JPH02207796A - 酵素を用いたガラクトオリゴ糖の製造法 - Google Patents
酵素を用いたガラクトオリゴ糖の製造法Info
- Publication number
- JPH02207796A JPH02207796A JP2808989A JP2808989A JPH02207796A JP H02207796 A JPH02207796 A JP H02207796A JP 2808989 A JP2808989 A JP 2808989A JP 2808989 A JP2808989 A JP 2808989A JP H02207796 A JPH02207796 A JP H02207796A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- galactooligosaccharide
- membrane
- liquid
- enzyme
- gal
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
- 235000021255 galacto-oligosaccharides Nutrition 0.000 title claims abstract description 19
- 150000003271 galactooligosaccharides Chemical class 0.000 title claims abstract description 19
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 title claims abstract description 16
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 title claims abstract description 16
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims description 4
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 4
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 claims abstract description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims abstract 7
- 239000012528 membrane Substances 0.000 abstract description 34
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 abstract description 10
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 abstract description 6
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 5
- 241001149409 Cystobasidium minutum Species 0.000 abstract description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 abstract description 4
- 238000006911 enzymatic reaction Methods 0.000 abstract description 3
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 3
- 239000002131 composite material Substances 0.000 abstract description 2
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 abstract description 2
- 239000012295 chemical reaction liquid Substances 0.000 abstract 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 abstract 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 abstract 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 9
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 description 8
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 6
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 6
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- XQMVBICWFFHDNN-UHFFFAOYSA-N 5-amino-4-chloro-2-phenylpyridazin-3-one;(2-ethoxy-3,3-dimethyl-2h-1-benzofuran-5-yl) methanesulfonate Chemical compound O=C1C(Cl)=C(N)C=NN1C1=CC=CC=C1.C1=C(OS(C)(=O)=O)C=C2C(C)(C)C(OCC)OC2=C1 XQMVBICWFFHDNN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000193752 Bacillus circulans Species 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000222051 Papiliotrema laurentii Species 0.000 description 3
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 3
- 241000186216 Corynebacterium Species 0.000 description 2
- 108010093096 Immobilized Enzymes Proteins 0.000 description 2
- 241001149698 Lipomyces Species 0.000 description 2
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 2
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 2
- 239000004695 Polyether sulfone Substances 0.000 description 2
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 2
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 2
- 239000000463 material Substances 0.000 description 2
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 2
- 229920002492 poly(sulfone) Polymers 0.000 description 2
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 2
- 229920006393 polyether sulfone Polymers 0.000 description 2
- -1 polypropylene Polymers 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 2
- PIPWSBOFSUJCCO-UHFFFAOYSA-N 2,2-dimethylpiperazine Chemical compound CC1(C)CNCCN1 PIPWSBOFSUJCCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JMHSCWJIDIKGNZ-UHFFFAOYSA-N 4-carbamoylbenzoic acid Chemical compound NC(=O)C1=CC=C(C(O)=O)C=C1 JMHSCWJIDIKGNZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 240000006439 Aspergillus oryzae Species 0.000 description 1
- 235000002247 Aspergillus oryzae Nutrition 0.000 description 1
- 241001136168 Clavibacter michiganensis Species 0.000 description 1
- 229920000219 Ethylene vinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 239000002033 PVDF binder Substances 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 239000004698 Polyethylene Substances 0.000 description 1
- 239000004743 Polypropylene Substances 0.000 description 1
- 239000004372 Polyvinyl alcohol Substances 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 241001236630 Sirobasidium magnum Species 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 229910021529 ammonia Inorganic materials 0.000 description 1
- 102000005936 beta-Galactosidase Human genes 0.000 description 1
- 108010005774 beta-Galactosidase Proteins 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 239000000919 ceramic Substances 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000017 hydrogel Substances 0.000 description 1
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 230000003647 oxidation Effects 0.000 description 1
- 238000007254 oxidation reaction Methods 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 229920000191 poly(N-vinyl pyrrolidone) Polymers 0.000 description 1
- 229920003229 poly(methyl methacrylate) Polymers 0.000 description 1
- 229920002239 polyacrylonitrile Polymers 0.000 description 1
- 239000004417 polycarbonate Substances 0.000 description 1
- 229920000515 polycarbonate Polymers 0.000 description 1
- 229920000573 polyethylene Polymers 0.000 description 1
- 239000005518 polymer electrolyte Substances 0.000 description 1
- 239000004926 polymethyl methacrylate Substances 0.000 description 1
- 229920000098 polyolefin Polymers 0.000 description 1
- 229920001155 polypropylene Polymers 0.000 description 1
- 229920002451 polyvinyl alcohol Polymers 0.000 description 1
- 229920002981 polyvinylidene fluoride Polymers 0.000 description 1
Abstract
(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。
め要約のデータは記録されません。
Description
【発明の詳細な説明】
（産業上の利用分野）
本発明は酵素を用いて一般式Ｇａｌ −（Ｇａｊ２）ｎ
Ｇｌｃ（但し式中Ｇａｌはガラクトース残基、Ｇｌｃは
ル はグレコース残基、ｎは１〜３の整数をそれぞれ表わす
）でしめされるガラクトオリゴ糖を生産する際に反応槽
で反応させたのち限外濾過膜で反応液をｔＰ遇し、外液
よりガラクトオリゴ糖を採取後さらに内液より酵素を回
収することを特徴とするガラクトオリゴ糖の製造法に関
する。
Ｇｌｃ（但し式中Ｇａｌはガラクトース残基、Ｇｌｃは
ル はグレコース残基、ｎは１〜３の整数をそれぞれ表わす
）でしめされるガラクトオリゴ糖を生産する際に反応槽
で反応させたのち限外濾過膜で反応液をｔＰ遇し、外液
よりガラクトオリゴ糖を採取後さらに内液より酵素を回
収することを特徴とするガラクトオリゴ糖の製造法に関
する。
（従来技術と問題点）
ガラクトオリゴ糖の製造方法としては、アスペルギルス
・オリゼエのβ−ガラクトシダーゼを用いる方法（特公
昭５８−２０２６６）、酵母クリプトコツカス・ローレ
ンティを用いる方法（特開昭６０２５１８９６）が知ら
れているがこれらの方法はいづれも蓄積が低かった。本
発明者らはこの欠点を解決する為鋭意検討した結果、ガ
ラクトオリゴ糖の高生産株として、ロドトルラ・ミヌタ
、ステリグマドマイセス・エリビアエ、シロバシディウ
ム・マグナムを見い出している（特願昭６３−１１８１
６０）。しかしながら更に効率よ（生産する為には、反
応工程の改善が必要である。例えば、微生物のブロスを
酵素源に用いた場合には酵素反応液を除菌する必要があ
り、その際に生成物のロスを生じるという問題がある。
・オリゼエのβ−ガラクトシダーゼを用いる方法（特公
昭５８−２０２６６）、酵母クリプトコツカス・ローレ
ンティを用いる方法（特開昭６０２５１８９６）が知ら
れているがこれらの方法はいづれも蓄積が低かった。本
発明者らはこの欠点を解決する為鋭意検討した結果、ガ
ラクトオリゴ糖の高生産株として、ロドトルラ・ミヌタ
、ステリグマドマイセス・エリビアエ、シロバシディウ
ム・マグナムを見い出している（特願昭６３−１１８１
６０）。しかしながら更に効率よ（生産する為には、反
応工程の改善が必要である。例えば、微生物のブロスを
酵素源に用いた場合には酵素反応液を除菌する必要があ
り、その際に生成物のロスを生じるという問題がある。
更に、ブロスは一般に有色であるから、生成物を脱色す
る工程が必要になり、またブロス由来のパイロジエン物
質の除去も必要となる。
る工程が必要になり、またブロス由来のパイロジエン物
質の除去も必要となる。
これらの課題を解決するために酵素を固定化して用いる
方法（特開昭６３−１８５３７３）も開発されてはいる
が、この固定化酵素法では酵素を担体に固定化する操作
が必要となり、その操作は煩雑であるという欠点を有す
る。
方法（特開昭６３−１８５３７３）も開発されてはいる
が、この固定化酵素法では酵素を担体に固定化する操作
が必要となり、その操作は煩雑であるという欠点を有す
る。
（問題点を解決するための手段）
本発明者らは上述の事情に鑑み鋭意検討を重ねた結果、
限外濾過膜を用いて反応液を濾過することによって外液
より高純度のガラクトオリゴ糖を容易に精製することが
でき、さらに内液より酵素を回収することによって効率
よくガラクトオリゴ糖を生産できることを見い出し本発
明を完成させるに至った。
限外濾過膜を用いて反応液を濾過することによって外液
より高純度のガラクトオリゴ糖を容易に精製することが
でき、さらに内液より酵素を回収することによって効率
よくガラクトオリゴ糖を生産できることを見い出し本発
明を完成させるに至った。
本発明において使用される酵素反応槽は限外濾過膜を付
設した槽と連結している酵素反応槽であれば形状、容量
は特に限定されず、どのようなものでもよい。
設した槽と連結している酵素反応槽であれば形状、容量
は特に限定されず、どのようなものでもよい。
本発明で使用される酵素は微生物の菌体をそのまま用い
てもよいし、アセトン処理、凍結乾燥等の処理をほどこ
したものでもよい。また使用される微生物はガラクトオ
リゴ糖を生産させるものであればいかなるものも用いる
ことができるが、例えばロドトルラ・ミヌタ（Ｒｈｏｄ
ｏｔｏｒｕｌａ ｍ１ｎｕｔａ）バシデイウム・マグナ
ム（Ｓｉｒｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｍｕｇｎｕｍ）ＣＢ
Ｓ ６８０３、クリプトコツカス・ローレンティ（Ｃｒ
ｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ Ｉａｕｒｅｎｔｉｉ） Ｉ
Ｆ ０６０９ ％ブレラ・シンギュラリス（Ｂｕｌｌｅ
ｒａ ｓｉｎｇｕｌａｒｉｓ） ＣＢ５５１０９、リポ
ミセス・リボノｙ −（Ｌｉｐｏｍｙｃｅｓｌｉｏｆｅ
ｒ） Ｉ Ｆ Ｏ６７３，バチラス・サーキュランス（
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｉｒｃｕｌａｎｓ） ＡＴＣＣ７
０４９、コリネバクテリウム・ミシガネンス（Ｃｏｒｙ
ｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｍｉｃｈｉｇａｎｅｎｓｅ）Ａ
ＴＣＣ４９２等がある。さらに、微生物の菌体を得るた
めには微生物が生育できる培するための原料を添加する
と酵素活性の強い菌体が得られる場合もある。
てもよいし、アセトン処理、凍結乾燥等の処理をほどこ
したものでもよい。また使用される微生物はガラクトオ
リゴ糖を生産させるものであればいかなるものも用いる
ことができるが、例えばロドトルラ・ミヌタ（Ｒｈｏｄ
ｏｔｏｒｕｌａ ｍ１ｎｕｔａ）バシデイウム・マグナ
ム（Ｓｉｒｏｂａｓｉｄｉｕｍ ｍｕｇｎｕｍ）ＣＢ
Ｓ ６８０３、クリプトコツカス・ローレンティ（Ｃｒ
ｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ Ｉａｕｒｅｎｔｉｉ） Ｉ
Ｆ ０６０９ ％ブレラ・シンギュラリス（Ｂｕｌｌｅ
ｒａ ｓｉｎｇｕｌａｒｉｓ） ＣＢ５５１０９、リポ
ミセス・リボノｙ −（Ｌｉｐｏｍｙｃｅｓｌｉｏｆｅ
ｒ） Ｉ Ｆ Ｏ６７３，バチラス・サーキュランス（
Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｉｒｃｕｌａｎｓ） ＡＴＣＣ７
０４９、コリネバクテリウム・ミシガネンス（Ｃｏｒｙ
ｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍｍｉｃｈｉｇａｎｅｎｓｅ）Ａ
ＴＣＣ４９２等がある。さらに、微生物の菌体を得るた
めには微生物が生育できる培するための原料を添加する
と酵素活性の強い菌体が得られる場合もある。
本発明に使用される限外濾過膜としてはガラクトオリゴ
糖は濾過され、酵素は濾過されない膜であればどのよう
な膜でも使用可能であるが、具体的に高分子電解質複合
体膜、セルロースアセテート膜、硝化セルロース膜、ポ
リスルホン膜、ナイロン膜、ポリーｔｒａｎｓ−２＋５
−ジメチルピペラジンテレフタル酸アミド膜、ポリオレ
フィンオキサイド膜、塩素化ポリアミド膜、ポリメチル
メタアクリレート膜、ポリウレタン−ポリＮ−ビニルピ
ロリドンブレンド架橋ハイドロゲル膜、シアノエチル化
ポリビニルアルコール膜、セラミック膜、ポリアクリル
ニトリル膜、ポリアミド膜、ポリカーボネ−）！、ポリ
プロピレン膜、エチレンビニルアルコール共重合体膜、
ポリエチレン膜、ポリエーテルスルホン膜、ポリフッ化
ビニリデン膜、等が挙げられる。
糖は濾過され、酵素は濾過されない膜であればどのよう
な膜でも使用可能であるが、具体的に高分子電解質複合
体膜、セルロースアセテート膜、硝化セルロース膜、ポ
リスルホン膜、ナイロン膜、ポリーｔｒａｎｓ−２＋５
−ジメチルピペラジンテレフタル酸アミド膜、ポリオレ
フィンオキサイド膜、塩素化ポリアミド膜、ポリメチル
メタアクリレート膜、ポリウレタン−ポリＮ−ビニルピ
ロリドンブレンド架橋ハイドロゲル膜、シアノエチル化
ポリビニルアルコール膜、セラミック膜、ポリアクリル
ニトリル膜、ポリアミド膜、ポリカーボネ−）！、ポリ
プロピレン膜、エチレンビニルアルコール共重合体膜、
ポリエチレン膜、ポリエーテルスルホン膜、ポリフッ化
ビニリデン膜、等が挙げられる。
以下、本発明を具体的に実施例にて説明するが、本発明
はこれら実施例のみに限定されるものではない。実施例
における乳糖及びガラクトオリゴ糖の定量は高速液体ク
ロマトグラフィー（ポンプは日立製作所製６５５型、検
出器は昭和電工５Ｅ５１カラムは５ｈｏｄｅｘ −５８
０１、溶媒は水）を用いピーク面積より求めた。
はこれら実施例のみに限定されるものではない。実施例
における乳糖及びガラクトオリゴ糖の定量は高速液体ク
ロマトグラフィー（ポンプは日立製作所製６５５型、検
出器は昭和電工５Ｅ５１カラムは５ｈｏｄｅｘ −５８
０１、溶媒は水）を用いピーク面積より求めた。
実施例１
ラクトース１．０ｇ／ｄ！、グリセロール２．０ ｇ
／〃、酵母エキス１．０ｇ／／ｊ、ポリペプトン１．０
ｇ／７、（Ｎ１３） ｔｓＯａ ０．５ ｇ ／ ｄ！
、ＫｔＨＰＯ４０，３ｇ ／ ｄ！、ＫＨｚＰＯ＊０．
１ ｇ ／ ４１ＸＭｇＳ（Ｉ４・ＩＨｔｏ ０．０５
ｇ ／ ｔＵを含むｐＨ７，０の培地２１を５１容の
発酵槽に入れこれにロドトルラ・ミヌタＩＦＯ８７９、
ステリグリ マトマイセス・エルビアエＦＥＲＭＰ〜１０００１、シ
ロバシディウム・マグナムＣＢ Ｓ ６８０３を各々接
種して通気量％ｖｖｍ 、攪拌５００ｒｐｍ３０℃で３
６時間好気的に培養した。培養液を遠心して菌体を得、
酵素源とした。次いで下記の工程を行なった。
／〃、酵母エキス１．０ｇ／／ｊ、ポリペプトン１．０
ｇ／７、（Ｎ１３） ｔｓＯａ ０．５ ｇ ／ ｄ！
、ＫｔＨＰＯ４０，３ｇ ／ ｄ！、ＫＨｚＰＯ＊０．
１ ｇ ／ ４１ＸＭｇＳ（Ｉ４・ＩＨｔｏ ０．０５
ｇ ／ ｔＵを含むｐＨ７，０の培地２１を５１容の
発酵槽に入れこれにロドトルラ・ミヌタＩＦＯ８７９、
ステリグリ マトマイセス・エルビアエＦＥＲＭＰ〜１０００１、シ
ロバシディウム・マグナムＣＢ Ｓ ６８０３を各々接
種して通気量％ｖｖｍ 、攪拌５００ｒｐｍ３０℃で３
６時間好気的に培養した。培養液を遠心して菌体を得、
酵素源とした。次いで下記の工程を行なった。
工程（１）：得られた菌体を３６ｇ／ｄｌの乳糖液（５
０ｍＭリン酸緩衝液中ρ１１６．０）２Ｊに懸濁し３０
℃で通気攪拌させながら反応させた。工程（２１： ３
日間反応させたのち、反応液を限外濾過膜ポリスルホン
膜（アミコン社製）で循環が過し、外液が１０００ｌｌ
ｌになるまでが過した。その後内液の液量を２１、乳糖
の濃度が３６ ｇ／ａ、 ｐＦＩが６．０になるように
調整した。この工程（２）の操作を４回くりかえした。
０ｍＭリン酸緩衝液中ρ１１６．０）２Ｊに懸濁し３０
℃で通気攪拌させながら反応させた。工程（２１： ３
日間反応させたのち、反応液を限外濾過膜ポリスルホン
膜（アミコン社製）で循環が過し、外液が１０００ｌｌ
ｌになるまでが過した。その後内液の液量を２１、乳糖
の濃度が３６ ｇ／ａ、 ｐＦＩが６．０になるように
調整した。この工程（２）の操作を４回くりかえした。
第１表にこの操作における外液中のガラクトオリゴ糖の
濃度を示した。
濃度を示した。
尚、限外が過は平均炉圧１ｋｇ／ｃｄ、温度３０℃で行
なった。
なった。
以下の実施例でも限外濾過時の平均が圧、温度は同じ条
件で行なった。
件で行なった。
第１表
実施例２
実施例１と同じ培地、発酵槽を用い、これにクリプトコ
ツカス・ローレンティＩ ＦＯ＠６０９ 、ブレラ・シ
ンギュラリスＣＢ ５５１０９、リポミセス・リポフ、
−ＩＦＯ６７３を接種し、通気量％ ｖｖｍ、攪拌５０
０ｒｐｍ、２５℃４８時間好気的に培養した。培養液を
遠心して菌体を得、酵素源とした。
ツカス・ローレンティＩ ＦＯ＠６０９ 、ブレラ・シ
ンギュラリスＣＢ ５５１０９、リポミセス・リポフ、
−ＩＦＯ６７３を接種し、通気量％ ｖｖｍ、攪拌５０
０ｒｐｍ、２５℃４８時間好気的に培養した。培養液を
遠心して菌体を得、酵素源とした。
次いで下記の工程を行った。工程（１）：得られた菌体
を１８ｇ／ｄ１の乳糖液（溶媒は水）２Ｎに懸濁し、３
０℃で通気、攪拌アンモニアでｐＦＩを５．０に制御し
つつ反応させた。工程（２１： ３日間反応させたのち
反応液を限外が過膜セルロースアセテート膜（旭メディ
カル社製）で循環が過し、外液が１０１００Ｏ！になる
までが過した。その後内液の液量を２ｚ、乳糖の濃度が
１８ｇ／ｄ！、ｐＨが５．０になるように調整した。こ
の工程（２）の操作を４回くりかえした。第２表にこの
操作における外液中のガラクトオリゴ糖の濃度を示した
。
を１８ｇ／ｄ１の乳糖液（溶媒は水）２Ｎに懸濁し、３
０℃で通気、攪拌アンモニアでｐＦＩを５．０に制御し
つつ反応させた。工程（２１： ３日間反応させたのち
反応液を限外が過膜セルロースアセテート膜（旭メディ
カル社製）で循環が過し、外液が１０１００Ｏ！になる
までが過した。その後内液の液量を２ｚ、乳糖の濃度が
１８ｇ／ｄ！、ｐＨが５．０になるように調整した。こ
の工程（２）の操作を４回くりかえした。第２表にこの
操作における外液中のガラクトオリゴ糖の濃度を示した
。
第 ２ 表
実施例３
ラクトース１．０ｇ／ｄ１、ペプトン１．０ｇ／ｄ！、
酵母エキス１．０ｇ／ａ、（ＮＨ４，）２５０．０．５
ｇ ／ｄ１、ＫｔＨＰＯ４０，３ｇ ／ｄ！、Ｋ）１
．ＰＯ，，０，１ｇ ／Ｊ、ＭｇＳＯ４・７ＨｚＯＯ，
０５ｇ ／ｄｉを含むｐ）１７．０の培地２７！を５１
容の発酵槽に入れ、これにバチラス・サーキュランス＾
ＴＣＣ７０４９、コリネバクテリウム・ミシガネンスＡ
ＴＣＣ４９２を各々接種し通気１ ’Ａ ｖｖｎ＋ 、
ｙ７１拌５００ｒｐｍ、３０℃１８時間好気的に培養
した。
酵母エキス１．０ｇ／ａ、（ＮＨ４，）２５０．０．５
ｇ ／ｄ１、ＫｔＨＰＯ４０，３ｇ ／ｄ！、Ｋ）１
．ＰＯ，，０，１ｇ ／Ｊ、ＭｇＳＯ４・７ＨｚＯＯ，
０５ｇ ／ｄｉを含むｐ）１７．０の培地２７！を５１
容の発酵槽に入れ、これにバチラス・サーキュランス＾
ＴＣＣ７０４９、コリネバクテリウム・ミシガネンスＡ
ＴＣＣ４９２を各々接種し通気１ ’Ａ ｖｖｎ＋ 、
ｙ７１拌５００ｒｐｍ、３０℃１８時間好気的に培養
した。
培養液を遠心して菌体を得、酵素源とした。次いで下記
の工程を行なった。工程（１）：得られた菌体を３０ｇ
／ｄ１の乳糖液（５０ｎ＋Ｎリン酸緩衝液ｐＨ６，０）
２Ｎに懸濁し、５０℃で反応させた。工程（２１： １
６時間反応させたのち反応液を限外濾過膜ポリエーテル
スルホン膜（ダイセル社製）で循環が過し外液が１００
０ｍ７！になるまで濾過した。その後内液の液量を２７
！、乳糖の濃度が３０ ｇ／ｄｉ、ｐＨが６．０になる
ように調製した。この工程（２）を４回（りかえした。
の工程を行なった。工程（１）：得られた菌体を３０ｇ
／ｄ１の乳糖液（５０ｎ＋Ｎリン酸緩衝液ｐＨ６，０）
２Ｎに懸濁し、５０℃で反応させた。工程（２１： １
６時間反応させたのち反応液を限外濾過膜ポリエーテル
スルホン膜（ダイセル社製）で循環が過し外液が１００
０ｍ７！になるまで濾過した。その後内液の液量を２７
！、乳糖の濃度が３０ ｇ／ｄｉ、ｐＨが６．０になる
ように調製した。この工程（２）を４回（りかえした。
第３表にこの操作における外液中のガラクトオリゴ塘の
濃度を示した。
濃度を示した。
第３表
Claims (1)
- 酵素を用いて一般式Ｇａｌ−（Ｇａｌ）＿ｎ−Ｇｌｃ（
但し式中Ｇａｌはガラクトース残基、Ｇｌｃはグレコー
ス残基、ｎは１〜３の整数をそれぞれ表わす）でしめさ
れるガラクトオリゴ糖を生産する際に反応槽で反応させ
たのち限外濾過膜で反応液を濾過し、外液よりガラクト
オリゴ糖を採取後さらに内液より酵素を回収することを
特徴とするガラクトオリゴ糖の製造法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2808989A JPH02207796A (ja) | 1989-02-07 | 1989-02-07 | 酵素を用いたガラクトオリゴ糖の製造法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2808989A JPH02207796A (ja) | 1989-02-07 | 1989-02-07 | 酵素を用いたガラクトオリゴ糖の製造法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH02207796A true JPH02207796A (ja) | 1990-08-17 |
Family
ID=12239055
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2808989A Pending JPH02207796A (ja) | 1989-02-07 | 1989-02-07 | 酵素を用いたガラクトオリゴ糖の製造法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH02207796A (ja) |
Cited By (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1086391C (zh) * | 1998-12-12 | 2002-06-19 | 中国科学院新疆化学研究所 | 低聚糖纯化方法 |
| WO2015175412A1 (en) * | 2014-05-12 | 2015-11-19 | Ritter Pharmaceuticals, Inc. | Methods and systems for galactooligosac-charides manufacture |
| US9775860B2 (en) | 2009-02-24 | 2017-10-03 | Ritter Pharmaceuticals, Inc. | Prebiotic formulations and methods of use |
| US11028422B2 (en) | 2009-08-07 | 2021-06-08 | Ritter Pharmaceuticals, Inc. | Process for the production of ultrapure galacto-oligosaccharides |
-
1989
- 1989-02-07 JP JP2808989A patent/JPH02207796A/ja active Pending
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN1086391C (zh) * | 1998-12-12 | 2002-06-19 | 中国科学院新疆化学研究所 | 低聚糖纯化方法 |
| US9775860B2 (en) | 2009-02-24 | 2017-10-03 | Ritter Pharmaceuticals, Inc. | Prebiotic formulations and methods of use |
| US9808481B2 (en) | 2009-02-24 | 2017-11-07 | Ritter Pharmaceuticals, Inc. | Prebiotic formulations and methods of use |
| US11028422B2 (en) | 2009-08-07 | 2021-06-08 | Ritter Pharmaceuticals, Inc. | Process for the production of ultrapure galacto-oligosaccharides |
| WO2015175412A1 (en) * | 2014-05-12 | 2015-11-19 | Ritter Pharmaceuticals, Inc. | Methods and systems for galactooligosac-charides manufacture |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5455244B2 (ja) | 遊離細胞によるガラクトオリゴ糖の製造方法 | |
| EP2039777A1 (en) | Method for purification of hyaluronic acid salt | |
| JP4554277B2 (ja) | 微生物によるコハク酸の製造方法 | |
| JP5130811B2 (ja) | 連続発酵による１，３−プロパンジオールの製造方法 | |
| JP2008104453A (ja) | 連続発酵によるカダベリンの製造方法 | |
| JPH02207796A (ja) | 酵素を用いたガラクトオリゴ糖の製造法 | |
| US5500352A (en) | Membrane filtration process for 6-aminopenicillanic acid | |
| JP3845912B2 (ja) | エリスリトールの製造方法 | |
| US4737461A (en) | Novel bacteriolytic enzyme and process for preparing the same | |
| JPH01247086A (ja) | エンドチア・パラシチカからプロテアーゼの製法 | |
| JP2516006B2 (ja) | 廃糖蜜の脱色方法 | |
| JP3759229B2 (ja) | ポリ−γ−グルタミン酸の単離法 | |
| Göklen et al. | Development of crossflow filtration processes for the commercial-scale isolation of a bacterial lipase | |
| DK144277B (da) | Femgangsmaade til fremstilling af 6-aminopenicillansyre | |
| JP2564147B2 (ja) | 高濃度菌体酢酸醗酵法 | |
| JPH0154999B2 (ja) | ||
| JPH11215980A (ja) | 菌体含有液の処理方法 | |
| GB2108128A (en) | Production of aspartase | |
| CN110923280A (zh) | 河豚毒素制备及其纯化方法 | |
| DE4127648C1 (ja) | ||
| JPH0272890A (ja) | ガラクトオリゴ糖の製造方法 | |
| Bhattacharyya et al. | Biocatalytic membrane reactor with continuous removal of organic acids by electrodialysis | |
| US3558432A (en) | Waxolytic enzyme preparation | |
| JPH0339092A (ja) | 微生物が生産する物質の製造法 | |
| JPH04108395A (ja) | ガラクトサミノオリゴ糖の製造方法 |