JPH02117687A - 甘草由来細胞賦活作用剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】

［ｆ＾明の目的） 本発明は、新規な細胞賦活物質（因子）の量定に関する
。そして、具体的には、マメ科植物（ＬｅｇｕｍｉｎＯ
ｓａｅ）の甘草（ＧｌｙＣｙｒｒｈｉｚａｅ　　Ｒａｄ
ｉｘ）から抽出された水溶性物質の、細胞主管率とコロ
ニー形成率促進作用を有することを特徴とする、細胞賦
活物質に関する。 「産業上の利用分野」 本発明による細胞賦活物質は、例えば、細胞組織培養、
医葵品、医薬部外品、化粧品（人及びその他の動物用を
含む）などに利用出来る。 「従来の技術Ｊ 甘草は、古くから医薬品あるいは１食品分野に用いられ
、抗炎症作用、抗アレルギー作用、抗潰瘍作用が知られ
ている。又、その抽出物としては、グリチルリチン、及
びそのサボゲニンであるグリチルリチン酸には、抗炎症
、抗アレルギー作用があることが知られている。一方、
甘草は消化性？ｒｔ癲に用いられてきたが、その有効物
質については、今だ確定されていない（高木敗次部ら　
川漠薬物学　ｐ７３、南山堂刊　１９８２年）。 「発明が解決しようとする課題」 本発明者らの課題は、各種植物中から、細胞賦活能を有
する物質（因子）の新規な開発にある。 本発明者らは、この目的のために、そのスクリニングを
続ける過程で、甘草からクリチルリチン、グリチルリチ
ン酸を含まない抽出物を得て、これに強い細胞賦活作用
を有することを見い出すに至った。さらに、これをもと
に、その細胞賦活物質の特定のために鋭意研究を続けて
きたが、その結果、以下に開示するごとく、理化学的デ
ーター及び、生物学的データーをもって２本発明を成功
（完成）するに至った。

【発明の構成】

本発明は、マメ科植物の甘草中に存在する。 水溶性物質であって、その主成分は１分子量が１３００
付近にあり、ペーパークロマトグラムによるＲｆ値が、
０．８０〜０８５にあるものをもって特定され、さらに
、水及び８０％エタノールに可溶、且つ無水エタノール
、ｎ−ブタノール、酢酸エチル、クロロホルム、石油エ
ーテ／ｌ／、エーテルに不溶であり、又、モーリッジ上
反応、ニンヒドリン反応が陽性であることをもって特定
される。 ［課題を解決するための手段Ｊ ［Ａｌ　Ｉｕ造法（抽出のための手段）本発明による細
胞賦活物質は、マメ科植物の甘草を出発原料となし、抽
出、精製することによって製造出来るが、その際の出発
原料は、組織培養法によって、得られた甘草を用いるこ
とも出来る。 製造法は１次のどと（である。 甘草（乾燥物）　１部　当り、５〜１０部の水を減圧下
において、１０分の１〜２０分のｌになるまで濃縮を行
い、その濃縮液に対して、エタノールの濃度が５０％に
なるように添加後、遠心分離し、その上清液を分取する
。 この上清液な、セフ７デソクスＧ−２５メデイウムを充
填したカラム（２５Ｘ６０ｃｍｌによって、ゲル濾過を
行い、Ｋ　ａ　ｖ　ｌａで０．４〜０１６５に流出する
　フラクションを得る（第１図）。 さらに、これを凍結乾燥して１本発明による細胞賦活物
質を得る。上記方法によって得られた、その収量は、約
ｌｏｇである。 ＦＢＩ理化学的特性に関するデーター （ａ）分子量測定結果 本発明による細胞賦活物質の分子量は、以下の試験法を
もって推定するとき、１３００前後であることが確認さ
れた　（第２図）。 （測定法の概要） ポリエチレングリコールｔ　ｏｏｏ及び４０００を簿準
品として、セファデックスＧ−２５フアイン（ファルマ
シア社製）で分画して、分子量を推定する。 ｆｂｌペーパークロマトグラムによる測定結果展開溶媒
として、エタノール・水温？ｌｌ１ｌｌ・１）を使用し
た場合　クロマトグラム上のＲｆ値は、０８０〜０８５
にあることが確認された。 尚、アニリン−フタシー１−法によって淡赤色に呈色す
る。 （ｃ）ｆｆｉ奴に対するｌ容解性試験結果水及び８０％
エタノールには易溶であり、無水エタノール、ｎ−ブタ
ノール、酢酸エチル、クロロホルム、石油エーテル、エ
ーテルに不溶である。 （ｄ）その他の反応試験結果 ■モーリッジ１反応：水に溶解した液に、１５％ａ５％
ミーナフトールし、硫酸を加える時２赤紫色を呈する。 ■ニンヒドリン反応：水に溶解した液喀こ、ニンヒドリ
ン試液を加え、水浴中で３分間加熱する時、青紫色を呈
する。 ［Ｃ］　！明の効果 （１１細胞生ｌｔ率の促進作用 モルモットの初代線維芽細胞、さらにマウスの初代腹腔
マクロファージは、無血清のＭＥＭ中では、培養器に生
着せず死滅する。 これに対して１本物質は、無血清の培地において、細胞
の生青竹（率）を促進し、死滅することを防止すること
が確認出来る。 したがって１本物質を添加することにより、細胞が生着
し、１Ｊ！！間以上生存させることがわかった。 （２）コロニー形成からみた促進作用 モルモットの初代培養線維芽細胞を用いて、コロニー形
成能（率）を求めてみると形成が良好である。 この促進作用は、線維芽細胞に限らず、上皮細胞等にお
いても、同様に確認された。 第１表（次表）は、１０〜１０００個のモルモットの初
代培ＩＩ線維芽細胞を、直径６．０ｃｍのペトリ皿（培
養液：　ＭＥＭ＋５％ＦＢＳ　（牛胎児血清））に播種
し、２週間後のコロニー数を測定した成績結果である。 「第１表」コロニ 形成（率）促進作用 以上、本発明による甘草から得られた水溶性物質は、細
胞賦活作用に優れた効果を有するものである。 よって、例えば、組織培養における利用、あるいは医薬
品、化粧品等においては、潰瘍部あるいは外傷部の再生
治懇の促進剤、あるいは細胞賦活剤として用いることが
可能であると共に、ざらに甘草の有効利用に当っては、
そのほとんどが、クリチルリチンやグリチルリチン酸と
して利用され、又、その抽出エキスとしても、従来は、
その主役成分として、これらの成分を主体とした定潰を
もとにしたエキスが、医薬品、化粧品、健ｆ、社食品、
その他の食品に用いられて来ていた。 したがって１本発明によれば、その製造法に示すごとく
、その主役成分は、まったく異なっている点で１例えば
、あらかじめ、本物質を抽出後。 残漬物から従来のエキス、あるいはグリチルリチン、グ
リチ・ルリチン酸を得ることが回腸となるため、甘草の
有効利用の観点からみても太き（貢献出来るものである
。

【図面の簡単な説明】

第１図は１本発明による細胞賦活物質（製造法の欄中の
工程で得られたフラクション、セファデックスＧ−２５
フアインによる分画）による溶出図である。 第２図は、本発明による細胞賦活物質の分子量測定に当
って、［ｔＦ物質を用いて作成した１分子ｍとＫ　ａ　
ｖ　ｌａによる挟覆線である。 第２図中、Ａはポリエチレングリコール１０００（平均
分子１１１１０００１．８はポリエチレングリコール４
０００　（平均分子量３０００１゜図 圓 第　１　口 Ｋａｖ値 ジ１２　口 分子量（ｘｉ♂）

Claims (1)

【特許請求の範囲】
1. （１） マメ科植物の甘草から抽出された水溶性物質であり、次
   の（ａ）〜（ｂ）、又は（ｃ）〜（ｄ）で特定される、
   甘草由来細胞賦活物質。 （ａ）分子量が１３００付近にある。 （ｂ）ペーパークロマトグラム〔東洋ろ紙Ｎｏ．５０、
   展開溶媒：水・エタノール混液（１：１）〕上のＲｆ値
   が、０．８０〜０．８５にある。 （ｃ）水及び８０％エタノールに可溶であり、且つ無水
   エタノール、ｎ−ブタノール、 酢酸エチル、クロロホルム、石油エーテル、エーテルに
   不溶である。 （ｄ）モーリッシュ反応及びニンヒドリン反応が陽性で
   ある。