JPH02138188A - セファロスポリン誘導体の製造法 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〈産業上の利用分野〉 本発明は、式（Ｉ） ［式中、Ｒ１は−ＣＯＯＨ，−ＣＯＯＭ　　（式中、Ｍ
はアルカリ金属又はアルカリ土類金属を示す。）　、−
ｃｏｏ　Ｏ又は−ＣＯＯＲ２（式中、Ｒ２はカルボキシ
ル基の保護基を示す。）を、ＸＯは無機酸又は有機酸を
形成する陰イオンを示す。但し、Ｒ８が−ｃｏｏ　Ｏを
示す場合にはＸＯは必ずしも必要としない。コで示され
る化合物に、ペニシリンＧアミダーゼ又は該酵素を含有
する組成物を反応させることを特徴とすに （式中、Ｒ１及び×−は前記に同じ）で示される化合物
の製造法に関する。

式（１１）の化合物は優れた抗菌活性を有する式（ＩＩ
Ｉ　’） で示される化合物（特開昭６１−７２８０号公報参照）
の製造中間体として重要なものである。

〈従来の技術〉 式（ＩＩ）の化合物の製造法としては特開昭６２＝１４
５０９０号公報に開示されたものが知られている。

該製造法は反応の操作及び反応後の後処理の点で工業的
製造法としては不充分なものであった。

〈発明が解決しようとする問題点〉 本発明者等は上記問題点を解決すべく鋭意検討した結果
本発明を完成した。

〈発明の構成〉 本発明は式ＣＩ）の化合物にペニシリンＧアミダーゼ又
は該酵素を含有する組成物を反応させることを特徴とす
る式（ＩＩ）の化合物の製造法に関する。

式（Ｉ）において、アルカリ金属としてはナトリウム、
カリウム、リチウム等を、アルカリ土類金属としては、
カルシウム、マグナシラム等をあげることができる。カ
ルボキシル基の保護基としては、メチル、エチル、プロ
ピル、第三級ブチル、２，２，２．−　トリクロロエチ
ル、バレリルオキシメチル、ピバロイルオキシメチル、
ジフェニルメチルの如き置換基を有することもある低級
アルキル基、Ｐ−メトキシベンジル、Ｐ−ニトロベンジ
ルの如き置換基を有するベンジル基、トリメチルシリル
、ｔ−ブチルジメチルシリルの如き置換基を有するシリ
ル基等をあげることができる。

無機酸を形成する陰イオンとしては、塩素、臭素、ヨウ
素などのハロゲンの陰イオン、硫酸イオン、リン酸イオ
ン、過塩素酸イオン、ホウフッ化水素酸イオン等をあげ
ることができる。また有機酸を形成する陰イオンとして
は、トリフルオロ酢酸などの有機カルボン酸のカルボキ
シレートイオンをあげることができる。

ペニシリンＧアミダーゼ活性を有する組成物とは該酵素
を産生する微生物の菌体、培養物もしくはこれらのもの
をアルカリ処理、破砕、ゲル濾過、限外濾過、樹脂処理
、硫安の如き塩による塩析等の通常の分画手段、好まし
くはアルカリ処理で分画したものを意味し、これらの組
成物が前記酵素を含有するか否かは該酵素の活性を例え
ばＢｉｏｃｈｉｍ、ｌ１ｉｏｐｈｙｓ、Ａｃｔａ、、　
２７６、２５０．　（１９７２年）に記載された方法に
より測定、確認すればよい。ペニシリンＧアミダーゼに
ついては、酵素製剤として市販されており、その例とし
てはキャリアフィックストペニシリンＧアミダーゼ（ベ
ーリンガーマンハイム社製）等が知られている。一般に
は簡便性という点から該市販の酵素製剤を使用すること
が好ましい。又、該酵素を産生する微生物としては、Ｅ
ｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ（ＡＴＣｆｌニー９３
５７．ＡＴ（：Ｃ−１１１０５゜ＮＣＩＢ−８７４３，
ＢＲＬ−３５１）の如きＥｓｃｈｅｒｉ−ｃｈｉａ属、
Ｂａ−ｃｉｌｌｕｓ　ｍｅｇａｔｅｒｉｕｍ　　（ＡＴ
ＣＣ−１４９４５，Ｂ−４００）の如きＢａｃｉｌｌｕ
ｓ属、Ａｌｃａｌｉｇｅｎ＋ｅｓ　ｆａｅｃａｌｉｓ　
（ＭＢ−１０）の如き　Ａｌｃａｌｉｇｅｍｅｓ属、Ａ
ｒｔｈｒｏｂａｃｔｏｒ　ｖｉｓｃｏｓｕｓ（ＡＴＣＣ
−１５２９４）　　の如きＡｒｔｈｒｏｂａｃｔｏｒ属
、Ｎｏｃａｒｄｉａ　５ｐ（ＡＴＣ［ニー１３６５５．
ＦＤ−４６９７３）の如きＮｏｃａｒｄｉａ属、Ｓｔｒ
ｅｐ−ｔｏｍｙｃｅｓ　ａｍｂｏｆａｃｉｅｎｓ（ＳＰ
ＳＬ−１５）の如きＳ　ｔｒｅｐ　ｔｏｍｙ−ＣｅＳ　
　属、　に１ｕｙｖｅｒａ　　ｃｉｔｒｏｐｈｉｌａ（
にＹ−７８４４，ＫＹ−’３６４１、ＡＴＣＣ−２１２
８５）の如きＫｌｕｙｖｅｒａ属に属するものをあげる
ことができる。

次に、本発明の製造法を具体的に説明する。

まず式（Ｉ）の化合物を水、メタノール、エタノール、
アセトニトリルの如き有機溶媒と水の混液等の適当な溶
媒に、好ましくは水に溶解し、次いでペニシリンＧアミ
ダーゼ又は該酵素を含有する組成物を加え静かに攪拌す
ればよい。反応は通常５〜３５℃、ｐＨ７〜９で３０分
〜１４時間程度行われる。前記溶媒は式（ＩＩ）の化合
物に対し２０倍〜２００倍重量部使用される。ペニシリ
ンＧアミダーゼ又は該酵素を含有する組成物の使用量は
特に限定されず、ペニシリンＧアミダーゼを式（Ｉ）の
化合物に対し例えば５倍重量部用いた場合には３０分程
度の反応時間で充分な効果が得ることができ、前記酵素
を５倍重量部よりも少なく使用した場合には３０分より
も長時間反応させれば前記と同等の効果を期待すること
ができる。

反応終了後、反応液を濾過、減圧濃縮、カラムクロマト
グラフィー、晶析等の通常の精製手段を用いることによ
り、式（Ｉりの化合物を単離することができる。

得られた式（ＩＩ　）の化合物は特開昭６２−１４５０
９０号、　６２−１４５０９１号及び８３−４４５８２
号公報に示される製造法を適宜用いることにより式（Ｉ
Ｈ）の化合物に導くことができる。

〈発明の効果〉 本発明の製造法は、温和な条件下で有機溶媒を使用する
ことなく、後処理も極めて容易に目的の式（ＩＩ）の化
合物を高純度に製造することができる。従って、本発明
の製造法は式（１１）の化合物の工業的製造法として優
れたものである。

以下、本発明を更に参考例及び実施例により説明するが
、本発明はこれにより限定されるものではない。

参考例１ 酵母エキスｌ零、ペプトン１宝、肉エキスＯ，Ｓ机　グ
ルタミン酸ナトリウム０，５机食塩ａ、２食を含有する
培地（ｐＨ７，３）５ｆｌにに１ｕｙｖｅｒａ　ｃｉｔ
ｒｏｐｈｉｌａ（ＡＴＣＣ−２１２３５）ノ菌体懸濁液
約１００ｍｆｔを接種し、３０ｔで３日間培養した。更
に、遠心分離により菌体を得た。この様にして得られた
菌体に、文献記載の方法に従い（Ａ３ｒ、Ｂｉｏｌ、Ｃ
ｈｅＩｏ、、、ＩＪ−，１７０１（１９７２）　）アル
カリ処理を行った。即ち、菌体約１０ｇを水２００ｍｆ
ｌに懸濁し、希アンモニア水でｐＨ９に調製しながら４
０℃で４時間加温した。更に、遠心分離、生理食塩水で
洗浄することによりペニシリンＧアミダーゼ活性を有す
るアルカリ処理菌体を得た。

参考例２ ７−β−フェニルアセトアミド−３−（４−（オキサゾ
ール−５−イル）−１−ピリジニオコメチル−３−セフ
ェム−４−カルボンＱＳｔｐ−メトキシベンジルエステ
ルヨウ化物３．６ｇに、水冷下トリフロロ酢酸２ｏ［Ｉ
Ｉｆｌを加え０〜５℃で９０分間攪拌した。ＨＰＬＣで
反応の終了を確認後、反応液を冷イソプロピルエーテル
２００ｍｎ中に滴下し析出結晶を濾取した。エーテル、
塩化メチレンの順に洗浄乾燥し、標記化合物２．２ｇを
得た。

Ｂｒ ＩＲｖ　　　ｃｌ’：１８００（β−ラクタム）ｍａ× ＦＴ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄａ−Ｄ２０中のδ値ｐｐｍ
）３．１０，３．５２（２Ｈ，ＡＢｑ、Ｊ＝１８）１ｚ
）３．４９　（２）１．ｓ） ４．９５〜５．７９（４Ｈ，ｍ） ７．１０〜７．４２（５Ｈ，＋ｎ） ８．４３（２Ｈ，ｄ、Ｊ−７Ｈｚ） ８．４７（ＩＨ，ｓ） ８．８７（１８，ｓ） ９．５０（２）１．ｄ、Ｊ−７Ｈｚ） ７−β−フニニルアセトアミドー３−［４−（オキサゾ
ール−５−イル）−１−ピリジニオコメチル−３−セフ
ェム−４−カルボキシレート１．００ｇを水１００ｍｆ
Ｌに溶解し０．５Ｎ水酸化ナトリウム溶液でｐＨ７に調
整した。この基質７夜にキャリアフィックストペニシリ
ンＧアミダーゼ（キャリア：ポリアクリルアミド、ベー
リンガーマンハイム社製）５ｇを水に膨潤させたものを
加え、溶を夜のｐｎをｐ）ｌ自動コントローラーを用い
て、　ｐＨ７に保ちながら３０℃で３０分間攪拌した。

ＨＰＬＣで原料の消失を確認後、固定化酵素を濾過して
濾液を減圧濃縮した。

残漬を、水４ｍｌ１に溶解後、４２＊ホウフッ化水素酸
１ｍｊ！、イソプロピルアルコール５０ｍ１を加え析出
する結晶を濾取乾燥し目的物である、７−β−アミノ−
３−（４−（オキサゾール−５−イル）−１−ピリジニ
オコメチル−３−セフェム−４−カルボキシレートホウ
フッ化水素酸塩６４０ｍｇを得た。

ＦＴ−ＮＭＲ（ＤｌｉｌＳＯ−ｄａ−ＤｚＯ中のδ値ｐ
ｐｍ）３．３４．３．７３（２Ｈ，ＡＢｑ、Ｊ＝１８Ｈ
２）５．２５（ＩＨ，ｄ、Ｊ−６Ｈｚ） ５、：１６（ＩＨ，ｄ、　　Ｊ−５Ｈ２）５．３０，５
．５９（２Ｈ，ｄ、Ｊ・１４Ｈｚ）８．１９（ＩＨ，ｓ
） ８．２９（２）１．ｄ、Ｊ−７Ｈｚ） ８．５３（ＩＨ，ｓ） ８．９４（２Ｈ，ｄ、Ｊ−７Ｈｚ） 元素分析　［＋５ＨｚＮ４０４・５−ＨＢＦ４・２Ｈ２
０理論値　Ｃ３９，８５，Ｈ３，９７，Ｎ１１．６２分
析値　Ｃ３９，８８，Ｈ４，００，Ｎ１１．３９７−β
−フェニルアセトアミド−３−［４−（オキサゾール−
５−イル）−１−ピリジニオコメチル−３−セフェム−
４−カルボン酸ｐ−メトキシベンジルエステルヨウ化物
　１．ｏｏｇを　２銚アセトニトリル１００ｍｆｔに溶
解し０．５Ｎ水酸化ナトリウム溶液でｐＨ７に調整した
。この基買液にキャリアフィックストペニシリンＧアミ
ダーゼ（キャリア：ポリアクリルアミド、ベーリンガー
マンハイム社製）５ｇを水に膨潤させたものを加え、溶
液のｐ）ＩをｐＨ自動コントローラーを用いて、　ｐＨ
７に保ちながら５℃で１２時間攪拌した。　ＨＰＬＣで
原料の消失を確認後実施例１と同様の操作を行ない、標
記化合物５９０ｍｇを得た。

ＦＴ−ＮＭＲ（ＤＭＳＯ−ｄａ−０２０中のδ値ｐｐｍ
）３．５９．３．９８　（各ＩＨ，各ｄ、　Ｊ−１９Ｈ
ｚ）３．６０（３Ｎ、ｓ） ５．１７〜５．７９（６Ｈ，ｍ） ６．７３．７．１８　（各２１（、各ｄ、　Ｊ−９）１
ｚ）７．９９（２８，ｄ、Ｊ−７Ｈｚ） ８．１５（ＩＨ，ｓ） ８．５７（２Ｈ，ｄ、Ｊ−７）ＩＺ） ８．５９（ＩＨ，ｓ） 実施例３ ７−β−アミノ−３−［４−（オキサゾール−５−イル
）−１−ピリジニオコメチル−３−セフェム−４−カル
ボキシレート塩酸塩 参考例１で得たアルカリ処理菌体約５ｇ（湿体）を０．
ＩＮリン酸塩１！街液（ｐＨ７）に懸濁し、次いで７−
β−フェニルアセトアミド−３−（４−（オキサゾール
−５−イル）−１−ピリジニオコメチル−３−セフェム
−４−カルボキシレート５００ｍｇを加え３０℃で１時
間攪拌した。ＨＰＬＣで反応の終了を確認後閑体をセラ
イト濾過により除いた。濾液を吸着カラム（セパビーズ
５Ｐ−２０７、三菱化成工業社製）に通し水洗後２繋メ
タノールで目的物を溶出させた。溶出液を集めＩＮ塩酸
で酸性とした後濃縮し、標記化合物３００ｍｇを得た。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 式（ I ） ▲数式、化学式、表等があります▼（ I ） ［式中、Ｒ＿１は−ＣＯＯＨ、−ＣＯＯＭ（式中、Ｍは
   アルカリ金属又はアルカリ土類金属を示す。）、−ＣＯ
   Ｏ＾■又は−ＣＯＯＲ＿２（式中、Ｒ＿２はカルボキシ
   ル基の保護基を示す。）を、Ｘ＾■は無機酸又は有機酸
   を形成する陰イオンを示す。但し、Ｒ＿１が−ＣＯＯ＾
   ■を示す場合にはＸ＾■は必ずしも必要としない。］で
   示される化合物に、ペニシリンＧアミダーゼ又は該酵素
   を含有する組成物を反応させることを特徴とする式（I
   I） ▲数式、化学式、表等があります▼（II） （式中、Ｒ＿１及びＸ＾■は前記に同じ）で示される化
   合物の製造法