JP7360385B2 - ブラルテミシン類似体 - Google Patents

ブラルテミシン類似体 Download PDF

Info

Publication number
JP7360385B2
JP7360385B2 JP2020524894A JP2020524894A JP7360385B2 JP 7360385 B2 JP7360385 B2 JP 7360385B2 JP 2020524894 A JP2020524894 A JP 2020524894A JP 2020524894 A JP2020524894 A JP 2020524894A JP 7360385 B2 JP7360385 B2 JP 7360385B2
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
mmol
formula
alkyl
pharmaceutically acceptable
acceptable salt
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
JP2020524894A
Other languages
English (en)
Other versions
JP2021501791A5 (ja
JP2021501791A (ja
Inventor
フォスター，エイミー・ジェーン
ストッカー，ブリジット・ルイス
ティマー，マテウス・サイモン・マリア
晶 山▲崎▼
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Victoria Link Ltd
Original Assignee
Victoria Link Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Victoria Link Ltd filed Critical Victoria Link Ltd
Publication of JP2021501791A publication Critical patent/JP2021501791A/ja
Publication of JP2021501791A5 publication Critical patent/JP2021501791A5/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP7360385B2 publication Critical patent/JP7360385B2/ja
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/39—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the immunostimulating additives, e.g. chemical adjuvants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/02—Immunomodulators
    • A61P37/04—Immunostimulants
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H13/00—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids
    • C07H13/02—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids
    • C07H13/08—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids having the esterifying carboxyl radicals directly attached to carbocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7024—Esters of saccharides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H13/00—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids
    • C07H13/02—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids
    • C07H13/04—Compounds containing saccharide radicals esterified by carbonic acid or derivatives thereof, or by organic acids, e.g. phosphonic acids by carboxylic acids having the esterifying carboxyl radicals attached to acyclic carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
    • C07H15/18—Acyclic radicals, substituted by carbocyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
    • C07H5/00—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium
    • C07H5/04—Compounds containing saccharide radicals in which the hetero bonds to oxygen have been replaced by the same number of hetero bonds to halogen, nitrogen, sulfur, selenium, or tellurium to nitrogen
    • C07H5/06—Aminosugars
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Steroid Compounds (AREA)

Description

本発明は、全体としてブラルテミシン類似体、これらを含む医薬組成物、およびそれらの使用に関する。
ワクチンに対する適応免疫応答を増強するため従来からアジュバントが使用されており、最新のワクチンは主に体液性免疫によって防御する。しかし、体液性免疫は、一部の病原体からの保護を与えるのには不十分であり、獲得細胞性（Ｔｈ１）免疫を増強するアジュバントの必要性が余儀なくされる。Ｔｈ１細胞は、マクロファージを活性化するサイトカインを分泌し、オプソニン化される抗体のＢ細胞による産生を誘導する。Ｔｈ１応答は、細菌、原生動物、真菌およびウイルスなどの侵襲性病原体から保護する。Ｔｈ１応答はまた、病原体感染細胞の死を誘導するＴ細胞のサブグループである細胞傷害性Ｔリンパ球（ＣＴＬ）を活性化する。ナチュラルキラー（ＮＫ）細胞も、Ｔｈ１応答によって活性化され、腫瘍およびウイルス感染細胞におけるアポトーシスにおいて主要な役割を果たす。
有効なＴｈ１刺激性アジュバントは、プロフェッショナル抗原提示細胞（ＡＰＣ）上のパターン認識受容体（ＰＲＲ）を活性化することによって先天性免疫系に働きかけることが多い。以前に、ワクチンアジュバントの標的としてＴｏｌｌ様受容体（ＴＬＲ）に対して大きな関心があった。しかし、さらに最近では、マクロファージ誘導性Ｃ型レクチン（Ｍｉｎｃｌｅ）がマクロファージおよび樹状細胞（ＤＣ）の表面上のＰＲＲであると同定されたことから、ワクチン開発の有望な新しい標的とされている。
病原体関連分子パターン（ＰＡＭＰ）は、先天性免疫系の細胞によって認識される病原体群に関連している分子である。多数の分子は、グリカンおよび複合糖質を含めてＰＡＭＰとして働くことができる。ＰＡＭＰはＰＲＲに結合し、結果として生じる免疫応答の特異性が、活性化されるＰＲＲのタイプおよびそれぞれの特異的ＰＡＭＰの構造によって方向付けられる。
Ｍｉｎｃｌｅは、結核菌（Mycobacterium tuberculosis）細胞壁の糖脂質トレハロースジミコレート（ＴＤＭ）を含めていくつかのＰＡＭＰによって活性化され、Ｍｉｎｃｌｅの活性化により、ＦｃＲγ－Ｓｙｋ－Ｃａｒｄ９－Ｂｃｌ１０－Ｍａｌｔ１シグナル伝達軸およびＴｈ１分極免疫応答が誘導される。合成により誘導されたいくつかのリガンド、例えばトレハロースジベヘネート（ＴＤＢ）もＭｉｎｃｌｅを結合し、活性化する。
Figure 0007360385000001
しかし、ＴＤＭは毒性が高く、治療剤として使用されることはあり得ない。また、ＴＤＭは化合物の複合混合物も含み、合成するのは難しい。
したがって、代替のＭｉｎｃｌｅアゴニスト、好ましくは高活性および低毒性で、調製するのが簡単な化合物が求められている。本発明の目的は、代替のＭｉｎｃｌｅアゴニストおよび／またはそのような代替のＭｉｎｃｌｅアゴニストを使用して対象において免疫応答を増強する方法を提供するのに少なくとも何らかの役に立ち、かつ／あるいは少なくとも１種のＴｈ１刺激性ワクチンアジュバントを提供し、かつ／あるいは公共に有用な選択肢を少なくとも提供することである。
特許明細書、他の外部文書、または他の情報源について言及された本明細書において、これは、全体として本発明の特徴を論じるための状況を提供する目的のものである。特段の記載がない限り、そのような外部文献への言及は、いかなる管轄においてもそのような文献またはそのような情報源が先行技術であること、または当技術分野における共通一般知識の一部分を成すということを承認するものとして解釈されるべきでない。
本発明者らは、驚くべきことに、長鎖親油性尾部を含むブラルテミシン類似体が強力なＭｉｎｃｌｅアゴニストおよびＴｈ１刺激性ワクチンアジュバントであることを見出した。
一態様において、本発明は、式Ｉの化合物を提供する
Figure 0007360385000002
［式中、ＸａおよびＸｂは独立して、ＯまたはＮＨから選択され、
ＹａおよびＹｂはそれぞれ独立して、－Ｉ、－Ｂｒ、－Ｃｌ、－Ｆ、－ＯＨ、－Ｒ１および－ＯＲ１を含む群から選択され、Ｒ１は、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルから選択され、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、
ｎおよびｍは独立して、０～４であり、
ＺａおよびＺｂはそれぞれ独立して、Ｒ２、－ＯＲ２ 、－ＮＨＲ２、－ＮＨＣ（Ｏ）－Ｒ２および－Ｓ－Ｒ２から選択され、Ｒ２は、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルから選択され、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、
ｒおよびｓは独立して、１～３であり、
ｐおよびｑは独立して、０～４であり、
ｎ＋ｒ＝１～５であり、ｍ＋ｓ＝１～５である、
ただし、ＸがＯであり、ｎおよびｍが両方とも０であり、ＺａおよびＺｂが－ＯＲ２であり（Ｒ２がＣ１６～Ｃ２３である）、ｒおよびｓが両方とも１または２であるとき、ｐおよびｑは両方が３であることはないことを条件とする。
別の態様において、本発明は、式Ｉａの化合物を提供する
Figure 0007360385000003
［式中、ＸａおよびＸｂは独立して、ＯまたはＮＨから選択され、
ＹａおよびＹｂはそれぞれ独立して、－Ｉ、－Ｂｒ、－Ｃｌ、－Ｆ、－ＯＨ、－Ｒ１および－ＯＲ１を含む群から選択され、Ｒ１は、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルから選択され、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、
ｎおよびｍは独立して、０～４であり、
ＺａおよびＺｂはそれぞれ独立して、Ｒ２、－ＯＲ２ 、－ＮＨＲ２、－ＮＨＣ（Ｏ）－Ｒ２および－Ｓ－Ｒ２から選択され、Ｒ２は、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルから選択され、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルは、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、
ｒおよびｓは独立して、１～３であり、
ｐおよびｑは独立して、０～２であり、
ｎ＋ｒ＝１～５であり、ｍ＋ｓ＝１～５である］。
別の態様において、本発明は、式Ｉｂの化合物を提供する
Figure 0007360385000004
［式中、Ｘａ、Ｘｂ、Ｙａ、Ｙｂ、Ｚａ、Ｚｂ、Ｒ１、Ｒ２、ｎ、ｒ、ｐ、ｑ、ｍおよびｓは、式Ｉについて定義された通りである］。
別の態様において、本発明は、式Ｉｂの化合物を提供する［式中、Ｘａ、Ｘｂ、Ｙａ、Ｙｂ、Ｚａ、Ｚｂ、Ｒ１、Ｒ２、ｎ、ｒ、ｐ、ｑ、ｍおよびｓは、式Ｉａについて定義された通りである］。
本発明の上記の態様では、一実施形態において、ＸａおよびＸｂは両方ともＯである。
別の実施形態において、ＸａおよびＸｂは両方ともＮＨである。
別の実施形態において、ＸａおよびＸｂの一方はＯであり、他方はＮＨである。
別の実施形態において、ｎおよびｍは両方とも０である。
別の実施形態において、ｎおよびｍは両方とも１であり、ＹａおよびＹｂは独立して、－ＯＨおよびＭｅから選択される。
別の実施形態において、ｎおよびｍは両方とも２であり、Ｙａは、一方のオルト位において－ＯＨであり、他方のオルト位においてＭｅである。
一実施形態において、ｓおよびｒは両方とも１である。
一実施形態において、ＺａおよびＺｂは両方ともＯＲ２であり、Ｒ２は（Ｃ５～Ｃ２２）アルキル、好ましくは（Ｃ７～Ｃ１９）アルキルである。
一実施形態において、ＺａおよびＺｂは両方ともＲ２であり、Ｒ２は（Ｃ５～Ｃ２２）アルキル、好ましくは（Ｃ７～Ｃ１９）アルキルである。
別の態様において、本発明は、式ＩＩの化合物を提供する
Figure 0007360385000005
［式中、Ｘは、ＯまたはＮＨから選択され、
Ｙはそれぞれ独立して、－Ｉ、－Ｂｒ、－Ｃｌ、－Ｆ、－ＯＨ、－Ｒ１および－ＯＲ１を含む群から選択され、Ｒ１は、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルから選択され、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、
ｎは、０～４であり、
Ｚはそれぞれ独立して、Ｒ２、－ＯＲ２、－ＮＨＲ２、－ＮＨＣ（Ｏ）－Ｒ２および－Ｓ－Ｒ２から選択され、Ｒ２は、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルから選択され、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、
ｒは、１～３であり、
ｐは、０～４であり、
ｎ＋ｒ＝１～５である、
ただし、ＸがＯであり、ｎが０であり、Ｚが－ＯＲ２であり（Ｒ２がＣ１６～Ｃ２２である）、ｒが１または２であるとき、ｐは３ではないことを条件とする］。
一実施形態において、ＸはＯである。
別の実施形態において、ＸはＮＨである。
別の実施形態において、ｎおよびｍは両方とも０である。
別の実施形態において、ｎおよびｍは両方とも１であり、Ｙは、－ＯＨおよびＭｅから選択される。
別の実施形態において、ｎおよびｍは両方とも２であり、Ｙは、一方のオルト位において－ＯＨであり、他方のオルト位においてＭｅである。
一実施形態において、ｓおよびｒは両方とも１である。
一実施形態において、ＺａおよびＺｂは両方ともＯＲ２であり、Ｒ２は（Ｃ５～Ｃ２２）アルキル、好ましくは（Ｃ７～Ｃ１９）アルキルである。
一実施形態において、ＺａおよびＺｂは両方ともＲ２であり、Ｒ２は（Ｃ５～Ｃ２２）アルキル、好ましくは（Ｃ７～Ｃ１９）アルキルである。
別の態様において、本発明は、式ＩＩＩの化合物を提供する
Figure 0007360385000006
［式中、Ｘは、ＯまたはＮＨから選択され、
Ｙはそれぞれ独立して、－Ｉ、－Ｂｒ、－Ｃｌ、－Ｆ、－ＯＨ、－Ｒ１および－ＯＲ１を含む群から選択され、Ｒ１は、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルから選択され、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、
ｎは、０～４であり、
Ｚはそれぞれ独立して、Ｒ２、－ＯＲ２、－ＮＨＲ２、－ＮＨＣ（Ｏ）－Ｒ２および－Ｓ－Ｒ２から選択され、Ｒ２は、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルから選択され、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、
ｒは、１～３であり、
ｐは、０～４であり、
ｎ＋ｒ＝１～５である］。
一実施形態において、ＸはＯである。
一実施形態において、Ｙは独立して、－ＯＨおよびＭｅから選択される。
一実施形態において、ＺはＯＲ２であり、Ｒ２は（Ｃ５～Ｃ２２）アルキル、好ましくは（Ｃ７～Ｃ１９）アルキルである。
一実施形態において、ＺはＲ２であり、Ｒ２は（Ｃ５～Ｃ２２）アルキル、好ましくは（Ｃ７～Ｃ１９）アルキルである。
別の態様において、本発明は、式ＩＶの化合物を提供する
Figure 0007360385000007
［式中、ＸａおよびＸｂは独立して、ＯまたはＮＨから選択され、
ＹａおよびＹｂはそれぞれ独立して、－Ｉ、－Ｂｒ、－Ｃｌ、－Ｆ、－ＯＨ、－Ｒ１および－ＯＲ１を含む群から選択され、Ｒ１は、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルから選択され、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、
ｎおよびｍは独立して、０～４であり、
ＺａおよびＺｂはそれぞれ独立して、Ｒ２、－ＯＲ２ 、－ＮＨＲ２、－ＮＨＣ（Ｏ）－Ｒ２および－Ｓ－Ｒ２から選択され、Ｒ２は、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルから選択され、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、
ｒおよびｓは独立して、１～３であり、
ａｌｋａおよびａｌｋｂは独立して、（Ｃ１～Ｃ４）アルキレン、（Ｃ２～Ｃ４）アルケニレンおよび（Ｃ２～Ｃ４）アルキニレンから選択され、またはａｌｋａおよびａｌｋｂはそれぞれ、アリール環がＣ（Ｏ）炭素に直接接続するように存在しなくてもよく、
ｎ＋ｒ＝１～５であり、ｍ＋ｓ＝１～５である、
ただし、ＸがＯであり、ｎおよびｍが両方とも０であり、ＺａおよびＺｂが－ＯＲ２であり（Ｒ２がＣ１６～Ｃ２３である）、ｒおよびｓが両方とも１または２であるとき、ａｌｋａおよびａｌｋｂは、両方がＣ３アルキレンであることはないことを条件とする］。
別の態様において、本発明は、式ＩＶａの化合物を提供する
Figure 0007360385000008
［式中、ＸａおよびＸｂは独立して、ＯまたはＮＨから選択され、
ＹａおよびＹｂはそれぞれ独立して、－Ｉ、－Ｂｒ、－Ｃｌ、－Ｆ、－ＯＨ、－Ｒ１および－ＯＲ１を含む群から選択され、Ｒ１は、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルから選択され、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、
ｎおよびｍは独立して、０～４であり、
ＺａおよびＺｂはそれぞれ独立して、Ｒ２、－ＯＲ２、－ＮＨＲ２、－ＮＨＣ（Ｏ）－Ｒ２および－Ｓ－Ｒ２から選択され、Ｒ２は、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルから選択され、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、
ｒおよびｓは独立して、１～３であり、
ａｌｋａおよびａｌｋｂは独立して、（Ｃ１～Ｃ４）アルキレン、（Ｃ２～Ｃ４）アルケニレンおよび（Ｃ２～Ｃ４）アルキニレンから選択され、またはａｌｋａおよびａｌｋｂはそれぞれ、アリール環がＣ（Ｏ）炭素に直接接続するように存在しなくてもよく、
ｎ＋ｒ＝１～５であり、ｍ＋ｓ＝１～５である］。
別の態様において、本発明は、式ＩＶｂの化合物を提供する
Figure 0007360385000009
［式中、Ｘａ、Ｘｂ、Ｙａ、Ｙｂ、Ｚａ、Ｚｂ、Ｒ１、Ｒ２、ｎ、ｒ、ａｌｋａおよびａｌｋｂ、ｍおよびｓは、式ＩＶについて定義された通りである］。
別の態様において、本発明は、式Ｉｂの化合物を提供する［式中、Ｘａ、Ｘｂ、Ｙａ、Ｙｂ、Ｚａ、Ｚｂ、Ｒ１、Ｒ２、ｎ、ｒ、ａｌｋａおよびａｌｋｂ、ｍおよびｓは、式ＩＶａについて定義された通りである］。
本発明の上記の態様では、一実施形態において、ＸａおよびＸｂは両方ともＯである。
別の実施形態において、ＸａおよびＸｂは両方ともＮＨである。
別の実施形態において、ＸａおよびＸｂの一方はＯであり、他方はＮＨである。
別の実施形態において、ｎおよびｍは両方とも０である。
別の実施形態において、ｎおよびｍは両方とも１であり、ＹａおよびＹｂは独立して、－ＯＨおよびＭｅから選択される。
別の実施形態において、ｎおよびｍは両方とも２であり、Ｙａは、一方のオルト位において－ＯＨであり、他方のオルト位においてＭｅである。
一実施形態において、ｓおよびｒは両方とも１である。
一実施形態において、ａｌｋａおよびａｌｋｂは独立して、（Ｃ１～Ｃ４）アルキレンおよび（Ｃ２～Ｃ４）アルケニレン、好ましくは（Ｃ１～Ｃ４）アルキレンから選択される。
一実施形態において、ＺａおよびＺｂは両方ともＯＲ２であり、Ｒ２は（Ｃ５～Ｃ２２）アルキル、好ましくは（Ｃ７～Ｃ１９）アルキルである。
一実施形態において、ＺａおよびＺｂは両方ともＲ２であり、Ｒ２は（Ｃ５～Ｃ２２）アルキル、好ましくは（Ｃ７～Ｃ１９）アルキルである。
別の態様において、本発明は、式Ｖの化合物を提供する
Figure 0007360385000010
［式中、Ｘは、ＯまたはＮＨから選択され、
Ｙはそれぞれ独立して、－Ｉ、－Ｂｒ、－Ｃｌ、－Ｆ、－ＯＨ、－Ｒ１および－ＯＲ１を含む群から選択され、Ｒ１は、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルから選択され、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、
ｎは、０～４であり、
Ｚはそれぞれ独立して、Ｒ２、－ＯＲ２、－ＮＨＲ２、－ＮＨＣ（Ｏ）－Ｒ２および－Ｓ－Ｒ２から選択され、Ｒ２は、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルから選択され、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、
ｒは、１～３であり、
ａｌｋは、（Ｃ１～Ｃ４）アルキレン、（Ｃ２～Ｃ４）アルケニレンおよび（Ｃ２～Ｃ４）アルキニレンから選択され、またはａｌｋは、アリール環がＣ（Ｏ）炭素に直接接続するように存在しなくてもよく、
ｎ＋ｒ＝１～５である、
ただし、ＸがＯであり、ｎが０であり、Ｚが－ＯＲ２であり（Ｒ２がＣ１６～Ｃ２２である）、ｒが１または２であるとき、ｐは３ではないことを条件とする］。
一実施形態において、ＸはＯである。
別の実施形態において、ＸはＮＨである。
別の実施形態において、ｎおよびｍは両方とも０である。
別の実施形態において、ｎおよびｍは両方とも１であり、Ｙは、－ＯＨおよびＭｅから選択される。
別の実施形態において、ｎおよびｍは両方とも２であり、Ｙは、一方のオルト位において－ＯＨであり、他方のオルト位においてＭｅである。
一実施形態において、ｓおよびｒは両方とも１である。
一実施形態において、ａｌｋは、（Ｃ１～Ｃ４）アルキレンまたは（Ｃ２～Ｃ４）アルケニレン、好ましくは（Ｃ１～Ｃ４）アルキレンである。
一実施形態において、ＺａおよびＺｂは両方ともＯＲ２であり、Ｒ２は（Ｃ５～Ｃ２２）アルキル、好ましくは（Ｃ７～Ｃ１９）アルキルである。
一実施形態において、ＺａおよびＺｂは両方ともＲ２であり、Ｒ２は（Ｃ５～Ｃ２２）アルキル、好ましくは（Ｃ７～Ｃ１９）アルキルである。
別の態様において、本発明は、式ＶＩの化合物を提供する
Figure 0007360385000011
［式中、Ｘは、ＯまたはＮＨから選択され、
Ｙはそれぞれ独立して、－Ｉ、－Ｂｒ、－Ｃｌ、－Ｆ、－ＯＨ、－Ｒ１および－ＯＲ１を含む群から選択され、Ｒ１は、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルから選択され、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、
ｎは、０～４であり、
Ｚはそれぞれ独立して、Ｒ２、－ＯＲ２、－ＮＨＲ２、－ＮＨＣ（Ｏ）－Ｒ２および－Ｓ－Ｒ２から選択され、Ｒ２は、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルから選択され、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、
ｒは、１～３であり、
ａｌｋは、（Ｃ１～Ｃ４）アルキレン、（Ｃ２～Ｃ４）アルケニレンおよび（Ｃ２～Ｃ４）アルキニレンから選択され、またはａｌｋは、アリール環がＣ（Ｏ）炭素に直接接続するように存在しなくてもよく、
ｎ＋ｒ＝１～５である］。
一実施形態において、ＸはＯである。
一実施形態において、Ｙは独立して、－ＯＨおよびＭｅから選択される。
一実施形態において、ａｌｋは、（Ｃ１～Ｃ４）アルキレンおよび（Ｃ２～Ｃ４）アルケニレン、好ましくは（Ｃ１～Ｃ４）アルキレンである。
一実施形態において、ＺはＯＲ２であり、Ｒ２は（Ｃ５～Ｃ２２）アルキル、好ましくは（Ｃ７～Ｃ１９）アルキルである。
一実施形態において、ＺはＲ２であり、Ｒ２は（Ｃ５～Ｃ２２）アルキル、好ましくは（Ｃ７～Ｃ１９）アルキルである。
別の態様において、本発明は、
Figure 0007360385000012
からなる群から選択される化合物を提供する。
別の態様において、本発明は、
Figure 0007360385000013
Figure 0007360385000014
Figure 0007360385000015
からなる群から選択される化合物を提供する。
本明細書に開示される数値範囲への言及（例えば、１～１０）は、その範囲内のすべての有理数（例えば、１、１．１、２、３、３．９、４、５、６、６．５、７、８、９および１０）さらにはその範囲内の有理数の任意の範囲（例えば、２～８、１．５～５．５および３．１～４．７）への言及も含み、したがって、本明細書に明示的に開示されるすべての範囲のすべての部分範囲が、これによって明示的に開示されることが意図されている。これらは、具体的に意図されるものの例にすぎず、列挙された最低値と最高値の間の数値の考えうるすべての組合せが、本出願において同様に明示的に記載されていると見なされるべきである。
単に例示として記載されている以下の説明から、また添付図面を参照して、本発明の他の態様が明らかになりうる。
次に、添付図面における図を参照しながら、本発明を説明する。
図１ａはｍＭｉｎｃｌｅおよびｈＭｉｎｃｌｅを介して結合およびシグナル伝達する本発明の化合物を示す図である。図１ｂはｍＭｉｎｃｌｅおよびｈＭｉｎｃｌｅを介して結合およびシグナル伝達する本発明の化合物を示す図である。図１ｃはｍＭｉｎｃｌｅおよびｈＭｉｎｃｌｅを介して結合およびシグナル伝達する本発明の化合物を示す図である。（図１ａ）ブラルテミシン類似体（０．１ｎｍｏｌ／ウェル）でコートしたプレートを、Ｉｇ－ｍＭｉｎｃｌｅ、Ｉｇ－ｈＭｉｎｃｌｅ、またはＩｇのみとインキュベートし、リガンド結合タンパク質をＥＬＩＳＡにより検出した。データは、３度繰り返して行われた独立した３つの実験を表している（平均±ＳＤ）。リガンドコートプレート（０．０１、０．１、または１ｎｍｏｌ／ウェル）を使用して、（図１ｂ）ｍＭｉｎｃｌｅ＋ＦｃＲγまたは（図１ｃ）ｈＭｉｎｃｌｅ＋ＦｃＲγを発現するＮＦＡＴ－ＧＦＰ ２Ｂ４レポーター細胞を１８時間刺激した。レポーター細胞を回収し、ＮＦＡＴ－ＧＦＰ発現について試験した。データは、２度繰り返して行われた独立した３つの実験の平均（平均±ＳＥＭ）を表す。 本発明のブラルテミシン類似体がＭｉｎｃｌｅ依存性の炎症性サイトカイン産生を誘導すること、ブラルテミシン誘導体で処理され回収された野生型またはＭｉｎｃｌｅ－／－型ＧＭ－ＣＳＦ ＢＭＤＭによるＴＮＦ、ＭＩＰ－２、ＩＬ－６およびＩＬ－１β産生を示す図である。回収されたＧＭ－ＣＳＦ ＢＭＤＭを、ＴＤＢ、ＴＤＭ、もしくはブラルテミシン誘導体でコートしたプレート（０．１または１ｎｍｏｌ／ウェル）または可溶化ＬＰＳ（１００ｎｇ／ｍＬ）を使用して刺激した。２４時間後に収集された上澄みから、ＥＬＩＳＡによりサイトカイン産生を測定した。データは、３度繰り返して行われた独立した３つの実験を表している（±ＳＤ）。 化合物９ａがインビトロでアジュバント活性を表すことを示す図である。ＯＴ－ＩＩ ＣＤ４＋Ｔ細胞を、ＴＤＭ（０．１ｎｍｏｌ／ウェル）、ＴＤＢ（０．１ｎｍｏｌ／ウェル）、９ａ（０．１ｎｍｏｌ／ウェル）およびＯＶＡ３２３－３３９ペプチド（０、０．１、および１μＭ）の存在下でＧＭ－ＣＳＦ ＢＭＤＭと共培養した。４８時間後に、上澄みを収集し、ＥＬＩＳＡを使用してＩＦＮ－γおよびＩＬ－１７のレベルを測定した。データは、３度繰り返して行われた独立した２つの実験を表している（平均±ＳＤ）。＊Ｐ≦０．０５；＊＊Ｐ≦０．０１；＊＊＊Ｐ≦０．００５；＊＊＊＊Ｐ≦０．００１。 図４ａは化合物９ａがインビボで強力なアジュバント活性を表す図である。図４ｂは化合物９ａがインビボで強力なアジュバント活性を表す図である。図４ｃは化合物９ａがインビボで強力なアジュバント活性を表す図である。Ｃ５７ＢＬ／６マウス（１群当たりｎ＝５匹）を、ＯＶＡのみ（２００μｇ）、ＯＶＡ＋ＴＤＢ（ＯＶＡ＝２００μｇ、ＴＤＢ＝０．３μｍｏｌ）、ＯＶＡ＋９ａ（ＯＶＡ＝２００μｇ、９ａ＝０．３μｍｏｌ）を含む水中油型乳濁液、または乳濁液のみで皮下免役した。７日後、マウスにＯＶＡ（１００μｇ／足蹠）を負荷した。さらに７日後、マウスを屠殺し、血液試料を採取し、それらの脾臓を回収した。ＯＶＡで再刺激した後、全脾細胞数（図４ａ）およびサイトカイン産生（図４ｂ）を測定した。血清をＯＶＡ特異的抗体産生について分析した（図４ｃ）。＊Ｐ≦０．０５；＊＊Ｐ≦０．０１；＊＊＊Ｐ≦０．００５；＊＊＊＊Ｐ≦０．００１。 図５ａはｍＭｉｎｃｌｅおよびｈＭｉｎｃｌｅを介して結合およびシグナル伝達する化合物４３ａ～４３ｈおよび９ｆを示す図である。図５ｂはｍＭｉｎｃｌｅおよびｈＭｉｎｃｌｅを介して結合およびシグナル伝達する化合物４３ａ～４３ｈおよび９ｆを示す図である。ｈＭｉｎｃｌｅ＋ＦｃＲγ（図５ａ）またはｍＭｉｎｃｌｅ＋ＦｃＲγ（図５ｂ）を発現するＮＦＡＴ－ＧＦＰ ２Ｂ４レポーター細胞を、ＴＤＢ、９ｆ、および類似体４３ａ～４３ｈ（０．１および１ｎｍｏｌ／ウェル）をコートしたプレート中で２０時間インキュベートした。次いで、２Ｂ４レポーター細胞を回収し、フローサイトメトリーを使用してＮＦＡＴ－ＧＦＰ発現について試験した。データは、２度繰り返して行われた独立した２つの実験を表している（平均±ＳＤ）。 図６ａは化合物４３ａ～４３ｈおよび９ｆがＩＬ－１β産生を誘導することを示す図である。図６ｂは化合物４３ａ～４３ｈおよび９ｆがＩＬ－１β産生を誘導することを示す図である。ＴＤＢ、誘導体９ｆ、ブラルテミシン誘導体４３ａ～４３ｈ（０．１または１ｎｍｏｌ／ウェル）、または可溶化ＬＰＳ（１００ｎｇ／ｍＬ）をコートしたプレートを使用して、回収されたＧＭ－ＣＳＦ ＢＭＤＭを刺激した。２４時間後に収集された上澄みから、ＥＬＩＳＡによりサイトカイン産生を測定した。データは、２度繰り返して行われた独立した３つの実験の平均（平均±ＳＥＭ）を表す。
定義
本発明をよりよく定義するために、本発明の実施において当業者の指針として、以下の定義を示す。
「アルキル」という用語は、３０個までの炭素原子を有する任意の飽和炭化水素基を意味し、任意のＣ１～Ｃ２６、Ｃ１～Ｃ２２、Ｃ１～Ｃ１８、Ｃ１～Ｃ１０、またはＣ１～Ｃ７アルキル基を包含し、環式（縮合二環式を含む）アルキル基（本明細書では「シクロアルキル」とも呼ばれる）、直鎖および分枝鎖アルキル基、ならびに環式アルキル基で置換されている直鎖または分枝鎖アルキル基を包含するように意図されている。アルキル基の例としては、メチル基、エチル基、ｎ－プロピル基、ｉｓｏ－プロピル基、シクロプロピル基、ｎ－ブチル基、ｉｓｏ－ブチル基、ｓｅｃ－ブチル基、ｔ－ブチル基、ｎ－ペンチル基、１，１－ジメチルプロピル基、１，２－ジメチルプロピル基、２，２－ジメチルプロピル基、１－エチルプロピル基、２－エチルプロピル基、ｎ－ヘキシル基、シクロヘキシル基、シクロオクチル基、および１－メチル－２－エチルプロピル基が挙げられる。
「アルキレン」という用語は、アルキル基に対応する２価基を意味する。アルキレン基の例としては、メチレン基、シクロへキシレン基、エチレン基が挙げられる。アルキレン基は、アルキレン鎖中に１つまたは複数の環式アルキレン基を含むことができ、例えば、「アルキレン」は、メチレン基に結合しているシクロへキシレン基を包含することができる。いずれのアルキレン基も、ヒドロキシル、ハロゲン、例えばフッ素、アルキル、例えばメチル、およびアリールからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で場合によって置換されていてもよい。いずれのアルキレンも、アルキレン鎖内に１つまたは複数のアリーレン部分を場合によって含んでもよく、例えば、アルキレン鎖内にフェニレン基が含まれていてもよい。
「アルケニル」という用語は、少なくとも１つの二重結合を有し、３０個までの炭素原子を有する任意の炭化水素基を意味し、任意のＣ２～Ｃ２６、Ｃ２～Ｃ２２、Ｃ２～Ｃ１８、Ｃ２～Ｃ１０、またはＣ２～Ｃ７アルケニル基を含み、直鎖アルケニル基と分枝鎖アルケニル基の両方を包含するように意図されている。アルケニル基の例としては、エテニル基、ｎ－プロペニル基、ｉｓｏ－プロペニル基、ｎ－ブテニル基、ｉｓｏ－ブテニル基、ｓｅｃ－ブテニル基、ｔ－ブテニル基、ｎ－ペンテニル基、１，１－ジメチルプロペニル基、１，２－ジメチルプロペニル基、２，２－ジメチルプロペニル基、１－エチルプロペニル基、２－エチルプロペニル基、ｎ－ヘキセニル基および１－メチル－２－エチルプロペニル基が挙げられる。
「アルケニレン」という用語は、アルケン基に対応する２価基を意味する。いずれのアルキレン基も、ヒドロキシル、ハロゲン、例えばフッ素、アルキル、例えばメチル、およびアリールからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で場合によって置換されていてもよい。いずれのアルキレンも、アルキレン鎖内に１つまたは複数のアリーレン部分を場合によって含んでもよく、例えば、フェニレン基がアルキレン鎖内に含まれていてもよい。
「アルキニル」という用語は、少なくとも１つの三重結合を有し、３０個までの炭素原子を有する任意の炭化水素基を意味し、任意のＣ２～Ｃ２６、Ｃ２～Ｃ２２、Ｃ２～Ｃ１８、Ｃ２～Ｃ１０、またはＣ２～Ｃ７アルケニル基を含み、直鎖アルケニル基と分枝鎖アルケニル基の両方を包含するように意図されている。アルケニル基の例としては、エチニル基、ｎ－プロピニル基、ｉｓｏ－プロピニル基、ｎ－ブチニル基、ｉｓｏ－ブチニル基、ｓｅｃ－ブチニル基、ｔ－ブチニル基、ｎ－ペンチニル基などが挙げられる。
「アルキニレン」という用語は、アルキニル基に対応する２価基を意味する。いずれのアルキニレン基も、ヒドロキシル、ハロゲン、例えばフッ素、アルキル、例えばメチル、およびアリールからなる群から選択される１つまたは複数の置換基で場合によって置換されていてもよい。いずれのアルキレンも、アルキレン鎖内に１つまたは複数のアリーレン部分を場合によって含んでもよく、例えば、フェニレン基がアルキレン鎖内に含まれていてもよい。
「アリール」という用語は、４～１８個の炭素原子を有する芳香族基を意味し、ヘテロ芳香族基を包含する。例としては、単環式基、および二環式基や三環式基などの縮合基が挙げられる。例としては、フェニル基、インデニル基、１－ナフチル基、２－ナフチル基、アズレニル基、ヘプタレニル基、ビフェニル基、インルダセニル基、アセナフチル基、フルオレニル基、フェナレニル基、フェナントレニル基、アントラセニル基、シクロペンタシクロオクテニル基およびベンゾシクロオクテニル基、ピリジル基、ピロリル基、ピリダジニル基、ピリミジニル基、ピラジニル基、トリアゾリル基（１－Ｈ－１，２，３－トリアゾール－１－イルおよび１－Ｈ－１，２，３－トリアゾール－４－イル基を含む）、テトラゾリル基、ベンゾトリアゾリル基、ピラゾリル基、イミダゾリル基、ベンゾイミダゾリル基、インドリル基、イソインドリル基、インドリジニル基、プリニル基、インダゾリル基、フリル基、ピラニル基、ベンゾフリル基、イソベンゾフリル基、チエニル基、チアゾリル基、イソチアゾリル基、ベンゾチアゾリル基、オキサゾリル基およびイソオキサゾリル基が挙げられる。
「アルコキシ」という用語は、Ｏ－アルキル基を意味し、アルキルは以上に定義した通りである。
「アシル」という用語は、Ｃ（＝Ｏ）Ｒ’基を意味し、Ｒ’は以上に定義したアルキルである。
「アシルオキシ」という用語は、ＯＲ”基を意味し、Ｒ”は以上に定義したアシルである。
「アミド」は、Ｎ連結（－ＮＨＣ（Ｏ）Ｒ）アミドとＣ連結（－Ｃ（Ｏ）ＮＨＲ）アミドの両方を包含する。
「抗原」という用語は、特異的免疫応答を誘導し、その応答の産物と反応することができる任意の物質を指す。抗原は、毒素やタンパク質などの分子、または細菌および／もしくは組織細胞の一部分とすることができる。
「免疫アジュバント」という用語は、ワクチン組成物に組み込まれ、またはワクチン組成物と一緒に投与されるとき、ワクチンに対する抗原特異的免疫応答を加速、延長または増強するように働く物質を意味する。
「薬学的に許容される賦形剤」という用語は、治療薬と共に投与される、過度の毒性を示さない担体、希釈剤または媒体を意味する。薬学的に許容される賦形剤は、担当政府規制局により認可されてきた。賦形剤としては、水および動物油、植物油、合成油または石油を含めた油、生理食塩水、水性デキストロースおよびグリセロール溶液、デンプングルコース、ラクトース、スクロース、ゼラチン、ステアリン酸ナトリウム、モノステアリン酸グリセリン、塩化ナトリウム、プロピレングリコール、エタノール、湿潤剤、乳化剤、結合剤、分散剤、粘稠化剤、滑沢剤、ｐＨ調整剤、可溶化剤、軟化剤、界面活性剤などの無菌液体が挙げられるが、これらに限定されない。本発明の組成物は、溶液、懸濁液、乳濁液、錠剤、丸剤、カプセル、粉末および持続放出製剤の形を取ることができる。好適な医薬賦形剤の例については、Ｒｅｍｉｎｇｔｏｎ’ｓ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ、１８版、Ｇｅｎｎａｒｏ編（Ｍａｃｋ Ｐｕｂｌｉｓｈｉｎｇ Ｃｏ．社、１９９０年）に記載されている。薬学的に許容される賦形剤は、本発明の化合物の活性を損なわない量が本発明の組成物中に存在する。
本明細書では「置換された」という用語は、示された基の１個または複数の水素原子が独立して選択される１つまたは複数の好適な置換基で置き換えられていることを意味するように意図されている、ただし、置換基が結合している各原子の通常の原子価を超えていないこと、置換によって、安定な化合物になることを条件とする。好適な置換基には、本明細書に示されている任意選択の置換基が含まれる。
不斉またはキラル中心が本発明の化合物中に存在することがある。不斉またはキラル中心を、キラル原子における置換基の三次元空間配置に応じて（Ｒ）または（Ｓ）と命名することができる。化合物のジアステレオマー、エナンチオマー、およびエピマーの形を含めて、すべての立体化学的異性体の形、ならびにｄ－異性体およびｌ－異性体、ならびに立体化学的異性体のエナンチオマーが濃縮された混合物およびジアステレオマーが濃縮された混合物を含めて、それらの混合物が本明細書に含まれる。
個々のエナンチオマーは、市販のエナンチオピュアな出発物質から合成により調製することができ、またはエナンチオマー混合物を調製し、混合物を個々のエナンチオマーに分割することによって調製することができる。分割方法は、エナンチオマー混合物からジアステレオマーの混合物への変換、および例えば再結晶またはクロマトグラフィー、および当技術分野において公知であるいずれか他の適切な方法によるジアステレオマーの分離を含む。定義された立体化学を有する出発物質は市販されており、または当技術分野において周知である技法により作製し、必要なら分割することができる。
本発明の化合物は、ｃｉｓ、ｔｒａｎｓ、ｓｙｎ、ａｎｔｉ、ｅｎｔｇｅｇｅｎ（Ｅ）、およびｚｕｓａｍｍｅｎ（Ｚ）異性体を含めて、配座または幾何立体異性体としても存在することがある。そのような立体異性体およびそれらの任意の混合物はすべて、本発明の範囲内に入る。本発明の化合物の任意の互変異性体またはそれらの混合物も本発明の範囲内に入る。当業者であれば理解されるように、多種多様な官能基および他の構造が互変異性を示すことがある。例としては、ケト／エノール、イミン／エナミン、およびチオケトン／エンチオール互変異性が挙げられるが、これらに限定されない。
本発明の化合物は、化合物中の１個または複数の原子が異なる同位体で置き換えられているアイソトポログおよびアイソトポマーとしても存在することがある。好適な同位体には、例えば１Ｈ、２Ｈ（Ｄ）、３Ｈ（Ｔ）、１２Ｃ、１３Ｃ、１４Ｃ、１６Ｏ、および１８Ｏが含まれる。そのような同位体を化合物に組み込む手順は当業者に明らかである。化合物のアイソトポログおよびアイソトポマーも本発明の範囲内に入る。
本発明の化合物の薬学的に許容される塩も本発明の範囲内に入る。そのような塩には、塩基性窒素含有基の酸付加塩、塩基付加塩、および第四級塩が含まれる。
酸付加塩は、化合物を遊離塩基の形で、無機または有機酸と反応させることによって調製することができる。無機酸の例としては、塩酸、臭化水素酸、硝酸、硫酸、およびリン酸が挙げられるが、これらに限定されない。有機酸の例としては、酢酸、トリフルオロ酢酸、プロピオン酸、コハク酸、グリコール酸、乳酸、リンゴ酸、酒石酸、クエン酸、アスコルビン酸、マレイン酸、フマル酸、ピルビン酸、アスパラギン酸、グルタミン酸、ステアリン酸、サリチル酸、メタンスルホン酸、ベンゼンスルホン酸、イセチオン酸、スルファニル酸、アジピン酸、酪酸、およびピバル酸が挙げられるが、これらに限定されない。塩基付加塩は、化合物を遊離酸の形で、無機または有機塩基と反応させることによって調製することができる。無機塩基付加塩の例としては、アルカリ金属塩、アルカリ土類金属塩、および他の生理学的に許容される金属塩、例えばアルミニウム、カルシウム、リチウム、マグネシウム、カリウム、ナトリウム、または亜鉛塩が挙げられる。有機塩基付加塩の例としては、アミン塩、例えばトリメチルアミン、ジエチルアミン、エタノールアミン、ジエタノールアミン、およびエチレンジアミンの塩が挙げられる。化合物中の塩基性窒素含有基の第四級塩は、例えば、化合物を、メチル、エチル、プロピル、およびブチルクロリド、ブロミド、およびヨージドなどのハロゲン化アルキル、硫酸ジメチル、ジエチル、ジブチル、およびジアミルなどの硫酸ジアルキルなどと反応させることによって調製することができる。
本発明の化合物のＮ－オキシドも本発明の範囲内に入る。
本発明の化合物は、様々な溶媒との溶媒和物を形成し、または様々な溶媒との溶媒和物として存在することができる。溶媒が水である場合、溶媒和物を水和物、例えば一水和物、二水和物、または三水和物と呼ぶことができる。化合物の溶媒和の形および非溶媒和の形はすべて、本発明の範囲内に入る。
「投与すること」または「投与」という用語は、免疫応答をもたらすのに適している方法により本発明の組成物または化合物を対象に入れることを指す。剤形は、治療目的および対象に応じて適切に選択および使用される。本発明の組成物の用量は、治療目的ならびに対象の種、年齢、性別、全身的健康状態および疾患進行を含めて対象の特質に応じて選択することができる。一般に、ヒト対象の場合、本発明の化合物は、１日当たり０．０１～１００ｍｇ／体重１ｋｇ、好ましくは０．１～５０ｍｇ／体重１ｋｇの用量を１回投与し、または数回にわたって分割投与することができる。
「治療有効量」（または「有効量」）は、臨床結果を含むがこれに限定されない有益なまたは所望の結果をもたらすのに十分な量である。治療有効量を、様々な投与経路により１回または複数回投与で投与することができる。対象に投与される化合物の治療有効量は、例えば、化合物が投与される目的、投与方法、いずれか共投与される化合物の性質および投与量、ならびに全身的健康状態、他の疾患、年齢、性別、遺伝子型、体重および薬物耐性などの対象の特質によって決まる。当業者は、これらいずれか他の関連因子を考慮して適切な投与量を決定することができる。
「対象」は、ヒトまたは非ヒト動物、好ましくは哺乳類である脊椎動物を指す。非ヒト哺乳類としては、ウシ、ヒツジ、ブタ、シカ、およびヤギなどの家畜；イヌ、ネコ、およびウマなどのスポーツおよびコンパニオン動物；ならびにマウス、ラット、ウサギ、およびモルモットなどの研究動物が挙げられるが、これらに限定されない。好ましくは、対象はヒトである。
「がん」という用語は、乳がん、精巣がん、膵がん、肺がん、卵巣がん、胃がん、胆嚢がん、腎がん、皮膚がん、前立腺がん、食道（eosophageal）がん、肝がん、口腔がん、結腸がん、直腸がん、子宮がん、膀胱がん、甲状腺がんおよび胆管がんを包含する。また、膵島細胞腺腫、副腎皮質癌、悪性カルチノイド腫瘍、神経膠腫、骨肉腫、骨髄腫、軟部組織肉腫、神経芽細胞腫、悪性リンパ腫および白血病も包含する。
本発明において、開示化合物の言及はいずれも、例えば遊離（例えば、遊離酸または塩基）の形、塩または水和物の形、異性体（例えば、ｃｉｓ／ｔｒａｎｓ異性体）、エナンチオマー、ジアステレオマーおよびエピマーなどの立体異性体の形、エナンチオマーもしくはジアステレオマーの混合物の形、ラセミ体もしくはラセミ混合物の形、または個々のエナンチオマーもしくはジアステレオマーの形をした、考えうるすべての製剤、配置、および立体配座を包含する。化合物の特定の形については、本明細書に詳細に記載する。
本明細書では、「含む（ｃｏｍｐｒｉｓｅｓ）」、「含んでいる（ｃｏｍｐｒｉｓｉｎｇ）」という単語、および同様の単語は、排他的または包括的な意味で解釈されるべきでない。言い換えれば、それらは、「～を含むがこれに限定されない」ことを意味するように意図されている。
本明細書に開示される数値範囲への言及（例えば、１～１０）は、その範囲内のすべての有理数（例えば、１、１．１、２、３、３．９、４、５、６、６．５、７、８、９および１０）さらにはその範囲内の有理数の任意の範囲（例えば、２～８、１．５～５．５および３．１～４．７）への言及も含み、したがって、本明細書に明示的に開示されるすべての範囲のすべての部分範囲が、これによって明示的に開示されることが意図されている。これらは、具体的に意図されるものの例にすぎず、列挙された最低値と最高値の間の数値の考えうるすべての組合せが、本出願において同様に明示的に記載されていると見なされるべきである。
特許明細書、他の外部文書、または他の情報源について言及された本明細書において、これは、全体として本発明の特徴を論じるための状況を提供する目的のものである。特段の記載がない限り、そのような外部文献への言及は、いかなる管轄においてもそのような文献またはそのような情報源が先行技術であり、または当技術分野における共通一般知識の一部分を成すということを承認するものとして解釈されるべきでない。
５．２ 本発明の化合物の合成
本発明の化合物は、例えば「Ｃｏｍｐｅｎｄｉｕｍ ｏｆ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｔｉｃ Ｍｅｔｈｏｄｓ」、１～１３巻、Ｉ． Ｈａｒｒｉｓｏｎ／Ｌ． Ｓ． Ｈｅｇｅｄｕｓ／Ｌ． Ｇ． Ｗａｄｅ／Ｍ． Ｂ． Ｓｍｉｔｈ編、１９７１～２０１４年、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ社、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ、および「Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ：Ｃｏｎｃｅｐｔｓ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ」、第３版、Ｊ．－Ｈ． Ｆｕｈｒｈｏｐ、Ｌ． Ｇｕａｎｇｔａｏ、２００３年、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ社、Ｎｅｗ Ｙｏｒｋに説明されている公知の化学合成方法を参照して、実施例１に述べるプロセスに従って調製することができる。
反応種を保護する方法は、例えばＰｅｔｅｒ Ｇ． Ｍ． ＷｕｔｓおよびＴｈｅｏｄｏｒａ Ｗ． Ｇｒｅｅｎｅ、Ｇｒｅｅｎｅ’ｓ Ｐｒｏｔｅｃｔｉｖｅ Ｇｒｏｕｐｓ ｉｎ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第４版、Ｊｏｈｎ Ｗｉｌｅｙ ＆ Ｓｏｎｓ， Ｉｎｃ．社、Ｈｏｂｏｋｅｎ， ＮＪ．、２００６年で見ることができる。他の方法については、Ｇｏｏｄｍａｎ， Ｍ．、Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ｏｒｇ． Ｃｈｅｍ．（Ｈｏｕｂｅｎ－Ｗｅｙｌ）、第４版の増補・補遺巻、Ｅ２２ａ巻、２００２年、４２５～８８８頁；Ｆｒａｎｃｉｓ Ａ． ＣａｒｅｙおよびＲｉｃｈａｒｄ Ｊ． Ｓｕｎｄｂｅｒｇ、Ａｄｖａｎｃｅｄ Ｏｒｇａｎｉｃ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ， Ｐａｒｔ Ｂ：Ｒｅａｃｔｉｏｎ ａｎｄ Ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、第５版、Ｓｐｒｉｎｇｅｒ ＵＳ社、２００７年に記載されている。ペプチドカップリング技法については、Ａ． Ｅｌ－ＦａｈａｍおよびＦ． Ａｌｂｅｒｉｃｉｏ、Ｐｅｐｔｉｄｅ ｃｏｕｐｌｉｎｇ ｒｅａｇｅｎｔｓ：ｍｏｒｅ ｔｈａｎ ａ ｌｅｔｔｅｒ ｓｏｕｐ． Ｃｈｅｍ． Ｒｅｖ．、１１１巻、６５５７～６６０２頁（２０１１年）ならびにＭ． Ｔｓａｋｏｓ、Ｅ． Ｓ． Ｓｃｈａｆｆｅｒｔ、Ｌ． Ｌ． Ｃｌｅｍｅｎｔ、Ｎ． Ｌ． Ｖｉｌｌａｄｓｅｎ、Ｔ． Ｂ． Ｐｏｕｌｓｅｎ、Ｅｓｔｅｒ ｃｏｕｐｌｉｎｇ ｒｅａｃｔｉｏｎｓ－ａｎ ｅｎｄｕｒｉｎｇ ｃｈａｌｌｅｎｇｅ ｉｎ ｔｈｅ ｃｈｅｍｉｃａｌ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ ｏｆ ｂｉｏａｃｔｉｖｅ ｎａｔｕｒａｌ ｐｒｏｄｕｃｔｓ、Ｎａｔ． Ｐｒｏｄ． Ｒｅｐ．、３２巻（４号）、６０５～６３２頁（２０１５年）に記載されている。エステル化反応の概要が、Ｊ． Ｏｔｅｒａ、Ｔｒａｎｓｅｓｔｅｒｉｆｉｃａｔｉｏｎ、Ｃｈｅｍ． Ｒｅｖ．、９３巻（４号）、１４４９～１４７０頁（１９９３年）およびＶ． Ｒ． Ｐａｔｔａｂｉｒａｍａｎ、Ｊ． Ｗ． Ｂｏｄｅ、Ｒｅｔｈｉｎｋｉｎｇ ａｍｉｄｅ ｂｏｎｄ ｓｙｎｔｈｅｓｉｓ、Ｎａｔｕｒｅ、４８０巻、４７１～４７９頁（２０１１年）に記載されている。
本発明の対称的化合物を調製する例示的な一方法を以下のスキーム１に示す。方法の詳細な説明は以下の実験の部で見られる。
Figure 0007360385000016
式ＩＩの化合物の合成では、式Ｘ（Ｘ＝ＯまたはＸ＝ＮＨ）の保護されている（例えば、Ｒ＝Ｂｎ、ＴＭＳ、Ｌｅｖ）または保護されていない（Ｒ＝Ｈ）化合物を、カップリング試薬（例えば、ＤＣＣ、ＢＯＰ、ＨＡＴＵ、ＣＯＭＵ、Ｐｈ３Ｐ／ＤＥＡＤ、またはそれらの誘導体のいずれか）の作用下で、またはカルボン酸ＸＩの活性化型（例えば、無水物または酸塩化物）を使用して式ＸＩ（Ｙ、Ｚ、ｎ、ｍおよびｐは、式ＩＩについて先に定義された通りである）の化合物と縮合させ、次に、（例えば水素化、酸または塩基を使用して）場合によって脱保護して、本発明の組成物ＩＩを形成する。
あるいは、式Ｘ（Ｘ＝ＮＨ）の化合物は、還元剤（例えば、水素、ヒドリド、スルフィドまたはホスフィン）を使用して対応するアジドを還元することによりインサイチュ(in situ)形成することができる。さらに、式Ｘの化合物をＸＩのエステル誘導体（Ｍｅ、Ｅｔ、またはビニルエステルなど）と共に、酵素、酸、または塩基を触媒とする反応に供し、次に、（例えば、水素化、酸または塩基を使用して）場合によって脱保護して、本発明の組成物ＩＩを形成することもできる。
本発明の非対称性化合物（式Ｉの化合物）の合成は、式Ｉｂの化合物の合成を図示する以下のスキーム２に示すように、２ステップで実施することができる。
Figure 0007360385000017
式Ｉｂの化合物の合成において、式ＸＩＩ（Ｘａ＝ＯまたはＸａ＝ＮＨ；Ｙ＝ＯＲ２（ここで、Ｒ２＝Ｈまたは保護基）、またはＹ＝ＮＲ２Ｒ３（ここで、Ｒ２、Ｒ３＝Ｈまたは保護基））の保護されている（例えば、Ｒ１＝Ｂｎ、ＴＭＳ、Ｌｅｖ）または保護されていない（Ｒ１＝Ｈ）化合物を、カップリング試薬（例えば、ＤＣＣ、ＢＯＰ、ＨＡＴＵ、ＣＯＭＵ、Ｐｈ３Ｐ／ＤＥＡＤ、またはそれらの誘導体のいずれか）の作用下で、またはカルボン酸ＸＩＩＩの活性化型（例えば、無水物または酸塩化物）を使用して式ＸＩＩＩの化合物（Ｙａ、Ｚａ、ｎ、ｒおよびｐは、式Ｉについて定義された通りである）と縮合させ、次に、（例えば水素化、酸または塩基を使用して）場合によって脱保護して、式ＸＩＶ（Ｘｂ＝ＯまたはＸｂ＝ＮＨ）の化合物を形成する。続いて、カップリング試薬（例えば、ＤＣＣ、ＢＯＰ、ＨＡＴＵ、ＣＯＭＵ、Ｐｈ３Ｐ／ＤＥＡＤ、またはそれらの誘導体のいずれか）の作用下における、またはカルボン酸ＸＶの活性化型（例えば、無水物または酸塩化物）を使用する、式ＸＩＶの化合物と式ＸＶ（Ｙｂ、Ｚｂ、ｍ、ｓおよびｑは、式Ｉについて定義された通りである）の化合物との縮合を行い、次に、（例えば水素化、酸または塩基を使用して）場合によって脱保護して、本発明の組成物Ｉｂを得る。
あるいは、式ＸＩＩ（Ｘａ＝ＮＨ）の化合物または式ＸＩＶ（Ｘｂ＝ＮＨ）の化合物は、還元剤（例えば、水素、ヒドリド、スルフィドまたはホスフィン）を使用して対応するアジドを還元することによりインサイチュ形成することができる。さらに、式ＸＩＩの化合物または式ＸＩＶの化合物をＸＩＩＩまたはＸＶのエステル誘導体（Ｍｅ、Ｅｔ、またはビニルエステルなど）と共に、酵素、酸、または塩基を触媒とする反応に供し、次に、（例えば水素化、酸または塩基を使用して）場合によって脱保護して、本発明の組成物Ｉｂを形成することができる。
本発明の化合物を調製する例示的な別法を以下に述べる。この方法を使用して、実施例７の化合物を調製した。
トレハロースのＣ６およびＣ６’位を選択的にヨウ素化して、６，６’－ジデオキシ－６，６’－ジヨード－α，α’－トレハロースを高い収率（７５％）で得た（スキーム３）。次いで、ヨード基をアジドに置換して、６，６’－ジアジド－６，６’－ジデオキシ－α，α’－トレハロースを得た。次いで、ジアジドをＳｔａｕｄｉｎｇｅｒ還元条件にかけて、中間体６，６’－ジアミノ－６，６’－ジデオキシ－α，α’－トレハロースを得た。それを直ちに適切な安息香酸、ベンジル基で保護されたいずれかのフェノールとのカップリング反応に供して、ジアミドを高い～優れた収率（５７％～９３％）で形成した。適宜、ジアミドをパラジウム触媒水素化反応に供することによって、脂質のベンジル保護基を除去した。これにより、アミド４３ｉ、４３ｊおよび４３ｋが得られた。
Figure 0007360385000018
２－ヒドロキシ安息香酸メチル（４４）および３－ヒドロキシ安息香酸エチル（４５）を、まず１－ブロモオクタデカンでアルキル化して、対応する親油性エステル４６および４７をそれぞれ収率２９％および８７％で得た（スキーム４）。次に、親油性エステル４６および４７のＮａＯＨ加水分解により、ｏ－置換（４８）およびｍ－置換（４９）酸が高収率（それぞれ８２％および８８％）で得られた。手元の適切な酸については、次いで、これらをベンジルで保護されたトレハロース３１と共に、ＥＤＣＩ促進エステル化にかけた。カップリング反応は順調に進行して、対応する保護糖脂質５０および５１を高収率（それぞれ８２％および８８％）で得た。最後に、Ｐｅａｒｌｍａｎ触媒およびＨ２を使用して、ベンジル保護基を除去すると、目標のブラルテミシン類似体ｏ－ＯＣ１８（４３ａ）およびｍ－ＯＣ１８（４３ｂ）が得られた。
Figure 0007360385000019
３，５－ジヒドロキシ安息香酸メチル５２を１－ブロモオクタデカンでジアルキル化して、親油性エーテルを中程度の収率（６３％）で導入した（スキーム５）。次いで、メチルエステル５３の加水分解により、対応する酸５４が得られ、次いで、それをベンジルで保護されたトレハロース３１と共に、ＥＤＣＩ媒介エステル化にかけて、保護糖脂質５５を得た。
Figure 0007360385000020
ジヒドロシンナメート誘導体４３ｄの合成は、安息香酸メチル５６を１－ブロモヘキサデカンでアルキル化することから始めて、Ｃ１６脂質を高い収率（６８％）で導入した（スキーム６）。次いで、メチルエステル５７を加水分解することにより、対応する酸５８を得た。それを使用して、ベンジルで保護されたトレハロース３１をエステル化して、糖脂質５９を中程度の収率（４３％）で得た。最後に、ジエステル５９のベンジル保護基をＰｅａｒｌｍａｎ触媒およびＨ２の作用下で除去して、目標の糖脂質４３ｄを収率６４％で得た。
Figure 0007360385000021
４－ヒドロキシケイ皮酸メチル６１を１－ブロモヘキサデカンおよびＫ２ＣＯ３で処理して、親油性エステル６２を高収率（８８％）で得た（スキーム７）。次いで、メチルエステル６２を加水分解すると、対応する酸６３が得られた。続いて、それを使用して、ＴＭＳで保護されたトレハロース６０をエステル化して、α，β－不飽和ジエステル６４を中程度の収率（２ステップにわたって３２％）で得た。最後に、Ｄｏｗｅｘ－Ｈ＋を使用して、ＴＭＳ保護基を除去して、目標の糖脂質４３ｅを収率４０％で得た。
Figure 0007360385000022
炭素連結誘導体４３ｆを合成するために、１－ブロモオクタデカン６５を、まずＰＰｈ３と反応させて、臭化ホスホニウム６６を収率５７％で得た（スキーム８）。次に、臭化ホスホニウム６６をＢｕＬｉで処理すると、対応するイリドが得られた。それを４－ホルミル安息香酸メチル６７と共に、直ちにＷｉｔｔｉｇ反応に供して、メチルエステル６８をＺ－アルケンとＥ－アルケンの３：１の混合物として得た。次いで、これらの異性体を塩基性条件下で直ちに加水分解して、酸６９を高収率（９１％）で得た。次に、ベンジルで保護されたトレハロース３１と酸６９のＥＤＣＩ媒介エステル化により、保護糖脂質７０を得た。続いて、それをＰｄ（ＯＨ）２およびＨ２にかけて、目標の炭素連結糖脂質４３ｆを収率５６％で得た。
Figure 0007360385000023
窒素連結ブラルテミシン誘導体４３ｇの合成は、オクタデカン－１－オール７１のＰＣＣ媒介酸化から始めて、オクタデカナール（７２）を高収率（８５％）で得た（スキーム９）。次に、４－アミノ安息香酸エチル７３およびトリアセトキシ水素化ホウ素ナトリウムを用いて、オクタデカナール７２を還元的アミノ化すると、第二級アミン７４が中程度の収率（５８％）で得られた。次いで、エチルエステル７４をＮａＯＨおよびＥｔＯＨの存在下で加水分解して、酸７５を収率９９％で得た。次いで、ベンジルで保護されたトレハロース３１と酸７５のＥＤＣＩ媒介エステル化により、保護された窒素連結糖脂質７６を収率３８％で得た。エステル化反応で得られた高くない収率は、糖脂質７６を十分な純度で得るためにサイズ排除クロマトグラフィー（親油性セファデックス）が必要とされる精製手順時における材料の損失に起因した。手元の保護糖脂質７６の場合、Ｐｅａｒｌｍａｎ触媒およびＨ２を使用して、ベンジル保護基を除去して、目標の窒素連結誘導体４３ｇを得た。
Figure 0007360385000024
硫黄連結ブラルテミシン誘導体４３ｈを合成するために、４－メルカプト安息香酸メチル７７を１－ブロモオクタデカンでアルキル化して、対応する硫黄連結エステル７８を収率３９％で得た（スキーム１０）。次いで、メチルエステル７８をＮａＯＨで加水分解すると、ＴＬＣ分析（Ｒｆ＝０．４５［４：１（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ］）により観察して、酸７９が円滑に形成された。酸７９は、ＥｔＯＡｃやＣＨ２Ｃｌ２などの有機溶媒に対する溶解度が比較的低く、それにより、ワークアップ時に生成物を抽出するために熱ＥｔＯＡｃを使用することを余儀なくされた。このように、酸７９を（定量的）高収率で単離した。次に、ＴＭＳで保護されたトレハロース６０を保護トレハロース誘導体として選択し、それから硫黄連結ブラルテミシン誘導体４３ｈを調製した。硫黄含有化合物はＰｄベースの触媒を無力にするおそれがあるので１４３、ベンジルで保護されたα，α’－ｄ－トレハロースコア３１を４３ｈの合成においては回避し、したがってＴＭＳで保護されたトレハロース６０を選択し、酸７９とエステル化して、保護糖脂質８０を収率７７％で得た。次いで、Ｄｏｗｅｘ－Ｈ＋を使用して、ＴＭＳ保護基を除去して、目標の硫黄連結ブラルテミシン誘導体４３ｈを収率４８％で得た。
Figure 0007360385000025
５．３ 本発明の化合物の使用
本発明の化合物はインビトロでもインビボでもＭｉｎｃｌｅ ＰＲＲを結合し、活性化することが示された。本発明の化合物は、ＴＤＭに似ている二重エステル化α，α－トレハロースコア構造を含むＮｏｎｏｍｕｒａｅａ属種から単離された天然物であるブラルテミシンの誘導体である。ブラルテミシン自体は、ｍＭｉｎｃｌｅまたはｈＭｉｎｃｌｅ ＮＦＡＴ－ＧＦＰレポーター細胞またはＢＭＤＭを活性化しないことがわかった。
しかし、本発明の化合物は、ｍＭｉｎｃｌｅもｈＭｉｎｃｌｅも活性化し、化合物による刺激時にＢＭＤＭによって高レベルのＴＮＦ、ＩＬ－６、ＩＬ－１βおよびＭＩＰ－２が産生される。化合物９ａがインビボで抗原と組み合わされると、強いＴｈ１リコール応答が観察され、ＴＤＢのＴｈ１リコール応答より高かった。
したがって、本発明の化合物および組成物は、病原体によって引き起こされる感染症、ならびにがんおよび他の疾患を予防または処置するのに使用することができる免疫モジュレーターとして働く。本発明の化合物および組成物は、抗原と一緒に(in conjunction)使用されると、免疫アジュバントとして機能することもできる。
一態様において、本発明は、式Ｉ、式１ａ、式１ｂ、式ＩＩまたは式ＩＩＩのいずれかの化合物と１種または複数の薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物を提供する。
一実施形態において、医薬組成物は、非ヒト対象に投与するために製剤化された動物医薬組成物である。
一実施形態において、医薬組成物は、抗原をさらに含む。
一実施形態において、医薬組成物は、Ｔｏｌｌ様受容体アゴニスト（ＴＬＲＡ）をさらに含む。
一態様において、本発明は、対象において免疫応答を増強する方法であって、対象に式Ｉ、式１ａ、式１ｂ、式ＩＩまたは式ＩＩＩの化合物の治療有効量を投与するステップを含む方法を提供する。
一態様において、本発明は、対象において免疫応答を増強する方法であって、対象に式ＩＶ、式ＩＶａ、式ＩＶｂ、式Ｖまたは式ＶＩの化合物の治療有効量を投与するステップを含む方法を提供する。
一態様において、本発明は、対象において抗原に対する免疫応答を増強する方法であって、対象に式Ｉ、式１ａ、式１ｂ、式ＩＩまたは式ＩＩＩの化合物の治療有効量を抗原と一緒に投与するステップを含む方法を提供する。
一態様において、本発明は、対象において抗原に対する免疫応答を増強する方法であって、対象に式ＩＶ、式ＩＶａ、式ＩＶｂ、式Ｖまたは式ＶＩの化合物の治療有効量を投与するステップを含む方法を提供する。
一態様において、本発明は、対象においてＴｈ１媒介免疫を誘導または増強する方法であって、対象に式Ｉ、式１ａ、式１ｂ、式ＩＩまたは式ＩＩＩの化合物の治療有効量を投与するステップを含む方法を提供する。
一態様において、本発明は、対象においてＴｈ１媒介免疫を誘導または増強する方法であって、対象に式ＩＶ、式ＩＶａ、式ＩＶｂ、式Ｖまたは式ＶＩの化合物の治療有効量を投与するステップを含む方法を提供する。
一態様において、本発明は、対象において抗原に対するＴｈ１媒介免疫を誘導または増強する方法であって、対象に式Ｉ、式１ａ、式１ｂ、式ＩＩまたは式ＩＩＩの化合物の治療有効量を抗原と同時に、順次にまたは別々に投与するステップを含む方法を提供する。
一態様において、本発明は、対象において抗原に対するＴｈ１媒介免疫を誘導または増強する方法であって、対象に式ＩＶ、式ＩＶａ、式ＩＶｂ、式Ｖまたは式ＶＩの化合物の治療有効量を抗原と同時に、順次にまたは別々に投与するステップを含む方法を提供する。
一態様において、本発明は、対象において病原体によって引き起こされる疾患または病態を予防または処置する方法であって、対象に式Ｉ、式１ａ、式１ｂ、式ＩＩまたは式ＩＩＩの化合物の治療有効量を投与するステップを含む方法を提供する。
一態様において、本発明は、対象において病原体によって引き起こされる疾患または病態を予防または処置する方法であって、対象に式ＩＶ、式ＩＶａ、式ＩＶｂ、式Ｖまたは式ＶＩの化合物の治療有効量を投与するステップを含む方法を提供する。
上記の方法では、一実施形態において、対象は、ヒトおよび非ヒト哺乳類から選択される哺乳類である。一実施形態において、対象は、非ヒト哺乳類、好ましくはコンパニオン動物または家畜動物である。
一実施形態において、病原体は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、結核、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、インフルエンザ、肺炎、髄膜炎、ロタウイルス、破傷風、リーシュマニア症、炭疽病、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、麻疹、風疹、水痘、ムンプス、帯状疱疹、ポリオ、百日咳、黄熱病、狂犬病、破傷風、デング熱、腸チフスおよび日本脳炎からなる群から選択される。
一実施形態において、病原体は、ＨＩＶ、結核、肺炎、百日咳および髄膜炎からなる群から選択される。
一実施形態において、病原体は、ウイルス、細菌、原生生物、および真菌からなる群から選択される。
一実施形態において、細菌は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ属、Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ属、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ属、Ｂｏｒｒｅｌｉａ属、Ｂｒｕｃｅｌｌａ属、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ属、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ属、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ属、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ属、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ属、Ｃｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ属、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ属、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ属、Ｇｉａｒｄｉａ属、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ属、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ属、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ属、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ属、Ｌｉｓｔｅｒｉａ属、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ属、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ属、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ属、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ属、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ属、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ属、Ｓｈｉｇｅｌｌａ属、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ属、Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ属、Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ属、Ｖｉｂｒｉｏ属、およびＹｅｒｓｉｎｉａ属からなる群から選択される。
一実施形態において、細菌は、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ａｎｔｈｒａｃｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｃｅｒｅｕｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｕｂｔｉｌｉｓ、Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｔｈｕｒｉｎｇｉｅｎｓｉｓ、Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ ｈｅｎｓｅｌａｅ、Ｂａｒｔｏｎｅｌｌａ ｑｕｉｎｔａｎａ、Ｂｏｒｄｅｔｅｌｌａ ｐｅｒｔｕｓｓｉｓ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ａｆｚｅｌｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｂｕｒｇｄｏｒｆｅｒｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｇａｒｉｎｉｉ、Ｂｏｒｒｅｌｉａ ｒｅｃｕｒｒｅｎｔｉｓ、Ｂｒｕｃｅｌｌａ ａｂｏｒｔｕｓ、Ｂｒｕｃｅｌｌａ ｃａｎｉｓ、Ｂｒｕｃｅｌｌａ ｍｅｌｉｔｅｎｓｉｓ、Ｂｒｕｃｅｌｌａ ｓｕｉｓ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｃｏｌｉ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｆｅｔｕｓ、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｊｅｊｕｎｉ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｃｈｌａｍｙｄｉａ ｔｒａｃｈｏｍａｔｉｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ ｐｓｉｔｔａｃｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｂｏｔｕｌｉｎｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｃｈａｕｖｏｅｉ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｈａｅｍｏｌｙｔｉｃｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｅｐｔｉｃｕｍ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｓｐｉｒｏｆｏｒｍｅ、Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｔｅｔａｎｉ、Ｃｏｒｙｎｅｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｄｉｐｈｔｈｅｒｉａｅ、Ｃｙｐｔｏｓｐｏｒｉｄｉｕｍ ｐａｒｖｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ａｖｉｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｃａｓｓｅｌｉｆｌａｖｕｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｆａｅｃａｌｉｓ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｃｕｓ ｆａｅｃｉｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｇａｌｌｉｎａｒｕｍ、Ｅｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓ ｍｕｎｄｔｉｉ、Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ、Ｆｒａｎｃｉｓｅｌｌａ ｔｕｌａｒｅｎｓｉｓ、Ｇｉａｒｄｉａ ｌａｍｂｌｉａ、Ｇｉａｒｄｉａ ｄｕｏｄｅｎａｌｉｓ、Ｈａｅｍｏｐｈｉｌｕｓ ｉｎｆｌｕｅｎｚａｅ、Ｈｅｌｉｃｏｂａｃｔｅｒ ｐｙｌｏｒｉ、Ｌｅｇｉｏｎｅｌｌａ ｐｎｅｕｍｏｐｈｉｌａ、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ ｉｎｔｅｒｒｏｇａｎｓ、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ ｎｏｇｕｃｈｉｉ、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ ｓａｎｔａｒｏｓａｉ、Ｌｅｐｔｏｓｐｉｒａ ｗｅｉｌｉｉ、Ｌｉｓｔｅｒｉａ ｍｏｎｏｃｙｔｏｇｅｎｅｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ａｖｉｕｍ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｂｏｖｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｌｅｐｒａｅ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｕｌｃｅｒａｎｓ、Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｐａｒａｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓ、Ｍｙｃｏｐｌａｓｍａ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｇｏｎｏｒｒｈｏｅａｅ、Ｎｅｉｓｓｅｒｉａ ｍｅｎｉｎｇｉｔｉｄｉｓ、Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ａｅｒｕｇｉｎｏｓａ、Ｒｉｃｋｅｔｔｓｉａ ｒｉｃｋｅｔｔｓｉｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｄｕｂｌｉｎ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ Ｎｅｗｐｏｒｔ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉ、Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｔｙｐｈｉｍｕｒｉｕｍ、Ｓｈｉｇｅｌｌａ ｓｏｎｎｅｉ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ａｕｒｅｕｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ、Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ ｓａｐｒｏｐｈｙｔｉｃｕｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｙｏｇｅｎｅｓ、Ｔｒｅｐｏｎｅｍａ ｐａｌｌｉｄｕｍ、Ｕｒｅａｐｌａｓｍａ ｕｒｅａｌｙｔｉｃｕｍ、Ｖｉｂｒｉｏ ｃｈｏｌｅｒａｅ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｅｎｔｅｒｏｃｏｌｉｔｉｃａ、Ｙｅｒｓｉｎｉａ ｐｅｓｔｉｓ、およびＹｅｒｓｉｎｉａ ｐｓｅｕｄｏｔｕｂｅｒｃｕｌｏｓｉｓからなる群から選択される。
一実施形態において、病原体は、Ａｐｈａｎｏｍｙｃｅｓ ｉｎｖａｄａｎｓ、Ｂａｂｅｓｉａ ｂｏｖｉｓ、Ｂａｂｅｓｉａ ｂｉｇｅｍｉｎａ、Ａｎａｐｌａｓｍａ ｍａｒｇｉｎａｌｅ、Ｂｕｒｋｈｏｌｄｅｒｉａ ｐｓｅｕｄｏｍａｌｌｅｉ、Ｃａｌｉｃｉｖｉｒｉｄａｅ科（Ｃａｌｃｉｖｉｒｉｄａｅ）、Ｃａｍｐｙｌｏｂａｃｔｅｒ ｈｅｐａｔｉｃｕｓ、Ｃｈｌａｍｙｄｏｐｈｉｌａ ａｂｏｒｔｕｓ、Ｃｏｘｉｅｌｌａ ｂｕｒｎｅｔｉｉ、Ｅｃｈｉｎｏｃｏｃｃｕｓ、Ｆｌａｖｉｖｉｒｉｄａｅ科、Ｌａｗｓｏｎｉａ ｉｎｔｒａｃｅｌｌｕｌａｒｉｓ、Ｎｅｏｂｅｎｅｄｅｎｉａ属、Ｐａｒａｍｙｘｏｖｉｒｉｄａｅ科、Ｐａｓｔｅｕｒｅｌｌａ ｍｕｌｔｏｃｉｄａ、Ｐｉｃｏｒｎａｖｉｒｉｄａｅ科、Ｒｈａｂｄｏｖｉｒｉｄａｅ科、Ｓｐａｒｇａｎｕｍ ｍａｎｓｏｎｉ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ａｇａｌａｃｔｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｃａｎｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｅｑｕｉ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｓｕｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｕｂｅｒｉｓ、Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｚｏｏｅｐｉｄｅｍｉｃｕｓ、Ｔｏｘｏｃａｒａ ｃａｎｉｓ、Ｔｏｘｏｃａｒａ ｃａｔｉ、Ｔｏｘｏｐｌａｓｍａ ｇｏｎｄｉｉ、およびＣｒｙｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｎｅｏｆｏｒｍａｎｓからなる群から選択される。
一態様において、本発明は、対象においてがんを予防または処置する方法であって、対象に式Ｉ、式１ａ、式１ｂ、式ＩＩまたは式ＩＩＩの化合物の治療有効量を投与するステップを含む方法を提供する。
上記の態様では、以下の通りである。
一実施形態において、抗原は、弱毒生微生物またはその抗原部分、不活化もしくは死んでいる微生物またはその抗原部分、ウイルスもしくは細菌タンパク質によって産生されたまたはそれらに由来する不活化毒素またはその抗原断片、ウイルスもしくは細菌ＤＮＡまたはその抗原部分、トキソイド、およびそれらの組合せからなる群から選択される。
一実施形態において、抗原は、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、結核、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、インフルエンザ、肺炎、髄膜炎、ロタウイルス、破傷風、リーシュマニア症、炭疽病、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、麻疹、風疹、水痘、ムンプス、帯状疱疹、ポリオ、百日咳、黄熱病、狂犬病、破傷風、デング熱、腸チフスおよび日本脳炎に対する抗原からなる群から選択される。
一実施形態において、対象は、免疫不全状態である。一実施形態において、免疫不全状態の対象は、新生児、乳児、１２歳未満の小児、高齢者、ＨＩＶ患者および免疫抑制剤（immunosuppresant）服用者からなる群から選択される。
一実施形態において、投与は、局所または全身投与である。一実施形態において、投与は、鼻腔内、表皮、および経皮、経口または非経口投与である。
一実施形態において、経口投与は、液体、ゲル、クリーム、軟膏、ローションまたはスラリーの適用を含む。一実施形態において、経口投与は、経口剤形の送達を含む。一実施形態において、経口剤形は、固体経口剤形である。一実施形態において、固体経口剤形は、粉末、顆粒、錠剤、丸剤、カプセルもしくはロゼンジ、またはそれらの組合せを含む。
一実施形態において、経口剤形は液体剤形である。一実施形態において、液体剤形は、水性懸濁液、水性溶液、非水性懸濁液または非水性溶液である。
一実施形態において、経口剤形は、粘稠化剤、矯味剤、希釈剤、乳化剤、分散助剤および結合剤からなる群から選択される追加の成分を含む。
一実施形態において、非経口投与は、直接適用、全身、皮下、腹腔内または筋肉内注射、静脈内滴注または注入、吸入、吹送、または髄腔内もしくは脳室内投与からなる群から選択される。
一実施形態において、投与は、一時的投与である。一実施形態において、一時的投与は、本発明の化合物または本明細書に記載される医薬組成物を、処置を実現するまたは治療結果を達成するのに十分な期間投与することを含む。
本発明の方法による特定の有効な用法は、処置をする疾患および／または病態の重症度、ならびに処置を受けた対象の処置過程に対する応答性に依存する。有効な処置は、数時間から数日、数か月、またはそれ以上、あるいは許容される治療成績がもたらされるもしくは確信されるまで、または許容される感染低減が観察されるまで続くことがある。
最適な投与計画は、処置を受けた対象の身体において測定された薬物蓄積から決めることができる。最適および／または好適な投与量、投与製剤および用法を容易に決定することができるのは当業者の技能範囲内であると考えられる。当然、最適投与量は、本発明の化合物またはその化合物を含む医薬組成物の相対効力に応じて変わることがある。一般に、投与量は、体重１ｋｇ当たり０．０００１ｇ～９９ｇであり、毎日、毎週、毎月、または毎年１回または複数回投与することができるが、これらに限定されない。
一態様において、本発明は、対象において免疫応答を増強するための医薬品の製造における式Ｉ、式Ｉａ、式Ｉｂ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式ＩＶａ、式ＩＶｂ、式Ｖまたは式ＶＩの化合物の使用を提供する。
一態様において、本発明は、対象において抗原に対する免疫応答を増強するための医薬品の製造における式Ｉ、式Ｉａ、式Ｉｂ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式ＩＶａ、式ＩＶｂ、式Ｖまたは式ＶＩの化合物および抗原の使用を提供する。
一態様において、本発明は、対象においてＴｈ１媒介免疫を誘導または増強するための医薬品の製造における式Ｉ、式Ｉａ、式Ｉｂ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式ＩＶａ、式ＩＶｂ、式Ｖまたは式ＶＩの化合物の使用を提供する。
一態様において、本発明は、対象において抗原に対するＴｈ１媒介免疫を誘導または増強するための医薬品の製造における式Ｉ、式Ｉａ、式Ｉｂ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式ＩＶａ、式ＩＶｂ、式Ｖまたは式ＶＩの化合物および抗原の使用であって、医薬品が式Ｉまたは式ＩＩの化合物を抗原と同時に、順次にまたは別々に投与するために製剤化される、使用を提供する。
一態様において、本発明は、対象において病原体によって引き起こされる疾患または病態を予防または処置するための医薬品の製造における式Ｉ、式Ｉａ、式Ｉｂ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式ＩＶａ、式ＩＶｂ、式Ｖまたは式ＶＩの化合物の使用を提供する。
一態様において、本発明は、対象において免疫応答を増強するために使用するための、式Ｉ、式Ｉａ、式Ｉｂ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式ＩＶａ、式ＩＶｂ、式Ｖまたは式ＶＩの化合物を含む組成物を提供する。
一態様において、本発明は、対象において抗原に対する免疫応答を増強するために使用するための、式Ｉ、式Ｉａ、式Ｉｂ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式ＩＶａ、式ＩＶｂ、式Ｖまたは式ＶＩの化合物と抗原とを含む組成物を提供する。
一態様において、本発明は、対象においてＴｈ１媒介免疫を誘導または増強するために使用するための、式Ｉ、式Ｉａ、式Ｉｂ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式ＩＶａ、式ＩＶｂ、式Ｖまたは式ＶＩの化合物を含む組成物を提供する。
一態様において、本発明は、対象において抗原に対するＴｈ１媒介免疫を誘導または増強するための、式Ｉ、式Ｉａ、式Ｉｂ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式ＩＶａ、式ＩＶｂ、式Ｖまたは式ＶＩの化合物と抗原とを含む組成物であって、式Ｉまたは式ＩＩの化合物を抗原と同時に、順次にまたは別々に投与するために製剤化される組成物を提供する。
一態様において、本発明は、対象において病原体によって引き起こされる疾患または病態を予防または処置するために使用するための、式Ｉ、式Ｉａ、式Ｉｂ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式ＩＶａ、式ＩＶｂ、式Ｖまたは式ＶＩの化合物を含む組成物を提供する。
一実施形態において、組成物は、式Ｉ、式Ｉａ、式Ｉｂ、式ＩＩ、式ＩＩＩ、式ＩＶ、式ＩＶａ、式ＩＶｂ、式Ｖまたは式ＶＩの化合物の治療有効量を含む。
医薬品の製造における本発明の化合物の使用、および使用のための組成物に関連した本発明の上記態様の実施形態として、以上に述べた処置方法の態様により本明細書に包含される実施形態のすべてが具体的に考えられる。
実施例において調製されたと記載された本発明の化合物は、処置方法、前記方法で使用するための医薬品および組成物の製造における使用について具体的に考えられる。
さらに、本発明の以下の実施形態も、医薬品の製造における本発明の化合物の使用、および使用するための組成物である以上の本発明の態様について考えられる。
一実施形態において、医薬品は、それを必要とする対象に投与するために製剤化され、または投与するための形をとる。一実施形態において、医薬品は、局所、鼻腔内、表皮、経皮、経口もしくは非経口投与するための形をとり、またはそのために製剤化される。一実施形態において、非経口投与は、直接適用、全身、皮下、腹腔内または筋肉内注射、静脈内滴注または注入、吸入、吹送、または髄腔内もしくは脳室内投与からなる群から選択される。一実施形態において、医薬品は、局所投与するために製剤化され、または局所組成物の形をとり、または投与するときに、局所投与される。
一実施形態において、医薬品は、いずれか適切な溶液、好ましくは緩衝液、希釈剤および他の好適な添加剤も含有することができる無菌水性溶液として非経口投与するための形をとり、またはそのために製剤化される。
一実施形態において、医薬品は、経口投与するために製剤化され、または粉末、顆粒、水性懸濁液、水性溶液、非水性懸濁液、非水性溶液、ゲル、スラリー、軟膏、クリーム、スプレー、カプセル、丸剤、ロゼンジ、および錠剤からなる群から選択される、経口投与の形をとる。
経口投与するときには、次の粘稠化剤、矯味剤、希釈剤、乳化剤、分散助剤または結合剤の１種または複数の添加が望ましいことがある。
一実施形態において、医薬品は、局所もしくは直接投与するために製剤化され、または経皮パッチ、皮下植え込み、軟膏、ローション、クリーム、ゲル、滴剤、ペースト、坐剤、スプレー、液体および粉末からなる群から選択される、局所もしくは直接投与するための形をとる。通常の担体、特に医薬用担体、水性、粉末または油性基剤、粘稠化剤などを、この実施形態において必要とされるまたは所望されるように使用することができる。
一実施形態において、直接投与は、直接適用または局所適用である。一実施形態において、直接または局所適用は、医薬品を送達試薬または追加の活性剤と組み合わせた適用を含む。
当業者は、文献を参照して、本明細書に記載されるように医薬品の適切な投与方法を選択することができる。非限定的な例として、アトピー性皮膚炎の処置および予防には局所適用が好ましい。
一実施形態において、医薬品は、追加の活性剤と別々に、同時にもしくは順次に投与するためのものであり、そのために製剤化され、またはそのための形をとる。
非限定的な例として、本発明の組成物に含めることができるまたは本発明において使用するための１種の追加の活性剤は、所望の疾患もしくは病態に有効であるまたは有効であると思われる抗生物質である。
一実施形態において、医薬品は、動物またはその一部分に適用するために製剤化される。一実施形態において、医薬品は、動物またはその一部分に適用するための形をとる。一実施形態において、医薬品は、動物に投与するために製剤化される。一実施形態において、医薬品は、動物に投与するための形をとる。
一実施形態において、動物は、哺乳類である。一実施形態において、哺乳類は、非ヒト哺乳類である。一実施形態において、哺乳類は、ヒトである。
特許明細書、他の外部文書、または他の情報源について言及された本明細書において、これは、全体として本発明の特徴を論じるための状況を提供する目的のものである。特段の記載がない限り、そのような外部文献への言及は、いかなる管轄においてもそのような文献またはそのような情報源が先行技術であり、または当技術分野における共通一般知識の一部分を成すということを承認するものとして解釈されるべきでない。
次に、本発明を、以下の実施例を参照することにより非限定的に説明する。
一般方法
化学：別段の記載がない限り、すべての反応は、アルゴン雰囲気下で行った。アセトン、ヨウ化メチル、１－ヨードヘプタンおよび１－ヨードブタンは蒸留し、モレキュラーシーブ（４Å）上で保存した。２，４－ジヒドロキシ安息香酸メチル（ＢＤＨ社）、４－ヒドロキシ安息香酸メチル（ＢＤＨ社）、１－ブロモオクタデカン（Ａｌｄｒｉｃｈ社）、ＴＢＡＩ（Ｒｉｅｄｅｌ－ｄｅ Ｈａｅｎ社）、臭化ベンジル（Ａｌｄｒｉｃｈ社）、メタノール（Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）、水酸化ナトリウム（Ｖｉｃｋｅｒｓ社）、Ｋ２ＣＯ３（Ｐａｎｒｅａｃ社）、エタノール（Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）、ＥＤＣＩ（Ｃｈｅｍ Ｉｍｐｅｘ社）、ＤＭＡＰ（Ｌａｂ Ｓｕｐｐｌｙ社）、トルエン（ＲＯＭＩＬ社）、Ｐｄ（ＯＨ）２（Ａｌｄｒｉｃｈ社）、ＣＨ２Ｃｌ２（Ｆｉｓｃｈｅｒ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）、ピリジン（ＲＯＭＩＬ社）、Ｃ５Ｄ５Ｎ（Ａｐｏｌｌｏ社）、ＣＤＣｌ３（Ａｌｄｒｉｃｈ社）、ＣＤ３ＯＤ（Ｃａｍｂｒｉｄｇｅ Ｉｓｏｔｏｐｅｓ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ Ｉｎｃ．社）、Ｈ２（ＢＯＣ社）、ＥｔＯＡｃ（Ｐｕｒｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ社）、および石油エーテル（Ｐｕｒｅ Ｓｃｉｅｎｃｅ社）は、受け入れたままの状態で使用した。２，２’，３，３’，４，４’－Ｈｅｘａ－Ｏ－ベンジル－α，α’－Ｄ－トレハロースは、文献（Ｋｈａｎら、２０１１年）の手順に従って調製した。
２，４－ジヒドロキシ安息香酸メチル（Ｃａｒｔａら、２０１３年）および２，４－ジヒドロキシ－６－メチル安息香酸エチル（Ｂａｉｒｄら、２００９年）を改変した文献の手順に従って調製した。溶媒はすべて、減圧下で蒸発させることによって除去した。反応は、Ｍａｃｈｅｒｅｙ－Ｎａｇｅｌシリカゲルをコートしたプラスチックシート（０．２０ｍｍ、蛍光指示薬ＵＶ２５４を含む）を用いて、ＥｔＯＨ中１０％Ｈ２ＳＯ４に浸漬し、次に炭化し、ＫＭｎＯ４溶液（Ｈ２Ｏ中２％）に浸漬し、またはモリブデン酸アンモニウムセリウム溶液に浸漬し、ＵＶ吸収（２５４ｎｍ）による検出でＴＬＣ分析することによって監視した。カラムクロマトグラフィーは、Ｐｕｒｅ Ｓｃｉｅｎｃｅシリカゲル（４０～６３μｍ）を使用して行い、サイズ排除クロマトグラフィーは、親油性セファデックス（２５～１００μｍ、Ｓｉｇｍａ社）を使用して行った。高分解能質量スペクトルは、Ａｇｉｌｅｎｔ ６５３０ Ｑ－ＴＯＦ質量分析計を用いて、ＪｅｔＳｔｒｅａｍエレクトロスプレーイオン化源を正および負モードで利用して記録した。旋光度は、Ａｕｔｏｐｏｌ ＩＩまたはＩＶ（Ｒｕｄｏｌｐｈ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ａｎａｌｙｔｉｃａｌ社）を用いて、５８９ｎｍ（ナトリウムｄ線）で記録した。赤外スペクトルは、Ｂｒｕｋｅｒ Ｐｌａｔｉｎｕｍ ＡＴＲを使用して薄膜として記録し、波数（ｃｍ－１）で報告する。核磁気共鳴スペクトルは、５００または６００ＭＨｚで動作するｖａｒｉａｎ ＩＮＯＶＡを使用してＣ５Ｄ５Ｎ、ＣＤ３ＯＤ、またはＣＤＣｌ３中、２０℃で記録した。化学シフトは、残留溶媒ピークに対してｐｐｍ（δ）で示す。ＮＭＲピークの帰属は、ＣＯＳＹ、ＨＳＱＣ、およびＨＭＢＣ ２Ｄ実験を使用して行った。融点は、Ｇａｌｌｅｎｋａｍｐ融点測定装置を使用して得られた。
マウス：Ｃ５７ＢＬ／６野生型、Ｍｉｎｃｌｅ－／－およびＯＴ－ＩＩマウスを、Ｍａｌａｇｈａｎ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ ｏｆ Ｍｅｄｉｃａｌ Ｒｅｓｅａｒｃｈ（Ｎｅｗ Ｚｅａｌａｎｄ）または九州大学（日本）における通常の動物施設で飼育および収容した。実験に使用されたマウスはすべて、８～１２週齢であり、実験手順は、Ｖｉｃｔｏｒｉａ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ａｎｉｍａｌ Ｅｔｈｉｃｓ Ｃｏｍｍｉｔｔｅｅまたは九州大学医学研究院の動物実験倫理委員会により認可された。
エンドトキシン試験：Ｐｉｅｒｃｅリムルスアメボサイトライセート（ＬＡＬ）発色性エンドトキシン定量化キット（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）を使用することによって、合成糖脂質はすべて、≦０．１ＥＵ／ｍＬの感度でエンドトキシン不含であることが確認された。
リガンドコートプレートの調製：ブラルテミシン類似体９ａ～９ｉ、ＴＤＭ（Ｃａｒｂｏｓｙｎｔｈ、Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ社）、およびＴＤＢ１４をＣＨＣｌ３：ＭｅＯＨ（２：１、１ｍＭ）に溶解し、イソプロパノール（０．０５ｍＭ）に希釈し、９６ウェルプレート（２０μＬ／ウェル）に添加した。溶媒を蒸発させ、コートしたプレートを直ちに使用した。
インビトロＭｉｎｃｌｅ結合アッセイ：ｍＭｉｎｃｌｅ－およびｈＭｉｎｃｌｅ－Ｉｇ融合タンパク質の調製は先に記載した。プレートにコートした糖脂質９ａ～ｉ、ＴＤＢ、およびＴＤＭをｈＭｉｎｃｌｅ－Ｉｇ、ｍＭｉｎｃｌｅ－Ｉｇ、またはｈＩｇＧ１－Ｆｃ（Ｉｇ）と共にインキュベートした［結合バッファー（２０ｍＭ Ｔｒｉｓ－ＨＣｌ、１５０ｍＭ ＮａＣｌ、１ｍＭ ＣａＣｌ２、２ｍＭ ＭｇＣｌ２、ｐＨ７．０）中３μｇ／ｍＬ］。結合したタンパク質の検出は、抗ｈＩｇＧ－ＨＲＰとのインキュベーション、次に、比色基質の添加および４５０ｎｍにおけるＯＤの測定を行うことにより達成された。バックグラウンドは、ｈＩｇＧ１－ＦｃのＯＤ４５０値を融合タンパク質のＯＤ４５０値から差し引くことによって考慮した。
２Ｂ４－ＮＦＡＴ－ＧＦＰレポーター細胞：ｍＭｉｎｃｌｅ＋ＦｃＲγ、ｈＭｉｎｃｌｅ＋ＦｃＲγ、またはＦｃＲγのみを発現する２Ｂ４－ＮＦＡＴ－ＧＦＰレポーター細胞は先に記載した。ＮＦＡＴ－ＧＦＰ ２Ｂ４レポーター細胞を、リガンドコートプレート（０．０１、０．１、または１ｎｍｏｌ／ウェル）と共に１８時間インキュベートした。レポーター細胞を回収し、ヨウ化プロピジウムで染色し、フローサイトメトリー（ＦＡＣＳ Ｃａｌｉｂｕｒ社）を使用して、ＮＦＡＴ－ＧＦＰ発現を分析した。
マウス骨髄由来のマクロファージ：マウス骨髄由来のマクロファージの調製では、骨髄細胞をＣ５７ＢＬ／６マウスの脛骨および大腿骨から収集し、５０ｎｇ／ｍＬのＧＭ－ＣＳＦ（クローンＸ６３／ＧＭ－ＣＳＦマウス細胞）を補充した完全ＲＰＭＩ培地［１０％熱失活ウシ胎仔血清（Ｇｉｂｃｏ社）、１００単位／ｍＬのペニシリン－ストレプトマイシン（Ｇｉｂｃｏ社）、および２ｍＭ Ｇｌｕｔａｍａｘ（Ｇｉｂｃｏ社）を含むＲＰＭＩ－１６４０（Ｇｉｂｃｏ社）］中（２５０，０００細胞／ｍＬ）で培養した。細胞を３７℃（５％ＣＯ２）で８日間インキュベートした（３日目および６日目に培地の半分を交換することによって、細胞に補給した）。８日目に、培地をすべて除去し、細胞をＤｕｌｂｅｃｃｏリン酸緩衝食塩水（ＤＰＢＳ、Ｇｉｂｃｏ社）で洗浄して、軽く付着したいかなる細胞も除去した。ＳｔｅｍＰｒｏ Ａｃｕｔａｓｅ（１ｍＬ／ウェル、室温で１５分間、Ｇｉｂｃｏ社）でＢＭＤＭを回収し、プレコート９６ウェルプレートに播種した。２４時間後に、上澄みを収集し、サイトカイン／ケモカイン産生について分析した。
サイトカイン分析：ＩＬ－１β、ＩＦＮ－γ、ＩＬ－６、ＴＮＦ－α（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社）、ＩＬ－１７、およびＭＩＰ－２（Ｒ＆Ｄ社）レベルを、製造業者の指示書に従ってサンドイッチＥＬＩＳＡにより決定した。
指定部位突然変異誘発：ＱｕｉｋＣｈａｎｇｅ（商標）指定部位突然変異誘発キット、コドン修飾プライマー、および鋳型プラスミドｐＭＸ－ＩＲＥＳ－ｈＣＤ８－ｈＭｉｎｃｌｅを使用して、指定部位突然変異誘発を行った。１８３位におけるアミノ酸変異に対して使用したプライマーセットは、５’－ＧＧＡＣＴＧＴＧＣＣＡＣＣＡＴＧＧＣＡＧＡＣＴＣＴＴＣＡＡＡＣＣＣＡＡ－３’および５’－ＴＴＧＧＧＴＴＴＧＡＡＧＡＧＴＣＴＧＣＣＡＴＧＧＴＧＧＣＡＣＡＧＴＣＣ－３’であった。ＰＣＲ増幅は、ＰｆｕＴｕｒｂｏ ＤＮＡポリメラーゼを用いて、９５℃で３０秒、５５℃で１分および６８℃で７分を１８サイクル行った。この変異導入に成功したことは、ＤＮＡシーケンシングによって確証された。ポリエチレンイミン（Ｐｏｌｙｓｃｉｅｎｃｅｓ社）を使用して、変異遺伝子をフェニックス細胞にトランスフェクトし、次いでレトロウイルス媒介感染を使用して、ＦｃＲγのみ発現するＮＦＡＴ－ＧＦＰ ２Ｂ４細胞に導入した。
抗体：Ｍｉｎｃｌｅ発現は、抗ヒトＭｉｎｃｌｅ抗体［（１３Ｄ１０－Ｈ１１）、ビオチン標識キット（ＤＯＪＩＮＤＯ社）］およびＳＡ－ＰＥ（ＢｉｏＬｅｇｅｎｄ社）を使用して、フローサイトメトリー（ＦＡＣＳ Ｃａｌｉｂｕｒ社）で分析した。
ＢＭＤＣ－ＯＴ－ＩＩ Ｔ細胞共培養：プレートにコートした糖脂質（glycolipd）（０．１ｎｍｏｌ／ウェル）またはｉＰｒＯＨのみ（２０μＬ／ウェル）を用い、ＯＶＡ濃度（０、０．１、または１μＭ）を増加させつつ、ＯＴ－ＩＩ細胞（１×１０５細胞／１００μＬ）とＢＭＤＣ（１×１０４細胞／１００μＬ）の混合物を刺激した。４８または７２時間後に、上澄みを収集し、ＥＬＩＳＡを使用して、ＩＦＮ－γおよびＩＬ－１７のレベルを決定した。
遅延型過敏：ＯＶＡのみ（２００μｇ）、ＯＶＡ＋ＴＤＢ（ＯＶＡ＝２００μｇ、ＴＤＢ＝０．３μｍｏｌ）、ＯＶＡ＋９ａ（ＯＶＡ＝２００μｇ、９ａ＝０．３μｍｏｌ）を含有するまたはＯＶＡを含有しない水中油型乳濁液（鉱油／Ｔｗｅｅｎ－８０／ＰＢＳ、９：１：９０（ｖ／ｖ／ｖ））の皮下注射により、マウスを感作させた。７日後、マウスにＯＶＡ（１００μｇ／足蹠）を負荷し、さらに７日後、マウスを屠殺し、それらの脾臓を回収した。インビトロ再刺激では、脾細胞をＯＶＡで再刺激し、脾細胞（spenocyte）数（３時間後４５０ｎｍにおいて測定、Ｃｅｌｌ Ｃｏｕｎｔ Ｒｅａｇｅｎｔ ＳＦ、Ｎａｃａｌａｉ Ｔｅｓｑｕｅ Ｉｎｃ．社）、ＩＦＮ－γ産生、およびＩＬ－１７産生について分析した。ノギス（venier caliper）を使用して、足蹠腫脹を負荷前、負荷２４時間後、および負荷４８時間後に測定した。０、７、および１４日目に、各マウスから血清を収集し、ＨＲＰ共役ヤギ抗マウスＩｇＧ（ＧＥ Ｈｅａｌｔｈ－ｃａｒｅ社）、ＩｇＧ１、ＩｇＧ２ｂ、ＩｇＧ２ｃ、およびＩｇＧ３（ＳｏｕｔｈｅｒｎＢｉｏｔｅｃ社）を使用して、ＥＬＩＳＡによりＯＶＡ特異的抗体価について分析した。４５０ｎｍにおける吸光度を血清濃度のｌｏｇに対してプロットすることによって、ＥＣ５０を定義した。ＧｒａｐｈＰａｄ Ｐｒｉｓｍ７（ＧｒａｐｈＰａｄ Ｓｏｆｔｗａｒｅ社）を使用して、抗体滴定曲線をプロットした。
統計：すべての統計解析に二元配置分散分析を使用した（Ｐｒｉｓｍ７）。
実施例１
本発明の化合物の調製
出発物質の調製
４－Ｏ－アルキル－ベンゾエート合成の一般手順：ベンゾエート（１当量）のアセトン（２０ｍＬ）溶液に、Ｋ２ＣＯ３（１．４～２当量）、ハロゲン化アルキル（１．２～１．５当量）およびＴＢＡＩ（４－Ｏ－オクタデシルオキシ－ベンゾエートのみの場合、０．０５～０．１当量）を添加した。混合物を、反応が完了するまで（ＴＬＣ分析により計測して、１８～４８時間）還流させながら加熱した。反応混合物を室温に冷却し、減圧下で濃縮した。得られた残渣を、グラジエントシリカ－ゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテルから石油エーテル：ＥｔＯＡｃ；９：１（ｖ／ｖ））を使用して精製した。
２－ヒドロキシ－４－メトキシ安息香酸メチル
Figure 0007360385000026
２，４－ジヒドロキシ安息香酸メチル（４００ｍｇ、２．３９ｍｍｏｌ）、ヨウ化メチル（０．１９ｍＬ、３．１２ｍｍｏｌ）、およびＫ２ＣＯ３（５２８ｍｇ、３．８２ｍｍｏｌ）を４－Ｏ－アルキル－ベンゾエート合成の一般手順に供することによって、表題化合物を透明な油（３９０ｍｇ、２．１４ｍｍｏｌ、９０％）として得た。
４－ブトキシ－２－ヒドロキシ安息香酸メチル
Figure 0007360385000027
２，４－ジヒドロキシ安息香酸メチル（２０５ｍｇ、１．２２ｍｍｏｌ）、１－ヨードブタン（０．２０ｍＬ、１．５５ｍｍｏｌ）、およびＫ２ＣＯ３（２９１ｍｇ、２．１１ｍｍｏｌ）を４－Ｏ－アルキル－ベンゾエート合成の一般手順に供することによって、表題化合物を透明な油（２４８ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ、９０％）として得た。
４－（ヘプチルオキシ）－２－ヒドロキシ安息香酸メチル
Figure 0007360385000028
２，４－ジヒドロキシ安息香酸メチル（３１０ｍｇ、１．８４ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（３９５ｍｇ、２．８６ｍｍｏｌ）、および１－ヨードヘプタン（０．３８ｍＬ、２．３１ｍｍｏｌ）を４－Ｏ－アルキル－ベンゾエート合成の一般手順に供することによって、表題化合物を無色油（４７９ｍｇ、１．８０ｍｍｏｌ、９８％）として得た。
２－ヒドロキシ－４－（オクタデシルオキシ）安息香酸メチル
Figure 0007360385000029
２，４－ジヒドロキシ安息香酸メチル（３５７ｍｇ、２．１２ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（４２９ｍｇ、３．１０ｍｍｏｌ）、１－ブロモオクタデカン（８３６ｍｇ、２．５０ｍｍｏｌ）、およびＴＢＡＩ（７１ｍｇ、０．１９ｍｍｏｌ）を４－Ｏ－アルキル－ベンゾエート合成の一般手順に供することによって、表題化合物をアモルファス灰白色固体（６９５ｍｇ、１．６５ｍｍｏｌ、７８％）として得た。
４－（ヘプチルオキシ）－安息香酸メチル
Figure 0007360385000030
４－ヒドロキシ安息香酸メチル（５５０ｍｇ、３．６２ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（１．０１ｇ、７．３３ｍｍｏｌ）、および１－ヨードヘプタン（０．７７ｍＬ、４．７０ｍｍｏｌ）を４－Ｏ－アルキル－ベンゾエート合成の一般手順に供することによって、表題化合物をアモルファス白色固体（８５３ｍｇ、３．４１ｍｍｏｌ、９４％）として得た。
４－（オクタデシルオキシ）安息香酸メチル
Figure 0007360385000031
４－ヒドロキシ安息香酸メチル（４０６ｍｇ、２．６７ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（５６５、４．０９ｍｍｏｌ）、１－ブロモオクタデカン（１．３１ｇ、３．９２ｍｍｏｌ）、およびＴＢＡＩ（１０１ｍｇ、０．２７ｍｍｏｌ）を４－Ｏ－アルキルベンゾエート合成の一般手順に供することによって、表題化合物をアモルファス白色固体（９６８ｍｇ、２．３９ｍｍｏｌ、９０％）として得た。
２－ヒドロキシ－６－メチル－４－（オクタデシルオキシ）安息香酸メチル
Figure 0007360385000032
２，４－ジヒドロキシ－６－メチル安息香酸エチル（５００ｍｇ、２．５５ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（４７８ｍｇ、３．４６ｍｍｏｌ）、１－ブロモオクタデカン（１．０４７、３．１４ｍｍｏｌ）、およびＴＢＡＩ（５０ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）を４－Ｏ－アルキル－ベンゾエート合成の一般手順に供することによって、表題化合物をアモルファス淡黄色固体（１．１３ｇ、２．５２ｍｍｏｌ、９９％）として得た。
ベンジル化の一般手順：ベンゾエート（１当量）のアセトン（２０ｍＬ）溶液に、Ｋ２ＣＯ３（１．２～３当量）、臭化ベンジル（１．２～３当量）、およびＴＢＡＩ（０．０３～０．１当量）を添加した。得られた混合物を１８時間還流し、室温に冷却し、真空濃縮した。次いで、残渣を、シリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテルから石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、４：１（ｖ／ｖ））を使用して精製した。
２，４－ビス（ベンジルオキシ）安息香酸メチル
Figure 0007360385000033
２，４－ジヒドロキシ安息香酸メチル（１７８ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ）、臭化ベンジル（０．４１ｍＬ、３．４６ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（４７８ｍｇ、３．４６ｍｍｏｌ）、およびＴＢＡＩ（４３ｍｇ、０．１２ｍｍｏｌ）をベンジル化の一般手順に供することによって、表題化合物をアモルファス黄色固体（３７８ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ、９４％）として得た。
２，４－ビス（ベンジルオキシ）－６－メチル安息香酸エチル
Figure 0007360385000034
２，４－ジヒドロキシ－６－メチル安息香酸エチル（３００ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（５１７ｍｇ、３．７４ｍｍｏｌ）、臭化ベンジル（０．４７ｍＬ、３．８２ｍｍｏｌ）をベンジル化の一般手順に供することによって、表題化合物をアモルファス白色固体（５６６ｍｇ、１．５０ｍｍｏｌ、９８％）として得た。
２－（ベンジルオキシ）－４－メトキシ安息香酸メチル
Figure 0007360385000035
２－ヒドロキシ－４－メトキシ安息香酸メチル（２９０ｍｇ、１．５９ｍｍｏｌ）、臭化ベンジル（０．２６ｍＬ、２．０７ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２９７ｍｇ、２．１５ｍｍｏｌ）、およびＴＢＡＩ（５５ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）をベンジル化の一般手順に供することによって、表題化合物を淡黄色油（４２２ｍｇ、１．５５ｍｍｏｌ、９７％）として得た。
２－（ベンジルオキシ）－４－ブトキシ安息香酸メチル
Figure 0007360385000036
４－ブトキシ－２－ヒドロキシ安息香酸メチル（２４３ｍｇ、１．０８ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（２４０ｍｇ、１．７３ｍｍｏｌ）、臭化ベンジル（０．２１ｍｍｏｌ、１．７３ｍｍｏｌ）、およびＴＢＡＩ（１３ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ）をベンジル化の一般手順に供することによって、表題化合物を白色結晶固体（３１２ｍｇ、０．９９ｍｍｏｌ、９２％）として得た。
２－（ベンジルオキシ）－４－ヘプチルオキシ安息香酸メチル
Figure 0007360385000037
４－（ヘプチルオキシ）－２－ヒドロキシ安息香酸メチル（２７０ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ）、臭化ベンジル（０．１５ｍＬ、１．２１ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（１６７ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）、およびＴＢＡＩ（２８ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ）をベンジル化の一般手順に供することによって、表題化合物（３１８ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ、８８％）を無色油として単離した。
２－（ベンジルオキシ）－４－（オクタデシルオキシ）安息香酸メチル
Figure 0007360385000038
２－ヒドロキシ－４－（オクタデシルオキシ）安息香酸メチル（２５０ｍｇ、０．５９ｍｍｏｌ）、臭化ベンジル（０．１２ｍＬ、０．９５ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（１３９ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ）、およびＴＢＡＩ（２２ｍｇ、０．０５９ｍｍｏｌ）をベンジル化の一般手順に供することによって、表題化合物（２９６ｍｇ、０．５８ｍｍｏｌ、９８％）をアモルファス灰白色固体として単離した。
２－（ベンジルオキシ）－６－メチル－４－（オクタデシルオキシ）安息香酸エチル
Figure 0007360385000039
２－ヒドロキシ－６－メチル－４－（オクタデシルオキシ）安息香酸エチル（０．９５ｇ、２．１２ｍｍｏｌ）、臭化ベンジル（０．３８ｍＬ、３．１８ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（４８０ｍｇ、３．４７ｍｍｏｌ）、およびＴＢＡＩ（８０ｍｇ、０．２１ｍｍｏｌ）をベンジル化の一般手順に供することによって、表題化合物（６２２ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ、５４％）をアモルファス固体として単離した。
エステル加水分解の一般手順：ベンゾエートのＭｅＯＨ（２０ｍＬ）溶液に、ＮａＯＨ（５Ｍ、５ｍＬ）を添加し、得られた溶液を終夜還流した。反応が（ＴＬＣにより計測して）完了したら、過剰のＭｅＯＨを真空除去した。得られた懸濁液を水で希釈し、濃ＨＣｌで酸性化し、ＥｔＯＡｃで抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。
２－（ベンジルオキシ）－４－（オクタデシルオキシ）安息香酸（４ａ）
Figure 0007360385000040
２－（ベンジルオキシ）－４－（オクタデシルオキシ）安息香酸メチル（２６７ｍｇ、０．５２ｍｍｏｌ）をベンゾエート加水分解の一般手順に供することによって、表題化合物をアモルファス淡橙色固体（１７１ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ、６５％）として得た。
２－（ベンジルオキシ）－４－（ヘプチルオキシ）安息香酸（４ｂ）
Figure 0007360385000041
２－（ベンジルオキシ）－４－（ヘプチルオキシ）安息香酸メチル（５００ｍｇ、０．９８ｍｍｏｌ）をベンゾエート加水分解の一般手順に供することによって、表題化合物をアモルファス淡黄色固体（４３０ｍｇ、０．８７ｍｍｏｌ、８９％）として得た。
２－（ベンジルオキシ）－４－ブトキシ安息香酸（４ｃ）
Figure 0007360385000042
２－ビス（ベンジルオキシ）－４－ブトキシ安息香酸メチル（３２０ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）をベンゾエート加水分解の一般手順に供することによって、表題化合物をアモルファス白色固体（２６７ｍｇ、０．８９ｍｍｏｌ、８７％）として得た。
２－（ベンジルオキシ）－４－メトキシ安息香酸（４ｄ）
Figure 0007360385000043
２－ビス（ベンジルオキシ）－４－メトキシ安息香酸メチル（５１１ｍｇ、１．８８ｍｍｏｌ）をベンゾエート加水分解の一般手順に供することによって、表題化合物を淡黄色固体（４５０ｍｇ、１．７４ｍｍｏｌ、９３％）として得た。
２，４－ビス（ベンジルオキシ）安息香酸（４ｅ）
Figure 0007360385000044
２，４－ビス（ベンジルオキシ）安息香酸メチル（４３１ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）をベンゾエート加水分解の一般手順に供することによって、表題化合物をアモルファス灰白色固体（３８４ｍｇ、１．１５ｍｍｏｌ、９３％）として得た。
４－（オクタデシルオキシ）安息香酸（５ａ）
Figure 0007360385000045
４－（オクタデシルオキシ）安息香酸メチル（９６２ｍｇ、２．３８ｍｍｏｌ）をベンゾエート加水分解の一般手順に供することによって、表題化合物をアモルファス白色固体（６３８ｍｇ、１．６３ｍｍｏｌ、６９％）として得た。
４－（ヘプチルオキシ）安息香酸（５ｂ）
Figure 0007360385000046
４－（ヘプチルオキシ）安息香酸メチル（３５３ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）をベンゾエート加水分解の一般手順に供することによって、表題化合物をアモルファス白色固体（２８０ｍｇ、１．１９ｍｍｏｌ、８４％）として得た。
２－（ベンジルオキシ）－６－メチル－４－（オクタデシルオキシ）安息香酸（６ａ）
Figure 0007360385000047
２－（ベンジルオキシ）－６－メチル－４－（オクタデシルオキシ）安息香酸エチル（５９８ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）をベンゾエート加水分解の一般手順に供することによって、表題化合物をアモルファス灰白色固体（４９４ｍｇ、０．９７ｍｍｏｌ、８７％）として得た。
２，４－ビス（ベンジルオキシ）－６－メチル安息香酸（６ｂ）
Figure 0007360385000048
２，４－ビス（ベンジルオキシ）安息香酸エチル（５９０ｍｇ、１．５７ｍｍｏｌ）をベンゾエート加水分解の一般手順に供することによって、表題化合物をアモルファス灰白色固体（５１７ｍｇ、１．４８ｍｍｏｌ、９４％）として得た。
本発明の化合物の調製
エステル化の一般手順：ジオール７（１当量）およびカルボン酸（４．５当量）をトルエン（２回×２０～４０ｍＬ／ｍｍｏｌ）と共蒸発させ、次いで乾燥トルエン（１０～２０ｍＬ／ｍｍｏｌ）に溶解した。ＥＤＣＩ（６．５～６．６当量）およびＤＭＡＰ（１当量）を添加し、反応混合物を６０℃で終夜撹拌した。追加の試薬を必要に応じて添加した。それらについては、個々の手順で詳述する。反応が（ＴＬＣ分析により計測して）完了したら、反応混合物をＥｔＯＡｃで希釈し、水およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－６，６’－ジ－Ｏ－（２－ベンジルオキシ－４－オクタデシルオキシベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（８ａ）
Figure 0007360385000049
ジオール７（５５ｍｇ、０．０６２ｍｍｏｌ）、酸４ａ（１３６ｍｇ、０．２７４ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（６４ｍｇ、０．３３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１１ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）、およびトルエン（２ｍＬ）を、エステル化の一般手順に記載されている条件に供した。１８時間後に、４ａの追加の一部分（２１ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ）を添加してから、一般手順を続けた。得られた残渣をグラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、１９：１－９：１（ｖ／ｖ））により精製して、表題化合物を無色油（７５ｍｇ、０．０４１ｍｍｏｌ、６６％）として得た。Ｒｆ＝０．５６（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、７：３（ｖ／ｖ））；［α］１７．２ Ｄ＝＋５９．６（ｃ＝１．０、ＣＨ２Ｃｌ２）；
Figure 0007360385000050
ＩＲ（膜）：２９２２、２８５２、１７２３、１６０６、１４５４、１２４４、１０６９、１０２８、９９７、７３２、６９６ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ１１８Ｈ１５０Ｏ１７＋ＮＨ４］＋の計算値：１８５７．１２１１；実測値：１８５７．１２２３。
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－６，６’－ジ－Ｏ－（２－ベンジルオキシ－４－ヘプチルオキシベンゾエート）－α，α’－Ｄ－トレハロース（８ｂ）
Figure 0007360385000051
ジオール７（１１４ｍｇ、０．１２９ｍｍｏｌ）、酸４ｂ（１９９ｍｇ、０．５８１ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（１６１ｍｇ、０．８３９ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１６ｍｇ、０．１２９ｍｍｏｌ）およびトルエン（３ｍＬ）を、エステル化の一般手順に記載されている条件に供した。得られた油をグラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、９：１－５：１（ｖ／ｖ））により精製して、表題化合物を無色油（１３８ｍｇ、０．１０３ｍｍｏｌ、７０％）として得た。Ｒｆ＝０．３６（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、４：１（ｖ／ｖ））；［α］２１．１ Ｄ＝＋７４．６（ｃ＝１．０、ＣＨ２Ｃｌ２）；
Figure 0007360385000052
ＩＲ（膜）：３０３１、２９２８、２８５７、１７２２、１６０６、１５７４、１５２４、１４９８、１４５４、１４３２、１３７８、１２４３、１０７０、１０７０、９９７、７３４、６９６ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ９６Ｈ１０６Ｏ１７＋ＮＨ４］＋の計算値：１５４８．７７７４；実測値：１５４８．７７８２。
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－６，６’－ジ－Ｏ－（２－ベンジルオキシ－４－ブトキシベンゾイル）－α，α－Ｄ－トレハロース（８ｃ）
Figure 0007360385000053
ジオール７（１０３ｍｇ、０．１１７ｍｍｏｌ）、酸４ｃ（１５８ｍｇ、０．５２７ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（１５０ｍｇ、０．７８２ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１４．３ｍｇ、０．１１７ｍｍｏｌ）およびトルエン（２．５ｍＬ）を、エステル化の一般手順に記載されている条件に供した。得られた残渣をグラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、９：１－１７：３（ｖ／ｖ））により精製して、表題化合物を透明な油（１０３ｍｇ、０．０７１ｍｍｏｌ、６１％）として得た。Ｒｆ＝０．６７（ＣＨ２Ｃｌ２：ＥｔＯＡｃ、１９：１（ｖ／ｖ））；［α］１６ Ｄ＝＋７５（ｃ＝１．０、ＣＨ２Ｃｌ２）；
Figure 0007360385000054
ＩＲ（膜）：２９３２、２８７２、１７２２、１６０６、１４９８、１４５４、１４３３、１０７０、６９７ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ９０Ｈ９４Ｏ１７＋Ｈ］＋のｍ／ｚ計算値：１４４７．６５６４；実測値：１４４７．６５９２。
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－６，６’－ジ－Ｏ－（２－ベンジルオキシ－４－メトキシベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（８ｄ）
Figure 0007360385000055
ジオール７（１４９ｍｇ、０．１６９ｍｍｏｌ）、酸４ｄ（１９６ｍｇ、０．７６０ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（１８６ｍｇ、０．９７０ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（２１ｍｇ、０．１７２ｍｍｏｌ）を、エステル化の一般手順に記載されている条件に供した。１８時間後に、４ｄの追加の一部分（２０ｍｇ、０．０７７ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（２２ｍｇ、０．１１ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（１０ｍｇ、０．０８２ｍｍｏｌ）を添加してから、一般手順を続けた。得られた残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、９：１－３：１（ｖ／ｖ））および親油性セファデックス（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、１：１（ｖ／ｖ））を使用して精製して、表題化合物を無色油（１５０ｍｇ、０．１１０ｍｍｏｌ、６５％）として得た。Ｒｆ＝０．６０（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、１：１（ｖ／ｖ））；［α］１８ Ｄ＝＋７９（ｃ＝１．０、ＣＨ２Ｃｌ２）；
Figure 0007360385000056
ＩＲ（膜）：３０３１、２９３４、１７２２、１６０８、１５７５、１４９８、１４４３、１４３０、１３８０、１３２７、１２４８、１１４７、１０２８、７３５ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ８４Ｈ８２Ｏ１７＋ＮＨ４］＋のｍ／ｚ計算値：１３８０．５８９０；実測値：１３８０．５９４６。
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－６，６’－ジ－Ｏ－（２，４－ビス（ベンジルオキシ）ベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（８ｅ）
Figure 0007360385000057
ジオール７（１３６ｍｇ、０．１５４ｍｍｏｌ）、酸４ｅ（２３１ｍｇ、０．６９１ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（１９５ｍｇ、１．０２ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１９ｍｇ、０．１５４ｍｍｏｌ）、およびトルエン（２ｍＬ）を、エステル化の一般手順に記載されている条件に供した。グラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテルから石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、１７：３（ｖ／ｖ））および親油性セファデックス（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、１：１（ｖ／ｖ））により、残渣を精製して、表題化合物を無色油（１３６ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ、５８％）として得た。Ｒｆ＝０．６３（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、２４：１（ｖ／ｖ））；［α］１８．４ Ｄ＝＋５５．８（ｃ＝１．０、ＣＨ２Ｃｌ２）；
Figure 0007360385000058
ＩＲ（膜）：３０３０、２８７０、１７２１、１６０６、１５７５、１４９８、１４５４、１２４３、１２１３、１１７５、１０７０、１０２７、９９７、８３６、７３４、６９６ｃｍ－１ ；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ９６Ｈ９０Ｏ１７＋ＮＨ４］＋のｍ／ｚ計算値：１５３２．６５１６；実測値：１５３２．６５７９。
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－６，６’－ジ－Ｏ－（４－オクタデシルオキシベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（８ｆ）
Figure 0007360385000059
ジオール７（３００ｍｇ、０．３４０ｍｍｏｌ）、酸５ａ（５９８ｍｇ、１．５３ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（４５６ｍｇ、２．３８ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（４２ｍｇ、０．３４０ｍｍｏｌ）、およびトルエン（３ｍＬ）を、エステル化の一般手順に記載されている条件に供した。得られた残渣を、グラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、１９：１（ｖ／ｖ））により精製して、表題化合物を淡黄色油（４４２ｍｇ、０．２７２ｍｍｏｌ、８０％）として得た。Ｒｆ＝０．７（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、９：１（ｖ／ｖ））；［α］２３ Ｄ＝＋５５（ｃ＝１．０、ＣＨ２Ｃｌ２）；
Figure 0007360385000060
ＩＲ（膜）：２９２２、２８５２、１７１６、１６０５、１４５４、１２７３、１１６６、１０９６、１０７０、９９６、６９５ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ１０４Ｈ１３８Ｏ１７＋ＮＨ４］＋の計算値：１６４５．０３７４；実測値：１６４５．０３７３。
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－６，６’－ジ－Ｏ－（４－ヘプチルオキシベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（８ｇ）
Figure 0007360385000061
ジオール７（８９ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）、酸５ｂ（１０６ｍｇ、０．４５ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（１２５ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１２ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）、およびトルエン（２ｍＬ）を、エステル化の一般手順に記載されている条件に供した。得られた残渣を、グラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、１：０－１７：３（ｖ／ｖ））を使用して精製して、表題化合物を無色油（１０９ｍｇ、０．０８３ｍｍｏｌ、８３％）として得た。Ｒｆ＝０．５（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、４：１（ｖ／ｖ））；［α］２３ Ｄ＝＋６７（ｃ＝１．０、ＣＨ２Ｃｌ２）；
Figure 0007360385000062
ＩＲ（膜）：３０６４、３０３１、２９２７、２８５６、１７１５、１６０５、１５１０、１４５４、１２５２、１１６６、８４６、７３４、６９６ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ８２Ｈ９８ＮＯ１５］＋の計算値：１３３６．６９３１；実測値：１３３６．６８７０。
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－６，６’－ジ－Ｏ－（２－ベンジルオキシ－６－メチル－４－オクタデシルオキシベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（８ｈ）
Figure 0007360385000063
ジオール７（１１５ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、酸６ａ（２９０ｍｇ、０．５６８ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（１３９ｍｇ、０．７３ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（１７ｍｇ、０．１３９ｍｍｏｌ）、およびトルエン（３ｍＬ）を、エステル化の一般手順に記載されている条件に供した。１８時間後に、８ｈの追加の一部分（８３ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ（２５ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）を添加してから、一般手順を続けた。得られた残渣を、グラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、１９：１－９：１（ｖ／ｖ））を使用して精製して、表題化合物を無色油（１６６ｍｇ、０．０８９ｍｍｏｌ、６８％）として得た。Ｒｆ＝０．８３（ＣＨ２Ｃｌ２）；［α］２２．４ Ｄ＝＋４７．５（ｃ＝１．０、ＣＨ２Ｃｌ２）；
Figure 0007360385000064
ＩＲ（膜）：２９２３、２８５３、１７２８、１６０４、１４９９９７、１３７５、１３２７、１２６２、１１６４、１０９３、１０７１、９９８、７３４、６９６ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ１２０Ｈ１５４Ｏ１７＋Ｈ］＋の計算値：１８６８．１２５９；実測値：１８６８．１２７５。
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－６，６’－ジ－Ｏ－（２，４－ベンジルオキシ－６－メチルベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（８ｉ）
Figure 0007360385000065
ジオール７（１６６ｍｇ、０．１８８ｍｍｏｌ）、酸６ｂ（２９５ｍｇ、０．８４７ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（１９０ｍｇ、０．９９１ｍｍｏｌ）、ＤＭＡＰ（２３ｍｇ、０．１８８ｍｍｏｌ）、およびトルエン（２．５ｍＬ）を、エステル化の一般手順に記載されている条件に供した。１８時間後に、６ｂの追加の一部分（７０ｍｇ、０．２０ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ（３６ｍｇ、０．１８８ｍｍｏｌ）を添加した。さらに１８時間後に、６ｂ（５２ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ）、ＥＤＣＩ（３５ｍｇ、０．１８ｍｍｏｌ）、およびＤＭＡＰ（２０ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）を添加してから、一般手順を続けた。得られた残渣を、グラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、１：０－４：１（ｖ／ｖ））により精製して、表題化合物を無色油（１５０ｍｇ、０．０９７ｍｍｏｌ、５２％）として得た。Ｒｆ＝０．７６（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、１：１（ｖ／ｖ））；［α］２３ Ｄ＝＋６７．８（ｃ＝１．０、ＣＨ２Ｃｌ２）；
Figure 0007360385000066
ＩＲ（膜）：３０３１、２９２６、２８７１、１７２７、１６０３、１４９７、１４５４、１３７２、１３２６、１２６４、１１５９、１０９２、１０７１、９９７、７３５、６９７ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ９８Ｈ９４Ｏ１７＋ＮＨ４］＋の計算値：１５６０．６８２９；実測値：１５６０．６８９４。
脱ベンジル化の一般手順：ベンジルで保護されたトレハロースジエステル（１当量）をＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２（５ｍＬ、１：１（ｖ／ｖ））に溶解した溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃを添加した。反応混合物にＨ２ガスを終夜通気した。反応が（ＴＬＣにより計測して）完了した後、懸濁液をピリジンに希釈し、セライト濾過した。
６，６’－ジ－Ｏ－（２－ヒドロキシ－４－オクタベンジルオキシベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（９ａ）
Figure 0007360385000067
ベンジルで保護されたトレハロース８ａ（１４０ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃを、脱ベンジル化の一般手順に記載されている条件に供した。得られた残渣を、グラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、１：０－９：１（ｖ／ｖ））および親油性セファデックス（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、１：１（ｖ／ｖ））を使用して精製して、表題化合物をアモルファス白色固体（５８ｍｇ、０．０５２ｍｍｏｌ、６８％）として得た。Ｒｆ＝０．３７（ＥｔＯＡｃ）；［α］２１．６ Ｄ＝＋５２（ｃ＝０．１、ピリジン）；
Figure 0007360385000068
ＩＲ（膜）：３４０３、２９１７、２８４９、１６９８、１６６２、１５０４，１３９５、１２５２、１１５１、１０９５、１０７５、１０１７、９８７、８０４、７７０、６７２ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ６２Ｈ１０３Ｏ１７＋Ｈ］＋の計算値：１１１９．７１９０；実測値１１１９．７１６９。
６，６’－ジ－Ｏ－（４－ヘプチルオキシ－２－ヒドロキシベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（９ｂ）
Figure 0007360385000069
ベンジルで保護されたトレハロース８ｂ（１３８ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（８３ｍｇ）を、脱ベンジル化の一般手順に記載されている条件に供した。得られた残渣を、グラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：石油エーテル－ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、４：１－９：１（ｖ／ｖ））を使用して精製して、表題化合物をアモルファス白色固体（６１ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ、８３％）として得た。Ｒｆ＝０．７６（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、４：１（ｖ／ｖ））；［α］２０ Ｄ＝＋４６．０（ｃ＝０．１、ピリジン）；
Figure 0007360385000070
ＩＲ（膜）：３３４０、２９２６、２８５６、１６６８、１１５２、９９１、７７７ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ４０Ｈ５８Ｏ１７＋Ｈ］＋の計算値：８１１．３７４７；実測値：８１１．３７６１。
６，６’－ジ－Ｏ－（２－ヒドロキシ－４－ブトキシベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（９ｃ）
Figure 0007360385000071
ベンジルで保護されたトレハロース８ｃ（８２ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（４９ｍｇ）を、脱ベンジル化の一般手順に記載されている条件に供した。粗材料を、グラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ－ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、１：１－１７：３（ｖ／ｖ））により精製し、表題化合物がアモルファス白色固体（３５ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ、８６％）として得られた。Ｒｆ＝０．２６（ＥｔＯＡｃ）；［α］２０ Ｄ＝＋６９．８（ｃ＝１、ピリジン）；
Figure 0007360385000072
ＩＲ（膜）：３２９３、２９５９、１６６８、１６２２、１５８０、１５０４、１３５１、１２４９、１１５１、１０８４、９９１、７７６ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ４３Ｈ４６Ｏ１７＋Ｈ］＋の計算値：７２７．２８１３；実測値：７２７．２８１３。
６，６’－ジ－Ｏ－（２－ヒドロキシ－４－メトキシベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（９ｄ）
Figure 0007360385000073
ベンジルで保護されたトレハロース８ｄ（８６ｍｇ、０．０６８ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（５２ｍｇ）を、脱ベンジル化の一般手順に供した。得られた残渣を、グラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、１：０－９：１（ｖ／ｖ））により精製し、表題化合物がアモルファス白色固体（２７ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ、６２％）として得られた。Ｒｆ＝０．６６（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、４：１（ｖ／ｖ））；［α］２０ Ｄ＝＋１０３．６（ｃ＝１、ＭｅＯＨ）；
Figure 0007360385000074
ＩＲ（膜）：３２５８、２９１９、１６６４、１６２２、１５０４、１４４１、１３５１、１２４９、１１４９、９８８、８０３ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ２８Ｈ３４Ｏ１７＋Ｎａ］＋の計算値：６６５．１６８８；実測値：６６５．１７１５。
６，６’－ジ－Ｏ－（２，４－ジヒドロキシベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（９ｅ）
Figure 0007360385000075
ベンジルで保護されたトレハロース８ｅ（５８．３ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（３５ｍｇ）を、脱ベンジル化の一般手順に記載されている条件に供した。得られた残渣を、グラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ－ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、４：１－４：１（ｖ／ｖ））により精製して、表題化合物を灰白色固体（２１．８ｍｇ、０．０３５ｍｍｏｌ、９２％）として得た。Ｒｆ＝０．４７（ＭｅＯＨ：ＥｔＯＡｃ、１：４（ｖ／ｖ））；［α］２０ Ｄ＝＋３２．８（ｃ＝０．２５、ピリジン）；
Figure 0007360385000076
ＩＲ（膜）：３２３２、２９２６、１６５７、１６２２、１４５４、１３９３、１３４０、１２５９、１１４７、１０９４、１０７５、１０４３、１０１８、９７７、７７２ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ２６Ｈ４０Ｏ１７＋ＮＨ４］＋の計算値：６３２．１８２１；実測値：６３２．１８２２。
６，６’－ジ－Ｏ－（４－オクタデシルオキシベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（９ｆ）
Figure 0007360385000077
ベンジルで保護されたトレハロース８ｆ（１２２ｍｇ、０．０７５ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（７３ｍｇ）を、脱ベンジル化の一般手順に記載されている条件に供した。得られた残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ－ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、１：１－４：１（ｖ／ｖ））により精製して、表題化合物をアモルファス灰白色固体（４２ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ、５１％）として得た。Ｒｆ＝０．３１（ＥｔＯＡｃ） ［α］２０．０ Ｄ＝＋６７．８（ｃ＝０．１、ピリジン）；
Figure 0007360385000078
ＩＲ（膜）：３４２８、２９１７、２８５０、１７１０、１６８６、１６０７、１５１１、１４６９、１２５４、１１６８、１１００、１０７７、１０５２、１０３６、１０２１、７６９ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ６２Ｈ１０２Ｏ１５＋Ｎａ］＋の計算値：１１０９．７１１１；実測値：１１０９．７１３９。
６，６’－ジ－Ｏ－（４－ヘプチルオキシベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（９ｇ）
Figure 0007360385000079
ベンジルで保護されたトレハロース８ｇ（８７ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（５９ｍｇ）を、脱ベンジル化の一般手順に記載されている条件に供した。得られた残渣を、グラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ－ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ；１：１－４：１（ｖ／ｖ））により精製して、表題化合物をアモルファス白色固体（３７ｍｇ、０．０４８ｍｍｏｌ、７３％）として得た。Ｒｆ＝０．５８（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、４：１（ｖ／ｖ））；［α］２０．０ Ｄ＝＋６２．０（ｃ＝０．１、ピリジン）；
Figure 0007360385000080
ＩＲ（膜）：３３２７、２９１８、２８５０、１７１４、１６０６、１５８５、１４６７、１３６０、１２５４、１１４９、１０８０、１０４２、９８５、７７０ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ４０Ｈ５８Ｏ１５＋ＮＨ４］＋の計算値：７９６．４１１９；実測値：７９６．４１３４。
６，６’－ジ－Ｏ－（４－ヘプチルオキシ－２－ヒドロキシ－６－メチルベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（９ｈ）
Figure 0007360385000081
ベンジルで保護されたトレハロース８ｈ（１３３ｍｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（８０ｍｇ）を、脱ベンジル化の一般手順に記載されている条件に供した。得られた残渣をシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（石油エーテル：ＥｔＯＡｃ－ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、１：１－９：１（ｖ／ｖ））により精製して、表題化合物を白色固体（５６ｍｇ、０．０４９ｍｍｏｌ、６９％）として得た。Ｒｆ＝０．１５（ＥｔＯＡｃ）；［α］２０．８ Ｄ＝＋３９（ｃ＝０．５、ピリジン）；
Figure 0007360385000082
ＩＲ（膜）：３３９０、２９１６、２８４９、１６２６、１６１３、１５７３、１４６８、１２９６、１１０３、９８５、７９５、６９５、６０２ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ６４Ｈ１０６Ｏ１７＋Ｈ］＋の計算値：１１４７．７５０３；実測値：１１４７．７４９７。
ブラルテミシン（９ｉ）
Figure 0007360385000083
ベンジルで保護されたトレハロース８ｉ（８６ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）およびＰｄ（ＯＨ）２／Ｃ（５０ｍｇ）を、脱ベンジル化の一般手順に記載されている条件に供した。得られた残渣を、グラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ：ＡｃＯＨ、９：１：０．１－１７：３：０．１（ｖ／ｖ／ｖ））および親油性セファデックス（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、１：１（ｖ／ｖ））により精製して、９ｉをアモルファス淡黄色固体（３２ｍｇ、０．０５０ｍｍｏｌ、８９％）として得た。Ｒｆ＝０．６６（ＭｅＯＨ：ＥｔＯＡｃ、１：４（ｖ／ｖ））；［α］２０ Ｄ＝＋６７（ｃ＝０．１、ＭｅＯＨ）；
Figure 0007360385000084
ＩＲ（膜）：３３６３、２９３５、１６１９、１５０４、１３７６、１２６１、１２０５、１１５５、１１００、１０７６、１０４６、９９４、７９８、６９６ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ２８Ｈ３４Ｏ１７＋Ｈ］＋の計算値：６４３．１８６９；実測値：６４３．１８６６。
上記の技法を使用して、異なる脂質長を有する一連の４－Ｏ－アルキル、デスメチルおよびデヒドロキシブラルテミシン誘導体を調製した。４－Ｏ－アルキル基の長さを変更するために、以下のスキーム１の通り長（Ｃ１８）、中（Ｃ７）および短（Ｃ４またはＣ１）アルキル鎖を組み込んで、一連の４－アルコキシ－安息香酸誘導体を調製した。
Figure 0007360385000085
スキーム１．試薬および条件 ａ）ＣＨ３（ＣＨ２）１７Ｂｒ／ＴＢＡＩ、ＣＨ３（ＣＨ２）６Ｉ、ＣＨ３（ＣＨ２）３Ｉ、またはＭｅＩ、Ｋ２ＣＯ３、アセトン、還流；ｂ）ＢｎＢｒ、ＴＢＡＩ、Ｋ２ＣＯ３、アセトン、還流；ｃ）ＮａＯＨ（５Ｍ）、ＭｅＯＨ、還流。各ベンゾエートの全収率を括弧内に報告する。
この目的のために、２，４－ジヒドロキシ安息香酸メチル（４）の４位を選択的にアルキル化して、ベンジル保護およびエステル加水分解を行って、３ステップにわたって高い～優れた収率（５０～８７％）で安息香酸誘導体４ａ～ｅを得た。次いで、置換パターンの芳香族環に対する効果について、４－ヒドロキシ安息香酸５の長いおよび中程度の長さのアルキル基によるアルキル化、次に加水分解を行って、２－デオキシ－誘導体５ａおよび５ｂを再び高収率（６２～７９％）で提供することにより考察した。最後に、ブラルテミシンで見られる核となる芳香族残基である２，４－ジヒドロキシ－６－メチル安息香酸エチル（６）のアルキル化、次に、２位のベンジル化およびエステル基の加水分解を行うことにより、ベンジルで保護されたアルコキシベンゾエート６ａが得られた。さらに、ブラルテミシンの全合成の途中(en route)で６をジベンジル化し、加水分解した（→６ｂ）。
上記の安息香酸を用いて、文献の手順（Ｋｈａｎら、２００１年）に従って３ステップで調製された部分保護トレハロース７のエステル化により、最終糖脂質を組み立てた。１－エチル－３－（３－ジメチルアミノプロピル）カルボジイミド（ＥＤＣＩ）および４－（ジメチルアミノ）ピリジン（ＤＭＡＰ）の存在下でエステル化反応を行い、所望のベンジルで保護されたトレハロースジエステル８ａ～ｉを高い収率で得た（表１）。次いで、Ｐｅａｒｌｍａｎ触媒およびＨ２を使用する網羅的脱ベンジル化により、ブラルテミシン（９ｉ）および類似体９ａ～ｈを高い～優れた収率で得た。
Figure 0007360385000086
実施例２
ｍＭｉｎｃｌｅおよびｈＭｉｎｃｌｅの結合および活性化
最初に、実施例１で調製した合成ブラルテミシン類似体がヒトとマウスの両方のＭｉｎｃｌｅに結合する能力について、酵素結合性免疫吸着アッセイ（ＥＬＩＳＡ）で可溶性Ｍｉｎｃｌｅ－Ｉｇ融合タンパク質を使用して試験した（図１ａ）。
ここで、親油性基を欠いている化合物、すなわち４’－Ｏ－メチル－デスメチル－ブラルテミシン（９ｄ）、デスメチル－ブラルテミシン（９ｅ）、およびブラルテミシン（９ｉ）は、短い脂質を含む４’－Ｏ－ブチル－デスメチル－ブラルテミシン（９ｃ）と共に、ｈＭｉｎｃｌｅ－ＩｇともｍＭｉｎｃｌｅ－Ｉｇともあまり結合しなかった。比較すると、Ｃ１８を含む類似体９ａ、９ｆ、および９ｈとＣ７脂質尾部を含む類似体（９ｂおよび９ｇ）は、ヒトおよびマウスの両方の融合タンパク質に対して良好な結合を示した。
実施例３
ＮＦＡＴ－Ｍｉｎｃｌｅレポーター細胞の活性化
実施例１で観察されたＭｉｎｃｌｅ結合が細胞活性化と相互関係があるかどうかを決定するために、ＦｃＲγと結合している(coupled)ｍＭｉｎｃｌｅまたはｈＭｉｎｃｌｅを発現する活性化Ｔ細胞核内因子（ＮＦＡＴ）－緑色蛍光タンパク質（ＧＦＰ）レポーター細胞を、ＴＤＭ、ＴＤＢ、ブラルテミシン（９ｉ）、または類似体９ａ～９ｈでコートしたプレートを使用して刺激した。
レポーター細胞の活性化を、フローサイトメトリーにより監視されるＧＦＰの産生により測定した（図１ｂおよび１ｃ）。
Ｃ１８脂質を組み込んでいる本発明の化合物（９ａ、９ｆ、および９ｈ）は、マウスおよびヒトの両方のＭｉｎｃｌｅ ＮＦＡＴ－ＧＦＰレポーター細胞を用量依存的に強力に活性化し、一方、Ｃ７含有類似体（９ｂおよび９ｇ）も、ｍＭｉｎｃｌｅおよびｈＭｉｎｃｌｅ ＮＦＡＴＧＦＰレポーター細胞を活性化したが、その程度はＣ１８類似体より低かった。
Ｃ４類似体（９ｃ）は、高リガンド濃度でのみｍＭｉｎｃｌｅおよびｈＭｉｎｃｌｅを活性化することができたが、非脂質付加類似体９ｅおよびブラルテミシン（９ｉ）は、ｍＭｉｎｃｌｅを有意に活性化することはなく、９ｄは、高リガンド濃度でｈＭｉｎｃｌｅの活性化をわずかに示しただけであった。
これらの知見は、リガンド結合がＭｉｎｃｌｅ活性化と必ずしも相互関係があるとは言えないということを例示する。リガンド結合とＭｉｎｃｌｅ活性化の間に直接相関性がない理由は不明であるが、機能的受容体がリガンド結合時に立体構造変化する可能性があり、受容体活性化状態および受容体－リガンド親和性が変化することもある。
これらの知見は、ｍＭｉｎｃｌｅおよびｈＭｉｎｃｌｅの配列が高度保存されているにもかかわらず、ｈＭｉｎｃｌｅとｍＭｉｎｃｌｅの間の微妙な種特異的差異も明らかにする。それにもかかわらず、すべての試験濃度で、９ａは、ｈＭｉｎｃｌｅを最も活性化することができた。
実施例４
ＧＭ－ＣＳＦ ＢＭＤＭの活性化
実施例１で調製したブラルテミシン類似体がＡＰＣを誘導して、炎症性サイトカインを産生する能力を検査して、受容体と候補リガンドとの相互作用をより生理的学的な環境において評価した。
最初に、化合物がＧＭ－ＣＳＦ ＢＭＤＭを活性化する能力を、リガンドコートプレートアッセイで炎症性サイトカインＴＮＦ、ＩＬ－６、およびＩＬ－１βならびにケモカインＭＩＰ－２の分泌を監視することによって決定した（図２）。
図示するように、ＢＭＤＭをＣ１８ブラルテミシン誘導体（９ａ、９ｆおよび９ｈ）で刺激することにより、ＴＤＢおよびＴＤＭと同様に、すべてのサイトカインおよびＭＩＰ－２の著しい産生がもたらされた。Ｃ７－誘導体（９ｂおよび９ｇ）は、ＭＩＰ－２、ＩＬ－１β、ＴＮＦ、およびＩＬ－６のわずかな産生をもたらし、一方Ｃ４ブラルテミシン誘導体（９ｃ）は、ＭＩＰ－２を誘導したが、ＴＮＦ、ＩＬ－６、およびＩＬ－１βを誘導しなかった。
非脂質付加誘導体（９ｄおよび９ｅ）およびブラルテミシン自体（９ｉ）は、測定されたサイトカインのいずれの産生も誘導しなかった。
Ｍｉｎｃｌｅの非存在下では、合成リガンドに応答したＭＩＰ－２、ＩＬ－１β、ＴＮＦ、およびＩＬ－６の産生は消失した。これは、Ｍｉｎｃｌｅが、親油性ブラルテミシン誘導体によるＢＭＤＭ活性化を媒介することに関与する主要な受容体であることを示唆する。
実施例５
インビトロにおけるＴｈ１／Ｔｈ１７誘導性アジュバント活性
Ｔｈ１／Ｔｈ１７アジュバントとしてのＣ１８ｄＭｅＢｒａｒ（９ａ）の潜在能力を評価するために、ＯＶＡ特異的ＯＴ－ＩＩ ＴＣＲ Ｔｇマウス由来のＧＭ－ＣＳＦ ＢＭＤＭおよびＴ細胞を、ＴＤＭ（０．０１ｎｍｏｌ／ウェル）、ＴＤＢ（０．０１ｎｍｏｌ／ウェル）、またはＣ１８ｄＭｅＢｒａｒ（９ａ、０．０１ｎｍｏｌ／ウェル）でコートしたプレートで共培養した。細胞をＯＶＡ（０、０．１、および１μＭ）で刺激し、４８時間後に、上澄みを収集した。増強された宿主防御反応を示す重要なＴｈ１サイトカインＩＦＮ－γおよびＴｈ１７サイトカインＩＬ－１７のレベルをＥＬＩＳＡ（図３）により測定した。９ａによって、ＩＬ－１７のＯＶＡ特異的産生が、ＴＤＭおよびＴＤＢより少ない程度ではあるものの有意に増大された。しかし、ＩＦＮ－γの抗原特異的分泌は、９ａでの処理では増強されなかった。
実施例６
インビボにおけるＴｈ１刺激性アジュバント活性
次いで、遅延型過敏反応免疫化プロトコルを使用して、化合物９ａをインビボで評価して、Ｔｈ１抗原特異的応答を誘導するその能力を確認した。この目的のために、４群のＣ５７ＢＬ／６マウスを、ＯＶＡのみ、ＯＶＡ＋Ｃ１８ｄＭｅＢｒａｒ（９ａ）、ＯＶＡ＋ＴＤＢを含有するまたはＯＶＡを含有しない水中油型乳濁液(emulsion)の皮下注射により免疫した。７日後に、マウスにＯＶＡ（一足蹠当たり１００μｇ）を負荷し、さらに７日後に、脾細胞を単離し、３つの濃度（１０、３０、または１００μｇ／ｍＬ）のＯＶＡで再刺激した。免疫応答は、足蹠腫脹、ＩＦＮ－γおよびＩＬ－１７の産生（図４ｂ）、Ｔ細胞増殖（図４ａ）、ならびに抗体価（図４ｃ）を決定することによって測定した。９ａもＴＤＢも、足蹠腫脹もＩＬ－１７産生も誘導しなかったが、Ｃ１８ｄＭｅＢｒａｒ（９ａ）を使用するマウスの免疫化により、異なるＴｈ１プロファイルを有する分極免疫応答が生じた。９ａをアジュバントとして使用すると、抗原特異的ＩＦＮ－γ産生の増加に向かう傾向がすべてのＯＶＡ濃度で観察され、１００μｇ／ｍＬの抗原で再刺激すると、サイトカイン産生が有意に増強した。これとは対照的に、ＭｉｎｃｌｅアゴニストのＴＤＢは、試験したＯＶＡ濃度のいずれでもＩＦＮ－γの著しい増加を導かなかった。Ｃ１８ｄＭｅＢｒａｒ（９ａ）を投与したマウスからは、ＯＶＡ単独を投与したマウスと比べて有意に多数の脾細胞も観察された（図４ａ）。さらに、ＯＶＡ再刺激濃度のすべてにおいて、Ｃ１８ｄＭｅＢｒａｒ（９ａ）はＴＤＢと比べて、細胞数が有意に増加した。これらのインビボアッセイにおけるＴＤＢの限られた効能は、最初に驚くべきことであった。しかし、ＴＤＢのアジュバント活性を検討する研究は、大部分がＴＤＢ：ＤＤＡ（ＣＡＦ０１）リポソーム系に焦点を合わせたものであった（Ｇｒａｍら、２００９年）。したがって、Ｃ１８ｄＭｅＢｒａｒ（９ａ）がＴｈ１免疫応答の増強を導く能力は、さらに一層著しかった。この全免疫プロファイルも免疫マウスによる抗体産生に反映された。Ｃ１８ｄＭｅＢｒａｒ（９ａ）およびＴＤＢは、ＩｇＧ抗体の産生を高めたが、Ｃ１８ｄＭｅＢｒａｒでのみ抗体産生が有意に増加した。産生された抗体の下位クラスに目を向けると、Ｔｈ１関連下位クラスＩｇＧ２ｂおよびＩｇＧ２ｃもＴｈ２関連ＩｇＧ１も、Ｃ１８ｄＭｅＢｒａｒおよびＴＤＢで増加を示した。高いＩｇＧ２ｃ：ＩｇＧ１比は、通常はＴｈ１応答と関連し、より低い比はＴｈ２応答に関連する。Ｃ１８ｄＭｅＢｒａｒで免疫したマウスにおけるＩｇＧ２ｃの産生は、ＯＶＡ単独と比べて３倍増加した。これは、Ｃ１８ｄＭｅＢｒａｒがＴｈ１バイアス免疫応答を誘導するという証拠を提供する。結論として、Ｃ１８ｄＭｅＢｒａｒ（９ａ）は、抗体産生を増強する能力に関してＴＤＢに定性的に似ているが、より強いＴｈ１免疫応答を導く。
実施例７
本発明の別の化合物の調製
出発物質の調製
２－（オクタデシルオキシ）安息香酸メチル
Figure 0007360385000087
アセトン（２５ｍＬ）中２－ヒドロキシ安息香酸メチル（５００ｍｇ、３．２９ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（７０５ｍｇ、５．１０ｍｍｏｌ）、およびＴＢＡＩ（５５ｍｇ、０．１７ｍｍｏｌ）の溶液に、１－ブロモオクタデカン（１．５５ｇ、４．６５ｍｍｏｌ）を添加し、得られた懸濁液を還流させながら終夜撹拌した。翌朝、反応混合物を減圧下で濃縮し、残存する残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－９：１（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）により精製して、表題化合物を灰白色固体（３８３ｍｇ、０．９５ｍｍｏｌ、２９％）として得た。
２－（オクタデシルオキシ）安息香酸
Figure 0007360385000088
２－（オクタデシルオキシ）安息香酸メチル（３８３ｍｇ、０．９４７ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（３０ｍＬ）溶液に、ＮａＯＨ（５ｍＬ、５Ｍ）を添加し、得られた混合物を終夜還流した。翌日、反応混合物を水（２０ｍＬ）で希釈し、濃ＨＣｌでｐＨ１に酸性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮して、表題化合物をアモルファス灰白色固体（３３８、０．８６５ｍｍｏｌ、９１％）として得た。
３－（オクタデシルオキシ）安息香酸エチル
Figure 0007360385000089
アセトン（２５ｍＬ）中３－ヒドロキシ安息香酸エチル（５００ｍｇ、３．０１ｍｍｏｌ）、ＴＢＡＩ（１００ｍｇ、０．３１ｍｍｏｌ）、およびＫ２ＣＯ３（６２２ｍｇ、４．５０ｍｍｏｌ）の溶液に、１－ブロモオクタデカン（１．５０ｇ、４．５０ｍｍｏｌ）を添加し、得られた懸濁液を終夜還流した。反応混合物を真空濃縮し、残存する残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－１７：３（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）により精製して、表題化合物を灰白色固体（１．０９ｇ、２．６０ｍｍｏｌ、８６％）として得た。
３－オクタデシルオキシ安息香酸
Figure 0007360385000090
３－（オクタデシルオキシ）安息香酸エチル（５９０ｍｇ、１．４１ｍｍｏｌ）のエタノール（２５ｍＬ）溶液に、ＮａＯＨ溶液（５Ｍ、６ｍＬ）を添加し、得られた懸濁液を終夜還流した。反応混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、濃ＨＣｌでｐＨ１に酸性化し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮して、指定の化合物を灰白色固体（５０３ｍｇ、１．２９ｍｍｏｌ、９１％）として得た。
３，５－ビス（オクタデシルオキシ）安息香酸メチル
Figure 0007360385000091
３，４－ジヒドロキシ安息香酸メチル（２０８ｍｇ、１．２４ｍｍｏｌ）のアセトン（２０ｍＬ）溶液に、Ｋ２ＣＯ３（３６２ｍｇ、２．６２ｍｍｏｌ）、１－ブロモオクタデカン（８８０ｍｇ、２．６４ｍｍｏｌ）、およびＴＢＡＩ（３９ｍｇ、０．１２１ｍｍｏｌ）を添加し、得られた懸濁液を終夜還流した。翌日、１－ブロモオクタデカンのさらに一部分（１４６ｍｇ、０．４３８ｍｍｏｌ）、Ｋ２ＣＯ３（１００ｍｇ、０．７２４ｍｍｏｌ）、およびＴＢＡＩ（４０ｍｇ、０．１２４ｍｍｏｌ）を添加し、反応混合物を還流させながらさらに１２時間撹拌しておいた。反応混合物を真空濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－９：１（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）により精製して、表題化合物を白色固体（４１３ｍｇ、０．６１４ｍｍｏｌ、５０％）として得た。
３，５－ビス（オクタデシルオキシ）安息香酸
Figure 0007360385000092
３，５－ビス（オクタデシルオキシ）安息香酸メチル（４０２ｍｇ、０．６０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）溶液に、ＮａＯＨ（５ｍＬ、５Ｍ）を添加し、得られた懸濁液を終夜還流した。反応混合物を水で希釈し、濃ＨＣｌで（ｐＨ１に）酸性化し、ＥｔＯＡｃで抽出した。有機相をＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮して、表題化合物を灰白色固体（２２０ｍｇ、０．３３５ｍｍｏｌ、５６％）として得た。
３－（４－［ヘキサデシルオキシ］フェニル）プロパン酸メチル
Figure 0007360385000093
３－（４－ヒドロキシフェニル）プロパン酸メチル（３００ｍｇ、１．６６ｍｍｏｌ）のアセトン（２０ｍＬ）溶液に、Ｋ２ＣＯ３（２９９ｍｇ、２．１６ｍｍｏｌ）、ＴＢＡＩ（５４ｍｇ、０．１６６ｍｍｏｌ）、および１－ブロモヘキサデカン（０．６６ｍＬ、２．１６ｍｍｏｌ）を添加し、得られた懸濁液を終夜還流した。翌日、１－ブロモヘキサデカンの追加の一部分（０．１ｍＬ、０．３２７ｍｍｏｌ）およびＴＢＡＩ（３０ｍｇ、０．０９３ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を還流させながらさらに２時間撹拌した。反応混合物を減圧濃縮し、得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－１９：１（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）により精製して、表題化合物を白色固体（４５７ｍｇ、１．１２９ｍｍｏｌ、６８％）として得た。
３－（４－［ヘキサデシルオキシ］フェニル）プロパン酸
Figure 0007360385000094
３－（４－［ヘキサデシルオキシ］フェニル）プロパン酸メチル（４５０ｍｇ、１．１１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）溶液に、ＮａＯＨ（５．６ｍＬ、５Ｍ）を添加し、得られた懸濁液を終夜還流した。反応混合物をＨ２Ｏ（５０ｍＬ）で希釈し、濃ＨＣｌで酸性化し（ｐＨ１）、ＥｔＯＡｃで抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮して、表題化合物を灰白色固体（４０３ｍｇ、１．０３ｍｍｏｌ、９３％）として得た。
４－ヘキサデシルオキシケイ皮酸メチル（Methyl 4-hexadecyloxycinnamte）：
Figure 0007360385000095
４－ヒドロキシケイ皮酸メチル（４０９ｍｇ、２．３０ｍｍｏｌ）のアセトン（１５ｍＬ）溶液に、Ｋ２ＣＯ３（４７２ｍｇ、３．４２ｍｍｏｌ）、１－ブロモヘキサデカン（１．０５ｍＬ、３．４５ｍｍｏｌ）、およびＴＢＡＩ（７４ｍｇ、０．２３０ｍｍｏｌ）を添加し、得られた溶液を還流させながら終夜撹拌した。反応混合物を真空濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－４：１（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）により精製して、表題化合物を白色固体（８１７ｍｇ、２．０３ｍｍｏｌ、８８％）として得た。
４－ヘキサデシルオキシケイ皮酸
Figure 0007360385000096
４－ヘキサデシルオキシケイ皮酸メチル（Methyl 4-hexadecyloxycinnamte）（３７９ｍｇ、０．９４１ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）溶液に、ＮａＯＨ（５ｍＬ、５Ｍ）を添加し、得られた懸濁液を終夜還流した。反応混合物を１Ｍ ＨＣｌ（５０ｍＬ）で希釈し、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮して、表題化合物を灰白色固体（２９１ｍｇ、０．７４９ｍｍｏｌ、８０％）として得た。
オクタデシルトリフェニルホスホニウムブロミド
Figure 0007360385000097
トルエン（２０ｍＬ）中１－ブロモオクタデカン（５．００ｇ、０．０１５ｍｏｌ）およびＰＰｈ３（３．９３ｇ、０．０１５ｍｍｏｌ）の溶液を１２０℃に２４時間加熱した。反応混合物を室温に冷却し、Ｅｔ２Ｏ（５０ｍＬ）の添加により沈澱させた。沈澱物をＥｔ２Ｏで繰り返し洗浄して、表題化合物を薄茶色固体（５．１０ｇ、８．５７ｍｍｏｌ、５７％）として得た。
（Ｚ）－４－（ノナデカ－１－エン－１－イル）安息香酸メチル
Figure 0007360385000098
新しく蒸留したＴＨＦ（５ｍＬ）中オクタデシルトリフェニルホスホニウムブロミド（５４３ｍｇ、０．９１４ｍｍｏｌ）の溶液を０℃に冷却し、ＢｕＬｉ（０．４６ｍＬ、２Ｍ）を滴下して加えた。反応混合物を室温まで温め、１時間撹拌しておいた。反応混合物に、アルデヒドの４－ホルミル安息香酸メチル（１５０ｍｇ、０．９１４ｍｍｏｌ）を乾燥ＴＨＦ（２ｍＬ）に溶解したものを添加し、得られた溶液を室温で１２時間撹拌しておいた。翌日、アセトン（５ｍＬ）の添加により、反応をクエンチし、減圧下で濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－９９：１（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）精製して、表題化合物を白色固体（Ｚ：Ｅ ３：１の混合物、２７６ｍｇ、０．６８９ｍｍｏｌ、７６％）として得た。
（Ｚ）－４－（ノナデカ－１－エン－１－イル）安息香酸
Figure 0007360385000099
ベンゾエートの４－（ノナデカ－１－エン－１－イル）安息香酸メチル（２７３ｍｇ、０．６８２ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（４０ｍＬ）溶液に、ＮａＯＨ（５Ｍ、８ｍＬ）を添加し、得られた懸濁液を終夜還流した。反応混合物を１Ｍ ＨＣｌで酸性化し（ｐＨ１）、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮して、表題化合物をアモルファス白色固体（２４１ｍｇ、０．６２３ｍｍｏｌ、９１％）として得た。
オクタデカナール
Figure 0007360385000100
ＰＣＣ（１．６０ｇ、７．４２ｍｍｏｌ）の乾燥ＣＨ２Ｃｌ２（２０ｍＬ）溶液に、オクタデカノール（１．０ｇ、３．７０ｍｍｏｌ）を添加し、得られた溶液を室温で３時間撹拌しておいた。反応混合物をシリカゲル濾過し、減圧下で濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－９：１（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）により精製して、表題化合物を白色固体（８４７ｍｇ、３．１３ｍｍｏｌ、８５％）として得た。
４－（オクタデシルアミノ）安息香酸エチル
Figure 0007360385000101
４－アミノ安息香酸エチル（２００ｍｇ、１．２１ｍｍｏｌ）、オクタデカナール（６５０ｍｇ、２．４２ｍｍｏｌ）、およびＡｃＯＨ（０．２１ｍＬ、３．６３ｍｍｏｌ）をＴＨＦ（１０ｍＬ）に溶解し、室温で１０分間撹拌した。得られた溶液に、ＮａＢＨ（ＯＡｃ）３（５１８ｍｇ、２．４４ｍｍｏｌ）を添加し、反応を室温で終夜撹拌しておいた。反応混合物を真空濃縮し、残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－９：１（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）により精製して、表題化合物を白色固体（４６９ｍｇ、１．１２ｍｍｏｌ、９３％）として得た。
４－（オクタデシルアミノ）安息香酸
Figure 0007360385000102
安息香酸エチルの４－（オクタデシルアミノ）安息香酸エチル（４６０ｍｇ、１．１０ｍｍｏｌ）のエタノール（２０ｍＬ）溶液に、ＮａＯＨ（５．５ｍＬ、５Ｍ）を添加し、得られた懸濁液を終夜還流した。反応混合物を水（５０ｍＬ）で希釈し、濃ＨＣｌで酸性化し（ｐＨ１）、ＥｔＯＡｃで抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮して、表題化合物をベージュ色固体（３９２ｍｇ、１．０１ｍｍｏｌ、９２％）として得た。
４－（オクタデシルチオ）安息香酸メチル
Figure 0007360385000103
４－メルカプト安息香酸メチル（４６６ｍｇ、２．７７ｍｍｏｌ）のアセトン（２０ｍＬ）溶液に、Ｋ２ＣＯ３（６１３ｍｇ、４．４４ｍｍｏｌ）、１－ブロモオクタデカン（１．４８ｇ、４．４４ｍｍｏｌ）、およびＴＢＡＩ（１４３ｍｇ、０．４４ｍｍｏｌ）を添加し、得られた溶液を還流させながら終夜撹拌した。反応混合物を減圧濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－３：２（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）により精製して、表題化合物を白色固体（４６０ｍｇ、１．０９ｍｍｏｌ、４０％）として得た。
４－（オクタデシルチオ）安息香酸
Figure 0007360385000104
安息香酸メチルの４－（オクタデシルチオ）安息香酸メチル（４４６ｍｇ、１．０６ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（２０ｍＬ）溶液に、ＮａＯＨ（５ｍＬ、５Ｍ）を添加し、得られた溶液を終夜還流した。反応混合物を１Ｍ ＨＣｌ（５０ｍＬ）で希釈し、熱ＥｔＯＡｃで抽出し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮して、表題化合物をアモルファス白色固体（４３４ｍｇ、１．０６、定量的）として得た。
６，６’－ジデオキシ－６，６’－ジヨード－α，α’－トレハロース
Figure 0007360385000105
α，α’－トレハロース二水和物（２．０１ｇ、５．３１ｍｍｏｌ）をＤＭＦ（４０ｍＬ）と共蒸発させ、次いでＤＭＦ（６０ｍＬ）に溶解し、体積を１／３低減した。トリフェニルホスフィン（６．９９ｇ、２６．６ｍｍｏｌ）およびＩ２（５．４１ｇ、２１．３ｍｍｏｌ）を添加し、得られた溶液を８０℃で２時間撹拌した。混合物を濃縮して、体積を１／３にし、ＭｅＯＨ（８０ｍＬ）で希釈し、ＮａＯＭｅでｐＨを８に調整した。３０分撹拌した後、混合物をＤｏｗｅｘ－Ｈ＋で中和し、濾過し、樹脂をＭｅＯＨで洗浄した。ＭｅＯＨを真空除去し、得られたスラッジを激しく撹拌した水（８０ｍＬ）に注ぎ込んだ。固体をセライト濾過により除去し、濾液をＣＨ２Ｃｌ２（３回×１３０ｍＬ）で抽出した。水性層を濃縮して、黄色残渣を得た。それをＨＰ２０クロマトグラフィー（Ｈ２ＯからＨ２Ｏ：ＭｅＯＨ、１：１（ｖ／ｖ））によりさらに精製して、表題化合物を白色固体（２．２５ｇ、４．００ｍｍｏｌ、７５％）として得た。
６，６’－ジアジド－６，６’－ジデオキシ－α，α’－トレハロース
Figure 0007360385000106
ＤＭＦ（５．０ｍＬ）中６，６’－ジデオキシ－６，６’－ジヨード－α，α’－トレハロース（２１８ｍｇ、０．３９ｍｍｏｌ）の撹拌溶液に、アジ化ナトリウム（１５１ｍｇ、２．３ｍｍｏｌ）を添加した。混合物を８０℃で２０時間撹拌し、次いで濃縮した。残渣をＨＰ２０クロマトグラフィー（Ｈ２ＯからＨ２Ｏ：ＭｅＯＨ、１：１（ｖ／ｖ））により精製し、凍結乾燥して、表題化合物を白色固体（１３５ｍｇ、０．３４ｍｍｏｌ、８９％）として得た。
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－トリメチルシリル－α，α’－Ｄ－トレハロース
α，α’－Ｄ－トレハロース（５ｇ、０．０１３ｍｏｌ）をＤＭＦ（２回×２５ｍＬ）と共蒸発させ、ＤＭＦ（３０ｍＬ）に溶解した。この溶液に、ＢＳＡ（２２．４ｍＬ、０．１３ｍｍｏｌ）およびＴＢＡＦ（１．２５ｍＬ、１．３ｍｍｏｌ）を添加し、得られた溶液を室温で２時間撹拌した。反応をイソプロパノール（２ｍＬ）でクエンチし、ＭｅＯＨ（１００ｍＬ）で希釈した。Ｋ２ＣＯ３（０．３５９ｇ）を添加し、反応物をさらに２時間撹拌しておいた。反応混合物を真空濃縮し、エーテルとブラインに分配し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィーにより精製して、表題化合物を白色結晶（５．０２ｇ、６．４７ｍｍｏｌ、５０％）として得た。
本発明の化合物の調製
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－６，６’－ジ－Ｏ－（２－オクタデシルオキシベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（５０）：
Figure 0007360385000107
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－α，α’－Ｄ－トレハロース（９７ｍｇ、０．１１０ｍｍｏｌ）および２－（オクタデシルオキシ）安息香酸（１９３ｍｇ、０．４９４ｍｍｏｌ）をトルエン（２回×５ｍＬ）と共蒸発させ、次いで乾燥トルエン（４ｍＬ）に溶解した。得られた溶液に、ＥＤＣＩ（１３７ｍｇ、０．７１４ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１３ｍｇ、０．１１０ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を６０℃で終夜撹拌した。翌日、２－（オクタデシルオキシ）安息香酸のさらに一部分（６０ｍｇ、０．１５４ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ（６０ｍｇ、０．３１３ｍｍｏｌ）を添加し、得られた懸濁液をさらに２時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。残っている残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－５：１（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）により精製して、表題化合物を透明な油（１５０ｍｇ、０．９２１ｍｍｏｌ、８４％）として得た。Ｒｆ＝０．５１（４：１；石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）；［α］２１．０ Ｄ＝＋５６（ｃ＝０．１、ＣＨ２Ｃｌ２）；
Figure 0007360385000108
ＩＲ（膜）：２９２２、２８５２、１７３５、１４５３、１２９８、１２４４、１０７１、９９８、７５３ｃｍ－１；ＨＲＭＳ ［Ｃ１０４Ｈ１３８Ｏ１５＋ＮＨ４］＋の計算値：１６４５．０３７４；実測値：１６４５．０３７５。
６，６’－ジ－Ｏ－（２－オクタデシルオキシベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（４３ａ）：
Figure 0007360385000109
ジエステル５０（１４６ｍｇ、０．０９０ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２（４ｍＬ、１：１（ｖ／ｖ））溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（８８ｍｇ）を添加した。反応混合物にＨ２ガスを終夜通気した。翌日、反応混合物をピリジンに希釈し、セライト濾過し、真空濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：１－９：１（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ－ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）により精製して、表題化合物をアモルファス灰白色固体（５６ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ、５７％）として得た。Ｒｆ＝０．６３（９：１（ｖ／ｖ）、ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）；［α］２０．３ Ｄ＝＋８０（ｃ＝０．１、ピリジン）；
Figure 0007360385000110
ＩＲ（３２５３、２９１８、２８５０、１７３４、１４４９、１２３８、１０８１、９９２、７５５ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ６２Ｈ１０２Ｏ１５＋ＮＨ４］＋の計算値：１１０４．７５６２；実測値：１１０４．７５３３。
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－６，６’－ジ－Ｏ－（３－オクタデシルオキシベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（５１）：
Figure 0007360385000111
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－α，α’－Ｄ－トレハロース（１０７ｍｇ、０．１２１ｍｍｏｌ）および３－オクタデシルオキシ安息香酸（２１２ｍｇ、０．５４３ｍｍｏｌ）をトルエン（２回×５ｍＬ）と共蒸発させ、次いで乾燥トルエン（７ｍＬ）に溶解した。得られた溶液に、ＥＤＣＩ（１５１ｍｇ、０．７８７ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１５ｍｇ、０．１２１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５５℃で終夜撹拌した。翌日、３－オクタデシルオキシ安息香酸のさらに一部分（２２ｍｇ、０．０５６ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ（３７ｍｇ、０．１９３ｍｍｏｌ）を添加し、得られた懸濁液をさらに２時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。残っている残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－２２：３（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）により精製して、表題化合物を透明な油（１７４ｍｇ、０．１０７ｍｍｏｌ、８８％）として得た。Ｒｆ＝０．４０（９：１（ｖ／ｖ）；石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）；
Figure 0007360385000112
ＩＲ（膜）：２９１８、２８５１、１７２３、１４５４、１２７５、１０９７、１０７１、９９８、７５４、６９７ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ１０４Ｈ１３８Ｏ１５＋ＮＨ４］＋の計算値：１６４５．０３７４；実測値：１６４５．０３９９。
６，６’－ジ－Ｏ－（３－オクタデシルオキシベンゾイル）－α，α’－Ｄ－トレハロース（４３ｂ）：
Figure 0007360385000113
ジエステル５１（１１０ｍｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２（１０ｍＬ、１：１（ｖ／ｖ））溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（７４ｍｇ）を添加した。反応混合物にＨ２ガスを終夜通気した。翌日、反応混合物をピリジンに希釈し、セライト濾過し、真空濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：１－９：１（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ－ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）により精製して、表題化合物をアモルファス灰白色固体（４９ｍｇ、０．０４５ｍｍｏｌ、６７％）として得た。Ｒｆ＝０．８３（４：１（ｖ／ｖ）、ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）；［α］２０．７ Ｄ＝＋８０（ｃ＝０．１、ピリジン）；
Figure 0007360385000114
ＩＲ（膜）：３３３１、２９１６、２８４９、１６９６、１４９０、１２７９、９４２、７５４ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ６２Ｈ１０２Ｏ１５＋ＮＨ４］＋の計算値：１１０４．７５５７；実測値：１１０４．７５５５。
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－６，６’－ジ－Ｏ－（３，５－ビス（オクタデシルオキシ）ベンゾエート）－α，α’－Ｄ－トレハロース（５５）：
Figure 0007360385000115
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－α，α’－Ｄ－トレハロース（９７ｍｇ、０．１１０ｍｍｏｌ）および３，５－ビス（オクタデシルオキシ）安息香酸（４７２ｍｇ、０．７１６ｍｍｏｌ）をトルエン（２回×５ｍＬ）と共蒸発させ、次いで乾燥トルエン（３ｍＬ）に溶解した。得られた溶液に、ＥＤＣＩ（１９４ｍｇ、１．０１２ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（２４ｍｇ、０．１９６ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５５℃で終夜撹拌した。翌日、反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、Ｈ２Ｏ（５０ｍＬ）およびブライン（５０ｍＬ）で洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、真空濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－２２：３（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）により精製して、表題化合物を透明な油（１４６ｍｇ、０．０６７ｍｍｏｌ、６１％）として得た。Ｒｆ＝０．６９（４：１（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）；［α］２４．７ Ｄ＝＋５８（ｃ＝０．１、ＣＨ２Ｃｌ２）；
Figure 0007360385000116
ＩＲ（膜）：２９２１、２８５１、１７２４、１５９５、１４５３、１１６３、１０６９、９９８、７３２ｃｍ－１；ＭＡＬＤＩ－ＴＯＦ／ＴＯＦ ＭＳ ［Ｃ１４０Ｈ２１０Ｏ１７＋Ｎａ］＋の計算値：２１８６．５４６０；実測値：２１８６．５４７１。
６，６’－ジ－Ｏ－（３，５－ビス（オクタデシルオキシ）ベンゾエート）－α，α’－Ｄ－トレハロース（４３ｃ）
Figure 0007360385000117
５５（１５４ｍｇ、０．０７１ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ（１：１、５ｍＬ）溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（８７ｍｇ）を添加し、得られた懸濁液にＨ２を終夜通気した。翌日、反応混合物をピリジン（５０ｍＬ）で希釈し、セライト濾過し、減圧下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－９：１（ｖ／ｖ）、ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）により精製して、表題化合物を白色固体（６２ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ、５４％）として得た。Ｒｆ＝０．６０（４：１（ｖ／ｖ）、ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）；［α］２１．４ Ｄ＝＋６０（ｃ＝０．１、ピリジン）；
Figure 0007360385000118
ＩＲ（膜）：３３４０、２９１６、２８４９、１７１８、１５９５、１４６６、１１６０、９８７、７６４ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ９８Ｈ１７４Ｏ１７＋ＮＨ４］＋の計算値：１６４１．３０８９；実測値：１６４１．３１１２。
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－６，６’－ジ－Ｏ－（３－［４－（ヘキサデシルオキシ）フェニル］プロパノエート）－α，α’－Ｄ－トレハロース（５９）：
Figure 0007360385000119
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－α，α’－Ｄ－トレハロース（１３０ｍｇ、０．１４７ｍｍｏｌ）および３－（４－［ヘキサデシルオキシ］フェニル）プロパン酸（２５８ｍｇ、０．６６１ｍｍｏｌ）をトルエン（２回×５ｍＬ）と共蒸発させ、次いで乾燥トルエン（７ｍＬ）に再溶解した。得られた溶液に、ＥＤＣＩ（１８７ｍｇ、０．９７５ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１８ｍｇ、０．１４７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を６０℃で終夜撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、水およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－９：１（ｖ／ｖ））、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）および親油性サイズ排除（１：１、ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ （ｖ／ｖ））により精製して、表題化合物を透明な油（１０２ｍｇ、０．０６５ｍｍｏｌ、４４％）として得た。Ｒｆ＝０．３８（４：１（ｖ／ｖ））、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）；［α］２１ Ｄ＝＋５６（ｃ＝１．０、ＣＨ２Ｃｌ２）；
Figure 0007360385000120
ＩＲ（膜）：２９２３、２８５３、１７３５、１５１２、１２４５、１１０６、１０９６、１０７１、７３３、６９７ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ１０６Ｈ１４２Ｏ１５＋ＮＨ４］＋の計算値：１６４５．０３８０；実測値：１６４５．０４０７。
６，６’－ジ－Ｏ－（３－［４－（ヘキサデシルオキシ）フェニル］プロパノエート）－α，α’－Ｄ－トレハロース（４３ｄ）：
Figure 0007360385000121
ジエステル５９（１０３ｍｇ、０．０６６ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ、１：１（ｖ／ｖ））溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（５０ｍｇ）を添加した。反応混合物にＨ２ガスを終夜通気した。翌日、反応混合物をピリジンに希釈し、セライト濾過し、真空濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－９：１、ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ（ｖ／ｖ））により精製して、表題化合物をアモルファス灰白色固体（４３ｍｇ、０．０４２ｍｍｏｌ、６４％）として得た。Ｒｆ＝０．５６（４：１（ｖ／ｖ））、ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）；［α］２７．７ Ｄ＝＋５０．６（ｃ＝０．１、ピリジン）；
Figure 0007360385000122
ＩＲ（膜）：３３６０、２９１６、２８４９、１７１８、１２９７、９９０、７２１ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ６２Ｈ１０２Ｏ１５＋ＮＨ４］＋の計算値：１１０４．７５５７；実測値：１１０４．７６０４。
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－トリメチルシリル－６，６’－ジ－Ｏ－（４－ヘキサデシルオキシシンナメート）－α，α’－Ｄ－トレハロース（６４）：
Figure 0007360385000123
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－トリメチルシリル－α，α’－Ｄ－トレハロース（１５０ｍｇ、０．１９３ｍｍｏｌ）および４－ヘキサデシルオキシケイ皮酸（３８８ｍｇ、０．８７１ｍｍｏｌ）をトルエン（２回×５ｍＬ）と共蒸発させ、次いで乾燥トルエン（６ｍＬ）に再溶解した。得られた溶液に、ＥＤＣＩ（２５８ｍｇ、１．３５ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（３８ｍｇ、０．３１１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を５０℃で終夜撹拌した。翌日、４－ヘキサデシルオキシケイ皮酸の追加の一部分（４３ｍｇ、０．１１１ｍｍｏｌ）およびＥＤＣＩ（４２ｍｇ、０．２１９ｍｍｏｌ）を添加し、混合物をさらに２時間撹拌しておいた。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、水およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－３：２（ｖ／ｖ））、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）および親油性サイズ排除（１：１、ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ（ｖ／ｖ））により精製して、表題化合物を透明な油（１１７ｍｇ、０．０７７ｍｍｏｌ、３４％）として得た。Ｒｆ＝０．７７（４：１（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）；
Figure 0007360385000124
ＩＲ（膜）：２９２０、２８５１、１７１９、１６０３、１２５０、１１７１、１０４６、８４０ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ８０Ｈ１４６Ｏ１５Ｓｉ６＋ＮＨ４］＋の計算値：１５３２．９６１６；実測値：１５３２．９６１０。
６，６’－ジ－Ｏ－（４－ヘキサデシルオキシシンナメート）－α，α’－Ｄ－トレハロース（４３ｅ）
Figure 0007360385000125
ジエステル６４（１１６ｍｇ、０．０７６ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ（１：１、１０ｍＬ）溶液に、Ｄｏｗｅｘ－Ｈ＋（３５ｍｇ）を添加し、得られた懸濁液を室温で３０分間撹拌しておいた。反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮し、シリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－４：１（ｖ／ｖ）、ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）により精製して、表題化合物をアモルファス白色固体（３２ｍｇ、０．０３０ｍｍｏｌ、４０％）として得た。Ｒｆ＝０．７１（４：１（ｖ／ｖ）、ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）；［α］２７．６ Ｄ＝＋４２．８（ｃ＝０．１、ピリジン）；
Figure 0007360385000126
ＩＲ（膜）：３３４２、２９１７、２８５０、１７００、１６０３、１２５０、１１７２、１０１７、８２５ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ６２Ｈ９８Ｏ１５＋Ｈ］＋の計算値：１０８３．６９８３；実測値：１０８３．６９８１。
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－６，６’－ジ－Ｏ－［４－（ノナデカ－１－エン－１－イル）ベンゾエート］－α，α’－Ｄ－トレハロース（７０）：
Figure 0007360385000127
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－α，α’－Ｄ－トレハロース（１０５ｍｇ、０．１１９ｍｍｏｌ）および４－（ノナデカ－１－エン－１－イル）安息香酸（２０７ｍｇ、０．５３５ｍｍｏｌ）をトルエン（２回×５ｍＬ）と共蒸発させ、次いで乾燥トルエン（３ｍＬ）に再溶解した。得られた溶液に、ＥＤＣＩ（１５７ｍｇ、０．８１９ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１８ｍｇ、０．１４７ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を７０℃で終夜撹拌した。翌日、反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、水およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－２３：２（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）により精製して、表題化合物を透明な油（６５ｍｇ、０．０４０ｍｍｏｌ、３４％）として得た。Ｒｆ＝０．５０（４：１、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、ｖ／ｖ）；［α］２１ Ｄ＝＋６４（ｃ＝１．０、ＣＨ２Ｃｌ２）；
Figure 0007360385000128
ＩＲ（膜）：２９２３、２８５２、１７３４、１６０７、１４６６、１２７３、１０９７、１０７２、９９８、７４９、６９６ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ１０６Ｈ１３８Ｏ１３＋ＮＨ４］＋の計算値：１６３７．０４７６；実測値：１６３７．０４９４。
６，６’－ジ－Ｏ－［（Ｚ）－４－（ノナデカ－１－エン－１－イル）ベンゾエート］－α，α’－Ｄ－トレハロース（４３ｆ）：
Figure 0007360385000129
ジエステル７０（６２ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２（２．５ｍＬ、１：１（ｖ／ｖ））溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（３７ｍｇ）を添加した。反応混合物にＨ２ガスを終夜通気した。１２時間後に、反応混合物を希釈し、セライト濾過し、真空濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－９：１（ｖ／ｖ）、ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）により精製して、表題化合物を灰白色固体（２４ｍｇ、０．０２２ｍｍｏｌ、５８％）として得た。Ｒｆ＝０．７６（４：１（ｖ／ｖ）、ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）；［α］２２．０ Ｄ＝＋６０（ｃ＝０．１、ピリジン）；
Figure 0007360385000130
ＩＲ（膜）：３３５７、２９１７、２８５０、１７１６、１４６７、１４１５、１２８３、１１０２、１０７７、１０４６、１０１９、７２１ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ６４Ｈ１０６Ｏ１３＋ＮＨ４］＋の計算値：１１００．７９７２；実測値：１１００．７９９２。
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－６，６’－ジ－Ｏ－（４－（オクタデシルアミノ）ベンゾエート）－α，α’－Ｄ－トレハロース（７６）：
Figure 0007360385000131
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－ベンジル－α，α’－Ｄ－トレハロース（１０７ｍｇ、０．１２１ｍｍｏｌ）および４－（オクタデシルアミノ）安息香酸（２１１ｍｇ、０．５４２ｍｍｏｌ）をトルエン（２回×５ｍＬ）と共蒸発させ、次いで乾燥トルエン（３ｍＬ）に再溶解した。得られた溶液に、ＥＤＣＩ（１５１ｍｇ、０．７８７ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（１５ｍｇ、０．１２１ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を７０℃で終夜撹拌した。翌日、反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、水およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－３：１（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）により精製して、表題化合物を透明な油（７５ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ、３８％）として得た。Ｒｆ＝０．４６（４：１、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、ｖ／ｖ）；［α］２３ Ｄ＝＋６６（ｃ＝１．０、ＣＨ２Ｃｌ２）；
Figure 0007360385000132
ＩＲ（膜）：３３８０、２９２１、２８５２、１７０６、１６０４、１５２７、１４９７、１４１８、１２６７、１１７２、１０９５、１０７０、９９８、７３３、６９６ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ１０４Ｈ１４０Ｎ２Ｏ１３＋Ｈ］＋の計算値：１６２６．０４２８；実測値：１６２６．０４９０。
６，６’－ジ－Ｏ－（４－（オクタデシルアミノ）ベンゾエート）－α，α’－Ｄ－トレハロース（４３ｇ）：
Figure 0007360385000133
ジエステル７６（７４ｍｇ、０．０４６ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ：ＣＨ２Ｃｌ２（３ｍＬ、１：１（ｖ／ｖ））溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（４４ｍｇ）を添加した。反応混合物にＨ２ガスを通気した。４８時間後に、反応混合物をピリジンで希釈し、セライト濾過し、真空濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－４：１、ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ、ｖ／ｖ）により精製して、表題化合物を灰白色固体（１４ｍｇ、０．０１３ｍｍｏｌ、２８％）として得た。Ｒｆ＝０．７１（９：１（ｖ／ｖ）、ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）；［α］２１．０ Ｄ＝＋８０（ｃ＝０．０２５、ピリジン）；
Figure 0007360385000134
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ６２Ｈ１０４Ｎ２Ｏ１３＋Ｈ］＋の計算値：１０８５．７６１１；実測値：１０８５．７５８９。
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－トリメチルシリル－６，６’－ジ－Ｏ－（４－［オクタデシルチオ］ベンゾエート）－α，α’－Ｄ－トレハロース（８０）：
Figure 0007360385000135
２，２’，３，３’，４，４’－ヘキサ－Ｏ－トリメチルシリル－α，α’－Ｄ－トレハロース（１１０ｍｇ、０．１４２ｍｍｏｌ）および４－（オクタデシルチオ）安息香酸（３４６ｍｇ、０．８５１ｍｍｏｌ）をトルエン（２回×５ｍＬ）と共蒸発させ、次いで乾燥トルエン（５ｍＬ）に再溶解した。得られた溶液に、ＥＤＣＩ（１８６ｍｇ、０．９２３ｍｍｏｌ）およびＤＭＡＰ（２０ｍｇ、０．１６４ｍｍｏｌ）を添加し、混合物を７０℃で４８時間撹拌した。反応混合物をＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈し、水およびブラインで洗浄し、ＭｇＳＯ４で乾燥し、濾過し、減圧濃縮した。得られた残渣をシリカゲルカラムクロマトグラフィー（１：０－１９：１、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ、ｖ／ｖ）により精製して、表題化合物を透明な油（１７０ｍｇ、０．１１０ｍｍｏｌ、７７％）として得た。Ｒｆ＝０．５９（９：１（ｖ／ｖ）、石油エーテル：ＥｔＯＡｃ）；［α］２１．６ Ｄ＝＋３０（ｃ＝１．０、ＣＨ２Ｃｌ２；
Figure 0007360385000136
ＩＲ（膜）：２９２２、２８５２、１７１８、１５９３、１４５７、１４０１、１２６３、１１４８、１０９９、８６９、８３８、７５７ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ８０Ｈ１５０Ｏ１３Ｓ２Ｓｉ６＋ＮＨ４］＋の計算値：１５６８．９４７２；実測値：１５６８．９４９６。
６，６’－ジ－Ｏ－（４－［オクタデシルチオ］ベンゾエート）－α，α’－Ｄ－トレハロース（４３ｈ）：
Figure 0007360385000137
ジエステル８０（１６０ｍｇ、０．１０３ｍｍｏｌ）のＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ（１：１、５ｍＬ）溶液に、Ｄｏｗｅｘ－Ｈ＋（２３ｍｇ）を添加し、得られた懸濁液を室温で１時間撹拌しておいた。反応混合物を濾過し、減圧下で濃縮して、表題化合物を白色固体として得た。それを、熱ＥｔＯＨから沈殿させた（６０ｍｇ、０．０５４ｍｍｏｌ、５２％）。Ｒｆ＝０．６８（４：１（ｖ／ｖ）、ＥｔＯＡｃ：ＭｅＯＨ）；［α］２２．６ Ｄ＝＋６０（ｃ＝０．１、ＣＨ２Ｃｌ２
Figure 0007360385000138
ＩＲ（膜）：３３５３、２９１７、２８４９、１７１３、１５９３、１４７０、１４００、１２７５、１１００、１０７７、１０４２、７５９ｃｍ－１；ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ［Ｃ６２Ｈ１０２Ｏ１３Ｓ２＋ＮＨ４］＋の計算値：１１３６．７１００；実測値：１１３６．７１１７。
Ｓｔａｕｄｉｎｇｅｒ還元およびカップリング反応の一般手順。
０℃でＤＭＦ中６，６’－ジアジド－６，６’－ジデオキシ－α，α’－トレハロースの撹拌溶液（０．０８ｍｍｏｌ／ｍＬ）に、１．０Ｍ ＰＭｅ３のＴＨＦ溶液（１０当量）および水（６０当量）を添加した。溶液を０℃で１０分間撹拌し、次いで室温まで温め、さらに２０時間撹拌した。混合物を濃縮し、残渣を蒸留したピリジン（０．０２ｍｍｏｌ／ｍＬ）と２回共蒸発させ、次いで蒸留したピリジン（２回×０．０２ｍｍｏｌ／ｍＬ）に溶解した。この溶液に、カルボン酸（２．５当量）、ＤＩＰＥＡ（５当量）、次いでＨＢＴＵ（２．５当量）を添加した。反応混合物を室温で終夜撹拌し、次いで濃縮した。残渣を個々の手順に詳述するように精製した。
６，６’－ジデオキシ－ジ－（４－オクタデシルオキシ－ベンゾイルアミド）－α，α’－トレハロース（４３ｉ）
Figure 0007360385000139
６，６’－ジアジド－６，６’－ジデオキシ－α，α’－トレハロース（５４ｍｇ、０．１４ｍｍｏｌ）、ＰＭｅ３（１．４ｍＬ、１．４ｍｍｏｌ）、水（０．１５ｍＬ、８．３ｍｍｏｌ）、４－オクタデシルオキシ安息香酸（１３７ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）、ＤＩＰＥＡ（０．１２ｍＬ、０．７４ｍｍｏｌ）、およびＨＢＴＵ（１３２ｍｇ、０．３５ｍｍｏｌ）を、Ｓｔａｕｄｉｎｇｅｒ還元およびカップリング反応の一般手順に供した。得られた残渣を熱ｔＢｕＯＨ：ＥｔＯＡｃ（４０ｍＬ、２：１（ｖ／ｖ））に溶解し、ＨＣｌ（７５ｍＬ、０．１Ｍ）、飽和ＮａＨＣＯ３（７５ｍＬ）およびブライン（７５ｍＬ）で洗浄した。有機層をピリジン（１０ｍＬ）で希釈し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮した。得られた残渣をグラジエントシリカゲルフラッシュクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２からＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、８５：１５（ｖ／ｖ））により精製して、表題化合物を白色固体（８５ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ、５７％）として得た。Ｒｆ＝０．６１（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、４：１（ｖ／ｖ））；
Figure 0007360385000140
；ＩＲ（膜）：３３２７、２９１５、２８４９、１６２３、１６０７、１５５１、１５０５、１４６７、１３０２、１２５４、１１８２、１１４７、１１０３、１０３５、９９３、８４０ｃｍ－１；
Figure 0007360385000141
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ［Ｍ＋Ｈ］＋ ［Ｃ６２Ｈ１０４Ｎ２Ｏ１３＋Ｈ］＋の計算値：１０８５．７６１１；実測値：１０８５．７６０９。
６，６’－ジデオキシ－ジ－（２－Ｏ－ベンジル－４－オクタデシルオキシ－ベンゾイルアミド）－α，α’－トレハロース
Figure 0007360385000142
６，６’－ジアジド－６，６’－ジデオキシ－α，α’－トレハロース（６３ｍｇ、０．１６ｍｍｏｌ）、ＰＭｅ３（１．６ｍＬ、１．６ｍｍｏｌ）、水（０．１７ｍＬ、９．４ｍｍｏｌ）、２－（ベンジルオキシ）－４－（オクタデシルオキシ）安息香酸（１９８ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）、ＨＢＴＵ（１５２ｍｇ、０．４０ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（０．１４ｍＬ、０．８０ｍｍｏｌ）を、Ｓｔａｕｄｉｎｇｅｒ還元およびカップリング反応の一般手順に供した。得られた残渣を熱ｔＢｕＯＨ：ＥｔＯＡｃ（７０ｍＬ、２：１（ｖ／ｖ））に溶解し、ＨＣｌ（１００ｍＬ、０．１Ｍ）、飽和ＮａＨＣＯ３（１００ｍＬ）、およびブライン（１００ｍＬ）で洗浄した。有機層をピリジン（１０ｍＬ）で希釈し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮した。得られた残渣をグラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２からＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、９：１（ｖ／ｖ））により精製して、表題化合物を白色固体（１９３ｍｇ、０．１５ｍｍｏｌ、９３％）として得た。Ｒｆ＝０．３５（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、９：１（ｖ／ｖ））；
Figure 0007360385000143
；ＩＲ（膜）：３３８７、２９１６、２８４９、１６２８、１６０５、１５４４、１４９８、１４６６、１３９１、１２５７、１１７５、１１４６、１１１０、１０３５、９９６、８４０ｃｍ－１；
Figure 0007360385000144
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ［Ｍ＋Ｈ］＋ ［Ｃ７６Ｈ１１６Ｎ２Ｏ１５＋Ｈ］＋の計算値：１２９７．８４４８；実測値：１２９７．８４４２。
６，６’－ジデオキシ－（２－Ｏ－ベンジル－６－メチル－４－オクタデシルオキシ－ベンゾイルアミド）－α，α’－トレハロース
Figure 0007360385000145
６，６’－ジアジド－６，６’－ジデオキシ－α，α’－トレハロース（５２ｍｇ、０．１３ｍｍｏｌ）、ＰＭｅ３（１．３ｍＬ、１．３ｍｍｏｌ）、水（０．１５ｍＬ、８．３ｍｍｏｌ）、２－Ｏ－ベンジル－６－メチル－オクタデシルオキシ安息香酸（２．１０ｍｇ、０．４１）、ＤＩＰＥＡ（０．１４ｍＬ、０．８０ｍｍｏｌ）、およびＨＢＴＵ（１５５ｍｇ、０．４１ｍｍｏｌ）を、Ｓｔａｕｄｉｎｇｅｒ還元およびカップリング反応の一般手順に供した。得られた残渣を熱ｔＢｕＯＨ：ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ、２：１（ｖ／ｖ））に溶解し、０．１Ｍ ＨＣｌ（７５ｍＬ）、飽和ＮａＨＣＯ３（７４ｍＬ）、およびブライン（７５ｍＬ）で洗浄した。有機層をピリジン（５ｍＬ）で希釈し、乾燥し（ＭｇＳＯ４）、濾過し、濃縮した。得られた残渣をグラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２からＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、９：１（ｖ／ｖ））により精製して、表題化合物を白色固体（１０４ｍｇ、０．０８ｍｍｏｌ、５９％）として得た。Ｒｆ＝０．２６（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、８５：１５（ｖ／ｖ））；
Figure 0007360385000146
；ＩＲ（膜）：３３３３、２９１７、２８５０、１６０５、１５３２、１４８８、１４６７、１３７７、１３２１、１２８１、１２２９、１１７２、１１４５、１０７５、１０３７、９９５、９４３、９０９、８４１、８０５ｃｍ－１；
Figure 0007360385000147
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ［Ｍ＋Ｈ］＋ ［Ｃ７８Ｈ１２０Ｎ２Ｏ１５＋Ｈ］＋の計算値：１３２５．８７６１；実測値：１３２５．８７６１。
６，６’－ジデオキシ－（２－ヒドロキシ－４－オクタデシルオキシ－ベンゾイルアミド）－α，α’－トレハロース（４３ｊ）
Figure 0007360385000148
蒸留したＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ（６ｍＬ、１：１（ｖ／ｖ））中６，６’－ジデオキシ－ジ－（２－Ｏ－ベンジル－４－オクタデシルオキシ－ベンゾイルアミド）－α，α’－トレハロース（１２６ｍｇ、０．１０ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（１０ｍｇ）を添加した。懸濁液にＨ２を４８時間通気し、次いで反応混合物をピリジン（１５ｍＬ）で希釈し、セライト濾過した。濾液を濃縮し、得られた残渣をグラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２からＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、９：１（ｖ／ｖ））により精製して、表題化合物を白色固体（８２ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ、７５％）として得た。Ｒｆ＝０．３７（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、８５：１５（ｖ／ｖ））；
Figure 0007360385000149
；ＩＲ（膜）：３３４８、２９１７、２８４９、１６４２、１６１６、１５９７、１５５１、１５３４、１５０３、１４６９、１４３８、１３７７、１３３５、１２７５、１２５９、１１９１、１１７９、１０４２、９９６、９４０、８５５、８３４、８１５、８０５ｃｍ－１；
Figure 0007360385000150
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ［Ｍ＋Ｈ］＋ ［Ｃ６２Ｈ１０４Ｎ２Ｏ１５＋Ｈ］＋の計算値：１１１７．７５０９；実測値：１１１７．７５１３。
６，６’－ジデオキシ－（２－ヒドロキシ－６－メチル－４－オクタデシルオキシ－ベンゾイルアミド）－α，α’－トレハロース（４３ｋ）
Figure 0007360385000151
蒸留したＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ（６ｍＬ、１：１（ｖ／ｖ））中６，６’－ジデオキシ－（２－Ｏ－ベンジル－６－メチル－４－オクタデシルオキシ－ベンゾイルアミド）－α，α’－トレハロース（９１ｍｇ、０．０７ｍｍｏｌ）の溶液に、Ｐｄ（ＯＨ）２／Ｃ（２９ｍｇ）を添加した。懸濁液にＨ２を２０時間通気し、次いで反応混合物をピリジン（６ｍＬ）で希釈し、セライト濾過した。濾液を濃縮し、得られた残渣をグラジエントシリカゲルフラッシュカラムクロマトグラフィー（ＣＨ２Ｃｌ２からＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、４：１（ｖ／ｖ））により精製して、表題化合物を白色固体（５１ｍｇ、０．０４ｍｍｏｌ、６４％）として得た。Ｒｆ＝０．１８（ＣＨ２Ｃｌ２：ＭｅＯＨ、８５：１５（ｖ／ｖ））；
Figure 0007360385000152
；ＩＲ（膜）：３３５０、２９１６、２８４９、２７６５、１６０７、１５３９、１４６７、１３１８、１２７５、１２１３、１１７４、１１４４、１１０６、１０５９、１０３７、９９２、９４５、８３５、８０４ｃｍ－１；
Figure 0007360385000153
ＨＲＭＳ（ＥＳＩ） ｍ／ｚ ［Ｍ＋Ｈ］＋ ［Ｃ６４Ｈ１０８Ｎ２Ｏ１５＋Ｈ］＋の計算値：１１４５．７８２２；実測値：１１４５．７８２２。
実施例８
ＮＦＡＴ－Ｍｉｎｃｌｅレポーター細胞の活性化
手元の化合物４３ａ～ｈについては、これらの類似体がＭｉｎｃｌｅと結合し、シグナル伝達する能力を評価した（図５）。したがって、ｍＭｉｎｃｌｅ＋ＦｃＲγ、ｈＭｉｎｃｌｅ＋ＦｃＲγ、またはＦｃＲγ－のみを発現するＮＦＡＴ－ＧＦＰレポーター細胞を、２Ｇ－ブラルテミシン類似体４３ａ～ｈ、ＴＤＢ、ｉＰｒＯＨ、またはｐ－ＯＣ１８Ｈ３７置換類似体９ｆで刺激した。フローサイトメトリーによって分析されるＮＦＡＴ－ＧＦＰの産生によって、レポーター細胞活性化を測定した。概して、すべてのブラルテミシン類似体がｈＭｉｎｃｌｅおよびｍＭｉｎｃｌｅ発現レポーター細胞を両方とも強く活性化し、すべての誘導体はｐ－ＯＣ１８（９ｆ）およびＴＤＢと比較できるレベルのＮＦＡＴ－ＧＦＰを誘導した。０．１ｎｍｏｌ／ウェルの量では、ｏ－ＯＣ１８（４３ａ）とｍ－ＯＣ１８（４３ｂ）の両方がｐ－ＯＣ１８（３０ｈ）より、比較的多いＮＦＡＴ－ＧＦＰを産生するようにレポーター細胞を誘導し、ｏ－置換誘導体４３ａで最も強力な応答が観察された。すべての試験濃度で、分枝状ブラルテミシン誘導体４３ｃ、ジヒドロシンナメート誘導体４３ｄ、シンナメート誘導体４３ｅ、炭素連結誘導体４３ｆ、アミン連結類似体４３ｇ、および硫黄連結誘導体４３ｈが、ＴＤＢに応答した細胞によって産生されたレベルと似たレベルのＮＦＡＴ－ＧＦＰを産生するようにｈＭｉｎｃｌｅおよびｍＭｉｎｃｌｅ発現レポーター細胞を誘導した。総合的に見て、このデータにより、ブラルテミシン類似体の構造への変化に耐えるＭｉｎｃｌｅの能力が強調され、ｏ－ＯＣ１８（４３ａ）は他の誘導体より、多くのＮＦＡＴ－ＧＦＰを産生するようにレポーター細胞を誘導する。
実施例９
ＧＭ－ＣＳＦ ＢＭＤＭの活性化
ブラルテミシン類似体の２Ｇシリーズが炎症性免疫応答を誘導する能力を洞察するために、次にＥＬＩＳＡを使用してＩＬ－１βを測定することにより、細胞活性化を決定して、ＷＴおよびＭｉｎｃｌｅ－／－ ＢＭＤＭを活性化する能力について類似体を選別した（図６）。ここで、すべてのブラルテミシン類似体（４３ａ～ｈ）がＷＴ ＢＭＤＭを刺激して、かなりの量のＩＬ－１βを産生し、ｍ－置換誘導体４３ｂ、ジヒドロシンナメート誘導体４３ｄ、シンナメート誘導体４３ｅ、炭素連結類似体４３ｆ、および硫黄連結誘導体４３ｈはｐ－ＯＣ１８（９ｆ）およびＴＤＢと比べてほぼ等量のＩＬ－１βを産生した（図２ａ）。さらに、Ｍｉｎｃｌｅ－／－ ＢＭＤＭを類似体４３ｂ、４３ｄ～ｆ、および４３ｈで刺激することにより、ＩＬ－１βは実質的に産生されなかった。これは、Ｍｉｎｃｌｅがこれらの化合物によるＢＭＤＭ活性化の媒介を主として担う受容体であることを示す（図６ｂ）。
本発明の態様には、下記の態様も含まれる。
態様１
式ＩＶａの化合物
［式中、Ｘ ａ およびＸ ｂ は独立して、ＯまたはＮＨから選択され、
Ｙ ａ およびＹ ｂ はそれぞれ独立して、－Ｉ、－Ｂｒ、－Ｃｌ、－Ｆ、－ＯＨ、－Ｒ １ および－ＯＲ １ を含む群から選択され、Ｒ １ は、（Ｃ １ ～Ｃ ６ ）アルキル、（Ｃ ２ ～Ｃ ６ ）アルケニルおよび（Ｃ ２ ～Ｃ ６ ）アルキニルから選択され、（Ｃ １ ～Ｃ ６ ）アルキル、（Ｃ ２ ～Ｃ ６ ）アルケニルおよび（Ｃ ２ ～Ｃ ６ ）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ １ ～Ｃ ６ ）アルコキシで置換されていてもよく、
ｎおよびｍは独立して、０～４であり、
Ｚ ａ およびＺ ｂ はそれぞれ独立して、Ｒ ２ 、－ＯＲ ２ 、 －ＮＨＲ ２ 、－ＮＨＣ（Ｏ）－Ｒ ２ および－Ｓ－Ｒ ２ から選択され、Ｒ ２ は、（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルキル、（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルケニルおよび（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルキニルから選択され、（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルキル、（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルケニルおよび（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ １ ～Ｃ ６ ）アルコキシで置換されていてもよく、
ｒおよびｓは独立して、１～３であり、
ａｌｋ ａ およびａｌｋ ｂ は独立して、（Ｃ １ ～Ｃ ４ ）アルキレン、（Ｃ ２ ～Ｃ ４ ）アルケニレンおよび（Ｃ ２ ～Ｃ ４ ）アルキニレンから選択され、またはａｌｋ ａ およびａｌｋ ｂ はそれぞれ、アリール環がＣ（Ｏ）炭素に直接接続するように存在しなくてもよく、
ｎ＋ｒ＝１～５であり、ｍ＋ｓ＝１～５である］。
態様２
Ｘ ａ およびＸ ｂ が両方ともＯである、態様１に記載の化合物。
態様３
Ｘ ａ およびＸ ｂ が両方ともＮＨである、態様１に記載の化合物。
態様４
ｎおよびｍが０～３であり、Ｙ ａ およびＹ ｂ のそれぞれが独立して、－ＯＨ、－Ｒ １ および－ＯＲ １ から選択され、Ｒ １ は、（Ｃ １ ～Ｃ ６ ）アルキル、（Ｃ ２ ～Ｃ ６ ）アルケニルおよび（Ｃ ２ ～Ｃ ６ ）アルキニルから選択され、（Ｃ １ ～Ｃ ６ ）アルキル、（Ｃ ２ ～Ｃ ６ ）アルケニルおよび（Ｃ ２ ～Ｃ ６ ）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ １ ～Ｃ ６ ）アルコキシで置換されていてもよい、態様１から３のいずれかに記載の化合物。
態様５
Ｙ ａ およびＹ ｂ のそれぞれが独立して、－ＯＨおよび－（Ｃ １ ～Ｃ ６ ）アルキルから選択される、態様４に記載の化合物。
態様６
ｎおよびｍが両方とも１である、態様４に記載の化合物。
態様７
ｎおよびｍが両方とも１であり、Ｙ ａ およびＹ ｂ が独立して、－ＯＨおよびメチルから選択される、態様１から６のいずれかに記載の化合物。
態様８
Ｚ ａ およびＺ ｂ のそれぞれが独立して、Ｒ ２ および－ＯＲ ２ から選択され、Ｒ ２ は、（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルキル、（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルケニルおよび（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルキニルから選択され、（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルキル、（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルケニルおよび（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ １ ～Ｃ ６ ）アルコキシで置換されていてもよい、態様１から７のいずれかに記載の化合物。
態様９
Ｚ ａ およびＺ ｂ のそれぞれが独立して、Ｒ ２ 、－ＯＲ ２ 、－ＮＨＲ ２ および－Ｓ－Ｒ ２ から選択され、Ｒ ２ は、（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルキル、（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルケニルおよび（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルキニルから選択される、態様１から７のいずれかに記載の化合物。
態様１０
ｒおよびｓが両方とも１である、態様１から９のいずれかに記載の化合物。
態様１１
ａｌｋ ａ およびａｌｋ ｂ が独立して、（Ｃ １ ～Ｃ ４ ）アルキレン、（Ｃ ２ ～Ｃ ４ ）アルケニレンおよび（Ｃ ２ ～Ｃ ４ ）アルキニレンから選択される、態様１から１０のいずれかに記載の化合物。
態様１２
式ＶＩの化合物
［式中、Ｘは、ＯまたはＮＨから選択され、
Ｙはそれぞれ独立して、－Ｉ、－Ｂｒ、－Ｃｌ、－Ｆ、－ＯＨ、－Ｒ １ および－ＯＲ １ を含む群から選択され、Ｒ １ は、（Ｃ １ ～Ｃ ６ ）アルキル、（Ｃ ２ ～Ｃ ６ ）アルケニルおよび（Ｃ ２ ～Ｃ ６ ）アルキニルから選択され、（Ｃ １ ～Ｃ ６ ）アルキル、（Ｃ ２ ～Ｃ ６ ）アルケニルおよび（Ｃ ２ ～Ｃ ６ ）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ １ ～Ｃ ６ ）アルコキシで置換されていてもよく、
ｎは、０～４であり、
Ｚはそれぞれ独立して、Ｒ ２ 、－ＯＲ ２ 、 －ＮＨＲ ２ 、－ＮＨＣ（Ｏ）－Ｒ ２ および－Ｓ－Ｒ ２ から選択され、Ｒ ２ は、（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルキル、（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルケニルおよび（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルキニルから選択され、（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルキル、（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルケニルおよび（Ｃ ５ ～Ｃ ２６ ）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ １ ～Ｃ ６ ）アルコキシで置換されていてもよく、
ｒは、１～３であり、
ａｌｋは、（Ｃ １ ～Ｃ ４ ）アルキレン、（Ｃ ２ ～Ｃ ４ ）アルケニレンおよび（Ｃ ２ ～Ｃ ４ ）アルキニレンから選択され、またはａｌｋは、アリール環がＣ（Ｏ）炭素に直接接続するように存在しなくてもよく、
ｎ＋ｒ＝１～５である］。
態様１３
態様１から１２のいずれかに記載の化合物と１種または複数の薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物。
態様１４
対象において免疫応答を増強する方法であって、対象に態様１から１２のいずれかに記載の化合物の治療有効量を投与するステップを含む方法。
態様１５
対象において抗原に対する免疫応答を増強する方法であって、対象に態様１から１２のいずれかに記載の化合物の治療有効量を抗原と一緒に投与するステップを含む方法。
態様１６
対象においてＴｈ１媒介免疫を誘導または増強する方法であって、対象に態様１から１２のいずれかに記載の化合物の治療有効量を投与するステップを含む方法。
態様１７
対象において抗原に対するＴｈ１媒介免疫を誘導または増強する方法であって、対象に態様１から１２のいずれかに記載の化合物の治療有効量を抗原と同時に、順次にまたは別々に投与するステップを含む方法。
態様１８
対象において細胞内病原体によって引き起こされる疾患または病態を予防または処置する方法であって、対象に態様１から１２のいずれかに記載の化合物の治療有効量を投与するステップを含む方法。
態様１９
細胞内病原体が、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、結核、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、インフルエンザ、肺炎、髄膜炎、ロタウイルス、破傷風、リーシュマニア症、炭疽病、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、麻疹、風疹、水痘、ムンプス、帯状疱疹、ポリオ、百日咳、黄熱病、狂犬病、破傷風、デング熱、腸チフスおよび日本脳炎からなる群から選択される、態様１８に記載の方法。
態様２０
対象においてがんを予防または処置する方法であって、対象に態様１から１２のいずれかに記載の化合物の治療有効量を投与するステップを含む方法。
参考文献
Khan AA, Chee SH, McLaughlin RJ, Harper JL, Kamena F, Timmer MSM, Stocker BL (2011) Long-chain lipids are required for the innate immune recognition of trehalose diesters by macrophages. ChemBioChem 12(17):2572-2576.

Carta F, Vullo D, Maresca A, Scozzafava A, Supuran CT (2013) Mono-/dihydroxybenzoic acid esters and phenol pyridinium derivatives as inhibitors of the mammalian carbonic anhydrase isoforms I, II, VII, IX, XII and XIV. Bioorg Med Chem21(6):1564-1569.

Baird LJ, Timmer MS, Teesdale-Spittle PH, Harvey JE (2009) Total synthesis of aigialomycin D using a Ramberg-Backlund/RCM strategy. J Org Chem 74(6):2271-2277.

Gram GJ, Karlsson I, Agger EM, Andersen P, Fomsgaard A (2009) A novel liposome-based adjuvant CAF01 for induction of CD8(+) cytotoxic T-lymphocytes (CTL) to HIV-1 minimal CTL peptides in HLA-A*0201 transgenic mice. PloS ONE4(9):e6950.

Claims (18)

  1. 式ＩＶｂの化合物
    またはその薬学的に許容される塩
    ［式中、ＸａおよびＸｂは独立して、ＯまたはＮＨから選択され、
    ＹａおよびＹｂはそれぞれ独立して、－Ｉ、－Ｂｒ、－Ｃｌ、－Ｆ、－ＯＨ、－Ｒ１および－ＯＲ１を含む群から選択され、Ｒ１は、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルから選択され、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、
    ｎおよびｍは独立して、０～４であり、
    ＺａおよびＺｂはそれぞれ独立して、Ｒ２、－ＯＲ２ 、－ＮＨＲ２、－ＮＨＣ（Ｏ）－Ｒ２および－Ｓ－Ｒ２から選択され、Ｒ２は、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルから選択され、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよく、
    ｒおよびｓは独立して、１～３であり、
    ａｌｋａおよびａｌｋｂは、アリール環がＣ（Ｏ）炭素に直接接続するように存在せず、
    ｎ＋ｒ＝１～５であり、ｍ＋ｓ＝１～５である］。
  2. ＸａおよびＸｂが両方ともＯである、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  3. ＸａおよびＸｂが両方ともＮＨである、請求項１に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  4. ｎおよびｍが０～３であり、ＹａおよびＹｂのそれぞれが独立して、－ＯＨ、－Ｒ１および－ＯＲ１から選択され、Ｒ１は、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルから選択され、（Ｃ１～Ｃ６）アルキル、（Ｃ２～Ｃ６）アルケニルおよび（Ｃ２～Ｃ６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよい、請求項１から３のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  5. ＹａおよびＹｂのそれぞれが独立して、－ＯＨおよび－（Ｃ１～Ｃ６）アルキルから選択される、請求項４に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  6. ｎおよびｍが両方とも１である、請求項４に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  7. ｎおよびｍが両方とも１であり、ＹａおよびＹｂが独立して、－ＯＨおよびメチルから選択される、請求項１から６のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  8. ＺａおよびＺｂのそれぞれが独立して、Ｒ２および－ＯＲ２から選択され、Ｒ２は、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルから選択され、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルはそれぞれ、－ＯＨまたは（Ｃ１～Ｃ６）アルコキシで置換されていてもよい、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  9. ＺａおよびＺｂのそれぞれが独立して、Ｒ２、－ＯＲ２、－ＮＨＲ２および－Ｓ－Ｒ２から選択され、Ｒ２は、（Ｃ５～Ｃ２６）アルキル、（Ｃ５～Ｃ２６）アルケニルおよび（Ｃ５～Ｃ２６）アルキニルから選択される、請求項１から７のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  10. ｒおよびｓが両方とも１である、請求項１から９のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩。
  11. 請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩と１種または複数の薬学的に許容される賦形剤とを含む医薬組成物。
  12. 対象において免疫応答を増強するための医薬組成物であって、請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の治療有効量を含む、医薬組成物。
  13. 対象において抗原に対する免疫応答を増強するための医薬組成物であって、請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の治療有効量を抗原と一緒に含む、医薬組成物。
  14. 対象においてＴｈ１媒介免疫を誘導または増強するための医薬組成物であって、請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の治療有効量を含む、医薬組成物。
  15. 対象において抗原に対するＴｈ１媒介免疫を誘導または増強するための医薬組成物であって、請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の治療有効量を含む医薬組成物であり、抗原と同時に、順次にまたは別々に投与される、医薬組成物。
  16. 対象において細胞内病原体によって引き起こされる疾患または病態を予防または処置するための医薬組成物であって、請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の治療有効量を含む、医薬組成物。
  17. 細胞内病原体が、ヒト免疫不全ウイルス（ＨＩＶ）、結核、Ａ型肝炎ウイルス、Ｂ型肝炎ウイルス、Ｃ型肝炎ウイルス、単純ヘルペスウイルス（ＨＳＶ）、インフルエンザ、肺炎、髄膜炎、ロタウイルス、破傷風、リーシュマニア症、炭疽病、ヒトパピローマウイルス（ＨＰＶ）、麻疹、風疹、水痘、ムンプス、帯状疱疹、ポリオ、百日咳、黄熱病、狂犬病、破傷風、デング熱、腸チフスおよび日本脳炎からなる群から選択される、請求項１６に記載の医薬組成物。
  18. 対象においてがんを予防または処置するための医薬組成物であって、請求項１から１０のいずれか一項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩の治療有効量を含む、医薬組成物。
JP2020524894A 2017-11-02 2018-11-02 ブラルテミシン類似体 Active JP7360385B2 (ja)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
NZ73694117 2017-11-02
NZ736941 2017-11-02
PCT/NZ2018/050156 WO2019088854A1 (en) 2017-11-02 2018-11-02 Brartemicin analogues

Publications (3)

Publication Number Publication Date
JP2021501791A JP2021501791A (ja) 2021-01-21
JP2021501791A5 JP2021501791A5 (ja) 2021-12-16
JP7360385B2 true JP7360385B2 (ja) 2023-10-12

Family

ID=66332235

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP2020524894A Active JP7360385B2 (ja) 2017-11-02 2018-11-02 ブラルテミシン類似体

Country Status (5)

Country Link
US (2) US11510980B2 (ja)
EP (1) EP3710462A4 (ja)
JP (1) JP7360385B2 (ja)
AU (1) AU2018361867B2 (ja)
WO (1) WO2019088854A1 (ja)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2019088854A1 (en) * 2017-11-02 2019-05-09 Victoria Link Ltd Brartemicin analogues
US11912736B2 (en) 2018-02-21 2024-02-27 The University Of Montana Diaryl trehalose compounds and uses thereof
JPWO2023277051A1 (ja) * 2021-06-30 2023-01-05
WO2023147057A2 (en) * 2022-01-27 2023-08-03 Citrachem Corp. Methods of synthesizing cannabidiol, derivatives thereof, and other phytocannabinoids
CN114796247B (zh) * 2022-05-24 2023-08-08 广东医科大学 亚麻木酚素在制备抗轮状病毒药物的应用

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010050178A1 (ja) 2008-10-31 2010-05-06 大塚化学株式会社 トレハロース化合物、その製造方法、及び該化合物を含有する医薬
CN102260297A (zh) 2011-06-07 2011-11-30 山东大学 海藻糖酰胺衍生物及其制备方法与应用
US20130331346A1 (en) 2010-08-06 2013-12-12 Joyochem Co., Ltd Trehalose derivatives, preparation method and uses thereof
JP2021514000A (ja) 2018-02-21 2021-06-03 ザ ユニバーシティー オブ モンタナ ジアリールトレハロース化合物及びその使用

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4307229A (en) * 1979-11-07 1981-12-22 Avraham Liav 6,6'-Diesters of trehalose and process for the synthesis thereof
WO2019088854A1 (en) * 2017-11-02 2019-05-09 Victoria Link Ltd Brartemicin analogues

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2010050178A1 (ja) 2008-10-31 2010-05-06 大塚化学株式会社 トレハロース化合物、その製造方法、及び該化合物を含有する医薬
US20130331346A1 (en) 2010-08-06 2013-12-12 Joyochem Co., Ltd Trehalose derivatives, preparation method and uses thereof
CN102260297A (zh) 2011-06-07 2011-11-30 山东大学 海藻糖酰胺衍生物及其制备方法与应用
JP2021514000A (ja) 2018-02-21 2021-06-03 ザ ユニバーシティー オブ モンタナ ジアリールトレハロース化合物及びその使用

Non-Patent Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Biomedicine & Pharmacotherapy，2017年12月31日，2017，96，982-992
Cancer Immnol. Immunother.，1980年，9，101-109
Carbohydrare Research，1980年，81，Cl-C3
Carbohydrate Research，1981年，94，230-235
J. Med. Chem.，2017年12月30日，2018，61，1045-1060
J. Nat. Prod.，2009年，72，980-982
The Journal of Antibiotics ，2013年，66，531-537

Also Published As

Publication number Publication date
WO2019088854A1 (en) 2019-05-09
EP3710462A1 (en) 2020-09-23
AU2018361867A1 (en) 2020-06-11
US20230139366A1 (en) 2023-05-04
AU2018361867B2 (en) 2023-08-10
EP3710462A4 (en) 2021-08-25
US11510980B2 (en) 2022-11-29
JP2021501791A (ja) 2021-01-21
US20210177965A1 (en) 2021-06-17

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP7360385B2 (ja) ブラルテミシン類似体
KR102480429B1 (ko) 스트렙토코커스 뉴모니에 혈청형 8에 대한 백신
JP5547491B2 (ja) 硫酸化糖脂質、その製造法及び結核に対するその使用
JP5933106B2 (ja) 炭水化物−糖脂質共役ワクチン
AU2018375987B2 (en) Vaccine against Klebsiella pneumoniae
JP2010516748A5 (ja)
KR102250099B1 (ko) 스트렙토코커스 뉴모니에 1형에 대한 합성 백신
JP6630440B2 (ja) ストレプトコッカス ニューモニアエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ）血清型２に対する合成ワクチン
EP3274358A1 (en) Vaccine against carbapenem-resistantklebsiella pneumoniae
EP3755342A1 (en) Diaryl trehalose compounds and uses thereof
Reddy et al. Synthesis and biological evaluation of novel 2-azido muramyl dipeptide as NOD2 agonistic adjuvants
JP7296459B2 (ja) Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ ｄｉｆｆｉｃｉｌｅに対する安定なワクチン
WO2021261444A1 (ja) Ｔｌｒ４作動活性を有するアジュバント
OA21080A (en) Adjuvant with TLR4 agonist activity.
Chakkumkal et al. Vaccines against Streptococcus pneumoniae serotype 5
Lynch Trehalose amide glycolipids as Mincle ligands: Towards new vaccine adjuvants
EP3000820A1 (en) Synthetic vaccines against Streptococcus pneumoniae serotype 8
EP3181148A1 (en) Synthetic vaccines against streptococcus pneumoniae serotype 2

Legal Events

Date Code Title Description
A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20211102

A621 Written request for application examination

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621

Effective date: 20211102

A131 Notification of reasons for refusal

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131

Effective date: 20221130

A711 Notification of change in applicant

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A711

Effective date: 20221215

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A821

Effective date: 20221215

A601 Written request for extension of time

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A601

Effective date: 20230227

A521 Request for written amendment filed

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523

Effective date: 20230501

TRDD Decision of grant or rejection written
A01 Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01

Effective date: 20230831

A61 First payment of annual fees (during grant procedure)

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61

Effective date: 20230929

R150 Certificate of patent or registration of utility model

Ref document number: 7360385

Country of ref document: JP

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150