JPH01175999A - シクロトリフォスファゼン誘導体 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〈産業上の利用分野〉 本発明は、新規なシクロトリフォスフ７ノピン誘導体に
関する。更に詳しくは本発明は新規な、治療用生理活性
物質、水親和性高分子化シクロトリフオスファゼン誘導
体に関する。

〈従来の技術〉 疾患の治療に有効でありうる生理活性物質を生体く人や
動物）に投与する場合に、往々にして種々の障害のため
に期待した効果がみられないことがある。

例えば、経口投与された場合に、腸管からの吸収が不良
で期待した効果が現れないことがある。

又、生体内に吸収されるか、あるいは注射等の方法で直
接生体内に投与されても、生体内の分解酵素等の作用に
より急速に分解され、効果が持続しないことがある。更
には生理活性物質がペプチドホルモン等の場合には、時
に抗体が産生きれ重篤な副作用をおこすことがある。

これらの障害に対して多くの回避方法が考案されてきた
が、治療用生理活性物質を適当な水親和性高分子に結合
させる方法が有効であることが近年知られてきた。

例えばデキストランにＢｒＣＮを用いて結合されたヘモ
グロビンは、代用血液として身体中に適当な期間滞留す
ることが開示されている（特開昭５２−５１０１６号公
報参照）。更に、ポリエチレングリコールで直接修飾さ
れたペプチドホルモン類は、その抗原性が低下すること
が開示されている（特開昭６１−１７８９２６号公報参
照）。

しかるに、これら治療用生理、活性物質を直接水親和性
高分子と結合させる方法は、その反応の際に副生成物の
生成が多いこと、反応収率が低いこと、結合された生理
活性物質の結合物からの放出速度のコントロールが難し
いこと等の欠点を有している。　　　− これらの問題を解決するために多くの方法が提案された
が、それらの中でも水親和性高分子と治療用生理活性物
質との間に塩化シアヌルを導入する方法が優れていると
いわれ、多くの治療用生理活性物質と塩化シアヌルを導
入したポリエチレングリコール（活性化ポリエチレング
リコールといわれている）との反応生成物が開示されて
いる（例えば、特公昭６０−２３０８４号公報では活性
化ポリエチレングリコール化ヘモグロビンの例が、又、
特開昭６２−５５０７９号公報では活性化ポリエチレン
グリコール化ウリカーゼが、更には特開昭６２−１１５
２８０号公報では活性化ポリエチレングリコール化スー
パオキシドディスムターゼ（ＳＯＤ＞が開示されている
）。

〈発明が解決しようとする問題点〉 しかし、塩化シアヌルで活性化されたポリエチレングリ
コール等の水親和性高分子により治療用生理活性物質を
修飾する方法は、第一に、塩化シアヌル基自体の安全性
が不明で、かつ生体内における代謝１分解過程も不明で
あること、分解生成物の安全性についても未解明である
こと等のため、その使用には慎重を期す必要がある。第
二に、塩化シアヌルを用いると治療用生理活性物質、特
に酵素の活性が大幅に低下してしまうという問題点があ
る。。

く問題を解決するための手段〉 本発明者らは、上記のような従来技術の問題点に鑑みて
鋭意検討の結果、ポリエチレングリコール等の水親和性
高分子により治療用生理活性物質を修飾する場合に、水
親和性高分子と治療用生理活性物質との間に塩化シアヌ
ルを導入するかわりにシクロトリフ−オスファゼンを導
入することにより安全性が高く、治療用生理活性物質の
活性が低下せず、更に生体内での治療用生理活性物質の
動態を制御しうる治療用生理活性物質の水親和性高分子
誘導体を製造しうろことを知見し、本発明に到達したも
のである。

本発明によって、■安全性が高い■生理活性の高い及び
／又は■生体内での動態が制御可能な新規な治療用生理
活性物質、水親和性高分子誘導体のシクロトリフオスフ
ァゼン類が提供される。

シクロトリフオスファゼンは無機高分子物質ポリフォス
フアゼンの最小構成単位である。このシクロトリフオス
ファゼンは窒素とリンとからできているため生体内での
安全性が高いことから既にこれに治療用生理活性物質を
結合させる試みが知られている。

例えば、アルキル化剤と結合したシクロトリフオスファ
ゼンとしてシクロトリフオスファゼンのアジリジン誘導
体が知られている（Ｌａｂｒｒｅ、Ｊ、Ｆ。

ら、　Ｅｕｒ、　Ｊ、　Ｃａｎｃｅｒ　１９７９．１５
（５）　６３７−４３）。しかしながら、これらの化合
物のリン原子に水親和性高分子が結合した誘導体は知ら
れていない。

又、例えば、ＵＳＰ　４，２３９，７５５号明細書には
下記式［ｎ］で表わされるステロイド化シクロトリフオ
スファピン類が開示されている。

上記式［■］でＲ１は３又は１７−ヒドロキシステロイ
ド残塁でありＲ２はアルキル基である。しかしながら同
明細書には、ステロイド残基が結合しているリン原子以
外のリン原子の置換基として水親和性高分子を結合させ
る概念は全く開示されていない。

又、ＵＳＰ　４，４９５，１７４号明細書には局所麻酔
剤を結合したシクロトリフオスファゼンあるいはポリフ
ォスフアゼンが開示されている。しかしながら、開明Ｉ
Ｉ書にはアミノ基を有する局所麻酔剤でシクロトリフオ
スファゼンの塩素基を置換する方法は開示されてはいる
ものの、未置換の塩素基の取扱いについては何ら記載さ
れておらず、ましてそこに水親和性高分子を結合させる
ことについては何の記載も示唆もなされていない。

更に、特開昭５６−３０４３２号公報には、エトフィリ
ン化ホスファゼンポリマー及びその製法が開示されてい
る。同明細書には、エトフィリン以外の置換基としては
炭素数１〜３個のアルコキシ基、プロピルアミノ基又は
フェノキシ基が記載されているのみであり、水親和性高
分子については何らの記載はない。

すなわち、これらの先行技術に記載されている治療用生
理活性物質は何れも低分子であり、酵素類、ポリペプチ
ド類、蛋白質類については全く開示されておらず、又水
親和性高分子類を結合することについては何の記載も示
唆もなされていないのである。

一方、ＵＳＰ　３，６７４，５０９号明細書には、反す
う動物用の蛋白質飼料として、シクロトリフオスファゼ
ンでクロスリンクさせた蛋白質が開示されている。開明
、ｌｌｌ１書の蛋白質シクロトリフオスファゼン誘導体
は、蛋白質をシクロトリフオスファゼンでクロスリンク
させて反すう動物の前胃での消化に対し抵抗性をもたせ
ているもので、蛋白質の生体内動態をかえるものではあ
っても、本発明の蛋白質をシクロトリフオスファゼン類
を介して水親和性高分子類と結合した誘導体とは全く異
なるものである。

しかして、本発明は下記式［Ｉ］ で表わされるシクロトリフオスファゼン誘導体である。

本発明の水親和性高分子とは、シクロトリフオスファゼ
ン環に結合しうるちのであればいずれでもよく、なかで
もその分子内に存する官能基、例えば水酸基、アミノ基
等を介して直接シクロトリフ４スフアゼン環のリン原子
と結合し得るような水親和性高分子残基が好ましく、又
その誘導体とは、これらの基を有していなくても、例え
ばアミド化等によってこれらの基を含むようにせしめら
れたような、あるいは架橋剤を水親和性高分子に結合せ
しめることによって、シクロトリフォスフ７ビン環と結
合し得るような水親和性高分子の誘導体をいう。

かかる水親和性高分子としては、例えばポリエチレング
リコール、モノメトキシポリエチレングリコール、ポリ
プロピレングリコール、エチレンオキサイドとプロピレ
ンオキサイドとの共重合体。

デキストラン、イヌリン、プルラン、コンドロイチン、
ヒアウロン酸、カルボキシメチルセルロース、ヒドロキ
シエチル澱粉、ポリ乳酸、ポリグリコール酸、乳酸とグ
リコール酸との共重合体、ポリリジン、Ｄ−グルタミン
酸とＤ−リジンの共重合体、α、β−ポリ［（２−ヒド
ロキシエチル）−ＤＬ−アスパラギン酸アミド］、アル
ブミン。

グロブリン等及びこれらの誘導体等が挙げられる。

又、前述の水親和性高分子の誘導体に水親和性高分子と
しては、例えばスチレン−マレイン酸共手合体、ジビニ
ルエーテル−無水マレイン酸共重合体等の水親和性高分
子が挙げられる。これらの水親和性高分子は単独で用い
られてもよいし、二種以上が混合されていてもよい。

これらの水親和性高分子類とシクロトリフオスファゼン
環とは、ポリエチレングリコール、モノメトキシポリエ
チレングリコール、ポリプロピレングリコール、エチレ
ンオキサイドとプロピレンオキサイドとの共重合体、デ
キストラン、イヌリン等の水酸基をもつ水親和性高分子
化合物（−数式Ｘ−０Ｈ）ではシクロトリフオスファゼ
ン環のＰ原子と、Ｐ−０−Ｘなるエーテル結合を形成し
、ポリリジン、アルブミン、グロブリン等のアミン基を
もつ水親和性高分子化合物（−数式Ｘ−ＮＨ２）では、
シクロトリフオスファゼン環のＰ原子とＰ−ＮＨ−Ｘな
る結合を形成する。

これらの水親和性高分子類の分子量は、水親和性高分子
の種類により異なるので一概に規定することはできない
。

ポリエチレングリコール、モノメトキシポリエチレング
リコール、ポリプロピレングリコール等では３００〜３
０．０００．デキストラン、イヌリン、コンドロイチン
、ヒアウロン酸等では１，０００〜３．０００，０００
　、ポリ乳酸、ポリグリコール酸等ではｉ　、　ｏｏｏ
〜５０，０００が通常用いられる。

これらの中でもポリエチレングリコール、モノメトキシ
ポリエチレングリコール、ポリプロピレングリコールで
は分子量３００〜ｉｏ、ｏｏｏのものが好ましい。又デ
キストランでは分子１５，０００〜１００、０００のも
のが好ましい。

本発明の治療用生理活性物質とは、人間あるいは動物の
疾病の治療を目的として投与される生理活性物質であり
、アミノ酸、糖類等のような栄養補給に用いられるよう
な物質は含まれない。これらの治療用生理活性物質はシ
クロトリフオスファゼン環に結合しうれば如何なるもの
でもよい。従って、分子内に水酸基、アミノ基、イミノ
基、チオール基等を有する治療用生理活性物質又はその
誘導体であればよい。これらの治療用生理活性物質とし
ては、具体的にはペプチドホルモン類、酵素類、蛋白質
類及び各種の低分子物質が挙げられる。ペプチドホルモ
ン類としては、２個以上のアミノ酸がペプチド結合によ
って結合したもので、ヒトを含む各種動物由来のもの１
合成品、遺伝子工学産物等何れでもよく、更にこれらと
類似構造を有し、同様の生理活性を有する物質をも包含
する。具体的には、インスリン、ＡＣＴＨ，ガストリン
、カルシトニン、エンドルフィン、グルカーゴン、ソマ
トスタヂン、ウロガストロン、成長ホルモン放出因子（
ＧＲＦ）、コルチコトロピン放出因子（ＣＲＦ）、ナト
リウム利尿ペプチド、ＦＳＨ，Ｌ［ＲＨ，パップレシン
、エンケファリン。

インターフェロン、インターロイキン類、ＴＮＦ。

プロティンＣ等が挙げられる。

酵素類としては、ヒトを含む各種動物由来のもの９合成
品、遺伝子工学産物等何れでもよく、更にこれらと類似
構造を有し、同様の生理活性を有する物質をも包含する
。具体的には、スーパーオキシドディスムターゼ、ペル
オキシダーゼ、アスパラギナーゼ、グルタマーゼ、アル
ギナーゼ、アルギニンデアミナーゼ、ＲＮアーゼ、ヘキ
ソサミンダーゼＡ、ヘキソサミンダーゼＢ、アルファー
グルコシダーゼ、スフインゴミエリナーゼ、アリルスル
フエターゼ、ウリカーゼ、バトロキソビン。

ストレプトキナーゼ、■ラスターゼ、β−グルクロニダ
ービ、β−グルコシダーゼ、アデノシンデアミナーゼ、
ウロキナーピ、ビリルビンオキシダーゼ等が挙げられる
。

蛋白質類としては、ヒトを含む各種動物由来のもの２合
成品、遺伝子工学産物等何れでもよく、更にこれらと類
似構造を有し、同様の生理活性を有する物質をも包含す
る。具体的には、アルブミン、ヘモグロビン、フィブリ
ノーゲン、プラスミノーゲン、ＴＰＡ　（組織型プラス
ミノーゲンアクチベーター）、免疫グロブリンＧ、α２
−マクログロブリン、ラクトフェリン、ブタフサ花粉等
が挙げられる。

各種の低分子物質としては、制癌剤；催眠鎮静剤：鎮う
ん剤；抗てんかん剤；解熱鎮痛消炎剤；精神神経用剤；
局所麻酔剤二面弛緩剤；自律神経用剤；感覚器官用剤；
強心剤、不整脈治療剤、降圧利尿剤、血管拡張剤等の循
環器用剤；鎮咳去痰剤；副腎皮質ホルモン剤、性ホルモ
ン剤等のステロイド類；止血剤；化学療法剤：抗生物質
：その伯の薬剤が挙げられる。

制癌剤としては、メルフアラン、ｐ−フェニレンジアミ
ンマスタード、りロラムブシル、　Ａｒａ　−Ｃ，メト
トレキサート、メルカプトプリン、マイトマイシンＣ，
ベプレオマイシン、ダウノルじシン、ドキソルごシン、
５−ＦＵ等が挙げられる。

催眠鎮静剤としては、ウレタン、エチナメート。

プロムワレリル尿素、ブロムジエチルアセチル尿素等が
挙げられる。

鎮うん剤としては、メシル酸ベタヒスチン等が挙げられ
る。

抗てんかん剤としては、アミノグルテチミド。

フエナセミド、エチルフエナセミド、カルバマビピン、
スルヂアム、アセタゾラミド、γ−アミノ酪酸及びその
エステル等が挙げられる。

解熱鎮痛消炎剤としては、５−アミンサリチル酸、アセ
トアミノフＩン、オキシフェンブタシン等が挙げられる
。

精神神経用剤としては、レボドパ、メタンフェタミン、
シチコリン、デシプラミン、バクロフェン、スルピリド
等が挙げられる。

局所麻酔剤としては、プロ力イン、クロロプロ力イン、
アミノ安息香酸エヂル、プロパラ力イン。

プロポキシカイン、テトラカイン、ブテタミン。

ペンシカイン等が挙げられる。

筋弛緩剤としては、メトカルバモール、ステラメート。

フェンプロバメート、カリソブロドール。

カルバミン酸クロルフェネシン等が挙げられる。

自律神経用剤としては、メタラミノール、フェニレンフ
リン、ノルフェネフリン、エチフェルミン、エチレフリ
ン、スプリフエン、アンフェタミン、メタンフェタミン
、フェニルプロパツールアミン、メトキサミン、エルゴ
メトリン、ジヒドロエルゴタミン、フロプロピオン等が
挙げられる。

感覚器官用剤としては、ジクロフェナミド、アセタゾラ
ミド、メタシラミド等が挙げられる。

強心剤、不整脈治療剤としては、エトフィリン。

ピンドロール、アルプレノロール等が挙げられる。

降圧利尿剤としては、ヒドララジン、メチルドパ、クロ
ロチアジド、ヒドロフルメチアジド、トリアムテレン等
が挙げられる。

血管拡張剤としては、トリメタジジン、ナイリドン、イ
ソクスプリン等が挙げられる。

鎮咳去痰剤としては、イソプロテレノール、テルブタリ
ン、サルブタモール等が挙げられる。

副腎皮質ホルモン剤・性ホルモン剤としては、３位ある
いは１７位が水酸基であるステロイドである、デソキソ
エストロン、エストロン、プレグナノロン、エストラジ
オール−３−メチルエーテルやテストステロン、エチニ
ルエストラジオール。

プレドニゾロン、トリアムシノロン、トリアムシノロン
アセトニド等が挙げられる。

止血剤としては、ナフチオニン酸ナトリウム。

サイクロナミン、塩化トロニウム、ε−アミノカプロン
酸、トラネキサム酸、カルバゾクロム等が挙げられる。

化学療法剤としては、スルファミン、スルファチアゾー
ル、スルファジアジン、スルファメラジン、スルフイソ
キサゾール、スルフイソミジン。

スルファメチゾール、スルフ７メトキシピリダジン、ス
ルファモノメトキシン、スルファジメトキシン、スルフ
ァフエナゾール、イソニアシト、チアゾスルフォン、ア
マンタジン、５−フルオロサイトシン、マフエニド、フ
ルシトシン等が挙げられる。

抗生物質としては、アンピシリン、アモキシシリン、セ
ファログリシン、セファレキシン等が挙げられる。

その他の薬剤としては、アデノシン、アデノシンミリン
酸二ナトリウム。グルタチオン、シクロスポリン、ガベ
キサート、カモスタット、ナファモスタット等が挙げら
れる。

以上に記載した低分子物質は何れも分子内にシクロトリ
フオスファゼン環と結合しうる構造を有する化合物であ
るが、そのような構造を有しない化合物であってもシク
ロトリフオスファゼン環から適当なスペ、−サーを出し
、そのスベー１ノーに結合しうる化合物であってもかま
わない。例えば、シクロトリフオスファゼンのＰ原子か
らＰ−０べ戸）ＣＨｚＮＨｚとなるようなスペーサーを
出せば、このスペーナーのアミノ基と反応しつる基を有
する低分子物質であればよいことになる。

このような例としては、サカチル酸、メフェナム酸、イ
ンドメサシン、フルフェナム酸、ナプロキセン、イブプ
ロフェン、ニコチン酸、カルベニシリン、Ｌ−ＤＯＰＡ
、アスピリン、Ｔ−アミノ酪酸、プロスタグランジン類
等が挙げられる。

本発明で用いられる、シクロトリフオスファゼン環の、
水親和性高分子類と治療用生理活性物質を除いた部分は
、−〇Ｒ７（Ｒ７がＣ１〜Ｃ２４のアルキル基であるア
ルコキシ基又はチロシン残基）あるいは−Ｎ’ＨＲｓ　
　（アミノ酸残基又はＲ８がＣ−Ｃ２４のアルキル基）
あるいは−ＮＲ９ＲＩ０（Ｒ９、Ｒ＋ｏはＣ１〜Ｃ２４
のアルキル基）あるいは−Ｒ１１（Ｒ１１は℃１〜Ｇ２
４のアルキル基）あるいは−×（ハロゲン原子）の何れ
かであればよいが、具体的にはメトキシ基（−ＱＣ市）
、メチルアミノＩ　（−Ｎ　ＨＣＨ３）　、グリシンエ
チルエステル残基（−ＮＨＣＨｚ−ＣＯＯＣｚＨｓ　）
、ジメチルアミノ基（−Ｎ　（ＣＨ３）　２　）　、メ
チル基（−ＣＨ３）、フッ素（−Ｆ）、塩素（−α）、
臭素（−Ｂｒ）等が挙げられ、中でもグルシンエチルエ
ステル残基が好ましい。

本発明の化合物は、例えば以下の方法で製造することが
できる。先ず、水親和性高分子とへキサハロゲン化シク
ロトリフオスファゼンとを溶媒中で反応させ、再結晶後
ケル清適して、水親和性高分子置換シクロトリフオスフ
ァゼン類を製造する。

用いる水親和性高分子とへキサハロゲン化シクロトリフ
オスファゼンの量比は、シクロトリフオスファゼン環に
導入しようとする水親和性高分子量による。通常シクロ
トリフオスファゼン環の６個のハロゲン原子の１〜３個
を置換するに足る量の水親和性高分子が用いられる。反
応性の差により置換個数の当量よりも大過剰の水親和性
高分子が用いられることもある。水親和性高分子類とし
ては、水酸基をもつ水親和性高分子類として、ポリエチ
レングリコール、モノメトキシポリエチレングリコール
、ポリプロピレングリコール、エチレンオキサイドとプ
ロピレンオキサイドとの共重合体、デキストラン、イヌ
リン、プルラン、コンドロイチン、カルボキシメチルセ
ルロース、ヒドロキシエチル澱粉、ポリ乳酸、ポリグリ
コール酸。

乳酸とグリコール酸との共重合体及びこれらの誘導体が
又、アミノ基をもつ水親和性高分子類としてポリリジン
、Ｄ−グルタミン酸とＤ−リジンの共重合体、α、β−
ポリ［（２−とドロキシエチル）−ＤＬ−アスパラギン
酸アミド］、アルブミン、グロブリン及びこれらの誘導
体等が挙げられる。

水酸基をもつ水親和性高分子類は水酸基の水素原子をア
ルカリ金属原子に置換したアルコラードにした方が望ま
しい場合もある。

ヘキサハロゲン化シクロトリフオスファゼンとしては、
ヘキサクロロシクロトリフオスファゼン。

ヘキサフルオロトリフオスファゼン、ヘキサブロモシク
ロトリフオスファゼン等が挙げられる。なかでもヘキ゛
す゛クロロシクロトリフオスファゼンが望ましい。

使用する有機溶媒としては、ベンゼン、トルエン、テト
ラハイドロフラン、ジオキサン、ジメチルホルムアミド
等の非水？Ｈ媒あるいはジメチルホルムアミド−水混合
溶媒が挙げられる。使用される水親和性高分子類の脂溶
性が高い場合においては非水溶媒を、又水親和性高分子
類の脂溶性が低い場合においてはジメチルホルムアミド
−水混合溶媒が用いられる。

反応温度はＯ℃〜還流温度であり、反応時間は反応物質
によって異なるが通常１〜２４時間である。

反応が脱塩酸反応である場合は、塩基の添加が望ましい
。用いられる塩基としては炭酸ナトリウム。

トリエチルアミン、ピリジン、ジメヂルアミノビリジン
等が挙げられる。

ゲルリン濾過にはセファデックスＬＨ−２０、１１トロ
０　。

Ｇ−１００等の通常用いられるゲルが使用される。グル
ｉ濾過によって、シクロトリフオスファゼン環が所望の
個数水親和性高分子によって置換された水親和性高分子
置換シクロトリフオスファゼンが分離される。水親和性
高分子の置換個数は１〜３個が望ましい。

次に、こうして製造された水親和性高分子置換シクロト
リフオスファゼン類と治療用生理活性物質とを溶媒中で
反応させ、水親和性高分子及び治療用生理活性物質１分
子シクロトリフオスファゼン類を製造する。

用いる水ＶＡ和性高分子置換シクロトリフｔスフ７ゼン
類と治療用生理活性物質の量比は治療用生理活性物質に
よって大きく異なる。治療用生理活性物質が高分子量の
ペプチドホルモン類、酵素類及び蛋白質類である場合は
、シクロトリフオスファゼン環と反応するアミノ基を１
分子内に複数個持つので、それらの治療用生理活性物質
１分子につき複数個の水親和性高分子置換シクロトリフ
オスファゼンが結合しうる。従って、そのような場合通
常治療用生理活性物質の遊離アミノ基１個に対し、１〜
１　、０００倍、好ましくは５〜２００倍当量の水親和
性高分子置換シクロトリフオスフッ・ゼンが使用される
。

一方、治療用生理活性物質が低分子量のペプチドホルモ
ン類やその他の低分子化合物である場合は、水親和性高
分子置換シクロトリフオスファゼン１分子につき複数個
の治療用生理活性物質が結合しうる。従って、そのよう
な場合、通常水親和性高分子置換シクロトリフオスファ
ゼンに対し１〜１００倍、好ましくは１〜５０倍当量の
治療用生理活性物質が使用される。

反応は基本的には前期の水親和性高分子置換シクロトリ
フオスファゼン類の製造方法と同様である。治療用生理
活性物質の脂溶性が高い場合は非水溶媒で、又、治療用
生理活性物質の脂溶性が低い場合は含水溶媒で反応され
る。用いられる含水溶媒としては、例えば水、０．１Ｍ
ホウ酸緩衝溶液（ｐＨ１０，０）　、ジメチルホルムア
ミド−緩衝溶液混合溶液が挙げられる。

反応温度はＯ℃〜還流温度であるが、治療用生理活性物
質がペプチドホルモン類，酵素類，蛋白質類の場合は失
活を防ぐためになるべく低温、望ましくは０〜４０℃で
行うのが好ましい。反応時間は反応物質によって異なる
が１〜２４時間である。

反応後、ゲル）濾過及び限外ｉ濾過を行い、反応生酸物
である所望の個数治療用生理活性物質が導入された水親
和性高分子、治療用生理活性物質両置換シクロトリフｔ
スフアゼン類を単離する。

好ましくは、最後にこうして製造された水親和性高分子
、治療用生理活性物質両置換シクトロリフォスファゼン
類の未置換ハロゲン原子をアルコキシ基、二級アミノ基
、三級アミノ基、アルキル基等で置換する。

アルコキシ基で置換する場合は、該両置換シクロトリフ
オスファゼン類とナトリウムアルコキシド、例えばナト
リウムメチラートとを有機溶媒中で反応させる。又、二
級アミン基で置換する場合は該両置換シクロトリフオス
ファゼンと一級アミン、例えばメチルアミン、エチルア
ミン、グリシンエチルエステル等とを有機溶媒中でトリ
エチルアミンの存在下反応させる。又、三級アミノ基で
置換する場合は該両置換シクロトリフオスファゼンと二
級アミン、例えばジメチルアミン等とを有機溶媒中でト
リエチルアミンの存在下反応させる。

又、アルキル基で置換する場合はグリニヤール試薬で反
応させる。

反応後グル濾過及び限外ン濾過を行い、本発明の治療用
生理活性物質のシクロトリフオスファゼン誘導体を得る
。

上述の方法は、シクロトリフオスファゼン環に対し、最
初に水親和性高分子を、次に治療用生理活性物質を、最
後にアルコキシ基等のその他を導入する方法であるが、
治療用生理活性物質とアルコキシ基等のその他との順序
をかえて導入する方法であってもよい。

本発明の化合物は通常公知の担体、希釈剤を用い適宜医
薬組成物として経口的又は非経口的に哺乳動物（サル、
イヌ、ブタ、ウサギ、マウス、ヒト等）に投与すること
ができる。

経口的に投与する場合には錠剤、顆粒剤、硬カプセル剤
、軟カプセル剤、液剤、散剤等の通常の剤型に製剤化さ
れる。その場合、賦形剤、結合剤。

崩壊剤、滑沢剤等の添加物とともに製剤化される。

非経口的に投与する倍には、注射剤、外用剤（軟膏剤、
クリーム剤、テープ剤、坐剤、経鼻剤。

口腔用剤）等の通常の剤型に製剤化される。その場合、
賦形剤、溶剤９分散剤、滑沢剤等の添加物とともに製剤
化される。

〈発明の効果〉 本発明により、第一に治療用生理活性物質の生体への吸
収率が増加した、第二に生体内半減期が延長された、第
三に抗原性等の副作用が軽減された、第四に疾病部位に
貯苗性が増強された、第五に安全性の高い、第六に活性
が保持された等の優れた特徴を有する治療用生理活性物
質、水親和性高分子化シクロトリフオスファゼン誘導体
が提供される。

上述のような特徴は、治療用生理活性物質の有効性、安
全性を向上させることになり、かような治療用生理活性
物質のシクロトリフオスファゼン誘導体を提供すること
は医療上極めて意義が大きい。

本発明の特徴について具体的に説明する。

第一に、本発明の化合物の安全性についてであるが、本
発明の化合物を構成する部分の内、水親和性高分子、治
療用生理活性物質が安全でおることはいうまでもない。

又、その他のシクロトリフオスファゼン環を置換する残
基は、通常のアルコキシ基、アミノ基、イミノ基、アル
キル基から選ばれており、特にアミノ酸残塁を用いれば
安全であることはいうまでもない。従って安全性が問題
となるのはシクロトリフオスファゼン環そのものである
。しかし、これについては、１１．Ｒ，Ａｌ１ｃＯｃｋ
らの文献（Ｉｎｏｒｇ、　Ｃｈｅｍ、　１９Ｂ２．２１
．５１５−５２１）により、水性溶媒中でアンモニアと
リン酸に分解されることが示されている。従って、本発
明の化合物も生体内で代謝を受けていく過程で最後には
シクロトリフオスファゼン環が加水分解されてアンモニ
アとリン酸に分解されるのは明らかである。

そして、アンモニアとリン酸が通常の濃度で安全である
ことはいうまでもない。従来の塩化シアヌルを用いた水
親和性高分子の各種治療用生理活性物質誘導体において
は塩化シアヌルの代謝過程が全く不明であるのに対し、
本化合物の安全性がこのように優れていることは容易に
理解できよう。

第二に、本発明の治療用生理活性物質誘導体の生理活性
が従来の塩化シアヌルを用いた治療用生理活性物質誘導
体の生理活性より高い点については、以下に述べる実施
例に明らかなように、本発明によるＳＯＤ誘導体のＳＯ
Ｄ活性を従来法と比較した結果、従来法よりも高い活性
を保持していたことから理解できよう。

第三に、実施例に詳細に述べられているように、本発明
の生体内での動態の制御については、マイトマイシンＣ
の場合について調べた。すなわち、シクロトリフォスフ
７ゼンの６置換基をモノメトキシポリエチレングリコー
ル１．グリシンエイチルエステル３．マイトマイシンＣ
１で置換し、残りの１個をアルキル基の艮ざが異なるア
ルコキシ基で置換したシクロトリフオスファゼン誘導体
を製造し、水中でそれから遊離されるマイトマイシンＣ
の遊離速度を測定した。その結果アルキル基の長さが長
い程マイトマイシンＣの遊離速度は小さいことが明らか
となった。この結果は本発明の化合物を生体内に投与し
た時の治療用生理活性物質の放出速度を自由に制御でき
うろことを示している。

〈実施例〉 以下に本発明を実施例により更に詳細に説明するが、本
発明はこれらに限定されるものではない。

実施例１ モノメトキシポリエチレングリコール（ＰＥＧ）。

グリシンエチルエステル化シクロトリフｔスフアゼン−
３ＯＤの製造 （ｉ）　　モノメトキシＰＥＧのナトリウムアルコラー
ドの製造 モノメトキシＰＥＧ　（平均分子量５，０００）　５０
ｇをテトラハイドロフラン（ＴＨＦ　）　３００　ｍＡ
中に溶解し、水素化ナトリウム０．２４ｇを加えて還流
する。水素の発生が止むまで反応を続けた。

（ｉｉ）　　モノメトキシＰＥＧ−シクロトリフオスフ
ァゼンの製造 続いて、上記の反応液に、ヘキサクロロシクロトリフオ
スファゼン３．５ｇをＴＨＦｌｏｏｍｆｆに溶解した溶
液を加え室温で２時間反応した。反応終了後生成したＮ
ａαを）濾過して取り除いた。

（ｉｉｉ）　　モノメトキシＰＥＧ、グリシンエチルエ
ステル−シクロトリフォスフ７ゼンの製造 続いて上記のか液を５℃に冷却し、そこへグルシンエチ
ルエステル（Ｎｌ２−ＣＨ２−ＣＯＯＣ２Ｈ５）　ｓ、
１８９をＴＨＦｌｏｏｄに溶解した溶液を加え、更にト
リエチルアミン６．００（］を添加して３時間反応させ
た。反応後生成した沈澱物（トリエチルアミン塩酸塩）
を濾過して除き、炉液を濃縮し、残渣をクロロホルム−
ヘキサン（１：１）溶液２００　ｒｆｌｌに溶解した。

この溶液をセファデックスＬＨ−２０（ファルマシア社
製）のカラム（５ｘ　７３ｃｍ）のゲル濾過によって精
製して主成分を分離し溶媒を留去して乾固物的３５９を
得た。本生成物中のαを定量したところシクロトリフオ
スファゼン環１つに対し１原子の割合であった。

（ｉｖ）　　モノメトキシＰＥＧ、グリシンエチルエス
テル−シクロトリフオスファゼンの５ＯＯ＝導体の製造 上記で１ｑられた乾固物１．５ｇ、及びＳＯＤ　（日本
ケミカルラ１ナーチ■製）　１５ｍ（］を０．１Ｈホウ
酸緩衝液、　ｐＨ９，０の５．０ｍｌ中で、４℃、２時
間反応させた後０．　ＩＮリン酸緩衝液、　ｐＨ７，０
を３０ｄ加え反応を停止させ、限外）濾過（アミコン社
製、膜Ｙ）ｌ−１０）で未反応のＰＥＧ化シクロトリフ
オスファゼン類を除去し、濃縮液２．０ｄをセファクリ
ルＳ−１００（ファルマシア社製）のカラム（５×７３
ｃｍ）のゲル）濾過によって’Ｍ”ｌＪし、モノメトキ
シＰＥＧ、グリシンエチルエステル化−シクロトリフオ
スファゼン−３ＯＤとして約１５ｍｇを１９だ。１ｑら
れた生成物は元素分析、　ｎｍｒスペクトル、　ｍａｓ
ｓスペクトルの測定により、シクロトリフオスファゼン
環の６ケ所の置換基の内１つがモノメトキシＰＥＧ、１
つがＳＯＤ、残りの４つがグリシンエチルエステルであ
ることが確かめられた。得られたモノメトキシＰＥＧ−
シクロトリフオスファゼン−３ＯＤはＳＯＤの７−１２
残塁のアミノ基が修飾されており、ＳＯＤ活性はもとの
約７０％程度になった（詳細は下記の検討を参照）。

得られたＳＯＤ誘導体について次の実験を行った。

■　ＳＯＤ活性の測定 得られた本化合物のＳＯＤ活性をチトクロームＣの還元
を利用する方法（生化学工業■Ｅｎｚｙｍｅ　Ｄａｔａ
　５ｅｅｔ　Ｌｉｂｒａｒｙ　Ｎｏ、６８に記載の方法
）で測定し未修飾のＳＯＤの活性と比較した。

同時に対照例として塩化シアヌルを用いたＳＯＤのＰＥ
Ｇ誘導体のＳＯＤ活性を比較した。塩化シアヌルを用い
たＳＯＤのＰＥＧ誘導体は下記の方法で製造した。

モノメトキシＰＥＧ　（平均分子ｉ５，０００）４０（
＋と塩化シアヌル０．７３！；ｌをベンピン１５０　ｄ
中でモレキュラーシーブ３Ａ　７ｇと炭酸ナトリウム１
５Ｃ１の存在下８０℃で２０時間反応させた。

反応終了後沈澱物を濾過して除き、次いで石油エーテル
を加えてモノメトキシＰＥＧ生塩化シアヌルを沈澱させ
た。これを石油エーテルでよく洗浄後乾燥して生成物１
０ｇを得た。

（ｑられた生成物１．５（１，及びＳＯＤ　（日本ケミ
カルリサーチ１１）１５ｍｇを０．１Ｈホウ酸緩衝液ｐ
１１９．０の５．０ｒｄｌ中で４℃２時間反応させた後
、０．１）１リン酸緩衝液ｐＨ７，０を３０ｄ加えて反
応を停止させ、限外）濾過（アミコン社製、膜７ト１０
）で未反応のモノメトキシＰＥＧ−Ｗ化シアヌルを除去
し、濃縮液２．０ｄをセファクリルＳ−１００（ファル
マシア社製）のカラム（５Ｘ　７３Ｃｍ）のゲル）濾過
によって精製し、凍結乾燥してモノメトキシＰＥＧ−塩
化シアヌル−８ＯＤとして約１５ｍｇを得た。ｊｑられ
た化合物はＳＯＤの７−に残塁のアミノ基が修飾されて
いた。

上記で得られた実施例１と対象令について、ＳＯＤ活性
の相対比較結果を第１表に示した。

第１表より本発明のＳＯＤ誘導体の方が従来の塩化シア
ヌルを用いた誘導体よりもＳＯＤ活性が高いことがわか
る。

第１表 木床修飾の活性を１００とづ゛る。

■　血中半減期の測定 本発明の化合物と未修飾ＳＯＤの血中半減期をラット（
各３匹）に静注し、経時的に尾静脈より採血して血漿中
のＳＯＤ活性を上記の方法により測定することにより比
較した。

得られた結果を第２表に示す。

第２表 第２表に示す如く本発明の化合物の血中半減期が著しく
延長していることがわかる。

■　免疫原性 本発明の化合物（実施例１）と未修飾ＳＯＤとの各々Ｓ
ＯＤとして２０μｇ量をフロイント完全補助液（Ｆｒｅ
ｕｎｄ’ｓ　ｃｏｍｐｌｅｔｅ　ａｄｊｕｖａｎ↑）（
ＦＣＡ）で乳濁化したのちＡ／Ｊマウスの腹腔内へ投与
（０，２＃１Ｉ２）　ｂ、その後更に、１４日目、２８
日目に追加投与を行った。最初の投与口から７日目毎に
マウス眼窩静脈から採血し、その血清について、ラット
を用いて、予め希釈しておいた血清を成因注射（０，１
ｍｆりをしておき、その４時間後に５ＯＤ０．５ｍｇと
エバンスブルー２０ｍ（］の混液２ｄを静脈注射し、色
素の血管透過性をもって判定する受身皮膚アナフィラキ
シ−（Ｐａｓｓｉｖｅ　Ａｎａｐｈｙｌａｘｉｓ。

ＰＣＡ）反応による抗体産生の評価を行った。

結果を第３表に示す。表中の数値はＰＣＡ反応が陽性で
あった血清の最大希釈倍数で表示した。

第３表 第３表の結果より、未修飾ＳＯＤに対しては抗体産生が
認められたが、本発明の化合物に対しては全く認められ
なかった。

■　十二指腸からの吸収性 本発明の化合物及び未修飾ＳＯＤを各々ＳＯＤ活性とし
てｉｏｏｍｇ　、’にｇを２０時間絶食したラット（Ｓ
、　Ｏ，雄性、６週令）に十二指腸投与し、投与後の血
漿中ＳＯＤ活性を測定した。

結果を第４表に示す。

第４表 第４表の結果は、本発明の化合物によりＳＯＤが経口投
与で吸収される可能性を示唆するものである。

実施例２ モノメトキシＰＥＧ、グリシンエチルエステル−シクロ
トリフオスファゼン＝ＳＯＤの製造実施例１と同じ化合
物を別法で製造した例を以下に示す。

（１）　　モノメトキシＰＥＧ−シクロトリフオスファ
ゼンの製造 モノメトキシＰＥＧ　（平均分子量５，０００＞　５０
（１とへキサクロロシクロトリフオスファゼン３．５９
をベンゼン２００　Ｗｉｌ中でモレキュラーシープ３Ａ
１０ｇと炭酸ナトリウム２０（］の存在下８０°Ｃで４
００時間反応せた。反応終了俊沈澱物を）濾過して除き
、次いで石油エーテルを加えてモノメトキシＰＥＧ化シ
クロトリフォスファピンを沈澱させた。これを石油エー
テルでよく洗浄後乾燥して生成物５２（Ｊを得た。本化
合物１分子中、α原子が５個ついていることがα分析よ
り確認された。

（ｉｉｌ　　モノメトキシＰＥＧ−シクロトリフオスフ
ァゼン−３ＯＤの製造 上記で得られた生成物１．５ｇ、及びＳＯＤ　（日本ケ
ミカルリサーチ（４１）１５ｍｇを０．１）１ホウ酸緩
衝液ｐＨ９，０の５．０ｒｎｌ中で３７℃、１時間反応
させた後、０．１８リン酸緩衝液ｐＨ７，０を３０ｄ加
えて反応を停止させ限外）濾過くアミコン社製、　ｒｌ
Ａ７）１−１０）で未反応のモノメトキシＰＥＧ−シク
ロトリフオスファゼンを除去し、濃縮液２．０ｍｌをセ
ファクリルＳ−１００（ファルマシア社製）のカラム（
５ｘ　７３ｃｍ）のゲルン濾過によって精製し、凍結乾
燥して、モノメトキシＰＥＧ−シクロトリフＡスフ７ゼ
ンーＳＯＤとして約１５ｍ（］を得た。

（ｉｉｉ）　　モノメトキシＰＥＧ、グリシンエチルエ
ステル−シクロトリフオスファゼン−３ＯＤの製造 上記で１９だモノメトキシＰＥＧ−シクロトリフオスフ
ァゼン−３ＯＤ　１５…Ｑを水に溶解し、これにクリシ
ンエヂルエステル１０ｍｇをトリエチルアミン１０ｍ（
ｌとともに加え、４０℃で２時間反応さ−ぜた。反応終
了後透析して低分子を除き、凍結乾燥して得た反応生成
物をセファクリル５−ｉｏ。

（ファルマシア社製）のカラム（５ｘ　７３ｃｍ）のゲ
ル）濾過によって精製し、凍結乾燥して実施例１の最終
生成物と同一の化合物を約５ｍＯ得た。

実施例３ モノメトキシＰＥＧ、グリシンエヂルエステル化シクロ
トリフォスフ７ゼンーインシユリンの製造（ｉ）実施例
１の（ｉ）〜（ｉｎ）と同様にしてモノメトキシＰＥＧ
、グリシンエチルニスデル化シクロトリフ汁スフアゼン
を得た。

（ｉｉ）　　モノメトキシＰＥＧ、グリシンエチルエス
テル化シクロトリフオスファゼンのインシュリン誘導体
の製造 上記で得られた乾固物１．５（１，及びブタインシュリ
ン１５０ｍ（Ｊ　ｅＯ，１）１ホウ酸緩衝液、　ｐＨ９
，０の５、Ｏｄ中で、４℃、２時間反応させた後０．１
Ｍリン酸緩衝液、　ｐＨ７，０を３０ｒＩ１１加え反応
を停止させ、限外ン濾過（アミコン社製、膜ＹＭ−１０
）で未反応のＰＥＧ化シクシクロトロフォスフアゼン類
去し、濃縮液２．ひｄをバイオゲルＰ−３０のカラム（
５Ｘ７３Ｃｍ）のゲル）濾過によって精製し、主溶出部
分を凍結乾燥したモノメトキシＰＥＧ、グリシンエチル
エステル化シクロトリフオスファゼン−インシュリンと
して約１３０ｍ（］を得た。

実施例４ 実施例３と同様の方法で、モノメトキシＰＥＧの平均分
子量が３５０．７５０．１，９００のものについても各
々モノメトキシＰＥＧ、グリシンエチルエステル化シク
ロトリフォスフ７ゼンーインシユリンを製造した（実施
例４−　（ａ）〜（Ｃ））。実施例３の化合物及びこれ
らのインシュリン誘導体のグルコース低下作用を文献Ｂ
、　Ａｎａｌ。Ｃｈｅｍｉｅ、　２５２゜２２４　（１
９７０））の方法で測定した。

その結果を第５表に示す。

本末修飾インシュリンを１００とする。

実施例５ 七ツメｌ〜キシＰＥＧ、グリシンエチルエステルーシク
ロトリフオスファゼンーアルバラギナーゼの製造 （ｉ）モノメトキシＰＥＧ−シクロトリフオスファゼン
の製造 実施例２と同様にしてモノメトキシＰＥＧ−シクロトリ
フオスファゼンを得た。

（ｉｉ）　　モノメトキシＰＥＧ−シクロトリフオスフ
ァゼンーアルパラギナーゼの製造 上記で得られた生成物１．５９．及びアスパラギナーゼ
（Ｅ、Ｃｏｌ由来、協和醗酵＞　１５０ｍｃ＋　８０．
ＩＨホウｒ！ｉ緩衝液１）８９．０の５．ＯＷＩｉ中で
３γ℃、１時間反応させた後、Ｏ，１Ｍリン酸緩衝液１
）Ｈ７，０を３０ｒｄｌ加えて反応を停止させ限外ン濾
過（アミコン社製。

膜７Ｍ−１０）で未反応のモノメトキシＰＥＧ−シクロ
トリフオスファゼンを除去し、濃縮液２．０−をセファ
クリルＳ−１００（ファルマシア社製）のカラム（５ｘ
　７３ｃｍ）のゲル濾過によって精製し、凍結乾燥して
モノメトキシＰＥＧ−シクロトリフォスファゼンーアル
パラギナーゼとして約３００ｍｇを得た。、、得られた
化合物中、α原子は４個あることが確認された。

（ｉｉ）　　モノメトキシＰＥＧ、メチルアミン−シク
ロトリフオスファゼン−アスパラギナーゼの製造 上記で得たモノメトキシＰＥＧ−シクロトリフオスファ
ゼン−アスパラギナーゼ１００ｍｇを水に溶解し４℃に
保った後、そこへメチルアミンをガス状で吹き込んだ。

３０分１多吹込をやめ、減圧してメチルアミンを除去し
た後透析して低分子を除き、凍結乾燥して１９だ反応生
成物をセフ１クリル５−ｉｏｏ　　＜７１ルフ７シ７社
製）のカラム（５ｘ　７３ｃｍ）のゲル）濾過によって
精製し、凍結乾燥してモノメトキシＰＥＧ−メチルアミ
ン−シクロトリフォスフ７ゼンーアスパラギナーゼを約
７０ｎｔｇ（Ｗた。得られた生成物中にはα原子がない
ことが確認された。

実施例６ モノメトキシＰＥＧ、グリシンエチルエステル化シクロ
トリフオスファゼン−ヘモグロビンの製造（ｉ）実施例
１の（ｉ）〜（ｉｉｉ）と同様にしてモノメトキシＰＥ
Ｇ、グリシンエチルエステル化シクロトリフがスフ７ゼ
ンを製造した。

（ｉｉ）　　モノメトキシＰＥＧ、グリシンエチルエス
テル化シクロトリフオスファゼンのヘモグロビン誘導体
の製造 上記で得られた乾固物１．８ｇ及びヘモグロビン０．５
９を０．１）１ホウ酸緩衝液、　１）８９．０の１５０
　ｄ中で水冷下、２時間反応させたｉｌｏ、ｉ＋リン酸
緩衝液。

ｐＨ７，０を３（７！加え反応を停止させ、限外ン濾過
（分子ｍ１０万阻止メンプラン）で未反応の原料等を除
去し、凍結乾燥してモノメトキシＰＥＧ。

グリシンエチルエステル化シクロトリフオスファゼン−
ヘモグロビンとして約２ｇを（ワた。

実施例７ モノメトキシＰＥＧ、グリシンエチルエステル−シクロ
トリフォスフ７ゼンーマイトマイシンＣの製造 （ｉｌ　　モノメトキシＰＥＧ−シクロトリフオスファ
ゼンの製造 実施例２と同様にしてモノメトキシＰＥＧ−シクロトリ
フオスファゼンを得た。

（ｉｉｌ　　モノメトキシＰＥＧ−シクロトリフォスフ
７ゼンーマイトマイシンＣの製造 上記で得られた生成物１．５ｇ及びマイトマイシンＣ：
、　２００ｍｇをアセトンに溶解し、炭酸カリウム１０
０ｍｇを添加し５時間速流した。沈澱物をン濾過後アセ
トンを留去し、残漬をセファデックス［１１−２０ゲル
濾過て精製し、モノメトキシＰＥＧ−シクロトリフｔス
ファビンーマイトマイシンＣを１．０（ｌ得た。

（町　モノメトキシＰＥＧ、グリシンエチルエステル−
シクロトリフオスファゼン−マイトマイシンＣの製造 上記で得たモノメトキシＰＥＧ−シクロトリフオスファ
ゼン−マイトマイシン０５００ｍＱ　＠ＴＨＦに溶解し
、これにグリシンエチルエステル１００ｍｇをトリエチ
ルアミン１００ｍｇとともに加え４℃で２時間反応させ
た。反応終了後、沈澱物を）濾過して除き、ＴＩ−ＩＦ
を留去して得た反応生成物をセファデックスＬＨ−２０
（ファルマシア社製）のカラム（５ｘ　７３ｃｍ）のゲ
ル）濾過によって精製し、モノメトキシＰＥＧ、グリシ
ンエチルエステル−シクロトリフオスファゼン−マイト
マイシンＣを３２０ｍｇ　ｑ９た。本生成物中にα原子
は検出されなかった。又、ｎｍｒよりグリシンエチルエ
ステルが４個シクＯトリフオスファゼン環についている
ことが確認された。

実施例８ モノメ１〜キシＰＥＧ、グリシンエチルエステルアルコ
キシ−シクロトリフオスファゼン−マイトマイシンＣの
製造 実施例７と同様の方法を用い、（ｉｉｉ）の工程でグリ
シンエチルエステルをシクロトリフオスファゼンの４倍
当量仕込むかわりに３倍当量として反応させて、ヘキサ
クロロシクロトリフオスファビンのα原子１個分が残っ
た化合物を製造した。これを原料としてＴＨＦ中で、Ｃ
Ｈ３ＯＮａ、　Ｃ６Ｈ１３ＯＮａ。

Ｃｌ２Ｈ２５ＯＮａ、Ｃ１３Ｈ３，７ＯＮａとを各々室
温で１０時間反応させ、残ったα原子が各々−〇ＣＨ３
゜”６　ＨＩ３，０Ｃ１２Ｈ２５，０Ｃ１８Ｈ３□に置
換された化合物を製造した。これらの化合物をマイトマ
イシンＣに換粋して同じ吊となるように水中に溶解し、
３７℃で攪拌した時のマイトマイシンＣの放出率を第６
表に示す。

第６表 これらの結果からシクロトリフオスファゼン環に結合し
たマイトマイシンＣの遊離は、同じ環に置換された基の
性質をかえると自由に制御できることがわかる。

実施例９ モノメトキシＰＥＧ、グリシンエチルエステル−シクロ
トリフオスファゼン−ドキソルビシンの製造 実施例７のマイトマイシンＣのかわりにドキソルビシン
２００ｍ（Ｊを用いて同様の反応を行い、七）゛メトキ
シＰＥＧ’、グリシンエチルエステル−シクロ１〜リフ
オスファゼン−ドキソルビシンを２９０ｍｇ得た。

反応生成物のｎｍｒスペクトルによりドキソルビシンの
７ミノ基がシクロトリフオスファゼン環と結合している
ことが確認された。

実施例１０ モノメトキシＰＥＧ、メトキシーシク口トリフォスファ
ゼンータウノマイシンの製造、 （１）モノメトキシＰＥＧ−シクロトリフオスファゼン
の製造 実施例２と同様にしてモノメトキシＰＥＧ−シクロトリ
フｔスフアゼンを１りた。

（ｉｉ）　　モノメトキシＰＥＧ−シクロトリフオスフ
ァゼン−ダウノマイシンの製造 上記で１ｑられた生成物１．５ｇ及びダウノマイシン２
００１ＩＩｇをアセトンに加え、炭酸カリウム１００ｍ
ｇを添加し５時間還流した。沈澱物をン濾過て除いた後
、アセトンを留去し、残渣をセファデックスＬｌ＋−２
０ゲル）濾過て精製し、モノメトキシＰＥＧ−シクロト
リフオスファゼン−ダウノマイシンを１．３ｑ得た。

（町　モノメトキシＰＥＧ、メトキシーシクロトリフオ
スファゼン−ダウノマイシンの製造上記で得たモノメト
キシＰＥＧ−シクロトリフォスフ７ゼンーダウノマイシ
ンｓｏｏｍｇをメタノールに溶解し、そこへナトリウム
メチラート２００ｍｇを加え、４℃で２時間反応させた
。反応終了後沈澱物を）濾過して除き、メタノールを留
去して１ｑた反応生成物をセファデックスＬＨ−２０（
ファルマシア社製）のカラム（５Ｘ　７３Ｃｍ）のゲル
）濾過によって精製し、モノメトキシＰＥＧ。

メトキシ−シクロトリフオスファゼン−ダウノマイシン
を３３０１１１ｇ得た。本生成物中にα原子は検出され
なかった。又、ｎｍｒよりメトキシ基が４個シクロトリ
フｔスフ７ゼン環についていることが確認された。

実施例１１ モノメトキシＰＥＧ、グリシンエチルエステル化シクロ
トリフｔスフ７ゼンーエストラジオール３−メチルエー
テルの製造 （ｉ）実施例１の（ｉ）〜（ｉｉ）と同様にしてモノメ
トキシＰＥＧ−シクロトリフオスファゼンを得た。

（ｉｉ）　　モノメトキシＰＥＧ−シクロトリフオスフ
ァゼン−エストラジオール３−メチルエーテルの製造 エストラジオール３−メチルエーテル２．８６（］をＴ
ＨＦ１００ｄ中に溶解し、水素化ナトリウム０、２４ｇ
を加えて５時間還流した。反応後、反応液を室温に冷却
し、次いで（ｉｌで得たン戸液を加え室温で５時間反応
した。反応終了後生成したＮａαをン濾過して取り除い
た。ＴＨＥを留去してモノメトキシＰＥＧ−シクロトリ
フォスファピンーエストラジオール３−メチルエーテル
５２ｇを得た。

（ｉｉｉ）　　モノメトキシＰＥＧ、グリシンエチルエ
ステル−シクロトリフオスファゼン−エストラジオール
３−メチルエーテルの製造 （ｉｉｌで得たモノメトキシＰＥＧ−シクロトリフオス
ファゼン−エストラジオール３−メチルエーテル１０（
ｌをＴ　ｔ−Ｉ　Ｆ　３０ｍ１に溶解し、そこへグリシ
ンエチルエステル１０ｅ　Ｔ　ＨＦ　５０ｍ１に溶解し
た溶液を加え、更にトリエチルアミン１ｇを添加して５
時間反応した。反発後生成した沈澱物（トリエチルアミ
ン塩酸塩）を）濾過して除き、２戸液を濃縮し、残渣を
クロロホルム−ヘキサン（１：１）溶液２０ｍ１に溶解
した。この溶液をセファデックス１１１−２０　　（フ
ァルマシア社製）のカラム（５ｘ　７３ｃｍ）のゲル）
濾過によって精製し、溶媒を留去してモノメトキシＰＥ
Ｇ、グリシンエチルエステル−シクロトリフオスファゼ
ン−エストラジオール３−メチルエーテル１５（ｌを得
た。

実施例１２ デキストラン、グリシンエチルエステルーシクロトリフ
ォスファビン−８ＯＤの製造 （ｉ）　　デキストラン−シクロトリフオスファゼンの
製造 デキストラン（平均分子！４０，０００）　１０ｇを８
２０　１００　ｄｌに溶解した液にヘキサクロロシクロ
トリフオスファゼン３．５ｇを水１０ＩｎＲとアセトン
４０−の混合溶媒に溶解した溶液を滴下した。この間２
Ｎカセイソーダ水溶液によりｐＨを１ｏ−１ｉに保った
。滴下終了後２Ｎ＠酸によりｐＨを３にした。生成した
デキストラン化シクロトリフオスファゼンはアセトンを
加えることにより沈澱させ精製した。

（ｉｉ）　　デキストラン−シクロトリフォスフ７ゼン
ーＳＯＤの製造 上記で得られた生成物５．０９．及びＳＯＤ　（日本ケ
ミカ／Ｌｚリサ−１ｖｉＪ）　１５ｍｇ１．ＩＨ；ｈつ
酸Ｍ耐液ＤＨ９，０の５．Ｏｄ中で３７℃、１時間反応
させた後、０．１８リン酸緩衝液ｐＨ７，０を３０ｒｄ
ｌ加えて反応を停止させ、限外濾過（アミコン社製、膜
７ト１０）で未反応のデキストラン−シクロトリフォス
フ７ゼンを除去し、濃縮液２．Ｏｔｊ！をセフ７クリル
Ｓ−１００（ファルマシア社製）のカラム（５Ｘ　７３
ＣＩｌ）のゲル濾過によって精製し、凍結乾燥して、デ
キストラン−シクロトリフオスファゼン−３ＯＤとして
約１００ｍｇを得た。

（ｉｉ）　　デキストラン、グリシンエチルエステル−
シクロトリフオスファゼン−８ＯＤの製造上記で得たデ
キストラン−シクロトリフオスファゼン−３ＯＤ　８０
ｍ（］を水に溶解し、これにグリシンエチルエステル１
０ｍｇをトリエチルアミン１０ｍｇとともに加え、４℃
で２時間反応させた。

反応終了後透析して低分子を除き、凍結乾燥して得た反
応生成物をセファクリル５−ｉｏｏ　　＜ファルマシア
社製）のカラム（５ｘ　７３ｃｍ）のゲルシン濾過によ
って精製し、凍結乾燥してデキストラン。

グリシンエチルエステル−シクロトリ７ｔスフアゼン−
８ＯＤを６０ｍｇ得た。得られたＳＯＤ誘導体はＳＯＤ
の７−１２残基のアミノ基が修飾されており、ＳＯＤ活
性はもとの約６０％程度であった。

実施例１３ デキストラン、グリシンエチルエステル−シクロトリフ
ォスフ７ゼンーインシユリンの製造（ｉ）　　デキスト
ラン−シクロトリフオスファゼンの製造 実施例１２と同様にしてデキストラン−シクロトリフオ
スファゼンを得た。

（ｉｉ）　　デキストラン−シクロトリフオスファゼン
−インシュリンの製造 上記で得られた生成物４．０ｇ、及びブタインシュリン
１５０ｍｇを０．１８ホウ酸緩衝液ｐｌ＋９．０の５．
０ｄ中で３７℃、１時間反応させた後、０．１８リン酸
緩衝液ｐＨ７，０を３０ｄ加えて反応を停止させ、限外
濾過（アミコン社製、膜７Ｍ−１０）で未反応のデキス
トラン−シクロトリフオスファゼンを除去し、濃縮液２
．０　ｒＩＪｉをバイオゲルＰ−３０のカラム（５ｘ　
７３ｃｍ）のゲル）濾過によって精製し、凍結乾燥して
デキストラン−シクロトリフオスファゼン−インシュリ
ンとして約１５０ｍｇを得た。

（ｉｉ）　　デキストラン、グリシンエチルニスデル−
シクロトリフオスファゼン−インシュリンの製造 上記で得たデキストラン−シクロトリフオスファゼン−
インシュリン５０ｍｇを水に溶解し、そこヘゲリシンエ
チルエステル１０ｍｇをトリエチルアミン１０ｍｇとと
もに加え、４℃で２時間反応させた。反応終了後透析し
て低分子を除、き、凍結乾燥して得た反応生成物をバイ
オゲルＰ−３０のカラム（５ｘ　７３ｃｍ）のゲル）濾
過によって精製し、凍結乾燥してデキストラン、グリシ
ンエチルエステル−シクロトリフォスフ７ゼンーインシ
ユリンを３３ｍｇ得た。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、下記式［ I ］ ▲数式、化学式、表等があります▼・・・［ I ］ 式中、Ｒ＿１〜Ｒ＿６は置換基であつてＲ＿１〜Ｒ＿６
   の少くとも１つが水親和性高分子又はその誘導体であり
   、他の少くとも１つが治療用生理活性物質又はその誘導
   体であり、それら置換基の合計が５以下の場合には残り
   が、−ＯＲ＿７、−ＮＨＲ＿８、−ＮＲ＿９Ｒ＿１＿０
   、−Ｒ＿１＿１及びＸからなる群より選ばれる一種又は
   二種以上である（但し、−ＯＲ＿７はチロシン残基又は
   Ｒ＿７がＣ＿１＿〜＿２＿４のアルキル基であるアルコ
   キシ基−ＮＨＲ＿８はアミノ酸残基であるか又はＲ＿８
   がＣ＿１＿〜＿２＿４のアルキル基であるアミノ基；Ｒ
   ＿９、Ｒ＿１＿０は同一又は異なってＣ＿１＿〜＿２＿
   ４のアルキル基：Ｒ＿１＿１はＣ＿１＿〜＿２＿４のア
   ルキル基；Ｘはハロゲン原子を示す）。 で表わされるシクロトリフォスファゼン誘導体。 ２、水親和性高分子が、ポリエチレングリコール、モノ
   メトキシポリエチレングリコール、ポリプロピレングリ
   コール、エチレンオキサイドとプロピレンオキサイドと
   の共重合体、デキストラン、イヌリン、プルラン、コン
   ドロイチン、ヒアウロン酸、カルボキシメチルセルロー
   ス、ヒドロキシエチル澱粉、ポリ乳酸、ポリグリコール
   酸、乳酸とグリコール酸との共重合体、ポリリジン、Ｄ
   −グルタミン酸とＤ−リジンの共重合体、α，β−ポリ
   ［（２−ヒドロキシエチル）−ＤＬ−アスパラギン酸ア
   ミド］、アルブミン、及びグロブリンからなる群よる選
   ばれる一種又は二種以上である特許請求の範囲第１項記
   載のシクロトリフオスファゼン誘導体。 ３、水親和性高分子がモノメトキシポリエチレングリコ
   ールである特許請求の範囲第１項記載のシクロトリフオ
   スファゼン誘導体。 ４、モノメトキシポリエチレングリコールの分子量が３
   ００〜３０，０００である特許請求の範囲第３項記載の
   シクロトリフオスファゼン誘導体。 ５、水親和性高分子がデキストランである特許請求の範
   囲第１項記載のシクロトリフオスファゼン誘導体。 ６、デキストランの分子量が１，０００〜３，０００，
   ０００である特許請求の範囲第５項記載のシクロトリフ
   オスファゼン誘導体。 ７、治療用生理活性物質又はその誘導体が分子内に水酸
   基、アミノ基、イミノ基、及びチオール基からなる群よ
   る選ばれる一種又は二種以上の基を有する化合物である
   特許請求の範囲第１項〜第６項のいずれか１項に記載の
   シクロトリフオスファゼン誘導体。 ８、治療用生理活性物質がペプチドホルモン類である特
   許請求の範囲第１項〜第６項のいずれか１項に記載のシ
   クロトリフオスファゼン誘導体。 ９、ペプチドホルモン類がインシュリン、カルシトニン
   、又はナトリウム利尿ペプチドである特許請求の範囲第
   ８項記載のシクロトリフオスファゼン誘導体。 １０、治療用生理活性物質が酵素類である特許請求の範
   囲第１項〜第６項のいずれか１項に記載のシクロトリフ
   オスファゼン誘導体。 １１、酵素類がスーパーオキシドディスムターゼ、アス
   パラギナーゼ、又はビリルビンオキシダーゼである特許
   請求の範囲第１０項記載のシクロトリフオスフアゼン誘
   導体。 １２、治療用生理活性物質が蛋白質類である特許請求の
   範囲第１項〜第６項のいずれか１項に記載のシクロトリ
   フオスファゼン誘導体。 １３、蛋白質類がヘモグロビン、ＴＰＡ又はインターフ
   エロンである特許請求の範囲第１２項記載のシクロトリ
   フオスファゼン誘導体。 １４、治療用生理活性物質が制癌剤である特許請求の範
   囲第１項〜第６項のいずれか１項に記載のシクロトリフ
   オスファゼン誘導体。 １５、制癌剤がマイトマイシンＣ、ダウノルビシン、又
   はドキソルビシンである特許請求の範囲第１項〜第６項
   のいずれか１項に記載のシクロトリフオスフアゼン誘導
   体。 １６、治療用生理活性物質がステロイド類である特許請
   求の範囲第１項〜第６項のいずれか１項に記載のシクロ
   トリフオスファゼン誘導体。 １７、ステロイド類がエストラジオール−３−メチルエ
   ーテル、テストステロン又はトリアムシノロンアセトニ
   ドである特許請求の範囲第１項〜第６項のいずれか１項
   に記載のシクロトリフオスファゼン誘導体。 １８、Ｒ＿１〜Ｒ＿６のうち水親和性高分子又はその誘
   導体と治療用生理活性物質又はその誘導体の合計が５以
   下の場合には、残りのシクロトリフオスファゼンの置換
   基がグリシンエチルエステル残基である特許請求の範囲
   第１項〜第１７項のいずれか１項に記載のシクロトリフ
   オスファゼン誘導体。 １９、（ａ）有効量の下記式［ I ］ ▲数式、化学式、表等があります▼・・・［ I ］ 式中、Ｒ＿１〜Ｒ＿６は置換基であつてＲ＿１〜Ｒ＿６
   の少くとも１つが水親和性高分子又はその誘導体であり
   、他の少くとも１つが治療用生理活性物質又はその誘導
   体であり、それら置換基の合計が５以下の場合には残り
   が、−ＯＲ＿７、−ＮＨＲ＿８、−ＮＲ＿９Ｒ＿１＿０
   、−Ｒ＿１＿１及びＸからなる群より選ばれる一種又は
   二種以上である（但し、−ＯＲ＿７はチロシン残基又は
   Ｒ＿７がＣ１〜２４のアルキル基であるアルコキシ基−
   ＮＨＲ＿８はアミノ酸残基であるか又はＲ＿８がＣ＿１
   ＿〜＿２＿４のアルキル基であるアミノ基；Ｒ＿９、Ｒ
   ＿１＿０は同一又は異なってＣ＿１＿〜＿２＿４のアル
   キル基；Ｒ＿１＿１はＣ＿１＿〜＿２＿４のアルキル基
   ；Ｘはハロゲン原子を示す）。 で表わされるシクロトリフオスファゼン誘導体と （ｂ）薬学的に許容される担体 とからなる医薬品組成物。