JP7569145B2 - 内生胞子に対する効能を有する抗菌性組成物 - Google Patents

Description

関連する出願との相互参照
この国際出願は、２０１５年７月１７日に出願された米国仮特許出願番号６２／１９４，１４１および２０１５年７月１８日に出願された米国仮特許出願番号６２／１９４，２１０の優先権を要求する。また、それらの開示は参照されここに組込まれる。
背景的事項

真実の胞子と異なり、内生胞子は別の生体の結果ではない。しかしながら、「胞子」、「内生胞子（ｅｎｄｏｓｐｏｒｅ）」という用語は，本明細書において交換可能に使用される。

成長力のあるバクテリア（vegetative bacteria）は、成長することができ、物を食べることができ、再生することができるものである。栄養素が不足した時、成長力のある特定のバクテリアは、「胞子形成（ｓｐｏｒｕｌａｔｉｏｎ）」と呼ばれるプロセスを始める。これはそれらが栄養素なしで残存することを可能にし、低減され休止している形式を採ることで、紫外線、枯渇、高温、極端な結氷および化学的消毒剤に対する抵抗を与える。環境要因が増殖に好都合なものに戻るとすぐに、そのようなバクテリアは、休眠状態を脱し（「胞子発芽（ｓｐｏｒｅ ｇｅｒｍｉｎａｔｉｏｎ）」）、スポアーコアに水分を補給し、皮質を加水分解し、殻を脱ぎ捨て、最終的にＤＮＡ複製を開始する。これらの複雑なプロセスに関する追加情報について興味を持った読者は、様々なテキストを参照されたい。たとえばＪ．Ｃ．Ｐｏｍｍｅｒｖｉｌｌｅ，Ｆｕｎｄａｍｅｎｔａｌｓ ｏｆ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ，１０ｔｈ ｅｄ．（Ｊｏｎｅｓ ＆ Ｂａｒｔｌｅｔｔ Ｌｅａｒｎｉｎｇ；Ｂｕｒｌｉｎｇｔｏｎ，Ｍａｓｓａｃｈｕｓｅｔｔｓ）。

胞子形成ステップの最初は、「母細胞」と呼ばれる成長力のあるバクテリアがそのＤＮＡのコピーを作り、次いでＤＮＡの新しいコピーのまわりに膜を形成し、「前芽胞」と呼ばれている膜によりコピーされたＤＮＡを有する細胞の部分を完全に囲む。胞子形成の次の形態論の段階は、その母細胞による前芽胞の「貪食（ｅｎｇｕｌｆｍｅｎｔ）」であり、これは食細胞運動と類似しているプロセスである；貪食が完了した時、前芽胞はその内膜および外膜に完全に囲まれ、母細胞細胞質を含まない。胞子のこのコアのまわりに一連の保護構造が組み立てられる。その完成は成熟型の内生胞子に帰着し、母細胞が壊れて離れた後にそれは解放される。

内生胞子には多重層状構造を有し、それらのすべては核を保護する。核は多くの層によって保護される。表１に内側から外側に順番に示す。

内部の胞子殻はアルカリ溶液に可溶性である。しかし、外部の胞子殻は、アルカリの加水分解に抵抗性である。これは恐らく、その多数のジスルフィド（Ｓ－Ｓ－）リンケージによるのだろう。

胞子は根絶するのが非常に難しく、疾病（たとえばクロストリジウム・ディフィシレ（Ｃ．ｄｉｆｆ）感染および炭疽菌の蔓延に関係する。

クロストリジウム・ディフィシレは、ヘルスケア設備でしばしば見つかるグラム陽性の胞子－形成性バクテリアで、抗生物質関連下痢の原因である。Ｃ．クロストリジウム・ディフィシレ感染は、影響を受けたものを顕著な割合で死亡に導く、毎年何十万もの人々に影響する増加している問題である。クロストリジウム・ディフィシレ胞子は、長い期間、環境において生存可能なままである、型通りの表面浄化方法に最も強い。

炭疽菌は、急性の、通常致死性の疾病であり、それはヒトおよび動物の両方に影響し、バクテリア炭疽菌（Bacillus anthracis (B. anthracis)）によって引き起こされる。その胞子は生体外で生産することができる。また、生物兵器として使用することができる。炭疽菌は、患畜または人から別の患畜に直接広がらないが、代わりに胞子によって拡散する。

抗胞子（ｓｐｏｒｏｓｔａｔｉｃ）化合物は胞子を殺さない。つまり、それらは胞子を殺さない；代わりに、それらは、胞子の発芽を阻害するか、または発芽した胞子を異常に成長させる。胞子は、これらの化合物への接触から生き延び、次に、抗胞子化合物がもはや存在しなくなった後、成長することができる。抗胞子化合物としては、フェノールおよびクレゾール、有機酸およびエステル、アルコール、第４級アンモニア化合物、ビグアニドおよび有機水銀化合物が挙げられる。これらの抗胞子化合物は、高濃度でわずかに胞子を殺すことができる；殺胞子能力を達成するために必要とされるある抗胞子化合物の相対的濃度については、たとえばＡ．Ｄ．Ｒｕｓｓｅｌｌ，”Ｂａｃｔｅｒｉａｌ Ｓｐｏｒｅｓ ａｎｄ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｓｐｏｒｉｃｉｄａｌ Ａｇｅｎｔｓ，”Ｃｌｉｎｉｃａｌ Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ Ｒｅｖｉｅｗｓ，ｐｐ．９９－１１９（１９９０）を参照。

一般に使用される胞子処理オプションはアルデヒド、特にグルタルアルデヒドおよびホルムアルデヒド；Ｃｌ_２、次亜塩素酸ナトリウム、次亜塩素酸カルシウムを含む塩素放出性薬剤、および塩素還元剤、たとえばジクロロイソシアヌレート；ヨウ素とヨードフォア；過酸化水素と過酢酸を含む過酸化物；ガス、たとえばエチレンオキシド、プロピレンオキシドおよびオゾン；およびβ－プロビオラクトンである。すべての場合において、活性は胞子の保護膜を通る活性分子の浸透によって速度が制限されるが、胞子に対する活性の機構はよく理解されていない。保護のための様々な層に浸透する必要があることは、胞子がこれらの化合物の高濃度に長い期間暴露されなければならないことを意味する。

米国特許番号８，９４０，７９２および９，３１４，０１７、米国特許公開番号２０１０／００８６５７６、２０１３／０２７２９２２、２０１３／００７９４０７および２０１６／００７３６２８は、抗菌性組成物および様々な用途について記述する。胞子のコアおよび皮質（皮膜を含む）は、これらのドキュメントに述べられていた高い浸透性組成物のタイプによる、溶解および細胞融解に弱い。しかしながら、そのような組成物は、外部の胞子殻および内部の胞子殻を破壊し、浸透する能力が制限されているため、胞子に対して特に有効と分かっていない。

望ましいものは、内生胞子の様々な防御物に浸透することができ、その内部のバクテリアを殺すことができる組成物である。そのような組成物は、クロストリジウム・ディフィシレと炭疽菌のようなバクテリアの内生胞子に対して有効である一方、それを扱うか接触するヒトへ毒性をもたらさない。

要約
１つの態様では、成熟型の内生胞子形式において、様々な内生胞子を生ずるバクテリアを殺すことができる組成物が提供される。組成物の実施態様は内生胞子の形のバクテリアの様々な防御物に対して有効である。具体的には、ジスルフィド結合は開裂することができ、内因性の疎水性を克服することができ、ペプチドグリカンを分裂することができ、コアと皮膜を溶解することができる。

組成物は酸性であるが、ｐＨ≧１．５であり、溶剤と溶質成分を含み、溶質成分は少なくとも１つの酸化性酸（oxidizing acid）および少なくとも１つの電解質酸化剤の解離生成物を含んでいる。ある実施態様では、組成物は、さらに有機液体、湿潤剤（特にイオン性界面活性剤）および様々な非酸化性電解質（non-oxidizing electrolytes）のうちの１つ以上を含むことができる。有利には、組成物は、胞子を殺すために活性な抗菌物質を含む必要がない。

組成物は、少なくとも１．０Ｏｓｍ／Ｌ、典型的には少なくとも１．５Ｏｓｍ／Ｌ、しばしばより高く、最大で溶剤成分中の溶質成分の溶解限度までの有効溶質濃度を有する。

さらに、表面を処理する方法が提供される。この方法は表面に先の組成物の実施態様を適用し、組成物が内生胞子へ吸収され、成熟型の内生胞子形式内のバクテリアのうちの少なくとも幾分かを殺すことを可能にすることを含んでいる。処理される表面は、無生物の表面、特に硬表面（ｈａｒｄ ｓｕｒｆａｃｅ）および有利にヘルスケア設備中の硬表面であることができる。

組成物の実施態様では、テスト、たとえばＡＳＴＭ標準Ｅ２１９７－１１およびＡＯＡＣ公式方法９６６．０４に使用された時、営利上適切な時間枠内で陽性（合格）の結果を提供することができる。例えば、４時間未満で医療機器の滅菌処理を達成することができる一方、硬表面（無生物）の保護のタイプ（ｊａｎｉｔｏｒｉａｌ－ｔｙｐｅ）の消毒処理は、２０分未満で達成することができる。

本発明の他の態様は、続く詳細な記述から当業者に明白になる。その記述を理解するのを支援するために、ある定義が以下に提供される。また、これらは、もし周囲のテキストが明示的に反対の企図を示さなければ、全体に当てはまるように意図される：
「含む」は、リストされた成分またはステップを非制限的に含むことを意味する；
「から成る」は、リストされた成分（またはステップ）のみを含むことをいうが、不活性な添加物またはアジュバンドの少量は含むことができる。
「本質的に成る」は、リストされた成分（またはステップ）のみを含み、少量（５％、４％、３％、２％、１％、０．５％、０．２５％または０．１％未満）の他の成分であって、胞子を殺す活性および／または意図した最終用途に望ましい副次的効果（例えば防曇性、汚れ除去など）を提供する成分、および／または不活性な添加物またはアジュバンドを含むことを意味する。
「ポリ酸」は、少なくとも２つのカルボキシル基を有する化合物を意味し、具体的にはジカルボン酸、トリカルボン酸などを含む。
「ｐＨ」は、容認できる信頼性を有する測定法（たとえば適切にキャリブレートされたｐＨ計、既知の標準などに対する滴定曲線など）によって決定されるような［Ｈ^＋］の１０対数のマイナスの値を意味する。
「ｐＫａ」は、特定の化合物の酸解離定数の１０対数のマイナスの値を意味する。
「Ｅ^０ｒｅｄ」は２５℃の水の中での還元反応中点での標準電位を意味する。
「バッファー」は、比較的狭い範囲内でそれが加えられる溶液のｐＨを維持する能力を持っている化合物または化合物の混合物を意味する。
「バッファー前駆物質」は、酸を含んでいる混合物に加えられた時、バッファーに帰着する化合物を意味する。
「電解質」は、水に加えられた時ある程度の解離を示す化合物を意味する。
「非酸化性電解質」は、酸化剤として働くことができるもの以外の電解質を意味する。
「塩化ベンザルコニウム」は、下記一般式によって定義される任意の化合物を指す。

式中、Ｒ^３はＣ_８－Ｃ_１８アルキル基、またはそのような化合物の任意の混合物である。「有効溶質濃度（effective solute concentration）」は、１リットル当たりのオスモル単位でしばしば示される、与えられた体積の溶液の中にある分子（非電解質からの）またはイオン（電解質からの）のモル数に起因する束一的性質の測定値である；

「δｐ」はダイポール分子内力ハンセン溶解パラメータ（ＨＳＰ）であり、溶液または溶剤の混合物について、下記式によって計算することができる：

δｄｉは、溶剤成分ｉについてのダイポール相互作用力からのエネルギー、ｘｄｉは組成物の溶剤成分の合計に対する溶剤成分ｉのパーセンテージ、ｎは溶剤成分の総数である。

「酸素酸」は、酸素を含んでいる鉱酸を意味する。
「置換された」は、対象のグループの意図した目的を邪魔をしないヘテロ原子または官能基（例えばヒドロカルビル基）を含むことを意味する。
「微生物」は、非制限的にバクテリア、ウイルス、菌類、ウイロイド、プリオンなどを含む、任意のタイプの微生物を意味する。
「抗菌物質」は、１つ以上の微生物の数の９０％（１ ｌｏｇ）よりも大きい低減を示す能力を持っている物質を意味する。
「活性な抗菌物質」は、生活環の活性な部分（例えば微生物の細胞分裂）にのみ、または主として有効な抗菌物質を意味する。
「殺菌剤」は、１つ以上のタイプの有害な微生物に対して致死性の物質を意味する。
「消毒剤」は、１つ以上のタイプのバクテリアに対して致死性の物質を意味する。
「ハイレベル消毒剤」は、内生胞子の形での少量のバクテリアを除いて、すべてのバクテリアを殺すことができる消毒剤を意味する。
「滅菌剤」は、形式にかかわらず、少なくともすべての微生物の６ ｌｏｇ（９９．９９９９％）を低減除去することができる物質を意味する。
「接触時間」は、組成物と表面および／または表面上の内生胞子との接触が許容される時間を意味する。
「硬表面」は、流体に対して非多孔性で、ほとんどの場合変形不可能な任意の表面を意味する。
「ヘルスケア」は、身体または精神の健康の維持または回復に含まれるか関係するものを意味する。

この明細書の全体にわたって、もし周囲のテキストが明示的に反対の企図を示さなければ、パーセンテージの形で与えられた値はすべて、ｗ／ｖ（すなわち組成物の１リットル当たりの溶質のグラム数）である。任意の具体的に参考文献として載せられた特許および／または公表された特許出願の適切な部分は、参照され本明細書に組込まれる。

実施態様の詳細な記述
殺胞子組成物（sporicidal composition）は、最初にその特性および成分の観点から記述され（それらの多くは広く利用可能で比較的安い）、その後用途の観点から記述される。

組成物の溶剤成分は典型的には有意の量の水を含んでいる。全体の体積に対して、組成物はしばしば２０％、２５％、３０％、３３％、３５％、４０％、４５％、５０％まで、または５５％（すべてｖ／ｖ）で含んでいる。１リットルあたりで、組成物はしばしば約５０から約５００ｍＬまで、一般に約７５から約４７５ｍＬまで、より一般に約１００から約４５０ｍＬまで、通常約１２５から約４２５ｍＬまで、典型的に約１５０から約４００ｍＬまで、最も典型的に２５０±５０ｍＬの水を含む。特に水を処理する必要はない（例えば脱イオン化および／または蒸留）。組成物の意図した抗菌効果の邪魔をしないことが好ましい。

組成物の溶剤成分はしばしば少なくとも１つの有機液体を含んでいる。また、いくつかの実施態様では、水（δｐはほぼ１６．０ＭＰａ^１／２）より低いδｐ値を備えた有機液体が好ましい。少なくとも１つの有機液体が溶剤成分の中にある場合、全体の溶剤成分のδｐ値は、一般に１６．０未満、１５．６未満、１５．２未満、１５．０未満、１４．６未満または１４．０ＭＰａ^１／２未満である。いくつかの実施態様では、全体の溶剤成分のδｐ値は、１３．１から１５．７ＭＰａ^１／２まで、１３．３から１５．６ＭＰａ^１／２まで、１３．５から１５．５ＭＰａ^１／２、および１３．７から１５．４ＭＰａ^１／２までであることができる。

有機液体はしばしば６０％以内の濃度で存在し、一般に５～５０％、より一般に１０～４５％、さらに一般に１５から４０％、および典型的に２０～３５％（すべて溶剤成分の全容積に基づいたｗ／ｖ）で存在する。

水に加えられる所定の有機液体（あるいは有機液体の混合物）の量は、ターゲットとされたδｐ値が知られている場合、式（Ｉ）を使用して計算することができる。同様に、計画されたδｐ値は、有機液体の量およびそれらの個々のδｐ値が知られている場合、式（Ｉ）を使用して計算することができる。

溶剤成分は、水のみまたは１以上の有機液体から成るか、本質的に成ることができる。例えば１つのエーテルおよび１つのアルコールではなく２つのエーテルおよび２つのアルコールのように、同じ種類の有機液体の混合物が好ましい。ある好ましい実施態様では、溶剤成分は水および有機液体から成るか、または本質的に成ることができる。好ましくは１５．５ＭＰａ^１／２未満のδｐ値を持っている。他の実施態様では、溶剤成分は水および２つ以上の有機液体から成るか、または本質的に成ることができる。結果として生じる溶剤成分のδｐ値は、式（Ｉ）を使用して計算することができる。再び、有機液体は１つのエーテルおよび１つのアルコールではなく２つのエーテルおよび２つのアルコールのように、同じ種類の有機液体の混合物が好ましい。

溶剤成分の中で使用することができる有機液体に関して、互いに、および／または水と混和性のものが好ましい。それらの非制限的例としては、アセトン、メチルブチルケトン、メチルエチルケトン、クロロアセトンなどのケトン；酢酸アミル、酢酸エチルおよび酢酸メチルなどの酢酸塩；アクリルアミド、メタクリル酸ラウリルおよびアクリロニトリルなどの（メタ）アクリレートおよび誘導体；ベンゼン、クロロベンゼン、フルオロベンゼン、トルエン、キシレン、アニリンおよびフェノールなどのアリール化合物；ペンタン、イソペンタン、ヘキサン、ヘプタンおよびデカンなどの脂肪族アルカン；クロロホルム、メチレンジクロライド、クロロエタンおよび四塩化エチレンなどのハロゲン化アルカン；シクロペンタンおよびシクロヘキサンなどの環式アルカン；およびエチレングリコール、ジエチレングリコール、プロピレングリコール、ヘキシレングリコールおよびグリセリンなどの多価アルコールがあげられる。組成物の溶剤成分での使用にそのような有機液体を選ぶ場合、組成物の中で使用されている酸および任意に塩類のいずれかと反応する官能基を含んでいるものを回避することが考慮され、より高度の規定により事前に承認された範囲内のものであることが好ましい。

有機液体に関して、好ましい化合物としては、それらの低い組織毒性および環境フレンドリーな性質によりエーテルとアルコールがあげられる。これらは、組成物中の他の成分の溶解限度までの濃度で加えることができる。

溶剤成分の中で使用することができるエーテルベースの液体としては、次の一般式によって定義されたものがあげられる：
R¹(CH₂)_xO-R²-[O(CH₂)_z]_yZ (II)
式中、ｘは０～２０の整数（任意に２≦ｘ≦２０であり、１以上のエチレン性不飽和を含む）、ｙは０または１、ｚは１～４の整数、Ｒ^２はＣ_１－Ｃ_６の直鎖または分岐鎖アルキレン基、Ｒ^１はメチル、イソプロピルあるいはフェニル基である。また、Ｚは水酸基またはメトキシ基である。溶剤成分の中で使用することができるグリコールエーテル（Ｚ=ＯＨである式（ＩＩ）の化合物）の非制限的例は、表２に示される。

＊ ９位置で不飽和を含んでいる。

環式およびＣ_１－Ｃ_１６非環式（直鎖、または分岐鎖、飽和または不飽和）アルコール、任意に１以上のエチレン性不飽和および／またはアルコール酸素以外の１つ以上のヘテロ原子（ハロゲン原子、アミン窒素など）が、組成物の溶剤成分の有機液体として使用する事ができる。代表的な例の非制限的例は、次の表に示される。

有機液体を含む溶剤成分についてのさらに詳しい情報については、興味を持っていたリーダーは、米国特許公開２０１６／００７３６２８を参照。

組成物は酸性であり、４以下のｐＨを有し、特定の実施態様では、３．８、３．７、３．６、３．５、３．４、３．３、３．２、３．１、３．０、２．９、２．８、２．７、２．６、２．５、２．４、２．３または２．２以下のｐＨを有することができる。組成物は少なくとも１．５のｐＨ、一般には少なくとも１．７５、そして典型的には少なくとも２．０のｐＨを有する。ｐＨの範囲は各々の最大と各々の最低を組み合わせることができる。組成物の実施態様は、ｐＨ価として、２．７５±１．１５、２．７０±１．０５、２．６５±１．０、２．６０±０．７５、２．５５±０．６０、２．５０±０．５５および２．４５±０．４５を有することができる。

酸性度は１つ以上の酸を溶剤成分に加えること（または逆）により達成することができる。強い（ミネラル）酸、たとえばＨＣｌ、Ｈ_２ＳＯ_４、Ｈ_３ＰＯ_４、ＨＮＯ_３、Ｈ_３ＢＯ_３など、または有機酸、特に有機的なポリ酸を使用することができる。有機酸の例としては、一塩基酸、たとえばギ酸、酢酸および置換されたもの（例えばヒドロキシ酢酸、クロロ酢酸、ジクロロ酢酸、フェニル酢酸など）、プロパン酸および置換された変形（例えば乳酸、ピルビン酸など）、様々な安息香酸（例えばマンデル酸、クロロマンデル酸、サリチル酸など）、グルクロン酸など；二塩基酸、たとえばシュウ酸および置換された変形（例えばオキサミド酸）、ブタンジオン酸および置換された変形（例えばリンゴ酸、アスパラギン酸、酒石酸、シトラマル酸など）、ペンタン２酸および置換された変形（例えばグルタミン酸、２－ケトグルタル酸など）、ヘキサン二酸および置換された変形（例えば粘液酸）、ブタンジオン酸（シスとトランス異性体の両方）、イミノ２酢酸、フタル酸など；三塩基酸、たとえばクエン酸、２－メチルプロパン－１，２，３－トリカルボン酸、ベンゼントリカルボン酸、ニトリロ三酢酸など；四塩基酸、たとえばプレーニト酸、ピロメリット酸など；またさらに高度の酸、例えばペンタ－、ヘキサ－、ヘプタープロトン酸など。トリ－、テトラ－またはより高度の酸が使用される場合、カルボキシルプロトンを１つ以上の同じかまたは異なるカチオン性原子または基（例えばアルカリ金属イオン）と置換することができる。。

内生胞子の中にある様々な層に起因する防御物のうちのいくつかの性質のために、組成物は少なくとも１つの酸化性酸を含まなければならない。多くの酸素酸、たとえば過塩素酸、塩素酸、亜塩素酸、次亜塩素酸、ペルオキソ硫酸、硫酸、亜硫酸、次亜硫酸、ピロ硫酸、二亜硫酸、チオ亜硫酸、過硝酸、硝酸、亜硝酸、次亜硝酸、過クロム酸、クロム酸、重クロム酸、過マンガン酸、マンガン酸、過リン酸、リン酸、リン、次亜リン酸、過ヨウ素酸、ヨウ素、亜ヨウ素酸などが、酸化性酸であると考えられる。有機的な酸化性酸は非制限的に、過酢酸、過蓚酸およびジペルオキソ酸を含む。

好ましい酸化性酸は、比較的高いｐＫａ値（つまり、特に強酸であると考えられない）および正の標準電位（Ｅ^０ｒｅｄ）があるものである。前者はあまり低くないｐＨ価がある組成物、すなわち約１．５以上、好ましくは約１．７５以上、より好ましくは約２以上、最も好ましくは約２．２以上の生成物を許容し、その結果、組成物はその取扱、それらの表面への適用および／または処理される物品の成分の破壊に対する極端な保護対策なしで使用することができる。正の標準電位は、酸が十分な酸化するキャパシティーを持つことを可能とし、ある内生胞子の防御に打ち勝つかまたはこれを避けることを許容し、たとえばジスルフィド結合および内生胞子殻上のタンパク質ポリマーを酸化し、外部の胞子殻の開裂を可能にする。

好ましいｐＫａ値は約１より大きく、約１．５より大きく、約２より大きく、約２．５より大きく、約３より大きく、約３．５より大きく、約４より大きく、約４．５より大きく、約５より大きく、約５．５よりも大きい。他のステップが、たとえば組成物のｐＨ範囲（先に議論された）および有効溶質濃度（以下に議論される）のような組成物の必要または所望の性状を保証するために他の手段が取られる場合、より低いｐＫａ値を備えた酸を使用することができる。

好ましくはＥ^０ｒｅｄ値は、少なくとも＋０．２０Ｖ、少なくとも＋０．２５Ｖ、少なくとも＋０．３３Ｖ、少なくとも＋０．４０Ｖ、少なくとも＋０．５０Ｖ、少なくとも＋０．６０Ｖ、少なくとも＋０．６７Ｖ、少なくとも＋０．７５Ｖ、少なくとも＋０．８０Ｖ、少なくとも＋０．９０Ｖ、少なくとも＋１．００Ｖ、少なくとも＋１．１０Ｖ、少なくとも＋１．２０Ｖ、または少なくとも＋１．２５Ｖである。

いくつかの酸化性酸は、水溶液において特に安定していない。従って、酸化性酸を含み生体外で調製される組成物を提供することは有利である。たとえば、１つの好ましい実施態様の中で、組成物の溶剤成分に、接触された時に可逆的に過酢酸を形成する酢酸および過酸化水素を提供することができる。

使用された所定の酸の量は、もしあれば、組成物の中で希望の有効溶質濃度を達成するために利用され、与えられた組成物の目標ｐＨ、および化合物のタイプおよび量を考慮して選ばれた酸のｐＫａ値から決定することができる。（浸透性についてのより詳細な議論および浸透性を調節する化合物のタイプは、以下に示される。）

さらに組成物の溶質成分中に、Ｚｅｒｅｗｉｔｉｎｏｆｆ決定に供された時に任意の活性水素原子を含まない電解質酸化剤が存在する。潜在的に有用な電解質の非制限的な例は、好ましくは無機の酸化剤であり、たとえばマンガン酸塩、過マンガン酸塩、ペルオキソクロマート、クロム酸塩、重クロム酸塩、ペルオキシモノスルファートなどの、アニオンを含む化合物である。（これらの電解質のうちのいくつかはｐＨに影響を与えることができる。したがって、与えられたｐＨを持つように調剤された組成物は、酸化剤の追加の後に調節を要求することがある。好ましくは少なくとも＋１．２５Ｖ、より好ましくは少なくとも＋１．５Ｖ、より好ましくは少なくとも＋１．７５Ｖ、さらに好ましくは＋２．０Ｖ、そして最も好ましくは少なくとも＋２．２５ＶのＥ^０ｒｅｄ値を有する化合物が好ましい。

電解質酸化剤は、一般にそれらの個々の溶解限度までで加えることができるが、最大量は一般に全体の組成物の１リットル当たり約３０ｇのオーダーである。電解質酸化剤の例示的な範囲は、約２から２５ｇ／ｌ、３から約２１ｇ／ｌ、４から約１８ｇ／ｌ、５から約１６ｇ／ｌ、および６から約１４ｇ／ｌである。電解質酸化剤の例示的な量は、１７．５±１２ｇ／ｌ、１５±９ｇ／ｌ、１２．５±６ｇ／ｌおよび１０±３ｇ／ｌである。

一旦酸と酸化剤が水を含んでいる溶剤成分に加えられれば（またはその逆）、各々は少なくとも部分的に解離する。

溶剤成分、および、１つ以上の酸化性酸および１つ以上の電解質酸化剤から成るか本質的に成る溶質成分を含む組成物は、内生胞子に対する効能を持つことができる。つまり、いくらかまたはすべての内生胞子を増殖状態に戻ることができなくさせることができる。しかしながら、追加のサブコンポーネントを含んでいる溶質成分を含んでいる組成物は、ある状況でより高い効能を示すことができた。

ある実施態様では、組成物の有効溶質濃度は比較的高い。しばしば有効溶質濃度（浸透性）が増加すると効能が増加する。豊富な溶質の存在は、皮膜を横切る高い浸透圧を引き起こすのに十分な量が存在することを保証し、細胞融解に結びつく。

皮膜を横切る輸送の容易さと溶剤キャパシティー（つまり溶剤成分の所定量に、（典型的に）等モル量のより大きな分子よりより多くの小分子が含まれる能力）のために、より小さな分子はより大きな分子より一般に有効であるが、この効能は溶質成分の個々の化合物の特定の同一性または特性に依存しない。

任意の数の溶質を、組成物の浸透性を増加させるために使用することができる。

組成物の増加した浸透性の達成への１つのアプローチは、大量の非酸化性電解質（特にイオン化合物（塩類））を加えることによる；例えば米国特許７，０９０，８８２を参照。酸化性酸および無機酸化剤のように、非酸化性電解質は、水を含んでいる溶剤成分へ導入される時に解離する。

１つ以上の有機酸が組成物の中で使用される場合、希望の目標を過ぎたｐＨに組成物のｐＨを増加させずに、浸透性を増加させることへの別のアプローチは、１以上の酸の塩類、または１つ以上の他の有機酸の塩類を含むことである。そのような化合物は、解離の際に、組成物中の緩衝系を提供しつつ、ヒドロニウムイオンのモル濃度に大きな影響を与えずに、組成物中の溶質の有効な量を増加させる。

例えば、組成物が酸を含んでいる場合、その酸（または他の酸）の１つ以上の塩類のフラクションを、過剰（例えば、３倍から１０倍、少なくとも５倍または少なくとも８倍）に含むことができる。塩の対カチオン部分の同一性は特に重要であると考えられず、一般的な例としてアンモニウムイオンとアルカリ金属を含むことができる。ポリ酸が使用される場合、カルボキシル基の全ての水素または全部よりも少ない水素が、同じか又は異なるカチオン性の原子又は基で置き換えられることができる。例えば、モノ－、ジ－およびトリナトリウムクエン酸塩は、クエン酸と使用されるかまたは別の有機酸と共に使用されるかに関わらず、すべて潜在的に有用なバッファー前駆物質を構成する。しかしながら、トリナトリウムクエン酸塩は、３つの利用可能な塩基性部位があるので、それはクエン酸ジナトリウム（それは２つのそのような部位がある）よりも５０％大きい理論的な緩衝能を有し、クエン酸ナトリウム（それはたった１つのそのような部位がある）の２００％までの理論的な緩衝能を持っている。

どのように達成されるかにかかわらず、組成物の有効溶質濃度は少なくとも１．０Ｏｓｍ／Ｌ、一般に少なくとも１．２５Ｏｓｍ／Ｌ、しばしば少なくとも１．５Ｏｓｍ／Ｌ、一般に、少なくとも１．７５Ｏｓｍ／Ｌ、一般に少なくとも２．０Ｏｓｍ／Ｌ、典型的に少なくとも２．２５Ｏｓｍ／Ｌ、より典型的に少なくとも２．５Ｏｓｍ／Ｌである。（比較のため、生物学の用途では、０．９％（重量による）の食塩水は約０．３ Ｏｓｍ／Ｌであり、典型的に適度の浸透力を持っていると考えられており、３％（重量による）の食塩水は約０．９ Ｏｓｍ／Ｌであり、一般に高張性であると考えられている。いくつかの実施態様では、組成物は、少なくとも約３．０、少なくとも約３．２５、少なくとも約３．５、少なくとも約３．７５、または少なくともた約４．０ Ｏｓｍ／Ｌの有効溶質濃度を有し、上限は溶剤成分への溶質の溶解限度によって定義されてる。いくつかの実施態様では、有効溶質濃度の最大は４．５、４．７５、５．０、５．２５、５．５、５．７５、６．０、６．２５、６．５、６．７５、７．０、７．２、７．４、７．６、７．８、８．０、８．２、８．４、８．６、８．８、または約９ Ｏｓｍ／Ｌである。有効溶質濃度範囲は、任意の下限および任意の上限のいずれかの組み合わせを含むことが意図される。本発明による組成物の有効溶質濃度は、内生胞子に対して有効（つまり、致死性である）になるように意図され、米国特許番号８，９４０，７９２および９，３１４，０１７、および米国特許公開番号２０１０／００８６５７６、２０１３／０２７２９２２、２０１３／００７９４０７および２０１６／００７３６２８に述べられていたものより一般に高い。それらのすべては、プランクトン生物のバクテリアおよびバイオフィルムに一般に関する。

有効溶質濃度は既知の技術を使用して計算することができ、また所望であれば、様々な束一的性質測定値、たとえば沸点上昇、凝固点降下、浸透圧および蒸気圧降下のうちのいずれかを使用して測定することができる。

前のパラグラフにリストされたドキュメントに述べられていた組成物の多くと異なり、本発明の殺胞子組成物は溶質成分中の界面活性剤を含むことを要求しない。だがある好ましい実施態様では、１つ以上の湿潤剤を含んでいる。これは非制限的に界面活性剤を含む。

本質的に、水中で表面活性な特性を有する任意の物質を、組成物の溶剤成分の中に水があるかどうかにかかわらず使用することができる。あるタイプのイオン電荷を有するものは抗菌性を高めると予想される。そのような荷電が、バクテリアと接触した際に、より有効な細胞膜崩壊と、最終的な細胞漏出および細胞融解に結びつくと考えられるからである。

極性界面活性剤は無極性の界面活性剤より一般に効果的である。イオン性界面活性剤は最も有効である。極性界面活性剤については、アニオン性界面活性剤が最も有効なものであり、両性イオン界面活性剤およびカチオン性界面活性剤が後に続く。さらに、より小さな界面活性剤は大きいものより効果的である。極性ヘッドに結合する側鎖基のサイズは、イオン性界面活性剤の効能に影響を及ぼす。極性ヘッドに結合する側鎖基のより大きな寸法およびより多くの数は、界面活性剤の効能を減少させることがある。

限定するものではないが、潜在的に有用なアニオン性界面活性剤としては以下が含まれる。アンモニウムラウリル硫酸塩、スルホコハク酸ジオクチルナトリウム、ペルフロオロブタンスルホン酸、ペルフルオロノナン酸、ペルフルオロオクタンスルホン酸、ペルフルオロオクタン酸、カリウムラウリル硫酸塩、ナトリウムドデシルベンゼンスルホン酸塩、ラディウム(ladium)ラウレス硫酸塩、ナトリウム ラウロイルサルコシネート(lauroyl sarcosinate)、ナトリウム ミレス(myreth)硫酸塩、ナトリウムミレス硫酸塩、ナトリウムパレス(pareth)硫酸塩、ステアリン酸ナトリウム、ナトリウム チェノデオキシ(chenodeoxy)－コール酸塩、Ｎ－ラウロイルサルコシン(lauroylsarcosine)ナトリウム塩、リチウム硫酸ドデシル、１－オクタンスルホン酸ナトリウム塩、ナトリウムコール酸塩水化物、デオキシコール酸ナトリウム、硫酸ドデシルナトリウム（ＳＤＳ）、ナトリウムグリコデオキシコール酸塩、ラウリル硫酸ナトリウム（ＳＬＳ）、および米国特許６，６１０，３１４の中で述べられたアルキルリン酸塩。ＳＬＳが特に好ましい物質である。

限定するものではないが、潜在的に有用なカチオン性界面活性剤としては以下が含まれる。セチルピリジニウム塩化物（ＣＰＣ）、セチルトリメチルアンモニウム塩化物、塩化ベンゼトニウム、５－ブロモ－５－ニトロ－ｌ，３－ジオキサン、ジメチルジオクタデシルアンモニウム塩化物、臭化セトリモニウム、ジオクタ－デシルジメチルアンモニウム臭化物、テトラデシルトリメチルアンモニウムボリン(borine)、塩化ベンザルコニウム（ＢＫ）、ヘキサデシルピリジニウム塩化物一水化物およびヘキサデシルトリメチル－アンモニウム臭化物。

限定するものではないが、潜在的に有用な非イオン界面活性剤としては以下が含まれる。ナトリウムポリオキシエチレングリコールドデシルエーテル、Ｎ－デカノイル－Ｎ－メチルグルカミン、ジギトニン、ｎ－ドデシル β－Ｄ－メルトサイド(maltoside)、オクチル β－Ｄグリコピラノシド、オクチルフェノールエトキシレート、ポリオキシエチレン（８）イソオクチルフェニルエーテル、ポリオキシエチレンソルビタンモノラウレート、ポリオキシエチレン（２０）ソルビタンクロルアミドプロピルジメチルアンモニオ］－２－ヒドロキシ－１－プロパンスルホン酸塩、３－［（３－クロルアミドプロピル）ジメチルアンモニオ］－ｌ－プロパンスルホン酸塩、３－（デシルジメチルアンモニオ）プロパンスルフォナート インナーソルト、Ｎ－ドデシル－Ｎ，Ｎ－ジメチル－３－アンモニオ－ｌ）－プロパンスルフォナート。

限定するものではないが、潜在的に有用な両性イオン界面活性剤としては以下が含まれる。スルホン酸塩（例えば３－［（３－コラミド（cholamide）プロピル）ジメチルアンモニオ］－ｌ－プロパンスルフォナート）、スルタイン類(sultaines)（例えばコカミドプロピル ヒドロキシスルタイン）、ベタイン（例えばコカミドプロピルベタイン）およびリン酸塩（例えばレシチン）。

他の潜在的に有用な材料については、興味を持った読者は、例えば、米国特許４，１０７，３２８ および６，９５３，７７２、７，９５９，９４３、および８，９４０，７９２に示された他の物質を参照のこと。

組成物に加えられる湿潤剤の量は、目標有効溶質濃度および組成物の溶質成分の他のサブコンポーネントとの相溶性によってある程度まで制限される。組成物の中に存在する湿潤剤の総量は、少なくとも０．１％から、少なくとも０．２５％から、少なくとも０．５％から、少なくとも０．７５％から、または少なくとも１％から５％まで、一般的に４％まで、より一般に３％まで、典型的には２．５％までで変動することができる。時々、特定の最終用途（特定の試験、調査および承認のない）用の組成物の中に存在することのできるあるタイプの湿潤剤（特に界面活性剤）の最大量は、政府の規制によって設定される。

１以上のタイプの界面活性剤が使用される場合、大多数は好ましくはイオン性界面活性剤であり、イオン性と非イオン性の界面活性剤の比率は一般に約２：１から約１０：１まで、一般に約５：２から約１５：２、および典型的に約３：１から約７：１までである。さらに、当該技術分野で知られているように、組成物は例えば、アニオンとカチオン性、または両性イオンとアニオン性またはカチオン性のように、適合性がない界面活性剤タイプを含むべきでない。

抗菌性組成物は、特定の最終用途について本質的な態様で否定的にその効能に影響するとしても、その使用により法的責任を満たすために様々な添加物およびアジュバンドを含むことができる。例としては、非制限的に、皮膚軟化剤、殺真菌剤、香水、色素、染料、消泡剤、起泡剤、着香料、研磨材、漂白剤、防腐剤（例えば酸化防止剤）などを含む。アメリカ食品薬品局によって承認された添加物の包括的なリストは、ｈｔｔｐ：／／ｗｗｗ．ｆｄａ．ｇｏｖ／Ｄｒｕｇｓ／ＩｎｆｏｒｍａｔｉｏｎＯｎＤｒｕｇｓ／ｕｃｍ１１３９７８．ｈｔｍ（本出願の申請日の時点で有効なリンク）での圧縮されたテキストファイルとして利用可能である。

組成物の効能は、効能のために活性な抗菌物質（上に定義された）の包含を要求しない。しかし、そのような材料はある実施態様では含むことができる。潜在的に有用な活性な抗菌剤添加物の非制限的な例は、Ｃ_２－Ｃ_８アルコール（溶剤成分の有機液体として使用される以外のもの、またはそれらに加えて）、たとえばエタノール、ｎ－プロパノールなど；アルデヒド、たとえばグルタルアルデヒド、ホルムアルデヒドおよびｏ－フタルアルデヒド；ホルムアルデヒドを生成する化合物、たとえばノキシチオリン、タウロリン、ヘキサミン、尿素ホルムアルデヒド、イミダゾロン派生物など；アニリド、特にトリクロカルバン；ビグアニジド、たとえばクロルヘキシジンとアレキシジン、重合体の形式、たとえばポリ（ヘキサメチレン）ビグアニド；ジカルボキシイミドアミド、例えば置換されたか非置換のプロパミジンおよびそれらのイセチオン酸塩塩類；ハロゲン原子を含むかまたは遊離性化合物、たとえば漂白剤、ＣｌＯ_２、ジクロロイソシアヌレート塩類、トシルクロルアミド、ヨウ素（またヨードフォア）など；銀および銀化合物、たとえば酢酸銀、スルファジアジン銀および硝酸銀；フェノール、ビスフェノールおよびハロフェノール（ヘキサクロロフェンおよびフェノキシフェノール、たとえばトリクロサンを含む）；および第四アンモニウム化合物。

以下の表は、本発明にかかる例示の組成物の成分リストを提供する。量はグラムで示され、成分を１Ｌの体積にするために蒸留水を加えた。

本発明の様々な実施態様は例として示され、制限を与えるものではない。先の表から明白なように、好ましい特徴、範囲、数値制限および実施態様は、実現可能な程度であり、妨げまたは非互換性にない限り、他の一般に好ましい特徴、範囲、数値制限および実施態様と組み合わせることができることが企図される。

本発明による組成物は、抗菌性で有り、実際上抗菌性で有り、攻撃的な抗菌性であることが意図される。その意図した使用法は無生物に関連し、たとえば、特に硬表面、特にヘルスケア設備で一般に見つかるものに関連する。

組成物は、配給装置（例えばモップ、ラグ、ブラシ、織物のワイプなど）によって、注入、スプレーまたはミストをはじめとする様々な方法で無生物（特に硬表面）に適用することができる。

あるいは、ある対象は組成物に浸されることができる。これは、多数の患者に使用するために設計された医療用具、例えば透析装置、様々な内視鏡、十二指腸内視鏡など、内視鏡検査法の付属品、たとえば握り手およびはさみなど、手動器具、たとえばクランプと鉗子、腹腔鏡の外科の付属品、整形外科のハードウェアおよび脊椎外科ハードウェア、たとえばクランプおよび治具のうちの任意のものに特に該当する。本発明の組成物は、過酢酸と漂白剤よりも穏やかな［Ｈ^＋］を有するので、それは殺菌、高いレベル殺菌または滅菌を、負の効果、たとえば重合体の分解、金属腐食、ガラスやプラスチックのエッチングなどを生ずることなく達成することができる。

一旦表面または対象に適用されたならば、組成物の様々な成分は任意の存在する内生胞子に作用し、それらの様々な防御物を回避するか分解する。組成物が内生胞子を処理（つまり、それらが増殖状態に返ることができないことを保証する）するのに必要な接触時間は、特定の組成物およびその意図した最終用途に広く依存して変わる場合がある。

例えば、組成物の実施態様はヘルスケア設備中の硬表面に適用される場合に、少なくとも３．０、３．２、３．４、３．６、３．８、４．０、４．２、４．４、４．６、４．８または５．０ ｌｏｇの低減を、１２００秒以下、１０５０秒以下、９００秒以下、８４０秒以下、７８０秒以下、７２０秒以下、６６０秒以下または６００秒以下の接触時間で達成できる。ＡＳＴＭ Ｅ２１９７－１１に従ってテストされた時、ある実施態様は６００秒の接触時間の後に少なくとも４．５ ｌｏｇの低減を達成することができる。

これら、および／または他の組成物の実施態様で、医療用具用のソーキングバスとして使用することが意図され、少なくとも５．０、５．１、５．２、５．３、５．４、５．５、５．６、５．７、５．８、５．９、または６．０ ｌｏｇの低減を、約１４，４００秒まで、約１０，８００秒まで、約７２００秒まで、約５４００秒まで、または約３６００秒までの接触時間の後に達成できた。ＡＯＡＣ公式方法９６６．０４に従ってテストされた時、ある実施態様は１８００秒の接触時間の後に合格するスコアを達成することができた。

殺胞子組成物の実施態様は、ハイレベルの消毒剤、または殺菌剤として分類されることができる。

適切な時間（予期されたバクテリアの量、潜在的に存在するバクテリアのタイプ、対象／表面などの重要性などの観点から）の間、組成物と与えられた対象または表面と接触させた後、それは残され蒸発されるか、または好ましくは、水または薄い食塩水ですすいで除去することができる。

以下の非制限的な例となる実施例は、本発明の実施に役立つ詳細な条件および材料を提供する。それらの例の全体にわたって、室温との言及は約２２℃を指す。

実施例
例１（比較例）：過酢酸
内生胞子が存在するか疑われる場所への広く認識され推奨された殺菌処理は、１０％（ｗ／ｖ）の過酢酸の対象面への１０分の接触時間での適用である。従って、過酢酸は、本発明の組成物のためのよい比較を構成する。

２つの過酢酸溶液が、蒸留水を過酢酸を含むフラスコに加えることにより調製された。溶液のうちの１つの濃度は５％（ｗ／ｖ）だった。他方の濃度は１０％（ｗ／ｖ）だった。これらの溶液のための計算された有効溶質濃度はそれぞれ１．９７および３．９５Ｏｓｍ／Ｌだった。

５０ｍＬビーカーに、追加の２０ｍＬの蒸留水を加えた。清浄なすずがれて乾燥された、キャリブレートされた温度補償ｐＨ計のプローブが、ビーカー内の下部に入れられた。その後、過酢酸溶液の連続するアリコートは、添加の後のｐＨを測定しつつビーカーに加えられた。滴定は室温で行なわれた。

これらの滴定の結果は、表５に示される。

上記のデータは、どちらの過酢酸溶液の小さなアリコート（つまり１体積％未満）さえの追加で３未満に水のｐＨが低下し、過酢酸溶液のたった１ ｍＬ（５体積％）の追加が、ｐＨを２未満にしたことを示す。さらに、どちらの酸性溶液の漸近のｐＨも約１．１±０．１である。

さらに、米国ＥＰＡの推薦は少なくとも２．５％（ｗ／ｖ）の過酢酸溶液であり、作表されたデータによれば、１．２５以下のｐＨを持っている。

したがって、この勧められた殺菌手続き（つまり２．５－１０％の過酢酸溶液の適用）を行なうすべての作業者は、強酸を扱うのに適切な使用上の注意、例えば保護手袋、保護アイウエア、呼吸マスクなどを使用しなければならない。

例２（比較例）：漂白剤
内生胞子が存在するか疑われる場所への、別の広く認識され推奨された殺菌処理は、漂白剤の対象面との１０分の接触時間での適用である。

５０ｍＬビーカーに、漂白剤（つまり８．２５％（ｗ／ｖ）の次亜塩素酸ナトリウム）の５ ｍＬを入れた。清浄なすずがれて乾燥された、キャリブレートされた温度補償ｐＨ計のプローブが、ビーカー内の下部に入れられた。その後、過酢酸溶液の連続するアリコートは、添加の後のｐＨを測定しつつビーカーに加えられた。

この滴定のデータは、表６に示される。

この表のデータは、希釈されていない８．２５％の漂白剤溶液のｐＨはほぼ１３であり、４分の３へのＣｌＯ^－濃度の低減はこれを約１１．９にするに過ぎないことを示す。反対に、８．２５％から５％（両方ともｗ／ｖ）に濃度を減らすことは、ほとんど半分（つまり２．２８から１．３４Ｏｓｍ／Ｌまで）に低減された計算有効溶質濃度に帰着する。

したがって、この勧められた殺菌手続き（つまり漂白剤の適用）を行な全ての作業者は、強塩基を扱うのに適切な使用上の注意、例えば保護手袋、保護アイウエア、呼吸マスクなどを使用しなければならない。

例３－１０（比較例）：
生体外の死滅までの時間
ある殺胞子組成物の効能がクロストリジウム・ディフィシル（ＡＴＣＣ＃ ４３５９８）に対して調べられた。この試験では、バクテリアの低減は、様々な時間測定ポイント、典型的には１５分（９００秒）ごとに、処理していないコントロール（液体として使用する燐酸塩緩衝食塩水）に対する比較によって決定される。

テストされる溶液の９．９ｍＬのアリコートが２０ｍＬ試験管内に置かれた。テスト培地の０．１ｍＬ（薄められた時に、１ｍＬあたり約１０^６のＣ．Ｄｉｆｆのコロニー形成単位（ＣＦＵ））が、試験管に加えられた。その後、それは攪拌された。所定の接触時間の後、サンプル／テスト培地懸濁液の１．０ｍＬが、適切な中和溶液の９．０ｍＬを含む無菌の試験管へ転送され、さらに攪拌された。

その後、中和溶液の４．５ｍＬの中へ被験液の０．５ｍＬアリコートを転送して１０倍の段階稀釈液を調製した。各希釈の間に撹拌された。これらの稀釈液から、２つの１．０ｍＬアリコートは脳・心臓寒天平板上に広げてプレートされた。その後、それは約７２時間３５℃±２℃で酸素欠如状態でインキュベートされた。

インキュベーションに続いて、プレート上のコロニーがカウントされ、２０～２００ＣＦＵ範囲のものがデータ計算で使用された。この試験からのｌｏｇ低減は、対照試料から回収されたＣＦＵ／ｍＬから処理されたものから回収されたＣＦＵ／ｍＬ引くことにより行なわれる。

多くの組成物がこのようにして試験され、表７の最後のカラムに、胞子の６ ｌｏｇ低減を達成する時間が示された。組成物の各々は、ターゲットとされた約２．３Ｏｓｍ／Ｌの有効溶質濃度および目標ｐＨの４に基づいて調製された。緩衝系のカラムでは、「Ａ」は酢酸／酢酸ナトリウムを表わし、「Ｃ」がクエン酸／トリナトリウムクエン酸塩を表わす。オキシダントのカラムでは、「ＰＰＯＭＳ」はペルオキシモノスルファートを表わし、すべて０．２２％（ｗ／ｖ）である。また「ＰＡＡ」は、記載された濃度の過酢酸を表わす。界面活性剤としてＢＫを使用するものとして指定された組成物は０．２１％（ｗ／ｖ）を含む。ＳＤＳを使用するものとして指定されたものは０．１７５％（ｗ／ｖ）を含む。有機液体を含むと示された組成物については、イソプロパノール溶液（水中の７０％）が使用された。

先の表の中で示される時間は、最も営利上利用可能な殺胞子生成物（それらは典型的にはＣ．Ｄｉｆｆ殺菌のために２４０～２１６０分を必要とする）で達成することができるものよりよい。さらに、これらの組成物の各々への暴露は、そのような商品に接することよりはるかに危険がない。

例 １１－２２
上記の表７からのデータは、アニオン性界面活性剤（ＳＤＳ）を使用する組成物がカチオン性界面活性剤（ＢＫ）を使用するものよりもよい結果を提供することを示すように見える。

さらに効能を調査するために、追加の組成物が調製された。ポリソルベートタイプ非イオン性界面活性剤の０．０２％（ｗ／ｖ）を加え、例４および９－１０で使用されたと各々同じ量のＳＤＳを使用した。２５０ｇ／ｌの３０％Ｈ_２Ｏ_２溶液および３００ｇ／ｌの有機液体をそれぞれ含む。各組成物の電解質酸化剤（ＥＯＡ）はＰＰＯＭＳだった。クエン酸を含む組成物は１４０ｇ／ｌのクエン酸および１７．５ｇ／ｌのトリナトリウムクエン酸塩二水和物（前もって定義した目標値に有効溶質濃度を上げるために示された量のＮａＣｌを加えた）を含んでいた。その一方で酢酸を含む組成物は示された量の酢酸（ＡＡ）および酢酸ナトリウム（ＳＡ）を含んでいだ。

量的キャリアー試験は、次の表の最後のカラムで示されている胞子に対する効能について、ＡＳＴＭ標準Ｅ２１９７－１１との本質的な合致のもとで行なわれた。

これらの表からのデータの統計分析は、酸のタイプが効能に最も大きな影響を及ぼすことを示唆し、次いでｐＨ（低いものがよい）、溶剤のタイプおよび有効溶質濃度である。電解質酸化剤の量は、より小さい効果があるように見える。

例 ２３－３１
中心点（例２３として再実行）として例２２を使用して、追加の量的キャリアーテストが、ターゲットｐＨ（２．５）、有効溶質濃度（約６．４ Ｏｓｍ／Ｌ）およびＰＰＯＭＳの量（８ｇ／ｌ）が一定に保持された、一連の調製した組成物について行なわれた。アニオン性界面活性剤はＳＤＳだった。一方非イオン性界面活性剤はポリソルベートだった。各々の有機液体は７０％（ｖ／ｖ）のＩＰＡ溶液だった。

例１１－３１のためのデータの分析は、ｐＨおよび酸のタイプが最も大きなインパクトを持っており、次いで有効溶質濃度および溶剤のタイプであることを示した。

例 ３２－４０
付加的な量的キャリアー試験が、ｐＨ（２．５）および有効溶質濃度（約６．４ Ｏｓｍ／Ｌ）が一定に保持された組成物について行なわれた。このセットでは、電解質酸化剤（ＰＰＯＭＳ）の量、溶剤（Ｅは無水エタノールを表わす）の量とタイプ、過酸化水素水の量およびアニオンと（ＳＤＳ）と非イオン物質（ポリソルベートタイプ）界面活性剤の量を変えた。

酸のタイプおよび量が一定に保持される場合、最も統計的有意な要因は、溶剤タイプの２ウェイの組み合わせ、溶剤濃度および電解質酸化剤の量であることをこのデータの分析は示唆する。本発明は以下の実施態様を含む。
実施態様第１項： １つ以上のタイプの内生胞子の存在に感染しやすい表面を処理する方法であって、
該表面を、１．５以上のｐＨを有し、１．５～９Ｏｓｍ／Ｌの有効溶質濃度を有する酸性の殺胞子組成物と接触させることを含み、
該組成物は、（１）水を含む溶剤成分、および
（２）少なくとも１つの酸化性酸の解離生成物および１以上の電解質酸化剤を含む溶質成分を含む、方法。
実施態様第２項： 前記組成物の前記溶剤成分が１６．０ＭＰａ^１／２未満のδｐ値を持っている有機液体をさらに含む、実施態様第１項記載の方法。
実施態様第３項： 前記有機液体がグリコールエーテルである、実施態様第２項記載の方法。
実施態様第４項： 前記組成物の前記溶質成分がさらにアニオン性界面活性剤を含む、実施態様第１から３のいずれか１項記載の方法。
実施態様第５項： 前記組成物の前記溶質成分がさらに非イオン性界面活性剤を含む、実施態様第４項記載の方法。
実施態様第６項： 前記組成物の前記溶質成分が１以上の非酸化性電解質の解離生成物をさらに含む、実施態様第４項記載の方法。
実施態様第７項： 前記組成物の前記溶質成分が１以上の非酸化性電解質の解離生成物をさらに含む、実施態様第１から３のいずれか１項記載の方法。
実施態様第８項： 前記１以上の非酸化性電解質が少なくとも１つの有機酸の塩を含む、実施態様第７項記載の方法。
実施態様第９項： 前記組成物が少なくとも２Ｏｓｍ／Ｌの有効溶質濃度を有する、実施態様第７項記載の方法。
実施態様第１０項： 前記組成物が少なくとも３Ｏｓｍ／Ｌの有効溶質濃度を有する、実施態様第７項記載の方法。
実施態様第１１項： 前記組成物が高々４のｐＨを有する、実施態様第１から３のいずれか１項記載の方法。
実施態様第１２項： 前記組成物の前記溶剤成分が１３．５～１５．５ＭＰａ^１／２のδｐ値を有する、実施態様第１から３のいずれか１項記載の方法。
実施態様第１３項： 前記接触が高々１２００秒の接触時間で無生物の硬表面に前記組成物を適用することを含む、、実施態様第１から３のいずれか１項記載の方法。
実施態様第１４項： 前記接触時間が高々６００秒である、実施態様第１３項記載の方法。
実施態様第１５項： 前記接触が高々１４，４００秒の接触時間で前記組成物中に前記表面を浸すことを含む、実施態様第１から３のいずれか１項記載の方法。
実施態様第１６項： 前記接触時間が高々１８００秒である、実施態様第１３項記載の方法。
実施態様第１７項： １．５～４のｐＨを有し、１．５～９Ｏｓｍ／Ｌの有効溶質濃度を有する殺胞子組成物であって、組成物の１リットル当たり以下を含む組成物：
ａ） １５．６ＭＰａ^１／２未満のδｐ値を有し、以下を含む溶剤成分、
１） ５０－５００ｍＬの水、および
２） 少なくとも１つの有機液体、
ｂ） 以下を含む溶質成分、
１） ３を超えるｐＫａ値および少なくとも＋０．５Ｖの標準電位を有する酸化性酸の解離生成物、
２） 少なくとも＋１．５Ｖの標準電位を有する４～２０ｇの電解質酸化剤の解離生成物、
３） 少なくとも１つの非酸化性電解質の解離生成物、および
４） 任意に、湿潤剤。
実施態様第１８項： 前記溶質成分がアニオン性界面活性剤および任意に非イオン性界面活性剤を含む湿潤剤を含む、実施態様第１７項記載の殺胞子組成物。
実施態様第１９項： 前記酸化性酸が有機酸と過酸化物の反応生成物である、実施態様第１７または１８項記載の殺胞子組成物。
実施態様第２０項： 高々３のｐＨおよび少なくとも２Ｏｓｍ／Ｌの有効溶質濃度を有する、実施態様第１７または１８項記載の殺胞子組成物。

Claims (8)

1. １．５～４のｐＨを有し、１．５～９ Ｏｓｍ／Ｌの有効溶質濃度を有する殺胞子組成物であって、組成物の１リットル当たり以下を含む組成物：
   ａ） １５．６ＭＰａ^１／２未満のδｐ値を有し、以下を含む溶剤成分、
   １） ５０－５００ｍＬの水、および
   ２） 少なくとも１つの有機液体、並びに
   ｂ） 以下を含む溶質成分、
   １） ３を超えるｐＫａ値および少なくとも＋０．５Ｖの標準電位を有する、有機酸と過酸化物の反応生成物である酸化性酸の解離生成物、
   ２） 少なくとも＋１．５Ｖの標準電位を有する４～２０ｇの電解質酸化剤の解離生成物、および
   ３） 少なくとも１つの非酸化性電解質の解離生成物。
2. 前記溶質成分がさらに湿潤剤を含む、請求項１記載の殺胞子組成物。
3. ｐＨが３以下であり、有効溶質濃度が少なくとも２ Ｏｓｍ／Ｌである、請求項１または２記載の殺胞子組成物。
4. 前記湿潤剤がアニオン性界面活性剤を含む、請求項２記載の殺胞子組成物。
5. 前記湿潤剤がさらに非イオン性界面活性剤を含む、請求項４記載の殺胞子組成物。
6. 前記少なくとも１つの有機液体がグリコールエーテルを含む、請求項１記載の殺胞子組成物。
7. 有効溶質濃度が少なくとも３ Ｏｓｍ／Ｌである、請求項１記載の殺胞子組成物。
8. 前記溶剤成分が１３．５から１５．５ＭＰａ^１／２のδｐ値を有する、請求項１記載の殺胞子組成物。