JP7283682B2 - 固相抽出材及び核酸の濃縮・検出におけるその応用 - Google Patents
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Description
本出願は、2017年7月14日に中国特許庁へ提出された、出願番号が201710575341.5、発明の名称が「固相抽出材及び核酸の濃縮・検出におけるその応用」である中国特許出願に基づき優先権を主張し、その開示内容は、参照により本明細書に組み込まれる。
ガラスビーズを濃硫酸と混合した後、それに過酸化水素をゆっくりと加え、シェーカーで1h振盪して反応させ、その後、純水でガラスビーズを10回洗浄した後、干燥させ、
干燥されたガラスビーズをシラン化試薬及び溶媒と混合し、2h振とうして反応させた後、純水で10回洗浄し、シラン化されたガラスビーズを得る。
酸洗浄済みガラスビーズ(Sigma)約0.5gをビーカーに加え、それに濃硫酸7mLを加えた後、過酸化水素3mLを徐々に加え、その反応系をシェーカーで1時間振盪して、ガラスビーズの活性化を完了させた。活性化後、ガラスビーズを純水で10回洗浄し、オーブンに入れて乾燥させた。
酸洗浄済みガラスビーズ(Sigma)約0.5gをビーカーに加え、それに濃硫酸7mLを加えた後、過酸化水素3mLを徐々に加え、その反応系をシェーカーで1時間振盪して、ガラスビーズの活性化を完了させた。活性化後、ガラスビーズを純水で10回洗浄し、オーブンに入れて乾燥させた。
APTES修飾磁気ビーズは海狸公司から購入された(粒径500nm、初期濃度10mg/mL)。まず、磁気ビーズ100μLを1.5mL遠心分離管に入れ、磁気スタンドに置いて磁気ビーズを収集し、余分な水を除去し、その後、磁気ビーズを純水で3回洗浄し、余分な水を除去した。磁気ビーズには、GO分散液300μLを加え(先豊ナノ公司から購入、横方向サイズ0.5~2μm、初期濃度いずれも1mg/mL)、振とうしながら1h反応させ、磁気ビーズと十分に結合させた後、過剰の未結合GOを除去し、上清が透明になるまで磁気ビーズを水で洗浄し、得られたGO修飾磁気ビーズを水200μLに分散させ、4℃で保存して準備した。
APTES修飾磁気ビーズは、海狸公司から購入された(粒径500nm、初期濃度10mg/mL)。まず、磁気ビーズ100μLを1.5mL遠心分離管に入れ、磁気スタンドに置いて磁気ビーズを収集し、余分な水を除去し、その後、磁気ビーズを純水で3回洗浄し、余分な水を除去した。磁気ビーズにrGO分散液300μLを加え(先豊ナノ公司から購入、横方向サイズ0.5~2μm、初期濃度いずれも1mg/mL)、振とうしながら1h反応させ、磁気ビーズと十分に結合させた後、過剰の未結合GOを除去し、上清が透明になるまで磁気ビーズを水で洗浄し、得られたGO修飾磁気ビーズを水200μLに分散させ、4℃で保存して準備した。
1.GO修飾ガラスビーズによる短い1本鎖DNA(22nt)の濃縮効果
まず、ssDNA(配列5’-TGAGGTAGTAGGTTGTATAGTT-3’;配列番号1)を含む最終濃度10nMのサンプル溶液25μLを調製し、実施例1で調製されたGO修飾ガラスビーズ0.005gを秤量して0.2mL遠心分離管に入れた。サンプル溶液20μLを抽出材料の入った遠心分離管に加え、渦巻きし振とうし抽出材料と溶液とを十分に混合し、室温で10min抽出した。抽出後、遠心分離管内の液体を吸引し、得られた抽出材料を後のRCAにかけた。
まず、let-7a(配列5’-UGAGGUAGUAGGUUGUAUAGUU-3’;配列番号3)を含む最終濃度10nMのサンプル水溶液25μLを調製し、実施例3で調製されたrGO修飾ガラスビーズ0.5μLを秤量して0.2mL遠心分離管に入れた。サンプル溶液20μLを抽出材料の入った遠心分離管に加え、渦巻きし振とうし抽出材料と溶液とを十分に混合し、室温で10min抽出した。抽出後、遠心分離管内の液体を吸引し、得られた抽出材料を後のRCAにかけた。
アミノ基磁気ビーズは、主に静電吸着により核酸を捕捉するが、グラフェン固相抽出材は、主にπ-π相互作用により1本鎖核酸を捕捉する。miRNAへの捕捉については、両方は同様の効果があり、グラフェン修飾固相抽出材の利点を示さないが、この実験は、rGO修飾磁気ビーズがアミノ基磁気ビーズではなく、相同miRNAを効率的に区別できることを示している。
本発明は、rGO修飾材料がmiRNAを効率的に吸着できるが、ゲノムDNA(gDNA)及びmRNAを吸着できないため、複雑な核酸溶液からmiRNAを抽出できるために使用できることを初めて見出・証明した。市販されているよく見られたシリコンマトリックス材料は、miRNA、gDNA又はmRNAを特異的に吸着することができない。
濃縮されていない低濃度核酸抽出液は、インサイチュ増幅を行い、RCA反応系は、20μLで、RCAマスターミックス10μL、miRNA(let-7a)サンプル2μL、環状プローブ(配列CACGCGATCCGCAACTATACAACCTACTACCTCAACACCCTCCAACCACCAAGGCAATGTACACGAATTCGCCGAACG)2μL及び水6μLを含む。
Claims (4)
- サンプルを固相抽出材と混合し、抽出した後、固相抽出材を分離し、清洗し、溶出した後、核酸溶液を得ることを含み、前記固相抽出材が、短い1本鎖核酸を吸着する固相抽出材であり、かつ、表面が還元型酸化グラフェンで修飾されたガラスビーズ又は磁気ビーズであり、前記ガラスビーズの直径は、100μm~300μmであり、前記磁気ビーズの直径は、10nm~5μmであり、前記短い1本鎖核酸がmiRNAである、前記短い1本鎖核酸の濃縮方法。
- 前記還元型酸化グラフェンの横方向サイズは、0.5μm~2μmである、請求項1に記載の方法。
- サンプルを固相抽出材と混合し、抽出した後、固相抽出材を分離し、特異的なプローブ及びインサイチュ増幅用試薬と混合し、ローリングサークル増幅(RCA)で増幅させた後、電気泳動により増幅産物を検出することを含み、
前記固相抽出材が短い1本鎖核酸を吸着する固相抽出材であり、前記固相抽出材の固相支持体の表面が還元型酸化グラフェンで修飾されており、前記固相支持体は、ガラスビーズ又は磁気ビーズであり、前記ガラスビーズの直径は、100μm~300μmであり、前記磁気ビーズの直径は、10nm~5μmであり、前記短い1本鎖核酸がmiRNAである、前記短い1本鎖核酸の検出方法。 - サンプルを固相抽出材と混合し、抽出した後、固相抽出材を分離し、特異的なプローブ及びインサイチュ増幅用試薬と混合し、ローリングサークル増幅(RCA)で増幅させた後、電気泳動により増幅産物を検出することを含み、
前記固相抽出材が短い1本鎖核酸を吸着する固相抽出材であり、前記固相抽出材の固相支持体の表面が還元型酸化グラフェンで修飾されており、前記固相支持体は、ガラスビーズ又は磁気ビーズであり、前記ガラスビーズの直径は、100μm~300μmであり、前記磁気ビーズの直径は、10nm~5μmであり、前記短い1本鎖核酸がmiRNAであり、前記還元型酸化グラフェンの横方向サイズは、0.5μm~2μmである、前記短い1本鎖核酸の検出方法。
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Citations (1)
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---|---|---|---|---|
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US9051605B2 (en) * | 2011-07-29 | 2015-06-09 | Auburn University | Magnetic bead quantum dot nanoparticle assay |
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Non-Patent Citations (3)
Title |
---|
Pham XH. et al.,Graphene Oxide Conjugated Magnetic Beads for RNA Extraction ,Chem Asian J. ,2017年06月22日,12(15),pp.1883-1888,doi: 10.1002/asia.201700554 |
Wang YH. et al.,Partially reduced graphene oxide as highly efficient DNA nanoprobe,Biosensors and Bioelectronics,2016年,Vol.80,p.140-145 ,http://dx.doi.org/10.1016/j.bios.2016.01.052 |
Zhu X. et al.,Detection of microRNA SNPs with ultrahigh specificity by using reduced graphene oxide-assisted rolling circle amplification,Chemical Communications,No.51, Issue 49,p.10002-10005,doi:/10.1039/c5cc02039e |
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