JPH01163162A - アミノ酸誘導体および酵素阻害剤 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 〔産業上の利用分野〕 本発明は新規なアミノ酸誘導体く関し、更に詳しくは蛋
白分解酵素阻害活性を有するアミノ酸誘導体又はその薬
学的に許容し得る塩及びそれらを有効成分とする蛋白分
解酵素阻害剤に関する。

〔従来の技術及び発明が解決しようとする問題点〕生体
内には種々の蛋白分解酵素が存在していることは周知の
通りであり、例えばグラスミン、トリプシン、カリクレ
イン、ウロキナーゼなどが知られている。これらの蛋白
分解酵素は、何らかの理由により異常に活性化されると
種々の疾患をひきおこす事が知られている。例えば異常
に活性化されて生じた多量のグラスミンが血液中に存在
すると、出血性疾患を生ずる。またグラスミンは炎症に
も関与し、炎症性疾患を引き起すと考えられる。よって
これらの蛋白分解酵素に阻害活性を示す物質は何らかの
臨床治療薬として有用であり、従来からその開発が種々
検討されて来た。例えば抗プラスミン剤は止血剤、抗炎
症剤、抗アレルギー剤として有用であり、抗トリプシン
剤は膵炎の・治療に有用であり、抗カリクレイン剤は炎
症治療剤等として有用であり、抗ウロキナーゼ剤はウロ
キナーゼによる血栓溶解療法の際の出血症状を抑制する
のに有用である。従来からかかる作用を有する蛋白分解
酵素阻害剤の開発が進められており、医薬品として知ら
れている蛋白分解酵素阻害剤であるアプロチニンは、生
柿からの抽出物であり、高分子量蛋白のため、安定性、
副作用などの点で問題がある。本発明はかかる従来技術
の問題点を解決して実用上十分な阻害活性を有し、しか
もいくつかの蛋白分解酵素に対しても十分な阻害活性を
有する化合物及びそれを有効成分とする蛋白分解酵素阻
害剤の開発を目的とする。

〔前記問題点を解決するための手段〕

本発明に従えば一般式（Ｉ） （式中、Ａ　ＦｉＲ，５Ｏ２−、Ｒ２Ｃｏ−又は〔但し
、Ｒはフェニル基（０１〜Ｃ４のアルキル基又はフェノ
キシ基で置換されていても良い）及びナフチル基； Ｒ２はシクロヘキシル基（アミンメチル基又はペンジル
オキシカルボニルアミノメチル基で置換されていても良
い）、フェニル基（Ｃ１〜Ｃ４のアルキル基又はフェノ
キシ基で置換されていても良い）、ナフチル基及び基 〔但し、札はフェニル基（Ｃ，〜ｃ４のアルキル基、Ｃ
４〜Ｃ４のフルキルカル−ニル基又はフェニルカルボニ
ル基で置換されていても良い）。

ナフチル基及びピリジル基； Ｒ４Ｉｄ、フェニルＩｉ　（Ｃ，〜Ｃ４のフルキルカル
♂ニル基、フェニルカル♂ニル基又Ｈｃ、〜ｃ４のアル
コキシカルボニル基で置換されていても良い）、ベンジ
ル基（Ｃ４〜Ｃ４のアルコキシカルボニル基で置換され
ていても良い）及びピリジルメチル基； ａ、ｈ、ｃ、〜Ｃ４のアルコキシカルボニル基。

ベンジル基及びフェニルカルノニルＭ　ｔ　示ス。〕〕
ＹＦｉ３−７ミノグロピルｉ、３（ペンジルオキシカル
ボニルアミノ）ｆロピル基又はフェニル基ｃペア’）ル
オキシ基又はハロゲン置換すれていても良いベンジルオ
キシカル？ニルオキシ基）ｔ−示す。） で表わされるアミノ酸誘導体又はその薬学的に許容し得
る塩が提供される。

そのような塩としては例えば、塩酸塩、臭化水素酸塩、
ヨウ化水素酸塩、硫酸塩、硝酸塩、燐酸塩等の無機酸塩
、蓚酸塩、コハク酸塩、グリコール酸塩、リンゴ酸塩、
クエン酸塩、マレイン酸塩、乳酸塩、ベンゼンスルホン
酸塩、トルエンスルホン酸塩、メタンスルホン酸塩等の
有機酸塩等金あげることができる。

本発明に従えば、更に前記一般式（１）のアミノ酸誘導
体又はその薬学的に許容しうる塩を有効成分とする蛋白
分解酵素阻害剤が提供される。

〔発明の詳細な説明〕

本発明の前記一般式（Ｉ）にて表わされる化合物につい
て代表的なものを具体的に例示すれば表−１の通りであ
る。

なお表中の化合物には番号が付しであるが以下の説明に
於ては便宜上当該化合物番号にて個々の化合物の表示に
代える。

また、化合物の構造式中フェニルアラニン骨格、チロシ
ン骨格及びリジン骨格の不斉炭素はすべて５体である。

物性欄に於けるｍｐは融点を意味する。

又、Ｉｆ’Ｌは赤外吸収スペクトルを意味し、特にこと
わらない限り臭化カリウム錠剤として測定した。

なお数字は波数を示し、単位は備　である。又、吸収ピ
ークは主なもののみを示した。

本発明の化合物はいわゆるペグチド合成と呼ばれる種々
の方法の組合せによって合成され得る。

１）混合酸無水物法（Ａｎｎ、　Ｃｈｅｍ１５７２．１
９０２）酸塩化物法１：　Ｂｌｏａｈｅｍｌａｔｒｙｓ
　４　、２２１９３）ホスファゾ法［Ｃｈｅｍ、　Ｂ＠
ｒ、、　９３　、２３８７４）　カルボジイミド法（Ｊ
、　Ａｍ、　Ｃｈｅｍ、　Ｓｏｅ、。

７７．１０６７（１９５５）］ ５）活性化エステル法〔例えばＮ−ヒドロキシコハク酸
イミドを用いる方法〕 （Ｊ、　Ａｍ、　Ｃｈｅｍ、　ＳＯｅ、、　８５．３０
３９（１９６３）］但し本発明の化合物のすべてをここ
に記述した方法のいずれでも合成できるわけではない。

各化合物に適した合成法の組み合わせが必要である。

これらの方法のうち、代表的な例について一般的な反応
ルートを以下に示す。

なお、合成例の記載の中でＴＨＦはテトラヒドロフラン
、　ＤＭＦはＮ、Ｎ−ジメチルホルムアはド、ＤＭＳＯ
はジメチルスルホキシドを意味する。

ルート （ＢＯＣ：（ＣＨ，）、Ｃ０Ｃ０−Ａ、Ｂは一般式の定
義通り）なおＹの中にベンジルオキシカル？ニル基など
でアミノ基を保護したものに関して、この保護基を除去
する必要のある場合は、一般的に知られている方法を用
いればよい。例えば■を適当な溶媒例えばエチルアルコ
ール、酢酸、ジオキサンなどに溶解させ、適当な触媒Ｐ
ｄ−炭素、ラネーニッケルなどを■に対して５〜１０重
量％加え、２０〜９０℃好ましくは常温で、１〜２気圧
の水素圧下又はヒドラジンなどで反応させる。通常の後
処理を行ない適当な溶媒例えば酢酸エチル、クロロホル
ムなどで再結晶する。

■から■の合成は■を適当な溶媒、例えばＴｌ（Ｆ’　
。

ＤＭＦ、ジエチルエーテル、ジオキサンなどに溶解させ
、適当な塩基例えばトリエチルアミン、ピリジンなどを
のに対して１当量から５当量、好ましくは２〜３当量加
える。この反応液にクロル炭酸エチルをそのまま、ある
いは反応溶媒に使用した溶媒に溶かし一度にあるいは数
回に分けて添加する。この時反応液の温度は一１０℃〜
３０℃、好ましくは５〜１０℃に保つ。反応時間は、１
時間から５０時間、好ましくは５時間〜２０時間である
。

■から■の合成は■を適当な溶媒、例えばＴＨＦ　。

ＤＭＦ　、ジエチルエーテル、ジオキサンなどに溶解さ
せ、Ｎ−ニトロンメチルウレア、Ｐ−）ルエンスルホニ
ルーＮ−メ？ルーＮ−ニド四ソアミトナどから調製した
ジアゾメタン溶液（エチルエーテル、ジオキサンなど）
を２〜１０当量加え、０℃〜１０℃、１〜１０時間攪拌
する。ついで、反応液を一３０〜１０℃、好ましくは一
２０〜０℃に保ち、４Ｎ−ＨＣｔ／ジオキサン溶液を■
に対して１〜１０当量、好ましくは３〜７当量加え、０
．２〜２時間、好ましくは０．５〜１時間攪拌する。反
応後、適当な塩基例えばトリエチルアミン、ピリジンな
どを■に対して、１〜５当量好ましくは２〜３当量加え
攪拌する。反応後、通常の後処理を行ないエチルエーテ
ル、酢酸エチル、クロロホルムなどで再結晶する。

■から■の合成は■全適当な溶媒例えばＤＭＦ　。

ＤＭＳＯ，などに溶かして、Ｔ（−Ｂ（■に対して１〜
１．５当量）加え、ヨウ化ナトリウム、ヨウ化カリラム
など（■に対して１〜３当量）加え、適当な塩基例えば
炭酸水素ナトリ９ム、炭酸カリウムなどを■に対して１
〜５当量好ましくは２〜３当量加え、Ｏ℃〜３０℃、１
〜２４時間攪拌する。反応後、通常の後処理を行なう。

■から■の反応は、４Ｎ−ＨＣ１／ジオキサン溶液を■
に対して１〜１０当量、好ましくは３〜７当量加え室温
下反応させる。通常の後処理後■が得られる。

■から■の合成は、■を適当な溶媒例えばＴＨＦ。

ＤＭＦなどに溶かして、Ａ−Ｃｔ（■に対して１〜１．
５当量）加え適当な塩基例えばトリエチルアミン、ピリ
ジンなどを■に対して３．〜５当量好ましくは２〜３当
量加え攪拌する。反応時間は１〜４８時間好ましくは３
〜１２時間で、反応温度は０℃〜６０℃である。反応後
、通常の後処理を行ない適当な溶媒例えばエチルアルコ
ール、クロロホルムなどで再結晶する。

〔合成例〕

以下、本発明に係る代表的な化合物の製法について具体
的に例を示して説明する。

実施例１ Ｎ２−（ｐ−）ルエンスルホニル）−Ｌ−リジン３−エ
トキシカルゲニルピペリジノメチルケトン（化合物６）
の合成 ５０ｔｓ水酸化カリウム（４０ｉ／）、ジエチルエーテ
ル（８０！Ｊ）を−２０℃に冷却し、ニトロソメチルウ
レア（５，４ｇ）を加え、約２０分間攪拌した後、エー
テル層を分取した。Ｎ２−ｔ−プチルオキシカルゲニル
ーＮ６−ペンジルオキジカルメ二、Ａ／−Ｌ−リジン（
１０，０，Ｆ）をテトラヒドロフラン（１ｏｏｄ）に溶
かし、０℃下、トリエチルアミン（３，６ｍ／）を加え
、−２０℃下、クロル炭酸エチル（２，５ｍ）を加え攪
拌し、先のエーテル層を徐々に加え、４℃で２時間攪拌
した。反応液を再び一２０℃に冷却し、５．４Ｎ塩化水
素／ジオキサン溶液（１５，２１１）を加え、３０分間
攪拌した後トリエチルアミン（１１，６ｆｆｌ／）ｉ加
えて中和した。

溶媒を留去し、酢酸エチルを加え、１０％クエン酸、水
、５％炭酸ナトリウム、水の順序で洗浄し、酢酸エチル
層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した後、濃縮し、油状物
を得た。粗油状物をシリカゲルカラムクロマトに供した
後、石油エーテルで結晶化１、Ｎ２−ｔ−２チルオキシ
カルメニルーＮ６−ベンジルオキシカル？ニルーＬ−リ
ジン　クロルメチルケトン、（１）、６．２１１を得た
。

ニペコチン酸エチル（０，２１９）をＮ、Ｎ’−ジメチ
ルホルムアミド（１１！Ｊ）Ｋ溶かし、ヨウ化ナトリウ
Ａ（０，１９Ｉｉ）、炭酸水素ナトリウム（０，１１ｇ
）を加え、前記化合物（１）（０，５３，ｌを加えた後
、−夜、室温で攪拌した。溶媒を留去し、酢酸エチルを
加え、１０チクエン酸、水、５チ炭酸す）　ＩＪウム、
水の順序で洗浄し、酢酸エチル層を無水硫酸ナトリウム
で乾燥した後、濃縮し油状物を得た。粗油状物をシリカ
ゲルカラムクロマトに供した後、油状物のＮ２−ｔ−ブ
チルオキシカル？二／ｌ／　−Ｎ’−ヘンシルオキシカ
ルＭニル−Ｌ　−ＩＪ　’／ン　３−エト中シカルゲニ
ルビペリジノメチルケトン（ＩＩ）、０．１７．９を得
た。

前記化合物（ＩＩ）（０，１５ｇ）に水冷下５．６Ｎ塩
化水累／ジオキサン溶液（０，５ゴ）を加え、１０分後
後室温下オキサン（Ｑ、５ｍ１）を加え、５０分間攪拌
した。反応液中へ、ジエチルエーテルを加え、沈澱させ
、油状残渣を数回ジエチルエーテルで洗浄した。油状物
をＮ、Ｎ’−ジメチルホルムアミ）’（１０！Ｊ）Ｋ溶
かし、水冷下トリエチルアミン（０，１！／）？加えて
中和した。トシルクロライド（０，１１）を加え、−夜
重温で攪拌した。溶媒を留去し、酢酸エチルを加え、Ｉ
Ｎ塩酸、水、５チ炭酸ナトリウム、水の順序で洗浄し、
酢酸エチル層を無水硫酸す）　ＩＪウムで乾燥した後、
酢酸エチルを留去した。石油エーテルにより結晶化し、
戸数した後、酢酸エチルと石油エーテルにより再結晶し
、Ｎ２−（ｐ−）リエンスルホニル）−Ｎ６−ペンジル
オキジカルボ二ルーＬ−リジン　３−エトキシカルダニ
ルビベリジノ　メチルケトン（■）、０．０８４．９を
得た。

前記化合物（ＩＩＩ）（０，０６４１ｉ）をメチルアル
コール（ＩｏＩＩ！／）に溶かし、ノ４ラジウム触媒下
、接触還元を３時間行なった。不溶物を除去し、溶媒全
留去し、油状物Ｎ２−（ｐ−）ルエンスルホニル）−Ｌ
−！ｊレジン３−エトキシカルゲニルビペリジノメチル
ケトン（ＩＶ）、０．０１５９を得な。

実施例２ Ｎ−（トランス−４−アミノメチルシクロヘキシルカル
ゲニル）−Ｌ−フェニルアラニン４−７セチルフエノキ
シメチルケトン・塩酸塩（化合物１５）の合成 ５０チ水酸化カリウム水（９９ｍ／）、ジエチルエーテ
ル（ｉｓｏｍｌ）を−２０℃に冷却し、ニトロソメチル
ワレア（１５，７，Ｆ）ｔ−加え約２０分間攪拌した後
エーテル層を分取した。Ｎ−ｔ−ブチルオキシカル♂ニ
ルーＬ−７エニルアラニン（１０，０ｇ）をテトラヒド
ロフラン（１８ＱｍＪ）に溶かし、０℃下、トリエチル
アミン（５，：３１））を加え、−２０℃、クロル炭酸
エチル（３，６ｍ１）を加え攪拌し、先のエーテル層を
徐々に加え、４℃で２時間攪拌した。反応液を再び一２
０℃に冷却し、７．ＯＮ塩化水累／ジオキサン溶液（２
０，Ｏｍ／）を加え、３０分間攪拌した後、トリエチル
アミン（２１，３ｍ／）を加えて中和し念。溶媒を留去
し、酢酸エチルを加え、１０％クエン酸、水、５チ炭酸
ナトリウム、水の順序で洗浄し、酢酸エチル層を無水硫
酸ナトリウムで乾燥した後、濃縮し、油状物を得た。粗
油状物をシリカダルカラムクロマトに供した後、石油エ
ーテルで結晶化しＮ−ｔ−ブチルオキシカルボニル−Ｌ
−フェニルアラニンクロルメチルケトン、（１）９．０
＃を得た。

４−ヒドロキシアセトフェノン（０，４６Ｉｉ）’ｋＮ
、マージメチルホルムアミド（３ＱｍＪ）に溶かしヨウ
化ナトリウム（０，５１Ｎ）、炭酸水素ナトリウム（０
，２９ｇ）ｔ−加え、前記化合物（１）　（１，０１）
を加えた後、−夜、室温で攪拌した。溶媒を留去し、酢
酸エチルを加え、１０％クエン酸、水、５％炭酸ナトリ
ウム、水の順序で洗浄し、酢酸エチル層を無水硫酸ナト
ＩＪウムで乾燥した後、濃縮し少量のエタノールより結
晶化を行ない戸数した後、エタノールで再結晶を行ない
Ｎ−ｔ−ブチルオキシカルＭニルーＬ−フェニルアラニ
ン　４−７セチルフエノキシメチルケトン（Ｉｆ）、０
．４０　ｇ’！に得九。

前記化合物（ＩＩ）　（０，３ｇ’）に水冷下７．ＯＮ
塩化水素／ジオキサン溶液（１，１ｍｊ）を加え、１０
分後後室温下オキサン（１，１ｍＪ）を加え、５０分間
攪拌した。反応液中へ、ジエチルエーテルを加え、沈澱
させ数回ジエチルエーテルで洗浄した。得られた結晶を
、Ｎ、Ｎ’−ジメチルホルムアミド（２０ｍｌ　）に溶
かし、水冷下、トリエチルアミン（０，１１ｍｌ　）を
加えて中和した。トランス−４−（ｔ−ブチルオキシカ
ルボニル）アξツメチルシクロヘキシルカル♂ン酸（０
，２８ｆ）ｔ−テトラヒドロフラン（２０ｍｌ　）に溶
かし、水冷下、トリエチルアミン（０，１６ｍ１）を加
え、−２０℃に冷却し、クロルギ酸インブチル（０，１
１ゴ）を加えた後、先の溶液に加える。−夜、室温で攪
拌した後、溶媒を留去し、酢酸エチルを加え、１０％ク
エン酸、水、５％炭酸ナトリウム、水の順序で洗浄し、
酢酸エチル層を無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を
・　留去し、ジエチルエーテルを加え結晶化し、Ｐ取し
た後、エタノール−ジエチルエーテルにより再結晶し、
Ｎ−〔トランス−４−（ｔ−ブチルオキシカルボニル）
アミノメチルシクロヘキシルカルゲニル〕−Ｌ−フェニ
ルアラニン　４−７セチルフエノキシメチルケトン（Ｉ
ＩＩ）、０．０８７Ｎ？得た。

前記化合物（Ｉ［［）（０，０７０ｇ）に水冷下７．Ｏ
Ｎ塩化水素／ジオキサン溶液（０，１９ｄ）ｔ−加え、
１０分攪拌した後、室温下ジオキサン（０，１９，ｍｌ
　）を加え１時間攪拌した。ジエチルエーテルを加え沈
澱とし、ジエチルエーテルでデカンテーションを３回行
ない遠心分離した後、デシケータ−で乾燥しＮ−（トラ
ンス−４−７ミノメチルシクロヘキシルカルメニル）−
Ｌ−フェニルアラニン　４−アセチルフェノキシメチル
ケトン・塩酸［ＣＷ）、０．０５３１９を得た。

実施例３ Ｎ−（トランス−４−アミンメチルシクロへ中シルカル
ゲニル）−〇−ベンジルーＬ−チロシン　４−７セチル
フエノキシメチルケトン・塩酸塩（化合物１６）の合成 ５０チ水酸化カリウム水（４Ｑ　ｍｌ　）　、ゾエチル
エーテル（８０ｍ／）を−２０℃に冷却し、ニトロソメ
チルウレア（５，４ｇ）を加え、約２０分間攪拌した後
、エーテル層を分取した。Ｎ−ｔ−ブチルオキシカル−
ニルー〇−ベンジルーＬ−？ロシア（４，９１）ｆｆト
ラヒｔ’ｏ７うｙ（１５０ｍ１）に溶かし、０℃下、ト
リエチルアミン（１，８１Ｉ）を加え、−２０℃下、ク
ロル炭酸エチル（１，２ｇ）を加え攪拌し、先のエーテ
ル層を徐々に加え、４℃で２時間撹拌した。反応液を再
び一２０℃に冷却し、７．３Ｎ塩化水累／ジオキサン溶
液（７，ｌ　ｍｌ　）を加え、３０分間攪拌した後、ト
リエチルアミン（７，３’ｎｔ　）’ｆｒ：加えて中和
し念。溶媒ｔ−留去し、酢酸エチルを加え、１０％クエ
ン酸、水、５％炭酸す）　１７ウム、水の順序で洗浄し
、酢酸エチル層を無水硫酸す）　＋７ウムで乾燥した後
、濃縮し、油状物を得た。粗油状物をシリカグルカラム
クロマトに供し念後、ジエチルエーテルで結晶化し戸数
した後、酢酸エチル−ジエチルエーテルにより再結晶を
行ない、Ｎ−（ｔ−ブチルオキシカル−ニル）−〇−ベ
ンゾルーＬ−チロシン　クロルメチルケトン、（１）、
１．８１を得た。

４−ヒドロキシアセトフェノン（０，４１ｇ）をＮ、Ｎ
’−ジメチルホルムアミド（３０＋＋４’）に溶かしヨ
ク化ナトリウム（ｏ、＋５２）、炭酸水素ナトリウム（
０，２！Ｍ）を加え、前記化合物（Ｉ）（１，２０１）
を加え７１？、後、−夜、４５℃で攪拌した。溶媒全留
去し、酢酸エチルを加え１０％クエン酸、水、５％炭酸
ナトリウム、水の１１四序で洗浄し、酢酸エチル層を無
水硫酸す）　ＩＪウムで乾燥した後、濃縮し少量のエタ
ノールにより結晶化を行ない戸数した後、エタノールで
再結晶を行ないＮ−（ｔ−ブチルオキシカルＭニル）−
〇−ベンジルーＬ−チロシン　４−７セチルフエノキシ
メチルケトン（ＩＩ）、０、３８　Ｎを得た。

前記化合物（ＩＩ）（０，２３９）に水冷下７．３Ｎ塩
化水素／ノオキサン溶液（０，６３ｍ／）を加え、１０
分後後室温下ノオギサン（０，６３ゴ）を加、（，５０
分間攪拌した。反応液中へ、ジエチルエーテルを加え、
沈澱させ、数回ジエチルエーテルで洗浄した。得られた
結晶を、Ｎ、Ｎ’−ツメチルホルムアミ）Ｐ（４ｍ／）
に溶かし、水冷下、トリエチルアミン（０，１０ｒｎｌ
）′Ｉｋ加えて中和した。トラｙｘ−４−（１−プチル
オキシカルゴニル）アミンメチルシクロへ中シルカルゲ
ン酸（０，１９Ｎ）ｔ−テトラヒドロ７ラン（８ｄ）Ｋ
溶かし、水冷下、トリエチルアミン（０，１１１１１／
）ｔ−加え、−２０℃に冷却し、クロル４ＩＰ酸イソブ
チル（０，１０１ｄ）を加えた後、先の溶液に加える。

−夜、室温で攪拌した後、溶媒を留去し、酢酸エチルを
加え、１０％クエン酸、水、５％炭酸ナトリウム、水の
順序で洗浄し、酢酸エチル層を無水硫酸ナトリウムで乾
燥し九。溶媒を留去し、ジエチルエーテルを加え結晶化
し、戸数した後、エタノール−ジエチルエーテルにより
再結晶し、Ｎ−〔トランス−４−（ｔ−プチルオキシ力
ル〆ニル）アミンメチルシクロヘキシルカル〆ニル〕−
〇−ベンジルーＬ−チロシン　４−７セチルフエノキシ
メチルケトン（Ｉ［Ｉ）、０．１３１１を得た。

前記化合物（ＩＩＩ）（０，０８８Ｎ　）に水冷下７．
３Ｎ塩化水Ｘ／ジオキサン溶液（０，２０ｍＪ）ｙ加え
、１０分攪拌した後、室温下ジオキサン（０，２０ｍｌ
　）を加え１時間攪拌した。ジエチルエーテルを加え沈
澱とし、ジエチルエーテルでデカンテーションを３回行
ない遠心分離した後、デシケータ−で乾燥しＮ−（トラ
ンス−４−アミノメチルシクロヘキシルカル？ニル）−
〇−ベンジルーＬ−チロシン４−７セチルフエノキシメ
チルケトン・塩ｉ　ｕ　（ＩＶ）。

０．０７２Ｉｉを得た。

実施例４ Ｎ−（トランス−４−７ミノメチルシクロヘキシルカル
ゴニル）−０−（２−７”ロモペンジルオキシカルゴニ
ル）−Ｌ−チロシン　４−７セチルフエノ中ジメチルケ
トン・トリフルオロ酢酸塩（化合物１７）の合成 Ｌ−チロシン（２５Ｎ　）と水酸化ナトリウム（１１，
２Ｆ）を水冷下水（１６０ａｊ）に溶かし、硫酸鋼・５
水和物（１７，４，９）の水溶液（１００ｒｒｔｌ　）
　、！：　２−プロモペンジルオキシカルゲニルクロリ
ド（３！Ｍ）を加えて３時間攪拌した。濃塩酸（５０ｄ
）ｔ−加えてさらに２時間攪拌した後析出固体を戸数し
飽和ＥＤＴＡ／７０　％酢酸で再結晶して０−　（２−
ｆロモペンジルオキシカル〆ニル）−Ｌ−チロシン（１
）　（４５ｇ　）を得た。（１）　（２０ｇ＞とｔ−プ
チルオキシカル〆ニルオキシイミノ−２−フェニルアセ
トニトリル（１４ｇ）を水−ジオキサン混合塔Ｋｊｔ　
（２００ｍｌ　）に溶かしたのちトリエチルアミン（Ｉ
ＩＦ）を加えて室温で１２時間攪拌した。反応後溶媒を
留去したのち水（ｘｏｏｍｇ）を加え酢酸エチルで数回
洗浄した。

１０％クエン酸水で酸性にして酢酸エチルで抽出し硫酸
ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去したのち残渣をクロ
ロホルムで再結晶して淡黄色固体のＮ−（ｔ−プチルオ
キシカルゲニル）−０−（２−プロモペンジルオキシカ
ル〆ニル）−Ｌ−チロシン（ＩＩ）（２２１ｉ）を得た
。ＩＲと元素分析で確認し次。

５０％水酸化カリウム水（２０＋ｌ）、ジエチルエーテ
ル（４０ｍｌ）’？（−２０℃に冷却し、ニトロソメチ
ルウレア（３，２１ｔ−加え約２０分間攪拌した後エー
テル層を分取し念。（ｎ）　（３，０１）をテトラヒド
ロフラン（８０ｒＩＬｌ　）に溶かし、０℃下トリエチ
ルアミン（１，１ｍ）１に加え一２０℃下クロル炭酸エ
チル（０，７８ｍｌ　）　’ＩＨ加え攪拌し、先のエー
テル層を徐々に加え４℃で２時間攪拌した。

反応液を再び一２０℃に冷却し、７．３Ｎ塩化水素／ジ
オキサン溶液（４，２ｍ／）を加え、３０分間攪拌し念
後トリエチルアミン（４゜３　ｍｌ　）　ｔ−加えて中
和した。溶媒を留去し、酢酸エチルを加え１０％クエン
酸、水、５％炭酸ナトリウム、水の順序で洗浄し、酢酸
エチル層を無水硫酸す）　ＩＪウムで乾燥した後、濃縮
し油状物を得た。粗油状物をシリカうル力ラムクロマト
に供した後ジエチルエーテルで結晶化し戸数し、Ｎ−ｔ
−ｆチルオキシカル♂ニル−〇−（２−プ京モベンジル
オキシカルぎニル）−Ｌ−チロシン　クロルメチルケト
ン（Ｉ［Ｉ）、ｏ、ｓＩＩを得た。

４′−ヒドロキシアセトフェノン（０，１２ｆｌ）ｔ−
Ｎ、Ｎ’−ジメチルホルムアミド（１０ｍ／）に溶かし
ヨウ化ナトリウム（０，１３ＩＩ）、炭酸水素ナトリウ
ム（０，０７１９）を加え、前記化合物（ＩＩＩ）（０
，４５ｇＪ）を加え念後−夜４５℃で攪拌し次。溶媒を
留去し、酢酸エチルを加え、１０％クエン酸、水、５チ
炭酸ナトリウム、水の順序で洗浄し、酢酸エチル層を無
水硫酸ナトリウムで乾燥した後、濃縮しジエチルエーテ
ルを加え結晶化した。粗結晶をエタノール（２ｒｎｌ　
）に溶かし、５ｅｐｈａｄｓｘ　ＬＨ−２０（３Ｘ　１
５８　副）に付しエタノールにより流出させ精製し、エ
タノールを留去し、ジエチルエーテルにより結晶化を行
ないＮ−（ｔ−プチルオキシ力ルゴニル）−０−（２−
プｐモベンジルオキシカルゲニル）−Ｌ−チロシン　４
−７セチルフエノキシメチルケトン（Ｆｌｙ）、０．０
７ｇｆｆ１得た。

前記化合物（ＩＶ）　（０，２ＩＮ　）に水冷下７．３
Ｎ塩化水素／ジオキサン溶液＜０．４７ｍ１）を加え１
０分後呈湛下ゾオキサン（０，４７ゴンを加え５０分間
攪拌した。反応液中へ、ジエチルエーテルを加え沈澱さ
せ数回ジエチルエーテルで洗浄した。得られた結晶を、
Ｎ、Ｎ’−ジメチルホルムアミド（７ｍｌ　）に溶かし
、水冷下、トリエチルアミン（０，０５４）を加えて中
和した。トランス−４−（（−プチルオキシカルゲニル
）アミンメチルシクロヘキシルカルメン酸（０，１３Ｉ
Ｉ）をテトラヒドロフラン（２０ｍ／）に溶かし水冷下
トリエチルアミン（０，０１ｄ）を加え、−２０℃に冷
却し、クロルギ酸イソブチル（９，５ｍ？）を加えた後
、先の溶液に加える。−夜室温で攪拌した後溶媒ｆ：留
去し、酢酸エチルを加え、１０チクエン酸、水、５チ炭
酸ナトリクム、水の順序で洗浄し、酢酸エチル層を無水
硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を留去し、酢酸エチル
と水を加え結晶化し、戸数した後酢酸エチルにより再結
晶し、Ｎ−〔トランス−４−（１−プチルオ中シカル？
ニル）アミンメチルシクロヘキシルカルボニル］−０−
（２−ブロモベンジルオキシカル♂ニル）−Ｌ−４０シ
ン　４−７セチルフエノキシメチルケトン（Ｖ）　、０
．０８　Ｆを得た。

前記化合物（Ｖ）（０，０５５ｇ）にアニソール（Ｑ、
Ｑ４ｍｌ）存在下、トリフル、ｔａ酢酸（０，１１ｍ１
　）を加え水冷下１０分、室ｍ５０分間攪拌した。

ジエチルエーテルを加え沈澱とした後ジェチルエ−チル
でデカンテーションを３回行ない遠止分離し、デシケー
タ−で゛乾燥し、Ｎ−（トランス−４−アミンメチルシ
クロヘキシルカルボニル）−〇−（２−プロモベンジル
オキシ力ル〆ニル）−Ｌ−チロシン　４−アセチルフェ
ノキシメチルケトン・トリフルオロ酢酸塩（Ｍ）、０．
０５ＯＮを得た。

実施例５ Ｎ−（トランス−４−７ｚツメチルシクロヘキシルカル
♂ニル）−０−（２−ブロモベンジルオキシカルＩニル
）−Ｌ−チロシン　４−ビリゾルオキシメチルケトン・
二塩酸塩（化合物１８）の合成 実施例４で得九化合物（ｍ）　（ｏ、ｔ　６ｇ）と４−
ヒドロキシピリジン（０，１１ｍ）をＮ、Ｎ’−ジメチ
ルホルムアミド（ｌｉｔ／）に溶かし、ヨウ化ナトリク
ム（０，１８，Ｆ）、炭酸水素ナトリウム（０，ＩＩ）
を加え、−夜４５℃で攪拌した。溶媒を留去し、酢酸エ
チルを加え、水で洗浄した。酢酸エチル層を無水硫酸ナ
トリウムで乾燥した後、濃縮し油状物Ｎ−（ｔ−プチル
オキシカルゴニル）−〇−（２−プロモペンジルオキシ
カル〆ニル）−Ｌ−チロシン　４−ピリジルオキシメチ
ルケトン（１）、０．２５を得た。

前記化合物（［）（０，１０ｇ）に水冷下７．６Ｎ塩化
水索／ジオキサンＳ液（０，４４ＩＬｌ）を加え、１０
分後後室温下オキサン（０，４４１Ｌｔ）を加え５０分
間攪拌した。反応液中ヘジエチルエーテルを加え沈澱さ
せ、数回ジエチルエーテルで洗浄した。得られた結晶を
、　Ｎ、Ｎ’−ジメチルホルムアミド（１０ｍｌ　）に
溶かし、水冷下トリエチルアミン（０，０４ｔｎｌ　）
を加えて中和した。トランス−４−（ｔ−プチルオキシ
カルダニル）アミンメチルシクロヘキシルカルはン酸（
０，１１Ｆ）ｔ−テトラヒドロフラン（１５ａ（）Ｋ溶
かし水冷下、トリエチルアきン（０，０６ｄ）’！！ｉ
−加え、−２０℃に冷却しクロルギ酸イソブチル（０，
０４ｍＡりを加えた後、先の溶液に加える。−夜室混で
攪拌した後溶媒を留去し、酢酸エチルを加え、１０％ク
エン酸、水、５％炭酸ナトリウム、水の順序で洗浄し、
酢酸エチル層全無水硫酸ナトリウムで乾燥した。溶媒を
留去し、油状物として、Ｎ−〔トランス−４−（ｔ−プ
チルオキシカル〆ニル）アミンメチルシクロヘキシルカ
ルボニル］−０−（２−プロモペンジルオキシカルダニ
ル）−Ｌ−チロシン　４−ビリゾルオキシメチルケトン
（１［Ｉ）、　０．０５０１を得念。

前記化合物（Ｉｌｌ）（０，０２０ｇ）に水冷下７．６
Ｎ塩化水素／ゾオキサン溶液（Ｑ、１ｍ）を加え１０分
攪拌した後室瀉下ジオキサン（０，１ｍｌ　）　ｙ＜加
え１時間攪拌した。ジエチルエーテルを加え沈澱としジ
エチルエーテルでｒカンテーシ、ンを３回行ない遠心分
離し次後デシケータ−で乾燥しＮ−（トランス−４−ア
ミンメチルシクロヘキシルカル〆ニル）−０−（２−プ
ロモペンジルオキシ力ル〆ニル）−Ｌ−チロシン　４−
ピリゾルオキシメチルケトン・二塩酸塩（ＩＶ）、０．
０１２ＩＩｔ−得た。

実施例６ Ｎ２−（４−ヘンシルオキシ）ベンジル−Ｌ−リジン　
４−ベンゾイルフェノキシメチルケトン（化合物２６）
の合成 ５０％水酸化カリウム（４０ｒｌｌｌ）、ジエチルエー
テル（８（１／）を−２０℃に冷却し、ニトロソメチル
ウレア（４，４，Ｆ）を加え約２０分間攪拌した後、エ
ーテル層を分取した。Ｎ２−ペンジルオキシカルボニル
−Ｎ’−４−プチルオΦシカルゴニルーＬ−リジン（８
，ＯＩ）をテトラヒドロフラン（８０１ｄ）Ｋ＠かし０
℃下、トリエチルアミン（２，９１を加え一２０℃下り
ロル炭醇エチル（２，０Ｉ＋ｔｌ）を加え攪拌し、先の
エーテル層を徐々に加え４℃で２時間攪拌した。反応液
を再び一２０℃に冷却し、５．４Ｎ塩化水累／ジオキサ
ン溶液（１２，（１／）を加え３０分間攪拌した後、ト
リエチルアミン（９，４＋ｎｌ）を加えて中和した。溶
媒を留去し、酢酸エチルを加え１０％クエン酸、水、５
チ炭酸ナトリウム、水の順で洗浄し酢酸エチル層を無水
硫酸す）　ＩＪウムで乾燥し次後濃縮し油状物を得念。

粗油状物をシリカうル力ラムクロマトに供した後石油エ
ーテルで結晶化し、Ｎ２−ペンジルオキシカルゲニルー
Ｎ”ｔ−プチルオキシカルメ二ルーＬ−リジンクロルメ
チルケトン（Ｉ）、３．０１１を得た。

前記化合物（１）（１，５０ｇ）と４−ヒドロキシベン
ゾフェノン（０，７ａ　Ｉ　）２Ｎ、Ｎ′−ジメチルホ
ルムアミド（１５ｍ／）に溶かし、ヨウ化ナトリウム（
９，５５Ｉｉ）、炭酸水素ナトリウム（０，３１１Ｉ）
を加え、−夜４５℃で攪拌した。溶媒を留去し、酢酸エ
チルを加え、水で洗浄した。酢酸エチル層を無水硫酸す
）　ＩＪウムで乾燥した後、濃縮し油状物Ｎ　−ヘンジ
ルオ中シカルゴニルーＮ’−ｔ−７”ｆ−ルオ中シカル
ダニルーＬ　−１）シン　４−ペンソイルフェノキシメ
チルケトン（ＩＩ）、　０．９８　ＩＩ得た。

前記化合物（ＩＩ）（０，６６Ｉｉ）をメタノール（１
ｓｔｎｌ　）に溶かし・臂ラジウム触媒下、接触還元を
行なう九。６時間後、不溶物を除去しメタノールを留去
した。残渣にＮ、Ｎ’−ツメチルホルムアミド（１５ｒ
ｎｔ　）を加え溶かしヨウ化ナトリウム（０，２５Ｆ）
、炭酸水素ナトリウム（０，１４ＩＩ）、４−ベンジル
オキシベンジル　クロリド（０，４ｙ）ｔ−加え、４８
時間、４５℃で攪拌した。溶媒を留去し、酢酸エチルを
加え１０チクエン酸、水、５％炭酸ナトリウム、水の順
序で洗浄し酢酸エチル層を無水硫酸ナトリウムで乾燥し
た。溶媒を留去し、粗油状物を得て、５ｅｐｈａｄ＠ｘ
　ＬＨ−２０カラ！　（３，４Ｘ１５０ｔＭ）に供し精
製した。油状物としてＮ２−４−ベンジルオキシベンジ
ル−Ｎ’−ｔ−プチルオキシカルゲニルーＬ−リジン　
４−ベンゾイルフェノキシメチルケトン（ＩＩＩ）、０
．１１１ｊを得た。

前記化合物（Ｉ［Ｉ）（０，１１Ｎ）に水冷下７．３Ｎ
塩化水素／ジオキサン溶液（０，３０ｍｌ　）を加え、
１０分攪拌した後室瀉下ジオキサン（ｏ、３ｏｍ／）ｔ
−加え１時間攪拌した。ジエチルエーテルを加え、沈澱
とし、ジエチルエーテルでデカンテーションを３回行な
い遠心分離した後デシケータ−で乾燥した。結晶をエタ
ノール（ｌ　ｍｌ　）に溶かし、水冷下トリエチルアミ
ン（０，０２ｍｌ　）を加えて中和し、５ｅｐｈａｄｅ
ｘ　ＬＨ−２０カラムで精製し、ジエチルエーテルで結
晶化させ、Ｎ２−４−ペンジルオ中ジベンジルーＬ−リ
ジン　４−ベンゾイルフェノキシメチルケトン（■）、
０．０５８Ｆを得た。

実施例７ Ｎ−（トランス−４−アミノメチルシクロヘキシルカル
Ｒニル）−Ｌ−フェニルアラニン　４−エトキシカルは
ニルアニリノメチルケトン・二塩酸１［（化合物２７）
の合成 実施例２で得た化合物（１）　（４，０Ｎ　）Ｋ氷冷下
７、ＯＮ塩化水素／ゾオ中サン溶液（１９ゴ）を加え、
室温にもどレジオキサン（１９ゴ）ｔ−加え５０分間攪
拌した。ジエチルエーテルを加え、沈澱とし、デカンテ
ーションを３回行ない遠心分離した後、沈渣をデシケー
タ−で乾燥し念。結晶をＮ、Ｎ’−ジメチルホルムアミ
ド（２Ｑｍ／）に溶かし、水冷下トリエチルアミン（１
，（Ｊ！ｊ）’＆加え、中和した。トランス−４−（ｔ
−プチルオキシカルゴニル）アミンメチルシクロヘキシ
ルカルゲン酸（５，１ｇ）をテトラヒドロフラン（１５
０ｍｌ）に溶かし、水冷下トリエチルアミン（２，８ｍ
ｊ）を加え、−２０℃に冷却し、クロル炭酸エチル（１
，９ｍｌ　）　ｆ加え攪拌した後、先の溶液に加えた。

−夜室温で攪拌した後、溶媒を留去し、酢酸エチルを加
え、５チ炭酸ナトリウム、水、１（ｌクエン酸、水の順
序で洗浄し、酢酸エチル層を無水ｖＬ酸ナトリウムで乾
燥し、溶媒を留去し念。ジエチルエーテルで結晶化しＰ
取した後、エタノールで再結晶を行ないＮ−（トランス
−４−（ｔ−ブチルオキシカルｄニル）アミノメチルシ
クロヘキシルカル〆ニル）−Ｌ−フェニルアラニン　ク
ロルメチルケトン（［）　、　３．２　ｇを得た。ｐ−
７ミノ安息香酸エチル（０，５６１）ｆＮ、Ｎ’−ジメ
チルホルムアミド（１５ｒｎｌ　）に溶かし、ヨウ化ナ
トリウム（０，５２１）、炭酸水素ナトリウム（０，２
９ＩＩ）、前記化合物（１）　（１，５９）を加え、７
２時間４５℃で攪拌した。溶媒ｔ−留去し、酢酸エチル
を加え、水で洗浄した後酢酸エチル層を無水硫酸ナトリ
ウムで乾燥し、濃縮し、シリカｒルカ２ムクロマトに供
し、ジエチルエーテルで結晶化させ、Ｎ−（）ランス−
４−（ｔプチルオキシカル〆ニル）アミノメチルシクロ
ヘキシル力ルダニル］−Ｌ−フェニルアラニン　４−エ
トキシカルゲニルアニリノメチルケトン（ＩＩ）、０．
１２１を得九。

前記化合物（■）（０，０４２Ｆ）に水冷下７．ＯＮ塩
化水素／ノオキサン溶液（０゜ｌ　ｍｌ　）を加え、１
０分攪拌し穴径、室温下ジオ中サン（Ｑ、　ｌ　ａｔ　
）を加え１時間攪拌した。ジエチルエーテルを加え沈澱
とし、ジエチルエーテルでデカンテーシ曹ンを３回行な
い遠心分離した後デシケータ−で乾燥し、Ｎ−（）ラン
ス−４−７ミノメチルシクロヘキシル力ルＭエル）−Ｌ
−７エニルアラニン　４−エト中シカルｄニルアニリノ
メチルケトン・二塩酸塩（ＩＶ）、０．０２６＃ｔ−得
意。

〔発明の効果〕

本発明の蛋白分解酵素阻害剤の１効成分である前記一般
式（１）のフェニルアラニン誘導体又はその壇は以下の
実験結東から明らかなようにプラスミン、カリクレイン
、トリグシン及びウロキナーゼに対し、非富に強い阻害
活性を有する。本発明化合物の作用は従来公知の薬剤、
例えばトラネ中すム酸や１−７ｉツカグロン酸のような
蛋白分解酵素のうちプラスミンのみｔ−選択的く阻害す
るものとは異なる。例えば本発明く係る蛋白分解酵素阻
害剤の有効成分のあるものはウロキナーゼに対する阻害
活性を示すが、ウロキナーゼは周知の如くプラスミノ−
ｒン活性化酵素であろから、これを阻害することは止血
剤として好ましい薬剤となる。まｔ本発明に係る賛自分
解＃素阻害剤のあるものは、抗カリクレイン作用及び抗
トリグシン作用を示すが、これらの作用を呈することは
前記抗プラスミン作用と併せてより強力な抗炎症剤とし
て有効であることを意味するものである。また、抗トリ
グシン作用は、膵炎の治療に有効である。

また、本発明の化合物は、医薬品として知られている蛋
白分ｗ＃ｒｎ索阻害剤でめるアプロチニンに比べ、低分
子はで品質一定のものを供給しやすい。

以下に本発明化合物の抗プラスミン活性、抗カリクレイ
ン活性、抗トリプシン活性、抗タロキナーゼ活性及び抗
トロンビン活性について代表的な試験例を示し、具体的
に説明する。

なお、以下の試１験例に於いて使用した測定法は久のと
おりである。また試験績来は、本発明の化合物について
は前記表−１の化合ａｉ＠番号にて表−２に示した。

ｌ）抗プラスミン活性の測定 （１）　　フィブリン分解抑制の測定法阻害剤を０．１
８Ｍホク酸生理食塩緩衝液（Ｐｌｉ７．４）に浴かし、
全体を６００μノとし、３７℃恒温槽中、これに同緩衝
液に溶解し九牛のフイツリノーダンの０．２％浴液を２
００μ！１人のグラスギン０．３カゼインユニット１ｍ
ｌ済液ｆｌＯＯμｌ　、　牛（２）　）　ロンビン５Ｏ
−Ｌ＝ツ）／ｉｌ溶液をｌＯＯμノ加えた後生成したフ
ィブリン塊の溶解時間を測定し、阻害剤を入れない場合
の溶解時間（本実験条件では約５分）を２１ｆに延長す
る阻害剤の一度１５ｏＣ５０％己害剤−度、単位μｍｏ
ｔ）ｔ−求める・ｃ＋＋）　８−２２５１分解抑制の測
定法阻害剤を０．０５Ｍ）リス塩酸緩衝液（ｐ’１７．
４）Ｋ溶かし、全体ｔ−４００ｔｔｌとし、ここへ８−
２２５１の３ｍＭ浴液を５０μｌを加え３７℃の恒温槽
中で５分間イン中為ベー７１ンし、人のプラスぽン０．
２カゼインユニツト／１を５０μｌ添力口、３７℃で４
分間インｌ？エベーシ１ノした後５０％酢＠５０−ｊを
加え反応を止める。

系内で生成したバラニドｐアニリンＯａ元度を４０５　
ｎｍで測定し、阻害剤なしの場合のＶ２の吸光度を示す
阻害剤浸度（ハｍｏｌ）を！、。として求めた。

２）抗トロンビン活性の測定 中　フィブリン生成抑制の測定法 阻害剤７に０．１８　Ｍホウ酸生理食塩緩衝液（ＰＨ７
，４）に溶かし、全体を５００μ！とし、３７℃恒温槽
中、これに同緩衝液に溶解した牛のフィブリノ−ダン０
．２％溶／［−４００μ！、牛のトロンビン４５−ニッ
ト／Ｍｌ浴液を１００μ１ｍえ凝固時間を測定し、阻害
剤を入れない場合の凝固時間ｔ−２倍に延長する阻害剤
の濃度（μｍｏｔ）をＸ５゜とじて求めた。

（ＩＩ）　　８−２２３８ 分解抑制の測定法 阻害剤を０．０５Ｍ）リス塩酸緩衝液（ｐ）１８．３）
に洛かし、全体を４００μノとし、ここへ８−２２３８
の０．２Ｍ俗′Ｗｉ、を５０μ！加え３７℃恒畠僧中で
５分間インキ為ページ璽ンし、牛のトロンビン０．２　
：ｓ−１ツ）／ｄ溶液を５０μ！添加、３７℃で初速変
法により１分間あ九りに生成した２母うニトロアニリン
の＠光度を４０５　ｎｍで測定し、阻害剤を入れない場
合のＶ２の吸光Ｍを示す阻害剤磯度（μｍｏｔ）ｔ、Ｉ
５゜として求めた。

３）抗トリックン活性の測定 ８−２２３８分Ｍ抑制の副定法 阻沓剤を０．０５Ｍ）リスイずダゾールス衝欣（ＰＩ８
．１）に浴かし、Ｂ−２２３８の１　ｍ　Ｍ　浴’Ｍ　
ｔｌ”１２５μ！加え、全体を１．２０１１７とし、３
７℃恒温槓中で５分間イン中具ページ１ンする。ここへ
クシのトリフシン０．０５１１ｊｔ−添加、３７℃で初
速変法により１分間めたシに生成したパラニトロアニリ
ンの吸光度を４０５　ｎｍで測定し、阻害剤を入れない
場合の１／２のｌＡ元ｆｔ−示す阻譬剤濃度（μｍｏｔ
）を！、。とじて求めた。

４）抗皿漿カリクレイン活性の測定 Ｓ　−２３０２分＃３１ｔｌｉｌＪｃ１ｍｔｌｆｆｌ法
凪吾剤ｔ−０，０５Ｍ）リス塩＃ｔｉｉ衝液（ＰＩ”１
７．８ンに沼かし、全体ｔ−４００μｊとし、ここへ８
−２３０２の２ｒｎｂ４浴漱を５０μ！加え３７℃恒温
格中で５分間インｄＰ＆ページ璽ンし、人の血漿カリク
レインＱ、　ｌ　２ｓ−ｘ　ｙト／ｗＬ１％液を５０／
ＪＪ添加、３７℃で５分間イン中島ページ■ンした後５
０％酢酸５０μｌｔ−加え反応を止める。

系内で生成したバラニトロアニリンのａ：Ｘ度を４０５
　！ＩＩ！ｌで測定し、阻害剤を入れない一合のｖ２の
＠光度を示す阻晋剤−度（μｍｏｔ）をＩ５゜とじて求
めた。

５）抗クロキナーゼ活用の測定 ８−２４４４分屏抑制の副定法 阻杏剤ｔ−０，０５Ｍ）リス基数緩衝液（〆１８．８）
に浴かし、全体を４００μｌとし、ここへＳ−２４４４
の１ｍＭ浴液を５０μ！加え３７℃恒温伯中で５分間イ
ン中シペーシ璽ンし、人のクロキナーゼ５００ユニツト
／ｊＩＪ浴液１に５０μｊ株加、３７℃で５分間インｄ
Ｐ、ベージ曹ンした後５０％α１ｉ１１５０μ！を加見
反応を止める。

系内で生成し九ノ中うニトロ７品リンのａｆｔ、度を４
０５　ｃｍで測定し、阻害剤を入れない場合の１７２の
吸光度を示す阻害剤改変（μｍｏｔ）ｔ−”ｓ。として
求めた。

尚、本発明化合物を医薬として用いる場合、投与方法に
ついては必ずしも開隔はなく、系宇土慣用の実刑方法に
て適用な製剤とし、静脈注射、筋悶注射、０脈内点滴、
経口投与、気道吸入、点眼、点鼻、皮膚外用尋の方法に
て開用される。又、七の用には１日、１人当りｌＮ１０
００ダが過当である。但し、必懺に応じて迩亘ＮＩ減し
得ることは笛うまでもない。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ＡはＲ＿１ＳＯ＿２−、Ｒ＿２ＣＯ−又は▲数
   式、化学式、表等があります▼を示す。 〔但し、Ｒ＿１はフェニル基（Ｃ＿１〜Ｃ＿４のアルキ
   ル基又はフェノキシ基で置換されていても良い）及びナ
   フチル基； Ｒ＿２はシクロヘキシル基（アミノメチル基又はベンジ
   ルオキシカルボニルアミノメチル基で置換されていても
   良い）、フェニル基（Ｃ＿１〜Ｃ＿４のアルキル基又は
   フェノキシ基で置換されていても良い）、ナフチル基及
   び基 ▲数式、化学式、表等があります▼を示す。〕 Ｂは−ＯＲ＿３、−ＮＨＲ＿４又は▲数式、化学式、表
   等があります▼を示す。 〔但し、Ｒ＿３はフェニル基（Ｃ＿１〜Ｃ＿４のアルキ
   ル基、Ｃ＿１〜Ｃ＿４のアルキルカルボニル基又はフェ
   ニルカルボニル基で置換されていても良い）、ナフチル
   基及びピリジル基； Ｒ＿４は、フェニル基（Ｃ＿１〜Ｃ＿４のアルキルカル
   ボニル基、フェニルカルボニル基又はＣ＿１〜Ｃ＿４の
   アルコキシカルボニル基で置換されていても良い）、ベ
   ンジル基（Ｃ＿１〜Ｃ＿４のアルコキシカルボニル基で
   置換されていても良い）及びピリジルメチル基； Ｒ＿５は、Ｃ＿１〜Ｃ＿４のアルコキシカルボニル基、
   ベンジル基及びフェニルカルボニル基を示す。〕Ｙは３
   −アミノプロピル基、３−（ベンジルオキシカルボニル
   アミノ）プロピル基又はフェニル基（ベンジルオキシ基
   又はハロゲン置換されていても良いベンジルオキシカル
   ボニルオキシ基）を示す。｝ で表わされるアミノ酸誘導体又はその薬学的に許容し得
   る塩。 ２）一般式 ▲数式、化学式、表等があります▼ （式中、ＡはＲ＿１ＳＯ＿２−、Ｒ＿２ＣＯ−又は▲数
   式、化学式、表等があります▼を示す。 〔但し、Ｒ＿１はフェニル基（Ｃ＿１〜Ｃ＿４のアルキ
   ル基又はフェノキシ基で置換されていても良い）及びナ
   フチル基； Ｒ＿２はシクロヘキシル基（アミノメチル基又はベンジ
   ルオキシカルボニルアミノメチル基で置換されていても
   良い）、フェニル基（Ｃ＿１〜Ｃ＿４アルキル基又はフ
   ェノキシ基で置換されていても良い）、ナフチル基及び
   基 ▲数式、化学式、表等があります▼を示す。〕 Ｂは−ＯＲ＿３、−ＮＨＲ＿４又は▲数式、化学式、表
   等があります▼を示す。 〔但し、Ｒ＿３はフェニル基（Ｃ＿１〜Ｃ＿４のアルキ
   ル基、Ｃ＿１〜Ｃ＿４のアルキルカルボニル基又はフェ
   ニルカルボニル基で置換されていても良い）、ナフチル
   基及びピリジル基； Ｒ＿４は、フェニル基（Ｃ＿１〜Ｃ＿４のアルキルカル
   ボニル基、フェニルカルボニル基又はＣ＿１〜Ｃ＿４の
   アルコキシカルボニル基で置換されていても良い）、ベ
   ンジル基（Ｃ＿１〜Ｃ＿４のアルコキシカルボニル基で
   置換されていても良い）及びピリジルメチル基； Ｒ＿５は、Ｃ＿１〜Ｃ＿４のアルコキシカルボニル基、
   ベンジル基及びフェニルカルボニル基を示す。〕Ｙは３
   −アミノプロピル基、３−（ベンジルオキシカルボニル
   アミノ）プロピル基又はフェニル基（ベンジルオキシ基
   又はハロゲン置換されていても良いベンジルオキシカル
   ボニルオキシ基）を示す。） で表わされるアミノ酸誘導体又はその薬学的に許容し得
   る塩を有効成分として含有する蛋白分解酵素阻害剤。