JP7242650B2 - ヒト化C1q複合体を発現する非ヒト動物 - Google Patents
ヒト化C1q複合体を発現する非ヒト動物 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7242650B2 JP7242650B2 JP2020518013A JP2020518013A JP7242650B2 JP 7242650 B2 JP7242650 B2 JP 7242650B2 JP 2020518013 A JP2020518013 A JP 2020518013A JP 2020518013 A JP2020518013 A JP 2020518013A JP 7242650 B2 JP7242650 B2 JP 7242650B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- polypeptide
- human
- chimeric
- nucleic acid
- rodent
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 title claims description 44
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 claims description 847
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 claims description 837
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 claims description 837
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 claims description 802
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims description 478
- 101150065475 C1QA gene Proteins 0.000 claims description 287
- 101150104394 C1qc gene Proteins 0.000 claims description 280
- 101150084780 C1qb gene Proteins 0.000 claims description 275
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 claims description 269
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 claims description 257
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims description 231
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims description 220
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims description 220
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 205
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 182
- 239000000427 antigen Substances 0.000 claims description 161
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 claims description 161
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 claims description 161
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 89
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims description 88
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims description 86
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 85
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 claims description 39
- 229940000406 drug candidate Drugs 0.000 claims description 36
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims description 35
- 102000025171 antigen binding proteins Human genes 0.000 claims description 30
- 108091000831 antigen binding proteins Proteins 0.000 claims description 30
- 108010076504 Protein Sorting Signals Proteins 0.000 claims description 29
- 101100111905 Rattus norvegicus C1qa gene Proteins 0.000 claims description 29
- 230000024203 complement activation Effects 0.000 claims description 27
- 101100111903 Mus musculus C1qa gene Proteins 0.000 claims description 24
- 101100111913 Mus musculus C1qb gene Proteins 0.000 claims description 24
- 101100272891 Rattus norvegicus C1qc gene Proteins 0.000 claims description 24
- 230000008685 targeting Effects 0.000 claims description 24
- 101100111914 Rattus norvegicus C1qb gene Proteins 0.000 claims description 23
- 101100272890 Mus musculus C1qc gene Proteins 0.000 claims description 19
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 18
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 16
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 claims description 15
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 13
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 13
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 claims description 12
- 238000012216 screening Methods 0.000 claims description 10
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 claims description 5
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims description 4
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000002068 genetic effect Effects 0.000 claims description 2
- 210000001161 mammalian embryo Anatomy 0.000 claims description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 218
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 209
- 210000003128 head Anatomy 0.000 description 177
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 160
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 140
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 86
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 63
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 56
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 31
- 108700028369 Alleles Proteins 0.000 description 27
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 21
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 18
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 16
- 241001529936 Murinae Species 0.000 description 16
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 15
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 14
- 239000013598 vector Substances 0.000 description 14
- 238000012217 deletion Methods 0.000 description 13
- 230000037430 deletion Effects 0.000 description 13
- 210000004436 artificial bacterial chromosome Anatomy 0.000 description 12
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 12
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 11
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 11
- 238000011808 rodent model Methods 0.000 description 11
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 10
- 108700024394 Exon Proteins 0.000 description 10
- 241000288906 Primates Species 0.000 description 10
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 10
- 230000004540 complement-dependent cytotoxicity Effects 0.000 description 10
- 108020005345 3' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 9
- 108010047041 Complementarity Determining Regions Proteins 0.000 description 9
- 238000004520 electroporation Methods 0.000 description 9
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 9
- 210000004899 c-terminal region Anatomy 0.000 description 8
- 229960005091 chloramphenicol Drugs 0.000 description 8
- WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N chloramphenicol Chemical compound ClC(Cl)C(=O)N[C@H](CO)[C@H](O)C1=CC=C([N+]([O-])=O)C=C1 WIIZWVCIJKGZOK-RKDXNWHRSA-N 0.000 description 8
- 230000004154 complement system Effects 0.000 description 7
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 7
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 7
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 description 6
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 description 6
- 108060003951 Immunoglobulin Proteins 0.000 description 6
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 6
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 description 6
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 6
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 6
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 6
- 102000018358 immunoglobulin Human genes 0.000 description 6
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 6
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 6
- 241000282693 Cercopithecidae Species 0.000 description 5
- DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N Glycine Chemical compound NCC(O)=O DHMQDGOQFOQNFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 125000000539 amino acid group Chemical group 0.000 description 5
- 210000004443 dendritic cell Anatomy 0.000 description 5
- 210000004602 germ cell Anatomy 0.000 description 5
- 238000002744 homologous recombination Methods 0.000 description 5
- 230000006801 homologous recombination Effects 0.000 description 5
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 5
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 5
- 101100112922 Candida albicans CDR3 gene Proteins 0.000 description 4
- 102000006496 Immunoglobulin Heavy Chains Human genes 0.000 description 4
- 108010019476 Immunoglobulin Heavy Chains Proteins 0.000 description 4
- 108010065825 Immunoglobulin Light Chains Proteins 0.000 description 4
- 102000013463 Immunoglobulin Light Chains Human genes 0.000 description 4
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 4
- 108010003723 Single-Domain Antibodies Proteins 0.000 description 4
- 108091036066 Three prime untranslated region Proteins 0.000 description 4
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 4
- 230000001640 apoptogenic effect Effects 0.000 description 4
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 4
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 4
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 4
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 4
- 230000002949 hemolytic effect Effects 0.000 description 4
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 description 4
- 210000001539 phagocyte Anatomy 0.000 description 4
- 229940124598 therapeutic candidate Drugs 0.000 description 4
- 229940126585 therapeutic drug Drugs 0.000 description 4
- 239000013638 trimer Substances 0.000 description 4
- MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N (2S)-2-Amino-3-hydroxypropansäure Chemical compound OC[C@H](N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 2,3-bis(butanoylsulfanyl)propyl butanoate Chemical compound CCCC(=O)OCC(SC(=O)CCC)CSC(=O)CCC NHBKXEKEPDILRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 108020003589 5' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 3
- 102100030886 Complement receptor type 1 Human genes 0.000 description 3
- 241000699800 Cricetinae Species 0.000 description 3
- 101000727061 Homo sapiens Complement receptor type 1 Proteins 0.000 description 3
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N L-phenylalanine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N L-valine Chemical compound CC(C)[C@H](N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 3
- 108091026898 Leader sequence (mRNA) Proteins 0.000 description 3
- 241000699729 Muridae Species 0.000 description 3
- 108091081062 Repeated sequence (DNA) Proteins 0.000 description 3
- KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N Valine Natural products CC(C)C(N)C(O)=O KZSNJWFQEVHDMF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000009471 action Effects 0.000 description 3
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 235000018417 cysteine Nutrition 0.000 description 3
- XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N cysteine Natural products SCC(N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011161 development Methods 0.000 description 3
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 3
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 3
- -1 glutamic/aspartic Chemical compound 0.000 description 3
- 230000002163 immunogen Effects 0.000 description 3
- 230000002998 immunogenetic effect Effects 0.000 description 3
- 238000011835 investigation Methods 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 238000010172 mouse model Methods 0.000 description 3
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 3
- 210000004897 n-terminal region Anatomy 0.000 description 3
- COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N phenylalanine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=CC=C1 COLNVLDHVKWLRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000011552 rat model Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 230000002207 retinal effect Effects 0.000 description 3
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 3
- 210000004881 tumor cell Anatomy 0.000 description 3
- 239000004474 valine Substances 0.000 description 3
- 241000699725 Acomys Species 0.000 description 2
- 101001073212 Arabidopsis thaliana Peroxidase 33 Proteins 0.000 description 2
- 239000004475 Arginine Substances 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N Asparagine Natural products OC(=O)C(N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 2
- 238000011740 C57BL/6 mouse Methods 0.000 description 2
- 108020004705 Codon Proteins 0.000 description 2
- 108700040183 Complement C1 Inhibitor Proteins 0.000 description 2
- 102000055157 Complement C1 Inhibitor Human genes 0.000 description 2
- 108010034753 Complement Membrane Attack Complex Proteins 0.000 description 2
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 2
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 2
- YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N Epihygromycin Natural products OC1C(O)C(C(=O)C)OC1OC(C(=C1)O)=CC=C1C=C(C)C(=O)NC1C(O)C(O)C2OCOC2C1O YQYJSBFKSSDGFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108700028146 Genetic Enhancer Elements Proteins 0.000 description 2
- 241000699694 Gerbillinae Species 0.000 description 2
- 239000004471 Glycine Substances 0.000 description 2
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 description 2
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 2
- 101001123325 Homo sapiens Peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-beta Proteins 0.000 description 2
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 2
- XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N L-Cysteine Chemical compound SC[C@H](N)C(O)=O XUJNEKJLAYXESH-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P L-argininium(2+) Chemical compound NC(=[NH2+])NCCC[C@H]([NH3+])C(O)=O ODKSFYDXXFIFQN-BYPYZUCNSA-P 0.000 description 2
- DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N L-asparagine Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O DCXYFEDJOCDNAF-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N L-isoleucine Chemical compound CC[C@H](C)[C@H](N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-WHFBIAKZSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N L-leucine Chemical compound CC(C)C[C@H](N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 2
- AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N L-threonine Chemical compound C[C@@H](O)[C@H](N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-GBXIJSLDSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N Leucine Natural products CC(C)CC(N)C(O)=O ROHFNLRQFUQHCH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- 241000282567 Macaca fascicularis Species 0.000 description 2
- 241001529466 Muscardinus avellanarius Species 0.000 description 2
- 229930193140 Neomycin Natural products 0.000 description 2
- 108700026244 Open Reading Frames Proteins 0.000 description 2
- 241000282579 Pan Species 0.000 description 2
- 102100028961 Peroxisome proliferator-activated receptor gamma coactivator 1-beta Human genes 0.000 description 2
- 241000121210 Sigmodontinae Species 0.000 description 2
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 2
- 108091008874 T cell receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000016266 T-Cell Antigen Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108700005077 Viral Genes Proteins 0.000 description 2
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 2
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 2
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 2
- 230000000890 antigenic effect Effects 0.000 description 2
- ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N arginine Natural products OC(=O)C(N)CCCNC(N)=N ODKSFYDXXFIFQN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000009582 asparagine Nutrition 0.000 description 2
- 229960001230 asparagine Drugs 0.000 description 2
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 description 2
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 2
- 238000009509 drug development Methods 0.000 description 2
- 210000001671 embryonic stem cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000010195 expression analysis Methods 0.000 description 2
- 230000004077 genetic alteration Effects 0.000 description 2
- 231100000118 genetic alteration Toxicity 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N glutamine Chemical group OC(=O)C(N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 125000000487 histidyl group Chemical group [H]N([H])C(C(=O)O*)C([H])([H])C1=C([H])N([H])C([H])=N1 0.000 description 2
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 2
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 238000010348 incorporation Methods 0.000 description 2
- 239000012678 infectious agent Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 230000015788 innate immune response Effects 0.000 description 2
- AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N isoleucine Natural products CCC(C)C(N)C(O)=O AGPKZVBTJJNPAG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960000310 isoleucine Drugs 0.000 description 2
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 2
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 2
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 2
- 229960004927 neomycin Drugs 0.000 description 2
- 230000014207 opsonization Effects 0.000 description 2
- 230000003285 pharmacodynamic effect Effects 0.000 description 2
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 2
- 229950010131 puromycin Drugs 0.000 description 2
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 2
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 2
- 108091008146 restriction endonucleases Proteins 0.000 description 2
- 229960000268 spectinomycin Drugs 0.000 description 2
- UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N spectinomycin Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](NC)[C@@H](O)[C@H]([C@@H]([C@H]1O1)O)NC)[C@]2(O)[C@H]1O[C@H](C)CC2=O UNFWWIHTNXNPBV-WXKVUWSESA-N 0.000 description 2
- 238000012453 sprague-dawley rat model Methods 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N tyrosine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 2
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 2
- 239000013603 viral vector Substances 0.000 description 2
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 2
- 238000011714 129 mouse Methods 0.000 description 1
- FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 4-amino-1-[(2r)-6-amino-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-[[(2r)-2-amino-3-phenylpropanoyl]amino]-3-phenylpropanoyl]amino]-4-methylpentanoyl]amino]hexanoyl]piperidine-4-carboxylic acid Chemical compound C([C@H](C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N1CCC(N)(CC1)C(O)=O)NC(=O)[C@H](N)CC=1C=CC=CC=1)C1=CC=CC=C1 FWMNVWWHGCHHJJ-SKKKGAJSSA-N 0.000 description 1
- 241000251468 Actinopterygii Species 0.000 description 1
- 102000013455 Amyloid beta-Peptides Human genes 0.000 description 1
- 108010090849 Amyloid beta-Peptides Proteins 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 1
- 235000017166 Bambusa arundinacea Nutrition 0.000 description 1
- 235000017491 Bambusa tulda Nutrition 0.000 description 1
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 description 1
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 description 1
- 108091033409 CRISPR Proteins 0.000 description 1
- 241000700193 Calomyscus Species 0.000 description 1
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 1
- 241000251730 Chondrichthyes Species 0.000 description 1
- 102100025877 Complement component C1q receptor Human genes 0.000 description 1
- 108010037897 DC-specific ICAM-3 grabbing nonintegrin Proteins 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 108010008177 Fd immunoglobulins Proteins 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101100111902 Homo sapiens C1QA gene Proteins 0.000 description 1
- 101100111912 Homo sapiens C1QB gene Proteins 0.000 description 1
- 101000933665 Homo sapiens Complement component C1q receptor Proteins 0.000 description 1
- 101000854886 Homo sapiens Immunoglobulin iota chain Proteins 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 108010054477 Immunoglobulin Fab Fragments Proteins 0.000 description 1
- 102000001706 Immunoglobulin Fab Fragments Human genes 0.000 description 1
- 108700005091 Immunoglobulin Genes Proteins 0.000 description 1
- 108010067060 Immunoglobulin Variable Region Proteins 0.000 description 1
- 102000017727 Immunoglobulin Variable Region Human genes 0.000 description 1
- 102100020744 Immunoglobulin iota chain Human genes 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N L-Proline Chemical compound OC(=O)[C@@H]1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N L-aspartic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC(O)=O CKLJMWTZIZZHCS-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical group OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N L-histidine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N L-lysine Chemical compound NCCCC[C@H](N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-YFKPBYRVSA-N 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N L-methionine Chemical compound CSCC[C@H](N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-BYPYZUCNSA-N 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N L-tryptophane Chemical compound C1=CC=C2C(C[C@H](N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-VIFPVBQESA-N 0.000 description 1
- 230000004988 N-glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 1
- 230000004989 O-glycosylation Effects 0.000 description 1
- 241001452677 Ogataea methanolica Species 0.000 description 1
- 206010057249 Phagocytosis Diseases 0.000 description 1
- 244000082204 Phyllostachys viridis Species 0.000 description 1
- 235000015334 Phyllostachys viridis Nutrition 0.000 description 1
- 206010035226 Plasma cell myeloma Diseases 0.000 description 1
- 102000029797 Prion Human genes 0.000 description 1
- 108091000054 Prion Proteins 0.000 description 1
- ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N Proline Natural products OC(=O)C1CCCN1 ONIBWKKTOPOVIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940124158 Protease/peptidase inhibitor Drugs 0.000 description 1
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 description 1
- 101100533311 Rattus norvegicus Set gene Proteins 0.000 description 1
- 108010091086 Recombinases Proteins 0.000 description 1
- 102000018120 Recombinases Human genes 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 1
- 241000235347 Schizosaccharomyces pombe Species 0.000 description 1
- MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N Serine Natural products OCC(N)C(O)=O MTCFGRXMJLQNBG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010022999 Serine Proteases Proteins 0.000 description 1
- 102000012479 Serine Proteases Human genes 0.000 description 1
- 102000008847 Serpin Human genes 0.000 description 1
- 108050000761 Serpin Proteins 0.000 description 1
- 238000002105 Southern blotting Methods 0.000 description 1
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 1
- 241000187747 Streptomyces Species 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N Threonine Natural products CC(O)C(N)C(O)=O AYFVYJQAPQTCCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004473 Threonine Substances 0.000 description 1
- QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N Tryptophan Natural products C1=CC=C2C(CC(N)C(O)=O)=CNC2=C1 QIVBCDIJIAJPQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000009108 Urtica dioica Nutrition 0.000 description 1
- 241000218215 Urticaceae Species 0.000 description 1
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 1
- 238000007792 addition Methods 0.000 description 1
- 125000003295 alanine group Chemical group N[C@@H](C)C(=O)* 0.000 description 1
- 238000012867 alanine scanning Methods 0.000 description 1
- 125000001931 aliphatic group Chemical group 0.000 description 1
- 208000026935 allergic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 230000004075 alteration Effects 0.000 description 1
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 1
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 1
- 125000000637 arginyl group Chemical group N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)* 0.000 description 1
- 238000003491 array Methods 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- 235000003704 aspartic acid Nutrition 0.000 description 1
- 210000003719 b-lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000011425 bamboo Substances 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N beta-carboxyaspartic acid Natural products OC(=O)C(N)C(C(O)=O)C(O)=O OQFSQFPPLPISGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 210000002459 blastocyst Anatomy 0.000 description 1
- 208000002352 blister Diseases 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- 210000004556 brain Anatomy 0.000 description 1
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 1
- 230000007910 cell fusion Effects 0.000 description 1
- 230000022534 cell killing Effects 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 1
- 239000002299 complementary DNA Substances 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000008021 deposition Effects 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 230000036267 drug metabolism Effects 0.000 description 1
- 239000012636 effector Substances 0.000 description 1
- 210000002308 embryonic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 230000002708 enhancing effect Effects 0.000 description 1
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 1
- 210000002615 epidermis Anatomy 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 239000013604 expression vector Substances 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 238000000684 flow cytometry Methods 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 230000004927 fusion Effects 0.000 description 1
- 108020001507 fusion proteins Proteins 0.000 description 1
- 102000037865 fusion proteins Human genes 0.000 description 1
- 238000012239 gene modification Methods 0.000 description 1
- 238000010363 gene targeting Methods 0.000 description 1
- 238000010353 genetic engineering Methods 0.000 description 1
- 230000005017 genetic modification Effects 0.000 description 1
- 235000013617 genetically modified food Nutrition 0.000 description 1
- 238000003205 genotyping method Methods 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 125000000291 glutamic acid group Chemical group N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 125000000404 glutamine group Chemical group N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)* 0.000 description 1
- 230000013595 glycosylation Effects 0.000 description 1
- 238000006206 glycosylation reaction Methods 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N histidine Natural products OC(=O)C(N)CC1=CN=CN1 HNDVDQJCIGZPNO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000710 homodimer Substances 0.000 description 1
- 244000052637 human pathogen Species 0.000 description 1
- 238000011577 humanized mouse model Methods 0.000 description 1
- 239000002663 humin Substances 0.000 description 1
- 230000028996 humoral immune response Effects 0.000 description 1
- 210000004408 hybridoma Anatomy 0.000 description 1
- 125000001165 hydrophobic group Chemical group 0.000 description 1
- 210000002865 immune cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000003365 immunocytochemistry Methods 0.000 description 1
- 229940072221 immunoglobulins Drugs 0.000 description 1
- 238000003364 immunohistochemistry Methods 0.000 description 1
- 238000007901 in situ hybridization Methods 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 description 1
- 230000008595 infiltration Effects 0.000 description 1
- 238000001764 infiltration Methods 0.000 description 1
- 210000005007 innate immune system Anatomy 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 238000007689 inspection Methods 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 125000000741 isoleucyl group Chemical group [H]N([H])C(C(C([H])([H])[H])C([H])([H])C([H])([H])[H])C(=O)O* 0.000 description 1
- 229950003188 isovaleryl diethylamide Drugs 0.000 description 1
- 210000003734 kidney Anatomy 0.000 description 1
- 125000001909 leucine group Chemical group [H]N(*)C(C(*)=O)C([H])([H])C(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- 210000001165 lymph node Anatomy 0.000 description 1
- 125000003588 lysine group Chemical group [H]N([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 210000003519 mature b lymphocyte Anatomy 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 230000003278 mimic effect Effects 0.000 description 1
- 208000024191 minimally invasive lung adenocarcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000000472 morula Anatomy 0.000 description 1
- 201000000050 myeloid neoplasm Diseases 0.000 description 1
- AEMBWNDIEFEPTH-UHFFFAOYSA-N n-tert-butyl-n-ethylnitrous amide Chemical compound CCN(N=O)C(C)(C)C AEMBWNDIEFEPTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000000137 peptide hydrolase inhibitor Substances 0.000 description 1
- 230000008782 phagocytosis Effects 0.000 description 1
- 125000000405 phenylalanyl group Chemical group 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 description 1
- 229920000447 polyanionic polymer Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 125000002924 primary amino group Chemical group [H]N([H])* 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 230000002797 proteolythic effect Effects 0.000 description 1
- 230000008707 rearrangement Effects 0.000 description 1
- 230000007115 recruitment Effects 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 230000022532 regulation of transcription, DNA-dependent Effects 0.000 description 1
- 210000001525 retina Anatomy 0.000 description 1
- 239000011435 rock Substances 0.000 description 1
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 1
- 230000028327 secretion Effects 0.000 description 1
- 239000003001 serine protease inhibitor Substances 0.000 description 1
- 125000003607 serino group Chemical group [H]N([H])[C@]([H])(C(=O)[*])C(O[H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000000717 sertoli cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003584 silencer Effects 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 210000000952 spleen Anatomy 0.000 description 1
- 210000001845 splenic macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000019635 sulfation Effects 0.000 description 1
- 238000005670 sulfation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000010189 synthetic method Methods 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 125000000341 threoninyl group Chemical group [H]OC([H])(C([H])([H])[H])C([H])(N([H])[H])C(*)=O 0.000 description 1
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 1
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 1
- 238000012546 transfer Methods 0.000 description 1
- 238000002054 transplantation Methods 0.000 description 1
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 1
- 230000004614 tumor growth Effects 0.000 description 1
- 230000005909 tumor killing Effects 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 125000002987 valine group Chemical group [H]N([H])C([H])(C(*)=O)C([H])(C([H])([H])[H])C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- 210000003501 vero cell Anatomy 0.000 description 1
- 108700026220 vif Genes Proteins 0.000 description 1
- 210000005253 yeast cell Anatomy 0.000 description 1
Images
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
- A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
- A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
- A01K67/0278—Knock-in vertebrates, e.g. humanised vertebrates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/8509—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
- C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
- C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
- C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
- C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
- C07K14/472—Complement proteins, e.g. anaphylatoxin, C3a, C5a
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
- C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
- C12Q1/02—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms
- C12Q1/025—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving viable microorganisms for testing or evaluating the effect of chemical or biological compounds, e.g. drugs, cosmetics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2207/00—Modified animals
- A01K2207/15—Humanized animals
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2217/00—Genetically modified animals
- A01K2217/05—Animals comprising random inserted nucleic acids (transgenic)
- A01K2217/054—Animals comprising random inserted nucleic acids (transgenic) inducing loss of function
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2217/00—Genetically modified animals
- A01K2217/07—Animals genetically altered by homologous recombination
- A01K2217/072—Animals genetically altered by homologous recombination maintaining or altering function, i.e. knock in
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2217/00—Genetically modified animals
- A01K2217/15—Animals comprising multiple alterations of the genome, by transgenesis or homologous recombination, e.g. obtained by cross-breeding
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2227/00—Animals characterised by species
- A01K2227/10—Mammal
- A01K2227/105—Murine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2267/00—Animals characterised by purpose
- A01K2267/03—Animal model, e.g. for test or diseases
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2267/00—Animals characterised by purpose
- A01K2267/03—Animal model, e.g. for test or diseases
- A01K2267/0337—Animal models for infectious diseases
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2267/00—Animals characterised by purpose
- A01K2267/03—Animal model, e.g. for test or diseases
- A01K2267/035—Animal model for multifactorial diseases
- A01K2267/0368—Animal model for inflammation
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
- A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
- A01K2267/00—Animals characterised by purpose
- A01K2267/03—Animal model, e.g. for test or diseases
- A01K2267/035—Animal model for multifactorial diseases
- A01K2267/0387—Animal model for diseases of the immune system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07K—PEPTIDES
- C07K2319/00—Fusion polypeptide
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
- C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
- C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
- C12N15/8509—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic
- C12N2015/8527—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic for producing animal models, e.g. for tests or diseases
Landscapes
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Zoology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Environmental Sciences (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Toxicology (AREA)
- Animal Husbandry (AREA)
- Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Gastroenterology & Hepatology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Immunology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Peptides Or Proteins (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
Description
本出願は、2017年9月29日に出願された米国仮出願第62/565,438号の優先権の利益を主張し、その内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。
配列表の参照による組み込み
本発明は、例えば以下の項目を提供する。
(項目1)
そのゲノム内に、キメラC1qポリペプチドをコードする核酸を含む、遺伝子改変齧歯類動物であって、ここにおいて、前記核酸が、齧歯類核酸配列と、ヒト核酸配列とを含み、ここにおいて、前記キメラC1qポリペプチドが、キメラC1qaポリペプチド、キメラC1qbポリペプチド、およびキメラC1qcポリペプチドをからなる群から選択され、かつここにおいて、前記キメラC1qポリペプチドが、実質的にヒトである球状頭部ドメインと、実質的に齧歯類であるN末端葉柄茎領域とを含む、遺伝子改変齧歯類動物。
(項目2)
前記齧歯類動物が、キメラC1qaポリペプチド、キメラC1qbポリペプチド、キメラC1qcポリペプチド、またはそれらの組み合わせを発現する、項目1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目3)
前記齧歯類動物がラット、またはマウスである、項目1または2に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目4)
前記キメラC1qポリペプチドがキメラC1qaポリペプチドである、項目1~3のいずれか1項に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目5)
前記キメラC1qaポリペプチドが、実質的にヒトC1qaポリペプチドの球状頭部ドメインと同一である前記球状頭部ドメイン、および実質的に齧歯類C1qaポリペプチドのN末端葉柄茎領域と同一である前記N末端葉柄茎領域を含む、項目4に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目6)
前記ヒトC1qaポリペプチドの球状頭部ドメインが、配列番号4の108~245を含む、項目5に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目7)
前記齧歯類動物がマウスである、項目4~6のいずれか1項に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目8)
前記キメラC1qaポリペプチドが、内因性マウスC1qaポリペプチドのN末端葉柄茎領域と実質的に同一な前記N末端葉柄茎領域を含み、ここにおいて、前記内因性マウスC1qaポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が、配列番号1のアミノ酸23~107を含む、項目7に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目9)
前記キメラC1qaポリペプチドが、配列番号10のアミノ酸23~245を含む、項目7または8に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目10)
前記齧歯類動物がラットである、項目4~6のいずれか1項に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目11)
前記キメラC1qaポリペプチドが、内因性ラットC1qaポリペプチドのN末端葉柄茎領域と実質的に同一な前記N末端葉柄茎領域を含み、ここにおいて、前記内因性ラットC1qaポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が、配列番号7のアミノ酸23~107を含む、項目10に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目12)
前記キメラC1qaポリペプチドが、配列番号55のアミノ酸23~245を含む、項目10または11に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目13)
前記キメラC1qポリペプチドがキメラC1qbポリペプチドである、項目1~3のいずれか1項に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目14)
前記キメラC1qbポリペプチドが、実質的にヒトC1qbポリペプチドの球状頭部ドメインと同一である前記球状頭部ドメイン、および実質的に齧歯類C1qbポリペプチドのN末端葉柄茎領域と同一である前記N末端葉柄茎領域を含む、項目13に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目15)
前記ヒトC1qbポリペプチドの球状頭部ドメインが、配列番号5のアミノ酸115~251を含む、項目14に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目16)
前記齧歯類動物がマウスである、項目13~15に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目17)
前記キメラC1qbポリペプチドが、内因性マウスC1qbポリペプチドのN末端葉柄茎領域と実質的に同一な前記N末端葉柄茎領域を含み、ここにおいて、前記内因性マウスC1qbポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が、配列番号2のアミノ酸26~114を含む、項目16に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目18)
前記キメラC1qbポリペプチドが、配列番号11のアミノ酸26~251を含む、項目16または17に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目19)
前記齧歯類動物がラットである、項目13~15のいずれか1項に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目20)
前記キメラC1qbポリペプチドが、内因性ラットC1qbポリペプチドのN末端葉柄茎領域と実質的に同一な前記N末端葉柄茎領域を含み、ここにおいて、前記内因性ラットC1qbポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が、配列番号8のアミノ酸26~114を含む、項目19に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目21)
前記キメラC1qbポリペプチドが、配列番号56のアミノ酸26~251を含む、項目19または20に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目22)
前記キメラC1qポリペプチドがキメラC1qcポリペプチドである、項目1~3のいずれか1項に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目23)
前記キメラC1qcポリペプチドが、実質的にヒトC1qcポリペプチドの球状頭部ドメインと同一である前記球状頭部ドメイン、および実質的に齧歯類C1qcポリペプチドのN末端葉柄茎領域と同一である前記N末端葉柄茎領域を含む、項目22に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目24)
前記ヒトC1qcポリペプチドの球状頭部ドメインが、配列番号6のアミノ酸113~245を含む、項目23に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目25)
前記齧歯類動物がマウスである、項目22~24のいずれか1項に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目26)
前記キメラC1qcポリペプチドが、内因性マウスC1qcポリペプチドのN末端葉柄茎領域と実質的に同一な前記N末端葉柄茎領域を含み、ここにおいて、前記内因性マウスC1qcポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が、配列番号3のアミノ酸30~113を含む、項目25に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目27)
前記キメラC1qcポリペプチドが、配列番号11のアミノ酸30~246を含む、項目25または26に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目28)
前記齧歯類動物がラットある、項目22~24のいずれか1項に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目29)
前記キメラC1qcポリペプチドが、内因性ラットC1qcポリペプチドのN末端葉柄茎領域と実質的に同一な前記N末端葉柄茎領域を含み、ここにおいて、前記内因性ラットC1qcポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が、配列番号9のアミノ酸32~115を含む、項目28に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目30)
前記キメラC1qcポリペプチドが、配列番号57のアミノ酸32~248を含む、項目28または29に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目31)
前記キメラC1qポリペプチドが、齧歯類C1qシグナルペプチド、任意選択的に内因性齧歯類C1qシグナルペプチドを含む、項目1~30のいずれかに記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目32)
前記キメラC1qポリペプチドをコードする前記核酸が、内因性齧歯類C1q遺伝子座にある、項目1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目33)
前記内因性齧歯類C1q遺伝子座における内因性ゲノム配列が、前記ヒト核酸配列によって置換されている、項目32に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目34)
前記ヒト核酸配列が、ヒトC1qポリペプチドの球状頭部ドメインを実質的にコードする、項目1、2、32、または33のいずれか1項に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目35)
前記ヒト核酸配列が、ヒトC1q遺伝子のゲノム断片である、項目34に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目36)
前記ゲノム断片が、前記ヒトC1q遺伝子の3’UTRを含む、項目35に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目37)
前記キメラC1qポリペプチドがキメラC1qaポリペプチドであり、前記ヒト核酸配列が前記ヒトC1qaポリペプチドの球状頭部ドメインを実質的にコードする、項目34~36のいずれかに記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目38)
前記ヒトC1qaポリペプチドの前記球状頭部ドメインが、配列番号4のアミノ酸108~245を含む、項目37に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目39)
前記ヒト核酸配列が、配列番号4のアミノ酸112~245をコードする、項目37または38に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目40)
前記キメラC1qポリペプチドがキメラC1qbポリペプチドであり、前記ヒト核酸配列が前記ヒトC1qbポリペプチドの球状頭部ドメインを実質的にコードする、項目34~36のいずれかに記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目41)
前記ヒトC1qbポリペプチドの前記球状頭部ドメインが、配列番号5のアミノ酸115~251を含む、項目40に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目42)
前記ヒト核酸配列が、配列番号5のアミノ酸118~251をコードする、項目40または41に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目43)
前記キメラC1qポリペプチドがキメラC1qcポリペプチドであり、前記ヒト核酸配列が前記ヒトC1qcポリペプチドの球状頭部ドメインを実質的にコードする、項目34~36のいずれかに記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目44)
前記ヒトC1qcポリペプチドの前記球状頭部ドメインが、配列番号6のアミノ酸113~245を含む、項目43に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目45)
前記ヒト核酸配列が、配列番号6のアミノ酸114~245をコードする、項目43または44に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目46)
前記齧歯類核酸配列が、齧歯類C1qポリペプチドのN末端葉柄茎領域を実質的にコードする、項目1、2、または32~34のいずれか1項に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目47)
前記齧歯類動物がマウスであり、マウスC1qポリペプチドのN末端葉柄茎領域が、それぞれ、配列番号1のアミノ酸23~107(C1qaの)、配列番号2のアミノ酸26~114(C1qbの)、または配列番号3のアミノ酸30~113(C1qcの)を含む、項目46に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目48)
前記マウスが、キメラC1qaポリペプチドをコードする核酸を含み、ここにおいて、前記核酸が、マウス核酸配列およびヒト核酸配列を含み、ここにおいて前記マウス核酸配列が、配列番号1のアミノ酸23~111をコードする、項目47に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目49)
前記マウスが、キメラC1qbポリペプチドをコードする核酸を含み、ここにおいて、前記核酸が、マウス核酸配列およびヒト核酸配列を含み、ここにおいて前記マウス核酸配列が、配列番号2のアミノ酸26~117をコードする、項目47に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目50)
前記マウスが、キメラC1qcポリペプチドをコードする核酸を含み、ここにおいて、前記核酸が、マウス核酸配列およびヒト核酸配列を含み、ここにおいて前記マウス核酸配列が、配列番号3のアミノ酸30~114をコードする、項目47に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目51)
前記齧歯類動物がラットであり、前記内因性C1qポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が、それぞれ、配列番号7のアミノ酸23~107(C1qaの)、配列番号8のアミノ酸26~114(C1qbの)、および配列番号9のアミノ酸32~115(C1qcの)を含む、項目46に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目52)
前記ラットが、キメラC1qaポリペプチドをコードする核酸を含み、ここにおいて、前記核酸が、ラット核酸配列およびヒト核酸配列を含み、ここにおいて前記ラット核酸配列が、配列番号7のアミノ酸23~111をコードする、項目51に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目53)
前記ラットが、キメラC1qbポリペプチドをコードする核酸を含み、ここにおいて、前記核酸が、ラット核酸配列およびヒト核酸配列を含み、ここにおいて前記ラット核酸配列が、配列番号8のアミノ酸26~117をコードする、項目51に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目54)
前記ラットが、キメラC1qcポリペプチドをコードする核酸を含み、前記核酸が、ラット核酸配列、およびヒト核酸配列を含み、ここにおいて前記ラット核酸配列が、配列番号9のアミノ酸32~116をコードする、項目51に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目55)
前記動物が、ラットであり、かつそのゲノム中に、
a. 前記内因性C1qa遺伝子座で、キメララット/ヒトC1qaポリペプチドをコードする核酸配列であって、ここにおいて、前記核酸配列が、5’-3’、ならびに、動作可能な連結において、配列番号7のラットC1qaポリペプチドのアミノ酸1~111をコードする第一のヌクレオチド配列、および配列番号4のヒトC1qaポリペプチドのアミノ酸112~245をコードする第二のヌクレオチド配列、を含む、核酸配列と、
b. 前記内因性C1qb遺伝子座で、キメララット/ヒトC1qbポリペプチドをコードする核酸配列であって、ここにおいて、前記核酸配列が、5’-3’、ならびに、動作可能な連結において、配列番号8のラットC1qbポリペプチドのアミノ酸1~117をコードする第三のヌクレオチド配列、および配列番号5のヒトC1qbポリペプチドのアミノ酸118~251をコードする第4のヌクレオチド配列を、含む、核酸配列と、
c. 前記内因性C1qc遺伝子座で、キメララット/ヒトC1qcポリペプチドをコードする核酸配列であって、ここにおいて、前記核酸配列が、5’-3’、ならびに、動作可能な連結において、配列番号9のラットC1qcポリペプチドのアミノ酸1~116をコードする第五のヌクレオチド配列、および配列番号6のヒトC1qcポリペプチドのアミノ酸114~245をコードする第六のヌクレオチド配列を、含む、前記核酸配列と、を含む、項目1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目56)
前記動物がマウスであり、かつそのゲノム中に、
a. 前記内因性C1qa遺伝子座で、キメラマウス/ヒトC1qaポリペプチドをコードする核酸配列であって、ここにおいて、前記核酸配列が、5’-3’、ならびに、動作可能な連結において、配列番号1のマウスC1qaポリペプチドのアミノ酸1~111をコードする第一のヌクレオチド配列、および配列番号4のヒトC1qaポリペプチドのアミノ酸112~245をコードする第二のヌクレオチド配列を、含む、核酸配列と、
b. 前記内因性C1qb遺伝子座で、キメラマウス/ヒトC1qbポリペプチドをコードする核酸配列であって、ここにおいて、前記核酸配列が、5’-3’、ならびに、動作可能な連結において、配列番号2のマウスC1qbポリペプチドのアミノ酸1~117をコードする第三のヌクレオチド配列、および配列番号5のヒトC1qbポリペプチドのアミノ酸118~251をコードする第四のヌクレオチド配列を、含む、核酸配列と、
c. 前記内因性C1qc遺伝子座で、キメラマウス/ヒトC1qcポリペプチドをコードする核酸配列であって、ここにおいて、前記核酸配列が、5’-3’、ならびに、動作可能な連結において、配列番号3のマウスC1qcポリペプチドのアミノ酸1~114をコードする第五のヌクレオチド配列、および配列番号6のヒトC1qcポリペプチドのアミノ酸114~245をコードする第六のヌクレオチド配列を、含む、前記核酸配列と、を含む、項目1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目57)
前記齧歯類動物が、機能的な内因性C1qa、C1qb、および/またはC1qcポリペプチドを発現しない、項目1~56のいずれか1項に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目58)
遺伝子改変齧歯類動物を作製する方法であって、前記方法が、キメラC1qポリペプチドをコードする核酸を含む、齧歯類動物のゲノムを改変することを含み、ここにおいて、前記核酸が、齧歯類核酸配列と、ヒト核酸配列とを含み、ここにおいて、前記キメラC1qポリペプチドが、キメラC1qaポリペプチド、キメラC1qbポリペプチド、キメラC1qcポリペプチド、およびそれらの組み合わせからなる群から選択され、かつここにおいて、前記キメラC1qポリペプチドが、実質的にヒトである球状頭部ドメインと、実質的に齧歯類であるN末端葉柄茎領域とを含む、方法。
(項目59)
前記齧歯類動物の前記ゲノムが改変されて、キメラC1qaポリペプチドをコードする核酸と、キメラC1qbポリペプチドをコードする核酸と、キメラC1qcポリペプチドをコードする核酸とを含む、項目58に記載の方法。
(項目60)
前記キメラC1qポリペプチドをコードする核酸が、前記内因性齧歯類C1q遺伝子座に導入される、項目58または59に記載の方法。
(項目61)
前記キメラC1qポリペプチドをコードする核酸が、前記内因性齧歯類C1q遺伝子のヌクレオチド配列を前記内因性齧歯類C1q遺伝子座で置換する、項目60に記載の方法。
(項目62)
前記動物が齧歯類、例えばマウスまたはラットである、項目58~61のいずれか1項に記載の方法。
(項目63)
前記改変することが、
a. 前記ヒト核酸配列を含む核酸分子を、齧歯類胚性幹(ES)細胞のゲノム内に導入することと、
b. 齧歯類ES細胞を得ることであって、前記キメラC1qポリペプチドをコードするように、前記ヒト核酸配列が、内因性齧歯類核酸配列に動作可能な連結で、内因性C1q遺伝子座内に統合されている、得ることと、
c. bで得られた前記齧歯類ES細胞から齧歯類動物を生成することと、を含む、項目62に記載の方法。
(項目64)
前記核酸分子が、キメラC1qaポリペプチドをコードする核酸、キメラC1qbポリペプチドをコードする核酸、およびキメラC1qcポリペプチドをコードする核酸を含む、項目63に記載の方法。
(項目65)
実質的にヒトである球状頭部ドメインと、実質的に齧歯類であるN末端葉柄茎領域とを含むキメラC1qポリペプチドであって、ここにおいて、前記キメラC1qポリペプチドが、キメラC1qaポリペプチド、キメラC1qbポリペプチド、およびキメラC1qcポリペプチドからなる群から選択される、キメラC1qポリペプチド。
(項目66)
項目1~57のいずれかに記載の齧歯類動物から作製されたキメラC1qポリペプチド。
(項目67)
項目65または66に記載のキメラC1qポリペプチドのうちの1つ以上を含むキメラC1qタンパク質。
(項目68)
前記タンパク質が、少なくとも1つのキメラC1qa、少なくとも1つのキメラC1qb、および少なくとも1つのキメラC1qcポリペプチドを含む、項目67に記載のキメラC1qタンパク質。
(項目69)
前記タンパク質が、前記キメラC1qaポリペプチド、キメラC1qbポリペプチド、およびキメラC1qcポリペプチドの各々の6個ずつを含む、項目68に記載のキメラC1qタンパク質。
(項目70)
機能的なキメラC1qポリペプチドをコードする単離核酸であって、前記単離核酸が、齧歯類核酸配列、およびヒト核酸配列を含み、ここにおいて、前記ヒト核酸配列が、ヒトC1qポリペプチドの球状頭部ドメインを実質的にコードし、前記齧歯類核酸配列が、同族齧歯類C1qポリペプチドのN末端葉柄茎領域を実質的にコードし、かつここにおいて、前記C1qポリペプチドが、C1qaポリペプチド、C1qbポリペプチド、またはC1qcポリペプチドから選択される、単離核酸。
(項目71)
前記第一、第二、または第三のヌクレオチド配列のうちの1つ以上を含む、キメラ齧歯類C1qタンパク質をコードする単離核酸であって、ここにおいて、
a. 前記第一のヌクレオチド配列が、キメラC1qaポリペプチドをコードし、
b. 前記第二のヌクレオチド配列が、キメラC1qbポリペプチドをコードし、
c. 前記第三のヌクレオチド配列が、キメラC1qcポリペプチドをコードし、
ここにおいて、前記第一、第二、および第三のヌクレオチド配列が、齧歯類核酸配列と、ヒト核酸配列とを含み、ここにおいて、前記ヒト核酸配列が、それぞれ、ヒトC1qa、C1qb、およびC1qcポリペプチドの球状頭部ドメインを実質的にコードし、および前記齧歯類核酸配列が、それぞれ、同族齧歯類C1qポリペプチド、C1qa、C1qb、およびC1qcポリペプチドのN末端葉柄茎領域を実質的にコードする、単離核酸。
(項目72)
項目70または71に記載の単離核酸を含む細胞。
(項目73)
前記細胞が胚性幹細胞である、項目72に記載の細胞。
(項目74)
項目73に記載の細胞を含む、遺伝子改変齧歯類動物。
(項目75)
C1qベースの二重特異性抗原結合タンパク質を試験するトランスジェニック齧歯類モデルであって、ここにおいて、前記抗原結合タンパク質が、ヒトC1q、および非齧歯類対象抗原の両方を結合し、項目1~57のいずれかに記載の遺伝子改変齧歯類動物を含み、さらに前記非齧歯類対象抗原、または前記非齧歯類対象抗原を発現する細胞を含む、トランスジェニック齧歯類モデル。
(項目76)
対象抗原を標的とする薬剤候補のスクリーニング方法であって、前記方法が、
a. 項目1~57のいずれかにより定義された遺伝子改変齧歯類動物に前記対象抗原を導入することと、
b. 前記齧歯類動物を対象の薬剤候補と接触させることであって、ここにおいて、前記薬剤候補が、前記ヒトC1qおよび前記対象抗原に対して向けられている、接触させることと、
c. 前記薬剤候補が、前記対象抗原の存在または発現により特徴付けられる細胞の予防、低減、または除去において有効であるかどうかを分析することと、を含む、方法。
(項目77)
前記導入する工程が、前記齧歯類動物に前記対象抗原を発現することを含む、項目76に記載の方法。
(項目78)
前記導入する工程が、前記齧歯類動物内に、前記対象抗原を発現する細胞を導入することを含む、項目76に記載の方法。
(項目79)
前記対象抗原が腫瘍関連抗原である、項目76~78のいずれかに記載の方法。
(項目80)
前記細胞が、ブドウ球菌細胞などの細菌細胞であり、前記抗原がブドウ球菌抗原などの細菌抗原である、項目76~78のいずれかに記載の方法。
(項目81)
前記抗原がウイルス抗原である、項目76~78のいずれかに記載の方法。
(項目82)
前記導入する工程が、前記齧歯類を前記対象抗原で感染させることを含む、項目80または81に記載の方法。
(項目83)
前記齧歯類動物が、免疫応答性のマウス、または免疫応答性のラットである、項目76に記載の方法。
(項目84)
前記薬剤候補が、抗体、または抗原結合タンパク質である、項目76に記載の方法。
(項目85)
前記抗体または前記抗原結合タンパク質が、それぞれ、二重特異性抗体、または二重特異性抗原結合タンパク質であり、これがヒトC1qタンパク質および前記対象抗原の両方を結合する能力を有する、項目84に記載の方法。
(項目86)
候補抗体が補体経路を活性化するかどうかを評価する方法であって、前記方法が、
a. 細胞表面上に対象抗原を発現する細胞、ヒトFc領域を含み、前記対象抗原に向けられる候補抗体、および項目1~59のいずれかに記載の遺伝子改変齧歯類動物からの血清サンプル、を提供することと、
b. 前記細胞を前記候補抗体と混合して、前記抗体が、前記細胞表面上に発現される前記対象抗原に結合することを可能にすることと、
c. 前記血清サンプルを前記細胞抗体混合物に加えて、前記細胞上の前記対象抗原に結合した抗体に、前記血清サンプル内の前記ヒト化C1qタンパク質が結合することを可能にすることと、
d. 前記細胞の細胞毒性を測定することと、を含む、方法。
(項目87)
対象抗原およびヒトC1qを標的とする候補二重特異性抗体を評価するための方法であって、前記方法が、
a. 前記対象抗原を発現する細胞またはウイルス、前記候補二重特異性抗体、および項目1~59のいずれかに記載の遺伝子改変齧歯類動物から血液サンプルを混合し、インキュベートして、前記抗体が、前記細胞またはウイルスにより発現される前記対象抗原、および前記血液サンプル中のヒト化C1q分子に結合することを可能にすることと、
b. 前記細胞またはウイルスの生存を測定することと、を含む、方法。
(項目88)
前記細胞が、ブドウ球菌細胞などの細菌細胞であり、前記抗原がブドウ球菌抗原などの細菌抗原である、項目87に記載の方法。
(項目89)
前記ラットが、そのゲノム中に、
a.前記内因性C1qa遺伝子座で、配列番号55のアミノ酸配列を含むキメララット/ヒトC1qaポリペプチドをコードする核酸配列と、
b.前記内因性C1qb遺伝子座で、配列番号56のアミノ酸配列を含むキメララット/ヒトC1qbポリペプチドをコードする核酸配列と、
c.前記内因性C1qa遺伝子座で、配列番号57のアミノ酸配列を含むキメララット/ヒトC1qcポリペプチドをコードする核酸配列と、を含む項目55に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
(項目90)
前記マウスが、そのゲノム内に、
a. 前記内因性C1qa遺伝子座で、配列番号10のアミノ酸配列を含むキメラマウス/ヒトC1qaポリペプチドをコードする核酸配列と、
b. 前記内因性C1qb遺伝子座で、配列番号11のアミノ酸配列を含むキメラマウス/ヒトC1qbポリペプチドをコードする核酸配列と、
c. 前記内因性C1qa遺伝子座で、配列番号12のアミノ酸配列を含むキメラマウス/ヒトC1qcポリペプチドをコードする核酸配列と、を含む、項目56に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
A. 用語の定義
B. 組成物
C. ポリペプチド
D. 核酸
E. 遺伝子改変ヒト化C1q動物
F.ヒト療法試験のための齧歯類モデル
G.遺伝子改変非ヒト動物の使用
実施例1.ヒト化C1qマウスの生成
表1:マウスC1q配列のGeneBank登録番号
表3:キメラマウス/ヒトC1qタンパク質のアミノ酸配列
表4:マウスC1qノックアウト遺伝子座の接合部配列
表5:マウスC1q遺伝子座の欠失を確認するためにMOAアッセイで使用されるプライマーおよびプローブ
実施例1.2 ヒト化C1qマウスの生成
表6:キメラマウス/ヒトC1q遺伝子の存在を確認するためにMOAアッセイで使用されるプライマーおよびプローブ
表7:キメラヒト/マウスC1q遺伝子座の接合部配列
実施例2. ヒト化C1qラットの生成
表8:ラットC1q配列のGeneBank登録番号
表9:キメララット/ヒトC1qタンパク質のアミノ酸配列
表10:ラットC1q遺伝子座の欠失の接合部配列
表11:ラットC1q遺伝子座の欠失を確認するためにMOAアッセイで使用されるプライマーおよびプローブ
実施例2.2 ヒト化C1qラットの生成
表12:キメラヒト/ラットのC1q遺伝子の存在を確認するためにMOAアッセイで使用されるプライマーおよびプローブ
表13: キメラヒト/ラットC1q遺伝子座の接合部配列
実施例3:ヒト化C1qマウスの特徴付け
実施例3.1: キメラC1qが存在し、マウス血清中の機能性
(1) ウェスタンブロット:
(2) 古典的経路溶血アッセイ:
実施例4:ヒト治療薬の試験のためのモデルとしてのヒト化C1qマウス
表14:細菌血症モデルにおけるヒト化C1qマウスの生存
実施例5:ヒト化C1qラットの特徴付け
(1)古典的経路溶血アッセイ
実施例6:ヒト治療薬の試験のためのモデルとしてのヒト化C1qラット
(1)補体依存性細胞障害(CDC)アッセイ
(2)C1qヒト化ラット血液中の黄色ブドウ球菌の生存、および二重特異性抗体の効果
(項目1)
そのゲノム内に、キメラC1qポリペプチドをコードする核酸を含む、遺伝子改変非ヒト動物であって、ここにおいて、前記核酸が、非ヒト核酸配列と、ヒト核酸配列とを含み、ここにおいて、前記キメラC1qポリペプチドが、キメラC1qaポリペプチド、キメラC1qbポリペプチド、およびキメラC1qcポリペプチドをからなる群から選択され、かつここにおいて、前記キメラC1qポリペプチドが、実質的にヒトである球状頭部ドメインと、実質的に非ヒトであるN末端葉柄茎領域とを含む、遺伝子改変非ヒト動物。
(項目2)
前記非ヒト動物が、キメラC1qaポリペプチド、キメラC1qbポリペプチド、キメラC1qcポリペプチド、またはそれらの組み合わせを発現する、項目1に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目3)
前記非ヒト動物が哺乳動物である、項目1または2に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目4)
前記非ヒト動物が齧歯類である、項目1または2に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目5)
前記非ヒト動物がラット、またはマウスである、項目1または2に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目6)
前記キメラC1qポリペプチドがキメラC1qaポリペプチドである、項目1~5のいずれか1項に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目7)
前記キメラC1qaポリペプチドが、実質的にヒトC1qaポリペプチドの球状頭部ドメインと同一である前記球状頭部ドメイン、および実質的に非ヒトC1qaポリペプチドのN末端葉柄茎領域と同一である前記N末端葉柄茎領域を含む、項目6に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目8)
前記ヒトC1qaポリペプチドの球状頭部ドメインが、配列番号4の108~245を含む、項目7に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目9)
前記非ヒト動物がマウスである、項目6~8のいずれか1項に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目10)
前記キメラC1qaポリペプチドが、内因性マウスC1qaポリペプチドのN末端葉柄茎領域と実質的に同一な前記N末端葉柄茎領域を含み、ここにおいて、前記内因性マウスC1qaポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が、配列番号1のアミノ酸23~107を含む、項目9に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目11)
前記キメラC1qaポリペプチドが、配列番号10のアミノ酸23~245を含む、項目9または10に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目12)
前記非ヒト動物がラットである、項目6~8のいずれか1項に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目13)
前記キメラC1qaポリペプチドが、内因性ラットC1qaポリペプチドのN末端葉柄茎領域と実質的に同一な前記N末端葉柄茎領域を含み、ここにおいて、前記内因性ラットC1qaポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が、配列番号7のアミノ酸23~107を含む、項目12に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目14)
前記キメラC1qaポリペプチドが、配列番号55のアミノ酸23~245を含む、項目12または13に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目15)
前記キメラC1qポリペプチドがキメラC1qbポリペプチドである、項目1~5のいずれか1項に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目16)
前記キメラC1qbポリペプチドが、実質的にヒトC1qbポリペプチドの球状頭部ドメインと同一である前記球状頭部ドメイン、および実質的に非ヒトC1qbポリペプチドのN末端葉柄茎領域と同一である前記N末端葉柄茎領域を含む、項目15に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目17)
前記ヒトC1qbポリペプチドの球状頭部ドメインが、配列番号5のアミノ酸115~251を含む、項目16に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目18)
前記非ヒト動物がマウスである、項目15~17に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目19)
前記キメラC1qbポリペプチドが、内因性マウスC1qbポリペプチドのN末端葉柄茎領域と実質的に同一な前記N末端葉柄茎領域を含み、ここにおいて、前記内因性マウスC1qbポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が、配列番号2のアミノ酸26~114を含む、項目18に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目20)
前記キメラC1qbポリペプチドが、配列番号11のアミノ酸26~251を含む、項目18または19に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目21)
前記非ヒト動物がラットである、項目15~17のいずれか1項に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目22)
前記キメラC1qbポリペプチドが、内因性ラットC1qbポリペプチドのN末端葉柄茎領域と実質的に同一な前記N末端葉柄茎領域を含み、ここにおいて、前記内因性ラットC1qbポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が、配列番号8のアミノ酸26~114を含む、項目21に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目23)
前記キメラC1qbポリペプチドが、配列番号56のアミノ酸26~251を含む、項目21または22に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目24)
前記キメラC1qポリペプチドがキメラC1qcポリペプチドである、項目1~5のいずれか1項に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目25)
前記キメラC1qcポリペプチドが、実質的にヒトC1qcポリペプチドの球状頭部ドメインと同一である前記球状頭部ドメイン、および実質的に非ヒトC1qcポリペプチドのN末端葉柄茎領域と同一である前記N末端葉柄茎領域を含む、項目24に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目26)
前記ヒトC1qcポリペプチドの球状頭部ドメインが、配列番号6のアミノ酸113~245を含む、項目25に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目27)
前記非ヒト動物がマウスである、項目24~26のいずれか1項に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目28)
前記キメラC1qcポリペプチドが、内因性マウスC1qcポリペプチドのN末端葉柄茎領域と実質的に同一な前記N末端葉柄茎領域を含み、ここにおいて、前記内因性マウスC1qcポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が、配列番号3のアミノ酸30~113を含む、項目27に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目29)
前記キメラC1qcポリペプチドが、配列番号11のアミノ酸30~246を含む、項目27または28に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目30)
前記非ヒト動物がラットある、項目24~26のいずれか1項に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目31)
前記キメラC1qcポリペプチドが、内因性ラットC1qcポリペプチドのN末端葉柄茎領域と実質的に同一な前記N末端葉柄茎領域を含み、ここにおいて、前記内因性ラットC1qcポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が、配列番号9のアミノ酸32~115を含む、項目30に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目32)
前記キメラC1qcポリペプチドが、配列番号57のアミノ酸32~248を含む、項目30または31に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目33)
前記キメラC1qポリペプチドが、非ヒトC1qシグナルペプチド、任意選択的に内因性非ヒトC1qシグナルペプチドを含む、項目1~32のいずれかに記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目34)
前記キメラC1qポリペプチドをコードする前記核酸が、内因性非ヒトC1q遺伝子座にある、項目1に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目35)
前記内因性非ヒトC1q遺伝子座における内因性ゲノム配列が、前記ヒト核酸配列によって置換されている、項目34に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目36)
前記ヒト核酸配列が、ヒトC1qポリペプチドの球状頭部ドメインを実質的にコードする、項目1、2、34、または35のいずれか1項に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目37)
前記ヒト核酸配列が、ヒトC1q遺伝子のゲノム断片である、項目36に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目38)
前記ゲノム断片が、前記ヒトC1q遺伝子の3’UTRを含む、項目37に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目39)
前記キメラC1qポリペプチドがキメラC1qaポリペプチドであり、前記ヒト核酸配列が前記ヒトC1qaポリペプチドの球状頭部ドメインを実質的にコードする、項目36~38のいずれかに記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目40)
前記ヒトC1qaポリペプチドの前記球状頭部ドメインが、配列番号4のアミノ酸108~245を含む、項目39に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目41)
前記ヒト核酸配列が、配列番号4のアミノ酸112~245をコードする、項目39または40に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目42)
前記キメラC1qポリペプチドがキメラC1qbポリペプチドであり、前記ヒト核酸配列が前記ヒトC1qbポリペプチドの球状頭部ドメインを実質的にコードする、項目36~38のいずれかに記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目43)
前記ヒトC1qbポリペプチドの前記球状頭部ドメインが、配列番号5のアミノ酸115~251を含む、項目42に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目44)
前記ヒト核酸配列が、配列番号5のアミノ酸118~251をコードする、項目42または43に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目45)
前記キメラC1qポリペプチドがキメラC1qcポリペプチドであり、前記ヒト核酸配列が前記ヒトC1qcポリペプチドの球状頭部ドメインを実質的にコードする、項目36~38のいずれかに記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目46)
前記ヒトC1qcポリペプチドの前記球状頭部ドメインが、配列番号6のアミノ酸113~245を含む、項目45に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目47)
前記ヒト核酸配列が、配列番号6のアミノ酸114~245をコードする、項目45または46に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目48)
前記非ヒト核酸配列が、非ヒトC1qポリペプチドのN末端葉柄茎領域を実質的にコードする、項目1、2、または34~36のいずれか1項に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目49)
前記非ヒト動物がマウスであり、マウスC1qポリペプチドのN末端葉柄茎領域が、それぞれ、配列番号1のアミノ酸23~107(C1qaの)、配列番号2のアミノ酸26~114(C1qbの)、または配列番号3のアミノ酸30~113(C1qcの)を含む、項目48に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目50)
前記マウスが、キメラC1qaポリペプチドをコードする核酸を含み、ここにおいて、前記核酸が、マウス核酸配列およびヒト核酸配列を含み、ここにおいて前記マウス核酸配列が、配列番号1のアミノ酸23~111をコードする、項目49に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目51)
前記マウスが、キメラC1qbポリペプチドをコードする核酸を含み、ここにおいて、前記核酸が、マウス核酸配列およびヒト核酸配列を含み、ここにおいて前記マウス核酸配列が、配列番号2のアミノ酸26~117をコードする、項目49に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目52)
前記マウスが、キメラC1qcポリペプチドをコードする核酸を含み、ここにおいて、前記核酸が、マウス核酸配列およびヒト核酸配列を含み、ここにおいて前記マウス核酸配列が、配列番号3のアミノ酸30~114をコードする、項目49に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目53)
前記非ヒト動物がラットであり、前記内因性C1qポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が、それぞれ、配列番号7のアミノ酸23~107(C1qaの)、配列番号8のアミノ酸26~114(C1qbの)、および配列番号9のアミノ酸32~115(C1qcの)を含む、項目48に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目54)
前記ラットが、キメラC1qaポリペプチドをコードする核酸を含み、ここにおいて、前記核酸が、ラット核酸配列およびヒト核酸配列を含み、ここにおいて前記ラット核酸配列が、配列番号7のアミノ酸23~111をコードする、項目53に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目55)
前記ラットが、キメラC1qbポリペプチドをコードする核酸を含み、ここにおいて、前記核酸が、ラット核酸配列およびヒト核酸配列を含み、ここにおいて前記ラット核酸配列が、配列番号8のアミノ酸26~117をコードする、項目53に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目56)
前記ラットが、キメラC1qcポリペプチドをコードする核酸を含み、前記核酸が、ラット核酸配列、およびヒト核酸配列を含み、ここにおいて前記ラット核酸配列が、配列番号9のアミノ酸32~116をコードする、項目53に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目57)
前記動物が、ラットであり、かつそのゲノム中に、
a. 前記内因性C1qa遺伝子座で、キメララット/ヒトC1qaポリペプチドをコードする核酸配列であって、ここにおいて、前記核酸配列が、5’-3’、ならびに、動作可能な連結において、配列番号7のラットC1qaポリペプチドのアミノ酸1~111をコードする第一のヌクレオチド配列、および配列番号4のヒトC1qaポリペプチドのアミノ酸112~245をコードする第二のヌクレオチド配列、を含む、核酸配列と、
b. 前記内因性C1qb遺伝子座で、キメララット/ヒトC1qbポリペプチドをコードする核酸配列であって、ここにおいて、前記核酸配列が、5’-3’、ならびに、動作可能な連結において、配列番号8のラットC1qbポリペプチドのアミノ酸1~117をコードする第三のヌクレオチド配列、および配列番号5のヒトC1qbポリペプチドのアミノ酸118~251をコードする第4のヌクレオチド配列を、含む、核酸配列と、
c. 前記内因性C1qc遺伝子座で、キメララット/ヒトC1qcポリペプチドをコードする核酸配列であって、ここにおいて、前記核酸配列が、5’-3’、ならびに、動作可能な連結において、配列番号9のラットC1qcポリペプチドのアミノ酸1~116をコードする第五のヌクレオチド配列、および配列番号6のヒトC1qcポリペプチドのアミノ酸114~245をコードする第六のヌクレオチド配列を、含む、前記核酸配列と、を含む、項目1に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目58)
前記動物がマウスであり、かつそのゲノム中に、
a. 前記内因性C1qa遺伝子座で、キメラマウス/ヒトC1qaポリペプチドをコードする核酸配列であって、ここにおいて、前記核酸配列が、5’-3’、ならびに、動作可能な連結において、配列番号1のマウスC1qaポリペプチドのアミノ酸1~111をコードする第一のヌクレオチド配列、および配列番号4のヒトC1qaポリペプチドのアミノ酸112~245をコードする第二のヌクレオチド配列を、含む、核酸配列と、
b. 前記内因性C1qb遺伝子座で、キメラマウス/ヒトC1qbポリペプチドをコードする核酸配列であって、ここにおいて、前記核酸配列が、5’-3’、ならびに、動作可能な連結において、配列番号2のマウスC1qbポリペプチドのアミノ酸1~117をコードする第三のヌクレオチド配列、および配列番号5のヒトC1qbポリペプチドのアミノ酸118~251をコードする第四のヌクレオチド配列を、含む、核酸配列と、
c. 前記内因性C1qc遺伝子座で、キメラマウス/ヒトC1qcポリペプチドをコードする核酸配列であって、ここにおいて、前記核酸配列が、5’-3’、ならびに、動作可能な連結において、配列番号3のマウスC1qcポリペプチドのアミノ酸1~114をコードする第五のヌクレオチド配列、および配列番号6のヒトC1qcポリペプチドのアミノ酸114~245をコードする第六のヌクレオチド配列を、含む、前記核酸配列と、を含む、項目1に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目59)
前記非ヒト動物が、機能的な内因性C1qa、C1qb、および/またはC1qcポリペプチドを発現しない、項目1~58のいずれか1項に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目60)
遺伝子改変非ヒト動物を作製する方法であって、前記方法が、キメラC1qポリペプチドをコードする核酸を含む、非ヒト動物のゲノムを改変することを含み、ここにおいて、前記核酸が、非ヒト核酸配列と、ヒト核酸配列とを含み、ここにおいて、前記キメラC1qポリペプチドが、キメラC1qaポリペプチド、キメラC1qbポリペプチド、キメラC1qcポリペプチド、およびそれらの組み合わせからなる群から選択され、かつここにおいて、前記キメラC1qポリペプチドが、実質的にヒトである球状頭部ドメインと、実質的に非ヒトであるN末端葉柄茎領域とを含む、方法。
(項目61)
前記非ヒト動物の前記ゲノムが改変されて、キメラC1qaポリペプチドをコードする核酸と、キメラC1qbポリペプチドをコードする核酸と、キメラC1qcポリペプチドをコードする核酸とを含む、項目60に記載の方法。
(項目62)
前記キメラC1qポリペプチドをコードする核酸が、前記内因性非ヒトC1q遺伝子座に導入される、項目60または61に記載の方法。
(項目63)
前記キメラC1qポリペプチドをコードする核酸が、前記内因性非ヒトC1q遺伝子のヌクレオチド配列を前記内因性非ヒトC1q遺伝子座で置換する、項目62に記載の方法。
(項目64)
前記動物が齧歯類、例えばマウスまたはラットである、項目60~63のいずれか1項に記載の方法。
(項目65)
前記改変することが、
a. 前記ヒト核酸配列を含む核酸分子を、齧歯類胚性幹(ES)細胞のゲノム内に導入することと、
b. 齧歯類ES細胞を得ることであって、前記キメラC1qポリペプチドをコードするように、前記ヒト核酸配列が、内因性非ヒト核酸配列に動作可能な連結で、内因性C1q遺伝子座内に統合されている、得ることと、
c. bで得られた前記齧歯類ES細胞から齧歯類動物を生成することと、を含む、項目64に記載の方法。
(項目66)
前記核酸分子が、キメラC1qaポリペプチドをコードする核酸、キメラC1qbポリペプチドをコードする核酸、およびキメラC1qcポリペプチドをコードする核酸を含む、項目65に記載の方法。
(項目67)
実質的にヒトである球状頭部ドメインと、実質的に非ヒトであるN末端葉柄茎領域とを含むキメラC1qポリペプチドであって、ここにおいて、前記キメラC1qポリペプチドが、キメラC1qaポリペプチド、キメラC1qbポリペプチド、およびキメラC1qcポリペプチドからなる群から選択される、キメラC1qポリペプチド。
(項目68)
項目1~59のいずれかに記載の非ヒト動物から作製されたキメラC1qポリペプチド。
(項目69)
項目67または68に記載のキメラC1qポリペプチドのうちの1つ以上を含むキメラC1qタンパク質。
(項目70)
前記タンパク質が、少なくとも1つのキメラC1qa、少なくとも1つのキメラC1qb、および少なくとも1つのキメラC1qcポリペプチドを含む、項目69に記載のキメラC1qタンパク質。
(項目71)
前記タンパク質が、前記キメラC1qaポリペプチド、キメラC1qbポリペプチド、およびキメラC1qcポリペプチドの各々の6個ずつを含む、項目70に記載のキメラC1qタンパク質。
(項目72)
機能的なキメラC1qポリペプチドをコードする単離核酸であって、前記単離核酸が、非ヒト哺乳動物核酸配列、およびヒト核酸配列を含み、ここにおいて、前記ヒト核酸配列が、ヒトC1qポリペプチドの球状頭部ドメインを実質的にコードし、前記非ヒト核酸配列が、同族非ヒトC1qポリペプチドのN末端葉柄茎領域を実質的にコードし、かつここにおいて、前記C1qポリペプチドが、C1qaポリペプチド、C1qbポリペプチド、またはC1qcポリペプチドから選択される、単離核酸。
(項目73)
前記第一、第二、または第三のヌクレオチド配列のうちの1つ以上を含む、キメラ非ヒト哺乳動物C1qタンパク質をコードする単離核酸であって、ここにおいて、
a. 前記第一のヌクレオチド配列が、キメラC1qaポリペプチドをコードし、
b. 前記第二のヌクレオチド配列が、キメラC1qbポリペプチドをコードし、
c. 前記第三のヌクレオチド配列が、キメラC1qcポリペプチドをコードし、
ここにおいて、前記第一、第二、および第三のヌクレオチド配列が、非ヒト哺乳動物核酸配列と、ヒト核酸配列とを含み、ここにおいて、前記ヒト核酸配列が、それぞれ、ヒトC1qa、C1qb、およびC1qcポリペプチドの球状頭部ドメインを実質的にコードし、および前記非ヒト核酸配列が、それぞれ、同族非ヒトC1qポリペプチド、C1qa、C1qb、およびC1qcポリペプチドのN末端葉柄茎領域を実質的にコードする、単離核酸。
(項目74)
項目73または74に記載の単離核酸を含む細胞。
(項目75)
前記細胞が胚性幹細胞である、項目74に記載の細胞。
(項目76)
項目75に記載の細胞を含む、遺伝子改変非ヒト動物。
(項目77)
C1qベースの二重特異性抗原結合タンパク質を試験するトランスジェニック齧歯類モデルであって、ここにおいて、前記抗原結合タンパク質が、ヒトC1q、および非齧歯類対象抗原の両方を結合し、項目1~59のいずれかに記載の遺伝子改変齧歯類を含み、さらに前記非齧歯類対象抗原、または前記非齧歯類対象抗原を発現する細胞を含む、トランスジェニック齧歯類モデル。
(項目78)
対象抗原を標的とする薬剤候補のスクリーニング方法であって、前記方法が、
a. 項目1~59のいずれかにより定義された遺伝子改変齧歯類に前記対象抗原を導入することと、
b. 前記齧歯類を対象の薬剤候補と接触させることであって、ここにおいて、前記薬剤候補が、前記ヒトC1qおよび前記対象抗原に対して向けられている、接触させることと、
c. 前記薬剤候補が、前記対象抗原の存在または発現により特徴付けられる細胞の予防、低減、または除去において有効であるかどうかを分析することと、を含む、方法。
(項目79)
前記導入する工程が、前記齧歯類に前記対象抗原を発現することを含む、項目78に記載の方法。
(項目80)
前記導入する工程が、前記齧歯類内に、前記対象抗原を発現する細胞を導入することを含む、項目78に記載の方法。
(項目81)
前記対象抗原が腫瘍関連抗原である、項目78~80のいずれかに記載の方法。
(項目82)
前記細胞が、ブドウ球菌細胞などの細菌細胞であり、前記抗原がブドウ球菌抗原などの細菌抗原である、項目78~80のいずれかに記載の方法。
(項目83)
前記抗原がウイルス抗原である、項目78~80のいずれかに記載の方法。
(項目84)
前記導入する工程が、前記齧歯類を前記対象抗原で感染させることを含む、項目82または83に記載の方法。
(項目85)
前記齧歯類が、免疫応答性のマウス、または免疫応答性のラットである、項目78に記載の方法。
(項目86)
前記薬剤候補が、抗体、または抗原結合タンパク質である、項目78に記載の方法。
(項目87)
前記抗体または前記抗原結合タンパク質が、それぞれ、二重特異性抗体、または二重特異性抗原結合タンパク質であり、これがヒトC1qタンパク質および前記対象抗原の両方を結合する能力を有する、項目86に記載の方法。
(項目88)
候補抗体が補体経路を活性化するかどうかを評価する方法であって、前記方法が、
a. 細胞表面上に対象抗原を発現する細胞、ヒトFc領域を含み、前記対象抗原に向けられる候補抗体、および項目1~59のいずれかに記載の遺伝子改変非ヒト動物からの血清サンプル、を提供することと、
b. 前記細胞を前記候補抗体と混合して、前記抗体が、前記細胞表面上に発現される前記対象抗原に結合することを可能にすることと、
c. 前記血清サンプルを前記細胞抗体混合物に加えて、前記細胞上の前記対象抗原に結合した抗体に、前記血清サンプル内の前記ヒト化C1qタンパク質が結合することを可能にすることと、
d. 前記細胞の細胞毒性を測定することと、を含む、方法。
(項目89)
対象抗原およびヒトC1qを標的とする候補二重特異性抗体を評価するための方法であって、前記方法が、
a. 前記対象抗原を発現する細胞またはウイルス、前記候補二重特異性抗体、および項目1~59のいずれかに記載の遺伝子改変非ヒト動物から血液サンプルを混合し、インキュベートして、前記抗体が、前記細胞またはウイルスにより発現される前記対象抗原、および前記血液サンプル中のヒト化C1q分子に結合することを可能にすることと、
b. 前記細胞またはウイルスの生存を測定することと、を含む、方法。
(項目90)
前記細胞が、ブドウ球菌細胞などの細菌細胞であり、前記抗原がブドウ球菌抗原などの細菌抗原である、項目89に記載の方法。
(項目91)
前記ラットが、そのゲノム中に、
a.前記内因性C1qa遺伝子座で、配列番号55のアミノ酸配列を含むキメララット/ヒトC1qaポリペプチドをコードする核酸配列と、
b.前記内因性C1qb遺伝子座で、配列番号56のアミノ酸配列を含むキメララット/ヒトC1qbポリペプチドをコードする核酸配列と、
c.前記内因性C1qa遺伝子座で、配列番号57のアミノ酸配列を含むキメララット/ヒトC1qcポリペプチドをコードする核酸配列と、を含む項目57に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
(項目92)
前記マウスが、そのゲノム内に、
a. 前記内因性C1qa遺伝子座で、配列番号10のアミノ酸配列を含むキメラマウス/ヒトC1qaポリペプチドをコードする核酸配列と、
b. 前記内因性C1qb遺伝子座で、配列番号11のアミノ酸配列を含むキメラマウス/ヒトC1qbポリペプチドをコードする核酸配列と、
c. 前記内因性C1qa遺伝子座で、配列番号12のアミノ酸配列を含むキメラマウス/ヒトC1qcポリペプチドをコードする核酸配列と、を含む、項目58に記載の遺伝子改変非ヒト動物。
Claims (32)
- 遺伝子改変齧歯類動物であって、前記齧歯類動物が、マウスまたはラットであり、かつ、そのゲノム内に:
(a)キメラC1qaポリペプチドをコードする核酸であって、前記キメラC1qaポリペプチドが、
(i)配列番号4のアミノ酸108~245を含むヒトC1qaポリペプチドの球状頭部ドメインと、少なくとも90%同一の球状頭部ドメイン、および
(ii)内因性の齧歯類C1qaポリペプチドのN末端葉柄茎領域と少なくとも90%同一のN末端葉柄茎領域を含み、
前記齧歯類動物がマウスである場合、内因性のマウスC1qaポリペプチドのN末端葉柄茎領域が配列番号1のアミノ酸23~107を含み、
前記齧歯類動物がラットである場合、内因性のラットC1qaポリペプチドのN末端葉柄茎領域が配列番号7のアミノ酸23~107を含む、核酸;
(b)キメラC1qbポリペプチドをコードする核酸であって、前記キメラC1qbポリペプチドが、
(i)配列番号5のアミノ酸115~251を含むヒトC1qbポリペプチドの球状頭部ドメインと、少なくとも90%同一の球状頭部ドメイン、および
(ii)内因性の齧歯類C1qbポリペプチドのN末端葉柄茎領域と少なくとも90%同一のN末端葉柄茎領域を含み、
前記齧歯類動物がマウスである場合、内因性のマウスC1qbポリペプチドのN末端葉柄茎領域が配列番号2のアミノ酸26~114を含み、
前記齧歯類動物がラットである場合、内因性のラットC1qbポリペプチドのN末端葉柄茎領域が配列番号8のアミノ酸26~114を含む、核酸;ならびに
(c)キメラC1qcポリペプチドをコードする核酸であって、前記キメラC1qcポリペプチドが、
(i)配列番号6のアミノ酸113~245を含むヒトC1qcポリペプチドの球状頭部ドメインと、少なくとも90%同一の球状頭部ドメイン、および
(ii)内因性の齧歯類C1qcポリペプチドのN末端葉柄茎領域と少なくとも90%同一のN末端葉柄茎領域を含み、
前記齧歯類動物がマウスである場合、内因性のマウスC1qcポリペプチドのN末端葉柄茎領域が配列番号3のアミノ酸30~113を含み、
前記齧歯類動物がラットである場合、内因性のラットC1qcポリペプチドのN末端葉柄茎領域が配列番号9のアミノ酸32~115を含む、核酸
を含み、
ここで、前記キメラC1qa、C1qb、およびC1qcポリペプチドが前記齧歯類動物内で発現されて、機能的なC1q複合体を形成し、そして
前記齧歯類動物が、機能的な内因性のC1qaポリペプチド、機能的な内因性のC1qbポリペプチド、および機能的なC1qcポリペプチドのいずれも発現しない、遺伝子改変齧歯類動物。 - 前記齧歯類動物がマウスであり、前記内因性のマウスC1qaポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が配列番号1の23~107のアミノ酸を含む、請求項1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
- 前記齧歯類動物がマウスであり、前記キメラC1qaポリペプチドが配列番号10の23~245のアミノ酸を含む、請求項1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
- 前記齧歯類動物がラットであり、前記内因性のラットC1qaポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が配列番号7の23~107のアミノ酸を含む、請求項1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
- 前記齧歯類動物がラットであり、前記キメラC1qaポリペプチドが配列番号55の23~245のアミノ酸を含む、請求項1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
- 前記齧歯類動物がマウスであり、前記内因性のマウスC1qbポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が配列番号2の26~114のアミノ酸を含む、請求項1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
- 前記齧歯類動物がマウスであり、前記キメラC1qbポリペプチドが配列番号11の26~251のアミノ酸を含む、請求項1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
- 前記齧歯類動物がラットであり、前記内因性のラットC1qbポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が配列番号8の26~114のアミノ酸を含む、請求項1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
- 前記齧歯類動物がラットであり、前記キメラC1qbポリペプチドが配列番号56の26~251のアミノ酸を含む、請求項1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
- 前記齧歯類動物がマウスであり、前記内因性のマウスC1qcポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が配列番号3の30~113のアミノ酸を含む、請求項1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
- 前記齧歯類動物がマウスであり、前記キメラC1qcポリペプチドが配列番号12の30~246のアミノ酸を含む、請求項1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
- 前記齧歯類動物がラットであり、前記内因性のラットC1qcポリペプチドの前記N末端葉柄茎領域が配列番号9の32~115のアミノ酸を含む、請求項1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
- 前記齧歯類動物がラットであり、前記キメラC1qcポリペプチドが配列番号57の32~248のアミノ酸を含む、請求項12に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
- 前記キメラC1qaポリペプチドが内因性の齧歯類C1qaシグナルペプチドを含み、前記キメラC1qbポリペプチドが内因性の齧歯類C1qbシグナルペプチドを含み、前記キメラC1qcポリペプチドが内因性の齧歯類C1qcシグナルペプチドを含む、請求項1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
- (i)前記キメラC1qaポリペプチドをコードする前記核酸が内因性の齧歯類C1qa遺伝子座にあり、
(ii)前記キメラC1qbポリペプチドをコードする前記核酸が内因性の齧歯類C1qb遺伝子座にあり、かつ/または
(iii)前記キメラC1qcポリペプチドをコードする前記核酸が内因性の齧歯類C1qc遺伝子座にある、請求項1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。 - 内因性の齧歯類C1q遺伝子座において内因性ゲノム配列がヒト核酸配列によって置換されている、請求項1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。
- 前記齧歯類動物がラットであり、
(a)内因性C1qa遺伝子座で、キメララット/ヒトC1qaポリペプチドをコードする核酸配列を含み、前記核酸配列が、5’-3’、ならびに動作可能な連結において、配列番号7のラットC1qaポリペプチドのアミノ酸1~111をコードする第一ヌクレオチド配列、および配列番号4のヒトC1qaポリペプチドのアミノ酸112~245をコードする第二ヌクレオチド配列を含み、
(b)内因性C1qb遺伝子座で、キメララット/ヒトC1qbポリペプチドをコードする核酸配列を含み、前記核酸配列が、5’-3’、ならびに動作可能な連結において、配列番号8のラットC1qbポリペプチドのアミノ酸1~117をコードする第三ヌクレオチド配列、および配列番号5のヒトC1qbポリペプチドのアミノ酸118~251をコードする第四ヌクレオチド配列を含み、かつ
(c)内因性C1qc遺伝子座で、キメララット/ヒトC1qcポリペプチドをコードする核酸配列を含み、前記核酸配列が、5’-3’、ならびに動作可能な連結において、配列番号9のラットC1qcポリペプチドのアミノ酸1~116をコードする第五ヌクレオチド配列、および配列番号6のヒトC1qcポリペプチドのアミノ酸114~245をコードする第六ヌクレオチド配列を含む、請求項1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。 - 前記齧歯類動物がマウスであり、
(a)内因性C1qa遺伝子座で、キメラマウス/ヒトC1qaポリペプチドをコードする核酸配列を含み、前記核酸配列が、5’-3’、ならびに動作可能な連結において、配列番号1のマウスC1qaポリペプチドのアミノ酸1~111をコードする第一ヌクレオチド配列、および配列番号4のヒトC1qaポリペプチドのアミノ酸112~245をコードする第二ヌクレオチド配列を含み、
(b)内因性C1qb遺伝子座で、キメラマウス/ヒトC1qbポリペプチドをコードする核酸配列を含み、前記核酸配列が、5’-3’、ならびに動作可能な連結において、配列番号2のマウスC1qbポリペプチドのアミノ酸1~117をコードする第三ヌクレオチド配列、および配列番号5のヒトC1qbポリペプチドのアミノ酸118~251をコードする第四ヌクレオチド配列を含み、かつ
(c)内因性C1qc遺伝子座で、キメラマウス/ヒトC1qcポリペプチドをコードする核酸配列を含み、前記核酸配列が、5’-3’、ならびに動作可能な連結において、配列番号3のマウスC1qcポリペプチドのアミノ酸1~114をコードする第五ヌクレオチド配列、および配列番号6のヒトC1qcポリペプチドのアミノ酸114~245をコードする第六ヌクレオチド配列を含む、請求項1に記載の遺伝子改変齧歯類動物。 - 遺伝子改変齧歯類動物の製造方法であって、前記齧歯類動物がマウスまたはラットであり、前記方法は、
齧歯類ゲノムを改変することにより改変齧歯類ゲノムが
(a)齧歯類C1qa核酸配列およびヒトC1qa核酸配列を含み、キメラC1qaポリペプチドをコードする核酸であって、前記キメラC1qaポリペプチドが、
(i)配列番号4のアミノ酸108~245を含むヒトC1qaポリペプチドの球状頭部ドメインと、少なくとも90%同一の球状頭部ドメイン、および
(ii)内因性の齧歯類C1qaポリペプチドのN末端葉柄茎領域と少なくとも90%同一のN末端葉柄茎領域を含み、
前記齧歯類動物がマウスである場合、内因性のマウスC1qaポリペプチドのN末端葉柄茎領域が配列番号1のアミノ酸23~107を含み、
前記齧歯類動物がラットである場合、内因性のラットC1qaポリペプチドのN末端葉柄茎領域が配列番号7のアミノ酸23~107を含む、核酸;
(b)齧歯類C1qb核酸配列およびヒトC1qb核酸配列を含み、キメラC1qbポリペプチドをコードする核酸であって、前記キメラC1qbポリペプチドが、
(i)配列番号5のアミノ酸115~251を含むヒトC1qbポリペプチドの球状頭部ドメインと、少なくとも90%同一の球状頭部ドメイン、および
(ii)内因性の齧歯類C1qbポリペプチドのN末端葉柄茎領域と少なくとも90%同一のN末端葉柄茎領域を含み、
前記齧歯類動物がマウスである場合、内因性のマウスC1qbポリペプチドのN末端葉柄茎領域が配列番号2のアミノ酸26~114を含み、
前記齧歯類動物がラットである場合、内因性のラットC1qbポリペプチドのN末端葉柄茎領域が配列番号8のアミノ酸26~114を含む、核酸;ならびに
(c)齧歯類C1qc核酸配列およびヒトC1qc核酸配列を含み、キメラC1qcポリペプチドをコードする核酸であって、前記キメラC1qcポリペプチドが、
(i)配列番号6のアミノ酸113~245を含むヒトC1qcポリペプチドの球状頭部ドメインと、少なくとも90%同一の球状頭部ドメイン、および
(ii)内因性の齧歯類C1qcポリペプチドのN末端葉柄茎領域と少なくとも90%同一のN末端葉柄茎領域を含み、
前記齧歯類動物がマウスである場合、内因性のマウスC1qcポリペプチドのN末端葉柄茎領域が配列番号3のアミノ酸30~113を含み、
前記齧歯類動物がラットである場合、内因性のラットC1qcポリペプチドのN末端葉柄茎領域が配列番号9のアミノ酸32~115を含む、核酸
を含み、
ここで、(a)~(c)の前記核酸の各々が、各々の内因性の齧歯類C1q遺伝子座に導入され、
前記キメラC1qa、C1qb、およびC1qcポリペプチドが前記齧歯類動物内で発現されて、機能的なC1q複合体を形成し、そして
前記齧歯類動物が、機能的な内因性のC1qaポリペプチド、機能的な内因性のC1qbポリペプチド、および機能的なC1qcポリペプチドのいずれも発現しない、製造方法。 - 前記改変することが、
(a)以下を齧歯類胚性幹(ES)細胞に導入すること
(i)ヒトC1qa核酸配列を含む核酸分子、
(ii)ヒトC1qb核酸配列を含む核酸分子、および
(iii)ヒトC1qc核酸配列を含む核酸分子
(b)齧歯類ES細胞を得ることであって、前記キメラC1qaポリペプチド、前記キメラC1qbポリペプチド、および前記キメラC1qcポリペプチドをコードするように、ヒト核酸配列が、内因性の齧歯類核酸配列に動作可能な連結でそれぞれの内因性C1q遺伝子座内に統合されている、得ること、ならびに
(c)齧歯類動物を(b)で得られた前記齧歯類ES細胞から生成すること
を含む、請求項19に記載の製造方法。 - キメラ齧歯類C1qタンパク質をコードする単離核酸の組み合わせであって、
(a)キメラC1qaポリペプチドをコードする第一ヌクレオチド配列を含む核酸、
(b)キメラC1qbポリペプチドをコードする第二ヌクレオチド配列を含む核酸、および
(c)キメラC1qcポリペプチドをコードする第三ヌクレオチド配列を含む核酸、
を含み、
ここで、前記第一、第二、第三ヌクレオチド配列の各々が、齧歯類核酸配列およびヒト核酸配列を含み、
前記ヒト核酸配列がそれぞれ、ヒトC1qa、C1qb、およびC1qcポリペプチドの球状頭部ドメインと少なくとも90%同一なポリペプチドをコードし、
前記ヒトC1qaポリペプチドの球状頭部ドメインが配列番号4のアミノ酸108~245を含み、
前記ヒトC1qbポリペプチドの球状頭部ドメインが配列番号5のアミノ酸115~251を含み、そして、
前記ヒトC1qcポリペプチドの球状頭部ドメインが配列番号6のアミノ酸113~245を含み、
前記齧歯類核酸配列がそれぞれ、同族の齧歯類のC1qポリペプチド、C1qa、C1qb、およびC1qcポリペプチドのN末端葉柄茎領域と少なくとも90%同一なポリペプチドをコードし、前記齧歯類がマウスまたはラットであり、
前記齧歯類がマウスである場合、同族マウスC1qaポリペプチドのN末端葉柄茎領域が配列番号1のアミノ酸23~107を含み、同族マウスC1qbポリペプチドのN末端葉柄茎領域が配列番号2のアミノ酸26~114を含み、同族マウスC1qcポリペプチドのN末端葉柄茎領域が配列番号3のアミノ酸30~113を含み、そして
前記齧歯類がラットである場合、同族ラットC1qaポリペプチドのN末端葉柄茎領域が配列番号7のアミノ酸23~107を含み、同族ラットC1qbポリペプチドのN末端葉柄茎領域が配列番号8のアミノ酸26~114を含み、同族ラットC1qcポリペプチドのN末端葉柄茎領域が配列番号9のアミノ酸32~115を含み、
ここで、前記キメラC1qa、C1qb、およびC1qcポリペプチドが、機能的なC1q複合体を形成する、単離核酸の組み合わせ。 - 請求項21の単離核酸の組み合わせを含む齧歯類胚性幹(ES)細胞であって、前記齧歯類ES細胞が、マウスES細胞またはラットES細胞である、齧歯類ES細胞。
- 請求項22に記載の齧歯類ES細胞を含む、齧歯類胚。
- 対象抗原を標的とする薬剤候補のスクリーニング方法であって、
(a)前記対象抗原を請求項1~18のいずれかに記載の齧歯類動物に導入すること、
(b)前記齧歯類動物を薬剤候補と接触させることであって、前記薬剤候補がヒトC1qおよび前記対象抗原に対して向けられる、接触されること、および
(c)前記薬剤候補が、前記対象抗原の存在または発現によって特徴づけられる細胞を低減する、あるいは除去するのに有効であるかどうかを分析すること、を含む、方法。 - 前記対象抗原が、腫瘍関連抗原、細菌細胞、細菌抗原、またはウイルス抗原である、請求項24に記載の方法。
- 前記対象抗原が、ブドウ球菌細胞、またはブドウ球菌抗原である、請求項25に記載の方法。
- 前記齧歯類動物が免疫応答性のマウスまたは免疫応答性のラットである、請求項24に記載の方法。
- 前記薬剤候補が、抗体または抗原結合タンパク質である、請求項24に記載の方法。
- 候補抗体が補体経路を活性化するかどうかを評価する方法であって、前記候補抗体がヒトFc領域を含み、かつ、対象抗原に向けられ、前記方法は、
(a)細胞表面上に前記対象抗原を発現する細胞と前記候補抗体を混合して、前記抗体と細胞表面上に発現した前記対象抗原とを結合させること、
(b)請求項1~18のいずれか一項に記載の遺伝子改変齧歯類動物から得た血清サンプルを細胞抗体混合物に加えて、前記血清サンプル内のヒト化C1qタンパク質の、前記細胞上の対象抗原と結合された抗体との結合を可能にすること、および
(c)前記細胞の溶解を測定することであって、前記細胞の溶解は、前記候補抗体が補体経路を活性化することを示す、こと
を、含む、方法。 - 対象抗原およびヒトC1qを標的とする候補二特異性抗体を評価する方法であって、
(a)前記対象抗原を発現する細胞またはウイルスと、前記候補二特異性抗体と、遺伝子改変齧歯類のゲノムを含む請求項1~18のいずれか一項に記載の齧歯類動物からの血液サンプルとを混合し、インキュベートして、前記抗体が、前記細胞またはウイルスにより発現される前記対象抗原、および前記血液サンプル中のヒト化C1q分子に結合することを可能にすること、ならびに
(b)前記細胞またはウイルスの生存を測定すること、を含む、方法。 - 前記細胞が細菌細胞であり、前記抗原が細菌抗原である、請求項30に記載の方法。
- 前記細菌細胞がブドウ球菌細胞であるか、または、前記細菌抗原がブドウ球菌抗原である、請求項31に記載の方法。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
JP2023035499A JP2023075230A (ja) | 2017-09-29 | 2023-03-08 | ヒト化C1q複合体を発現する非ヒト動物 |
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201762565438P | 2017-09-29 | 2017-09-29 | |
US62/565,438 | 2017-09-29 | ||
PCT/US2018/053099 WO2019067706A1 (en) | 2017-09-29 | 2018-09-27 | NON-HUMAN ANIMALS EXPRESSING A HUMANIZED C1Q COMPLEX |
Related Child Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2023035499A Division JP2023075230A (ja) | 2017-09-29 | 2023-03-08 | ヒト化C1q複合体を発現する非ヒト動物 |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020535815A JP2020535815A (ja) | 2020-12-10 |
JP2020535815A5 JP2020535815A5 (ja) | 2021-11-04 |
JP7242650B2 true JP7242650B2 (ja) | 2023-03-20 |
Family
ID=63858187
Family Applications (2)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020518013A Active JP7242650B2 (ja) | 2017-09-29 | 2018-09-27 | ヒト化C1q複合体を発現する非ヒト動物 |
JP2023035499A Pending JP2023075230A (ja) | 2017-09-29 | 2023-03-08 | ヒト化C1q複合体を発現する非ヒト動物 |
Family Applications After (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2023035499A Pending JP2023075230A (ja) | 2017-09-29 | 2023-03-08 | ヒト化C1q複合体を発現する非ヒト動物 |
Country Status (18)
Country | Link |
---|---|
US (2) | US11186848B2 (ja) |
EP (2) | EP4249502A3 (ja) |
JP (2) | JP7242650B2 (ja) |
KR (1) | KR20200058487A (ja) |
CN (2) | CN116376973A (ja) |
AU (1) | AU2018341685A1 (ja) |
CA (1) | CA3077418A1 (ja) |
DK (1) | DK3687287T3 (ja) |
ES (1) | ES2961713T3 (ja) |
FI (1) | FI3687287T3 (ja) |
IL (1) | IL273588A (ja) |
LT (1) | LT3687287T (ja) |
PT (1) | PT3687287T (ja) |
RU (1) | RU2020112751A (ja) |
SG (1) | SG11202002002XA (ja) |
SI (1) | SI3687287T1 (ja) |
WO (1) | WO2019067706A1 (ja) |
ZA (1) | ZA202001389B (ja) |
Families Citing this family (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20190098879A1 (en) | 2017-09-29 | 2019-04-04 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Non-Human Animals Comprising A Humanized TTR Locus And Methods Of Use |
JP2022534867A (ja) | 2019-06-04 | 2022-08-04 | リジェネロン・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド | ベータスリップ変異を有するヒト化ttr遺伝子座を含む非ヒト動物と使用方法 |
Family Cites Families (16)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US20030082546A1 (en) * | 1996-11-06 | 2003-05-01 | Genentech, Inc. | Secreted and transmembrane polypeptides and nucleic acids encoding the same |
US6586251B2 (en) | 2000-10-31 | 2003-07-01 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Methods of modifying eukaryotic cells |
ES2329012T3 (es) | 2000-11-07 | 2009-11-20 | Zymogenetics, Inc. | Receptor del factor de necrosis tumoral humano. |
GB0322998D0 (en) | 2003-10-01 | 2003-11-05 | Ares Trading Sa | Protein |
US7294754B2 (en) | 2004-10-19 | 2007-11-13 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Method for generating an animal homozygous for a genetic modification |
SI1962895T1 (sl) * | 2005-12-16 | 2013-04-30 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Terapevtska uporaba DII4 antagonista in VEGF inhibitorja za inhibiranje tumorske rasti |
CN104761641A (zh) * | 2007-06-12 | 2015-07-08 | Ac免疫有限公司 | β淀粉样蛋白的人源化抗体 |
KR101830020B1 (ko) | 2010-03-31 | 2018-02-19 | 아블렉시스, 엘엘씨 | 키메라 항체의 제조를 위한 비-인간 동물의 유전적 조작 |
WO2012080518A1 (en) * | 2010-12-17 | 2012-06-21 | Neurimmune Holding Ag | Human anti-sod1 antibodies |
LT3262932T (lt) | 2011-10-28 | 2019-08-26 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Pelės su genetiškai modifikuotu pagrindiniu histosuderinamumo kompleksu |
US9043996B2 (en) * | 2011-10-28 | 2015-06-02 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Genetically modified major histocompatibility complex animals |
ES2904803T3 (es) | 2013-02-20 | 2022-04-06 | Regeneron Pharma | Modificación genética de ratas |
ES2699578T3 (es) | 2013-04-16 | 2019-02-11 | Regeneron Pharma | Modificación direccionada del genoma de rata |
MX2016014504A (es) * | 2014-05-05 | 2017-05-23 | Regeneron Pharma | Animales c5 y c3 humanizados. |
HUE059417T2 (hu) | 2014-11-24 | 2022-11-28 | Regeneron Pharma | Humanizált CD3-komplexet expresszáló nem humán állatok |
US20190098879A1 (en) | 2017-09-29 | 2019-04-04 | Regeneron Pharmaceuticals, Inc. | Non-Human Animals Comprising A Humanized TTR Locus And Methods Of Use |
-
2018
- 2018-09-27 PT PT187866116T patent/PT3687287T/pt unknown
- 2018-09-27 ES ES18786611T patent/ES2961713T3/es active Active
- 2018-09-27 CA CA3077418A patent/CA3077418A1/en active Pending
- 2018-09-27 SI SI201831001T patent/SI3687287T1/sl unknown
- 2018-09-27 DK DK18786611.6T patent/DK3687287T3/da active
- 2018-09-27 WO PCT/US2018/053099 patent/WO2019067706A1/en unknown
- 2018-09-27 CN CN202310113182.2A patent/CN116376973A/zh active Pending
- 2018-09-27 SG SG11202002002XA patent/SG11202002002XA/en unknown
- 2018-09-27 US US16/144,156 patent/US11186848B2/en active Active
- 2018-09-27 RU RU2020112751A patent/RU2020112751A/ru unknown
- 2018-09-27 CN CN201880066080.7A patent/CN111386039B/zh active Active
- 2018-09-27 KR KR1020207011761A patent/KR20200058487A/ko active IP Right Grant
- 2018-09-27 JP JP2020518013A patent/JP7242650B2/ja active Active
- 2018-09-27 AU AU2018341685A patent/AU2018341685A1/en active Pending
- 2018-09-27 LT LTEPPCT/US2018/053099T patent/LT3687287T/lt unknown
- 2018-09-27 EP EP23174310.5A patent/EP4249502A3/en active Pending
- 2018-09-27 FI FIEP18786611.6T patent/FI3687287T3/fi active
- 2018-09-27 EP EP18786611.6A patent/EP3687287B1/en active Active
-
2020
- 2020-03-04 ZA ZA2020/01389A patent/ZA202001389B/en unknown
- 2020-03-25 IL IL273588A patent/IL273588A/en unknown
-
2021
- 2021-10-21 US US17/506,730 patent/US20220033847A1/en active Pending
-
2023
- 2023-03-08 JP JP2023035499A patent/JP2023075230A/ja active Pending
Non-Patent Citations (2)
Title |
---|
Acta Neuropathol.,2013年,125(6),829-840 |
Mol Immunol.,2008年,45(11),3244-3252 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
RU2020112751A (ru) | 2021-10-29 |
KR20200058487A (ko) | 2020-05-27 |
EP4249502A3 (en) | 2023-12-06 |
WO2019067706A4 (en) | 2019-05-23 |
DK3687287T3 (da) | 2023-10-16 |
CN111386039A (zh) | 2020-07-07 |
SI3687287T1 (sl) | 2023-11-30 |
PT3687287T (pt) | 2023-11-03 |
US20220033847A1 (en) | 2022-02-03 |
US20190100772A1 (en) | 2019-04-04 |
RU2020112751A3 (ja) | 2022-02-09 |
AU2018341685A1 (en) | 2020-04-02 |
CA3077418A1 (en) | 2019-04-04 |
SG11202002002XA (en) | 2020-04-29 |
FI3687287T3 (fi) | 2023-10-12 |
EP3687287B1 (en) | 2023-07-12 |
CN111386039B (zh) | 2023-02-28 |
US11186848B2 (en) | 2021-11-30 |
IL273588A (en) | 2020-05-31 |
ZA202001389B (en) | 2024-01-31 |
JP2020535815A (ja) | 2020-12-10 |
CN116376973A (zh) | 2023-07-04 |
EP4249502A2 (en) | 2023-09-27 |
ES2961713T3 (es) | 2024-03-13 |
JP2023075230A (ja) | 2023-05-30 |
LT3687287T (lt) | 2023-10-25 |
WO2019067706A1 (en) | 2019-04-04 |
EP3687287A1 (en) | 2020-08-05 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
US10932455B2 (en) | Non-human animals expressing humanized CD3 complex | |
CN106255410B (zh) | 产生单结构域结合蛋白的非人动物 | |
US11602136B2 (en) | In vivo method for generating diversity in a protein scaffold | |
JP2023075230A (ja) | ヒト化C1q複合体を発現する非ヒト動物 | |
US20220039362A1 (en) | Humanized mouse model susceptible to emerging coronaviruses |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210927 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20210927 |
|
A131 | Notification of reasons for refusal |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A131 Effective date: 20220909 |
|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20221128 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20230207 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20230308 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7242650 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |