JPH01132526A - 薬剤組成物 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は免疫不全を生じるレトロウィルス及びそれらの
酵素によって生じる免疫不全に伴なう病的状態の予防、
緩和又は治療のためのコンドロイチンポリ硫酸（ＣＰＳ
）の使用に関するものである。

後天性免疫不全症候群（ＡＩＤＳ）の病気を生じさせる
、たとえば、フレンドネズミ白血病ウィルス（ＦＭＬＶ
）、ネコ免疫不全ウィルス（ＦＩｖ）、サル免疫不全ウ
ィルス（ＳＩＶ）及び特にヒト免疫不全ウィルス（ＨＩ
Ｖ）のような、種々のレトロウィルスは、ＲＮＡ依存Ｄ
ＮＡ−ポリメラーゼ［すなわち、逆転写酵素ＣＲＴ）］
によって宿主細胞（特にＴ−細胞）を攻撃し、それによ
って抗原（免疫原）に対する免疫応答を抑制する。

レトロウィルス及びそれらが放出する作用に対する拮抗
剤が、これらのウィルスに伴なう病的状態及び病気の治
療のために必要である。たとえば、ＨＩＶの拮抗剤に対
する適応症はＡＩＤＳ及びＡＩＤＳ関連症候群（ＡＲＣ
）、並びに前記のウィルスによって生じる無徴候感染で
ある。

レトロウィルスに対する拮抗作用をもつ公知の物質とし
ては、たとえば、以下のものがある＝ａ）ＲＮＡ及びＤ
ＮＡのプリン塩基に類似する、たとえば、それぞれ、ア
ジド−チミジン３−アジド−ジデオキシグアノシン及び
３−フルオロシトシンのような構造をもつ物質； ｂ）レトロウィルスの被膜物質に類似する構造をもち且
つウィルスに対する潜在的宿主細胞の適当なレセプタ一
部位を遮蔽する物質、たとえばペプチドＴ； 及び逆転写酵素に対して有効な、次のような物質ニスラ
ミンのような負に荷電した無機基をもつ物質［Ｈ，ミツ
ヤら、５ｃｉｅｎｃｅｓ　２２６．１７２〜１７４（１
９８４）］　　；ホスホノホルミアート　［Ｂ、ニーベ
ルブ、Ｐｈａｒｍａｃ、Ｔｈｅｒ。

１９．３８７〜４１５（１９８３）］及びたとえば、ベ
ントサンポリ硫酸、デキストラン硫酸及びコンドロイチ
ン硫酸のようなドイツ特許公開第３，６６１．１３６号
中に記されているもののような、多糖類ポリ硫酸。

ポリ陰イオン性の多糖類がウィルス抑制因子として有効
なこともまた公知である。

Ａ、バヘリは、たとえばヘパリンについてそれを記して
いる［Ａｃｔａ　　Ｐａｔｈｏｌｏｇ。

ｅｔ　　　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｃａ　　　５ｃａ
ｎｄ、開側１７１　１〜９８頁（１９６４）］。Ｈ。

ボスはドイツ特許公開第３，１２４．３８４号中で、ポ
リアニオン性化合物によるウィルス抑制についての当時
入手可能であった文献を挙げている。すなわち、ヘパリ
ン、硫酸コンドロイチン及びケラタン硫酸の単純庖疹ウ
ィルス（ＨＳＶ）に対する効果を記している［Ａ、バヘ
リ、Ｐｒｏｃ、Ｓｏｃ。

ｅｘｐ、Ｂ　ｉ　ｏ　１．（Ｎ、Ｙ、）ｌ　ｌ　６．１
４０−１４４（１９６４）、Ａ、Ｊ　、ナーミアス、Ｓ
、キブリツク及びＰ、バーン７エルド、Ｐｒｏｃ、Ｓｏ
ｃ。

Ｂｉｏｌ、Ｍｅｄ、１１５．９９３〜９９６（１９６４
）］。

Ｈ，ボス、Ｍ、ムエンドラー及びＧ、プレツエ、Ｚｂ　
１．Ｂａｋｔ、１．０．１９２．１３７−１５７（１９
６４）もまた、ピコルナウィルス群の代表物：ボリオミ
エリチスー及びＥＣＨＯ−（エンテローシトパソゲニツ
クヒトオルファン）ウィルス、に対する寒天ムコ多糖、
ヘパリン、コンドロイチン硫酸及びデキストラン硫酸の
効果を記している。

同様な研究はＺｂｌ、Ｂａｋｔ、１．Ｏ，１９８，２１
１〜２１３（１９６５）中でＨ，ボスによっても記され
ている。

別の研究において黄熱病ウィルス−接種株１７Ｄに対す
るコンドロイチン硫酸、ヘパリン及びコンドロイチンポ
リ硫酸の効果が確かめられた［Ｈ。

ボス、Ｊ、ハース、Ｈ，カウフマン、Ｇ、プレツエ及び
Ａ、オルトマン、Ｚｂｌ、Ｂａｋｔ、Ｉ。

０．２０９．４４７〜４６４（１９６９）、Ｈ，ボス、
Ｋ、Ｈ，センシュ及びＰ、パンセ、Ｚｂ　Ｉ。

Ｂａｋｔ、Ｈｙｇ、、１．Ａｂｔ、Ｏｒｉｇ、Ａ２２９
．１〜３６（１９７４）］。その他の研究としては、ヘ
ルペス単純庖疹（ＨＳＶ）及びインフルエンザウィルス
［Ｈ，ボス、Ｋ、Ｈ，センシュ及びＰ６パンセ、Ｚｂｌ
、Ｂａｋｔ、Ｈｙｇ、、Ｉ。

Ａｂｔ、Ｏｒｉｇ、Ａ２２９．１〜３６（１９７４）］
がある。単純庖疹（ヘルペスシスター）をもつ患者に対
する局所投与を記している［Ｈ，ボス、Ｈ，Ｄ、ボール
及びＣ，ムセテアヌ、Ｚｂｌ、Ｂａｋｔ、Ｈｙｇ、、１
．Ａｂｔ、Ｏｒ　ｉｇ、Ａ２３７．１〜３４（１９７７
）並びにＨ，ボス、Ｊ。

ｏｆ　　　Ｐｈａｒｍａｃｏｔｈｅｒａｐｙ３、８４〜
８７（１９８０）］　　。

ドイツ特許公開明細書３，１２４．３８４号においてボ
スはＨＳＶ及び黄熱病−ウィルス株１７Ｄに対するデル
マンタンポリ硫酸（ＤＰＳ）のウィルス抑制効果を記し
ている。

ドイツ特許公開明細書２，０５１．７４５号においては
、化学修飾、特にメチル化したリポ核酸の効果がＵ、ク
ールマンによって記され、試験微生物としてミクソ−ウ
ィルスパラインフルエンザを用いた結果を報告している
。たとえば、グリコサミングリカンポリ硫酸、コンドロ
イチンポリ硫酸（ｃ　ｐ　ｓ　）、コンドロイチン−４
硫酸及びコンドロイチンのような化合物が家禽骨髄芽球
症ウィルスから誘導した逆転写酵素を抑制した。これに
関連して、ｃｐｓはｌＯμＭｏＱ／Ｑで顕著な酵素抑制
を生じた。

同様に、上記のドイツ特許公開明細書中には、ポリアニ
オンによる酵素ＡＭＶ−逆転写酵素（ＡＭＶ−ＲＴ）の
抑制を記している。ＡＭＶ−ＲＴによって達成される結
果は、哺乳動物のレトロウィルスにおける抑制効果に対
しても当てはまるという結論に達した。

ウィルスによって生じる免疫不全に対するＣＰＳの効果
は、効果的な抑制因子に対する集中的な探索にもかかわ
らず、未だ知られていない。

ここに驚くべきことに、ＣＰＳはヒトのＴ−細胞の培養
物に対するＨＩＶの作用に対する顕著な抑制効果を有し
ていることが発見された。ＨＩＶに対するＣＰＳの強い
抑制効果は実際に０．１μｇ／ｍ（ｌ以下の濃度におい
てすら始まる。

この強いウィルス抑制効果の予想外の利点は、１２．５
００μｇ／ｍＱに至るまでの濃度における、ＭＴ−４細
胞に対するＣＰＳの低い毒性である。

公知の作用物質アシドチミジンは４０〜２００μｇ／ｍ
Ｑの範囲で既に強い試験管内細胞毒性を示し、その臨床
上の副作用はよく知られている。低毒性と強い有効性を
もつ物質が望ましい目標である。ＡＩＤＳに対して従来
試験された物質による両目標の同時的な達成は成功をみ
なかった。ＣＰＳは、その投与によって、特にこの物策
においては、約１ｍｇ／ｋｇの投与後に各個人において
達成される血清中濃度が４８時間後に０．１μｇ／ｍＱ
の範囲にあることから、長時間の予防及び／又は治療を
可能とする［Ｗ、ミューラー、Ｐ、バンセ、Ｓ。

ブランド及びＡ、スト−ビル、Ｚ、Ｒｈｅｕｍａｔｏｌ
、４２，３５５〜３６１（１９８３）］　。

従来の知識（ドイツ特許公開明細書３，６６１゜１３６
号）によれば、ＡＭＶ−ＲＴに関する特定物質について
の測定抑制効果は、哺乳動物のレトロウィルス−ＲＴに
対しても当てはまるという。

しかしながら、本発明者が行なった試験は、ＡＭＶ−Ｒ
Ｔの抑制に基づいてレトロウィルスによって生じる異な
る免疫不全の効果を予測することは、不可能であること
を実証する。

本発明の主題は、免疫不全を引き起すレトロウィルス又
はそれらの酵素によって生じる感染及びそれに続く免疫
不全による病的な、場合によっては無徴候な症状に対す
る予防的、緩和的及び／又は治療処置としてのコンドロ
イチンポリ硫酸の哺乳動物における使用である。特に、
本発明はヒトの免疫不全ウィルス（Ｈｒ　Ｖ）によって
生じる感染とその結果としての病的状態、特にＡＩＤＳ
（後天性免疫不全症候群）及びＡＲＣ（ＡＩＤＳ関連症
候群）の予防、軽減又は治療処置に対する上記の使用に
関するものである。

ＣＰＳは公知の物質である。本発明者はＣＰＳとは構造
要素 υＫ を有する硫酸化コンドロイチンと了解しているが、上式
中でＲは水素又は基−３ｏ、Ｍを意味し、Ｍは水素、ア
ルカリ金属及び／又はアルカリ土類金属を表わす。本発
明において使用することができるコンドロイチンポリ硫
酸の硫黄含量は一般に９〜１６％、好ましくは１２〜１
５％である。使用できるＣＰＳの分子量は広い範囲内で
変えることができる。たとえば、２〜５ＱｋＤａ、好ま
しくは６〜１２ｋＤａの分子量を有するｃｐｓが、しば
しば使用される。ＣＰＳはたとえばドイツ特許第８７０
０９４号及び３１１８５８８号並びに米国特許第３，４
５４，５６０号によって入手することができる。必要と
するＣＰＳ製剤の純度は、その使用方式に依存する。た
とえば、外部的な投与に対しては、何らかの他の投与手
段に対するよりも、恐らくは低い全硫黄含量に対応する
、比較的低い純度のものを施用することができる（この
場合に低い硫黄含量は、蛋白質のような混合物によって
結果する）。ＣＰＳは本発明の方法において許容できる
どのような投与方式においても使用することができる。

本発明に従って、温血動物及びヒトにおいては、ＣＰＳ
を局所的に、皮下、筋肉内又は静脈内注射により非経口
的に、粘膜投与によって（たとえば、膣内座薬又はカプ
セル剤として）、コンドーム、ゲル剤、軟膏、点眼薬に
より、又は二一ロゾル吸人によって、投与することがで
きる。

上に一つの例としてのみ挙げた投与形態において、ＣＰ
Ｓは一般的な製薬上の補助薬物質を伴っていても伴なっ
ていなくてもよい。特別な投与形態は、たとえば次のも
のであるが、これらは本発明を制限するものではない；
カプセル剤、粉剤、液剤、注射液、点滴溶液、懸濁液、
エーロゾル、移植物、軟膏、乳剤、シロップ剤、座薬、
点眼薬及び無菌軟膏など。

ヒトにおける全身的使用に対するＣＰＳの有効な単位投
与量は、たとえば、経口使用においては、１〜５００ｍ
ｇ、好ましくは２５〜ｌ　ＯＯｍｇ、局所投与（皮膚、
粘膜、組織）においては、たとえば、１〜５００ｍｇ、
好ましくは１０−１００ｍｇである。

全身的な一回の内的用量を１日当り一最大で５回まで、
好ましくは２回投与することができ、経口的又は局所的
には一回の用量を１０回まで、好ましくは２回投与する
ことができる。全身的に投与すべき製剤は、たとえば、
０．０１〜２５％、好ましくは２．５〜ｌＯ％の濃度で
ＣＰＳを含有している。経口的に投与する製剤は、たと
えば、０゜０２〜１００％、好ましくは２〜８０％の濃
度でＣＰＳを含有している。局所投与のための製剤は、
たとえば、０．０１−１００％、好ましくは１〜９０％
の濃度でＣＰＳを含有している。

他の哺乳動物における全身的使用のためのＣＰＳの有効
な１回の用量は、たとえば、体重１ｋｇ当り０−０１−
１０　ｍｇｓ好ましくはＯ、１〜２　ｎ＋ｇ％経口使用
と局所使用（皮膚、粘膜、組織）に対しては、たとえば
、体重１ｋｇ当り０．０１−１０　ｍｇｓ好まｔ、　＜
　１；　０　、１〜２ｍｇである。全身的な一回の内的
用量は１日当り最高で５回まで、好ましくは２回投与す
ることができる。全身的に投与すべき製剤は、たとえば
、０．０１〜２５％、好ましくは２゜５〜１０％の濃度
でＣＰＳを含有している。経口的に投与する製剤は、た
とえば、０．０２〜ｌ。

０％、好ましくは２〜８０％の濃度でｃＰｓを含有して
いる。局所投与のために製剤は、たとえば、０．０１−
１００％、好１＜は１−９０％（７）濃度でｃｐｓを含
有している。

コンドロイチンポリ硫酸は持続的放出手段、たとえば、
移植できる徐放手段、の使用によって、又は噴霧、フィ
ルムの使用によって、又は経皮パッチの形態で、便利に
投与することができる。経口徐放手段の形態で、たとえ
ば、種々の粉剤粒子が異なる厚さの腸溶被覆で被覆して
あり、それによって被覆の厚さに従って異なる速度で異
なる粒子から被覆が溶は去ることにより、長時間にわた
る吸収のための活性成分の持続した放出を可能とするカ
プセルの使用によって、便宜に供給することもできる。

試験管内試験 実施例１　　細胞培養物中の有効性と毒性試験ドイツ特
許公開第３．ｌ１８．５８８号によって製造したｃｐｓ
の有効性を、ＡＩＤＳ及びＡＲＣの患者からのヒト細胞
から単離したＨＩＶをヒト細胞系列上で培養した。その
ようにして培養したＨＩＶの試験管内病原性を、ＨＩＶ
がそれに対して細胞病原性であるＭＴ４−細胞、Ｔ４−
細胞系列を用いて測定した。ＭＴ４−細胞系列は、サイ
エンス、第２２９巻（１９８５年８月９日）、５６３〜
５６６頁中に記されている。すなわち、細胞中へのチミ
ジンの取り込みの測定によって細胞病原性を観測した。

ＨＩＶ接種したＭＴ４−細胞に異なる濃度でＣＰＳを添
加したときに、低濃度（０、ｌ　ｔｔｇ／ｍＱ以下）の
ｃｐｓによって、ウィルスが引き起こした細胞病原的効
果を防止することが可能であった。

同様な系で毒性の測定を行なった。この場合には、ＭＴ
４−細胞を、ＨＩＶの不在において、増大する濃度のＣ
ＰＳにさらし且つ代謝細胞の放射性チミジン取り込み能
力に基づいて、又はそれらの低下に基づいて、添加した
ｃＰｓの毒性を決定した。ある物質に対する試験管内治
療指数は、毒性を示さない最高物質濃度とＨＩＶが引き
起す細胞病原作用を防止する最低物質濃度の商として定
義する。上記のヒト最低系列を用いるｃＰｓに対するこ
の治療指数は、最高のｃＰｓ濃度において行なった一連
の実験においてなお何らの毒性作用も認められなかった
ことから、１．２５Ｘ１０５よりも犬であることが認め
られる。

試験はウィルス生産細胞系列の上澄液の試料を、一連の
希釈度で、ＭＴ４−細胞系列を含有するミクロタイター
板中に移すという方法で行なった。

同時に、放射性標識チミジンをミクロタイター板に加え
、細胞中へのこの物質の取り込みを測定した。この取り
込みは、これらの細胞の存続力に対応する。ウィルス含
有液体の細胞病原性単位の影響下に、放射性標識チミジ
ンの取り込みは相応して低下する。これは他の抗−ＨＩ
Ｖ物質の毒性濃度においても同様に認められる。

１：ｌＯＯの培養物上澄液の希釈度において、ＭＴ４−
細胞に関する最高のＨＩ　ＩＰｔ原性がなお存在する。

ＣＰＳの有効性の分析及び毒性の試験は、このウィルス
希釈度において、希釈したウィルスとＣＰＳの予備混合
溶液を細胞系列試料に添加し且つ再びチミジンの取り込
みを測定することによって行なった。

０．１ｇｇ／ｍＱ以下のＣＰＳ濃度においてすら、細胞
はＨＩＶストック溶液のｌ：１００希釈物の病原性作用
に対して完全に保護される。１２，５００μｇ／ｍ（２
に至るまでの活性物質の濃度で何らの毒性も示さない。

ＡＩＤＳに対しては長期間にわたる治療が必要であるか
ら、この毒性の不在は、その種の治療に対してきわめて
有意義である。

生体内分析 実施例２　　薬物速度論的試験 それぞれ５〜７ｋｇの体重をもつ３匹のアカゲザルに、
１匹当り５〜２５ｍｇのＣＰＳの等張水溶液を、筋肉内
（ｉ、ｍ、）注射した。ＣＰＳは全分子鎖にわたってト
リチウムにより放射性標識付けしてあった。動物は何ら
の毒性作用の徴候も示さなかつ　ｔこ　。

１口の経過の異なる時点で血清試料を採取した。

尿は０〜４時間と４〜２４時間の二つの区分として収集
した。全試料を放射分析的に測定した。ヒトに筋肉注射
で投与したＣＰＳによる定性的な記録はＷ、ミューラー
、Ｐ、パンセ、Ｓ、ブランド及びＡ、スタウブリ、Ｚ、
Ｒｈｅｍａｔｏ　１．４２．３５５〜３６１（１９８３
）に記され；比較的良好な当初の分子の回収を示してい
る。

血清濃度は短時間内に最高値に達する。−日後に、両投
４量において、血清中濃度はなお０．１ｇｇ／ｍαより
も高い水準にある。

２４時間内の尿中への排泄は、５及び２５ｍｇの注射量
の、それぞれ、５２％と５０％であった。

製剤組成物 予防及び治療のためのＣＰＳ−製剤の調製は公知のＣＰ
Ｓ製剤のものと同様にして行なうことができる。ＣＰＳ
の用量は先に記したとおりである。

実施例３ アンプル溶液 溶液は次の成分から成っている： ＣＰＳ　　　　　　　　５０．０ｇ 塩化ナトリウム　　　　５．０ｇ 全体を１０００．０ｇとするために十分な木本発明の主
な特徴及び態様を記すと次のとおりである。

１、一つ以上のレトロウィルスによって生じる免疫不全
を患う哺乳動物に治療上有効な量のコンドロイチンポリ
硫酸を投与することを特徴とする該動物の治療方法。

２、コンドロイチンポリ硫酸及び製剤的に許容できる基
剤又は補助薬を包含する薬剤組成物中にコンドロイチン
ポリ硫酸を含有させる上記ｌに記載の方法。

３、哺乳動物はヒトである上記１に記載の方法。

４、ヒトの免疫不全ウィルス（ＨＩＶ）と関連するかか
る治療のだめの上記Ｉに記載の方法。

５、ＡＩＤＳ（後天性免疫不全症候群）の治療のための
上記１に記載の方法。

６、ＡＲＣ（エイズ関連症候群）の治療のための上記１
に記載の方法。

７、哺乳動物はヒトである上記４に記載の方法。

８、＃乳動物はヒトである上記５に記載の方法。

９、哺乳動物はヒトである上記６に記載の方法。

１０、ウィルス複製抑制量のコンドロイチンポリｖｔｍ
を投与することを特徴とする免疫不全を生じさせるレト
ロウィルスにさらされている哺乳動物にＲけるφ疫不全
の発現を抑制するだめの方法〜１１、コンドロイチンポ
リ硫酸及び製剤的（こ許容できる基剤又は補助薬を包含
する薬剤組成物中にコンドロイチンポリ硫酸を含有させ
る上記ｌＯに記載の方法。

１２、該哺乳動物はヒトである上記ｌＯに記載の方法。

１３、該レトロウィルスはヒト免疫不全ウィルス（ＨＩ
Ｖ）である上記１０に記載の方法。

１４、治療上有効な単位のコンドロイチンポリ硫酸及び
製剤的に許容できる基剤又は補助薬を包含する哺乳動物
においてレトロウィルスが引き起す免疫不全の作用と戦
うための薬剤組成物。

１５、カプセル、錠剤、軟膏、座薬又は移植物の形態に
ある上記１４に記載の組成物。

１６、徐放性処方物の形態にある上記１４に記載の組成
物。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、一つ以上のレトロウイルスによつて生じる免疫不全
   を患う哺乳動物に治療上有効な量のコンドロイチンポリ
   硫酸を投与することを特徴とする該動物の治療方法。 ２、ウィルス複製抑制量のコンドロイチンポリ硫酸を投
   与することを特徴とする免疫不全を生じさせるレトロウ
   イルスにさらされている哺乳動物における免疫不全の発
   現を抑制するための方法。 ３、治療上有効な単位のコンドロイチンポリ硫酸及び製
   剤的に許容できる基剤又は補助薬を包含する哺乳動物に
   おいてレトロウイルスが引き起す免疫不全の作用と戦う
   ための薬剤組成物。