JPH02167091A - 麦角アルカロイドの分離精製法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の１ 本発明は、麦角菌クラビセブス・パスバリ（Ｃ１ａｖｉ
ｃｅｐｓ　ｐａｓｐａｌｉ＞の培養によって得られる発
酵液より麦角アルカロイドを分１ｌｉｌ精製する方法に
関するものである。

麦角アルカロイドは、医薬品として数々の薬効が知られ
ている有用な化合物である。

従」聾生栽」Ｌ クラビセブス・パスバリの発酵液は、主たる麦角アルカ
ロイド成分としてα−ヒドロキシエチルリゼルグ酸アミ
ドとリゼルグ酸アミドの８＝２混合物を含み、その他に
培地成分である糖類や有機酸のアンモニウム塩、金属イ
オンおよび代謝産物や死菌体の構成成分である蛋白質、
脂質、色素など多数の挟雑物を含有する水溶液である。

従来、麦角アルカロイドを分離する一最的方法としては
、クロロホルム、酢酸エチル、ｎ−ブタン−ルなどの有
機溶媒を用いて抽出する方法が採用されてきた。しかし
ながら、この方法は麦角アルカロイドの回収率を向上さ
せるために大量の溶媒を使用する必要があったり、また
発酵液中に含有される蛋白質、脂質、消泡剤などに起因
する乳化を起こし易いなどの問題点を含んでいる。

また、樹脂を用いる方法としては、特公昭４５１２３０
２号公報に強酸性カチオン型イオン交換崩脂を利用する
ことが記載されている。しかしイオン交換樹脂の場合、
樹脂の活性化や再生に特別な処理操作を必要とする上、
樹脂の膨潤や発熱など実用的には問題が多い、特開昭５
４−９０１９８号公報には、アルコール性水酸基などの
１換基を有する不溶性の重合体を用いた麦角アルカロイ
ドの分離ないし精製法が記載されている。しかしその内
容は、エルゴクリブチン、エルゴクリブチン、エルゴコ
ルニンなどのペプチド型麦角アルカロイド混合物を相互
に分離する方法に関するものである。

が　′　しようと　る課題 以上のように従来技術では、麦角アルカロイドを、それ
を含有する発酵液がち取り上げる技術として工業的実施
に満足できる方法は確立されていないのが現状である。

本発明は、ここに新たな麦角アルカロイドの分離精製法
を提供する。

題を　　　るｔ・めの すなわち本発明は、麦角菌クラビセブス・パスパリ（Ｃ
１ａｖｉｃｅｐｓ　ｐａｓｐａｌ　ｉ）の培養によって
得られる麦角アルカロイドを含有する発酵液を、スチレ
ン−ジビニルベンゼン共重合体およびフェノール系樹脂
から泗ばれる１種の多孔性高分子合成吸着剤と接触させ
麦角アルカロイドを吸着させた後、／８離剤により該ア
ルカロイドを溶出することを特徴とする麦角アルカロイ
ドの分Ｍ￥ｌＩ製法である。

クラビセプス・パスパリの産生ずる発酵液は、αヒドロ
キシエチルリゼルグ酸アミドやリゼルグ酸アミドなとの
アミド型麦角アルカロイドに富むもので、同じ麦角菌で
もクラビセブス・プルブレア（Ｃ１ａｖＬｃｅｐｓ　ｐ
ｕｒｕｐｕｒｅａ）の発酵液がペプチド型麦角アルカロ
イドを主成分とするものであるのに対して、それらの化
学構造、物理的および化学的性質は互いに異なっている
。

本発明で使用する高分子合成吸着剤は、ジビニルベンゼ
ン−スチレン共重合体およびフェノール系樹脂から選ば
れる一種が使用できる。これら高分子合成吸着剤は、分
子中に際立った官能基を有しないで、単にその分子の持
つファンデアワールスカによって化合物を吸着する。−
最に粒径は２５０〜８５０μｍ、孔径は約５０ＯＡ’、
さらに表面積は４００〜１０００　ｍ２７ｇのものが使
用される。たとえばスチレン−ジビニルベンゼン系共重
合体の場合、三菱化成工業−のセパビーズ５Ｐ２０７、
Ｓ　Ｐ　２０６．Ｓ　Ｐ　８００．５Ｐ９００、ローム
及バースト社のデュオライトＳ−８６６および５−８６
１などが挙げられる。またフェノール系樹脂の場合、デ
ュオライト５−７６１などが挙げられる。

高分子合成吸着剤は、バッチ処理で発酵液を処理するこ
とも出来るが、カラムに充填してそこに発酵液を通過さ
せる方法がより簡便で好ましい。

なお、樹脂の使用量は、麦角アルカロイドの吸着能６０
　Ｂ／ｍｌ−湿潤樹脂に基づいて任意に決定される。カ
ラムサイズは、とくに限定されないが、カラム長は管内
径の２〜５倍が好ましい。

本発明で使用される溶離剤は、アミド型麦角アルカロイ
ドの親水性ゆえに５〜８０重量％の水を含有する有機溶
剤が使用できる。有機溶剤としては、メタノール、エタ
ノール、ｎ−プロパツールイソプロパノールなどの水溶
性アルコール類、アセトンなどの水溶性ケトン類、テト
ラヒドロフラン、ジオキサンなどの水溶性エーテル類、
アセトニトリルなどの水溶性ニトリル類が使用され、単
−ｉ媒またはこれらの混合溶媒として用いることができ
る。また、これらの溶媒系にアンモニア水炭酸水素ナト
リウム水溶液などの弱アルカリ性成分やコハク酸、クエ
ン酸などの弱酸性成分を添加しても良い。

次に、本発明の一実施態様を凧を追って説明する。

クラビセブス・パスパリの発酵液は菌体を濾過後、その
ままでも本発明方法に適用できる。しがし、液のｐＨは
５．０〜５．５であるので、麦角アルカロイドの収率を
高めたい場合にはアンモニア水にてＰＨを７．０以上に
調整して行えば、はぼ定量的に麦角アルカロイドを回収
することができる。

高分子合成吸着剤はあらかじめカラムに充填しておき、
水洗する。高分子合成吸着剤を充填したカラムへの発酵
液の通過空間速度は、０．５〜２０ｈが適当である０発
酵液の通過終了後、今度は溶離液をカラムに通過させる
。溶離剤の使用量ならびに通過速度は溶媒の種類により
異なるが、はぼ樹脂体積の３〜６倍くらい使用すれば充
分である。

アルカロイドの溶出が終了したかどうかは薄層クロマト
グラフィー等によって判定できる。溶離液は減圧下に溶
媒を留去したのち、水を含む残渣を酢酸エチルなどの抽
出溶媒で抽出すれば、容易に高純度の麦角アルカロイド
を得ることができる。

溶出の終わった高分子合成吸着剤は樹脂体積の２倍量の
１規定水酸化ナトリウム水溶Ｈを含むインプロパツール
またはアセトンで洗浄後、更に充分に水洗することによ
って再生することができる。

以下、実施例により本発明をさらに具体的に説明する。

火１目」 実施例　１ 麦角菌クラビセプス・パスパリの発酵１５００１（麦角
アルカロイド含量１０４０膳ｇ、ｐＨ５，２）を高分子
合成吸着剤セパビーズ５Ｐ２０７　＜三菱化成工業■製
）２０１を充填したカラム（φ２０Ｘ６４ｍｍ）に５　
ｍｌ／ｍｉｎｇ）流速で通液した後、８０ｍ１の水で洗
浄し、ついで５０％メタノール水溶液８０ｍ１で溶離し
た。溶Ｍ液から減圧下にメタノールを留去し、残渣をア
ンモニア水でｐＨ９に調整したのち酢酸エチルで抽出し
、酢酸エチルを除去して乾燥すると純度９２％の麦角ア
ルカロイド７６８　ｍｇ　（収率６８％）を得た。

実施例　２ 実施例１と同様の発酵液１５００ｍｌ（麦角アルカロイ
ド含１１２４８ｍｇ）を濃アンモニア水でｐＨ９とした
のち、セパビーズ５Ｐ２０７の２０ｍ１のカラム（φ２
０Ｘ６４ｔ＋＋＋）に５　ｍｌ／ｗｉｎの流速で通液し
た。これを８０１の水で洗浄し、ついで８５％インプロ
パツール水溶液８０１で溶離した。

実施例１と同様に処理し、純度９４％の麦角アルカロイ
ド１３１４ａ＋ｇ（収率９９％〉を得た。

実施例　３ 実施例１と同様の発酵液１００１００Ｏ麦角アルカロイ
ド含量ｓ３２ｒｓｇ）を濃アンモニア水でｐＨ９に調整
したのち、デュオライトＳ−８６１（ローム及バースト
社製）２０１のカラム（φ２０×６４ｍｍ）に５　ｍｌ
／ｗｉｎの流速で通液し、８０１の水で洗浄した後、５
０％のアセトン水溶Ｍ８０ｍｌで溶離した。実施例１と
同様に処理し、純度９０％の麦角アルカロイド９１５［
（収率９９％）を得た。

実施例　４ 実施例１と同様の発酵液１００１００Ｏ麦角アルカロイ
ド含量８３２ｍｇ＞を濃アンモニア水でＰＨ９に調整し
たのち、デュオライト５−７６１の２０［＋１１のカラ
ム（φ２０Ｘ６４［１１）に５１７ｗ１ｎの流速で３１
１液し、８０１の水で洗浄した後、５０％のアセトン水
溶液８０１で溶離した。実施例１と同様に処理し純度９
２％の麦角アルカロイド８５９ｍｇ（収率９５％）を得
た。

灸１Ｂ矢力」し 本発明により簡単な操作で麦角アルカロイドを含有する
発酵液より高純度の麦角アルカロイドを高収率で得るこ
とが可能になった。

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. １、麦角菌クラビセプス・パスパリ（Ｃｌａｖｉｃｅｐ
   ｓ　ｐａｓｐａｌｉ）の培養によって得られる麦角アル
   カロイドを含有する発酵液を、スチレン−ジビニルベン
   ゼン共重合体およびフェノール系樹脂から選ばれる１種
   の多孔性高分子合成吸着剤と接触させ麦角アルカロイド
   を吸着させた後、溶離剤により該アルカロイドを溶出す
   ることを特徴とする麦角アルカロイドの分離精製法。