JP7280313B2 - 水生生物種からシュウ酸が低減されたタンパク質を抽出するための方法及び系並びにその組成物。 - Google Patents

Description

関連出願の相互参照
本出願は、２０１５年８月１０日に出願された米国仮特許出願第６２／２０３，１９９号に対する優先権を主張する。上記出願の内容は、その全体が参照により本明細書に組み込まれる。

開示の分野
本開示は、一部の実施形態により、水生生物種（例えば、アオウキクサ（Ｌｅｍｎａ））由来のシュウ酸含有量が低減された（例えば、≦０．６％、≦０．０５％）タンパク質を産生するための組成物、方法及び系並びにその組成物に関する。一部の実施形態では、本開示は、シュウ酸含有量が低減されたマイクロクロップタンパク質産生物の組成物に関する。

開示の背景
増え続ける世界人口は、特に発展途上国において、動物の餌及びヒトの消費の両方のためのタンパク源への十分で入手可能な利用手段を含む持続可能性についての多くの懸案事項を刺激し続けている。海洋タンパク源は、それらの望ましい栄養プロファイル及び嗜好性の改良により飼料においてしばしば利用されている一方で、高い生産費用は代替手段に対する要求の増大をもたらしている。しかし多数の植物種はそれらの劣ったアミノ酸プロファイル及び／又は高い繊維含有量のために代替手段に適さない。代替タンパク源からタンパク質を抽出する多くの試みは、多くのヒト消費及び動物用飼料適用に適さないタンパク質完全性、溶解度及び／又は分散特徴を有する産生物をもたらしている。追加的に、代替タンパク質源からタンパク質を抽出するためのいくつかの試みは、シュウ酸などの抗栄養成分の含有量が増加している産生物をもたらし、多くのヒト消費適用についてそれらを望ましくないようにしている。さらに水の保全の懸案事項は、特に赤道及び乾燥領域において、タンパク質濃縮物の産生のために好適な代替種を同定することを推進する要因である。

概要
したがって、タンパク質完全性、溶解度、及び／又は分散特徴が増加し、シュウ酸含有量が低減された濃縮タンパク質産生物の産生のための方法及び系の改善に対する必要性が生じている。さらに、必要な水及び／又はエネルギー支出が減少した様式での濃縮タンパク質の産生のための方法及び系の改善に対する必要性が生じている。

本開示は、一部の実施形態により、シュウ酸含有量が低減された（例えば、ここで総シュウ酸含有量は≦０．６％ＤＭＢ、≦０．０５％ＤＭＢである）可溶性マイクロクロップタンパク質（例えば、アオウキクサタンパク質濃縮物）を含む産生物を産生するためにマイクロクロップ（microcrop）（例えば、アオウキクサ）を含むバイオマスに処理を行う
方法（a method of treating）に関する。

本開示は、一部の実施形態では；溶解バイオマス（lysed biomass）を形成するために
バイオマス（例えば、アオウキクサ）を溶解するステップ；溶解バイオマスからシュウ酸塩を沈殿させるステップ；ジュース画分及び固形画分を生成するために溶解バイオマスを分離するステップ；第１ジュース及び第１ケーキを生成するためにジュース画分を分離するステップ；並びに第１可溶性タンパク質及び第１リジェクト流を生成するために第１ジュースをろ過するステップを含む方法での、可溶性マイクロクロップタンパク質の生成方
法に関する。一部の実施形態により、第１可溶性タンパク質は約０．６％ＤＭＢ未満（例えば約０．１％ＤＭＢ未満、約０．０５％ＤＭＢ未満）のシュウ酸含有量を有してよい。

一部の実施形態では、該方法は、第２可溶性タンパク質及び第２リジェクト流を生成するために第１可溶性タンパク質をろ過するステップをさらに含んでよい。一部の実施形態により、該方法は、濃縮タンパク質産生物及び透過物（permeate）を生成するために第２可溶性タンパク質をろ過するステップをさらに含んでよい。一部の実施形態では、該方法は、乾燥タンパク質濃縮物を生成するために濃縮タンパク質産生物を乾燥させるステップをさらに含んでよい。一部の実施形態により、乾燥タンパク質濃縮物は、次の特徴の１つ又は複数を有してよい：重量で少なくとも約５０％のタンパク質濃度、少なくとも５０％の溶解度値及び／又は少なくとも５０％の分散性値。

該方法は、一部の実施形態により、浸漬バイオマスを形成するために第２培地（例えば、約８ｐｐｍ未満のカルシウム源若しくは約４ｐｐｍ未満の窒素源又は両方を含む）中にバイオマスを浸漬するステップをさらに含んでよい。一部の実施形態では、該方法は、第３培地中で浸漬バイオマスを緩衝するステップを含んでよい。一部の実施形態により、該方法は、ジュース画分からシュウ酸塩を沈殿させるステップを含んでよい。

追加的に本開示は：溶解バイオマスを形成するためにバイオマス（例えば、アオウキクサ）を溶解するステップ；ジュース画分及び固形画分を生成するために溶解バイオマスを分離するステップ；ジュース画分からシュウ酸塩を沈殿させるステップ；第１ジュース及び第１ケーキを生成するためにジュース画分を分離するステップ；並びに第１可溶性タンパク質及び第１リジェクト流を生成するために第１ジュースをろ過するステップを含む方法での、可溶性マイクロクロップタンパク質の生成方法に関する。一部の実施形態では、第１可溶性タンパク質は、約０．６％ＤＭＢ未満（例えば約０．１％ＤＭＢ未満、約０．０５％ＤＭＢ未満）のシュウ酸含有量を有してよい。該方法は、一部の実施形態では、溶解バイオマスからシュウ酸塩を沈殿させるステップを含んでよい。

一部の実施形態では、該方法は、第２可溶性タンパク質及び第２リジェクト流を生成するために第１可溶性タンパク質をろ過するステップを含んでよい。一部の実施形態により、該方法は、濃縮タンパク質産生物及び透過物を生成するために第２可溶性タンパク質をろ過するステップを含んでよい。該方法は、一部の実施形態では、乾燥タンパク質濃縮物を生成するために濃縮タンパク質産生物を乾燥させるステップをさらに含んでよい。一部の実施形態により、乾燥タンパク質濃縮物は、次の特徴の１つ又は複数を有してよい：重量で少なくとも約５０％のタンパク質濃度、少なくとも５０％の溶解度値及び／又は少なくとも５０％の分散性値。

該方法は、一部の実施形態により、浸漬バイオマスを形成するために第２培地（例えば、約８ｐｐｍ未満のカルシウム源若しくは約４ｐｐｍ未満の窒素源又は両方を含む）中にバイオマスを浸漬するステップを含んでよい。一部の実施形態では、該方法は、第３培地中で浸漬バイオマスを緩衝するステップを含んでよい。

本開示は、一部の実施形態では、バイオマスを形成するように第１培地中でマイクロクロップを培養するステップ、バイオマスを収集する（harvesting）ステップ及びバイオマスから可溶性タンパク質を抽出するステップを含む方法での、可溶性マイクロクロップタンパク質を含む産生物を生成するためのマイクロクロップ（例えば、アオウキクサ）を含むバイオマスの培養及び処理を行う方法に関する。一部の実施形態により、第１培地は、（ｉ）カルシウム；少なくとも２０ｐｐｍの濃度及び（ｉｉ）１つ又は複数の抗光合成色素、の少なくとも１つを含んでよい。一部の実施形態では、１つ又は複数の抗光合成色素は、（ｎ－エチル－ｎ－［４－［［４－［エチル［（３－スルホフェニル）メチル］アミ
ノ］－フェニル］（２－スルホフェニル－メチレン）］２，５－シクロヘキサジエン－１－イリデン］－３－スルホベンゼンメタンアミニウムヒドロキシド内塩の二ナトリウム塩、（４Ｅ）－５－オキソ－１－（４－スルホナトフェニル）－４－［（４－スルホナトフェニル）ヒドラゾノ］－３－ピラゾールカルボキシラートの三ナトリウム塩、ジアゾニウム；２－［［４－［エチル－［（３－スルホナトフェニル）メチル］アミノ］フェニル］－［４－［エチル－［（３－スルホナトフェニル）メチル］アザニウミリデン］シクロヘキサ－２，５－ジエン－１－イリデン］メチル］ベンゼンスルホナ－ト、ベンジル－［４－［［４－［ベンジル（エチル）アミノ］フェニル］－（５－ヒドロキシ－２，４－ジスルホフェニル）メチリデン］シクロヘキサ－２，５－ジエン－１－イリデン］－エチルアザニウム、２－（１，３－ジオキソインデン－２－イル）キノリン－６，８－ジスルホナートの二ナトリウム塩、又はこれらの組合せから選択されてよい。一部の実施形態では、可溶性タンパク質は、約０．６％ＤＭＢ未満（例えば約０．１％ＤＭＢ未満、約０．０５％ＤＭＢ未満）のシュウ酸含有量を有してよい。

一部の実施形態により、該方法は、溶解バイオマスを形成するためにバイオマスを溶解するステップ、ジュース画分及び固形画分を生成するために溶解バイオマスを分離するステップ、第１ジュース及び第１ケーキを生成するためにジュース画分を分離するステップ、並びに第１可溶性タンパク質及び第１リジェクト流を生成するために第１ジュースをろ過するステップを含んでよい。

一部の実施形態では、該方法は、第２可溶性タンパク質及び第２リジェクト流を生成するために第１可溶性タンパク質をろ過するステップを含んでよい。一部の実施形態により、該方法は、濃縮タンパク質産生物及び透過物を生成するために第２可溶性タンパク質をろ過するステップを含んでよい。該方法は、一部の実施形態では、乾燥タンパク質濃縮物を生成するために濃縮タンパク質産生物を乾燥させるステップをさらに含んでよい。一部の実施形態により、乾燥タンパク質濃縮物は、次の特徴の１つ又は複数を有してよい：重量で少なくとも約５０％のタンパク質濃度、少なくとも５０％の溶解度値及び／又は少なくとも５０％の分散性値。

該方法は、一部の実施形態により、浸漬バイオマスを形成するために第２培地（例えば、約８ｐｐｍ未満のカルシウム源若しくは約４ｐｐｍ未満の窒素源又は両方を含む）中にバイオマスを浸漬するステップを含んでよい。一部の実施形態では、該方法は、第３培地中で浸漬バイオマスを緩衝するステップを含んでよい。

本開示は、本明細書に記載の方法により産生されたマイクロクロップを含むバイオマス（例えば、アオウキクサ）由来の可溶性タンパク質産生物にさらに関する。一部の実施形態により、可溶性タンパク質産生物は、約０．６％ＤＭＢ未満（例えば約０．１％ＤＭＢ未満、約０．０５％ＤＭＢ未満）のシュウ酸含有量を有してよい。一部の実施形態では、可溶性タンパク質産生物は、乾燥タンパク質濃縮物を生成するために乾燥されてよい。一部の実施形態により、乾燥タンパク質濃縮物は、次の特徴の１つ又は複数を有してよい：重量で少なくとも約５０％のタンパク質濃度、少なくとも５０％の溶解度値及び／又は少なくとも５０％の分散性値。

本特許の書類は、カラーで出力された少なくとも１つの図面を含有している。カラー図面（単数又は複数）を含む本特許の複製物は、請求及び必要な費用の支払いに応じて特許商標局により提供される。

本開示の一部の実施形態は、一部分において、本開示及び添付の図面を参照することによって理解され得る。

本開示の具体的な実施形態例によるシュウ酸含有量が低減されたタンパク質濃縮物の産生のためにマイクロクロップを培養する、収集する及び処理する（process）ための系を例示する生産工程表である。 本開示の具体的な実施形態例によるシュウ酸含有量が低減されたタンパク質濃縮物の産生のためにマイクロクロップを培養する、収集する及び処理するための系を例示する生産工程表である。 本開示の具体的な実施形態例によるシュウ酸含有量が低減されたタンパク質濃縮物の産生のためにマイクロクロップを培養する、収集する及び処理するための系を例示する生産工程表である。 本開示の具体的な実施形態例によるシュウ酸含有量が低減されたタンパク質濃縮物の産生のためにマイクロクロップを培養する、収集する及び処理するための系を例示する生産工程表である。 本開示の具体的な実施形態例によりバイオマスからシュウ酸含有量が低減されたタンパク質濃縮物を産生するための工程（process）を例示する生産工程表である。 本開示の具体的な実施形態例によりバイオマスからシュウ酸含有量が低減されたタンパク質濃縮物を産生するための工程を例示する生産工程表である。 本開示の具体的な実施形態例によりバイオマスからシュウ酸含有量が低減されたタンパク質濃縮物を産生するための工程を例示する生産工程表である。

詳細な説明
本開示は、マイクロクロップ（例えば、水生植物種、アオウキクサ、藻類種）由来のシュウ酸含有量が低減された（例えば、総シュウ酸含有量が≦０．６％ＤＭＢ、≦０．０５％ＤＭＢである）タンパク質濃縮物（例えば、可溶性タンパク質、乾燥タンパク質濃縮物）を産生するための組成物、系（system）及び方法に関する。例えば該方法は、本開示の具体的な実施形態例によるシュウ酸含有量が低減されたタンパク質濃縮物（例えば、可溶性タンパク質、乾燥タンパク質濃縮物）の産生のためにマイクロクロップ（例えば、水生植物種、アオウキクサ、藻類種）を増殖させる、収集する及び／又は分離することを含んでよい。一部の実施形態では、該方法は、本開示の具体的な実施形態例によるシュウ酸含有量が低減されたタンパク質濃縮物（例えば、可溶性タンパク質、乾燥タンパク質濃縮物）の産生のためにマイクロクロップ（例えば、水生植物種、アオウキクサ、藻類種）由来の可溶性タンパク質を抽出することを含んでよい。

当業者は、タンパク質源（例えば、マイクロクロップ、バイオマス）からタンパク質を抽出する複数の方法があることを理解する。一部の実施形態では、タンパク質源からタンパク質を抽出することは、例えば化学的（例えば界面活性剤）、生物学的（例えば酵素）、熱的（例えば凍結、融解）及び／又は機械的手段（例えば、挽く）によってタンパク質源の１つ又は複数の細胞を破壊する（例えば、溶解する）ことを含んでよい。プロテアーゼ阻害剤は、抽出されるタンパク質がタンパク質分解に感受性である場合に用いられてよい。一部の実施形態では、細胞デブリは、濾過及び／又は遠心分離などの手段を通じて除去されてよい。一部の実施形態により、タンパク質源からタンパク質を抽出することは、例えば操作温度（例えば、冷却又は加熱）、凝集剤（例えば、硫酸アンモニウム）、培地容量を低減すること（例えば、蒸発）、遠心分離、濾過又はその任意の組合せの方法を使用して溶液（例えば、培地）から可溶性タンパク質を沈殿させることを含んでよい。一部の実施形態では、タンパク質源からタンパク質を抽出することは、イオン交換クロマトグラフィー、サイズ排除クロマトグラフィー、親和性クロマトグラフィー及び高速液体クロマトグラフィーなどのクロマトグラフィー法を含む精製方針を含んでよい。

一部の実施形態では、該方法は、その１つ又は複数が反復される場合がある一連のステップで実施されてよい。例えば、該方法は、シュウ酸含有量が低減されたタンパク質濃縮物（例えば、可溶性タンパク質、乾燥タンパク質濃縮物）の産生をもたらす単一のサイクル（例えば、反復されるステップがない）を含む場合がある。一部の実施形態では、該方法は、産生物、中間体及び／又は工程の前のサイクルの副産物が工程の１つ又は複数の続くサイクルで再利用され得るような、シュウ酸含有量が低減されたタンパク質濃縮物（例えば、可溶性タンパク質、乾燥タンパク質濃縮物）の産生のための複数のサイクル（例えば、第１ポーション、第２ポーション）又は連続的工程を含む場合がある。本開示の利益を有する当業者は、シュウ酸が、存在する場合、そのプロトン化された（Ｈ_２Ｃ_２Ｏ_４若しくはＨＯＯＣＣＯＯＨ）又は脱プロトン化された（ＨＣ_２Ｏ_４ ^－若しくはＣ_２Ｏ_４ ^２－）形態であってよいことを理解する。一部の実施形態では、シュウ酸塩（すなわち、Ｃ_２Ｏ_４ ^２－）は、塩の形態で存在してよい。例えばシュウ酸塩は、シュウ酸ナトリウム、シュウ酸カリウム、シュウ酸カルシウム、シュウ酸アンモニウム又はこれらの組合せを含んでよい。一部の実施形態により、マイクロクロップは、アオウキクサであってよい。

マイクロクロップ
一部の実施形態では、マイクロクロップは、単一の水生生物種（例えば、アオウキクサ種、サンショウモ（Ｓａｌｖｉｎｉａ）種）を含む場合がある。マイクロクロップは、アオウキクサ（例えば、ウキクサ（ｄｕｃｋｗｅｅｄ））、ウキクサ属（Ｓｐｉｒｏｄｅｌａ）、ランドルチア（Ｌａｎｄｏｌｔｉａ）、ウォルフィエラ（Ｗｏｌｆｉｅｌｌａ）、サンショウモ（例えば、汎熱帯性水生シダ（ｆｌｏａｔｉｎｇ ｆｅｒｎ））、ミジンコウキクサ属（Ｗｏｌｆｆｉａ）（例えば、ウォーターミール（ｗａｔｅｒｍｅａｌ））、アカウキクサ属（Ａｚｏｌｌａ）（例えば、モスキートフェルン（ｍｏｓｑｕｉｔｏ ｆｅｒｎ））、ピスティア（Ｐｉｓｔｉａ）（例えば、ボタンウキクサ（ｗａｔｅｒ ｌｅｔｔｕｃｅ））の種、又はその任意の組合せを含む場合がある。一部の実施形態により、マイクロクロップは、アオウキクサの種、例えば、コウキクサ（Ｌｅｍｎａ ｍｉｎｏｒ）、レンナ・オブスキュラ（Ｌｅｍｎａ ｏｂｓｃｕｒａ）、ヒナウキクサ（Ｌｅｍｎａ
ｍｉｎｕｔａ）、イボウキクサ（Ｌｅｍｎａ ｇｉｂｂａ）、アオウキクサ（Ｌｅｍｎａ ｖａｌｄｉｖｉａｎａ）又はナンゴクアオウキクサ（Ｌｅｍｎａ ａｅｑｕｉｎｏｃｔｉａｌｉｓ）であってよい。一部の実施形態により、マイクロクロップは、２つ以上の水生生物種の組合せを含んでよい。一部の実施形態では、マイクロクロップは、局所環境条件内で発達した同定された組成及び生育特徴に基づいて在来水生生物種から選択されてよい。在来種は、開放池又はバイオリアクターでは局所環境条件へのそれらの適応に基づいて、他の種との競争から逃れる場合がある。一部の実施形態では、マイクロクロップは、温度及び光利用能の季節変動への応答に適合され得る。

マイクロクロップは、他の水生生物種と比較して有利である特徴（例えば、早い増殖速度；栄養素要求の低減；収集及び／又は処理の容易さ；アミノ酸プロファイルの増強；食味の増強；蒸発散速度の低減；タンパク質組成の増加、シュウ酸含有量の低減）を有する場合がある。

例えば、アオウキクサは、急速に増殖するアオウキクサ科（Ｌｅｍｎａｃｅａｅ）ファミリー（例えば、ウキクサ）由来の浮遊性水生植物の属である。アオウキクサタンパク質は、大部分の他の植物タンパク質よりも動物タンパク質に非常に類似している必須アミノ酸プロファイルを有する。表１は、アオウキクサタンパク質の典型的な必須アミノ酸組成プロファイルを示している。加えてアオウキクサは、新鮮収集アオウキクサが乾燥重量で約４３％に至るタンパク質を含有して、高いタンパク質収量を提供する。さらに、大部分の他の植物と比較してアオウキクサ葉は、繊維含有量が低く（例えば、乾燥材料で約５％～約１５％）、単胃動物においてでさえ非常に消化されやすい。これは、およそ５０％の繊維含有量及び低い消化率を有する多くの作物種（例えば、ダイズマメ、イネ、トウモロ
コシ）の組成と対照的である。

マイクロクロップの培養
一部の実施形態では、マイクロクロップは、増殖を可能にする条件下でマイクロクロップを第１培地（例えば、水性栄養組成物、増殖培地）と接触させることによって無性生殖的に繁殖（例えば、培養）され得る。一部の実施形態により、マイクロクロップは、バイオリアクター系で培養され得る（例えば、１０２）。バイオリアクター系は、一部の実施形態により、水及び／又は栄養組成物を含む第１増殖培地（例えば、増殖培地）を含有してよい。一部の実施形態では、栄養組成物は、窒素、リン、カリウム及びカルシウムの少なくとも１つを含んでよい。一部の実施形態では、第１培地は、溶存酸素ガス及び／又は溶存二酸化炭素ガスを含んでよい。一部の実施形態により、第１培地は、カルシウム組成が増加するように構成されてよい（例えば、カルシウムを増加させた増殖培地）。例えば、カルシウムを増加させた第１培地は、≧約１２０百万分率（ｐｐｍ）、又は≧約１１５ｐｐｍ、又は≧約１１０ｐｐｍ、又は≧約１０５ｐｐｍ、又は≧約１００ｐｐｍ、又は≧約９５ｐｐｍ、又は≧約９０ｐｐｍ、又は≧約８５ｐｐｍ、又は≧約８０ｐｐｍ、又は≧約７５ｐｐｍ、又は≧約７０ｐｐｍ、又は≧約６５ｐｐｍ、又は≧約６０ｐｐｍ、又は≧約５５ｐｐｍ、又は≧約５０ｐｐｍ、又は≧約４５ｐｐｍ、又は≧約４０ｐｐｍ、又は≧約３５ｐｐｍ、又は≧約３０ｐｐｍ、又は≧約２５ｐｐｍ、又は≧約２０ｐｐｍのカルシウム濃度を有してよく、この文中で「約」は表示の濃度の±１０％を含む。一部の実施形態は、カルシウムを増加させた第１培地は、約２０ｐｐｍから約１２０ｐｐｍ、又は約２５ｐｐｍから約１２０ｐｐｍ、又は約３０ｐｐｍから約１２０ｐｐｍ、又は約４０ｐｐｍから約１２０ｐｐｍ、又は約５０ｐｐｍから約１２０ｐｐｍ、又は約６０ｐｐｍから約１２０ｐｐｍ、又は約７０ｐｐｍから約１２０ｐｐｍ、又は約８０ｐｐｍから約１２０ｐｐｍ、又は約２０ｐｐｍから約１００ｐｐｍ、又は約３０ｐｐｍから約１００ｐｐｍ、又は約４０ｐｐｍから約１００ｐｐｍ、又は約５０ｐｐｍから約１００ｐｐｍ、又は約６０ｐｐｍから約１００ｐｐｍ、又は約７０ｐｐｍから約１００ｐｐｍ、又は約８０ｐｐｍから約１００ｐｐｍのカルシウム濃度を有してよい。一部の実施形態により、カルシウムを増加させた第１培地は、少なくとも約２０ｐｐｍ（例えば、±１０％）のカルシウム濃度を有してよい。一部の実施形態では、カルシウムを増加させた第１培地は、少なくとも約１
００ｐｐｍカルシウムを含む。バイオリアクター系は、追加的栄養素（例えば、窒素、リン、カリウム、カルシウム）又は気体（例えば、酸素、二酸化炭素、窒素）を特定の時間指標で又はセンサー読み取り値への応答で第１培地に挿入するように構成されてよい。一部の実施形態では、カルシウムは、カルシウム、炭酸カルシウム、シュウ酸カルシウム、酸化カルシウム、クエン酸カルシウム、炭化カルシウム、リン酸カルシウム、硫酸カルシウム、塩化カルシウム又はこれらの組合せを含んでよい。

一部の実施形態では、第１培地は、増殖培地内の光合成有効放射を減弱するように構成されている１つ又は複数の抗光合成色素を含んでよい。１つ又は複数の抗光合成色素は、一部の実施形態により、少なくとも１つの他の水生生物（例えば、水中水生生物種、植物プランクトン、フィトアルガエ、着生藻類）の増殖を抑制するために十分な容量又は濃度で加えられてよい。抗光合成色素は、（ｎ－エチル－ｎ－［４－［［４－［エチル［（３－スルホフェニル）メチル］アミノ］－フェニル］（２－スルホフェニル－メチレン）］２，５－シクロヘキサジエン－１－イリデン］－３－スルホベンゼンメタンアミニウムヒドロキシド内塩二ナトリウム塩（Ｃｏｌｏｕｒ Ｉｎｄｅｘ Ａｃｉｄ Ｂｌｕｅ ９（Ｒｅｆ．Ｎｏ．４２０９０））、（４Ｅ）－５－オキソ－１－（４－スルホナトフェニル）－４－［（４－スルホナトフェニル）ヒドラゾノ］－３－ピラゾールカルボキシラート三ナトリウム塩（Ｃｏｌｏｕｒ Ｉｎｄｅｘ Ａｃｉｄ Ｙｅｌｌｏｗ ２３（Ｒｅｆ．Ｎｏ．１９１４０））、ジアゾニウム；２－［［４－［エチル－［（３－スルホナトフェニル）メチル］アミノ］フェニル］－［４－［エチル－［（３－スルホナトフェニル）メチル］アザニウミリデン］シクロヘキサ－２，５－ジエン－１－イリデン］メチル］ベンゼンスルホナ－ト（Ｃｏｌｏｕｒ Ｉｎｄｅｘ Ａｃｉｄ Ｂｌｕｅ ３４（Ｒｅｆ．Ｎｏ．４２６４５））；ベンジル－［４－［［４－［ベンジル（エチル）アミノ］フェニル］－（５－ヒドロキシ－２，４－ジスルホフェニル）メチリデン］シクロヘキサ－２，５－ジエン－１－イリデン］－エチルアザニウム（Ｃｏｌｏｕｒ Ｉｎｄｅｘ Ａｃｉｄ Ｂｌｕｅ ５（Ｒｅｆ．Ｎｏ．４２０５２））；２－（１，３－ジオキソインデン－２－イル）キノリン－６，８－ジスルホナート二ナトリウム塩（Ｃｏｌｏｕｒ Ｉｎｄｅｘ Ａｃｉｄ Ｙｅｌｌｏｗ ３（Ｒｅｆ．Ｎｏ．１５９８５））、及び（ｎ－エチル－ｎ－［４－［［４－［エチル［（３－スルホフェニル）メチル］アミノ］－フェニル］（２－スルホフェニル－メチレン）］２，５－シクロヘキサジエン－１－イリデン］－３－スルホベンゼンメタンアミニウムヒドロキシド内塩二ナトリウム塩と（４Ｅ）－５－オキソ－１－（４－スルホナトフェニル）－４－［（４－スルホナトフェニル）ヒドラゾノ］－３－ピラゾールカルボキシラート三ナトリウム塩との混合物（Ａｑｕａｓｈａｄｅ（登録商標））の少なくとも１つを含んでよい。他の好適な抗光合成色素は、参照により本明細書に組み込まれるＷｉｌｓｏｎへの米国特許第４，０４２，３６７号の表Ｉ及びＩＩに見出すことができる。

一部の実施形態により、第１培地（例えば、水性栄養組成物）は、バイオリアクター（例えば、池）に提供及び／又は加えられてよく、所望の設定点レベル（例えば、具体的な容量）で維持され得る。一部の実施形態では、バイオリアクター系は、雨水を集めるように及び／又は地面、表面若しくは再利用水（例えば、ストームウォーター、再利用水）又は任意の他の好適な水源から水を取り込むように構成されてよい。一部の実施形態により、バイオリアクター系は、余剰の増殖培地のための追加的保存容器（例えば、容器又は池）をさらに含んでよい。

一部の実施形態では、１つ又は複数の小さなバイオリアクター（例えば、池）は、大きなバイオリアクターへの「フィーダー」バイオリアクターとして適切に機能するように設計され、サイズを合わせられてよい。一部の実施形態では、小さなバイオリアクターは、最初に接種され、より早い増殖を支持する様式で大きなバイオリアクターに最適に播種され得る点の高密度まで増殖されてよい。

一部の実施形態ではバイオリアクター系は、モニタリング系を含んでよい。一部の実施形態では、モニタリング系は、バイオリアクター条件（単数又は複数）（例えば、栄養素濃度、ｐＨ、溶存酸素レベル、増殖培地レベル、マイクロクロップ分布、流速、温度）に関する１つ又は複数の使用者への警告を表示及び／若しくは提供するように、並びに／又は作動条件（例えば、増殖培地流速並びに／又は栄養添加；「フィーダー」マイクロクロップ添加、酸素若しくは二酸化炭素添加の時期及び／若しくは量）を調節するように構成されてよい。調節は、連続的、半連続的、定期的、断続的、必要に応じて、設定の若しくは可変の時期に又は任意の他の間隔で行われてよい。一部の実施形態では、調節は、水生生物種の増殖速度及び／又は収量を最適化するように選択されてよい。例えば、マイクロクロップ種は、例えば、それによって栄養素消費率を制御できる光への曝露に基づいて材料（例えば、新鮮又は再利用水、新鮮又は再利用増殖培地）の導入を調節するために構成されたモニタリング系を有する大規模開放型バイオリアクターで増殖されてよい。

一部の実施形態では、バイオリアクター系は、マイクロクロップが培養され得る単一の容器を含んでよい。一部の実施形態では、バイオリアクター系は、連結され得る、部分的に連結され得る又は連結され得ない複数の培養容器を含んでよい。一部の実施形態では、バイオリアクター（例えば、池）は、バイオリアクターの内側の底から除去した泥を成型してできている土手を有する土のくぼ地であってよい。一部の実施形態により、バイオリアクターは、人工容器（例えば、金属、プラスチック、レジン）であってよい。バイオリアクター系は、開放型バイオリアクター、閉鎖型バイオリアクター、半開放型バイオリアクター、又はその任意の組合せを含んでよい。一部の実施形態では、バイオリアクター系は、容器（単数又は複数）をチャネル又はセルに分割するように構成されてよい。一部の実施形態では、バイオリアクター系は、増殖培地の流れを可能にするように構成されてよい。一部の実施形態では、バイオリアクター系は、推進系（例えば、パドルホイール、通気、浸水又は表面水噴霧、浸水ミキサー）及び／又は再循環系を含んでよい。一部の実施形態では、バイオリアクター系は、増殖培地の流速を調節する（例えば、栄養素濃度又はマイクロクロップ増殖パターンを再分布させる）ように構成されてよい。

一部の実施形態ではバイオリアクター系は、バイオリアクター容器内に含有される増殖培地及び／又は増殖培地の上表面で増殖するマイクロクロップがバイオリアクター容器の外から来る風に曝露され得るように、バイオリアクター容器（例えば、蛇行水路）は開いていて（例えば、地面に対して水平面で）よい。一部の実施形態により、バイオリアクター系は、含有される培養培地の上表面が少なくとも９０％、又は少なくとも８０％、又は少なくとも７０％、又は少なくとも６０％、又は少なくとも５０％、又は少なくとも４０％、又は少なくとも３０％、又は少なくとも２０％、又は少なくとも１０％が開放され、部分的に開放（例えば、地面に対して水平面）されていてよい。一部の実施形態により、上表面は、開放されていてよく、表面がいかなるカバー又は他の障壁も実質的に有さず（例えば、有さず）、表面が周囲の天候条件に直接曝露されており、表面と大気の間に実質的に膜、ガラス、カバー若しくは他の障壁が実質的にない（そのような障壁がポア又は開口部を有するか否かに関わらず）及び／又は周囲大気だけが表面上少なくとも約１メートルの距離について表面上すぐ及び直接の空間を占めるものである。

一部の実施形態では、バイオリアクター系は、マイクロクロップマットの厚さ及び分布をモニター及び調節できる。例えば、マイクロクロップが特定の厚さ又は分布に達した場合、バイオリアクター系は収集手順を開始できる。一部の実施形態では、マイクロクロップマットの最小厚は、バイオリアクター系内の増殖培地の望ましい蒸発散速度が維持され得るように維持されてよい。一部の実施形態では、マイクロクロップの最小厚は、増殖培地の表面を透過できる日光が少ない（すなわち藻類などの水中水生生物種の増殖可能性を低減する）ように維持されてよい。

マイクロクロップの収集
マイクロクロップは、その全体又は部分で任意の望ましい時期（単数又は複数）に収集されてよい。例えば、マイクロクロップは、１回又は複数回の具体的な時期に、定期的に又は不定期に及び／又は連続的に収集されてよい。収集時期（単数又は複数）及び／又は間隔の選択は、環境条件（例えば、降水量、相対湿度、温度範囲、平均、低若しくは高閾値及び／又は光強度、波長範囲、曝露の持続期間）及び／又はマイクロクロップが示す１つ又は複数の望ましい特徴（例えば、マット厚、マット分布、成熟化）に基づいてよい。マイクロクロップを収集することは、手作業又は自動化されていてよい。一部の実施形態では、自動化スキマー系は、バイオリアクター系からマイクロクロップを集めることができ、収集されたマイクロクロップを（例えば、ポンプ系を介して）増殖培地及びデブリからバイオマスを分離するための傾斜震動スクリーンに移行できる。マイクロクロップは、一部の実施形態では、固定又は可動性スクリーンフィルターを通じてバイオリアクター系からマイクロクロップを真空ですくい取ることによって収集され得る。一部の実施形態により、収集されたマイクロクロップ（例えば、アオウキクサ）及び増殖培地（例えば、水）を含むバイオマススラリーは、バイオマス（例えば、マイクロクロップ）が第１培地から分離され得る傾斜振動スクリーンに運ばれてよい。

収集の際に分離された第１培地は、一部の実施形態により、バイオリアクター系に又は追加的保存容器（例えば、容器又は池）に戻して再利用されてよい（例えば、１０６）。一部の実施形態では、バイオマスから分離された増殖培地（例えば、水）の少なくとも約４０％、又は少なくとも約５０％、又は少なくとも約６０％、又は少なくとも約７０％、又は少なくとも約８０％、又は少なくとも約９０％、又は少なくとも約９５％は、マイクロクロップを培養する、収集する及び／又は処理することにおけるさらなる使用のために再利用されてよい。

バイオマスの浸漬及び／又は緩衝
収集後、バイオマスは、浸漬（例えば、１０８）及び／又は緩衝されてよい（例えば、１１０）。収集されたバイオマスを浸漬すること及び／又は緩衝することは、タンパク質産生物のシュウ酸含有量の低減に寄与できる。一部の実施形態では、収集されたバイオマスを浸漬すること及び／又は緩衝することは、タンパク質産生物のシュウ酸及び／又はシュウ酸塩含有量の低減に寄与できる。

一部の実施形態では収集されたバイオマスは、第２培地に浸漬されてよい（例えば、１０８）。第２培地は、一部の実施形態により、水（例えば、地下水、地表水、再利用水）、蒸留水、逆浸透若しくはナノろ過水及び／又は栄養組成物を含んでよい。一部の実施形態では、第２培地は、任意の望ましい割合の再利用液を含んでよい。例えば、第２培地は、工程の別の段階（例えば、濾過２６０、２５４からのリジェクト流）からの少なくとも約１０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約２０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約３０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約４０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約５０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約６０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約７０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約８０％（ｖ／ｖ）、又は少なくとも約９０％（ｖ／ｖ）の再利用液を含んでよい。

一部の実施形態により、第２培地は、低窒素組成を有するように構成されてよい（例えば、低窒素第２培地）。例えば、低窒素第２培地は、≦約２０百万分率（ｐｐｍ）、≦約１８ｐｐｍ、≦約１６ｐｐｍ、又は≦約１４ｐｐｍ、又は≦約１２ｐｐｍ、又は≦約１０ｐｐｍ、又は≦約９ｐｐｍ、又は≦約８ｐｐｍ、又は≦約７ｐｐｍ、又は≦約６ｐｐｍ、又は≦約５ｐｐｍ、又は≦約４ｐｐｍ、又は≦約３ｐｐｍ、又は≦約２ｐｐｍ、又は≦約１ｐｐｍ、又は≦約０．５ｐｐｍ又は約０ｐｐｍの窒素濃度を有してよい。一部の実施形態では、低窒素第２培地は、約０ｐｐｍから約２０ｐｐｍ、又は約０．５ｐｐｍから約２
０ｐｐｍ、又は約０．５ｐｐｍから約１５ｐｐｍ、又は約０．５ｐｐｍから約１０ｐｐｍ、又は約１ｐｐｍから約９ｐｐｍ、又は約１ｐｐｍから約７ｐｐｍ、又は約１ｐｐｍから約６ｐｐｍ、又は約１ｐｐｍから約５ｐｐｍ、又は約３ｐｐｍから約６ｐｐｍ、又は約２ｐｐｍから約８ｐｐｍの窒素濃度を有してよい。一部の実施形態により、低窒素第２培地は、最大で約１０ｐｐｍ（例えば、±１ｐｐｍ）の窒素濃度を有してよい。一部の実施形態では低窒素第２培地は、最大で約５ｐｐｍ（例えば、±０．５ｐｐｍ）の窒素濃度を有してよい。

一部の実施形態により、第２培地は、低カルシウム組成を有するように構成されてよい（例えば、低カルシウム第２培地）。例えば、低カルシウム第２培地は、≦約２０ｐｐｍ、≦約１８ｐｐｍ、≦約１６ｐｐｍ又は≦約１４ｐｐｍ、又は≦約１２ｐｐｍ、又は≦約１０ｐｐｍ、又は≦約９ｐｐｍ、又は≦約８ｐｐｍ、又は≦約７ｐｐｍ、又は≦約６ｐｐｍ、又は≦約５ｐｐｍ、又は≦約４ｐｐｍ、又は≦約３ｐｐｍ、又は≦約２ｐｐｍ、又は≦約１ｐｐｍ、又は≦約０．５ｐｐｍ、又は約０ｐｐｍのカルシウム濃度を有してよい。一部の実施形態では、低カルシウム第２培地は、約０ｐｐｍから約２０ｐｐｍ、又は約０．５ｐｐｍから約２０ｐｐｍ、又は約０．５ｐｐｍから約１５ｐｐｍ、又は約０．５ｐｐｍから約１０ｐｐｍ、又は約１ｐｐｍから約９ｐｐｍ、又は約１ｐｐｍから約７ｐｐｍ、又は約１ｐｐｍから約６ｐｐｍ、又は約１ｐｐｍから約５ｐｐｍ、又は約３ｐｐｍから約６ｐｐｍ、又は約２ｐｐｍから約８ｐｐｍのカルシウム濃度を有してよい。一部の実施形態により、低カルシウム第２培地は、最大で約１０ｐｐｍ（例えば、±１ｐｐｍ）のカルシウム濃度を有してよい。一部の実施形態では、低カルシウム第２培地は、最大で約５ｐｐｍ（例えば、±０．５ｐｐｍ）のカルシウム濃度を有してよい。一部の実施形態では、低カルシウム第２培地中にバイオマスを浸漬することは、シュウ酸濃度とシュウ酸塩（例えば、シュウ酸カルシウム）濃度との間の平衡に影響を与える場合がある。

一部の実施形態では、第２培地は、高カルシウム組成を有するように構成されてよい（例えば、高カルシウム第２培地）。例えば、高カルシウム第２培地は、≦約８００ｐｐｍ、又は≦約７５０ｐｐｍ、又は≦約７００ｐｐｍ、又は≦約６５０ｐｐｍ、又は≦約６００ｐｐｍ、又は≦約５５０ｐｐｍ、又は≦約５００ｐｐｍ、又は≦約４５０ｐｐｍ、又は≦約４００ｐｐｍ、又は≦約３５０ｐｐｍ、又は≦約３００ｐｐｍ、又は≦約２５０ｐｐｍ、又は≦約２００ｐｐｍ、又は≦約１５０ｐｐｍ、又は≦約１００ｐｐｍ、又は≦約５０ｐｐｍのカルシウム濃度を有してよい。一部の実施形態では、高カルシウム第２培地は、約５０ｐｐｍから約２００ｐｐｍ、又は約５０ｐｐｍから約４００ｐｐｍ、又は約５０ｐｐｍから約６００ｐｐｍ、又は約１００ｐｐｍから約８００ｐｐｍ、又は約１００ｐｐｍから約７００ｐｐｍ、又は約１００ｐｐｍから約６００ｐｐｍ、又は約１００ｐｐｍから約５００ｐｐｍ、又は約３００ｐｐｍから約６００ｐｐｍ、又は約２００ｐｐｍから約８００ｐｐｍのカルシウム濃度を有してよい。一部の実施形態により、高カルシウム第２培地は、最大で約８００ｐｐｍ（例えば、±５０ｐｐｍ）のカルシウム濃度を有してよい。一部の実施形態では、高カルシウム第２培地は、最大で約６００ｐｐｍ（例えば、±５０ｐｐｍ）のカルシウム濃度を有してよい。一部の実施形態では、バイオマスを高カルシウム第２培地中に浸漬することは、シュウ酸濃度とシュウ酸塩（例えば、シュウ酸カルシウム）濃度との間の平衡に影響を与える場合がある。例えば、バイオマスを高カルシウム第２培地中に浸漬することは、シュウ酸をシュウ酸塩に変換する場合がある。

一部の実施形態では、第２培地は、低カルシウム組成及び低窒素組成を有するように構成されてよい（例えば、低窒素及びカルシウム増殖培地）。例えば、低窒素及びカルシウム増殖培地は、≦約２０ｐｐｍ、又は≦約１８ｐｐｍ、又は≦約１６ｐｐｍ、又は≦約１４ｐｐｍ、又は≦約１２ｐｐｍ、又は≦約１０ｐｐｍ、又は≦約９ｐｐｍ、又は≦約８ｐｐｍ、又は≦約７ｐｐｍ、又は≦約６ｐｐｍ、又は≦約５ｐｐｍ、又は≦約４ｐｐｍ、又は≦約３ｐｐｍ、又は≦約２ｐｐｍ、又は≦約１ｐｐｍ、又は≦約０．５ｐｐｍ、又は約
０ｐｐｍのカルシウム濃度を有してよい。低窒素及びカルシウム増殖培地は、≦約２０ｐｐｍ、又は≦約１８ｐｐｍ、又は≦約１６ｐｐｍ、又は≦約１４ｐｐｍ、又は≦約１２ｐｐｍ、又は≦約１０ｐｐｍ、又は≦約９ｐｐｍ、又は≦約８ｐｐｍ、又は≦約７ｐｐｍ、又は≦約６ｐｐｍ、又は≦約５ｐｐｍ、又は≦約４ｐｐｍ、又は≦約３ｐｐｍ、又は≦約２ｐｐｍ、又は≦約１ｐｐｍ、又は≦約０．５ｐｐｍ、又は約０ｐｐｍの窒素濃度を有してよい。一部の実施形態では、低窒素及びカルシウム第２培地は、約０ｐｐｍから約２０ｐｐｍ、又は約０．５ｐｐｍから約２０ｐｐｍ、又は０．５ｐｐｍから約１５ｐｐｍ、又は０．５ｐｐｍから約１０ｐｐｍ、又は約１ｐｐｍから約９ｐｐｍ、又は約１ｐｐｍから約７ｐｐｍ、又は約１ｐｐｍから約６ｐｐｍ、又は約１ｐｐｍから約５ｐｐｍ、又は約３ｐｐｍから約６ｐｐｍ、又は約２ｐｐｍから約８ｐｐｍのカルシウム濃度を有してよい。一部の実施形態では、低窒素及びカルシウム第２培地は、約０ｐｐｍから約２０ｐｐｍ、又は約０．５ｐｐｍから約２０ｐｐｍ、又は０．５ｐｐｍから約１５ｐｐｍ、又は０．５ｐｐｍから約１０ｐｐｍ、又は約１ｐｐｍから約９ｐｐｍ、又は約１ｐｐｍから約７ｐｐｍ、又は約１ｐｐｍから約６ｐｐｍ、又は約１ｐｐｍから約５ｐｐｍ、又は約３ｐｐｍから約６ｐｐｍ、又は約２ｐｐｍから約８ｐｐｍの窒素濃度を有してよい。一部の実施形態により、低窒素及びカルシウム第２培地は、最大で約１０ｐｐｍ（例えば、±１ｐｐｍ）のカルシウム濃度を有してよい。一部の実施形態では、低窒素及びカルシウム第２培地は、最大で約５ｐｐｍ（例えば、±０．５ｐｐｍ）のカルシウム濃度を有してよい。一部の実施形態により、低窒素及びカルシウム第２培地は、最大で約１０ｐｐｍ（例えば、±１ｐｐｍ）の窒素濃度を有してよい。一部の実施形態では、低窒素及びカルシウム第２培地は、最大で約５ｐｐｍ（例えば、±０．５ｐｐｍ）の窒素濃度を有してよい。一部の実施形態では、低窒素及び低カルシウム第２培地中にバイオマスを浸漬することは、シュウ酸濃度とシュウ酸塩（例えば、シュウ酸カルシウム）濃度との間の平衡に影響を与える場合がある。

バイオマスを浸漬することは、一部の実施形態により、バイオマススラリーを形成するために第２培地中にバイオマスを浸すことを含んでよい。一部の実施形態ではバイオマスは、約１時間、又は約２時間、又は約４時間、又は約６時間、又は約８時間、又は約１０時間、又は約１２時間、又は約１６時間、又は約２０時間、又は約２４時間、又は約３６時間、又は約４８時間、又は約６０時間、又は約７２時間、又は約８４時間、又は約９６時間、又は約１０８時間、又は約１２０時間、又は約１３２時間、又は約１４４時間浸漬されてよい。バイオマスを浸漬することは、第２培地をかき混ぜる、流す、移動させる、スプレーする又は撹拌することを含んでよい。一部の実施形態により、浸漬されたマイクロクロップ（例えば、アオウキクサ）及び第２培地（例えば、低窒素第２培地）を含むバイオマススラリーは、バイオマス（例えば、マイクロクロップ）が第２培地から分離され得る傾斜振動スクリーンに運ばれてよい。

一部の実施形態ではバイオマスは、一部の実施形態により、第３培地中に緩衝されてよい（例えば、１１０）。第３培地は、一部の実施形態により、水（例えば、地下水、地表水、再利用水）、蒸留水、逆浸透水及び／又はナノろ過水を含んでよい。一部の実施形態では、第３培地は、任意の望ましい割合の再利用液を含んでよい。例えば、第３培地は、工程の別の段階（例えば、濾過２６０、２５４からのリジェクト流）からの少なくとも約１０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約２０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約３０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約４０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約５０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約６０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約７０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約８０％（ｖ／ｖ）、又は少なくとも約９０％（ｖ／ｖ）の再利用液を含んでよい。

バイオマスを緩衝すること（例えば、図１Ｃの１１０）は、一部の実施形態により、バイオマススラリーを形成するように第３培地中にバイオマスを浸すことを含んでよい。一部の実施形態では、バイオマスは、約１時間、又は約２時間、又は約４時間、又は約６時
間、約８時間、又は約１０時間、又は約１２時間、又は約１６時間、又は約２０時間、又は約２４時間、又は約３６時間、又は約４８時間緩衝されてよい。一部の実施形態により、緩衝マイクロクロップ（例えば、アオウキクサ）及び第３培地（例えば、蒸留水、地下水、地表水、雨水）を含むバイオマススラリーは、バイオマス（例えば、マイクロクロップ）が第３培地から分離され得る傾斜振動スクリーンに運ばれてよい。他の実施形態では、バイオマス（例えば、マイクロクロップ）は、排出によって第３培地から分離されてよい。

一部の実施形態により、バイオマスを緩衝することは、バイオマスのｐＨ値を変更すること（例えば、上げる、下げる）又は維持することを含んでよい。一部の実施形態では、バイオマスを緩衝することは、バイオマスのｐＨ値を約８．０未満、又は約７．５未満、又は約７．０未満、又は約６．５未満、又は約６．０未満、又は約５．５未満、又は約５．０未満、又は約４．５未満、又は約４．０未満、又は約３．５未満、又は約３．０に変更すること（例えば、上げる、下げる）又は維持することを含んでよい。一部の実施形態により、バイオマスを緩衝することは、バイオマスのｐＨ値を：約３．０から約７．５、又は約３．５から約７．５、又は約４．０から約７．５、又は約４．５から約７．５、又は約５．０から約７．５、又は約５．５から約７．５、又は約６．０から約７．５、又は約６．５から約７．５の範囲に変更すること（例えば、上げる、下げる）又は維持することを含んでよい。当業者に理解されるとおり、バイオマスのｐＨ値を調節することによってバイオマスを緩衝することは、タンパク質安定性を促進でき、一部の実施形態では、非緩衝バイオマスと比較してより多いタンパク質収量を増進できる。

ある手順において生成された浸漬バイオマス及び緩衝バイオマスの１つ又は複数は、１つ又は複数の下流手順又は器具に供給される前にそれらそれぞれの容器（例えば、浸漬容器、緩衝容器）に保存されてよい。これは、１つ又は複数の下流手順（単数若しくは複数）及び／又は器具（単数若しくは複数）への例えば、連続様式、バッチ様式又は複数供給流を含むさまざまな操作スケジュール又は様式に適合できる。例えば一部の実施形態では、バイオマスは、日中に収集され、処理（例えば、浸漬及び／又は緩衝）されてよく、続いて処理されたバイオマスは、下流処理機械類の能力の限界に適合させるために小さなバッチ（例えば、第１ポーション、第２ポーション）でさらに処理（例えば、溶解、分離）されてよい。

バイオマスの洗浄
一部の実施形態では、マイクロクロップ又はバイオマス（例えば、第１ポーション、第２ポーション）を処理することは、余剰の増殖培地、デブリ、混入物、微生物及び／又は毒素を除去するための洗浄手順を含んでよい。洗浄手順は：（１）収集後（例えば、１０４）；又は（２）収集及び浸漬後（例えば、１０８）；又は（３）収集及び緩衝後（例えば、１１０）；又は（４）収集、浸漬及び緩衝後にバイオマスに実施されてよい。バイオマスを洗浄することは、タンパク質純度及び／又は収量を増加させ得る。洗浄手順は、バイオマスを殺菌及び／又は消毒でき、バイオマスの表面上又は周辺にある細菌、真菌、ウイルス、昆虫及びその任意の組合せを低減又は除去する。一部の実施形態では、洗浄手順は、バイオマスの少なくとも１つの表面を洗浄溶液（例えば、水、増殖培地、抗菌性溶液）に曝露すること（例えば、浸すこと、スプレーすること）によって実施され得る。一部の実施形態では、洗浄溶液は、スラリーを形成するようにバイオマス（例えば、第１ポーション、第２ポーション）と混ぜ合わされてよい。

一部の実施形態では、洗浄溶液は、任意の望ましい割合の再利用液を含んでよい。例えば、洗浄溶液は、工程の別の段階から再利用された液体を少なくとも約１０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約２０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約３０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約４０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約５０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約６０％（ｖ／ｖ）、少なくと
も約７０％（ｖ／ｖ）、少なくとも約８０％（ｖ／ｖ）又は少なくとも約９０％（ｖ／ｖ）含んでよい（例えば、再利用洗浄溶液１０６、濾過からのリジェクト流２６０、２５４）。一部の実施形態では、洗浄溶液は水溶液又は溶媒であってよい。洗浄溶液は抗菌性、駆除化合物、脂肪酸、アルコール、塩素、酸化化合物、及びその任意の組合せ（例えば、オゾン処理水）の１つ又は複数を含有してよい。

一部の実施形態により、洗浄溶液は、温度を上昇させて及び／又は高圧で適用されてよい。洗浄溶液は、少なくとも約１秒間、又は少なくとも約５秒間、又は少なくとも約１０秒間、又は少なくとも約２０秒間、又は少なくとも約３０秒間、又は少なくとも約１分間、又は少なくとも約５分間バイオマスと接触されたままであってよい。一部の実施形態では、第２洗浄溶液（例えば、水、オゾン処理水、再利用洗浄溶液（例えば、１０６）はバイオマスに適用されてよい。一部の実施形態では、第３洗浄溶液（例えば、水、オゾン処理水、再利用洗浄溶液）はバイオマスに適用されてよい。第１洗浄溶液、第２洗浄溶液及び第３洗浄溶液の組成は、互いに同じ又は異なっていてよい。一部の実施形態では、第１洗浄溶液はろ濾過工程からのリジェクト流（例えば、２５４、２６０）であってよい又は含んでよく、第２洗浄溶液は水であってよく、第３洗浄溶液はオゾン処理水であってよい。一部の実施形態では洗浄溶液（例えば、第１、第２及び／又は第３洗浄溶液）の一部又はすべては、バイオマスから分離されてよい（例えば、傾斜スクリーン又は振動スクリーンを使用する）。

一部の実施形態では、洗浄溶液、第２洗浄溶液及び／又は第３洗浄溶液の一部又はすべては、集められ、再使用／再利用されてよい（例えば、１０６）。バイオマスから分離された洗浄溶液、第２洗浄溶液及び／又は第３洗浄溶液（例えば、水）の少なくとも約４０％、又は少なくとも約５０％、又は少なくとも約６０％、又は少なくとも約７０％、又は少なくとも約８０％、又は少なくとも約９０％、又は少なくとも約９５％は、一部の実施形態により、将来の使用のために再利用され得る（例えば、再利用洗浄溶液１０６；バイオリアクター系１０２において増殖培地として使用される）。

洗浄溶液（例えば、第１、第２及び／又は第３洗浄溶液）は、使用時に室温より低い温度（例えば、約１２℃）を有してよい。洗浄溶液、及びそれによりマイクロクロップを冷却することは、タンパク質回収効率を改善でき、及び／又はタンパク質分解活性を減少させることができる。一部の実施形態では、洗浄溶液（例えば、第１、第２及び／又は第３洗浄溶液）は、使用時に約３０℃未満、又は約２０℃未満、又は約１５℃未満、又は約１０℃未満、又は約５℃未満、又は約２℃未満、又は約１℃、又は約０℃未満の温度を有してよい。一部の実施形態では、洗浄溶液（例えば、第１、第２及び／又は第３洗浄溶液）は、使用時に約０℃から約１０℃の間の、又は約５℃から約１５℃の間、又は約１０℃から約２０℃の間、又は１５℃及び約２５℃の間、又は約２０℃から約３０℃の間の温度を有してよい。

一部の実施形態では、洗浄溶液（例えば、第１、第２及び／又は第３洗浄溶液）は、使用時に室温を超える温度（例えば、約５０℃）を有してよい。洗浄溶液及びそれによりマイクロクロップを加熱することは、タンパク質回収効率を改善でき、タンパク質分解活性を減少させることが（例えば、タンパク質分解酵素を変性）でき、及び／又は微生物混入を減少させることができる（例えば、低温殺菌）。一部の実施形態では、洗浄溶液（例えば、第１、第２及び／又は第３洗浄溶液）は、使用時に約２０℃を超える、又は約２５℃を超える、又は約３０℃を超える、又は約３５℃を超える、又は約４０℃を超える、又は約４５℃を超える、又は約５０℃を超える、又は約５５℃を超える、又は約６０℃を超える、又は約６５℃を超える、又は約７０℃を超える、又は約７５℃を超える、又は約８０℃を超える、又は約８５℃を超える、又は約９０℃を超える、又は約９５℃を超える、又は約１００℃を超える温度を有してよい。一部の実施形態では、洗浄溶液（例えば、第１
、第２及び／又は第３洗浄溶液）は、使用時に温度約４０℃から約５０℃の間、又は約４５℃から約５５℃の間、又は約５０℃から約６０℃の間の温度を有してよい。一部の実施形態により、洗浄溶液（例えば、第１、第２及び／又は第３洗浄溶液）は、使用時に約７５℃から約８０℃の間、又は約８０℃から約８５℃の間、又は約８５℃から約９０℃の間、又は約９０℃から約９５℃の間又は約９５℃から約１００℃の間の温度を有してよい。一部の実施形態では、洗浄溶液（例えば、第１、第２及び／又は第３洗浄溶液）は、使用時に約５０℃から約８０℃の間、又は約５５℃から約８５℃の間、又は約６０℃から約９０℃の間、又は約６５℃から約９５℃の間、又は約７０℃及び約１００℃の間の温度を有してよい。

バイオマスの溶解（Lysing）
一部の実施形態により、バイオマスは、溶解バイオマス（例えば、第１ポーション、第２ポーション）を形成するように溶解されてよい。溶解は：（１）収集後（例えば、１０４）；又は（２）収集及び浸漬後（例えば、１０８）；又は（３）収集及び緩衝後（例えば、１１０）；又は（４）収集、浸漬及び緩衝後；又は（５）収集及び洗浄後；又は（６）収集、浸漬及び洗浄後；又は（７）収集、緩衝及び洗浄後；又は（８）収集、浸漬、緩衝及び洗浄後にバイオマスに実施されてよい。

本明細書において使用される溶解は、個々の細胞又は多細胞構造のレベルで生物の組織を乱す機械的、化学的、及び／又は超音波（例えば、ソニケーション）手順を含み得る。一部の実施形態では、溶解は、マイクロクロップ中に存在する炭水化物、タンパク質及び微量栄養素を、精製タンパク質、炭水化物含有材料及び／又は微量栄養素含有液に処理する下流工程のためにさらに利用し易くすることを含み得る。一部の実施形態により、溶解は、機械的、化学的及び／又は超音波（例えば、ソニケーション）方法を組み合わせて使用して達成され得る。

一部の実施形態では、溶解は、室温より低い温度で実施されてよい。より低い温度でマイクロクロップを溶解することは、例えば、望ましくない酵素活性（例えば、タンパク質分解活性）を制限又は減少させることによって収量を改善できる。溶解は、一部の実施形態では、約３０℃未満、又は約２０℃未満、又は約１５℃未満、又は約１０℃未満、又は約１５℃未満、又は約１０℃未満、又は約５℃未満、又は約２℃未満、又は約１℃未満、又は約０℃未満の温度で実施されてよい。溶解液（例えば、水、再利用水、逆浸透水）は、洗浄又は未洗浄バイオマスに、一部の実施形態による溶解前又は溶解の際に加えられてよい。例えば、溶解液の少なくとも約１０％、少なくとも約２０％、少なくとも約３０％、少なくとも約４０％、少なくとも約５０％、少なくとも約６０％、少なくとも約７０％、少なくとも約８０％又は少なくとも約９０％は、濾過産生物の逆浸透／ナノ濾過（例えば、２６０）の結果として生成された水であってよい。一部の実施形態では、溶解液は、約３０℃未満、又は約２０℃未満、又は約１５℃未満、又は約１０℃未満、又は約５℃未満、又は約２℃未満、又は約１℃未満、又は約０℃未満の温度であってよい。一部の実施形態では、溶解液は、緩衝液、プロテアーゼ阻害剤、抗菌剤、キレーター（例えば、ＥＤＴＡ）、還元剤、又はその任意の組合せを含んでよい。

一部の実施形態により、溶解は、例えば、セルロースの破壊を増強する及び／又は望ましくない酵素（例えば、タンパク質分解酵素）を変性させるために室温を超える温度（例えば、約４０℃）で実施されてよい。一部の実施形態では、溶解することは、約３０℃を超える、又は約３５℃を超える、又は約３７℃を超える、又は約４０℃を超える温度で実施されてよい。

溶解は、例えば、刻むこと、断片化すること、粉砕すること、圧力をかけること、引き裂くこと、超音波処理（例えば、ソニケーション）、浸透圧による溶解、生物学的構造を
分解する化学的処理、又はその任意の組合せを含んでよい。一部の実施形態では、溶解は、機械的方法（挽くとも称される）、例えば、溶解バイオマスを生成するためにバイオマスを挽くこと、グラインデイング又は断片化することによって達成される。溶解工程は、例えば、せん断ミル、ボールミル、コロイドミル、ナイフミル、ハンマーミル、グラインディングミル、ピューレマシン、フィルタープレス、メカニカルプレス、又はその任意の組合せを使用して達成され得る。

一部の実施形態では、溶解（例えば、挽く）工程への出入りは、任意の望ましい容量、質量又は他の速度若しくは間隔（例えば、一定速度、可変速度、連続的、半連続的、定期的、断続的）で計量されてよい。供給速度及び／又は様式は、例えば：標的産生速度；工程において用いられる器具（単数又は複数）；供給原料の特性、又はその任意の組合せを含む検討事項に基づいて決定されてよい。一部の実施形態では、供給速度は、少なくとも約１０ｋｇ／時間、又は少なくとも約５０ｋｇ／時間、又は少なくとも約１００ｋｇ／時間、又は少なくとも約２００ｋｇ／時間、又は少なくとも約３００ｋｇ／時間、又は少なくとも約４００ｋｇ／時間、又は少なくとも約５００ｋｇ／時間、又は少なくとも約６００ｋｇ／時間、又は少なくとも約７００ｋｇ／時間、又は少なくとも約８００ｋｇ／時間、又は少なくとも約９００ｋｇ／時間、又は少なくとも約１０００ｋｇ／時間、又は少なくとも約１２００ｋｇ／時間、又は少なくとも約１４００ｋｇ／時間、又は少なくとも約１６００ｋｇ／時間、又は少なくとも約１８００ｋｇ／時間、又は少なくとも約２０００ｋｇ／時間、又は少なくとも約２２００ｋｇ／時間である。一部の実施形態では、供給速度は、約１０ｋｇ／時間から約２００ｋｇ／時間、又は約２００ｋｇ／時間から約４００ｋｇ／時間、又は約４００ｋｇ／時間から約６００ｋｇ／時間、又は約６００ｋｇ／時間から約８００ｋｇ／時間、又は約８００ｋｇ／時間から約１０００ｋｇ／時間、又は約１０００ｋｇ／時間から約１２００ｋｇ／時間、又は約１２００ｋｇ／時間から約１４００ｋｇ／時間、又は約１４００ｋｇ／時間から約１６００ｋｇ／時間、又は約１６００ｋｇ／時間から約１８００ｋｇ／時間、又は約１８００ｋｇ／時間から約２０００ｋｇ／時間、又は約２０００ｋｇ／時間から約２２００ｋｇ／時間である。

一部の実施形態では、化学的方法は、バイオマス又は洗浄バイオマスを溶解するために（例えば、単独又は機械的方法との組合せで）用いられてよい。一部の実施形態では、酵素（例えば、セルロース）は、細胞構造を破壊するため又は破壊を補助するために使用されてよい。一部の実施形態では、溶解は、例えば、バイオマス（例えば、収集されたマイクロクロップ）のｐＨ値を変更することによって実施されてよい。一部の実施形態では、ｐＨ値は、約７．０より高く、又は約７．５より高く、又は約８．０より高く、又は約８．５より高く、又は約９．０より高く、又は約９．５より高く、又は約１０．０より高くに上げられてよい。一部の実施形態により、バイオマスのｐＨ値は、約７．０から約７．５に、又は約７．５から約８．０に、又は約８．０から約８．５に、又は約８．５から約９．０に、又は約９．０から約９．５に、又は約９．５から約１０．０に維持されてよい。一部の実施形態では、バイオマスのｐＨ値は、約７．０から約１４．０に、又は約７．０から約１３．０に、又は約７．０から約１２．０に、又は約７．０から約１１．０に、又は約７．０から約１０．０に、又は約７．０から約１０．５に、又は約７．０から約１０．０に、又は約７．０から約９．５に、又は約７．０から約９．０に、又は約７．０から約８．５に、又は約７．０から約８．０に、又は約７．０から約７．５に維持されてよい。一部の実施形態では、ｐＨ値は、約７．０未満、又は約６．５未満、又は約６．０未満、又は約５．５未満、又は約５．０未満、又は約４．５未満、又は約４．０未満、又は約３．５未満、又は約３．０未満に低下されてよい。一部の実施形態では、バイオマスｐＨ値は、約３．０から約３．５、又は約３．５から約４．０、又は約４．０から約４．５、又は約４．５から約５．０、又は約５．０から約５．５、又は約５．５から約６．０、又は約６．０から約６．５、又は約６．５から約７．０に維持されてよい。一部の実施形態により、バイオマスのｐＨ値は、約３．０から約７．０、又は約３．５から約７．０、
又は約４．０から約７．０、又は約４．５から約７．０、又は約５．０から約７．０、又は約５０約５．５から約７．０、又は約６．０から約７．０、又は約６．５から約７．０に維持されてよい。

一部の実施形態では、溶解バイオマス（例えば、機械的溶解バイオマス）は、中和を伴って又は伴わずに、タンパク質及び／又は他の産生物（単数又は複数）を単離するための次のステップ又は手順に進んでよい。例えば、溶解バイオマスは、直接次の手順に供給されてよい、又は最初にｐＨ調節（例えば、中和、酸性化、塩基性化）されてよい。一部の実施形態では、沈殿剤（例えば、塩）は、溶けている化合物を沈殿させるために溶解マイクロクロップに加えられてよい。

一部の実施形態では、溶解バイオマス（例えば、第１ポーション、第２ポーション）は、室温より低い温度（例えば、約１２℃）であってよい。溶解バイオマスを冷却することは、タンパク質回収効率を改善でき、及び／又はタンパク質分解活性を減少させることができる。一部の実施形態では、溶解バイオマスは、使用時に約３０℃未満、又は約２０℃未満、又は約１５℃未満、又は約１０℃未満、又は約１５℃未満、又は約１０℃未満、又は約５℃未満、又は約２℃未満、又は約１℃未満、又は約０℃未満の温度を有してよい。一部の実施形態により、溶解バイオマスは、使用時に約０℃から約１０℃の間、又は約５℃から約１５℃の間、又は約１０℃から約２０℃の間、又は約１５℃から約２５℃の間、又は約２０℃から約３０℃の間の温度を有してよい。

一部の実施形態では、溶解バイオマス（例えば、第１ポーション、第２ポーション）は、使用時に室温を超える温度（例えば、約５０℃）を有してよい。溶解バイオマスを加熱することは、タンパク質回収効率を改善でき、タンパク質分解活性を減少（例えば、タンパク質分解酵素を変性）させることができ、及び／又は微生物混入（例えば、低温殺菌）を減少させることができる。一部の実施形態では、溶解バイオマスは、使用時に約２０℃を超える、又は約２５℃を超える、又は約３０℃を超える、又は約３５℃を超える、又は約４０℃を超える、又は約４５℃を超える、又は約５０℃を超える、又は約５５℃を超える、又は約６０℃を超える、又は約６５℃を超える、又は約７０℃を超える、又は約７５℃を超える、又は約８０℃を超える、又は約８５℃を超える、又は約９０℃を超える温度を有してよい。一部の実施形態では、溶解バイオマスは、使用時に約４０℃から約５０℃の間、又は約４５℃から約５５℃の間、又は約５０℃から約６０℃の間の温度を有してよい。一部の実施形態により、溶解バイオマスは、使用時に約７５℃から約８０℃の間、又は約８０℃から約８５℃の間の温度を有してよい。

溶解バイオマスからのシュウ酸塩の沈殿
一部の実施形態により、少なくとも一部の可溶性シュウ酸は、シュウ酸をシュウ酸塩（例えば、シュウ酸カルシウム）に転換し、溶解バイオマス（例えば、１２２、２２２）からシュウ酸塩を沈殿させること（例えば、１２３）によって溶解バイオマスから除去されてよい。一部の実施形態では、溶解バイオマスからシュウ酸塩を沈殿させることは、溶解バイオマスの少なくとも一部を少なくとも１つのカルシウム塩（例えば、塩化カルシウム、酢酸カルシウム）と混合することを含んでよい。溶解バイオマスからシュウ酸塩を沈殿させることは、一部の実施形態では、溶解バイオマスの少なくとも一部を炭酸カルシウム溶液又は水酸化カルシウム溶液と混合することを含んでよい。沈殿されたシュウ酸塩は、一部の実施形態により、遠心分離及び／又は濾過によってバイオマスから除去されてよい。

バイオマスの分離
バイオマス（例えば、アオウキクサ）は、ジュース画分（例えば、２２６）及び固形画分（例えば、２２８）を生成するために分離（例えば、１２４、２２４）されてよい。ジ
ュース画分（例えば、第１ポーション、第２ポーション）は、高タンパク質液及び／又は少なくともおよそいくらかの固形粒子（例えば、炭水化物、繊維）を含んでよい。一部の実施形態では、バイオマス（例えば、洗浄、溶解）は、分離に先立って希釈液（例えば、水、再利用水、逆浸透水）で希釈されてよい。

一部の実施形態では、希釈液は、室温より低い温度（例えば、約１２℃）であってよい。希釈液を冷やすことは、タンパク質回収効率を改善でき、及び／又はタンパク質分解活性を減少させることができる。一部の実施形態では、希釈液は、使用時に約３０℃未満、又は約２０℃未満、又は約１５℃未満、又は約１０℃未満、又は約１５℃未満、又は約１０℃未満、又は約５℃未満、又は約２℃未満、又は約１℃未満、又は約０℃の温度を有してよい。一部の実施形態により、希釈液は、使用時に約０℃から約１０℃の間、又は約５℃から約１５℃の間、又は約１０℃から約２０℃の間、又は約１５℃から約２５℃の間、又は約２０℃から約３０℃の間の温度であってよい。

一部の実施形態では、希釈液は、使用時に室温を超える温度（例えば、約５０℃）を有してよい。希釈液を加熱することは、タンパク質回収効率を改善でき、タンパク質分解活性を減少（例えば、タンパク質分解酵素を変性）させることができ、及び／又は微生物混入を減少させることができる（例えば、低温殺菌）。一部の実施形態では、希釈液は、使用時に約２０℃を超える、又は約２５℃を超える、又は約３０℃を超える、又は約３５℃を超える、又は約４０℃を超える、又は約４５℃を超える、又は約５０℃を超える、又は約５５℃を超える、又は約６０℃を超える、又は約６５℃を超える、又は約７０℃を超える、又は約７５℃を超える、又は約８０℃を超える、又は約８５℃を超える、又は約９０℃を超える温度を有してよい。一部の実施形態では、希釈液は、使用時に約４０℃から約５０℃の間、又は約４５℃から約５５℃の間、又は約５０℃から約６０℃の間の温度を有してよい。一部の実施形態により、希釈液は、使用時に約７５℃から約８０℃の間、又は約８０℃から約８５℃の間の温度を有してよい。

一部の実施形態では、希釈液は、緩衝液、プロテアーゼ阻害剤、抗菌剤、キレーター（例えば、ＥＤＴＡ）、還元剤、又はその任意の組合せを含んでよい。一部の実施形態では、溶解バイオマス又は希釈解バイオマスは、分離の前にソニケーションされてよい。ソニケーションはタンパク質収量を増加させ得る。

ジュース画分及び固形画分を形成するためにバイオマスを分離することは、圧力をかけること（例えば、ベルトプレス、フィルタープレス）、遠心分離、濾過、加圧濾過、又はその任意の組合せを含んでよい。バイオマスを分離するための互換的ユニット操作は、例えば、デカンター遠心分離、ベルトプレス、ファンプレス、ロータリープレス、スクリュープレス、フィルタープレス、フィニッシャープレス、又はその任意の組合せを含む。

一部の実施形態では、バイオマスは、任意の望ましい容量、質量又は他の速度若しくは間隔（例えば、一定速度、可変速度、連続的、半連続的、定期的、断続的）で分離装置に計量されてよい。供給速度及び／又は様式は、例えば：標的産生速度；工程において用いられる器具（単数又は複数）；供給原料の特性、又はその任意の組合せを含む検討事項に基づいて決定されてよい。一部の実施形態では、供給速度は、少なくとも約１０ｋｇ／時間、又は少なくとも約５０ｋｇ／時間、又は少なくとも約１００ｋｇ／時間、又は少なくとも約２００ｋｇ／時間、又は少なくとも約３００ｋｇ／時間、又は少なくとも約４００ｋｇ／時間、又は少なくとも約５００ｋｇ／時間、又は少なくとも約６００ｋｇ／時間、又は少なくとも約７００ｋｇ／時間、又は少なくとも約８００ｋｇ／時間、又は少なくとも約９００ｋｇ／時間、又は少なくとも約１０００ｋｇ／時間、又は約１０００ｋｇ／時間より高くであってよい。一部の実施形態により、供給速度は、約１０ｋｇ／時間から約２００ｋｇ／時間、又は約２００ｋｇ／時間から約４００ｋｇ／時間、又は約４００ｋｇ
／時間から約６００ｋｇ／時間、又は約６００ｋｇ／時間から約８００ｋｇ／時間、又は約８００ｋｇ／時間から約１０００ｋｇ／時間、又は約１０００ｋｇ／時間から約１２００ｋｇ／時間、又は約１２００ｋｇ／時間から約１４００ｋｇ／時間、又は約１４００ｋｇ／時間から約１６００ｋｇ／時間、又は約１６００ｋｇ／時間から約１８００ｋｇ／時間、又は約１８００ｋｇ／時間から約２０００ｋｇ／時間、又は約２０００ｋｇ／時間から約２２００ｋｇ／時間であってよい。

バイオマスを分離することは、任意の望ましい温度で実施されてよい。分離は、例えば、タンパク質分解活性を減少させるために、室温より低い温度で実施されてよい。一部の実施形態では、分離は、約４０℃未満、約３０℃未満、又は約２０℃未満、又は約１５℃未満、又は約１０℃未満、又は約１５℃未満、又は約１０℃未満、又は約５℃未満、又は約２℃未満、又は約１℃未満、又は約０℃未満の温度で実施されてよい。分離は、例えば、約０℃から約１０℃の間、又は約５℃から約１５℃の間、又は約１０℃から約２０℃の間、又は約１５℃から約２５℃の間、又は約２０℃から約３０℃の間、又は約２５℃から約３５℃の間、又は約３０℃から約４０℃の間の温度で実施されてよい。

ジュース画分からのシュウ酸塩の沈殿（Precipitating）
一部の実施形態により、少なくとも一部の可溶性シュウ酸は、シュウ酸塩への転換及び沈殿によってジュース画分から除去されてよい。一部の実施形態では、ジュース画分を沈殿させることは、ジュース画分の少なくとも一部を少なくとも１つのカルシウム塩（例えば、塩化カルシウム、酢酸カルシウム）と混合することを含んでよい。ジュース画分を沈殿させることは、一部の実施形態では、ジュース画分の少なくとも一部を炭酸カルシウム溶液又は水酸化カルシウム溶液と混合することを含んでよい。沈殿されたシュウ酸塩は、一部の実施形態により、遠心分離及び／又は濾過によってバイオマスから除去されてよい。

ジュース画分の分離
一部の実施形態により、ジュース画分（例えば、第１ポーション、第２ポーション）は、第１ジュース及び第１ケーキを生成するように分離されてよい。第１ジュース（例えば、第１ポーション、第２ポーション）は、溶けたタンパク質を含んでよい。一部の実施形態では、緩衝液、プロテアーゼ阻害剤、抗菌剤、キレーター（例えば、ＥＤＴＡ）、還元剤、又はその任意の組合せは、ジュース画分及び／又は第１ジュースに加えられてよい。一部の実施形態では、ジュース画分を分離することは、遠心分離、濾過、加圧濾過、又はその任意の組合せを含んでよい。２つ以上のユニット操作（例えば、互換的ユニット操作）は、例えば、高速ディスクスタック遠心分離機、環状振動分離機、直鎖状／傾斜運動振とう機、デカンター遠心分離機、フィルタープレス、加圧濾過装置、精密濾過、真空濾過、又はその任意の組合せを含んでジュース画分を分離するために使用されてよい。

一部の実施形態では、精密濾過は、ジュース画分を第１ジュース及び第１ケーキに分離するために使用されてよい。一部の実施形態では、好適なフィルターサイズは、≦約１０μｍ、又は≦約５μｍ、又は≦約３μｍ、又は≦約２μｍ、又は≦約１μｍ、又は≦約０．５μｍ、又は≦約０．４μｍ、は≦約０．３μｍ、又は≦約０．２μｍ、又は≦約０．１μｍを含んでよい。一部の実施形態では、フィルターは、約０．１μｍ以上のフィルターサイズを有してよい。一部の実施形態により、精密濾過は、第１ジュース中の懸濁固形（例えば、脂肪、繊維）、微生物混入（例えば、大腸菌（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ ｃｏｌｉ））、及び／又は真菌混入物（例えば、酵母）の濃度を低減できる。

一部の実施形態では、真空が、分離工程の少なくとも一部の際に実行されてよい。

一部の実施形態により、分離は、例えば、タンパク質分解活性を減少させるために室温
より低い温度で実施されてよい。一部の実施形態では、分離は、約４０℃未満、又は約３０℃未満、又は約２０℃未満、又は約１５℃未満、又は約１０℃未満、又は約５℃未満、又は約２℃未満、又は約１℃未満、又は約０℃未満の温度で実施されてよい。一部の実施形態では、分離は、約０℃から約１０℃の間、又は約５℃から約１５℃の間、又は約１０℃から約２０℃の間、又は約１５℃から約２５℃の間、又は約２０℃から約３０℃の間、又は約２５℃から約３５℃の間、又は約３０℃から約４０℃の間の温度で実施されてよい。

第１ジュースは、さらなる処理まで保存タンク、例えば、冷却された保存タンクに注入されてよい。一部の実施形態では、冷却保存タンクは、室温より低い温度（例えば、１２℃）で維持されてよい。低温での第１ジュースの保存は、タンパク質分解活性を低減でき、それによりタンパク質回収効率を改善できる。一部の実施形態では、冷却保存タンクは、約３０℃未満、又は約２０℃未満、又は約１５℃未満、又は約１０℃未満、又は約５℃未満、又は約２℃未満、又は約１℃未満、又は約０℃未満の温度で維持されていてよい。一部の実施形態により、冷却保存タンクは、約５℃、約６℃、約７℃、約８℃、約９℃、約１０℃、約１１℃、約１２℃、約１３℃、約１４℃又は約１５℃の温度に維持されていてよい。一部の実施形態では、第１ジュースは、保存タンクで保存されることなくさらなる処理に直接供給されてよい。

ある手順において生成された液相（例えば、ジュース画分、第１ジュース、第２ジュース、第３ジュース）又は固相（例えば、固形画分、第１ケーキ、第２ケーキ）の任意の１つ又は複数は、１つ又は複数の下流手順又は器具に供給される前に保存タンクに保存されてよい。一部の実施形態では、均一な液相又は固相は、下流手順（単数若しくは複数）又は器具（単数若しくは複数）のために生成されてよい。これは、１つ又は複数の下流手順（単数若しくは複数）及び／又は器具（単数若しくは複数）への例えば、連続様式、バッチ様式又は複数供給流を含むさまざまな操作スケジュール又は様式に適合できる。液相又は固相は、さらなる処理まで分解を低減し、高品質を維持するために望ましい温度（例えば、室温より低い温度、１２℃など）で保存タンク中で維持されてよい。

固形画分の分離
一部の実施形態では、固形画分は、追加的ジュース（例えば、第２ジュース２３２）を抽出するためにさらに分離されてよい。固形画分（例えば、第１ポーション、第２ポーション）の分離は、第２ジュース（例えば、２３２）及び第１固形（例えば、２３４）を形成できる。第２ジュース（例えば、第１ポーション、第２ポーション）は、高タンパク質液及び／又は少なくともいくらかの固形粒子（例えば、炭水化物、繊維）を含む場合がある。

第２ジュース及び第１固形を形成するために固形画分を分離することは、圧力をかけること（例えば、スクリュープレス）、遠心分離、濾過、加圧濾過、又はその任意の組合せを含んでよい。固形画分を分離するための互換的ユニット操作は、例えば、デカンター遠心分離、ベルトプレス、ファンプレス、ロータリープレス、スクリュープレス、フィルタープレス、フィニッシャープレス、又はその任意の組合せを含む。

一部の実施形態では、固形画分は、任意の望ましい容量、質量又は他の速度若しくは間隔（例えば、一定速度、可変速度、連続的、半連続的、定期的、断続的）で分離装置に計量されてよい。供給速度及び／又は様式は、例えば：標的産生速度；工程において用いられる器具（単数又は複数）；供給原料の特性、又はその任意の組合せを含む検討事項に基づいて決定されてよい。一部の実施形態では、供給速度は、少なくとも約１０ｋｇ／時間、又は少なくとも約５０ｋｇ／時間、又は少なくとも約１００ｋｇ／時間、又は少なくとも約２００ｋｇ／時間、又は少なくとも約３００ｋｇ／時間、又は少なくとも約４００ｋ
ｇ／時間、又は少なくとも約５００ｋｇ／時間、又は少なくとも約６００ｋｇ／時間、又は少なくとも約７００ｋｇ／時間、又は少なくとも約８００ｋｇ／時間、又は少なくとも約９００ｋｇ／時間、又は少なくとも約１０００ｋｇ／時間、又は約１０００ｋｇ／時間より高くであってよい。一部の実施形態により、供給速度は、約１０ｋｇ／時間から約２００ｋｇ／時間、又は約２００ｋｇ／時間から約４００ｋｇ／時間、又は約４００ｋｇ／時間から約６００ｋｇ／時間、又は約６００ｋｇ／時間から約８００ｋｇ／時間、又は約８００ｋｇ／時間から約１０００ｋｇ／時間、又は約１０００ｋｇ／時間より高く、又は約１０００ｋｇ／時間から約１２００ｋｇ／時間、又は約１２００ｋｇ／時間から約１４００ｋｇ／時間、又は約１４００ｋｇ／時間から約１６００ｋｇ／時間、又は約１６００ｋｇ／時間から約１８００ｋｇ／時間、又は約１８００ｋｇ／時間から約２０００ｋｇ／時間、又は約２０００ｋｇ／時間から約２２００ｋｇ／時間であってよい。

固形画分を分離することは、任意の望ましい温度で実施されてよい。分離は、例えば、タンパク質分解活性及び／又は細菌増殖を減少させるために、室温より低い温度で実施されてよい。一部の実施形態では、分離は、約４０℃未満、約３０℃未満、又は約２０℃未満、又は約１５℃未満、又は約１０℃未満、又は約５℃未満、又は約２℃未満、又は約１℃未満、又は約０℃未満の温度で実施されてよい。分離は、例えば、約０℃から約１０℃の間、又は約５℃から約１５℃の間、又は約１０℃から約２０℃の間、又は約１５℃から約２５℃の間、又は約２０℃から約３０℃の間、又は約２５℃から約３５℃の間、又は約３０℃から約４０℃の間の温度で実施されてよい。

一部の実施形態では、固形画分を分離するために選択された分離器具（例えば、スクリュープレス）は、ジュース画分及び固形画分を形成するようにバイオマス（例えば、溶解）を分離するために使用される同じ器具であってよい。一部の実施形態では、固形画分を分離するために選択された分離器具（例えば、スクリュープレス）は、ジュース画分及び固形画分を形成するようにバイオマス（例えば、溶解）を分離する（例えば、デカンター遠心分離機）ために使用されるものとは異なる器具であってよい。一部の実施形態では、分離器具（例えば、スクリュープレス）は、固形画分から追加的第２ジュースを抽出するために複数回使用されてよい。

一部の実施形態により、マイクロクロップ（例えば、水生植物種、アオウキクサ、藻類種）を増殖、収集及び分離するための工程は単一サイクルであってよく、サイクルの他の段階（例えば、ジュース画分の分離は第１ケーキをもたらす）で集められる第１ケーキ（例えば、２４０）及び第２ケーキ（例えば、２４６）の少なくとも１つは固形混合物を形成するように第１固形と混ぜ合わされてよく、固形混合物はさらに処理されてよい（例えば、図２Ａ、図２Ｂ、図２Ｃ）。

一部の実施形態では、マイクロクロップ（例えば、水生植物種、アオウキクサ、藻類種）を増殖、収集及び分離するための工程は、前のサイクルで集められる第１ケーキ及び第２ケーキの１つ又は複数が次のサイクルからの固形画分と、固形画分の分離に先立って混ぜ合わされてよいような、複数サイクル又は連続工程であってよい。

固形画分からの第２ジュースの抽出が増加すると、第１固形の水分含有量全体は減少する場合があり、それにより第１固形をさらに処理するために必要なエネルギー支出（例えば、乾燥させるために必要なエネルギー）を低下させ得る。加えて、固形画分及び／又は固形混合物からのジュースの抽出が増加すると、高タンパク質産生物の収量を改善することができる。

一部の実施形態では、固形画分及び／又は固形混合物の水分含有量は、重量で約９０％未満、又は約８０％未満、又は約７０％未満、又は約６０％未満、又は約５０％未満、又
は約４０％未満、又は約３０％未満、又は約２０％未満、又は約１０％未満である。

第１ケーキ及び／又は第２ジュースの分離
一部の実施形態では、第１ケーキ（例えば、第１ポーション、第２ポーション）（例えば、２４０）及び第２ジュース（例えば、第１ポーション、第２ポーション）（例えば、２３２）のさらなる処理は実施されてよい。そのような追加的処理は、産生物収量及び／又は品質を増大させ得る。一部の実施形態では、第１ケーキ及び第２ジュースは、混ぜ合わされてよく、第３ジュース及び第２ケーキを形成するためにさらに分離されてよい（例えば、２４２）。一部の実施形態により、第１ケーキ及び第２ジュースは、さらなる分離に別々に供されてよい。

第１ケーキ、第２ジュース、又はその任意の組合せを分離すること（例えば、２４２）は、振動分離、遠心分離、濾過、加圧濾過、又はその任意の組合せを含んでよい。いくつかの異なる互換的ユニット操作は、例えば、高速ディスクスタック遠心分離機、環状振動分離機、直鎖状／傾斜運動振とう機、デカンター遠心分離機、フィルタープレス、加圧濾過装置、精密濾過、真空濾過、又はその任意の組合せを含んで分離するために使用されてよい。

一部の実施形態では、濾過（例えば、振動分離機）は、第３ジュース及び第２ケーキを形成するように第１ケーキ、第２ジュース、又はその任意の組合せを分離するために使用されてよい。一部の実施形態では、好適なフィルターサイズは、≦約８００μｍ、又は≦約６００μｍ、又は≦約５００μｍ、又は≦約４００μｍ、又は≦約３００μｍ、又は≦約２００μｍ、又は≦約１８０μｍ、又は≦約１５０μｍ、又は≦約１２０μｍ、又は≦約１００μｍ、又は≦約９０μｍ、又は≦約８０μｍ、又は≦約７０μｍ、又は≦約６０μｍ、又は≦約５０μｍ、又は≦約４０μｍ、又は≦約３０μｍ、又は≦２５μｍ、又は≦約２０μｍ、又は≦約１５μｍ、又は≦約１０μｍ、又は≦約５μｍ、又は≦約１μｍのポアサイズを含んでよい。一部の実施形態では、フィルターは、約８００μｍ以下のフィルターサイズを有してよい。フィルターのポアサイズは、所望により大きく又はより小さく選択されてよい。例えば、大きなポアサイズは、混入材料の除去が目的である場合に望ましい場合ある。小さなポアサイズは、工程のサイクル数を限定すること及び／又はタンパク質収量が目的である場合に望ましい場合がある。一部の実施形態では、フィルターのポアサイズは、溶解条件、例えば、溶解バイオマスの平均粒子サイズに基づいて選択されてよい。フィルターのポアサイズは、一部の実施形態により、マイクロクロップの１つ又は複数の特徴（例えば、細胞壁組成、タンパク質組成）に基づいて選択されてよい。

一部の実施形態では、精密濾過は、第３ジュース及び第２ケーキを形成するように第１ケーキ、第２ジュース、又はその任意の組合せを分離するために使用されてよい。一部の実施形態では、好適なフィルターサイズは、≦約１０μｍ、又は≦約５μｍ、又は≦約３μｍ、又は≦約２μｍ、又は≦約１μｍ、又は≦約０．５μｍ、又は≦約０．４μｍ、又は≦約０．３μｍ、又は≦約０．２μｍ、又は≦約０．１μｍを含んでよい。一部の実施形態では、マイクロフィルターは、約０．１μｍ以上のフィルターサイズを有してよい。

一部の実施形態では、真空は、分離工程の少なくとも一部の際に実施されてよい。

一部の実施形態により、分離（例えば、２４２）は、例えば、タンパク質分解活性を減少させるために、室温より低い温度で実施されてよい。一部の実施形態では、分離は、４０℃未満、又は約３０℃未満、又は約２０℃未満、又は約１５℃未満、又は約１０℃未満、又は約１５℃未満、又は約１０℃未満、又は約５℃未満、又は約２℃未満、又は約１℃未満、又は約０℃未満の温度で実施されてよい。一部の実施形態では、分離は、約０℃から約１０℃の間、又は約５℃から約１５℃の間、又は約１０℃から約２０℃の間、又は約
１５℃から約２５℃の間、又は約２０℃から約３０℃の間、又は約２５℃から約３５℃の間、又は約３０℃から約４０℃の間の温度で実施されてよい。

一部の実施形態により、マイクロクロップ（例えば、水生植物種、アオウキクサ、藻類種）を増殖させる、収集する又は分離するための工程は、単一サイクルを含んでよい。一部の実施形態では、単一サイクル工程において、第１ケーキ（例えば、２４０）及び第２ケーキ（例えば、２４６）の少なくとも１つは、固形混合物を形成するために第１固形を混ぜ合わされてよく、固形混合物はさらに処理されてよい（例えば、図２Ａ、２Ｂ、２Ｃ）。単一工程の一部の実施形態では、第３ジュースは、さらなる処理に先立って第１ジュースと混ぜ合わされてよい。

一部の実施形態では、マイクロクロップ（例えば、水生植物種、アオウキクサ、藻類種）を増殖させる、収集する又は分離するための工程は、複数サイクル（例えば、連続工程）を含んでよい。一部の実施形態により、複数サイクル又は連続工程において、前のサイクルで集められる第１ケーキ（例えば、２４０）及び第２ケーキ（例えば、２４６）の１つ又は複数は、続くサイクルからの固形画分と、固形画分の分離に先立って混ぜ合わされてよい。複数サイクル又は連続工程の一部の実施形態では、前のサイクルで集められた第３ジュースは、続くサイクルからのジュース画分と、さらなる処理に先立って混ぜ合わされてよい。

第１ジュース、第３ジュース、又はその任意の組合せの第１ろ過
第１ジュース（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、第３ジュース（例えば、第１ポーション、第２ポーション）又はその任意の組合せは、第１可溶性タンパク質（例えば、２５０）を生成するために１回又は複数回ろ過されてよい（例えば、第１濾過２４６）。第１濾過は、精密濾過、限外濾過、ナノ濾過又は逆浸透濾過を個々に又は組合せで含んでよい。

一部の実施形態により、精密濾過は、第１ジュース、第３ジュース、又はその任意の組合せ中の懸濁固形（例えば、脂肪、繊維）、微生物混入（例えば、大腸菌）及び／又は真菌混入物（例えば、酵母）の濃度を低減できる。一部の実施形態では、精密濾過によって産生された第１可溶性タンパク質は、シュウ酸含有量が低減する場合がある。一部の実施形態では、精密濾過のために好適なフィルターサイズは、≦約１０μｍ、又は≦約５μｍ、又は≦約３μｍ、又は≦約２μｍ、又は≦約１μｍ、又は≦約０．５μｍ、又は≦約０．４μｍ、又は≦約０．３μｍ、又は≦約０．２μｍ、又は≦約０．１μｍを含んでよい。一部の実施形態では、第１ジュース、第３ジュース又はその任意の組合せは、透過物中に可溶性タンパク質を生成するために精密濾過を使用してろ過されてよい。

限外濾過は、圧力、濃度グラジエント又はこれらの組合せを使用する膜濾過を含んでよい。一部の実施形態では、限外濾過のために好適な名目分子量カットオフ（ＮＭＷＣＯ）は、最大で約１００ｋＤａ、又は最大で約９０ｋＤａ、又は最大で約８０ｋＤａ、又は最大で約７０ｋＤａ、又は最大で約６０ｋＤａ、又は最大で約５５ｋＤａ、又は最大で約５０ｋＤａ、又は最大で約４５ｋＤａ、又は最大で約４０ｋＤａ、又は最大で約３０ｋＤａ、又は最大で約２０ｋＤａ、又は最大で約１５ｋＤａ、又は最大で約１４ｋＤａ、又は最大で約１３ｋＤａ、又は最大で約１２ｋＤａ、又は最大で約１１ｋＤａ、又は最大で約１０ｋＤａ、又は最大で約９ｋＤａ、又は最大で約８ｋＤａ、又は最大で約７ｋＤａ、又は最大で約６ｋＤａ、又は最大で約５ｋＤａ、又は最大で約４ｋＤａ、又は最大で約３ｋＤａ、又は最大で約２ｋＤａ、又は最大で約１ｋＤａであってよい。一部の実施形態では、限外濾過のために好適なＮＭＷＣＯカットオフは、最大で約１ｋＤａから最大で約１０ｋＤａ、最大で約２ｋＤａから最大で約１０ｋＤａ、最大で約３ｋＤａから最大で約１０ｋＤａ、最大で約３ｋＤａから最大で約１５ｋＤａ、又は最大で約３ｋＤａから最大で約２
０ｋＤａ、又は最大で約３ｋＤａから最大で約６０ｋＤａ、又は最大で約３ｋＤａから最大で約５５ｋＤａ、又は最大で約１０ｋＤａから最大で約５５ｋＤａの範囲内であってよい。一部の実施形態では、限外濾過のためのＮＭＷＣＯは、少なくとも１ｋＤａ、又は少なくとも３ｋＤａ、又は少なくとも５ｋＤａ、又は少なくとも１０ｋＤａ、又は少なくとも１５ｋＤａ、又は少なくとも２０ｋＤａ、又は少なくとも２５ｋＤａ、又は少なくとも３０ｋＤａ、又は少なくとも３５ｋＤａ、又は少なくとも４０ｋＤａ、又は少なくとも４５ｋＤａ、又は少なくとも５０ｋＤａ、又は少なくとも５５ｋＤａであってよい。限外濾過のために好適なＮＭＷＣＯは、限外濾過膜の製造仕様書に応じて変動する場合がある。一部の実施形態では、限外濾過のために好適なＮＭＷＣＯは、加水分解速度に応じて変動する場合がある。

一部の実施形態では、ナノ濾過のために好適なフィルターサイズは、≦約０．０１μｍ、又は≦約０．００９μｍ、又は≦約０．００８μｍ、又は≦約０．００７μｍ、又は≦約０．００６μｍ又は≦約０．００５μｍ、又は≦約０．００４μｍ、又は≦約０．００３μｍ、又は≦約０．００２μｍ、又は≦約０．００１μｍを含んでよい。一部の実施形態では、ナノ濾過フィルターは、約０．０１μｍ以下のフィルターサイズを有してよい。

一部の実施形態により、逆浸透濾過のために好適なフィルターサイズは、≦約０．００１μｍ、≦約０．０００９μｍ、≦約０．０００８μｍ、≦約０．０００７μｍ、≦約０．０００６μｍ、≦約０．０００５μｍ、≦約０．０００４μｍ、≦約０．０００３μｍ、≦約０．０００２μｍ、又は≦約０．０００１μｍを含んでよい。一部の実施形態では、逆浸透フィルターは、約０．００１μｍ以下のフィルターサイズを有してよい

一部の実施形態では、緩衝液、プロテアーゼ阻害剤、抗菌剤、キレーター（例えば、ＥＤＴＡ）、還元剤、又はその任意の組合せは、第１可溶性タンパク質産生物に加えられてよい。一部の実施形態では、第１可溶性タンパク質産生物は、約３０℃未満、又は約２５℃未満、又は約２０℃未満、又は約１５℃未満、又は約１０℃未満、又は約５℃未満、又は約２℃未満、又は約１℃未満、又は約０℃未満、又は約－２℃未満、又は約－５℃未満、又は約－１０℃未満の温度で冷却及び／又は保存されてよい。低い温度に可溶性タンパク質産生物を冷却及び／又は保存することは、分解を低減でき、及び／又はタンパク質回収効率を改善できる。

第１可溶性タンパク質の第２濾過
一部の実施形態により、第１可溶性タンパク質（例えば、２４６）は、第２可溶性タンパク質（例えば、２５６）及び第２リジェクト流（例えば、２５４）を形成するために第２濾過（例えば、２５２）に供されてよい。第２濾過は、限外濾過、ナノ濾過及び／又は逆浸透濾過を含んでよい。

限外濾過は、圧力、濃度グラジエント又はこれらの組合せを使用する膜濾過を含んでよい。一部の実施形態では、限外濾過のために好適な名目分子量カットオフ（ＮＭＷＣＯ）は、最大で約１００ｋＤａ、又は最大で約９０ｋＤａ、又は最大で約８０ｋＤａ、又は最大で約７０ｋＤａ、又は最大で約６０ｋＤａ、又は最大で約５５ｋＤａ、又は最大で約５０ｋＤａ、又は最大で約４５ｋＤａ、又は最大で約４０ｋＤａ、又は最大で約３０ｋＤａ、又は最大で約２０ｋＤａ、又は最大で約１５ｋＤａ、又は最大で約１４ｋＤａ、又は最大で約１３ｋＤａ、又は最大で約１２ｋＤａ、又は最大で約１１ｋＤａ、又は最大で約１０ｋＤａ、又は最大で約９ｋＤａ、又は最大で約８ｋＤａ、又は最大で約７ｋＤａ、又は最大で約６ｋＤａ、又は最大で約５ｋＤａ、又は最大で約４ｋＤａ、又は最大で約３ｋＤａ、又は最大で約２ｋＤａ、又は最大で約１ｋＤａであってよい。一部の実施形態では、限外濾過のために好適なＮＭＷＣＯカットオフは、最大で約１ｋＤａから最大で約１０ｋＤａ、最大で約２ｋＤａから最大で約１０ｋＤａ、最大で約３ｋＤａから最大で約１０ｋ
Ｄａ、最大で約３ｋＤａから最大で約１５ｋＤａ、又は最大で約３ｋＤａから最大で約２０ｋＤａ、又は最大で約３ｋＤａから最大で約６０ｋＤａ、又は最大で約３ｋＤａから最大で約５５ｋＤａ、又は最大で約１０ｋＤａから最大で約５５ｋＤａの範囲内であってよい。一部の実施形態では、限外濾過のためのＮＭＷＣＯは、少なくとも１ｋＤａ、又は少なくとも３ｋＤａ、又は少なくとも５ｋＤａ、又は少なくとも１０ｋＤａ、又は少なくとも１５ｋＤａ、又は少なくとも２０ｋＤａ、又は少なくとも２５ｋＤａ、又は少なくとも３０ｋＤａ、又は少なくとも３５ｋＤａ、又は少なくとも４０ｋＤａ、又は少なくとも４５ｋＤａ、又は少なくとも５０ｋＤａ、又は少なくとも５５ｋＤａであってよい。限外濾過のために好適なＮＭＷＣＯは、限外濾過膜の製造仕様書に応じて変動する場合がある。一部の実施形態では、限外濾過のために好適なＮＭＷＣＯは、加水分解速度に応じて変動する場合がある。

一部の実施形態では、ナノ濾過のために好適なフィルターサイズは、≦約０．０１μｍ、又は≦約０．００９μｍ、又は≦約０．００８μｍ、又は≦約０．００７μｍ、又は≦約０．００６μｍ又は≦約０．００５μｍ、又は≦約０．００４μｍ、又は≦約０．００３μｍ、又は≦約０．００２μｍ、又は≦約０．００１μｍを含んでよい。一部の実施形態では、ナノ濾過フィルターは、約０．０１μｍ以下のフィルターサイズを有してよい。

一部の実施形態により、逆浸透濾過のために好適なフィルターサイズは、≦約０．００１μｍ、≦約０．０００９μｍ、≦約０．０００８μｍ、≦約０．０００７μｍ、≦約０．０００６μｍ、≦約０．０００５μｍ、≦約０．０００４μｍ、≦約０．０００３μｍ、≦約０．０００２μｍ、又は≦約０．０００１μｍを含んでよい。一部の実施形態では、逆浸透フィルターは、約０．００１μｍ以下のフィルターサイズを有してよい。

一部の実施形態では、緩衝液、プロテアーゼ阻害剤、抗菌剤、キレーター（例えば、ＥＤＴＡ）、還元剤、又はその任意の組合せは、第２可溶性タンパク質産生物に加えられてよい。一部の実施形態では、第２可溶性タンパク質産生物は、約３０℃未満、又は約２５℃未満、又は約２０℃未満、又は約１５℃未満、又は約１０℃未満、又は約５℃未満、又は約２℃未満、又は約１℃未満、又は約０℃未満、又は約－２℃未満、又は約－５℃未満、又は約－１０℃未満の温度で冷却及び／又は保存されてよい。低い温度に第２可溶性タンパク質産生物を冷却及び／又は保存することは、分解を低減でき、及び／又はタンパク質回収効率を改善できる。

可溶性タンパク質産生物の水分含有量の低減
一部の実施形態では、工程は、第１可溶性タンパク質（例えば、２５０）、第２可溶性タンパク質（例えば、２５６）、又はその任意の組合せ（集合的に「可溶性タンパク質産生物」）の水分含有量を低減するために使用されてよい。可溶性タンパク質産生物の水分含有量を低減することは、例えば、最終タンパク質産生物（例えば、シュウ酸が低減された濃縮可溶性タンパク質２６２）を乾燥させるために必要なエネルギーを低減することによって資本的及び操作的支出を低減できる。

一部の実施形態では、蒸発工程は、濃縮タンパク質産生物（例えば、シュウ酸が低減された濃縮タンパク質産生物２６２）を形成するために可溶性タンパク質産生物の水分含有量を低減するために使用されてよい。蒸発は、例えば：上昇フィルム蒸発器、下降フィルム蒸発器、自然循環蒸発器（垂直又は水平）、撹拌フィルム蒸発器、多重効果蒸発器、真空蒸発による、又はその任意の組合せなどの熱的（蒸発的）手段によって実施されてよい。熱は、蒸発器に直接、又は熱ジャケットを通じ間接的に供給されてよい。熱は、原料（例えば、天然ガスの燃焼、ボイラーからの蒸気）から又は廃熱流（例えば、乾燥機排気）から又は流入流を冷やすことによって移行される熱からのいずれであってもよい。

一部の実施形態では、可溶性タンパク質産生物（例えば、第２可溶性タンパク質）の水分含有量は、濃縮タンパク質産生物（例えば、シュウ酸が低減された濃縮タンパク質産生物２６２）を形成するためにナノ濾過又は逆浸透濾過（例えば、２５８）によって低減され得る。一部の実施形態では、ナノ濾過のために好適なフィルターサイズは、≦約０．０１μｍ、又は≦約０．００９μｍ、又は≦約０．００８μｍ、又は≦約０．００７μｍ、又は≦約０．００６μｍ、又は≦約０．００５μｍ、又は≦約０．００４μｍ、又は≦約０．００３μｍ、又は≦約０．００２μｍ、又は≦約０．００１μｍを含んでよい。一部の実施形態では、可溶性タンパク質産生物（例えば、第２可溶性タンパク質）の水分含有量は、残余物中の可溶性タンパク質産生物（例えば、シュウ酸が低減された濃縮タンパク質産生物２６２）でナノ濾過を使用して低減され得る。一部の実施形態により、逆浸透濾過のために好適なフィルターサイズは、≦約０．００１μｍ、≦約０．０００９μｍ、≦約０．０００８μｍ、≦約０．０００７μｍ、≦約０．０００６μｍ、≦約０．０００５μｍ、≦約０．０００４μｍ、≦約０．０００３μｍ、≦約０．０００２μｍ、又は≦約０．０００１μｍを含んでよい。一部の実施形態では、可溶性タンパク質産生物（例えば、第２可溶性タンパク質）の水分含有量は、残余物中の可溶性タンパク質産生物（例えば、シュウ酸が低減された濃縮タンパク質産生物２６２）で逆浸透濾過を使用して低減され得る。一部の実施形態により、ナノ濾過又は逆浸透濾過の透過物は、再利用されてよい（例えば、溶解のための希釈液２６０；洗浄溶液）。

一部の実施形態では、抗酸化物質（例えば、ローズマリー抽出物）は、包装される場合に、産生物の保存可能期間を改善するように乾燥させる前に可溶性タンパク質産生物（例えば、第２可溶性タンパク質２５６、シュウ酸が低減された濃縮タンパク質産生物２６２）と混合されてよい。

ポリフェノールの低減
一部の実施形態では、高ポリフェノール産生物は、少なくとも１つのポリフェノール（例えば、タンニン）の濃度が低減している産生物を生成するためにポリフェノール低減工程に供されてよい。高ポリフェノール産生物は、一部の実施形態により、ジュース画分（例えば、図１Ａ、１Ｂ、１Ｃ、１Ｄ、１２６；図２Ａ、２Ｂ、２Ｂ、２２６）、第１可溶性タンパク質（例えば、図２Ａ、２Ｂ、２Ｃ、２５０）、第２可溶性タンパク質（例えば、図２Ａ、２Ｂ、２Ｃ、２５６）、シュウ酸が低減された濃縮タンパク質産生物（例えば、図２Ａ、２Ｂ、２Ｃ、２６２、第１ジュース（例えば、図２Ａ、２Ｂ、２Ｃ、２３８）、第２ジュース（例えば、図２Ａ、２Ｂ、２Ｃ、２３２）、第３ジュース（例えば、図２Ａ、２Ｂ、２Ｃ、２４４）又はその任意の組合せを含んでよい。一部の実施形態により、ポリフェノール低減工程は、少なくとも１つのポリフェノール（例えば、少なくとも１つのタンニン）の濃度を低減するように構成されてよい。一部の実施形態では、ポリフェノール低減工程は、下流可溶性タンパク質産生物の収量又は量における低減を最少化するために構成されてよい。

一部の実施形態により、ポリフェノール低減工程は、高ポリフェノール産生物をイオン交換レジンに通すことを含んでよい。一部の実施形態では、ポリフェノール低減工程は、高ポリフェノール産生物を一連（例えば、少なくとも２個、少なくとも３個）のイオン交換レジンに通すことを含んでよい。一連の各イオン交換レジンは、一連の他のイオン交換レジンと同じ又は異なっていてよい。一部の実施形態では、イオン交換レジンは、強酸性レジン、強塩基性レジン（例えば、ＤＩＡＩＯＮ ＰＡ３０８）、弱酸性レジン（例えば、Ｒｅｌｉｔｅ ＪＡ８００）、弱塩基性レジン、弱アニオン交換レジン（例えば、Ｒｅｌｉｔｅ ＲＡＭ２）、強アニオン交換レジン、弱カチオン交換レジン、強カチオン交換レジン、又はその任意の組合せであってよい。一部の実施形態により、ポリフェノール低減工程は、高ポリフェノール産生物を、弱酸性レジン（例えば、Ｒｅｌｉｔｅ ＪＡ８００）、アニオン交換レジン（例えば、Ｒｅｌｉｔｅ ＲＡＭ２）、強塩基性レジン（例え
ば、ＤＩＡＩＯＮ ＰＡ３０８）、又はこれらの組合せから選択されるイオン交換カラムに通すことを含んでよい。一部の実施形態では、ポリフェノール低減工程は：第１に、高ポリフェノール産生物を弱アニオン交換及び強アニオン交換レジンから選択されるイオン交換カラムに通すこと、並びに第２に、高ポリフェノール産生物を弱アニオン交換レジン及び強アニオン交換レジンから選択されるイオン交換カラムに通すことを含んでよい。イオン交換レジンは、バッチ様式で使用されてよく、又は連続工程に配置されてよく、それによりレジンはポリフェノール抽出及び再生工程を通じて循環されてよい。一部の実施形態では、ポリフェノール低減工程は、高ポリフェノール産生物又はイオン交換カラムから得られた産生物のｐＨを調節することをさらに含んでよい。ポリフェノール低減工程は、単独で又は他の精製工程及び／若しくはステップとの組合せで実施されてよい。

一部の実施形態では、ポリフェノール低減工程は、少なくとも５％まで、又は少なくとも１０％まで、又は少なくとも１５％まで、又は少なくとも２０％まで、又は少なくとも２５％まで、又は少なくとも３０％まで、又は少なくとも３５％まで、又は少なくとも４０％まで、又は少なくとも４５％まで、又は少なくとも５０％まで、又は少なくとも５５％まで、又は少なくとも６０％まで、又は少なくとも６５％まで、又は少なくとも７０％まで高ポリフェノール産生物のポリフェノール（例えば、タンニン）含有量を低減できる。一部の実施形態により、ポリフェノール低減工程は、高ポリフェノール産生物のポリフェノール含有量を約５％から約１０％、約１５％から約２０％、約２０％から約３０％、３０％から約４０％、約３５％から約４５％約４０％から約５０％、約４５％から約５５％、約５０％から約６０％、約５５％から約６５％、又は約６０％から約７０％低減できる。

一部の実施形態では、可溶性タンパク質産生物（例えば、可溶性タンパク質、第１可溶性タンパク質、第２可溶性タンパク質）は、ポリフェノール（例えば、総ポリフェノール）を約０．０５ｇ／１００ｇ可溶性タンパク質産生物、約０．１ｇ／１００ｇ可溶性タンパク質産生物、約０．５ｇ／１００ｇ可溶性タンパク質産生物、約１ｇ／１００ｇ可溶性タンパク質産生物、約５ｇ／１００ｇ可溶性タンパク質産生物、約１０ｇ／１００ｇ可溶性タンパク質産生物及び約２０ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物の濃度で含んでよい。一部の実施形態により、低温殺菌産生物の分析に基づいて、最終産生物１００ｇは、約６５ｇのタンパク質及び約１．０９２ｇポリフェノールを含有してよい（没食子酸等量として表す）。

可溶性タンパク質産生物の乾燥
一部の実施形態により、可溶性タンパク質産生物（例えば、第１可溶性タンパク質２５０、第２可溶性タンパク質２５６、シュウ酸が低減された濃縮タンパク質産生物２６２）は、乾燥タンパク質濃縮物（例えば、第１ポーション、第２ポーション）を生成するために乾燥されてよい。乾燥手順（例えば、２６４）は、一部の実施形態では、可溶性タンパク質産生物の水分含有量を望ましいレベルに低減してよい（例えば、より高い又はより低い水分含有量、望ましい水分含有量）。一部の実施形態では、乾燥タンパク質濃縮物の水分含有量は、例えば、重量で乾燥タンパク質濃縮物の９０％未満、又は約８０％未満、又は約７０％未満、又は約６０％未満、又は約５０％未満、又は約４０％未満、又は約３０％未満、又は約２０％未満、又は約１０％未満、又は約５％未満、又は約１％未満であってよい。一部の実施形態により、乾燥タンパク質濃縮物のタンパク質濃度は、重量で乾燥タンパク質濃縮物の約３０％から約９５％、又は約４０％から約９０％、又は約５０％から約８５％、又は約６０％から約８０％、又は約７０％から約７５％であってよい。乾燥手順は、例えば、スプレー乾燥器、ダブルドラム乾燥器、フラッシュ乾燥器、蒸発器、又はその任意の組合せを含む装置を使用して実施されてよい。

一部の実施形態では、乾燥装置の入り口温度（乾燥機への入口での温度）は、２５℃を
超えていて、又は５０℃を超えていて、又は７５℃を超えていて、又は１００℃を超えていて、又は２５℃を超えていて、又は１５０℃を超えていて、又は１７５℃を超えていて、又は２００℃を超えていて、又は２２５℃を超えていて、又は２５０℃を超えていて、又は２７５℃を超えていて、又は３００℃を超えていて、又は３２５℃を超えていて、又は３５０℃を超えていて、又は３７５℃を超えていて、又は４００℃を超えていて、又は４２５℃を超えていて、又は４５０℃を超えていて、又は４７５℃を超えていて、又は５００℃を超えていてよい。一部の実施形態では、入り口温度は、約２５℃から約５０℃、又は約５０℃から約７５℃、又は約７５℃から約１００℃、又は約１００℃から約１２５℃、又は約１２５℃から約１５０℃、又は約１５０℃から約１７５℃、又は約１７５℃から約２００℃、又は約２００℃から約２２５℃、又は約２２５℃から約２５０℃、又は約２５０℃から約２７５℃、又は約２７５℃から約３００℃、又は約３００℃から約３２５℃、又は約３２５℃から約３５０℃、又は約３５０℃から約３７５℃、又は約３７５℃から約４００℃、又は約４００℃から約４２５℃、又は約４２５℃から約４５０℃、又は約４５０℃から約４７５℃、又は約４７５℃から約５００℃、又は５００℃を超えていてよい。一部の実施形態では、入り口温度は、約５０℃から約１００℃、又は約１００℃から約１５０℃、又は約１５０℃から約２００℃、又は約２００℃から約２５０℃、又は約２５０℃から約３００℃、又は約３００℃から約３５０℃、又は約３５０℃から約４００℃、又は約４００℃から約４５０℃、又は約４５０℃から約５００℃、又は５００℃を超えていてよい。一部の実施形態により、乾燥装置への入り口温度は、約２２５℃であってよい。

一部の実施形態により、乾燥装置の排出温度（乾燥機からの出口での温度）は、約３００℃未満、又は約２７５℃未満、又約２５０℃未満、又約２２５℃未満、又約２００℃未満、又約１７５℃未満、又約１５０℃未満、又約１２５℃未満、又約１００℃未満、又約７５℃未満、又約５０℃未満、又約２５℃であってよい。一部の実施形態では、排出温度は、約３００℃から約２７５℃、又は約２７５℃から約２５０℃、又は約２５０℃から約２２５℃、又は約２２５℃から約２００℃、又は約２００℃から約１７５℃、又は約１７５℃から約１５０℃、又は約１５０℃から約１２５℃、又は約１２５℃から約１００℃、又は約１００℃から約７５℃、又は約７５℃から約５０℃、又は約５０℃から約２５℃、又は約２５℃未満であってよい。一部の実施形態では、排出温度は、約３００℃から約２５０℃、又は約２５０℃から約２００℃、又は約２００℃から約１５０℃、又は約１５０℃から約１００℃、約１００℃から約５０℃、又は約５０℃から約２５℃、又は約２５℃未満であってよい。一部の実施形態により、乾燥装置からの排出温度は、約７５℃であってよい。

一部の実施形態では、１容量の可溶性タンパク質産生物（例えば、第１可溶性タンパク質２５０、第２可溶性タンパク質２５６、シュウ酸が低減された濃縮タンパク質産生物２６２）は、乾燥に先立って１容量の乾燥タンパク質濃縮物と混合されてよい。戻し混合として既知のこの工程は、例えば、可溶性タンパク質の水分含有量が乾燥装置が許容できるレベルを超えている場合に用いられてよい。乾燥タンパク質濃縮物を可溶性タンパク質産生物と戻し混合することによって、総水分含有量は乾燥装置の仕様内に維持でき、それにより操作の費用（例えば、装置の損傷）を低減する。

一部の実施形態により、抗酸化物質（例えば、ローズマリー抽出物）は、包装の前に乾燥タンパク質濃縮物と混合されてよい。

可溶性タンパク質産生物又は乾燥タンパク質濃縮物の溶媒洗浄
一部の実施形態により、可溶性タンパク質産生物（例えば、可溶性タンパク質、第１可溶性タンパク質２５０、第２可溶性タンパク質２５６）及び／又はシュウ酸が低減された濃縮タンパク質産生物（例えば、２６２）は、洗浄タンパク質産生物を生成するために少
なくとも１つの溶媒（例えば、エタノール、メタノール）で洗浄されてよい。

一部の実施形態では、洗浄タンパク質産生物は、未洗浄対応物と比較して脂肪含有量が低減していてよい（例えば、重量で乾燥タンパク質濃縮物約２％以下）及び／又はクロロフィル含有量が低減していてよい（例えば、視覚的に知覚可能な緑色着色の低減）。一部の実施形態では、洗浄タンパク質産生物は、無色、白色、実質的に白色に見える、又は緑色着色が低減していてよい。一部の実施形態では、洗浄タンパク質産生物は、食味、色、保存可能期間（例えば、脂肪の酸化の低減）、タンパク質密度、マレアビリティ及びその組合せの改善を示し得る。一部の実施形態では、洗浄タンパク質産生物は、質感を整えたタンパク質産生物を形成するために成形されてよい。

一部の実施形態により、溶媒は、メタノール、エタノール、アセトン、ヘキサン、ジクロロメタン、酢酸エチル、プロパノール、イソプロパノール、グリセロール又はその組合せを含んでよい。

一部の実施形態では、洗浄タンパク質産生物は、重量で洗浄タンパク質産生物の約５０％未満、又は約４０％未満、又は約３０％未満、又は約２５％未満、又は約２０％未満、又は約１５％未満、又は約１０％未満、又は約５％未満、又は約４％未満、又は約３％未満、又は約２％未満、又は約１％未満を含む脂肪含有量を有してよい。一部の実施形態により、洗浄タンパク質産生物は、一部の実施形態では、重量でタンパク質濃縮物の約１％から約１０％、又は約１０％から約２０％、又は約２０％から約３０％、又は約３０％から約４０％、又は約４０％から約５０％を含む脂肪含有量を有してよい。

一部の実施形態では、洗浄タンパク質産生物は、重量で乾燥タンパク質濃縮物の約１５％以下、重量で乾燥タンパク質濃縮物の約１０％以下、重量で乾燥タンパク質濃縮物の約８％以下、重量で乾燥タンパク質濃縮物の約６％以下、重量で乾燥タンパク質濃縮物の約４％以下、重量で乾燥タンパク質濃縮物の約２％以下、重量で乾燥タンパク質濃縮物の約１％以下、重量で乾燥タンパク質濃縮物の約０．５％以下、重量で乾燥タンパク質濃縮物の約０．２％以下又は重量で乾燥タンパク質濃縮物の約０．１％以下を含む脂肪含有量を有してよい。一部の実施形態では、洗浄タンパク質産生物は、重量で乾燥タンパク質濃縮物の約０．１から約０．２％を含む脂肪含有量を有してよい。

タンパク質濃縮物
一部の実施形態は、収集されたマイクロクロップ（例えば、水生植物種、アオウキクサ、藻類種）のバイオマスからの可溶性タンパク質産生物（例えば、第１可溶性タンパク質２５０、第２可溶性タンパク質２５６、シュウ酸が低減された濃縮タンパク質産生物２６２）及び／又は乾燥タンパク質濃縮物（集合的に「タンパク質濃縮物」）の産生のための工程に関する。工程は、任意の望ましいタンパク質収量（例えば、最大収量、選択された収量）を達成するために構成又は実施されてよい。一部の実施形態では、タンパク質濃縮物のタンパク質濃度は、重量でタンパク質濃縮物の約３０％より高い、又は約４０％より高い、又は約５０％より高い、又は５５％より高い、又は約６０％より高い、又は６５％より高い、又は約７０％より高い、又は約７５％より高い、又は約８０％より高い。タンパク質濃縮物の残部は、炭水化物、繊維、脂肪、ミネラル、又はその任意の組合せを含んでよい。タンパク質濃縮物は、動物飼料及び／又はヒト消費のために好適である。例えば、タンパク質濃縮物は、個々に又は原料及び添加物のいずれかとして多数のヒト食品において現在使用されているタンパク質単離物（例えば、ダイズ、エンドウマメ、乳清）のための有効な代替物として役立つ可能性がある。一部の実施形態により、タンパク質濃縮物のタンパク質組成は、天然の又は天然に近い形態であってよい。例えば、タンパク質濃縮物のタンパク質組成物は、＜２％変性タンパク質、又は＜４％変性タンパク質、＜６％変性タンパク質、又は＜８％変性タンパク質、又は＜１０％変性タンパク質、又は＜１５％
変性タンパク質、又は＜２０％変性タンパク質、又は＜２５％変性タンパク質、又は＜３０％変性タンパク質、又は＜３５％変性タンパク質、又は＜４０％変性タンパク質、又は＜４５％変性タンパク質、又は＜５０％変性タンパク質を含んでよい。

一部の実施形態では、タンパク質濃縮物は、１つ又は複数の必須アミノ酸を含んでよい。例えば、タンパク質濃縮物は、ロイシン、イソロイシン、リシン、メチオニン、フェニルアラニン、スレオニン、トリプトファン、バリン、ヒスチジン、アルギニン、アスパラギン酸、セリン、グルタミン酸、プロリン、グリシン、アラニン、チロシン及びシステインから選択される１つ又は複数のアミノ酸を含んでよい。一部の実施形態では、必須アミノ酸の濃度は、少なくとも約１ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約１．５ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約２ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約２．５ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約３ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約４ｇ／１００ｇ乾燥物少なくとも約２．５ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約３ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約４ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約５ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約６ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約７ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約８ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約９ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約１０ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物であってよい。

一部の実施形態では、アミノ酸（例えば、必須アミノ酸）の濃度は、タンパク質濃縮物から回収されたタンパク質の重量分率として表されてよく、タンパク質１００ｇ当たり少なくとも約１ｇ、又はタンパク質１００ｇ当たり少なくとも約１．５ｇ、又はタンパク質１００ｇ当たり少なくとも約２ｇ、又はタンパク質１００ｇ当たり少なくとも約２．５ｇ、又はタンパク質１００ｇ当たり少なくとも約３ｇ、又はタンパク質１００ｇ当たり少なくとも約４ｇ、又はタンパク質１００ｇ当たり少なくとも約５ｇ、又はタンパク質１００ｇ当たり少なくとも約６ｇ、又はタンパク質１００ｇ当たり少なくとも約７ｇ、又はタンパク質１００ｇ当たり少なくとも約８ｇ、又はタンパク質１００ｇ当たり少なくとも約９ｇ、又はタンパク質１００ｇ当たり少なくとも約１０ｇである。

一部の実施形態では、タンパク質濃縮物は、１つ又は複数の分岐鎖アミノ酸（ＢＣＡＡ）を含んでよい。例えば、タンパク質濃縮物は、ロイシン、イソロイシン、バリン及びその組合せから選択される１つ又は複数のアミノ酸を含んでよい。一部の実施形態では、ＢＣＡＡの濃度は、少なくとも約１ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約１．５ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約２ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約２．５ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約３ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約４ｇ／１００ｇ乾燥物少なくとも約２．５ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約３ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約４ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約５ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約６ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約７ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約８ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約９ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、少なくとも約１０ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、少なくとも約１１ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、少なくとも約１２ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、少なくとも約１３ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、少なくとも約１４ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物、又は少なくとも約１５ｇ／１００ｇタンパク質濃縮物であってよい。一部の実施形態ではタンパク質濃縮物のＢＣＡＡタンパク質含有量は、タンパク質濃縮物の総アミノ酸の約１０％より高い、又は約１１％より高い、又は約１２％より高い、又は約１３％より高い、又は約１４％より高い、又は約１５％より高い、又は約２０％より高い、又は約２５％より高い、又は約３０％より高い、又は３５％より高い、又は約４０％より高い、又は４５％より高い、又は約５０％より高い、又は約５５％より
高い、又は約６０％より高い。一部の実施形態では、高タンパク質産生物のＢＣＡＡ含有量が総アミノ酸含有量の２０～２１％であり、総アミノ酸含有量の約１８～１９％を含有するエンドウマメ及びダイズマメ由来の代替タンパク質産生物のＢＣＡＡ含有量よりも約１１％高い（例えば、１８％から２０％への増加は１１％増加である）ことが見出された。一部の実施形態により、ＢＣＡＡタンパク質含有量は、Ａｓｓｏｃｉａｔｉｏｎ ｏｆ
Ｏｆｆｉｃｉａｌ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｃｈｅｍｉｓｔｓ（ＡＯＡＣ）Ｏｆｆｉｃｉａｌ Ｍｅｔｈｏｄ ９９４．１２．に基づくアミノ酸プロファイルのイオン交換クロマトグラフィーを使用して評価され得る。

一部の実施形態により、タンパク質濃縮物は、（ａ）カルシウムを増加させた第１培地中でマイクロクロップを培養すること、又は（ｂ）１つ又は複数の抗光合成色素を含む第１培地中でマイクロクロップを培養すること、又は（ｃ）浸漬すること、又は（ｄ）緩衝すること、又は（ｅ）溶解バイオマスからシュウ酸カルシウムを沈殿させること、又は（ｆ）第１ジュースからシュウ酸カルシウムを沈殿させること、又は（ｇ）第１ジュースをろ過すること、又はその任意の組合せも含まない方法と比較して低減されたシュウ酸（Ｈ_２Ｃ_２Ｏ_４又はＨＯＯＣＣＯＯＨ）含有量を有してよい。一部の実施形態では、タンパク質濃縮物（例えば、可溶性マイクロクロップタンパク質）は、約０．６％ＤＭＢ未満、約０．５５％ＤＭＢ未満、約０．５％ＤＭＢ未満、又は約０．４５％ＤＭＢ未満、又は約０．４％ＤＭＢ未満、又は約０．３５％ＤＭＢ未満、又は約０．３％ＤＭＢ未満、又は約０．２５％ＤＭＢ未満、又は約０．２％ＤＭＢ未満、又は約０．１５％ＤＭＢ未満、又は約０．１％ＤＭＢ未満、又は約０．０５％ＤＭＢ未満、又は約０．０４％ＤＭＢ未満、又は約０．０３％ＤＭＢ未満、又は約０．０２％ＤＭＢ未満のシュウ酸含有量（総シュウ酸含有量は乾燥重量ベース（ＤＭＢ）で算出される）を有してよい。一部の実施形態では、タンパク質濃縮物は、約０．０２％ＤＭＢから約０．６％ＤＭＢ、又は約０．０２％ＤＭＢから約０．５％ＤＭＢ、又は約０．０２％ＤＭＢから約０．４％ＤＭＢ、又は約０．０２％ＤＭＢから約０．３％ＤＭＢ、又は約０．０２％ＤＭＢから約０．２％ＤＭＢ、又は約０．０２％ＤＭＢから約０．１５％ＤＭＢ、又は約０．０２％ＤＭＢから約０．１％ＤＭＢのシュウ酸含有量を有してよい。一部の実施形態では、タンパク質濃縮物は、０．１％ＤＭＢ以下のシュウ酸含有量を有してよい。一部の実施形態により、タンパク質濃縮物は、０．０５％ＤＭＢ以下のシュウ酸含有量（例えば、総シュウ酸含有量）を有してよい。

一部の実施形態により、タンパク質濃縮物は、（ａ）カルシウムを増加させた第１培地中でマイクロクロップを培養すること、又は（ｂ）１つ又は複数の抗光合成色素を含む第１培地中でマイクロクロップを培養すること、又は（ｃ）浸漬すること、又は（ｄ）緩衝すること、又は（ｅ）溶解バイオマスからシュウ酸カルシウムを沈殿させること、又は（ｆ）第１ジュースからシュウ酸カルシウムを沈殿させること、又は（ｇ）第１ジュースを精密ろ過すること、又はその任意の組合せも含まない方法と比較して低減されたシュウ酸塩（Ｃ_２Ｏ_４ ^２－）含有量を有してもよい。

一部の実施形態では、タンパク質濃縮物は、重量でタンパク質濃縮物の約５０％未満、又は約４０％未満、又は約３０％未満、又は約２５％未満、又は約２０％未満、又は約１５％未満、又は約１０％未満、又は約５％未満、又は約４％未満、又は約３％未満、又は約２％未満、又は約１％未満の脂肪含有量を有してよい。一部の実施形態では、タンパク質濃縮物は、重量でタンパク質濃縮物の約１％から約１０％、又は約１０％から約２０％、又は約２０％から約３０％、又は約３０％から約４０％、又は約４０％から約５０％の脂肪含有量を有してよい。一部の実施形態では、タンパク質濃縮物は、重量でタンパク質濃縮物の約１％から約５０％、又は約２％から約４０％、又は約５％から約３０％、又は約８％から約２０％、又は約１０％から約１５％の脂肪含有量を有してよい。タンパク質濃縮物は、望ましい脂肪含有量（例えば、より高い又はより低い濃度、望ましい脂肪組成）に合致させるためにさらに処理されてよい。

一部の実施形態により、タンパク質濃縮物は、無機鉱物要素を含有する残渣からなる灰分を含んでよい。一部の実施形態では、灰分は、有機物質を除去するためにタンパク質濃縮物を高温（例えば、≧５００℃）で燃焼させることによって決定され得る。一部の実施形態では、タンパク質濃縮物は、重量でタンパク質濃縮物の約５０％未満、又は約４０％未満、又は約３０％未満、又は約２５％未満、又は約２０％未満、又は約１５％未満、又は約１０％未満、又は約５％未満、又は約４％未満、又は約３％未満、又は約２％未満、又は約１％未満の灰分を有してよい。一部の実施形態では、タンパク質濃縮物は、重量でタンパク質濃縮物の約１％から約１０％、又は約１０％から約２０％、又は約２０％から約３０％、又は約３０％から約４０％、又は約４０％から約５０％の灰分を有してよい。一部の実施形態では、タンパク質濃縮物は、重量でタンパク質濃縮物の約１％から約５０％、又は約２％から約４０％、又は約３％から約３０％、又は約３％から約２０％、又は約３％から約１５％、又は約３％から約１０％、又は約５％から約１０％、又は約５％から約１５％の灰分を有してよい。タンパク質濃縮物は、望ましい灰分（例えば、より高い又はより低い濃度、望ましい灰組成）に合致させるためにさらに処理されてよい。

一部の実施形態により、タンパク質濃縮物は、重量でタンパク質濃縮物の約５０％未満、又は約４０％未満、又は約３０％未満、又は約２５％未満、又は約２０％未満、又は約１５％未満、又は約１０％未満、又は約５％未満、又は約４％未満、又は約３％未満、又は約２％未満、又は約１％未満の炭水化物含有量を有してよい。一部の実施形態では、タンパク質濃縮物は、重量でタンパク質濃縮物の約１％から約１０％、又は約１０％から約２０％、又は約２０％から約３０％、又は約３０％から約４０％、又は約４０％から約５０％の炭水化物含有量を有してよい。一部の実施形態では、タンパク質濃縮物は、重量でタンパク質濃縮物の約１％から約５０％、又は約２％から約４０％、又は約５％から約３０％、又は約８％から約２０％、又は約１０％から約１５％の炭水化物含有量を有してよい。タンパク質濃縮物は、望ましい炭水化物含有量（例えば、より高い又はより低い濃度、所望の炭水化物組成物）に合致するようにさらに処理されてよい。

一部の実施形態では、タンパク質濃縮物は、重量でタンパク質濃縮物の約２０％未満、又は約１５％未満、又は約１０％未満、又は約８％未満、又は約５％未満、又は約４％未満、又は約３％未満、又は約２％未満、又は約１％未満の繊維含有量を有してよい。タンパク質濃縮物は、望ましい繊維含有量（例えば、より高い又はより低い濃度、望ましい繊維組成）に合致するようにさらに処理されてよい。

例えば、本明細書に記載の工程によって産生された乾燥タンパク質濃縮物は、表２に要約した内容物を含んでよい。

一部の実施形態では、産生物及び／又は工程は、タンパク質濃縮物の他の特徴（例えば、粒子サイズ、細菌仕様）が所望の判定基準に合致するように構成若しくは実施されてよく、及び／又は意図する目的のために好適であってよい。

一部の実施形態により、タンパク質濃縮物は、約３０μｍ、又は約４０μｍ、又は約５０μｍ、又は約６０μｍ、又は約７０μｍ、又は約８０μｍ、又は約９０μｍ、又は約１００μｍ、又は約１１０μｍ、又は約１２０μｍ、又は約１３０μｍ、又は約１４０μｍ、又は約１５０μｍ、又は約１６０μｍ、又は約１７０μｍ、又は約１８０μｍ、又は約１９０μｍ、又は約２００μｍ、又は約２２５μｍ、又は約２５０μｍ、又は約２７５μｍ、又は約３００μｍ、又は約３２５μｍ、又は約３５０μｍ、又は約３７５μｍ、又は約４００μｍ、又は約４２５μｍ、又は約４５０μｍ、又は約４７５μｍ、又は約５００μｍのメッシュサイズ（例えば、タンパク質濃縮物全体の大部分又はすべての粒子が平均ポアサイズを有するメッシュを通る）を有してよい。一部の実施形態では、タンパク質濃縮物は、約３０μｍから約５００μｍ、又は約３０μｍから約３００μｍ、又は約５０μｍから約３００μｍ、又は約７０μｍから約３００μｍ、又は約１００μｍから約３００μｍ、又は約３０μｍから約２００μｍ、又は約５０μｍから約２００μｍ、又は約７０μｍから約２００μｍ、又は約１００μｍから約２００μｍ、又は約３０μｍから約１９０μｍ、又は約５０μｍから約１９０μｍ、又は約７０μｍ又は約１９０μｍ、又は約１００μｍから約１９０μｍ、又は約３０μｍから約１８０μｍ、又は約５０μｍから約１８０μｍ、又は約７０μｍから約１８０μｍ、又は約１００μｍから約１８０μｍ、又は約３０μｍから約１７０μｍ、又は約５０μｍから約１７０μｍ、又は約７０μｍから約１７０μｍ、又は約１００μｍから約１７０μｍの範囲のメッシュサイズを有してよい。

一部の実施形態により、タンパク質濃縮物は、約４００ｋｇ／ｍ^３、又は約４０５ｋｇ／ｍ^３、又は約４１０ｋｇ／ｍ^３、又は約４１５ｋｇ／ｍ^３、又は約４２０ｋｇ／ｍ^３、又は約４２５ｋｇ／ｍ^３、又は約４３０ｋｇ／ｍ^３、又は約４３５ｋｇ／ｍ^３、又は約４４０ｋｇ／ｍ^３、又は約４４５ｋｇ／ｍ^３、又は約４５０ｋｇ／ｍ^３の密度を有してよい。

一部の実施形態では、タンパク質濃縮物は、少なくとも約３５％、又は少なくとも約４０％、又は少なくとも約４５％、又は少なくとも約５０％、又は少なくとも約５５％、又
は少なくとも約６０％、又は少なくとも約６５％、又は少なくとも約７０％、又は少なくとも約７５％の溶解度値（％水溶性窒素）を有してよく、ここでこの文中の「約」は指定の濃度±５％を含む。溶解度値は、Ｆ．Ｖｏｊｄａｎｉ、タンパク質機能の検査方法（Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ｔｅｓｔｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｔｙ）１１～６０（Ｇ．Ｍ．Ｈａｌｌ、ｅｄ．、１９９６）に記載の窒素溶解指数（ＮＳＩ）法を使用して決定され得る。

一部の実施形態により、タンパク質濃縮物は、少なくとも約３５、又は少なくとも約４０、又は少なくとも約４５、又は少なくとも５０、又は少なくとも約５５、又は少なくとも約６０、又は少なくとも約６５、又は少なくとも約７０、又は少なくとも約７５の分散性値（％水分散性タンパク質／％総タンパク質）を有してよく、ここでこの文中の「約」は±５を含む。分散性値は、Ｆ．Ｖｏｊｄａｎｉ、タンパク質機能の検査方法（Ｍｅｔｈｏｄｓ ｏｆ Ｔｅｓｔｉｎｇ Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｆｕｎｃｔｉｏｎａｌｉｔｙ）１１～６０（Ｇ．Ｍ．Ｈａｌｌ、ｅｄ．、１９９６）に記載のタンパク質分散指数（ＰＤＩ）を使用して決定され得る。

一部の実施形態では、細菌の標準平板菌数は、約１００，０００コロニー形成単位（ｃｆｕ）／ｇ未満、又は約８０，０００ｃｆｕ／ｇ未満、又は約６０，０００ｃｆｕ／ｇ未満、又は約５０，０００ｃｆｕ／ｇ未満、又は約４０，０００ｃｆｕ／ｇ未満、又は約３０，０００ｃｆｕ／ｇ未満、又は約２５，０００ｃｆｕ／ｇ未満、又は約２０，０００ｃｆｕ／ｇ未満、又は約１５，０００ｃｆｕ／ｇ未満、又は約１０，０００ｃｆｕ／ｇ未満、又は約５，０００ｃｆｕ／ｇ未満、又は約１０００ｃｆｕ／ｇ未満、又は約５００ｃｆｕ／ｇ未満であってよい。タンパク質濃縮物がいくらかの大腸菌を含む場合、細菌は検出不能及び／又は非感染性であるような低いレベルで存在する可能性がある。タンパク質濃縮物がいくらかのサルモネラ種（Ｓａｌｍｏｎｅｌｌａ ｓｐｐ．）を含む場合、細菌は検出不能及び／又は非感染性であるような低いレベルで存在する可能性がある。タンパク質濃縮物がいくらかの酵母／カビを含む場合、微生物数は約５００／ｇ未満、又は約４００／ｇ未満、又は約３００／ｇ未満、又は約２５０／ｇ未満、又は約２００／ｇ未満、又は約１５０／ｇ未満、又は約１００／ｇ未満、又は約５０／ｇ未満である可能性がある。

一部の実施形態では、タンパク質濃縮物は、さまざまな大きさの業界標準の袋又はドラム缶のいずれかに包装及び／又は密封されてよい。業界標準規格の密封方法は、適切な保存可能期間及び発送条件を確実にするために使用されてよい。袋又はドラム缶は、例えば、その使用意図、保存可能期間、推奨保存条件、発送条件、組成など、又はこれらの組合せに関する印刷された説明書又は仕様書を含んでよい。一部の実施形態により、抗酸化物質（例えば、ローズマリー抽出物）は、包装の前にタンパク質濃縮物と混合されてよい。

第１固形及び／又は固形混合物の加工
第１固形（例えば、第１ポーション、第２ポーション）及び／又は固形混合物（例えば、第１ポーション、第２ポーション）は、１つ又は複数の高炭水化物産生物を生成するために処理されてよい。既に記載のとおり、固形混合物は、１つ又は複数の分離工程（例えば、２３０／２３６／２４２）後に残る第１固形（例えば、２３４）、第１ケーキ（例えば、２４０）、第２ケーキ（例えば、２４６）、又はその任意の組合せの１つ若しくは複数を含む場合がある。高炭水化物産生物は、燃料供給原料として好適な乾燥バイオクルード産生物、ヒト若しくは動物飼料補充物（例えば、アオウキクサミール）として好適な高炭水化物ミールを含み得る。臭気吸収剤及び／又は吸湿剤として好適な産生物（例えば、動物寝わら又は敷きわら）、及び多糖類産生物（例えば、アピオガラクツロナン及び／又はオリゴガラクツロニド）。これらの産生物に関連する方法及び系は、参照により本明細書に組み込まれる米国仮特許出願第６２／１７３，６４３号；第６２／１７３，６４５号；及び第６２／１８９，０４０号に開示されている。

熱交換
一部の実施形態により、熱エネルギー交換装置（例えば、熱交換器）は、マイクロクロップ（例えば、アオウキクサ）からの濃縮タンパク質（例えば、シュウ酸含有量が低減された濃縮タンパク質）及び／又は高炭水化物産生物の産生のために必要なエネルギー流入全体を減少させ得る。一部の実施形態では、冷却流（例えば、レシピエント流）は、ドナー流熱エネルギーの少なくとも一部を冷却流が吸収するように、熱エネルギーを有するドナー流に近接して流れるように方向付けられてよい。一部の実施形態により、レシピエント流は、ドナー流熱エネルギーの少なくとも一部をレシピエント流が吸収するように、熱エネルギーを有するドナー流に近接して流れるように方向付けられてよい。

一部の実施形態では、レシピエント流は、溶解バイオマス（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、ジュース画分（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、第１ジュース（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、第１可溶性タンパク質画分（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、第１リジェクト流、第２可溶性タンパク質画分（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、第２リジェクト流、及び透過物の少なくとも１つであってよい。一部の実施形態では、レシピエント流は冷却流であってよい。一部の実施形態により、溶解バイオマス（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、ジュース画分（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、第１ジュース（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、第１可溶性タンパク質画分（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、第１リジェクト流、第２可溶性タンパク質画分（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、第２リジェクト流、及び透過物の少なくとも１つは、冷却流を形成するように冷却されてよい。レシピエント流（例えば、冷却流）は、使用時に室温より低い温度（例えば、約１２℃）を有してよい。一部の実施形態では、レシピエント流（例えば、冷却流）は、使用時に約３０℃未満、又は約２０℃未満、又は約１５℃未満、又は約１０℃未満、又は約５℃未満、又は約２℃未満、又は約１℃未満、又は約０℃未満の温度を有してよい。一部の実施形態では、レシピエント流（例えば、冷却流）は、使用時に約０℃から約１０℃の間、又は約５℃から約１５℃の間、又は約１０℃から約２０℃、又は１５℃から約２５℃の間、又は約２０℃から約３０℃の間の温度を有してよい。一部の実施形態では、レシピエント流（例えば、冷却流）は、約１２℃の温度を有してよい。一部の実施形態により、レシピエント流（例えば、冷却流）は、ドナー流より低い温度を有してよい。

一部の実施形態では、ドナー流は、溶解バイオマス（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、ジュース画分（例えば、第１ポーション、第２ポーション）又は第１ジュース（例えば、第１ポーション、第２ポーション）の少なくとも１つを含んでよい。一部の実施形態により、ドナー流は、レシピエント流より高い温度を有してよい。一部の実施形態では、ドナー流は、室温を超える温度（例えば、約５０℃）を有してよい。一部の実施形態では、ドナー流は、使用時に約２０℃を超える、又は約２５℃を超える、又は約３０℃を超える、又は約３５℃を超える、又は約４０℃を超える、又は約４５℃を超える、又は約５０℃を超える、又は約５５℃を超える、又は約６０℃を超える、又は約６５℃を超える、又は約７０℃を超える、又は約７５℃を超える、又は約８０℃を超える、又は約８５℃を超える、又は約９０℃を超える、又は約９５℃を超える、又は約１００℃を超える温度を有してよい。一部の実施形態では、ドナー流は、使用時に約４０℃から約５０℃の間、又は約４５℃から約５５℃の間、又は約５０℃から約６０℃の間の温度を有してよい。一部の実施形態により、ドナー流は、約７５℃から約８０℃の間、又は約８０℃から約８５℃の間、又は約８５℃から約９０℃の間、又は約９０℃から約９５℃の間、又は約９５℃から約１００℃の間の温度を有してよい。一部の実施形態では、ドナー流は、約５０℃から約８０℃の間、又は約５５℃から約８５℃の間、又は約６０℃から約９０℃の間、又は約６５℃から約９５℃の間、又は約７０℃から約１００℃の間の温度を有してよい。

一部の実施形態では、熱エネルギーは、マイクロクロップ（例えば、アオウキクサ）からの濃縮タンパク質及び／又は高炭水化物産生物の産生の際に１つ又は複数の工程によって生成されてよい。例えば、熱エネルギーは、（１）濃縮タンパク質の乾燥、（２）高炭水化物産生物の乾燥並びに／又は（３）冷却流を生成するための、溶解バイオマス（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、ジュース画分（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、第１ジュース（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、第１可溶性タンパク質画分（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、第１リジェクト流、第２可溶性タンパク質画分（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、第２リジェクト流、及び透過物の少なくとも１つの冷却、によって生成されてよい。一部の実施形態により、熱エネルギーは、熱交換器との熱伝達において生成されてよい。例えば、ジュース画分（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、第１ジュース（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、第１可溶性タンパク質画分（例えば、第１ポーション、第２ポーション）、第２可溶性タンパク質画分（例えば、第１ポーション、第２ポーション）の少なくとも１つの冷却は、熱交換器との熱伝達において実施されてよい。一部の実施形態では、洗浄溶液、第１リジェクト流、第２リジェクト流、及び透過物の少なくとも１つの加熱は、熱交換器との熱伝達において実施されてよい。一部の実施形態では、濃縮タンパク質の乾燥及び／又は高炭水化物産生物の乾燥は、熱交換器との熱伝達において実施されてよい。

図１Ａ、１Ｂ、１Ｃ及び１Ｄ
図１Ａ、１Ｂ、１Ｃ及び１Ｄは、本開示の具体的な実施形態例によるシュウ酸含有量が低減されたタンパク質濃縮物の産生のために、マイクロクロップ（例えば、水生植物種、アオウキクサ、藻類種）を増殖、収集及び分離するための工程１００を例示する模式図である。

図１Ａ、１Ｂ、１Ｃ及び１Ｄは、第１培地１０２中でのマイクロクロップ（例えば、アオウキクサ）の培養を含む、シュウ酸含有量が低減されたタンパク質濃縮物の産生のための工程１００の実施形態例を例示している。一部の実施形態では、第１培地は、カルシウムを増加させた第１培地（例えば、≧約２０ｐｐｍから約１２０ｐｐｍのカルシウム濃度を有する）及び／又は１つ又は複数の抗光合成色素を含み得る。一部の実施形態により、１つ又は複数の抗光合成色素は少なくとも１つの他の水生生物の増殖を抑制するために十分な容量又は濃度で加えられてよい。一部の実施形態では、１つ又は複数の抗光合成色素は、３．５ｐｐｍまでの濃度で加えられてよい。工程１００は、マイクロクロップを収集すること１０４をさらに含む。一部の実施形態では、収集の際に、第１培地は、バイオマスから分離され（例えば、静的排出、振動分離機）、分離された第１培地の少なくとも一部はバイオリアクター系に又は追加的保存容器（例えば、容器又は池）に戻して再利用され（１０６）得る。

図１Ｂ及び図１Ｄに例示されるとおり、一部の実施形態では、収集されたバイオマスは、第２培地（例えば、水、蒸留水、逆浸透若しくはナノろ過水、栄養組成物、及び／又は再利用液２６０、２５４）中に浸漬されて（１０８）よい。一部の実施形態により、第２培地は、低カルシウム組成（例えば、≦約５ｐｐｍのカルシウム濃度を有する）を有するように構成されてよい。一部の実施形態では、第２培地は、（１）低窒素組成（例えば、≦約１ｐｐｍの窒素濃度を有する）又は（２）低カルシウム組成（例えば、≦約５ｐｐｍのカルシウム濃度を有する）又は（３）低窒素組成物（例えば、≦約１ｐｐｍの窒素濃度を有する）及び低カルシウム組成（例えば、≦約５ｐｐｍのカルシウム濃度を有する）を有するように構成されてよい。一部の実施形態では、バイオマスを浸漬することは、バイオマススラリーを形成するために、かき混ぜながら又はかき混ぜずに長時間（例えば、２４時間）にわたって浸漬してバイオマスを第２培地中に浸すことを含んでよい。

一部の実施形態により、図１Ｂ及び図１Ｃに例示されるとおりバイオマスは、第３培地（例えば、１１０）中に緩衝されてよい。一部の実施形態により、第３培地は、水、蒸留水、逆浸透、ナノろ過水、及び／又は任意の望ましい割合の再利用液（例えば、濾過２６０、２５４からのリジェクト流）を含んでよい。一部の実施形態では、バイオマスを緩衝することは、かき混ぜながら又はかき混ぜずに長時間（例えば、２４時間）にわたってバイオマスを第３培地中に浸すことを含んでよい。

一部の実施形態では、図１Ａ、１Ｂ、１Ｃ及び１Ｄに例示されるとおり、バイオマスを処理することは、洗浄手順１１２を含んでよい。洗浄手順１１２は：（１）収集後（図１Ａ）；又は（２）収集及び浸漬後（図１Ｂ）；又は（３）収集及び緩衝後（図１Ｃ）；又は（４）収集、浸漬及び緩衝後（図１Ｄ）にバイオマスに実施されてよい。バイオマスを洗浄することは、タンパク質純度及び／又は収量を増加させ得る。一部の実施形態では、洗浄手順は、バイオマスの少なくとも１つの表面について洗浄溶液（例えば、水、増殖培地、抗菌性溶液）に曝露する（例えば、浸す、スプレーする）ことによって実施されてよい。一部の実施形態では、洗浄溶液は、スラリーを形成するためにバイオマス（例えば、第１ポーション、第２ポーション）と混ぜ合わされてよい。一部の実施形態では、バイオマスは、第１洗浄溶液、第２洗浄溶液、第３洗浄溶液、又はその任意の組合せで洗浄されてよい。洗浄溶液（例えば、第１洗浄溶液、第２洗浄溶液、及び／又は第３洗浄溶液）の一部又はすべては、バイオマスから分離され、集められ、再使用／再利用されて（１１４）よい。一部の実施形態では再利用洗浄溶液は、一部の実施形態によるバイオリアクター系１０２において増殖培地（例えば、第１培地）として使用されてよい。

図１Ａ、１Ｂ、１Ｃ及び１Ｄに例示されるとおり、一部の実施形態により、バイオマスは、溶解バイオマス１２２を形成するために溶解されて（１２０）よい。溶解１２０は：（１）収集後（１０４）；又は（２）収集及び浸漬後（１０８）；又は（３）収集及び緩衝後（１１０）；又は（４）収集、浸漬及び緩衝後；又は（５）収集及び洗浄１１２後（図１Ａ）；又は（６）収集、浸漬及び洗浄後（図１Ｂ）；又は（７）収集、緩衝及び洗浄後（図１Ｃ）；又は（８）収集、浸漬、緩衝及び洗浄後（図１Ｄ）にバイオマスに実施されてよい。一部の実施形態により、溶解１２０は、機械的、化学的、及び／又は超音波（例えば、ソニケーション）法の組合せを使用して達成され得る。溶解１２０は、例えば、刻むこと、断片化すること、粉砕すること、圧力をかけること、引き裂くこと、超音波処理（例えば、ソニケーション）、浸透圧による溶解、生物学的構造を分解する化学的処理、又はその任意の組合せを含んでよい。一部の実施形態では、溶解１２０は、機械的方法（挽くとも称される）、例えば、溶解バイオマスを生成するためにバイオマスを挽くこと、グラインデイング又は断片化することによって達成される。溶解工程１２０は、例えば、せん断ミル、ボールミル、コロイドミル、ナイフミル、ハンマーミル、グラインディングミル、ピューレマシン、フィルタープレス、メカニカルプレス、又はその任意の組合せを使用して達成され得る。一部の実施形態では、溶解は、室温より低い温度（例えば、１２℃）で実施されてよい。

図１Ａ、１Ｂ及び１Ｃ及び１Ｄに例示されるとおり、バイオマス（例えば、アオウキクサ）は、ジュース画分１２６及び固形画分１２８を生成するために分離されて（１２４）よい。ジュース画分（例えば、第１ポーション、第２ポーション）は、高タンパク質液及び／又は少なくともおよそいくらかの固形粒子（例えば、炭水化物、繊維）を含んでよい。ジュース画分及び固形画分を形成するためにバイオマスを分離することは、圧力をかけること（例えば、ベルトプレス、フィルタープレス）、遠心分離、濾過、加圧濾過又はその任意の組合せを含んでよい。バイオマスを分離するための互換的ユニット操作は、例えば、デカンター遠心分離、ベルトプレス、ファンプレス、ロータリープレス、スクリュープレス、フィルタープレス、フィニッシャープレス、又はその任意の組合せを含む。

バイオマスを分離することは、任意の望ましい温度で実施されてよい。一部の実施形態では、分離は、例えば、タンパク質分解活性を減少させるために、室温より低い温度（例えば、１２℃）で実施されてよい。

一部の実施形態により、図１Ａ、１Ｂ及び１Ｃに例示されるとおり、少なくとも一部の可溶性シュウ酸は、シュウ酸カルシウムへの転換及び沈殿１２３によって溶解バイオマスから除去されてよい。一部の実施形態では、溶解バイオマスからシュウ酸塩を沈殿させることは、溶解バイオマスの少なくとも一部を少なくとも１つのカルシウム塩（例えば、塩化カルシウム、酢酸カルシウム）と混合することを含み得る。溶解バイオマスからシュウ酸塩を沈殿させることは、一部の実施形態では、溶解バイオマスの少なくとも一部を炭酸カルシウム溶液又は水酸化カルシウム溶液と混合することを含み得る。沈殿されたシュウ酸塩は、一部の実施形態により、遠心分離及び／又は濾過によってバイオマスから除去されてよい。

一部の実施形態により、図１Ｄに例示されるとおり、少なくとも一部の可溶性シュウ酸は、シュウ酸カルシウムへの転換及び沈殿１２７によってジュース画分から除去されてよい。一部の実施形態では、ジュース画分を沈殿させることは、ジュース画分の少なくとも一部を少なくとも１つのカルシウム塩（例えば、塩化カルシウム、酢酸カルシウム）と混合することを含み得る。ジュース画分を沈殿させることは、一部の実施形態では、ジュース画分の少なくとも一部を炭酸カルシウム溶液又は水酸化カルシウム溶液と混合することを含み得る。

一部の実施形態では、ジュース画分１２６は少なくとも１つのポリフェノールの低減のための処理ステップ（ａ）を受けてよい。ポリフェノール低減工程は、ジュース画分１２６を単一の又は一連の（例えば、少なくとも２個、少なくとも３個）のイオン交換レジンに通すことを含んでよい。一部の実施形態ではポリフェノール低減工程は、ジュース画分１２７を沈殿させることの前又は後のいずれかで実施されてよい。一部の実施形態では、ポリフェノール低減工程は、ジュース画分１２６のポリフェノール（例えば、タンニン）含有量を少なくとも５％、又は少なくとも１０％、又は少なくとも１５％、又は少なくとも２０％、又は少なくとも２５％、又は少なくとも３０％、又は少なくとも３５％、又は少なくとも４０％、又は少なくとも４５％、又は少なくとも５０％、又は少なくとも５５％、又は少なくとも６０％、又は少なくとも６５％、又は少なくとも７０％低減できる。

一部の実施形態により、ジュース画分１２６は、溶媒洗浄（ｂ）を受けてよい。一部の実施形態では、溶媒洗浄は、ジュース画分１２７を沈殿させることの前又は後にのいずれかで実施されてよい。ジュース画分１２６の溶媒洗浄は、一部の実施形態では、少なくとも１つの溶媒（例えば、エタノール、メタノール）を含んでよい。一部の実施形態により、ジュース画分１２６の溶媒洗浄は、未洗浄対応物と比較して脂肪含有量の低減（例えば、重量で乾燥タンパク質濃縮物約２％以下）及び／又はクロロフィル含有量の低減（例えば、視覚的に知覚可能な緑色着色の低減）を生じ得る。

図２Ａ、２Ｂ及び２Ｃ
図２Ａ、２Ｂ及び２Ｃは、本開示の具体的な実施形態例によりマイクロクロップ（例えば、水生植物種、アオウキクサ、藻類種）から、シュウ酸含有量が低減されたタンパク質濃縮物を産生するための工程２００を例示する模式図である。

図２Ａ、２Ｂ及び２Ｃに例示されるとおり、一部の実施形態により、バイオマスは、溶解バイオマス２２２を形成するために溶解されて（２２０）よい。溶解２２０は：（１）収集１０４後；又は（２）収集及び浸漬１０８後；又は（３）収集及び緩衝後１１０後；
又は（４）収集、浸漬及び緩衝後；又は（５）収集及び洗浄後１１２（図１Ａ）；又は（６）収集、浸漬及び洗浄後（図１Ｂ）；又は（７）収集、緩衝及び洗浄後（図１Ｃ）；又は（８）収集、浸漬、緩衝、及び洗浄後（図１Ｄ）にバイオマスに実施されてよい。溶解１２０は、例えば、刻むこと、断片化すること、粉砕すること、圧力をかけること、引き裂くこと、超音波処理（例えば、ソニケーション）、浸透圧による溶解、生物学的構造を分解する化学的処理、又はその任意の組合せを含んでよい。溶解工程１２０は、例えば、せん断ミル、ボールミル、コロイドミル、ナイフミル、ハンマーミル、グラインディングミル、ピューレマシン、フィルタープレス、メカニカルプレス、又はその任意の組合せを使用して達成され得る。一部の実施形態では、溶解は、室温より低い温度（例えば、１２℃）で実施されてよい。

一部の実施形態により、図２Ｂに例示されるとおり、少なくとも一部の可溶性シュウ酸は、シュウ酸塩への転換及び沈殿２２３によって溶解バイオマスから除去されてよい。一部の実施形態では、溶解バイオマスからシュウ酸塩を沈殿させることは、溶解バイオマスの少なくとも一部を少なくとも１つのカルシウム塩（例えば、塩化カルシウム、酢酸カルシウム）と混合することを含み得る。溶解バイオマスからシュウ酸塩を沈殿させることは、一部の実施形態では、溶解バイオマスの少なくとも一部を炭酸カルシウム溶液又は水酸化カルシウム溶液と混合することを含み得る。沈殿されたシュウ酸塩は、一部の実施形態により、遠心分離及び／又は濾過によってバイオマスから除去されてよい。

図２Ａ、２Ｂ及び２Ｃに例示されるとおり、バイオマス（例えば、アオウキクサ）は、ジュース画分２２６及び固形画分２２８を生成するために分離されて（２２４）よい。ジュース画分（例えば、第１ポーション、第２ポーション）は、高タンパク質液及び／又は少なくともおよそいくらかの固形粒子（例えば、炭水化物、繊維）を含んでよい。ジュース画分及び固形画分を形成するためにバイオマスを分離することは、圧力をかけること（例えば、ベルトプレス、フィルタープレス）、遠心分離、濾過、加圧濾過又はその任意の組合せを含んでよい。バイオマスを分離するための互換的ユニット操作は、例えば、デカンター遠心分離、ベルトプレス、ファンプレス、ロータリープレス、スクリュープレス、フィルタープレス、フィニッシャープレス、又はその任意の組合せを含む。

バイオマスを分離することは、任意の望ましい温度で実施されてよい。一部の実施形態では、分離は、例えば、タンパク質分解活性及び／又は微生物増殖を減少させるために、室温より低い温度（例えば、１２℃）で実施されてよい。

一部の実施形態により、図２Ｃに例示されるとおり、少なくとも一部の可溶性シュウ酸は、シュウ酸カルシウムへの転換及び沈殿２２７によってジュース画分から除去されてよい。一部の実施形態では、ジュース画分を沈殿させることは、ジュース画分の少なくとも一部を少なくとも１つのカルシウム塩（例えば、塩化カルシウム、酢酸カルシウム）と混合することを含み得る。ジュース画分を沈殿させることは、一部の実施形態では、ジュース画分の少なくとも一部を炭酸カルシウム溶液又は水酸化カルシウム溶液と混合することを含み得る。沈殿されたシュウ酸塩は、一部の実施形態により、遠心分離及び／又は濾過によってバイオマスから除去されてよい。

図２Ａ、２Ｂ及び２Ｃに例示されるとおり、ジュース画分２２６は、一部の実施形態により、第１ジュース２３８及び第１ケーキ２４０を生成するために分離されて（２３６）よい。第１ジュースは、溶けたタンパク質を含んでよい。一部の実施形態では、ジュース画分を分離することは、遠心分離、濾過、加圧濾過、又はその任意の組合せを含んでよい。２つ以上のユニット操作（例えば、互換的ユニット操作）は、例えば、高速ディスクスタック遠心分離機、環状振動分離機、直線／傾斜運動振とう機、デカンター遠心分離機、フィルタープレス、加圧濾過装置、精密濾過、真空濾過、又はその任意の組合せを含んで
ジュース画分を分離するために使用されてよい。一部の実施形態では、精密濾過は、ジュース画分２２６を第１ジュース２３８及び第１ケーキ２４０に分離する（２３６）ために使用されてよい。一部の実施形態では、分離２３６は、室温より低い温度（例えば、１２℃）で実施されてよい。

一部の実施形態では、固形画分２２８は、第２ジュース２３２及び第１固形２３４を形成するためにさらに分離されて（２３０）よい。第２ジュース画分２３２は、高タンパク質液及び／又は少なくともいくらかの固形粒子（例えば、炭水化物、繊維）を含んでよい。第２ジュース２３２及び第１固形２３４を形成するために固形画分２２８を分離する（２３０）ことは、圧力をかけること（例えば、スクリュープレス）、遠心分離、濾過、加圧濾過又はその任意の組合せを含んでよい。固形画分を分離する（２３０）ための互換的ユニット操作は、例えば、デカンター遠心分離、ベルトプレス、ファンプレス、ロータリープレス、スクリュープレス、フィルタープレス、フィニッシャープレス、又はその任意の組合せを含む。

図２Ａ、２Ｂ及び２Ｃに示されるとおり、一部の実施形態により、マイクロクロップ（例えば、水生植物種、アオウキクサ、藻類種）を増殖、収集及び分離するための工程は、単一サイクルであってよく、サイクルの他の段階（例えば、ジュース画分の分離は第１ケーキをもたらす）で集められる第１ケーキ（例えば、２４０）及び第２ケーキ（例えば、２４６）の少なくとも１つは、固形混合物を形成するように第１固形と混ぜ合わされてよく、固形混合物はさらに処理されてよい。

一部の実施形態では、マイクロクロップ（例えば、水生植物種、アオウキクサ、藻類種）を増殖、収集及び分離するための工程は、前のサイクルで集められる第１ケーキ及び第２ケーキの１つ又は複数が次のサイクルからの固形画分と、固形画分の分離に先立って混ぜ合わされてよいような、複数サイクル又は連続工程であってよい。

図２Ａ、２Ｂ及び２Ｃに例示されるとおり、一部の実施形態では、第１ケーキ２４０及び第２ジュース２３２は、第３ジュース２４４及び第２ケーキ２４６を形成するように混ぜ合わされ、さらに分離されて（２４２）よい。第１ケーキ２４０、第２ジュース２３２、又はその任意の組合せを分離する（２４２）ことは、振動分離、遠心分離、濾過、加圧濾過、又はその任意の組合せを含んでよい。いくつかの異なる互換的ユニット操作は、例えば、高速ディスクスタック遠心分離機、環状振動分離機、直鎖状／傾斜運動振とう機、デカンター遠心分離機、フィルタープレス、加圧濾過装置、精密濾過、真空濾過、又はその任意の組合せを含んで分離するために使用されてよい。

図２Ａ、２Ｂ及び２Ｃに例示されるとおり、第１ジュース２３８、第３ジュース２４４又はその任意の組合せは、第１可溶性タンパク質産生物２５０及び第１リジェクト流２４８を生成するために１回又は複数回ろ過されて（２４６）よい。第１濾過は、精密濾過を含んでよい。一部の実施形態では、精密濾過のために好適なフィルターサイズは、≦約１０μｍ、又は≦約５μｍ、又は≦約３μｍ、又は≦約２μｍ、又は≦約１μｍ、又は≦約０．５μｍ、又は≦約０．４μｍ、又は≦約０．３μｍ、又は≦約０．２μｍ、又は≦約０．１μｍを含んでよい。第１可溶性タンパク質産生物は、室温より低い温度（例えば、１２℃）に冷却及び／又は保存されてよい。

一部の実施形態により、第１可溶性タンパク質２４６は、第２可溶性タンパク質２５６及び第２リジェクト流２５４を形成するため第２濾過２５２に供されてよい。第２濾過は、限外濾過、ナノ濾過及び／又は逆浸透濾過を含んでよい。一部の実施形態では、第２タンパク質産生物は、室温より低い温度（例えば、１２℃）に冷却及び／又は保存されてよい。

一部の実施形態では、工程は、第１可溶性タンパク質２５０、第２可溶性タンパク質２５６、又はその任意の組合せ（集合的に「可溶性タンパク質産生物」）の水分含有量を低減するために使用されてよい。一部の実施形態では、蒸発工程は、可溶性タンパク質産生物の水分含有量を低減するために使用されてよい。図２Ａ、２Ｂ及び２Ｃに示されるとおり、一部の実施形態では、可溶性タンパク質産生物（例えば、第２可溶性タンパク質）の水分含有量は、シュウ酸が低減された濃縮タンパク質産生物２６２を形成するためのナノ濾過又は逆浸透濾過２５８によって低減されてよい。ナノ濾過又は逆浸透濾過工程２５８の透過物は、一部の実施形態により、再利用されてよい（例えば、溶解２６０のための希釈液；洗浄溶液）。

可溶性タンパク質産生物（例えば、第１可溶性タンパク質２５０、第２可溶性タンパク質２５６、シュウ酸が低減された濃縮タンパク質産生物２６２）は、一部の実施形態により、乾燥タンパク質濃縮物を生成するために乾燥されて（２６４）よい。乾燥手順は、例えば、スプレー乾燥器、ダブルドラム乾燥器、フラッシュ乾燥器、蒸発器、又はその任意の組合せを含む装置を使用して実施されてよい。

一部の実施形態では、ジュース画分２２６、第１ジュース２４１、第２ジュース２３２、第３ジュース２４６及び／又は可溶性タンパク質２５１は、少なくとも１つのポリフェノールの低減のための処理ステップ（ａ）を受けてよい。ポリフェノール低減工程は、ジュース画分２２６、第１ジュース２４１、第２ジュース２３２、第３ジュース２４６及び／又は可溶性タンパク質２５１を一連（例えば、少なくとも２個、少なくとも３個）のイオン交換レジンに通すことを含んでよい。一部の実施形態では、ポリフェノール低減工程は、ジュース画分２２６、第１ジュース２４１、第２ジュース２３２、第３ジュース２４６及び／又は可溶性タンパク質２５１のポリフェノール（例えば、タンニン）含有量を少なくとも５％、又は少なくとも１０％、又は少なくとも１５％、又は少なくとも２０％、又は少なくとも２５％、又は少なくとも３０％、又は少なくとも３５％、又は少なくとも４０％、又は少なくとも４５％、又は少なくとも５０％、又は少なくとも５５％、又は少なくとも６０％、又は少なくとも６５％、又は少なくとも７０％低減できる。

一部の実施形態では、可溶性タンパク質２５１は、溶媒洗浄（ｂ）を受けてよい。溶媒洗浄（ｂ）は乾燥２５５に続いてよい。可溶性タンパク質産生物２５１の溶媒洗浄及び／又は乾燥２５５に続く溶媒洗浄は、一部の実施形態では少なくとも１つの溶媒（例えば、エタノール、メタノール）を含んでよい。一部の実施形態により、可溶性タンパク質産生物２５１の溶媒洗浄及び／又は乾燥２５５に続く溶媒洗浄は、未洗浄対応物と比較して脂肪含有量の低減（例えば、重量で乾燥タンパク質濃縮物の約２％以下）及び／又はクロロフィル含有量の低減（例えば、視覚的に知覚可能な緑色着色の低減）を生じ得る。

一部の実施形態では、第１固形２３４及び／又は固形混合物は、１つ又は複数の高炭水化物産生物を生成するためにさらに処理されてよい。

水生生物種からのタンパク質及び／又は高炭水化物産生物抽出系
本開示の実施形態は、水生生物種からタンパク質及び高炭水化物産生物を抽出する系も提供する。そのような系は、例えば：溶解バイオマスを生成するようにバイオマスを溶解するための溶解ユニット（例えば、１２０／２２０）；ジュース画分及び固形画分を生成するために溶解バイオマスを分離するための第１分離ユニット（例えば、２２４）；第１ジュース及び第１ケーキを形成するための第２分離ユニット（例えば、２３６）；第１固形及び第２ジュースを形成するための第３分離ユニット（例えば、２３０）；第２ケーキ及び第３ジュースを形成するための第４分離ユニット（例えば、２４２）；第１可溶性タンパク質及び第１リジェクト流を形成するための第１濾過ユニット（例えば、２４６）；
第２可溶性タンパク質及び第２リジェクト流を形成するための第２濾過ユニット（例えば、２５２）；濃縮タンパク質及び透過物を形成するための脱水ユニット（例えば、２５８）；乾燥タンパク質濃縮物を生成するために可溶性タンパク質産生物を乾燥させるためのタンパク質乾燥ユニット（例えば、２６４）を含んでよい。表４に要約されているのは、上に記載のユニットに含まれ得る器具である。

各ユニットについて列挙された器具は例示の目的のみであり、出願の範囲を限定することを意図しないことは理解される。これら又は他の器具若しくはユニットの具体的な組合せは、本出願の教示に基づいて意図する使用のためにそのような系に構成されてよい。

当業者は、本開示の範囲から逸脱することなく、パーツの形、サイズ、数、分離特徴、及び／又は配置において種々の変更を行うことができる。各開示の方法及び方法ステップは、任意の他の開示の方法又は方法ステップと関連して、一部の実施形態により任意の順序で実施されてよい。動詞「してよい（し得る、する場合がある）（ｍａｙ）」が記される場合、任意選択及び／又は許容状態を表すことを意図しているが、他に示す場合を除いてその使用は実施可能性のなんらかの欠如を示唆すると意図されない。当業者は、開示の組成物、デバイス及び／又は系の調製及び使用の方法において種々の変更を行うことができる。所望により、本開示の一部の実施形態は、他の実施形態を排除して実施されてよい。

同様に、範囲が提供される場合、開示の終点は、所望により又は具体的な実施形態によ
って要求されて厳密に及び／又は近似として扱われてよい（例えば「約」を伴わずに又は伴って読み取られる）。端点が近似である場合、変動の程度は範囲の桁に比例して変動してよい。例えば、一方で約５から約５０の範囲の内容での約５０の範囲の端点は、５０．５を含んでよいが５２．５又は５５を含まず、一方約０．５から約５０の範囲の内容での約５０の範囲の端点は、５５を含んでよいが６０も７５も含まない。一部の実施形態では、変動は、単純に規定値の＋／－１０％であってよい。加えて一部の実施形態では、範囲の端点を合わせる及び適合させることが望ましい場合がある。同様に一部の実施形態では、開示の各図（例えば１つ又は複数の例、表及び／又は図面）が、範囲の基準（例えば、示された値の＋／－約１０％、示された値の＋／－約５０％、示された値の＋／－約１００％）及び／又は範囲の端点を形成する場合がある。前者に関して、例、表及び／又は図面に記載された５０の値は、例えば、約４５から約５５、約２５から約１００、及び／又は約０から約１００の範囲の基準を形成する場合がある。

これらの等価物及び代替物は、明らかな変更及び修飾と共に本開示の範囲に含まれることが意図される。したがって、前述の開示は、添付の特許請求の範囲によって例示される本開示の範囲の例示であり、限定でないことが意図される。

表題、要約、背景及び見出しは、規制に従って、及び／又は読者の便宜のために提供されている。それらは、先行技術の範囲及び内容に関するいかなる承認並びにすべての開示の実施形態に適用可能ないかなる限定も含まない。

Claims (8)

1. 以下の：
   バイオマスを形成するために第１培地中でマイクロクロップを培養するステップであって、前記第１培地が（ｉ）少なくとも２０ｐｐｍの濃度のカルシウム、及び（ｉｉ）１つ又は複数の抗光合成色素、の少なくとも１つを含み、
   前記バイオマスを収集するステップ、並びに
   前記バイオマスから可溶性タンパク質を抽出するステップであって、以下の、
   前記バイオマスを溶解して、溶解したバイオマスを形成すること、
   前記溶解したバイオマスからシュウ酸塩を沈殿させること、
   前記溶解したバイオマスを分離して、ジュース画分と固形画分を生成させること、
   前記ジュース画分を分離して、第１ジュース及び第１ケーキを生成すること、
   前記第１ジュースを濾過して、第１可溶性タンパク質と第１リジェクト流を生成すること、
   を含む、可溶性マイクロクロップタンパク質を含む産生物を生成するためのマイクロクロップを含むバイオマスの培養及び処理を行う方法であって、
   前記可溶性タンパク質は０．６％ＤＭＢ未満のシュウ酸含有量を有する、
   方法。
2. 前記１つ又は複数の抗光合成色素が、（ｎ－エチル－ｎ－［４－［［４－［エチル［（３－スルホフェニル）メチル］アミノ］－フェニル］（２－スルホフェニル－メチレン）］２，５－シクロヘキサジエン－１－イリデン］－３－スルホベンゼンメタンアミニウムヒドロキシド内塩の二ナトリウム塩、（４Ｅ）－５－オキソ－１－（４－スルホナトフェニル）－４－［（４－スルホナトフェニル）ヒドラゾノ］－３－ピラゾールカルボキシラートの三ナトリウム塩、ジアゾニウム；２－［［４－［エチル－［（３－スルホナトフェニル）メチル］アミノ］フェニル］－［４－［エチル－［（３－スルホナトフェニル）メチル］アザニウミリデン］シクロヘキサ－２，５－ジエン－１－イリデン］メチル］ベンゼンスルホナ－ト、ベンジル－［４－［［４－［ベンジル（エチル）アミノ］フェニル］－（５－ヒドロキシ－２，４－ジスルホフェニル）メチリデン］シクロヘキサ－２，５－ジエン－１－イリデン］－エチルアザニウム、２－（１，３－ジオキソインデン－２－イル）キノリン－６，８－ジスルホナートの二ナトリウム塩、又はこれらの組合せから選択される、請求項１に記載の方法。
3. さらに、前記バイオマスを第２培地中に浸漬するステップであって、前記第２培地が、８ｐｐｍ未満のカルシウム源若しくは４ｐｐｍ未満の窒素源又は両方を含むステップ、並びに
   第３培地中で前記バイオマスを緩衝するステップを含む、請求項１に記載の方法。
4. 前記第１可溶性タンパク質が０．１％ＤＭＢ未満のシュウ酸含有量を有する、又は前記第１可溶性タンパク質が０．０５％ＤＭＢ未満のシュウ酸含有量を有する、請求項１に記載の方法。
5. さらに、前記第１可溶性タンパク質をろ過して、第２可溶性タンパク質及び第２リジェクト流を生成するステップを含む、請求項１に記載の方法。
   以下をさらに含む、請求項1記載の方法。
6. さらに、前記第２可溶性タンパク質をろ過して、濃縮タンパク質産生物及び透過物を生成するステップを含む、請求項５に記載の方法。
7. さらに、前記濃縮タンパク質産生物を乾燥して、乾燥タンパク質濃縮物を生成するステップであって、前記乾燥タンパク質濃縮物が重量で少なくとも５０％のタンパク質濃度を有するステップ、
   前記濃縮タンパク質産生物を乾燥して、乾燥タンパク質濃縮物を生成するステップであって、前記乾燥タンパク質濃縮物が少なくとも５０％の溶解度値を有するステップ、並びに
   前記濃縮タンパク質産生物を乾燥して、乾燥タンパク質濃縮物を生成するステップであって、前記乾燥タンパク質濃縮物が少なくとも５０％の分散性値を有するステップ
   のうちの少なくとも１つを含む、請求項６に記載の方法。
8. 前記マイクロクロップがアオウキクサ（Ｌｅｍｎａ）である、請求項１に記載の方法。

Images