JP7448126B2 - 軟骨疾患の治療薬 - Google Patents
軟骨疾患の治療薬 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7448126B2 JP7448126B2 JP2020552636A JP2020552636A JP7448126B2 JP 7448126 B2 JP7448126 B2 JP 7448126B2 JP 2020552636 A JP2020552636 A JP 2020552636A JP 2020552636 A JP2020552636 A JP 2020552636A JP 7448126 B2 JP7448126 B2 JP 7448126B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- cartilage
- amino acid
- acid sequence
- peptide
- seq
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 208000015100 cartilage disease Diseases 0.000 title claims description 53
- 238000011282 treatment Methods 0.000 title claims description 11
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 76
- 210000000845 cartilage Anatomy 0.000 claims description 57
- 230000007547 defect Effects 0.000 claims description 43
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 claims description 32
- 230000000472 traumatic effect Effects 0.000 claims description 22
- 201000008482 osteoarthritis Diseases 0.000 claims description 21
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 claims description 21
- 201000009859 Osteochondrosis Diseases 0.000 claims description 16
- 208000007656 osteochondritis dissecans Diseases 0.000 claims description 16
- 210000003035 hyaline cartilage Anatomy 0.000 claims description 14
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 14
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 10
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 claims description 10
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 7
- 208000019802 Sexually transmitted disease Diseases 0.000 claims 1
- 230000003412 degenerative effect Effects 0.000 claims 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims 1
- 102100037907 High mobility group protein B1 Human genes 0.000 description 43
- 101001025337 Homo sapiens High mobility group protein B1 Proteins 0.000 description 43
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 23
- 210000000629 knee joint Anatomy 0.000 description 21
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 15
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 14
- 238000001356 surgical procedure Methods 0.000 description 14
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 14
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 description 12
- OARRHUQTFTUEOS-UHFFFAOYSA-N safranin Chemical compound [Cl-].C=12C=C(N)C(C)=CC2=NC2=CC(C)=C(N)C=C2[N+]=1C1=CC=CC=C1 OARRHUQTFTUEOS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 8
- 206010061762 Chondropathy Diseases 0.000 description 7
- 102000000503 Collagen Type II Human genes 0.000 description 6
- 108010041390 Collagen Type II Proteins 0.000 description 6
- 210000001188 articular cartilage Anatomy 0.000 description 6
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 6
- 238000012744 immunostaining Methods 0.000 description 6
- 239000003981 vehicle Substances 0.000 description 6
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 5
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 5
- 210000001503 joint Anatomy 0.000 description 5
- 210000002310 elbow joint Anatomy 0.000 description 4
- 239000002504 physiological saline solution Substances 0.000 description 4
- 108700010013 HMGB1 Proteins 0.000 description 3
- 102000055207 HMGB1 Human genes 0.000 description 3
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- -1 fluidity promoters Substances 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 238000011870 unpaired t-test Methods 0.000 description 3
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 3
- 206010053555 Arthritis bacterial Diseases 0.000 description 2
- 208000036487 Arthropathies Diseases 0.000 description 2
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 description 2
- 206010007710 Cartilage injury Diseases 0.000 description 2
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 208000003947 Knee Osteoarthritis Diseases 0.000 description 2
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 2
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 2
- 238000010162 Tukey test Methods 0.000 description 2
- 230000005856 abnormality Effects 0.000 description 2
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 2
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 2
- 210000003414 extremity Anatomy 0.000 description 2
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 2
- 235000013355 food flavoring agent Nutrition 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 210000003127 knee Anatomy 0.000 description 2
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 2
- 230000000116 mitigating effect Effects 0.000 description 2
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 2
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 description 2
- 239000012188 paraffin wax Substances 0.000 description 2
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 2
- 238000007492 two-way ANOVA Methods 0.000 description 2
- 210000003462 vein Anatomy 0.000 description 2
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 1
- LCSKNASZPVZHEG-UHFFFAOYSA-N 3,6-dimethyl-1,4-dioxane-2,5-dione;1,4-dioxane-2,5-dione Chemical group O=C1COC(=O)CO1.CC1OC(=O)C(C)OC1=O LCSKNASZPVZHEG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 1
- 206010002091 Anaesthesia Diseases 0.000 description 1
- 241000486679 Antitype Species 0.000 description 1
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 1
- 238000011746 C57BL/6J (JAX™ mouse strain) Methods 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 description 1
- 241000700198 Cavia Species 0.000 description 1
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 1
- 241000283153 Cetacea Species 0.000 description 1
- 241000725101 Clea Species 0.000 description 1
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 1
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 1
- 241000283086 Equidae Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 229920002153 Hydroxypropyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- 208000004575 Infectious Arthritis Diseases 0.000 description 1
- PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N Isoflurane Chemical compound FC(F)OC(Cl)C(F)(F)F PIWKPBJCKXDKJR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000012659 Joint disease Diseases 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 1
- 229930195725 Mannitol Natural products 0.000 description 1
- 206010072970 Meniscus injury Diseases 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 208000007534 Patellar Dislocation Diseases 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229920003171 Poly (ethylene oxide) Polymers 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 1
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 206010044502 Traumatic arthropathy Diseases 0.000 description 1
- DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N acetaldehyde Diethyl Acetal Natural products CCOC(C)OCC DHKHKXVYLBGOIT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- VJHCJDRQFCCTHL-UHFFFAOYSA-N acetic acid 2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal Chemical compound CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O VJHCJDRQFCCTHL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N acetic acid;2,3,4,5,6-pentahydroxyhexanal;sodium Chemical compound [Na].CC(O)=O.OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O DPXJVFZANSGRMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 230000037005 anaesthesia Effects 0.000 description 1
- 229940035676 analgesics Drugs 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 239000000730 antalgic agent Substances 0.000 description 1
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 1
- 210000000544 articulatio talocruralis Anatomy 0.000 description 1
- 239000011230 binding agent Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 239000006172 buffering agent Substances 0.000 description 1
- 210000005252 bulbus oculi Anatomy 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 description 1
- 229950008138 carmellose Drugs 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 239000004359 castor oil Substances 0.000 description 1
- 235000019438 castor oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000010980 cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 210000000795 conjunctiva Anatomy 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 description 1
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 1
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 239000007884 disintegrant Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000002496 gastric effect Effects 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 description 1
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 1
- ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N glycerol triricinoleate Natural products CCCCCC[C@@H](O)CC=CCCCCCCCC(=O)OC[C@@H](COC(=O)CCCCCCCC=CC[C@@H](O)CCCCCC)OC(=O)CCCCCCCC=CC[C@H](O)CCCCCC ZEMPKEQAKRGZGQ-XOQCFJPHSA-N 0.000 description 1
- 210000004394 hip joint Anatomy 0.000 description 1
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 1
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 1
- 239000001863 hydroxypropyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010977 hydroxypropyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000001866 hydroxypropyl methyl cellulose Substances 0.000 description 1
- 235000010979 hydroxypropyl methyl cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 229920003088 hydroxypropyl methyl cellulose Polymers 0.000 description 1
- UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N hydroxypropyl methyl cellulose Chemical compound OC1C(O)C(OC)OC(CO)C1OC1C(O)C(O)C(OC2C(C(O)C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C(CO)O2)O)C(CO)O1 UFVKGYZPFZQRLF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 238000001361 intraarterial administration Methods 0.000 description 1
- 238000007918 intramuscular administration Methods 0.000 description 1
- 238000010255 intramuscular injection Methods 0.000 description 1
- 239000007927 intramuscular injection Substances 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 239000007928 intraperitoneal injection Substances 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010253 intravenous injection Methods 0.000 description 1
- 229960002725 isoflurane Drugs 0.000 description 1
- 210000000281 joint capsule Anatomy 0.000 description 1
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 1
- 210000003041 ligament Anatomy 0.000 description 1
- 210000003141 lower extremity Anatomy 0.000 description 1
- 239000000314 lubricant Substances 0.000 description 1
- 239000000594 mannitol Substances 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 150000004667 medium chain fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000004400 mucous membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000003928 nasal cavity Anatomy 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 210000004417 patella Anatomy 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000001267 polyvinylpyrrolidone Substances 0.000 description 1
- 229920000036 polyvinylpyrrolidone Polymers 0.000 description 1
- 235000013855 polyvinylpyrrolidone Nutrition 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002685 pulmonary effect Effects 0.000 description 1
- 239000008213 purified water Substances 0.000 description 1
- 230000008929 regeneration Effects 0.000 description 1
- 238000011069 regeneration method Methods 0.000 description 1
- 206010039073 rheumatoid arthritis Diseases 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 201000001223 septic arthritis Diseases 0.000 description 1
- 210000000323 shoulder joint Anatomy 0.000 description 1
- RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N silicic acid Chemical compound O[Si](O)(O)O RMAQACBXLXPBSY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000012239 silicon dioxide Nutrition 0.000 description 1
- 238000010532 solid phase synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 239000003381 stabilizer Substances 0.000 description 1
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 1
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 1
- 238000007920 subcutaneous administration Methods 0.000 description 1
- 238000010254 subcutaneous injection Methods 0.000 description 1
- 239000007929 subcutaneous injection Substances 0.000 description 1
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 1
- 239000004094 surface-active agent Substances 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 210000001738 temporomandibular joint Anatomy 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002554 vinyl polymer Polymers 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 1
- 210000003857 wrist joint Anatomy 0.000 description 1
- 210000002517 zygapophyseal joint Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- A61K38/17—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- A61K38/1703—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- A61K38/1709—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K38/00—Medicinal preparations containing peptides
- A61K38/16—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
- A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
Description
本願は、High mobility group box 1（HMGB1）タンパク質の断片ペプチドを含む、軟骨疾患の予防および／または治療のための医薬組成物に関する。本願は、２０１８年１０月２５日出願の日本国特許出願第２０１８－２００８６６号に対して優先権を主張するものであり、該日本国特許出願の全内容を、参照により本明細書に一体化させる。
軟骨組織、例えば関節軟骨は修復能が低く、一度損傷してしまうと自然再生することはほぼ不可能である。例えば外傷性関節軟骨欠損症の治療法は、鎮痛剤の内服やヒアルロン酸の関節内注射等の対症療法が中心であり、現在のところ外傷性関節軟骨欠損症に対する根治的療法は確立されていない。また、外傷性関節軟骨欠損症に対する自家骨軟骨柱移植等の外科的治療方法も存在するが、患者の正常組織を採取する必要があるため大きな欠損には対応できない等の問題がある。したがって、より効果的かつ侵襲性の低い軟骨疾患治療薬の開発が望まれている。
本願は、軟骨疾患の治療に有効な新規医薬を提供することを目的とする。
本発明者らは、軟骨疾患の治療に有効な物質を探索した結果、特定のアミノ酸配列を有するHMGB1断片ペプチドが、関節軟骨欠損症の動物モデルにおいて硝子軟骨を含む正常な軟骨組織を再生する効果を示すことを見出した。この知見に基づき、本願は、当該特定のHMGB1断片ペプチドを含有する、軟骨疾患の予防および／または治療のための医薬組成物を提供する。
すなわち、本願は、以下を提供する。
〔１〕
以下の（ａ）から（ｃ）のいずれかに記載の物質（以下、物質Aと称する）を含有する、軟骨疾患の予防および／または治療のための医薬組成物：
（ａ）配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含むHMGB1断片ペプチド；
（ｂ）配列番号：１に記載のアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が置換、欠失、挿入若しくは付加されたアミノ酸配列を含むペプチド； および
（ｃ）配列番号：１に記載のアミノ酸配列と約８０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むペプチド。
〔２〕
軟骨疾患が外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である、〔１〕に記載の医薬組成物。
〔３〕
物質Aを含有する、軟骨疾患の患者において硝子軟骨を再生するための医薬組成物。
〔４〕
軟骨疾患が外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である、〔３〕に記載の医薬組成物。
〔Ａ１〕
物質Aの有効量を対象に投与する工程を含む、軟骨疾患を予防および／または治療する方法。
〔Ａ２〕
軟骨疾患が外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である、〔Ａ１〕に記載の方法。
〔Ａ３〕
物質Aの有効量を対象に投与する工程を含む、軟骨疾患の患者において硝子軟骨を再生する方法。
〔Ａ４〕
軟骨疾患が外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である、〔Ａ３〕に記載の方法。
〔Ｂ１〕
軟骨疾患の予防および／または治療に用いるための、物質A。
〔Ｂ２〕
軟骨疾患が外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である、〔Ｂ１〕に記載の物質A。
〔Ｂ３〕
軟骨疾患の患者において硝子軟骨の再生に用いるための、物質A。
〔Ｂ４〕
軟骨疾患が外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である、〔Ｂ３〕に記載の物質A。
〔Ｃ１〕
軟骨疾患の予防および／または治療のための医薬の製造における、物質Aの使用。
〔Ｃ２〕
軟骨疾患が外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である、〔Ｃ１〕に記載の使用。
〔Ｃ３〕
軟骨疾患の患者において硝子軟骨を再生するための医薬の製造における、物質Aの使用。
〔Ｃ４〕
軟骨疾患が外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である、〔Ｃ３〕に記載の使用。
〔１〕
以下の（ａ）から（ｃ）のいずれかに記載の物質（以下、物質Aと称する）を含有する、軟骨疾患の予防および／または治療のための医薬組成物：
（ａ）配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含むHMGB1断片ペプチド；
（ｂ）配列番号：１に記載のアミノ酸配列において１若しくは複数個のアミノ酸が置換、欠失、挿入若しくは付加されたアミノ酸配列を含むペプチド； および
（ｃ）配列番号：１に記載のアミノ酸配列と約８０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むペプチド。
〔２〕
軟骨疾患が外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である、〔１〕に記載の医薬組成物。
〔３〕
物質Aを含有する、軟骨疾患の患者において硝子軟骨を再生するための医薬組成物。
〔４〕
軟骨疾患が外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である、〔３〕に記載の医薬組成物。
〔Ａ１〕
物質Aの有効量を対象に投与する工程を含む、軟骨疾患を予防および／または治療する方法。
〔Ａ２〕
軟骨疾患が外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である、〔Ａ１〕に記載の方法。
〔Ａ３〕
物質Aの有効量を対象に投与する工程を含む、軟骨疾患の患者において硝子軟骨を再生する方法。
〔Ａ４〕
軟骨疾患が外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である、〔Ａ３〕に記載の方法。
〔Ｂ１〕
軟骨疾患の予防および／または治療に用いるための、物質A。
〔Ｂ２〕
軟骨疾患が外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である、〔Ｂ１〕に記載の物質A。
〔Ｂ３〕
軟骨疾患の患者において硝子軟骨の再生に用いるための、物質A。
〔Ｂ４〕
軟骨疾患が外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である、〔Ｂ３〕に記載の物質A。
〔Ｃ１〕
軟骨疾患の予防および／または治療のための医薬の製造における、物質Aの使用。
〔Ｃ２〕
軟骨疾患が外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である、〔Ｃ１〕に記載の使用。
〔Ｃ３〕
軟骨疾患の患者において硝子軟骨を再生するための医薬の製造における、物質Aの使用。
〔Ｃ４〕
軟骨疾患が外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である、〔Ｃ３〕に記載の使用。
本願は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含むHMGB1断片ペプチドを含有する、軟骨疾患の予防および／または治療のための医薬組成物を提供する。
軟骨疾患とは、軟骨組織の異常を伴う疾患をいう。軟骨組織の異常としては、軟骨の損傷、磨耗、欠損、変性等が挙げられる。
本願における軟骨疾患としては、外傷性軟骨欠損症、変形性関節症、離断性骨軟骨炎、半月板損傷、外傷性関節症、炎症性関節症（例えば関節リウマチ）、感染性関節症（例えば化膿性関節炎）等が挙げられるが、これらに限定されない。変形性関節症には、原因が明確でない原発性変形性関節症と、原因が明確である続発性変形性関節症がある。続発性変形性関節症としては、靭帯損傷、軟骨損傷、半月板損傷等が原因となって生じる変形性関節症が挙げられるが、これらに限定されない。
一つの好ましい態様において、本願のHMGB1断片ペプチドを用いて治療される軟骨疾患は、外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である。別の好ましい態様において、本願のHMGB1断片ペプチドを用いて治療される軟骨疾患は、外傷性軟骨欠損症または変形性関節症である。さらなる態様において、本願のHMGB1断片ペプチドを用いて治療される軟骨疾患は、外傷性軟骨欠損症である。別の態様において、本願のHMGB1断片ペプチドを用いて治療される軟骨疾患は、変形性関節症である。
本願のHMGB1断片ペプチドを用いて治療される軟骨の種類（部位）としては、例えば関節の軟骨が挙げられるが、これに限定されない。関節としては、四肢関節（肩関節、肘関節、手関節、股関節、膝関節、足関節）、顎関節、椎間関節等が挙げられるが、これらに限定されない。
一つの態様において、本願のHMGB1断片ペプチドを用いて治療される軟骨疾患は、四肢関節の軟骨疾患である。別の態様において、本願のHMGB1断片ペプチドを用いて治療される軟骨疾患は、肘関節または膝関節の軟骨疾患である。さらなる態様において、本願のHMGB1断片ペプチドを用いて治療される軟骨疾患は、膝関節の軟骨疾患である。
本願のHMGB1断片ペプチドを用いて治療される軟骨疾患のさらなる例としては、関節の外傷性軟骨欠損症、肘関節の外傷性軟骨欠損症、膝関節の外傷性軟骨欠損症、変形性肘関節症、変形性膝関節症、関節の離断性骨軟骨炎、肘関節の離断性骨軟骨炎、膝関節の離断性骨軟骨炎を挙げることができる。一つの態様において、本願のHMGB1断片ペプチドを用いて治療される軟骨疾患は、膝関節の外傷性軟骨欠損症である。別の態様において、本願のHMGB1断片ペプチドを用いて治療される軟骨疾患は、変形性膝関節症である。
本願において、「医薬組成物」という用語は、「医薬」、「薬剤」または「薬学的組成物」と互換的に用いられる。
また本願は、配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含むHMGB1断片ペプチドを含有する、軟骨疾患の患者において硝子軟骨を再生するための医薬組成物を提供する。一つの態様において、本願の医薬組成物は、外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎の患者において硝子軟骨を再生するために用いられるものである。
本願において、配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含むHMGB1断片ペプチドとは、HMGB1タンパク質の一部からなるペプチドであって、配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含むペプチドを意味する。このようなペプチドは、該ペプチドをコードするDNAを適当な発現系に組み込んで遺伝子組換え体（recombinant）として得ることができるし、または、人工的に合成することもできる。
本願において、HMGB1タンパク質としては、配列番号：２に記載のアミノ酸配列を含むタンパク質、および、配列番号：３に記載の塩基配列を含むDNAによってコードされるタンパク質が例示できるが、これらに限定されるものではない。
本願における配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含むHMGB1断片ペプチドとしては、配列番号：１に記載のアミノ酸配列からなるHMGB1断片ペプチドを例示できるが、これに限定されるものではない。
本願の医薬組成物においては、配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含むHMGB1断片ペプチドに代えて、またはこれと共に、配列番号：１に記載のアミノ酸配列において１つ以上のアミノ酸残基が改変（置換、欠失、挿入若しくは付加）されたアミノ酸配列を含むペプチドであって、配列番号：１に記載のアミノ酸配列を含むHMGB1断片ペプチドと機能的に同等なペプチドを用いることもできる。かかるペプチドの例としては、以下のものを例示できるが、これらに限定されるものではない：
i) 配列番号：１に記載のアミノ酸配列において１若しくは複数個（例えば１個～１０個、１個～９個、１個～８個、１個～７個、１個～６個、１個～５個、１個～４個、１個～３個、または１個若しくは２個）のアミノ酸が置換、欠失、挿入若しくは付加されたアミノ酸配列を含むペプチド；
ii) 配列番号：１に記載のアミノ酸配列において１若しくは複数個（例えば１個～１０個、１個～９個、１個～８個、１個～７個、１個～６個、１個～５個、１個～４個、１個～３個、または１個若しくは２個）のアミノ酸が置換、欠失、挿入若しくは付加されたアミノ酸配列からなるペプチド；
iii) 配列番号：１に記載のアミノ酸配列と約８０％以上、例えば約８５％以上、約９０％以上、約９１％以上、約９２％以上、約９３％以上、約９４％以上、約９５％以上、約９６％以上、約９７％以上または約９８％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むペプチド；
iv) 配列番号：１に記載のアミノ酸配列と約８０％以上、例えば約８５％以上、約９０％以上、約９１％以上、約９２％以上、約９３％以上、約９４％以上、約９５％以上、約９６％以上、約９７％以上または約９８％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなるペプチド。
i) 配列番号：１に記載のアミノ酸配列において１若しくは複数個（例えば１個～１０個、１個～９個、１個～８個、１個～７個、１個～６個、１個～５個、１個～４個、１個～３個、または１個若しくは２個）のアミノ酸が置換、欠失、挿入若しくは付加されたアミノ酸配列を含むペプチド；
ii) 配列番号：１に記載のアミノ酸配列において１若しくは複数個（例えば１個～１０個、１個～９個、１個～８個、１個～７個、１個～６個、１個～５個、１個～４個、１個～３個、または１個若しくは２個）のアミノ酸が置換、欠失、挿入若しくは付加されたアミノ酸配列からなるペプチド；
iii) 配列番号：１に記載のアミノ酸配列と約８０％以上、例えば約８５％以上、約９０％以上、約９１％以上、約９２％以上、約９３％以上、約９４％以上、約９５％以上、約９６％以上、約９７％以上または約９８％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列を含むペプチド；
iv) 配列番号：１に記載のアミノ酸配列と約８０％以上、例えば約８５％以上、約９０％以上、約９１％以上、約９２％以上、約９３％以上、約９４％以上、約９５％以上、約９６％以上、約９７％以上または約９８％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなるペプチド。
本願のペプチドやそれを含有する医薬組成物（以下、ペプチド等と称する）の有効量が、本明細書に記載の疾患や症状の治療や予防のために対象に投与される。
本願における有効量とは、本明細書に記載の疾患や症状の治療や予防に十分な量をいう。本願における治療には、軽減、遅延、阻止、改善、寛解、治癒、完治などが含まれるが、これらに限定されない。また本願における予防には、軽減、遅延、阻止などが含まれるが、これらに限定されない。
本願における対象としては、特に制限はなく、哺乳類、鳥類、魚類等が挙げられる。哺乳類としては、ヒト又は非ヒト動物が挙げられ、例えば、ヒト、マウス、ラット、サル、ブタ、イヌ、ウサギ、ハムスター、モルモット、ウマ、ヒツジ、クジラなどが例示できるが、これらに限定されるものではない。本願において、「対象」という用語は、「患者」、「個体」および「動物」と互換的に用いられる。
本願のペプチド等の投与部位に制限はなく、軟骨疾患の症状が現れる部位もしくはその近傍、それらとは異なる部位（それら以外の部位）、軟骨疾患の症状が現れる部位から離れた部位、軟骨疾患の症状が現れる部位から遠位にある部位、または、軟骨疾患の症状が現れる部位に対して遠位かつ異所である部位など、いかなる部位に投与されても、本願のペプチド等は、その効果を発揮することができる。
また本願のペプチド等は、軟骨疾患の症状が現れる組織（例えば関節）とは異なる組織、軟骨疾患の症状が現れる組織から離れた組織、軟骨疾患の症状が現れる組織から遠位にある組織、または、軟骨疾患の症状が現れる組織に対して遠位かつ異所にある組織など、いかなる組織に投与されても、その効果を発揮することができる。
本願のペプチド等の投与方法としては、経口投与または非経口投与が挙げられ、非経口投与方法としては、血管内投与（動脈内投与、静脈内投与等）、筋肉内投与、皮下投与、皮内投与、腹腔内投与、経鼻投与、経肺投与、経皮投与などが挙げられるが、これらに限定されない。また、本願のペプチド等を、注射投与、例えば、静脈内注射、筋肉内注射、腹腔内注射、皮下注射などによって全身または局部的（例えば、皮下、皮内、皮膚表面、眼球あるいは眼瞼結膜、鼻腔粘膜、口腔内および消化管粘膜、膣・子宮内粘膜、または損傷部位など）に投与できる。
また、本願のペプチド等に代えて、本願のペプチドを分泌する細胞、該ペプチドをコードするDNA、該DNAが挿入されたベクター、該ベクターを含む細胞、およびこれらを含有する医薬組成物を用いることもできる。
また、患者の年齢、症状により適宜投与方法を選択することができる。本願のペプチドを投与する場合、例えば、一回の投与につき、体重1 kgあたり約0.0000001mgから約1000mgの範囲で投与量が選択できる。あるいは、例えば、患者あたり約0.00001から約100000mg/bodyの範囲で投与量が選択できる。本願のペプチドを分泌する細胞や該ペプチドをコードするDNAが挿入された遺伝子治療用ベクターを投与する場合も、該ペプチドの量が上記範囲内となるように投与することができる。しかしながら、本願における医薬組成物はこれらの投与量に制限されるものではない。
本願の医薬組成物は、常法に従って製剤化することができ（例えば、Remington's Pharmaceutical Science, latest edition, Mark Publishing Company, Easton, U.S.A）、医薬的に許容される担体や添加物を共に含むものであってもよい。例えば界面活性剤、賦形剤、着色料、着香料、保存料、安定剤、緩衝剤、懸濁剤、等張化剤、結合剤、崩壊剤、滑沢剤、流動性促進剤、矯味剤等が挙げられるが、これらに制限されず、その他常用の担体や添加剤が適宜使用できる。具体的には、軽質無水ケイ酸、乳糖、結晶セルロース、マンニトール、デンプン、カルメロースカルシウム、カルメロースナトリウム、ヒドロキシプロピルセルロース、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、ポリビニルアセタールジエチルアミノアセテート、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、中鎖脂肪酸トリグリセライド、ポリオキシエチレン硬化ヒマシ油60、白糖、カルボキシメチルセルロース、コーンスターチ、無機塩類、精製水、生理食塩水、グリセリン等を挙げることができる。
なお、本明細書において引用されたすべての先行技術文献は、参照として本明細書に組み入れられる。
本発明は、下記の実施例によってさらに例示されるが、それらに限定されるものではない。
実施例１
関節軟骨欠損症に対するHMGB1断片ペプチドの有効性の評価
関節軟骨欠損症に対するHMGB1断片ペプチドの有効性の評価
（１）材料および方法
ｉ）薬剤調製
ヒト由来のHMGB1タンパク質のアミノ酸残基1-44（配列番号：１）からなるペプチドを固相法により化学合成した。以下、当該HMGB1断片ペプチドをHMGB1ペプチド(1-44)と称し、実施例に対応する図面においては「1-44」と省略して表記する。
ｉ）薬剤調製
ヒト由来のHMGB1タンパク質のアミノ酸残基1-44（配列番号：１）からなるペプチドを固相法により化学合成した。以下、当該HMGB1断片ペプチドをHMGB1ペプチド(1-44)と称し、実施例に対応する図面においては「1-44」と省略して表記する。
ｉｉ）軟骨欠損モデルマウスの作成
C57BL/6Jマウス（6-7週齢、雄、野生型）を日本クレアより購入後、8週齢になるまで動物施設内に順化させた（8週齢時で体重約25g）。1.5-2.0%（v/v）のイソフルレン吸入麻酔下で、軟骨欠損を作成する側の下肢の剃毛を行い、膝関節中央に剪刀で約1cmの縦皮切を加えた。顕微鏡下に傍膝蓋内側アプローチで尖刃（#11）を用いて約1cmの関節切開を行い、膝蓋骨を外側に脱臼させた。大腿骨滑車を確認し、0.5mm径の手回しドリル（MEISINGER社製）を用いて滑車の中心に0.5x0.5x0.5mmの軟骨欠損を作成した。生理食塩水で関節内の洗浄を行った後、膝蓋骨脱臼が起きないように関節包を8-0バイクリルで連続縫合し、皮膚を5-0ナイロン糸で縫合した。
C57BL/6Jマウス（6-7週齢、雄、野生型）を日本クレアより購入後、8週齢になるまで動物施設内に順化させた（8週齢時で体重約25g）。1.5-2.0%（v/v）のイソフルレン吸入麻酔下で、軟骨欠損を作成する側の下肢の剃毛を行い、膝関節中央に剪刀で約1cmの縦皮切を加えた。顕微鏡下に傍膝蓋内側アプローチで尖刃（#11）を用いて約1cmの関節切開を行い、膝蓋骨を外側に脱臼させた。大腿骨滑車を確認し、0.5mm径の手回しドリル（MEISINGER社製）を用いて滑車の中心に0.5x0.5x0.5mmの軟骨欠損を作成した。生理食塩水で関節内の洗浄を行った後、膝蓋骨脱臼が起きないように関節包を8-0バイクリルで連続縫合し、皮膚を5-0ナイロン糸で縫合した。
ｉｉｉ）ペプチドの投与
上記の通り作成した軟骨欠損モデルマウスを、HMGB1ペプチド(1-44)投与群（n=16）および対照群（n=16）に分けた。HMGB1ペプチド(1-44)投与群には、軟骨欠損を作成した直後に、生理食塩水を溶媒として1μg/μLの濃度に調整したHMGB1ペプチド(1-44)溶液を100μL/匹の量（ペプチドの投与量としては4mg/kg）で尾静脈より投与し、その後も同じ用量で軟骨欠損作成後（以下、単に「術後」とも称する）4週まで2回／週の頻度で投与した。対照群には、HMGB1ペプチド(1-44)投与群と同じスケジュールで、生理食塩水を100μL/匹の量で尾静脈より投与した。
上記の通り作成した軟骨欠損モデルマウスを、HMGB1ペプチド(1-44)投与群（n=16）および対照群（n=16）に分けた。HMGB1ペプチド(1-44)投与群には、軟骨欠損を作成した直後に、生理食塩水を溶媒として1μg/μLの濃度に調整したHMGB1ペプチド(1-44)溶液を100μL/匹の量（ペプチドの投与量としては4mg/kg）で尾静脈より投与し、その後も同じ用量で軟骨欠損作成後（以下、単に「術後」とも称する）4週まで2回／週の頻度で投与した。対照群には、HMGB1ペプチド(1-44)投与群と同じスケジュールで、生理食塩水を100μL/匹の量で尾静脈より投与した。
ｉｖ）ペプチドの投与による効果の評価
HMGB1ペプチド(1-44)投与群および対照群ともに、術後2、4、8および12週の各時点で４匹ずつマウスをsacrificeし、膝関節の軟骨欠損作成部位を取り出して顕微鏡観察および組織染色を行った。顕微鏡観察では、Wayne scoring systemを用い、下記の表１に示す基準に従って肉眼所見をスコア化して軟骨組織の状態を評価した。また、組織学的評価のために軟骨組織の切片を作成してサフラニンO染色を行い、下記の表２に示す基準に従って組織像からWakitani スコアを算出して軟骨組織の状態を評価した。
HMGB1ペプチド(1-44)投与群および対照群ともに、術後2、4、8および12週の各時点で４匹ずつマウスをsacrificeし、膝関節の軟骨欠損作成部位を取り出して顕微鏡観察および組織染色を行った。顕微鏡観察では、Wayne scoring systemを用い、下記の表１に示す基準に従って肉眼所見をスコア化して軟骨組織の状態を評価した。また、組織学的評価のために軟骨組織の切片を作成してサフラニンO染色を行い、下記の表２に示す基準に従って組織像からWakitani スコアを算出して軟骨組織の状態を評価した。
（２）結果
ｉ）顕微鏡観察（肉眼所見）
術後2、4、8および12週における膝関節軟骨欠損部位およびその周辺の顕微鏡観察結果を図１に示す。HMGB1ペプチド(1-44)投与群の軟骨欠損部位は、対照群と比較してより正常に近い状態まで回復していることが観察された。Wayneスコアについても、HMGB1ペプチド(1-44)投与群の方が対照群より高かった（図２）。
ｉ）顕微鏡観察（肉眼所見）
術後2、4、8および12週における膝関節軟骨欠損部位およびその周辺の顕微鏡観察結果を図１に示す。HMGB1ペプチド(1-44)投与群の軟骨欠損部位は、対照群と比較してより正常に近い状態まで回復していることが観察された。Wayneスコアについても、HMGB1ペプチド(1-44)投与群の方が対照群より高かった（図２）。
ｉｉ）組織学的評価
軟骨組織切片のサフラニンO染色の結果、HMGB1ペプチド(1-44)投与群では赤色に強く染まる領域（硝子軟骨と考えられる）が軟骨欠損作成部位の全体にわたって観察され、欠損した軟骨組織が完全に再生していることが確認された（図３および５）。また、Wakitani スコアによる評価でも、HMGB1ペプチド(1-44)投与群の値は対照群と比較して有意に低く、関節の軟骨欠損に対するHMGB1ペプチドの治療効果が示された（図４および６）。
軟骨組織切片のサフラニンO染色の結果、HMGB1ペプチド(1-44)投与群では赤色に強く染まる領域（硝子軟骨と考えられる）が軟骨欠損作成部位の全体にわたって観察され、欠損した軟骨組織が完全に再生していることが確認された（図３および５）。また、Wakitani スコアによる評価でも、HMGB1ペプチド(1-44)投与群の値は対照群と比較して有意に低く、関節の軟骨欠損に対するHMGB1ペプチドの治療効果が示された（図４および６）。
実施例２
関節軟骨の組織染色
関節軟骨の組織染色
方法
実施例１と同じ方法で軟骨欠損モデルマウスを作成し、そのまま飼育を続けた。術後12週の時点で当該マウスから膝関節の軟骨欠損作成部位を含む組織を取り出してパラフィン切片を作成し、抗II型コラーゲン抗体を用いた免疫染色とサフラニンO染色を行った。また、同系統の正常マウスからも膝関節の軟骨組織を取り出してパラフィン切片を作成し、同様にII型コラーゲンの免疫染色とサフラニンO染色を行った。
実施例１と同じ方法で軟骨欠損モデルマウスを作成し、そのまま飼育を続けた。術後12週の時点で当該マウスから膝関節の軟骨欠損作成部位を含む組織を取り出してパラフィン切片を作成し、抗II型コラーゲン抗体を用いた免疫染色とサフラニンO染色を行った。また、同系統の正常マウスからも膝関節の軟骨組織を取り出してパラフィン切片を作成し、同様にII型コラーゲンの免疫染色とサフラニンO染色を行った。
結果
軟骨欠損モデルマウスの術後12週における膝関節の軟骨欠損作成部位の組織（即ち、軟骨欠損の作成後、自然修復に任せた場合の組織）は、サフラニンO染色およびII型コラーゲンの免疫染色のいずれにおいても殆ど陽性反応を示さなかったことから、硝子軟骨ではないことが確認できた（図７）。
一方、正常マウスの膝関節の軟骨組織（硝子軟骨であることが知られている）は、サフラニンO染色およびII型コラーゲンの免疫染色のいずれにおいても、上記軟骨欠損モデルマウスの術後12週における軟骨欠損作成部位と比較して明らかに強い陽性反応を示した（図８）。また、サフラニンO染色の陽性領域とII型コラーゲン免疫染色の陽性領域が良く対応していることも確認できた。
軟骨欠損モデルマウスの術後12週における膝関節の軟骨欠損作成部位の組織（即ち、軟骨欠損の作成後、自然修復に任せた場合の組織）は、サフラニンO染色およびII型コラーゲンの免疫染色のいずれにおいても殆ど陽性反応を示さなかったことから、硝子軟骨ではないことが確認できた（図７）。
一方、正常マウスの膝関節の軟骨組織（硝子軟骨であることが知られている）は、サフラニンO染色およびII型コラーゲンの免疫染色のいずれにおいても、上記軟骨欠損モデルマウスの術後12週における軟骨欠損作成部位と比較して明らかに強い陽性反応を示した（図８）。また、サフラニンO染色の陽性領域とII型コラーゲン免疫染色の陽性領域が良く対応していることも確認できた。
考察
実施例１に記載のHMGB1ペプチド(1-44)投与群の術後12週における膝関節の軟骨組織（図３および図５）は、サフラニンO染色において、正常マウスの膝関節の軟骨組織（図８左）と同様の強い陽性反応を示している。したがって、HMGB1ペプチド(1-44)の投与によって再生された軟骨組織は、硝子軟骨からなる正常な関節軟骨組織と同等の組織であると考えられる。
実施例１に記載のHMGB1ペプチド(1-44)投与群の術後12週における膝関節の軟骨組織（図３および図５）は、サフラニンO染色において、正常マウスの膝関節の軟骨組織（図８左）と同様の強い陽性反応を示している。したがって、HMGB1ペプチド(1-44)の投与によって再生された軟骨組織は、硝子軟骨からなる正常な関節軟骨組織と同等の組織であると考えられる。
本願のペプチドを含む医薬組成物は、自然には再生し得ない関節軟骨を完全な形で再生することができるため、既存の治療薬では十分な効果が得られない軟骨疾患の患者に対して多大な恩恵をもたらすものと期待される。
Claims (2)
- 以下の（ａ）から（ｃ）のいずれかに記載の物質を含有する、軟骨疾患の予防および／または治療のための医薬組成物であって、該軟骨疾患が外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である、医薬組成物：
（ａ）配列番号：１に記載のアミノ酸配列からなるペプチド；
（ｂ）配列番号：１に記載のアミノ酸配列において１から４個のアミノ酸が置換、欠失、挿入若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、且つ、軟骨組織を再生する効果を有するペプチド； および
（ｃ）配列番号：１に記載のアミノ酸配列と９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、且つ、軟骨組織を再生する効果を有するペプチド。 - 以下の（ａ）から（ｃ）のいずれかに記載の物質を含有する、軟骨疾患の患者において硝子軟骨を再生するための医薬組成物であって、該軟骨疾患が外傷性軟骨欠損症、変形性関節症または離断性骨軟骨炎である、医薬組成物：
（ａ）配列番号：１に記載のアミノ酸配列からなるペプチド；
（ｂ）配列番号：１に記載のアミノ酸配列において１から４個のアミノ酸が置換、欠失、挿入若しくは付加されたアミノ酸配列からなり、且つ、硝子軟骨を再生する効果を有するペプチド； および
（ｃ）配列番号：１に記載のアミノ酸配列と９０％以上の配列同一性を有するアミノ酸配列からなり、且つ、硝子軟骨を再生する効果を有するペプチド。
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP2018200866 | 2018-10-25 | ||
| JP2018200866 | 2018-10-25 | ||
| PCT/JP2019/042015 WO2020085506A1 (ja) | 2018-10-25 | 2019-10-25 | 軟骨疾患の治療薬 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPWO2020085506A1 JPWO2020085506A1 (ja) | 2021-09-16 |
| JP7448126B2 true JP7448126B2 (ja) | 2024-03-12 |
Family
ID=70331194
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP2020552636A Active JP7448126B2 (ja) | 2018-10-25 | 2019-10-25 | 軟骨疾患の治療薬 |
Country Status (12)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US20210386823A1 (ja) |
| EP (1) | EP3865179A4 (ja) |
| JP (1) | JP7448126B2 (ja) |
| KR (1) | KR20210082478A (ja) |
| CN (1) | CN113423466A (ja) |
| AU (1) | AU2019367943A1 (ja) |
| BR (1) | BR112021007732A2 (ja) |
| CA (1) | CA3117107A1 (ja) |
| IL (1) | IL282377A (ja) |
| MX (1) | MX2021004758A (ja) |
| SG (1) | SG11202104015YA (ja) |
| WO (1) | WO2020085506A1 (ja) |
Families Citing this family (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| WO2024005133A1 (ja) * | 2022-06-30 | 2024-01-04 | 国立大学法人大阪大学 | 半月板の治療薬 |
Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2010503630A (ja) | 2006-09-15 | 2010-02-04 | クレアビリス・セラピューティクス・エスピーエー | ＨＭＧＢ１のＢｏｘ−ＡおよびＨＭＧＢ１のＢｏｘ−Ａ変異体のポリマー複合体 |
| WO2012147470A1 (ja) | 2011-04-26 | 2012-11-01 | 株式会社ジェノミックス | 組織再生を誘導するためのペプチドとその利用 |
| WO2014065348A1 (ja) | 2012-10-25 | 2014-05-01 | 株式会社ジェノミックス | Hmgb1断片を利用した脊髄の損傷に対する新規治療法 |
| WO2018199107A1 (ja) | 2017-04-25 | 2018-11-01 | 塩野義製薬株式会社 | 組織再生を誘導するためのペプチドとその利用 |
Family Cites Families (10)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US20040156851A1 (en) * | 2002-11-20 | 2004-08-12 | Critical Therapeutics, Inc. | HMGB1 combination therapies |
| WO2006024547A2 (en) * | 2004-09-03 | 2006-03-09 | Creabilis Therapeutics S.P.A. | Protease resistant human and non-human hmgb1 box-a mutants and their therapeutic/diagnostic use |
| BRPI0718491A2 (pt) * | 2006-09-15 | 2013-12-03 | Creabilis Therapeutics Spa | Conjugados poliméricos do box-a da hmgb1 e variantes do box-a da hmbg1 |
| CA2722909A1 (en) * | 2008-04-30 | 2009-11-05 | Genomix Co., Ltd. | Method for collecting functional cells in vivo with high efficiency |
| AU2013335684B2 (en) | 2012-10-25 | 2017-06-29 | Osaka University | Novel method for treating cardiac infarction using HMGB1 fragment |
| CA3051825A1 (en) | 2017-01-27 | 2018-08-02 | StemRIM Inc. | Therapeutic agent for cardiomyopathy, old myocardial infarction and chronic heart failure |
| MX2019012014A (es) | 2017-04-07 | 2019-11-11 | Stemrim Inc | Medicina terapeutica para enfermedades fibrosas. |
| US11196087B2 (en) | 2017-05-19 | 2021-12-07 | Panasonic Intellectual Property Management Co., Ltd. | Nonaqueous electrolyte containing perfluoropolyether and nitrile compound, and secondary battery including the same |
| EP3719117A4 (en) * | 2017-12-01 | 2021-11-03 | Stemrim Inc. | EECTODERMAL MESENCHYMAL STEM CELLS AND METHOD FOR PRODUCING THEM |
| JP7386455B2 (ja) * | 2018-02-08 | 2023-11-27 | 株式会社ステムリム | 乾癬の治療薬 |
-
2019
- 2019-10-25 WO PCT/JP2019/042015 patent/WO2020085506A1/ja unknown
- 2019-10-25 JP JP2020552636A patent/JP7448126B2/ja active Active
- 2019-10-25 US US17/287,636 patent/US20210386823A1/en active Pending
- 2019-10-25 SG SG11202104015YA patent/SG11202104015YA/en unknown
- 2019-10-25 MX MX2021004758A patent/MX2021004758A/es unknown
- 2019-10-25 EP EP19875071.3A patent/EP3865179A4/en active Pending
- 2019-10-25 CN CN201980085703.XA patent/CN113423466A/zh active Pending
- 2019-10-25 KR KR1020217015301A patent/KR20210082478A/ko unknown
- 2019-10-25 CA CA3117107A patent/CA3117107A1/en active Pending
- 2019-10-25 AU AU2019367943A patent/AU2019367943A1/en active Pending
- 2019-10-25 BR BR112021007732-4A patent/BR112021007732A2/pt unknown
-
2021
- 2021-04-18 IL IL282377A patent/IL282377A/en unknown
Patent Citations (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JP2010503630A (ja) | 2006-09-15 | 2010-02-04 | クレアビリス・セラピューティクス・エスピーエー | ＨＭＧＢ１のＢｏｘ−ＡおよびＨＭＧＢ１のＢｏｘ−Ａ変異体のポリマー複合体 |
| WO2012147470A1 (ja) | 2011-04-26 | 2012-11-01 | 株式会社ジェノミックス | 組織再生を誘導するためのペプチドとその利用 |
| WO2014065348A1 (ja) | 2012-10-25 | 2014-05-01 | 株式会社ジェノミックス | Hmgb1断片を利用した脊髄の損傷に対する新規治療法 |
| WO2018199107A1 (ja) | 2017-04-25 | 2018-11-01 | 塩野義製薬株式会社 | 組織再生を誘導するためのペプチドとその利用 |
Non-Patent Citations (5)
| Title |
|---|
| FREITAG J, et al.，The effect of autologous adipose derived mesenchymal stem cell therapy in the treatment of a large o，BMC Musculoskelet Disord.，2017年，Vol.18 No.1，p.298.(p.1-11)，doi: 10.1186/s12891-017-1658-2 |
| LEE G, et al.，Fully reduced HMGB1 accelerates the regeneration of multiple tissues by transitioning stem cells to，Proc Natl Acad Sci U S A.，2018年04月，Vol.115 No.19，p.E4463-E4472，doi: 10.1073/pnas.1802893115 |
| TANIGUCHI N, et al.，Stage-specific secretion of HMGB1 in cartilage regulates endochondral ossification.，Mol Cell Biol.，2007年，Vol.27 No.16，p.5650-63，doi: 10.1128/MCB.00130-07 |
| 玉井 克人、金田 安史、，第２章 各種病態モデルと創薬研究, ７．皮膚・炎症疾患, ２）生体内骨髄間葉系幹／前駆細胞動員因子を利，遺伝子医学MOOK，2012年，Vol.22，p.207-212，ISSN : 1349-2527 |
| 菅原 桂，●人工臓器 最近の進歩, 培養軟骨による軟骨欠損治療の最近の進歩，人工臓器，2013年，Vol.42 No.3，p.198-200，ISSN : 0300-0818 |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN113423466A (zh) | 2021-09-21 |
| JPWO2020085506A1 (ja) | 2021-09-16 |
| SG11202104015YA (en) | 2021-05-28 |
| EP3865179A4 (en) | 2022-07-27 |
| CA3117107A1 (en) | 2020-04-30 |
| US20210386823A1 (en) | 2021-12-16 |
| KR20210082478A (ko) | 2021-07-05 |
| AU2019367943A1 (en) | 2021-05-27 |
| WO2020085506A1 (ja) | 2020-04-30 |
| MX2021004758A (es) | 2021-08-24 |
| BR112021007732A2 (pt) | 2021-08-03 |
| EP3865179A1 (en) | 2021-08-18 |
| IL282377A (en) | 2021-06-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP5815206B2 (ja) | Ｆｇｆ−１８を用いた軟骨障害の治療 | |
| WO1993021946A1 (en) | Methods for treating interleukin-1 and tumor necrosis factor mediated diseases | |
| US11298403B2 (en) | Therapeutic agent for inflammatory bowel disease | |
| JP7386455B2 (ja) | 乾癬の治療薬 | |
| ES2392883T3 (es) | Tratamiento de trastornos de cartílagos con FGF-18 | |
| JP6431082B2 (ja) | Ｆｇｆ−１８化合物の投与計画 | |
| JP7448126B2 (ja) | 軟骨疾患の治療薬 | |
| KR101736280B1 (ko) | 관절염 예방 또는 치료용 약학적 조성물 | |
| RU2813889C2 (ru) | Терапевтическое средство для заболевания хряща | |
| WO2024005133A1 (ja) | 半月板の治療薬 | |
| EP4358992A1 (en) | Pharmaceutical compositions comprising glp-1r agonists | |
| JPWO2008078588A1 (ja) | 関節軟骨の変性を治療又は予防するための医薬及び方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20220930 |
|
| A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20230808 |
|
| A601 | Written request for extension of time |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601 Effective date: 20231006 |
|
| A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20231128 |
|
| TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
| A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20240206 |
|
| A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20240219 |
|
| R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7448126 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |