JPH01500905A

JPH01500905A - 腫瘍壊死因子と抗炎症剤との組合せおよび悪性腫瘍性および非悪性腫瘍性疾患の処置方法

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Publication number: JPH01500905A
Application number: JP62506436A
Authority: JP
Inventors: ゴールドバーグ，アルフレッド　エル; フィアーズ，ウォルター　シー; ケッテルハット，アイシス　シー
Original assignee: プレジデント　アンド　フェロース　オブ　ハーバード　カレッジ; バイオジェンインコーポレイテッド
Priority date: 1986-10-16
Filing date: 1987-10-14
Publication date: 1989-03-30
Also published as: IL84189A0; EP0287633A4; ATE91237T1; WO1988002632A1; ZA877771B; EP0287633A1; DE3786456T2; DE3786456D1; EP0287633B1

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるため要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】腫瘍壊死因子と抗炎症剤との組合せおよび悪性腫瘍性および非悪性腫瘍性疾患の処置方法発明の技術分野本発明は、悪性１Ｉｆｆｉ瘍性および非悪性１を層性疾患の処置についての組合せおよび方法に関する。さらに詳しくは、本発明は、天然または組換え腫瘍壊死因子（ｒＴＮＦＪ）とインドメクシンおよびイブプロフェンのような非ステロイド系抗炎症剤との組合せに関し、形質転換細胞の増殖阻害または殺細胞に有用である０本発明によれば、悪性Ｉｔ瘍性および非悪性腫瘍性新生組織性疾患の処置において非ステロイド系抗炎症剤を使用し、用いる高投与量のＴＮＦの有毒な副作用を低減または除去する。有利なことに、本発明の組合せおよび方法によりＴＮＦ単独に基づ〈従来の処置処方において耐容し得たものに比較するとより高い投与量のＴＮＦが許容される。

背景技術ＴＮＦは、内毒素または他の微生物生産物または刺激物による活性化に際しマクロファージおよび単核食細胞によって生産される〔イー・ニー・カルスウェルら、「腫瘍の壊死をニー・ホテツら、「腹膜滲出細胞由来のへマドプロトシア誘導性メディエータによる３Ｔ３−ＬＬ細胞におけるリボプロティンリパーゼのサブレフジョンＪ　、Ｐａｒａｓｉｔｅ　ｌｎｍｕｎｏｌ、、６．２０３−０９頁（１９８４））、ＴＮＦは、試験管内で広範囲の動物およびヒトガン細胞に対して細胞毒性または静細胞性であり、かつ生体内である種の腫瘍および異種移植ヒト腫瘍において出血性壊死を誘導するにも拘らず、正常細胞に対してはほとんどまたは全く細胞毒性を及ぼさない〔ケー・ハラナカとエヌ・サトミ、「ノート：試験管内でのＩｌ！：蕩壊死因子（ＴＮＦ）のヒトガン細胞に対する細胞毒性活性」、Ｊａｐａｎ　Ｊ　、Ｅｘｐ、Ｍｅｄ、　、５１．１９１−９４頁（１９８１）、エル・オールド、「ガン免疫：特異性の検索−ジー・エッチ・ニー・クロウニス記念講演Ｊ　％　Ｃａｎｃｅｒ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈ　ｓ　４１　％３６１− ７５頁（１９８１）、ビー・ディ・ウィリアムソンら、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、ＵＳＡｓ　８０．５３９７−４０１頁（１９８３））。

悪性腫瘍性疾患は、腫瘍性または新生組織性細胞増殖を特徴とする一群の疾患である。この種の疾患には、悪性ｌｌｆｆ１蕩性血液系疾患、カルシノーマ、ザルコーマ、ミエローマ、メ−７ノーマ、リンホーマ並びにパピローマが包含される。非悪性腫瘍性腫瘍を含む非悪性腫瘍性新生組織性疾患も特定の領域に局在する新生組織性細胞増殖を特徴とする。体内の正常細胞の悪性腫瘍性または非悪性腫瘍性新生組織への形質転換は、化学発ガン物質、放射線、物理剤または腫瘍原性自然増殖によって誘導され得る。

多くの悪性腫瘍性および非悪性腫瘍性疾患の正確な病因は未知のままである。よって、これらの疾患に対する処置は制限され、特定の疾患に対して有効な薬剤は必ずしも従来は利用可能ではなかった。この種の疾患は、例えば、外科的技術によりまたは化学療法、放射線並びに免疫療法により処置されて来た。しかしながら、この種の全ゆる処置技術の価値は、逆行的な副作用またはこれらの使用に伴う危険によりしばしば低減する０例えば、化学療法のような非外科的技術は免疫抑制効果を有し、二次感染に対する患者の感受性を増加させ得る。悪性腫瘍性または非悪性腫瘍性腫瘍を処置する外科的処置は、全ゆる侵入的手法に随伴する危険を包含し、全ての形質転換細胞の集団を有効に除去または排除し得ない可能性がある。さらに、ある種の悪性腫瘍性疾患は、従来の処置技術に対して耐性である０例えば、大半の皮膚メラノーマは放射線耐性であると考えられている。Ｒ独の薬剤または組合せた化学療法で悪性腫瘍性メラノーマを有効に一貫して退行させたものは１つもない、悪性腫瘍性腎臓細胞カルシノーマも利用可能な単独薬剤および組合せた化学療法に対して耐性である。

悪性腫瘍性および非悪性！！蕩慢性疾患対する他の処置方法は、形質転換細胞の表面上の腫瘍特異的抗原に対するモノクローナル抗体の使用を包含するに至った。典型的にはネズミモノクローナル抗体を包含するこの種の処置の有効性は、ネズミ抗体の更なる投与の有効性を妨害する抗−抗体応答を含む種々の因子によりしばしば制限される〔ジー・イー・グツドマンら、「進行メラノーマを有する患者におけるネズミモノクローナル抗体の予備的な試みＪ　、Ｊ、Ｃｌ１ｎ、０ｎｃｏ１．　％　３．３４０−５１頁（１９８５））、モノクローナル抗体処置の他の報告された副作用にはアナフラキシー、発熱並びに悪寒が含まれる。

この種の療法の欠点を考慮に入れ、多様な処置が、ある種のリンホカインの体内レベルを増加させることによってＭｔ瘍原性細胞に対する体の免疫応答を増加させることに向けられて来た０例えば、ＴＮＦは単独で腫ＷＩ細胞の増殖を阻害するか殺すことが知られている。さらに、ヒトリンホカインとヒトガンマインターフェロンとの組合せは腫瘍増殖を阻害すると報告された〔ヨーロッパ特許出ＩＩＩ第１２８．００９号）、ＴＮＦとヒトインターフェロンとの組合せが、ヒト１ＩｔｌＸに対してこれらの別々の効果の合計より大きい増殖阻害または細胞毒性効果を示すことも報告された〔エル・フランセら、「組換えＩＩｉ瘍壊死因子：種々の正常および形質転換ヒトおよびマウス細胞ラインに対するその効果およびインターフェロン−γとのその共働作用Ｊ　Ｅｕｒ、Ｊ、Ｃａｎｃｅｒ　Ｃ１１ｎ、０ｎｃｏ１．．２２．４１９−２６ｊＷ　（１９８６）　、ビー・ディ・ウィリアムソンら、「ヒ）Ｂ−細胞ラインによって生産されたヒト腫瘍壊死因子：ヨーロッパ特許出願第１３１，７８９号も参照するとよい）、ＴＮＦは有効な細胞毒性剤としての有望性が示されたにも拘らず、悪性腫瘍性および非悪性腫瘍性疾患を処置する治療剤としてのその有用性は、投与量を制限する有毒な副作用によって制限されている。

ＴＮＦは内毒素ショックの発病におけるメディエータの１つであると示唆された〔ビー・ビュートラら、「カケクチン／ｌｉｔ瘍壊死因子に対する受動免疫化は内毒素の致死的効果からマウスを保護するＪ　、５ｃｉｅｎｃｅ、２２９．８６９−７１頁（１９８５）、ビー・ビュートラおよびニー・シー・セラミ、「同じ生物学的コインの２つの側面としてのカケクチンと腫瘍壊死因子Ｊ　、Ｎａｔｕｒｅ、　３２０．５８４−８８頁（１９８６）　）　。

この種の全身系効果に対する寄与に加えて、ＴＮＦは骨関節炎におけるような局所的炎症に役割を果し得る〔ジェー・エム・ダイヤら、「カケクチン／Ｍｔ瘍壊死因子は、ヒト滑液細胞および皮膚線維芽細胞によるコラ−ゲナーゼおよびプロスタグランジンＥ２生産を刺激するＪ　、Ｊ、Ｅｘｐ、Ｍｅｄ、　、１６２．２１６３−６８頁（１９８５））。

この種の発病におけるＴＮＦの役割は、プロスタグランジンまたはトロンボキサン生産へのその刺激に帰し得る。毒性ショックにおける発病機構の明確な説明はないにも拘らず、出血性および内毒素ショックの種々の実験的モデルにおいて循１１するプロスタグランジンが実質的に増加することも報告され、トロンボキサンＰＣＩ、並びにプロスタグランジンＰＧＥ２は不可逆的ショックの進行における重要なメディエータとして提唱された〔ジェー・アール・フレラフチャ、Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｐｒｏｔｅｃｔｉｏｎ　Ｗｉｔｈ　Ｐｒｏｓｔａｇｌａｎｄｉｎｓ　、中、■−６５−７２頁（１９８５）、アール・アール・ブトラら、「敗血病性ショックにおけるトロンボキサン（Ｔｘ）およびプロスタグランジン（ＰＧＩ２）の血漿レベルの上昇」、Ｃ１ｒｃ、５ｈｏｃｋ、８．２１３−１４頁（１９８１）、アール・エッチ・デムリングら、Ａｍ、Ｊ、Ｐｈｙｓｉｏｌ、　、２４０、Ｈ３４８−５３頁（１９８１）、ダブリュ・シー・ワイゼら、「内毒素ショックの発病におけるトロンボキサンＡ２の関連性」、Ａｄｖ、５ｈｏｃｋ　Ｒｅｓ　、　、６．８３頁（１９８１）、エッチ・プルトら、「６−ケド〜ＰＧＦ、〆の血中レベル、内毒素誘導低血圧におけるプロスタサイクリンの安定代謝産物Ｊ　、Ａｒｃｈ。

Ｉｎｔ、Ｐｈａｒｍａｃｏｄｙｎ、　２３６．２８５−８６頁（１９７８）、ジェー・ニー・タックら、「内毒素ショック過程のラットにおけるトロンボキサンレベルの上昇Ｊ　、　Ｊ、ＣＨｎ、Ｉｎｖｅｓｔ、、６５．２２７−３０頁（１９８０））。非ステロイド系抗炎症剤は実験動物において内毒素のある種の致死的効果に対し保護を行い得ると報告されているにも拘らず、この種の薬剤は内毒素および出血性ショックのヒト患者を処置すべく臨床的に未だ使用されていない〔ビー・エル・ジョートラ、「インドメタシンはグラム陰性敗血症における生存率を改善する」、Ａｄｖ、５ｈｏｃｋ、Ｒｅｓ、、６．２７−３６頁（１９８１）、ビー・エム・アルムクピストら、「イブプロフェンを用いる実験的イヌ内毒素ショックの処置、シクロオキシゲナーゼ阻害剤」、頁（１９８２）、ビー・ブイ・ハルシュ力ら、「内毒素ショックにおけるアスピリンの保護効果Ｊ　、　Ｊ、Ｐｈａｒｍａｃｏｌ、Ｅｘｐ。

Ｔｈｅｒｍ、、２１８．４６４−６９頁（１９８１））。

よって今日まで、従来の方法および治療剤が多くの悪性腫瘍性および非悪性腫瘍性疾患の処置に有効であることは証明されていない、よって、これらの従来の薬剤および方法の欠点を排し、これらの疾患に対し有効な処置を提供する治療剤および方法の必要性が存する。

発明の開示本発明は、悪性Ｉｔ蕩性および非悪性腫瘍性疾患を処置する有効な組合せおよび方法を提供することにより前記した課題を解決する０本発明によれば、悪性Ｉ！を層性および非悪性腫瘍性新生組織性疾患を処置するに際し、天然または組換え腫瘍壊死因子（ｒＴＮＦＪ）を非ステロイド系抗炎症剤と組合せて使用する。有利なことに、本発明の組合せおよび方法は、ＴＮＦ単独高投与に伴う潜在的な副作用を回避または低減し、悪性腫瘍性または非悪性ＩＩｔ瘍性細胞の望ましくない増殖に対するＴＮＦの細胞毒性活性に影響を与えない。

図面の簡単な説明第１図は、ＣＤ種オスのラットの死亡率（第１Ａ図）および体温（第１Ｂ図）に対するＴＮＦ単独、インドメタシン単独、またはＴＮＦとインドメタシンとの組合せを用いる処置の効果をグラフ的に示す図である。

第２図は、ＣＤ種オスのラットの血漿グルコースレベルに対するＴＮＦ単独、インドメタシン単独、またはＴＮＦとインドメタシンとの組合せを用いる処置の効果をグラフ的に示す図である。

第３図は、ＣＤ１ｔオスのラットの血Ｐ１３．１４−ジヒドロー１５−ケト−ＰＧＥ２　（ｒＤＨＫ−ＰＧＪ　）レベルに対するＴＮＦ単独、インドメタシン単独、イブプロフェン単独、またはＴＮＦとインドメタシンもしくはイブプロフェンとの組合せを用いる処置の効果を示す表である。

第４図は、ＣＤ！オスのラットの血液のｐＨ，ｐｃｏ、並びにＨＣＣｈ　レベルに対するＴＮＦ単独、またはインドメタシンとの組合せを用いる処置の効果を示す表である。

第５図は、ＣＤ種オスのラットの死亡率（第５Ａ図）および体温（第５Ｂ図）に対するＴＮＦ単独、イブプロフェン単独、またはＴＮＦとイブプロフェンとの組合せを用いる処置の効果をグラフ的に示す図である。

第６図は、培養ヒーラ（Ｈｅｌａ）細胞の細胞増殖に対するＴＮＦ単独、またはインドメタシンとの組合せを用いる処置の効果をグラフ的に示す図である。

を　する最　の一様ここに記載する発明がより十分に理解され得るべく、次の詳細な説明を記載する。

説明では次の用語を用いる：ＴＮＦ　（または腫瘍壊死因子）−−−ＴＮＦは増殖阻害または細胞毒性モノカインである。天然のＴＮＦは分子量１７，０００を越えるサブユニットを有する蛋白質である。ＴＮＦは注体内では少量生産される１例えば、内毒素を活性化マクロファージによるＴＮＦの放出の誘起因子として使用し得る。ＴＮＦは確立されたセルライ、ンすなわちＵ９３７においても生産され得る〔ディ・ディー・カメルラン、Ｒｅｔｉｃｕｌｏｅｎｔｈｅｌ、　Ｓｏｃ、、３４．４５−５２頁（１９８３））、ＴＮＦはすでに種々の宿主−ベクク系でクローン化され発現された〔ニー・エル・マルメノウトら、「ヒト腫瘍壊死因子の分子クローン化および発現並びにマウス腫瘍壊死因子との比較Ｊ　、Ｅｕｒ、Ｊ、Ｂｉｏｃｈｅｍｏ、１５２．５１５−２２頁（１９８５）、エル・フランセンら、「マウス腫瘍壊死因子ｃＤＮＡの分子クローン化およびその真核生物発現Ｊ　、Ｎｕｃｌ、Ａｃ１ｄ、Ｒｅｓ、、１３．４４１７頁以下（１９８５）。ディ・ペニカら、「ヒトｌ！瘍壊死因子：前駆体構造、発現並びにリンホトキシンとの相同性Ｊ　、Ｎａｔｕｒｅ、３１２．７２４−２９頁（１９８４）、ティ・シライ、「ヒトＩ！瘍壊死因子の遺伝子のイー・コリにおけるクローン化および発現Ｊ　、Ｎａｔｕｒｅ、　３１３．８０３−０６頁（１９８５）、ニー・エム・ワンら、「ヒトＩ！瘍壊死因子に相補的なりＮＡ（１９８５）も参照するとよい〕。

クローン化されたＴＮＦのヌクレオチド配列はそれが約１５７アミノ酸からなることを示す。本出願で使用するように、ｒＴＮＦＪは、天然または組換えＴＮＦまたはその誘導体であって、これらのＴＮＦの殺腫瘍性または細胞毒性活性を特徴とする全ての蛋白質、ポリペプチド並びにペプチドを含む、これらは、天然ＴＮＦ、組換えＴＮＦ、並びに合成または半合成ＴＮＦのような種々の起源に由来するＴＮＦＩＩＩ似化合物を金化合物出願で使用するように、ｒＴＮＦＪは、Ｔ　Ｎ　Ｆ−βとしても知られる密接に関連するポリペプチドリンホカインをも一２９頁、ビー・ダプリュ・グレイら、「ヒトリンホカインのｃＤＮＡのクローン化および発現、ｍｔｆｌｔ壊死活性を有するリンホカインＪ　、Ｎａｔｕｒｅ、　３１２．７２１−２４頁（１９８４）、ビー・ライ・ルピンら、ｒＬｕｋＩｌセルライン由来のヒト腫瘍壊死因子の精製および特ｆｆ１Ｊ　、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ。

特徴とし、悪性腫瘍性血液性全身系疾患、カルシノーマ、ザルコーマ、ミエローマ、メラノーマ、ロイケミア、リンホーマ並びにパピローマを含む全ゆる疾患。

非悪性腫瘍性新生組織性疾患−一一良性増殖のような起源部位に局在する細胞の望ましくない増殖を特徴とする全ゆる疾患。

本発明は、悪性腫瘍性および非悪性！を腸性新生組織性疾患を処置する組合せおよび方法に関する。さらに詳しくは、本発明は、薬学的に有効な量のＴＮＦと高投与量のＴＮＦの副作用をブロックする薬学的に有効な量の非ステロイド系抗炎症剤との組合せに関する。この種の副作用には、体温降下、代謝性酸性症、低血糖症、末梢性チアノーゼ、下痢並びに内毒素ショックに見られるものに類似する他の作用が含まれる。

１つの態様によれば、本発明の方法は、薬学的に許容し得る様式で薬学的に有効な量のＴＮＦと非ステロイド系抗炎症剤よりなる群から選択される薬学的に有効な量の化合物とを用い腫瘍または他の新生組織性細胞集団に対して細胞毒性または静細胞効果を及ぼすのに十分な時間の開明乳動物を処置する工程からなる。

本発明の組合せおよび方法に有用なＴＮＦの中には、種々の誘導因子に応答して種々の細胞によって生体内で生産されるＴＮＦがある０例えば、これらのＴＮＦには、バシルスーカルメソテーグエリン（ＢＣＧ）またはコリネバクテリウムが感染しイー・コリのリポポリサンカライド（Ｌ　Ｐ　Ｓ）で処置されたマウスおよびウサギの血清から得られるＴＮＦ活性を示す化合物が含まれる〔イー・ニー・カルスウェルら、［！！瘍の壊死を生起する内毒素に誘導される血清因子」、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、ＵＳＡ、　７２．３６６６−７０頁（１９７５））、同様に有用なのは、ＢＣＧで感染されたマウスのマクロファージ集積腹膜滲出液細胞の培養培地から誘導されるＴＮＦ、並びにマクロファージ生育因子を用いて試験管内で増殖されＬＰＳで刺激されたマクロファージ様腫瘍細胞（ＰＵ５−１．８）および予備処置マウスの腹膜マクロファージである〔ビー・ビー・アガルワルら、Ｊ、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、、２６０．２３４５−５４頁（１９８５）、ディー・マネルら、「殺腫瘍活性（腫瘍壊死因子）の起源としてのマクロファージＪ　、Ｉｎｆｅｃｔ、Ｉｍｍｕｎｏｌ、　、３０．５２３−３０頁（１９８０））。

さらに、健康なヒト供与体の血液から単離されリンホカインまたはＬＰＳで刺激されたヒト単核細胞は、マウス標的細胞およびヒト形質転換細胞に対して細胞毒性または静細胞効果を有する化学薬剤を生産するが、これは本発明の組成物に有用である〔エヌ・マチウス、「ヒト単核細胞による抗腫瘍細胞毒の生産：内毒素、インターフェロン並びに他の薬剤の誘導因子としての比較Ｊ　、Ｂｒ、Ｊ、Ｃａｎｃｅｒ　ｓ　４５．６１５−１７頁（１９８２）、ディー・ハメルストロム、「ヒト単核細胞から放出される可溶性静細胞因子：■、生産、正常および形質転換ヒト標的細胞に対する効果Ｊ　５ｃａｎｄ、Ｊ、ｌｍｌ１ｕｎｏｌ−１１５，３１１−１８頁（１９８２））、同様に有用なのは、マウスの腫瘍に対し毒性があり、ヒト結腸ガン、メラノーマ並びに神経芽細胞腫セルラインの試験管内での増殖を阻害すると示された正常なヒトの血清由来のα、−α２グロブリン画分で７９．６７頁（１９７８））。

これらの天然の動物およびヒ）ＴＮＦは、以後ある程度精製され一部特徴が明らかにされている〔例えば、米国特許第４．３０９．４１８号、ニス・グリーンら、「腫瘍の壊死を生起する血清因子の部分精製Ｊ　、Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、ＵＳＡ、７３．３８１頁（１９７６）を参照するとよい〕。

本発明の組合せおよび方法に有用なＴＮＦは、組換えＤＮＡ技術を用いても大量に生産し精製し得る〔エル・フランセンら、［マウス腫瘍壊死因子ｃＤＮＡの分子クローン化およびその真核生物発現Ｊ　、Ｎｕｃｌ、Ａｃ１ｄｓ、Ｒｅｓ、　、１３．４４１７頁以Ｂｉ（１９８５）、ニー・エル・マルメノウトら、「ヒト腫瘍壊死因子の分子クローン化および発現並びにマウス腫瘍壊死因子との比較Ｊ　％　Ｅｕｒ、Ｊ、Ｂｉｏｃｈｅ＋ｓ、、１５２．５１５−２２頁（１９８５）、デ４’ペニカら、Ｎａｔｕｒｅ、　３１２．７２４−２８頁（１９８４）、ティ・シライ、Ｎａｔｕｒｅ、　３１３．８０３−０６頁（１９８５）、ニー・エム・ワンら、５ｃｉｅｎｃｅ　％２２８．１４９−５４頁（１９８５）も参照するとよい）。

本発明の組合せおよび方法に有用な抗炎症剤には、シクロオキシゲナーゼ阻害剤でもある非ステロイド系抗炎症剤が含まれるが、これは、プロスタグランジン、プロスタサイクリンまたはトロンボキサンの生合成を阻害する。この種の薬剤は、アラキドン酸シクロオキシゲナーゼを阻害するが、これはプロスタグランジン合成酵素としても知られている。これらの非ステロイド系抗炎症剤には、アセチルサリチル酸（アスピツン）、サリチル酸メチル、サリチル酸ナトリウム、フェニルブタシン、オキシフェンブタシン、アバシン、インドメタシン、スリンダク、トルメチン、メフェナム酸、イブプロフェン、ナプロキセン、フェノプロフェン、フルルビプロフェン、ケトプロフェン並びにプロスタグランジン、プロスタサイクリンまたはトロンボキサン合成をブロックする類似する能力を有する他の化合物が含まれるが、これらに限定されない６本発明の組合せおよび方法に有用な他の抗炎症剤は、天然起源から誘導されるリボコルチンまたは組換え技術によって生産されるリボコルチンおよびリボコルチン様ポリペプチドであり〔米国特許出願第６９０．１４６号、７１２，３７６号、７６５．８７７号並びに７７２，８９２号、ビー・ワルナら、「潜在的な抗炎症活性ををするヒトリボコルチンＡホスホリパーゼＡ−２インヒビタのクローン化と発現Ｊ　、Ｎａｔｕｒｅ、　３２０．７７−８１頁（１９８６）を参照するとよい〕、また、ウロモジュリンである〔ニー・ブイ・ムクモアとジーン・エム・デツカ、「ウロモジュリン：妊娠した女性の尿から単離された独特な８５キロダルトンの免疫抑制糖蛋白質Ｊ　、５ｃｉｅｎｃｅ　％２２９．４７９−８１頁（１９８５））。

本発明の組合せおよび方法は、ＴＮＦＩｍ独に基づ〈従来の処置処方で耐えられたものより高い投与量でＴＮＦの投与を許容する。よって、本発明の組合せおよび方法は、ＴＮＦ単独を用いる高投与量処置のを毒な効果を有利に低減または除去する。理論に拘束されるものではないが、ＴＮＦ単独を用いるものを越える本出願人の組合せおよび方法の有効性は、ＴＮＦの高投与の結果生起する体内でのプロスタグランジン、プロスタサイクリンまたはトロンボキサンの１または複数の生産をブロックする抗炎症剤の作用に起因し、これによりＴＮＦの毒性が低減されるものと考えられる。これにより、従来は典型的に有毒な効果を伴った高投与量でのＴＮＦの投与が許容される。よって、非ステロイド系抗炎症剤と組合せたＴＮＦの使用は、ＴＮＦ単独の低い従来の許容投与量に基づく治療に要求された処置の期間およびレベルを低減し得る。

本発明の組合せおよび方法は、ヒトを含む全ゆる動物を処置するのに有用である。標的患者種から誘導されるＴ　Ｎ　Ｆを好ましくは使用する。しかしながら、標的細胞内で活性であれば、他の種から誘導されるＴＮＦを本発明の組合せおよび方法で使用し得る０例えば、マウスＴＮＦは試験管内でヒト細胞ライン中で活性であることが示されている〔エル・フランセンら、「組換えＩ！瘍壊死因子：種々のヒトおよびネズミ形質転換セルラインに対する種特異性Ｊ　、Ｃｅ１１．Ｉｍｍｕｎｏｌ、、１００．２６０−６７頁（１９８６））。

本発明によれば、哺乳動物は、薬学的に有効な量の本発明の組合せの２つの活性成分、ＴＮＦおよび非ステロイド系抗炎症剤を用い悪性ｌｉｔ瘍性または望ましくない非悪性腫瘍性細胞増殖に十分な例えば腫瘍または新生組繊細胞増殖を抑制し、好ましくは腫瘍または新生組繊細胞を殺す時間の間装置される。

本発明によれば、薬学的に有効な量の非ステロイド系抗炎症剤とＴＮＦとを順にまたは同時に患者に投与する。しかしながら、処置の特定の順序は重要ではないと考えられる。

ＴＮＦと抗炎症剤との最も有効な投与および投与量処方の態様は、処１される疾患の種類、疾患の重篤性および経過、治療の経歴、患者の健康状態およびＴＮＦに対する応答並びに処置担当者の判断に依存し得る。ＴＮＦを患者に対し１回または一連の処置に渡って投与し得る。

好ましくは、非ステロイド系抗炎症剤とＴＮＦとを患者に順に投与するが、非ステロイド系抗炎症剤をＴＮＦを用いる処置の後、前または後と前の両方に投与する。順次投与は、非ステロイド系抗炎症剤をＴＮＦを用いる処置の少なくとも同じ日（２４時間以内）に用いる処置を包含し、ＴＮＦを投与しない日に抗炎症剤を用いる連続処置を包含する。抗炎症剤の従来の投与様式および標準的投与処方を使用し得る〔ニー・ジー・ギルマンら（［者）　、Ｔｈｅ　Ｐｈａｒｍａｃｏｌｏｇｉｃａｌ　Ｂａ５ｉｓ（１９８６版）を参照するとよい〕０例えば、インドメタシンを約２５−５０■の投与量で１日に３回経口投与し得る。

より高い投与量も使用し得る。その他、アスピリン（約１５００−２０００■／日）、イフ゛プロフェン（約１２００−３２００■７日）または従来の治療投与量の他の非ステロイド系抗炎症剤を使用し得る。非ステロイド系抗炎症剤の投与量は個々の患者について決定し得る。

本発明の１つの態様によれば、患者は、非ステロイド系抗炎症剤とＴＮＦとの同時処置を受け得る。ＴＮＦの局所的、病巣内または静脈内注入が好適である〔ニー・ジー・ギルマンら、前記文献、１２９０−９１頁を参照するとよい〕、非ステロイド系抗炎症剤は、好ましくは皮下注射または経口により投与すべきである。

その他、患者は、抗ガン、抗ｉｔ瘍または抗炎症活性を示す薬剤の従来の投与様式によりＴＮＦと非ステロイド系抗炎症剤との組合せからなる組成物を受け得る。これらには、例えば、非経口的、皮下、静脈内または病巣内投与経路が含まれる。

これらの治療に使用する組成物も種々の形態とし得る。これらには、例えば、錠剤、ビル、粉末、液体溶液もしくは分散体、リポソーム、座薬、注射および注入性溶液のような固体、半固体並びに液体投与形態が含まれる。好適な形態は投与および治療療法の意図する様式に依存する。好ましくは組成物は、当業者に公知の従来の薬学的に許容され得るキャリヤおよびアジュバントをも含む、好ましくは、本発明の組成物は単位投与量の形態であり、通常は患者に対し１日につき１または複数回投与され得る。

ＴＮＦは、静脈内、筋肉内、病巣内または皮下注射を含む全ゆる薬学的に許容し得る投与形態で患者に投与し得る。有効な投与量は、約０．０１〜約１．０■／に＋ｒ体重の範囲であるが、これより低いか高い投与量も有用であることが認められている。さらに詳しくは、ＴＮＦｉ独で処置される患者において典型的に許容されるものより高いＴＮＦの投与量を本発明の方法および組成物で有利に使用し得る。

勿論、本発明の組成物および方法は、哺乳動物における悪性腫瘍性および非悪性腫瘍性疾患を処置する例えばインターフェロン（例えば、ＩＦＮ−α、ＩＦＮ− β並びにＩＦＮ−Ｔ）のような他のガンもしくは腫瘍治療剤または化学堡法と組合せて使用し得ると理解されるべきである。

一旦患者の状況の改善が起これば、必要に応じて維持投与量を投与する０次いで、投与量または投与頻度、または両方を、症状の状況により改善された状況が維持されるレベルに低減し得る。症状が所望のレベルに緩和されたならば処置番停止すべきである。しかしながら、患者は、いずれかの疾患症状の再発に際して長期ベースでの断続的な処置を必要とし得る。

ここに記載した発明がより十分に理解されるべく、以下の実施例を記載する。これらの実施例は説明の目的のためのみであり、如何なる様式においても本発明を回定するものとして解釈されるべきでないことを理解すべきである。

実施例１本実施例は、高投与量のＴＮＦを用いる処置の有毒な副作用をブロックする非ステロイド系抗炎症剤の生体内での作用を示す。本実施例では、体温降下、代謝性酸性症、低血糖症並びに末梢性チアノーゼのような生命を脅かす副作用に起因して静脈内経由で与える際は致死的であった投与量でＴＮＦを投与した。この投与量は皮下的に与えると十分に許容された。この経路を介して到達されるＴＮＦの血中レベルは静脈内投与の結果のものより決して高くないからである。

以下に記載するデータは、Ｔ　Ｎ　Ｆを非ステロイド系抗炎症剤と組合せて投与すると単独の場合よりも副作用を伴わず一層高いＴＮＦの血中レベルが許容されることを示す、よって、本実施例は、非ステロイド系抗炎症剤をＴＮＦの投与と同時に用いる処置がＴＮＦの高い血中レベルにより誘導される全ゆる逆行的な生理的応答をブロックすることを示す、したがって、本発明の方法および組成物は、悪性腫瘍性および非悪性腫瘍性新生組織性疾患を処置する治療剤として従来は典型的に望ましくない副作用を伴った特に高投与量でのＴＮＦの宵月性を増強する。

本実施例では、それぞれ５０−６０グラムの体重のオスのラット（ＣＤ種、チャールス・リバ飼育研究所、ウィルミントン、マサチューセッツ）を６つの処置群に分けた。処置に先だち３Ｂ間、全てのラットをプリナ・ラット・チオウの標準食餌および水で維持した。以下に示すように、ＴＮＦ単独、抗炎症剤単独または抗炎症剤と組合せたＴＮＦを用いて群１−５のそれぞれを処１した０群６は運搬体コントロール群と後に静脈内に４μｇ　／　ｇ体重ヒト組換えＴＮＦ。

群３：腹膜内に３■／　ｋｇ体重インドメタシン、続いて２時間後に静脈内にリン酸緩ｆｉ塩類溶液。

群４：腹膜内に２０■／ｋｇ体重イブプロフェン、続いて２時間後に静脈内に４ μｇ／ｇ体重ヒト組換えＴＮＦ。

群５：腹膜内に２０■／ｋｇ体重イブプロフェン、続いて２時間後に静脈内にリン酸緩衝塩類溶液。

本実施例で使用したＴＮＦは、バイオケント（ゲント、ベルギ）およびバイオケント（ケンブリッジ、マサチューセッツ）により供給される組換えＴＮＦである。調製物は９９％を越えて純粋であり、２０　ｎｇ／　ｍｇ未溝の内毒素を含有し、約９．６　Ｘ　１０’単位／■〜２．５　Ｘ　１０’単位／■の比活性ををした。

インドメタシンおよびイブプロフェンは、それぞれシグマ社およびア、プジッン社によって供給された。

エーテル麻酔下で行う頚静脈への静脈内注射によりＴＮＦを投与した。ＴＮＦまたはリン酸緩衝塩類溶液注射後の時間間隔後および時に頚静脈の穿刺によって血液サンプルを集めた。その後ヘパリン化したチューブで集めた血液を遠心分離し、血漿を一２０℃で保存した。ペンクマングルコース分析計（ベックマン・インストルメント社）を用いて血漿クルコースレベルを測定した。エル・レビン、Ｂｉｏｃｈｅｍ、ｏｆ　Ａｒａｃｈ。

うなラジオイムノアッセイによりプロスタグランジン代謝物レベルを測定した。

電気温度計（モデル４９ＴＡ、イエロ・スプリングス・インストルメント社）を用いて直腸温度を測定した。全ての結果は平均上ＳＥＭで示し、観察された変化の統計的意義はアンペアのスチューデントのオス）　（ＵｎｐａｉｒｅｄＳｔｕｄｅｎｔ’ｓ　ｔｅｓｔ）を用いて評価した。

ＴＮＦ処置単独の効果第１Ａ図に示すように、群１のラットの間では、ＴＮＦ注射後の最初の１時間の間は死亡は起こらなかった。しかしながら、この時間の後に生存性の進行的な低減が観察され、典型的には２〜４時間以内に全ての動物が死亡する結果となった０例えば、注射２時間後には約２５％の動物が死亡し、注射４時間後には全ての群１のラットが死亡した０合計すると、この様式で３５匹の動物を処置し、３０匹が速やかに死亡した。

群１のラットの生存性の速やかな減少は、実験的に誘導された内毒素シラツクの研究において観察されるものに類似する生理的変化のスペクトルを伴う〔ジェー・ビー・フィルキロ４頁（１９８５））、これらの生理的変化は体温降下、末梢性チアノーゼ、代謝性酸性症、下痢、初期過血糖症を誘起し、続いて重篤な低血糖症およびプロスタグランジン合成の増加を伴った。

第１Ｂ図に示すように、Ｔ　Ｎ　Ｆは注射後１時間以内に体温の激しい下降を誘起し、処置した動物の平均直腸温度は３６．８℃から３４．３℃に降下した。この体温の低下は明らかに他の症状に先立ち、従って、生存性の低下の結果であるよりも特異的なＴＮＦの生理的効果であると考えられる。注射後３〜４時間の間、体温は連続して２９．５℃〜３２℃に降下した。比較的低量のＴＮＦの静脈内投与、または等量のＴＮＦの皮下注射は発熱を誘起し、これはシクロオキシゲナーゼ阻害剤でブロックされるため、この体温降下効果は驚くべきことである。

他の生理的変化は体温降下を伴った０例えば、死亡直前の時間に、動物は一見して極めて嗜眠性となり、四肢にチアノーゼを呈した。さらに、注射後約１時間で動物は下痢を起こした。死後の検査に際し、処置に先だち動物は自由に食餌に近寄れたにも拘わらず、ＴＮＦ処置ラットの腸は一見して空であった。それに対し、対照ラットまたは４時間食餌を奪われた対照ラットの腸は固形物で十分に満たされていた。

Ｔ　Ｎ　Ｆ処置の他の結果は初期の過血糖症であり、続く重篤な低血糖症である。第２図に示すように、ＴＮＦ注射後に血中グルコースの大きな二相的変化が起ワた。最初に、ラットは過血糖症を呈し、これは１時間以内に３０１１ｆ／１００ｍ１（１，６ｍＭ）　マでの血漿グルコースレベルの激しい低下を伴った。ＴＮＦ注射後数時間、大半の動物は死亡真近であり、その血中グルコースレベルはさらに約２　（ｉｔ／　１００＋ａｌに低下した。このようなレベルは、もし維持されれば、一般に生存に十分ではない。

ＴＮＦ処置ラットは血清中のプロスフグランジンのレベルの増加をも示した。ＰＧＥ２の安定な代謝産物、１３．１４−ジヒドロ−１５−ケト−ＰＧＥ２　（ｒＤＨＫ　ＰＧＪ　）の血中含量を測定することにより、ＴＮＦ処置後の体のプロスタグランジン生産を測定した。注射後１時間以内にＴＮＦはＰＧＥ、生産の実質的な増加を誘起した。第３図に示すように、ＤＨＫ−ＰＧの血漿レベルは０．４０±０．０５ｎｇ／　ｍｌから４．２６±０．４８ｎｇ／　ｍｌへと１０倍増加した。ＰＧＥ２のこの代謝産物の高いレベルは数時間維持され、注射後３時間で５．７７±０．５１ｎｇ／ｍｌに達した。プロスタグランジンおよび特にＰＧＥ２は体温降下より発熱の誘起を伴うため、このように増加したことは予期し得ないものだった〔エッチ・ニー・ベルンハイムら、Ｊ、Ｐｈｙｓｉｏｌ、、３０１．６９−７８頁（１９８０））。

群１−３および６についての前記したのと類似する処置において、ＴＮＦ処置は重篤な代謝性酸性症をも生起することを観察した。

第４図に示すように、次のように処置した４つの別々の群のラットについて、血液ｐＨ，ｐＣｏ２　（ｍｍＨｇ）並びにＨＣＯｘ　（／Ｊ　ｍｏｌ／　１　）を測定したニ一群Ａ（ラット４匹）：運搬体対照、静脈内にリン酸緩衝塩類溶液。

続いて２時間後に静脈内にヒト組換えＴＮＦ。

群Ｄ（ラット５匹）：腹膜内に３Ｑ／ｋｆ体重インドメタシン、続いて２時間後に静脈内にリン酸緩衝塩類溶液。

ＴＮＦまたは塩類溶液注射３時間後にエーテル麻酔下で動脈血を大動脈からヘパリン化したシリンジ内に集めた。血液ガス分析機で血液ｐＨおよびｐＣｏ、（ｍｍＨｇ）を測定した。ヘンダーランーハフセルバソハ平衡ヲ用いてＨＣＯ。

（ｐ　ｍｏｌ／　ｌ　）を測定した。第４図に示すように、ＴＮＦ４！１独で処置したラットの動脈ｐＨは顕著に低下し、そのｐｃｏ。

は約３０％減少し、その動脈重炭酸塩（ＨＣＯｓ）濃度は対照の約半分だった。

ＴＮＦ処置の結果の生理的効果は、内毒素ショックで動物に認められる典型的なものである。よって、活性化された単核細胞は多くの有効なポリペプチドを生産するにも拘わらず、ＴＮＦの過剰生産はそれ自体で大半の不可逆的ショックの生命を脅かす症状に寄与し得る。

観察された種々の生理的効果がＴＮＦ熔液への内毒素それ自体の混入によるものでないことを証明するために、全ゆる内毒素に影響を与えずにＴＮＦを７０℃で１５分間加熱してＴＮＦ活性を破壊した〔イー・ニー・カルスウェルら、前記文献、１頁〕、このように処理したＴＮＦをラットに投与しても、動物の死亡は全く生起しなかった。さらに、処置したラットで体温の変化または下痢の発生を呈するものはなかった。

非ステロイド系炎症剤／ＴＮＦ処置組合せの効果ＴＮＦ処１を受ける前に非ステロイド系炎症剤／プロスタグランジン合成ｆＩＩ素阻害剤の腹膜内単発注射で処置した群２および群４のラットは群１０ラットで見られた症状を示さなかった。

よって、インドメタシン（群２）およびイブプロフェン（群４）は高投与量レベルのＴＮＦ投与のを毒な効果を妨げることが分る。

第１Ａ図に示すように、ＴＮＦ処置前のインドメタシンの単発注射は、ＴＮＦの致死的効果に対し高程度の保護を与える。群２のラットの全てが、Ｔ　Ｎ　Ｆ注射を受けた４時間後も生存していた６例えば、８匹の群２０ラットの内、１匹のラットは注射１２時間後に死亡し、さらに２匹のラットは注射２１時間後に死亡した０群２のその他５匹のラットは生存を維持し、以後−見して正常であった。

群１および群２のラットについて前記したものに類似する処置において、インドメタシンの単発注射はＴＮＦ誘導死亡率に対する保護を与えることを再び観察した。さらに詳しくは、ＴＮＦ単発で注射した１６匹のラットの群のそれぞれは処置４時間以内に死亡したのに対し、ＴＮＦ処置の前にインドメタシンで処置した２０匹のラットの群のそれぞれはＴＮＦ注射を受けた４時間後も生存していた。

４匹のインドメタシン処置ラットは、ＴＮＦ注射後４−６時間以内に死亡し、さらに３匹のラントが注射後６−２４時間以内に死亡した。

ＴＮＦ注射後２４−５６時間以内にさらに死亡したものはなく、この時点で６５％のラットが生存し一見して健常に見えた。

同様に、ＴＮＦ処置後にインドメタシンの単発注射を受けたラットは、ＴＮＦの致死的効果から保護されることを観察した。ＴＮＦ単独を受けた動物は処置４時間以内に死亡したのに対し、ＴＮＦ投与投与１浚ラットはＴＮＦ注射後６時間生存した。

ＴＮＦ処置前にイブプロフェンの単発注射を受けた群４のラットもＴＮＦの致死的効果から保護された．第５Ａ図に示すように、約７５％のイブプロフェン処置ラットはＴＮＦ注射注射６浚５０％のラットが生存し、−見して健常に見えた。

前記した処置におけるインドメタシンまたはイブプロフェンの繰り返し投与はＴＮＦに誘起される全ゆる生存率をさらに低下させ得ると考えられる。

インドメタシンとイブプロフェンの両方は、体温の速やかな降下および続いてＴＮＦ単独で処置した動物に見られる進行的な体温降下を妨げた．第１Ｂ図および５Ｂ図に示すように、ＴＮＦ処置前にインドメタシンまたはイブプロフェンで処置したラットの幾つかは、僅かな体温の降下（１乃至２℃）のみを示し、これは速やかに正常レベルに回復した．さらに、ＴＮＦ処置１時間後にインドメタシンを５匹のラットに投与した場合、体温降下がすでに顕著である場合、その体温が上昇して正常に回復した。

群２（インドメタシン処置）および群４（イブプロフェン処置）のラットは、末梢性チアノーゼや下痢を示さなかった。

さらに、ＴＮＦ処置前のインドメタシンまたはイブプロフェンの投与は、ＰＧＥ，のＤＨＫ−ＰＧ代謝産物の血漿レベルに反映されるものとしてＴＮＦ単独で処置したラットに見られるプロスタグランジン生産の大幅な増加を完全に遮断した．第３図に示すように、この代謝産物のレベルは、インドメタシンおよびイブプロフェン処置ラットでは極めて低かった。シクロオキシゲナーゼ阻害剤注射後３時間において、ＤＨＫ−ＰＣレベルは再び検出されるようになり正常値に近づくにも拘らず、ＴＮＦのみを用いて処置したラットのＤＨＫ−ＰＧルベルよりなお一層低かった。

群１のＴＮＦ処置ラットで見られる血漿グルコースレベルの２相的変化は、ＴＮＦ処置の前にインドメタシンまたはイブプロフェン注射を受けるラットでは見られなかった．第２図に示すように、インドメタシンを受けた群２のラットは血漿グルコースレベルの顕著な変化は全く示さなかった，ＴＮＦ処置前のイブプロフェン注射も血中グルコースの変化を減少させた．ＴＮＦ処置４時間後、イブプロフェンを受けたこれらのラットは、未処置対照ラットより約４０％低いグルコースレベルを有した．血中グルコースのこの減少は、ＴＮＦＩＩ独で処置された群１のラットで見られるものより一層小さい。

ＴＮＦ処置単独に伴う血液ｐＨ，ｐｃｏ２並びにＨＣＯ！レベルの顕著な変化は、ＴＮＦを用いる注射に先だってインドメタシンで処１したラットでは見られなかった。第４図に示すように、ＴＮＦを用いる注射に先だってインドメタシンを受けたラットの重炭酸塩（ＨＣＯ，）レベルは、ＴＮＦのみを受けた動物より５０％高かった。ＴＮＦ注射３時間後、インドメタシン処置ラットの動脈ｐｃｏ２およびｐＨは対照ラットのものと区別できなかった。

前記したようにＴ　Ｎ　、Ｆの副作用の低減が非ステロイド系抗炎症剤の１回の投与の結果得られたが、残存する副作用はＴＮＦ療法の過程に渡りその薬剤をくり返し投与することによりさらに低減または除去され得ると考えられる。

実施例２本実施例では、種々の形質転換セルラインに対するＴＮＦの細胞毒性および静細胞作用に対する非ステロイド系抗炎症剤の効果を調べた。第６図に示すように、培養腫瘍細胞（ヒーラ細胞）に対するＴＮＦの静細胞作用は、全てのプロスタグランジン合成を阻害するはずの濃度のインドメタシンの存在によって影響を受けなかった。

エル・フランセンら、Ｅｕｒｏｐ、Ｊ、Ｃａｎｃｅｒ　Ｃ１１ｎ、０ｎｃｏ＋、、２２．４１９−２６　（１９８６）に記載されたように、１０％ウシ胎児血清と２５μｇ／ｍｌゲンタマイシンとを含有するドルベッコの改変イーグル培地（ＤＭＥＭ）を用い、５％ｃｏ２の下３７℃でヒーラＤ９８／ＡＨ２細胞（イー・スクンブリソジ博士、イルビンのカリホルニア大学から最初は得たセルライン）を培養した。種々の濃度のＴＮＦまたはＴＮＦとインドメタシンを含有する標準マイクロタイクプレートに１０４細胞１０．２ｍｌ／穴をプレートした。３０００ｉ位／ｉｆおよび１単位／ｍｌまでの１７３＠釈の濃度でＴＮＦを試験した。

それぞれのＴＮＦ！！度について、５Ｘ１０−’Ｍ（プロスタグランジン合成を完全に遮断する濃度）および５Ｘ１０−’Ｍまでの１／３希釈の濃度でインドメタシンを試験した。３日後に細胞上清を除去し、０．５％クリスタル・バイオレフ）、８％（Ｖ／Ｖ）ホルムアルデヒド（４０％）　、　０．１７％Ｎ　ａ　Ｃ１並びに２２．３％（Ｖ／Ｖ）エタノールからなる溶液を用いてｌＯ分間染色することにより残存する細胞を定量した。その後水道水を用いて穴を完全に洗浄し、結合した色素を３３％酢酸（０，１ｍｌ／穴）中に熔解した。放出された色素を５５７ｎｍで分光光学的に測定した（コントロン分光光度計５ＬＴ２１０）。

結果を第６図に示すが、図中、細胞毒性の増加は０Ｄ−５７７値の減少に対応する。

マウス繊維芽細胞ラインＬ９２９およびヒト頚部カルシノーマ細胞ラインＭＥ− １８０についても同様の結果が観察された。

本実施例で示したように、インドメタシンのようなシクロオキシゲナーゼ阻害剤は、抗新生組織活性を妨害することな（高投与量のＴＮＦの有毒な効果を低減する。

本発明の幾つかの態様を前記したが、この基本的な構成を改変して本発明の方法および組成物を使用する他の態様を与え得ることは明らかである。したがって、本発明の範囲は、ここに記載する請求の範囲によって特定すべきであり、例として前記した特定の態様によらないことが理解され得る。

ＦＩＧ、２５土イ■支の吟回ＦＩＧ、３ＴＮメｂ１オ点＠；２゛檀ρ・）山ヒ」±Ｄ匹　」値　コ訓（＝Ｌ匹ユユヱ■１てドＦ（］　１）　ＯｊＯ：０．０５　４．２６：Ｏ，Ａｇ　５．７７：０．５１１０吟頗：とけるｆ・皮は、智ＦＪた１よ虚麹客歳Ａ収羊直卸；灯禾２　！ｆ項Ｉｌｌ芝辻す” ＦＩＧ、ム７ＮＦＣＪＯＢ）　７．５ｘ＝ｏ、ｏｘ　ｕ、ｚ：２．ｓ’　１１．１：０．９２’　ｐ＜ｏ、ｏｓ　（（イ、４　とｎｉ＃）２ｐ＜（ｌｏｔ　ＣＰＩ−Ａと／＋ＦＦ−秋）コ　ｐ＜０．０５　ｃ　ｍ−ｓ　どｒ　上業二一−−ヒ）ＦＩＧ、６手続補正書（，７ｉ′力昭和６３年２月ＪＯ日特許庁長官　吉　１）　文毅　殿１、事件の表示ＰＣＴ／ＵＳ　８７１０２６０２２、発明の名称３、補正をする者事件との関係　特許出願人代表者　プリントン、　ジ重イスＧ面）　（アメリカ金庫ｍ　（ほか１名）国際調査報告

Claims

【特許請求の範囲】

１．ＴＮＦとプロスタグランジン、プロスタサイクリンまたはトロンボキサン生合成を阻害する非ステロイド系抗炎症剤との組合せ。
２．非ステロイド系抗炎症剤がアセチルサリチル酸、サリチル酸メチル、サリチル酸ナトリウム、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、アパゾン、インドメタシン、スリンダク、トルメチン、メフェナム酸、イブプロフェン、ナプロキセン、フェノプロフェン、フルルビプロフェン、ケトプロフェン、リポコルテン並びにウロモジュリンよりなる群から選択される請求項１記載の組合せ。
３．ＴＮＦの量が約０．０１〜１．０ｍｇ／ｋｇ体重である請求項１記載の組合せ。
４．ＴＮＦが、形質転換細胞に対するＴＮＦの細胞毒性活性を特徴とする天然ＴＮＦ、組換えＴＮＦ並びにこれらの誘導体よりなる群から選択される請求項１記載の組合せ。
５．ＴＮＦが組換えＴＮＦである請求項４記載の組合せ。
６．薬学的に有効な量のＴＮＦとプロスタグランジン、プロスタサイクリン、またはトロンボキサン生合成を阻害する薬学的に有効な量の非ステロイド系抗炎症剤とを哺乳動物に投与する工程からなる、哺乳動物の悪性腫瘍性または非悪性腫瘍性新生組織性疾患の処置方法。
７．非ステロイド系抗炎症剤をアセチルサリチル酸、サリチル酸メチル、サリチル酸ナトリウム、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、アパゾン、インドメタシン、スリンダク、トルメチン、メフェナム酸、イブプロフェン、ナプロキセン、フェノプロフェン、フルルビプロフェン、ケトプロフェン、リポコルテン並びにウロモジュリンよりなる群から選択する請求項６記載の方法。
８．ＴＮＦの量を約０．０１〜１．０ｍｇ／ｋｇ体重とする請求項６記載の方法。
９．ＴＮＦを形質転換細胞に対するＴＮＦの細胞毒性活性を特徴とする天然ＴＮＦ、組換えＴＮＦ並びにこれらの誘導体よりなる群から選択する請求項６記載の方法。
１０．ＴＮＦを組換えＴＮＦとする請求項９記載の方法。
１１．哺乳動物をヒトとする請求項６記載の方法。
１２．処置する悪性腫瘍性疾患を悪性腫瘍性腫瘍原性または新生組織性細胞増殖、悪性腫瘍性血液性全身系疾患、カルシノーマ、ザルコーマ、ミエローマ、メラノーマ、リンホーマ並びにパピローマよりなる群から選択する請求項６記載の方法。
１３．悪性腫瘍性または非悪性腫瘍性新生組織性疾患を処置する薬学的に許容し得る組合せを製造するための桑学的に有効な量のＴＮＦとプロスタグランジン、プロスタサイクリンまたはトロンボキサン生合成を阻害する桑学的に有効な量の非ステロイド系抗炎症剤との使用。
１４．非ステロイド系抗炎症剤をアセチルサリチル酸、サリチル酸メチル、サリチル酸ナトリウム、フェニルブタゾン、オキシフェンブタゾン、アパゾン、インドメタシン、スリンダク、トルメチン、メフェナム酸、イブプロフェン、ナプロキセン、フェノプロフェン、フルルビプロフェン、ケトプロフェン、リポコルテン並びにウロモジニリンよりなる群から選択する請求項１３記載の使用。
１５．ＴＮＦの量を約０．０１〜１．０ｍｇ／ｋｇ体重とする請求項１３記載の使用。
１６．ＴＮＦを形質転換細胞に対するＴＮＦの細胞毒性活性を特徴とする天然ＴＮＦ、組換えＴＮＦ、並びにこれらの誘導体よりなる群から選択する請求項１３記載の使用。
１７．ＴＮＦを組換えＴＮＦとする請求項１６記載の使用。
１８．処置する悪性腫瘍性疾患を悪性腫瘍性腫瘍原性または新生組織性細胞増殖、悪性腫瘍性血液性全身系疾患、カルシノーマ、ザルコーマ、ミエローマ、メラノーマ、リンホーマ並びにパピローマよりなる群から選択する請求項１３記載の使用。