JP7058407B2 - 経口組成物 - Google Patents
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[1]3-ヒドロキシ-3-メチル酪酸カルシウムと、ビタミンDと、グルコースとを含有することを特徴とする経口組成物。
[2]筋肉の増強に用いられる筋肉増強用であることを特徴とする[1]記載の経口組成物。
[3]筋肉の疲労回復に用いられる筋肉疲労回復用であることを特徴とする[1]又は[2]記載の経口組成物。
[4]チュアブルタブレットであることを特徴とする[1]~[3]のいずれか記載の経口組成物。
本発明の経口組成物におけるHMBCaは、公知の方法により合成したものや、市販品を用いることができる。市販品としては、食品に適用可能なものであれば限定されない。
本発明の経口組成物におけるビタミンDは、脂溶性ビタミンの1種であり、植物由来であっても、動物由来であっても、合成品であってもよい。ビタミンDとしては、ビタミンD2(エルゴカルシフェロール)、ビタミンD3(コレカルシフェロール)、これらの誘導体が挙げられ、ビタミンD3が特に好ましい。一般的に、ビタミンD2は植物(植物性食品)に多く含まれ、ビタミンD3は動物(動物性食品)に多く含まれる。
本発明の経口組成物におけるグルコースは、L-グルコースでも、D-グルコースでもよいが、D-グルコース(ブドウ糖)が好ましい。ブドウ糖としては、無水結晶ブドウ糖、含水結晶ブドウ糖、精製ブドウ糖、液状ブドウ糖が挙げられ、デンプンを原料とした酸糖化法や酵素糖化法などによって得ることができる。本発明においては、市販のグルコースを用いることができる。
本発明の経口組成物は、必要に応じて、経口用として許容される上記成分以外の他の成分を含有してもよい。このような他の成分としては、例えば、水溶性ビタミン(ビタミンB1、B2、B3、B5、B6、B12、B13、B15、B17、ビオチン、コリン、葉酸、イノシトール、PABA、ビタミンC、ビタミンP)、油溶性ビタミン(ビタミンA、E、K)等のビタミン類;カルシウム、マグネシウム、リン、鉄等のミネラル類;タウリン、ニンニク等に含まれる含硫化合物;ヘスペリジン、ケルセチン等のフラバノイド或いはフラボノイド類;コラーゲン等のタンパク質;ペプチド;アミノ酸;動物性油脂;植物性油脂;動物・植物の粉砕物又は抽出物等を挙げることができる。
[実施例1]
試験1:筋芽細胞を用いた筋分化促進作用の評価
(2)トリプシン処理により浮遊させた細胞を、75cm2フラスコからコラーゲンコートした96ウェルプレートの各ウェルに10%(V/V)FBS含有DMEMを用いて1×104cells/wellの細胞密度で播種した。以下、DMEMはグルコース濃度1000mg/Lのものを用いた。
(3)37℃、5%CO2インキュベーター内で24時間前培養した。
(5)24時間培養後、RNeasy Mini Kit(QIAGEN製)を用いてRNAを回収し、ReverTra Ace(登録商標)qPCR RT Master Mix with gDNA Remover(東洋紡製)を用いてcDNAを合成した。
(6)得られたcDNAを鋳型として、Myogenin遺伝子(Myog)に対するプライマー(QIAGEN製)を用いて、QuantiNova SYBR Green PCR Kit(QIAGEN製)により定量リアルタイムPCRを行い、Myogenin遺伝子のmRNA発現量を測定した。内在性コントロールとして、GAPDHプライマー(QIAGEN製)を用いて、GAPDHのmRNA発現量を測定した。
ビタミンD3は、エタノールに溶解後、10%(V/V)FBS含有DMEMで希釈して、エタノール終濃度が0.1%(V/V)となるように調製し、フィルター滅菌した。その他の被験物質は、0.1%(V/V)エタノール及び10%(V/V)FBS含有DMEMに溶解後、フィルター滅菌した。
これらの各被験物質を含む溶液を0.1%(V/V)エタノール及び10%(V/V)FBS含有DMEMを用いて各被験物質が下記表1に示す濃度となるように調製した。なお、コントロールには、0.1%(V/V)エタノール及び10%(V/V)FBS含有DMEMを添加した。
(1)マウス筋芽細胞(C2C12)(理化学研究所バイオリソースセンター製)を37℃、5%CO2インキュベーター内で、10%FBS-DMEM培地により培養を行った。
(2)コラーゲンコート(東洋紡製)した96wellplateの各wellに12000cells/wellで播種し24時間前培養した。
(3)各wellより培地を除去後、2%HS-DMEMを200μL添加し72時間培養した。
(4)各wellより培地を除去後、2%HS-DMEMを200μL添加しさらに48時間培養した。これら一連の処理により、単核細胞である筋芽細胞は融合して、多核細胞である筋管細胞へと分化する。
(6)洗浄後、KRP bufferで所定の濃度(下記表2)に調整したサンプルを200μL添加し、16時間培養した。各サンプルは、試験1と同様に調製した。コントロールについても、試験1と同様である。
(7)培養後Cell Counting Kit-8(同仁化学研究所製)を用いて筋管細胞の賦活活性を測定した。
(1)マウス筋芽細胞(C2C12)(理化学研究所バイオリソースセンター製)を37℃、5%CO2インキュベーター内で、10%FBS-DMEM培地により培養を行った。
(2)コラーゲンコート(東洋紡製)した96wellplateの各wellに8000cells/wellで播種し24時間前培養した。
(3)各wellより培地を除去後、10%FBS‐DMEMで所定濃度(下記表3)に調整したサンプルを150μL添加し24時間培養した。各サンプルは、試験1と同様に調製した。コントロールについても、試験1と同様である。
(4)培養後、10%FBS‐DMEMで100μg/mlに調製したニトロプルシドナトリウムを50μL添加し、24時間培養した。なお、この工程においては、ニトロプルシドナトリウムの添加により細胞死を誘発した。
(5)培養後Cell Counting Kit-8(同仁化学研究所製)を用いて筋芽細胞の生存率を測定した。
Claims (4)
- 3-ヒドロキシ-3-メチル酪酸カルシウムと、ビタミンDと、グルコースとを含有することを特徴とする経口組成物であって、3-ヒドロキシ-3-メチル酪酸カルシウムとグルコースとの配合質量比が1:1.0~5.0である前記経口組成物(ただし、タンパク質を主成分として含有するものを除く)。
- 筋肉の増強に用いられる筋肉増強用であることを特徴とする請求項1記載の経口組成物。
- 筋肉の疲労回復に用いられる筋肉疲労回復用であることを特徴とする請求項1又は2記載の経口組成物。
- チュアブルタブレットであることを特徴とする請求項1~3のいずれか記載の経口組成物。
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Non-Patent Citations (3)
Title |
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J. Nutr. Biochem.,2001年,vol.12, no.11,pp.631-639 |
SCITEC NUTRITION CATALOG 2016:WOD CRUSHER MUSCLE FACTOR Forskolin, HMB & More,2016年,p.19 |
ビーレジェンド ホエイプロテイン フットボール リカバリー&アジリティ 1Kg,2016年07月26日,pp.1-3,URL: https://www.amazon.co.jp/%E3%83%93%E3%83%BC%E3%83%AC%E3%82%B8%E3%82%A7%E3%83%B3%E3%83%89-%E3%83%9B%E3%82%A8%E3%82%A4%E3%83%97%E3%83%AD%E3%83%86%E3%82%A4%E3%83%B3-%E3%83%95%E3%83%83%E3%83%88%E3%83%9C%E3%83%BC%E3%83%AB-%E3%83%AA%E3%82%AB%E3%83%90%E3%83%AA%E3%83%BC%EF%BC%86%E3%82%A2%E3%82%B8%E3%83%AA%E3%83%86%E3%82%A3-1Kg/dp/B01J3B5BN2 |
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