JP7164537B2 - 運動ニューロン疾患の治療のためのガングリオシド代謝阻害剤 - Google Patents

Description

本発明は運動ニューロン疾患の分野に関し、特に運動ニューロン疾患を治療するための方法に関する。本発明は、運動ニューロン疾患を治療するためのガングリオシド代謝阻害剤に関する。

遺伝性痙性対麻痺（ＨＳＰ）は２番目に最も頻繁な運動ニューロン疾患群を構成し、可変的に複雑な形態の他の脳の変化を伴う皮質脊髄路神経変性を特徴とする。それらは下肢における進行性の両側脱力感、痙縮および振動感覚の喪失を特徴とする。これらの症状は主として皮質脊髄路における上位運動ニューロンの軸索の変性が原因である。

ＳＰＧ１１（痙性対麻痺１１型）は、最も一般的な形態の常染色体劣性ＨＳＰであり、症例の１４～２５％であって複雑な劣性型の最大７０％を占める。主な症状は一般に人生の最初の１０年間に現われ、痙性歩行障害、認知機能障害、末梢性ニューロパチー、小脳性運動失調症、パーキンソン症候群および網膜変性が挙げられる。それはＳＰＧ１１遺伝子における突然変異によって引き起こされる。ＳＰＧ１１遺伝子（ＳＰＡＴＡＣＳＩＮまたはＫＩＡＡ１８４０ともいう）は、スパタクシン（ｓｐａｔａｃｓｉｎ）と呼ばれる２，４４３－アミノ酸タンパク質をコードする。大多数のＳＰＧ１１患者における突然変異は、ナンセンスもしくはフレームシフト突然変異ならびにスパタクシン機能の喪失を引き起こすことが予測される遺伝子内再構成である。

ＳＰＧ１１患者における末期の症状発現は、スパスチジン（ｓｐａｓｔｉｚｉｎ）をコードするＺＦＹＶＥ２６／ＳＰＧ１５遺伝子の突然変異を有するＳＰＧ１５患者において観察される症状発現とは区別できない。スパタクシンおよびスパスチジンはアダブタータンパク質複合体ＡＰ５と相互作用し、そのサブユニットのうちの１つであるＡＰ５－Ｚ１は、ＳＰＧ４８患者において突然変異される遺伝子によってコードされる。

この疾患のための治癒法は現在のところ利用可能なものはなく、従って、推定上の治療標的を同定するために、神経細胞死より上流の病理学的機序の分子特性評価が必要とされている。従ってＳＰＧ１１における推定上の治療は、ＳＰＧ４８およびＳＰＧ１５を含む他の形態のＨＳＰだけでなく、同じ経路において遺伝子の突然変異を有する進行性筋萎縮性側索硬化症およびシャルコー・マリー・トゥース病などの対立遺伝子疾患も対象となり得る。

本出願人は、当該疾患の初期段階におけるスパタクシン機能の喪失の結果を探究するために、および神経細胞死に先行する機序を調査するために、Ｓｐｇ１１ノックアウトマウスモデルを作製した。本出願人は、ヒトにおいて観察される症状に一致する初期の運動障害を観察した。

驚くべきことに本出願人は、ガングリオシド代謝を阻害すること（特にグルコシルセラミドシンターゼを阻害するかＧＭ３シンターゼを下方制御すること）により、Ｓｐｇ１１ノックアウトニューロンが死滅から保護されるということを発見した。グルコシルセラミドシンターゼ阻害剤は通常、深刻な多臓器性ヒト遺伝性疾患（それらの表現型の一部として神経細胞の変化を含む）であり且つ単一の酵素の欠損によって引き起こされる、リソソーム蓄積症（ＬＳＤ）の治療のために使用される。これまでのところ、ＨＳＰなどの運動ニューロン疾患のかなりの遺伝的異質性にも関わらず、変異した遺伝子によってコードされるタンパク質の機能は、細胞内膜輸送（より具体的には、巨大分子および細胞小器官の軸索輸送）の機能障害などの小数の細胞機能に集中している。驚くべきことに本出願人は、酵素の機能の完全な遮断により化合物が特にリソソームに蓄積しないため、ＳＰＧ１１の機能喪失は、軽度のＬＳＤ様表現型を模倣する進行性リソソーム機能不全につながる、ということを発見した。

さらにより驚くべきことに本出願人は、運動障害症状の前にＧＭ（Ｇａｎｇｌｉｏｓｉｄｅ Ｍｏｎｏｓｉａｌｉｃ）２およびＧＭ３ガングリオシドを含む脂質のリソソームへの蓄積（やはりこれも神経細胞死の前に生じる）が生じることを観察した。

本発明の１つの目的は、少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤を含むか、それからなるか、本質的にそれからなる、運動ニューロン疾患を治療するのに使用するための組成物である。

一実施形態では、前記ガングリオシド代謝阻害剤は、有機小分子、抗体、拮抗薬、阻害剤スキャフォールド、アプタマー、リボザイム、ペプチド、化学シャペロン、リボ核酸干渉（ＲＮＡｉ）、オリゴヌクレオチドアンチセンス、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、アンチセンスＲＮＡ（ａｓＲＮＡ）、モルホリノおよび操作されたヌクレアーゼを含む群から選択される。

別の実施形態では、前記ガングリオシド代謝阻害剤はグルコシルセラミドシンターゼ阻害剤であり、好ましくはイミノ糖、Ｄ－トレオ－１－フェニル－２－デカノイルアミノ－３－モルホリノ－プロパノール（ＰＤＭＰ）の類似体、セラミド類似体、カルボキサミド、カルバメート、グリコシドヒドロラーゼシャペロンを含む群から選択される。

別の実施形態では、前記グルコシルセラミドシンターゼ阻害剤は、キヌクリジン－３－イル （２－（４’－フルオロ－［１，－ビフェニル］－３－イル）プロパン－２－イル）カルバメート（quinuclidin-3-yl (2-(4'-fluoro-[1,-biphenyl]-3-yl)propan-2-yl) carbamate）（ＧＺ１６１）、Ｎ－ブチルデオキシノジリマイシン（ＮＢ－ＤＮＪ）、Ｎ－［（１Ｒ，２Ｒ）－１－（２，３－ジヒドロ－１，４－ベンゾジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（１－ピロリジニル）－２－プロパニル］オクタンアミド（N-[(1R,2R)-1-(2,3-dihydro-1,4-benzodioxin-6-yl)-1-hydroxy-3-(1-pyrrolidinyl)-2-propanyl]octanamide）、Ｎ－（５－アダマンタン－１－イル－メトキシペンチル）デオキシノジリマイシン（ＡＭＰ－ＤＮＪ）、Ｎ－ブチル－１－デオキシ－ノジリマイシン（ＫＴＢ－ＤＮＪ）、Ｎ－エチル－１－デオキシノジリマイシン（ＮＥ－ＤＮＪ）（N-ethyl-1-dexynojirimycin）、Ｎ－ブチルデオキシマンノジリマイシン（N-butyldeoxymannojixamycin）、Ｎ－５－カルボキシル－１－デオキシノジリマイシン（N-5-carboxyl-1-deoxynojiramycin）、Ｎ－ドデシル－１－デオキシノジリマイシン（N-docecyl -1-deoxynojirimycin）、ノジリマイシン硫酸塩（nojirimycin bisulfate）、ノジリマイシン－１－スルホン酸（nojiximycin -1-sulfonic acid）、Ｎ－（ｎ－ノニル）－１－デオキシノジリマイシン、Ｎ－（７－オキサデシル）－１－デオキシノジリマイシン、Ｎ－（７－オキサ－９，９，９－トリフルオロノニル）－１－デオキシノジリマイシン、（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（ヒドロキシメチル）－３，４，５－ピペリジントリオール、Ｎ－ブチルデオキシガラクトノジリマイシン（ＮＢ－ＤＧＪ）、Ｎ－（ｎ－ノニル）デオキシノジリマイシン、（３Ｓ，４Ｓ）－３－（ヒドロキシメチル）ピロリジン－３，４－ジオール（ｉｓｏＬＡＢ）、１，４－ジデオキシ－１，４－イミノ－Ｄ－アラビニトール、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－オキソピペリジン－２－カルボン酸、Ｄ－グルカロ－δ－ラクタム、１，４－ジデオキシ－２－ヒドロキシメチル－１，４－イミノ－Ｄ－トレイトール、（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）－２，４－ビス（ヒドロキシメチル）ピロリジン－３，４－ジオール、ｉｓｏＤＧＤＰ、Ｄ－トレオ－１－フェニル－２－デカノイルアミノ－３－モルホリノ－プロパノール（ＰＤＭＰ）、ＰＤＭＰの鏡像異性体、Ｌ－トレオ－１－フェニル－２－アミノ－１，３－プロパンジオールおよびＤＬ－エリスロ－１－フェニル－２－アミノ－１，３－プロパンジオール、Ｄ－トレオ（Ｒ，Ｒ）鏡像異性体、１－フェニル－２－パルミトイルアミノ－３－モルホリノ－１－プロパノール、１－フェニル－２－パルミトイルアミノ－３－ピロリジノ－１－プロパノール（Ｐ４）、Ｄ－トレオ－１－エチレンジオキシフェニル－２－パルミトイル－３－ピロリジノ－プロパノール（ＥｔＤＯ－Ｐ４）、ＤＬ－トレオ－１－フェニル－２－パルミトイルアミノ－３－ピロリジノ－１－プロパノール（ＤＬ－トレオ－Ｐ４）、２－（２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－２－イル）－Ｎ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）アセトアミド、Ｎ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）ノナンアミド、ＢＭＬ－１１９、ＩＶ－２３１Ｂ、（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル （２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメート（Ｓ）－２－ヒドロキシスクシネート（(S)-quinuclidin-3-yl (2-(2-(4-fluorophenyl)thiazol-4-yl)propan-2-yl)carbamate (S)-2-hydroxysuccinate）（ＧＺ４５２）、キヌクリジン－３－イル （２－（４’－フルオロ－［１，－ビフェニル］－３－イル）プロパン－２－イル）カルバメート（quinuclidin-3-yl (2-(4'-fluoro-[1,-biphenyl]-3-yl)propan-2-yl)carbamate）、（１Ｒ，２Ｒ）－オクタン酸［２－（２’，３’－ジヒドロ－ベンゾ［１，４］ジオキシン－６’－イル）－２－ヒドロキシ－１－ピロリジン－１－イルメチル－エチル］－アミド－Ｌ－酒石酸、ＥＸＥＬ－０３４６、イソファゴミン、トランス－４－（２－アミノ－３，５－ジブロモベンジルアミノ）－シクロヘキサノール（trans-4-(2-amino-3,5-dibrombenzylamino)-cyclohexanol）、５－（４－クロロフェニル）－６－エチル－２，４－ピリミジンジアミン、（３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（ヒドロキシメチル）－３，４－ピペリジンジオール、アンブロキソール、イミグルセラーゼ、α－ホモガラクトノジリマイシン（α-homogalactonojirimycin）、α－ホモアロノジリマイシン（α-homoallonojirimycin）、β－１－Ｃ－ブチル－ＤＧＪ、Ｎ－ノニル－ＤＮＪを含む群から選択される。

別の実施形態では、前記ガングリオシド代謝阻害剤はＧＭ３シンターゼ阻害剤である。一実施形態では、ＧＭ３シンターゼ阻害剤は、好ましくは配列番号３、配列番号４およびその機能保存的バリアントを含む群から選択される、ｍｉＲＮＡである。一実施形態では、ＧＭ３シンターゼ阻害剤はシチジン－モノホスホ－Ｎ－アセチルノイラミン酸の炭素連結型類似体である。

別の実施形態では、本組成物は、経口投与、局所投与、経皮投与、筋肉内投与、皮下投与、静脈内投与、非経口投与、鼻腔内投与によって投与される。

別の実施形態では、運動ニューロン疾患は、遺伝性痙性対麻痺（ＨＳＰ）（例えば、末梢性ニューロパチーを示すＨＳＰなど）、遺伝性痙性不全対麻痺、家族性痙性対麻痺、フランス植民地病（French settlement disease）またはストランペル－ロレイン病（Strumpell-Lorrain disease）、乳児発症上行性遺伝性痙性麻痺、ＭＡＳＡ症候群（ＣＲＡＳＨ症候群およびＧａｒｅｉｓ－Ｍａｓｏｎ症候群とも呼ばれる）、運動ニューロパチーを伴う白内障、低身長と骨格異常、ＭＡＳＴ症候群、アラン・ハーンドン・ダドリー症候群、トロイヤー症候群（Troyer syndrome）、Ｌｉｓｏｎ症候群、痙性運動失調症（特に、例えば痙性運動失調症２型などの遺伝性痙性運動失調症）、ＳＰＯＡＮ症候群、末梢性ニューロパチー、Ｋｊｅｌｌｉｎ症候群、遺伝性感覚運動ニューロパチー（ＨＭＳＮ）を含む群から選択される。一実施形態では、運動ニューロン疾患はＨＳＰであり、好ましくはＳＰＧ１１、ＳＰＧ１５、ＳＰＧ４８、ＳＰＧ４およびＳＰＧ７から選択される。

本発明の別の目的は、上述されるような少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤と薬学的に許容される賦形剤とを含むか、それらからなるか、本質的にそれらからなる、運動ニューロン疾患を治療するのに使用するための医薬組成物である。

本発明の別の目的は、上述されるような少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤を含むか、それからなるか、本質的にそれからなる、運動ニューロン疾患を治療するのに使用するための医薬である。

定義
本発明では、以下の用語は以下の意味を有する。

数字の前にある「約」は、前記数字の値の±１０％を意味する。

「遺伝子発現阻害剤」とは、遺伝子の発現を阻害するか有意に減少させるための生物学的効果を有する天然もしくは合成の化合物を指す。従って一実施形態では、「ガングリオシド代謝経路の酵素または酵素の補因子の発現阻害剤」とは、ガングリオシド代謝経路に関与する酵素またはそれらの補因子をコードする遺伝子の発現を阻害するか有意に減少させるための生物学的効果を有する天然もしくは合成の化合物を指す。

「拮抗薬」は、受容体の「真の」拮抗薬または逆作動薬を区別なく示すために使用される。「真の」受容体拮抗薬は、受容体に結合してその受容体の生物学的活性化を遮断する化合物である。一実施形態では、真の受容体拮抗薬は、例えば受容体の作動薬と競合することによって、前記受容体の作動薬の作用を防止する。逆作動薬は、作動薬と同じ受容体に結合するが逆の効果を与える化合物である。逆作動薬は、作動薬の非存在下で受容体活性化の構成的レベルを減少させる能力を有する。

「ガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素または酵素の少なくとも１種の補因子の阻害剤または拮抗薬」には、機能的ガングリオシド代謝経路（特に機能的酵素、そのリガンドなど）を発現する患者または細胞に投与すると、投与しなければガングリオシド代謝経路の酵素のその天然のリガンドへの結合により生じる下流の生物学的効果のいずれかを含む患者または細胞におけるガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素の活性化に関連する生物学的活性の阻害または下方制御を引き起こすあらゆる化学物質が包含される。そのような阻害剤または拮抗薬としては、ガングリオシド代謝経路の酵素の活性化またはガングリオシド代謝経路の酵素の下流の生物学的効果のいずれかを遮断することができるあらゆる薬剤が挙げられる。例えば、そのような阻害剤または拮抗薬は競合的阻害剤であってもよく、ガングリオシド代謝経路の酵素のリガンド結合部位またはその一部を占有することによって作用し、それにより当該酵素を、その正常な生物学的活性が防止または減少されるようにその天然のリガンドにアクセス不可能にさせる。そのような阻害剤または拮抗薬の他の例としては、限定されるものではないが、非競合的阻害剤、不競合的阻害剤および混合型阻害剤が挙げられる。非競合的阻害剤とは、標的酵素の活性を減少させ、かつ酵素が既に基質に結合しているか否かに関わらずそれに同等に十分に結合する阻害剤を指す。非競合的阻害剤はその基質が既に結合されているか否かに関わらず標的酵素に結合することができるが、それがある状態またはそれ以外の状態において標的酵素に結合するためのより高い親和性を有する場合は混合型阻害剤と呼ばれる。不競合的阻害剤とは、酵素と基質との間で形成される複合体のみに結合し、典型的には２種以上の基質または産物との反応において作用する阻害剤を指す。

「ペプチド」とは、ペプチド結合によって互いに連結された少なくとも２アミノ酸且つ５０アミノ酸未満のアミノ酸の直鎖状ポリマーを指す。ペプチドにおけるアミノ酸残基は、フェニルアラニンはＰｈｅまたはＦ、ロイシンはＬｅｕまたはＬ、イソロイシンはＩｌｅまたはＩ、メチオニンはＭｅｔまたはＭ、バリンはＶａＩまたはＶ、セリンはＳｅｒまたはＳ、プロリンはＰｒｏまたはＰ、トレオニンはＴｈｒまたはＴ、アラニンはＡｌａまたはＡ、チロシンはＴｙｒまたはＹ、ヒスチジンはＨｉｓまたはＨ、グルタミンはＧｌｎまたはＱ、アスパラギンはＡｓｎまたはＮ、リジンはＬｙｓまたはＫ、アスパラギン酸はＡｓｐまたはＤ、グルタミン酸はＧＩｕまたはＥ、システインはＣｙｓまたはＣ、トリプトファンはＴｒｐまたはＷ、アルギニンはＡｒｇまたはＲ、グリシンはＧＩｙまたはＧのように省略される。２０種の従来のアミノ酸の立体異性体（例えば、Ｄ－アミノ酸）、α，α－二置換アミノ酸、Ｎ－アルキルアミノ酸、乳酸などの非天然アミノ酸および他の非従来のアミノ酸も本明細書に提供されている技術の化合物にとって好適な構成要素であり得る。非従来のアミノ酸の例としては、β－アラニン、１－ナフチルアラニン、２－ナフチルアラニン、３－ピリジルアラニン、４－ヒドロキシプロリン、Ｏ－ホスホセリン、Ｎ－アセチルセリン、Ｎ－ホルミルメチオニン、３－メチルヒスチジン、５－ヒドロキシリジン、ノルロイシンならびに他の同様のアミノ酸およびイミノ酸（例えば、４－ヒドロキシプロリン）が挙げられる。

「薬学的に許容される賦形剤」とは、動物、好ましくはヒトに投与した際にどんな有害反応、アレルギー反応または他の望ましくない反応を生じさせない賦形剤を指す。これは、ありとあらゆる溶媒、分散媒、被覆剤、抗菌薬および抗真菌薬、等張剤および吸収遅延剤などを含む。ヒトへの投与のために、製剤は例えばＦＤＡ局またはＥＭＡなどの規制当局によって要求される無菌性、発熱性、一般的な安全性および純度基準を満たすものでなければならない。

「有機小分子」とは、一般に医薬品に使用される有機分子に相当する大きさの分子を指す。この用語は、生物学的巨大分子（例えば、タンパク質、核酸など）を除外する。好ましい有機小分子は、最大約５０００Ｄａ、より好ましくは最大２０００Ｄａ、最も好ましくは最大約１０００Ｄａの範囲である。

「対象」とは、哺乳類、好ましくはヒトを指す。一実施形態では、対象は、医療的ケアを受けるのを待っているか受けている、あるいは過去に医療処置の対象であったか現在対象であるか今後対象になる、あるいは疾患の発症について観察される「患者」、すなわち女性または男性、成人または小児であってもよい。

「治療有効量」とは、標的に対して有意なマイナスの効果または有害な副作用を引き起こすことなく、（１）運動ニューロン疾患の発症を遅らせるか予防する、（２）運動ニューロン疾患の１つ以上の症状の進行、増悪または悪化を減速または停止する、（３）運動ニューロン疾患の症状の寛解をもたらす、（４）運動ニューロン疾患の重症度または発生率を低下させる、または（５）運動ニューロン疾患を治癒させることを目的とした薬剤のレベルまたは量を指す。治療有効量は予防処置のために運動ニューロン疾患の発症前に投与してもよい。代わりまたは追加として、治療有効量は治療処置のために運動ニューロン疾患の発症後に投与してもよい。一実施形態では、本組成物の治療有効量は、運動ニューロン疾患の少なくとも１つの症状を減少させるのに有効な量である。

「治療する」または「治療」または「軽減」とは、治療処置および予防措置の両方を指し、ここではその目的は、標的とされる病的状態または疾患を予防するか遅らせる（和らげる）ことである。治療を必要とするものとしては、当該疾患を既に有するものならびに当該疾患に罹患しやすいものまたは当該疾患が予防されるべきものが挙げられる。対象または哺乳類は、治療量の本発明の組成物が投与された後に、その患者が（ｉ）神経細胞死の減少、（ｉｉｉ）認知機能障害または錐体路徴候の軽減または減少、（ｉｖ）特定の疾患または状態に伴う１つ以上の症状のある程度の緩和、（ｖ）罹患率および死亡率の低下、および（ｖｉ）生活の質の問題の改善のうちの１つ以上に対する観察可能な効果を示す場合に、標的とされる病的疾患の「治療が成功」となる。治療の成功および疾患の改善を評価するための上記パラメーターは、医師が精通している通常の手順によって容易に測定可能である。

詳細な説明
本出願人は、ヒトのＳＰＧ１１の病態の主要な特徴を再現するＳＰＧ１１^－／－マウスモデルを用いて、ＳＰＧ１１がリソソーム内への脂質（特に、ＧＭ２、ＧＭ３、ＧＤ２およびＧＤ３）の蓄積に関連しているということを本願で実証した。この脂質の蓄積は、ＳＰＧ１１ヒト患者およびＳＰＧ１１疾患のゼブラフィッシュモデルにおいてさらに確認された。従って、これらの実験結果は、この疾患を治療するためのガングリオシド代謝阻害剤の使用、および特にガングリオシド合成の阻害剤の使用、を強く支持するものである。

本発明の１つの目的は、少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤を含むか、それからなるか、本質的にそれからなる、運動ニューロン疾患を治療するための、または運動ニューロン疾患を治療するのに使用するための、組成物である。

ガングリオシドの代謝は、セラミドからのＯ－、ａ－、ｂ－およびｃ－シリーズのガングリオシドの生合成に関わる。そのような代謝は、異なる経路を伴い、特に、シアル酸転移酵素およびグリコシル転移酵素などの酵素の連続的活動を伴う。

従って一実施形態では、ガングリオシド代謝阻害剤（本明細書ではガングリオシド代謝経路阻害剤と呼ぶ場合もある）は、ガングリオシド生合成の阻害剤である。

一実施形態では、前記阻害剤は、（ｉ）ガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（または少なくとも１種のその補因子）の活性、および／または（ｉｉ）ガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（または少なくとも１種のその補因子）のタンパク質発現を阻害する。一実施形態では、前記阻害剤は、本明細書に記載されているガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（または少なくとも１種のその補因子）の遺伝子発現の阻害剤および／または下流経路の阻害剤である。

ガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（または少なくとも１種のその補因子）の活性またはタンパク質発現の阻害剤の例としては、限定されるものではないが、有機小分子、ペプチド、阻害剤スキャフォールド、拮抗薬、抗体、アプタマーおよび化学シャペロンが挙げられる。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、ガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（または少なくとも１種のその補因子）の競合的阻害剤である。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、ガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（または少なくとも１種のその補因子）の不競合的阻害剤である。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、ガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（または少なくとも１種のその補因子）の非競合的阻害剤である。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、ガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（または少なくとも１種のその補因子）の混合型阻害剤である。

一実施形態では、本発明の阻害剤は、ガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（または少なくとも１種のその補因子）の選択的阻害剤である。

本明細書で使用される場合、「選択的阻害剤」という用語は、約５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、２００、３００、４００、５００、６００、７００、８００、９００ｎＭ、１、５、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、１５０、２００μＭ以下の半数阻害濃度（ＩＣ_５０）を有する化合物を指す。

一実施形態では、本発明の化合物は、それらのＩＣ_５０値が２００μＭ以下である場合に活性であるとみなされる。例えば、より小さいＩＣ_５０値（例えば１０ｎＭのＩＣ_５０）を有する化合物は、より大きなＩＣ_５０値（例えば１μＭのＩＣ_５０値）を有する化合物よりも強力であるとみなされる。

化合物のＩＣ_５０を決定するための技術は当業者に周知であり、限定されるものではないが、機能的拮抗薬アッセイ、競合結合アッセイ、細胞を利用したｃＡＭＰアッセイ、ウェスタンブロットおよびｑＲＴ－ＰＣＲが挙げられる。

例えばＩＣ_５０は、用量反応曲線を確立するために、ある濃度範囲の本発明の阻害剤の存在下で決定することができる。その用量反応曲線から、規定濃度の作動薬への反応の５０％を阻害するのに必要な拮抗薬の濃度を表すＩＣ_５０値を推定することができる。ＩＣ_５０値は、用量反応プロットを用量反応方程式に当てはめることによって当業者が容易に決定することができる。ＩＣ_５０値はチェン－プルソフの式を用いて親和定数（Ｋｉ）に変換することができる。

例えばグルコシルセラミドシンターゼ、ＧＭ３シンターゼ、グルコシルセラミダーゼβ（ＧＢＡ）２およびＧＢＡ１またはガングリオシド代謝経路からの任意の酵素など、ガングリオシド代謝経路の酵素（またはその補因子）の活性を決定するための技術は当業者に周知である。例えば、グルコシルセラミドシンターゼの活性は、この酵素によって触媒される反応の間に消費されるＵＤＰグルコースの量として測定されてもよい。特に、別の酵素（例えばＵＤＰグルコース脱水素酵素）を一般に使用してＵＤＰグルコースからＮＡＤＨを生成し、次いでこれは、ジアホラーゼ（すなわちＮＡＤＨ脱水素酵素）とＵＤＰグルコース脱水素酵素によって形成されるＮＡＤＨ分子とによって低蛍光レサズリン（酸化還元指示薬）を高蛍光レゾルフィンに定量的に変換する。グルコシルセラミドシンターゼによって触媒されるこの反応は、ＵＤＰグルコースからのグルコースをＣ６－セラミドに移して、産物としてＵＤＰおよびグルコシルセラミドを与え、このアッセイはこのようにしてＵＤＰグルコース基質の消失を測定する。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は有機小分子である。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤はペプチドである。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は阻害剤スキャフォールドである。

阻害剤スキャフォールドは、当該酵素またはその補因子の選択的かつ強力な阻害にとって有用である中心的分子足場の構造に基づく設計により選択される。阻害剤スキャフォールドを設計するための技術は当業者に周知であり、限定されるものではないが、ドッキング方法およびＭＭ－ＧＢＳＡ手法と組み合わせられた形状および静電気的類似性検索の使用が挙げられる。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は化学シャペロンである。

本明細書で使用される「化学シャペロン」は、タンパク質のフォールディングおよび／または安定性を向上させるように機能する小分子のクラスである。化学シャペロンは広範囲かつ多様な分子群であり、様々な機序によりタンパク質の安定性およびポリペプチドの組織化に影響を与え得る。異なるクラスの化学シャペロンが存在し、特に浸透圧調節物質、疎水性化合物および薬理学的シャペロンが挙げられる。浸透圧調節物質は、浸透または他の形態のストレスを受けている期間中に細胞成分の完全性を維持するために細胞によって合成されるか取り込まれる極性の小分子である。これらの非限定的な例としては、グリセロール、トレハロース、トリメチルアミンＮ－オキシド（ＴＭＡＯ）およびグリシンが挙げられる。水性環境においてなお可溶である様々な程度の疎水性を有する疎水性化合物も化学シャペロンとして機能することができる。これらの化合物は、折り畳まれていないか不適切に折り畳まれたタンパク質の溶媒に曝される疎水性セグメントに結合することによって機能し、それによりそれらを凝集から「保護」すると考えられている。４－フェニル酪酸（ＰＢＡ）は、リゾホスファチジン酸および他の脂質および界面活性剤と共にこの群の化合物の顕著な例である。薬理学的シャペロンは、タンパク質リガンド、補因子、競合的阻害剤および特異タンパク質に特異的に結合する他の小分子からなる。これらの分子は特異タンパク質に対してのみ活性であるため、それらは薬理学的シャペロンと呼ばれる。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は拮抗薬である。

一実施形態では、拮抗薬は、抗体が酵素へのリガンドの結合を損なうように、例えばグルコシルセラミドシンターゼ、ＧＭシンターゼ（ＧＭ１、ＧＭ２、ＧＭ３シンターゼ）、ＧＤシンターゼ（ＧＤ１ａ、ＧＤ１ｂ、ＧＤ２、ＧＤ３シンターゼ）、ＧＴシンターゼ（ＧＴ１ａ、ＧＴ１ｂ、ＧＴ２、ＧＴ３シンターゼ）、Ｇｂシンターゼ（Ｇｂ１、Ｇｂ２、Ｇｂ３シンターゼ）などのガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（または少なくとも１種のその補因子）に対する抗体またはガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素のリガンドに対する抗体からなっていてもよい。

ガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（または少なくとも１種のその補因子）に対する抗体は、適当な抗原またはエピトープを、例えば特にブタ、ウシ、ウマ、ウサギ、ヤギ、ヒツジおよびマウスから選択される宿主動物に投与することによって公知の方法に従って得ることができる。当該技術分野で公知の各種アジュバントを使用して抗体産生を高めることができる。本発明を実施するのに有用な抗体はポリクローナルであってもよいが、モノクローナル抗体が好ましい。ガングリオシド代謝経路の酵素あるいはガングリオシド代謝経路の酵素のリガンドまたは補因子に対するモノクローナル抗体は、培養物中で連続細胞株により抗体分子の産生を行う任意の技術を用いて調製および単離することができる。産生および単離のための技術としては、限定されるものではないが、最初にＫｏｈｌｅｒおよびＭｉｌｓｔｅｉｎ（１９７５）によって記載されたハイブリドーマ技術、ヒトＢ細胞ハイブリドーマ技術（Ｃｏｔｅら，１９８３）およびＥＢＶ－ハイブリドーマ技術（Ｃｏｌｅら，１９８５）が挙げられる。あるいは、一本鎖抗体の産生のために記載されている技術（例えば、米国特許第４，９４６，７７８号を参照）を改変してガングリオシド代謝経路の酵素またはガングリオシド代謝経路の酵素のリガンドに対する一本鎖抗体を産生することができる。

本発明を実施するのに有用なガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（またはその少なくとも１種の補因子）の他の拮抗薬は、ガングリオシド代謝経路の酵素（例えばグルコシルセラミドシンターゼ）に対する抗体の断片あるいはガングリオシド代謝経路の酵素のリガンドまたは補因子（例えばグルコシルセラミドシンターゼのリガンド）に対する抗体の断片も含む。抗体断片の例としては、限定されるものではないが、インタクトな抗体分子のペプシン消化によって産生することができるＦ（ａｂ’）_２断片、およびＦ（ａｂ’）_２断片のジスルフィド架橋を還元することにより産生することができるＦａｂ断片が挙げられる。抗体断片の他の例としては、限定されるものではないが、Ｆｖおよび特にｓｃＦｖが挙げられる。あるいは、Ｆａｂおよび／またはｓｃＦｖ発現ライブラリーは、グルコシルセラミドシンターゼへの所望の特異性を有する断片の迅速同定を可能にするように構築することができる。

ガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素あるいはそのリガンドまたは補因子に対するヒト化抗体（またはその断片）も公知の技術に従って調製することができる。「ヒト化抗体」は、非ヒト免疫グロブリン由来の最小配列を含む非ヒト（例えば、齧歯類）キメラ抗体の形態である。ほとんどの場合、ヒト化抗体は、レシピエントの超可変領域（ＣＤＲ）からの残基が、所望の特異性、親和性および能力を有するマウス、ラット、ウサギまたは非ヒト霊長類などの非ヒト種（ドナー抗体）の超可変領域からの残基で置き換えられたヒトの免疫グロブリン（レシピエント抗体）である。場合によっては、ヒトの免疫グロブリンのフレームワーク領域（ＦＲ）残基が、対応する非ヒト残基で置き換えられている。さらにヒト化抗体は、レシピエント抗体またはドナー抗体中に存在しない残基を含んでいてもよい。これらの修飾は、抗体性能をさらに改善するために行われる。一般にヒト化抗体は、超可変ループの全てまたは実質的に全てが非ヒト免疫グロブリンの超可変ループに対応し、かつＦＲの全てまたは実質的に全てがヒトの免疫グロブリン配列のＦＲである少なくとも１つ、典型的には２つの可変領域の実質的に全てを含む。ヒト化抗体は、免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）、典型的にはヒトの免疫グロブリン定常領域（Ｆｃ）の少なくとも一部も任意に含む。ヒト化抗体を産生する方法は、例えば、Ｗｉｎｔｅｒ（米国特許第５，２２５，５３９号）およびＢｏｓｓ（Ｃｅｌｌｔｅｃｈ、米国特許第４，８１６，３９７号）によって記載されている。

次いで、上記のようにガングリオシド代謝経路の酵素（例えばグルコシルセラミドシンターゼ）またはそのリガンドまたは補因子に対する抗体を産生した後、当業者はガングリオシド代謝経路の酵素の活性化を遮断するものを容易に選択することができる。

別の実施形態では、本発明の拮抗薬はアプタマーである。アプタマーは、分子認識の点で抗体の代わりとなる分子クラスである。アプタマーは、高い親和性および特異性で実質的にあらゆるクラスの標的分子を認識する能力を有するオリゴヌクレオチドまたはオリゴペプチド配列である。そのようなリガンドは、Ｔｕｅｒｋ Ｃ．およびＧｏｌｄ Ｌ．（１９９０）に記載されているように、ランダム配列ライブラリーの試験管内進化法（ＳＥＬＥＸ：Ｓｙｓｔｅｍａｔｉｃ Ｅｖｏｌｕｔｉｏｎ ｏｆ Ｌｉｇａｎｄｓ ｂｙ ＥＸｐｏｎｅｎｔｉａｌ ｅｎｒｉｃｈｍｅｎｔ）により単離してもよい。ランダム配列ライブラリーは、ＤＮＡのコンビナトリアル化学合成によって得られる。このライブラリーでは、各メンバーは、ユニーク配列の最終的に化学修飾された直鎖状オリゴマーである。このクラスの分子の可能な修飾、使用および利点は、Ｊａｙａｓｅｎａ Ｓ．Ｄ．（１９９９）において再考されている。ペプチドアプタマーは、２つのハイブリッド法（Ｃｏｌａｓら，１９９６）によるコンビナトリアルライブラリーから選択される大腸菌チオレドキシンＡなどのプラットフォームタンパク質によって示される立体配置的に制限された抗体可変領域からなる。

次いで、上記のようなガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素あるいはそのリガンドまたは補因子に対するアプタマーを産生した後、当業者はガングリオシド代謝経路の酵素の活性化を遮断するものを容易に選択することができる。

一実施形態では、本発明の使用のための阻害剤は、ガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（またはその少なくとも１種の補因子）の遺伝子発現阻害剤である。一実施形態では、「阻害する」という用語は、例えば、参照発現レベルの９０％、８０％、７０％、６０％、５０％、４０％、３０％、２０％、１０％以下またはそれ未満のレベルなどの参照発現レベルと比較した場合の発現レベルの低下を指す。一実施形態では、遺伝子発現の阻害は、細胞を遺伝子発現に対するその影響について試験される化合物と接触させた後に測定し、参照発現レベルは前記化合物と接触させていない細胞において測定される発現レベルに一致する。

遺伝子発現レベルを決定するための方法は当業者に周知であり、限定されるものではないが、トランスクリプトーム（一実施形態では遺伝子の転写レベルに関する）および／またはプロテオーム（一実施形態では遺伝子の翻訳レベルに関する）を決定することが挙げられる。

遺伝子発現レベルを決定するための方法としては、限定されるものではないが、転写レベルまたは翻訳レベルまたは前記遺伝子産物の分泌／放出レベルでの遺伝子産物のレベルの決定が挙げられる。

本発明の一実施形態では、遺伝子発現レベルを転写レベル（すなわちｍＲＮＡレベル）で評価する。

遺伝子の転写レベルを評価するためのインビトロ方法は先行技術で周知である。そのような方法の例としては、限定されるものではないが、ＲＴ－ＰＣＲ、ＲＴ－ｑＰＣＲ、ノーザンブロット、例えばマイクロアレイの使用などのハイブリダイゼーション技術およびそれらの組み合わせ、例えば限定されるものではないが、ＲＴ－ＰＣＲよって得られた単位複製配列のハイブリダイゼーション、および例えば次世代ＤＮＡシーケンシング（ＮＧＳ）またはＲＮＡ－ｓｅｑ（「全トランスクリプトームショットガンシーケンシング」としても知られている）などのシークエンシングなどが挙げられる。

本発明の一実施形態では、遺伝子発現レベルを翻訳レベル（すなわちタンパク質レベル）で評価する。

遺伝子の翻訳レベルを評価するためのインビトロ方法が当該技術分野で周知である。そのような方法の例としては、限定されるものではないが、免疫組織化学、マルチプレックス法（Ｌｕｍｉｎｅｘ）、ウェスタンブロット、酵素結合免疫吸着法（ＥＬＩＳＡ）、サンドイッチＥＬＩＳＡ、蛍光結合免疫吸着法（ＦＬＩＳＡ：ｆｌｕｏｒｅｓｃｅｎｔ－ｌｉｎｋｅｄ ｉｍｍｕｎｏｓｏｒｂｅｎｔ ａｓｓａｙ）、酵素免疫測定法（ＥＩＡ）、放射免疫測定法（ＲＩＡ）およびフローサイトメトリー（ＦＡＣＳ）などが挙げられる。

ガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（またはその補因子）の遺伝子発現阻害剤の例としては、限定されるものではないが、ＲＮＡｉ、オリゴヌクレオチドアンチセンス（例えば、限定されるものではないが、アンチセンスＲＮＡ分子またはアンチセンスＤＮＡ分子）、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、リボザイム、アプタマー、モルホリノおよび操作されたヌクレアーゼが挙げられる。

ガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（またはその補因子）の遺伝子発現阻害剤の他の例としては、限定されるものではないが、アンチセンスＲＮＡ分子またはアンチセンスＤＮＡ分子、低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）、短ヘアピン型ＲＮＡ（ｓｈＲＮＡ）、マイクロＲＮＡ（ｍｉＲＮＡ）、ＤＮＡザイム、修飾された、もしくは合成の、ＤＮＡまたはＲＮＡの分解耐性ポリヌクレオシドアミド、ペプチド核酸（ＰＮＡ）、ロックド核酸（ＬＮＡ）および他の核酸塩基含有ポリマーが挙げられる。

一実施形態では、ガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（またはその補因子）の遺伝子発現阻害剤はｍｉＲＮＡである。ｍｉＲＮＡは、ＲＮＡ誘導サイレンシング複合体（ＲＩＳＣ）に取り込まれ且つｍＲＮＡ上の部分的に相補的な標的と相互作用してタンパク質発現を抑制する、遺伝子調節ＲＮＡである。ｍｉＲＮＡは一般に単鎖であり、ＲＩＳＣに取り込まれるとｍｉＲＮＡ「ガイド」配列（シード領域ともいう）がＲＩＳＣの表面に保持され、その場所で標的ｍＲＮＡと相互作用することができる。ｍｉＲＮＡガイド配列によって認識される標的は、最も一般にはＲＮＡの３’非翻訳領域（ＵＴＲ）上にある。結合によりｍＲＮＡの５’キャップ上の開始複合体の構築を抑制することができるが、それはｍＲＮＡが翻訳の開始時に結合されて円形状になり、３’ＵＴＲおよび５’ＵＴＲを互いに近くに引き寄せるからである。

一実施形態では、本発明で使用するためのガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（またはその補因子）の遺伝子発現阻害剤は、アンチセンスオリゴヌクレオチド構築物に基づくものである。アンチセンスＲＮＡ分子およびアンチセンスＤＮＡ分子を含むアンチセンスオリゴヌクレオチドは、そこに結合し、このようにしてタンパク質翻訳を防止するかｍＲＮＡの分解を増加させることにより、ガングリオシド代謝経路の酵素（例えばガングリオシド合成酵素）（またはその補因子）ｍＲＮＡの翻訳を直接遮断するように作用し、このようにして細胞におけるガングリオシドの代謝レベル、ひいては活性を減少させる。例えば、少なくとも約１５個の塩基からなり、かつガングリオシド合成酵素をコードするｍＲＮＡ転写配列の特異領域に相補的なアンチセンスオリゴヌクレオチドを、例えば従来のリン酸ジエステル技術によって合成し、例えば静脈内注射または注入によって投与することができる。配列が知られている遺伝子の遺伝子発現を特異的に阻害するためのアンチセンス技術の使用方法が当該技術分野で周知である（例えば、米国特許第６，５６６，１３５号、第６，５６６，１３１号、第６，３６５，３５４号、第６，４１０，３２３号、第６，１０７，０９１号、第６，０４６，３２１号および第５，９８１，７３２号を参照されたく、これらは参照により本明細書に組み込まれる）。

低分子干渉ＲＮＡ（ｓｉＲＮＡ）は、本発明で使用するためのガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（またはその補因子）の遺伝子発現阻害剤として機能することもできる。

ガングリオシド代謝経路の酵素（例えば、グルコシルセラミドシンターゼ）またはその補因子の遺伝子発現が特異的に阻害されるように（すなわちＲＮＡ干渉またはＲＮＡｉ）、対象または細胞を低分子二本鎖ＲＮＡ（ｄｓＲＮＡ）あるいは低分子二本鎖ＲＮＡの産生を引き起こすベクターまたは構築物と接触させることにより、ガングリオシドの代謝の少なくとも１種の酵素（またはその補因子）の遺伝子発現を減少させることができる。適当なｄｓＲＮＡまたはｄｓＲＮＡをコードするベクターを選択する方法は、配列が知られている遺伝子については当該技術分野で周知である（例えば、Ｔｕｓｃｈｌ，Ｔ．ら（１９９９）、Ｅｌｂａｓｈｉｒ，Ｓ．Ｍ．ら（２００１）、Ｈａｎｎｏｎ，ＧＪ．（２００２）、ＭｃＭａｎｕｓ，ＭＴ．ら（２００２）、Ｂｒｕｍｍｅｌｋａｍｐ，ＴＲ．ら（２００２）、米国特許第６，５７３，０９９号および第６，５０６，５５９号ならびに国際公開第０１／３６６４６号、第９９／３２６１９号および第０１／６８８３６号を参照されたく、これらは参照により本明細書に組み込まれる）。

リボザイムも本発明で使用するためのガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素（またはその補因子）の遺伝子発現阻害剤として機能することができる。リボザイムは、ＲＮＡの特異的切断を触媒することができる酵素的ＲＮＡ分子である。リボザイムの作用機序には、リボザイム分子の相補的標的ＲＮＡへの配列特異的ハイブリダイゼーション、次いでヌクレオチド鎖切断が含まれる。従って、ガングリオシド合成酵素ｍＲＮＡ配列のヌクレオチド鎖切断を特異的かつ効率的に触媒する操作されたヘアピンまたはハンマーヘッド型モチーフのリボザイム分子は、本発明の範囲において有用である。典型的には、ＧＵＡ、ＧＵＵおよびＧＵＣ配列を含むリボザイム切断部位について標的分子を走査して、あらゆる可能性のあるＲＮＡ標的内の特異的リボザイム切断部位を最初に同定する。同定したら、切断部位を含む標的遺伝子の領域に対応する約１５～２０個のリボヌクレオチドからなる短いＲＮＡ配列を、オリゴヌクレオチド配列を不適切にし得る二次構造などの予測される構造的特徴について評価することができる。例えば、リボヌクレアーゼ保護アッセイを用いて、相補的オリゴヌクレオチドとのハイブリダイゼーションへのそれらの到達性を試験することにより、候補標的の適合性も評価することができる。

ガングリオシド代謝経路遺伝子発現の少なくとも１種の酵素または酵素の補因子阻害剤として有用なアンチセンスオリゴヌクレオチドおよびリボザイムはどちらも、公知の方法で調製することができる。これらとしては、例えば、固相ホスホラミダイト化学合成などの化学合成のための技術が挙げられる。あるいは、ＲＮＡ分子をコードするＤＮＡ配列のインビトロまたはインビボ転写によって、アンチセンスＲＮＡ分子を産生することができる。そのようなＤＮＡ配列は、Ｔ７またはＳＰ６ポリメラーゼプロモーターなどの好適なＲＮＡポリメラーゼプロモーターを含む多種多様なベクターに組み込むことができる。細胞内安定性および半減期を増加させる手段として、本発明のオリゴヌクレオチドに対する各種修飾を導入することができる。可能な修飾としては、限定されるものではないが、分子の５’および／または３’末端へのリボヌクレオチドまたはデオキシリボヌクレオチドのフランキング配列の付加、またはオリゴヌクレオチド骨格におけるホスホジエステラーゼ結合ではなくホスホロチオエートまたは２’－Ｏ－メチルの使用が挙げられる。

本発明のアンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡおよびリボザイムを単独で、あるいはベクターに結合させてインビボ送達してもよい。その最も広い意味で「ベクター」は、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡまたはリボザイム核酸の細胞および好ましくはガングリオシド代謝経路の少なくとも１種の酵素を発現している細胞への移動を容易にすることができるあらゆる媒体である。好ましくは、ベクターは、ベクターの非存在下で生じる分解の程度と比べて分解が減少した核酸を細胞に輸送する。一般に、本発明において有用なベクターとしては、限定されるものではないが、プラスミド、ファージミド、ウイルス、アンチセンスオリゴヌクレオチド、ｓｉＲＮＡまたはリボザイム核酸配列の挿入または組み込みによって操作されたウイルスまたは細菌源に由来する他の媒体が挙げられる。ウイルスベクターは好ましい種類のベクターであり、限定されるものではないが、モロニーマウス白血病ウイルス、ハーベイマウス肉腫ウイルス、マウス乳癌ウイルスおよびラウス肉腫ウイルスなどのレトロウイルス、アデノウイルス、アデノ随伴ウイルス、ＳＶ４０型ウイルス、ポリオーマウイルス、エプスタイン・バール・ウイルス、パピローマウイルス、ヘルペスウイルス、ワクシニアウイルス、ポリオウイルスおよびレトロウイルスなどのＲＮＡウイルスの核酸配列が挙げられる。命名されていないが当該技術分野で公知である他のベクターを容易に用いることができる。

好ましいウイルスベクターは、非必須遺伝子が目的の遺伝子で置き換えられている非細胞変性真核性ウイルスに基づいている。非細胞変性ウイルスとしては、レトロウイルス（例えば、レンチウイルス）が挙げられ、そのライフサイクルでは、ゲノムウイルスＲＮＡをＤＮＡに逆転写し、その後、プロウイルスが宿主細胞ＤＮＡに組み込まれる。レトロウイルスは、ヒトの遺伝子治療治験のために認可されている。最も有用なのは、複製欠損性の（すなわち、所望のタンパク質の合成を指示することはできるが、感染粒子を製造することができない）レトロウイルスである。そのような遺伝子改変されたレトロウイルス発現ベクターは、インビボでの高効率な遺伝子形質導入にとって一般的な有用性を有する。複製欠損性レトロウイルスを産生する標準的な手順（外来性遺伝物質をプラスミドに組み込み、パッケージング細胞株をプラスミドでトランスフェクトし、パッケージング細胞株によって組換え型レトロウイルスを産生し、組織培地からウイルス粒子を回収し、標的細胞をウイルス粒子で感染させる工程を含む）は、Ｋｒｉｅｇｌｅｒ，Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，ＵＳＡ １９９３およびＭｕｒｒｙ，ｖｏｌ ７ Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ １９９１において提供されている。

特定の用途にとって好ましいウイルスは、遺伝子治療におけるヒトへの使用に対して既に認可されている二本鎖ＤＮＡウイルスであるアデノウイルスおよびアデノ随伴ウイルスである。アデノ随伴ウイルスは複製欠損性であり、かつ広範囲の細胞型および生物種に感染できるように操作することができる。そのウイルスは、熱および脂質溶媒安定性、多種多様な系列の細胞における高い形質導入頻度、および重感染阻害の欠如などの利点をさらに有するため、複数の一連の形質導入が可能となる。報告によれば、アデノ随伴ウイルスをヒトの細胞ＤＮＡに部位特異的に組み込み、それにより挿入突然変異誘発の可能性およびレトロウイルス感染を特徴とする挿入遺伝子発現の可変性を最小限に抑えることができる。また野性型アデノ随伴ウイルス感染は、組織培養において選択圧の非存在下で１００継代を超えて維持され、これは、アデノ随伴ウイルスのゲノムの組み込みが比較的安定な事象であることを暗示している。アデノ随伴ウイルスは染色体外でも機能することができる。

他のベクターとしてはプラスミドベクターが挙げられる。プラスミドベクターは、当該技術分野において広範囲に記載されており、当業者に周知である。例えば、Ｓａｍｂｒｏｏｋら（１９８９）を参照されたい。ここ数年、プラスミドベクターは、抗原をコードする遺伝子をインビボで細胞に送達するためのＤＮＡワクチンとして使用されている。プラスミドベクターはウイルスベクターの多くと同じ安全性懸念を有していないため、ＤＮＡワクチンにとって特に有利である。但し、宿主細胞に適合可能なプロモーターを有するこれらのプラスミドは、プラスミド内に機能的にコードされた遺伝子からペプチドを発現することができる。いくつかのよく使用されるプラスミドとしては、ｐＢＲ３２２、ｐＵＣ１８、ｐＵＣｌ９、ｐＲＣ／ＣＭＶ、ＳＶ４０およびｐＢｌｕｅＳｃｒｉｐｔが挙げられる。他のプラスミドは当業者に周知である。さらに、ＤＮＡの特定の断片を除去および付加するために制限酵素および連結反応を用いて、プラスミドをカスタム設計してもよい。プラスミドを様々な非経口経路、粘膜経路および局所経路によって送達してもよい。例えば、ＤＮＡプラスミドを筋肉内、皮内、皮下または他の経路によって注射することができる。また、これを鼻腔内スプレーまたは点鼻薬、肛門坐剤で投与したり経口投与したりしてもよい。また、遺伝子銃を用いてこれを表皮または粘膜面の中に投与してもよい。プラスミドを水溶液として、金粒子上の乾燥被覆物として、あるいは限定されるものではないが、リポソーム、デンドリマー、コクリエートおよびマイクロカプセル化などの別のＤＮＡ送達システムに結合させて投与してもよい。

本発明で使用するためのガングリオシドの代謝阻害剤は、モルホリノオリゴマーおよびホスホロジアミデートモルホリノオリゴマー（ＰＭＯ）としても知られているモルホリノであってもよい。モルホリノは、遺伝子発現を修飾するために分子生物学で使用されているオリゴマー分子（口語ではオリゴ）の一種である。その分子構造は、メチレンモルホリン環の骨格およびホスホロジアミデート結合を有する。モルホリノは、他の分子がリボ核酸（ＲＮＡ）の塩基対表面の小さい（約２５塩基）特異的配列にアクセスするのを遮断する。

また本発明で使用するためのガングリオシドの代謝阻害剤は、ゲノム編集のために使用される操作されたヌクレアーゼすなわち「分子バサミ」であってもよい。ゲノム編集または操作されたヌクレアーゼによるゲノム編集（ＧＥＥＮ）は、当業者に周知であるように操作されたヌクレアーゼすなわち「分子バサミ」を用いてＤＮＡが生物のゲノムにおいて挿入、欠失または置換される遺伝子工学の一種である。これらのヌクレアーゼはゲノム内の所望の位置で部位特異的二本鎖切断（ＤＳＢ）を誘導する。誘導された二本鎖切断は、非相同末端結合（ＮＨＥＪ）または相同組換え（ＨＲ）により修復され、標的突然変異を引き起こす。現在のところ、４つのファミリーの操作されたヌクレアーゼ、すなわち、メガヌクレアーゼ、亜鉛フィンガーヌクレアーゼ（ＺＦＮ）、転写活性化剤様エフェクターヌクレアーゼ（ＴＡＬＥＮ）およびＣＲＩＳＰＲ－Ｃａｓシステムが使用されている。

一実施形態では、本発明の阻害剤は、モノシアロガングリオシド（ＧＭ）１ａ、ＧＭ１ｂ、ＧＭ２、ＧＭ３および／またはＧＭ４、ジシアロガングリオシド（ＧＤ）１ａ、ＧＤ１ｂ、ＧＤ１ｃ、ＧＤ１α、ＧＤ２、ＧＤ３、トリシアロガングリオシド（ＧＴ）１ａ、ＧＴ１ｂ、ＧＴ２、ＧＴ３、テトラシアロガングリオシド（quadri -sialogangliosides）（ＧＱ）１ｂ、ＧＱ１ｃ、ＧＱ２、ＧＱ３、ペンタシアロガングリオシド（ＧＰ）１ｃの蓄積を阻害する。一実施形態では、本発明の阻害剤は、ＧＭ２、ＧＭ３、ＧＤ２および／またはＧＤ３の蓄積を阻害する。

別の実施形態では、本発明の阻害剤は、モノシアロガングリオシド（ＧＭ）１ａ、ＧＭ１ｂ、ＧＭ２、ＧＭ３および／またはＧＭ４、ジシアロガングリオシド（ＧＤ）１ａ、ＧＤ１ｂ、ＧＤ１ｃ、ＧＤ１α、ＧＤ２、ＧＤ３、トリシアロガングリオシド（ＧＴ）１ａ、ＧＴ１ｂ、ＧＴ２、ＧＴ３、テトラシアロガングリオシド（ＧＱ）１ｂ、ＧＱ１ｃ、ＧＱ２、ＧＱ３、ペンタシアロガングリオシド（ＧＰ）１ｃの凝集を阻害する。一実施形態では、本発明の阻害剤は、ＧＭ２、ＧＭ３、ＧＤ２および／またはＧＤ３の凝集を阻害する。

一実施形態では、本発明の阻害剤は、ＧＭ２の合成、蓄積および／または凝集を阻害する。

一実施形態では、本発明の阻害剤は、ＧＭ３の合成、蓄積および／または凝集を阻害する。

一実施形態では、本発明の阻害剤は、ＧＤ２の合成、蓄積および／または凝集を阻害する。

一実施形態では、本発明の阻害剤は、ＧＤ３の合成、蓄積および／または凝集を阻害する。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、グルコシルセラミドシンターゼまたはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、ＧＭ３シンターゼまたはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、ＧＭ２シンターゼまたはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、ＧＤ３シンターゼまたはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、ＧＤ２シンターゼまたはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、ラクトシルセラミドシンターゼまたはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、β１，４－ＧａｌＮＡｃ転移酵素またはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、β－１，４－Ｎ－アセチルガラクトサミン転移酵素またはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、ＵＤＰ－Ｇａｌ：βＧａｌＮＡｃβ－１，３－ガラクトース転移酵素（galactisyltransferase）またはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、シアル酸転移酵素ＩＶまたはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、シアル酸転移酵素ＶＩＩまたはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、Ｇｂ３シンターゼまたはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、ｉＧｂ３シンターゼまたはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、Ｌｃ３シンターゼまたはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、ＧＴ１ｃシンターゼまたはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、ＧＴ２シンターゼまたはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、ＧＴ３シンターゼまたはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、ＧＡ１シンターゼまたはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、ＧＡ２シンターゼまたはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、ＧＤ１ｂシンターゼまたはその補因子を阻害する。

別の実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、ＧＭ１ａシンターゼまたはその補因子を阻害する。

グルコシルセラミドシンターゼ阻害剤の例としては、限定されるものではないが、以下の群の化合物：イミノ糖、Ｄ－トレオ－１－フェニル－２－デカノイルアミノ－３－モルホリノ－プロパノール（ＰＤＭＰ）の類似体またはセラミド類似体、カルボキサミド、カルバメート、ペプチド、グリコシドヒドロラーゼ；および酵素療法が挙げられる。

本発明の一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤はイミノ糖化合物である。

イミノ糖化合物の例としては、限定されるものではないが、以下のサブ群：アルキル置換イミノ糖化合物、アダマンチル置換イミノ糖化合物およびピロリジン誘導体イミノ糖化合物が挙げられる。

本発明の一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤はアルキル置換イミノ糖化合物である。

アルキル置換イミノ糖化合物の例は、特許出願の国際公開第２００７１４０１８４号、国際公開第２０１１０８６３４７号、欧州特許第０５６６５５６号、国際公開第２０１１０９５７７２号、国際公開第２０１５１４７６３９号、Ｒｉｃｈａｒｄｓ Ｓら，Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．２０１２年５月１０日；５５（９）：４３２２－３５、Ｆｒｏｈｌｉｃｈ ＲＦら，Ｃａｒｂｏｈｙｄｒ Ｒｅｓ．２０１１年９月６日；３４６（１２）：１５９２－１５９８に記載されており、これらは全て参照により本明細書に組み込まれる。

本発明の一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤はアダマンチル置換イミノ糖化合物である。

アダマンチル置換イミノ糖化合物の例は、特許出願の国際公開第２００７１４０１８４号、国際公開第２００５０４０１１８号、国際公開第２０１５１４７６３９号に記載されており、これらは全て参照により本明細書に組み込まれる。

本発明の一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤はピロリジン誘導体イミノ糖化合物である。

ピロリジン誘導体イミノ糖化合物の例は、特許出願の国際公開第２００７１４０１８４号、国際公開第２０１１０８６３４７号、国際公開第２０１１０９５７７２号、国際公開第２０１２１１７２１９号、国際公開第２０１３０５９１１９号、Ｊｅｎｋｉｎｓｏｎら，Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２０１３，７８（１５），ｐｐ７３８０－７３９７に記載されており、これらは全て参照により本明細書に組み込まれる。

本発明の一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、特許出願の米国特許第６，６１０，７０３号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている化合物であり、Ｎ－ノニル－ＤＮＪまたはＮ－デシル－ＤＮＪから選択される。

本発明の一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、特許出願の国際公開第２００７１４０１８４号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている化合物であり、好ましくはＮ－（Ｎ’－｛４’－アジド－２’－ニトロフェニル）－６－アミノヘキシル）－デオキシノジリマイシン、Ｎ－（Ｎ’－｛２’，４’－ジニトロフェニル）－６－アミノヘキシル）－デオキシノジリマイシン（ＮＡＰ－ＤＮＪ）、Ｎ－（Ｎ’－｛２，４－ジニトロフェニル）－６－アミノヘキシル）－ＤＮＪ（ＮＤＰ－ＤＮＪ）、Ｎ－（アルキルフェニル）－ＤＮＪ誘導体およびＮ－ブチル－ＤＮＪ（ＮＢ－ＤＮＪ）を含む群から選択される。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、特許出願の国際公開第２００７１４０１８４号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されている化合物であり、以下の式：

を含む群から選択され、式中、Ｒは、

であり、Ｒ’は、

であり、
Ｒ_１は、置換されているか置換されていないアルキル基であり、
Ｒ_２は、置換されているか置換されていないアルキル基であり、
Ｑは存在しないかＣＨであるが、但し、Ｑが存在しない場合にはＯＷ_１も存在せず、
Ｗ_１～４は、独立して、水素、置換されているか置換されていないアルキル基、置換されているか置換されていないハロアルキル基、置換されているか置換されていないアルカノイル基、置換されているか置換されていないアロイル基または置換されているか置換されていないハロアルカノイル基から選択され、
Ｘ_１～５は、独立して、Ｈ、ＮＯ_２、Ｎ_３またはＮＨ_２から選択され、
Ｙは存在しないか、カルボニル以外の、置換されているか置換されていないＱ－アルキル基であり、
Ｚは結合またはＮＨから選択されるが、但し、Ｚが結合である場合にはＹは存在せず、ＺがＮＨである場合にはＹは、カルボニル以外の、置換されているか置換されていないＱ－アルキル基であり、
Ｚ’は結合またはＮＨである。

ピロリジン誘導体のさらなる例も国際公開第２０１２１１７２１９号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、限定されるものではないが、ｉｓｏＤＡＢ（１，４－ジデオキシ－２－ヒドロキシメチル－１，４－イミノ－Ｄ－トレイトール）、ｉｓｏＤＭＤＰ、ｉｓｏＤＧＤＰおよびＬ－ｉｓｏＤＭＤＰ［（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）－２，４－ビス（ヒドロキシメチル）ピロリジン－３，４－ジオール］を含む。

本発明の一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は特許出願の国際公開第２０１１０８６３４７号に記載されている化合物であり、（３Ｓ，４Ｓ）－３－（ヒドロキシメチル）ピロリジン－３，４－ジオール（１，４－ジデオキシ－２－ヒドロキシメチル－１，４－イミノ－Ｌ－トレイトール（ｉｓｏＬＡＢ）および以下の式：

（式中、Ｒ^１は、Ｈ、直鎖状もしくは分岐鎖状の、置換されているか置換されていないアルキル、アルケニル、アルキニルおよびアラルキルから選択され、ここで任意選択の置換は、－ＯＨ；－Ｆ；－ＣＩ；－Ｂｒ；－Ｉ；－ＮＨ_２；アルキルアミノ；ジアルキルアミノ；直鎖状もしくは分岐鎖状のアルキル、アルケニル、アルキニルおよびアラルキル；アリール；ヘテロアリール；直鎖状もしくは分岐鎖状のアルコキシ；アリールオキシ；アラルコキシ（aralkoxy）；－（アルキレン）オキシ（アルキル）；－ＣＮ；－ＮＯ_２；－ＣＯＯＨ；－ＣＯＯ（アルキル）；－ＣＯＯ（アリール）；－Ｃ（Ｏ）ＮＨ（アルキル）；－Ｃ（Ｏ）ＮＨ（アリール）；スルホニル；アルキルスルホニル；アリールスルホニル；スルファモイル；アルキルスルファモイル；アルキルチオ；アルキルスルホンアミド；アリールスルホンアミド；－ＮＨＮＨ_２；および－ＮＨＯＨから独立して選択される１つ以上の基によるものであってもよい）
を有する化合物、あるいはそのアイソスター（isostere）、薬学的に許容される塩または誘導体（すなわち、本明細書において上に開示されている化合物の化学的誘導体化によって得られる（または得ることができる）化合物）を含む。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、特許出願の国際公開第２０１３０５９１１９号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているグルコシルセラミドシンターゼを阻害する化合物であり、Ｎ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）シンナムアミド、Ｎ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）－２－フェニルシクロプロパンカルボキサミド、２－（２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－２－イル）－Ｎ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）アセトアミド、Ｎ－（（１Ｒ，２Ｒ－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）－２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－２－カルボキサミド、Ｎ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）－Ｎ－メチル－３－フェニルプロパンアミド、Ｎ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－ヒドロキシ－１－（２－メトキシフェニル）－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）オクタンアミド、Ｎ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－（３－（ジメチルアミノ）フェニル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）オクタンアミド、Ｎ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）－３－（３－フルオロフェニル）プロパンアミド、Ｎ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）－３－（４－フルオロフェニル）プロパンアミド、Ｎ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）－３－フェニルブタンアミド、Ｎ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）－３－（２－メトキシフェニル）プロパンアミド、Ｎ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）－２－（フェニルアミノ）アセトアミド、２－（２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－２－イル）－Ｎ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）アセトアミドオキサレート一水和物（2-(2,3-dihydro-1H-inden-2-yl)-N-((1R,2R)-1-(2,3-dihydrobenzo[b][1,4]dioxin-6-yl)-1-hydroxy-3-(pyrrolidin-1-yl)propan-2-yl)acetamide oxylate monohydrate）、およびＮ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）－２－フェニルアセトアミドを含む群から選択される。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、特許出願の国際公開第２０１３０５９１１９号に記載されており、以下の式：

（式中、
Ｒ^１は、ＨまたはＣ_１～３アルキルであり、
Ｒ^２は、
（ｉ）Ｒ^１が－Ｃ_１～３アルキルである場合には－（ＣＨ_２）_１～３Ｃ_６Ｈ_５、
（ｉｉ）－ＣＨ_２－Ｃ（Ｒ^ａ _２）_１，２－Ｃ_６Ｈ_５（式中、Ｒ^ａは独立してＨまたはＣ_１～３アルキルであるが、但し、少なくとも１つのＲ^ａはＣ_１～３アルキルである）、
（ｉｉｉ）－（ＣＨ_２）_１，２ＮＨＣ_６Ｈ_５、
（ｉｖ）－ＣＨ＝ＣＨＣ_６Ｈ_５、
（ｖ）

（ここでは、（ｉ）～（ｖ）のＣ_６Ｈ_５基は－ハロまたは－ＯＲ^ａのうちの１つまたは２つで任意に置換されている）、
または
（ｖｉ）

（式中、縮合環Ａは飽和もしくは部分不飽和の４～８員環であり、かつ炭素原子と任意にＯ、ＳおよびＮＲ^ａから選択される１つまたは２つのヘテロ原子とを含み、かつ縮合フェニル環は１つまたは２つの置換基で任意に置換されている）
であり、
かつ
Ｒ^３は、

であり、
式中、縮合環Ｂは飽和または部分もしくは完全不飽和の５または６員環であり、炭素原子とＯ、ＳおよびＮＲ^ａから選択される１つまたは２つのヘテロ原子とを含み、かつフェニル環は１つまたは２つの置換基で任意に置換されている）
を有する化合物、
あるいはその薬学的に許容される塩、溶媒和物、水和物またはプロドラッグである。

特に、本ガングリオシド代謝阻害剤は、特許出願の国際公開第２０１３０５９１１９号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、以下の式：

を有する化合物を含む群から選択される。

ピロリジン誘導体イミノ糖化合物の例としては、限定されるものではないが、水酸化ピロリジン誘導体および置換ピロリジン誘導体が挙げられる。

ピロリジン誘導体イミノ糖の例は、Ｊｅｎｋｉｎｓｏｎら．Ｊ．Ｏｒｇ．Ｃｈｅｍ．，２０１３，７８（１５），ｐｐ７３８０－７３９７（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、限定されるものではないが、１，４－ジデオキシ－２－ヒドロキシメチル－１，４－イミノ－Ｄ－トレイトール（ｉｓｏＤＡＢ）、（２Ｓ，３Ｓ，４Ｒ）－２，４－ビス（ヒドロキシメチル）ピロリジン－３，４－ジオール（ｉｓｏＤＭＤＰ）、ｉｓｏＤＭＤＰの鏡像異性体対およびｉｓｏＤＧＤＰが挙げられる。

水酸化ピロリジン誘導体の例は、Ｔａｋａｙａｍａ Ｓら（Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．１９９９年２月；７（２）：４０１－９）（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、限定されるものではないが、以下の式：

を有する化合物が挙げられる。

置換ピロリジン誘導体の例は、Ｓａｏｔｏｍｅ Ｃら（Ｃｈｅｍ Ｂｉｏｌ．２００１年１１月；８（１１）：１０６１－７０）（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、限定されるものではないが、以下の式：

（式中、Ｘは、ＢｕＮＨ、（ＣＨ_３）_２ＮＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ、ＣＨ_３（ＣＨ_２）_９ＮＨ、ＨＯＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨ、ＣＨ_３Ｏ（ＣＨ_２）_３ＮＨ、ＰｈＣＨ_２ＣＨ_２ＮＨまたは以下の式：

を有する化合物であり、
かつ式中、ＹはＨ、ＣＨ_２ＮＨ_２またはＣＯＮＨ_２である）
を有する化合物が挙げられる。

一実施形態では、イミノ糖群からの本ガングリオシド代謝阻害剤としては、限定されるものではないが、デオキシノジリマイシン（ＤＮＪ）としても知られている１，５－ジデオキシ－１，５－イミノ－Ｄ－グルシトール、ミグルスタット、Ｚａｖｅｓｃａ（商標）としても知られているＮ－ブチルデオキシノジリマイシン（ＮＢ－ＤＮＪ）、Ｎ－ヒドロキシエチル－ＤＮＪ（ミグリトール）、Ｎ－（５－アダマンタン－１－イル－メトキシペンチル）デオキシノジリマイシン（ＡＭＰ－ＤＮＪ）としても知られているミグルスタットのアダマンチル類似体、Ｎ－ブチル－１－デオキシ－ノジリマイシン（ＫＴＢ－ＤＮＪ）、Ｎ－エチル－１－デオキシノジリマイシン（ＮＥ－ＤＮＪ）、Ｎ－ブチルデオキシマンノジリマイシン、Ｎ－５－カルボキシル－１－デオキシノジリマイシン、Ｎ－ドデシル－１－デオキシノジリマイシン、ノジリマイシン硫酸塩、ノジリマイシン－１－スルホン酸、Ｎ－（ｎ－ノニル）－１－デオキシノジリマイシン、Ｎ－（７－オキサデシル）－１－デオキシノジリマイシン、Ｎ－（７－オキサ－９，９，９－トリフルオロノニル）－１－デオキシノジリマイシン、１－デオキシガラクトノジリマイシン（ＤＧＪ）またはミガラスタットとも命名されている（２Ｒ，３Ｓ，４Ｒ，５Ｓ）－２－（ヒドロキシメチル）－３，４，５－ピペリジントリオール、Ｎ－ブチルデオキシガラクトノジリマイシン（ＮＢ－ＤＧＪ）、Ｎ－（ｎ－ノニル）デオキシノジリマイシン、（３Ｓ，４Ｓ）－３－（ヒドロキシメチル）ピロリジン－３，４－ジオール（ｉｓｏＬＡＢ）、１，４－ジデオキシ－１，４－イミノ－Ｄ－アラビニトール、（２Ｓ，３Ｒ，４Ｓ，５Ｒ）－３，４，５－トリヒドロキシ－６－オキソピペリジン－２－カルボン酸またはＤ－グルカロ－δ－ラクタムが挙げられる。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤はミグルスタットである。

デオキシノジリマイシン誘導体の合成方法は、例えば、米国特許第５，６２２，９７２号、第５，２００，５２３号、第５，０４３，２７３号、第４，９９４，５７２号、第４，２４６，３４５号、第４，２６６，０２５号、第４，４０５，７１４号および第４，８０６，６５０号および米国特許出願公開第２００７／０２７５９９８号に開示されており、これらは全て参照により本明細書に組み込まれる。

１，５－ジデオキシ－１，５－イミノ－Ｄ－グルシトールの誘導体の合成方法は、米国特許第５，５２５，６１６号、第５，４７２，９６９号、第６，６６０，７４９号および第６，４６５，４８８号に記載されており、全てが参照により本明細書に組み込まれる。

本発明の一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤はセラミド類似体である。

本発明の一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、１－フェニル－２－デカノイルアミノ－３－モルホリノ－プロパノール（ＰＤＭＰ）の類似体である。

セラミド類似体または１－フェニル－２－デカノイルアミノ－３－モルホリノ－プロパノール（ＰＤＭＰ）の類似体の例としては、限定されるものではないが、Ｄ－トレオ－１－フェニル－２－デカノイルアミノ－３－モルホリノ－プロパノール（ＰＤＭＰ）、ＰＤＭＰの鏡像異性体、Ｌ－トレオ－１－フェニル－２－アミノ－１，３－プロパンジオールおよびＤＬ－エリスロ－１－フェニル－２－アミノ－１，３－プロパンジオール、Ｄ－トレオ（Ｒ，Ｒ）鏡像異性体、１－フェニル－２－パルミトイルアミノ－３－モルホリノ－１－プロパノール（ＰＰＭＰ）、１－フェニル－２－パルミトイルアミノ－３－ピロリジノ－１－プロパノール（Ｐ４）、Ｄ－トレオ－１－エチレンジオキシフェニル－２－パルミトイル－３－ピロリジノ－プロパノール（ＥｔＤＯ－Ｐ４）、ＤＬ－トレオ－１－フェニル－２－パルミトイルアミノ－３－ピロリジノ－１－プロパノール（ＤＬ－トレオ－Ｐ４）、２－（２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－２－イル）－Ｎ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）アセトアミド、Ｇｅｎｚ－１１２６３８およびエリグルスタットの相同体としても知られているＮ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）オクタンアミド、Ｇｅｎｚ－１２３３４６とも命名されているＮ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）ノナンアミド、ＢＭＬ－１１９およびＩＶ－２３１Ｂが挙げられる。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、特許出願の国際公開第２０１１０６６３５２号に記載されているグルコシルセラミドシンターゼを阻害する化合物であり、特に以下の式：

を有するＧＥＮＺ１１２６３８ヘミ酒石酸塩の非晶形および結晶形を含む。

セラミドの類似体の他の例は、モルホリノ誘導体、Ｃａｒｓｏｎら．Ｔｅｔｒａｈｅｄｒｏｎ Ｌｅｔｔ．，１９９４，３５，２６５９－２６６２；Ｍｉｕｒａ Ｔら．Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．１９９８年９月；６（９）：１４８１－９（これらは全て参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、以下の式：

を有するピロリジノ誘導体も含む。

本発明によって想定されるセラミド類似体またはＰＤＭＰの類似体の例としては、限定されるものではないが、米国特許第６，９１６，８０２号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているものが挙げられ、限定されるものではないが、以下の式：

（式中、
Ｒ^１は、フェニル基、好ましくはメチレンジオキシ、エチレンジオキシおよびトリメチレンジオキシなどのｐ－メトキシ、ヒドロキシ、ジオキサン置換体などの置換フェニル基、シクロヘキシルまたは他の非環式基、ｔ－ブチルまたは他の分岐鎖状脂肪族基、あるいは当該構造体の核の隣に二重結合を有する好ましくは７～１５炭素長の長アルキルまたはアルケニル鎖であり、その脂肪族鎖はフィトスフィンゴシンに対応する２つの不斉中心の近くにヒドロキシル基を有していてもよく、
Ｒ^２は、２～１８の炭素長の脂肪酸のアルキル残基であり、その脂肪酸は飽和または不飽和であってもよく、あるいは、Ｃ２位に小さい置換（例えばヒドロキシル基）を有し、Ｒ^２基の脂肪酸は２、３、４、５、６、７、８、９、１０、１１、１２、１３、１４、１５、１６、１７または１８炭素長であってもよいことが想定され、また、より長い脂肪酸は有用であり得、好ましくは上記構造中のＲ^２は５または７炭素長のいずれかであってもよく、
Ｒ^３は第三級アミン、好ましくはピロリジン、アゼチジン、モルホリンまたはピペリジンなどの環式アミンであり、この中の窒素原子は核に結合されている（すなわち第三級アミン）
を有する化合物が挙げられる。

本発明によって想定されるセラミド類似体またはＰＤＭＰの類似体の例としては、限定されるものではないが、Ｌｅｅら． ＪＢＣ １９９９ Ｖｏｌ．２７４，Ｎｏ．２１：１４６６２－１４６６９；ＳｈａｙｍａｎおよびＬａｒｓｅｎ Ｊ Ｌｉｐｉｄ Ｒｅｓ．２０１４年７月；５５（７）：１２１５－２５（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているものが挙げられ、限定されるものではないが、Ｎ－（５－アダマンタン－１－イル－メトキシペンチル）デオキシノジリマイシン、Ｄ－トレオ－１－エチレンジオキシフェニル－２－パルミトイル－３－ピロリジノ－プロパノール（ＥｔＤＯ－Ｐ４）、エリグルスタット酒石酸塩（Ｃｅｒｄｅｌｇａ（商標））、－（２，３－ジヒドロ－１Ｈ－インデン－２－イル）－Ｎ－（（１Ｒ，２Ｒ）－１－（２，３－ジヒドロベンゾ［ｂ］［１，４］ジオキシン－６－イル）－１－ヒドロキシ－３－（ピロリジン－１－イル）プロパン－２－イル）アセトアミド、イソファゴミン、１－デオキシガラクトノジリマイシン（ミガラスタット）、アンブロキソール、ピリメタミン［２，４－ジアミノ－５－（４－クロロフェニル）－６－エチルピリミジン］ならびに、以下の式：

（式中、Ｒは以下：

から選択される）
を有する化合物が挙げられる。

本発明の一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、米国特許第６，０５１，５９８号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、１－フェニル－２－パルミトイルアミノ－３－ピロリジノ－１－プロパノール、Ｄ－トレオ－１－ピロリジノ－１－デオキシセラミド、（１Ｒ，２Ｒ）－１－フェニル－２－アシルアミノ－３－環式アミノ－１－プロパノール、（２Ｒ，３Ｒ）－２－パルミトイル－スフィンゴシルアミン、１－環式アミノ－１－デオキシセラミド、および１－環式アミノ－２－ヘキサデカノイルアミノ－３－ヒドロキシ－オクタデカ－４，５－エンを含む群から選択される。

本発明の一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、米国特許第５，３０２，６０９号、米国特許第５，９５２，３７０号、米国特許第５，９１６，９１１号、米国特許第６，０３０，９９５号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、以下の式：

（式中、
Ｒ_１は、５～１５個の炭素を有する芳香族構造、脂環式構造、分岐鎖状の脂肪族構造または直鎖状の脂肪族基であり、
Ｒ_２は、９～１８個の炭素を有する脂肪族鎖であり、かつ
Ｒ_３はピロリジノである）
を有する化合物、
ならびに、その機能的相同体、異性体および薬学的に許容される塩から選択される。

本発明の一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、米国特許第６，５６９，８８９号、米国特許第６，２５５，３３６号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、４’－ヒドロキシ－１－フェニル－２－パルミトイルアミノ－３－ピロリジノ－１－プロパノール、３’，４’－エチレンジオキシ－１－フェニル－２－パルミトイルアミノ－３－ピロリジノ－１－プロパノール、Ｄ－ｔ－３’，４’－エチレンジオキシ－１－フェニル－２－パルミトイルアミノ－３－ピロリジノ－１－プロパノール、Ｄ－ｔ－４－ヒドロキシ－１－フェニル－２－パルミトイルアミノ－３－ピロリジノ－１－プロパノール、それらの薬学的に許容される塩およびそれらの混合物を含む群から選択される。本明細書で使用される「薬学的に許容される塩」という用語は、薬学的に許容される酸、例えば、硫酸、塩酸、リン酸などの無機酸または酢酸などの有機酸との本発明の化合物の塩を意味することが意図されている。

本発明の一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤はカルボキサミド誘導体である。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、特許出願の国際公開第２０１００９１１０４号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているグルコシルセラミドシンターゼ阻害剤であり、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］－２－｛［３－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝ピリジン－３－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］－２－｛［３－（トリフルオロメチル）－フェニル］オキシ｝ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロ－２－メチルフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロ－２－メチルフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］－メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチル－１，４－ジアゼパン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチル－１，４－ジアゼパン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］－メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－メチルフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ベンズアミド、２－［（４－メチルフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ベンズアミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２－クロロ－４－メチルフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２－クロロ－４－メチルフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝－エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－メチルフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－メチルフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］－メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］－２－｛［３－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝ピリジン－３－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］－２－｛［３－（トリフルオロメチル）－フェニル］オキシ｝ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－｛（１Ｒ）－１－［（４－メチルピペラジン－１－イル）カルボニル］－３－［（フェニルメチル）オキシ］プロピル｝ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－｛（１Ｒ）－１－［（４－メチルピペラジン－１－イル）カルボニル］－３－［（フェニルメチル）オキシ］－プロピル｝ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－［（１－メチルピペリジン－４－イル）アミノ］－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－［（１－メチルピペリジン－４－イル）アミノ］－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］－メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－｛４－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］ピペラジン－１－イル｝－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－｛４－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］ピペラジン－１－イル｝－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－｛（１Ｒ）－１－［（４－メチルピペラジン－１－イル）カルボニル］－４－フェニルブチル｝ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－｛（１Ｒ）－１－［（４－メチルピペラジン－１－イル）カルボニル］－４－フェニルブチル｝ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（３－メチルヘキサヒドロピロロ［１，２－ａ］－ピラジン－２（１Ｈ）－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（３－メチルヘキサヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－シクロプロピルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－シクロプロピルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－メチル－１，４－ジアゼパン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－メチル－１，４－ジアゼパン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－［（１Ｒ）－２－［３－（ジメチルアミノ）－アゼチジン－１－イル］－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－［（１Ｒ）－２－［３－（ジメチルアミノ）アゼチジン－１－イル］－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（５，６－ジヒドロ［１，２，４］トリアゾロ［４，３－ａ］ピラジン－７（８Ｈ）－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（５，６－ジヒドロ［１，２，４］トリアゾロ［４，３－ａ］ピラジン－７（８Ｈ）－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－［３－（ヒドロキシメチル）ヘキサヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル］－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－［３－（ヒドロキシメチル）ヘキサヒドロピロロ［１，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル］－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（１，３－ジヒドロ－２Ｈ－ピロロ［３，４－ｃ］ピリジン－２－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（１，３－ジヒドロ－２Ｈ－ピロロ［３，４－ｃ］ピリジン－２－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペリジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペリジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝－２－（１，５，６，７－テトラヒドロ－４Ｈ－イミダゾ［４，５－ｂ］ピリジン－４－イル）エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝－２－（１，５，６，７－テトラヒドロ－４Ｈ－イミダゾ［４，５－ｂ］ピリジン－４－イル）エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－［４－（２－フルオロエチル）ピペラジン－１－イル］－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－［４－（２－フルオロエチル）ピペラジン－１－イル］－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－エチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－エチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－［４－（２－ヒドロキシエチル）ピペラジン－１－イル］－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－［４－（２－ヒドロキシエチル）ピペラジン－１－イル］－２－オキソ－１－［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｒ）－２－（１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イルアミノ）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］－２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－ピリジン－３－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｒ）－２－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イルアミノ］
－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］－２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝ピリジン－３－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｒ）－２－［（３Ｒ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イルアミノ］－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］－２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝ピリジン－３－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｒ）－２－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イルアミノ］－１－（｛［（３－メチルフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－オキソエチル］－２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（３－メチルフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２－クロロ－４－フルオロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１１）－１－（｛［（４－メチルフェニル）メチル］オキシ｝－メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２－クロロ－４－フルオロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（４－メチルフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－フルオロ－２－メチルフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（４－メチルフェニル）メチル］－オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－フルオロ－２－メチルフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（４－メチルフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロ－２－メチルフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（４－フルオロフェニル）メチル］－オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロ－２－メチルフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（４－フルオロフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２－クロロ－４－フルオロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（４－フルオロフェニル）メチル］－オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２－クロロ－４－フルオロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（４－フルオロフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－フルオロ－２－メチルフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（４－フルオロフェニル）メチル］－オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－フルオロ－２－メチルフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（４－フルオロフェニル）メチル］－オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（２－クロロフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－２－［（４－クロロフェニル）オキシ］ピリジン－３－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（２－クロロフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－２－［（４－クロロフェニル）オキシ］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－１－｛［（ナフタレン－２－イルメチル）オキシ］メチル｝－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－１－｛［（ナフタレン－２－イルメチル）オキシ］メチル｝－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－［（｛［３－（メチルオキシ）フェニル］メチル｝オキシ）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－［（｛［３－（メチルオキシ）フェニル］メチル｝オキシ）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（４－メチルフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（４－メチルフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（３－クロロフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－２－［（４－クロロフェニル）オキシ］ピリジン－３－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（３－クロロフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－２－［（４－クロロフェニル）オキシ］ピリジン－３－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（４－クロロフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－２－［（４－クロロフェニル）オキシ］ピリジン－３－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（４－クロロフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－２－［（４－クロロフェニル）オキシ］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（２，４－ジメチルフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（２，４－ジメチルフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（ピリジン－３－イルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（ピリジン－３－イルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－［（｛［４－（１－メチルエチル）フェニル］メチル｝オキシ）－メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－［（｛［４－（１－メチルエチル）フェニル］メチル｝オキシ）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（２－メチルフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（２－メチルフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（２－クロロピリジン－４－イル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝ピリジン－３－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（２－クロロピリジン－４－イル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－［（１Ｒ）－１－｛［（２，３－ジヒドロ－１，４－ベンゾジオキシン－６－イルメチル）オキシ］メチル｝－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（２－メチル－１，３－オキサゾール－５－イル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（２－メチル－１，３－オキサゾール－５－イル）メチル］－オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－｛（１Ｒ）－１－｛［（２，３－ジヒドロ－１，４－ベンゾジオキシン－６－イルメチル）オキシ］メチル｝－２－［３－（ジメチルアミノ）アゼチジン－１－イル］－２－オキソエチル｝ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－｛（１Ｒ）－１－｛［（２，３－ジヒドロ－１，４－ベンゾジオキシン－６－イルメチル）オキシ］メチル｝－２－［３－（ジメチルアミノ）アゼチジン－１－イル］－２－オキソエチル｝ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－［（１Ｒ）－２－［（３Ｒ）－３－（ジメチルアミノ）－ピロリジン－１－イル］－１－（｛［（３－メチルフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－［（１Ｒ）－２－［（３Ｒ）－３－（ジメチルアミノ）ピロリジン－１－イル］－１－（｛［（３－メチルフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（ピリジン－４－イルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（ピリジン－４－イルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（２，６－ジクロロピリジン－４－イル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４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－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（１－メチルシクロプロピル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフ
ルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－｛（１Ｒ）－１－（｛［（１－メチルシクロプロピル）メチル］オキシ｝メチル）－２－［（１－メチルピペリジン－４－イル）アミノ］－２－オキソエチル｝－ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－（｛［（１－メチルシクロプロピル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｒ）－１－［（ビシクロ［２．２．１］ヘプタ－２－イルオキシ）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－２－［（４－クロロフェニル）オキシ］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－［（シクロヘキシルオキシ）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－１－｛［（シクロヘキシルメチル）オキシ］メチル｝－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（１－フェニルエチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ベンズアミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）アミノ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－［（１Ｒ）－２－オキソ－２－｛（３Ｒ）－３－［（フェニルメチル）アミノ］ピロリジン－１－イル｝－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（４－クロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｒ）－２－［（３Ｒ）－３－（ジメチルアミノ）ピロリジン－１－イル］－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－［（１Ｒ）－２－［（３Ｒ）－３－（ジメチルアミノ）ピロリジン－１－イル］－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－［（１Ｒ）－２－［３－（メチルアミノ）ピロリジン－１－イル］－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－［（１Ｒ）－２－｛３－［メチル（フェニルメチル）アミノ］ピロリジン－１－イル｝－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－［（１Ｒ）－２－オキソ－２－｛（３Ｒ）－３－［（２－フェニルエチル）アミノ］ピロリジン－１－イル｝－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－［（１Ｒ）－２－｛（３Ｒ）－３－［（２－メチルプロピル）アミノ］ピロリジン－１－イル｝－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］－ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－［（１Ｒ）－２－［（３Ｒ）－３－（メチルアミノ）ピロリジン－１－イル］－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－［（１Ｒ）－２－［（３Ｓ）－３－（メチルアミノ）ピロリジン－１－イル］－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－［（１Ｓ）－２－［（３Ｓ）－３－（ジメチルアミノ）ピロリジン－１－イル］－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－［（１Ｓ）－２－［（フェニルメチル）オキシ］－１－（ピロリジン－１－イルメチル）エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－｛［２－クロロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］オキシ｝－Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｓ）－２－モルホリン－４－イル－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｓ）－２－［３－（ジメチルアミノ）ピロリジン－１－イル］－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｓ）－２－［（３Ｒ）－３－（ジメチルアミノ）ピロリジン－１－イル］－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、２－［（２，４－ジクロロフェニル）オキシ］－Ｎ－［（１Ｓ）－２－［（３Ｓ）－３－（ジメチルアミノ）ピロリジン－１－イル］－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］メチル｝エチル］ピリジン－３－カルボキサミド、（Ｒ）－２－（ｔｅｒｔ－ブトキシカルボニルアミノ）－３－（（１－メチルシクロプロピル）メトキシ）プロパン酸を含む群から選択される。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、特許出願の国際公開第２０１００９１１６４号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているグルコシルセラミドシンターゼ阻害剤であり、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（２Ｓ）－３－（１Ｈ－インドール－３－イル）－１－（４－メチルピペラジン－１－イル）－１－オキソプロパン－２－イル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－２－［３－（ジメチルアミノ）アゼチジン－１－イル］－１－（１Ｈ－インドール－３－イルメチル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）－エチル］－Ｌ－トリプトファンアミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－（１Ｈ－インドール－３－イルメチル）－２－（４－メチル－１，４－ジアゼパン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－（１Ｈ－インドール－３－イルメチル）－２－オキソ－２－ピペラジン－１－イルエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－（１Ｈ－インドール－３－イルメチル）－２－モルホリン－４－イル－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－２－｛４－［３－（ジメチルアミノ）プロピル］ピペラジン－１－イル｝－１－（１Ｈ－インドール－Ｓ－イルメチル］－１－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－（１－メチルピペリジン－４－イル）－Ｌ－トリプトファンアミド、Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［３－（ジメチルアミノ）－プロピル］－Ｌ－トリプトファンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－トリプトファンアミド、１－（４－クロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－（１Ｈ－インドール－３－イルメチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－（１Ｈ－インドール－３－イルメチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－１－［４－（メチルオキシ）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－１－［４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（２－クロロフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－｛［４－（メチルオキシ）フェニル］メチル｝－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（２Ｓ）－３－（３－クロロフェニル）－１－（４－メチルピペラジン－１－イル）－１－オキソプロパン－２－イル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、２－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－２－メチルプロパンアミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（３，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（４－フルオロフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（ジメチル－アミノ）エチル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－｛［４－（エチルオキシ）フェニル］メチル｝－２－（４－メチル－ピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（２，４－ジメチルフェニル）メチル］－２－（４－メチル－ピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－１－（ナフタレン－２－イルメチル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（４－メチルフェニル）メチル］－２－（４－メチル－ピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、１－（３，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（４－クロロフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（２－フルオロフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）フェニル］メチル｝エチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－（フェニルメチル）－エチル］シクロプロパン－カルボキサミド、１－（２，６－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－［（３，４，５－トリフルオロフェニル）メチル］エチル｝シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（３，４－ジフルオロフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（４－ヒドロキシフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－１－［３－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２－クロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－（４－メチル－ピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－１－（４－フルオロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－１－［２－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－１－（２，４－ジフルオロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎ－２－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］－カルボニル｝－５－フェニル－Ｌ－ノルバリンアミド、４－ブロモ－Ｎ－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニル－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）エチル］－Ｌ－プロリンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎ－α－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）エチル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－メチル－Ｎ－（１－メチルピロリジン－３－イル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－メチル－Ｎ－（１－メチルピペリジン－４－イル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－［（３Ｒ）－３－（ジメチルアミノ）－ピロリジン－１－イル］－２－オキソエチル｝シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－［（３Ｓ）－３－（ジメチルアミノ）－ピロリジン－１－イル］－２－オキソエチル｝シクロプロパンカルボキサミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）－１－メチルエチル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［１－（フェニルメチル）－ピペリジン－４－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｒ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－（フェニルメチル）エチル］－シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－１－（ナフタレン－１－イルメチル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－［（８ａＲ）－ヘキサヒドロピロロ－［ｌ，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル］－２－オキソエチル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル－２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］－カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（ジエチルアミノ）－エチル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（１－メチルピ
ロリジン－２－イル）エチル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－（２－ピペリジン－１－イルエチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［３－（ジメチルアミノ）－プロピル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－（１－エチルピペリジン－３－イル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［１－（フェニルメチル）ピロリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（４－アセチルフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［１－（フェニル－メチル）－１Ｈ－イミダゾール－５－イル］メチル｝エチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（２－メチルフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（３－メチルフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（３－フルオロフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（４－シアノフェニル）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－［４－（１－メチルエチル）－ピペラジン－１－イル］－２－オキソエチル｝シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［３－（トリフルオロメチル）フェニル］メチル｝エチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［２－（トリフルオロメチル）－フェニル］メチル｝エチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－（ピリジン－２－イルメチル）エチル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－（シクロヘキシルメチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－１－（２，４－ジクロロ－フェニル）シクロプロパンカルボキサミド、３，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）エチル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）－エチル］－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［３－（ジメチルアミノ）－プロピル］－Ｎ－メチル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［３－（ジメチルアミノ）－２，２－ジメチルプロピル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［（１－メチルピペリジン－２－イル）メチル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－（２－ピロリジン－１－イルプロピル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（３，５－ジクロロフェニル）メチル］－２－（４－エチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（３，５－ジクロロフェニル）メチル］－２－［４－（２－ヒドロキシエチル）－ピペラジン－１－イル］－２－オキソエチル｝シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（３，５－ジクロロフェニル）メチル］－２－［４－（２－フルオロエチル）ピペラジン－１－イル］－１－オキソエチル｝シクロプロパンカルボキサミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）－エチル］－Ｎ－メチル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）－エチル］－Ｎ－メチル－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ’２’－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）エチル］－Ｎ－メチル－Ｌ－ロイシンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－メチル－Ｎ－［（３Ｒ）－１－メチルピロリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－メチル－Ｎ－［１－（フェニルメチル）ピペリジン－４－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－メチル－Ｎ－［１－（フェニルメチル）－ピペリジン－４－イル］－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－２－［３－（ジメチルアミノ）アゼチジン－１－イル］－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）フェニル］メチル｝エチル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）エチル］－Ｎ－エチル－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－メチル－Ｎ－［（３Ｒ）－１－メチル－ピロリジン－３－イル］－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－（２－ピロリジン－１－イルエチル）－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－（｛［（４－クロロフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－（｛［（３－クロロフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－（｛［（２－クロロフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－１－（３，５－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、１－（３，５－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－（｛［（４－フルオロフェニル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（３，５－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（｛［２－（メチルオキシ）フェニル］メチル｝オキシ）メチル］－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｒ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］－メチル｝エチル］シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［（フェニルメチル）オキシ］－メチル｝エチル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎ’２’－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］－カルボニル｝－３－（２，３－ジヒドロ－１，４－ベンゾジオキシン－６－イル）－Ｌ－アラニンアミド、Ｎ－［（３Ｒ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎ’２’－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］－カルボニル｝－３－（２，３－ジヒドロ－１，４－ベンゾジオキシン－６－イル）－Ｌ－アラニンアミド、Ｎ’２’－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－３－（２，３－ジヒドロ－１，４－ベンゾジオキシン－６－イル）－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）エチル］－Ｎ－メチル－Ｌ－アラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－クロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］－カルボニル｝－３－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｏ－メチル－３－（メチルオキシ）－Ｌ－チロシンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－クロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－２－フルオロ－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－クロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－２－フルオロ－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－（２，３－ジヒドロ－１，４－ベンゾジオキシン－６－イルメチル）－２－オキソエチル］－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、３－（２，３－ジヒドロ－１，４－ベンゾジオキシン－６－イル）－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）エチル］－Ｎ－メチル－Ｎ－２－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－アラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－（２，３－ジヒドロ－１，４－ベンゾジオキシン－６－イルメチル）－２－オキソエチル］－１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－（アゼチジン－３－イルメチル）－４－ブロモ－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロピル）－カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル］－１－［４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタ－２－イル）－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）フェニル］－メチル｝エチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボ
キサミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（メチルアミノ）エチル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－オキソ－２－ピペラジン－１－イルエチル｝シクロプロパンカルボキサミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－メチル－Ｎ－［２－（メチルアミノ）エチル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－（４－メチル－ピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］プロパンアミド、Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－（ピロリジン－２－イルメチル）－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（３－アミノアゼチジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）フェニル］メチル｝－エチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－（１－メチルピペリジン－３－イル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル－４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］－カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｒ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－［（８ａＳ）－ヘキサヒドロピロロ［ｌ，２－ａ］ピラジン－２（１Ｈ）－イル］－２－オキソエチル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－［（３Ｒ）－３－アミノピロリジン－１－イル］－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）フェニル］－メチル｝エチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］－カルボニル｝－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－（ピロリジン－３－イルメチル）－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｒ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｒ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）－エチル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）－エチル］－Ｎ－メチル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（メチルアミノ）－エチル］－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（メチルアミノ）－エチル］－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－（２－アミノエチル）－２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］－カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－（２－メチル－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－（８－メチル－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－３－イル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル－２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－メチル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）－エチル］－β－メチルフェニルアラニンアミド、Ｎ－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］－カルボニル｝－２，４－ビス（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｒ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、（βＳ）－Ｎ－［（３Ｒ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－β－メチル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］－カルボニル｝－Ｎ－メチル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル－Ｎα－（｛１－［４－（メチルオキシ）フェニル］シクロプロピル｝－カルボニル）－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－２，４－ビス（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－クロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－｛［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イルアミノ］カルボニル｝－３－フェニルプロピル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－クロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－１－（フェニルメチル）－Ｌ－ヒスチジンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎ－２－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］－カルボニル｝－３－（２，２－ジフルオロ－１，３－ベンゾジオキソール－５－イル）－Ｌ－アラニンアミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［３－（１Ｈ－イミダゾール－１－イル）プロピル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［（１Ｓ，３Ｓ，４Ｓ）－１－オキシド－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－クロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－２－フルオロフェニルアラニンアミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－２－（６－メチル－２，６－ジアザスピロ［３．３］ヘプタ－２－イル）－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）フェニル］メチル｝エチル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎα－（｛１－［４－（メチルオキシ）フェニル］－シクロプロピル｝カルボニル）－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｒ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎα－（｛１－［４－（メチルオキシ）フェニル］－シクロプロピル｝カルボニル）－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｒ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎα－（｛１－［４－（メチルオキシ）フェニル］－シクロプロピル｝カルボニル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎα－（｛１－［４－（メチルオキシ）フェニル］－シクロプロピル｝カルボニル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－ピリジン－４－イル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－フェニル－Ｎα－（｛１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－４－イル－４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－３－シクロヘキシル－Ｎ－２－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－アラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎα－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）－フェニル］シクロプロピル｝カルボニル）－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－［３－（ジメチル－アミノ）－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル］－２－オキソエチル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－アミノ－４－メチルピペリジン－１－イル）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎ’２’－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］－カルボニル｝－Ｎ’２’－メチル－５－フェニル－Ｌ－ノルバリンアミド、Ｎ’２’－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）エチル］－Ｎ－メチル－５－フェニル－Ｌ－ノルバリンアミド、１－（２，
４－ジクロロフェニル）－Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－［（３Ｒ）－３－メチルピペラジン－１－イル］－２－オキソエチル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）－オキシ］フェニル｝シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎα－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝カルボニル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、（βＳ）－Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－β－メチルフェニルアラニンアミド、（βＳ）－Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－β－メチルフェニルアラニンアミド、Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［トランス－４－フェニルピロリジン－３－イル］－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル－４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｄ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－５－（４－クロロフェニル）－Ｎ－２－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－ノルバリンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－［（３Ｒ）－３－アミノピペリジン－１－イル］－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－アミノ－４－メチルピペリジン－１－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－［（３Ｓ）－３－メチルピペラジン－１－イル］－２－オキソエチル｝シクロプロパンカルボキサミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［（２Ｓ）－ピロリジン－２－イルメチル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［（２Ｒ）－ピロリジン－２－イルメチル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［（３Ｒ）－ピロリジン－３－イルメチル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［（３Ｓ）－ピロリジン－３－イルメチル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－［（３Ｓ）－３－アミノピロリジン－１－イル］－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－［（３Ｒ）－３－アミノピロリジン－１－イル］－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－［（３Ｓ）－３－アミノピペリジン－１－イル］－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［（３Ｓ）－ピロリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［（３Ｒ）－ピロリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－（３－アミノシクロヘキシル）－２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－（ビフェニル－４－イルメチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－アミノ－４－メチルピペリジン－１－イル）－１－（ビフェニル－４－イルメチル）－２－オキソエチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－（ビフェニル－４－イルメチル）－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）エチル］－２－オキソエチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－（２－アミノシクロヘキシル）－２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｒ，２Ｒ）－２－アミノシクロヘキシル］－２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ，２Ｓ）－２－アミノシクロヘキシル］－２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［（３Ｓ）－ピペリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－［４－（メチルアミノ）ピペリジン－１－イル］－２－オキソエチル｝－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－（２－アミノ－２－メチルプロピル）－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］－カルボニル｝－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－［（３Ｒ）－３－（メチルアミノ）ピロリジン－１－イル］－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）－フェニル］－メチル｝エチル］－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝－シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－［（３Ｒ）－３－（メチルアミノ）ピロリジン－１－イル］－２－オキソエチル｝－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－（２－アミノ－２－メチルプロピル）－４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－［（３Ｓ）－３－（メチルアミノ）ピロリジン－１－イル］－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）－フェニル］メチル｝エチル］－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－［（３Ｓ）－３－（メチルアミノ）ピロリジン－１－イル］－２－オキソエチル｝－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（２，７－ジアザスピロ［４．４］ノナ－２－イル）－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）フェニル］－メチル｝エチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（２，８－ジアザスピロ［４．５］デカ－８－イル）－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）フェニル］－メチル｝エチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（ｌ，７－ジアザスピロ［４．４］ノナ－７－イル）－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）フェニル］－メチル｝エチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２－フルオロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［（３Ｓ）－ピペリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－ピペリジン－３－イル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－ピペリジン－３－イル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－［（３Ｓ）－３－（メチルアミノ）ピロリジン－１－イル］－２－オキソエチル｝－１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－［（３Ｒ）－３－（メチルアミノ）ピロリジン－１－イル］－２－オキソエチル｝－１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎα－［（１－｛４－［（ジフルオロメチル）－オキシ］フェニル｝シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］－Ｎ－［（１Ｓ）－２－［（３Ｒ）－３－（メチルアミノ）－ピロリジン－１－イル］－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）フェニル］メチル｝エチル］シクロプロパン－カルボキサミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎα－［（１－｛４－［（ジフルオロメチル）オキシ］－フェニル｝シクロプロピル）カルボニル］－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－ピペリジン－４－イル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－（２－アミノエチル）－４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］－カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－メチル－Ｎ－［２－（メチルアミノ）エチル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－（２－アミノエチル）－４－ブロモ－Ｎα－｛
［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］－カルボニル｝－Ｎ－メチル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎα－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝－カルボニル）－Ｎ－メチル－Ｎ－［２－（メチルアミノ）エチル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）エチル］－Ｎα－｛［１－（２－フルオロフェニル）シクロプロピル］－カルボニル｝－Ｎ－メチル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎ－メチル－Ｎ－［２－（メチルアミノ）エチル］－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝－シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）エチル］－Ｎ－メチル－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］－フェニル｝シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－アミノ－４－メチルピペリジン－１－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ’２’－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－５－フェニル－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｌ－ノルバリンアミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－２－オキソ－２－｛３－［（フェニルメチル）アミノ］－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル｝－１－｛［４－（トリフルオロメチル）フェニル］メチル｝エチル］シクロプロパン－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）－フェニル］メチル｝エチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－２－｛３－［（２－メチルプロピル）アミノ］－８－アザビシクロ－［３．２．１］オクタ－８－イル｝－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）フェニル］メチル｝－エチル］－シクロプロパン－カルボキサミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－２－オキソ－２－（３－ピロリジン－１－イル－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－｛［４－（トリフルオロメチル）フェニル］メチル｝エチル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）－フェニル］メチル｝エチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、４－ブロモ－Ｎ－［２－（ジメチルアミノ）エチル］－Ｎα－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）－フェニル］シクロプロピル｝カルボニル）－Ｎ－メチル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－３－イル－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］－カルボニル｝－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（３－フルオロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－ピペリジン－４－イル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎ－ピペリジン－４－イル－Ｎα－｛［１－（２，４，５－トリフルオロフェニル）シクロプロピル］－カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－２－クロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］－カルボニル｝－４－フルオロ－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）－フェニル］メチル｝エチル］－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパン－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）－フェニル］メチル｝エチル］－１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパン－カルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）－フェニル］メチル｝エチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－メチル－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－メチル－Ｎ－ピペリジン－４－イル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－１－（ビフェニル－４－イルメチル）－２－オキソエチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－ピペリジン－４－イル－１－（ビフェニル－４－イルメチル）－２－オキソエチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロパンカルボキサミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－ピペリジン－４－イル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－ピペリジン－４－イル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－（シス－４－アミノシクロヘキシル）－４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－（トランス－４－アミノシクロヘキシル）－４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－（２－メチルピペリジン－４－イル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎ－α－｛［１－（２，３－ジフルオロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎ－α－｛［１－（２，６－ジフルオロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］－フェニル｝シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、２，４－ジクロロ－Ｎ－［（３Ｓ）－ピロリジン－３－イル］－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］－フェニル｝シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－４－（トリフルオロメチル）－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）－オキシ］フェニル｝シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－［（３Ｒ）－３－アミノピペリジン－１－イル］－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）フェニル］－メチル｝エチル］－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（３Ｓ）－ピペリジン－３－イル］－４－（トリフルオロメチル）－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－アミノ－４－メチルピペリジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）－フェニル］メチル｝エチル］－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（３Ｓ）－ピロリジン－３－イル］－４－（トリフルオロメチル）－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）－オキシ］フェニル｝シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎ－［（３Ｓ）－ピロリジン－３－イル］－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝－シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝－シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－２－オキソ－１－（フェニルメチル）エチル］－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（３Ｓ）－ピロリジン－３－イル］－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝－シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、３－シクロヘキシル－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｎ－２－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝－シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－アラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－（シクロヘキシルメチル）－２－オキソエチル］－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、３－シクロヘキシル－Ｎ－［（３Ｓ）－ピロリジン－３－イル］－Ｎ－２－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝－シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－アラニンアミド、Ｎ－ピペリジン－４－イル－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロピル）－カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－ピペリジン－４－イル－４－（トリフルオロメチル）－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］－フェニル｝シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、３－シクロヘキシル－Ｎ－ピペリジン－４－イル－Ｎ’２’－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝－シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－アラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎ－ピペリジン－４－イル－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝－シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－［４－（メチルアミノ）ピペリジン－１－イル］－２－オキソエチル｝－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－［４－（メチルアミノ）ピペリジン－１－イル］－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）フェニル］－メチル｝エチル］－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェ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サミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－［４－（メチルアミノ）ピペリジン－１－イル］－２－オキソエチル｝－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－［４－（メチルアミノ）ピペリジン－１－イル］－２－オキソ－１－（フェニルメチル）エチル］－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－２－オキソ－１－（フェニルメチル）エチル］－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－１－（シクロヘキシルメチル）－２－［４－（メチルアミノ）ピペリジン－１－イル］－２－オキソエチル｝－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－１－（シクロヘキシルメチル）－２－オキソエチル］－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、４－ブロモ－Ｎ－ピペリジン－４－イル－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝－シクロプロピル）－カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－アミノ－４－メチルピペリジン－１－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２，３，４－トリフルオロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、４－ブロモ－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｎα－｛［１－（２，３，４－トリフルオロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２，３，４－トリフルオロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－アミノ－４－メチルピペリジン－１－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２，３－ジフルオロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，３－ジフルオロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２，３－ジフルオロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－アミノ－４－メチルピペリジン－１－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（４－フルオロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（４－フルオロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（４－フルオロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝－カルボニル）－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝－カルボニル）－Ｎ－［（３Ｓ）－ピロリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－アミノ－４－メチルピペリジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）－フェニル］メチル｝エチル］－１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎα－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝カルボニル）－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎα－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝カルボニル）－Ｎ－［（３Ｓ）－ピロリジン－３－イル］－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎα－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝－カルボニル）－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、４－ブロモ－Ｎα－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝カルボニル）－Ｎ－［（３Ｓ）－ピロリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎα－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝カルボニル）－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－２－オキソ－１－（フェニルメチル）エチル］－１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎα－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝カルボニル）－Ｎ－［（３Ｓ）－ピロリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、３－シクロヘキシル－Ｎ’２’－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝－カルボニル）－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｌ－アラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－（シクロヘキシルメチル）－２－オキソエチル］－１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、３－シクロヘキシル－Ｎ’２’－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝－カルボニル）－Ｎ－［（３Ｓ）－ピロリジン－３－イル］－Ｌ－アラニンアミド、２，４－ジクロロ－Ｎα－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝－カルボニル）－Ｎ－ピペリジン－４－イル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎα－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝カルボニル）－Ｎ－ピペリジン－４－イル－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎα－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝－カルボニル）－Ｎ－ピペリジン－４－イル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎα－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝カルボニル）－Ｎ－ピペリジン－４－イル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、３－シクロヘキシル－Ｎ’２’－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝－カルボニル）－Ｎ－ピペリジン－４－イル－Ｌ－アラニンアミド、１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］－Ｎ－［（１Ｓ）－２－［４－（メチルアミノ）ピペリジン－１－イル］－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）フェニル］メチル｝エチル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－２－オキソ－１－｛［４－（トリフルオロメチル）フェニル］メチル｝－エチル］－１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－［４－（メチルアミノ）ピペリジン－１－イル］－２－オキソエチル｝－１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－１－［（２，４－ジクロロフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－［４－（メチルアミノ）ピペリジン－１－イル］－２－オキソエチル｝－１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］－Ｎ－［（１Ｓ）－２－［４－（メチルアミノ）ピペリジン－１－イル］－２－オキソ－１－（フェニルメチル）エチル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－２－オキソ－１－（フェニルメチル）エチル］－１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－１－（シクロヘキシルメチル）－２－［４－（メチルアミノ）ピペリジン－１－イル］－２－オキソエチル｝－１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－１－（シクロヘキシルメチル）－２－オキソエチル］－１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－アミノ－４－メチルピペリジン－１－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－［２－フルオロ－４－トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－アミノ－４－メチルピペリジン－１－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２，４－ジフルオロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジフルオロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２，４－ジフルオロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、４－ブロモ－Ｎα－（｛１－［４－フルオロ－３－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝カルボニル）－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－［４－フルオロ－３－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－アミノ－４－メチルピペリジン－１－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－［４－フルオロ－３－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－アミノ－４－メチルピペリジン－１－イル）－１－［（
４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２－フルオロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２－フルオロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２－フルオロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４，５－トリフルオロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－（２，４，５－トリフルオロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、４－ブロモ－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｎα－｛［１－（２，４，５－トリフルオロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｒ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－（アゼチジン－３－イルメチル）－４－ブロモ－Ｎ－メチル－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）－オキシ］フェニル｝シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－Ｉ－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－（２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタ－２－イル）－２－オキソエチル］－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－（２，５－ジアザビシクロ［２．２．１］ヘプタ－２－イル）－２－オキソエチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（４－フルオロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－｛４－［（１－メチルエチル）アミノ］ピペリジン－１－イル｝－２－オキソエチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－（アゼチジン－３－イルメチル）－４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］－カルボニル｝－Ｎ－メチル－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，３，４－トリフルオロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎα－（｛１－４－フルオロ－３－（トリフルオロメチル）－フェニル］シクロプロピル｝カルボニル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－（シス－４－アミノシクロヘキシル）－４－ブロモ－Ｎα－（｛１－［２－フルオロ－４－（トリフルオロメチル）－フェニル］シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－（シス－４－アミノシクロヘキシル）－４－ブロモ－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］－フェニル］シクロプロピル｝カルボニル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎα－（｛１－［４－フルオロ－２－（トリフルオロメチル）フェニル］シクロプロピル｝カルボニル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎα－｛［１－（２，４－ジフルオロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－［（４－フルオロフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎα－（｛１－［２－（トリフルオロメチル）－フェニル］シクロプロピル｝カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－フルオロ－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝－シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－アミノピペリジン－１－イル）－１－［（４－フルオロフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－１－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（１Ｓ）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－（４－ヒドロキシピペリジン－１－イル）－２－オキソエチル］－１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－（トリフルオロメチル）－Ｎα－［（１－｛４－［（トリフルオロメチル）－オキシ］フェニル｝シクロプロピル）カルボニル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－２，４－ジクロロ－Ｎ－α－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－４－ブロモ－Ｎ－α－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］カルボニル｝－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－［（３Ｓ）－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル］－Ｎ－α－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）－シクロプロピル］－カルボニル｝－４－（トリフルオロメチル）－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎα－［２－（２，４－ジクロロフェニル）－２－メチルプロパノイル］－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、４－ブロモ－Ｎα－（２－メチル－２－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝プロパノイル）－Ｎ－［（３Ｒ）－ピペリジン－３－イル］－Ｌ－フェニルアラニンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（３－アミノ－８－アザビシクロ［３．２．１］オクタ－８－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－２－メチル－２－｛４－［（トリフルオロメチル）オキシ］フェニル｝プロパンアミド、Ｎ－｛（１Ｓ）－２－（４－アミノ－４－メチルピペリジン－１－イル）－１－［（４－ブロモフェニル）メチル］－２－オキソエチル｝－２－（２，４－ジクロロフェニル）－２－メチルプロパンアミド、１－（２，４－ジクロロフェニル）－Ｎ－［（１Ｓ）－１－（｛［（１－メチルシクロプロピル）メチル］オキシ｝メチル）－２－（４－メチルピペラジン－１－イル）－２－オキソエチル］シクロプロパンカルボキサミド、Ｎ－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル－Ｎ’２’－｛［１－（２，４－ジクロロフェニル）シクロプロピル］カルボニル｝－３－（１－メチルシクロプロピル）－Ｌ－アラニンアミドを含む群から選択される。

カルバメートの例は、特許出願の国際公開第２０１２１２９０８４号、国際公開第２０１４０４３０６８号に記載されており、それらは全て参照により組み込まれる。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、特許出願の国際公開第２０１２１２９０８４号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、［２－（２，４’－ジフルオロビフェニル－４－イル）プロパン－２－イル］カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、｛２－［４－（１，３－ベンゾチアゾール－６－イル）フェニル］プロパン－２－イル｝カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、｛１－［５－（４－フルオロフェニル）ピリジン－２－イル］シクロプロピル｝カルバミン酸１－アザビシクロ［３．２．２］ノナ－４－イル、｛１－［３－（４－フルオロフェノキシ）フェニル］シクロプロピル｝カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、｛ｌ－［４－（１，３－ベンゾチアゾール－５－イル）フェニル］シクロプロピル｝カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、［１－（４’－フルオロ－３’－メトキシビフェニル－４－イル）シクロプロピル］カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、［３－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）オキセタン－３－イル］カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、｛１－［６－（４－フルオロフェノキシ）ピリジン－２－イル］シクロプロピル｝カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、［３－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）ペンタン－３－イル］カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、｛２－［２－（４－フルオロフェニル）－２Ｈ－インダゾール－６－イル］プロパン－２－イル｝カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、｛２－［２－（１Ｈ－ピロール－１－イル）ピリジン－４－イル］プロパン－２－イル｝カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、１－（３－エチル－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）－３－［１－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）シクロプロピル］尿素、Ｎ－（１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）－Ｎ’－［１－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）シクロプロピル］エタンジアミド、（１－｛４［（４，４－ジフルオロシクロヘキシル）オキシ］フェニル｝シクロプロピル）カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、１－（４－メチル－１－アザビシクロ［３．２．２］ノナ－４－イル）－３－［１－（５－フェニルピリジン－２－イル）シクロプロピル］尿素、１－［１－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）シクロプロピル］－１－メチル－３－（３－メチル－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）尿素、１－［１－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）シクロプロピル］－１－メチル－３－（３－メチル－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）尿素、１－｛２－［４’－（２－メトキシエトキシ）ビフェニル－４－イル］プロパン－２－イル｝－３－（３－メチル－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）尿素、２－（１－アザビシクロ［３．２．２］ノナ－４－イル）－Ｎ－［ｌ－（５－フェニルピリジン－２－イル）シクロプロピル］アセトアミド、３－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）－３－メチル－Ｎ－（４－メチル－１－アザビシクロ［３．２．２］ノナ－４－イル）ブタンアミド、Ｎ－［２－（ビフェニル－４－イル）プロパン－２－イル］－Ｎ’－（３－メチル－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）硫酸ジアミド、Ｎ－［２－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）プロパン－２－イル］－Ｎ’－（３－メチル－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）硫酸ジアミド、１－（３－ブチル－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）－３－｛２－［１－（４－フルオロフェニル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル］プロパン－２－イル｝尿素、［４－（４－フルオロフェニル）－２－メチルブタ－３－イン－２－イル］カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、１－（３－ブチル－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）－３－［４－（４－フルオロフェニル）－２－メチルブタ－３－イン－２－イル）尿素、Ｎ－［１－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）シクロプロピル］－１，４－ジアザビシクロ［３．２．２］ノナン－４－カルボキサミド、１－（２－（４’－フルオロ－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）－３－（３－メチル－１－アザビシクロ［３．２．２］ノナン－３－イル）尿素、１－（２－（４’－フルオロ－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）－３－（４－メチル－１－アザビシクロ［４．２．２］デカン－４－イル）尿素、１－（２－（４’－フルオロ－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）－３－（３－メチル－１－アザビシクロ［４．２．２］デカン－３－イル）尿素、および１－（２－（４’－フルオロ－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）－３－（５－メチル－１－アザビシクロ［４．２．２］デカン－５－イル）尿素を含む群から選択される。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は特許出願の国際公開第２０１２１２９０８４号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、以下の式：

を有する化合物、あるいはその薬学的に許容される塩またはプロドラッグであり、
式中、
ｎは１、２または３であり、
ｍは０または１であり、
ｐは０または１であり、
ｔは０、１または２であり、
ｙは１または２であり、
ｚは０、１または２であり、
Ｅは、Ｓ、Ｏ、ＮＨ、ＮＯＨ、ＮＮＯ_２、ＮＣＮ、ＮＲ、ＮＯＲまたはＮＳＯ_２Ｒであり、
Ｘ^１は、ｍが１である場合にはＣＲ^１であり、ｍが０である場合にはＮであり、
Ｘ^２は、Ｏ、－ＮＨ、－ＣＨ_２－、ＳＯ_２、ＮＨ－ＳＯ_２、ＣＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルまたは－ＮＲ^２であり、
Ｘ^３は、Ｏ、－ＮＨ、－ＣＨ_２－、ＣＯ、－ＣＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、ＳＯ_２ＮＨ、－ＣＯ－ＮＨ－または－ＮＲ^３であり、
Ｘ^４は、ＣＲ^４Ｒ^５、ＣＨ_２ＣＲ^４Ｒ^５またはＣＨ_２－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル－ＣＲ^４Ｒ^５であり、
Ｘ^５は、直接結合、Ｏ、Ｓ、ＳＯ_２、ＣＲ^４Ｒ^５、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルオキシ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルケニル、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルケニルオキシであり、
Ｒは、（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリール、（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロアリール、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロアリール（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり、
Ｒ^１は、Ｈ、ＣＮ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルカルボニルまたは（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり、
Ｒ^２およびＲ^３はそれぞれ独立して－Ｈ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり、それらはハロゲン、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリール、（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロアリール、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリール、ハロ（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリールおよびハロ（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロアリールからなる群から選択される１つ以上の置換基で任意に置換されており、あるいは、任意に、Ｘ^２が－ＮＲ^２であり、かつＸ^３が－ＮＲ^３である場合には、Ｒ^２およびＲ^３はそれらが結合する窒素原子と一緒になって、ハロゲン、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリール、（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロアリール、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリール、ハロ（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリールおよびハロ（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換された非芳香族複素環を形成していてもよく、
Ｒ^４およびＲ^５は独立してＨ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルから選択されるか、あるいは、それらが結合する炭素と一緒になってスピロ（Ｃ_３～Ｃ_１０）シクロアルキル環またはスピロ（Ｃ_３～Ｃ_１０）シクロアルコキシ環を形成し、
Ｒ^６は、－Ｈ、ハロゲン、－ＣＮ、（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリール、（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリールオキシ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルオキシ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり、それらは１～４つのハロまたは（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルで任意に置換されており、
Ａ^１は、（Ｃ_２～Ｃ_６）アルキニル、（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリール、（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロアリール、（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロシクロアルキルまたはベンゾ（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロシクロアルキルであり、それらはハロ、１～３つのハロで任意に置換された（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルケニル、アミノ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルアミノ、（Ｃ_１～Ｃ_６）ジアルキルアミノ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルコキシ、ニトロ、ＣＮ、－ＯＨ、１～３つのハロで任意に置換された（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルオキシ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルコキシカルボニルおよび（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルカルボニルからなる群から選択される１つ以上の置換基で任意に置換されており、
Ａ^２は、Ｈ、（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリール、（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロアリール、（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロシクロアルキルまたはベンゾ（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロシクロアルキルであり、それらはハロ、１～３つのハロで任意に置換された（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキレニル（ａｌｋｙｌｅｎｙｌ）、アミノ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルアミノ、（Ｃ_１～Ｃ_６）ジアルキルアミノ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルコキシ、Ｏ（Ｃ_３～Ｃ_６シクロアルキル）、（Ｃ_３～Ｃ_６）シクロアルコキシ、ニトロ、ＣＮ、ＯＨ、１～３つのハロで任意に置換された（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルオキシ、（Ｃ_３～Ｃ_６）シクロアルキル、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルコキシカルボニル、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルカルボニル、（Ｃ_１～Ｃ_６）ハロアルキルからなる群から選択される１つ以上の置換基で任意に置換されているが、
但し、
ｎ＋ｔ＋ｙ＋ｚの合計は６以下であり、
ｐが０である場合には、Ｘ^２はＮＨ－ＳＯ_２であり、かつＸ^３はＮＨであり、
ｎが１であり、ｔが０であり、ｙが１であり、ｚが１である場合には、Ｘ^２はＮＨであり、ＥはＯであり、Ｘ^３はＮＨであり、Ａ^２はＨであり、かつＸ^５は直接結合であり、Ａ^１は非置換のフェニル、ハロフェニルまたはイソプロペニルフェニルではなく、
ｎが１であり、ｔが０であり、ｙが１であり、ｚが１である場合には、Ｘ^２はＯであり、ＥはＯであり、Ｘ^３はＮＨであり、Ａは（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリールであり、かつＸ^５は直接結合であり、Ａ^２はＨであり、かつＲ^４はＨであり、故にＲ^５はシクロヘキシルではなく、ｎが１であり、ｔが０であり、ｙが１であり、ｚが１である場合には、ＸはＮＨであり、ＥはＯであり、ＸはＣＨ_２であり、Ｒ^４およびＲ^５はどちらも水素であり、Ａ^２はＨであり、かつＸ^５は直接結合であり、故にＡ^１は非置換のフェニルではない。

特に、本ガングリオシド代謝阻害剤は、特許出願の国際公開第２０１２１２９０８４号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、以下の式：

を有する化合物から選択される。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、特許出願の国際公開第２０１４０４３０６８号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、［２－（２，４’－ジフルオロビフェニル－４－イル）プロパン－２－イル］カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、｛２－［４－（１，３－ベンゾチアゾール－６－イル）フェニル］プロパン－２－イル｝カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、｛１－［５－（４－フルオロフェニル）ピリジン－２－イル］シクロプロピル｝カルバミン酸１－アザビシクロ［３．２．２］ノナ－４－イル、｛１－［３－（４－フルオロフェノキシ）フェニル］シクロプロピル｝カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、｛１－［４－（１，３－ベンゾチアゾール－５－イル）フェニル］シクロプロピル｝カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、［１－（４’－フルオロ－３’－メトキシビフェニル－４－イル）シクロプロピル］カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、［３－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）オキセタン－３－イル］カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、｛１－［６－（４－フルオロフェノキシ）ピリジン－２－イル］シクロプロピル｝カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、［３－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）ペンタン－３－イル］カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、｛２－［２－（４－フルオロフェニル）－２Ｈ－インダゾール－６－イル］プロパン－２－イル｝カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、｛２－［２－（１Ｈ－ピロール－１－イル）ピリジン－４－イル］プロパン－２－イル｝カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、１－（３－エチル－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）－３－［１－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）シクロプロピル］尿素、Ｎ－（１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）－Ｎ’－［１－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）シクロプロピル］エタンジアミド、（１－｛４［（４，４－ジフルオロシクロヘキシル）オキシ］フェニル｝シクロプロピル）カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、１－（４－メチル－１－アザビシクロ［３．２．２］ノナ－４－イル）－３－［１－（５－フェニルピリジン－２－イル）シクロプロピル］尿素、１－［１－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）シクロプロピル］－１－メチル－３－（３－メチル－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）尿素、１－［１－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）シクロプロピル］－１－メチル－３－（３－メチル－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）尿素、１－｛２－［４’－（２－メトキシエトキシ）ビフェニル－４－イル］プロパン－２－イル｝－３－（３－メチル－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）尿素、２－（１－アザビシクロ［３．２．２］ノナ－４－イル）－Ｎ－［１－（５－フェニルピリジン－２－イル）シクロプロピル］アセトアミド、３－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）－３－メチル－Ｎ－（４－メチル－１－アザビシクロ［３．２．２］ノナ－４－イル）ブタンアミド、Ｎ－［２－（ビフェニル－４－イル）プロパン－２－イル］－Ｎ’－（３－メチル－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）硫酸ジアミド、Ｎ－［２－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）プロパン－２－イル］－Ｎ’－（３－メチル－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）硫酸ジアミド、１－（３－ブチル－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）－３－｛２－［１－（４－フルオロフェニル）－１Ｈ－ピラゾール－４－イル］プロパン－２－イル｝尿素、［４－（４－フルオロフェニル）－２－メチルブタ－３－イン－２－イル］カルバミン酸１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル、１－（３－ブチル－１－アザビシクロ［２．２．２］オクタ－３－イル）－３－［４－（４－フルオロフェニル）－２－メチルブタ－３－イン－２－イル］尿素、Ｎ－［１－（４’－フルオロビフェニル－４－イル）シクロプロピル］－１，４－ジアザビシクロ［３．２．２］ノナン－４－カルボキサミド、１－（２－（４’－フルオロ－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）－３－（３－メチル－１－アザビシクロ［３．２．２］ノナン－３－イル）尿素、１－（２－（４’－フルオロ－［１，－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）－３－（４－メチル－１－アザビシクロ［４．２．２］デカン－４－イル）尿素、１－（２－（４’－フルオロ－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）－３－（３－メチル－１－アザビシクロ［４．２．２］デカン－３－イル）尿素、および１－（２－（４’－フルオロ－［１，１’－ビフェニル］－４－イル）プロパン－２－イル）－３－（５－メチル－１－アザビシクロ［４．２．２］デカン－５－イル）尿素を含む群から選択される。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、特許出願の国際公開第２０１４０４３０６８号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、以下の式：

を含み、
式中、
ｎは１、２または３であり、
ｍは０または１であり、
ｐは０または１であり、
ｔは０、１または２であり、
ｙは１または２であり、
ｚは０、１または２であり、
Ｅは、Ｓ、Ｏ、ＮＨ、ＮＯＨ、ＮＮＯ_２、ＮＣＮ、ＮＲ、ＮＯＲまたはＮＳＯ_２Ｒであり、
Ｘ^１は、ｍが１である場合にはＣＲ^１であり、ｍが０である場合にはＮであり、
Ｘ^２は、Ｏ、－ＮＨ、－ＣＨ_２－、ＳＯ_２、ＮＨ－ＳＯ_２、ＣＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルまたは－ＮＲ^２であり、
Ｘ^３は、Ｏ、－ＮＨ、－ＣＨ_２－、ＣＯ、－ＣＨ（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、ＳＯ_２ＮＨ、－ＣＯ－ＮＨ－または－ＮＲ^３であり、
Ｘ^４は、ＣＲ^４Ｒ^５、ＣＨ_２ＣＲ^４Ｒ^５またはＣＨ_２－（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル－ＣＲ^４Ｒ^５であり、
Ｘ^５は、直接結合、Ｏ、Ｓ、ＳＯ_２、ＣＲ^４Ｒ^５、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルオキシ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルケニル、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルケニルオキシであり、
Ｒは、（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリール、（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロアリール、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロアリール（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり、
Ｒ^１は、Ｈ、ＣＮ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルカルボニルまたは（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり、
Ｒ^２およびＲ^３はそれぞれ独立して－Ｈ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり、それらはハロゲン、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリール、（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロアリール、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリール、ハロ（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリールおよびハロ（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロアリールからなる群から選択される１つ以上の置換基で任意に置換されており、あるいは任意に、Ｘ^２が－ＮＲ^２であり、かつＸ^３が－ＮＲ^３である場合には、Ｒ^２およびＲ^３はそれらが結合する窒素原子と一緒になって、ハロゲン、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリール、（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロアリール、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリール、ハロ（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリールおよびハロ（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロアリールから選択される１つ以上の置換基で任意に置換された非芳香族複素環を形成していてもよく、
Ｒ^４およびＲ^５は独立してＨ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルから選択されるか、あるいは、それらが結合する炭素と一緒になってスピロ（Ｃ_３～Ｃ_１０）シクロアルキル環またはスピロ（Ｃ_３～Ｃ_１０）シクロアルコキシ環を形成し、
Ｒ^６は、－Ｈ、ハロゲン、－ＣＮ、（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリール、（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリールオキシ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルオキシ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルであり、それらは１～４つのハロまたは（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルで任意に置換されており、
Ａ^１は、（Ｃ_２～Ｃ_６）アルキニル、（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリール、（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロアリール、（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロシクロアルキルまたはベンゾ（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロシクロアルキルであり、それらはハロ、１～３つのハロで任意に置換された（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルケニル、アミノ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルアミノ、（Ｃ_１～Ｃ_６）ジアルキルアミノ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルコキシ、ニトロ、ＣＮ、－ＯＨ、１～３つのハロで任意に置換された（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルオキシ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルコキシカルボニルおよび（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルカルボニルからなる群から選択される１つ以上の置換基で任意に置換されており、
Ａ^２は、Ｈ、（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリール、（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロアリール、（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロシクロアルキルまたはベンゾ（Ｃ_２～Ｃ_９）ヘテロシクロアルキルであり、それらはハロ、１～３つのハロで任意に置換された（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキル、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキレニル、アミノ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルアミノ、（Ｃ_１～Ｃ_６）ジアルキルアミノ、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルコキシ、Ｏ（Ｃ_３～Ｃ_６シクロアルキル）、（Ｃ_３～Ｃ_６）シクロアルコキシ、ニトロ、ＣＮ、ＯＨ、１～３つのハロで任意に置換された（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルオキシ、（Ｃ_３～Ｃ_６）シクロアルキル、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルコキシカルボニル、（Ｃ_１～Ｃ_６）アルキルカルボニル、（Ｃ_１～Ｃ_６）ハロアルキルからなる群から選択される１つ以上の置換基で任意に置換されているが、
但し、
ｎ＋ｔ＋ｙ＋ｚの合計は６以下であり、
ｐが０である場合には、Ｘ^２はＮＨ－ＳＯ_２であり、かつＸ^３はＮＨであり、
ｎが１であり、ｔが０であり、ｙが１であり、ｚが１である場合には、Ｘ^２はＮＨであり、ＥはＯであり、Ｘ^３はＮＨであり、Ａ^２はＨであり、かつＸ^５は直接結合であり、Ａ^１は非置換のフェニル、ハロフェニルまたはイソプロペニルフェニルではなく、
ｎが１であり、ｔが０であり、ｙが１であり、ｚが１である場合には、Ｘ^２はＯであり、ＥはＯであり、Ｘ^３はＮＨであり、Ａは（Ｃ_６～Ｃ_１２）アリールであり、かつＸ^５は直接結合であり、Ａ^２はＨであり、かつＲ^４はＨであり、故にＲ^５はシクロヘキシルではなく、かつｎが１であり、ｔが０であり、ｙが１であり、ｚが１である場合には、ＸはＮＨであり、ＥはＯであり、ＸはＣＨ_２であり、Ｒ^４およびＲ^５はどちらも水素であり、Ａ^２はＨであり、かつＸ^５は直接結合であり、故にＡ^１は非置換のフェニルではない。

特に、本ガングリオシド代謝阻害剤は、特許出願の国際公開第２０１４０４３０６８号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、以下の式：

を有する化合物から選択される。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、特許出願の国際公開第２０１４０４３０６８号に記載されており、（Ｓ）キヌクリジン－３－イル （２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメート（Ｓ）－２－ヒドロキシスクシネート（ＧＺ４５２）、キヌクリジン－３－イル （２－（４’－フルオロ－［１，－ビフェニル］－３－イル）プロパン－２－イル）カルバメート（ＧＺ１６１）および（１Ｒ，２Ｒ）－オクタン酸［２－（２’，３’－ジヒドロ－ベンゾ［１，４］ジオキシン－６’－イル）－２－ヒドロキシ－１－ピロリジン－１－イルメチル－エチル］－アミド－Ｌ－酒石酸（ＧＺ６３８）を含む群から選択される。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤スキャフォールドは、Ｒｉｃｈａｒｄｓ Ｓら（Ｊ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ．２０１２年５月１０日；５５（９）：４３２２－３５）（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、以下の式を有する：

ＥＸＥＬ－０３４６（僅か２ｎＭのＩＣ_５０を有する）。

一実施形態では、本発明の阻害剤はガングリオシドの代謝を阻害するペプチドである。そのようなペプチドの非限定的な例は、Ｋｏｌｔｕｎ Ｅら．Ｂｉｏｏｒｇ Ｍｅｄ Ｃｈｅｍ Ｌｅｔｔ．２０１１年１１月１５日；２１（２２）：６７７３－７（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、以下の式：

を有し、式中、Ｒは、

である。

一実施形態では、本阻害剤は化学シャペロン阻害剤シャペロンである。化学シャペロンの例としては、限定されるものではないが、イソファゴミン、ミガラスタット（ｍｉｇｌａｓｔａｔ）、アンブロキソールとも命名されているトランス－４－（２－アミノ－３，５－ジブロモベンジルアミノ）－シクロヘキサノール、およびピリメタミンまたはダラプリムとも命名されている５－（４－クロロフェニル）－６－エチル－２，４－ピリミジンジアミンが挙げられる。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、米国特許第７，５０１，４３９号に記載されている化学シャペロンであり、以下の式：

を有するＤ－酒石酸イソファゴミン（アフェゴスタット（Ａｆｅｇｏｓｔａｔ））とも命名されている（３Ｒ，４Ｒ，５Ｒ）－５－（ヒドロキシメチル）－３，４－ピペリジンジオールである。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、欧州特許第０２４０９０７号に記載されている化学シャペロンであり、以下の式：

を有するアンブロキソールである。

化学シャペロンの他の例としては、限定されるものではないが、１－デオキシガラクトノジリマイシン（ＤＧＪ）、α－ホモガラクトノジリマイシン、α－ホモアロノジリマイシン、β－１－Ｃ－ブチル－ＤＧＪ、ＮＢ－ＤＧＪおよびＮ－ノニル－ＤＮＪが挙げられる。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤は、米国特許第５，２３６，８３８号、第５，５４９，８９２号および第６，４５１，６００号（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、セレザイムとも命名されているイミグルセラーゼである。

一実施形態では、本ガングリオシド代謝阻害剤はＧＭ３シンターゼを阻害する。

一実施形態では、ＧＭ３シンターゼ阻害剤はｍｉＲＮＡである。

ＧＭ３シンターゼ阻害剤の例としては、限定されるものではないが、ＡＴＧＴＡＣＡＧＧＡＧＣＣＡＧＡＣＴＣＣＡＧＴＴＴＴＧＧＣＣＡＣＴＧＡＣＴＧＡＣＴＧＧＡＧＴＣＴＣＴＣＣＴＧＴＡＣＡＴ（配列番号３）および／またはＡＴＡＡＣＡＧＡＧＣＣＡＴＡＧＣＣＧＴＣＴＧＴＴＴＴＧＧＣＣＡＣＴＧＡＣＴＧＡＣＡＧＡＣＧＧＣＴＧＧＣＴＣＴＧＴＴＡＴ（配列番号４）が挙げられる。

本発明の一実施形態では、ＧＭ３シンターゼ阻害剤は、配列番号３の少なくとも２０、３０、４０、５０または５５個のヌクレオチド（好ましくは、連続したヌクレオチド）からなる配列を有するｍｉＲＮＡである。

本発明の一実施形態では、ＧＭ３シンターゼ阻害剤は、配列番号３の２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８または５９個の連続したヌクレオチドなど、配列番号３の少なくとも２０個の連続したヌクレオチドを含むかそれらからなる配列を有するｍｉＲＮＡである。

本発明の一実施形態では、ＧＭ３シンターゼ阻害剤は、配列番号３の２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８または５９個の連続したヌクレオチドなど、配列番号３の少なくとも２０個の連続したヌクレオチドと、３’および／または５’に１、２、３、４または５個のさらなるヌクレオチドと、を含むかそれらからなる配列を有するｍｉＲＮＡである。

一実施形態では、ＧＭ３シンターゼ阻害剤は配列番号３の機能保存的配列であり、前記機能保存的配列は、配列番号３と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％超、の同一性を有し且つ配列番号３のようなＧＭ３シンターゼ発現を阻害する能力を保存している、９～７０、１２～６０または１５～５０個のヌクレオチドを含むかそれらからなる。

一実施形態では、配列番号３の機能保存的配列は、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９または７０個のヌクレオチドを含むかそれらからなる。

「同一性」または「同一の」という用語は、２つ以上のヌクレオチド配列間の関係において使用する場合、２つ以上の塩基からなる配列間の一致数によって決定されるヌクレオチド配列間の配列関連性（ｓｅｑｕｅｎｃｅ ｒｅｌａｔｅｄｎｅｓｓ）の程度を指す。「同一性」とは、特定の数学モデルまたはコンピュータプログラム（すなわち「アルゴリズム」）によって扱われるギャップアラインメント（存在すれば）を有する２つ以上の配列のより短い配列間の完全な一致率の尺度である。関連するヌクレオチド配列の同一性は、公知の方法によって容易に計算することができる。そのような方法としては、限定されるものではないが、Ａｒｔｈｕｒ Ｍ．Ｌｅｓｋ，Ｃｏｍｐｕｔａｔｉｏｎａｌ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ｓｏｕｒｃｅｓ ａｎｄ Ｍｅｔｈｏｄｓ ｆｏｒ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ（コンピューターを使用した分子生物学：配列解析のための提供源および方法）（Ｎｅｗ－Ｙｏｒｋ：Ｏｘｆｏｒｄ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ Ｐｒｅｓｓ，１９８８）、Ｄｏｕｇｌａｓ Ｗ．Ｓｍｉｔｈ，Ｂｉｏｃｏｍｐｕｔｉｎｇ：Ｉｎｆｏｒｍａｔｉｃｓ ａｎｄ Ｇｅｎｏｍｅ Ｐｒｏｊｅｃｔｓ（バイオコンピューティング：情報科学およびゲノムプロジェクト）（Ｎｅｗ－Ｙｏｒｋ：Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，１９９３）、Ｈｕｇｈ Ｇ．ＧｒｉｆｆｉｎおよびＡｎｎｅｔｔｅ Ｍ．Ｇｒｉｆｆｉｎ，Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ｄａｔａ，Ｐａｒｔ １（配列データのコンピューター解析、パート１）（Ｎｅｗ Ｊｅｒｓｅｙ：Ｈｕｍａｎａ Ｐｒｅｓｓ，１９９４）、Ｇｕｎｎａｒ ｖｏｎ Ｈｅｉｎｊｅ，Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｉｎ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｂｉｏｌｏｇｙ：Ｔｒｅａｓｕｒｅ Ｔｒｏｖｅ ｏｒ Ｔｒｉｖｉａｌ Ｐｕｒｓｕｉｔ（分子生物学における配列解析：貴重な発見または小さな追及）（Ａｃａｄｅｍｉｃ Ｐｒｅｓｓ，１９８７）、Ｍｉｃｈａｅｌ ＧｒｉｂｓｋｏｖおよびＪｏｈｎ Ｄｅｖｅｒｅｕｘ，Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ Ｐｒｉｍｅｒ（配列解析プライマー）（Ｎｅｗ Ｙｏｒｋ：Ｍ．Ｓｔｏｃｋｔｏｎ Ｐｒｅｓｓ，１９９１）およびＣａｒｉｌｌｏら，１９８８．ＳＩＡＭ Ｊ．Ａｐｐｌ．Ｍａｔｈ．４８（５）：１０７３－１０８２に記載されているものが挙げられる。同一性を決定するための好ましい方法は、試験される配列間の最大の一致を与えるように設計されている。同一性の決定方法は、公的に入手可能なコンピュータプログラムに記述されている。２つの配列間の同一性を決定するための好ましいコンピュータプログラムによる方法としては、ＧＡＰ（Ｄｅｖｅｒｅｕｘら，１９８４．Ｎｕｃｌ．Ａｃｉｄ．Ｒｅｓ．１２（１ Ｐｔ １）：３８７－３９５；Ｇｅｎｅｔｉｃｓ Ｃｏｍｐｕｔｅｒ Ｇｒｏｕｐ，ウィスコンシン大学バイオテクノロジーセンター，ウィスコンシン州マディソン）、ＢＬＡＳＴＰ、ＢＬＡＳＴＮ、ＴＢＬＡＳＴＮおよびＦＡＳＴＡ（Ａｌｔｓｃｈｕｌら，１９９０．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５（３）：４０３－４１０））などのＧＣＧプログラムパッケージが挙げられる。ＢＬＡＳＴＸプログラムは、国立生物工学情報センター（ＮＣＢＩ）および他の提供源（ＢＬＡＳＴ Ｍａｎｕａｌ，Ａｌｔｓｃｈｕｌら，ＮＣＢ／ＮＬＭ／ＮＩＨ，メリーランド州ベセズダ ２０８９４；Ａｌｔｓｃｈｕｌら，１９９０．Ｊ．Ｍｏｌ．Ｂｉｏｌ．２１５（３）：４０３－４１０）から公的に入手可能である。また、周知のＳｍｉｔｈ Ｗａｔｅｒｍａｎアルゴリズムを使用して同一性を決定してもよい。

本発明の一実施形態では、配列番号３の前記機能保存的配列は、Ｃ末端およびＮ末端の他の核酸の間に配列番号３を含む配列であってもよい。また前記機能保存的配列は配列番号３の断片であってもよい。

本発明の一実施形態では、ＧＭ３シンターゼ阻害剤は、配列番号４の少なくとも２０、３０、４０、５０または５５個のヌクレオチド（好ましくは、連続したヌクレオチド）の配列を有するｍｉＲＮＡである。

本発明の一実施形態では、ＧＭ３シンターゼ阻害剤は、配列番号４の２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８または５９個の連続したヌクレオチドなどの配列番号４の少なくとも２０個の連続したヌクレオチドを含むかそれらからなる配列を有するｍｉＲＮＡである。

本発明の一実施形態では、ＧＭ３シンターゼ阻害剤は、配列番号４の２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８または５９個の連続したヌクレオチドなど、配列番号４の少なくとも２０個の連続したヌクレオチドと、３’および／または５’に１、２、３、４または５個のさらなるヌクレオチドと、を含むかそれらからなる配列を有するｍｉＲＮＡである。

一実施形態では、ＧＭ３シンターゼ阻害剤は配列番号４の機能保存的配列であり、前記機能保存的配列は、配列番号４と少なくとも約７５％、８０％、８５％、９０％、９５％、または約９５％、９６％、９７％、９８％、９９％超、の同一性を有し且つ配列番号４のようなＧＭ３シンターゼ発現を阻害する能力を保存する、９～７０、１２～６０または１５～５０個のヌクレオチドを含むかそれらからなる。

一実施形態では、配列番号４の機能保存的配列は、２０、２１、２２、２３、２４、２５、２６、２７、２８、２９、３０、３１、３２、３３、３４、３５、３６、３７、３８、３９、４０、４１、４２、４３、４４、４５、４６、４７、４８、４９、５０、５１、５２、５３、５４、５５、５６、５７、５８、５９、６０、６１、６２、６３、６４、６５、６６、６７、６８、６９または７０個のヌクレオチドを含むかそれらからなる。

本発明の一実施形態では、配列番号４の前記機能保存的配列は、Ｃ末端およびＮ末端の他の核酸の間に配列番号４を含む配列であってもよい。また前記機能保存的配列は配列番号４の断片であってもよい。

ＧＭ３シンターゼ阻害剤の他の例としては、限定されるものではないが、Ｈａｔａｎａｋａら，Ｈｅｔｅｒｏｃｙｃｌｅｓ ４３：５３１－５３４（１９９６）（参照により本明細書に組み込まれる）に記載されているシチジン－モノホスホ－Ｎ－アセチルノイラミン酸（ＣＭＰ－ＮＡＮＡ）の炭素連結型類似体が挙げられる。

ＧＭ３シンターゼの発現または活性の他の阻害剤またはそのような阻害剤を製造するための方法は、米国特許出願公開第２００９００８２３０３号、国際公開第２００５１０８６００号、国際公開第２０１１１３３９１８号または米国特許第６，２８０，９８９号（全てが参照により本明細書に組み込まれる）に記載されており、限定されるものではないが、ＧＭ３シンターゼ転写を遮断し、かつ以下の配列：ＧＧＧＵＵＡＵＵＣＵＧＡＡＣＡＵＧＵＵＴＴ（配列番号７）、ＧＡＡＧＡＣＣＣＡＧＣＴＴＧＴＴＡＡＴＧＴＧＴＧＣＴＧＴＣＣＡＴＴＡＡＣＡＡＧＣＴＧＧＧＴＣＴＴＣＴＴＴＴＴ（配列番号８）、ＧＣＣＡＡＴＧＡＴＴＴＧＴＴＣＧＴＴＡＧＴＧＴＧＣＴＧＴＣＣＴＡＡＣＧＡＡＣＡＡＡＴＣＡＴＴＧＧＣＴＴＴＴＴ（配列番号９）、ＡＴＣＡＣＴＴＣＴＣＡＧＴＴＴＣＡＣＡＴ（配列番号１０）、ＧＣＴＴＴＧＡＧＣＴＣＧＧＧＴＧＴＡＣＣ（配列番号１１）、ＧＧＣＣＴＴＣＴＣＡＴＣＴＴＧＣＴＴＴＧ（配列番号１２）、ＴＣＴＴＴＴＡＡＴＡＡＣＡＡＧＣＴＧＧＧ（配列番号１３）、ＧＧＡＴＧＴＣＴＴＴＴＡＡＴＡＡＣＡＡＧ（配列番号１４）、ＡＡＣＡＣＡＡＧＣＡＡＴＧＴＡＣＡＴＴＴ（配列番号１５）、ＴＣＣＡＣＡＣＴＣＣＡＡＡＣＡＣＡＡＧＣ（配列番号１６）、ＴＴＡＣＡＴＧＧＴＣＡＧＧＧＴＣＣＡＣＡ（配列番号１７）、ＴＣＴＧＡＧＣＴＣＴＣＴＴＴＡＣＡＴＧＧ（配列番号１８）、ＡＡＧＡＣＴＴＧＣＴＧＡＧＣＡＴＡＴＴＴ（配列番号１９）、ＡＣＡＴＴＣＣＴＴＣＴＧＣＡＡＧＡＣＴＴ（配列番号２０）、ＧＧＣＡＡＡＣＴＴＧＧＧＡＣＧＡＣＡＴＴ（配列番号２１）、ＴＣＴＧＣＡＣＡＡＡＡＧＧＧＡＧＴＡＡＧ（配列番号２２）、ＴＴＡＣＴＧＧＡＧＡＡＣＴＴＣＣＧＧＡＡ（配列番号２３）、ＧＧＡＣＴＴＴＡＣＴＧＧＡＧＡＡＣＴＴＣ（配列番号２４）、ＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣＧＣＴＴＣＣＡＡＴ（配列番号２５）、ＡＡＴＣＣＧＴＧＣＡＧＴＡＴＴＣＣＴＣＣ（配列番号２６）、ＡＣＴＧＴＴＴＡＡＣＣＴＴＡＴＣＡＣＡＡ（配列番号２７）、ＴＡＴＣＣＣＴＣＡＡＣＴＧＧＴＧＣＡＣＴ（配列番号２８）、ＧＴＡＧＴＴＴＴＡＴＴＴＣＣＡＡＣＡＴＧ（配列番号２９）、ＡＧＴＣＡＴＣＣＴＴＡＴＡＧＴＡＧＴＴＴ（配列番号３０）、ＴＧＡＡＡＴＣＡＡＣＡＣＴＣＴＴＡＡＡＴ（配列番号３１）、ＴＴＧＡＡＧＣＣＡＧＴＴＧＡＡＡＴＣＡＡ（配列番号３２）、ＴＴＴＡＣＣＡＴＴＧＣＴＴＧＡＡＧＣＣＡ（配列番号３３）、ＣＣＣＡＧＡＡＴＧＧＣＡＧＧＧＴＴＴＣＣ（配列番号３４）、ＡＣＣＴＧＣＴＴＣＣＡＡＡＡＧＡＡＧＡＧ（配列番号３５）、ＣＴＧＣＣＡＣＣＴＧＣＴＴＣＣＡＡＡＡＧ（配列番号３６）、ＴＴＴＴＴＣＴＧＣＣＡＣＣＴＧＣＴＴＣＣ（配列番号３７）、ＴＴＴＧＧＣＴＧＣＡＧＴＧＧＧＡＴＴＴＴ（配列番号３８）、ＴＧＧＡＴＴＣＡＡＡＡＴＣＣＴＧＡＡＡＴ（配列番号３９）、ＴＣＴＧＡＧＴＡＣＴＧＡＡＧＧＡＴＧＴＣ（配列番号４０）、ＧＡＧＧＣＴＣＴＧＡＧＴＡＣＴＧＡＡＧＧ（配列番号４１）、ＴＧＡＣＴＧＡＧＧＣＴＣＴＧＡＧＴＡＣＴ（配列番号４２）、ＡＴＣＴＣＧＧＣＣＣＣＡＧＡＡＣＣＴＴＧ（配列番号４３）、ＴＧＣＡＴＧＧＴＣＴＧＡＡＡＧＴＴＣＡＴ（配列番号４４）、ＡＣＣＡＧＣＴＴＴＡＡＧＡＧＧＡＡＣＴＴ（配列番号４５）、ＴＴＴＣＡＣＣＡＣＴＣＣＣＴＣＴＴＴＧＡ（配列番号４６）、ＴＴＴＣＴＧＴＧＴＴＣＡＡＡＡＴＴＣＡＣ（配列番号４７）、ＡＧＡＧＴＴＧＣＡＴＴＴＴＣＡＡＣＴＧＡ（配列番号４８）、ＣＴＧＴＣＡＡＡＡＡＣＡＧＣＴＣＴＣＡＧ（配列番号４９）、ＴＡＴＣＴＧＣＡＧＧＡＴＧＧＡＧＡＡＡＴ（配列番号５０）、ＡＣＡＴＧＡＧＣＴＧＣＡＣＴＴＣＡＡＡＧ（配列番号５１）、ＣＣＡＡＴＴＣＡＡＴＴＣＴＴＡＡＧＴＴＴ（配列番号５２）、ＧＴＴＡＣＡＴＡＣＡＡＴＴＣＴＣＴＴＴＧ（配列番号５３）、ＧＣＡＧＡＡＧＴＴＴＴＡＣＡＡＡＴＴＡＡ（配列番号５４）、ＣＡＡＡＡＧＡＧＴＧＡＣＣＴＣＣＣＣＴＣ（配列番号５５）、ＣＡＣＣＡＴＣＡＡＡＡＧＡＧＴＧＡＣＣＴ（配列番号５６）、ＡＡＴＧＡＧＧＴＴＣＡＧＧＧＣＣＡＣＣＡ（配列番号５７）、ＴＣＡＣＡＣＣＡＡＧＣＡＧＣＧＣＡＧＣＡ（配列番号５８）、ＧＧＡＴＣＣＴＣＣＧＴＧＧＧＴＣＡＣＡＣ（配列番号５９）、ＡＴＣＣＴＧＧＧＡＧＴＧＧＡＴＣＣＴＣＣ（配列番号６０）、ＧＣＴＡＣＧＧＡＧＣＡＣＧＴＣＡＴＣＣＴ（配列番号６１）、ＧＣＡＧＡＣＣＣＡＧＴＡＴＣＡＧＣＡＧＣ（配列番号６２）、ＧＣＣＧＣＴＧＣＡＴＣＧＣＡＧＡＣＣＣＡ（配列番号６３）、ＣＣＣＴＧＧＴＴＧＧＴＴＣＴＣＧＡＧＴＣ（配列番号６４）、ＣＣＴＣＣＡＧＧＡＣＡＧＣＴＴＣＣＣＴＧ（配列番号６５）、ＴＡＴＧＴＣＣＣＴＣＴＣＣＧＡＣＣＡＧＧ（配列番号６６）、ＴＣＡＣＣＴＣＡＧＡＣＡＧＡＣＡＣＴＧＧ（配列番号６７）、ＡＧＧＧＴＧＴＡＣＴＣＴＣＣＣＡＴＧＡＣ（配列番号６８）、ＧＴＧＴＴＴＣＣＣＡＡＡＡＣＡＴＴＡＴＴ（配列番号６９）、ＴＴＴＡＴＡＡＴＡＣＴＧＧＧＡＡＧＡＴＴ（配列番号７０）、ＧＧＴＡＴＡＣＡＣＣＧＣＣＡＧＧＴＡＧＧ（配列番号７１）、ＡＴＣＣＡＴＡＴＡＡＣＡＧＧＣＡＣＡＴＧ（配列番号７２）、ＣＴＴＣＣＴＡＴＣＴＣＡＣＣＴＧＴＴＴＣ（配列番号７３）、ＡＣＡＧＣＡＧＧＡＡＡＴＴＴＧＴＴＧＧＴ（配列番号７４）、ＧＧＴＡＧＡＴＧＡＣＴＧＡＡＴＣＡＴＧＧ（配列番号７５）、ＧＴＧＡＣＡＴＧＧＴＡＧＡＴＧＧＡＣＡＣ（配列番号７６）、ＧＣＴＧＣＡＧＴＡＡＴＧＡＡＧＧＣＧＧＧ（配列番号７７）、ＣＧＧＴＧＴＡＧＧＴＣＴＧＣＡＧＡＧＴＣ（配列番号７８）、ＣＡＧＴＡＧＴＣＡＣＣＴＴＣＴＧＡＣＴＧ（配列番号７９）、ＧＣＡＣＴＧＡＧＴＴＣＴＡＧＡＧＧＡＧＡ（配列番号８０）、ＡＣＣＡＡＧＡＧＣＡＧＴＧＣＡＣＴＧＡＧ（配列番号８１）、ＴＧＣＣＡＣＴＴＡＣＴＧＴＡＧＣＣＡＧＣ（配列番号８２）、ＡＣＴＧＴＴＴＡＡＣＣＴＡＴＴＴＡＡＡＴ（配列番号８３）、ＣＡＣＴＴＧＧＣＡＴＴＧＣＴＧＴＴＴＣＴ（配列番号８４）、ＣＣＴＴＣＡＧＧＡＧＣＴＣＴＡＡＧＡＴＡ（配列番号８５）、ＡＧＣＴＣＴＣＴＴＣＴＧＡＣＴＧＴＧＡＣ（配列番号８６）、ＧＣＡＣＴＧＡＧＴＴＣＴＴＡＴＣＡＣＡＡ（配列番号８７）を有する干渉ＲＮＡが挙げられる。

本発明の別の目的は、本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤および少なくとも１種の薬学的に許容される賦形剤を含むか、それらからなるか、本質的にそれからなる運動ニューロン疾患を治療するための（またはそれを治療するのに使用するための）医薬組成物である。

本発明の別の目的は、本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤を含むか、それらからなるか、本質的にそれからなる運動ニューロン疾患を治療するための（またはそれを治療するのに使用するための）医薬である。

組成物、医薬組成物または薬剤に関して本明細書で使用される「本質的に～からなる」という用語は、本発明の少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤が前記組成物、医薬組成物または医薬の中でたった１種の治療薬すなわち生物学的活性を有する医薬であることを意味する。

薬学的に許容される賦形剤の例としては、限定されるものではないが、水、生理食塩水、リンゲル液、デキストロース溶液、およびエタノール、グルコース、スクロース、デキストラン、マンノース、マンニトール、ソルビトール、ポリエチレングリコール（ＰＥＧ）、リン酸塩、酢酸塩の溶液、ゼラチン、コラーゲン、カーボポール（登録商標）、植物油などが挙げられる。賦形剤は、例えば、ＢＨＡ、ＢＨＴ、クエン酸、アスコルビン酸およびテトラサイクリンなどの好適な防腐剤、安定化剤、抗酸化剤、抗菌剤および緩衝剤をさらに含んでもよい。

本発明の組成物中に使用することができる薬学的に許容される賦形剤の他の例としては、限定されるものではないが、イオン交換体、アルミナ、ステアリン酸アルミニウム、レシチン、ヒトの血清アルブミンなどの血清タンパク質、リン酸塩などの緩衝物質、グリシン、ソルビン酸、ソルビン酸カリウム、植物性飽和脂肪酸の部分グリセリド混合物、水、塩または電解質（例えば、硫酸プロタミン、リン酸水素二ナトリウム、リン酸水素カリウム、塩化ナトリウム、亜鉛塩）、コロイド状シリカ、三ケイ酸マグネシウム、ポリビニルピロリドン、セルロース系物質、ポリエチレングリコール、カルボキシメチルセルロースナトリウム、ポリアクリル酸塩、ワックス、ポリエチレン－ポリオキシプロピレンブロックポリマー、ポリエチレングリコールおよび羊毛脂が挙げられる。

さらに、薬学的に許容される賦形剤は、例えば、界面活性剤（例えば、ヒドロキシプロピルセルロース）、好適な担体（例えば、水、エタノール、ポリオール（例えば、グリセロール、プロピレングリコールおよび液体ポリエチレングリコールなど）を含有する例えば溶媒および分散媒、好適なそれらの混合物および例えば落花生油および胡麻油などの植物油など）、等張剤（例えば、糖類または塩化ナトリウムなど）、被覆剤（例えば、レシチンなど）、吸収遅延剤（例えば、モノステアリン酸アルミニウムおよびゼラチンなど）、防腐剤（例えば、塩化ベンザルコニウム、塩化ベンゼトニウム、クロロブタノール、チメロサールなど）、緩衝液（例えば、ホウ酸、重炭酸ナトリウムおよび重炭酸カリウム、ホウ酸ナトリウムおよびホウ酸カリウム、炭酸ナトリウムおよび炭酸カリウム、酢酸ナトリウム、リン酸二水素ナトリウムなど）、等張化剤（例えば、デキストロース、塩化カリウム、プロピレングリコール、塩化ナトリウムなど）、抗酸化剤および安定化剤（例えば、重亜硫酸ナトリウム、メタ重亜硫酸ナトリウム、チオ硫酸ナトリウム、チオ尿素など）、非イオン性浸潤剤または清澄剤（例えば、ポリソルベート８０、ポリソルベート２０、ポロキサマー２８２およびチロキサポールなど）、粘度調整剤（例えば、デキストラン４０、デキストラン７０、ゼラチン、グリセロール、ヒドロキシエチルセルロース、ヒドロキシメチルプロピルセルロース、ラノリン、メチルセルロース、ワセリン、ポリエチレングリコール、ポリビニルアルコール、ポリビニルピロリドン、カルボキシメチルセルロースなど）などのいくつかの賦形剤を含んでもよい。

本発明の別の目的は、本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬を、それを必要とする対象に投与することを含む（またはそれからなるか、本質的にそれからなる）、運動ニューロン疾患を治療するための方法である。一実施形態では、治療有効量の少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤が当該対象に投与される。

本発明の別の目的は、治療有効量の本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬を、それを必要とする対象に投与することを含むか、それからなるか、本質的にそれからなる、対象におけるガングリオシド凝集またはガングリオシド蓄積を減少させるための方法である。

本発明の別の目的は、本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬を、それを必要とする対象に投与することを含むか、それからなるか、本質的にそれからなる、対象におけるガングリオシド合成を減少させるための方法である。

本発明の別の目的は、本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬を、それを必要とする対象に投与することを含むか、それからなるか、本質的にそれからなる、対象における神経細胞死を減少させるための方法である。

本発明の別の目的は、本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬を、それを必要とする対象に投与することを含むか、それからなるか、本質的にそれからなる、対象におけるオートリソソームの蓄積を減少させるための方法である。

運動ニューロン疾患の例としては、限定されるものではないが、遺伝性痙性対麻痺（ＨＳＰ）、遺伝性痙性不全対麻痺、家族性痙性対麻痺、フランス植民地病またはストランペル－ロレイン病、乳児発症上行性遺伝性痙性麻痺、ＭＡＳＡ症候群（ＣＲＡＳＨ症候群およびＧａｒｅｉｓ－Ｍａｓｏｎ症候群とも呼ばれる）、運動ニューロパチーを伴う白内障、低身長と骨格異常、ＭＡＳＴ症候群、アラン・ハーンドン・ダドリー症候群、トロイヤー症候群、Ｌｉｓｏｎ症候群、痙性運動失調症２型、ＳＰＯＡＮ症候群、末梢性ニューロパチー、Ｋｊｅｌｌｉｎ症候群が挙げられる。

一実施形態では、運動ニューロン疾患は、遺伝性痙性対麻痺（ＨＳＰ）、遺伝性痙性不全対麻痺、家族性痙性対麻痺、フランス植民地病またはストランペル－ロレイン病、乳児発症上行性遺伝性痙性麻痺、ＭＡＳＡ症候群（ＣＲＡＳＨ症候群およびＧａｒｅｉｓ－Ｍａｓｏｎ症候群とも呼ばれる）、運動ニューロパチーを伴う白内障、低身長と骨格異常、ＭＡＳＴ症候群、アラン・ハーンドン・ダドリー症候群、トロイヤー症候群、Ｌｉｓｏｎ症候群、痙性運動失調症（特に遺伝性痙性運動失調症、例えば痙性運動失調症２型など）、ＳＰＯＡＮ症候群、遺伝性感覚運動ニューロパチー（ＨＭＳＮ）、末梢性ニューロパチー（特に末梢性ニューロパチーを示すＨＳＰ）およびＫｊｅｌｌｉｎ症候群から選択される。

一実施形態では、運動ニューロン疾患は、ＳＰＧ遺伝子における突然変異（「痙性対麻痺」に関する）によって引き起こされる。一実施形態では、運動ニューロン疾患は、ＳＰＧ１１、ＳＰＧ４、ＳＰＧ７、ＳＰＧ１５、ＳＰＧ４８、ＳＰＧ８および／またはＳＰＧ３１遺伝子における突然変異によって引き起こされる。一実施形態では、運動ニューロン疾患は、ＳＰＧ１１および／またはＳＰＧ４および／またはＳＰＧ７遺伝子における突然変異によって引き起こされる。一実施形態では、運動ニューロン疾患は、ＳＰＧ１１遺伝子における突然変異によって引き起こされる。一実施形態では、運動ニューロン疾患は、ＳＰＧ４遺伝子における突然変異によって引き起こされる。一実施形態では、運動ニューロン疾患は、ＳＰＧ７遺伝子における突然変異によって引き起こされる。一実施形態では、運動ニューロン疾患は、ＳＰＧ２６および／またはＳＰＧ４６遺伝子における突然変異に起因していない。一実施形態では、運動ニューロン疾患は、ＳＰＧ２６遺伝子における突然変異に起因していない。一実施形態では、運動ニューロン疾患は、ＳＰＧ４６遺伝子における突然変異に起因していない。

一実施形態では、運動ニューロン疾患はＨＳＰである。一実施形態では、運動ニューロン疾患はＳＰＧ２６および／またはＳＰＧ４６ではない。一実施形態では、運動ニューロン疾患は、ＳＰＧ１１、ＳＰＧ４、ＳＰＧ７、ＳＰＧ１５、ＳＰＧ４８、ＳＰＧ８およびＳＰＧ３１から選択されるＨＳＰである。一実施形態では、運動ニューロン疾患は、ＳＰＧ１１、ＳＰＧ１５、ＳＰＧ４８、ＳＰＧ４またはＳＰＧ７である。一実施形態では、運動ニューロン疾患はＳＰＧ１１、ＳＰＧ１５またはＳＰＧ４８、好ましくはＳＰＧ１１である。一実施形態では、運動ニューロン疾患はＳＰＧ４である。一実施形態では、運動ニューロン疾患はＳＰＧ７である。

一実施形態では、本発明の方法は、運動ニューロン疾患を治癒させるためのものである。別の実施形態では、本発明の方法は、例えば運動ニューロン疾患の少なくとも１つの運動または認知症状などの運動ニューロン疾患の少なくとも１つの症状を軽減するためのものである。

一実施形態では、本発明の方法は、ＳＰＧ１１の少なくとも１つの症状を軽減するためのものである。ＳＰＧ１１の症状の例としては、限定されるものではないが、脳画像診断における脳室周囲白質の異常および／または脳梁欠損症、末梢有髄神経線維の数の減少、外側皮質脊髄路の変性、脳室拡大、黄斑変性症、斜視、潜時の増加および振幅の減少を伴う視覚誘発電位、バビンスキー反射、膝クローヌス、足クローヌス、肥満症、脳梁の形成不全／低形成、大脳皮質萎縮（ｃｅｒｅｂｒａｌ ｃｏｒｔｉｃａｌ ａｔｒｏｐｈｙ）、網膜変性（Ｋｊｅｌｌｉｎｇ症候群）、パーキンソン症候群などの錐体外路徴候、発作、軸索、運動もしくは感覚運動末梢性ニューロパチー、眼の不随意運動（眼振）、衝動性／滑動性追跡眼球運動、歩行障害、構音障害、運動失調症、衝動性／滑動性追跡眼球運動、運動性多発ニューロパチー、母指球筋萎縮、つま先歩行、痙縮（進行性の筋硬直）、対麻痺（下肢の最終的麻痺）、腕および脚における痺れ、刺痛または疼痛、筋肉の動きのために使用される神経の障害、下肢の過剰反射、膀胱制御の低下、筋肉消耗、眼の不随意運動、脊椎の異常な湾曲（脊柱側弯症）、ハイアーチの足（凹足）、嚥下困難（嚥下障害）、言語障害（構音障害）、精神機能低下、知的障害、記憶、コミュニケーションもしくは学習障害が挙げられる。

一実施形態では、本発明の方法は、ＳＰＧ１１の少なくとも１つの認知症状を軽減するためのものである。ＳＰＧ１１の認知症状の例としては、限定されるものではないが、精神機能低下、知的障害、記憶、コミュニケーションもしくは学習障害が挙げられる。

一実施形態では、本発明の方法は、ＳＰＧ１１の少なくとも１つの運動症状を軽減するためのものである。ＳＰＧ１１の運動症状の例としては、限定されるものではないが、衝動性／滑動性追跡眼球運動、運動性多発ニューロパチー、母指球筋萎縮、つま先歩行、軸索、運動もしくは感覚運動末梢性ニューロパチー、眼の不随意運動（眼振）、衝動性／滑動性追跡眼球運動、歩行障害、構音障害、運動失調症（筋肉制御の欠如）、痙縮（進行性の筋硬直）、対麻痺（下肢の最終的麻痺）、腕および脚における痺れ、刺痛または疼痛、筋肉の動きのために使用される神経の障害、下肢の過剰反射、筋肉消耗、眼の不随意運動、脊椎の異常な湾曲（脊柱側弯症）、嚥下困難（嚥下障害）、および言語障害（構音障害）が挙げられる。

一実施形態では、本発明の方法は、ＳＰＧ４の少なくとも１つの症状を軽減するためのものである。ＳＰＧ４の症状の例としては、限定されるものではないが、遺伝的表現促進、腰痛、発作、外側皮質脊髄路の変性、軽度の小脳虫部萎縮および／または脳梁菲薄化、バビンスキー反射、足首における振動を感じる能力の低下、過剰反射（反射亢進）、ハイアーチの足（凹足）、足首の痙攣、運動失調症（筋肉制御の欠如）、下肢筋脱力感、痙縮（進行性の筋硬直）、眼の不随意運動（眼振）、膀胱括約筋機能不全、対麻痺、攻撃行動、アジテーション、アパシー、認知症、鬱病、抑制消失、知的障害、記憶、コミュニケーションもしくは学習障害および日中の過剰な眠気が挙げられる。

一実施形態では、本発明の方法は、ＳＰＧ４の少なくとも１つの認知症状を軽減するためのものである。ＳＰＧ４の認知症状の例としては、限定されるものではないが、攻撃行動、アジテーション、アパシー、認知症、鬱病、抑制消失、知的障害、記憶、コミュニケーションもしくは学習障害および日中の過剰な眠気が挙げられる。

一実施形態では、本発明の方法は、ＳＰＧ４の少なくとも１つの運動症状を軽減するためのものである。ＳＰＧ４の運動症状の例としては、限定されるものではないが、足首の痙攣、運動失調症（筋肉制御の欠如）、下肢筋脱力感、痙縮（進行性の筋硬直）、眼の不随意運動（眼振）、膀胱括約筋機能不全および対麻痺が挙げられる。

一実施形態では、本発明の方法は、ＳＰＧ７の少なくとも１つの症状を軽減するためのものである。ＳＰＧ７の症状の例としては、限定されるものではないが、外側皮質脊髄路の変性、大脳皮質萎縮、小脳萎縮、バビンスキー反射、反射亢進、下肢における振動感覚障害、視神経萎縮、ハイアーチの足（凹足）、脊椎の異常な湾曲（脊柱側弯症）、構音障害、嚥下障害、歩行運動失調、下肢筋脱力感、下肢痙縮、眼振、痙性歩行、痙性対麻痺、膀胱括約筋機能不全、注意力障害、記憶障害および言語学習が挙げられる。

一実施形態では、本発明の方法は、ＳＰＧ７の少なくとも１つの認知症状を軽減するためのものである。認知的ＳＰＧ７の症状の例としては、限定されるものではないが、注意力障害、記憶障害および言語学習が挙げられる。

一実施形態では、本発明の方法は、ＳＰＧ７の少なくとも１つの運動症状を軽減するためのものである。ＳＰＧ７の運動症状の例としては、限定されるものではないが、構音障害、嚥下障害、歩行運動失調、下肢筋脱力感、下肢痙縮、眼振、痙性歩行、痙性対麻痺、および膀胱括約筋機能不全が挙げられる。

一実施形態では、対象は運動ニューロン疾患に罹患しており、好ましくは運動ニューロン疾患と診断されている。別の実施形態では、本発明の対象は運動ニューロン疾患、好ましくはＨＳＰを発症するリスクがある。

リスク因子の例としては、限定されるものではないが、遺伝因子、痙性対麻痺遺伝子Ｌ１細胞接着分子（Ｌ１ＣＡＭ）／ＮＣＡＭ（染色体Ｘｑ２８）、ＰＬＰ１／ＭＰＬＰ、ＡＴL１／ＡＴＬＡＳＴＩＮ－１、ＳＰＡＳＴ／スパスチン（ＳＰＡＳＴＩＮ）、ＣＹＰ７Ｂ１／ＯＡＨ１、ＮＩＰＡ１／ＮＩＰＡ１、ＰＧＮ／パラプレギン（ＰＡＲＡＰＬＥＧＩＮ）、ＫＩＡＡ０１９６／ストラムペリン（ＳＴＲＵＭＰＥＬＬＩＮ）、ＫＩＦ５Ａ／キネシンＨＣ５Ａ（ＫＩＮＥＳＩＮ ＨＣ５Ａ）、ＫＩＡＡ１８４０／スパタクシン（ＳＰＡＴＡＣＳＩＮ）、ＲＴＮ２／レティキュロン２（ＲＥＴＩＣＵＬＯＮ ２）、ＨＳＰＤ１／ＨＳＰ６０、ＺＦＹＶＥ２６／スパスチジン（ＳＰＡＳＴＩＺＩＮ）、ＢＳＣＬ２／セイピン（ＳＥＩＰＩＮ）、ＥＲＬＩＮ２／ＳＰＦＨ２、ＳＰＧ２０／スパルティン（ＳＰＡＲＴＩＮ）、ＡＣＰ３３／マスパルディン（ＭＡＳＰＡＲＤＩＮ）、ＳＬＣ１６Ａ２／ＭＣＴ８、Ｂ４ＧＡＬＮＴ１／Ｂ４ＧＡＬＮＴ１、ＤＤＨＤ１／ＰＡＰＬＡ１、ＫＩＦ１Ａ／キネシン３（ＫＩＮＥＳＩＮ３）、ＲＥＥＰ１／ＲＥＥＰ１、ＺＦＹＶＥ２７／プロトルーディン（ＰＲＯＴＲＵＤＩＮ）、ＦＡ２Ｈ／ＦＡ２Ｈ、ＮＴＥ／ＰＮＰＬＡ６、ＳＬＣ３３Ａ１／ＡＣｏＡ担体（ＡＣｏＡ ＣＡＲＲＩＥＲ）、Ｃ１９ｏｒｆ１２／Ｃ１９ＯＲＦ１２、ＧＪＣ２／コネキシン４７（ＣＯＮＮＥＸＩＮ ４７）、ＧＢＡ２／ＧＢＡ２、ＡＰ４Ｂ１／ＡＰ４Ｂ１、ＫＩＡＡ０４１５／ＡＰ５Ｚ１、ＴＥＣＰＲ２／ＫＩＡＡ０３２９、ＡＰ４Ｍ１／ＡＰ４Ｍ１、ＡＰ４Ｅ１／ＡＰ４Ｅ１、ＡＰ４Ｓ１／ＡＰ４Ｓ１、ＶＰＳ３７Ａ／ＶＰＳ３７Ａ、ＤＤＨＤ２／ＤＤＨＤ２、Ｃ１２ｏｒｆ６５／Ｃ１２ＯＲＦ６５、ＣＹＰ２Ｕ１／ＣＹＰ２Ｕ１、ＴＦＧ／ＴＦＧ、ＫＩＦ１Ｃ／キネシンファミリーメンバー１Ｃ（ＫＩＮＥＳＩＮ ＦＡＭＩＬＹ ＭＥＭＢＥＲ １Ｃ）、ＵＳＰ８／ユビキチン特異的プロテアーゼ８（ＵＢＩＱＵＩＴＩＮ－ＳＰＥＣＩＦＩＣ ＰＲＯＴＥＡＳＥ ８）、ＷＤＲ４８／ＷＤ繰り返しドメイン４８（ＷＤ ＲＥＰＡＥＴ ＤＯＭＡＩＮ ４８）、ＡＲＬ６ＩＰ１／ＡＤＰリボシル化因子様６相互作用タンパク質１（ＡＤＰ－ＲＩＢＯＳＹＬＡＴＩＯＮ ＦＡＣＴＯＲ－ＬＩＫＥ ６ ＩＮＴＥＲＡＣＴＩＮＧ ＰＲＯＴＥＩＮ １）、ＥＲＬＩＮ１／ＥＲ脂質ラフト関連１（ＥＲ ＬＩＰＩＤ ＲＡＦＴ ＡＳＳＯＣＩＡＴＥＤ １）、ＡＭＰＤ２／アデノシン一リン酸デアミナーゼ２（ＡＤＥＮＯＳＩＮＥ ＭＯＮＯＰＨＯＳＰＨＡＴＥ ＤＥＡＭＩＮＡＳＥ２）、ＥＮＴＰＤ１／エクトヌクレオチド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ（ＥＣＴＯＮＵＣＬＥＯＳＩＤＥ ＴＲＩＰＨＯＳＰＨＡＴＥ ＤＩＰＨＯＳＰＨＯＨＹＤＲＯＬＡＳＥ）、ＮＴ５Ｃ２／５’－ヌクレオチダーゼ、細胞ＩＩ（／５’－ＮＵＣＬＥＯＴＩＤＡＳＥ， ＣＹＴＯＳＯＬＩＣ ＩＩ）、ＡＲＳＩ／アリールスルファターゼファミリーメンバーＩ（ＡＲＹＬＳＵＬＦＡＴＡＳＥ ＦＡＭＩＬＹ，ＭＥＭＢＥＲ Ｉ）、ＰＧＡＰ１／ＧＰＩ後タンパク質結合１（ＰＯＳＴ－ＧＰＩ ＡＴＴＡＣＨＭＥＮＴ ＴＯ ＰＲＯＴＥＩＮＳ １）、ＦＬＲＴ１／フィブロネクチンロイシンリッチ膜貫通型タンパク質１（ＦＩＢＲＯＮＥＣＴＩＮ ＬＥＵＣＩＮＥ ＲＩＣＨ ＴＲＡＮＳＭＥＭＢＲＡＮＥ ＰＲＯＴＥＩＮ １）、ＲＡＢ３ＧＡＰ２／ＲＡＢ３ ＧＴＰアーゼ活性化タンパク質サブユニット２（ＲＡＢ３ ＧＴＰＡＳＥ ＡＣＴＩＶＡＴＩＮＧ ＰＲＯＴＥＩＮ ＳＵＢＵＮＩＴ ２）（非触媒性）、ＭＡＲＳ／メチオニルｔＲＮＡ合成酵素（ＭＥＴＨＩＯＮＹＬ－ＴＲＮＡ ＳＹＮＴＨＥＴＡＳＥ）、ＺＦＲ／亜鉛フィンガーＲＮＡ結合タンパク質（ＺＩＮＣ ＦＩＮＧＥＲ ＲＮＡ－ＢＩＮＤＩＮＧ ＰＲＯＴＥＩＮ）、ＲＥＥＰ２／受容体発現増強タンパク質２（ＲＥＣＥＰＴＯＲ ＥＸＰＲＥＳＳＩＯＮ－ＥＮＨＡＮＣＩＮＧ ＰＲＯＴＥＩＮ ２）、ＧＡＤ１／グルタミン酸デカルボキシラーゼ１（ＧＬＵＴＡＭＡＴＥ ＤＥＣＡＲＢＯＸＹＬＡＳＥ １）、ＣＣＴ５／細胞質シャペロニン含有Ｔ複合体ペプチド－１のεサブユニット（ε ＳＵＢＵＮＩＴ ＯＦ ＴＨＥ ＣＹＴＯＳＯＬＩＣ ＣＨＡＰＥＲＯＮＩＮ ＣＯＮＴＡＩＮＩＮＧ Ｔ－ＣＯＭＰＬＥＸ ＰＥＰＴＩＤＥ－１）、ＯＰＡ３／視神経萎縮３タンパク質（ＯＰＴＩＣ ＡＴＲＯＰＨＹ ３ ＰＲＯＴＥＩＮ）、ＢＩＣＤ２／バイコーダルＤ相同体２（ＢＩＣＡＵＤＡＬ Ｄ ＨＯＭＯＬＯＧ ２）、ＭＡＧ／ミエリン関連糖タンパク質（ＭＹＥＬＩＮ ＡＳＳＯＣＩＡＴＥＤ ＧＬＹＣＯＰＲＯＴＥＩＮ）、ＬＹＳＴ／リソソームの輸送調節因子（ＬＹＳＯＳＯＭＡＬ ＴＲＡＦＦＩＣＫＩＮＧ ＲＥＧＵＬＡＴＯＲ）、ＭＴ－ＡＴＰ６／ＡＴＰ合成酵素６（ＡＴＰ ＳＹＮＴＨＡＳＥ ６）、ＡＰ５Ｂ１／ＤＫＦＺｐ７６１Ｅ１９８、ＡＰ５Ｍ１／Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＡＰ５Ｓ１／Ｃ２０ｏｒｆ２９、染色体１５ｑ、１０ｑ２３．３－２４．２、１４ｑ２４．１、８、７ｐ２２．１、１６ｑ、２ｑ３３．２、３ｑ２７－ｑ２８、Ｘｑ１１．２、９ｑ、１ｑ２４－ｑ３２、１３ｑ１４、６ｑ２３－ｑ２４．１、１０ｑ２２．１－ｑ２４．１、１ｐ３１．１－ｐ２１．１、１４ｑ１２－ｑ２１、Ｘｑ２４－ｑ２５、１２ｑ２３－ｑ２４、８ｐ２１．１－ｑ１３．３、４ｐ１６－ｐ１５、１１ｐ１４．１－ｐ１１．２、１０ｑ２４．３－ｑ２５．１、１１ｑ１３、Ｘｑ２２に対する突然変異が挙げられる。

一実施形態では、リスク因子は、痙性対麻痺遺伝子Ｌ１細胞接着分子（Ｌ１ＣＡＭ）／ＮＣＡＭ（染色体Ｘｑ２８）、ＰＬＰ１／ＭＰＬＰ、ＡＴL１／ＡＴＬＡＳＴＩＮ－１、ＳＰＡＳＴ／スパスチン、ＣＹＰ７Ｂ１／ＯＡＨ１、ＮＩＰＡ１／ＮＩＰＡ１、ＰＧＮ／パラプレギン、ＫＩＡＡ０１９６／ストラムペリン、ＫＩＦ５Ａ／キネシンＨＣ５Ａ、ＫＩＡＡ１８４０／スパタクシン、ＲＴＮ２／レティキュロン２、ＨＳＰＤ１／ＨＳＰ６０、ＺＦＹＶＥ２６／スパスチジン、ＢＳＣＬ２／セイピン、ＥＲＬＩＮ２／ＳＰＦＨ２、ＳＰＧ２０／スパルティン、ＡＣＰ３３／マスパルディン、ＳＬＣ１６Ａ２／ＭＣＴ８、ＤＤＨＤ１／ＰＡＰＬＡ１、ＫＩＦ１Ａ／キネシン３、ＲＥＥＰ１／ＲＥＥＰ１、ＺＦＹＶＥ２７／プロトルーディン、ＦＡ２Ｈ／ＦＡ２Ｈ、ＮＴＥ／ＰＮＰＬＡ６、ＳＬＣ３３Ａ１／ＡＣｏＡ担体、Ｃ１９ｏｒｆ１２／Ｃ１９ＯＲＦ１２、ＧＪＣ２／コネキシン４７、ＡＰ４Ｂ１／ＡＰ４Ｂ１、ＫＩＡＡ０４１５／ＡＰ５Ｚ１、ＴＥＣＰＲ２／ＫＩＡＡ０３２９、ＡＰ４Ｍ１／ＡＰ４Ｍ１、ＡＰ４Ｅ１／ＡＰ４Ｅ１、ＡＰ４Ｓ１／ＡＰ４Ｓ１、ＶＰＳ３７Ａ／ＶＰＳ３７Ａ、ＤＤＨＤ２／ＤＤＨＤ２、Ｃ１２ｏｒｆ６５／Ｃ１２ＯＲＦ６５、ＣＹＰ２Ｕ１／ＣＹＰ２Ｕ１、ＴＦＧ／ＴＦＧ、ＫＩＦ１Ｃ／キネシンファミリーメンバー１Ｃ、ＵＳＰ８／ユビキチン特異的プロテアーゼ８、ＷＤＲ４８／ＷＤ繰り返しドメイン４８、ＡＲＬ６ＩＰ１／ＡＤＰリボシル化因子様６相互作用タンパク質１、ＥＲＬＩＮ１／ＥＲ脂質ラフト関連１、ＡＭＰＤ２／アデノシン一リン酸デアミナーゼ２、ＥＮＴＰＤ１／エクトヌクレオチド三リン酸ジホスホヒドロラーゼ、ＮＴ５Ｃ２／５’－ヌクレオチダーゼ、細胞ＩＩ、ＡＲＳＩ／アリールスルファターゼファミリーメンバーＩ、ＰＧＡＰ１／ＧＰＩ後タンパク質結合１、ＦＬＲＴ１／フィブロネクチンロイシンリッチ膜貫通型タンパク質１、ＲＡＢ３ＧＡＰ２／ＲＡＢ３ ＧＴＰアーゼ活性化タンパク質サブユニット２（非触媒性）、ＭＡＲＳ／メチオニルｔＲＮＡ合成酵素、ＺＦＲ／亜鉛フィンガーＲＮＡ結合タンパク質、ＲＥＥＰ２／受容体発現増強タンパク質２、ＧＡＤ１／グルタミン酸デカルボキシラーゼ１、ＣＣＴ５／細胞質シャペロニン含有Ｔ複合体ペプチド－１のεサブユニット、ＯＰＡ３／視神経萎縮３タンパク質、ＢＩＣＤ２／バイコーダルＤ相同体２、ＭＡＧ／ミエリン関連糖タンパク質、ＬＹＳＴ／リソソームの輸送調節因子、ＭＴ－ＡＴＰ６／ＡＴＰ合成酵素６、ＡＰ５Ｂ１／ＤＫＦＺｐ７６１Ｅ１９８、ＡＰ５Ｍ１／Ｃ１４ｏｒｆ１０８、ＡＰ５Ｓ１／Ｃ２０ｏｒｆ２９、染色体１５ｑ、１０ｑ２３．３－２４．２、１４ｑ２４．１、８、７ｐ２２．１、１６ｑ、２ｑ３３．２、３ｑ２７－ｑ２８、Ｘｑ１１．２、９ｑ、１ｑ２４－ｑ３２、１３ｑ１４、６ｑ２３－ｑ２４．１、１０ｑ２２．１－ｑ２４．１、１ｐ３１．１－ｐ２１．１、１４ｑ１２－ｑ２１、Ｘｑ２４－ｑ２５、１２ｑ２３－ｑ２４、８ｐ２１．１－ｑ１３．３、４ｐ１６－ｐ１５、１１ｐ１４．１－ｐ１１．２、１０ｑ２４．３－ｑ２５．１、１１ｑ１３、Ｘｑ２２に対する突然変異から選択される。

一実施形態では、運動ニューロン疾患はＳＰＧ１１である。ＳＰＧ１１病的対立遺伝子バリアントの例としては、限定されるものではないが、ｃ．１１８Ｃ＞Ｔ、ｃ．２６７Ｇ＞Ａ、ｃ．２６８Ｇ＞Ｔ、ｃ．３４９Ｇ＞Ｔ、ｃ．３５９ｄｅｌＴ、ｃ．３９８ｄｅｌＧ、ｃ．４０８＿４２８ｄｅｌ２１、ｃ．４４２＋１Ｇ＞Ｃ、ｃ．５２９＿５３３ｄｅｌＡＴＡＴＴ、ｃ．６４２ｄｅｌＴ、ｃ．６５４＿６５５ｄｅｌｉｎｓＧ、ｃ．７０４＿７０５ｄｅｌＡＴ、ｃ．７３３＿７３４ｄｅｌＡＴ、ｃ．８６９＋１Ｇ＞Ａ、ｃ．１２０３ｄｅｌＡ、ｃ．１２３５Ｃ＞Ｇ、ｃ．１２８２Ａ＞Ｔ、ｃ．１４５７－２Ａ＞Ｇ、ｃ．１４７１＿１４７２ｄｅｌＣＴ、ｃ．１５４９＿１５５０ｄｅｌＣＴ、ｃ．１５５０＿１５５１ｄｅｌＴＴ、ｃ．１６６８ｄｅｌＴ、ｃ．１６７９Ｃ＞Ｇ、ｃ．１６９７＿１７１２ｄｅｌ１６ｉｎｓＴＡＣＴＣＣＣＡＴ、ｃ．１７３５＋３＿＋６ｄｅｌＡＡＧＴ、ｃ．１８３７＿１８３８８ｉｎｓＡ、ｃ．１８４５＿１８４６ｄｅｌＧＴ、ｃ．１９５１Ｃ＞Ｔ、ｃ．２１４６Ｃ＞Ｔ、ｃ．２１６３＿２１６４ｉｎｓＴ、ｃ．２１９８Ｔ＞Ｇ、ｃ．２３１６＋１Ｇ＞Ａ、ｃ．２３５５＿２３５６ｄｅｌ２、ｃ．２４４４Ｇ＞Ｔ、ｃ．２４４４＋１Ｇ＞Ｃ、ｃ．２４７２ｉｎｓＴ、ｃ．２６０８Ａ＞Ｇ、ｃ．２６９７Ｇ＞Ａ、ｃ．２７１６ｄｅｌＣ、ｃ．２８３３Ａ＞Ｇ、ｃ．２８３４＋１Ｇ＞Ｔ、ｃ．２８４２＿２８４３ｉｎｓＧ、ｃ．２８４９＿２８５０ｉｎｓＴ、ｃ．３０７５＿３０７６ｉｎｓＡ、ｃ．３１４５＿３１４６ｉｎｓＣＡ、ｃ．３２９１＋１Ｇ＞Ｔ、ｃ．３６０２＿３６０３ｄｅｌＡＴ、ｃ．３６６４＿３６６５ｉｎｓＴ、ｃ．３７１９＿３７２０ｄｅｌＴＡ、ｃ．３７４１＿３７４２ｉｎｓＡ、ｃ．４０４６Ｔ＞Ａ、ｃ．４３０７＿４３０８ｄｅｌＡＡ、ｃ．４４６１＿４４６２ｄｅｌＧＴ、ｃ．４６６８Ｔ＞Ａ、ｃ．４８４６Ｃ＞Ｔ、ｃ．５２５５ｄｅｌＴ、ｃ．５３９９＿５４０７ｄｅｌＡＧＡＴｉｎｓＴＧＧＡＧＧＡＧ、ｃ．５４１０＿５４１１ｄｅｌＴＧ、ｃ．５４７０Ｃ＞Ｔ、ｃ．５５３２＿５５３３ｄｅｌＣＡ、ｃ．５６２３Ｃ＞Ｔ、ｃ．５７０３ｄｅｌＴ、ｃ．５７６９ｄｅｌＴ、ｃ．５７９８ｄｅｌＣ、ｃ．５８６７－３２３７＿６４７８－４５１ｄｅｌ８３２３、ｃ．５８７０Ｃ＞Ｇ、ｃ．５８９８＋５４９３＿６５０９－４９１ｄｅｌ、ｃ．５９７０Ｃ＞Ｇ、ｃ．５９７４Ｃ＞Ｔ、ｃ．５９７７Ｃ＞Ｔ、ｃ．５９８６＿５９８７ｉｎｓＴ、ｃ．５９８５ｄｅｌＣＴＧＴ、ｃ．５９８７＿５９９０ｄｕｐＣＴＣＴ、ｃ．５９８９＿５９９２ｄｅｌＣＴＧＴ、ｃ．５９９２ｉｎｓＴ、ｃ．６０９１Ｃ＞Ｔ、ｃ．６１００Ｃ＞Ｔ、ｃ．６１５７Ｇ＞Ａ、ｃ．６２０６－１Ｇ＞Ｃ、ｃ．６４５１ｄｅｌＧ、ｃ．６４７７＋４Ａ＞Ｇ、ｃ．６７３７＿６７４０ｄｅｌＴＴＧＡ、ｃ．６７３９＿６７４２ｄｅｌＧＡＧＴ、ｃ．６７５４＋４ｉｎｓＴＧ、ｇ．９６６７７＿９９３８６ｄｅｌ２７１０、ｒ．６７５５＿７１５１ｄｅｌ３９７、ｃ．６７９０＿６７９１ｉｎｓＣ、ｃ．６８３２＿６８３３ｄｅｌＡＧ、ｃ．６８５６Ｃ＞Ｔ、ｃ．６８９８＿６８９９ｄｅｌＣＴ、ｃ．７０００－３＿－２ｉｎｓＧＧＡ、ｃ．７０２３Ｃ＞Ａ、ｃ．７０２９＿７０３０ｉｎｓＴ、ｃ．７０８８＿７０８９ｉｎｓＡＴＴＡ、ｃ．７１０１＿７１０２ｉｎｓＴ、ｃ．７１５１＋４＿７１５１＋７ｄｅｌＡＧＴＡ、ｃ．７１５２－１Ｇ＞Ｃ、ｃ．７１５６＿７１５７ｉｎｓＡＡＡＣが挙げられる。

一実施形態では、運動ニューロン疾患はＳＰＧ４である。ＳＰＧ４病的対立遺伝子バリアントの例としては、限定されるものではないが、ｃ．３３４Ｇ＞Ａ、ｃ．１１５７Ａ＞Ｇ、１３４０－１３４４ｄｅｌ、１４４７Ａ＞Ｇ、１６１７－１６１８＋２ｄｅｌ、１８５３＋１Ｇ＞Ｔ、１２１０Ｃ＞Ｇ、１２３３Ｇ＞Ａ、１２６７Ｔ＞Ｇ、１２８３Ｔ＞Ｇ、１２８８Ａ＞Ｇ、１４０１Ｃ＞Ｇ、１４６８Ｇ＞Ａ、１５０４Ｇ＞Ｔ、１６２０Ｃ＞Ｔ、１７８８Ｇ＞Ａ、１７９２Ｃ＞Ｔ、７０２Ｃ＞Ｔ、８７３Ａ＞Ｔ、９０７Ｃ＞Ａ、９３２Ｃ＞Ｇ、１４１６Ｃ＞Ｔ、１４１６Ｃ＞Ｔ、１８０９Ｃ＞Ｔ、５７８－５７９ｉｎｓＡ、８５２ｄｅｌ１１、８８２－８８３ｉｎｓＡ、９０６ｄｅｌＴ、１２９９ｄｅｌＧ、１３４０ｄｅｌ５、１３４０ｄｅｌ５、１３４０ｄｅｌ５、１５２０ｄｅｌＴ、１５７４ｄｅｌＧＧ、１６３４ｄｅｌ２２、１６８４－１６８５ｉｎｓＴＴ、１６８５ｄｅｌ４、８０８－２ａ＞ｇ、１１２９＋２ｔ＞ｇ、１２２３＋１ｇ＞ｔ、１２９９＋１ｇ＞ａ、１５３８＋５ｇ＞ａ、１５３８＋３ｄｅｌ４、１６６１＋１ｇ＞ｔ、１６６２－２ａ＞ｔ、１８１２＋１ｇ＞ａ、１８１３－２ａ＞ｇ、１８１３－２ａ＞ｇ、１８１３－２ａ＞ｇ、１８５３＋１ｇ＞ａが挙げられる。

一実施形態では、運動ニューロン疾患はＳＰＧ７である。ＳＰＧ７病的対立遺伝子バリアントの例としては、限定されるものではないが、１Ａ＞Ｔ、２８Ｇ＞Ａ、２３３Ｔ＞Ａ、２４４－２４６ｄｅｌＡＣＡ、６９８Ｔ＞Ｃ、７８４ｄｅｌ２、８５０＿－８５１ｄｅｌＴＴｉｎｓＣ、１０４５Ｇ＞Ａ、１０４７ｉｎｓＣ、１０５７＿－１０８５ｄｅｌ２９、１４４７－１７７８ｄｅｌ３３１、１４５０－１４５８ｄｅｌ９、１５１９Ｃ＞Ｔ、１５５２１１Ｇ＞Ｔ、１６１６ｄｅｌＣ、１６３６Ｇ＞Ａ、１７４９Ｇ＞Ｃ、１７１５Ｃ＞Ｔ、１７２９Ｇ＞Ａ、１７４２－１７４４ｄｅｌ３、１９０４Ｃ＞Ｔ、１９４８Ｇ＞Ｃ、２０２６Ｔ＞Ｃ、２０７５Ｇ＞Ｃ、２１９１Ｇ＞Ａ、２２１６ｄｕｐＡ、２２２８ＩｎｓＡが挙げられる。

一実施形態では、治療される対象は、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０歳を超えている。

一実施形態では、本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬は、当業者によって決定され且つ各対象に個人的に適合された用量で投与される。

本発明の一実施形態では、本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬は治療有効量で投与される。

当然のことながら、本発明の化合物、本発明の組成物、医薬組成物および医薬の総１日使用量は適切な医学的判断の範囲内で担当医によって決められる。あらゆる特定の患者に特異的な治療的有効用量レベルは、治療中の疾患およびその疾患の重症度、用いられる具体的な化合物の活性、用いられる具体的な組成物、患者の年齢、体重、健康状態、性別および食事、用いられる具体的な化合物の投与時間、投与経路および排泄率、治療持続期間、用いられる具体的な組成物と組み合わせられるか同時に使用される薬物ならびに医学分野で周知である同様の因子を含む様々な因子によって決まる。例えば、所望の治療効果を達成するのに必要な用量よりも少ないレベルで本化合物の投与を開始し、所望の効果が達成されるまで投与量を徐々に増加させることは、当業者が備えている技量の十分に範囲内である。但し、本製品の１日投与量は、成人１日当たり約１～約１００００ｍｇ、成人１日当たり好ましくは２～約２０００、より好ましくは約５～約５００ｍｇの広範囲にわたって変動してもよい。好ましくは、本組成物は、治療される患者への症状に応じた投与量調整のために、１、１０、２０、３０、４０、５０、６０、７０、８０、９０、１００、２５０、５００、１０００および２，０００ｍｇの有効成分を含有する。薬剤は典型的に、約１～約１００００ｍｇの有効成分、好ましくは約２～約２０００、より好ましくは約５～約５００ｍｇの有効成分を含有してもよい。有効量の薬物は、１日当たり体重の約０．０１ｍｇ／ｋｇ～約１００ｍｇ／ｋｇ、好ましくは１日当たり体重の約０．０２ｍｇ／ｋｇ～２０ｍｇ／ｋｇ、より好ましくは１日当たり体重の約０．０５ｍｇ／ｋｇ～５ｍｇ／ｋｇの投与量レベルで通常提供されてもよい。

一実施形態では、本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬は、全身投与または局所投与される。

一実施形態では、本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬は、経口投与、注射による投与、局所投与、経鼻投与、吸入による投与、口腔内投与、直腸内投与、気管内投与、内視鏡による投与、経粘膜投与、経皮投与または脊髄周（ｐｅｒｉｓｐｉｎａｌ）投与で投与される。

一実施形態では、本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬は、注射によって投与され、好ましくは全身注射される。全身注射に適した製剤の例としては、限定されるものではないが、液体溶液または懸濁液、溶液または懸濁液に適した固体形態、注射前の液体が挙げられる。全身注射の例としては、限定されるものではないが、静脈内、皮下、筋肉内、皮内および腹膜内注射または灌流が挙げられる。別の実施形態では、注射される場合、本発明の組成物、医薬組成物または医薬は無菌である。無菌医薬組成物を得るための方法としては、限定されるものではないが、ＧＭＰ合成（ＧＭＰは「優良医薬品製造基準」を表す）が挙げられる。

一実施形態では、本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬は経口投与される。経口投与に適した製剤の例としては、限定されるものではないが、固体形態、液体形態およびゲルが挙げられる。経口投与に適した固体形態の例としては、限定されるものではないが、丸剤、錠剤、カプセル、軟ゼラチンカプセル、硬ゼラチンカプセル、カプレット、圧縮錠剤、カシェ剤、ウェーハ、糖被覆丸剤、糖被覆錠剤、またはＯＤ錠／崩壊錠、粉末、溶液または懸濁液に適した固体形態、経口投与前の液体および発泡錠が挙げられる。経口投与に適した液体形態の例としては、限定されるものではないが、溶液、懸濁液、飲用に適した溶液、エリキシル剤、密閉アンプル、頓服水剤、飲薬、シロップおよび水薬が挙げられる。

別の実施形態では、本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬は局所投与される。局所投与に適した製剤の例としては、限定されるものではないが、スティック、ワックス、クリーム、ローション、軟膏、香膏、ゲル、マスク、洗い流さない洗浄剤（ｌｅａｖｅ－ｏｎ ｗａｓｈ）などが挙げられる。

一実施形態では、本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬は持続放出式で投与される。別の実施形態では、本発明の組成物、医薬組成物または医薬は、薬剤の放出を制御する送達システムを含む。

一実施形態では、本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬は、局所拡散、脳脊髄液（ＣＳＦ）内への改良された輸送またはＣＮＳ内への直接輸送のいずれかによる改良された送達で脊髄周または鼻腔内投与される。

一実施形態では、治療有効量の本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬は、少なくとも１日１回、１日２回、少なくとも１日３回または少なくとも１日４回投与される。

別の実施形態では、治療有効量の本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬は、２日、３日、４日、５日、６日に１回投与される。

別の実施形態では、治療有効量の本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬は、１週間に２回、１週間に１回、２週間に１回、１ヶ月に１回投与される。

別の実施形態では、治療有効量の本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬は、少なくとも２、３、４、５、６ヶ月の期間または対象の人生の残りの期間にわたって１ヶ月に１回投与される。

別の実施形態では、治療有効量の本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬は、約１μｇ～１００ｇ、１ｍｇ～１ｇ、１０ｍｇ～５００ｍｇの範囲である。

別の実施形態では、治療有効量の本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬は、約１０～１００ｍｇの範囲、好ましくは６０ｍｇである。

別の実施形態では、治療有効量の本明細書の上に記載されている少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤、本発明の医薬組成物または医薬は、体重の約０．１μｇ／ｋｇ～１ｇ／ｋｇ、体重の０．１ｍｇ／ｋｇ～５００ｍｇ／ｋｇ、体重の１０ｍｇ／ｋｇ～１００ｍｇ／ｋｇの範囲である。

図１は、ｓｐｇ１１ノックアウトがニューロンの喪失前にマウスにおいて初期の運動障害を引き起こすことを示すグラフおよび画像のセットである。図１Ａ：Ｓｐｇ１１遺伝子のゲノム構造（上）、標的化ベクター（中央）およびネオマイシン耐性カセットの除去およびＣｒｅリコンビナーゼの作用による標的遺伝子座（下）。導入された突然変異は、ヒトにおけるｃ．６０９１Ｃ＞Ｔ（ｐ．Ａｒｇ２０３１^＊）に対応するｃ．６０５２Ｃ＞Ｔ（ｐ．Ａｒｇ２０１８^＊）およびヒトにおけるｃ．６１００Ｃ＞Ｔ（ｐ．Ａｒｇ２０３４^＊）に対応するｃ．６０６１Ｃ＞Ｔ（ｐ．Ｇｌｎ２０２１^＊）であった。図１Ｂ：Ｓｐｇ１１^－／－試料におけるスパタクシンの不存在およびＳｐｇ１５によってコードされる非常により低いレベルのスパスチジンを示す脳タンパク質抽出物のウェスタンブロット。３回の独立した実験からの代表的な画像。^＊：非特異的バンド。図１Ｃおよび図１Ｄ：１６ヶ月齢のＳｐｇ１１^＋／＋（図１Ｃ）およびＳｐｇ１１^－／－（図１Ｄ）マウス。ノックアウトマウスは異常な姿勢および脊柱の後弯を有していた。図１Ｅおよび図１Ｆ：真っ直ぐな廊下を自由に歩いているＳｐｇ１１^＋／＋（図１Ｅ）およびＳｐｇ１１^－／－（図１Ｆ）マウスの単一のビデオフレーム。足尖離地位置における足底角（ＦＢＡ：Ｆｏｏｔ／ｂａｓｅ ａｎｇｌｅ）が白色の線で示されている。図１Ｇ：自由な歩行中に記録されたＦＢＡ値。４ヶ月齢以降から、ＦＢＡはＳｐｇ１１^－／－マウスにおいて減少した（ｎ≧１２の動物／遺伝子型／年齢、クラスカル・ワリス検定、^＊ｐ≦０．０５および^＊＊＊：ｐ≦０．００１）。図１Ｈおよび図１Ｉ：歩行角度のスケッチ（図１Ｈ）およびトレッドミル上での強制歩行中に記録された値（図１Ｉ）。４ヶ月齢以降から、歩行角度はＳｐｇ１１^－／－マウスにおいて減少した（ｎ≧１２の動物／遺伝子型／年齢、クラスカル・ワリス検定、^＊：ｐ≦０．０５および^＊＊＊：ｐ≦０．００１）。図１Ｊ：６週齢からＳｐｇ１１^－／－マウスはヘテロ接合体および対照マウスよりも有意に短い期間で加速されたロータロッド上に留まることができた（ｎ≧１２の動物／遺伝子型／年齢、クラスカル・ワリス検定、^＊＊：ｐ≦０．０１および^＊＊＊：ｐ≦０．００１）。図１Ｋおよび図１Ｌ：１６ヶ月齢のＳｐｇ１１^＋／＋（図１Ｋ）およびＳｐｇ１１^－／－（図１Ｌ）マウスの一次運動野におけるＮｅｕＮおよびＧＦＡＰ免疫染色。スケールバー：２００μＭ。図１Ｍおよび図１Ｎ：一次運動野層Ｉ＋ＩＩ＋ＩＩＩ（図１Ｍ）およびＶ＋ＶＩ（図１Ｎ）中の総ＮｅｕＮ陽性細胞の定量化。免疫染色により、８ヶ月齢以降からノックアウトマウスにおける運動野の層Ｉ～ＶＩのニューロンの数の有意な減少が明らかになった（ｎ≧１０の切片／動物およびｎ≧５の動物／遺伝子型／年齢、クラスカル・ワリス検定、^＊＊：ｐ≦０．０１および^＊＊＊：ｐ≦０．００１）。図１Ｏおよび図１Ｐ：一次運動野層Ｉ＋ＩＩ＋ＩＩＩ（図１Ｏ）およびＶ＋ＶＩ（図１Ｐ）中の総ＧＦＡＰ陽性細胞の定量化。ニューロンの喪失は顕著なアストログリオーシスを伴っていた（ｎ≧１０の切片／動物およびｎ≧５の動物／遺伝子型／年齢、クラスカル・ワリス検定、^＊＊＊：ｐ≦０．００１）。 同上。 同上。 同上。 同上。 図２は、Ｓｐｇ１１^－／－マウスの皮質運動ニューロンにおいてＬａｍｐ１と共局在化している自家蛍光粒子の蓄積を示す画像のセットである。図２Ａ：６週齢、４ヶ月齢、８ヶ月齢および１６ヶ月齢のＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－皮質運動ニューロンにおける自家蛍光物質（励起４８８ｎｍ、放出５１５～５３０ｎｍ）。ノックアウトマウスは６週齢以降からそれらの皮質運動ニューロンに自家蛍光蓄積物を有していた。１６ヶ月齢において、これらの自家蛍光物質は対照マウスにおいても存在していたが、ノックアウトマウスよりも少ない量であった。スケールバー：１０μＭ。図２Ｂ：４０５ｎｍ、４７３ｎｍ、５４３ｎｍおよび６３５ｎｍでの励起時の８ヶ月齢のＳｐｇ１１^－／－皮質運動ニューロンにおける矢印の頭によって示されている自家蛍光物質。スケールバー：２０μＭ。図２Ｃ：６週齢および８ヶ月齢の動物からのＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－皮質運動ニューロンにおけるＬａｍｐ－１（リソソームマーカー）免疫染色および自家蛍光物質。共焦点顕微鏡画像はＳｐｇ１１^－／－ニューロンにおけるＬａｍｐ－１陽性染色によって取り囲まれた自家蛍光粒子を示す。スケールバー：１０μＭ。 同上。 図３は、Ｓｐｇ１１^－／－マウスの皮質運動ニューロンにおけるリソソーム機能の初期の変化およびｐ６２粒子の遅い蓄積を示すグラフおよび画像のセットである。図３Ａ：６週齢、８ヶ月齢および１６ヶ月齢のＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－皮質運動ニューロンにおけるｐ６２免疫染色および自家蛍光。共焦点顕微鏡画像は１６ヶ月齢のＳｐｇ１１^－／－マウスの皮質運動ニューロンにおいてのみｐ６２陽性染色と共局在化している自家蛍光粒子を示す。スケールバー：１０μＭ。図３Ｂ：異なる年齢の動物から採取されたＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－マウス皮質からの抽出物におけるＬＣ３－Ｉ、ＬＣ３－ＩＩのレベルおよびチューブリンレベルを示すウェスタンブロット。チューブリンに対して正規化されたＬＣ３－ＩＩバンド強度の定量化。グラフは平均±ＳＥＭ値を示す。ｎ＝３の独立した試料。図３Ｃ：異なる年齢の動物から採取されたＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－マウス皮質からの抽出物におけるカテプシンＤの前駆体（ＣｓｔＤｐ）、成熟型プロテアーゼ（ＣｓｔＤｍ）およびチューブリンのレベルを示すウェスタンブロット。チューブリンに対して正規化された成熟カテプシンＤバンド強度の定量化。グラフは平均±ＳＥＭ値を示す。２回ロードされたｎ＝３の独立した試料。クラスカル・ワリス検定、^＊：ｐ≦０．０５。 同上。 図４は、スパタクシンの喪失がリソソームへの未消化物質の蓄積を促進することを示すグラフおよび画像のセットである。図４Ａ～図４Ｆ：２ヶ月齢のＳｐｇ１１^＋／＋（図４Ａおよび図４Ｂ）またはＳｐｇ１１^－／－（図４Ｃ～図４Ｆ）マウスからの皮質ニューロンの電子顕微鏡写真。図４Ｂ：図４Ａにおいて印が付けられている領域のより高い拡大図。図４Ｄおよび図４Ｅ：図４Ｃにおいて印が付けられている領域からのリポフスチン粒子のより高い拡大図。図４Ｄおよび図４Ｅにおける挿入図は、矢印の頭によって示されているリポフスチン様構造体中に存在する膜状および粒状構造体を示す。図４Ｆ：リポフスチン様構造体の周りに未消化物質を含むリソソームのクラスター化を示す電子顕微鏡写真。アスタリスクは脂肪滴に一致する低い密度を有する構造体を示す。図４Ｆの挿入図はリポフスチン様粒子を取り囲む膜を示す。スケールバー：５μＭ（図４Ａおよび図４Ｃ）、５００ｎｍ（図４Ｂ、図４Ｄ～図４Ｆ）。図４Ｇ：リポフスチン様構造体（矢印の頭）中のジアミノベンジジン（ＤＡＢ）沈殿物の存在を示す、ＤＡＢにより明らかにされるカテプシンＤの免疫電子顕微鏡観察。リソソーム（矢印）におけるＤＡＢ沈殿物の存在に留意されたい。スケールバー：５００ｎｍ。図４Ｈ：リポフスチン（矢印の頭）の蓄積を示す、ＳＰＧ１１患者（疾患の持続期間：１０年、死亡時の年齢：３２歳）の脳の皮質ニューロンの電子顕微鏡画像。この患者はＳＰＧ１１の典型的な臨床的特徴を有し、かつトランスでエクソン１３にヘテロ接合体突然変異ｃ．２３５８＿２３５９ｄｅｌｉｎｓＴＴ（ｐ．Ｇｌｕ７８６＿Ｇｌｙ７８７ｄｅｌｉｎｓＡｓｐｆｓ^＊）とエクソン２８にｃ．４８６８ｄｅｌＴ（ｐ．Ｌｅｕ１６２３Ｔｙｒｆｓ^＊１７）とを有する。スケールバー：２μＭ。図４Ｉ～図４Ｌ：２ヶ月齢のＳｐｇ１１^＋／＋またはＳｐｇ１１^－／－マウスからの皮質ニューロンの電子顕微鏡写真に基づく各種リソソームパラメーターの定量化。グラフは平均±ＳＥＭを示す。各遺伝子型について２つの独立した動物において解析されたｎ＞４０の細胞。ｔ検定、^＊：ｐ＝０．０４１および^＊＊＊：ｐ≦０．０００１。 同上。 図５は、スパタクシンの喪失が皮質ニューロンにおいてＧＭ２およびＧＭ３の蓄積を促進することを示すグラフおよび画像のセットである。図５Ａ：６週齢および８ヶ月齢の動物からのＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－皮質運動ニューロンにおけるＧＭ２免疫染色および自家蛍光物質。６週齢および８ヶ月齢の動物におけるＧＭ２陽性染色との自家蛍光粒子の共局在化を示す共焦点顕微鏡画像。スケールバー：１０μＭ。図５Ｂ：ニューロンごとのＧＭ２免疫染色強度の平均（左のパネル）および分散（右のパネル）の定量化。グラフは平均±ＳＥＭ値を示す。５つの独立した皮質切片で定量化されたｎ＞１０のニューロン。クラスカル・ワリス検定、^＊＊＊：ｐ≦０．０００１。図５Ｃ：６週齢および８ヶ月齢の動物からのＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－皮質運動ニューロンにおけるＧＭ３免疫染色および自家蛍光物質。８ヶ月齢のＳｐｇ１１^－／－ニューロンにおいてのみＧＭ３染色との自家蛍光粒子の共局在化を示す共焦点顕微鏡画像。スケールバー：１０μＭ。図５Ｄ：ニューロンごとのＧＭ３免疫染色強度の平均（左のパネル）および分散（右のパネル）の定量化。図５Ｅ～図５Ｆ：ニューロンごとのＧＤ２（図５Ｅ）およびＧＤ３（図５Ｆ）免疫染色強度の平均（左のパネル）および分散（右のパネル）の定量化。グラフは平均±ＳＥＭ値を示す。５つの独立した皮質切片において定量化されたｎ＞１０のニューロン。クラスカル・ワリス検定、^＊＊：ｐ≦０．０１、^＊＊＊：ｐ≦０．０００１。 同上。 同上。 図６は、皮質ニューロンへのＧＭ２およびＧＭ３の蓄積が神経細胞死に寄与することを示すグラフである。図６Ａ：Ｓｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－皮質ニューロンの初代培養物におけるＧＭ２およびニューロンマーカーβＩＩＩ－チューブリンの免疫染色。図６Ｂ：Ｓｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－皮質ニューロンの初代培養物におけるＧＭ２（左のパネル）およびＧＭ３（右のパネル）免疫染色の蛍光強度の定量化。グラフは平均±ＳＥＭ値を示す。各実験において定量化された少なくとも２００個のニューロンを用いたｎ＞１１の独立した測定。ｔ検定、^＊：ｐ＝０．０３（ＧＭ２）およびｐ＝０．００９９（ＧＭ３）。図６Ｃ：ＧＭ３シンターゼを下方制御するためにＧＦＰおよびｍｉＲＮＡを発現するベクターでトランスフェクトされた細胞におけるＧＭ２またはＧＭ３免疫染色（矢印の頭）。図６Ｄ：ＧＭ３シンターゼに対する対照ｍｉＲＮＡまたは２種類の異なるｍｉＲＮＡを発現するベクターでトランスフェクトされたニューロンにおけるＧＭ２（左のパネル）またはＧＭ３（右のパネル）の蛍光強度の定量化。２つの独立した実験におけるｎ＞５０のニューロン。一元配置分散分析、^＊：ｐ＝０．０４１、^＊＊ｐ＝０．００２８および^＊＊＊：ｐ≦０．００１。図６Ｅ：ＧＭ３シンターゼに対する対照ｍｉＲＮＡまたは２種類の異なるｍｉＲＮＡを発現するベクターでトランスフェクトされたＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－皮質ニューロンの初代培養物においてニューロンをグルタミン酸（２００μＭ）と共にインキュベートしてから３０時間後の神経細胞死の定量化。各実験において定量化された少なくとも１００個のニューロンを用いたｎ＞５回の実験。クラスカル・ワリスの検定、^＊＊：ｐ＝０．００５８、^＊：ｐ＝０．０１２３。図６Ｆ：ミグルスタットで処置されたＳｐｇ１１^＋／＋またはＳｐｇ１１^－／－皮質ニューロンの初代培養物においてニューロンをグルタミン酸（２００μＭ）と共にインキュベートしてから３０時間後の神経細胞死の定量化。各実験において定量化された少なくとも１００個のニューロンを用いたｎ＞８回の実験。クラスカル・ワリスの検定、^＊：ｐ＝０．０１８８、^＊＊＊：ｐ＝０．０００２。 同上。 同上。 図７は、ＳＰＧ１１患者のｉＰＳ細胞由来のニューロンのリソソームへのＧＭ２およびＧＭ３の蓄積を示すグラフである。図７Ａ：多能性マーカーによるｉＰＳ細胞の免疫染色。図７Ｂ：ニューロンマーカーβ－ＩＩＩチューブリンおよびグルタミン酸作動性マーカーｖ－Ｇｌｕｔ１に対する抗体によるｉＰＳ細胞株由来のニューロン培養物の免疫染色。スケールバー：１０μＭ。図７Ｃ：ｉＰＳ細胞由来のニューロンのＧＭ２およびＬａｍｐ１免疫染色。スケールバー：５μＭ。図７Ｄ：ｉＰＳ細胞由来のニューロンのリソソームにおけるＧＭ２およびＧＭ３の相対量の定量化。３回の独立した実験においてｎ＞３０のニューロン。ｔ検定、^＊＊：ｐ＝０．００４２（ＧＭ２）、^＊＊＊ｐ＝０．０００２（ＧＭ３）。図７Ｅ：Ｌａｍｐ１染色と共局所化しているＧＭ２（左のパネル）またはＧＭ３（右のパネル）免疫染色の割合の定量化。３回の独立した実験においてｎ＞３０のニューロン。ｔ検定、^＊＊＊：ｐ≦０．０００１。 同上。 同上。 図８は、Ｓｐｇ１１ノックアウトが小脳において神経細胞死を引き起こすことを示すグラフおよび画像のセットである。図８Ａおよび図８Ｂ：ＧＦＡＰ（アストロサイトマーカー）、カルビンジン（プルキンエ細胞マーカー）およびヘキスト－３３２５８（青色、核マーカー）のために免疫染色した小脳の切片は、対照マウス（図８Ｂ）と比較してノックアウトマウス（図８Ｂ）におけるプルキンエ細胞の深刻な喪失を明らかにした。スケールバー：１００μＭ。ＰＣＬ：プルキンエ細胞層。図８Ｃ：プルキンエ細胞の数はノックアウトマウスにおいて８ヶ月齢から減少した（動物ごとにｎ≧５の切片、ｎ≧５の動物／遺伝子型／年齢、クラスカル・ワリス検定、^＊＊＊：ｐ＜０．００１）。 図９は、Ｓｐｇ１１ノックアウトマウスの小脳のプルキンエ細胞においてＬａｍｐ１と共局在化している自家蛍光粒子の蓄積を示す画像のセットである。図９Ａ：６週齢、４ヶ月齢、８ヶ月齢および１６ヶ月齢の動物からのＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－プルキンエ細胞における自家蛍光物質（励起４８８ｎｍ、放出５１５～５３０ｎｍ）。ノックアウトマウスは６週齢以降からプルキンエ細胞において自家蛍光蓄積物を既に示した。スケールバー：１０μＭ。図９Ｂ：６週齢および８ヶ月齢の動物からのＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－プルキンエ細胞における自家蛍光物質と比較したＬａｍｐ－１（リソソームマーカー）免疫染色。共焦点顕微鏡画像はノックアウト動物においてＬａｍｐ－１陽性染色によって取り囲まれた自家蛍光粒子を示した。スケールバー：１０μＭ。図９Ｃ：６週齢および８ヶ月齢のＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－プルキンエ細胞におけるｐ６２免疫染色および自家蛍光。共焦点顕微鏡画像は、８ヶ月齢のＳｐｇ１１^－／－マウスのプルキンエ細胞においてのみｐ６２陽性染色と共局在化している自家蛍光粒子を示す。スケールバー：１０μＭ。 同上。 図１０は、スパタクシンの喪失が小脳のプルキンエ細胞におけるＧＭ２およびＧＭ３の蓄積を促進することを示すグラフおよび画像のセットである。図１０Ａ：６週齢および８ヶ月齢の動物からのＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－プルキンエ細胞におけるＧＭ２免疫染色および自家蛍光物質。８ヶ月齢の動物におけるＧＭ２陽性染色との自家蛍光粒子の共局在化を示す共焦点顕微鏡画像。スケールバー：１０μＭ。図１０Ｂ：プルキンエ細胞ごとのＧＭ２免疫染色強度の平均（左のパネル）および分散（右のパネル）の定量化。グラフは平均±ＳＥＭ値を示す。５つの独立した小脳の切片において定量化されたｎ＞１０のプルキンエ細胞。クラスカル・ワリス検定、^＊：ｐ≦０．０５、^＊＊：ｐ≦０．０１、^＊＊＊：ｐ≦０．０００１。図１０Ｃ：６週齢および８ヶ月齢の動物からのＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－プルキンエ細胞におけるＧＭ３免疫染色および自家蛍光物質。８ヶ月齢のＳｐｇ１１^－／－ニューロンにおいてのみＧＭ３染色との自家蛍光粒子の共局在化を示す共焦点顕微鏡画像。スケールバー：１０μＭ。図１０Ｄ：プルキンエ細胞ごとのＧＭ３免疫染色強度の平均（左のパネル）および分散（右のパネル）の定量化。グラフは平均±ＳＥＭ値を示す。５つの独立した小脳の切片において定量化されたｎ＞１０のプルキンエ細胞。クラスカル・ワリス検定、^＊＊＊：ｐ≦０．０００１。 同上。 図１１は、スパタクシンの喪失がＳＰＧ１１患者由来のニューロンにおいてガングリオシドのリソソームへの蓄積を促進することを示すグラフおよび画像のセットである。図１１Ａ：前駆細胞マーカーＰａｘ６およびニューロン特異的マーカーβＩＩＩ－チューブリンに対する抗体による、インビトロで９０日間の間に分化された脳オルガノイドの免疫染色。神経細胞がオルガノイドの周囲に集中していることに留意されたい。スケールバー：５０μＭ。図１１Ｂ：健康な対象またはＳＰＧ１１患者由来のオルガノイドのニューロン層におけるＧＭ２およびＬａｍｐ１免疫染色。βＩＩＩ－チューブリンは、解析された細胞のニューロンの同一性を示す。ＳＰＧ１１患者由来のオルガノイドのＬａｍｐ１染色によって標識されたリソソームへのＧＭ２陽性染色の蓄積（矢印の頭）を示す共焦点顕微鏡画像。スケールバー：１０μＭ。図１１Ｃ～図１１Ｆ：ニューロンごとのＧＭ２（図１１Ｃ）、ＧＭ３（図１１Ｄ）、ＧＤ２（図１１Ｅ）およびＧＤ３（図１１Ｆ）免疫染色強度の平均（左のパネル）および分散（右のパネル）の定量化。グラフは平均±ＳＥＭ値を示す。５つの独立した皮質切片において定量化されたＮ＞１０のニューロン。一元配置分散分析、^＊＊＊ｐ≦０．００１。 同上。 同上。 図１２は、スパタクシンの喪失が皮質ニューロンの初代培養物においてガングリオシドのリソソームへの蓄積を誘発することを示すグラフおよび画像のセットである。図１２Ａ：インビトロで６日間培養されたＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－ニューロンのＧＭ２およびＬａｍｐ１免疫染色。Ｌａｍｐ１染色によって標識されたリソソームのＧＭ２陽性染色の蓄積を示す共焦点顕微鏡画像。スケールバー：１０μＭ。図１２Ｂ～図１２Ｅ：リソソームに局在化しているＧＭ２（図１２Ｂ）、ＧＭ３（図１２Ｃ）、ＧＤ２（図１２Ｄ）およびＧＤ３（図１２Ｅ）染色の割合の定量化。グラフは平均±ＳＥＭ値を示す。３つの独立したニューロン調製物において定量化されたＮ＞５０のニューロン。ｔ検定、^＊＊ｐ≦０．０１、^＊＊＊ｐ≦０．００１。 同上。 図１３は、リソソームへのＧＭ２の蓄積がオートリソソームの形成を促進することを示すグラフおよび画像のセットである。図１３Ａ：インビトロで３日および６日後にＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－ニューロンにおいてｐ６２に対しても陽性であったＬａｍｐ１で染色されたリソソームの割合。少なくとも４つの独立したニューロン調製物において定量化されたＮ＞５０のニューロン。二元配置分散分析、^＊ｐ＝０．０４、^＊＊＊ｐ＜０．００１。図１３Ｂ：ＧＭ２抗体、リソソームマーカーＬａｍｐ１およびオートファジーマーカーｐ６２によるＳｐｇ１１^－／－ニューロンの免疫染色。矢印の頭は、ＧＭ２染色に対して陽性であったオートリソソームを示す。スケールバー：１０μＭ。図１３Ｃ：インビトロで３日および６日後にＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－ニューロンにおいてｐ６２およびＧＭ２の両方に対しても陽性であったＬａｍｐ１で染色されたリソソームの割合。少なくとも４つの独立したニューロン調製物において定量化されたＮ＞５０のニューロン。二元配置分散分析、^＊＊＊ｐ＜０．００１。図１３Ｄ：各種濃度のミグルスタットと共にインビトロで６日間培養されたＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－皮質ニューロンの初代培養物のＧＭ２免疫染色の蛍光強度の定量化。各実験において定量化された少なくとも２００個のニューロンを用いたＮ＞３回の測定。図１３Ｅ：インビトロで６日後にＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－ニューロンにおいてｐ６２に対しても陽性であったＬａｍｐ１で染色されたリソソームの割合に対するミグルスタット処置（１００μＭ）の効果。少なくとも４つの独立したニューロン調製物において定量化されたＮ＞５０のニューロン。二元配置分散分析、^＊＊＊ｐ＜０．００１。図１３Ｆ：インビトロで６日後に対照ニューロンにおいてｐ６２に対しても陽性であったＬａｍｐ１で染色されたリソソームの割合に対する２つの独立したｍｉＲＮＡ（ＧＭ３Ｓ－１およびＧＭ３Ｓ－２）によるＧＭ３シンターゼの下方制御の効果。少なくとも３つの独立したニューロン調製物において定量化されたＮ＞２０のニューロン。二元配置分散分析、^＊＊＊ｐ＜０．００１。図１３Ｇ：ＧＭ２およびＬａｍｐ１に対する抗体による染色に対するＮｅｕ１下方制御の効果。Ｎｅｕ１の下方制御後のＧＭ２で標識されたリソソームの数の増加に留意されたい。スケールバー：１０μＭ。図１３Ｈ：Ｎｅｕ１に対する２つの独立したｍｉＲＮＡを発現するベクターでトランスフェクトされたニューロンにおいてリソソームに局在化しているＧＭ２染色の割合の定量化。３つの独立したニューロン調製物において定量化されたＮ＞２０のニューロン。一元配置分散分析、^＊ｐ＝０．０２、^＊＊ｐ＝０．００１７。図１３Ｉ：インビトロで６日後に対照ニューロンにおいてｐ６２に対しても陽性であったＬａｍｐ１で染色されたリソソームの割合に対する２つの独立したｍｉＲＮＡ（Ｎｅｕ１－１およびＮｅｕ１－２）によるＮｅｕ１下方制御の効果。３つの独立したニューロン調製物において定量化されたＮ＞２０のニューロン。一元配置分散分析、^＊＊＊ｐ＜０．００１。全てにおいて、グラフは平均±ＳＥＭ値を示す。 同上。 同上。 同上。 同上。 図１４は、ＧＭ２レベルを調節する処置がグルタミン酸によって誘発される神経細胞死を調節することを示すグラフおよび画像のセットである。図１４Ａ：２つの独立したｍｉＲＮＡ（Ｎｅｕ１－１およびＮｅｕ１－２）によりＮｅｕ１を下方制御するベクターでトランスフェクトされた対照ニューロンの初代培養物においてニューロンをグルタミン酸（２００μＭ）と共にインキュベートしてから３０時間後の神経細胞死の定量化。Ｎ＞３回の独立した実験。一元配置分散分析、^＊ｐ＝０．０１６、^＊＊ｐ＝０．００３。図１４Ｂ：ミグルスタット（１００μＭ）で処置したか処置していないＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－皮質ニューロンにおけるｐ６２レベルのウェスタンブロット分析。ニューロンをグルタミン酸（２００μＭ）と共に２４時間インキュベートした。グラフは、ミグルスタットまたはグルタミン酸で処置されたＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－皮質ニューロンにおけるチューブリンに対して正規化されたｐ６２の相対量の定量化を示す。Ｎ＞５回の独立した実験。一元配置分散分析^＊＊ｐ＜０．０１。全てにおいて、グラフは平均±ＳＥＭ値を示す。 図１５は、Ｓｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－マウスの脳からのリソソーム高含有画分の精製を示すグラフおよび画像のセットである。図１５Ａ：リソソーム高含有画分を精製するために使用される手順を示すスキーム。図１５Ｂ：Ｓｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－マウスの脳から得られた全脳溶解物、画分Ｓ２０、Ｐ２０およびリソソーム高含有画分のウェスタンブロット分析。 健康な対象またはＳＰＧ１１患者の線維芽細胞由来のｉＰＳ細胞の特性評価。多能性マーカーによるｉＰＳ細胞の免疫染色。スケールバー：２０μＭ。 図１７は、ＧＭ３シンターゼの下方制御により培養ニューロンにおいてガングリオシドレベルが減少することを示すグラフおよび画像のセットである。図１７Ａ：ＧＭ３シンターゼを標的にする２つの異なるｍｉＲＮＡを発現するベクターまたは対照ベクターでトランスフェクトされたマウスＮＩＨ－３Ｔ３細胞におけるＧＭ３シンターゼｍＲＮＡの減少を示すｑＲＴ－ＰＣＲ。Ｎ＝３。クラスカル・ワリス検定、^＊ｐ＝０．０４８、^＊＊ｐ＝０．００３。図１７Ｂ：ＧＭ３シンターゼを下方制御するためにＧＦＰおよびｍｉＲＮＡを発現するベクターでトランスフェクトされた細胞のＧＭ２免疫染色。矢印はＧＭ３シンターゼに対するｍｉＲＮＡでトランスフェクトされた細胞を示し、弱いＧＭ２染色を示す。矢印の頭はトランスフェクトされていない細胞を示す。スケールバー：１０μＭ。図１７Ｃ：ＧＭ３シンターゼに対する対照ｍｉＲＮＡまたは２種類の異なるｍｉＲＮＡを発現するベクターでトランスフェクトされたニューロンにおけるＧＭ２の蛍光強度の定量化。２つの独立した実験におけるＮ＞５０のニューロン。一元配置分散分析、^＊ｐ＝０．０３、^＊＊ｐ＝０．００１。 同上。 特異的ｍｉＲＮＡを発現するベクターのトランスフェクションによるＮｅｕ１の下方制御。Ｎｅｕ１または対照ベクターを標的にする２つの異なるｍｉＲＮＡを発現するベクターでトランスフェクトされたマウスＮＩＨ－３Ｔ３細胞におけるＮｅｕ１ｍＲＮＡの減少を示すｑＲＴ－ＰＣＲ。Ｎ＝４。クラスカル・ワリス検定、^＊ｐ＜０．０５。 図１９は、Ｓｐｇ１１ノックアウトマウスが認知および記憶障害を発症することを示すグラフおよび画像のセットである。図１９Ａ～図１９Ｂ：Ｙ迷路原理（図１９Ａ）および自発的交替値（図１９Ｂ）。ノックアウトマウスは、４ヶ月齢からは迷路の訪問済みアームと未知のアームとの間で嗜好を示さなかった（ｎ≧１２の動物／遺伝子型／年齢、クラスカル・ワリス検定、^＊＊＊ｐ≦０．００１）。この認知行動の変化は空間学習または記憶障害を明確に示している。図１９Ｃ～図１９Ｄ：恐怖条件付け。電気ショックの前後１日目に静止姿勢（frozen posture）に費やされた時間の割合（図１９Ｃ）。任意の年齢のマウスの条件付け中に明白な学習障害は認められなかった。条件付け後に電気ショックなしで２日目に静止姿勢に費やされた時間の割合（図１９Ｄ）。課題は学習されたが、８ヶ月齢からのノックアウトマウスが静止位置に費やす時間は減少し、これは認知および記憶障害を示している（ｎ≧１０の動物／遺伝子型／年齢、クラスカル・ワリス検定、^＊＊ｐ≦０．０１および^＊＊＊ｐ≦０．００１）。 同上。 図２０は、ミグルスタット処置はゼブラフィッシュｚｓｐｇ１１モデルにおいて運動機能障害を予防することを示すグラフおよび画像のセットである。図２０Ａ：１．２ピコモルのｚｓｐｇ１１ｓｐｌまたは１．２ピコモルのミスマッチ（ｍｍ）モルホリノを注射されていないか注射されたモルファントの表現型。受精から４８時間後に、モルファントを正常な表現型、ゆっくりと泳ぐ、麻痺しているまたはカーリーモルファントとして分類した。ｚｓｐｇ１１ｓｐｌモルホリノの注射により、大きな割合の麻痺している表現型またはゆっくりと泳ぐ表現型が生じる。ミグルスタットによる処置により麻痺しているモルファントの割合が減少した。各群においてＮ＞１００のモルファントを解析した。カイ二乗検定^＊＊＊ｐ＜０．０００１。図２０Ｂ～図２０Ｃ：接触誘発性逃避反応後に幼虫が移動する距離の追跡（図２０Ｂ）および定量化（図２０Ｃ）。ｚｓｐｇ１１ｓｐｌモルホリノの注射はモルファントの泳ぎを損ない、これはミグルスタットで処置された場合に矯正された。Ｎ＝１２のモルファントを各条件で解析した。一元配置分散分析^＊＊＊ｐ＜０．００１。図２０Ｄ～図２０Ｅ：１．２ピコモルのｚｓｐｇ１１ｓｐｌまたは１．２ピコモルのミスマッチ（ｍｍ）モルホリノを注射されたモルファントの終脳における免疫染色（図２０Ｄ）およびＧＭ２免疫染色の定量化（図２０Ｅ）。ｚｓｐｇ１１ｓｐｌモルホリノの注射によりＧＭ２免疫染色強度の平均および分散が増加した。この表現型はモルファントがミグルスタットで処置された場合に矯正された。Ｎ＞６のモルファントを各条件で解析した。一元配置分散分析^＊＊＊ｐ＜０．００１。 同上。 同上。 図２１は、ＳＰＧ１１、ＳＰＧ４およびＳＰＧ７患者の脳皮質におけるＧＭ２のニューロンへの蓄積を示す画像のセットである。神経学的症状のない対照の脳切片と比較したＳＰＧ１１、ＳＰＧ４およびＳＰＧ７患者の前頭皮質の脳切片のＧＭ２抗体による免疫染色。ＳＰＧ１１、ＳＰＧ４およびＳＰＧ７患者の切片におけるより高いＧＭ２免疫染色によるニューロンの存在に留意されたい。より高い拡大図における白色の矢印の頭は、ＳＰＧ１１、ＳＰＧ４およびＳＰＧ７患者のニューロンにおける小胞へのＧＭ２の蓄積を示す。

以下の実施例により本発明をさらに例示する。

実施例１：Ｓｐｇ１１ノックアウトマウスは神経変性の発症前に早期発症型の運動障害を発症する

Ｓｐｇ１１ノックアウトマウスモデルを作製し、このモデルにおいて本発明者らは老化の間の神経細胞死および細胞変化を解析した。このＳｐｇ１１ノックアウトマウスは６週齢から運動機能障害を示し、かつ８ヶ月齢で大脳皮質および小脳において神経細胞死が最初に検出され、ヒトの病態の主要な特徴を再現していた。神経細胞死の前に、ＧＭ２およびＧＭ３ガングリオシドを含む初期かつ進行性の脂質のリソソームへの蓄積が生じた。脂質のリソソームへの蓄積はＳＰＧ１１患者の脳内の皮質ニューロンにおいても観察された。ＧＭ２およびＧＭ３は、ＳＰＧ１１患者の皮膚生検から得られたｈｉＰＳＣ由来のニューロンにおいてもリソソームに蓄積し、これらの脂質が当該病態に寄与していることが確認された。培養ニューロンを用いて、本発明者らは、それらの生合成における鍵酵素を下方制御すること、またはそれらをミグルスタット（ガングリオシド生合成経路を防止し、かつゴーシェ病１型およびニーマン・ピック病Ｃ型の治療のために認可されている薬物）で処置することのいずれかによってガングリオシドレベルを減少させた。ガングリオシドレベルを減少させることによりグルタミン酸によって誘発される神経細胞死が防止された。

本発明者らは、マウスにおけるＳｐｇ１１発現を無効にすることにより神経変性におけるスパタクシンの生理病理学的役割を調査した。本発明者らは２つの連続した終止コドンを遺伝子のエクソン３２の中に挿入し（図１Ａ）、ＳＰＧ１１患者において観察されるこのエクソンの最も頻繁な突然変異を模倣した。本発明者らはウェスタンブロット法を使用して、Ｓｐｇ１１遺伝子の破壊によりスパタクシンの枯渇が生じることを確認した（図１Ｂ）。ヘテロ接合体マウス（Ｓｐｇ１１^＋／－）を交配させると、ノックアウトマウスが期待されたメンデル比で作製され、生存可能であった。それらは正常に発育し、繁殖力があり、かつそれらの野生型およびヘテロ接合体同腹子と同様の生存率を有していた。Ｓｐｇ１１^－／－マウスは、対照同腹子と比較して８ヶ月齢までは異形症特徴（ｄｙｓｍｏｒｐｈｉｃ ｆｅａｔｕｒｅ）または異常を有していなかった。しかし、本発明者らが倫理上の理由で研究を停止した年齢である１６ヶ月齢において、ノックアウトマウスの大部分が広がった後肢、より低い骨盤挙上および胸椎の顕著な後弯を伴う異常な姿勢を有した（図１Ｃおよび図１Ｄ）。

本発明者らは最初に、運動機能に対するスパタクシン無効の結果および神経細胞死の時間経過を評価し、皮質および小脳においてニューロンによって制御される運動機能に焦点を当てた。４ヶ月齢以降からＳｐｇ１１^－／－マウスは進行性の歩行障害を示し、これを足尖離地位置における後足の足底角（ＦＢＡ）を測定することによって定量化した（図１Ｅ、図１Ｆおよび図１Ｇ）。同様に、適度な速度（１０ｃｍ．ｓ^－１）のトレッドミル上でのマウスの歩行を記録することにより、４ヶ月齢以降から歩行角度、すなわち体の軸に対する後足の位置が対照マウスよりもノックアウトマウスにおいて有意により大きくなることが分かった（図１Ｈおよび図１Ｉ）。年齢に伴って、Ｓｐｇ１１^－／－マウスは後肢の広がりを示し、かつ強制歩行中にそれらの足を僅かに引きずり始めた。この運動障害はロータロッド試験、すなわち強制走行規範においてさらにより顕著であった。Ｓｐｇ１１^－／－マウスは、この試験において早くも６週齢で運動機能障害および失調性歩行の最初の徴候を示した。このノックアウトマウスはヘテロ接合体および対照マウスよりも有意に短い時間で加速するロータロッド上に留まり（図１Ｊ）、この運動障害は時間と共に悪化した。運動能力は対照およびヘテロ接合体マウスでは年齢と共に低下したが、ノックアウトマウスよりもこれらのマウスにおいて系統的に良好であった。

本発明者らは、Ｓｐｇ１１^－／－マウスの皮質および小脳を解析することによって行動的表現型が神経変性に起因するものであるか否かを調査した。様々な年齢において本発明者らは、ＮｅｕＮのための免疫染色によって一次運動野内の皮質ニューロンの総数を決定した（図１Ｋおよび図１Ｌ）。脳の冠状方向部分において、４ヶ月齢のノックアウトマウスでは皮質層内のニューロンの数は影響を受けていなかったが、８ヶ月齢以降からはＳｐｇ１１^＋／＋マウスの数よりも有意により少なかった（図１Ｍおよび図１Ｎ）。ＧＦＡＰ陽性細胞の増加によって示されているように、ニューロンの変性は時間と共に悪化し、かつアストログリオーシスを伴っていた（図１Ｌ、図１Ｏおよび図１Ｐ）。小脳においては、カルビンジン免疫染色によって標識されたプルキンエ細胞の数は、８ヶ月齢から対照マウスと比較してノックアウトマウスの小脳において大きく減少した（図８Ｃ）。さらに、プルキンエ細胞の変性は、一次運動野と同様にＧＦＡＰ免疫染色によって明らかにされる顕著なアストログリオーシスを伴っていた（図８Ａおよび図８Ｂ）。従って、明白な神経細胞死の発生前に運動機能が損なわれ、これは初期のニューロンの機能不全の存在を示唆していた。

実施例２：スパタクシンの喪失によりニューロンにおける初期のリソソームの機能不全が生じる

Ｓｐｇ１１^－／－マウスにおいて自家蛍光細胞内物質が大脳皮質のニューロンに蓄積した。この蓄積はノックアウトマウスでは６週齢で始まったが、対照マウスでは１６ヶ月齢まで大きな自家蛍光粒子は検出されなかった。この段階では、蓄積物はノックアウトマウスの運動ニューロンにおいてより頻繁であり、かつより大きかった（図２Ａ）。６３５ｎｍの励起時に自家蛍光は検出されなかったため（図２Ｂ）、各種マーカーとのその共局在化を解析することができた。Ｌａｍｐ１免疫反応性が自家蛍光凝集体を取り囲み（図２Ｃ）、これはスパタクシンの喪失がリソソーム機能を変化させることを示唆していた。リソソームはオートファゴソーム分解において重要な役割を担っており、リソソーム機能不全は、オートファゴリソソームの蓄積を引き起こすと考えられている。従って本発明者らは、自家蛍光凝集体がオートファジー基質のマーカーであるｐ６２と共局所化するか否かを調査した。自家蛍光凝集体とのｐ６２の共局在化が１６ヶ月齢のＳｐｇ１１^－／－マウスにおいてのみ観察された（図３Ａ）。６週齢および８ヶ月齢のＳｐｇ１１^－／－動物および１６ヶ月齢のＳｐｇ１１^＋／＋マウスでは、ｐ６２は自家蛍光凝集体と関連していなかった。Ｌａｍｐ１免疫染色によって取り囲まれた同様の自家蛍光凝集体がＳｐｇ１１^－／－マウスの小脳内のプルキンエ細胞において観察された（図９Ａおよび図９Ｂ）。オートファジーマーカーｐ６２は８ヶ月齢からのＳｐｇ１１^－／－マウスのプルキンエ細胞においても自家蛍光凝集体と共局所化していた（図９Ｃ）。これらのデータは、オートファゴソームの基質がＳｐｇ１１^－／－マウスにおいて疾患の後期で大脳および小脳皮質内のリソソーム構造体に蓄積することを示唆している。

本発明者らは、ウェスタンブロット法を行って、オートファゴソームに動員されるＬＣ３の脂質化形態（ｌｉｐｉｄａｔｅｄ ｆｏｒｍ）であるＬＣ３－ＩＩおよびリソソームのプロテアーゼであるカテプシンＤのレベルを決定することにより、オートファジーの変化またはリソソーム機能不全をさらに調査した。ＬＣ３－ＩＩレベルは全ての年齢において対照およびノックアウトマウスにおいて同様であった（図３Ｂ）。対照的に、リソソームのプロテアーゼの活性型である成熟カテプシンＤのレベルは対照よりも、６週齢および４ヶ月齢の若いＳｐｇ１１^－／－マウスの皮質において有意に高かった。成熟カテプシンＤレベルは年齢と共に増加したため、遺伝子型間の差は８ヶ月齢および１６ヶ月齢ではもはや明白ではなかった（図３Ｃ）。従って、スパタクシンの喪失により、当該疾患の後期においてのみ検出されたｐ６２オートファゴソームマーカーの蓄積の前にリソソーム機能における初期の変化が生じた。

実施例３：スパタクシンの喪失はマウスおよびヒトの脳における脂質のリソソームへの蓄積を促進する

本発明者らは、電子顕微鏡法を使用して２ヶ月齢の皮質ニューロンを解析することにより、初期段階におけるリソソーム機能不全に対するスパタクシン無効の結果を評価した（図４）。リソソームの平均密度および表面積は遺伝子型間で異なっていなかった（図４Ｉおよび図４Ｋ）。しかし、未消化物質を含む細胞小器官の数は、対照ニューロン（図４Ａおよび図４Ｂ）よりもＳｐｇ１１^－／－（図４Ｃ～図４Ｆおよび図４Ｊ）において有意により高かった。これらのリソソーム粒子のいくつかは、脂肪滴に加えて粒状および膜状物質も含んでおり、リポフスチン様構造体を連想させた（図４Ｄ、図４Ｅおよび図４Ｆ）。本発明者らはニューロンの細胞体において、脂肪滴を含むより大きなリポフスチン様構造体と共に未消化物質を含むリソソームのクラスター化も観察した（図４Ｆ）。これらの構造体はカテプシンＤに対して陽性であり、これはリソソームの起源を示唆していた（図４Ｇ）。リポフスチン様構造体は、２ヶ月齢において対照ニューロンよりもＳｐｇ１１^－／－皮質ニューロンにおいて既に有意に大きかった（図４Ｌ）。同様の構造体が、トランスで２つの短縮型ヘテロ接合体突然変異を有するＳＰＧ１１患者の脳内の皮質ニューロンにおいて大きな数で観察され（Ｄｅｎｏｒａら，Ｂｒａｉｎ．２０１６年６月；１３９（Ｐｔ ６）：１７２３－３４）（図４Ｈ）、それらが神経病理学的プロセスに寄与していることを示唆していた。これらのデータは、スパタクシンの不存在により、神経細胞死の発生よりもかなり前に２ヶ月齢もの若い動物のマウス皮質ニューロンにおいてリソソーム機能不全を生じさせることを示唆している。Ｓｐｇ１１^－／－ニューロンにおける脂質および膜含有構造体の有意な増加は、リソソームによる脂質クリアランスが損なわれ得ることを示唆している。

実施例４：スパタクシンの喪失はＧＭ２、ＧＭ３、ＧＤ２およびＧＤ３ガングリオシドの進行性蓄積を促進する

本発明者らは、当該疾患の初期段階でリピドーム解析を行うことにより、Ｓｐｇ１１^－／－マウスの大脳皮質に蓄積する脂質の性質を調査した。６週齢のマウスの皮質から脂質を抽出し、液体クロマトグラフィ－高分解能質量分析によって解析した。各種クラスの脂質のうち、２つの脂質種、すなわちＧＭ２およびＧＭ３ガングリオシドのみのレベルが対照マウス皮質よりもＳｐｇ１１^－／－マウス皮質において有意に高かった（表１、両脂質に対して０．０８のｐ値、ｎ＝３）。

これらの脂質の同一性はタンデム質量分析実験により確認した。従って本発明者らは、脂質種に対する特異的抗体を用いてＳｐｇ１１^－／－脳の皮質ニューロンへのこれらの化合物の蓄積を評価した。免疫染色により、ＧＭ２は６週齢からノックアウトマウスにおいて自家蛍光リソソームと共局所化するが、対照マウスのニューロンでは点状分布を有することが分かった。蛍光強度の定量化により、ＧＭ２レベルが全ての年齢の皮質において対照ニューロンよりもＳｐｇ１１^－／－において高いことが分かった（図５Ｂ）。興味深いことに、染色の不均一分布を表す蛍光強度の分散の定量化は、ノックアウト組織において年齢と共に大きく増加した（図５Ｂ）。従って、ＧＭ２はノックアウトマウスにおいて全ての自家蛍光凝集体に蓄積した。この蓄積は年齢と共に増加したが、それは自家蛍光リソソームのサイズが増加したからである（図５Ａ）。ＧＭ３染色は、６週齢の動物からの対照およびＳｐｇ１１^－／－皮質ニューロンにおいて点状であり、かつ細胞質内であったが、Ｓｐｇ１１^－／－動物においてより強力であった（図５Ｃおよび図５Ｄ）。蛍光強度の分散の定量化は、ノックアウト動物においてＧＭ３の不均一な染色も示した（図５Ｄ）。実際にはＧＭ３は、６週齢以降からＳｐｇ１１^－／－マウスの皮質中の自家蛍光リソソームに蓄積した（図５Ｃ）。ＧＭ２およびＧＭ３の蓄積の同様のパターンがＳｐｇ１１^－／－マウスのプルキンエ細胞において観察された（図１０Ａ～図１０Ｄ）。

本発明者らのリピドーム解析を皮質全体に対して行った。従って、それらのレベルにおける全体的変化が存在しないにも関わらず、他の脂質がリソソームに蓄積し得る可能性がある。（ｉ）それらの低レベルの総脂質抽出物および／または（ｉｉ）非常に強力に染色されたリン脂質を含むいくつかの脂質クラスの存在によるイオン抑制効果が原因で、いくつかの脂質が検出されなかった可能性もある。従って本発明者らは、Ｓｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－マウスの脳からリソソーム高含有画分を精製し（図１５Ａおよび図１５Ｂ）、Ｆｏｌｓｃｈ法を用いて脂質を抽出した（Ｆｏｌｃｈら，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ １９５７，２２６，４９７）。簡単に説明すると、脳組織を２：１のクロロホルム－メタノール混合物と共にホモジナイズし、０．２体積の水を添加して洗浄した。得られた混合物は２つの相に分離する。ガングリオシドを含有するＦｏｌｓｃｈの上相に対してリピドーム解析を行った。ガングリオシドＧＭ２、ＧＭ３、ＧＤ２およびＧＤ３のレベルは、対照の脳よりもＳｐｇ１１^－／－マウスの脳から得られたリソソーム画分において著しく高かった（表２）。本発明者らは、特異的抗体による免疫染色によってリソソーム中にこれらのガングリオシドが多く含まれていることを確認した。脂質ＧＭ３、ＧＤ２およびＧＤ３はＧＭ２と同様にリソソームと共局所化していた。蛍光強度の定量化により、４種類の脂質種のレベルが年齢と共に増加し、かつ対照の脳よりもＳｐｇ１１^－／－マウスの脳において高いことが分かった（図５Ｂ、図５Ｄ、図５Ｅおよび図５Ｆ）。蛍光強度の分散の定量化は、ノックアウト組織において年齢と共に増加し、これは大きなリソソームへのそれらの蓄積に一致する。複合体ガングリオシド（ＧＭ１、ＧＤ１およびＧＴ１）のレベルは、リソソーム高含有画分において僅かであるが有意ではなく高かった（表２）。従って、免疫染色によって評価した場合にＳｐｇ１１^＋／＋マウスの脳とＳｐｇ１１^－／－マウスの脳との間でＧＭ１の局在化における差は認められなかった（データは示さず）。

これらのデータから、スパタクシン機能の喪失により神経変性が生じる前に大脳および小脳皮質内のニューロンのリソソームへのガングリオシドの初期および進行性の蓄積が生じることが確認される。

実施例５：ガングリオシド蓄積は培養ニューロンにおける神経変性に寄与する

次いで本発明者らは、皮質ニューロンの初代培養物を用いて神経変性におけるＧＭ２およびＧＭ３の蓄積の結果を評価した。ＧＭ２およびＧＭ３抗体による免疫染色により、両種のガングリオシドがノックアウト胚由来の培養ニューロンに有意に蓄積することが分かった（図６Ａおよび図６Ｂ）。ガングリオシドの生合成経路における鍵酵素であるＧＭ３シンターゼを標的にするｍｉＲＮＡの発現により、ＧＭ２およびＧＭ３のレベルが有意に減少した（図６Ｃおよび図６Ｄ）。従って本発明者らは、神経細胞死におけるガングリオシド蓄積の関与を試験することができた。モデルとして本発明者らは、神経変性疾患の多くのモデルに関与しているグルタミン酸によって誘発される神経細胞死を評価した。神経細胞死は、対照ニューロンと比較してＳｐｇ１１^－／－胚から得られた細胞においてより高かった（図６Ｅ）。重要なことに、ＧＭ２およびＧＭ３のレベルがＧＭ３シンターゼの下方制御後に減少した場合に、グルタミン酸による神経細胞死はＳｐｇ１１^－／－ニューロンにおいて大きく減少した（図６Ｅ）。次に本発明者らは、グルタミン酸によって誘発される神経細胞死に対するミグルスタット（基質合成抑制療法（ＳＲＴ））の効果を評価した。ミグルスタットはテイ・サックス病のマウスモデルにおけるＧＭ２の脳レベルを減少させるために使用されているグルコシルセラミドシンターゼ阻害剤である（Ｐｌａｔｔら，Ｓｃｉｅｎｃｅ．１９９７年４月１８日；２７６（５３１１）：４２８－３１）。Ｓｐｇ１１^－／－ニューロンにおいて、ミグルスタットはグルタミン酸によって誘発される神経細胞死を用量依存的に減少させた（図６Ｆ）。これらのデータは、ＧＭ２およびＧＭ３の蓄積が神経細胞死に寄与することを示唆している。

実施例６：スパタクシンの喪失は皮質ニューロンの初代培養物におけるオートリソソームへの単純なガングリオシド蓄積を促進する

ＧＭ２およびＧＭ３がＳｐｇ１１^－／－マウスの胚由来の皮質ニューロンの初代培養物において蓄積したので、本発明者らは、ガングリオシドが胚様構造体である脳オルガノイドに蓄積したように、ガングリオシドがそれらのリソソームにも蓄積するか否かをさらに解析した。ＧＭ２、ＧＭ３、ＧＤ２およびＧＤ３は、Ｓｐｇ１１^－／－胚由来の培養ニューロンにおいてリソソームに有意に蓄積した（図１２Ａ～図１２Ｅ）。従って、皮質ニューロンの初代培養物は、細胞機能に対するガングリオシド蓄積の結果を調査するのに良好なモデルである。ＧＭ２はリソソームに最も蓄積したガングリオシドであり、従って本発明者らは、その後の実験ではそれをガングリオシド蓄積のマーカーとして使用した。

次いで本発明者らは、Ｓｐｇ１１ノックアウトニューロンのリソソーム機能に対するガングリオシド蓄積の結果を調査した。スパタクシンの喪失によりオートファゴソームのクリアランスが損なわれ、かつオートリソソームの蓄積が生じる。従って、リソソームマーカーＬａｍｐ１およびオートファゴソームマーカーｐ６２に対する陽性染色によって定められるオートリソソームであるリソソームの割合は、対照ニューロンよりもＳｐｇ１１^－／－ニューロンにおいてより高く、この割合は培養されたＳｐｇ１１^－／－ニューロンにおいて時間と共に増加した（図１３Ａ）。次いで本発明者らは、ＧＭ２がオートリソソームの割合の増加に寄与しているか否かを調査した。ニューロンにおけるＧＭ２染色の詳細検査により、それが同様にｐ６２で染色されたリソソームのサブセットに主に蓄積することが分かった（図１３Ｂ）。ｐ６２およびＧＭ２抗体で染色されたリソソームの割合は、対照ニューロンよりもＳｐｇ１１^－／－ニューロンにおいて高く、かつ時間と共に増加し（図１３Ｃ）、これはＧＭ２がオートリソソームの蓄積に寄与している可能性があることを示唆していた。

実施例７：ＧＭ２はオートリソソームの蓄積に寄与する

本発明者らは、ミグルスタット（スフィンゴ糖脂質合成の初期段階のグルコシルセラミドシンターゼを阻害する基質合成抑制療法（ＳＲＴ））を用いて、オートリソソームの蓄積におけるＧＭ２の役割を評価した。本発明者らのインビトロモデルでは、ミグルスタットは対照およびＳｐｇ１１^－／－ニューロンにおいてＧＭ２のレベルを用量依存的に有意に減少させた（図１３Ｄ）。ミグルスタット（１００μＭ）は、Ｓｐｇ１１^－／－ニューロンにおいてｐ６２マーカーに対して陽性のリソソームの割合も大きく減少させた（図１３Ｅ）。本発明者らは、生合成経路において第１のガングリオシドを産生し、かつそれらか全ての他のシアル酸付加ガングリオシドが産生される酵素であるＧＭ３シンターゼを標的にする２つの独立したｍｉＲＮＡを用いて、オートリソソームの形成におけるガングリオシド蓄積の役割をより直接的に試験した。これらのｍｉＲＮＡの発現は、ＧＭ３シンターゼｍＲＮＡおよびＧＭ２レベルの発現を有意に減少させた（図１７Ａ～図１７Ｃ）。ＧＭ３シンターゼの下方制御後にＧＭ２のレベルが減少した場合、ｐ６２を含むリソソームの割合はＳｐｇ１１^－／－ニューロンにおいて有意に減少した（図１３Ｆ）。全体として本発明者らのデータは、オートリソソームへのＧＭ２の蓄積がそれらの内容物の分解およびそれらの再循環を防止することを示唆している。

本発明者らは、対照細胞においてリソソームでのガングリオシドの分解に関与する酵素であるノイラミニダーゼ１（Ｎｅｕ１）の発現を下方制御することによって、この仮説を直接的に試験した。本発明者らは、Ｎｅｕ１の発現を効率的に下方制御する２種類の独立したｍｉＲＮＡ配列を使用した（図１８）。Ｎｅｕ１の下方制御は、トランスフェクトされた細胞においてリソソームへのＧＭ２の有意な蓄積を促進した（図１３Ｇおよび図１３Ｈ）。Ｎｅｕ１の下方制御後のリソソームにおけるＧＭ２レベルの増加により、オートファゴソームマーカーｐ６２に対して陽性のリソソームの割合の有意な増加が生じた（図１３Ｉ）。これは、リソソームへのＧＭ２の蓄積がオートリソソームの蓄積を引き起こすことを示唆している。

実施例８：ＧＭ２は培養ニューロンにおける神経変性に寄与する

次いで本発明者らは、マウス皮質ニューロンの初代培養物を用いてＧＭ２およびオートリソソームの蓄積が神経変性に寄与しているか否かを調査した。本発明者らは、神経変性疾患の多くのモデルにおいて生じるグルタミン酸によって誘発される神経細胞死を評価した。グルタミン酸処置は培養ニューロンにおいてガングリオシドレベルを増加させることが分かっている（Ｐａｒｋ Ｄ．Ｈ．ら，Ａｎａｌ Ｃｈｅｍ，２０１６）。従って本発明者らは、対照（＋２０．０±４．６％、ｐ＝０．０２、ｔ検定、ｎ＞９）およびＳｐｇ１１^－／－ニューロン（＋１５．７±３．９％、ｐ＝０．００７、ｔ検定、ｎ＞１０）の両方において全体的ＧＭ２レベルの中度であるが有意な増加を観察した。

グルタミン酸によって誘発される神経細胞死は、対照ニューロンよりもＳｐｇ１１^－／－胚から得られたニューロンにおいて有意に高かった（図６Ｆ）。Ｓｐｇ１１^－／－ニューロンのミグルスタット処置により、グルタミン酸によって誘発される神経細胞死が用量依存的に減少した（図６Ｆ）。ＧＭ３シンターゼの下方制御後にＧＭ２レベルが減少した場合に同様のデータが得られた（図６Ｅ）。これらのデータは、ＧＭ２の蓄積が神経細胞死に寄与することを示唆している。本発明者らは、Ｎｅｕ１を下方制御した後にリソソームへのガングリオシドの蓄積を誘発し、かつグルタミン酸によって誘発される神経細胞死を監視することにより、この仮説を確認した。ガングリオシドレベルの増加は、当該ニューロンのグルタミン酸によって誘発される細胞死に対する感受性を高めた（図１４Ａ）。

本発明者らは、グルタミン酸で２４時間処置された対照およびＳｐｇ１１^－／－ニューロンにおけるｐ６２レベルを監視して、ガングリオシドによって媒介されるオートリソソームの蓄積がグルタミン酸によって誘発される神経細胞死に寄与するか否かを決定した。本発明者らは、対照ニューロンにおいてｐ６２レベルにおいて差がないことを観察した。対照的に、グルタミン酸処置はＳｐｇ１１^－／－ニューロンにおいてｐ６２レベルを有意に増加させ、これはミグルスタット処置によってＧＭ２レベルが減少した場合に阻害された（図１４Ｂ）。これらのデータは、オートリソソームの蓄積を促進することによってＧＭ２が神経細胞死に寄与することを示唆している。

実施例９：スパタクシンの喪失はヒトのニューロンにおけるＧＭ２およびＧＭ３ガングリオシドのリソソームへの蓄積を促進する

ガングリオシドの蓄積がヒトの病態にも関連しているか否かを試験するために、本発明者らは患者由来の誘導された多能性幹（ｉＰＳ）細胞を使用した。最初に本発明者らは、エクソン３２にＳｐｇ１１^－／－マウスモデルに導入されたものと同様の突然変異であるホモ接合停止突然変異（ｃ．６１００Ｃ＞Ｔ、ｐ．Ｒ２０３４Ｘ）を有する第１のＳＰＧ１１患者からの線維芽細胞を使用した（図１Ａ）。この患者は６歳に当該疾患を発症し、かつ１９歳に遠位萎縮を伴う痙性歩行を示すという典型的なＳＰＧ１１病態を有していた。大脳の画像診断は脳梁菲薄化ならびに皮質萎縮を示した（Ｓｔｅｖａｎｉｎら，Ｎａｔ Ｇｅｎｅｔ．２００７年３月；３９（３）：３６６－７２）。この患者ならびに性別および年齢適合対照の線維芽細胞をｉＰＳ細胞へと誘導した。

ｉＰＳ細胞株を多能性マーカーについて調べた（図７Ａ）。次いで、ニューロン特異的マーカーβＩＩＩ－チューブリンおよびｖ－Ｇｌｕｔ１に対する陽性染色によって示されているように、それらを神経前駆細胞に分化させ、次いでインビトロで４９日間グルタミン酸作動性ニューロンに分化させた（図７Ｂ）。スパタクシンの不存在下でガングリオシドの蓄積を解析するために、これらのニューロンをＧＭ２またはＧＭ３に対する抗体で免疫染色した（図７Ｃ）。ＧＭ２およびＧＭ３のレベルは、対照と比較して第１のＳＰＧ１１患者由来のニューロンにおいて上方制御された（図７Ｄ）。この差は神経前駆細胞において観察されず、これはガングリオシドの蓄積がニューロンの分化または老化と共に生じることを示唆していた。最後に、本発明者らはガングリオシドおよびリソソームの二重免疫染色を行って、ＧＭ２およびＧＭ３がリソソームに蓄積するか否かを調べた（図７Ｃ）。Ｓｐｇ１１^－／－マウスの脳において観察されるように、リソソームと共局在化していたＧＭ２およびＧＭ３の割合は、対照ニューロンよりも第１のＳＰＧ１１患者由来のニューロンにおいて有意に高かった（図７Ｅ）。これらの結果は、マウスにおいて同定された異常な経路がヒトのニューロンと共有されていることを示す。

その後、本発明者らは、２人の他の独立したＳＰＧ１１患者の線維芽細胞由来のｉＰＳ細胞を脳オルガノイドに分化させた。脳オルガノイドは、シナプスによって連結され、かつ非反応性グリア細胞のネットワークによって取り囲まれた転写的かつ電気生理学的に成熟したニューロンを含む層状の大脳皮質様構造体である。第２の患者のＳＰＧ１１は、トランスで２つのヘテロ接合体短縮型突然変異（ｃ．２４３１Ｃ＞Ｔ、ｐＧｌｎ８１１Ｘ；エクソン２９の欠失）を有していた。この患者は正常な知的発達を有し、１４歳までに歩行困難を経験し、徐々に悪化して２０歳で杖に依存するようになった。２３歳での検査により、この女性患者は杖を用いてまだ歩行できることが分かった。痙縮および脱力感が下肢に存在していたが、上肢における緊張度および強度は正常であった。この女性患者は、足クローヌスによる反射亢進および両側性伸展性足底反射ならびに上肢におけるホフマン徴候を有していた。深部感覚は正常であった。この女性患者は、腕における姿勢時振戦および正常な視線を有し、かつ認知機能障害を有していなかった。明らかな小脳の徴候は認められなかった。第３の患者のＳＰＧ１１は、トランスで２つのヘテロ接合体短縮型突然変異（ｃ．１９５１Ｃ＞Ｔ、ｐＡｒｇ６５１Ｘ；ｃ．５６２３Ｃ＞Ｔ、ｐＧｌｎ１８７５Ｘ）を有していた。この女性患者は１７歳で痙性歩行を発症した。２７歳で、この女性患者は中度の痙性歩行を示し、２６歳から歩行器が必要になり、ごく最近になって車椅子を必要とするようになった。この女性患者は両側性伸展性足底反射を含む下肢の反射亢進を有し、かつホフマン徴候が上肢に存在した。この女性患者は脚に中度の脱力感を有し、かつ足首における深部感覚が低下していた。動作緩慢は明らかであり、指鼻試験を行うと軽度の振戦が認められた。認知は臨床的に正常であり、この女性患者は異常な眼球運動を示さなかった。大脳の画像診断は脳梁菲薄化を示した。２人の性別および年齢適合対照の線維芽細胞も使用してｉＰＳ細胞を得た。本発明者らは、多能性マーカーを有するｉＰＳ細胞株も確認した（図１６）。

ＳＰＧ１１患者（第２および第３の患者）ならびに健康な対象のｉＰＳ細胞を、浮遊三次元培養方法を用いてインビトロで優勢な皮質同一性を有する脳オルガノイドに分化させた（Ｐａｓｃａ Ａ．Ｍ．ら，Ｎａｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ，２０１５）。簡単に説明すると、ｉＰＳ細胞の凝集および分化を促進させて神経外胚葉様上皮を形成し、次いで初期の皮質形成を連想させるように最終的に自己組織化する皮質ニューロンを産生する。９０日間の分化後に、オルガノイドはＰａｘ６およびＮｅｓｔｉｎによって標識された放射状グリア細胞の層ならびにβＩＩＩ－チューブリンおよびＮｅｕＮを発現したニューロンの末梢層において組織化された（図１１Ａ、データは示さず）。本発明者らは、これらの脂質種に対する抗体を用いて、ガングリオシドがニューロンの末梢層においてリソソームに蓄積するか否かを調べた（図１１Ｂ～図１１Ｆ）。ＧＭ２、ＧＭ３およびＧＤ３は、対照およびＳＰＧ１１脳オルガノイドの末梢層のニューロンに点状局在化を有しており、それらは主としてＳＰＧ１１脳オルガノイドのニューロンにおいてリソソームと共局所化していた（図１１Ｂ、データは示さず）。蛍光強度の定量化により、ＧＭ２およびＧＭ３レベルが対照オルガノイドよりもＳＰＧ１１皮質のオルガノイドにおいて高いことが分かった（図１１Ｃ～図１１Ｆ）。さらに、ＧＭ２、ＧＭ３およびＧＤ３染色の蛍光強度の分散も健康な対照由来のオルガノイドよりもＳＰＧ１１患者由来のオルガノイドにおいて高く、リソソームへのそれらの蓄積に一致していた。ＳＰＧ１１患者および健康な対照由来のオルガノイド間にＧＤ２染色における差は認められず、初期段階のＳｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^－／－マウスの皮質においてＧＤ２染色における差が欠如していることに一致していた（図５Ｅ）。全体として、これらのデータは、単純なガングリオシドがヒトのニューロンのリソソームに蓄積したことを示しており、これは皮質のオルガノイドモデルによって表される発生の初期段階に開始する。

実施例１０：スパタクシンの喪失はマウスにおいて認知障害を引き起こす

ＳＰＧ１１患者の症状は一般に認知機能障害および精神遅滞を含む。従って、Ｓｐｇ１１ノックアウトマウスがヒトにおいて観察される認知障害を再現するか否かを調査するために、本発明者らはマウスをあらゆる認知障害を評価するためのＹ迷路自発的交替試験に供した。この試験はマウスの新しい環境を探索する傾向に依存するものであり、これを使用して空間記憶を監視した（Ｈｕｇｈｅｓ，Ｒ．Ｎ．，Ｎｅｕｒｏｓｃｉ Ｂｉｏｂｅｈａｖ Ｒｅｖ，２００４）（図１９Ａ）。第１段階の間は、マウスは迷路の開放されているアームのみを自由に探索することが許され、マウスの背後のドアを閉じることによりマウスを１分間そこに閉じ込めた。第２段階の間に、両アームを開放した状態でマウスを迷路の入口に置いた。予期どおりに、Ｓｐｇ１１^＋／＋およびＳｐｇ１１^＋／－マウスは、試行の約７５％において迷路の既に探索された部分ではなく迷路の未知のアーム、すなわち新しい環境を探索することを自然に選択する。対照的に、Ｓｐｇ１１^－／－マウスは、６週齢においてＳｐｇ１１^＋／＋マウスよりも未知のアームに進入する傾向の低さを示し、４ヶ月以降から、Ｓｐｇ１１^－／－マウスは、訪問済みのアームと未知のアームとの間で嗜好差を示さず（図１９Ｂ）、これはノックアウトマウスにおける短期間の空間作業記憶の変化を示唆していた。本発明者らは、異なる種類の記憶が影響を受けるか否かを決定するために、中立的文脈が２種類の嫌悪電気ショックと関連づけられた恐怖条件付け実験を行った。すくみ反応は正常に嫌悪刺激に応じたストレス行動を反映する。すくみ反応のベースラインは年齢と共に僅かに増加したが、本発明者らは、ノックアウトマウスと野生型すなわちヘテロ接合体同腹子との間に有意差を観察しなかった。２種類の電気ショックは全ての群においてすくみ反応の顕著な増加を誘発した（図１９Ｃ）。翌日、電気ショックなしで野生型およびヘテロ接合体マウスが静止姿勢に費やした時間の割合は高く、課題が学習されたことを示した。対照的に、Ｓｐｇ１１^－／－マウスは８ヶ月以降からは静止姿勢に費やされる時間が短くなり（図１９Ｄ）、ノックアウトマウスが長期間の情動的記憶障害を有することを示唆した。

実施例１１：ガングリオシド合成の阻害はゼブラフィッシュモデルにおけるＳＰＧ１１病態をレスキューする

本発明者らは、ガングリオシド合成の阻害が治療戦略になり得るか否かを試験した。胚形成期にガングリオシドがリソソームに蓄積するので、本発明者らはモデルとして、モルホリノを注射してスパタクシンの発現を減少させたゼブラフィッシュ幼虫を使用した。ｚｓｐｇ１１モルホリノが注射された幼虫は、ミスマッチモルホリノが注射された幼虫または注射されていない幼虫ではそれぞれ滅多にまたは全く観察されなかった運動性の喪失または麻痺のいずれかを特徴とする運動表現型を示した（図２０Ａ）。幼虫をミグルスタットで処置した場合、麻痺した幼虫の割合は対照と比較して用量依存的に有意に低下した。これらのデータを確認するために本発明者らは、接触誘発性逃避反応後の幼虫の移動距離を監視した。ｚｓｐｇ１１モルホリノが注射されたモルファントは、対照モルホリノが注射された幼虫よりも有意に短い接触誘発性逃避を示した。この表現型は幼虫がミグルスタットで処置された場合に有意に矯正されたが（図２０Ｂ、図２０Ｃ）、ミグルスタットはミスマッチモルホリノが注射されたモルファントに対しては全く効果を有しなかった。最後に、ミグルスタットのこの作用がガングリオシド合成に対するその効果に依存しているか否かを試験するために、本発明者らは、幼虫において免疫蛍光によりＧＭ２ガングリオシドを監視した。ｚｓｐｇ１１モルホリノが注射されたゼブラフィッシュは、ミスマッチモルホリノが注射された幼虫よりも強力な終脳におけるＧＭ２染色を有していた。ＧＭ２抗体によるより強力な染色は、ミグルスタットで処置された幼虫において矯正された（図２０Ｄ、図２０Ｅ）。つまり、これらのデータは、ガングリオシドの合成を阻害することによりＳＰＧ１１病態のゼブラフィッシュモデルの運動表現型が改善されることを示している。

実施例１２：ＳＰＧ４、ＳＰＧ７およびＳＰＧ１１患者の脳におけるＧＭ２ガングリオシドの蓄積

本発明者らは、ガングリオシドが他の形態のＨＳＰの生理病理学に関与しているか否かを確認した。本発明者らは、ＳＰＧ４遺伝子またはＳＰＧ７遺伝子に突然変異を有する２人の患者の脳皮質を調べ、それらをＳＰＧ１１病態に冒されている患者（Ｄｅｎｏｒａら、２０１６）および急性膵炎により６１歳に死亡した神経疾患を有しない患者の脳皮質と比較した。患者ＦＳＰ－ＳＡＬ－ＰＩＲ－６２５は、ＳＰＧ４遺伝子にヘテロ接合体ｃ．１２１５＿１２１９ｄｅｌ（ｐ．Ａｓｎ４０５ＬｙｓｆｓＸ３６）突然変異を有する。この男性患者は膀胱癌により５９歳に死亡した。最初の症状は２５歳の時に検出され、この男性患者は３７歳で歩行器が必要になり、４８歳で車椅子が必要になった。臨床検査により、進行性運動障害と共に下肢の強い痙縮が明らかになった。上肢は冒されていなかったが、両側性ホフマンおよびバビンスキー反射と共に錐体路症候群（ｔｅｔｒａｐｙｒａｍｉｄａｌ ｓｙｎｄｒｏｍｅ）が認められた。痙性対麻痺評定尺度は５５歳で４３／５２であり、５８歳で４９／５２まで上昇した。深部感覚は減少し、最終的に４３歳で消失した。錐体外路または小脳の徴候は検出されなかった。脳および脊髄ＭＲＩでは３８歳および５５歳で目立った点はなく、５９歳での筋電図検査は、左側の圧迫（left carpian compression）の徴候以外は正常であった。患者ＡＡＲ－２４７はＳＰＧ７に２つの複合ヘテロ接合子突然変異、すなわちエクソン１３にｃ．１７４９Ｇ＞Ｃ（ｐ．Ｔｒｐ５８３Ｃｙｓ）とエクソン１６にｃ．２１８１＋２ｄｕｐとを有していた。この女性患者は５６歳で膵臓癌により死亡した。最初の症状は約３０歳で不安定性および次いで脚の剛直により検出された。この女性患者は４５歳で歩行器を必要とし、５０歳で車椅子を必要とした。この女性患者は嚥下困難のない構音障害であった。５５歳での臨床評価により下肢の痙縮、両側性バビンスキー反射および下肢の近位軽度運動障害を伴う錐体路症候群（tetrapyramidal syndrome）であることが分かった。深部感覚が損なわれていた。この女性患者は１６．５／４０のＳＡＲＡスコアによって示される小脳症候群を有していた。眼球運動検査は非対称眼瞼下垂、衝動性追従眼球運動および上下注視の限界を示した。患者が４０歳および５５歳の時に行われた脳ＭＲＩにより、主として小脳虫部を冒す小脳萎縮が明らかになった。筋電図検査は４３歳のおよび５５歳の２回ともに正常であった。５５歳の時に行われた神経心理学的評価は、アパシーおよび抑鬱徴候以外は正常な認知能力を示した。

４人の個体の運動野の４０μＭの厚さの切片を抗ＧＭ２抗体で染色した。Ｓｐｇ１１ノックアウトマウスの皮質において得られたデータに一致して、本発明者らは、ＳＰＧ１１患者のいくつかのニューロンがＧＭ２抗体で強力に染色されることを観察した。より拡大率の高い画像は大きな小胞中にＧＭ２の存在を示した（図２１）。ＳＰＧ４およびＳＰＧ７患者の皮質において本発明者らは、いくつかのニューロンにおいてＧＭ２染色の強度が僅かに増加することを観察した。より高い拡大図において本発明者らはＧＭ２染色が大きな小胞に集中していることも観察した。つまり、これらのデータは、ＧＭ２ガングリオシドがＳＰＧ４およびＳＰＧ７患者のニューロンに蓄積するがＳＰＧ１１患者と比較してより低いレベルであることを示唆している。これは、これらの患者間の症状の重症度の差を説明することができる。

影響
本発明者らのデータは、リソソームへのＧＭ２およびＧＭ３ガングリオシドの蓄積を含むリソソーム機能の初期の変化が、ヒト由来のモデルにおけるものを含むＳＰＧ１１生理病理学の初期段階に寄与していることを実証している。本発明者らは、ガングリオシドをＳＰＧ１１病態の進行を予防するか遅らせるための推定上の標的として同定する。ガングリオシドの蓄積はＳＰＧ１１患者に限定されず、ＳＰＧ４およびＳＰＧ７患者の脳にも認められ、ガングリオシドが様々な細胞経路に影響を与える遺伝子における突然変異によって引き起こされる様々な形態のＨＳＰにおける治療標的であることを示唆している。

材料および方法

Ｓｐｇ１１ノックアウトマウスの作製および繁殖
Ｓｐｇ１１ノックアウトマウスは先に記載したように作製した（Ｓｃｈｎｕｔｇｅｎら，Ｎａｔ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌ．２００３年５月；２１（５）：５６２－５）。遺伝子標的化ベクターは、エクソン３２にｃ．６０５２Ｃ＞Ｔおよびｃ．６０６１Ｃ＞Ｔ置換を有するマウスのエクソン３２～エクソン３４（ｓｖ１２９の遺伝的背景）に対応する断片を逆方向にイントロン３４の中に挿入することによって構築した（図１Ａ）。ＭＣＩ－１２９Ｓｖ／Ｐａｓ ＥＳ細胞株を得られた構築物でトランスフェクトし、サザンブロット法およびＰＣＲによって選別した。相同な組換え型クローンを胚盤胞に注射した。キメラマウスをＣ５７ＢＬ／６雌と交配させて生殖細胞系列伝達を得た。ネオマイシン（Ｎｅｏ）選択カセットをフリッパーゼ（ｆｌｐ）発現マウスと交配させることによって除去した。ＣＭＶプロモーターの制御下でマウスを、Ｃｒｅリコンビナーゼを発現する系統と交配させることによって、エクソン３２を有する停止突然変異体のユビキタス挿入（ubiquitous insertion）を達成した。次いで、ヘテロ接合体マウスを１０世代にわたってＣ５７ＢＬ／６Ｎマウスと戻し交配した。

５’－ＧＣＣＡＡＧＧＴＡＴＧＣＡＣＣＡＧＡＣＧＧＧＧ－３’（配列番号１）および５’－ＴＣＣＴＧＣＣＣＴＴＣＡＣＣＡＣＧＴＣＡＧＧ－３’（配列番号２）プライマーを用いるＰＣＲによってジェノタイピングを行った。無効および野生型対立遺伝子のそれぞれのために４９３ｂｐおよび４３４ｂｐのＰＣＲ産物が得られた。マウスを同じ性別群の中に収容し、食物および水に制限なくアクセスできる状態で１２時間の明／１２時間の暗サイクルで維持した。

行動的評価
全ての行動手順を午前８：００と午後１：００との間に行った。実験コホート中のマウスをそれらの遺伝子型に関わらずランダムに試験することによって偏りを最小限に抑えた。足底角（ＦＢＡ）を測定するために、マウスを暗箱および通常食に通じる水平の廊下を歩くように訓練した。マウスを４回の歩行中に個々にパナソニック製のフルＨＤカメラＨＣ－Ｖ７２０で撮影した。後足の足尖離地位置におけるＦＢＡを、記録からの単一のビデオフレームを用いてＩｍａｇｅＪで測定した。トレッドミル試験を４×１６ｃｍのトレッドミルを含むプラスチックチャンバーからなる装置（ＣｌｅｖｅｒＳｙｓ社）を用いて行った。これらのマウスを１０ｃｍ．ｓ^－１の制御された速度で個々に試験した。１分間の馴化期の後に、マウスの歩行を２０秒間（８０フレーム／秒、ＢＣａｍ）記録した。歩行をＧａｉｔＳｃａｎソフトウェア（ＣｌｅｖｅｒＳｙｓ社）で解析した。運動協調性および平衡をロータロッド装置（加速モデルＬＥ８２００、Ｂｉｏｓｅｂ社）で評価した。マウスを４ｒｐｍの開始速度で加速ロッドの上に置いた。５分以内に４０ｒｐｍの最終速度に達した。試行間を１５分間隔にして１日当たり５回の試行で２日間連続でマウスを試験した。マウスが棒の上に留まることができた持続時間を記録した。Ｙ迷路および恐怖条件付け試験を用いて認知機能を監視した。Ｙ迷路は、同じ距離だけ分離された等しい長さの３つの透明のアーム（４０ｃｍの長さ、２０ｃｍの高さ、１０ｃｍの幅、１２０°）からなる。部屋の中に視覚的手がかりを置いた。迷路の１つのアーム（アームＢ）を取外し可能な不透明な仕切りで封鎖し、マウスを迷路の中心に向かう装置の開始アーム（アームＡ）の中に個々に置いた。このマウスが迷路の中を自由に歩くのを許した。マウスが開放されているアーム（アームＣ）の末端に到達したら、仕切りを適所に置いてマウスを保持する。１分後に、マウスを開始アーム（アームＡ）に再びすぐに置き、仕切りを除去して２つの選択肢を与えた。交替を未訪問のアーム（アームＢ）内への自発的進入として定めた。それどころか、既に探索済みのアーム（アームＣ）内への再進入はエラーと見なした。音減衰箱（恐怖条件付けシステムシリーズ４６０００（Ｆｅａｒ Ｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇ Ｓｙｓｔｅｍｓ Ｓｅｒｉｅｓ ４６０００）、Ｕｇｏ Ｂａｓｉｌｅ ＳＲＬ社、コメーリオ、イタリア）の中に置いたプレキシガラスチャンバー（１７×１７×２５ｃｍ）において文脈的恐怖条件付けを行った。チャンバーの壁は取外し可能なチェッカーボード文脈で覆われている。そのチャンバーの底は、スクランブルド・ショック発生器に接続されたステンレス鋼製のグリッド床からなる（棒は直径が２ｍｍであり、１ｃｍ間隔で離間されている）。訓練はマウスを訓練文脈の中に置くことにより開始し、すくみ反応のベースラインを最初の１２０秒間でスコア化した。次いで、２回の電気ショック（２秒間、６０秒の間隔を空けて０．６２ｍＡ）をＡｎｙＭａｚｅソフトウェアの制御下で送った。訓練セッションの終了はすくみ反応を記録した１２０秒間で構成されていた。文脈的恐怖条件付けを訓練から２４時間後に、マウスを訓練チャンバーに戻し、かつすくみ反応を電気ショックなしで１８０秒間スコア化することによって試験した。

抗体
研究で使用した抗体は、ウサギ抗スパタクシン（Ｐｒｏｔｅｉｎ Ｔｅｃｈ社）、ウサギ抗スパスチジン（Ｍｕｒｍｕら，２０１１ Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ．２０１１年７月；４７（３）：１９１－２０２）、マウス抗α－チューブリン（Ａｂｃａｍ社）、マウス抗ＮｅｕＮ（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社）、ウサギ抗ＧＦＡＰ（ＤＡＫＯ社）、モノクローナルマウス抗カルビンジン（１：３００、Ｓｗａｎｔ社）、ラット抗Ｌａｍｐ１（クローン１Ｄ４Ｂ）、マウス抗Ｌａｍｐ１（クローンＨ５Ｇ１１、Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）、マウス抗クラスリン（クローンＸ－２２、Ａｂｃａｍ社；クローン２３、ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社）、ウサギ抗Ｐａｘ－６（Ｃｏｖａｎｃｅ社）、ウサギ抗ｓｏｘ２（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社）、マウス抗ｏｃｔ４（Ｓａｎｔａ Ｃｒｕｚ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社）、マウス抗Ｔｒａ１－６０（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社）、ウサギ抗ＰＩＰ５Ｋ１Ｂ（Ｐｒｏｔｅｉｎｔｅｃｈ社）、ウサギ抗ダイナミン１（Ａｂｃａｍ社）、マウス抗ＧＲＰ７８（ＢＤ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅｓ社）、マウス抗ｐ６２（Ａｂｃａｍ社）、ウサギ抗カテプシンＤ（Ａｂｃａｍ社）、ウサギ抗ＬＣ３（Ｎｏｖｕｓ Ｂｉｏｌｏｇｉｃａｌｓ社）、ウサギ抗ｖ－Ｇｌｕｔ１（Ｓｙｎａｐｔｉｃ Ｓｙｓｔｅｍｓ社）、マウス抗β－ＩＩＩチューブリン（クローンＴＵＪ１、Ｃｏｖａｎｃｅ社）、マウス抗ＧＭ２（Ｄｏｂｒｅｎｉｓら，１９９２；Ｎａｔｏｌｉら，１９８６）（Ｄｏｂｒｅｎｉｓ博士から贈呈されたもの）およびマウス抗ＧＭ３（Ｃｏｓｍｏ Ｂｉｏ社）、マウス抗ＧＤ２（Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社）、およびマウス抗ＧＤ３（Ｉｎｖｉｔｒｏｇｅｎ社）であった。免疫ブロット法のために、二次抗体を西洋ワサビペルオキシダーゼ（Ｊａｃｋｓｏｎ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社）またはフルオロクロム（ＩＲ－ｄｙｅ ８００またはＩＲ－ｄｙｅ ６８０；ＬＩ－ＣＯＲ社）と結合させた。免疫蛍光のために使用した二次抗体はＬｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社製であった。

免疫組織化学分析
１／６の２％キシラジン（ロンプン（Ｒｏｍｐｕｎ））および１／３のケタミン（１０ｍｇ．ｍｌ^－１、Ｉｍａｌｇｅｎ １０００）のリン酸緩衝食塩水（ＰＢＳ）溶液の腹膜内注射によってマウスを麻酔し、４％パラホルムアルデヒドのＰＢＳ溶液で心臓内灌流を行った。脳を解剖し、４％パラホルムアルデヒド中で２４時間インキュベートすることによって後固定した。脳切片（２０μＭ）を凍結ミクロトーム（Ｍｉｃｒｏｍ ＨＭ４５０、Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）で切断し、４℃の０．０２％アジ化ナトリウムのＰＢＳ溶液中に維持した。ブロッキング溶液中で９０分間インキュベートした後に、切片を２％ＢＳＡ／０．２５％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００のＰＢＳ溶液中で一次抗体と共に４℃で一晩インキュベートした。洗浄後、この切片を二次抗体と共に室温で９０分間インキュベートし、Ｆｌｕｏｒｏｍｏｕｎｔ－Ｇ封入剤（Ｓｏｕｔｈｅｒｎ Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ社）の中に封入した。一次抗体の非存在下でのインキュベーションによって染色特異性を決定した。２０×対物レンズを備えたＮａｎｏＺｏｏｍｅｒ ２．０－ＲＳ（Ｈａｍａｍａｔｓｕ社）により画像を取得した。ＩｍａｇｅＪソフトウェアを用いて各一次運動野層中のニューロンおよびアストロサイトの数を決定した。同一の輝度、コントラストおよび色バランス調整を全ての群に適用した。６０×対物レンズを備えたＯｌｙｍｐｕｓ ＦＶ－１０００共焦点レーザー走査型顕微鏡によって共焦点画像を取得した。自家蛍光は４８８ｎｍのレーザーによる励起によって誘発された。

リピドーム解析
６週齢のＳｐｇ１１^－／－マウスおよびＳｐｇ１１^＋／＋マウスの大脳皮質を処理し、先に記載したように解析した（Ｓｅｙｅｒら，Ｍｅｔａｂｏｌｏｍｉｃｓ．２０１６；１２：９１）。液体クロマトグラフィ－高分解能質量分析後に、試料を負イオンモードでの高エネルギー衝突解離（ＨＣＤ）タンデム質量分析実験（ＭＳ／ＭＳ）のために再注入し、その機器を標的モードに設定し、インクルージョンリストを用いた。単離幅はｍ／ｚ０．４に設定し、正規化された衝突エネルギーは２６％であり、質量解像度はｍ／ｚ２００で１７，５００ＦＷＨＭに設定した。ＨＣＤ質量スペクトルを手作業で調べてガングリオシド種の同一性を確認した。

リソソーム画分
先に記載した自己形成（ｓｅｌｆ－ｇｅｎｅｒａｔｅｄ）パーコール勾配手順に従って、リソソーム高含有画分を８ヶ月齢の動物の全脳から精製した（Ｇｒａｈａｍ Ｊ．Ｍ．，Ｃｕｒｒ Ｐｒｏｔｏｃ Ｃｅｌｌ Ｂｉｏｌ，２００１）（図１５Ａ）。この手順の終了時に、リソソーム高含有画分をＰＢＳで一度洗浄し、タンパク質をＢＣＡキット（Ｐｉｅｒｃｅ社）で定量化した。先に記載したようにウェスタンブロットを行った（Ｅｓｔｅｖｅｓ Ｔ．ら，Ｔｈｅ Ａｍｅｒｉｃａｎ Ｊ ｏｆ Ｈｕｍａｎ Ｇｅｎｅｔｉｃｓ，２０１４）。Ｆｏｌｃｈ手順に従ってリソソーム高含有画分を抽出した（Ｆｏｌｃｈ Ｊ．ら，Ｊ Ｂｉｏｌ Ｃｈｅｍ，１９５７）。ガングリオシドを含有する脱塩されたＦｏｌｃｈ上相（水相）を負イオン化モードの高解像度質量分析（ＬＣ－ＨＲＭＳ）に連結された液体クロマトグラフィで解析して、脱プロトン化一価イオン［Ｍ－Ｈ］^－および二価イオン［Ｍ－_２Ｈ］^２－を検出した。データを処理し、先に記載したように解析した（Ｓｅｙｅｒ Ａ．ら，Ｍｅｔａｂｏｌｏｍｉｃｓ，２０１６）。各脂質の相対量をそのクロマトグラフピークの面積として定量化し、それを各リソソーム高含有画分中のタンパク質の濃度に対して正規化した。リソソーム画分を自己形成パーコール勾配を用いてさらに分離した。リソソーム画分をパーコールと混合して５０％パーコール（ｖ：ｖ）溶液を得て、２０，０００ｇで９０分間遠心分離した。等体積の８つの画分を上から回収し、ウェスタンブロットで解析した。

ニューロンの初代培養
皮質ニューロンのマウス初代培養物を培養の２日目からミグルスタット（Ｔｏｃｒｉｓ社）で処置した。培地を３日ごとに変えた。インビトロでの６日間の培養後に、先に記載したように免疫染色を行った（Ｍｕｒｍｕら，２０１１）。ＧＭ３シンターゼの発現を下方制御するために、ｍｉＲＮＡを発現するベクターをＢｌｏｃｋ－ｉｔキット（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を用いて作製した。ｍｉＲＮＡ配列は、ＡＴＧＴＡＣＡＧＧＡＧＣＣＡＧＡＣＴＣＣＡＧＴＴＴＴＧＧＣＣＡＣＴＧＡＣＴＧＡＣＴＧＧＡＧＴＣＴＣＴＣＣＴＧＴＡＣＡＴ（ｍｉＲＮＡ ＧＭ３Ｓ－１）（配列番号３）、ＡＴＡＡＣＡＧＡＧＣＣＡＴＡＧＣＣＧＴＣＴＧＴＴＴＴＧＧＣＣＡＣＴＧＡＣＴＧＡＣＡＧＡＣＧＧＣＴＧＧＣＴＣＴＧＴＴＡＴ（ｍｉＲＮＡ ＧＭ３Ｓ－２）（配列番号４）、ＴＣＴＡＣＡＧＡＧＣＣＧＡＴＣＴＧＣＴＴＣＧＴＴＴＴＧＧＣＣＡＣＴＧＡＣＴＧＡＣＧＡＡＧＣＡＧＡＧＧＣＴＣＴＧＴＡＧＡ（ｍｉＲＮＡ Ｎｅｕ１－１）（配列番号５）およびＣＴＡＣＧＡＴＧＡＡＧＧＣＴＧＴＡＧＡＧＧＧＴＴＴＴＧＧＣＣＡＣＴＧＡＣＴＧＡＣＣＣＴＣＴＡＣＡＣＴＴＣＡＴＣＧＴＡＧ（ｍｉＲＮＡ Ｎｅｕ１－２）（配列番号６）であった。Ｎｅｏｎトランスフェクションシステム（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）を用いて、ニューロンをｍｉＲＮＡおよびＧＦＰを発現するベクターでトランスフェクトした。ｍｉＲＮＡ配列の効率は、製造業者の説明書に従ってＮＩＨ－３Ｔ３細胞をトランスフェクトし、かつＬｉｇｈｔＣｙｃｌｅｒ４８０装置（Ｒｏｃｈｅ社）を用いる定量的ＲＴ－ＰＣＲを行うことにより確認した。先に記載したようにインビトロでの６日間の培養後に免疫染色を行い（Ｍｕｒｍｕ Ｒ．Ｐ．ら，Ｍｏｌ Ｃｅｌｌ Ｎｅｕｒｏｓｃｉ，２０１１）、対物レンズＰｌａｎ－Ａｐｏｃｈｒｏｍａｔ ６３×（Ｎ．Ａ．１．４）を備えたＡｐｏｔｏｍｅ２顕微鏡（Ｚｅｉｓｓ社）またはＯｌｙｍｐｕｓ ＦＶ－１０００共焦点顕微鏡を用いて画像を取得した。Ｎｉｋｏｎ Ｅｃｌｉｐｓｅ Ｔｉ－Ｕ顕微鏡で得られた画像に対して一般強度測定（Ｇｅｎｅｒａｌ Ｉｎｔｅｎｓｉｔｙ Ｍｅａｓｕｒｅｍｅｎｔ）手順を用いる自動化ＡｒｒａｙＳｃａｎ ＸＴＩ装置（Ｔｈｅｒｍｏ－Ｆｉｓｈｅｒ社）またはＩｍａｇｅＪのいずれかを用いて、ガングリオシドレベルの定量化を行った。培地に２００μＭのグルタミン酸（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社）を添加することによって神経細胞死が誘導された。リソソームとのガングリオシド染色の共局在化を、ＩｍａｇｅＪを用いて定量化した。Ｌａｍｐ１染色チャネルからマスクを作製し、対応するガングリオシド蛍光を全ての細胞中の総ガングリオシド蛍光の割合として定量化した。２００μＭのグルタミン酸（Ｓｉｇｍａ－Ａｌｄｒｉｃｈ社）を培地に添加することによって神経細胞死が誘導された。神経細胞死を定量化するために、グルタミン酸処置から３０時間後に全てのニューロンを１００ｎＭのＣｅｌｌ ｔｒａｃｋｅｒ Ｄｅｅｐ Ｒｅｄ （Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）で標識し、死細胞をヨウ化プロピジウム（５μＭ）で標識した。あるいは、グルタミン酸処置から３０時間後に、ニューロンを４％パラホルムアルデヒドで固定し、Ｔｕｊ－１抗体で免疫染色した。ウェル当たりのＴｕｊ－１陽性細胞の数を、コンパートメント解析手順を用いて自動化ＡｒｒａｙＳｃａｎ ＸＴＩ装置（Ｔｈｅｒｍｏ－Ｆｉｓｈｅｒ社）で定量化した。グルタミン酸で処置したニューロンと処置していないニューロンとを比較することによって神経細胞死を定量化した。

細胞の再プログラミング、特性評価およびｉＰＳの分化
皮膚生検を３人の健康な女性対象および３人のＳＰＧ１１女性患者から採取した。エピソームベクターを用いるＯＣＴ３／４、Ｌ－ＭＹＣ、ＳＯＸ２、ＫＬＦ４およびＬＹＮ２８の一過性発現によって線維芽細胞をｉＰＳ細胞に再プログラミングした。完全なＥ８培地中のＧｅｌｔｒｅｘマトリックス（Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）上でｉＰＳ細胞を培養した。ｉＰＳ細胞の多能性を評価するために、それらを胚様体（ＥＢ）に分化させた。ｉＰＳｃクローンをコラゲナーゼ処置によって回収し、ＦＧＦ２を含まないＥ８培地に再懸濁した。２週間後、ＥＢをポリオルニチン（２０μｇ／ｍｌ）およびラミニン（１０μｇ／ｍｌ）で覆ったカバーガラスの上に播種し、さらに７日間インキュベートした。ＥＢを３種類の胚葉：外胚葉（Ｎｅｓｔｉｎ、Ｍｉｌｌｉｐｏｒｅ社）、中胚葉（α－平滑筋アクチン、Ａｂｃａｍ社）および内胚葉（α－フェトプロテイン、細胞情報伝達）のマーカーについて評価した。ｉＰＳ細胞およびＥＢをリアルタイムｑＰＣＲアッセイ（ＴａｑＭａｎ ｈＰＳＣ Ｓｃｏｒｅｃａｒｄ Ｐａｎｅｌ、Ｌｉｆｅ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｉｅｓ社）でも解析して多能性マーカーの発現を確認した。ｉＰＳ細胞を前脳神経前駆細胞に分化させ、次いで皮質ニューロンの富化集団に分化させた。ニューロンを７週間増殖させ、固定し、かつ免疫染色のために処理した。Ｚｅｉｓｓ ａｐｏｔｏｍｅシステム（ＡｘｏＶｉｓｉｏｎ ＬＥ Ｒｅｌ ４．５）を用いて画像を取得した。ＩｍａｇｅＪを使用してリソソームとのＧＭ２またはＧＭ３染色の共局在化を定量化した。あるいは、先に記載した手順に従って、ｉＰＳ細胞を脳オルガノイドに分化させた（Ｐａｓｃａ Ａ．Ｍ．ら，Ｎａｔ．Ｍｅｔｈｏｄｓ ２０１５）。インビトロで９０日後、オルガノイドを４％パラホルムアルデヒドで２４時間固定し、凍結保存し、かつ－８０℃で貯蔵した。マウス脳切片について記載されているように、オルガノイド切片（１２μＭ）をクリオスタット（ＬＥＩＣＡ＿ＣＭ３０５０Ｓ）で切断し、かつ免疫染色のために処理した。６０×対物レンズ（ＮＡ １．４）を備えたＬｅｉｃａ ＳＰ－８共焦点顕微鏡を用いて画像を取得した。マウス脳切片に関してガングリオシド蓄積の定量化を行った。

電子顕微鏡法
標準的な電子顕微鏡分析のために、ＳＰＧ１１患者から得られた前頭皮質のホルマリンで固定した試料（Ｄｅｎｏｒａら，Ｂｒａｉｎ．２０１６年６月；１３９（Ｐｔ ６）：１７２３－３４）を脱パラフィン処理し、２％グルタルアルデヒドの０．１Ｍのリン酸緩衝液（ｐＨ７．４）中でさらに２４時間インキュベートすることによって固定した。マウス運動野の試料を１％グルタルアルデヒド中でインキュベートすることによって固定した。次いで、試料を２％四酸化オスミウムで後固定し、脱水し、かつアラルダイトで包理した。プレエンベディング免疫組織化学も行った。超薄切片を切断して酢酸ウラニルおよびクエン酸鉛で染色し、Ｈｉｔａｃｈｉ透過電子顕微鏡で調べた。ＩｍａｇｅＪを用いて画像を解析して、細胞質およびリソソームの表面積および各切片中のリソソームの数を定量化した。

ウェスタンブロット分析
細胞または組織を、１００ｍＭのＮａＣｌ、１０ｍＭのＴｒｉｓ ＨＣｌ（ｐＨ７．４）、１ｍＭのＥＧＴＡ、２ｍＭのＭｇＣｌ_２、１％ＳＤＳおよびＨａｌｔ（商標）プロテアーゼ阻害剤カクテル（Ｔｈｅｒｍｏ Ｓｃｉｅｎｔｉｆｉｃ社）中、室温で５分間インキュベートすることによって溶解した。ウェスタンブロットを行い、シグナルを化学発光基質（ＳｕｐｅｒＳｉｇｎａｌ Ｗｅｓｔ Ｄｕｒａ）で可視化するか、Ｏｄｙｓｓｅｙ ＣｌＸ（ＬＩ－ＣＯＲ社）を用いて得た。シグナル強度をＩｍａｇｅＪソフトウェアを用いて定量化した。

ゼブラフィッシュのモデリング
先に記載したように、ゼブラフィッシュにおけるＳＰＧ１１病態のモデリングを行った（Ｍａｒｔｉｎ，２０１２）。スプライスドナー部位、すなわちｚｓｐｇ１１ｓｐｌ（５’－ＡＣＣＡＡＴＣＡＴＡＧＣＧＴＣＴＣＧＴＡＣＣＣＴＣ－３’－配列番号８８）を標的にするモルホリノを用いてｚｓｐｇ１１のノックダウンを行った。５つのミスマッチヌクレオチドを含む対照モルホリノｍｍｚｓｐｇ１１ｓｐｌ（５’－ＡＣｇＡＡＴｇＡＴＡＧＣｃＴＣＴＣＧＴＡｇＣｇＴＣ－３’－配列番号８９）を使用して、ｚｓｐｇ１１のノックダウンから得られた特異的な表現効果を注射またはモルホリノ毒性による非特異的な効果と区別した。１ｎｌのｚｓｐｇ１１ｓｐｌまたはｍｍｚｓｐｇ１１ｓｐｌの１．２ｍＭ溶液を１細胞期または２細胞期の胚の卵黄の中に注射した。注射後、胚を１００または３００ｕＭのミグルスタット（Ｔｏｃｒｉｓ Ｂｉｏｓｃｉｅｎｃｅ社）または対照群の場合はＤＭＳＯを含有するＥ３培地に２８℃で維持した、。２４ｈｐｆ（受精後時間）に、細い鉗子を用いてそれらを手作業でコリオン除去した。胚の形態を４８ｈｐｆにわたって観察した。運動活性を定量化するために、本発明者らは先に記載したように、明白な発生異常を有しない魚において受精から４８時間後に接触誘発性逃避反応を監視した（Ｍａｒｔｉｎ，２０１２）。画像を毎秒５００枚の画像で取得した。ＩｍａｇｅＪ手動追跡プラグインを用いて、接触誘発性逃避反応の追跡を行った。４％パラホルムアルデヒドのＰＢＳ溶液中、室温で２時間固定した４８ｈｐｆの胚を用いる全載インビボ免疫組織化学によってＧＭ２ガングリオシドレベルの評価を行った。胚をＰＢＳ－０．１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００（ＰＢＳＴ）で３回（各５分間）洗浄した。胚を１％ＤＭＳＯおよび１％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００（ＰＢＤＴ）を含む５％正常ヤギ血清のＰＢＳ溶液で１時間ブロッキングし、次いで、ＧＭ２一次抗体を含有するブロッキング溶液中、４℃で一晩インキュベートした。室温のＰＢＳＴで４回洗浄した後、胚をＡｌｅｘａ－４８８（Ｔｈｅｒｍｏ Ｆｉｓｈｓｅｒ社）に結合させた抗ＩｇＭ抗体と共にＰＢＤＴ中、室温で一晩インキュベートした。観察前に、胚をＰＳＢＴで３回洗浄し、Ｆｌｕｏｒｏｍｏｕｎｔ（商標）水性封入剤（Ｓｉｇｍａ Ａｌｄｒｉｃｈ社）の液滴の中に封入した。全載胚を共焦点顕微鏡（Ｌｅｉｃａ ＳＰ８，４０Ｘ，ＮＡ０．８）で画像化した。画像取得のために幼虫を同じ位置に方向づけて定量化における潜在的な偏りを最小限に抑えた。画像スタックを０．３５μＭの刻み幅で収集した。ＩｍａｇｅＪソフトウェアを用いて、終脳における蛍光の定量化のために、Ｚスタックの最大値投影を使用した。１００画素×１００画素の四角形の中の各モルファントについて蛍光強度の平均および分散を定量化した。

患者の脳の免疫細胞化学
３人の罹患患者（ＳＰＧ４、ＳＰＧ７およびＳＰＧ１１）および１人の非神経疾患患者からの前頭皮質をホルマリンに固定した。組織切片をビブラトーム（４０μＭ）で切断し、リン酸緩衝生理食塩水（ＰＢＳ）溶液中に回収した。内因性ペルオキシダーゼを０．１％ＴｒｉｔｏｎＴＭ Ｘ－１００（Ｓｉｇｍａ社）、１０％メタノールおよび０．００３％Ｈ_２Ｏ_２を含有するＰＢＳ中、室温で２０分間インキュベートして失活させた。脳切片をＰＢＳで３回洗浄し、ブロッキング溶液（ＰＢＳ、０．４％Ｔｒｉｔｏｎ Ｘ－１００、４％正常ヤギ血清、２％ウシ血清アルブミン）中、室温で１時間インキュベートした。切片を同じブロッキング溶液で１／１５０に希釈した抗ＧＭ２ ＩｇＭと共に４℃で２４時間インキュベートした。切片をＰＢＳで３回洗浄し、ブロッキング溶液で希釈した抗ＩｇＭビオチン化二次抗体（１：２００）と共に室温で２時間インキュベートした。結合された抗体を基質として３，３’－ジアミノベンジジン四塩酸塩（ＤＡＢ Ｍｅｔａｌ Ｃｏｎｃｅｎｔｒａｔｅ、Ｂｉｏｇｅｎｅｘ社）を用いるＡＢＣ増幅システム（Ｖｅｃｔａｓｔａｉｎ ＡＢＣキット、Ｖｅｃｔｏｒ Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ社）を用いて可視化した。これらの切片をエタノールおよびキシレン溶液で２回脱水し、Ｅｕｋｉｔｔで封入した。

統計学
コルモゴルフ・スミルノフ検定を最初に行ってデータが正常に分散されているかを判定した。データセットをノンパラメトリックデータのためにクラスカル・ワリス検定を用い、かつパラメトリックデータのために両側スチューデントｔ検定または一元配置分散分析を用いて比較した。０．０５以下のｐ値を統計的に有意であるとみなした。リピドームのデータをｌｏｇ１０変換後に、Ｒソフトウェアにおいて標準的なノンパラメトリック検定を用いて解析した。マン・ホイットニーの検定を用いて遺伝子型間の差を評価した。０．１以下のｐ値を統計的に有意であるとみなした。

倫理審査の承認
動物のケアおよび治療は、実験動物の留置、使用および倫理的治療のための欧州法（Ｎ°２０１０／６３／ＵＥ）および国内（農林水産省、フランス）のガイドラインに従った。動物に対する全ての実験が地方の倫理委員会によって認可されており（Ｃｅ５／２０１２／０４５認可番号）、許可された人によって行われた。その家族の書面によるインフォームドコンセント（ヒト皮質試料については認可ＳＳＴ０４／１１／０４０５２０１１、皮膚生検については認可ＲＢＭ－１－０２９）と共に倫理委員会によって認可されている手順により患者由来の物質を得た。

Claims (3)

1. 少なくとも１種のガングリオシド代謝阻害剤を含む、運動ニューロン疾患の治療における使用のための組成物であって、前記運動ニューロン疾患はＳＰＧ１１であり、前記ガングリオシド代謝阻害剤は、Ｎ－ブチルデオキシノジリマイシン（ＮＢ－ＤＮＪ）または（Ｓ）－キヌクリジン－３－イル （２－（２－（４－フルオロフェニル）チアゾール－４－イル）プロパン－２－イル）カルバメート （Ｓ）－２－ヒドロキシスクシネート（ＧＺ４５２）であるグルコシルセラミドシンターゼ阻害剤である、組成物。
2. 前記組成物は、経口投与、局所投与、経皮投与、筋肉内投与、皮下投与、静脈内投与、非経口投与、鼻腔内投与または脊髄周投与によって投与される、請求項１に記載の組成物。
3. 薬学的に許容される賦形剤をさらに含む、請求項１～２のいずれか１項に記載の組成物。
   

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