JP7488587B2 - 対物レンズに対する試料の変位を検出する方法及び装置 - Google Patents
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Description
なお、本願は、特許請求の範囲に記載の発明に関するものであるが、他の態様として以下の構成も包含し得る。
1.
対物レンズ(3)に対する試料(2)の変位を検出する方法であって、
試料(2)と接続された少なくとも1つの基準物体(40)からの光(43)が、連続した時点に対物レンズ(3)により像平面(15)内の基準物体像(25)に投影され、 これらの像平面(15)内の基準物体像(25)がカメラ(12)により記録され、
これらの記録された基準物体像(25)が互いに比較される当該方法において、
カメラ(12)の前の像平面(15)に対してフーリエ共役の平面(17)で、低空間周波数が、これらの基準物体像(25)から取り除かれる当該方法。
2.
対物レンズ(3)の瞳(19)の中央領域を起源とする光(43)の成分が像平面(15)に対してフーリエ共役の平面(17)で取り除かれることによって、前記低空間周波数がカメラ(12)の前で取り除かれる上記1に記載の方法。
3.
前記対物レンズ(3)の瞳(19)が、像平面(15)に対してフーリエ共役の平面(17)に投影される上記2に記載の方法。
4.
前記低空間周波数が、円板(20)、この低空間周波数を別の検出器の方に偏向させるミラー又は空間光変調器(SLM)を用いてカメラ(12)の前で取り除かれる上記1~3のいずれか1つに記載の方法。
5.
前記少なくとも1つの基準物体(40)がエッジを有し、このエッジを介して、その基準物体(40)から出て来る光(43)の強度が少なくとも90%低下するとともに、このエッジの像平面に対して平行な幅が、この光(43)の波長よりも短い上記1~4のいずれか1つに記載の方法。
6.
前記少なくとも1つの基準物体(40)が前記光(43)の波長を下回る直径を有する点形状のマーキング又はビーズである上記5に記載の方法。
7.
単一波長の光(43)が、前記少なくとも1つの基準物体(40)から像平面(15)内の基準物体像(25)に投影される上記1~6のいずれか1つに記載の方法。
8.
前記少なくとも1つの基準物体(40)からの光(43)が、その波長に基づき、対物レンズ(3)により前記カメラ(12)とは別の検出器上に投影される試料(2)の測定光から分離される上記1~7のいずれか1つに記載の方法。
9.
前記試料(2)が、前記少なくとも1つの基準物体(40)からの光のビームを生じさせる照明光(8)によって、広角に照明される上記1~8のいずれか1つに記載の方法。
10.
前記照明光(8)が対物レンズ(3)の瞳(19)の中心に集束される上記9に記載の方法。
11.
前記少なくとも1つの基準物体(40)が、
対物レンズ(3)を介して、又は
対物レンズ(3)の近くに配置されるか、試料(2)を介して対物レンズ(3)に対向するか、又は対物レンズ(3)と試料(2)の間に置かれた照明光源(7)からの、照明光(8)によって照明されて、この照明光が、前記少なくとも1つの基準物体(40)からの光(43)の放射を引き起こす上記1~10のいずれか1つに記載の方法。
12.
前記少なくとも1つの基準物体(40)が、対物レンズ(3)の光軸(44)に対して直角の方向に向けられた導波体を介して、照明光(8)によって照明されて、この照明光が、前記少なくとも1つの基準物体(40)から生じさせる上記1~8のいずれか1つに記載の方法。
13.
前記導波体が、試料支持体(5)又は試料(2)のカバーガラス(6)としての役割を果たす光学的に透明な材料から成る板である上記12に記載の方法。
14.
前記試料(2)が単一波長の照明光(8)によって照明されて、この照明光が、前記少なくとも1つの基準物体(40)からの光(42)を生じさせる上記1~13のいずれか1つに記載の方法。
15.
前記照明光(8)の波長が、試料(2)の測定光及び試料(2)の測定光を生じさせる励起光とそれぞれ少なくとも50nm又は少なくとも100nmだけ異なることと、前記照明光(8)の波長が800nmに等しい又はそれを上回る、有利には、900nmに等しい又はそれを上回ることとの中の1つ以上を特徴とする上記14に記載の方法。
16.
前記基準物体像(25)において、試料(2)と対物レンズ(3)の間に有る少なくとも1つの光学的な境界面又は対物レンズ(3)に配置された少なくとも1つの別の基準物体(40)からの更に別の光がカメラ(12)により記録される上記1~15のいずれか1つに記載の方法。
17.
基準物体像(25)における最大光強度がカメラ(12)の飽和強度の90%~1,000%又は100%~150%に達するように、前記カメラ(12)が制御される上記1~16のいずれか1つに記載の方法。
18.
前記基準物体像(25)の間における前記少なくとも1つの基準物体(40)の投影像(26)のずれから、対物レンズ(3)の光軸(44)に対して直角の対物レンズ(3)に対する試料(2)の横方向の変位が推定されることと、
前記基準物体像(25)の間における前記少なくとも1つの基準物体(40)の投影像(26)の変形から、対物レンズ(3)の光軸(44)に沿った対物レンズ(3)に対する試料(2)の変位が推定されることと、
の中の1つ以上を特徴とする上記1~17のいずれか1つに記載の方法。
19.
前記基準物体像(25)における前記少なくとも1つの基準物体(40)の投影像(26)と、基準物体比較像における前記の基準物体(40)又は別の基準物体(40)の投影像(26)との類似度から、絶対値及び/又は方向に関して決定された、対物レンズ(3)の光軸(44)に沿った対物レンズ(3)に対する試料(2)の変位が推定される上記1~18のいずれか1つに記載の方法。
20.
前記基準物体像(25)がカメラ(12)により記録される一方、試料(2)の関心を抱いている構造が共焦点式STED顕微鏡、RESOLFT顕微鏡又はMINFLUX顕微鏡によって投影され、その際、検出された、対物レンズ(3)に対する試料(2)の変位が補正される上記1~19のいずれか1つに記載の方法。
21.
前記少なくとも1つの基準物体(40)は、対物レンズ(3)により投影される、試料(2)の関心を抱いている物体が配置された物体平面に対して対物レンズ(3)の光軸(44)の方向にずれた基準物体平面内に配置されている上記1~20のいずれか1つに記載の方法。
22.
対物レンズ(3)と、その対物レンズ(3)を含む投影光学系の像平面(15)内に配置されたカメラ(12)とを備えた、請求項1~21のいずれか1つに記載の方法を実施するための装置において、
これらの対物レンズ(3)とカメラ(12)の間に、1つの光学機器が配置され、この光学機器が、像平面(15)に対してフーリエ共役の平面(17)内に配置されるとともに、投影光学系が像平面(15)に投影する基準物体像(25)から低空間周波数を取り除くように構成されている当該装置。
23.
前記光学機器が、対物レンズ(3)の瞳の中央領域を起源とする光(43)の成分をカメラ(12)の前で取り除くように構成されている上記22に記載の装置。
24.
前記低空間周波数を取り除くための光学機器が、円板(20)、低空間周波数を本装置の別の検出器の方に偏向させるミラー又は空間光変調器(SLM)を有する上記22又は23に記載の装置。
25.
前記対物レンズ(3)とカメラ(12)の間に、バンドパスフィルター(16)が配置されている上記22~24のいずれか1つに記載の装置。
26.
照明光源(7)が、対物レンズ(3)の前に配置された試料(2)と接続された基準物体(40)を単一の波長の照明光(8)により照明するように構成、配置されており、この波長が、有利には、800nm~1,300nm又は900nm~1,300nmの赤外線領域から選定される上記22~25のいずれか1つに記載の装置。
27.
前記照明光源(7)が、照明光(8)を対物レンズ(3)の瞳(19)の中心に集束させるように構成、配置されている上記26に記載の装置。
28.
前記フーリエ共役平面(17)と対物レンズ(3)の間に、偏光ビームスプリッタ(9)が配置され、この偏光ビームスプリッタを介して、前記フーリエ共役平面(17)又は1つの照明光源(7)が照明光(8)を入射させて、対物レンズ(3)の前に配置された少なくとも1つの基準物体(40)での照明光(8)の反射後に、対物レンズ(3)に戻って来る光(43)が、その偏光方向に基づき偏光ビームスプリッタ(9)からカメラ(12)の方に送り出される上記22~27のいずれか1つに記載の装置。
29.
前記偏光ビームスプリッタ(9)と対物レンズ(3)の間に、1/4波長遅延板(11)が配置されている上記28に記載の装置。
30.
照明機器が、照明光(8)を対物レンズ(3)の光軸(44)に対して直角の方向に向けられた、試料(2)の導波体に入射させる上記22~26のいずれか1つに記載の装置。
31.
前記対物レンズ(3)とカメラ(12)の間の光路が対物レンズ(3)において無限ビームとして始まる上記22~30のいずれか1つに記載の装置。
32.
前記投影光学系が、光学部品を有し、この光学部品は、前記少なくとも1つの基準物体(40)の投影像(26)の変形の対称性を、対物レンズ(3)の焦点面との間隔が大きくなる程増大させ、及び/又は
前記投影光学系の焦点距離が調整可能であり、その結果、投影光学系によって像平面に投影される基準物体平面が、対物レンズ(3)が投影する物体平面に対して対物レンズ(3)の光軸(44)の方向にずらすことが可能である上記22~31のいずれか1つに記載の装置。
2 試料
3 対物レンズ
4 試料位置決め機
5 物体支持体
6 カバーガラス
7 照明光源
8 照明光
9 偏光ビームスプリッタ
10 チューブレンズ
11 1/4波長遅延板
12 カメラ
13 接眼レンズ
14 レンズ
15 像平面
16 バンドパスフィルター
17 フーリエ共役平面
18 振幅フィルター
19 瞳
20 円板
21 補正機器
22 基板
23 瞳19の投影像
24 ワイヤー
25 基準物体像
26 基準物体の投影像
27 補助的な像
28 比較像貯蔵メモリ
29 像相関器
30 制御信号成形器
31 制御信号成形器
32 制御信号
33 制御信号
34 集光レンズ
35 明視野絞り
36 開口絞り
37 集束レンズ
38 中間像平面
39 プリズム
40 基準物体
41 光導波体
42 保持機器
43 光
44 光軸
45 断面線
46 第0次の最大値
47 第1次の最小値
48 第2次の最大値
49 強度上昇領域
50 強度上昇領域
51 強度上昇領域
52 第2次の最小値
Δr 横方向の位置偏差
Δl 軸方向の位置偏差
Claims (31)
- 対物レンズ(3)に対する試料(2)の変位を検出する方法であって、
試料(2)と接続された少なくとも1つの基準物体(40)からの光(43)が、連続した時点に対物レンズ(3)により像平面(15)内の基準物体像(25)に投影され、 これらの像平面(15)内の基準物体像(25)がカメラ(12)により記録され、
これらの記録された基準物体像(25)が互いに比較され、
前記少なくとも1つの基準物体(40)がエッジを有し、このエッジを介して、その基準物体(40)から出て来る光(43)の強度が少なくとも90%低下するとともに、このエッジの像平面に対して平行な幅が、この光(43)の波長よりも短い当該方法において、
カメラ(12)の前の像平面(15)に対してフーリエ共役の平面(17)で、低空間周波数が、これらの基準物体像(25)から取り除かれ、
前記基準物体像において、そのエッジに、低空間周波数が取り除かれたために強度を低減されている第0の次数の強度最大値(46)を有する回折パターンが、第1の次数の強度最小値(47)と、この第1の次数の強度最小値(47)に隣接し、前記第0の次数の強度最大値(46)と第1の次数の強度最大値(48)とに達する強度上昇領域(49,50)を有するこの第1の次数の強度最小値(47)に続く前記第1の次数の強度最大値(48)とを形成することを特徴とする方法。 - 対物レンズ(3)の瞳(19)の中央領域を起源とする光(43)の成分が像平面(15)に対してフーリエ共役の平面(17)で取り除かれることによって、前記低空間周波数がカメラ(12)の前で取り除かれることを特徴とする請求項1に記載の方法。
- 前記対物レンズ(3)の瞳(19)が、像平面(15)に対してフーリエ共役の平面(17)に投影されることを特徴とする請求項2に記載の方法。
- 前記低空間周波数が、円板(20)、この低空間周波数を別の検出器の方に偏向させるミラー又は空間光変調器(SLM)を用いてカメラ(12)の前で取り除かれることを特徴とする請求項1~3のいずれか1項に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの基準物体(40)が前記光(43)の波長を下回る直径を有する点形状のマーキング又はビーズであることを特徴とする請求項4に記載の方法。
- 単一波長の光(43)が、前記少なくとも1つの基準物体(40)から像平面(15)内の基準物体像(25)に投影されることを特徴とする請求項1~5のいずれか1項に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの基準物体(40)からの光(43)が、その波長に基づき、対物レンズ(3)により前記カメラ(12)とは別の検出器上に投影される試料(2)の測定光から分離されることを特徴とする請求項1~6のいずれか1項に記載の方法。
- 前記試料(2)が、前記少なくとも1つの基準物体(40)からの光のビームを生じさせる照明光(8)によって、広角に照明されることを特徴とする請求項1~7のいずれか1項に記載の方法。
- 前記照明光(8)が対物レンズ(3)の瞳(19)の中心に集束されることを特徴とする請求項8に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの基準物体(40)が、
対物レンズ(3)を介して、又は
対物レンズ(3)の近くに配置されるか、試料(2)を介して対物レンズ(3)に対向するか、又は対物レンズ(3)と試料(2)の間に置かれた照明光源(7)からの、照明光(8)によって照明されて、この照明光が、前記少なくとも1つの基準物体(40)からの光(43)の放射を引き起こすことを特徴とする請求項1~9のいずれか1項に記載の方法。 - 前記少なくとも1つの基準物体(40)が、対物レンズ(3)の光軸(44)に対して直角の方向に向けられた導波体を介して、照明光(8)によって照明されて、この照明光が、前記少なくとも1つの基準物体(40)から生じさせることを特徴とする請求項1~7のいずれか1項に記載の方法。
- 前記導波体が、試料支持体(5)又は試料(2)のカバーガラス(6)としての役割を果たす光学的に透明な材料から成る板であることを特徴とする請求項11に記載の方法。
- 前記試料(2)が単一波長の照明光(8)によって照明されて、この照明光が、前記少なくとも1つの基準物体(40)からの光(42)を生じさせることを特徴とする請求項1~12のいずれか1項に記載の方法。
- 前記照明光(8)の波長が、試料(2)の測定光及び試料(2)の測定光を生じさせる励起光とそれぞれ少なくとも50nm又は少なくとも100nmだけ異なることと、前記照明光(8)の波長が800nmに等しい又はそれを上回る、有利には、900nmに等しい又はそれを上回ることとの中の1つ以上を特徴とする請求項13に記載の方法。
- 前記基準物体像(25)において、試料(2)と対物レンズ(3)の間に有る少なくとも1つの光学的な境界面又は対物レンズ(3)に配置された少なくとも1つの別の基準物体(40)からの更に別の光がカメラ(12)により記録されることを特徴とする請求項1~14のいずれか1項に記載の方法。
- 基準物体像(25)における最大光強度がカメラ(12)の飽和強度の90%~1,000%又は100%~150%に達するように、前記カメラ(12)が制御されることを特徴とする請求項1~15のいずれか1項に記載の方法。
- 前記基準物体像(25)の間における前記少なくとも1つの基準物体(40)の投影像(26)のずれから、対物レンズ(3)の光軸(44)に対して直角の対物レンズ(3)に対する試料(2)の横方向の変位が推定されることと、
前記基準物体像(25)の間における前記少なくとも1つの基準物体(40)の投影像(26)の変形から、対物レンズ(3)の光軸(44)に沿った対物レンズ(3)に対する試料(2)の変位が推定されることと、
の中の1つ以上を特徴とする請求項1~16のいずれか1項に記載の方法。 - 前記基準物体像(25)における前記少なくとも1つの基準物体(40)の投影像(26)と、基準物体比較像における前記の基準物体(40)又は別の基準物体(40)の投影像(26)との類似度から、絶対値及び/又は方向に関して決定された、対物レンズ(3)の光軸(44)に沿った対物レンズ(3)に対する試料(2)の変位が推定されることを特徴とする請求項1~17のいずれか1項に記載の方法。
- 前記基準物体像(25)がカメラ(12)により記録される一方、試料(2)の関心を抱いている構造が共焦点式STED顕微鏡、RESOLFT顕微鏡又はMINFLUX顕微鏡によって投影され、その際、検出された、対物レンズ(3)に対する試料(2)の変位が補正されることを特徴とする請求項1~18のいずれか1項に記載の方法。
- 前記少なくとも1つの基準物体(40)は、対物レンズ(3)により投影される、試料(2)の関心を抱いている物体が配置された物体平面に対して対物レンズ(3)の光軸(44)の方向にずれた基準物体平面内に配置されていることを特徴とする請求項1~19のいずれか1項に記載の方法。
- 対物レンズ(3)と、その対物レンズ(3)を含む投影光学系の像平面(15)内に配置されたカメラ(12)とを備えた、請求項1~20のいずれか1項に記載の方法を実施するための装置において、
これらの対物レンズ(3)とカメラ(12)の間に、1つの光学機器が配置され、この光学機器が、像平面(15)に対してフーリエ共役の平面(17)内に配置されるとともに、投影光学系が像平面(15)に投影する基準物体像(25)から低空間周波数を取り除くように構成されていることを特徴とする装置。 - 前記光学機器が、対物レンズ(3)の瞳の中央領域を起源とする光(43)の成分をカメラ(12)の前で取り除くように構成されていることを特徴とする請求項21に記載の装置。
- 前記低空間周波数を取り除くための光学機器が、円板(20)、低空間周波数を本装置の別の検出器の方に偏向させるミラー又は空間光変調器(SLM)を有することを特徴とする請求項21又は22に記載の装置。
- 前記対物レンズ(3)とカメラ(12)の間に、バンドパスフィルター(16)が配置されていることを特徴とする請求項21~23のいずれか1項に記載の装置。
- 照明光源(7)が、対物レンズ(3)の前に配置された試料(2)と接続された基準物体(40)を単一の波長の照明光(8)により照明するように構成、配置されており、この波長が、有利には、800nm~1,300nm又は900nm~1,300nmの赤外線領域から選定されることを特徴とする請求項21~24のいずれか1項に記載の装置。
- 前記照明光源(7)が、照明光(8)を対物レンズ(3)の瞳(19)の中心に集束させるように構成、配置されていることを特徴とする請求項25に記載の装置。
- 前記フーリエ共役平面(17)と対物レンズ(3)の間に、偏光ビームスプリッタ(9)が配置され、この偏光ビームスプリッタを介して、前記フーリエ共役平面(17)又は1つの照明光源(7)が照明光(8)を入射させて、対物レンズ(3)の前に配置された少なくとも1つの基準物体(40)での照明光(8)の反射後に、対物レンズ(3)に戻って来る光(43)が、その偏光方向に基づき偏光ビームスプリッタ(9)からカメラ(12)の方に送り出されることを特徴とする請求項21~26のいずれか1項に記載の装置。
- 前記偏光ビームスプリッタ(9)と対物レンズ(3)の間に、1/4波長遅延板(11)が配置されていることを特徴とする請求項27に記載の装置。
- 照明機器が、照明光(8)を対物レンズ(3)の光軸(44)に対して直角の方向に向けられた、試料(2)の導波体に入射させることを特徴とする請求項21~25のいずれか1項に記載の装置。
- 前記対物レンズ(3)とカメラ(12)の間の光路が対物レンズ(3)において無限ビームとして始まることを特徴とする請求項21~29のいずれか1項に記載の装置。
- 前記投影光学系が、光学部品を有し、この光学部品は、前記少なくとも1つの基準物体(40)の投影像(26)の変形の対称性を、対物レンズ(3)の焦点面との間隔が大きくなる程増大させ、及び/又は
前記投影光学系の焦点距離が調整可能であり、その結果、投影光学系によって像平面に投影される基準物体平面が、対物レンズ(3)が投影する物体平面に対して対物レンズ(3)の光軸(44)の方向にずらすことが可能であることを特徴とする請求項21~30のいずれか1項に記載の装置。
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