JP3461238B2 - 有機化合物の生分解方法および環境修復方法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【発明の属する技術分野】本発明は有機化合物の生分解
方法、及び汚染物質を含む環境を微生物を用いて修復す
る方法に関する。

【０００２】

【従来の技術】近年、生体に対し有害でありかつ難分解
性である有機塩素化合物による環境汚染が大きな問題と
なってきている。特に、国内外のＩＣ工場等のハイテク
産業地域の土壌中にはテトラクロロエチレン（ＰＣＥ）
やトリクロロエチレン（ＴＣＥ）、ジクロロエチレン
（ＤＣＥ）等の塩素化脂肪族化合物による汚染がかなり
の範囲で拡がっていると考えられており、実際に環境調
査等で検出された事例が多数報告されている。これらの
有機塩素化合物は土壌中に残留したものが雨水等により
地下水中に溶解して周辺地域一帯に拡がるとされてい
る。このような化合物は発癌性や生殖毒性の疑いがあ
り、また環境中で非常に安定であるため、特に飲料水の
水源として利用されている地下水の汚染は大きな社会問
題となっている。

【０００３】このようなことから、有機塩素化合物の除
去、分解による、汚染地下水等の水性媒体、土壌、及び
それに伴う周辺気相の浄化は、環境保全の視点からきわ
めて重要な課題であり、浄化に必要な技術の開発が行わ
れてきている。

【０００４】例えば、活性炭による吸着処理、光や熱に
よる分解処理等が検討されてきたが、コストや操作性の
面からかならずしも実用的であるとはいえない。

【０００５】一方、環境中では安定であるＴＣＥ等の有
機塩素化合物に対して近年微生物による分解が報告さ
れ、その実用化に向けた研究がなされ始めている。即
ち、微生物を用いた生物分解処理では用いる微生物を選
択することで無害な物質までに有機塩素化合物を分解で
きること、基本的に特別な薬品が不要であること、メン
テナンスにかかる労力やコストを軽減できること等の利
点がある。有機塩素化合物分解能を有する微生物で単離
された報告は、例えば、ＴＣＥ分解菌としては、Ｗｅｌ
ｃｈｉａ ａｌｋｅｎｏｐｈｉｌａ ｓｅｒｏ ５（Ｕ
ＳＰ ４８７７７３６，ＡＴＣＣ ５３５７０）、Ｗｅ
ｌｃｈｉａ ａｌｋｅｎｏｐｈｉｌａ ｓｅｒｏ ３３
（ＵＳＰ ４８７７７３６，ＡＴＣＣ ５３５７１）、
Ｍｅｔｈｙｌｏｃｙｓｔｉｓ ｓｐ．ｓｔｒａｉｎＭ
（Ａｇｒｉｃ Ｂｉｏｌ．Ｃｈｅｍ．，５３，２９０３
（１９８９）、Ｂｉｏｓｃｉ．Ｂｉｏｔｅｃｈ．Ｂｉｏ
ｃｈｅｍ．，５６，４８６（１９９２）、同５６，７３
６（１９９２））、Ｍｅｔｈｙｌｏｓｉｎｕｓ ｔｒｉ
ｃｈｏｓｐｒｉｕｍ ＯＢ３ｂ（Ａｍ．Ｃｈｅｍ．Ｓｏ
ｃ．Ｎａｔｌ．Ｍｅｅｔ．Ｄｅｖ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍ
ｉｃｒｏｂｉｏｌ．，２９，３６５（１９８９）、Ａｐ
ｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，５５，
３１５５（１９８９）、Ａｐｐｌ．Ｂｉｏｃｈｅｍ．Ｂ
ｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．，２８，８７７（１９９１）、特
開平０２−９２２７４号公報、特開平０３−２９２９７
０号公報）、Ｍｅｔｈｙｌｏｍｏｎａｓ ｓｐ．ＭＭ２
（Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，
５７，２３６（１９９１））、Ａｌｃａｌｉｇｅｎｅｓ
ｄｅｎｉｔｒｉｆｉｃａｎｓ ｓｓｐ． ｘｙｌｏｓｏ
ｘｉｄａｎｓ ＪＥ７５（Ａｒｃｈ．ｍｉｃｒｏｂｉｏ
ｌ．，１５４，４１０（１９９０））、Ａｌｃａｌｉｇ
ｅｎｅｓｅｕｔｒｏｐｈｕｓ ＪＭＰ１３４（Ａｐｐ
ｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，５６，１
１７９（１９９０））Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｖ
ａｃｃａｅ ＪＯＢ５（Ｊ．Ｇｅｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏ
ｌ．，８２，１６３（１９７４）、Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉ
ｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，５４，２９６０（１９
８９）、ＡＴＣＣ ２９６７８）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎ
ａｓ ｐｕｔｉｄａ ＢＨ（下水道協会誌，２４，２７
（１９８７））、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃｔｏｒ ｓｐ．
ｓｔｒａｉｎ Ｇ４（Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉ
ｃｒｏｂｉｏｌ．，５２，３８３（１９８６）、同５
３，９４９（１９８７）、同５４，９５１（１９８
９）、同５６，２７９（１９９０）、同５７，１９３
（１９９１）、ＵＳＰ ４９２５８０２，ＡＴＣＣ ５
３６１７、この菌は初めＰｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｅ
ｐａｃｉａと分類されていたが、Ａｃｉｎｅｔｏｂａｃ
ｔｏｒ ｓｐ．に変更された）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａ
ｓｍｅｎｄｏｃｉｎａ ＫＲ−１（Ｂｉｏ／Ｔｅｃｈｎ
ｏｌ．，７，２８２（１９８９））、Ｐｓｅｕｄｏｍｏ
ｎａｓ ｐｕｔｉｄａ Ｆ１（Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏ
ｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，５４，１７０３（１９８
８）、同５４，２５７８（１９８８））、Ｐｓｅｕｄｏ
ｍｏｎａｓ ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｓ ＰＦＬ１２（Ａ
ｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，５
４，２５７８（１９８８））、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ
ｐｕｔｉｄａ ＫＷ１−９（特開平０６−７０７５３
号公報）、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｃｅｐａｃｉａ
ＫＫ０１（特開平０６−２２７７６９号公報）、Ｎｉｔ
ｒｏｓｏｍｏｎａｓ ｅｕｒｏｐａｅａ（Ａｐｐｌ．Ｅ
ｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ．，５６，１１６９
（１９９０））、Ｌａｃｔｏｂａｃｉｌｌｕｓ ｖａｇ
ｉｎａｌｉｓ ｓｐ．ｎｏｖ（ｌｎｔ．Ｊ．Ｓｙｓｔ．
Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ．，３９，３６８（１９８９）、Ａ
ＴＣＣ ４９５４０）等が知られている。

【０００６】ここで、これらの分解菌を実際の環境浄化
処理に用いる場合に非常に問題となるのが、これらすべ
ての分解菌が、ＴＣＥを分解するために、その分解誘導
物質として芳香族化合物やメタン等の化学物質を必要と
するということである。

【０００７】例えば、フェノールやトルエンといった芳
香族化合物は非常に優れた誘導物質であるが、その毒性
が高く、環境中に放出することは論外であり、また、メ
タンも有効な誘導物質であるが、可燃性の気体であり、
環境中に導入して制御することは好ましくない。

【０００８】これらの問題を解決するため、ネルソンら
は有機塩素化合物の分解誘導物質としてトリプトファン
を用いる方法を開発した（特開平４−５０２２７７号公
報）。しかしながら、誘導物質により分解を誘導すると
いう根本的な分解機構については他の分解菌と同様であ
り、つまり、ＴＣＥ分解酵素は誘導酸素であるため、い
ったん誘導された後の酵素活性は通常数時間程度しか維
持されず、その後はまた誘導物質の再添加が必要とな
る。さらにＴＣＥ分解が誘導物質の存在により拮抗阻害
を起こすことから、ＴＣＥ分解の効率が著しく低下して
しまうという本質的な問題については何ら解決策が示さ
れていない。つまり、誘導物質の環境中への導入は現実
的となったが、低コストで簡易、かつ効率的な浄化処理
方法を提供するのはやはり困難である。

【０００９】そこで現在、このようなＴＣＥ分解酵素で
あるオキシゲナーゼ或いはハイドロキシラーゼをコード
する遺伝子領域を含むＤＮＡ断片を組み込んだプラスミ
ドを宿主細菌に導入し、無害な誘導物質により、あるい
は誘導物質が存在しない状況でも構成的にＴＣＥ分解活
性を発言させようとする試みがなされている。ＤＮＡ断
片由来菌株としてはシュードモナスメンドシナＫＲ−１
（特開平２−５０３８６６号公報）、シュードモナスプ
チダＫＷ１−９（特開平６−１０５６９１号公報）及び
シュードモナスプチダＢＨ（地下水・土壌汚染とその防
止対策に関する研究集会第３回講演集、２１３（１９９
４））が挙げられる。

【００１０】しかしながら、これらの組み換え菌株を利
用した浄化方法では、誘導物質として非常に高価な物質
であるＩＰＴＧ（イソプロピルチオガラクトピラノシ
ド）が必要であったり、プラスミドの宿主菌株に対する
安定性が充分でないため、継代培養時の活性の発現が不
安定であるなどの様々な問題を伴う。その上、組み換え
菌株を環境中に放出することはパブリック・アクセプタ
ンスの上からも規制は免れない。

【００１１】これらの問題を解決するためのシールズ等
は、フェノールやトルエン等の誘導物質を用いることな
くＴＣＥ分解能を発現するアシネトバクター・スピーシ
ズＧ４株の変異株を、トランスポゾンを用いた変異の導
入によって取得した（Ａｐｐｌ．Ｅｎｖｉｒｏｎ．Ｍｉ
ｃｒｏｂｉｏｌ．，５８，３９７７（１９９２）、国際
公開番号ＷＯ９２／１９７３８号）。

【００１２】しかし、Ｇ４株の変異株を用いた浄化方法
に関しては、ＴＣＥ分解活性という点で不十分であり、
またトランスポゾンを用いて変異を導入しているためそ
の変異の安定性に問題を含んでいる。

【００１３】またトランスポゾン自体にアミノグリコシ
ド系抗生物質の耐性遺伝子を含んでいるため、環境中に
放出した場合、他の菌への水平伝達による疫学的な悪影
響が問題となり、現実の環境修復方法としては適当でな
い。

【００１４】

【発明が解決しようとする課題】本発明はこのような状
況の下でなされたものであって、その目的は有機化合物
をより効率良く且つ安定的に生分解可能な方法を提供す
る点にある。

【００１５】また本発明の他の目的は汚染物質で汚染さ
れた環境をより効率良く安定的に修復する方法を提供す
る点にある。

【００１６】

【課題を解決するための手段】本発明の生分解方法は、
ＪＭ１（ＦＥＲＭ ＢＰ−５３５２）を用いて有機化合
物を生分解する方法において、該ＪＭ１をクエン酸もし
くはその塩と接触させる工程を有することを特徴とする
ものである。また、本発明の環境修復方法は、汚染物質
をＪＭ１（ＦＥＲＭ ＢＰ−５３５２）を用いて環境を
修復する方法において、該ＪＭ１の炭素源としてクエン
酸もしくはその塩を用いることを特徴とするものであ
る。

【００１７】即ち本発明者らはＪＭ１株の有機化合物の
分解活性を安定的に、より一層高める様な炭素源として
クエン酸あるいはその塩が有効であることを見出し、汚
染物質、例えば芳香族化合物や塩素化脂肪族化合物等で
汚染された環境をＪＭ１株で修復する際に、該ＪＭ１株
の炭素源としてクエン酸或いはその塩をＪＭ１株と接触
させることにより該環境を効率的且つ安定的に修復する
方法を発明するに至った。

【００１８】

【発明の実施の形態】本発明の実施形態に係る有機化合
物の生分解方法あるいは環境修復方法において用いる微
生物は、芳香族化合物や塩素化脂肪族炭化水素化合物を
誘導物質を用いることで分解できる特定の微生物（ブタ
ペスト条約に基づく国際寄託の番号：ＦＥＲＭ ＢＰ−
５１０２）を変異源を用いた変異操作によって変異させ
て取得した、誘導物質を用いることなく有機化合物を分
解可能な変異株であり、特許手続上の微生物の寄託の国
際的承認に関するブタペスト条約に基づき下記の国際寄
託当局にＦＥＲＭ ＢＰ−５３５２／識別の為の表示：
コリネバクテリウム・スピーシズＪＭ１株（Ｃｏｒｙｎ
ｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｓｐ．ＪＭ１）（以下「ＪＭ１
株」と称す）として寄託したものである。

【００１９】工業技術院生命工学工業技術研究所（茨城
県つくば市）

【００２０】なお上記菌部ＦＥＲＭ ＢＰ−５３５２
は、当初本菌株がコリネバクテリウム属に属しているも
のとして「コリネバクテリウム・スピーシズＪＭ１株」
と表示したが、後の検討により本菌株が“コリネバクテ
リウム属には属さない”と認められた為、ＦＥＲＭ Ｂ
Ｐ−５３５２の識別の為の表示を「ＪＭ１株」と変更し
た。

【００２１】ＪＭ１株の菌学的性質は下記の通りであ
る。

【００２２】 グラム染色性及び形態：グラム陰性桿菌 各培地における生育 ＢＨＩＡ：生育良好 ＭａｃＣｏｎｋｅｙ：生育可能 コロニーの色：クリーム色 至適温度：２５℃＞３０℃＞３５℃ 運動性：陰性（半流動培地） ＴＳＩ（ｓｌａｎｔ／ｂｕｔｔ）：アルカリ／アルカ
リ、Ｈ₂ Ｓ（−） オキシダーゼ：陽性（弱） カタラーゼ：陽性 糖の発酵 グルコース ：陰性 シュクロース：陰性 ラフィノース：陰性 ガラクトース：陰性 マルトース ：陰性 ウレアーゼ：陽性 エスクリン加水分解（β−グルコシダーゼ）：陽性 硝酸還元：陰性 インドール産生：陰性 グルコース酸性化：陰性 アルギニンジヒドロラーゼ：陰性 ゼラチン加水分解（プロテアーゼ）：陰性 β−ガラクトシダーゼ：陰性 各化合物の同化 グルコース：陰性 Ｌ−アラビノース：陰性 Ｄ−マンノース：陰性 Ｄ−マンニトール：陰性 Ｎ−アセチル−Ｄ−グルコサミン：陰性 マルトース：陰性 グルコン酸カリウム：陰性 ｎ−カプリン酸：陽性 アジピン酸：陽性 ｄｌ−リンゴ酸：陽性 クエン酸ナトリウム：陽性 酢酸フェニル：陰性

【００２３】次にＪＭ１株を用いて有機化合物や汚染物
質を生分解させる際には、ＪＭ１株をクエン酸或はその
塩と接触させることは、該有機化合物や汚染物質の分解
効率を著しく向上させることができる為好ましいもので
ある。

【００２４】ここでクエン酸の塩としては、例えばクエ
ン酸のナトリウム塩やカリウム塩等が挙げられる。

【００２５】ここで微生物の培養に使用する培地として
は、基本的には生育に必要とする炭素源、窒素源、無機
塩類、及び特殊な要求物質（ビタミン、アミノ酸、核酸
塩基等）などを全て含んでいなければならない。

【００２６】一般的に、バクテリア等の微生物を短期間
に増殖させるという観点からは、酵母エキス、肉エキ
ス、ペプトン、カザミノ酸、ＣＳＬ（Ｃｏｒｎ ｓｔｅ
ｅｐｌｉｑｕｏｒ）、ＳＶＰ（Ｓｏｌｕｂｌｅ ｖｅｇ
ｅｔａｂｌｅ ｐｒｏｔｅｉｎ）、麦芽エキス、廃蜜糖
等の天然培地や、それらを組み合わせた２×ＹＴ培地や
ＬＢ培地といった完全栄養培地が効果的であり、純粋培
養の際の増殖培地として多く用いられている。その性質
上、このような完全栄養培地は、多種多様なアミノ酸や
糖類、有機酸等の炭素源が含まれている。

【００２７】一方、増殖基質が単一あるいは限られたも
のである場合には、それを効率的に資化できる微生物
は、完全栄養型天然培地の場合に比べて限定される。こ
のような培地は選択培地と呼ばれ、様々な微生物の存在
する環境中からある目的に添った微生物を集積培養した
りスクリーニングしたりする際に好適に用いられる。

【００２８】本発明者らは、これらの完全栄養培地ある
いは選択培地を用いて種々の条件下でＪＭ１株を増殖せ
しめ、その分解活性について評価を行ったところ、これ
らの種々の培地全てにおいてＪＭ１株の分解活性が十分
に発揮されるものではなく、分解活性の安定発現ならび
に高分解活性の維持には、最適な培地成分の選択が重要
であることを見出した。

【００２９】つまり、ＪＭ１株が安定的に高分解活性を
発現、維持しうるような培地成分として、炭素源にクエ
ン酸あるいはその塩を用いることが特に有効であること
を見出し、実際の浄化処理においてクエン酸あるいはそ
の塩を炭素源として添加することにより、ＪＭ１株によ
る環境中の芳香族化合物及び／或いは有機塩素化合物の
効率的かつ安定的な分解浄化を可能とした。

【００３０】ここで、ＪＭ１株を培養するために用いら
れる基本的な無機塩培地としては、該微生物が生育する
ために必要な成分が含有されていれば特に制限はなく、
例えばＭ９培地にクエン酸あるいはその塩を添加したも
ので培養することが可能である。

【００３１】以下にＭ９培地の組成を示す。

【００３２】 Ｎａ₂ＨＰＯ₄：６．２ｇ ＫＨ₂ＰＯ₄：３．０ｇ ＮａＣｌ：０．５ｇ ＮＨ₄Ｃｌ：１．０ｇ （培地１ｌ中；ｐＨ７．０） 培養は好気条件下で行なうことができ、液体培養でも団
体培養でもよい。培養温度は１５℃から３０℃程度が望
ましい。

【００３３】そしてＪＭ１株とクエン酸或はその塩との
接触は、分解対象の有機化合物とＪＭ１株での処理と同
時に行なうか、または分解対象の有機化合物のＪＭ１株
での処理に先立って行なうか、あるいは、ＪＭ１株での
分解対象化合物の処理前及び処理中に行なうことが好ま
しい。

【００３４】又、クエン酸又はその塩と、ＪＭ１株とを
接触させる前に、例えばＪＭ１株の菌数を増やす為に、
ＪＭ１株の前培養を行なってもよく、前培養にクエン酸
やその塩以外の炭素源、例えばリンゴ酸やその塩を用い
ても良い。

【００３５】次に、ＪＭ１株を用いた有機化合物や汚染
物質の分解処理は、例えば水性媒体中、土壌中或いは気
相中の分解対象化合物とＪＭ１株とを接触させることに
より行なうことができる。

【００３６】ここで、分解対象化合物としては、例えば
芳香族化合物（フェノール、トルエン、ｏ−クレゾー
ル、ｍ−クレゾール、ｐ−クレゾール等）や塩素化脂肪
族炭化水素化合物（トリクロロエチレン、ジクロロエチ
レン等）が挙げられる。

【００３７】そしてＪＭ１株と分解対象化合物との接触
は、ＪＭ１株がクエン酸又はその塩と接触によって発現
する高度な分解活性を損なうことのない条件であればい
かなる方法でも行なうことができ、バッチ法、半連続
法、連続法等種々の方法を用いて実施できる。該微生物
は半固定状態で或いは適当な担体に固定化して用いるこ
ともできる。廃液、土壌、気相等の被処理物は、必要に
応じて各種処理を行ってもよい。

【００３８】本発明における水性媒体中の芳香族化合物
及び／或いは有機塩素化合物の分解処理は、水性媒体中
に存在する芳香族化合物及び／或いは有機塩素化合物と
該分解微生物を接触させることによって行なうことがで
きる。以下に主な利用形態を述べるが、これらの形態に
限定されることなく、いかなる水性媒体中の芳香族化合
物及び／或いは有機塩素化合物汚染の浄化処理にも利用
可能である。

【００３９】例えば、最も簡便な方法としては、芳香族
化合物及び／或いは有機塩素化合物によって汚染された
水性媒体中に直接該分解微生物を導入してやるという方
法がある。この場合、水性媒体のｐＨ、塩濃度、温度や
汚染物質の濃度等を調整してやる必要があるが、該分解
微生物は極端な酸性或いはアルカリ性、高塩濃度でない
限り分解活性は維持される。

【００４０】また別の利用形態としては、培養槽を設け
該分解微生物を培養し、この培養槽に芳香族化合物及び
／或いは有機塩素化合物で汚染された水性媒体を所定の
流量で導入し、分解させる形態がある。水性媒体の導入
及び排水は連続して行ってもよいが、処理能力に応じて
間欠的に、あるいはバッチ式で処理することも可能であ
る。このような制御を芳香族化合物及び／或いは有機塩
素化合物の濃度に合わせてシステム制御し最適化を図る
とよい。

【００４１】更に、該分解微生物を担体、例えば土壌粒
子等に付着させ、これを反応層に充填し、この反応槽内
に芳香族化合物及び／或いは有機塩素化合物汚染水性媒
体を導入し分解処理を行う形態がある。この場合使用す
る担体は、土壌粒子に限らずいかなるものでも利用可能
であるが、微生物の保持能力に優れ、通気性を損なわな
いようなものがより望ましい。例えば、微生物の棲息空
間を与えるような材料として、従来より医薬品工業、食
品工業、廃水処理システム等で利用されているバイオリ
アクタで汎用されているさまざまな微生物担体が利用で
きる。より具体的には、多孔質ガラス、セラミクス、金
属酸化物、活性炭、カオリナイト、ベントナイト、ゼオ
ライト、シリカゲル、アルミナ、アンスラサイト等の無
機粒子状担体、デンプン、寒天、キチン、キトサン、ポ
リビニルアルコール、アルギン酸、ポリアクリルアミ
ド、カラギーナン、アガロース、ゼラチン等のゲル状担
体、イオン交換性セルロース、イオン交換樹脂、セルロ
ース誘導体、グルタルアルデヒド、ポリアクリル酸、ポ
リウレタン、ポリエステル等が挙げられる。また天然物
として、綿、麻、紙類といったセルロース系のもの、木
粉、樹皮といったリグニン系のものも利用可能である。

【００４２】本発明における土壌中の芳香族化合物及び
／或いは有機塩素化合物の分解処理は、土壌中に存在す
る芳香族化合物及び／或いは有機塩素化合物と該分解微
生物を接触させることによって行なうことができる。以
下に、主な利用形態を述べるが、これらの形態に限定さ
れることなく、本菌株はいかなる土壌中の芳香族化合物
及び／或いは有機塩素化合物汚染の浄化処理にも利用可
能である。

【００４３】例えば、最も簡便な方法としては、芳香族
化合物及び／或いは有機塩素化合物によって汚染された
土壌中に直接該分解微生物を導入してやるという方法が
ある。導入の方法としては、土壌表面に散布してやる方
法はもとより、比較的深い地層中の処理の場合には、地
中に挿入した井戸より導入してやる方法がある。更に、
空気や水等によって圧力をかけてやると広範囲に該分解
微生物が拡がり、より効果的である。この場合、土壌中
の諸条件を該分解微生物に適するように調整してやる必
要があるが、で該分解微生物は土壌粒子等の担体の存在
下でより増殖が速められ、そういった意味で土壌中とい
う条件は好都合である。

【００４４】更に、該分解微生物を担体付着させ、これ
を反応槽に充填し、この反応槽を芳香族化合物及び／或
いは有機塩素化合物で汚染された土壌の、主に帯水層中
に導入し分解処理を行う形態がある。反応槽の形態はフ
ェンス状やフィルム状のような、土壌中の広範囲を網羅
できるものが望ましい。この場合使用する担体は、いか
なるものでも利用可能であるが、微生物の保持能力に優
れ、通気性を損なわないようなものがより望ましい。例
えば、微生物の棲息空間を与えるような材料として、従
来より医薬品工業、食品工業、廃水処理システム等で利
用されているバイオリアクタで汎用されているさまざま
な微生物担体が利用できる。より具体的には、多孔質ガ
ラス、セラミクス、金属酸化物、活性炭、カオリナイ
ト、ベントナイト、ゼオライト、シリカゲル、アルミ
ナ、アンスラサイト等の無機粒子状担体、デンプン、寒
天、キチン、キトサン、ポリビニルアルコール、アルギ
ン酸、ポリアクリルアミド、カラギーナン、アガロー
ス、ゼラチン等のゲル状担体、イオン交換性セルロー
ス、イオン交換樹脂、セルロース誘導体、グルタルアル
デヒド、ポリアクリル酸、ポリウレタン、ポリエステル
等が挙げられる。また天然物として綿、麻、紙類といっ
たセルロース系のもの、木粉、樹皮といったリグニン系
のものも利用可能である。

【００４５】本発明における気相中の芳香族化合物及び
／或いは有機塩素化合物の分解処理は、気相中に存在す
る芳香族化合物及び／或いは有機塩素化合物とＪＭ１株
をを接触されることによって行うことができる。以下に
主な利用形態を述べるが、これらの形態に限定されるこ
となく、本菌株はいかなる気相中の芳香族化合物及び／
或いは有機塩素化合物気相汚染の浄化処理にも利用可能
である。

【００４６】例えば、培養槽を設け該分解微生物を培養
し、この培養槽に芳香族化合物及び／或いは有機塩素化
合物で汚染された気体を所定の流量で導入し、分解させ
る形態がある。気体の導入法についてはなんら制限はな
いが、気体の導入により培養液が攪拌されエアレーショ
ンが促進される形態がより望ましい。気体の導入及び排
気は連続して行ってもよいが、処理能力に応じて間欠的
に、あるいはバッチ式で処理することも可能である。こ
のような制御を有機塩素化合物の濃度に合わせてシステ
ム制御し最適化を図るとよい。

【００４７】また別の利用形態としては該分解微生物を
担体、例えば土壌粒子等に付着させ、これを反応槽に充
填し、この反応槽内に芳香族化合物及び／或いは有機塩
素化合物汚染気体を導入し分解処理を行う形態がある。
この場合使用する担体は、土壌粒子に限らずいかなるも
のでも利用可能であるが、微生物の保持能力に優れ、通
気性を損なわないようなものがより望ましい。例えば、
微生物の棲息空間を与えるような材料として、従来より
医薬品工業、食品工業、廃水処理システム等で利用され
ているバイオリアクタで汎用されているさまざまな微生
物担体が利用できる。より具体的には、多孔質ガラス、
セラミクス、金属酸化物、活性炭、カオリナイト、ベン
トナイト、ゼオライト、シリカゲル、アルミナ、アンス
ラサイト等の無機粒子状担体、デンプン、寒天、キチ
ン、キトサン、ポリビニルアルコール、アルギン酸、ポ
リアクリルアミド、カラギーナン、アガロース、ゼラチ
ン等のゲル状担体、イオン交換性セルロース、イオン交
換樹脂、セルロース誘導体、グルタルアルデヒド、ポリ
アクリル酸、ポリウレタン、ポリエステル等が挙げられ
る。また天然物として、綿、麻、紙類といったセルロー
ス系のもの、木粉、樹皮といったリグニン系のものも利
用可能である。

【００４８】汚染気体の浄化は、担体になる物質を予め
充填した上で菌を導入してもよいし、前培養してもかま
わない。分解反応をより効率的に行わせるためには、先
に述べた炭素源や含水比、酸素濃度などを所望の条件に
保つとよい。また、反応槽内の担体と水分量の比は微生
物の生育と通気性から、反応槽の形態は処理する気体の
量、濃度などにより適宜選択すればよいが、気体と担体
に保持される微生物との接触が促進されるように配慮す
るとよく、例えば、カラム、チューブ、タンク、箱形の
ものを利用することができる。さらにこのような形状の
ものを排気ダクトやフィルタなどとユニット化してもよ
いし、能力にあわせていくつかを連続させてもよい。

【００４９】汚染気体は、初め担体材料に吸着する場合
もあり、微生物利用の効果がうまく観察されない例も稀
にあるが、一定期間の後には担体材料に付着した汚染物
質が分解されて、また汚染物質の分解した材料表面に再
度汚染物質が吸着するということで、担体材料への吸着
性が再生されるといわれている。このようにして、汚染
除去能は飽和することなく常に一定の分解が期待でき
る。

【００５０】本発明の方法は、閉鎖系、開放系いずれの
廃液処理、土壌処理、及び空気処理にも適用できる。な
お、微生物を担体等に固定して用いたり、生育を促進す
る各種の方法を併用してもよい。

【００５１】

【実施例】以下に実施例を挙げて本発明を更に詳細に説
明する。

【００５２】実施例１ＪＭ１株によるフェノールの分解に対する各種栄養素の
比較（３０℃・砂系） ６７．５ｍｌ容バイアル瓶に佐原通砂を６０ｇ加えた系
で分解能の比較を行った。

【００５３】まず、０．５、１．０、２．０％の各種栄
養素（クエン酸ナトリウム、リンゴ酸ナトリウム、ピル
ビン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、酵母エキス）を含
むＭ９培地６ｍｌを調製し、これに前培養したＪＭ１株
を６０μｌ（１／１００量）ずつ接種した、ここで、前
培養は２．０％リンゴ酸ナトリウムを含むＭ９培地を用
い、１５℃で３日間の振盪培養とした。さらに、分解対
象物質として終濃度３００ｐｐｍとなるようにフェノー
ルを添加、混合し、バイアル瓶中の砂に加えた。添加後
にシリコ栓をして、３０℃で静置培養を行い、経時的に
フェノールの減少を測定した。測定は、液体クロマトグ
ラフィー（分光光度検出器）にて行い、初期濃度に対す
る残存率を示した。結果を図１から図３に示す。

【００５４】実施例２ＪＭ１株によるフェノールの分解に対する各種栄養素の
比較（１５℃・砂系） ６７．５ｍｌ容バイアル瓶に佐原通砂を６０ｇ加えた系
で分解能の比較を行った。

【００５５】まず、０．５、１．０、２．０％の各種栄
養素（クエン酸ナトリウム、リンゴ酸ナトリウム、ピル
ビン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、酵母エキス）を含
むＭ９培地６ｍｌを調製し、これに前培養したＪＭ１株
を６０μｌ（１／１００量）ずつ接種した、ここで、前
培養は２．０％リンゴ酸ナトリウムを含むＭ９培地を用
い、１５℃で３日間の振盪培養とした。さらに、分解対
象物質として終濃度３００ｐｐｍとなるようにフェノー
ルを添加、混合し、バイアル瓶中の砂に加えた。添加後
にシリコ栓をして、１５℃で静置培養を行い、経時的に
フェノールの減少を測定した。測定は、液体クロマトグ
ラフィー（分光光度検出器）にて行い、初期濃度に対す
る残存率を示した。結果を図４から図６に示す。

【００５６】実施例３ＪＭ１株によるＴＣＥの分解に対する各種栄養素の比較
（３０℃・砂系） ６７．５ｍｌ容バイアル瓶に佐原通砂を６０ｇ加えた系
で分解能の比較を行った。

【００５７】まず、０．５、１．０、２．０％の各種栄
養素（クエン酸ナトリウム、リンゴ酸ナトリウム、ピル
ビン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、酵母エキス）を含
むＭ９培地６ｍｌを調製し、これに前培養したＪＭ１株
を６０μｌ（１／１００量）ずつ接種した、ここで、前
培養は２．０％リンゴ酸ナトリウムを含むＭ９培地を用
い、１５℃で３日間の振盪培養とした。

【００５８】菌を接種した培養液をバイアル瓶中の砂に
加えた後、ブチルゴム栓とアルミキャップで密封し、こ
れにＴＣＥを含む空気を加えて最終液中ＴＣＥ濃度を１
０ｐｐｍとし、３０℃で静置培養を行い、経時的にＴＣ
Ｅ分解能を評価した。

【００５９】ＴＣＥ量はヘッドスペース法によりガスク
ロマトグラフィー（ＦＩＤ検出器）によって定量し、対
照として、同様の実験系においてＪＭ１株を加えない系
でのＴＣＥ量の定量も併せて行い、対照のＴＣＥ量に対
する残存率を求めた。結果を図７から図９に示す。

【００６０】実施例４ＪＭ１株によるＴＣＥの分解に対する各種栄養素の比較
（１５℃・砂系） ６７．５ｍｌ容バイアル瓶に佐原通砂を６０ｇ加えた系
で分解能の比較を行った。

【００６１】まず、０．５、１．０、２．０％の各種栄
養素（クエン酸ナトリウム、リンゴ酸ナトリウム、ピル
ビン酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、酵母エキス）を含
むＭ９培地６ｍｌを調製し、これに前培養したＪＭ１株
を６０μｌ（１／１００量）ずつ接種した、ここで、前
培養は２．０％リンゴ酸ナトリウムを含むＭ９培地を用
い、１５℃で３日間の振盪培養とした。

【００６２】菌を接種した培養液をバイアル瓶中の砂に
加えた後、ブチルゴム栓とアルミキャップで密封し、こ
れにＴＣＥを含む空気を加えて最終液中ＴＣＥ濃度を１
０ｐｐｍとし、１５℃で静置培養を行い、経時的にＴＣ
Ｅ分解能を評価した。

【００６３】ＴＣＥ量はヘッドスペース法によりガスク
ロマトグラフィー（ＦＩＤ検出器）によって定量し、対
照として、同様の実験系においてＪＭ１株を加えない系
でのＴＣＥ量の定量も併せて行い、対照のＴＣＥ量に対
する残存率を求めた。結果を図１０から図１２に示す。

【００６４】実施例５ＪＭ１株によるＤＣＥの分解に対する各種栄養素の比較
（３０℃・砂系） 培地中の分解対象物質をｃｉｓ−１，２−ジクロロエチ
レン（ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥ）、ｔｒａｎｓ−１，２
−ジクロロエチレン（ｔｒａｎｓ−１，２−ＤＣＥ）及
び１，１−ジクロロエチレン（１，１−ＤＣＥ）それぞ
れ１０ｐｐｍとした他は実施例３と同様の方法で経時的
にＤＣＥの減少を測定した。結果を図１３から図１５
（ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥ）、図１６から図１８（ｔｒ
ａｎｓ−１，２−ＤＣＥ）、図１９から図２１（１，１
−ＤＣＥ）にそれぞれ示す。

【００６５】実施例６ＪＭ１株によるＤＣＥの分解に対する各種栄養素の比較
（１５℃・砂系） 培地中の分解対象物質をｃｉｓ−１，２−ジクロロエチ
レン（ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥ）、ｔｒａｎｓ−１，２
−ジクロロエチレン（ｔｒａｎｓ−１，２−ＤＣＥ）及
び１，１−ジクロロエチレン（１，１−ＤＣＥ）それぞ
れ１０ｐｐｍとした他は実施例４と同様の方法で経時的
にＤＣＥの減少を測定した。結果を図２２から図２４
（ｃｉｓ−１，２−ＤＣＥ）、図２５から図２７（ｔｒ
ａｎｓ−１，２−ＤＣＥ）、図２８から図３０（１，１
−ＤＣＥ）にそれぞれ示す。

【００６６】実施例７ＪＭ１株によるＴＣＥの分解に対する各種栄養素の比較
（３０℃・土壌抽出液混合液培系） ６７．５ｍｌ容バイアル瓶に土壌抽出液を混合した液体
培地を２０ｍｌ加えた系で分解能の比較を行った。

【００６７】土壌抽出液は、３０ｇの佐原通砂に３０ｍ
ｌのＭ９培地を加えて３０秒間ボルテックスを行って土
壌を懸濁し、その液相部分を分取することにより調製し
た。このようにして調製した土壌抽出液２０ｍｌに最終
濃度が０．５、１．０、２．０％となるよう各種栄養素
（クエン酸ナトリウム、リンゴ酸ナトリウム、ピルビン
酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、酵母エキス）を加え、
これに前培養したＪＭ１株を２００μｌ（１／１００
量）ずつ接種した。ここで前培養は２．０％リンゴ酸ナ
トリウムを含むＭ９培地を用い、１５℃で３日間の振盪
培養とした。

【００６８】菌を接種した培養液をバイアル瓶に加えた
後、ブチルゴム栓とアルミキャップで密封し、これにＴ
ＣＥを含む空気を加えて最終液中ＴＣＥ濃度を１０ｐｐ
ｍとし、３０℃で振盪培養を行い、経時的にＴＣＥ分解
能を評価した。

【００６９】ＴＣＥ量はヘッドスペース法によりガスク
ロマトグラフィー（ＦＩＤ検出器）によって定量し、対
照として、同様の実験系においてＪＭ１株を加えない系
でのＴＣＥ量の定量も併せて行い、対照のＴＣＥ量に対
する残存率を求めた。結果を図３１から図３３に示す。

【００７０】実施例８ＪＭ１株によるＴＣＥの分解に対する各種栄養素の比較
（１５℃・土壌抽出液混合液培系） ６７．５ｍｌ容バイアル瓶に土壌抽出液を混合した液体
培地を２０ｍｌ加えた系で分解能の比較を行った。

【００７１】土壌抽出液は、３０ｇの佐原通砂に３０ｍ
ｌのＭ９培地を加えて３０秒間ボルテックスを行って土
壌を懸濁し、その液相部分を分取することにより調製し
た。このようにして調製した土壌抽出液２０ｍｌに最終
濃度が０．５、１．０、２．０％となるよう各種栄養素
（クエン酸ナトリウム、リンゴ酸ナトリウム、ピルビン
酸ナトリウム、乳酸ナトリウム、酵母エキス）を加え、
これに前培養したＪＭ１株を２００μｌ（１／１００
量）ずつ接種した。ここで前培養は２．０％リンゴ酸ナ
トリウムを含むＭ９培地を用い、１５℃で３日間の振盪
培養とした。

【００７２】菌を接種した培養液をバイアル瓶に加えた
後、ブチルゴム栓とアルミキャップで密封し、これにＴ
ＣＥを含む空気を加えて最終液中ＴＣＥ濃度を１０ｐｐ
ｍとし、１５℃で振盪培養を行い、経時的にＴＣＥ分解
能を評価した。

【００７３】ＴＣＥ量はヘッドスペース法によりガスク
ロマトグラフィー（ＦＩＤ検出器）によって定量し、対
照として、同様の実験系においてＪＭ１株を加えない系
でのＴＣＥ量の定量も併せて行い、対照のＴＣＥ量に対
する残存率を求めた。結果を図３４から図３６に示す。

【００７４】実施例９ＪＭ１株によるＴＣＥの分解に対する各種栄養素の比較
（３０℃・汚濁水系） ６７．５ｍｌ容バイアル瓶に汚濁水を２０ｍｌ加えた系
で分解能の比較を行った。

【００７５】神奈川県厚木市の、かなり汚濁した貯水池
より採取した水２０ｍｌに２ｍｌの１０×Ｍ９培地を加
え、本実施例に供する汚濁水とした。これに最終濃度が
０．５、１．０、２．０％となるよう各種栄養素（クエ
ン酸ナトリウム、リンゴ酸ナトリウム、ピルビン酸ナト
リウム、乳酸ナトリウム、酵母エキス）を加え、これに
前培養したＪＭ１株を２００μｌ（１／１００量）ずつ
接種した。ここで前培養は２．０％リンゴ酸ナトリウム
を含むＭ９培地を用い、１５℃で３日間の振盪培養とし
た。

【００７６】菌を接種した培養液をバイアル瓶に加えた
後、ブチルゴム栓とアルミキャップで密封し、これにＴ
ＣＥを含む空気を加えて最終液中ＴＣＥ濃度を１０ｐｐ
ｍとし、３０℃で振盪培養を行い、経時的にＴＣＥ分解
能を評価した。

【００７７】ＴＣＥ量はヘッドスペース法によりガスク
ロマトグラフィー（ＦＩＤ検出器）によって定量し、対
照として、同様の実験系においてＪＭ１株を加えない系
でのＴＣＥ量の定量も併せて行い、対照のＴＣＥ量に対
する残存率を求めた。結果を図３７から図３９に示す。

【００７８】実施例１０ＪＭ１株によるＴＣＥの分解に対する各種栄養素の比較
（１５℃・汚濁水系） ６７．５ｍｌ容バイアル瓶に汚濁水を２０ｍｌ加えた系
で分解能の比較を行った。

【００７９】神奈川県厚木市の、かなり汚濁した貯水池
より採取した水２０ｍｌに２ｍｌの１０×Ｍ９培地を加
え、本実施例に供する汚濁水とした。これに最終濃度が
０．５、１．０、２．０％となるよう各種栄養素（クエ
ン酸ナトリウム、リンゴ酸ナトリウム、ピルビン酸ナト
リウム、乳酸ナトリウム、酵母エキス）を加え、これに
前培養したＪＭ１株を２００μｌ（１／１００量）ずつ
接種した。ここで前培養は２．０％リンゴ酸ナトリウム
を含むＭ９培地を用い、１５℃で３日間の振盪培養とし
た。

【００８０】菌を接種した培養液をバイアル瓶に加えた
後、ブチルゴム栓とアルミキャップで密封し、これにＴ
ＣＥを含む空気を加えて最終液中ＴＣＥ濃度を１０ｐｐ
ｍとし、１５℃で振盪培養を行い、経時的にＴＣＥ分解
能を評価した。

【００８１】ＴＣＥ量はヘッドスペース法によりガスク
ロマトグラフィー（ＦＩＤ検出器）によって定量し、対
照として、同様の実験系においてＪＭ１株を加えない系
でのＴＣＥ量の定量も併せて行い、対照のＴＣＥ量に対
する残存率を求めた。結果を図４０から図４２に示す。

【００８２】実施例１１ＪＭ１株を用いた、土壌通気による気相中のＴＣＥの分
解処理に対する各種栄養素の比較 まず、０．５、１．０、２．０％の各種栄養素（クエン
酸ナトリウム、リンゴ酸ナトリウム、ピルビン酸ナトリ
ウム、乳酸ナトリウム、酵母エキス）を含むＭ９培地３
０ｍｌを調製し、これに前培養したＪＭ１株を３００μ
ｌ（１／１００量）ずつ接種した。ここで、前培養は
２．０％リンゴ酸ナトリウムを含むＭ９培地を用い、１
５℃で３日間の振盪培養とした。

【００８３】菌を接種した培養液に褐色森林土を水面ま
で加え、シリコ栓で封をして２０℃で２４時間静置培養
の後、過剰の培養液をデカントして取除いた。これに１
００ｐｐｍのＴＣＥ溶液中で曝気した空気を流量６０ｍ
ｌ／分で土壌中に３０分間流した後、ブチルゴム栓、ア
ルミシールで完全密封し、２０℃で静置培養を行った。
ＴＣＥ量は、ヘッドスペース法によりガスクロマトグラ
フィーで定量し、経時的にＴＣＥ量を測定した。結果を
図４３から図４５に示す。

【００８４】実施例１２ＪＭ１株を用いた、土壌連続通気による気相中のＴＣＥ
の分解処理に対する各種栄養素の比較 まず、０．５、１．０、２．０％の各種栄養素（クエン
酸ナトリウム、リンゴ酸ナトリウム、ピルビン酸ナトリ
ウム、乳酸ナトリウム、酵母エキス）を含むＭ９培地３
０ｍｌを調製し、これに前培養したＪＭ１株を３００μ
ｌ（１／１００量）ずつ接種した。ここで、前培養は
２．０％リンゴ酸ナトリウムを含むＭ９培地を用い、１
５℃で３日間の振盪培養とした。

【００８５】菌を接種した培養液に褐色森林土を水面ま
で加え、シリコ栓で封をして２０℃で２４時間静置培養
の後、過剰の培養液をデカントして取除いた。これをブ
チルゴム栓、アルミシールで完全密封した後に、１００
ｐｐｍのＴＣＥ溶液中で曝気した空気を流量０．５ｍｌ
／分で土壌中に連続して流しながら、２０℃で静置培養
を行った。ＴＣＥ量は、流出してきた空気中のＴＣＥ量
をガスクロマトグラフィーで定量することにより行い、
経時的にＴＣＥ量を測定した。結果を図４６から図４８
に示す。

【００８６】

【発明の効果】本発明の一実施態様によれば効率的且つ
安定的な有機化合物の生分解処理を行なうことができ
る。

【００８７】また例えば３０℃程度の高温条件下でも有
機化合物を効率良く安定的に生分解できる。

【００８８】また本発明の他の実施態様によれば効率的
且つ安定的に生物的な環境修復を行なうことができる。

【００８９】更に比較的高温の条件下（例えば３０℃程
度）でも生物的な環境修復を効率良く安定的に行なうこ
とができる。

【図面の簡単な説明】

【図１】実施例１におけるＪＭ１株を用いたフェノール
分解を示す図（栄養素濃度０．５％、３０℃）。

【図２】実施例１におけるＪＭ１株を用いたフェノール
分解を示す図（栄養素濃度１％、３０℃）。

【図３】実施例１におけるＪＭ１株を用いたフェノール
分解を示す図（栄養素濃度２％、３０℃）。

【図４】実施例２におけるＪＭ１株を用いたフェノール
分解を示す図（栄養素濃度０．５％、１５℃）。

【図５】実施例２におけるＪＭ１株を用いたフェノール
分解を示す図（栄養素濃度１％、１５℃）。

【図６】実施例２におけるＪＭ１株を用いたフェノール
分解を示す図（栄養素濃度２％、１５℃）。

【図７】実施例３におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ分解
を示す図（栄養素濃度０．５％、３０℃）。

【図８】実施例３におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ分解
を示す図（栄養素濃度１％、３０℃）。

【図９】実施例３におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ分解
を示す図（栄養素濃度２％、３０℃）。

【図１０】実施例４におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ分
解を示す図（栄養素濃度０．５％、１５℃）。

【図１１】実施例４におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ分
解を示す図（栄養素濃度１％、１５℃）。

【図１２】実施例４におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ分
解を示す図（栄養素濃度２％、１５℃）。

【図１３】実施例５におけるＪＭ１株を用いたｃｉｓ−
１，２−ＤＣＥ分解を示す図（栄養素濃度０．５％、３
０℃）。

【図１４】実施例５におけるＪＭ１株を用いたｃｉｓ−
１，２−ＤＣＥ分解を示す図（栄養素濃度１％、３０
℃）。

【図１５】実施例５におけるＪＭ１株を用いたｃｉｓ−
１，２−ＤＣＥ分解を示す図（栄養素濃度２％、３０
℃）。

【図１６】実施例５におけるＪＭ１株を用いたｔｒａｎ
ｓ−１，２−ＤＣＥ分解を示す図（栄養素濃度０．５
％、３０℃）。

【図１７】実施例５におけるＪＭ１株を用いたｔｒａｎ
ｓ−１，２−ＤＣＥ分解を示す図（栄養素濃度１％、３
０℃）。

【図１８】実施例５におけるＪＭ１株を用いたｔｒａｎ
ｓ−１，２−ＤＣＥ分解を示す図（栄養素濃度２％、３
０℃）。

【図１９】実施例５におけるＪＭ１株を用いた１，１−
ＤＣＥ分解を示す図（栄養素濃度０．５％、３０℃）。

【図２０】実施例５におけるＪＭ１株を用いた１，１−
ＤＣＥ分解を示す図（栄養素濃度１％、３０℃）。

【図２１】実施例５におけるＪＭ１株を用いた１，１−
ＤＣＥ分解を示す図（栄養素濃度２％、３０℃）。

【図２２】実施例６におけるＪＭ１株を用いたｃｉｓ−
１，２−ＤＣＥ分解を示す図（栄養素濃度０．５％、１
５℃）。

【図２３】実施例６におけるＪＭ１株を用いたｃｉｓ−
１，２−ＤＣＥ分解を示す図（栄養素濃度１％、１５
℃）。

【図２４】実施例６におけるＪＭ１株を用いたｃｉｓ−
１，２−ＤＣＥ分解を示す図（栄養素濃度２％、１５
℃）。

【図２５】実施例６におけるＪＭ１株を用いたｔｒａｎ
ｓ−１，２−ＤＣＥ分解を示す図（栄養素濃度０．５
％、１５℃）。

【図２６】実施例６におけるＪＭ１株を用いたｔｒａｎ
ｓ−１，２−ＤＣＥ分解を示す図（栄養素濃度１％、１
５℃）。

【図２７】実施例６におけるＪＭ１株を用いたｔｒａｎ
ｓ−１，２−ＤＣＥ分解を示す図（栄養素濃度２％、１
５℃）。

【図２８】実施例６におけるＪＭ１株を用いた１，１−
ＤＣＥ分解を示す図（栄養素濃度０．５％、１５℃）。

【図２９】実施例６におけるＪＭ１株を用いた１，１−
ＤＣＥ分解を示す図（栄養素濃度１％、１５℃）。

【図３０】実施例６におけるＪＭ１株を用いた１，１−
ＤＣＥ分解を示す図（栄養素濃度２％、１５℃）。

【図３１】実施例７におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ分
解を示す図（栄養素濃度０．５％、３０℃）。

【図３２】実施例７におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ分
解を示す図（栄養素濃度１％、３０℃）。

【図３３】実施例７におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ分
解を示す図（栄養素濃度２％、３０℃）。

【図３４】実施例８におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ分
解を示す図（栄養素濃度０．５％、１５℃）。

【図３５】実施例８におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ分
解を示す図（栄養素濃度１％、１５℃）。

【図３６】実施例８におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ分
解を示す図（栄養素濃度２％、１５℃）。

【図３７】実施例９におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ分
解を示す図（栄養素濃度０．５％、３０℃）。

【図３８】実施例９におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ分
解を示す図（栄養素濃度１％、３０℃）。

【図３９】実施例９におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ分
解を示す図（栄養素濃度２％、３０℃）。

【図４０】実施例１０におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ
分解を示す図（栄養素濃度０．５％、１５℃）。

【図４１】実施例１０におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ
分解を示す図（栄養素濃度１％、１５℃）。

【図４２】実施例１０におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ
分解を示す図（栄養素濃度２％、１５℃）。

【図４３】実施例１１におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ
分解を示す図（栄養素濃度０．５％）。

【図４４】実施例１１におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ
分解を示す図（栄養素濃度１％）。

【図４５】実施例１１におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ
分解を示す図（栄養素濃度２％）。

【図４６】実施例１２におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ
分解を示す図（栄養素濃度０．５％）。

【図４７】実施例１２におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ
分解を示す図（栄養素濃度１％）。

【図４８】実施例１２におけるＪＭ１株を用いたＴＣＥ
分解を示す図（栄養素濃度２％）。

フロントページの続き (72)発明者 三原 知恵子 東京都大田区下丸子３丁目30番２号キヤ ノン株式会社内 (56)参考文献 特開 平８−294387（ＪＰ，Ａ) (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) C02F 3/28 - 3/34 B09C 1/10

Claims (21)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 ＪＭ１（ＦＥＲＭ ＢＰ−５３５２）を
   用いて有機化合物を生分解する方法において、ＪＭ１を
   クエン酸もしくはその塩と接触させる工程を有すること
   を特徴とする有機化合物の生分解方法。
2. 【請求項２】 該ＪＭ１で該有機化合物を生分解するの
   に先立って、該ＪＭ１を有機酸を用いて前培養する請求
   項１の生分解方法。
3. 【請求項３】 該有機化合物が芳香族化合物である請求
   項１の生分解方法。
4. 【請求項４】 該芳香族化合物がフェノール、トルエン
   またはクレゾールである請求項３の生分解方法。
5. 【請求項５】 該有機化合物が塩素化脂肪族化合物であ
   る請求項１の生分解方法。
6. 【請求項６】 該塩素化脂肪族化合物がトリクロロエチ
   レン、又はジクロロエチレンである請求項５の生分解方
   法。
7. 【請求項７】 汚染物質をＪＭ１（ＦＥＲＭ ＢＰ−５
   ３５２）を用いて分解せしめて環境を修復する方法にお
   いて、該ＪＭ１株の炭素源としてクエン酸もしくはその
   塩を用いることを特徴とする環境修復方法。
8. 【請求項８】 該汚染物質の該ＪＭ１での分解に先立っ
   て、該ＪＭ１を有機酸を用いて前培養する請求項７の環
   境修復方法。
9. 【請求項９】 該汚染物質が芳香族化合物である請求項
   ７の環境修復方法。
10. 【請求項１０】 該芳香族化合物がフェノール、トルエ
    ンまたはクレゾールである請求項９の環境修復方法。
11. 【請求項１１】 該汚染物質が塩素化脂肪族化合物であ
    る請求項７の環境修復方法。
12. 【請求項１２】 該塩素化脂肪族化合物がトリクロロエ
    チレン、又はジクロロエチレンである請求項１１の環境
    修復方法。
13. 【請求項１３】 該環境が液体である請求項７の環境修
    復方法。
14. 【請求項１４】 ＪＭ１を担持させた担体と該液体を接
    触させることによって該汚染物質の分解を行なう請求項
    １３の環境修復方法。
15. 【請求項１５】 ＪＭ１を担持させた担体を有する容器
    の一端から該液体を該容器内に導入し、他端から該容器
    外へ排出する請求項１４の環境修復方法。
16. 【請求項１６】 該環境が土壌である請求項７の環境修
    復方法。
17. 【請求項１７】 ＪＭ１を含む液体を該土壌中に導入す
    る工程、および該有機酸を該土壌に導入する工程を有す
    る請求項１６の環境修復方法。
18. 【請求項１８】 該土壌中に酸素を導入する工程を有す
    る請求項１６の環境修復方法。
19. 【請求項１９】 該微生物の該土壌中への導入を、該土
    壌に設けた注入井から行なう請求項１６の環境修復方
    法。
20. 【請求項２０】 ＪＭ１を含むを含む液相中に該土壌を
    導入する請求項１６の環境修復方法。
21. 【請求項２１】 ＪＭ１を担持する担体と該土壌とを接
    触せしめる請求項１６の環境修復方法。