JPH02303426A - 細胞質雑種植物の作成方法 - Google Patents
細胞質雑種植物の作成方法Info
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- JPH02303426A JPH02303426A JP1123970A JP12397089A JPH02303426A JP H02303426 A JPH02303426 A JP H02303426A JP 1123970 A JP1123970 A JP 1123970A JP 12397089 A JP12397089 A JP 12397089A JP H02303426 A JPH02303426 A JP H02303426A
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Landscapes
- Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は、細胞融合方法により、直接ダイコン由来のサ
イトブラストからその細胞質遺伝子をナタネ等のブラシ
カ属植物由来のプロトプラストに導入し、細胞質Ｋｌｌ
を作成する方法に関するものである。
イトブラストからその細胞質遺伝子をナタネ等のブラシ
カ属植物由来のプロトプラストに導入し、細胞質Ｋｌｌ
を作成する方法に関するものである。
（従来の技術および発明が解決しようとする問題点）
細胞質にある核外遺伝子には細胞質雄性不稔（ＣｙＬｏ
ｐｌａｓｍｉｃ Ｍａｌｅ ５ｔｅｒｉｌｉｔｙ：以下
ＣＭＳと略す）などの有用遺伝子が存在することが知ら
れている。細胞質の有用形質を栽培品種に導入するため
には、戻し交配を用いる従来法のほかに、Ｘ線などによ
って核を不活化したプロトプラストを用いた非対称細胞
融合による細胞質２Ｉ種作成法などが行われている。ブ
ラシカ属植物でも非対称融合による細胞質雑種の作成が
報告されている［セオレティカルアンド アプライド
ノユネティクス（ＴＩ＋ｅｏｒ、ＡｐＨ，Ｇｅｎｅｊ、
入？ 、３−１８０’９−８１４（１９８７）； 第
１０回植物組織培豊シンボノウム講演要旨集第１６６項
（１９８７）１゜しかし、これらの報告の巾で、核を不
活化したにもかかわらず、染色体の脱落が完全ではない
ことが問題点としてあげられてきた。
ｐｌａｓｍｉｃ Ｍａｌｅ ５ｔｅｒｉｌｉｔｙ：以下
ＣＭＳと略す）などの有用遺伝子が存在することが知ら
れている。細胞質の有用形質を栽培品種に導入するため
には、戻し交配を用いる従来法のほかに、Ｘ線などによ
って核を不活化したプロトプラストを用いた非対称細胞
融合による細胞質２Ｉ種作成法などが行われている。ブ
ラシカ属植物でも非対称融合による細胞質雑種の作成が
報告されている［セオレティカルアンド アプライド
ノユネティクス（ＴＩ＋ｅｏｒ、ＡｐＨ，Ｇｅｎｅｊ、
入？ 、３−１８０’９−８１４（１９８７）； 第
１０回植物組織培豊シンボノウム講演要旨集第１６６項
（１９８７）１゜しかし、これらの報告の巾で、核を不
活化したにもかかわらず、染色体の脱落が完全ではない
ことが問題点としてあげられてきた。
近年プロトプラストを超遠心分離することにより細胞核
のみを脱落させた脱核細胞を作成する方法が提案されて
いる［フイノオロノ７ ブランタルム（Ｐ ｂｙｓｉｏ
ｌ、 Ｐ １ａｎｔ、 ）、５３．３８５−３９１（１
９８１）’］。
のみを脱落させた脱核細胞を作成する方法が提案されて
いる［フイノオロノ７ ブランタルム（Ｐ ｂｙｓｉｏ
ｌ、 Ｐ １ａｎｔ、 ）、５３．３８５−３９１（１
９８１）’］。
この脱核細胞はサイトブラストとよばれている。
サイトプラストを単離する方法にはタバコ及びトウモロ
コシの培！！細胞を用いて行った例がある。
コシの培！！細胞を用いて行った例がある。
しかし、サイトプラストを得るためには培！！細胞を用
いなければならないこと、あるいは再現性よく十分な量
のサイトプラストが得られないことなどの理由から、上
記方法はいまだ実用化には至っていない。
いなければならないこと、あるいは再現性よく十分な量
のサイトプラストが得られないことなどの理由から、上
記方法はいまだ実用化には至っていない。
又、サイトプラストは核を持ｒこないため、これを片親
にして細胞融合を行えば、Ｘ線処理などによる核の不活
化を行うことなくサイブリ７ドが得られると考えられる
が、サイトブラストを用いてサイプリッドを得たという
報告は、タバコで１例あるのみであり［モレキュラー
アンド フェネテル ノエネティクス（Ｍｏ１．Ｇｅｎ
、ＧｅｎｅＬ、）、１８５．２１１−２１５（１９８２
月、サイプリッドの作出は未だ困難であるというのが現
状である。
にして細胞融合を行えば、Ｘ線処理などによる核の不活
化を行うことなくサイブリ７ドが得られると考えられる
が、サイトブラストを用いてサイプリッドを得たという
報告は、タバコで１例あるのみであり［モレキュラー
アンド フェネテル ノエネティクス（Ｍｏ１．Ｇｅｎ
、ＧｅｎｅＬ、）、１８５．２１１−２１５（１９８２
月、サイプリッドの作出は未だ困難であるというのが現
状である。
（問題点を解決するための手段）
本発明者らの検討によれば、ダイコン下胚軸由米のプロ
トプラストをパーコールとマニトールを用いた不連続密
度勾配遠心にかけると、再現性よくサイトブラストを単
離することができ、これをヨード化合物処理したナタネ
のプロトプラストと融合させ、得られた融合細胞を培養
してコロニーを形成させ、更に不定芽を形成させること
により、容易に目的とするサイプリッドが得られること
が分かった。即ち、本発明の要１１は、ダイコン由来の
サイトプラストとヨード化合物処理したブラシカ属稙物
由米のプロトプラストとを融合させ、次いて・得られた
融合細胞を培養してコロニーを形成させ、該コロニーか
ら植物体を再生させることを特徴とする細胞質雑種植物
の製造方法に存ｒる。
トプラストをパーコールとマニトールを用いた不連続密
度勾配遠心にかけると、再現性よくサイトブラストを単
離することができ、これをヨード化合物処理したナタネ
のプロトプラストと融合させ、得られた融合細胞を培養
してコロニーを形成させ、更に不定芽を形成させること
により、容易に目的とするサイプリッドが得られること
が分かった。即ち、本発明の要１１は、ダイコン由来の
サイトプラストとヨード化合物処理したブラシカ属稙物
由米のプロトプラストとを融合させ、次いて・得られた
融合細胞を培養してコロニーを形成させ、該コロニーか
ら植物体を再生させることを特徴とする細胞質雑種植物
の製造方法に存ｒる。
以下、本発明の詳細な説明する。
本発明を使用するダイコンとしては、ＣＭ Ｓ系統など
があげられ、特にＬＩＫ−１及びフセナという２系統が
好適である。
があげられ、特にＬＩＫ−１及びフセナという２系統が
好適である。
また、ブラシカ属植物としては、春蒔ナタネ、秋蒔ナタ
ネ、キャベツ、ブロッコリー、カリフラワー及びハボタ
ン等の各栽培品種があげられる。
ネ、キャベツ、ブロッコリー、カリフラワー及びハボタ
ン等の各栽培品種があげられる。
先ず、サイトブラストの単離方法について述べる。
ダイコン下胚紬より、常法に従い酵素処理によってプロ
トプラストを単離し、それらをＷ５Ｑ［プラント セル
リボーツ（Ｐ １ａｎｔ Ｃｅ１ｌ Ｒｅｐ、）、鼾
、１９６−１９８（１９８４）１中に懸濁する。パーコ
ールとマニトールを混合した各々の比重の異なる３Ｎｉ
の溶液を重刑した不連続密度勾配を作成し、Ｗ５液中に
懸濁したプロトプラストを静かに釆せる。この３屑の溶
液のパーコール濃度は比重の重いものから順に５０％、
２０％、０％である。このチューブを８°Ｃ，４０００
０ｒ、ｐ、ｍ、の条件で超遠心分Ｕ磯を用いて３０分遠
心分離すると、プロトプラストは３屑の比重の異なる細
胞群に分かれる。この内、一番上層に位置する細胞群が
サイトブラストである。これらを細胞質供与体として細
胞融合に用いる。
トプラストを単離し、それらをＷ５Ｑ［プラント セル
リボーツ（Ｐ １ａｎｔ Ｃｅ１ｌ Ｒｅｐ、）、鼾
、１９６−１９８（１９８４）１中に懸濁する。パーコ
ールとマニトールを混合した各々の比重の異なる３Ｎｉ
の溶液を重刑した不連続密度勾配を作成し、Ｗ５液中に
懸濁したプロトプラストを静かに釆せる。この３屑の溶
液のパーコール濃度は比重の重いものから順に５０％、
２０％、０％である。このチューブを８°Ｃ，４０００
０ｒ、ｐ、ｍ、の条件で超遠心分Ｕ磯を用いて３０分遠
心分離すると、プロトプラストは３屑の比重の異なる細
胞群に分かれる。この内、一番上層に位置する細胞群が
サイトブラストである。これらを細胞質供与体として細
胞融合に用いる。
一方、細胞質受容体として用いるブラシカ属植物のプロ
トプラストは、常法に従って、植物体の一部を細分し、
セルラーゼやペクチナーゼ等の細胞壁分解酵素を含む酵
素液で２５−３０℃、５−２０時間処理して得られる。
トプラストは、常法に従って、植物体の一部を細分し、
セルラーゼやペクチナーゼ等の細胞壁分解酵素を含む酵
素液で２５−３０℃、５−２０時間処理して得られる。
得られたプロトプラストは、ヨードアセトアミド等のヨ
ード化合物２−４０論Ｍで４−３５°Ｃ１５−１０分間
処理し、プロトプラストが単独で分裂できないようにし
ておく。プロトプラストとサイトプラストを融合させる
溶液としては、４０％のポリエチレングリフール（以下
ＰＥＧと略す）を含むＷ５ｉ１ｉを用い、プロトプラス
トとサイトブラストを１：２のＭ Ａで１１７１合し、
室温で融合させる。
ード化合物２−４０論Ｍで４−３５°Ｃ１５−１０分間
処理し、プロトプラストが単独で分裂できないようにし
ておく。プロトプラストとサイトプラストを融合させる
溶液としては、４０％のポリエチレングリフール（以下
ＰＥＧと略す）を含むＷ５ｉ１ｉを用い、プロトプラス
トとサイトブラストを１：２のＭ Ａで１１７１合し、
室温で融合させる。
−１−述のように融か処理した細胞は、ＰＥＧを除去し
たのち、同じシャーレにＫ Ｍ液体培地［プランタ（Ｐ
ｌ ａｎ ｔａ ）、１、−（糺、１０５−１１０（
１９７５）１を加え、グリメリウスの方法［フイジオロ
ノアブランタルム（Ｐ ｈｙｓｉｏｌ、 Ｐ １ａｎｔ
、 ）、 Ｇ−ニー、３８−４４（１９８４）１に従っ
て培養し、不定芽を誘導する。
たのち、同じシャーレにＫ Ｍ液体培地［プランタ（Ｐ
ｌ ａｎ ｔａ ）、１、−（糺、１０５−１１０（
１９７５）１を加え、グリメリウスの方法［フイジオロ
ノアブランタルム（Ｐ ｈｙｓｉｏｌ、 Ｐ １ａｎｔ
、 ）、 Ｇ−ニー、３８−４４（１９８４）１に従っ
て培養し、不定芽を誘導する。
これらの不定芽を、常法に従って生育させ、バーミキュ
ライト上に移もへして発根させると、目的とする細胞質
雑種植物を得ることができる。
ライト上に移もへして発根させると、目的とする細胞質
雑種植物を得ることができる。
（実施例）
以下に、実施例を挙げて本発明の詳細な説明する。
１） ダイコンからのサイトブラストの８ダイコン（：
Ｉセナ）の下胚紬を発芽後５−７日口の植物より切り取
り、２％セルラーゼＲ８゜０．５％マセロザイムＲ−１
０、及び０．０５％ペクトリアーゼＹ−２３を含む０．
４Ｍサッカロース液中で細かく刻み、そのまま２５°Ｃ
で１６時間放置する。この酵Ｘ液から常法に従い、プロ
トプラストをｙ４製する。
Ｉセナ）の下胚紬を発芽後５−７日口の植物より切り取
り、２％セルラーゼＲ８゜０．５％マセロザイムＲ−１
０、及び０．０５％ペクトリアーゼＹ−２３を含む０．
４Ｍサッカロース液中で細かく刻み、そのまま２５°Ｃ
で１６時間放置する。この酵Ｘ液から常法に従い、プロ
トプラストをｙ４製する。
２） サイトブラストの調製
先ず、比重の異なる３ＮＩＭの溶液を調製する。
それらは、１）０．９Ｍマニトールと、パーコール（Ｐ
Ｉ＋ａｒ−ａｃｉａ社！りを１：１の割合で混合した
もの、２）Ｏ，（３Ｍマニトールとパーコールを４：１
の刻グローターＲＰＳ−５５Ｔ用の遠心チューブ内に、
下層より１）、２）、３）、の順に各１ 鴫１ずつ静か
に重層する。先に調製しておいたプロトプラストをＷ５
液中に１（１５個／値１の濃度になるように患濁し、そ
れを上記の遠心チューブの最上に静かにｍ屑後８℃、４
０００ （１ｒ、１＋、ｌｆｉ、の条件で３０分間遠心
分離する。
Ｉ＋ａｒ−ａｃｉａ社！りを１：１の割合で混合した
もの、２）Ｏ，（３Ｍマニトールとパーコールを４：１
の刻グローターＲＰＳ−５５Ｔ用の遠心チューブ内に、
下層より１）、２）、３）、の順に各１ 鴫１ずつ静か
に重層する。先に調製しておいたプロトプラストをＷ５
液中に１（１５個／値１の濃度になるように患濁し、そ
れを上記の遠心チューブの最上に静かにｍ屑後８℃、４
０００ （１ｒ、１＋、ｌｆｉ、の条件で３０分間遠心
分離する。
遠心分離後チューブを取り出すと、プロトプラストは３
層に分画されている。この３Ｒ７１のうち、最ｌユ層に
サイトブラスト画分が位置している。この最」；屑をパ
スツールピペットで静かに吸い取り、Ｗ５液に懸濁し、
８ ｔｌ （１ｒ、１＋、＋ａ９．５分の条件でサイト
ブラストを洗ったのち、直ちに融合操作に移す。このと
き、サイトブラストを艮時開（］０分以−Ｌ）放置して
おかないようにする。
層に分画されている。この３Ｒ７１のうち、最ｌユ層に
サイトブラスト画分が位置している。この最」；屑をパ
スツールピペットで静かに吸い取り、Ｗ５液に懸濁し、
８ ｔｌ （１ｒ、１＋、＋ａ９．５分の条件でサイト
ブラストを洗ったのち、直ちに融合操作に移す。このと
き、サイトブラストを艮時開（］０分以−Ｌ）放置して
おかないようにする。
３）葉肉プロトプラストの調製及びヨードアセトアミド
処理 伴蒔ナタネの無菌面から葉を取り、常法に従ってプロト
プラストを、１５Ｉ製する。葉肉プロトプラストは、Ｗ
５液に２Ｘ１０’個／鴫１の濃度で懸濁し、これに１０
０ｍＭのヨードアセトアミド液を最終濃度が５ｍＭにな
るように加え、室温で、１．０分間放置したのち、１３
０ Ｏｒ、１＋、＋ａ、で５分団遠心分離してプロトプ
ラストを婁め、そのｔｌＷ５液で２回洗ってヨードアセ
トアミド処理プロトプラストを得た。
処理 伴蒔ナタネの無菌面から葉を取り、常法に従ってプロト
プラストを、１５Ｉ製する。葉肉プロトプラストは、Ｗ
５液に２Ｘ１０’個／鴫１の濃度で懸濁し、これに１０
０ｍＭのヨードアセトアミド液を最終濃度が５ｍＭにな
るように加え、室温で、１．０分間放置したのち、１３
０ Ｏｒ、１＋、＋ａ、で５分団遠心分離してプロトプ
ラストを婁め、そのｔｌＷ５液で２回洗ってヨードアセ
トアミド処理プロトプラストを得た。
４）Ｊｌ胞融介
ヨードアセトアミド処理した葉肉プロトプラストと単離
したサイトブラストを１：２の割合で最終濃度２×１０
’個／ｍｌになるように混会し、その混合液を１００μ
］のドロップとして６ｃｍシャーレに３−４個のドロッ
プをおいた。これらのドロップ内で、２種の細胞が沈む
まで５分間放置した０次に、４０％のＰＥＧを含むＷ５
液５（１μｍを各ドロップに加え、５分放置した。その
後、ＰＥＧＩを吸い取り、１３％ＰＥＧを含むＷ５液を
５０μｍ加え、５分放置した。１３％ＰＥＧを吸い取り
、０．７％ＰＥＧを加え、５分放置した。
したサイトブラストを１：２の割合で最終濃度２×１０
’個／ｍｌになるように混会し、その混合液を１００μ
］のドロップとして６ｃｍシャーレに３−４個のドロッ
プをおいた。これらのドロップ内で、２種の細胞が沈む
まで５分間放置した０次に、４０％のＰＥＧを含むＷ５
液５（１μｍを各ドロップに加え、５分放置した。その
後、ＰＥＧＩを吸い取り、１３％ＰＥＧを含むＷ５液を
５０μｍ加え、５分放置した。１３％ＰＥＧを吸い取り
、０．７％ＰＥＧを加え、５分放置した。
６．７％ＰＥＧを吸い取り、０．４Ｍグルコース、２．
４−ノクロロフェノキシ酢酸（以下２．４−Ｄと略すＨ
ｕｇ／ｌ、ナフタレン酢酸（以下ＮＡＡと略す）０．１
−ｇ／Ｉ、ペンノル７ミノプリン（以下ＢＡＰと略す）
０．４Ｂ／ｌ を含むＫＭ液体培地をシャーレに加え、
２５−２７℃、１００−２００１ｕｘで培養を行った。
４−ノクロロフェノキシ酢酸（以下２．４−Ｄと略すＨ
ｕｇ／ｌ、ナフタレン酢酸（以下ＮＡＡと略す）０．１
−ｇ／Ｉ、ペンノル７ミノプリン（以下ＢＡＰと略す）
０．４Ｂ／ｌ を含むＫＭ液体培地をシャーレに加え、
２５−２７℃、１００−２００１ｕｘで培養を行った。
５）融合細胞の培養
４）の培１！液中で７日・＼・１０日間培養したのち、
０．１Ｍサッカロース、２．４ Ｄ１ｍｇ／ｌ、ＮＡ
Ａｏ、１１＋８／Ｉ、ＢＡＰｏ、４婦ｇ／ｌ を含む
ＫＭ液体培地を等量加えさらに培養を続けたところ、３
へ、 ４ Ｊ ＋１１１で０．５−リ】艙−のコロニー
が形成されたにのコロニーを０．２Ｍマンニトール、（
１層Ｍサッカロース、２．４−Ｄｉ 鱒ｇ／Ｉ 、Ｂ
Ａ、ＰＯ，１噛ｇ／ｌ、アガロース０．５％含むＭ Ｓ
ｎ正培地に移し、約１か月培養して２論論程度にまで
増殖させｔこにのカルスを０．２Ｍマンニトール、０．
０６Ｍサッカロース、インドール酢酸（以下ＩＡＡと略
す）０．１Ｂ／ｌ、ゼアチン２ｉＨ１／ｌ、硫酸アデニ
ン８０論！！／ｌ、カゼイン加水５り解物１００ＩＩｌ
ビ／１．０．６％アガａ−スを含むＭＳ修正培地に置床
し、不定芽形成を誘導した。カルスは約１か方接に０、
（１３Ｍす、カロース、１ＡＡ０．１−ｇ／ｌ、ゼアチ
ン２ｍＨ／ｌ、アガロース０．８％を含む培地（二稙え
継ぎ、不定芽誘導を促した。
０．１Ｍサッカロース、２．４ Ｄ１ｍｇ／ｌ、ＮＡ
Ａｏ、１１＋８／Ｉ、ＢＡＰｏ、４婦ｇ／ｌ を含む
ＫＭ液体培地を等量加えさらに培養を続けたところ、３
へ、 ４ Ｊ ＋１１１で０．５−リ】艙−のコロニー
が形成されたにのコロニーを０．２Ｍマンニトール、（
１層Ｍサッカロース、２．４−Ｄｉ 鱒ｇ／Ｉ 、Ｂ
Ａ、ＰＯ，１噛ｇ／ｌ、アガロース０．５％含むＭ Ｓ
ｎ正培地に移し、約１か月培養して２論論程度にまで
増殖させｔこにのカルスを０．２Ｍマンニトール、０．
０６Ｍサッカロース、インドール酢酸（以下ＩＡＡと略
す）０．１Ｂ／ｌ、ゼアチン２ｉＨ１／ｌ、硫酸アデニ
ン８０論！！／ｌ、カゼイン加水５り解物１００ＩＩｌ
ビ／１．０．６％アガａ−スを含むＭＳ修正培地に置床
し、不定芽形成を誘導した。カルスは約１か方接に０、
（１３Ｍす、カロース、１ＡＡ０．１−ｇ／ｌ、ゼアチ
ン２ｍＨ／ｌ、アガロース０．８％を含む培地（二稙え
継ぎ、不定芽誘導を促した。
得られた不定芽は０．１ｍｇ／Ｉ ＢＡＰ、０．１Ｍサ
ッカロース、０．８％７ガロースを含むＢ５培地でｌ＆
Ｈさせ、その後０，１１５ｇ／ｌ ＮＡＡ、０，１Ｍサ
ッカロース、０．８％ア〃ロースを含むＭＳ培地で発根
させた。植物体はバーミキュライトに移植し、さらに培
地に移して育てた。
ッカロース、０．８％７ガロースを含むＢ５培地でｌ＆
Ｈさせ、その後０，１１５ｇ／ｌ ＮＡＡ、０，１Ｍサ
ッカロース、０．８％ア〃ロースを含むＭＳ培地で発根
させた。植物体はバーミキュライトに移植し、さらに培
地に移して育てた。
得られた植物は染色体数が２ｎ＝３８（菜種型）を示し
、それらの５０％が０ＭＳ型のミトコンドリアＤＮＡを
持っていた。
、それらの５０％が０ＭＳ型のミトコンドリアＤＮＡを
持っていた。
（発明の効果）
本発明によれば、グイコンＣＭ Ｓ細胞質は戻し交配の
手法を経ることなく、短期間でブラシカ属植物に導入す
ることができる。
手法を経ることなく、短期間でブラシカ属植物に導入す
ることができる。
Claims (1)
- １）ダイコン由来のサイトプラストとヨード化合物処理
したブラシカ属植物由来のプロトプラストとを融合させ
、次いで得られた融合細胞を培養してコロニーを形成さ
せ、該コロニーから植物体を再生させることを特徴とす
る細胞質雑種植物の作成方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12397089A JP3149090B2 (ja) | 1989-05-17 | 1989-05-17 | 細胞質雑種植物の作成方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP12397089A JP3149090B2 (ja) | 1989-05-17 | 1989-05-17 | 細胞質雑種植物の作成方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH02303426A true JPH02303426A (ja) | 1990-12-17 |
| JP3149090B2 JP3149090B2 (ja) | 2001-03-26 |
Family
ID=14873822
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP12397089A Expired - Fee Related JP3149090B2 (ja) | 1989-05-17 | 1989-05-17 | 細胞質雑種植物の作成方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JP3149090B2 (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL9401153A (nl) * | 1993-07-14 | 1995-02-01 | Sakata Seed Corp | Werkwijze voor het kweken en het zich doen voortplanten van mannelijke steriele planten. |
| JPH0775558A (ja) * | 1993-09-08 | 1995-03-20 | Chikyu Kankyo Sangyo Gijutsu Kenkyu Kiko | 微細藻類のスクリーニング方法 |
| JP2003535578A (ja) * | 2000-03-22 | 2003-12-02 | アイコン・ジェネティクス，インコーポレイテッド | 植物プラスチドを形質転換する方法およびプラスチド転換植物を製造する方法 |
| US8058505B2 (en) | 2005-10-26 | 2011-11-15 | Sakata Seed Corporation | Cybrid plant of the genus Lactuca and method for producing the same |
| CN109370977A (zh) * | 2018-12-26 | 2019-02-22 | 青岛袁策集团有限公司 | 一种分离纯化水稻原生质体的方法 |
-
1989
- 1989-05-17 JP JP12397089A patent/JP3149090B2/ja not_active Expired - Fee Related
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| NL9401153A (nl) * | 1993-07-14 | 1995-02-01 | Sakata Seed Corp | Werkwijze voor het kweken en het zich doen voortplanten van mannelijke steriele planten. |
| JPH0775558A (ja) * | 1993-09-08 | 1995-03-20 | Chikyu Kankyo Sangyo Gijutsu Kenkyu Kiko | 微細藻類のスクリーニング方法 |
| JP2003535578A (ja) * | 2000-03-22 | 2003-12-02 | アイコン・ジェネティクス，インコーポレイテッド | 植物プラスチドを形質転換する方法およびプラスチド転換植物を製造する方法 |
| US8058505B2 (en) | 2005-10-26 | 2011-11-15 | Sakata Seed Corporation | Cybrid plant of the genus Lactuca and method for producing the same |
| EP2944692A1 (en) | 2005-10-26 | 2015-11-18 | Sakata Seed Corporation | Cybrid plant of the genus lactuca and method for producing the same |
| CN109370977A (zh) * | 2018-12-26 | 2019-02-22 | 青岛袁策集团有限公司 | 一种分离纯化水稻原生质体的方法 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| JP3149090B2 (ja) | 2001-03-26 |
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