分解処理を示
す図
す図
【図１１】ＴＬ２株による土壌中ＴＣＥの分解処理を示
す図
す図
【図１２】ＴＬ２株による土壌中クレゾール添加ＴＣＥ
の分解処理を示す図
の分解処理を示す図
【図１３】ＴＬ２株による土壌中ＤＣＥの分解処理を示
す図
す図
【図１４】ＴＬ２株による曝気によるＴＣＥの分解処理
を示す図
を示す図
【図１５】ＴＬ２株による曝気によるＴＣＥの分解処理
を示す図
を示す図
【図１６】ＴＬ２株による曝気によるＤＣＥの分解処理
を示す図
を示す図
【図１７】ＴＬ２株による通気によるＴＣＥの分解処理
を示す図
を示す図
【図１８】ＴＬ２株による曝気によるＴＣＥの分解処理
を示す図
を示す図
【図１９】ＴＬ２株による通気によるＴＣＥの分解処理
を示す図
を示す図
─────────────────────────────────────────────────────
フロントページの続き
(51)Int.Cl.7 識別記号 ＦＩ
Ｃ０２Ｆ 3/34 ＺＡＢ Ｃ１２Ｎ 1/20
//(Ｃ１２Ｎ 1/20 Ｃ１２Ｒ 1:05
Ｃ１２Ｒ 1:05） Ｂ０１Ｄ 53/34 １３４Ｅ
(56)参考文献 Ｋａｎｅｋａｒ Ｐ． ｅｔ ａ
ｌ．， Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｐｏｌｌｕｔ
ｉｏｎ， ｖｏｌ．81， ｐｐ．47−50
（1993)
中沢，日本細菌学雑誌， ｖｏｌ.
31， ｐｐ．285−299 （1976)
Ｓｈｅｅｋａ Ｓ． ｅｔ ａｌ．,
Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒ
ｏｂｉｏｌ．， ｖｏｌ．46， ｐｐ.
475−479 （1983)
(58)調査した分野(Int.Cl.7，ＤＢ名)
C12N 1/20 ZAB
ＢＩＯＳＩＳ／ＢＩＯＴＥＣＨＡＢＳ／Ｊ
ＩＣＳＴ−Ｅｐｌｕｓ／ＷＰＩＤＳ（Ｓ
ＴＮ)
Claims (16)
- 【請求項１】 新規微生物アルカリゲネス・スピーシズ
ＴＬ２（Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓｓｐ．ＴＬ２：ＦＥＲ
ＭＰ―１４６４２）。 - 【請求項２】 芳香族化合物または揮発性有機塩素化合
物で汚染された媒体にアルカリゲネス・スピーシズＴＬ
２を接触させることを特徴とする汚染媒体の生物浄化方
法。 - 【請求項３】 媒体が土壌であることを特徴とする請求
項２に記載の方法。 - 【請求項４】 芳香族化合物はフェノール、ｍ―クレゾ
ールまたはｐ―クレゾールのいずれか１以上であること
を特徴とする請求項３に記載の方法。 - 【請求項５】 揮発性有機塩素化合物はトリクロロエチ
レンまたは、ジクロロエチレンのいずれか１以上である
ことを特徴とする請求項３に記載の方法。 - 【請求項６】 アルカリゲネス・スピーシズＴＬ２は誘
導物質により揮発性有機塩素化合物分解活性が誘導され
ていることを特徴とする請求項５に記載の方法。 - 【請求項７】 誘導物質はフェノール、ｍ―クレゾール
またはｐ―クレゾールのいずれか１以上であることを特
徴とする請求項６に記載の方法。 - 【請求項８】 前記媒体が水であることを特徴とする請
求項２に記載の方法。 - 【請求項９】 前記媒体が空気であることを特徴とする
請求項２に記載の方法。 - 【請求項１０】 接触はアルカリゲネス・スピーシズＴ
Ｌ２を含む液相中に芳香族化合物または揮発性有機塩素
化合物を含む空気を導入することを特徴とする請求項９
に記載の方法。 - 【請求項１１】 接触はアルカリゲネス・スピーシズＴ
Ｌ２を担持させた担持体に芳香族化合物または揮発性有
機塩素化合物を含む空気を接触させることを特徴とする
請求項９に記載の方法。 - 【請求項１２】 接触がアルカリゲネス・スピーシズＴ
Ｌ２を担持させた担持体を容器に収容しその容器の一方
から芳香族化合物または揮発性有機塩素化合物を含む空
気を導入し他方から排出させることを特徴とする請求項
９に記載の汚染空気の生物浄化方法。 - 【請求項１３】 芳香族化合物はフェノール、ｍ―クレ
ゾールまたはｐ―クレゾールのいずれか１以上であるこ
とを特徴とする請求項１２に記載の方法。 - 【請求項１４】 揮発性有機塩素化合物はトリクロロエ
チレンまたは、ジクロロエチレンのいずれか１以上であ
ることを特徴とする請求項１２に記載の方法。 - 【請求項１５】 アルカリゲネス・スピーシズＴＬ２は
誘導物質により揮発性有機塩素化合物分解活性が誘導さ
れていることを特徴とする請求項１４に記載の方法。 - 【請求項１６】 誘導物質はフェノール、ｍ―クレゾー
ルまたはｐ―クレゾールのいずれか１以上であることを
特徴とする請求項１５に記載の方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP29932494A JP3478620B2 (ja) | 1994-12-02 | 1994-12-02 | 新規微生物ｔｌ２及びそれを用いた芳香族化合物及び／又は揮発性有機塩素化合物の生物分解処理方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP29932494A JP3478620B2 (ja) | 1994-12-02 | 1994-12-02 | 新規微生物ｔｌ２及びそれを用いた芳香族化合物及び／又は揮発性有機塩素化合物の生物分解処理方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH08154669A JPH08154669A (ja) | 1996-06-18 |
| JP3478620B2 true JP3478620B2 (ja) | 2003-12-15 |
Family
ID=17871073
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP29932494A Expired - Fee Related JP3478620B2 (ja) | 1994-12-02 | 1994-12-02 | 新規微生物ｔｌ２及びそれを用いた芳香族化合物及び／又は揮発性有機塩素化合物の生物分解処理方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3478620B2 (ja) |
Families Citing this family (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100427295B1 (ko) * | 2001-06-19 | 2004-04-17 | 한국생명공학연구원 | 신균주 알카리진즈 오도란스 ｎ６（ｋｃｔｃ１０２３ｂｐ）및 이를 이용한 염소화합물의분해ㆍ제거방법 |
| JP6472187B2 (ja) * | 2014-08-13 | 2019-02-20 | 大阪瓦斯株式会社 | アルカリゲネス属微生物の増殖方法、フェノール類化合物含有排水の処理方法 |
-
1994
- 1994-12-02 JP JP29932494A patent/JP3478620B2/ja not_active Expired - Fee Related
Non-Patent Citations (3)
| Title |
|---|
| Ｋａｎｅｋａｒ Ｐ． ｅｔ ａｌ．， Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｐｏｌｌｕｔｉｏｎ， ｖｏｌ．８１， ｐｐ．４７−５０ （１９９３） |
| Ｓｈｅｅｋａ Ｓ． ｅｔ ａｌ．， Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．， ｖｏｌ．４６， ｐｐ．４７５−４７９ （１９８３） |
| 中沢，日本細菌学雑誌， ｖｏｌ．３１， ｐｐ．２８５−２９９ （１９７６） |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JPH08154669A (ja) | 1996-06-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3478619B2 (ja) | 新規微生物ｋｂ２及びそれを用いた芳香族化合物及び／又は揮発性有機塩素化合物の生物分解処理方法 | |
| JP3450518B2 (ja) | 新規微生物ｊ１、これを用いた芳香族化合物及び／又は有機塩素化合物の生物分解処理方法及び環境修復方法 | |
| JP3347596B2 (ja) | 新規微生物、芳香族化合物及び／或いは有機塩素化合物の生分解方法、及び媒体の浄化方法 | |
| JP3323746B2 (ja) | 新規微生物、有機化合物の生分解方法及び環境修復方法 | |
| US5993658A (en) | Method for biodegrading trichloroethylene and method for biodegrading chlorinated organic compound by microorganisms | |
| JP3083077B2 (ja) | 有機化合物の生分解方法及び環境修復方法 | |
| JP3478620B2 (ja) | 新規微生物ｔｌ２及びそれを用いた芳香族化合物及び／又は揮発性有機塩素化合物の生物分解処理方法 | |
| JP3437304B2 (ja) | 新規微生物ｔｌ１及びそれを用いた芳香族化合物及び／又は揮発性有機塩素化合物の生物分解処理方法 | |
| JP3566408B2 (ja) | 環境中に放出された汚染物質の生物分解浄化方法 | |
| JPH09276843A (ja) | 微生物の分解活性の増大方法及びこれを用いた土壌浄化方法 | |
| JP3461238B2 (ja) | 有機化合物の生分解方法および環境修復方法 | |
| JPH08154667A (ja) | 新規微生物ｋｂ１及びそれを用いた芳香族化合物及び／又は揮発性有機塩素化合物の生物分解処理方法 | |
| JPH10296220A (ja) | 微生物による分解方法および環境修復方法 | |
| JP3416262B2 (ja) | 気相汚染ｔｃｅ浄化法 | |
| JP3437377B2 (ja) | 新規微生物及びその微生物を用いたジクロロプロペンの生物分解方法、環境浄化・修復方法 | |
| JPH09271749A (ja) | 適合溶質を用いた微生物による汚染土壌の生物的修復方法 | |
| JP2000069959A (ja) | 揮発性有機塩素化合物及び芳香族化合物の生物分解方法及び環境修復方法 | |
| JPH1128449A (ja) | 微生物の汚染物質分解活性の維持方法、及び環境修復方法 | |
| JPH09267085A (ja) | 汚染土壌の生物的修復浄化方法 | |
| JPH1190484A (ja) | 汚染媒体の生物分解浄化方法 | |
| JPH09271750A (ja) | 土壌中への薬液注入方法 | |
| JPH09267083A (ja) | 汚染土壌の生物的修復浄化方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20081003 Year of fee payment: 5 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091003 Year of fee payment: 6 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20091003 Year of fee payment: 6 |
|
| FPAY | Renewal fee payment (event date is renewal date of database) |
Free format text: PAYMENT UNTIL: 20101003 Year of fee payment: 7 |
|
| LAPS | Cancellation because of no payment of annual fees |