JP7479636B2 - 全身性エリテマトーデスの検出方法 - Google Patents
全身性エリテマトーデスの検出方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7479636B2 JP7479636B2 JP2020562391A JP2020562391A JP7479636B2 JP 7479636 B2 JP7479636 B2 JP 7479636B2 JP 2020562391 A JP2020562391 A JP 2020562391A JP 2020562391 A JP2020562391 A JP 2020562391A JP 7479636 B2 JP7479636 B2 JP 7479636B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- concentration
- didehydro
- deoxycytidine
- lupus erythematosus
- systemic lupus
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 201000000596 systemic lupus erythematosus Diseases 0.000 title claims description 117
- VQMYKNBUURJYAP-HTRCEHHLSA-N 3'-deoxy-3',4'-didehydro-cytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@H]1[C@H](O)C=C(CO)O1 VQMYKNBUURJYAP-HTRCEHHLSA-N 0.000 claims description 102
- 208000005777 Lupus Nephritis Diseases 0.000 claims description 99
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 claims description 89
- 206010029164 Nephrotic syndrome Diseases 0.000 claims description 80
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 49
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 claims description 37
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 claims description 34
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 33
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 33
- 238000001514 detection method Methods 0.000 claims description 18
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 claims 1
- 230000002485 urinary effect Effects 0.000 description 25
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 17
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 11
- 238000011862 kidney biopsy Methods 0.000 description 11
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 11
- 208000007342 Diabetic Nephropathies Diseases 0.000 description 10
- 208000033679 diabetic kidney disease Diseases 0.000 description 10
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 10
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 description 10
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 9
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 9
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 9
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 9
- 206010018372 Glomerulonephritis membranous Diseases 0.000 description 8
- 208000010159 IgA glomerulonephritis Diseases 0.000 description 8
- 206010021263 IgA nephropathy Diseases 0.000 description 8
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 8
- 201000005206 focal segmental glomerulosclerosis Diseases 0.000 description 8
- 231100000854 focal segmental glomerulosclerosis Toxicity 0.000 description 8
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 8
- 201000008350 membranous glomerulonephritis Diseases 0.000 description 8
- 231100000855 membranous nephropathy Toxicity 0.000 description 8
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000010586 diagram Methods 0.000 description 6
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 6
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 6
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 6
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 5
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 description 5
- 206010025135 lupus erythematosus Diseases 0.000 description 5
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 5
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 5
- 102000007562 Serum Albumin Human genes 0.000 description 4
- 108010071390 Serum Albumin Proteins 0.000 description 4
- 125000000129 anionic group Chemical group 0.000 description 4
- 230000003460 anti-nuclear Effects 0.000 description 4
- 238000005251 capillar electrophoresis Methods 0.000 description 4
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 4
- 230000008859 change Effects 0.000 description 4
- 230000001186 cumulative effect Effects 0.000 description 4
- HOXINJBQVZWYGZ-UHFFFAOYSA-N fenbutatin oxide Chemical compound C=1C=CC=CC=1C(C)(C)C[Sn](O[Sn](CC(C)(C)C=1C=CC=CC=1)(CC(C)(C)C=1C=CC=CC=1)CC(C)(C)C=1C=CC=CC=1)(CC(C)(C)C=1C=CC=CC=1)CC(C)(C)C1=CC=CC=C1 HOXINJBQVZWYGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 208000007475 hemolytic anemia Diseases 0.000 description 4
- 230000001900 immune effect Effects 0.000 description 4
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 4
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 4
- GKTNLYAAZKKMTQ-UHFFFAOYSA-N n-[bis(dimethylamino)phosphinimyl]-n-methylmethanamine Chemical compound CN(C)P(=N)(N(C)C)N(C)C GKTNLYAAZKKMTQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 239000000092 prognostic biomarker Substances 0.000 description 4
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 4
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 description 3
- 239000008280 blood Substances 0.000 description 3
- 238000000738 capillary electrophoresis-mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 230000009266 disease activity Effects 0.000 description 3
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 3
- 239000007789 gas Substances 0.000 description 3
- 201000006370 kidney failure Diseases 0.000 description 3
- 238000002372 labelling Methods 0.000 description 3
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 3
- 210000000056 organ Anatomy 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 201000004384 Alopecia Diseases 0.000 description 2
- USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N Ammonium acetate Chemical compound N.CC(O)=O USFZMSVCRYTOJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000005695 Ammonium acetate Substances 0.000 description 2
- 208000023275 Autoimmune disease Diseases 0.000 description 2
- 206010010904 Convulsion Diseases 0.000 description 2
- YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N Deuterium Chemical compound [2H] YZCKVEUIGOORGS-OUBTZVSYSA-N 0.000 description 2
- 206010025327 Lymphopenia Diseases 0.000 description 2
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 2
- 208000012902 Nervous system disease Diseases 0.000 description 2
- 208000025966 Neurological disease Diseases 0.000 description 2
- 206010030113 Oedema Diseases 0.000 description 2
- 208000007117 Oral Ulcer Diseases 0.000 description 2
- 206010034972 Photosensitivity reaction Diseases 0.000 description 2
- 206010058556 Serositis Diseases 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 231100000360 alopecia Toxicity 0.000 description 2
- 235000019257 ammonium acetate Nutrition 0.000 description 2
- 229940043376 ammonium acetate Drugs 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 238000000451 chemical ionisation Methods 0.000 description 2
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 229910052805 deuterium Inorganic materials 0.000 description 2
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 2
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 2
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 2
- 230000003902 lesion Effects 0.000 description 2
- 201000002364 leukopenia Diseases 0.000 description 2
- 231100001022 leukopenia Toxicity 0.000 description 2
- 238000004811 liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 210000004072 lung Anatomy 0.000 description 2
- 231100001023 lymphopenia Toxicity 0.000 description 2
- 238000000816 matrix-assisted laser desorption--ionisation Methods 0.000 description 2
- 238000000691 measurement method Methods 0.000 description 2
- 238000002705 metabolomic analysis Methods 0.000 description 2
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000008383 nephritis Diseases 0.000 description 2
- 208000008494 pericarditis Diseases 0.000 description 2
- 230000036211 photosensitivity Effects 0.000 description 2
- 208000008423 pleurisy Diseases 0.000 description 2
- 201000001474 proteinuria Diseases 0.000 description 2
- 210000003491 skin Anatomy 0.000 description 2
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 description 2
- 230000000451 tissue damage Effects 0.000 description 2
- 231100000827 tissue damage Toxicity 0.000 description 2
- 230000002618 waking effect Effects 0.000 description 2
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000027932 Collagen disease Diseases 0.000 description 1
- 206010010305 Confusional state Diseases 0.000 description 1
- 235000005956 Cosmos caudatus Nutrition 0.000 description 1
- 208000006926 Discoid Lupus Erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 208000032928 Dyslipidaemia Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 206010015150 Erythema Diseases 0.000 description 1
- 208000010201 Exanthema Diseases 0.000 description 1
- 238000004252 FT/ICR mass spectrometry Methods 0.000 description 1
- 206010018364 Glomerulonephritis Diseases 0.000 description 1
- 208000032843 Hemorrhage Diseases 0.000 description 1
- 101001043562 Homo sapiens Low-density lipoprotein receptor-related protein 2 Proteins 0.000 description 1
- 208000034767 Hypoproteinaemia Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 208000017170 Lipid metabolism disease Diseases 0.000 description 1
- 206010027918 Mononeuropathy multiplex Diseases 0.000 description 1
- 208000003926 Myelitis Diseases 0.000 description 1
- 108010026552 Proteome Proteins 0.000 description 1
- 208000028017 Psychotic disease Diseases 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 208000001647 Renal Insufficiency Diseases 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010053614 Type III immune complex mediated reaction Diseases 0.000 description 1
- 206010047115 Vasculitis Diseases 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 1
- 230000003429 anti-cardiolipin effect Effects 0.000 description 1
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 206010003246 arthritis Diseases 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N atomic oxygen Chemical compound [O] QVGXLLKOCUKJST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000034158 bleeding Diseases 0.000 description 1
- 230000000740 bleeding effect Effects 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 208000015114 central nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 1
- 238000010219 correlation analysis Methods 0.000 description 1
- 208000004921 cutaneous lupus erythematosus Diseases 0.000 description 1
- 230000003111 delayed effect Effects 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 238000003795 desorption Methods 0.000 description 1
- 230000001066 destructive effect Effects 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 208000016097 disease of metabolism Diseases 0.000 description 1
- 231100000321 erythema Toxicity 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000005713 exacerbation Effects 0.000 description 1
- 201000005884 exanthem Diseases 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 230000001815 facial effect Effects 0.000 description 1
- 238000010265 fast atom bombardment Methods 0.000 description 1
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 1
- ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N furosemide Chemical compound C1=C(Cl)C(S(=O)(=O)N)=CC(C(O)=O)=C1NCC1=CC=CO1 ZZUFCTLCJUWOSV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005350 fused silica glass Substances 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 102000052512 human LRP2 Human genes 0.000 description 1
- 230000016178 immune complex formation Effects 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 201000006334 interstitial nephritis Diseases 0.000 description 1
- 238000005040 ion trap Methods 0.000 description 1
- 230000000155 isotopic effect Effects 0.000 description 1
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 1
- 230000003907 kidney function Effects 0.000 description 1
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 1
- 201000004792 malaria Diseases 0.000 description 1
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 1
- 230000001431 metabolomic effect Effects 0.000 description 1
- 201000002003 mononeuritis multiplex Diseases 0.000 description 1
- 201000005518 mononeuropathy Diseases 0.000 description 1
- 210000000214 mouth Anatomy 0.000 description 1
- 210000001989 nasopharynx Anatomy 0.000 description 1
- 201000009925 nephrosclerosis Diseases 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 230000000422 nocturnal effect Effects 0.000 description 1
- 239000001301 oxygen Substances 0.000 description 1
- 229910052760 oxygen Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 208000027232 peripheral nervous system disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002085 persistent effect Effects 0.000 description 1
- 238000004262 preparative liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 208000022204 primary glomerular disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002062 proliferating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002035 prolonged effect Effects 0.000 description 1
- 208000020016 psychiatric disease Diseases 0.000 description 1
- 230000002285 radioactive effect Effects 0.000 description 1
- 206010037844 rash Diseases 0.000 description 1
- 231100001028 renal lesion Toxicity 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 201000004595 synovitis Diseases 0.000 description 1
- 208000006379 syphilis Diseases 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/483—Physical analysis of biological material
- G01N33/487—Physical analysis of biological material of liquid biological material
- G01N33/493—Physical analysis of biological material of liquid biological material urine
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/5308—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for analytes not provided for elsewhere, e.g. nucleic acids, uric acid, worms, mites
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
- G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
- G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
- G01N33/53—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor
- G01N33/564—Immunoassay; Biospecific binding assay; Materials therefor for pre-existing immune complex or autoimmune disease, i.e. systemic lupus erythematosus, rheumatoid arthritis, multiple sclerosis, rheumatoid factors or complement components C1-C9
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2560/00—Chemical aspects of mass spectrometric analysis of biological material
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/10—Musculoskeletal or connective tissue disorders
- G01N2800/101—Diffuse connective tissue disease, e.g. Sjögren, Wegener's granulomatosis
- G01N2800/104—Lupus erythematosus [SLE]
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/34—Genitourinary disorders
- G01N2800/347—Renal failures; Glomerular diseases; Tubulointerstitial diseases, e.g. nephritic syndrome, glomerulonephritis; Renovascular diseases, e.g. renal artery occlusion, nephropathy
-
- G—PHYSICS
- G01—MEASURING; TESTING
- G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
- G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
- G01N2800/52—Predicting or monitoring the response to treatment, e.g. for selection of therapy based on assay results in personalised medicine; Prognosis
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Immunology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Pathology (AREA)
- General Physics & Mathematics (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Food Science & Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Rehabilitation Therapy (AREA)
- Rheumatology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Electrochemistry (AREA)
Description
(1)(a)被検者から採取された尿中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を測定する工程;及び
(b)工程(a)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を、コントロール用の参照濃度と比較する工程;
を含み、
前記工程(a)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度が、コントロール用の参照濃度と比べて高いとき、前記被検者が全身性エリテマトーデスである可能性が高いことを示す、
全身性エリテマトーデスの検出方法;
(2)工程(a)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度が、コントロール用の参照濃度に対して1.2倍以上であるとき、被検者が全身性エリテマトーデスである可能性が高いことを示す、上記(1)に記載の検出方法;
(3)コントロール用の参照濃度が、ループス腎炎以外の病型であるネフローゼ症候群患者又は健常者から採取された尿中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度であることを特徴とする上記(1)又は(2)に記載の検出方法;
(4)被検者がネフローゼ症候群患者であり、全身性エリテマトーデスがループス腎炎であることを特徴とする上記(1)~(3)のいずれかに記載の検出方法;
(5)3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンからなり、全身性エリテマトーデスを検出するためのバイオマーカー;
(6)被検者から採取された尿中のバイオマーカーの濃度が、ループス腎炎以外の病型のネフローゼ症候群患者又は健常者から採取された尿中のバイオマーカーの濃度と比べて高い、上記(5)に記載のバイオマーカー;
(7)被検者がネフローゼ症候群患者であり、全身性エリテマトーデスがループス腎炎であることを特徴とする上記(5)又は(6)に記載のバイオマーカー;
(8)(A)全身性エリテマトーデス患者から採取された尿中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を測定する工程を含み、前記工程(A)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度が高いとき、前記全身性エリテマトーデス患者の予後が良好であると予測する、全身性エリテマトーデスの予後予測方法;
(9)3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンからなり、全身性エリテマトーデスの予後を予測するためのバイオマーカー;
(10)質量分析計の内部標準物質としての3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンを備える、全身性エリテマトーデスの検出又は予後予測用キット;
に関する。
[1](a)被検者から採取された尿中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を測定する工程;及び
(b)工程(a)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を、コントロール用の参照濃度と比較する工程;
を含み、
前記工程(a)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度が、コントロール用の参照濃度と比べて高いとき、前記被検者が全身性エリテマトーデスである可能性が高いことを示す、全身性エリテマトーデスの検出方法(以下、「本発明の検出方法」とも表示する。);
[2]3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンからなり、全身性エリテマトーデスを検出するためのバイオマーカー(以下、「本発明の検出用バイオマーカー」とも表示する。);
[3](A)全身性エリテマトーデス患者から採取された尿中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を測定する工程を含み、前記工程(A)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度が高いとき、前記全身性エリテマトーデス患者の予後が良好であると予測する、全身性エリテマトーデスの予後予測方法(以下、「本発明の予後予測方法」とも表示する。);
[3]3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンからなり、全身性エリテマトーデス患者の予後を予測するためのバイオマーカー(以下、「本発明の予後予測用バイオマーカー」とも表示する。);や
[4]質量分析計の内部標準物質としての3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンを備える、全身性エリテマトーデスの検出又は予後予測用キット(以下、「本発明のキット」とも表示する。);
などの実施形態を含んでいる。なお、本明細書において、特に断りがない限り、「濃度」とは、尿中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を意味する。また、本明細書において、「被検者が全身性エリテマトーデスであるかを検出する」ことには、好ましくは「被検者がループス腎炎であるかを検出する」ことが含まれ、より好ましくは「被検者がネフローゼ症候群患者である場合にその病型がループス腎炎であるかを検出する」ことが含まれる。また、本明細書において、「被検者が全身性エリテマトーデスである可能性」には、好ましくは「被検者がループス腎炎である可能性」が含まれ、より好ましくは「被検者がネフローゼ症候群患者である場合にその病型がループス腎炎である可能性」が含まれる。
本発明の検出方法は、被検者が全身性エリテマトーデスであるかを検出する方法である。本発明の検出方法としては、
(a)被検者から採取された尿中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を測定する工程;及び
(b)工程(a)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を、コントロール用の参照濃度と比較する工程;
を含み、
工程(a)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度が、コントロール用の参照濃度と比べて高いとき、前記被検者が全身性エリテマトーデスである可能性が高いことを示す、
方法である限り特に制限されない。本発明の検出方法は、被検者が全身性エリテマトーデスである可能性を医師が診断することを補助する方法であって、医師による診断行為を含まない。
本発明のバイオマーカーは、被検者が全身性エリテマトーデスであるかを検出するため、のバイオマーカーである。本発明のバイオマーカーとしては、3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンからなり、全身性エリテマトーデスを検出するためのバイオマーカーである限り特に制限されない。かかるバイオマーカーは、ループス腎炎であるネフローゼ症候群患者から採取された尿中の濃度が、ループス腎炎以外の病型のネフローゼ症候群患者から採取された尿中のバイオマーカーの濃度と比べて高い。
本発明の予後予測方法は、対象となる全身性エリテマトーデス患者が免疫抑制治療後に寛解する可能性を予測する方法である。本発明の予後予測方法としては、(A)全身性エリテマトーデス患者から採取された尿中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を測定する工程を含み、前記工程(A)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度が高いとき、前記全身性エリテマトーデス患者の予後が良好であると予測する方法である限り特に制限されない。本発明の予後予測方法は、全身性エリテマトーデス患者の寛解の可能性を医師が予測することを補助する方法であって、医師による診断行為を含まない。
本発明の予後予測用バイオマーカーは、全身性エリテマトーデス患者の予後を予測するためのバイオマーカーである。本発明のバイオマーカーとしては、3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンからなり、全身性エリテマトーデス患者の予後を予測するためのバイオマーカーである限り特に制限されない。かかる予後予測用バイオマーカーは、予後が良好な全身性エリテマトーデス患者から採取された尿中において、より高い濃度で存在する。
本明細書において、「全身性エリテマトーデス」とは、American College of Rheumatology(ACR)による1997年改訂の診断基準、又は、systemic lupus international collaborating clinics(SLICC)による2012年の診断基準に該当する状態を意味する。
<1>顔面紅斑
<2>円板状皮疹
<3>光線過敏症
<4>口腔内潰瘍(無痛性で口腔あるいは鼻咽腔に出現)
<5>関節炎(2関節以上で非破壊性)
<6>漿膜炎(胸膜炎あるいは心膜炎)
<7>腎病変(0.5g/日以上の持続的蛋白尿か、細胞性円柱の出現)
<8>神経学的病変(痙攣発作あるいは精神障害)
<9>血液学的異常(溶血性貧血、4000/mm3以下の白血球減少、1500/mm3以下のリンパ球減少又は10万/mm3以下の血小板減少)
<10>免疫学的異常(抗2本鎖DNA抗体陽性、抗Sm抗体陽性又は抗リン脂質抗体陽性(抗カルジオリピン抗体、ループスアンチコアグラント、梅毒反応偽陽性)
<11>抗核抗体陽性
臨床的基準
<1>急性皮膚型ループス
<2>慢性皮膚型ループス
<3>口腔潰瘍
<4>非瘢痕性脱毛
<5>滑膜炎
<6>漿膜炎(胸膜炎、心膜炎のいずれか)
<7>腎病変(尿蛋白0.5g/日以上、赤血球円柱のいずれか)
<8>神経学的病変(痙攣発作、精神病、多発性単神経炎、脊髄炎、末梢・中枢神経障害,急性錯乱状態)
<9>溶血性貧血
<10>白血球減少(<4,000/mm3、もしくはリンパ球減少(<4,000/mm3)
<11>血小板減少(<10万/mm3)
免疫学的基準
<1>抗核抗体陽性
<2>抗二本鎖DNA抗体陽性(ELISA法では基準値の2倍を超える)
<3>抗Sm抗体陽性
<4>抗リン脂質抗体陽性
<5>低補体(C3、C4、CH50)
<6>直接クームス試験陽性(溶血性貧血なし)
本明細書において、「ループス腎炎」とは、全身性エリテマトーデス(SLE)に伴う腎障害を意味する。SLEは、全身が侵され得る自己免疫疾患であり、免疫複合体の形成と補体による組織障害をもたらす。組織障害の発生場所は個々の症例によって異なり、腎臓、皮膚、肺、脳など多様な臓器に障害が発生し得る。SLEの診断基準として、例えば、Updating the American College of Rheumatology revised criteria (1997)、及び、The systemic lupus international collaborating clinics classification criteria for systemic lupus erythematosus (2012) が知られている。
本明細書において、「ネフローゼ症候群」とは、成人(15歳以上)においては、(i)尿中のタンパク質が1日3.5g以上であり、かつ、(ii)血清中のアルブミン濃度が3.0g/dL以下である状態を意味し、小児(15歳未満)においては、(i)夜間畜尿で40mg/時/m2以上、又は、早朝起床時第1尿で尿タンパク質/クレアチニン比2.0g/gCr以上であり、かつ、(ii)血清中のアルブミン濃度が2.5g/dL以下である状態を意味する。小児におけるネフローゼ症候群としては、前述の基準に代えて、以下の基準を用いてもよい。
(i)尿中のタンパク質が1日3.5g以上又は0.1g/kg以上であることが3日以上持続するか、あるいは、早朝起床時第1尿の尿タンパク質が300mg/mL以上であることが3日以上持続し、かつ、
(ii)血清総タンパク質量が、1歳以上15歳未満では6.0g/100mL 以下、1歳未満では5.5g/100mL 以下であり、かつ、血清アルブミン量が、1歳以上15歳未満では3.0g/100mL 以下、1歳未満では2.5g/100mL 以下である。
本明細書において、「被検者」とは、ヒトである限り、年齢、性別、疾患の有無など特に制限されないが、本発明の検出方法を適用する意義が高いことから、全身性エリテマトーデスの確定診断を受けてないヒト、ループス腎炎の確定診断を受けてないヒト等が好ましく挙げられる。前述の全身性エリテマトーデスの確定診断を受けていないヒトとしては、全身性エリテマトーデスの確定診断を受けていないヒトである限り特に制限されず、全身性エリテマトーデスの疑いのあるヒト、全身性エリテマトーデスの疑いが特に認められないヒト、ネフローゼ症候群の確定診断を受けているヒト、ネフローゼ症候群の確定診断を受けていないヒト、ネフローゼ症候群の疑いのあるヒト、ネフローゼ症候群の疑いが特に認められないヒトなどが挙げられる。また、前述のループス腎炎の確定診断を受けていないヒトとしては、ループス腎炎の確定診断を受けていないヒトである限り特に制限されず、ループス腎炎の疑いのあるヒト、ループス腎炎の疑いが特に認められないヒト、ネフローゼ症候群の確定診断を受けているヒト、ネフローゼ症候群の確定診断を受けていないヒト、ネフローゼ症候群の疑いのあるヒト、ネフローゼ症候群の疑いが特に認められないヒトなどが挙げられる。
上記工程(a)としては、被検者から採取された尿中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を測定する工程である限り特に制限されない。3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度は、被検者から採取された尿(すなわち、尿サンプル)から分析用尿サンプルを調製し3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンを特異的に検出できる公知の方法、例えば、質量分析法を用いて測定することができる。かかる質量分析法とは、尿サンプルを、イオン源を用いて気体状のイオンとし(イオン化)、分析部において、真空中で運動させ電磁気力を用いて、或いは飛行時間差によりイオン化した尿サンプルを質量電荷比に応じて分離し、検出できる質量分析計を用いた測定方法のことをいい、イオン源を用いてイオン化する方法としては、電子イオン化(EI)法、化学イオン化(CI)法、電界脱離イオン化(FD)法、高速原子衝撃(FAB)法、マトリックス支援レーザー脱離イオン化(MALDI)法、エレクトロスプレーイオン化(ESI)法等の方法を適宜選択することができ、また、分析部において、イオン化した尿サンプルを分離する方法としては、磁場偏向型、四重極型、イオントラップ型、飛行時間(TOF)型、フーリエ変換イオンサイクロトロン共鳴型等の分離方法を適宜選択することができる。また、2以上の質量分析法を組み合わせたタンデム型質量分析(MS/MS)を利用することができる。また、ガスクロマトグラフィー(GC)や液体クロマトグラフィー(LC)や高速液体クロマトグラフィー(HPLC)により、3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンを夾雑物から分離・精製して分析することができる。
上記工程(b)としては、工程(a)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を、コントロール用の参照濃度と比較する工程である限り特に制限されない。本明細書において「コントロール用の参照濃度」は、全身性エリテマトーデスではない者(以下、「コントロール者」とも表示する。)から採取された尿中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を用いることができる。上記のコントロール者としては、全身性エリテマトーデスではない者であればよく、例えば、ループス腎炎ではない者、健常者などが挙げられ、中でも、ネフローゼ症候群患者であって、その病型がループス腎炎ではない患者や、健常者が好ましく挙げられ、中でも、ネフローゼ症候群患者であって、その病型がループス腎炎ではない患者がより好ましく挙げられる。上記の「ネフローゼ症候群患者であって、その病型がループス腎炎ではない患者」としては、ネフローゼ症候群患者であって、その病型がループス腎炎ではない患者である限り特に制限されないが、ネフローゼ症候群のうち、病型が、微小変化型ネフローゼ症候群(MCNS)、膜性腎症(MN)、糖尿病性腎症(DN)、巣状分節性糸球体硬化症(FSGS)、IgA腎症(IgA)及びアミロイド腎症(RA)からなる群から選択される1種又は2種以上(例えば3種以上、4種以上、5種以上又は6種)である患者が好ましく挙げられる。また、「工程(a)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度」と、「コントロール用の参照濃度」(以下、併せて「両濃度」とも表示する。)は、対応する濃度を用いることが好ましく、具体的には、尿の由来が異なる以外は、実質的に同じ測定方法(尿から尿サンプルの調製法や、尿サンプル中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度の測定法など)で測定した濃度を用いることが好ましい。また、両濃度のうち、一方の濃度として絶対値を用いる場合は、他方の濃度として絶対値を用いることが好ましく、また、両濃度のうち、一方の濃度として相対値を用いる場合は、他方の濃度として相対値を用いることが好ましい。上記「コントロール用の参照濃度」は、本発明の検出方法を実施する際、コントロール者から採取された尿から分析用尿サンプルを調製し、その都度測定してもよいが、予め測定した濃度を用いてもよい。
また、本発明の検出方法及び本発明の検出用バイオマーカーにおいて、被検者が全身性エリテマトーデス(好ましくはループス腎炎)である可能性(好ましくは被検者の病型がループス腎炎である可能性)が高いことを示す、他の場合としては、被験者における濃度が、1.9mg/g Cr以上、好ましくは2.5mg/g Cr以上、より好ましくは3mg/g Cr以上、さらに好ましくは3.5mg/g Cr以上、より好ましくは4mg/g Cr以上、さらに好ましくは5mg/g Cr以上である場合が挙げられる。これらの場合は、コントロール用の参照濃度として、1.9mg/g Cr、好ましくは2.5mg/g Cr、より好ましくは3mg/g Cr、さらに好ましくは3.5mg/g Cr、より好ましくは4mg/g Cr、さらに好ましくは5mg/g Crを用いることを意味する。
上記工程(A)としては、既に全身性エリテマトーデスであると診断された患者から採取された尿中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を測定する工程である限り特に制限されないが、ここで使用される尿は免疫抑制治療を行う前の患者から採取されたものであることが好ましい。また、かかる工程においては、上述の工程(a)と同様の公知の方法によって3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を測定することができる。
なお、「mg/g Cr」とは、1gのクレアチニンに対するその物質(本発明では3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジン)の重量(mg)を表す。
本発明のキットは、質量分析計の内部標準物質として3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンを備える、全身性エリテマトーデスの検出又は予後予測用キットであれば特に制限されないが、3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンが同位体標識されていることが好ましい。同位体標識の例としては、放射性同位体による標識や、炭素、窒素、酸素、重水素などの元素による標識が挙げられるが、重水素による標識が好ましい。また、本発明のキットは、さらに他の検査試薬、希釈液、使用説明書などを備えていてもよい。
本発明には、以下の実施態様も含まれる。
(a)被検者から採取された尿中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を測定する工程;及び
(b)工程(a)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を、コントロール用の参照濃度と比較する工程;
を含む、前記被検者が全身性エリテマトーデス(好ましくはループス腎炎)であるかを検出(又は診断)するためのデータの収集方法;や、
(a)被検者から採取された尿中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を測定する工程;及び
(b)工程(a)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を、コントロール用の参照濃度と比較する工程;
を含む、前記被検者が全身性エリテマトーデス(好ましくはループス腎炎)であるかの診断を補助する方法(なお、該方法は、医師による診断行為を含まない);や、
(a)被検者から採取された尿中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を測定する工程;及び
(b)工程(a)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を、コントロール用の参照濃度と比較する工程;
を含む、前記被検者が全身性エリテマトーデス(好ましくはループス腎炎)であるかを診断する方法;や、
(a)被検者から採取された尿中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を測定する工程;
(b)工程(a)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を、コントロール用の参照濃度と比較する工程;及び、
(c)工程(a)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度が、コントロール用の参照濃度と比べて高いとき、前記被検者が全身性エリテマトーデス(好ましくはループス腎炎)である可能性が高いことを示し、かかる可能性が高い場合に前記被検者に全身性エリテマトーデス(好ましくはループス腎炎)の治療を施す工程;
を含む、前記被検者が全身性エリテマトーデス(好ましくはループス腎炎)であるかを診断する方法;や、
全身性エリテマトーデスであるか(好ましくはネフローゼ症候群であるか、より好ましくはネフローゼ症候群の病型がループス腎炎であるか)の診断における使用のための3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジン;
ネフローゼ症候群の中から、ループス腎炎を高精度で鑑別し得るバイオマーカーを探索するために、以下の実験を行った。
バイオマーカーの探索には、名古屋大学医学部付属病院に保管されているネフローゼ症候群患者274名の尿サンプルを使用した。これらのネフローゼ症候群患者の患者情報を以下の表1に示す。なお、前述の274名の全ての患者は腎生検を行っており、病型が確定している。
尿サンプルは、採取するタイミングや個人差に起因して濃度が比較的大きく異なる。そのため、尿中のバイオマーカーをより正確に探索するために、各尿サンプルの濃度を尿中のクレアチニン濃度で補正した。具体的には、各尿サンプル中のクレアチニン量を公知の酵素法によって定量し、その結果に基づいて、各尿サンプルのクレアチニンの最終濃度が10mg/dLとなるように、各尿サンプルを水で希釈した。かかる希釈した尿サンプルを、後述の質量分析に供した。
各尿サンプルにおける尿中代謝物の解析を、キャピラリー電気泳動-飛行時間型質量分析計(CE-TOFMS)を用いて行った。陽イオン性代謝物質の測定条件を以下の(1)に示し、陰イオン性代謝物質の測定条件を以下の(2)に示す。
陽イオン性代謝物質の測定条件は、以下の(s)や(t)の文献に記載の測定条件を参照した。
(s)Soga, T., Ohashi, Y., Ueno, Y., Naraoka, H., Tomita, M., and Nishioka, T., “Quantitative Metabolome Analysis Using Capillary Electrophoresis Mass Spectrometry”, J. Proteome Res. 2. 488-494, 2003.
(t)Soga, T., Baran, R., *Suematsu M., Ueno, Y., Ikeda, S., Sakurakawa T., Kakazu, Y., Ishikawa, T., Robert, M., Nishioka, T., Tomita, M., “Differential Metabolomics Reveals Ophthalmic Acid As An Oxidative Stress Biomarker Indicating Hepatic Glutathione Consumption”, J. Biol. Chem. 281, 16768-16776, 2006.
陽イオン性代謝物質の具体的な測定条件は以下のとおりである。
キャピラリーには、フューズドシリカキャピラリー(内径50μm、外径360μm、全長100cm)を用いた。緩衝液には、1Mのギ酸水溶液(pH約1.8)を用いた。印加電圧は+30kVとし、キャピラリー温度は20℃で電気泳動を行った。キャピラリーの一端への分析用尿サンプルの注入は、加圧法を用いて50mbarで3秒間行った。
正イオンモードを用い、イオン化電圧は4kV、フラグメンター電圧は75V、スキマー電圧は50V、OctRFV電圧は125Vに設定した。乾燥ガスには窒素を使用し、乾燥ガスの温度は300℃、圧力は10psigに設定した。シース液には50%メタノール溶液を用い、質量較正用にヘキサキス(2,2-ジフルオロトキシ)フォスファゼンを0.1μMとなるよう混入した。シース液は10μL/minで送液した。正イオンモードで得られた全てのデータは、ヘキサキス(2,2-ジフルオロトキシ)フォスファゼン(m/z 622.0290)と、メタノールの二量体のアイソトープ(m/z 66.0632)の質量数を用いて自動較正した。
陰イオン性代謝物質の測定条件は、以下の(u)の文献に記載の測定条件を参照した。(u)Soga, T., Igarashi, K., Ito, T., Mizobuchi, K., Zimmermann, H., Tomita, M., “Metabolomic Profiling of Anionic Metabolites by Capillary Electrophoresis Mass Spectrometry”, Anal. Chem. 81, 6165-6174, 2009.
キャピラリーには、COSMO(+)キャピラリー(内径50μm、外径360μm、全長100cm)を用いた。緩衝液には、50mM酢酸アンモニウム水溶液(pH8.5)を用いた。印加電圧は-30kV、キャピラリー温度は20℃で電気泳動を行った。キャピラリーの一端への分析用尿サンプルの注入は、加圧法を用いて50mbarで30秒間行った。
負イオンモードを用い、イオン化電圧は3.5kV、フラグメンター電圧は100V、スキマー電圧は50V、OctRFV電圧は200Vに設定した。乾燥ガスには窒素を使用し、温度300℃、圧力10psigに設定した。シース液には5mM酢酸アンモニウムを含む50%メタノール溶液を用い、質量較正用にヘキサキス(2,2-ジフルオロトキシ)フォスファゼンを0.1Mとなるよう混入した。シース液は10μL/minで送液した。負イオンモードで得られた全てのデータは、ヘキサキス(2,2-ジフルオロトキシ)フォスファゼンの酢酸付加イオン(m/z 680.0355)と、酢酸の二量体のアイソトープ(m/z 120.0384)の質量数を用いて自動較正した。
[バイオマーカーの探索]
前述のネフローゼ症候群患者274名の尿サンプルについて、前述の方法でCE-TOFMSを行い、メタボローム解析を行った。その結果、これらネフローゼ症候群患者の尿中から、合計220種の代謝物ピークが検出された。これらの尿中代謝物の全てのピークに対して統計学的な解析を行い、ネフローゼ症候群の7種の病型から1つの病型の罹患可能性が高いことを検出することができるマーカー候補の探索を実施した。その結果、ネフローゼ症候群の7種の病型のうち、特定の1種の病型であるループス腎炎である可能性が高いと検出することができるマーカー候補ピーク(ピークID「CU040」(後に、3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンと同定))を見いだした。ネフローゼ症候群の7種の各病型群におけるCU040の相対濃度の最小値、5パーセンタイル値、25パーセンタイル値、50パーセンタイル値(中央値)、75パーセンタイル値、95パーセンタイル値、最大値をそれぞれ表2に示し、それらの値を箱ひげ図で表した図を図1に示す。
前述したように、ピークID「CU040」は測定当初、該当する標準試薬が無かったために未知のピークであった。このピークの物質を同定するために、ループス腎炎のない全身性エリテマトーデス患者から蓄尿により尿を数リットル採取して、分取液体クロマトグラフィーによる代謝物の回収、及び、核磁気共鳴による物質の同定を試みることとした。なお、過去の文献(Tritten, L., Keiser, J., Godejohann, M., Utzinger, J., Vargas, M., Beckonert, O., Holmes, E., Saric, J., “Metabolic Profiling Framework for Discovery of Candidate Diagnostic Markers of Malaria”, Scientific Rep. 3, 2769, 2013.)でマウス尿中から検出されたと報告されていた代謝物(3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジン)の組成式が、CU040の組成式と同一であったため、その代謝物の合成を行い、その合成代謝物(「KAH51-57」)のピークとCU040のピークを比較した。その結果を図3に示す。
表3に示した、患者前述のネフローゼ症候群患者274名の一部を含む前述の7種の病型から構成されるネフローゼ症候群患者及び非ネフローゼ症候群患者531名および健常者15名の尿サンプルを加えた合計546名の尿サンプルについて、前述の方法でCE-TOFMSを行い、メタボローム解析を行った。その結果、7種の病型及び健常コントロールの各群におけるCU040の濃度分布を明らかにした。7種の各病型群及び健常コントロールにおけるCU040の濃度の最小値、10パーセンタイル値、25パーセンタイル値、50パーセンタイル値(中央値)、75パーセンタイル値、90パーセンタイル値、最大値をそれぞれ表4に示し、それらの値をドットブロット及び箱ひげ図で表した図を図4に示す。
ネフローゼ症候群患者の尿中CU040(3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジン)濃度と、各種臨床パラメータとの相関を調べた。具体的には、ネフローゼ症候群患者から採取した尿サンプル(n=63)における、3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジン濃度を、実施例1に記載された方法により定量した。得られた尿中3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジン濃度に基づき、患者分布数を解析した。まず、9区分の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジン濃度における患者分布数を検討した結果、濃度が10mg/g Cr未満の患者数は19例であり、10~20mg/g Crの患者数は16例であり、20~30mg/g Crの患者数は17例であり、30~40mg/g Crの患者数は7例であり、40~50mg/g Crの患者数は3例であり、90~100mg/g Crの患者数は1例であった(図6の上グラフ)。かかる結果に基づき、さらに4区分の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジン濃度における患者分布数を検討した結果、濃度が10mg/g Cr未満の患者数は19例であり、10~20mg/g Crの患者数は16例であり、20~30mg/g Crの患者数は17例であり、30mg/g Cr以上の患者数は11例であった(図6の下グラフ)。
名古屋大学腎臓内科で腎生検を施工した全身性エリテマトーデス患者から尿サンプルを採取し、その尿サンプル中のCU040(3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジン)濃度を測定した。なお、かかるCU040濃度は、CE-MSで尿サンプル中の濃度を測定してから、尿サンプル中のクレアチニン濃度で補正して算出した。
これらの全身性エリテマトーデス患者を、尿中3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジン濃度が20mg/g Cr未満(n=30)又は20mg/g Cr以上(n=27)の2つのグループに分け、免疫抑制治療から3、6、12、及び24か月後の完全寛解率を比較した。尿蛋白量が0.2g/day以下になった時点を完全寛解と評価した。完全寛解率を比較した結果を表5と図9に示す。なお、図9中の2つのグラフの内、累積初回完全寛解達成率が全般的に高いグラフが「CU040 20=<」の結果を表し、全般的に低いグラフが「CU040 <20」の結果を表す。
Claims (10)
- (a)被検者から採取された尿中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を測定する工程;及び
(b)工程(a)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を、コントロール用の参照濃度と比較する工程;
を含み、
前記工程(a)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度が、コントロール用の参照濃度と比べて高いとき、前記被検者が全身性エリテマトーデスである可能性が高いことを示す、
全身性エリテマトーデスの検出方法。 - 工程(a)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度が、コントロール用の参照濃度に対して1.2倍以上であるとき、被検者が全身性エリテマトーデスである可能性が高いことを示す、請求項1に記載の検出方法。
- コントロール用の参照濃度が、ループス腎炎以外の病型であるネフローゼ症候群患者又は健常者から採取された尿中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度であることを特徴とする請求項1又は2に記載の検出方法。
- 被検者がネフローゼ症候群患者であり、全身性エリテマトーデスがループス腎炎であることを特徴とする請求項1~3のいずれかに記載の検出方法。
- 3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンである、全身性エリテマトーデスを検出するためのバイオマーカー。
- 被検者から採取された尿中のバイオマーカーの濃度が、ループス腎炎以外の病型のネフローゼ症候群患者又は健常者から採取された尿中のバイオマーカーの濃度と比べて高い、請求項5に記載のバイオマーカー。
- 被検者がネフローゼ症候群患者であり、全身性エリテマトーデスがループス腎炎であることを特徴とする請求項5又は6に記載のバイオマーカー。
- (A)全身性エリテマトーデス患者から採取された尿中の3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度を測定する工程を含み、
前記工程(A)で測定した3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度が、予後が良好ではない全身性エリテマトーデス患者における3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンの濃度と比べて高いとき、前記全身性エリテマトーデス患者の予後が良好である可能性が高いことを示す、全身性エリテマトーデスの予後予測を補助する方法。 - 3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンである、全身性エリテマトーデスの予後を予測するためのバイオマーカー。
- 質量分析計の内部標準物質としての3’,4’-ジデヒドロ-3’-デオキシシチジンを備える、全身性エリテマトーデスの検出又は予後予測用キット。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2018242371 | 2018-12-26 | ||
JP2018242371 | 2018-12-26 | ||
PCT/JP2019/051066 WO2020138260A1 (ja) | 2018-12-26 | 2019-12-26 | 全身性エリテマトーデスの検出方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JPWO2020138260A1 JPWO2020138260A1 (ja) | 2020-07-02 |
JP7479636B2 true JP7479636B2 (ja) | 2024-05-09 |
Family
ID=71127740
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020562391A Active JP7479636B2 (ja) | 2018-12-26 | 2019-12-26 | 全身性エリテマトーデスの検出方法 |
Country Status (5)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US20220120730A1 (ja) |
EP (1) | EP3904872A4 (ja) |
JP (1) | JP7479636B2 (ja) |
CN (1) | CN113227777A (ja) |
WO (1) | WO2020138260A1 (ja) |
Families Citing this family (1)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2023063331A1 (ja) * | 2021-10-14 | 2023-04-20 | 国立大学法人東海国立大学機構 | 抗3',4'-ジデヒドロ-3'-デオキシシチジン抗体 |
Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2005511025A (ja) | 2001-09-25 | 2005-04-28 | ザ・ジョーンズ・ホプキンス・ユニバーシティ | ハイスループットスクリーニングおよび創薬のための同質遺伝子性ヒト癌細胞の使用方法 |
WO2013183596A1 (ja) | 2012-06-06 | 2013-12-12 | 国立大学法人名古屋大学 | 腎疾患のバイオマーカー及びその用途 |
Family Cites Families (4)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
WO2010126055A1 (ja) | 2009-04-27 | 2010-11-04 | 国立大学法人新潟大学 | 腎障害の検出用マーカーとしての尿中メガリンの使用 |
WO2014003744A1 (en) * | 2012-06-27 | 2014-01-03 | Morehouse School Of Medicine | Anti-cxcl9, anti-cxcl 10, anti-cxcl 11, anti-cxcl 13, anti-cxcr3 and anti-cxcr5 agents for inflammatory disorder |
JP6128631B2 (ja) | 2012-08-01 | 2017-05-17 | 国立大学法人名古屋大学 | 糖尿病性腎症鑑別用マーカー及びその用途 |
CN105441578B (zh) * | 2016-01-19 | 2018-08-31 | 中南大学湘雅二医院 | 尿液外泌体microRNA分子标志物的应用及制备的试剂盒 |
-
2019
- 2019-12-26 JP JP2020562391A patent/JP7479636B2/ja active Active
- 2019-12-26 CN CN201980085365.XA patent/CN113227777A/zh active Pending
- 2019-12-26 US US17/417,640 patent/US20220120730A1/en active Pending
- 2019-12-26 EP EP19904562.6A patent/EP3904872A4/en active Pending
- 2019-12-26 WO PCT/JP2019/051066 patent/WO2020138260A1/ja unknown
Patent Citations (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2005511025A (ja) | 2001-09-25 | 2005-04-28 | ザ・ジョーンズ・ホプキンス・ユニバーシティ | ハイスループットスクリーニングおよび創薬のための同質遺伝子性ヒト癌細胞の使用方法 |
WO2013183596A1 (ja) | 2012-06-06 | 2013-12-12 | 国立大学法人名古屋大学 | 腎疾患のバイオマーカー及びその用途 |
Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
OUYANG, X、外3名,1H NMR-based metabolomic study of metabolic profiling for systemic lupus erythematosus.,Lupus,2011年11月29日,Vol. 20, No. 13,Page.1411-1420 |
TRITTEN L、外7名,Metabolic Profiling Framework for Discovery of Candidate Diagnostic Markers of Malaria,Sci Rep.,2013年09月26日,Vol.3,No.2769,Page.1-7,Published online 2013 Sep 26. doi: 10.1038/srep02769 |
平山明由、外1名,メタボロミクスを用いた新たな尿検査の可能性,日本臨床検査自動化学会会誌,日本,2017年04月01日,Vol.42,No.2,Page.163-166 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
JPWO2020138260A1 (ja) | 2020-07-02 |
EP3904872A4 (en) | 2022-10-19 |
WO2020138260A1 (ja) | 2020-07-02 |
US20220120730A1 (en) | 2022-04-21 |
CN113227777A (zh) | 2021-08-06 |
EP3904872A1 (en) | 2021-11-03 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
AU2019205010B2 (en) | Multiplex biomarker for use in evaluation of state of accumulation of amyloid B in brain, and analysis method for said evaluation | |
US8653006B2 (en) | Metabolite biomarkers for the detection of esophageal cancer using NMR | |
WO2022073502A1 (zh) | 生物标志物在制备肺癌检测试剂中的用途和方法 | |
US20140045714A1 (en) | Novel Biomarkers For Cardiovascular Injury | |
Liang et al. | Metabolomics of alcoholic liver disease: a clinical discovery study | |
Zhang et al. | Preliminary characterizations of a serum biomarker for sarcoidosis by comparative proteomic approach with tandem-mass spectrometry in ethnic Han Chinese patients | |
JP7479636B2 (ja) | 全身性エリテマトーデスの検出方法 | |
JP6128631B2 (ja) | 糖尿病性腎症鑑別用マーカー及びその用途 | |
US11740245B2 (en) | Mass spectrometry-based methods for the detection of circulating histones H3 and H2B in plasma from sepsis or septic shock (SS) patients | |
JP2015507194A (ja) | 心不全の診断および評価のためのポリペプチドマーカー | |
JP7414281B2 (ja) | 初期心不全の診断方法 | |
CN115097147B (zh) | 预测奥密克戎复阳风险的生物标志物及代谢、蛋白、联合模型 | |
JP5867834B2 (ja) | 肺癌マーカー補体C3dg分子及び肺癌マーカーの分析方法 | |
CN114280202A (zh) | 一种用于诊断镉中毒的生物标志物及其应用 | |
Lapolla et al. | Urinary peptides as a diagnostic tool for renal failure detected by matrix-assisted laser desorption/ionisation mass spectrometry: an evaluation of their clinical significance | |
US20180252706A1 (en) | Novel biomarkers for diagnosis and progression of primary progressive multiple sclerosis (ppms) | |
US20180275135A1 (en) | Biomarker panel to identify steroid resistance in childhood idiopathic nephrotic syndrome | |
JP2015108515A (ja) | 大腸癌の診断のための検査方法 | |
WO2024048514A1 (ja) | 子宮頸がんおよび/または子宮頸部上皮内腫瘍の検査方法 | |
JP7336097B2 (ja) | 乳がんに関するペプチドマーカー | |
JP7457300B2 (ja) | 神経変性疾患の診断用ペプチドマーカー | |
JP5581432B2 (ja) | 脳卒中又は脳梗塞の発症リスクの評価方法及び評価用キット | |
JP7280582B2 (ja) | 心房細動指標値の測定方法 | |
JP2022068788A (ja) | 軽度認知障害における酸化ストレスの評価 | |
EP4370931A1 (en) | Biomarkers for alzheimer's disease |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210621 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20221114 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20231030 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20231226 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20240325 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20240416 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7479636 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |