JP7291696B2

JP7291696B2 - アルファｖインテグリン阻害剤としてのピロロピラジン誘導体

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Publication number: JP7291696B2
Application number: JP2020524801A
Authority: JP
Inventors: グオホア・ジャオ; ジェイムズ・ミニョーネ
Original assignee: Bristol Myers Squibb Co
Current assignee: Bristol Myers Squibb Co
Priority date: 2017-11-07
Filing date: 2018-11-05
Publication date: 2023-06-15
Anticipated expiration: 2038-11-05
Also published as: KR20200084879A; CN111433207A; JP2021502358A; AU2018365793A1; IL274425A; BR112020008893A2; WO2019094319A1; EA202091136A1; EP3707142A1; ES2904645T3; MX2020004455A; EP3707142B1; CN111433207B; SG11202004077WA; US20210163501A1; US11292802B2; CA3081805A1

Description

関連出願の相互参照
本願は、米国仮特許出願第６２／５８２，６９３号（２０１７年１１月７日出願）の優先権を主張し、これは引用によって本明細書に援用される。

本開示は、α_Ｖインテグリン阻害剤としてのピロロピラジン化合物、そのような化合物を含む医薬組成物、並びに、治療における、特にヒトにおいてα_Ｖインテグリン阻害剤が適応する疾患、障害、および病状の治療または予防における、それらの使用に関する。

インテグリンは、多様な細胞外マトリックスタンパク質への細胞接着、細胞－細胞相互作用、細胞遊走、増殖、生存、および組織完全性の維持に関係する、α／βヘテロ二量体膜貫通タンパク質の大きなファミリーに属する（Barczyk et al. Cell and Tissue Research 2010, 339, 269; Srichai, M. B.; Zent, R. in Cell-Extracellular Matrix Interactions in Cancer, 2010）。哺乳動物において、１８のアルファおよび８のベータサブユニットの様々な組み合わせから知られている、２４のα／βインテグリンヘテロ二量体が存在する。トランスフォーミング増殖因子－β（ＴＧＦ－β）は、線維症、細胞増殖、および自己免疫性疾患の根底にある、多くの病理学的プロセスを促進する、中心的な役割を有する。α_Ｖβ１、α_Ｖβ３、α_Ｖβ５、α_Ｖβ６、およびα_Ｖβ８を含むアルファＶ（α_Ｖ）インテグリンは、潜在的なＴＧＦ－βを活性型に変換する、重要な経路に関係している（Henderson, N. C.; Sheppard, D. Biochim, Biophys. Acta 2013, 1832, 891）。そのため、そのような潜在的なＴＧＦ－βのα_Ｖインテグリン介在性活性化の拮抗作用は、ＴＧＦ－βによって引き起こされる病理学的状態に介入するための、実行可能な治療アプロートを提供する（Sheppard, D. Eur. Resp. Rev. 2008, 17, 157; Goodman, S. L.; Picard, M. Trends Pharmacol. Sciences 2012, 33(7), 405; Hinz, B. Nature Medicine 2013, 19(12), 1567; Pozzi, A.; Zent, R. J. Am. Soc. Nephrol. 2013, 24(7), 1034）。５つ全てのα_Ｖインテグリンは、フィブロネクチン、ビトロネクチン、および潜在関連ペプチド（ＬＡＰ）などの、天然のリガンドに存在する、アルギニン－グリシン－アスパラギン酸（ＲＧＤ）モチーフを認識する、インテグリンの小さなサブセット（２４個中８個）に属する。

α_Ｖインテグリンサブタイプの発現は、大きく変化する。例えば、α_Ｖβ６は健康な組織において、上皮性細胞に非常に低いレベルで発現するが、炎症および創傷治癒の間は大きく上方制御される。α_Ｖβ３およびα_Ｖβ５は、破骨細胞、内皮、平滑筋、および固形腫瘍細胞、並びにペリサイトおよびポドサイトに発現し、一方でα_Ｖβ１は活性化線維芽細胞およびメサンギウム細胞に発現する。

主要なアンメット・メディカル・ニーズを示す一般的な線維症は、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、肝臓および腎線維症、非アルコール性脂肪肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、非アルコール性脂肪肝炎（ＮＡＳＨ）、ならびに全身性硬化症である。非インテグリン介在メカニズムによって作用する２つの薬物、ピルフェニドンおよびニンテダニブは、最近ＩＰＦの治療について承認された。本発明は、これらのインテグリンによって介在される、線維症および癌などの病態の治療における、１つ以上のα_Ｖインテグリンの作用を阻害または拮抗する化合物に関する。

多くのα_Ｖインテグリンの選択的または非選択的小分子、ペプチド、および抗体に基づく阻害剤が、文献において報告されている（Kapp, T. G. et al. Expert Opin. Ther. Patents 2013, 23(10), 1273; O’Day, S. et al. Brit. J. Cancer 2011, 105(3), 346; Pickarski, M. et al. Oncol. Rep. 2015, 33, 2737; Wirth, M. et al. Eur. Urol. 2014, 897; Henderson, N. C. et al. Nature Medicine 2012, 19(12), 1617; Horan, G. S. et al. Am. J. Resp. Crit. Care Med. 2008, 177, 56; Puthawala, K. et al. Am. J. Resp. Crit. Care Med. 2008, 177, 82; Reed, N. I. et al. Sci. Transl. Med. 2015, 7(288), 288ra79; Anderson, N. A. et al. WO 2014/154725 A1, WO 2016/046225 A1, WO 2016/046226 A1, WO 2016/046230 A1, WO 2016/046241 A1）。

本発明の説明
本開示は、α_Ｖ含有インテグリンを阻害する、式Ｉ：

で示される化合物に関し、これらの化合物を含む医薬組成物、並びに病理学的線維症、移植片拒絶、癌、骨粗鬆症、および炎症性疾患などの、α_Ｖ含有インテグリンの調節不全に関連する疾患、障害、または病状の治療方法を含む。

本発明のある局面は、式Ｉ：

［式中、
Ｘは結合、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＲ^７－、アルキレン、アルキレンオキシ、アルキレンチオ、またはアルキレン－ＮＲ^７－であり；
Ｒ^１は水素、ハロ、またはアルキルであり；
Ｒ^２はグアニジル、（ジヒドロイミダゾリル）アミノ、（イミダゾリル）アミノ、（テトラヒドロピリミジル）アミノ、（ピリジニル）アミノ、（ベンゾイミダゾリル）アミノ、テトラヒドロナフチリジニル、ナフチリジニル、ジヒドロピリドオキサジニル、テトラヒドロピリドピラジニル、テトラヒドロピリドアゼピニル、テトラヒドロピリドオキサゼピニル、ジヒドロイミダゾイミダゾリル、またはテトラヒドロイミダゾピリミジニルであり、かつ、０－２個のアルキル置換基で置換され；
あるいは、Ｒ^２Ｘは一緒になって、ジ－（（テトラヒドロナフチリジニル）メチル）メチルであり；
Ｒ^３は水素、ハロ、またはアルキルであり；
Ｒ^４は水素またはＡｒ^１であり；
Ｒ^５は水素、ベンジルオキシカルボニルアミノ、またはＡｒ^１ＳＯ_２ＮＨであり；
Ｒ^６は水素またはアルキルであり；
Ｒ^７は水素またはアルキルであり；
Ａｒ^１はフェニル、ナフチル、ジヒドロベンゾフラニル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、キノリニル、またはキノキサリニルであり、かつ、シアノ、ハロ、アルキル、ハロアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、（シクロアルキル）アルコキシ、およびハロアルコキシから選択される、０－３個の置換基で置換される。］
で示される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。

本発明の別の局面は、
Ｘが結合またはアルキレンであり；
Ｒ^１が水素またはハロであり；
Ｒ^２がグアニジル、（ジヒドロイミダゾリル）アミノ、（イミダゾリル）アミノ、（テトラヒドロピリミジル）アミノ、（ピリジニル）アミノ、（ベンゾイミダゾリル）アミノ、テトラヒドロナフチリジニル、ナフチリジニル、ジヒドロピリドオキサジニル、テトラヒドロピリドピラジニル、テトラヒドロピリドアゼピニル、テトラヒドロピリドオキサゼピニル、ジヒドロイミダゾイミダゾリル、またはテトラヒドロイミダゾピリミジニルであり、かつ、０－２個のアルキル置換基で置換され；
Ｒ^３が水素であり；
Ｒ^４が水素またはＡｒ^１であり；
Ｒ^５が水素、ベンジルオキシカルボニルアミノ、またはＡｒ^１ＳＯ_２ＮＨであり；
Ｒ^６が水素またはアルキルであり；
Ｒ^７が水素またはアルキルであり；
Ａｒ^１がフェニル、ナフチル、ジヒドロベンゾフラニル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、キノリニル、またはキノキサリニルであり、かつ、シアノ、ハロ、アルキル、ハロアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、（シクロアルキル）アルコキシ、およびハロアルコキシから選択される、０－３個の置換基で置換されている、
式Ｉの化合物、またはその薬学的に許容可能な塩である。

本発明の別の局面は、Ｘが結合またはアルキレンである、式Ｉの化合物である。
本発明の別の局面は、Ｒ^１が水素またはハロである、式Ｉの化合物である。
本発明の別の局面は、Ｒ^２が（ピリジニル）アミノ、テトラヒドロナフチリジニル、またはナフチリジニルであり、かつ、０－２個のアルキル置換基で置換されている、式Ｉの化合物である。
本発明の別の局面は、Ｒ^３が水素である、式Ｉの化合物である。
本発明の別の局面は、Ｒ^４がＡｒ^１であり、Ｒ^５が水素である、式Ｉの化合物である。
本発明の別の局面は、Ｒ^４が水素であり、Ｒ^５がベンジルオキシカルボニルアミノまたはＡｒ^１ＳＯ_２ＮＨである、式Ｉの化合物である。
本発明の別の局面は、Ａｒ^１がフェニル、ピリジニル、またはピリミジニルであり、かつ、シアノ、ハロ、アルキル、ハロアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、（シクロアルキル）アルコキシ、およびハロアルコキシから選択される、０－３個の置換基で置換されている、式Ｉの化合物である。

式Ｉの化合物について、Ｘ、Ｒ^１、Ｒ^２、Ｒ^３、Ｒ^４、Ｒ^５、Ｒ^６、Ｒ^７、およびＡｒ^１などの可変な置換基の任意の例の範囲は、他の可変な置換基の任意の例の範囲とは独立して使用されうる。従って、本発明は異なる局面の組み合わせを含む。

特に記載されない限り、これらの用語は以下の意味を有する。「アルキル」は、１～６個の炭素から構成される、直鎖または分岐鎖アルキル基を意味する。「アルケニル」は、少なくとも１つの二重結合を有する、２～６個の炭素から構成される、直鎖または分岐鎖アルキル基を意味する。「アルキニル」は、少なくとも１つの三重結合を有する、２～６個の炭素から構成される、直鎖または分岐鎖アルキル基を意味する。「シクロアルキル」は、３～７個の炭素から構成される、単環式環系を意味する。炭化水素基（例えば、アルコキシ）を含む用語は、炭化水素基についての直鎖および分岐鎖異性体を含む。「ハロ」は、フルオロ、クロロ、ブロモ、およびヨードを含む。「ハロアルキル」および「ハロアルコキシ」は、モノハロからパーハロの全てのハロゲン化異性体が含まれる。「アリール」は、６～１２個の炭素原子を有する、単環式または二環式芳香族炭化水素基を意味し、ここで、環の１つまたは両方は芳香族である。二環式縮合環系は、４～７員の芳香族または非芳香族炭素環式環に縮合したフェニル基から成る。アリール基の代表的な例としては、限定されないが、フェニル、インダニル、インデニル、ナフチル、およびテトラヒドロナフチルが挙げられる。

「ヘテロアリール」は、窒素、酸素、および硫黄から独立して選択される、１～５個のヘテロ原子を有する、５～７員単環式または８～１１員二環式芳香環系を意味する。結合連結部位が特定されていない場合、結合は当業者に理解されるような、任意の適切な位置に連結されうる。置換基および結合パターンの組み合わせは、当業者によって理解されるように、安定な化合物を生じるもののみである。括弧付きおよび複数括弧付きの用語は、当業者に結合の関係性を明確化することを意図する。例えば、（（Ｒ）アルキル）などの用語は、置換基Ｒでさらに置換されたアルキル置換基を意味する。

本発明は、化合物の全ての薬学的に許容可能な塩を含む。薬学的に許容可能な塩は、その対イオンが生理学的活性、または化合物の毒性に有意に寄与せず、薬学的に等価な機能を有するものである。これらの塩は、市販の試薬を使用する、一般的な有機技術に従って製造することができる。いくつかのアニオン性塩の形態としては、アセテート、アシストレート、ベシレート、ブロマイド、クロライド、シトレート、フマレート、グルクロネート、ヒドロブロマイド、ヒドロクロライド、ヒドロアイオダイド、アイオダイド、ラクテート、マレアート、メシレート、ニトレート、パモエート、ホスフェート、スクシネート、サルフェート、タートレート、トシレート、およびキシナホエートが挙げられる。いくつかのカチオン性塩の形態としては、アンモニウム、アルミニウム、ベンザチン、ビスマス、カルシウム、コリン、ジエチルアミン、ジエタノールアミン、リチウム、マグネシウム、メグルミン、４－フェニルシクロヘキシルアミン、ピペラジン、カリウム、ナトリウム、トロメタミン、および亜鉛が挙げられる。

いくつかの本発明の化合物は、立体異性体形態で存在しうる。本発明は、エナンチオマーおよびジアステレオマーなどの、化合物の全ての立体異性体形態を含む。立体異性体の合成および分離方法は、当業者に既知である。本発明は、化合物の全ての互変異性体形態を含む。本発明は、アトロプ異性体および回転異性体を含む。

本発明は、化合物中に存在する原子の全ての同位体を含む。同位体としては、同じ原子数を有するが、異なる質量数を有する原子が挙げられる。一般的な例として、限定されないが、水素の同位体としては、重水素およびトリチウムが挙げられる。炭素の同位体としては、^１３Ｃおよび^１４Ｃが挙げられる。同位体標識した化合物は一般に、当業者に既知の従来の技術によって、または本明細書に記載されるものと類似の方法によって、他の場合に用いられる非標識試薬の代わりに、適切に同位体標識した試薬を用いて、合成することができる。そのような化合物は、例えば、生物学的活性の決定における、標準および試薬として、様々な潜在的用途を有しうる。安定な同位体の場合、そのような化合物は、生物学的、薬理学的、または薬物動態特性を有利に変更する可能性を有しうる。

合成方法
本発明の化合物は、以下のスキームおよび特定の実施態様のセクションのものなどの、当業者に既知の様々な方法によって合成することができる。合成スキームに示される構造の番号付けと変数の番号付けは、特許請求の範囲または明細書の他の部分における構造または変数の番号付けとは異なっており、これらと混同されるべきではない。スキームにおける変数は、本発明の化合物のいくつかの合成方法を説明することのみを意味する。

式（Ｉ’）のピロロン類似体は、スキーム１から４に示される一般的な経路に従って合成することができる。合成される特定の式（Ｉ’）の分子に応じて、Ｒ^１、Ｒ^２－Ｘ－、Ｒ^３、Ｒ^４、およびＲ^５は、式（Ｉ’）のジヒドロピロロピラジノン骨格構造の組み立て前に完全に導入されるか、あるいはその後に合成されうる。スキーム１に示されるように、ピロールエステル４は、Tetrahedron Lett. 2003, 44, 427 (Handy, et al.)に記載されるように、鈴木反応またはスティル反応によって、ピロールエステル１から合成することができる。あるいは、ピロールエステル４は、対応するメチル１Ｈ－ピロール－２－カルボキシレートから当業者に既知の合成変換によって、またはGupton et al. (J. Org. Chem. 1990, 55, 4735)の手順を用いた、ビナミジニウム塩２およびグリシンエステル４の環化によってのいずれかで、合成することができる。ビナミジニウム塩２は市販で入手可能であるか、あるいは Davies et al. (J. Org. Chem. 2001, 66, 251; hexafluorophosphate salts)の手順、またはArnold et al. (Collect. Czech. Chem. Commun. 1973, 38, 2633; perchlorate salts)の手順を用いて合成することができる。ピロールカルボン酸５は、ＥｔＯＨまたはＭｅＯＨなどの溶媒中で、ＮａＯＨ、ＫＯＨまたはＬｉＯＨなどの塩基によって、ピロールエステル４を鹸化し、次いでＨＣｌまたはＨ_２ＳＯ_４などの酸による酸性化によって合成されうる。Ｒ^６＝Ｈである式（Ｉ’）の化合物は、当業者に既知のアミド形成を生じる様々な手順のうちの１つを用いた、アミノエステル６とピロールカルボン酸５との間のアミド結合形成、市販の式７の化合物によるジアルキル化によって得ることができ、あるいは、Ｘ＝ハロゲン、ＯＴｓ、ＯＭｓの場合、ＮａＨ、ＫＯｔＢｕ、Ｅｔ_３Ｎ、ｉＰｒ_２ＮＥｔ、ＮａＯＨ／Ｂｕ_４ＮＢｒなどの塩基の存在下で、当業者に容易に知られている方法を用いて合成することができ、次いで得られたカルボキシエステルを脱保護する。あるいは、ジアルキル化生成物は、アミノエステル６およびピロールカルボン酸５から得られたアミドを、ＫＯＨの存在下で、ジフェニルビニルスルホニウムトリフルレート（８）と反応させることによって、合成されうる (An et al. Chem. Commun., 2011, 47, 1869)。アミノエステル６は、文献（例えば、Hutchinson, J. H. et al. J. Med Chem. 2003, 46, 4790; Henderson, N. C. et al. Nature Medicine 2013, 19, 1617）において既知の方法を用いて、合成することができる。

アルギニン模倣体としてのテトラヒドロナフチリジンを含む、式（Ｉ’）の化合物（Ｒ^６＝Ｈ；式１５、および１６）の合成は、スキーム２に示す。ピロールエステル４は、標準的なヘック・カップリング条件下（Felpin, F.-X.; Nassar-Hardy, L.; Le Callonnec, F.; Fouquet, E. Tetrahedron 2011, 67, 2815－2831）で、ａ）ケトンアルケン９またはｂ）ヒドロキシルアルキルアルケン１０とカップリングさせ、次いで得られたアルコールを酸化させることによって、ケトンエステル１１に変換することができる。ナフチリジンエステル１２は、フリードランダー条件下で、ケトンエステル１１を２－アミノ－３－ホルミルピリジンと縮合させることによって生成することができる（Jose Marco-Contelles; Elena Perez-Mayoral; Abdelouahid Samadi; Maria do Carmo Carreiras; Elena Soriano (2009). 「Recent Advances in the Friedlander Reaction」. Chemical Reviews. 109 (6): 2652－2671）。ナフチリジンアミド１４は、ナフチリジンエステル１２の脱保護から得られたカルボン酸を、当業者に既知の様々なアミド形成方法の１つを用いて、アミノエステル６とカップリングさせることによって得ることができる。テトラヒドロナフチリジン酸１５（主）および１６（副）は、Ｘ＝ハロゲン、ＯＴｓ、ＯＭｓの場合、ＮａＨ、ＫＯｔＢｕ、Ｅｔ_３Ｎ、ｉＰｒ_２ＮＥｔ、ＮａＯＨ／Ｂｕ_４ＮＢｒなどの塩基の存在下で、ナフチリジンアミド１４によってジアルキル化させ、あるいはＫＯＨの存在下で、ナフチリジンアミド１４をジフェニルビニルスルホニウムトリフルレート（８）と反応させて、ＰｔＯ_２などの触媒の存在下で、ナフチリジン環の選択的な環還元、次いで得られたカルボキシルエステルの脱保護によって、合成することができる。テトラヒドロナフチリジン酸１５および１６はまた、p－トシルアミドなどのスルホンアミドの存在下で、メチルナフチリジンなどのあらかじめ形成されたナフチリジンを有する出発物質と、アルデヒドエステル１７を縮合させて（Yizhe Yan; Kun Xu; Yang Fang; and Zhiyong Wang. J. Org. Chem. 2011, 76, 6849－6855）、次いで１２から１５および１６への変換に用いたものと同様の方法を用いることによって、合成することができる。あるいは、１５および１６は、１２または１８の選択的な環還元によってテトラヒドロナフチリジンエステル１９（主）および２０（副）を生じ、次いで１２から１５および１６への変換に用いたものと同様の方法によって変換することによって、合成することができる。

スキーム３は、２－アミノピリジンをアルギニン模倣体として用いた、式（Ｉ’）の化合物（Ｒ^６＝Ｈ；式２５）の合成の例を記載する。アミノエステル２２は、ヘック反応条件下で、ピロールエステル４を保護されたアミノアルケン２１とカップリングさせ、次いで脱保護することによって合成した。Ｎ－オキシド２３は、２－クロロピリジンオキシドをアミノエステル２２によって求核置換することによって形成することができる。アミノピリジン酸２４は、Ｐｄ／Ｃの存在下で、Ｎ－オキシド２３を還元し、エステル脱保護することによって合成することができる。アミノピリジン酸２５は、スキーム１において５を式（Ｉ’）の化合物に変換するために用いたものと同様の方法を用いて、アミノエステル６およびアミノピリジン酸２４から得ることができる。

２－アミノジヒドロイミダゾールをアルギニン模倣体として用いた、式（Ｉ’）の化合物（Ｒ^６＝Ｈ；式２９）の合成の例は、スキーム４に概説される。アミノジヒドロイミダゾールエステル２７は、２－（メチルチオ）－４，５－ジヒドロ－１Ｈ－イミダゾールなどの適切な親電子物質を用いた、前記のアミノエステル２２の反応によって、次いでエステル脱保護によって、合成することができる。アミノジヒドロイミダゾール酸２８は、Ｐｄ／Ｃの存在下で、アミノジヒドロイミダゾールエステル２７の二重結合を還元し、次いでエステル脱保護をすることによって、合成することができる。アミノピリジン酸２９は、スキーム１において５を式（Ｉ’）の化合物に変換するために用いたものと同様の方法を用いることによって、アミノエステル６およびアミノジヒドロイミダゾール酸２８から得ることができる。

生物学的方法
全ての結合アッセイは、Cisbio InternationalからのＨＴＲＦ（均一時間分解蛍光）技術を用い、そのため全ての結合アッセイはＨＴＲＦ結合アッセイとして記載される。ヒトαＶβ６（？）によって例示された、実施例についてのアッセイ結果は、表１に列挙される。ＨＴＲＦ結合アッセイは、以下のインテグリンについて確立されている：ヒトαＶβ６、ヒトαＶβ１、ヒトαＶβ３、ヒトαＶβ５、およびヒトαＶβ８。全てのアッセイは、以下のアッセイ緩衝液を用いた：２０ｍＭＴｒｉｓ、ｐＨ７．４、１ｍＭＭｇＣｌ_２、１ｍＭＭｎＣｌ_２、０．０１％Ｔｗｅｅｎ２０、および０．０１％ＢＳＡ。あるいは、ＳＰＡに基づくアッセイを受容体結合の評価のために用いた。

以下にヒトαＶβ６ＨＴＲＦ結合アッセイのための構成成分および代表的な手順を記載する：組み換えヒトαＶβ６インテグリン（Ｒ＆Ｄシステム、３８１７－ＡＶ）を、ビオチニル化した。ビオチニル化ヒトαＶβ６インテグリンを、１．２５ｎＭの最終濃度でアッセイ容器に加えた。ＦＩＴＣ結合フィブロネクチン（Ｃｙｔｏｓｋｅｌｅｔｏｎ、ＦＮＲ０２）を次いで、５ｎＭの最終濃度で加えた。混合物をThermo Fisher Heraeus Multifuge X3 遠心分離器を用いて、３分間６００ｒｐｍで遠心分離し、次いで室温で１時間インキュベートした。ストレプトアビジン・テルビウム (Cisbio international 610STLB)を次いで、０．６２５ｎＭの最終濃度で加えた。得られた混合物をThermo Fisher Heraeus Multifuge X3 遠心分離器を用いて、３分間６００ｒｐｍで遠心分離し、次いで暗所、室温で一晩インキュベートし、その後ＨＴＲＦシグナルを読み取った。

以下の参考文献に記載されるものと同様の手順および方法に従って、当業者に容易に理解される適切な薬剤の変更と共に、ＳＰＡに基づくアッセイを行った：Pachter JA, Zhang R, Mayer-Ezell R., 「Scintillation proximity assay to measure binding of soluble fibronectin to antibody-captured αVβ1 integrin」 Anal Biochem. 1995 Sep 1;230(1):101-7.

医薬組成物および治療的使用
本発明の別の局面は、治療上の有効量の本発明の化合物、またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容可能な塩、もしくは溶媒和物を患者に投与することを含む、そのような治療が必要な患者におけるα_Ｖインテグリンの調節不全に関連する疾患、障害、または病状の治療のための方法を提供する。

本発明の別の局面は、治療上の有効量の少なくとも１つの本発明の化合物を、単体で、または適宜、本発明の他の化合物および／または少なくとも１つの他の種類の治療剤との組み合わせで、治療が必要な患者に投与することを含む、疾患、障害、または病状の治療のための方法を提供する。

本発明の別の局面は、治療上の有効量の本発明の化合物、またはその立体異性体、互変異性体、もしくは薬学的に許容される塩、もしくは溶媒和物を患者に投与することを含む、患者においてインテグリン受容体拮抗作用を誘発する方法を提供する。ある実施態様において、インテグリン受容体拮抗効果は、α_Ｖβ６、α_Ｖβ１、α_Ｖβ３、α_Ｖβ５、およびα_Ｖβ８のいずれかに対する、またはα_Ｖβ６、α_Ｖβ１、α_Ｖβ３、α_Ｖβ５、およびα_Ｖβ８の１つ以上の組み合わせに対する拮抗効果である。例えば、インテグリン受容体拮抗効果は、α_Ｖβ６、α_Ｖβ１、α_Ｖβ３、α_Ｖβ５、およびα_Ｖβ８拮抗効果でありうる。

本発明の別の局面は、肺、肝臓、腎臓、心臓、皮膚、眼、および膵線維症などの、線維症に関連する疾患、障害、または病状の場合である。

本発明の別の局面は、癌などの細胞増殖性疾患に関連する疾患、障害、または病状の場合である。いくつかの実施態様において、癌としては、固形腫瘍増殖または腫瘍が挙げられる。別の実施態様において、癌としては腫瘍転移が挙げられる。いくつかの実施態様において、癌は膀胱、血液、骨、脳、乳房、中枢神経系、頸、結腸、子宮内膜、食道、胆嚢、生殖器、泌尿生殖器、頭、腎臓、喉頭、肝臓、肺、筋肉組織、首、口または鼻粘膜、卵巣、膵臓、前立腺、皮膚、脾臓、小腸、大腸、胃、精巣、または甲状腺である。別の実施態様において、癌は癌、肉腫、リンパ腫、白血病、黒色腫、中皮腫、多発性骨髄腫、または精上皮腫である。本発明によって予防、制御、または治療することができる、α_Ｖインテグリンの活性に関連する疾患、障害、または病状の例としては、限定されないが、移植片注入、線維症性障害（例えば、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、間質性肺疾患、肝線維症、腎線維症、皮膚線維症、全身性硬化症）、炎症性疾患（例えば、急性肝炎、慢性肝炎、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、乾癬、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ））、骨粗鬆症、ならびに細胞増殖性疾患（例えば、癌、骨髄腫、線維腫、肝細胞癌、白血病、カポジ肉腫、固形腫瘍）が挙げられる。

本発明の化合物によって予防または治療されるのに適切な線維症性障害、炎症性疾患、並びに細胞増殖性疾患としては、限定されないが、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、間質性肺疾患、非特異性間質性肺疾患（ＮＳＩＰ）、通常型間質性肺炎（ＵＩＰ）、放射線誘発線維症、家族性肺線維症、気道線維症、慢性閉塞性肺疾患（ＣＯＰＤ）、糖尿病性腎症、巣状分節性糸球体硬化症、ＩｇＡ腎症、薬物または移植誘発性腎症、自己免疫性腎症、狼瘡腎炎、肝線維症、腎線維症、慢性腎臓病（ＣＫＤ）、糖尿病性腎症（ＤＫＤ）、皮膚線維症、ケロイド、全身性硬化症、強皮症、ウイルス誘発性線維症、非アルコール性脂肪性肝疾患（ＮＡＦＬＤ）、アルコール性または非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、急性肝炎、慢性肝炎、肝硬変、原発性硬化性胆管炎、薬剤誘発性肝炎、胆汁性肝硬変、門脈圧亢進症、再生不全、肝機能低下、肝血流障害、腎症、肺炎、乾癬、過敏性腸症候群（ＩＢＳ）、炎症性腸疾患（ＩＢＤ）、異常な膵臓分泌、良性前立腺過形成、神経性膀胱疾患、脊髄腫瘍、椎間板ヘルニア、脊柱管狭窄症、心不全、心線維症、血管性線維症、血管周囲線維症、手足口病、癌、骨髄腫、線維腫、肝細胞癌、白血病、慢性リンパ性白血病、カポジ肉腫、固形腫瘍、脳梗塞、脳出血、神経障害性疼痛、末梢ニューロパチー、加齢黄斑変性症（ＡＭＤ）、緑内障、眼線維症、角膜瘢痕、糖尿病性網膜症、増殖性硝子体網膜症（ＰＶＲ）、瘢痕性類天疱瘡緑内障濾過手術瘢痕、クローン病または全身性エリテマトーデス；異常創傷治癒から生じるケロイド形成；臓器移植後に生じる線維症、骨髄線維症、および子宮筋腫が挙げられる。ある実施態様において、本発明は、治療上の有効量の少なくとも１つの本発明の化合物を、単体で、または適宜、本発明の他の化合物および／または少なくとも１つの他の種類の治療剤との組み合わせで、治療が必要な患者に投与することを含む、線維症性障害、炎症性疾患、または細胞増殖性疾患の治療のための方法を提供する。

本発明の別の局面は、線維症性障害、炎症性疾患、または細胞増殖性疾患を治療するために、治療において用いるための本発明の化合物を提供する。

本発明の別の局面は、線維症性障害、炎症性疾患、または細胞増殖性疾患を治療するための医薬の製造のための、本発明の化合物の使用を提供する。

本発明の別の局面は、治療上の有効量の第一および第二治療剤を、必要な患者に投与することを含む、線維症性障害、炎症性疾患、または細胞増殖性疾患の治療のための方法を提供し、ここで、第一治療剤が本発明の化合物である。

本発明の別の局面は、治療において同時に、別々に、または順次使用するための、本発明の化合物およびさらなる治療剤の組み合わせ製剤を提供する。

本発明の別の局面は、線維症性障害、炎症性疾患、または細胞増殖性疾患の治療において同時に、別々に、または順次使用するための、本発明の化合物およびさらなる治療剤の組み合わせ製剤を提供する。

本発明の化合物は、１つ以上の抗線維症性および／または抗炎症性治療剤などの、さらなる治療剤との組み合わせで用いられうる。

本発明の別の局面は、組み合わせ医薬組成物、または組み合わせ方法、または組み合わせ使用において用いられる、以下の治療剤のうち１つ以上、好ましくは１から３個から選択される、さらなる治療剤に関する：ＴＧＦβ合成阻害剤（例えば、ピルフェニドン）、血管内皮細胞増殖因子（ＶＥＧＦ）、血小板由来増殖因子（ＰＤＧＦ）、および線維芽細胞増殖因子（ＦＧＦ）受容体キナーゼの阻害剤（例えば、ニンテダニブ）、ヒト化抗α_Ｖβ６モノクローナル抗体（例えば、３Ｇ９）、ヒト組み換えペントラキシン－２、組み換えヒト血清アミロイドＰ、ＴＧＦβ－１、－２、および－３に対する組み換えヒト抗体、エンドセリン受容体アンタゴニスト（例えば、マシテンタン）、インターフェロンガンマ、ｃ－Ｊｕｎアミノ末端キナーゼ（ＪＮＫ）阻害剤（例えば、４－［［９－［（３Ｓ）－テトラヒドロ－３－フラニル］－８－［（２，４，６－トリフルオロフェニル）アミノ］－９Ｈ－プリン－２－イル］アミノ］－トランス－シクロヘキサノール、３－ペンチルベンゼン酢酸（ＰＢＩ－４０５０）、マンガン（ＩＩＩ）を含むテトラ置換ポルフィリン誘導体、エオタキシン－２標的モノクローナル抗体、インターロイキン－１３（ＩＬ－１３）抗体（例えば、レブリキズマブ、トラロキヌマブ）、インターロイキン４（ＩＬ－４）およびインターロイキン１３（ＩＬ－１３）を標的とする二重特異性抗体、ＮＫ１タキキニン受容体アゴニスト（例えば、Ｓａｒ^９、Ｍｅｔ（Ｏ_２）^１１－物質Ｐ）、シトレデキン・ベスドトックス (Cintredekin Besudotox)、ヒト組み換えＤＮＡ由来の、結合性増殖因子に対するＩｇＧ１カッパモノクローナル抗体、およびＣＣ－ケモカインリガンド２選択的な全ヒトＩｇＧ１カッパ抗体（例えば、カルルマブ、ＣＣＸ１４０）、抗酸化剤（例えば、Ｎ－アセチルシステイン）、ホスホジエステラーゼ５（ＰＤＥ５）阻害剤（例えば、シルデナフィル）、ムスカリンアンタゴニストなどの閉塞性気道疾患の治療のための薬剤（例えば、チオトロピウム、イプラトロピウムブロマイド）、アドレナリンβ２アゴニスト（例えば、サルブタモール、サルメテロール）、コルチコステロイド（例えば、トリアムシノロン、デキサメサゾン、フルチカゾン）、免疫抑制剤（例えば、タクロリムス、ラパマイシン、ピメクロリムス）、およびＦＸＲアゴニストなどのＮＡＬＦＤ、ＮＡＳＨ、または全身性硬化症の治療に有用な治療剤（例えば、ＯＣＡ、ＧＳ－９６７４、およびＬＪＮ４５２）、ＬＯＸＬ２阻害剤（例えば、シムツズマブ（simtuzumab））、ＬＰＡ１アンタゴニスト（例えば、ＳＡＲ１００８４２）、ＰＰＡＲモジュレーター（例えば、エラフィブラノル（elafibrinor）、ピオグリタゾン、およびサログリタザル（saroglitazar）、ＩＶＡ３３７）、ＳＳＡＯ／ＶＡＰ－１阻害剤（例えば、ＰＸＳ－４７２８ＡおよびＳＺＥ５３０２）、ＡＳＫ－１阻害剤（例えば、ＧＳ－４９９７）、ＡＣＣ阻害剤（例えば、ＣＰ－６４０１８６およびＮＤＩ－０１０９７６）、ＦＧＦ２１アゴニスト（例えば、ＬＹ２４０５３１９）、カスパーゼ阻害剤（例えば、エミリカサン（emricasan）)、ＮＯＸ４阻害剤（例えば、ＧＫＴ１３７８３１）、ＭＧＡＴ２阻害剤、および胆汁酸／脂肪酸結合体（例えば、アラムコール（aramchol）)。本発明の様々な実施態様のα_Ｖ阻害剤はまた、ＣＣＲ２／５阻害剤（例えば、セニクリビロク）、ガレクチン－３阻害剤（例えば、ＴＤ－１３９、ＧＲ－ＭＤ－０２）、ロイコトリエン受容体アンタゴニスト（例えば、チペルカスト、モンテルカスト）、ＳＧＬＴ２阻害剤（例えば、ダパグリフロジン、レモグリフロジン（remogliflozin））、ＧＬＰ－１アゴニスト（例えば、リラグルチドおよびセマグルチド）、ＦＡＫ阻害剤（例えば、ＧＳＫ－２２５６０９８）、ＣＢ１インバースアゴニスト（例えば、ＪＤ－５０３７）、ＣＢ２アゴニスト（例えば、ＡＰＤ－３７１およびＪＢＴ－１０１）、オートタキシン阻害剤（例えば、ＧＬＰＧ１６９０）、プロリルｔ－ＲＮＡ合成酵素阻害剤（例えば、ハロフギノン）、ＦＰＲ２アゴニスト（例えば、ＺＫ－９９４）、およびＴＨＲアゴニスト（例えば、ＭＧＬ：３１９６）などの、１つ以上の治療剤との組み合わせにおいても用いられうる。

化合物は、例えば、錠剤、カプセル(それぞれ、除放性または遅延放出性製剤)、丸剤、散剤、顆粒、エリキシル、チンキ剤、懸濁液、シロップ、およびエマルジョンなどの経口；舌下；バッカル；皮下、静脈内、筋肉内、または胸骨内注射または注入技術（例えば、無菌注入可能な水溶液または非水溶液または懸濁液）などの、非経口；吸入スプレーなどの経鼻膜への投与などの経鼻；クリームまたは軟膏の形態などの局所；または坐薬の形態などの直腸など、任意の適切な方法によって、本明細書に記載される任意の使用のために投与することができる。これらは単体で投与することができるが、選択された投与経路および標準的な薬務に基づいて選択される、薬学的担体と共に投与される。

「医薬組成物」は、少なくとも１つのさらなる薬学的に許容可能な担体との組み合わせで、本発明の化合物を含む組成物を意味する。

「薬学的に許容可能な担体」は、生物学的に活性な薬剤を動物、特に哺乳動物に送達するための、当技術分野において一般に許容されている媒体、すなわち、投与形態および剤形の性質に応じて、希釈剤、防腐剤、充填剤、流量調節剤、崩壊剤、湿潤剤、乳化剤、懸濁化剤、甘味剤、風味剤、芳香剤、抗菌剤、抗真菌剤、滑沢剤、および分散剤などの、アジュバント、賦形剤、またはビヒクルなどをいう。薬学的に許容可能な担体は、十分に当業者の知識の範囲内である、多くの要因に従って製剤化される。これらとしては、限定されないが、製剤化される活性な薬剤の種類および性質；薬剤を含む組成物が投与される対象；組成物の意図される投与経路；および治療される治療上の適応症が挙げられる。薬学的に許容可能な担体としては、水性および非水性液体媒体の両方、並びに様々な固形および半固形剤形が挙げられる。そのような担体は、活性な薬剤に加えて、多くの異なる成分および添加剤を含むことができ、そのようなさらなる成分は、当業者に周知の様々な理由、例えば、活性剤、結合剤などの安定化などのために、製剤に含まれる。適切な薬学的に許容可能な担体、およびそれらの選択に関する要因の説明は、例えば、Remington’s Pharmaceutical Sciences, 18th Edition (1990)などの様々な容易に入手可能な情報源において存在する。

「治療すること」または「治療」は、化合物または組成物を用いることによって、臨床的結果などの、有益なまたは目的の結果を得るためのアプローチをいい、以下が挙げられる：疾患、障害、または病状に起因する、１つ以上の症状の重症度および／または頻度を減少させること；疾患、障害、または病状の程度を軽減させること、または退縮を引き起こすこと；疾患、障害、または病状を安定化させること（例えば、疾患、障害、または病状の悪化を予防することまたは遅延させること）；疾患、障害、または病状の進行を遅延させること、または遅らせること；疾患、障害、または病状を寛解させること；疾患、障害、または病状を治療するのに必要な１つ以上の他の薬物の用量を減少させること；および／またはクオリティ・オブ・ライフを上昇させること。

用量レジメンは、当然ながら、特定の薬剤の薬力学的特性および投与形式および投与経路；受容者の種、年齢、性別、健康状態、病状、および体重；症状の性質および程度；併用療法の種類；治療の頻度；投与経路、患者の腎臓および肝臓の機能、および目的の効果などの、既知の要因に応じて変化する。

一般的な指標として、所定の効果について用いられる場合、それぞれの活性成分の１日経口用量は、約０．０１から約５０００ｍｇ／日、好ましくは約０．１から約１０００ｍｇ／日、および最も好ましくは約０．１から約２５０ｍｇ／日の範囲である。静脈内の場合、最も好ましい用量は、一定速度の注入の間、約０．０１から約１０ｍｇ／ｋｇ／分の範囲である。本発明の化合物は、単一の１日用量で投与されてもよく、あるいは１日用量の総量は、毎日２、３、または４回の分割用量で投与されてもよい。

化合物は一般に、例えば、経口錠剤、カプセル、エリキシル、およびシロップなどの目的の投与形態について適切に選択され、従来の薬務と一致する、適切な医薬的希釈剤、賦形剤、または担体（本明細書において、合わせて医薬的担体と称する）との混合物において投与される。

投与に適切な剤形（医薬組成物）は、単位用量あたり約１ミリグラムから約２０００ミリグラムの活性成分を含みうる。これらの医薬組成物において、活性成分は通常、組成物の総重量に基づいて約０．１－９５重量％の分量で存在する。経口投与のための典型的なカプセルは、少なくとも１つの本発明の化合物（２５０ｍｇ）、ラクトース（７５ｍｇ）、およびステアリン酸マグネシウム（１５ｍｇ）を含む。混合物を６０メッシュのシーブを通過させ、１番のゼラチンカプセルに充填する。典型的な注入可能な製剤は、バイアル中に少なくとも１つの本発明の化合物（２５０ｍｇ）を無菌的にいれ、無菌的に凍結乾燥および密封することによって製造される。使用のために、バイアルの内容物を２ｍＬの生理食塩水と混合し、注入可能な製剤を作成する。

化合物は単体で、または１つ以上のさらなる治療剤との組み合わせで投与することができる。「組み合わせで投与される」または「組み合わせ治療」は、組み合わせで投与される場合、化合物のそれぞれの成分が同時または異なる時点において任意の順で順次投与されうることを意味する。そのため、それぞれの成分は、別々に投与されてもよいが、目的の治療効果を提供するように、時間的に十分に近接する。

化合物はまた、α_Ｖインテグリンに関する試験またはアッセイにおいて、標準または参照化合物として、例えば、品質標準または対照として、有用である。そのような化合物は、例えば、α_Ｖインテグリン活性に関する製薬研究における使用のための、市販のキットで提供されうる。例えば、既知の活性を、未知の活性を有する化合物と比較するアッセイにおいて、参照として。これは、特に試験化合物が参照化合物の誘導体である場合に、アッセイが適切に実行されたことを実験者に保証し、比較のための基準を提供する。

本明細書で用いられる略語は、以下のように定義される：「１ｘ」は１回、「２ｘ」は２回、「３ｘ」は３回、「℃」はセルシウス度、「ｅｑ」は当量、「ｇ」はグラム、「ｍｇ」はミリグラム、「Ｌ」はリットル、「ｍＬ」はミリリットル、「μＬ」はマイクロリットル、「Ｎ」はノーマル、「Ｍ」はモラー、「ｎＭ」はナノモラー、「ｍｏｌ」はモル、「ｍｍｏｌ」はミリモル、「ｍｉｎ」は分、「ｈ」は時間、「ｒｔ」は室温、「ＲＴ」は保持時間、「ａｔｍ」は雰囲気、「ｐｓｉ」は重量ポンド毎平方インチ、「ｃｏｎｃ．」は濃度、「ｓａｔ」または「ｓａｔ’ｄ」は飽和、「ＭＷ」は分子量、「ｍｐ」は融点、「ＭＳ」または「ＭａｓｓＳｐｅｃ」はマススペクトロメトリー、「ＥＳＩ」はエレクトロスプレーイオン化質量分析、「ＨＲ」は高分解能、「ＨＲＭＳ」は高分解能マススペクトロメトリー、「ＬＣＭＳ」は液体クロマトグラフィーマススペクトロメトリー、「ＨＰＬＣ」は高速液体クロマトグラフィー、「ＲＰＨＰＬＣ」は逆相ＨＰＬＣ、「ＴＬＣ」または「ｔｌｃ」は薄層クロマトグラフィー、「ＮＭＲ」は核磁気共鳴スペクトロスコピー、「ｎＯｅ」は核オーバーハウザー効果スペクトロスコピー、「１Ｈ」はプロトン、「δ」はデルタ、「ｓ」はシングレット、「ｄ」はダブレット、「ｔ」はトリプレット、「ｑ」はカルテット、「ｍ」はマルチプレット、「ｂｒ」はブロード、「Ｈｚ」はヘルツ、および「α」、「β」、「Ｒ」、「Ｓ」、「Ｅ」、および「Ｚ」は、当業者に周知な立体化学表記である。

本発明の化合物は、以下の反応スキームおよびその説明、並びに当業者に用いられ得る関連する出版物の手順に示されるように合成することができる。これらの反応についての試薬および手順の例は、以下および実施例に示される。

略語
以下の略語が本明細書において用いられる：
Ｂｎ＝ベンジル
ｔ－Ｂｕ＝ターシャリーブチル
Ｂｏｃ＝ｔｅｒｔ－ブチルオキシカルボニル
Ｂｏｃ_２Ｏ＝二炭酸ジ－ｔｅｒｔ－ブチル
Ｃｓ_２ＣＯ_３＝炭酸セシウム
ＤＢＵ＝１，８－ジアザビシクロ［５．４．０］ウンデカ－７－エン
ＤＣＭまたはＣＨ_２Ｃｌ_２＝ジクロロメタン
ＤＩＡＤ＝ジイソプロピルアゾジカルボキシレート
デス・マーチン・ペルヨージナンまたはＤＭＰ＝１，１，１－トリアセトキシ－１，１－ジヒドロ－１，２－ベンズヨードキソール－３（１Ｈ）－オン
ＤＩＰＥＡまたはｉ－Ｐｒ_２ＮＥｔ＝ジイソプロピルエチルアミン
ＤＭＡＰ＝４－ジメチルアミノピリジン
ＤＭＦ＝ジメチルホルムアミド
Ｅｔ＝エチル
Ｅｔ_３Ｎ＝トリエチルアミン
ＥｔＯＨ＝エタノール
Ｅｔ_２Ｏ＝ジエチルエーテル
ＥｔＯＡｃ＝酢酸エチル
ＨＯＡｃまたはＡｃＯＨ＝酢酸
Ｋ_２ＣＯ_３＝炭酸カリウム
ＬｉＣｌ＝塩化リチウム
ＬｉＯＡｃ＝酢酸リチウム
ＬｉＯＨ＝水酸化リチウム
Ｍｅ＝メチル
ＭｅＣＮまたはＡＣＮ＝アセトニトリル
ＭｅＯＨ＝メタノール
ＭｇＳＯ_４＝硫酸マグネシウム
ＮａＢＨ_４＝水素化ホウ素ナトリウム
ＮａＯＨ＝水酸化ナトリウム
ＮａＨＣＯ_３＝重炭酸ナトリウム
ＰＢｕ_３＝トリブチルホスフィン
Ｐｈ＝フェニル
Ｐｄ／Ｃ＝パラジウム／炭素
Ｐｄ（ＯＡｃ）_２＝パラジウム（ＩＩ）アセテート
Ｐｈ_３Ｐ＝トリフェニルホスフィン
ＰｔＯ_２＝白金ジオキシド
ＴＢＡＦ＝テトラ－ｎ－ブチルアンモニウムフルオライド
ＴＢＤＭＳ＝ｔｅｒｔ－ブチルジメチルシリル
ＴＭＳ＝トリメチルシリル
ＴＨＦ＝テトラヒドロフラン
ＴＦＡ＝トリフルオロ酢酸
ｍｉｎ＝分
ｈｒまたはｈｒｓ＝時間（ｓ）
Ｌ＝リットル
ｍＬ＝ミリリットル
μＬ＝マイクロリットル
ｇ＝グラム
ｍｇ＝ミリグラム
ｍｏｌ＝モル
ｍｍｏｌ＝ミリモル
ｍｅｑ＝ミリ当量
ｓａｔまたはｓａｔ’ｄ＝飽和
ａｑ.＝水性
ＴＬＣ＝薄層クロマトグラフィー
ＨＰＬＣ＝高速液体クロマトグラフィー
ＬＣ／ＭＳ＝高速液体クロマトグラフィー／マススペクトロメトリー
ＭＳまたはＭａｓｓＳｐｅｃ＝マススペクトロメトリー
ＮＭＲ＝核磁気共鳴
ｍｐ＝融点

ＮＭＲ（核磁気共鳴）スペクトルは、一般に、示される溶媒中で、ＢｒｕｋｅｒまたはＪＥＯＬ４００ＭＨｚおよび５００ＭＨｚ機器において得た。全ての化学シフトは、内部標準としての溶媒共鳴を有するテトラメチルシランからのｐｐｍにおいて報告する。^１ＨＮＭＲスペクトルデータは、一般に、以下のように報告する：化学シフト、多重度（ｓ＝シングレット、ｂｒｓ＝ブロードシングレット、ｄ＝ダブレット、ｄｄ＝ダブレットのダブレット、ｔ＝トリプレット、ｑ＝カルテット、ｓｅｐ＝セプテット、ｍ＝マルチプレット、ａｐｐ＝見かけ）、カップリング定数（Ｈｚ）、および積分値。

ＨＰＬＣは、以下の方法の１つを用いた、Ｓｈｉｍａｄｚｕ高速液体クロマトグラフィー機器をいう：
分析ＨＰＬＣ方法＃１：Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）Ｌｕｎａ５μ Ｃ１８４．６ｘ５０ｍｍ、４分の勾配、１０％ＭｅＯＨ／９０％Ｈ_２Ｏ／０．１％Ｈ_３ＰＯ_４から９０％ＭｅＯＨ／１０％Ｈ_２Ｏ／０．１％Ｈ_３ＰＯ_４、１分間保持；４ｍＬ／分、２２０ｎｍにおけるＵＶ検出。
分析ＨＰＬＣ方法＃２：ＹＭＣｓ５ＣｏｍｂｉｓｃｒｅｅｎＯＤＳ６ｘ５０ｍｍ、４分の勾配、１０％ＡＣＮ／９０％Ｈ_２Ｏ／０．１％ＴＦＡから９０％ＡＣＮ／１０％Ｈ_２Ｏ／０．１％ＴＦＡ、１分間保持；４ｍＬ／分、２２０ｎｍにおけるＵＶ検出。

中間体１
エチル（Ｓ）－３－アミノ－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート、ＨＣｌ

中間体－１Ａ、中間体－１Ｂ、および中間体－１Ｃは、Hutchinson, J. H. et. al., J. Med. Chem. 2003, 46, 4790に記載される方法に従って合成した。
中間体－１Ａ．エチル（Ｅ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）アクリレート： ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.59 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.33 － 7.21 (m, 2H), 6.96 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 6.30 (d, J = 15.7 Hz, 1H), 4.27 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 1.34 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。LCMS (ES): m/z 225.1 [M+H]⁺。
中間体－１Ｂ．エチル（Ｓ）－３－（ベンジル（（Ｓ）－１－フェニルエチル）アミノ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート： ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.59 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.33 － 7.21 (m, 2H), 6.96 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 6.30 (d, J = 15.7 Hz, 1H), 4.27 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 1.34 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。LCMS (ES): m/z 436.2 [M+H]⁺。
中間体－１Ｃ．エチル（Ｓ）－３－アミノ－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート： ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.13 (dd, J = 12.2、2.1 Hz, 1H), 7.07 (dt, J = 8.3、1.5 Hz, 1H), 6.92 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 4.37 (t, J = 6.7 Hz, 1H), 4.15 (qd, J = 7.1、1.0 Hz, 2H), 3.88 (s, 3H), 2.65 － 2.55 (m, 2H), 1.25 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 LCMS (ES): m/z 242.1 [M+H]⁺。

中間体－１Ｄ．エチル（Ｓ）－３－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート：０℃の、中間体－１Ｃ（３１．８ｇ、１３２ｍｍｏｌ）のＴＨＦ（１８９ｍＬ）中の溶液に、トリエチルアミン（２０．２ｍＬ、１４５ｍｍｏｌ）および（Ｂｏｃ）_２Ｏ（３０．６ｍＬ、１３２ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１８．５時間攪拌した後、反応液をＥｔＯＡｃで希釈し、水、１０％クエン酸、およびブラインで洗浄した。有機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空で濃縮し、中間体－１Ｄを得た。

中間体－１Ｅ．（Ｓ）－エチル３－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート：中間体－１Ｄを、キラルＳＦＣ（カラム：Ｗｈｅｌｋｏ－ＲＲ（５ｘ５０ｃｍ、１０ｕＭ、＃４０８０），ＢＰＲ圧力：１００ｂａｒｓ、温度：３５℃、流速：３００ｍＬ／分、移動相：ＣＯ_２／ＭｅＯＨ（７０／３０），検出波長：２２０ｎｍ；分離プログラム：スタック注入；注入：４ｍＬ、サイクル時間：２分；サンプル調製：４４．４ｇ／３１０ｍＬＭｅＯＨ：ＤＣＭ（９：１），１４３．２ｍｇ／ｍＬ；スループット：１６．３ｇ／時間）によって生成し、中間体－１Ｅ（４１．１ｇ、９１％）を白色の固形物として得た： ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.09 － 6.97 (m, 2H), 6.94 － 6.87 (m, 1H), 5.47 (br. s., 1H), 5.03 (br. s., 1H), 4.09 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.88 (s, 3H), 2.92 － 2.70 (m, 2H), 1.44 (s, 9H), 1.20 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。LCMS (ES): m/z 364.1 [M+Na]⁺。>99% ee。[α]_D ²⁰ －27.36^o(c 1.54、CHCl₃)。

中間体－１Ｆ．エチル（Ｒ）－３－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート：上記の分取キラルＳＦＣ分離によって、（Ｒ）－エナンチオマー（中間体－１Ｆ、１．５ｇ、３％）を白色の固形物として得た：¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.10 － 6.97 (m, 2H), 6.95 － 6.86 (m, 1H), 5.47 (br. s., 1H), 5.02 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.09 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.88 (s, 3H), 2.91 － 2.69 (m, 2H), 1.47 － 1.37 (m, 9H), 1.20 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。LCMS (ES): m/z 364.1 [M+Na]⁺。96.4% ee。[α]_D ²⁰ +20.76^o(c 1.54、CHCl₃)。

中間体１：中間体－１Ｅ（１．０ｇ、２．９３ｍｍｏｌ）の、４ＭＨＣｌ／ジオキサン（４８ｍＬ）中の溶液を、室温で１時間攪拌した。溶媒を真空で留去して、残留物を真空で乾燥させた。残留物をＥｔＯＨ（１０ｍＬ）中に溶解させ、真空で濃縮し、真空で乾燥させて、中間体１（０．８０１ｇ、９８％）を白色の固形物として得た。¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 8.80 (br. s., 3H), 7.37 － 7.28 (m, 2H), 6.95 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 4.68 (t, J = 6.9 Hz, 1H), 4.08 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.22 (dd, J = 16.6、6.2 Hz, 1H), 3.00 (dd, J = 16.5、7.7 Hz, 1H), 1.18 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。LCMS (ES): m/z 242.1 [M+H]⁺。>99% ee。[α]_D ²⁰ +11.82^o(c 1.54、CHCl₃)。

中間体２
エチル（Ｒ）－３－アミノ－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート、ＨＣｌ

中間体２：中間体１の合成について記載された方法を用いて、（Ｒ）－エチル３－（（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニル）アミノ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート（中間体－１Ｆ、１．５ｇ、４．３９ｍｍｏｌ）および４ＭＨＣｌ／ジオキサン（４８ｍＬ）から、中間体２（１．１６ｇ、９５％）を白色の固形物として得た： ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 8.81 (br. s., 3H), 7.37 － 7.27 (m, 2H), 7.01 － 6.88 (m, 1H), 4.68 (br. s., 1H), 4.08 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.23 (dd, J = 16.6、6.2 Hz, 1H), 3.01 (dd, J = 16.6、7.6 Hz, 1H), 1.18 (t, J = 7.0 Hz, 3H)。LCMS (ES): m/z 242.1 [M+H]⁺。96.4% ee。[α]_D ²⁰ －11.26^o(c 1.54、CHCl₃)。

中間体３
エチル（Ｓ）－３－アミノ－３－（６－メトキシピリジン－３－イル）プロパノエート

中間体３は、中間体１について記載された方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 8.14 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.66 (dd, J = 8.5、2.5 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.46 (dd, J = 8.8、5.0 Hz, 1H), 4.15 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.93 (s, 3H), 2.82 (dd, J = 16.2、8.8 Hz, 1H), 2.72 － 2.56 (m, 1H), 1.24 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#1): 1.132 分; LCMS (ES): m/z 225.0 [M+H]⁺。

中間体４
エチル（Ｒ）－３－アミノ－３－（３－ブロモ－５－（ｔｅｒｔ－ブチル）フェニル）プロパノエート

中間体４は、Henderson, N. C. et. al., Nature Medicine 2013 19, 1617に記載された方法に従って合成した。

中間体５
（±）－メチル３－アミノ－３－（３，５－ジクロロフェニル）プロパノエート
中間体６
メチル（Ｓ）－３－アミノ－３－（３，５－ジクロロフェニル）プロパノエート
中間体７
メチル（Ｒ）－３－アミノ－３－（３，５－ジクロロフェニル）プロパノエート

中間体－５Ａ：３－アミノ－３－（３，５－ジクロロフェニル）プロパン酸：ＥｔＯＨ（９０ｍＬ）中の酢酸アンモニウム（１４．１ｇ、１８３ｍｍｏｌ）、３，５－ジクロロベンズアルデヒド（８．０ｇ、４５．７ｍｍｏｌ）、およびマロン酸（５．２３ｇ、５０．３ｍｍｏｌ）の混合物を、１６時間還流で加熱した。室温に冷却した後、固形物を濾過によって回収し、ＥｔＯＨ（１５ｍＬ）で洗浄し、真空で乾燥させて、粗製の中間体－５Ａ（７．０ｇ、６６％）を白色の固形物として得た。LCMS (ES): m/z 234.3 [M+H]⁺。

中間体５：中間体－５Ａ（７．０ｇ、２９．９ｍｍｏｌ）のＭｅＯＨ（５０ｍＬ）中の混合物に、ＳＯＣｌ_２（５．０２ｍＬ、６８．８ｍｍｏｌ）を加えた。室温で６時間攪拌した後、固形物を濾過によって除去した。濾液を真空で濃縮し、粗生成物をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）中に溶解した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ_３溶液、ブラインで洗浄し、乾燥させ（ＭｇＳＯ_４）、濾過し、真空で濃縮して、粗生成物を得て、これをフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ＣＨ_２Ｃｌ_２：ＭｅＯＨ、１００：０から９５：５）によって精製し、中間体５（３．３ｇ、４６％）を黄色の油状物として得た： ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.31 (d, J = 1.9 Hz, 2H), 7.28 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 4.44 (t, J = 6.7 Hz, 1H), 3.69 (s, 3H), 2.81 - 2.63 (m, 2H)。LCMS (ES): m/z 248.3 [M+H]⁺。

中間体６：中間体５（３．３ｇ）を、分取キラルＳＦＣ（カラム：ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ、３０ｘ２５０ｍｍ、５ミクロン、ＢＰＲ圧力：１５０ｂａｒｓ、温度：４０℃、流速：８０ｍＬ／分、移動相：ＣＯ_２／ＭｅＯＨ（９５／５）＋０．１％ＤＥＡ、検出波長：２２０ｎｍ）によって精製し、中間体６（２．３ｇ）を黄色の油状物として得た。¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.28 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.26 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 4.43 - 4.34 (m, 1H), 3.70 (s, 3H), 2.76 - 2.56 (m, 2H)。

中間体７：中間体５（３．３ｇ）を、分取キラルＳＦＣ（カラム：ＣｈｉｒａｌｐａｋＡＤ、３０ｘ２５０ｍｍ、５ミクロン、ＢＰＲ圧力：１５０ｂａｒｓ、温度：４０℃、流速：８０ｍＬ／分、移動相：ＣＯ_２／ＭｅＯＨ（９５／５）＋０．１％ＤＥＡ、検出波長：２２０ｎｍ）によって精製し、中間体７（１．３１ｇ）を黄色の油状物として得た。¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 7.27 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.26 (t, J = 1.9 Hz, 1H), 4.38 (dd, J = 8.7、4.8 Hz, 1H), 3.70 (s, 3H), 2.65 (dd, J = 16.0、4.8 Hz, 1H), 2.60 (dd, J = 16.0、8.7 Hz, 1H)。

中間体８
（Ｓ）－エチル３－アミノ－３－（２，３－ジヒドロベンゾフラン－６－イル）プロパノエート

中間体８は、中間体１について記載される方法に従って合成した。¹H NMR (400 MHz, DMSO－d₆) δ 7.17 － 7.10 (m, 1H), 6.86 － 6.74 (m, 2H), 4.49 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 4.19 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 4.06 － 3.94 (m, 2H), 3.12 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 2.70 － 2.54 (m, 3H), 1.21 － 1.05 (m, 3H)。¹³C NMR (400 MHz, DMSO－d₆) δ 171.13、159.75、146.24、125.43、124.37、118.21、106.80、70.80、59.62、52.61、44.12、28.79、14.02。 LCMS (ES): m/z 236.0 [M+H]⁺。[α]_D ²⁵ ^C 6.0 ^o(c 0.10、CHCl₃)。

中間体９
エチル（Ｓ）－３－アミノ－３－（２－メトキシピリミジン－５－イル）プロパノエート

中間体－９Ａは、中間体－１Ａにおいて記載される方法に従って合成した。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 8.68 (s, 2H), 7.58 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.46 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 4.28 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 4.06 (s, 3H), 1.35 (t, J = 7.0 Hz, 3H)。 LCMS (ES): m/z 209.0 [M+H]⁺。

中間体９：ｔｅｒｔ－ブチルアルコール（３００ｍＬ）は、０－２０℃の間の温度で１時間、アンモニアをパージした。アンモニアパージしたｔｅｒｔ－ブチルアルコールおよび中間体－９Ａ（２０ｇ、９６ｍｍｏｌ）を、１Ｌのオートクレーブに加えた。反応液を８０℃で３０時間加熱した。反応液を室温に冷却した。反応混合物をオートクレーブから取り出し、濃縮した。粗製の固形物をジエチルエーテルでトリチューレートし、濾過した。濾液を濃縮し、ＩＳＣＯ（５％メタノール／クロロホルム）で精製し、ラセミ体化合物（５．９ｇ）を得る。ラセミ体をさらに、ＳＦＣ（ＣｈｉｒａｌｐａｋＩＡ（２５０ｘ４．６）ｍｍ、５ｕ；％ＣＯ_２：８０％；％共溶媒：２０％（０．２％ＤＥＡ／メタノール）；総流量：１２０．０ｇ／分；背圧：１００ｂａｒｓ；温度：３０℃；検出：２２０ｎｍにおけるＵＶ）によって精製し、中間体９（２．３ｇ、１０％）を第一溶出異性体として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO－d₆) δ 8.58 (s, 2H), 4.20 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 4.02 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 3.89 (s, 3H), 2.67 (dd, J = 7.2、4.9 Hz, 2H), 2.09 (br s, 2H), 1.13 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 LCMS (ES): m/z 226.2 [M+H]⁺。

中間体１０
（Ｓ）－エチル３－アミノ－３－（２－メチルピリミジン－５－イル）プロパノエート

中間体１０は、中間体９について記載される方法に従って合成した。¹H NMR (400 MHz, DMSO－d₆) δ 8.66 (s, 2H), 4.20 (t, J = 7.3 Hz, 1H), 4.05 － 3.98 (m, 2H), 2.68 (dd, J = 7.0、5.0 Hz, 2H), 2.57 (s, 3H), 2.09 (br s, 2H), 1.15 － 1.09 (m, 3H)。 LCMS (ES): m/z 210.2 [M+H]⁺。

中間体１１
（Ｓ）－エチル３－アミノ－３－（ピリミジン－５－イル）プロパノエート

中間体１１は、中間体９について記載される方法に従って合成した。¹H NMR (300 MHz, DMSO－d₆) δ 9.05 (s, 1H), 8.80 (s, 2H), 4.24 (t, J = 7.20 Hz, 1H), 4.01 (q, J = 6.90 Hz, 2H), 2.74 (q, J = 3.90 Hz, 2H), 1.11 (t, J = 6.90 Hz, 3H)。LCMS (ES): m/z 196.2 [M+H]⁺。

中間体１２
（±）－エチル３－アミノ－３－（２－メチルピリミジン－５－イル）プロパノエート

中間体－１２Ａ．３－アミノ－３－（２－メチルピリミジン－５－イル）プロパン酸：市販の２－メチルピリミジン－５－カルボアルデヒド（１．００ｇ、８．１９ｍｍｏｌ）、マロン酸（１．２８ｇ、１２．３ｍｍｏｌ）、およびＮＨ_４ＯＡｃ（１．５８ｇ、２０．５ｍｍｏｌ）の、ＥｔＯＨ（６．５５ｍＬ）中の混合物を、８０℃で４時間加熱した。室温に冷却した後、沈殿を濾過によって回収し、冷却ＥｔＯＨで洗浄し、真空で乾燥させ、中間体－１２Ａ（１．０８ｇ、７３％）を灰白色の固形物として得て、これをさらに精製を行わず、次のステップに用いた。 ¹H NMR (500MHz, D₂O) δ 8.79 (s, 2H), 4.75 － 4.73 (m, 1H), 3.01 － 2.92 (m, 1H), 2.90 － 2.82 (m, 1H), 2.70 (s, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 0.168 分; LCMS (ES): m/z 182.1 [M+H]⁺。

中間体１２：ＳＯＣｌ_２（０．１８５ｍＬ、２．５４ｍｍｏｌ）は、室温の、中間体－１２Ａ（０．２００ｇ、１．１０ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（２．９０ｍＬ）中の溶液に、滴下して加えた。室温で一晩攪拌した後、溶媒を真空で留去し、残留物をＤＣＭ中に溶解させ、飽和ＮａＨＣＯ_３、水、およびブラインで洗浄した。有機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、１００：０から９０：１０）によって精製し、中間体１２（０．１１５ｇ、５０％）を淡黄色の油状物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 8.68 (s, 2H), 4.47 (dd, J = 8.0、5.5 Hz, 1H), 4.16 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.79 － 2.58 (m, 5H), 1.25 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 0.317 分; LCMS (ES): m/z 210.1 [M+H]⁺。

中間体１３
（±）－エチル３－アミノ－３－（２－メトキシピリミジン－５－イル）プロパノエート

中間体１３は、中間体１２について記載された方法を用いて合成した。¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 8.54 (s, 2H), 4.46 － 4.39 (m, 1H), 4.16 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.01 (d, J = 0.6 Hz, 3H), 2.75 － 2.60 (m, 2H), 1.25 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 0.490 分; LCMS (ES): m/z 226.1 [M+H]⁺。

中間体１４
（±）－エチル３－アミノ－３－（ピリミジン－５－イル）プロパノエート

中間体１４は、中間体１２について記載された方法を用いて合成した。¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 9.15 (s, 1H), 8.79 (s, 2H), 4.50 (dd, J = 7.8、5.6 Hz, 1H), 4.16 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 2.77 － 2.64 (m, 2H), 1.25 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 0.318 分; LCMS (ES): m/z 196.1 [M+H]⁺

中間体１５
（Ｓ）－エチル３－アミノ－３－（キノリン－３－イル）プロパノエート

中間体－１５Ａ．（Ｓ，Ｅ）－２－メチル－Ｎ－（キノリン－３－イルメチレン）プロパン－２－スルフィンアミド：キノリン－３－カルボアルデヒド（２５．０ｇ、１５９ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（７００ｍＬ）中の溶液に、（Ｓ）－２－メチルプロパン－２－スルフィンアミド（１９．３ｇ、１５９ｍｍｏｌ）、次いでＴｉ（ＯＥｔ）_４（１６７ｍＬ、７９５ｍｍｏｌ）を加えた。反応液を４０℃で一晩加熱した。反応液を室温に冷却し、水でクエンチした。固形物をセライト（登録商標）パッドを介して濾過し、ＤＣＭで洗浄した。有機層を水、ブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空で濃縮した。粗生成物をフラッシュクロマトグラフィーによって精製し、中間体－１５Ａ（４０ｇ、９７％）を黄色の固形物として得た。¹H NMR (400 MHz, CDCl₃) δ 9.45 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.83 (s, 1H), 8.54 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.19 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.83－7.86 (m, 1H), 7.63－7.67 (m, 1H), 1.34 (s, 9H)。

中間体－１５Ｂ．（Ｓ）－エチル３－（（Ｓ）－１，１－ジメチルエチルスルフィンアミド）－３－（キノリン－３－イル）プロパノエート：１ＮＮａＨＭＤＳ／ＴＨＦ（２３０ｍＬ、２３０ｍｍｏｌ）の、ＴＨＦ（７５０ｍＬ）中の溶液に、－７８℃で、酢酸エチル（２２．５６ｍＬ、２３０ｍｍｏｌ）を滴下して加えた。反応液を０．５時間攪拌し、中間体－１５Ａ（４０ｇ、１５４ｍｍｏｌ）／ＴＨＦ（５００ｍＬ）を滴下して加えた。反応液を－７８℃で１時間攪拌し、飽和ＮＨ_４Ｃｌ溶液でクエンチした。混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を水、ブラインで洗浄し、硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。粗製物質をフラッシュクロマトグラフィー（２－３％メタノール／ＤＣＭ）によって精製し、中間体－１５Ｂ（５０ｇ、９３％）を淡黄色の液状物として得た。¹H NMR (300 MHz, DMSO－d₆) δ 8.91－9.02 (m, 1H), 8.38 － 8.25 (m, 1H), 7.93－8.03 (m, 2H), 7.74－7.77 (m, 1H), 7.58－7.63 (m, 1H), 4.92 － 4.80 (m, 1H), 4.10 － 3.92 (m, 2H), 3.06 － 2.89 (m, 2H), 1.18 － 1.01 (m, 12H)。LCMS (ES): m/z 349.0 [M+H]⁺。

中間体１５：中間体－１５Ｂ（５０ｇ、１４３ｍｍｏｌ）のエタノール（５００ｍｌ）中の溶液に、４ＭＨＣｌ／１，４－ジオキサン（２００ｍＬ）を加えた。反応液を室温で２時間攪拌した。溶媒を真空で留去した。残留物を水（１５０ｍＬ）に溶解し、ＭＴＢＥ（３ｘ７５ｍＬ）で洗浄した。水層を１０％ＮａＨＣＯ_３溶液で塩基性にし、酢酸エチル（３ｘ１５０ｍＬ）で抽出した。有機層を合わせて、水、ブラインで洗浄し、Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濃縮した。粗製物質をＳＦＣ（Ｗｈｅｌｋ（ＲＲ）（２５０ｘ３０）ｍｍ、５ｕ；％ＣＯ_２：７０％；％共溶媒：３０％（０．２％ＤＥＡ／メタノール）；総流量：１３０．０ｇ／分；背圧：１００ｂａｒｓ；温度：３０℃；検出：２２６ｎｍにおけるＵＶ）によって精製し、中間体１５（１５ｇ、４３％）を褐色の液状物として得た。¹H NMR (400 MHz, DMSO－d₆) δ 8.94 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 7.92－8.02 (m, 2H), 7.74 － 7.69 (m, 1H), 7.56－7.60 (m, 1H), 4.44 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 4.05 － 3.97 (m, 2H), 2.76 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 2.17 (br. s., 2H), 1.09 (t, J = 7.3 Hz, 3H)。 LCMS (ES): m/z 245.2 [M+H]⁺。99.3% ee。

中間体１６
（±）－エチル３－アミノ－３－（キノキサリン－２－イル）プロパノエート

中間体－１６Ａ．（Ｅ）－２－メチル－Ｎ－（キノキサリン－２－イルメチレン）プロパン－２－スルフィンアミド．市販のキノキサリン－２－カルボアルデヒド（０．５００ｇ、３．１６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１４．０ｍＬ）中の溶液に、２－メチルプロパン－２－スルフィンアミド（０．３８３ｇ、３．１６ｍｍｏｌ）およびＴｉ（ＯＥｔ）_４（３．３１ｍＬ、１５．８ｍｍｏｌ）を加えた。反応混合物を１７時間還流し、室温に冷却し、水でクエンチした。固形物をセライト（登録商標）パッドで濾過し、ＤＣＭで洗浄した。有機層を分離し、水、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、１００：０から５０：５０）によって精製し、中間体－１６Ａ（０．６９０ｇ、８４％）を褐色の固形物として得た。 ¹H NMR (500MHz, DMSO－d₆) δ 9.54 (s, 1H), 8.68 (s, 1H), 8.29 － 8.17 (m, 2H), 8.06 － 7.92 (m, 2H), 1.27 (s, 9H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 2.132 分; LCMS (ES): m/z 262.2 [M+H]⁺。

中間体－１６Ｂ．エチル３－（（ｔｅｒｔ－ブチルスルフィニル）アミノ）－３－（キノキサリン－２－イル）プロパノエート．中間体－１６Ｂは、中間体－１５Ｂについて記載された方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500 MHz, DMSO－d₆) δ 9.23 (s, 1H), 8.07－8.14 (m, 1H), 7.99－8.07 (m, 1H), 7.82－7.91 (m, 2H), 6.17 (d, J = 9.35 Hz, 1H), 4.97－5.14 (m, 1H), 4.05 (quin, J = 6.81 Hz, 2H), 3.10－3.26 (m, 1H), 2.94 (dd, J = 8.80、15.68 Hz, 1H), 1.10－1.19 (m, 12H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.935 分; LCMS (ES): m/z 350.1 [M+H]⁺。

中間体１６：中間体－１６Ｂ（０．１１１ｇ、０．３１８ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１．１１ｍＬ）中の室温の溶液に、４ＭＨＣｌ／ジオキサン（０．４４３ｍＬ）を加えた。室温で１．５時間攪拌した後、溶媒を真空で留去した。残留物を水に溶解させ、ジエチルエーテル（３ｘ）で洗浄した。水層を、１０％ＮａＨＣＯ_３水溶液を用いて塩基性にし、次いでＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。有機層を合わせて、水、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空で濃縮し、中間１６（５９．３ｍｇ、７６％）を褐色の油状物として得て、これはさらに精製を行わなかった。 ¹H NMR (400MHz, CD₃OD) δ 8.99 (s, 1H), 8.16 － 8.00 (m, 2H), 7.90 － 7.74 (m, 2H), 4.66 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 4.08 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.14 － 3.03 (m, 1H), 2.98 － 2.87 (m, 1H), 1.15 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 0.983 分; LCMS (ES): m/z 246.2 [M+H]⁺。

中間体１７
エチル（Ｓ）－３－アミノ－２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）プロパノエート、ＨＣｌ

中間体１７．中間体１７は、特許：ＷＯ２００００２１９３２に記載された方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, DMSO－d₆) δ 8.16 (br. s., 3H), 7.88 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.43 － 7.26 (m, 5H), 5.08 (s, 2H), 4.38 (td, J = 8.7、4.7 Hz, 1H), 4.13 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.22 (dd, J = 12.9、4.4 Hz, 1H), 3.05 (dd, J = 12.8、9.5 Hz, 1H), 1.18 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.078 分; LCMS (ES): m/z 267 [M+H]⁺。

中間体１８
エチル（Ｓ）－３－アミノ－２－（（２，４，６－トリメチルフェニル）スルホンアミド）プロパノエート

中間体１８は、Pitts, J. W. et. al., J.Med. Chem. 2000 43, 27において記載された方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 6.95 (s, 2H), 5.63 (br. s., 1H), 5.31 (s, 1H), 3.97－4.05 (m, 2H), 3.82 (t, J = 4.68 Hz, 1H), 2.94－3.05 (m, 2H), 2.66 (s, 6H), 2.29 (s, 3H), 1.14 (t, J = 7.15 Hz, 3H)。 LCMS (ES): m/z 315 [M+H]⁺。

中間体１９
（Ｅ）－４－（２－（１，８－ナフチリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－ピロール－２－カルボン酸、ＨＣｌ

中間体－１９Ａ．２－メチル－１，８－ナフチリジン：中間体－１９Ａは、特許：ＷＯ２０１１１５０１５６に記載される方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, DMSO－d₆) δ 9.02 (dd, J = 4.3、2.1 Hz, 1H), 8.40 (dd, J = 8.0、1.9 Hz, 1H), 8.34 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.56 (dd, J = 8.1、4.3 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 2.70 (s, 3H)。HPLC 保持時間 (方法#1): 0.303 分; LCMS (ES): m/z 145.0 [M+H]⁺。

中間体－１９Ｂ．エチル（Ｅ）－４－（２－（１，８－ナフチリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－ピロール－２－カルボキシレート：中間体－１９Ａ（０．３００ｇ、２．０８ｍｍｏｌ）、市販のエチル４－ホルミル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキシレート（０．３４８ｇ、２．０８ｍｍｏｌ）、および４－メチルベンゼンスルホンアミド（０．３５６ｇ、２．０８ｍｍｏｌ）の、トルエン（４．５ｍＬ）中の溶液を、２１時間還流した。室温に冷却した後、沈殿を濾過によって回収し、ＤＣＭ（２ｘ）でトリチュレートし、真空で乾燥させて、中間体－１９Ｂ（０．５１９ｇ、９４％）を黄色の固形物として得て、これをさらに精製を行わず次のステップに用いた。 ¹H NMR (500MHz, DMSO－d₆) δ 12.14 (br. s., 1H), 9.01 (dd, J = 4.3、2.1 Hz, 1H), 8.41 － 8.28 (m, 2H), 7.82 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.52 (dd, J = 8.0、4.1 Hz, 1H), 7.46 (s, 1H), 7.24 － 7.16 (m, 2H), 4.27 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 1.31 (t, J = 7.0 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#1): 1.973 分; LCMS (ES): m/z 294.0 [M+H]⁺。

中間体１９：中間体－１９Ｂ（３５．０ｇ、９５．０ｍｍｏｌ）およびＮａＯＨ（１１．５ｇ、２８６ｍｍｏｌ）を含む、９５：５ＥｔＯＨ／Ｈ_２Ｏ溶液（４２１ｍＬ）を、４時間還流した。室温に冷却した後、ＥｔＯＨを真空で留去し、残留物を１ＭＨＣｌ水溶液でｐＨ～２に酸性化した。沈殿を濾過によって回収し、水で洗浄し、真空で乾燥させて、中間体１９（１４．２ｇ、３９％）を褐色の粗製固形物として得た。 ¹H NMR (500MHz, DMSO－d₆) δ 12.31 (br. s., 1H), 9.16 (dd, J = 4.8、1.8 Hz, 1H), 8.80 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.75 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.22 － 8.08 (m, 2H), 7.85 (dd, J = 8.0、4.7 Hz, 1H), 7.53 (dd, J = 2.6、1.5 Hz, 1H), 7.33 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.18 (s, 1H)。 HPLC 保持時間 (方法#1): 1.402 分; LCMS (ES): m/z 266.0 [M+H]⁺。

中間体１９の別の合成

中間体－１９Ｃ．１－（Ｔｅｒｔ－ブチル）２－メチル４－ブロモ－１Ｈ－ピロール－１，２－ジカルボキシレート：中間体－１９Ｃは、Desplat, V. et. al., Journal of Enzyme Inhibition and Medicinal Chemistry 2010, 25, 204に記載される方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 7.31 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 1.58 (s, 9H)。LCMS (ES): m/z 249.9 [M－tBu+H]⁺。

中間体－１９Ｄ．１－（Ｔｅｒｔ－ブチル）２－メチル（Ｅ）－４－（３－オキソブト－１－エン－１－イル）－１Ｈ－ピロール－１，２－ジカルボキシレート：中間体－１９Ｄは、中間体－１Ａについて記載される方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 7.53 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 7.36 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.01 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 3.88 (s, 3H), 2.33 (s, 3H), 1.60 (s, 9H)。 HPLC 保持時間 (方法#1): 3.193 分; LCMS (ES): m/z 294.1 [M+H]⁺。

中間体－１９Ｅ．１－（Ｔｅｒｔ－ブチル）２－メチル（Ｅ）－４－（２－（１，８－ナフチリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－ピロール－１，２－ジカルボキシレート、ＴＦＡ：中間体－１９Ｄ（３６ｍｇ、０．１２３ｍｍｏｌ）、２－アミノニコチンアルデヒド（１９．５ｍｇ、０．１６０ｍｍｏｌ）およびＬ－プロリン（４．５８ｍｇ、０．１１５ｍｍｏｌ）の、ＥｔＯＨ（０．３６６ｍＬ）中の溶液を、８０℃で１９時間攪拌した。室温に冷却した後、溶媒を真空で留去し、残留物を分取ＨＰＬＣ（ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｎａＡＸＩＡ５ｕＣ１８２１．１ｘ１００ｍｍ、１０分勾配、１５分泳動、１０％から１００％溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ－１０％Ｈ_２Ｏ－０．１％ＴＦＡ、溶媒Ａ＝１０％ＭｅＯＨ－９０％Ｈ_２Ｏ－０．１％ＴＦＡ）によって精製し、中間体－１９Ｅ（１１．３ｍｇ、１９％）を橙色の油状物として得た。LCMS (ES): m/z 280.0 [M－BOC+H]⁺。

中間体１９．中間体－１９Ｅ（１１．３ｍｇ、０．０２３ｍｍｏｌ）およびＮａＯＨ（４．５８ｍｇ、０．１１５ｍｍｏｌ）の、ＥｔＯＨ（０．１７７ｍＬ）および水（９．３２μＬ）中の溶液を、４時間還流した。室温に冷却した後、ＥｔＯＨを真空で留去し、残留物を１ＭＨＣｌ水溶液で、ｐＨ～２に酸性化した。沈殿を濾過によって回収し、水で洗浄し、真空で乾燥させて、中間体１９（６．９ｍｇ、１００％）を橙色の粗製固形物として得た。 LCMS (ES): m/z 266.0 [M+H]⁺。

中間体２０
（Ｅ）－４－（２－（１，８－ナフチリジン－２－イル）ビニル）－５－メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボン酸、ＨＣｌ

中間体２０は、特許：ＷＯ２００５０２６１４９において記載される方法に従って合成した、エチル４－ホルミル－５－メチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキシレートから開始して、中間体１９について記載される方法を用いて合成した。LCMS (ES): m/z 280.1 [M+H]⁺。

中間体２１
４－（１，８－ナフチリジン－２－イル）－１Ｈ－ピロール－２－カルボン酸、ＨＣｌ

中間体－２１Ａ．メチル４－（１，８－ナフチリジン－２－イル）－１Ｈ－ピロール－２－カルボキシレート：メチル４－アセチル－１Ｈ－ピロール－２－カルボキシレート（０．３４２ｇ、２．０５ｍｍｏｌ）およびピロリジン（０．３７２ｍＬ、４．５０ｍｍＬ）の、ＤＣＭ（１．７１ｍＬ）およびＭｅＯＨ（５．１２ｍＬ）中の室温の溶液に、２－アミノニコチンアルデヒド（０．２５０ｇ、２．０５ｍｍｏｌ）を加えた。室温で２４時間攪拌した後、沈殿を濾過によって回収し、ＭｅＯＨでトリチュレートし、真空で乾燥させて、中間体－２１Ａ（０．３４５ｇ、６７％）を淡黄色の固形物として得た。 ¹H NMR (500MHz, DMSO－d₆) δ 12.37 (br. s., 1H), 9.00 (dd, J = 4.3、2.1 Hz, 1H), 8.44 － 8.30 (m, 2H), 8.05 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.52 (dd, J = 8.0、4.1 Hz, 1H), 3.83 (s, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#1): 1.515 分; LCMS (ES): m/z 254.1 [M+H]⁺。

中間体２１．中間体２１は、中間体１９について記載される方法を用いて合成した。¹H NMR (500MHz, DMSO－d₆) δ 12.62 (br. s., 1H), 9.17 (dd, J = 5.0、1.7 Hz, 1H), 8.91 － 8.81 (m, 1H), 8.72 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 8.37 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.23 － 8.13 (m, 1H), 7.88 (dd, J = 8.1、5.1 Hz, 1H), 7.66 (t, J = 1.9 Hz, 1H)。 HPLC 保持時間 (方法#1): 1.205 分; LCMS (ES): m/z 240.1 [M+H]⁺。

中間体２２
４－（３－（１，８－ナフチリジン－２－イル）プロピル）－１Ｈ－ピロール－２－カルボン酸、ＨＣｌ、３ＮａＣｌ

中間体－２２Ａ．エチル（Ｅ）－４－（４－ヒドロキシペント－１－エン－１－イル）－１Ｈ－ピロール－２－カルボキシレート：中間体－２２Ａは、中間体－１Ａについて記載された方法を用いて合成した。¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 8.99 (br. s., 1H), 6.99 (s, 1H), 6.91 － 6.87 (m, 1H), 6.34 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.01 － 5.90 (m, 1H), 4.36 － 4.28 (m, 2H), 3.89 (dd, J = 12.2、6.2 Hz, 1H), 2.40 － 2.32 (m, 1H), 2.30 － 2.19 (m, 1H), 1.41 － 1.32 (m, 3H), 1.25 (d, J = 6.3 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.568 分; LCMS (ES): m/z 224.2 [M+H]⁺。

中間体－２２Ｂ．エチル（Ｅ）－４－（４－オキソペント－１－エン－１－イル）－１Ｈ－ピロール－２－カルボキシレート：デス・マーチン・ペルヨージナン（０．４５６ｇ、１．０８ｍｍｏｌ）を、中間体－２２Ａ（０．２００ｇ、０．８９６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（８．３７ｍＬ）中の溶液に加えた。室温で１時間攪拌した後、反応液をジエチルエーテルで希釈し、セライト（登録商標）パッドで濾過した。濾液を真空で濃縮し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、１００：０から７０：３０）によって精製し、中間体－２２Ｂ（１０６ｍｇ、５３％）を黄色の油状物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 8.93 (br. s., 1H), 6.90 － 6.88 (m, 1H), 6.81 (dd, J = 2.8、1.7 Hz, 1H), 6.23 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 5.92 (dt, J = 15.7、7.2 Hz, 1H), 4.22 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.16 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 2.09 (s, 3H), 1.26 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 0.703 分; 1.733分 LCMS (ES): m/z 222.2 [M+H]⁺。

中間体－２２Ｃ．エチル４－（４－オキソペンチル）－１Ｈ－ピロール－２－カルボキシレート：中間体－２２Ｂ（９５ｍｇ、０．１８５ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（６．３３ｍＬ）中の溶液に、ＰｔＯ_２（２２ｍｇ、０．０９５ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液を、室温、Ｈ_２雰囲気下（１ａｔｍ、バルーン）で、２時間攪拌し、次いでセライト（登録商標）パッドで濾過した。濾液を真空で濃縮し、中間体－２２Ｃ（８２ｍｇ、７７％）を黄色の油状物として得て、これはさらに精製を行わなかった。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 8.91 (br. s., 1H), 6.79 － 6.68 (m, 2H), 4.31 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.47 (dt, J = 17.5、7.5 Hz, 4H), 2.13 (s, 3H), 1.86 (quin, J = 7.4 Hz, 2H), 1.36 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.788 分; LCMS (ES): m/z 224.2 [M+H]⁺。

中間体－２２Ｄ．エチル４－（３－（１，８－ナフチリジン－２－イル）プロピル）－１Ｈ－ピロール－２－カルボキシレート：中間体－２２Ｃ（８２ｍｇ、０．３６７ｍｍｏｌ）およびピロリジン（３６μＬ、０．４４１ｍｍｏｌ）の、ＤＣＭ（０．３０７ｍＬ）およびＥｔＯＨ（０．９２１ｍＬ）中の溶液に、２－アミノニコチンアルデヒド（４５ｍｇ、０．３６７ｍｍｏｌ）を加えた。室温で７時間攪拌した後、溶媒を真空で留去し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ＤＣＭ：ＥｔＯＡｃ、１００：０から２５：７５）によって精製し、中間体－２２Ｄ（６１．２ｍｇ、５４％）を白色の固形物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 9.10 (dd, J = 4.1、1.9 Hz, 1H), 8.88 (br. s., 1H), 8.16 (dd, J = 8.0、1.9 Hz, 1H), 8.10 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.45 (dd, J = 8.1、4.3 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.79 (s, 2H), 4.30 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.18 － 3.00 (m, 2H), 2.61 (t, J = 7.6 Hz, 2H), 2.20 (quin, J = 7.6 Hz, 2H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.140 分; LCMS (ES): m/z 310.3 [M+H]⁺。

中間体２２：中間体－２２Ｄ（６１．２ｍｇ、０．１９８ｍｍｏｌ）およびＮａＯＨ（２３．７ｍｇ、０．５９３ｍｍｏｌ）を含む、９５：５ＥｔＯＨ／Ｈ_２Ｏ溶液（１．５８ｍＬ）を、２時間還流した。室温に冷却した後、ＥｔＯＨを真空で濃縮し、残留物を１ＭＨＣｌ水溶液でｐＨ～２に酸性化した。混合物を再濃縮し、残留物を真空で乾燥させて、中間体２２（９８ｍｇ、１００％）を橙色の粗製固形物として得て、これはさらに精製を行わなかった。 ¹H NMR (500MHz, DMSO－d₆) δ 11.43 (br. s., 1H), 9.25 (br. s., 1H), 8.88 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 8.82 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 6.79 (br. s., 1H), 6.59 (br. s., 1H), 3.14 (br. s., 2H), 2.56 － 2.51 (m, 2H), 2.09 (br. s., 2H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 0.703 分; LCMS (ES): m/z 282.2 [M+H]⁺。

中間体２３
エチル（Ｓ）－３－（７－ブロモ－１－オキソ－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート

中間体－２３Ａ．エチル（Ｓ）－３－（４－ブロモ－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサミド）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート：市販の４－ブロモ－１Ｈ－ピロール－２－カルボン酸（１．００ｇ、５．２６ｍｍｏｌ）および中間体１（１．４６ｇ、５．２６ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（２６．３ｍＬ）中の溶液に、ＥＤＣ（２．０２ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ（１．６１ｇ、１０．５ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２．０２ｍＬ、１１．６ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１．５時間攪拌した後、反応液を水で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。有機層を合わせて、飽和ＮＨ_４Ｃｌ、水、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１００：０から０：１００）で精製し、中間体－２３Ａ（１．９９ｇ、９１％）を白色のゴム状固形物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 9.35 (br. s., 1H), 7.24 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.10 － 7.01 (m, 2H), 6.94 － 6.87 (m, 2H), 6.67 (dd, J = 2.6、1.5 Hz, 1H), 5.46 (dt, J = 8.5、5.4 Hz, 1H), 4.18 － 4.06 (m, 2H), 3.87 (s, 3H), 2.99 － 2.79 (m, 2H), 1.21 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 2.368 分; LCMS (ES): m/z 413.1、415.1 [M+H]⁺。

中間体２３：中間体－２３Ａ（１．９９ｇ、４．８２ｍｍｏｌ）、ＮＢｕ_４Ｂｒ（１．５５ｇ、４．８２ｍｍｏｌ）、１，２－ジブロモエタン（２．０８ｍＬ、２４．１ｍｍｏｌ）、および１ＮＮａＯＨ水溶液（１４．５ｍＬ、１４．５ｍｍｏｌ）の、ジクロロエタン（１４．７ｍＬ）中の混合物を、５０℃で１．５時間攪拌した。室温に冷却した後、反応液をＥｔＯＡｃで希釈し、次いで飽和ＮＨ_４Ｃｌおよびブラインで洗浄した。有機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空で濃縮し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン／ＥｔＯＡｃ、１００：０から５０：５０）によって精製し、中間体２３（０．８１８ｇ、３９％）を、白色のゴム状の半固形物として得た。¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 7.12 － 7.01 (m, 2H), 6.97 － 6.89 (m, 2H), 6.68 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.27 (dd, J = 9.1、6.9 Hz, 1H), 4.17 － 4.09 (m, 2H), 4.03 (ddd, J = 12.2、7.6、4.1 Hz, 1H), 3.96 － 3.85 (m, 4H), 3.61 － 3.51 (m, 1H), 3.33 － 3.22 (m, 1H), 3.05 － 2.85 (m, 2H), 1.20 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 2.465 分; LCMS (ES): m/z 439.1、441.1 [M+H]⁺。

中間体２４
エチル（Ｓ）－３－（７－ブロモ－１－オキソ－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）－３－（６－メトキシピリジン－３－イル）プロパノエート

中間体２４は、中間体２３について記載された方法を用いて合成した。
¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 8.12 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.60 (dd, J = 8.8、2.5 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.68 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.23 (dd, J = 9.2、7.0 Hz, 1H), 4.13 (dd, J = 7.2、1.7 Hz, 2H), 4.06 － 4.00 (m, 1H), 3.97 － 3.88 (m, 4H), 3.61 (ddd, J = 12.4、7.8、4.3 Hz, 1H), 3.37 － 3.27 (m, 1H), 3.07 － 2.98 (m, 2H), 1.21 (t, J = 7.0 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.955 分; LCMS (ES): m/z 422.2、424.1 [M+H]⁺。

中間体２５
エチル（Ｓ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（７－ホルミル－１－オキソ－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパノエート

中間体２５は、特許：ＷＯ２００９１４８００４に従って合成した、４－ホルミル－１Ｈ－ピロール－２－カルボン酸から開始して、中間体２３について記載された方法を用いて合成した。 ¹H NMR (400MHz, CDCl₃) δ 9.81 (s, 1H), 7.37 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 1.5 Hz, 1H), 7.15 － 7.03 (m, 2H), 6.96 － 6.86 (m, 1H), 6.36 － 6.18 (m, 1H), 4.24 － 4.09 (m, 3H), 4.07 － 3.98 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.71 － 3.57 (m, 1H), 3.39 － 3.24 (m, 1H), 3.03 － 2.96 (m, 2H), 1.21 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.808 分; LCMS (ES): m/z 389.3 [M+H]⁺。

実施例１
（Ｓ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（１－オキソ－７－（２－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパン酸

および
実施例２
（３Ｓ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（１－オキソ－７－（２－（１，２，３，４－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパン酸

１Ａ．エチル（Ｓ，Ｅ）－３－（４－（２－（１，８－ナフチリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサミド）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート：中間体１９（１３．９ｇ、３７．０ｍｍｏｌ）および中間体１（１０．３ｇ、３７．０ｍｍｏｌ）の、ＤＭＦ（１８５ｍＬ）中の溶液に、ＥＤＣ（１４．２ｇ、７３．９ｍｍｏｌ）、ＨＯＢＴ（１１．３ｇ、７３．９ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２０．５ｍＬ、１１８ｍｍｏｌ）を加えた。室温で２時間攪拌した後、反応液を水（２００ｍＬ）で希釈した。沈殿を濾過によって回収し、水で洗浄し、真空で乾燥させ、１Ａ（２０．０ｇ、１００％）を黄色の固形物として得た。 ¹H NMR (500MHz, DMSO－d₆) δ 11.76 (br. s., 1H), 9.00 (dd, J = 4.1、1.9 Hz, 1H), 8.52 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.40 － 8.32 (m, 2H), 7.87 － 7.76 (m, 2H), 7.51 (dd, J = 8.1、4.3 Hz, 1H), 7.36 － 7.22 (m, 3H), 7.20 － 7.10 (m, 2H), 7.04 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 5.46 － 5.33 (m, 1H), 4.08 － 3.97 (m, 2H), 3.83 － 3.78 (m, 3H), 2.99 － 2.79 (m, 2H), 1.12 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#1): 2.440 分; LCMS (ES): m/z 489.0 [M+H]⁺。

１Ｂ．エチル（Ｓ，Ｅ）－３－（７－（２－（１，８－ナフチリジン－２－イル）ビニル）－１－オキソ－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート：１Ａ（１２．６ｇ、２３．２ｍｍｏｌ）、ＮＢｕ_４Ｂｒ（７．４８ｇ、２３．２ｍｍｏｌ）、１，２－ジブロモエタン（１０．０ｍＬ、１１６ｍｍｏｌ）、および１ＮＮａＯＨ水溶液（６９．６ｍＬ、６９．６ｍｍｏｌ）の、ジクロロエタン（７０．８ｍＬ）中の混合物を、５０℃で１時間攪拌した。室温に冷却した後、反応液をＥｔＯＡｃ（１５０ｍＬ）で希釈した。粘性のある褐色の沈殿物を濾過によって回収し、ＥｔＯＡｃで洗浄した。濾液を水、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させて、真空で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、１００：０から９３：７）によって精製し、１Ｂ（２．１６ｇ、１８．１％）を黄色の固形物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 9.07 (dd, J = 4.3、2.1 Hz, 1H), 8.19 － 8.05 (m, 2H), 7.94 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 8.0、4.1 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.16 － 7.03 (m, 3H), 6.99 － 6.87 (m, 2H), 6.39 － 6.24 (m, 1H), 4.19 － 4.05 (m, 3H), 3.99 (ddd, J = 12.2、7.6、4.1 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.66 － 3.54 (m, 1H), 3.31 (ddd, J = 12.4、7.7、4.1 Hz, 1H), 3.05 － 2.93 (m, 2H), 1.21 (t, J = 7.0 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#1): 2.475 分; LCMS (ES): m/z 515.1 [M+H]⁺。

１Ｃ－１．エチル（Ｓ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（１－オキソ－７－（２－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパノエート：１Ｂ（９５ｍｇ、０．１８５ｍｍｏｌ）の、ＥｔＯＨ（５．０ｍＬ）中の溶液に、ＰｔＯ_２（８．４ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液をＨ_２雰囲気（１ａｔｍ、バルーン）下、室温で２４時間攪拌した。さらにＰｔＯ_２（８．３９ｍｇ、０．０３７ｍｍｏｌ）を加え、水素化をさらに２４時間継続した。スラリーをセライト（登録商標）パッドを介して濾過し、パッドをＥｔＯＨで十分に洗浄した。濾液を真空で濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣ（カラム：ＸＢｒｉｄｇｅＣ１８、１９ｘ２００ｍｍ、５μｍ粒子；移動相Ａ：１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む、５：９５アセトニトリル：水；移動相Ｂ：１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む、９５：５アセトニトリル：水；勾配：２５分にわたり、３８－６８％Ｂ、次いで５分間、６８％Ｂで保持；流速：２０ｍＬ／分）によって精製し、１Ｃ－１（３３ｍｇ、３２％）を白色の固形物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 7.16 － 7.02 (m, 3H), 6.95 － 6.87 (m, 1H), 6.79 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.54 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 6.37 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.32 － 6.27 (m, 1H), 4.12 (qd, J = 7.1、1.0 Hz, 2H), 3.97 (dd, J = 7.6、4.3 Hz, 1H), 3.92 － 3.82 (m, 4H), 3.53 (ddd, J = 12.3、7.6、4.3 Hz, 1H), 3.46 － 3.38 (m, 2H), 3.24 (ddd, J = 12.2、7.7、4.3 Hz, 1H), 3.03 － 2.91 (m, 2H), 2.88 － 2.79 (m, 4H), 2.71 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 1.92 (quin, J = 6.0 Hz, 2H), 1.19 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。HPLC 保持時間 (方法#1): 2.285 分; LCMS (ES): m/z 521.2 [M+H]⁺。

１Ｃ－２．エチル（３Ｓ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（１－オキソ－７－（２－（１，２，３，４－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパノエート：１Ｂの還元、次いで１Ｃ－１について記載された分取ＨＰＬＣによる精製によって、１Ｃ－２（４．５ｍｇ、４．５％）をジアステレオマーの混合物として、淡黄色の固形物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 7.82 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.11 － 7.03 (m, 2H), 6.95 － 6.89 (m, 1H), 6.80 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 6.53 (s, 1H), 6.50 (dd, J = 7.2、5.2 Hz, 1H), 6.30 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.12 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.99 (dd, J = 6.9、5.0 Hz, 1H), 3.92 － 3.83 (m, 4H), 3.59 － 3.51 (m, 1H), 3.45 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 3.26 (ddd, J = 12.4、7.7、4.1 Hz, 1H), 3.05 － 2.92 (m, 2H), 2.77 － 2.68 (m, 2H), 2.65 － 2.51 (m, 2H), 2.01 － 1.94 (m, 1H), 1.85 － 1.77 (m, 2H), 1.68 － 1.60 (m, 1H), 1.20 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#1): 2.340 分; LCMS (ES): m/z 521.2 [M+H]⁺。

実施例１：１Ｃ－１（１１．１ｍｇ、０．０２１ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（０．３８８ｍＬ）中の室温の溶液に、１ＭＮａＯＨ水溶液（６４μＬ、０．０６４ｍｍｏｌ）を加えた。１時間攪拌した後、反応液を真空で濃縮し、１ＭＨＣｌ水溶液でｐＨ～２に酸性化した。混合物を再濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣ（カラム：ＸＢｒｉｄｇｅＣ１８、１９ｘ２００ｍｍ、５μｍ粒子；移動相Ａ：０．１％ＴＦＡを含む、５：９５ＣＨ_３ＣＮ：Ｈ_２Ｏ；移動相Ｂ：０．１％ＴＦＡを含む、９５：５ＣＨ_３ＣＮ：Ｈ_２Ｏ；勾配：２０分にわたり、１０－５０％Ｂ、次いで５分間、１００％Ｂで保持；流速：２０ｍＬ／分）によって精製し、実施例１（５．５ｍｇ、５２％）を灰白色の固形物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CD₃OD) δ 7.39 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.18 － 7.11 (m, 2H), 7.06 (t, J = 8.7 Hz, 1H), 6.61 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 6.55 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.47 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.26 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.01 (td, J = 8.3、4.0 Hz, 1H), 3.93 － 3.87 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.67 (ddd, J = 12.9、6.9、4.1 Hz, 1H), 3.48 － 3.33 (m, 2H), 3.29 － 3.22 (m, 1H), 2.93 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 2.86 － 2.79 (m, 2H), 2.78 － 2.65 (m, 4H), 1.88 (quin, J = 6.0 Hz, 2H)。 HPLC 保持時間 (方法#1): 2.087 分; LCMS (ES): m/z 493.1 [M+H]⁺

実施例２：実施例２は、実施例１について記載された方法を用いて、ジアステレオマーの混合物として合成した。 ¹H NMR (500MHz, CD₃OD) δ 7.66 (br. s., 1H), 7.36 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 7.18 － 7.10 (m, 2H), 7.06 (t, J = 8.8 Hz, 1H), 6.70 － 6.63 (m, 2H), 6.60 － 6.52 (m, 1H), 6.26 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.13 － 4.01 (m, 1H), 3.98 － 3.89 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.73 － 3.62 (m, 1H), 3.51 － 3.39 (m, 1H), 3.27 (d, J = 4.4 Hz, 1H), 3.01 － 2.86 (m, 2H), 2.82 － 2.67 (m, 2H), 2.58 (q, J = 7.6 Hz, 2H), 2.05 － 1.97 (m, 1H), 1.88 － 1.80 (m, 1H), 1.75 (dt, J = 14.2、7.2 Hz, 1H), 1.66 － 1.57 (m, 1H)。 LCMS (ES): m/z 493.1 [M+H]⁺。

１Ｂ（１）の別の合成
１Ｂ
エチル（Ｓ，Ｅ）－３－（７－（２－（１，８－ナフチリジン－２－イル）ビニル）－１－オキソ－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート

１Ｄ．エチル（Ｓ，Ｅ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（１－オキソ－７－（３－オキソブト－１－エン－１－イル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパノエート：１Ｄは、中間体－１Ａについて記載される方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 7.40 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.11 － 7.05 (m, 2H), 6.97 － 6.90 (m, 2H), 6.48 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.30 (dd, J = 9.1、6.9 Hz, 1H), 4.19 － 4.04 (m, 3H), 4.02 － 3.94 (m, 1H), 3.92 － 3.83 (m, 3H), 3.65 － 3.52 (m, 1H), 3.31 (td, J = 8.2、3.7 Hz, 1H), 3.07 － 2.92 (m, 2H), 2.32 (s, 3H), 1.21 (t, J = 7.0 Hz, 3H)。HPLC 保持時間 (方法#1): 2.878 分; LCMS (ES): m/z 429.1 [M+H]⁺。

１Ｂ：１Ｄ（２９．８ｍｇ、０．０７０ｍｍｏｌ）およびピロリジン（１．４４μＬ、０．０１７ｍｍｏｌ）の、ＤＣＭ（０．０７０ｍＬ）およびＭｅＯＨ（０．２０９ｍＬ）中の溶液に、２－アミノニコチンアルデヒド（８．４９ｍｇ、０．０７０ｍｍｏｌ）を加えた。室温で１７時間攪拌した後、溶媒を真空で留去し、残留物を分取ＨＰＬＣ（Ｐｈｅｎｏｍｅｎｅｘ（登録商標）ＬｕｎａＡＸＩＡ５ｕ２１．２ｘ１００ｍｍ、１５分勾配、１０分泳動、２０％～１００％溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ－１０％Ｈ_２Ｏ－０．１％ＴＦＡ、溶媒Ａ＝１０％ＭｅＯＨ－９０％Ｈ_２Ｏ－０．１％ＴＦＡ）によって精製し、８．４ｍｇの１ＢのＴＦＡ塩を得た。この物質をＭｅＯＨ（０．２００ｍＬ）中に溶解させ、４０ｍｇのジアニオンＷＡ２１Ｊ樹脂を加えた。室温で１時間攪拌した後、樹脂を濾過によって除去し、ＭｅＯＨで十分に洗浄した。濾液を真空で濃縮し、１Ｂ（７．０ｍｇ、２０％）を橙色の油状物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 9.08 (br. s., 1H), 8.16 － 8.06 (m, 2H), 7.92 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.40 (dd, J = 8.0、4.1 Hz, 1H), 7.26 － 7.23 (m, 1H), 7.16 － 7.03 (m, 3H), 6.98 － 6.88 (m, 2H), 6.32 (s, 1H), 4.19 － 4.07 (m, 3H), 4.02 － 3.95 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.59 (dd, J = 7.4、4.1 Hz, 1H), 3.33 － 3.26 (m, 1H), 3.05 － 2.93 (m, 2H), 1.21 (t, J = 7.0 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#1): 2.582 分; LCMS (ES): m/z 515.1 [M+H]⁺。

１Ｂ（２）の別の合成
１Ｂ
エチル（Ｓ，Ｅ）－３－（７－（２－（１，８－ナフチリジン－２－イル）ビニル）－１－オキソ－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート
および
１Ｅ
エチル（Ｓ）－３－（７－（１，３－ジ（１，８－ナフチリジン－２－イル）プロパン－２－イル）－１－オキソ－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート

１Ｂおよび１Ｅ：２－メチル－１，８－ナフチリジン（０．０３７ｇ、０．２５７ｍｍｏｌ）、中間体２５（０．１００ｇ、０．２５７ｍｍｏｌ）、および４－メチルベンゼンスルホンアミド（０．０４４ｇ、０．２５７ｍｍｏｌ）のトルエン（０．５５５ｍＬ）中の溶液を、１１０℃で１４時間攪拌した。室温に冷却した後、溶媒を真空で留去し、残留物を分取ＨＰＬＣ（ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｎａＡＸＩＡ５ｕ２１．２ｘ１００ｍｍ、１０分勾配、１５分泳動、１０％～１００％溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ－１０％Ｈ_２Ｏ－０．１％ＴＦＡ、溶媒Ａ＝１０％ＭｅＯＨ－９０％Ｈ_２Ｏ－０．１％ＴＦＡ）によって精製し、１Ｂおよび１ＥのＴＦＡ塩をそれぞれ得た。これらの塩をそれぞれＭｅＯＨ（１．０００ｍＬ）に溶解させ、２５０ｍｇのジアニオンＷＡ２１Ｊ樹脂を加えた。室温で１時間攪拌した後、樹脂を濾過によって除去し、ＭｅＯＨで十分に洗浄した。濾液を真空で濃縮し、１Ｂ（２５．８ｍｇ、２０％）を橙色－褐色の油状物として、１Ｅ（３２．５ｍｇ、１９％）を褐色の油状物としてそれぞれ得た。
1B: ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 9.06 (dd, J = 4.1、1.9 Hz, 1H), 8.16 － 8.05 (m, 2H), 7.92 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.39 (dd, J = 8.0、4.1 Hz, 1H), 7.25 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.13 － 7.04 (m, 3H), 6.98 － 6.86 (m, 2H), 6.32 (dd, J = 8.8、7.2 Hz, 1H), 4.17 － 4.05 (m, 3H), 4.02 － 3.95 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.64 － 3.55 (m, 1H), 3.34 － 3.25 (m, 1H), 3.05 － 2.92 (m, 2H), 1.20 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#1): 2.430 分; LCMS (ES): m/z 515.1 [M+H]⁺
1E.: ¹H NMR (500MHz, CDCl3) δ 9.04 (dd, J = 4.1、1.9 Hz, 1H), 8.07 (dt, J = 8.0、1.5 Hz, 2H), 7.95 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.48 － 7.31 (m, 4H), 7.08 － 7.00 (m, 2H), 6.93 － 6.83 (m, 1H), 6.81 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.52 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.23 (dd, J = 8.7、7.3 Hz, 1H), 4.26 (t, J = 7.4 Hz, 1H), 4.07 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 3.92 － 3.79 (m, 4H), 3.77 － 3.68 (m, 1H), 3.48 － 3.33 (m, 5H), 3.20 － 3.08 (m, 1H), 3.02 － 2.81 (m, 3H), 1.12 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#1): 2.430 分; LCMS (ES): m/z 659.2 [M+H]⁺。

以下の表（表２）における実施例は、実施例１と同様の方法で合成した。特に言及されない限り、^１ＨＮＭＲは５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６において測定した。

実施例９のジアステレオマーの分離

実施例１１、ピーク１
（３Ｓ）－３－（６－メトキシピリジン－３－イル）－３－（１－オキソ－７－（２－（１，２，３，４－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパン酸

実施例１１：実施例９のキラルＳＦＣ分離（ジオンｘＵｌｔｉｍａｔｅ３０００；カラム：ＣｈｉｒａｌｐａｋＩＤ２１ｘ２５０ｍｍ、５ミクロン；移動相：１０ｍＭ酢酸アンモニウム／（５０％ＭｅＯＨ、５０％アセトニトリル）；流速条件：２０ｍＬ／分；検出波長：２２０ｎｍ；注入詳細：６００ｕＬの４０ｍｇ／ｍＬ、ＭｅＯＨ中）によって、実施例１１を単一のジアステレオマーとして、白色の固形物として得た。ピーク１、早い溶出ピーク。 ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 8.17 (d, J = 2.20 Hz, 1H), 7.72 (dd, J = 2.53、8.69 Hz, 1H), 7.63 (br. s., 1H), 7.43 (d, J = 7.04 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.58 Hz, 1H), 6.68－6.75 (m, 2H), 6.61 (t, J = 6.16 Hz, 1H), 6.24 (t, J = 8.03 Hz, 1H), 4.04－4.14 (m, 1H), 3.92－4.01 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.67－3.77 (m, 1H), 3.44－3.53 (m, 1H), 2.71－2.99 (m, 4H), 2.61 (t, J = 7.70 Hz, 2H), 1.97－2.05 (m, 1H), 1.84－1.91 (m, 2H), 1.74－1.82 (m, 1H), 1.57－1.68 (m, 1H)。 LCMS (ES): m/z 476.4 [M+H]⁺。

実施例１２、ピーク２
（３Ｓ）－３－（６－メトキシピリジン－３－イル）－３－（１－オキソ－７－（２－（１，２，３，４－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパン酸

実施例１２：実施例９のキラルＳＦＣ分離（ジオンｘＵｌｔｉｍａｔｅ３０００；カラム：ＣｈｉｒａｌｐａｋＩＤ２１ｘ２５０ｍｍ、５ミクロン；移動相：１０ｍＭ酢酸アンモニウム／（５０％ＭｅＯＨ、５０％アセトニトリル）；流速条件：２０ｍＬ／分；検出波長：２２０ｎｍ；注入詳細：６００ｕＬの４０ｍｇ／ｍＬ、ＭｅＯＨ中）によって、実施例１２を単一のジアステレオマーとして、白色の固形物として得た。ピーク２、遅い溶出ピーク。 ¹H NMR (400 MHz, CD₃OD) δ 8.18 (d, J = 2.42 Hz, 1H), 7.72 (dd, J = 2.53、8.69 Hz, 1H), 7.57－7.70 (m, 1H), 7.38 (d, J = 7.26 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.58 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 4.84 Hz, 2H), 6.58 (br. s., 1H), 6.25 (t, J = 7.92 Hz, 1H), 4.04－4.15 (m, 1H), 3.92－4.01 (m, 1H), 3.88 (s, 3H), 3.67－3.77 (m, 1H), 3.42－3.51 (m, 1H), 3.33－3.38 (m, 1H), 2.87－2.97 (m, 2H), 2.71－2.83 (m, 2H), 2.60 (t, J = 7.70 Hz, 2H), 1.83－1.89 (m, 2H), 1.70－1.82 (m, 1H), 1.56－1.67 (m, 1H)。 LCMS (ES): m/z 476.4 [M+H]⁺。

実施例３の別の合成。
実施例３
（Ｓ）－３－（６－メトキシピリジン－３－イル）－３－（１－オキソ－７－（２－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパン酸

３Ａ．エチル（Ｓ，Ｅ）－３－（４－（２－（１，８－ナフチリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサミド）－３－（６－メトキシピリジン－３－イル）プロパノエート．３Ａは、１Ａについて記載された方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, DMSO－d₆) δ 11.76 (br. s., 1H), 9.00 (dd, J = 4.3、2.1 Hz, 1H), 8.56 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.40 － 8.30 (m, 2H), 8.19 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.90 － 7.72 (m, 3H), 7.51 (dd, J = 8.1、4.3 Hz, 1H), 7.31 (br. s., 1H), 7.22 (s, 1H), 7.04 (d, J = 16.2 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.48 － 5.32 (m, 1H), 4.04 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.06 － 2.94 (m, 1H), 2.91 － 2.81 (m, 1H), 1.12 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.332 分; LCMS (ES): m/z 472.7 [M+H]⁺。

３Ｂ．エチル（Ｓ，Ｅ）－３－（７－（２－（１，８－ナフチリジン－２－イル）ビニル）－１－オキソ－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）－３－（６－メトキシピリジン－３－イル）プロパノエート．３Ａ（０．２５０ｇ、０．５３０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（３５．３ｍＬ）中の０℃の溶液に、ＫＯＨ（０．０７４ｇ、１．３３ｍｍｏｌ）を加えた。１０分間攪拌した後、ジフェニルスルホニウムトリフラート（０．２３１ｇ、０．６３６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（８．８３ｍＬ）中の溶液を滴下して加え、攪拌を０℃で１０分間継続した。氷浴を除き、反応液を室温で１時間攪拌した。反応混合物をセライト（登録商標）パッドで濾過し、濾液を真空で濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣ（Ｌｕｎａ－ＡＸＩＡＣ１８２１．５ｘ２５０ｍｍ５μｍ、２５分勾配、３１分泳動、１５％～１００％溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ－１０％Ｈ_２Ｏ－１０ｍＭＮＨ_４ＯＡｃ、溶媒Ａ＝１０％ＭｅＯＨ－９０％Ｈ_２Ｏ－１０ｍＭＮＨ_４ＯＡｃ）によって精製し、３Ｂ（０．１６８ｇ、６４％）を黄色の固形物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CD₃OD) δ 8.98 (dd, J = 4.4、1.9 Hz, 1H), 8.34 (dd, J = 8.3、1.9 Hz, 1H), 8.30 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 6.1 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 8.7、2.6 Hz, 1H), 7.52 (dd, J = 8.0、4.4 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.15 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 6.82 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.25 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.18 (s, 1H), 4.14 － 4.05 (m, 3H), 3.91 (s, 3H), 3.75 (ddd, J = 12.9、7.2、4.1 Hz, 1H), 3.44 － 3.35 (m, 1H), 3.20 － 3.10 (m, 2H), 1.19 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.438 分; LCMS (ES): m/z 498.4 [M+H]⁺。

３Ｃ．エチル（Ｓ）－３－（６－メトキシピリジン－３－イル）－３－（１－オキソ－７－（２－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパノエート、２ＴＦＡ．３Ｂ（３０ｍｇ、０．０６０ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（１．１０ｍＬ）中の溶液に、ＰｔＯ_２（２．７ｍｇ、０．０１２ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液をＨ_２雰囲気（１ａｔｍ、バルーン）下、室温で５時間攪拌した。スラリーをセライト（登録商標）パッドを介して濾過し、濾液を真空で濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣ（ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｎａＡＸＩＡ５ｕＣ１８２１．２ｘ１００ｍｍ、１０分勾配、１２分泳動、１０％～１００％溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ－１０％Ｈ_２Ｏ－０．１％ＴＦＡ、溶媒Ａ＝１０％ＭｅＯＨ－９０％Ｈ_２Ｏ－０．１％ＴＦＡ）によって精製し、３Ｃ（３６．６ｍｇ、８３％）を黄色の油状物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CD₃OD) δ 8.16 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.74 (dd, J = 8.8、2.5 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.85 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.20 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.17 － 4.02 (m, 3H), 4.00 － 3.94 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 3.74 － 3.64 (m, 1H), 3.53 － 3.45 (m, 2H), 3.33 (d, J = 0.6 Hz, 1H), 3.18 － 3.09 (m, 2H), 2.92 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 2.86 (d, J = 7.4 Hz, 2H), 2.80 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.01 － 1.88 (m, 2H), 1.26 － 1.11 (m, 3H)。 LCMS (ES): m/z 504.2 [M+H]⁺。

実施例３：実施例３は、実施例１について記載された方法を用いて合成した。¹H NMR (500MHz, DMSO－d₆) δ (br. s, 1H), 8.14 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.67 (dd, J = 8.5、2.5 Hz, 1H), 7.01 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.49 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.30 － 6.24 (m, 2H), 6.02 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.04 － 3.89 (m, 2H), 3.83 (s, 3H), 3.66 － 3.56 (m, 1H), 3.26 － 3.17 (m, 3H), 3.07 (dd, J = 15.5、7.8 Hz, 1H), 2.97 － 2.88 (m, 1H), 2.72 － 2.66 (m, 2H), 2.66 － 2.62 (m, 2H), 2.60 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 1.79 － 1.68 (m, 2H)。HPLC 保持時間 (方法#2): 1.245 分; LCMS (ES): m/z 476.5 [M+H]⁺

以下の表（表３）における実施例は、実施例３の別の合成と同様の方法で合成した。特に言及されない限り、^１ＨＮＭＲは５００ＭＨｚ，ＤＭＳＯ－ｄ_６において測定した。

実施例２２
（Ｓ）－３－（６－イソブトキシピリジン－３－イル）－３－（１－オキソ－７－（２－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパン酸

２２Ａ．（Ｓ）－３－（６－ヒドロキシピリジン－３－イル）－３－（１－オキソ－７－（２－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパン酸、ＴＦＡ：実施例３（２５ｍｇ、０．０５３ｍｍｏｌ）およびピリジンヒドロクロライド（７５ｍｇ、０．６５ｍｍｏｌ）を、密閉した反応バイアル中で、１２５℃で７．５分間攪拌した。（無溶媒溶解）。反応混合物を室温に冷却し、分取ＨＰＬＣ（ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｎａＡＸＩＡ５ｕＣ１８２１．２ｘ１００ｍｍ、１０分勾配、１２分泳動、０％～１００％溶媒Ｂ＝９０％ＡＣＮ－１０％Ｈ_２Ｏ－０．１％ＴＦＡ、溶媒Ａ＝１０％ＡＣＮ－９０％Ｈ_２Ｏ－０．１％ＴＦＡ）によって精製し、２２Ａ（２３ｍｇ、６３％）を透明な固形物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CD₃OD) δ 7.62 (dd, J = 9.4、2.8 Hz, 1H), 7.55 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.54 (s, 1H), 5.99 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.13 － 3.95 (m, 2H), 3.72 － 3.63 (m, 1H), 3.51 － 3.46 (m, 2H), 3.41 (dt, J = 12.7、4.0 Hz, 1H), 3.02 (dd, J = 8.0、3.0 Hz, 2H), 2.95 － 2.90 (m, 2H), 2.87 － 2.83 (m, 2H), 2.82 － 2.76 (m, 2H), 1.94 (dd, J = 6.2、5.4 Hz, 2H)。 HPLC 保持時間 (方法#2) 0.823 分; LCMS (ES): m/z 462.3 [M+H]⁺。

２２Ｂ．イソブチル（Ｓ）－３－（６－イソブトキシピリジン－３－イル）－３－（１－オキソ－７－（２－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパノエート、ＴＦＡ：炭酸銀（１０４ｍｇ、０．３７７ｍｍｏｌ）を、２２Ａ（２６．０ｍｇ、０．０３８ｍｍｏｌ）のトルエン（０．５１０ｍＬ）中の溶液に加え、反応混合物を密閉したバイアル中で２２時間、８０℃で攪拌した。室温に冷却した後、反応液をセライト（登録商標）パッドで濾過し、濾液を真空で濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣ（ＸＢｒｉｄｇｅＰｒｅｐＣ１８５ｕＯＢＤ１９ｘ１００ｍｍ、１０分勾配、１５分泳動、５％～１００％溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ－１０％Ｈ_２Ｏ－０．１％ＴＦＡ、溶媒Ａ＝１０％ＭｅＯＨ－９０％Ｈ_２Ｏ－０．１％ＴＦＡ）によって精製し、２２Ｂ（２．８ｍｇ、９．３％）を黄色の油状物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CD₃OD) δ 8.14 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 8.8、2.5 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.83 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.66 (d, J= 1.7 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.20 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 4.10 － 4.00 (m, 3H), 3.99 － 3.92 (m, 1H), 3.84 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 3.73 － 3.63 (m, 1H), 3.52 － 3.46 (m, 2H), 3.36 － 3.32 (m, 1H), 3.20 － 3.10 (m, 2H), 2.96 － 2.90 (m, 2H), 2.87 － 2.83 (m, 2H), 2.81 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.06 (dt, J = 13.3、6.7 Hz, 1H), 1.97 － 1.91 (m, 2H), 1.89 － 1.79 (m, 1H), 1.01 (d, J = 6.9 Hz, 6H), 0.87 (dd, J = 6.7、2.9 Hz, 6H)。 HPLC 保持時間 (方法#2) 1.633 分; LCMS (ES): m/z 574.5 [M+H]⁺。

実施例２２：実施例２２は、実施例１について記載された方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, CD₃OD) δ 8.14 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.73 (dd, J = 8.8、2.5 Hz, 1H), 7.56 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.60 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.18 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 4.11 － 4.00 (m, 3H), 4.00 － 3.94 (m, 1H), 3.70 (ddd, J = 12.9、6.9、4.4 Hz, 1H), 3.52 － 3.46 (m, 2H), 3.34 － 3.32 (m, 1H), 3.14 － 3.04 (m, 2H), 2.97 － 2.89 (m, 2H), 2.89 － 2.82 (m, 2H), 2.81 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.06 (dt, J = 13.3、6.8 Hz, 1H), 1.98 － 1.90 (m, 2H), 1.01 (d, J = 6.6 Hz, 6H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.707 分; LCMS (ES): m/z 518.5 [M+H]⁺

以下の表（表４）における実施例は、実施例２２と同様の方法で合成した。特に言及されない限り、^１ＨＮＭＲは５００ＭＨｚ，ＣＤ_３ＯＤにおいて測定した。

実施例２５
（Ｓ）－２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－３－（１－オキソ－７－（２－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパン酸

２５Ａ．１－（Ｔｅｒｔ－ブチル）２－エチル（Ｅ）－４－（２－（１，８－ナフチリジン－２－イル）ビニル）－１Ｈ－ピロール－１，２－ジカルボキシレート：中間体－１９Ｂ（２．５０ｇ、８．５２ｍｍｏｌ）のＡＣＮ（１７．２ｍＬ）中の溶液に、ＤＭＡＰ（０．１０４ｇ、０．８５２ｍｍｏｌ）およびＢＯＣ_２Ｏ（２．４２ｇ、１１．１ｍｍｏｌ）を加えた。室温で２時間攪拌した後、反応を飽和ＮＨ_４Ｃｌでクエンチし、ＥｔＯＡｃ（５０ｍＬ）で希釈した。有機層を飽和ＮａＨＣＯ_３、水、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ＤＣＭ：ＥｔＯＡｃ、１００：０から５０：５０）によって精製し、２５Ａ（２．４０ｇ、７２％）を淡緑色の固形物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 9.09 (dd, J = 4.1、1.9 Hz, 1H), 8.18 － 8.07 (m, 2H), 7.84 (d, J = 16.0 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.51 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.42 (dd, J = 8.1、4.3 Hz, 1H), 7.18 － 7.06 (m, 2H), 4.35 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 1.61 (s, 9H), 1.39 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.973 分; LCMS (ES): m/z 394.2 [M+H]⁺。

２５Ｂ．１－（Ｔｅｒｔ－ブチル）２－エチル４－（２－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－１Ｈ－ピロール－１，２－ジカルボキシレート：２５Ａ（２．４０ｇ、６．１０ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（８１ｍＬ）中の溶液に、ＰｔＯ_２（０．２７７ｇ、１．２２ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液を、Ｈ_２雰囲気（１ａｔｍ、バルーン）下、室温で３．５時間攪拌した。スラリーをセライト（登録商標）パッドを介して濾過し、濾液を真空で濃縮し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、１００：０から９５：５）によって精製し、２５Ｂ（１．４６ｇ、６０％）を橙色の油状物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 7.09 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.34 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.78 (br. s., 1H), 4.29 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.46 － 3.37 (m, 2H), 2.81 － 2.74 (m, 4H), 2.70 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 1.92 (quin, J = 6.0 Hz, 2H), 1.57 (s, 9H), 1.35 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 2.080 分; LCMS (ES): m/z 400.3 [M+H]⁺。

２５Ｃ．４－（２－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－１Ｈ－ピロール－２－カルボン酸、ＨＣｌ：ＮａＯＨ（１．５０ｇ、３７．５ｍｍｏｌ）の水（２．７８ｍＬ）中の溶液を、２５Ｂ（５．００ｇ、１２．５ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（５２．８ｍＬ）中の室温に溶液に滴下して加えた。反応液を８０℃に昇温させ、２時間攪拌した。室温に冷却した後、ＥｔＯＨを真空で留去し、残留物を１ＭＨＣｌ水溶液でｐＨ～６に酸性化した。沈殿を濾過によって回収し、水で洗浄し、真空で乾燥させた。この物質を４ＭＨＣｌ／ジオキサン（２ｍＬ）中に溶解させ、室温で５分間攪拌した。溶媒を真空で留去し、２５Ｃ（２．０３ｇ、５３％）をＨＣｌ塩として、橙色の固形物として得た。濾液を真空で濃縮し、次いで逆相ＩＳＣＯクロマトグラフィー（５０ｇカラム－ＨＰＣ１８Ａｑシリカゲルカートリッジ、２４分泳動）で精製し、１０％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ／ＴＦＡ（５％／９５％／０．０５％）から１００％ＡＣＮ／Ｈ_２Ｏ／ＴＦＡ（９５％．５％／０．０５％）の勾配で溶出し、２５Ｃ（０．６７９ｇ、１４％）をＴＦＡ塩として、橙色の固形物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CD₃OD) δ 7.09 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.57 － 6.51 (m, 2H), 6.34 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 3.40 － 3.34 (m, 2H), 2.74 (s, 4H), 2.68 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 1.96 － 1.79 (m, 2H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 0.930 分; LCMS (ES): m/z 272.1 [M+H]⁺。

２５Ｄ．エチル（Ｓ）－２－（（（ベンジルオキシ）カルボニル）アミノ）－３－（４－（２－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサミド）プロパノエート、ＴＦＡ：２５Ｃ（ＨＣｌ塩）（０．７５０ｇ、２．４４ｍｍｏｌ）および中間体１７（０．７３８ｇ、２．４４ｍｍｏｌ）のＤＭＦ（４．６５ｍＬ）中の溶液に、ＢＯＰ（１．６２ｇ、３．６６ｍｍｏｌ）およびＤＩＰＥＡ（２．１３ｍＬ、１２．２ｍｍｏｌ）を加えた。室温で一晩攪拌した後、反応液を水で希釈し、ＥｔＯＡｃ（３ｘ）で抽出した。有機層を合わせて、水、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ＤＣＭ：ＭｅＯＨ、１００：０から９０：１０）によって精製し、２５Ｄ（１．１ｇ、８７％）を灰白色の固形物として得た。 ¹H NMR (500MHz, DMSO－d₆) δ 11.16 (br. s., 1H), 7.97 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.41 － 7.20 (m, 5H), 7.06 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.64 (s, 1H), 6.59 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 6.35 (br. s., 1H), 6.29 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 5.05 (s, 2H), 4.23 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.07 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.60 － 3.51 (m, 2H), 3.25 (br. s., 2H), 2.69 (s, 4H), 2.62 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 1.78 － 1.71 (m, 2H), 1.13 (t, J = 7.0 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.815 分; LCMS (ES): m/z 520.3 [M+H]⁺。

実施例２５．２５Ｄ（５０ｍｇ、０．０６７ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（４．５０ｍＬ）中の０℃の溶液に、ＫＯＨ（１６．９ｍｇ、０．３０１ｍｍｏｌ）を加え、反応液を０℃で１０分間攪拌した。ジフェニルビニルスルホニウムトリフラート（２９．１ｍｇ、０．０８０ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１．１２ｍＬ）中の溶液を加え、反応混合物を０℃で１０分間攪拌した。氷浴を除き、攪拌を室温で３．５時間継続した。反応混合物をセライト（登録商標）パッドを介して濾過し、濾液を真空で濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣ（ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｎａＡＸＩＡ５ｕＣ１８２１．２ｘ１００ｍｍ、１０分勾配、１２分泳動、５％～１００％溶媒Ｂ＝９０％ＡＣＮ－１０％Ｈ_２Ｏ－０．１％ＴＦＡ、溶媒Ａ＝１０％ＡＣＮ－９０％Ｈ_２Ｏ－０．１％ＴＦＡ）によって精製し、実施例２５（１７．３ｍｇ、４０％）を白色の固形物として得た。 ¹H NMR (400MHz, CD₃OD) δ 7.55 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.32 － 7.20 (m, 5H), 6.71 (s, 1H), 6.65 － 6.59 (m, 2H), 5.14 － 5.08 (m, 1H), 5.03 － 4.97 (m, 1H), 4.60 (dd, J = 9.2、4.8 Hz, 1H), 3.99 － 3.90 (m, 3H), 3.80 (dd, J = 13.9、9.5 Hz, 1H), 3.72 － 3.62 (m, 2H), 3.51 － 3.44 (m, 2H), 2.94 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 2.89 － 2.84 (m, 2H), 2.79 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 1.93 (quin, J = 5.9 Hz, 2H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.467 分; LCMS (ES): m/z 518.4 [M+H]⁺。

実施例２６
（Ｓ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（６－ヨード－１－オキソ－７－（２－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパン酸

２６Ａ．エチル（Ｓ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（６－ヨード－１－オキソ－７－（２－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパノエート：Ｉ_２（０．０２４ｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）を、１Ｃ－１（０．０５０ｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）およびトリフルオロ酢酸銀（０．０２１ｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１．０ｍＬ）中の５℃の溶液に、滴下して加えた。５℃で１時間攪拌した後、反応液を室温に昇温させ、攪拌を１時間継続した。反応混合物を濾過し、濾液を５％Ｎａ_２Ｓ_２Ｏ_３（２ｘ）、次いで水で洗浄した。有機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空で濃縮した。残留物を分取ＨＰＬＣ（カラム：ＸＢｒｉｄｇｅＣ１８、１９ｘ２００ｍｍ、５μｍ粒子；移動相Ａ：１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む、５：９５アセトニトリル：水；移動相Ｂ：１０ｍＭ酢酸アンモニウムを含む、９５：５アセトニトリル：水；勾配：２５分にわたり、４１－７７％Ｂ、次いで８分間、１００％Ｂで保持；流速：２０ｍＬ／分）によって精製し、２６Ａ（２３ｍｇ、３５％）を淡黄色の固形物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 7.12 － 7.04 (m, 3H), 6.95 － 6.90 (m, 1H), 6.89 (s, 1H), 6.29 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.25 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.17 － 4.06 (m, 2H), 3.93 (dd, J = 7.6、4.5 Hz, 1H), 3.90 － 3.82 (m, 4H), 3.59 － 3.51 (m, 1H), 3.45 － 3.39 (m, 2H), 3.27 (ddd, J = 12.5、7.7、4.3 Hz, 1H), 3.04 － 2.91 (m, 2H), 2.84 － 2.74 (m, 4H), 2.70 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 1.90 (dt, J = 11.7、6.0 Hz, 2H), 1.20 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#1): 2.620 分; LCMS (ES): m/z 647.1 [M+H]⁺。

実施例２６：実施例２６は、実施例１について記載された方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, DMSO－d₆) δ 7.55 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.28 － 7.05 (m, 4H), 6.72 (s, 1H), 6.54 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 5.97 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 3.86 (d, J = 5.2 Hz, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.66 － 3.55 (m, 1H), 3.47 (br. s., 1H), 3.39 (br. s., 1H), 3.28 － 3.18 (m, 1H), 3.06 (dd, J = 15.6、7.6 Hz, 1H), 2.93 － 2.82 (m, 3H), 2.75 － 2.64 (m, 4H), 1.81 (br. s., 2H)。 LCMS (ES): m/z 619.3 [M+H]⁺。

実施例２７
（Ｓ）－３－（３－フルオロ－４－ヒドロキシフェニル）－３－（１－オキソ－７－（２－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパン酸

２７Ａ．エチル（Ｓ）－３－（３－フルオロ－４－ヒドロキシフェニル）－３－（１－オキソ－７－（２－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）エチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパノエート：トリブロモボラン（１．０Ｍ、ヘキサン中）（０．９５８ｍＬ、０．９５８ｍｍｏｌ）を、１Ｃ－１（０．０５０ｇ、０．０９６ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（０．９１５ｍＬ）中の０℃の溶液に、滴下して加えた。０℃で３０分間攪拌した後、反応をＥｔＯＨでゆっくりとクエンチした。混合物をＤＣＭで希釈し、飽和ＮａＨＣＯ_３で慎重に洗浄した。有機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空で濃縮し、残留物を分取ＨＰＬＣ（ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｎａＡＸＩＡ５ｕＣ１８２１．２ｘ１００ｍｍ、１０分勾配、１２分泳動、１０％～１００％溶媒Ｂ＝９０％ＡＣＮ－１０％Ｈ_２Ｏ－０．１％ＴＦＡ、溶媒Ａ＝１０％ＡＣＮ－９０％Ｈ_２Ｏ－０．１％ＴＦＡ）によって精製し、２７Ａ（２２．１ｍｇ、４５％）を白色の固形物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 7.14 － 7.04 (m, 2H), 7.01 － 6.89 (m, 2H), 6.75 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.45 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.36 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.21 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 5.71 (br. s., 1H), 4.11 (qd, J = 7.1、1.2 Hz, 2H), 3.94 (dd, J = 7.6、4.3 Hz, 1H), 3.89 － 3.78 (m, 1H), 3.63 － 3.46 (m, 1H), 3.41 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.25 (ddd, J = 12.4、7.8、4.3 Hz, 1H), 2.98 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 2.78 (s, 4H), 2.70 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 1.96 － 1.83 (m, 2H), 1.19 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#1): 2.062 分; LCMS (ES): m/z 507.1 [M+H]⁺。

実施例２７．実施例２７は、実施例１について記載された方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, DMSO－d₆) δ 12.67 － 11.76 (m, 1H), 10.09 － 9.61 (m, 1H), 7.08 (dd, J = 12.4、1.9 Hz, 1H), 7.02 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.97 － 6.92 (m, 1H), 6.91 － 6.83 (m, 1H), 6.71 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.28 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 6.00 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 4.03 － 3.84 (m, 2H), 3.53 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 3.27 － 3.19 (m, 2H), 3.13 (ddd, J = 13.0、8.2、4.4 Hz, 1H), 2.93 (br. s., 1H), 2.79 (br. s., 1H), 2.72 － 2.56 (m, 6H), 1.78 － 1.68 (m, 2H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.188 分; LCMS (ES): m/z 479.2 [M+H]⁺。

実施例２８
（Ｓ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（１－オキソ－７－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパン酸

２８Ａ．エチル（Ｓ）－３－（４－（１，８－ナフチリジン－２－イル）－１Ｈ－ピロール－２－カルボキサミド）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート：２８Ａは、１Ａについて記載された方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, DMSO－d₆) δ 11.93 (br. s., 1H), 8.99 (dd, J = 4.1、1.9 Hz, 1H), 8.70 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.42 － 8.29 (m, 2H), 7.98 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.50 (dd, J = 8.1、4.3 Hz, 1H), 7.28 (dd, J = 12.7、1.9 Hz, 1H), 7.24 － 6.99 (m, 3H), 4.06 － 4.01 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.92 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 2.85 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 1.12 (t, J = 7.0 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#1): 2.395 分; LCMS (ES): m/z 463.1 [M+H]⁺。

２８Ｂ．エチル（Ｓ）－３－（７－（１，８－ナフチリジン－２－イル）－１－オキソ－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート：２８Ｂは、１Ｂについて記載された方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 9.11 － 9.04 (m, 1H), 8.18 － 8.15 (m, 2H), 7.86 － 7.82 (m, 1H), 7.80 － 7.75 (m, 1H), 7.56 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.46 － 7.39 (m, 1H), 7.17 － 7.09 (m, 2H), 7.00 － 6.91 (m, 1H), 6.39 － 6.34 (m, 1H), 4.19 － 4.13 (m, 4H), 3.91 (s, 3H), 3.72 － 3.59 (m, 1H), 3.42 － 3.27 (m, 1H), 3.05 － 3.01 (m, 2H), 1.26 － 1.20 (m, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#1): 2.438 分; LCMS (ES): m/z 489.1 [M+H]⁺。

２８Ｃ．エチル（Ｓ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（１－オキソ－７－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパノエート：２８Ｂ（７０．４ｍｇ、０．１４４ｍｍｏｌ）のＥｔＯＨ（３．９０ｍＬ）中の溶液に、ＰｔＯ_２（６．５６ｍｇ、０．０２９ｍｍｏｌ）を加えた。懸濁液をＨ_２雰囲気（１ａｔｍ、バルーン）下、室温で５時間攪拌した。スラリーをセライト（登録商標）パッドを介して濾過し、濾液を真空で濃縮し、２８Ｃ（６３ｍｇ、８８％）を黄色の固形物として得て、これを精製を行わず次のステップにおいて用いた。LCMS (ES): m/z 493.2 [M+H]⁺。

実施例２８：実施例２８は、実施例１について記載された方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, DMSO－d₆) δ 12.83 － 11.59 (m, 1H), 7.34 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 7.14 (d, J = 5.0 Hz, 2H), 7.08 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.20 (s, 1H), 6.06 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.15 － 3.97 (m, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.69 － 3.55 (m, 1H), 3.28 － 3.18 (m, 3H), 3.08 (dd, J = 15.4、7.7 Hz, 1H), 2.93 (dd, J = 15.4、8.3 Hz, 1H), 2.62 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 1.82 － 1.68 (m, 2H)。 LCMS (ES): m/z 465.1 [M+H]⁺。

実施例２９
（Ｓ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（１－オキソ－７－（（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）メチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパン酸

２９Ａ．エチル（Ｓ，Ｚ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（７－（２－ニトロプロプ－１－エン－１－イル）－１－オキソ－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパノエート：中間体２５（０．２１５ｇ、０．５５４ｍｍｏｌ）およびＮＨ_４ＯＡｃ（０．０４３ｇ、０．５５４ｍｍｏｌ）の、ニトロエタン（１．１１ｍＬ、１５．５ｍｍｏｌ）中の溶液を、１１０℃で３０分間攪拌した。反応混合物を室温に冷却し、水で希釈し、ＤＣＭ（３ｘ）で希釈した。有機層を合わせて、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空で濃縮した。残留物を、フラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、１００：０から０：１００）によって精製し、２９Ａ（０．２０４ｇ、８３％）を黄色の固形物として得た。 ¹H NMR (500MHz, CDCl3) δ 7.98 (s, 1H), 7.19 (s, 1H), 7.13 － 7.05 (m, 2H), 7.01 (s, 1H), 6.97 － 6.90 (m, 1H), 6.36 － 6.25 (m, 1H), 4.20 － 4.09 (m, 3H), 4.03 (ddd, J = 12.2、7.4、4.3 Hz, 1H), 3.89 (s, 3H), 3.71 － 3.58 (m, 1H), 3.33 (ddd, J = 12.4、7.8、4.3 Hz, 1H), 3.07 － 2.90 (m, 2H), 2.48 (s, 3H), 1.22 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 2.482 分; LCMS (ES): m/z 446.3 [M+H]⁺。

２９Ｂ．エチル（Ｓ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（１－オキソ－７－（２－オキソプロピル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパノエート：２９Ａ（０．２０４ｇ、０．４５８ｍｍｏｌ）および塩化鈴（ＩＩ）二水和物（１．０３ｇ、４．５８ｍｍｏｌ）の、ＴＨＦ（２．０５ｍＬ）中の混合物を、１００℃、μＷ照射下で、１０分間攪拌した。反応混合物を、水およびＤＣＭの１：１混合物（２５ｍＬ）で希釈し、セライト（登録商標）パッドを介して濾過した。濾液を飽和ＮａＨＣＯ_３で慎重に洗浄した。有機層を分離し、ブラインで洗浄し、無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、真空で濃縮した。残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ヘキサン：ＥｔＯＡｃ、１００：０から２５：７５）によって精製し、２９Ｂ（９７ｍｇ、５１％）を白色の固形物として得た。 1H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 7.12 － 7.04 (m, 2H), 6.96 － 6.88 (m, 1H), 6.81 (s, 1H), 6.62 (s, 1H), 6.30 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.12 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 4.01 (dd, J = 7.3、4.5 Hz, 1H), 3.95 － 3.85 (m, 4H), 3.60 － 3.48 (m, 3H), 3.27 (ddd, J = 12.2、7.5、4.3 Hz, 1H), 3.04 － 2.92 (m, 2H), 2.18 (s, 3H), 1.20 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.958 分; LCMS (ES): m/z 417.3 [M+H]⁺。

２９Ｃ．エチル（Ｓ）－３－（７－（（１，８－ナフチリジン－２－イル）メチル）－１－オキソ－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート：２９Ｃは、中間体－２２Ｄについて記載された方法を用いて合成した。HPLC 保持時間 (方法#2): 1.618 分; LCMS (ES): m/z 503.4 [M+H]⁺。

２９Ｄ．エチル（Ｓ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（１－オキソ－７－（（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）メチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパノエート：２９Ｄは、２８Ｃについて記載された方法を用いて合成した。 LCMS (ES): m/z 507.3 [M+H]⁺。

実施例２９：実施例２９は、実施例１について記載される方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, CD₃OD) δ 7.30 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.18 － 7.10 (m, 2H), 7.05 (t, J = 8.5 Hz, 1H), 6.70 (s, 1H), 6.63 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 6.39 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.25 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 4.06 (td, J = 8.5、4.3 Hz, 1H), 3.98 － 3.89 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.75 － 3.64 (m, 3H), 3.40 (dd, J = 6.2、3.4 Hz, 2H), 3.30 － 3.25 (m, 1H), 2.91 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 2.72 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 1.87 (quin, J = 5.9、Hz, 2H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.383 分; LCMS (ES): m/z 479.2 [M+H]⁺。

実施例３０
（Ｓ）－３－（６－メトキシピリジン－３－イル）－３－（１－オキソ－７－（３－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）プロピル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパン酸

３０Ａ．エチル（３Ｓ）－３－（７－（（Ｅ）－４－ヒドロキシペント－１－エン－１－イル）－１－オキソ－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）－３－（６－メトキシピリジン－３－イル）プロパノエート：３０Ａは、中間体－１Ａについて記載された方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500 MHz, CDCl₃) δ 8.14 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 8.8、2.5 Hz, 1H), 7.03 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.68 (d, J =1.4 Hz, 1H), 6.39 － 6.23 (m, 2H), 5.95 (dd, J = 15.4、8.0 Hz, 1H), 4.18 － 4.12 (m, 2H), 4.07 － 4.01 (m, 1H), 4.00 － 3.86 (m, 5H), 3.61 (ddd, J = 12.3、7.6、4.3 Hz, 1H), 3.37 － 3.25 (m, 1H), 3.12 － 2.99 (m, 2H), 2.42 － 2.34 (m, 1H), 2.31 － 2.21 (m, 1H), 1.28 － 1.17 (m, 6H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.587 分; LCMS (ES): m/z 428.3 [M+H]⁺。

３０Ｂ．エチル（Ｓ，Ｅ）－３－（６－メトキシピリジン－３－イル）－３－（１－オキソ－７－（４－オキソペント－１－エン－１－イル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパノエート：デス・マーチン・ペルヨージナン（０．０８９ｇ、０．２１１ｍｍｏｌ）を、３０Ａ（０．０７５ｇ、０．１７５ｍｍｏｌ）のＤＣＭ（１．６４ｍＬ）中の溶液に加えた。室温で１時間攪拌した後、反応液をジエチルエーテルで希釈し、セライト（登録商標）パッドを介して濾過した。濾液を真空で濃縮し、残留物をフラッシュクロマトグラフィー（シリカゲル、ＤＣＭ：ＥｔＯＡｃ、１００：０から０：１００）によって精製し、３０Ｂ（４１．１ｍｇ、５５％）を橙色の固形物として得た。 LCMS (ES): m/z 426.3 [M+H]⁺。

３０Ｃ．エチル（Ｓ）－３－（６－メトキシピリジン－３－イル）－３－（１－オキソ－７－（４－オキソペンチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパノエート：３０Ｃは、２８Ｃについて記載された方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 8.12 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 8.5、2.5 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 6.26 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 4.13 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 4.00 (td, J = 8.0、3.7 Hz, 1H), 3.94 － 3.88 (m, 4H), 3.58 (ddd, J = 12.3、7.6、4.3 Hz, 1H), 3.29 (ddd, J = 12.3、7.6、4.3 Hz, 1H), 3.10 － 2.98 (m, 2H), 2.45 (td, J = 7.3、3.6 Hz, 4H), 2.12 (s, 3H), 1.83 (quin, J = 7.4 Hz, 2H), 1.20 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.717 分; LCMS (ES): m/z 428.3 [M+H]⁺。

３０Ｄ．エチル（Ｓ）－３－（７－（３－（１，８－ナフチリジン－２－イル）プロピル）－１－オキソ－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）－３－（６－メトキシピリジン－３－イル）プロパノエート：３０Ｄは、中間体－１９Ｅについて記載された方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 9.07 (dd, J = 4.3、2.1 Hz, 1H), 8.15 (dd, J = 8.3、1.9 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 8.08 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 8.5、2.5 Hz, 1H), 7.43 (dd, J = 8.1、4.3 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.72 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.53 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.26 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 4.14 － 4.09 (m, 2H), 3.98 (td, J = 8.0、3.7 Hz, 1H), 3.93 － 3.85 (m, 4H), 3.60 － 3.52 (m, 1H), 3.27 (ddd, J = 12.4、7.7、4.1 Hz, 1H), 3.10 － 2.98 (m, 4H), 2.57 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 2.15 (quin, J = 7.6 Hz, 2H), 1.21 － 1.26 (m, 3H)。HPLC 保持時間 (方法#2): 1.342 分; LCMS (ES): m/z 514.4 [M+H]⁺。

３０Ｅ．エチル（Ｓ）－３－（６－メトキシピリジン－３－イル）－３－（１－オキソ－７－（３－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）プロピル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパノエート：３０Ｅは、２８Ｃについて記載された方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 8.12 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 8.7、2.6 Hz, 1H), 7.18 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 1.7 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.55 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 6.29 － 6.21 (m, 2H), 4.12 (q, J = 7.2 Hz, 2H), 3.99 (dd, J = 7.6、4.5 Hz, 1H), 3.94 － 3.85 (m, 4H), 3.58 (ddd, J = 12.3、7.6、4.3 Hz, 1H), 3.49 － 3.40 (m, 2H), 3.29 (ddd, J = 12.3、7.6、4.3 Hz, 1H), 3.08 － 2.98 (m, 2H), 2.73 － 2.62 (m, 4H), 2.50 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 1.96 － 1.82 (m, 4H), 1.20 (t, J = 7.2 Hz, 3H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.612 分; LCMS (ES): m/z 518.4 [M+H]⁺。

実施例３０：実施例３０は、実施例１について記載された方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, CDCl₃) δ 14.57 (br. s., 1H), 9.47 (br. s., 1H), 8.17 (d, J = 1.4 Hz, 1H), 7.66 (dd, J = 8.7、2.1 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.70 (s, 1H), 6.62 (s, 1H), 6.37 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.31 (dd, J = 10.0、5.6 Hz, 1H), 4.01 (td, J = 8.0、3.7 Hz, 1H), 3.96 (s, 3H), 3.93 － 3.87 (m, 1H), 3.63 － 3.54 (m, 1H), 3.49 (br. s., 2H), 3.29 (ddd, J = 12.3、7.8、4.1 Hz, 1H), 3.16 － 3.08 (m, 1H), 3.07 － 2.94 (m, 1H), 2.76 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.71 － 2.61 (m, 2H), 2.50 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 1.98 － 1.87 (m, 4H)。 HPLC 保持時間 (方法#2): 1.290 分; LCMS (ES): m/z 490.1 [M+H]⁺。

実施例３１
（Ｓ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（１－オキソ－７－（４－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）ブチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパン酸

３１Ａ．エチル（Ｓ，Ｅ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（１－オキソ－７－（５－オキソヘキサ－１－エン－１－イル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパノエート：３１Ａは、中間体－１Ａについて記載された方法を用いて合成した。HPLC 保持時間 (方法#1): 3.068 分; LCMS (ES): m/z 457.2 [M+H]⁺。

３１Ｂ．エチル（Ｓ，Ｅ）－３－（７－（４－（１，８－ナフチリジン－２－イル）ブト－１－エン－１－イル）－１－オキソ－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）プロパノエート：３１Ａ（１７．７ｍｇ、０．０３９ｍｍｏｌ）、２－アミノニコチンアルデヒド（６．１６ｍｇ、０．０５０ｍｍｏｌ）、およびＬ－プロリン（４．４６ｍｇ、０．０３９ｍｍｏｌ）の、ＥｔＯＨ（０．１９４ｍＬ）中の溶液を、還流で１８時間攪拌した。室温に冷却した後、溶媒を真空で留去して、残留物を分取ＨＰＬＣ（ＰｈｅｎｏｍｅｎｅｘＬｕｎａＡＸＩＡ５ｕＣ１８２１．２ｘ１００ｍｍ、１０分勾配、１２分泳動、０％～１００％溶媒Ｂ＝９０％ＭｅＯＨ－１０％Ｈ_２Ｏ－０．１％ＴＦＡ、溶媒Ａ＝１０％ＭｅＯＨ－９０％Ｈ_２Ｏ－０．１％ＴＦＡ）によって精製し、２１．２ｍｇの３１ＢのＴＦＡ塩を得た。この物質をＭｅＯＨ（０．２５０ｍＬ）中に溶解させ、１００ｍｇのジアニオンＷＡ２１Ｊ樹脂を加えた。室温で１時間攪拌した後、樹脂を濾過によって除去し、ＭｅＯＨで十分に洗浄した。濾液を真空で濃縮し、３１Ｂ（１５．０ｍｇ、７１％）を黄色の固形物として得た。LCMS (ES): m/z 543.3 [M+H]⁺。

３１Ｃ．エチル（Ｓ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（１－オキソ－７－（４－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）ブチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパノエート：３１Ｃは、２８Ｃについて記載された方法を用いて合成した。 HPLC 保持時間 (方法#1): 2.660 分; LCMS (ES): m/z 549.3 [M+H]⁺。

実施例３１：実施例３１は、実施例１について記載された方法を用いて合成した。 ¹H NMR (500MHz, DMSO－d₆) δ 7.18 － 7.06 (m, 3H), 7.02 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 6.68 (s, 1H), 6.49 (s, 1H), 6.24 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.01 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 3.99 － 3.87 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 3.59 (br. s., 1H), 3.22 (br. s., 2H), 3.15 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 3.05 － 2.98 (m, 1H), 2.91 － 2.82 (m, 1H), 2.61 － 2.56 (m, 2H), 2.41 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 2.35 (t, J=7.0 Hz, 2H), 1.72 (br. s., 2H), 1.54 (d, J = 7.3 Hz, 2H), 1.46 (d, J = 7.0 Hz, 2H)。 LCMS (ES): m/z 521.5 [M+H]⁺。

実施例３２
（Ｓ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（１－オキソ－７－（４－（５，６，７，８－テトラヒドロ－１，８－ナフチリジン－２－イル）ブチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパン酸、ＴＦＡ

３２Ａ．エチル（Ｓ）－３－（３－フルオロ－４－メトキシフェニル）－３－（１－オキソ－７－（（ピリジン－２－イルアミノ）メチル）－３，４－ジヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）プロパノエート：中間体２５（１０ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）、ピリジン－２－アミン（２．４２ｍｇ、０．０２６ｍｍｏｌ）およびＮａＢＨ_４（１．９５ｍｇ、０．０５１ｍｍｏｌ）の、ＤＣＭ（０．２５７ｍＬ）中の混合物を、室温で１０分間攪拌した。反応混合物を水でクエンチし、ＤＣＭで抽出した。有機層を無水Ｎａ_２ＳＯ_４で乾燥させ、濾過し、真空で濃縮し、３２Ａ（１１．２ｍｇ、９３％）を粗製の黄色の油状物として得て、これをさらに精製を行わず、次のステップに用いた。 LCMS (ES): m/z 467.1 [M+H]⁺。

実施例３２：実施例３２は、実施例１について記載された方法を用いて合成した。¹H NMR (500 MHz, DMSO－d₆) δ 7.93 (br d, J = 5.8 Hz, 1H), 7.80 (br t, J = 7.5 Hz, 1H), 7.20 － 7.08 (m, 4H), 7.00 － 6.93 (m, 2H), 6.79 (br t, J = 6.4 Hz, 1H), 6.71 (s, 1H), 6.02 (br t, J = 7.9 Hz, 1H), 4.34 (s, 2H), 4.07 － 3.93 (m, 2H), 3.81 (s, 3H), 3.64 － 3.52 (m, 1H), 3.17 (br d, J = 8.2 Hz, 1H), 3.10 － 3.01 (m, 1H), 2.91 (br dd, J = 15.4、8.4 Hz, 1H)。 LCMS (ES): m/z 439.4 [M+H]⁺。

本発明の他の特徴は、本発明の説明のために示され、限定することを意図していない、例示的な実施態様の前記の説明の過程で明らかになるはずである。本発明は、その精神または本質的な特性から逸脱することなく、他の特定の形態で実施されうる。本発明は、本明細書に記載される、本発明の好ましい局面の全ての組み合わせを含む。本発明のありとあらゆる実施態様は、さらなる実施態様を記載するために、他の任意の実施態様と組み合わせられうることが理解される。実施態様のそれぞれの個々の要素は、それ自体で独立した実施態様であることもまた理解される。さらに、実施態様の任意の要素は、さらなる実施態様を記載するために、任意の実施態様からのありとあらゆる他の要素と組み合わせることができることを意味する。

Claims

式Ｉ：

［式中、
Ｘは結合、－Ｏ－、－Ｓ－、－ＮＲ^７－、アルキレン、アルキレンオキシ、アルキレンチオ、またはアルキレン－ＮＲ^７－であり；
Ｒ^１は水素、ハロ、またはアルキルであり；
Ｒ^２はグアニジル、（ジヒドロイミダゾリル）アミノ、（イミダゾリル）アミノ、（テトラヒドロピリミジル）アミノ、（ピリジニル）アミノ、（ベンゾイミダゾリル）アミノ、テトラヒドロナフチリジニル、ナフチリジニル、ジヒドロピリドオキサジニル、テトラヒドロピリドピラジニル、テトラヒドロピリドアゼピニル、テトラヒドロピリドオキサゼピニル、ジヒドロイミダゾイミダゾリル、またはテトラヒドロイミダゾピリミジニルであり、０－２個のアルキル置換基で置換され；
あるいは、Ｒ^２Ｘは一緒になって、ジ－（（テトラヒドロナフチリジニル）メチル）メチルであり；
Ｒ^３は水素、ハロ、またはアルキルであり；
Ｒ^４は水素またはＡｒ^１であり；
Ｒ^５は水素、ベンジルオキシカルボニルアミノ、またはＡｒ^１ＳＯ_２ＮＨであり；
Ｒ^６は水素またはアルキルであり；
Ｒ^７は水素またはアルキルであり；
Ａｒ^１はフェニル、ナフチル、ジヒドロベンゾフラニル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、キノリニル、またはキノキサリニルであり、かつ、シアノ、ハロ、アルキル、ハロアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、（シクロアルキル）アルコキシ、およびハロアルコキシから選択される、０－３個の置換基で置換されている。］
で示される化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
Ｘが結合またはアルキレンであり；
Ｒ^１が水素またはハロであり；
Ｒ^２がグアニジル、（ジヒドロイミダゾリル）アミノ、（イミダゾリル）アミノ、（テトラヒドロピリミジル）アミノ、（ピリジニル）アミノ、（ベンゾイミダゾリル）アミノ、テトラヒドロナフチリジニル、ナフチリジニル、ジヒドロピリドオキサジニル、テトラヒドロピリドピラジニル、テトラヒドロピリドアゼピニル、テトラヒドロピリドオキサゼピニル、ジヒドロイミダゾイミダゾリル、またはテトラヒドロイミダゾピリミジニルであり、かつ、０－２個のアルキル置換基で置換され；
Ｒ^３が水素であり；
Ｒ^４が水素またはＡｒ^１であり；
Ｒ^５が水素、ベンジルオキシカルボニルアミノ、またはＡｒ^１ＳＯ_２ＮＨであり；
Ｒ^６が水素またはアルキルであり；
Ｒ^７が水素またはアルキルであり；
Ａｒ^１がフェニル、ナフチル、ジヒドロベンゾフラニル、ピリジニル、ピリダジニル、ピリミジニル、ピラジニル、キノリニル、またはキノキサリニルであり、かつ、シアノ、ハロ、アルキル、ハロアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、（シクロアルキル）アルコキシ、およびハロアルコキシから選択される、０－３個の置換基で置換されている、
請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
Ｘが結合またはアルキレンである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
Ｒ^１が水素またはハロである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
Ｒ^２が（ピリジニル）アミノ、テトラヒドロナフチリジニル、またはナフチリジニルであり、かつ、０－２個のアルキル置換基で置換されている、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
Ｒ^３が水素である、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
Ｒ^４がＡｒ^１であり；Ｒ^５が水素である、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
Ｒ^４が水素であり、Ｒ^５がベンジルオキシカルボニルアミノまたはＡｒ^１ＳＯ_２ＮＨである、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
Ａｒ^１がフェニル、ピリジニル、またはピリミジニルであり、かつ、シアノ、ハロ、アルキル、ハロアルキル、ヒドロキシ、アルコキシ、（シクロアルキル）アルコキシ、およびハロアルコキシから選択される、０－３個の置換基で置換されている、請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩。
請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩、および担体を含む、医薬組成物。
請求項１に記載の化合物、またはその薬学的に許容可能な塩を含む、病理学的線維症、移植片拒絶、癌、骨粗鬆症、または炎症性疾患から選択される、疾患、障害、または病状を治療するための医薬組成物。
病理学的線維症が、肺、肝臓、腎臓、心臓、皮膚、眼、または膵線維症である、請求項１１に記載の医薬組成物。
疾患、障害、または病状が、特発性肺線維症（ＩＰＦ）、非アルコール性脂肪性肝炎（ＮＡＳＨ）、慢性腎臓病、糖尿病性腎症、および全身性硬化症である、請求項１１に記載の医薬組成物。
癌が、膀胱、血液、骨、脳、乳房、中枢神経系、頸、結腸、子宮内膜、食道、胆嚢、生殖器、泌尿生殖器、頭部、腎臓、喉頭、肝臓、肺、筋肉組織、頸部、口または鼻粘膜、卵巣、膵臓、前立腺、皮膚、脾臓、小腸、大腸、胃、精巣、または甲状腺である、請求項１１に記載の医薬組成物。