JP7331136B2 - Ccl21をコードする組換えラブドウイルス - Google Patents
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Description
本発明は、腫瘍溶解性ウイルスの分野に、特に、CCL21タンパク質をそのゲノム中にコードする組換えラブドウイルスに関する。本発明はさらに、癌の処置における組換えラブドウイルスの使用に、及びそのようなウイルスを産生するための方法に関する。
腫瘍溶解性ウイルスは、癌細胞内で選択的に複製し、それを死滅させ、腫瘍内に広がることができる新興クラスの生物製剤である。腫瘍溶解性ウイルスをさらに改善し、それらの治療的能力を増加させるための努力は、腫瘍処置におけるそれらの有効性を改善するために、それらのゲノム中に腫瘍抗原又は免疫調節導入遺伝子をコードする、いわゆる武装ウイルスの開発に導いてきた。
本発明は、そのゲノム中にCCL21タンパク質又はその機能的変異体、好ましくはヒトCCL21をコードする組換えラブドウイルス(例えば水疱性口内炎ウイルスなど)を提供することにより、上記の必要性に対処する。
(i)組換えラブドウイルス、好ましくは水疱性口内炎ウイルスを用いて宿主細胞を感染させること、
(ii)組換えラブドウイルスの複製を可能にする条件下で宿主細胞を培養すること、
(iii)細胞培養から組換えラブドウイルスを回収すること、
(iv)場合により、好ましくはベンゾナーゼを用いたウイルス回収物の酵素処理、
(v)陽イオン交換モノリス膜吸着剤又は樹脂上にロードし、それに続く溶出により、ラブドウイルス回収物を捕捉すること、
(vi)工程(v)の溶出液をサイズ排除、マルチモーダルサイズ排除/イオン交換又はタンジェンシャルフローろ過に供することによりラブドウイルスを研磨する、
(vii)限外ろ過/透析ろ過による研磨ラブドウイルスの緩衝液交換、
(viii)ラブドウイルスの滅菌ろ過。
以下の詳細な記載では、多数の特定の詳細を示して、本発明の完全な理解を提供する。しかし、主題の技術がこれらの特定の詳細の一部を伴わずに実行されうることは、当業者には明らかであろう。他の例では、周知の構造及び技術は、本発明を不明瞭にしないように詳細には示していない。見出しは、単に読む際に支援する便宜のために含まれており、本発明を特定の態様又は実施形態に限定すると理解すべきではない。
・ペムブロリズマブ(抗PD-1抗体);
・ニボルマブ(抗PD-1抗体);
・ピジリズマブ(抗PD-1抗体);
・PDR-001(抗PD-1抗体);
・本明細書中で以下に開示するPD1-1、PD1-2、PD1-3、PD1-4、及びPD1-5(抗PD-1抗体)
・アテゾリズマブ(抗PD-L1抗体);
・アベルマブ(抗PD-L1抗体);
・デュルバルマブ(抗PD-L1抗体)。
(PD1-1:)配列番号14のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号15のアミノ酸配列を含む軽鎖;又は
(PD1-2:)配列番号16のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号17のアミノ酸配列を含む軽鎖;又は
(PD1-3:)配列番号18のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号19のアミノ酸配列を含む軽鎖;又は
(PD1-4:)配列番号20のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号21のアミノ酸配列を含む軽鎖;又は
(PD1-5:)配列番号22のアミノ酸配列を含む重鎖及び配列番号23のアミノ酸配列を含む軽鎖。
・WO2013/127729において(一般的及び/又は具体的に)開示されているSMAC模倣物(即ち、化合物)、又はその医薬的に許容可能な塩;
・WO2015/025018において(一般的及び/又は具体的に)開示されているSMAC模倣物(即ち、化合物)、又はその医薬的に許容可能な塩;
・WO2015/025019において(一般的及び/又は具体的に)開示されているSMAC模倣物(即ち、化合物)、又はその医薬的に許容可能な塩;
・WO2016/023858において(一般的及び/又は具体的に)開示されているSMAC模倣物(即ち、化合物)、又はその医薬的に許容可能な塩;
・WO2008/0016893において(一般的及び/又は具体的に)開示されているSMAC模倣物(即ち、化合物)、又はその医薬的に許容可能な塩;
・LCL161、即ち、WO 2008/016893(28/29ページ;[122])の実施例1における化合物A、又はその医薬的に許容可能な塩;
・Debio-1143として公知のSMAC模倣物、又はその医薬的に許容可能な塩;
・ビリナパントとして公知のSMAC模倣物、又はその医薬的に許容可能な塩;
・ASTX-660として公知のSMAC模倣物、又はその医薬的に許容可能な塩;
・CUDC-427として公知のSMAC模倣物、又はその医薬的に許容可能な塩
・表2におけるSMAC模倣物1から26のいずれか1つ、又はその医薬的に許容可能な塩:
Claims (41)
- 以下:
(i) 配列番号2に示すアミノ酸1‐79、1‐81、1‐88、1‐91又は1‐104を含む、タンパク質、
(ii) 位置80~111において少なくとも1つのアミノ酸残基がさらに欠失又は変異している配列番号2の配列を含む、タンパク質、
(iii) 配列番号2を含むタンパク質;又は
配列番号2と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質、
(iv) 配列番号3を含むタンパク質;又は
配列番号3と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質、
(v) 配列番号4を含むタンパク質;又は
配列番号4と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質、
(vi) シグナルペプチド配列をさらに含む(i)~(v)のいずれかに記載のタンパク質、
(vii) 配列番号1を含むタンパク質;又は
配列番号1と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質、
及び
(viii)配列番号5を含むタンパク質;又は、
配列番号5と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質
を含む群から選択される少なくとも1つのCCL21タンパク質又はそのフラグメントをそのゲノム中にコードする組換え水疱性口内炎ウイルスであって、
水疱性口内炎ウイルスの糖タンパク質Gをコードする遺伝子が、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス(LCMV)の糖タンパク質GPをコードする遺伝子により置換されている、及び/又は糖タンパク質Gが、LCMVの糖タンパク質GPにより置換されている、組換え水疱性口内炎ウイルス。 - ゲノムが、(i)配列番号2に示すアミノ酸1‐79、1‐81、1‐88、1‐91又は1‐104を含む、タンパク質をコードする、請求項1に記載の組換え水疱性口内炎ウイルス。
- ゲノムが、(ii)位置80~111において少なくとも1つのアミノ酸残基がさらに欠失又は変異している配列番号2の配列を含む、タンパク質をコードする、請求項1に記載の組換え水疱性口内炎ウイルス。
- ゲノムが、(iii)配列番号2を含むタンパク質;又は配列番号2と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質をコードする、請求項1に記載の組換え水疱性口内炎ウイルス。
- ゲノムが、(iv)配列番号3を含むタンパク質;又は配列番号3と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質をコードする、請求項1に記載の組換え水疱性口内炎ウイルス。
- ゲノムが、(v)配列番号4を含むタンパク質;又は配列番号4と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質をコードする、請求項1に記載の組換え水疱性口内炎ウイルス。
- ゲノムが、(vi)シグナルペプチド配列をさらに含む(i)~(v)のいずれかに記載のタンパク質をコードする、請求項1に記載の組換え水疱性口内炎ウイルス。
- ゲノムが、(vii)配列番号1を含むタンパク質;又は配列番号1と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質をコードする、請求項1に記載の組換え水疱性口内炎ウイルス。
- ゲノムが、(viii)配列番号5を含むタンパク質;又は配列番号5と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質をコードする、請求項1に記載の組換え水疱性口内炎ウイルス。
- 少なくとも水疱性口内炎ウイルスの核タンパク質(N)、ラージタンパク質(L)、リン酸化タンパク質(P)、マトリックスタンパク質(M)及び少なくとも1つのCCL21タンパク質又はT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有するそのフラグメントをゲノム中にコードする組換え水疱性口内炎ウイルスであって、
(i)水疱性口内炎ウイルスの糖タンパク質Gをコードする遺伝子が、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス(LCMV)の糖タンパク質GPをコードする遺伝子により置換されている、及び/又は
(ii)前記糖タンパク質Gが、LCMVの糖タンパク質GPにより置換されている、組換え水疱性口内炎ウイルス。 - 核タンパク質(N)が、配列番号7に記載のアミノ酸配列、又は配列番号7と少なくとも98%同一の機能的変異体を含む、請求項10に記載の組換え水疱性口内炎ウイルス。
- リン酸化タンパク質(P)が、配列番号8に記載のアミノ酸配列、又は配列番号8と少なくとも98%同一の機能的変異体を含む、請求項10又は11のいずれかに記載の組換え水疱性口内炎ウイルス。
- ラージタンパク質(L)が、配列番号9に記載のアミノ酸配列、又は配列番号9と少なくとも98%同一の機能的変異体を含む、請求項10から12のいずれか一項に記載の組換え水疱性口内炎ウイルス。
- マトリックスタンパク質(M)が、配列番号10に記載のアミノ酸配列、又は配列番号10と少なくとも98%同一の機能的変異体を含む、請求項10から13のいずれか一項に記載の組換え水疱性口内炎ウイルス。
- 請求項10から14のいずれか一項に記載の組換え水疱性口内炎ウイルスであって:
-核タンパク質(N)が、配列番号7において示すアミノ酸配列、又は配列番号7と少なくとも98%同一である機能的変異体を含み、
-リン酸化タンパク質(P)が、配列番号8において示すアミノ酸配列、又は配列番号8と少なくとも98%同一である機能的変異体を含み、
-ラージタンパク質(L)が、配列番号9において示すアミノ酸配列、又は配列番号9と少なくとも98%同一である機能的変異体を含み、及び
-マトリックスタンパク質(M)が、配列番号10において示すアミノ酸配列、又は配列番号10と少なくとも98%同一である機能的変異体を含む組換え水疱性口内炎ウイルス。 - 複製可能である、請求項10から15のいずれか一項に記載の組換え水疱性口内炎ウイルス。
- 請求項10から16のいずれか一項に記載の組換え水疱性口内炎ウイルスであって、
CCL21タンパク質又はそのフラグメントが、以下を含む群:
(i) 配列番号2に示すアミノ酸1‐79、1‐81、1‐88、1‐91又は1‐104を含む、タンパク質、
(ii) 位置80~111において少なくとも1つのアミノ酸残基がさらに欠失又は変異している配列番号2の配列を含む、タンパク質、
(iii) 配列番号2を含むタンパク質;又は
配列番号2と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質、
(iv) 配列番号3を含むタンパク質;又は
配列番号3と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質、
(v) 配列番号4を含むタンパク質;又は
配列番号4と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質、
(vi) シグナルペプチド配列をさらに含む(i)~(v)のいずれかに記載のタンパク質、
(vii) 配列番号1を含むタンパク質;又は
配列番号1と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質、
及び
(viii)配列番号5を含むタンパク質;又は、
配列番号5と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質
より選択される、請求項10から16のいずれかに記載の組換え水疱性口内炎ウイルス。 - 水疱性口内炎ウイルスの核タンパク質(N)、ラージタンパク質(L)、リン酸化タンパク質(P)、マトリックスタンパク質(M)、及び少なくとも1つのCCL21タンパク質又はそのフラグメントをそのゲノム中にコードする組換え水疱性口内炎ウイルスであって、:
CCL21タンパク質又はそのフラグメントが、以下を含む群:
(i) 配列番号2に示すアミノ酸1‐79、1‐81、1‐88、1‐91又は1‐104を含む、タンパク質、
(ii) 位置80~111において少なくとも1つのアミノ酸残基がさらに欠失又は変異している配列番号2の配列を含む、タンパク質、
(iii) 配列番号2を含むタンパク質;又は
配列番号2と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質、
(iv) 配列番号3を含むタンパク質;又は
配列番号3と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質、
(v) 配列番号4を含むタンパク質;又は
配列番号4と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質、
(vi) シグナルペプチド配列をさらに含む(i)~(v)のいずれかに記載のタンパク質、
(vii) 配列番号1を含むタンパク質;又は
配列番号1と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質、
及び
(viii)配列番号5を含むタンパク質;又は、
配列番号5と少なくとも98%の同一性を有し、かつT細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有する、タンパク質より選択され、
水疱性口内炎ウイルスの糖タンパク質Gをコードする遺伝子が、リンパ球性脈絡髄膜炎ウイルス(LCMV)の糖タンパク質GPをコードする遺伝子により置換されており、及び/又は前記糖タンパク質Gが、LCMVの糖タンパク質GPにより置換されており、ならびに
-核タンパク質(N)が、配列番号7において示すアミノ酸配列、又は配列番号7と少なくとも98%同一である機能的変異体を含み、
-リン酸化タンパク質(P)が、配列番号8において示すアミノ酸配列、又は配列番号8と少なくとも98%同一である機能的変異体を含み、
-ラージタンパク質(L)が、配列番号9において示すアミノ酸配列、又は配列番号9と少なくとも98%同一である機能的変異体を含み、及び
-マトリックスタンパク質(M)が、配列番号10において示すアミノ酸配列、又は配列番号10と少なくとも98%同一である機能的変異体を含む、
組換え水疱性口内炎ウイルス。 - 組成物が、請求項1から18のいずれか一項に記載の組換え水疱性口内炎ウイルスを含むことを特徴とする医薬的組成物。
- 薬物としての使用のための、請求項19に記載の医薬的組成物。
- 癌、又は固形癌の処置における使用のための、請求項19に記載の医薬的組成物。
- 固形癌が、神経膠芽細胞腫、非小細胞肺癌、生殖系腫瘍、卵巣腫瘍、精巣腫瘍、内分泌腫瘍、胃腸腫瘍、膵臓腫瘍、肝臓腫瘍、腎臓腫瘍、結腸腫瘍、結腸直腸腫瘍、膀胱腫瘍、前立腺腫瘍、皮膚腫瘍、黒色腫、呼吸器系腫瘍、肺腫瘍、乳房腫瘍、頭頸部腫瘍、頭頸部扁平上皮癌(HNSCC)、及び骨腫瘍からなる群から選択される、請求項21に記載の使用のための医薬的組成物。
- 腫瘍内又は静脈内に投与される、請求項20から22のいずれか一項に記載の使用のための医薬的組成物。
- 少なくとも1回腫瘍内に、その後に静脈内に投与される、請求項21から23のいずれか一項に記載の使用のための医薬的組成物。
- その後の静脈内投与が、最初の腫瘍内投与後1日、2日、3日、4日、5日、6日、7日、8日、9日、10日、11日、12日、13日、14日、15日、16日、17日、18日、19日、20日、21日、22日、23日、24日、25日、26日、27日、28日、29日、30日、又は31日に与えられる、請求項24に記載の使用のための医薬的組成物。
- 請求項1から18のいずれか一項に記載の組換え水疱性口内炎ウイルス、及びさらにPD-1経路阻害剤又はSMAC模倣物を含む組成物。
- PD-1経路阻害剤が、PD-1又はPD-L1に対して向けられているアンタゴニスト抗体である、請求項26に記載の組成物。
- PD-1経路阻害剤が、ペムブロリズマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、PDR-001、PD1-1、PD1-2、PD1-3、PD1-4、及びPD1-5からなる群より選択されるアンタゴニストである、請求項26に記載の組成物。
- 以下を含むキット:
a)請求項1~18いずれか一項に記載の組換え水疱性口内炎ウイルス、又は請求項19に記載の医薬的組成物、及び
b)請求項29において定義されるPD-1経路阻害剤又は請求項28において定義されるSMAC模倣物。 - PD-1経路阻害剤又はSMAC模倣物と組み合わせて投与される、請求項20から22のいずれか一項に記載の使用のための医薬的組成物。
- PD-1経路阻害剤又はSMAC模倣物と同時に、連続的に、又は交互に投与される、請求項31に記載の使用のための医薬的組成物。
- SMAC模倣物が、請求項28に記載の化合物1から26のいずれか1つ又はこれらの化合物の1つの医薬的に許容可能な塩からなる群より選択される、請求項31又は32に記載の使用のための医薬的組成物。
- PD-1経路阻害剤が、ペムブロリズマブ、ニボルマブ、ピジリズマブ、アテゾリズマブ、アベルマブ、デュルバルマブ、PDR-001、PD1-1、PD1-2、PD1-3、PD1-4、及びPD1-5からなる群より選択される、請求項31又は32に記載の使用のための医薬的組成物。
- PD-1経路阻害剤又はSMAC模倣物とは異なる投与経路を介して投与される、31又は32に記載の使用のための医薬的組成物。
- 医薬的組成物が、少なくとも一回腫瘍内に投与され、PD-1経路阻害剤又はSMAC模倣物が静脈内に投与される、請求項31~33のいずれか一項に記載の使用のための医薬的組成物。
- 請求項1~18のいずれか一項に記載の組換え水疱性口内炎ウイルスに感染したウイルス産生細胞であって、前記組換え水疱性口内炎ウイルスを産生することを特徴とするウイルス産生細胞。
- 細胞がVero細胞、HEK細胞、HEK293細胞、チャイニーズハムスター卵巣細胞(CHO)、又はベビーハムスター腎臓(BHK)細胞であることを特徴とする、請求項37に記載のウイルス産生細胞。
- そのRNAゲノム中に少なくとも1つのCCL21タンパク質又はそのフラグメントをコードする組換え水疱性口内炎ウイルスであって、前記CCL21タンパク質又はそのフラグメントが、T細胞若しくは樹状細胞の誘引機能又は樹状細胞の活性化機能を有し、そのRNAゲノムが、配列番号24と同一、あるいは少なくとも90%同一のコード配列を含む、又はそれからなる、組換え水疱性口内炎ウイルス。
- 癌、又は固形癌の処置のための医薬の製造における、請求項1~18いずれか一項に記載の組換え水疱性口内炎ウイルスの使用。
- 固形癌が、神経膠芽細胞腫、非小細胞肺癌、生殖系腫瘍、卵巣腫瘍、精巣腫瘍、内分泌腫瘍、胃腸腫瘍、膵臓腫瘍、肝臓腫瘍、腎臓腫瘍、結腸腫瘍、結腸直腸腫瘍、膀胱腫瘍、前立腺腫瘍、皮膚腫瘍、黒色腫、呼吸器系腫瘍、肺腫瘍、乳房腫瘍、頭頸部腫瘍、頭頸部扁平上皮癌(HNSCC)、及び骨腫瘍からなる群から選択される、請求項40に記載の使用。
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