JP7058322B2 - 細菌感染症を治療するための化合物および方法 - Google Patents
細菌感染症を治療するための化合物および方法 Download PDFInfo
- Publication number
- JP7058322B2 JP7058322B2 JP2020512769A JP2020512769A JP7058322B2 JP 7058322 B2 JP7058322 B2 JP 7058322B2 JP 2020512769 A JP2020512769 A JP 2020512769A JP 2020512769 A JP2020512769 A JP 2020512769A JP 7058322 B2 JP7058322 B2 JP 7058322B2
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- alkyl
- mmol
- int
- oxo
- diazepine
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
Images
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
- C07D471/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains three hetero rings
- C07D471/18—Bridged systems
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
- C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
- C07D471/08—Bridged systems
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
- A61K31/439—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom the ring forming part of a bridged ring system, e.g. quinuclidine
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Oncology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
Description
本願は、2017年5月8日に出願された米国仮特許出願第62/502,867号の優先権を主張するものであり、上記出願の内容全体が参照により本明細書に組み込まれる。
本発明は米国保健福祉省の事前準備対応次官補局により授与された助成金番号IDSEP160030の下、政府の支援を受けてなされたものである。政府は本発明に一定の権利を有する。
1.化合物の全般的説明
ある特定の実施形態では、本開示は式I:
Xは、H、CN、C(O)NR1R2、NR1R2または任意選択でNHC(O)RgもしくはNHS(O)NH2で置換された(C1~C6)アルキルであり;
YはNOR3であるか;結合している原子と一緒になったR3およびXは、それぞれが(C1~C6)アルキル、C=O、C(O)OHおよびC(O)O(C1~C6)アルキルから選択される1つまたは複数の基で任意選択で置換された4~6員ヘテロシクリルまたは5~6員ヘテロアリールを形成し、上記(C1~C6)アルキルは任意選択で、OH、(C1~C6)アルコキシ、フェニルおよび5~6員ヘテロアリールから選択される1つまたは複数の基で置換されており、上記5~6員ヘテロアリールは任意選択で、NH2、NH(C1~C6)アルキルおよびN((C1~C6)アルキル)2で置換されており;
R1およびR2はそれぞれ独立に、水素、シアノ、C(O)NH2、NH2、OH、(C1~C6)アルコキシまたは任意選択で1つもしくは複数のR7で置換された(C1~C6)アルキルであり;
R3は、水素、C(O)(C1~C6)アルキル、C(O)NRdRe、SO2NH2、SO2OHまたは任意選択で1つもしくは複数のR7で置換された(C1~C6)アルキルであり;
R4、R5およびR6はそれぞれ独立に、水素、(C1~C6)アルキルまたはC(O)NRaRbであり、R4、R5およびR6に関する上記(C1~C6)アルキルは任意選択で、1つまたは複数のR7で置換されており、ただし、R4およびR5のうち少なくとも一方は水素ではなく、R4およびR5が結合している対応する窒素原子が、隣接する環原子と二重結合を介して結合している場合、R4およびR5は存在せず;
R7はそれぞれ独立に、ハロ、OH、ORc、(C1~C6)アルコキシ、CN、4~6員ヘテロシクリル、5~6員ヘテロアリール、フェニル、C(=NH)NH2、NHC(=NH)NH2、NRdRe、C(O)OH、C=NO(C1~C6)アルキルNH2、NHC(O)(C1~C6)アルキル、C(O)NRdRe、SO2RfおよびS(O)Rfから選択され、上記5~6員ヘテロアリールは任意選択で、NH2で置換されており、上記フェニルは任意選択で、NH2で置換されており;
Ra、Rb、RdおよびReはそれぞれ独立に、水素、OH、(C1~C6)アルキル、(C1~C6)アルコキシ、フェニル、OSO2OH、4~6員シクロアルキル、4~6員ヘテロシクリルまたは5~6員ヘテロアリールであり、Ra、Rb、RdおよびReに関する上記(C1~C6)アルキルおよび(C1~C6)アルコキシは任意選択でかつ独立に、OH、NH2、C(O)OH、C(O)O(C1~C6)アルキル、NHC(O)NH2、NHC(O)NH(C1~C6)アルキル、C(O)NH2、NHC(O)N((C1~C6)アルキル)2、NHC(O)(C1~C6)アルキル、NHC(O)ハロ(C1~C6)アルキル、4~6員ヘテロシクリル、5~6員ヘテロアリール、NH(C1~C6)アルキルおよびN((C1~C6)アルキル)2から選択される1つまたは複数の基で置換されており、Ra、Rb、RdおよびReに関する上記フェニル、4~6員ヘテロシクリル、4~6員シクロアルキルおよび5~6員ヘテロアリールならびにRa、Rb、RdおよびReに関する(C1~C6)アルキルおよび(C1~C6)アルコキシに関する上記5~6員の任意選択のヘテロアリール基は任意選択でかつ独立に、(C1~C6)アルキル、NH2、NH(C1~C6)アルキルおよび-N((C1~C6)アルキル)2から選択される1つまたは複数の基で置換されており;
Rcは、C(=NH)NH2、C(=NH)NH(5~6員ヘテロシクリル)、C(=NH)NH(C1~C6)アルキル、NHC(=NH)NH2、-NRdRe、C(O)NRdRe、SO2RfおよびSORfから選択される1つまたは複数の基で任意選択で置換されたフェニルであり、基C(=NH)NH(C1~C6)アルキルの上記(C1~C6)アルキルは任意選択で、NH2、NH(C1~C6)アルキルおよびN((C1~C6)アルキル)2から選択される1つまたは複数の基で置換されており;
Rfは水素または(C1~C6)アルキルであり;
Rgは、C=Oおよび(C1~C6)アルキルから選択される1つまたは複数の基で任意選択で置換された4~6員ヘテロシクリルである。
ハイフン(-)は、複数の結合点を有し得る化学基を記載するのに使用される場合、その基を定める変数の結合点を示す。例えば、-NRdReは、この基の結合点が窒素原子にあることを意味する。
特に明記されない限り、本明細書に記載される化合物の互変異性型はいずれも本発明の範囲内に含まれる。
本明細書で使用される「治療」、「治療する」および「治療すること」という用語は、本明細書に記載される疾患もしくは障害またはその1つもしくは複数の症状を正常な状態に戻すこと、軽減すること、その発現を遅らせること、またはその進行を阻害することを指す。いくつかの実施形態では、1つまたは複数の症状が発現した後に治療を実施し得る(すなわち、治療的治療)。他の実施形態では、症状がみられなくても治療を実施し得る。例えば、易感染性の個体には、(例えば、症状の既往を考慮し、かつ/または特定の生物体への曝露もしくはその他の易感染性因子を考慮して)症状が発現する前に治療を実施し得る(すなわち、予防的治療)。また、例えば症状の再発を予防する、または遅らせるため、症状が解消した後も治療を継続し得る。
第1の実施形態では、本開示は、式I:
第2の実施形態では、Yは式Iの化合物のNOR3であり、R3およびXは、それが結合している原子と一緒になって、(C1~C6)アルキル、C=OまたはC(O)OHから選択される1つまたは複数の基で任意選択で置換された4~6員ヘテロシクリルを形成し、上記(C1~C6)アルキルは任意選択で、OH、フェニルまたは5~6員ヘテロアリールで置換されており、上記5~6員ヘテロアリールは任意選択で、NH2で置換されており、残りの変数は、式Iに関して上に記載した通りのものである。あるいは、Yは式Iの化合物のNOR3であり、R3およびXは、それが結合している原子と一緒になって、それぞれが(C1~C4)アルキル、C=OまたはC(O)OHから選択される1つまたは複数の基で任意選択で置換された4,5-ジヒドロ-1,2,4-オキサジアゾールまたは4,5-ジヒドロイソオキサゾールを形成し、上記(C1~C4)アルキルは任意選択で、OH、フェニルまたはチアゾリルで置換されており、上記チアゾリルは任意選択で、NH2で置換されており、残りの変数は、式Iに関して上に記載した通りのものである。
Xは、H、CN、C(O)NR1R2、NR1R2または(C1~C6)アルキルであり;
R1およびR2はそれぞれ独立に、水素、シアノまたは任意選択で1つもしくは複数のR7で置換された(C1~C6)アルキルであり;
R3は、水素または任意選択で1つもしくは複数のR7で置換された(C1~C6)アルキルであり;
R4、R5およびR6はそれぞれ独立に、水素、(C1~C6)アルキルまたはC(O)NRaRbであり、R4、R5およびR6に関する上記(C1~C6)アルキルは任意選択で、1つまたは複数のR7で置換されており、ただし、R4およびR5のうち少なくとも一方は水素ではなく、R4およびR5が結合している対応する窒素原子が、隣接する環原子と二重結合を介して結合している場合、R4およびR5は存在せず;
R7はそれぞれ独立に、ハロ、OH、ORc、(C1~C6)アルコキシ、CN、4~6員ヘテロシクリル、5~6員ヘテロアリール、フェニル、C(=NH)NH2、NHC(=NH)NH2、NRdRe、C(O)NRdRe、SO2RfおよびS(O)Rfから選択され;
Ra、Rb、RdおよびReはそれぞれ独立に、水素、(C1~C6)アルキル、(C1~C6)アルコキシ、フェニル、4~6員ヘテロシクリルまたは5~6員ヘテロアリールであり、Ra、Rb、RdおよびReに関する上記(C1~C6)アルキルおよび(C1~C6)アルコキシは任意選択でかつ独立に、NH2、NH(C1~C6)アルキルおよびN((C1~C6)アルキル)2から選択される1つまたは複数の基で置換されており、Ra、Rb、RdおよびReに関する上記フェニル、4~6員ヘテロシクリルおよび5~6員ヘテロアリールは任意選択でかつ独立に、(C1~C6)アルキル、NH2、NH(C1~C6)アルキルおよびN((C1~C6)アルキル)2から選択される1つまたは複数の基で置換されており;
Rcは、C(=NH)NH2、C(=NH)NH(C1~C6)アルキル、NHC(=NH)NH2、NRdRe、C(O)NRdRe、SO2RfおよびSORfから選択される1つまたは複数の基で任意選択で置換されたフェニルであり、基C(=NH)NH(C1~C6)アルキルの上記(C1~C6)アルキルは任意選択で、NH2、NH(C1~C6)アルキルおよびN((C1~C6)アルキル)2から選択される1つまたは複数の基で置換されており;
Rfは水素または(C1~C6)アルキルである。
第6の実施形態では、式Iの化合物は式III:
第7の実施形態では、式I、Ia、IIまたはIIIのいずれか1つのR3は、水素または任意選択でアミノで置換された(C1~C6)アルキルであり、式中、残りの変数は、式IまたはIaに関して上に記載した通りのものである。代替的実施形態では、式I、Ia、IIまたはIIIのいずれか1つのR3は水素であり、残りの変数は、式IまたはIaに関して上に記載した通りのものである。
第11の実施形態では、式I、Ia、II、III、IVまたはVのいずれか1つのR6は、水素、-C(O)NRaRbまたは任意選択でORcで置換された(C1~C6)アルキルであり、残りの変数は、式IもしくはIaまたは第7の、第8のもしくは第9の実施形態に関して上に記載した通りのものである。
第14の実施形態では、式I、Ia、II、III、IV、VまたはVIのいずれか1つのR4は、C(O)NRaRbまたは任意選択でNH2で置換された(C1~C6)アルキルであり;Raは水素であり;Rbは、任意選択でNH2で置換された(C1~C6)アルキルであり、残りの変数は、式IもしくはIaまたは第8のもしくは第9の実施形態に関して上に記載した通りのものである。代替的実施形態では、式I、Ia、II、III、IV、VまたはVIのいずれか1つのR4は(C1~C6)アルキルであり、残りの変数は、式IもしくはIaまたは第8のもしくは第9の実施形態に関して上に記載した通りのものである。別の代替的実施形態では、式I、Ia、II、III、IV、VまたはVIのいずれか1つのR4はメチルであり、残りの変数は、式IもしくはIaまたは第8のもしくは第9の実施形態に関して上に記載した通りのものである。
第16の実施形態では、式I、Ia、II、III、IV、VIまたはVIIのいずれか1つのR5は、C(O)NRaRbまたは任意選択でNH2で置換された(C1~C6)アルキルであり;Raは水素であり;Rbは、任意選択でNH2で置換された(C1~C6)アルキルであり、残りの変数は、式IもしくはIaまたは第8のもしくは第9の実施形態に関して上に記載した通りのものである。代替的実施形態では、式I、Ia、II、III、IV、VIまたはVIIのいずれか1つのR5は(C1~C6)アルキルであり、残りの変数は、式IもしくはIaまたは第8のもしくは第9の実施形態に関して上に記載した通りのものである。別の代替的実施形態では、式I、Ia、II、III、IV、VIまたはVIIのいずれか1つのR5はメチルであり、残りの変数は、式IもしくはIaまたは第8のもしくは第9の実施形態に関して上に記載した通りのものである。
4.使用、製剤化および投与
本明細書に記載される化合物を用いて、1種または複数種のグラム陰性または非定型細菌を原因とする細菌感染症を治療することができる。グラム陰性菌としては、特に限定されないが、インフルエンザ菌(Haemophilus influenzae)、アシネトバクター・バウマンニ(Acinetobacter baumannii)、バークホルデリア(Burkholderia)菌種、シトロバクター(Citrobacter)菌種、大腸菌(Escherichia coli)、エンテロバクター(Enterobacter)菌種、緑膿菌(Pseudomonas aeruginosa)、クレブシエラ(Klebsiella)菌種、ステノトロホモナス・マルトフィラ(Stenotrophomonas maltophila)、野兎病菌(Francisella tularensis)、エルシニア(Yersinia)菌、サルモネラ(Salmonella)菌種、シゲラ(Shigella)菌種、レジオネラ(Legionella)菌種および淋菌(Neisseria gonorrhoeae)が挙げられる。非定型細菌としては、特に限定されないが、肺炎マイコプラズマ(Mycoplasma pneumoniae)、クラミドフィラ・ニューモニエ(Chlamydophila pneumoniae)およびレジオネラ・ニューモフィラ(Legionella pneumophila)が挙げられる。
他の態様では、本開示は、本明細書に記載される化合物と薬学的に許容される担体とを含む、薬学的に許容される組成物を提供する。これらの組成物を用いて、1つまたは複数の上記の細菌感染症を治療するほかにも、PBP3を阻害することができる。
また、任意の具体的患者に対する具体的な用量および治療計画は、年齢,体重,全般的健康状態,性別,食事,投与の時間,排泄速度,薬物の組合せ,治療にあたる医師の判断および治療する具体的疾患の重症度を含めた様々な因子によって決まることも理解されるべきである。組成物中の提供される化合物の量も組成物中の具体的化合物によって決まる。
以下の実施例に示すように、特定の例示的実施形態では、以下の一般的方法に従って化合物を調製する。一般的方法には本明細書の特定の化合物の合成が示されるが、以下の一般的方法および当業者に公知の他の方法を本明細書に記載される全化合物ならびにこれらの化合物それぞれのサブクラスおよび種に適用することが可能であることが理解されよう。
以下の反応の同じスケールの2つのバッチを並行して実施した。tert-ブチル3,5-ジオキソピペリジン-1-カルボキシラート(275g、1.29mol)のトルエン(1.95L)混合物に1,1-ジメトキシ-N,N-ジメチル-メタンアミン(247.59mL、1.87mol)を加えた。反応混合物を80℃で0.5時間攪拌し、次いで50℃で3.5時間攪拌した。反応混合物を減圧下で濃縮してtert-ブチル4-((ジメチルアミノ)メチレン)-3,5-ジオキソピペリジン-1-カルボキシラート(692g、99%)黄色の油として得た。MS:269ES+(C13H20N2O4)。これを次の工程に直接使用した。
以下の反応の同じスケールの2つのバッチを並行して実施した。tert-ブチル4-((ジメチルアミノ)メチレン)-3,5-ジオキソピペリジン-1-カルボキシラート(346g、1.29mol)をエタノール(1.90L)およびトルエン(1.90L)に溶かした溶液にメチルヒドラジン(168.1mL、3.21mol)を加えた。混合物を25℃で3時間攪拌した。反応混合物を減圧下で濃縮して残渣を得た。残基をカラムクロマトグラフィー(SiO2、DCM/酢酸エチル=1:0~1:1)により精製して、tert-ブチル1-メチル-4-オキソ-1,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6-カルボキシラート(540g、83%)を黄色の固体として得た。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:1.51-1.43(m,9H);3.85(s,3H);4.14(s,2H);4.73(br s,2H);7.88(s,1H)。
tert-ブチル1-メチル-4-オキソ-1,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6-カルボキシラート(50g、0.199mmol)をTHF(500mL)に溶かし、N2雰囲気下に置いた。反応混合物を-78℃まで冷却し、LDA(2M、397.96mL)を加えた。反応混合物を-78℃で40分間攪拌した。過剰の二酸化炭素を1時間にわたって導入し、次いで、混合物を放置して周囲温度まで戻し、12時間攪拌した。10%H2SO4をpH=2.5まで添加することにより反応混合物の反応を停止させ、酢酸エチル(3×500ml)で抽出した。合わせた有機層に飽和炭酸水素ナトリウム水溶液をpH>7になるまで加えた。水相を分離し、クエン酸溶液(10%)の添加により酸性化した。次いで、これを酢酸エチル(4×500mL)で抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、減圧下で濃縮して6-(tert-ブトキシカルボニル)-1-メチル-4-オキソ-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-7-カルボン酸(58g、95%)を白色の固体として得た。これを次の工程に直接使用した。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:1.48(s,9H);4.02(s,3H);4.12(m,1H);4.65-4.52(m,1H);6.16(s,1H);7.90(s,1H)。
6-(tert-ブトキシカルボニル)-1-メチル-4-オキソ-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-7-カルボン酸(58g、196.42mmol)のDMF(300mL)溶液に硫酸ジメチル(196.42mL、245.52mmol)を加え、25℃で2時間攪拌した。炭酸カリウム(10.86g、78.57mmol)および硫酸ジメチル(196.42mL、39.28mmol)を加え、25℃で12時間攪拌した。炭酸カリウム(5.43g、39.28mmol)をさらに加え、反応混合物をさらに1時間攪拌した。反応混合物に水(500mL)を加え、DCM(3×500mL)で抽出した。合わせた有機層を0.1N HCl(300mL)、次いでH2O(300mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮して6-(tert-ブチル)7-メチル1-メチル-4-オキソ-1,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6,7-ジカルボキシラート(50g、82%)を黄色の油として得た。これを次の工程に直接使用した。1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:1.49(s,9H);3.03-2.82(m,1H);3.80(s,3H);4.02(s,3H);4.59(d,J=18.4Hz,1H);6.16(s,1H);7.91(s,1H)。
6-(tert-ブチル)7-メチル1-メチル-4-オキソ-1,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6,7-ジカルボキシラート(50g、161.64mmol)のDCM(500mL)溶液にピリジン(25.57g、323.28mmol)およびO-ベンジルヒドロキシルアミン塩酸塩(25.80g、161.64mmol)を加えた。反応混合物を20℃で12時間攪拌した。10%酒石酸(200mL)を加えた。有機層を分離し、2%酒石酸(200mL)で洗浄した。合わせた水層をDCM(500mL)で洗浄した。合わせた有機層をブライン(200mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮して6-(tert-ブチル)7-メチル(Z)-4-((ベンジルオキシ)イミノ)-1-メチル-1,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6,7-ジカルボキシラート(70g、104%)を黄色の油として得た。これをそれ以上精製せずに次の工程に直接使用した。
6-(tert-ブチル)7-メチル(Z)-4-((ベンジルオキシ)イミノ)-1-メチル-1,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6,7-ジカルボキシラート(60g、144.77mmol)のMeOH(240mL)溶液にHCl/ジオキサン(4N、36.16mL、144.77mmol)を0℃で加えた。反応混合物を30分間攪拌した。ボランピリジン複合体(13.45g、144.77mmol)を0~2℃で加え、1.5時間攪拌した後、HCl/ジオキサン(4M、180.96mL、723.84mmol)を加えた。反応混合物を25℃で12時間攪拌した。反応混合物にHCl(31.67g、868.62mmol)ガスを吹き込んだ。アセトニトリル(500mL)を加え、40分間攪拌した。反応混合物をろ過し、ろ塊をアセトニトリル(300mL)、次いでMTBE(300ml)で洗浄した。ろ塊を酢酸エチル(500mL)に溶かし、飽和炭酸水素ナトリウムを加えてpH>7に調整した。水層を酢酸エチル(3×500mL)で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮してメチル4-((ベンジルオキシ)アミノ)-1-メチル-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-7-カルボキシラート(37g、81%)を褐色の油として得た。
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:2.01-1.70(m,1H);2.88(dd,J=2.8,13.6Hz,1H);3.32(d,J=13.4Hz,1H);3.76(s,3H);3.82-3.78(m,3H);3.94(br s,1H);4.56(s,1H);4.70(s,2H);7.38-7.25(m,5H);7.42(s,1H)。
以下の反応の同じスケールの2つのバッチを並行して実施した。0℃のメチル4-((ベンジルオキシ)アミノ)-1-メチル-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-7-カルボキシラート(18.5g、58.48mmol)とトリメチルアミン(130.4mL、935.68mmol)のTHF(360mL)溶液にトリホスゲン(6.94g、23.39mmol)のTHF(80mL)溶液を加えた。混合物を0℃で攪拌し、25℃に温まるまで12時間放置した。反応混合物をろ過し、ろ塊をDCM(200mL)に溶かし、1N HCl溶液でpH<7に調整した後、DCM(3×200mL)で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、減圧下で濃縮してメチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(12.00g)を白色の固体として得た。反応混合物ろ液を濃縮し、残渣をカラムクロマトグラフィー(SiO2、石油エーテル/酢酸エチル/DCM=5/1/0~1/1/0.5)により精製して、さらなるメチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(13.00g)を白色の固体として得た。2つのバッチ(25.00g、62%)を合わせ、次の工程に直接使用した。
1HNMR(400MHz,CDCl3)δ:3.23(d,J=11.2Hz,1H);3.43(dd,J=2.9,11.5Hz,1H);3.77(s,3H);3.86(s,3H);3.98(d,J=2.4Hz,1H);4.86(d,J=11.8Hz,1H);5.04-4.95(m,1H);5.21(s,1H);7.48-7.32(m,6H)。
メチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(20g、58.42mmol)をメタノール(960mL)およびTHF(480mL)に溶かした-10℃の溶液に水素化ホウ素リチウムの溶液(THF中2N、146.04mL、292.1mmol)を加えた。得られた混合物を-5℃で1.5時間攪拌した。次いで、飽和塩化アンモニウム水溶液で反応を停止させた。減圧下で溶媒の大部分を除去した。粗物質をDCM(1000mL)に再び溶かし、水(500mL)を加えた。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。得られた残渣を酢酸エチルで研和して、(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-(ヒドロキシメチル)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(12.5g、68%)を白色の固体として得た。これを次の工程に直接使用した。MS:315ES+(C17H18N4O4)。
周囲温度の(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-(ヒドロキシメチル)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(12.36g、39.36mmol)のジクロロメタン(500mL)溶液にデス・マーチンペルヨージナン(20.06g、47.23mmol)を加えた。反応混合物を1時間攪拌した。反応混合物にチオ硫酸ナトリウム水溶液(1N、300mL)および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液(200mL)を加え、15分間攪拌した。二相性の混合物を分離し、水相をジクロロメタン(500mL)で抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィー(120gシリカゲル、0%~100%の酢酸エチル/ヘキサン)により(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボアルデヒド(9.72g、79%)を白色の固体として得た。MS:313ES+(C16H16N4O3)。
周囲温度の(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボアルデヒド(8.62g、27.6mmol)のピリジン(120mL)溶液に塩酸ヒドロキシルアミン(2.11g、30.36mmol)を加えた。反応混合物を20分間攪拌した。塩化アンモニウム水溶液(500mL)および酢酸エチル(500mL)を加えた。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して(E)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボアルデヒドオキシム(9.03g、99%)を白色の固体として得た。これを次の工程に直接使用した。MS:328ES+(C16H17N5O3)。
室温の(E)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボアルデヒドオキシム(9.03g、27.6mmol)のDMF(300mL)溶液にN-クロロスクシンイミド(4.05g、30.36mmol)を加えた。反応混合物を40℃で2時間攪拌した後、周囲温度で一晩放置した。氷水(500mL)および酢酸エチル(500mL)を加えた。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して((4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルビミドイルクロリド(9.98g、99%)を淡黄色の固体として得た。これを次の工程に直接使用した。MS:362ES+(C16H16ClN5O3)。
室温の((4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルビミドイルクロリド(9.98g、27.6mmol)のDCM(360mL)溶液にメチルアミン(THF中2N、2.02mL、56.05mmol)を加えた。反応混合物を周囲温度で30分間攪拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液(300mL)およびDCM(200mL)を加えた。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。粗生成物をDCMとアセトンの混合物で研和し、ろ過して(Z)-5-(ベンジルオキシ)-N’-ヒドロキシ-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(7.27g、74%)を白色の固体として得た。これを次の工程に直接使用した。MS:357ES+(C17H20N6O3)。
室温の(Z)-5-(ベンジルオキシ)-N’-ヒドロキシ-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(6.88g、19.31mmol)のDCM(500mL)溶液にtert-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホナート(4.88mL、21.24mmol)および2,6-ルチジン(2.7mL、23.17mmol)を加えた。反応混合物を30℃で2時間攪拌した。DCM(300mL)および飽和塩化アンモニウム水溶液(300mL)を加えた。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。粗生成物をヘキサンと酢酸エチルの混合物で研和し、ろ過して(4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(9.17g,99%)を白色の固体として得た。MS:471ES+(C23H34N6O3Si)。
(4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(1.3g、2.76mmol)をMeOH(60mL)および酢酸エチル(150mL)に溶かした溶液に窒素を3回パージし、10%Pd/C(294mg、0.28mmol)を加えた。反応混合物に窒素を3回パージし、次いで、水素雰囲気下、周囲温度で1時間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮して(4R,8S,Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-5-ヒドロキシ-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(1.02g、97%)を白色の固体として得た。MS:381ES+(C16H28N6O3Si)。
周囲温度の(4R,8S,Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-5-ヒドロキシ-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(400mg、1.05mmol)のピリジン(20mL)溶液に三酸化硫黄ピリジン錯体(1338mg、8.41mmol)を加えた。反応混合物を一晩攪拌し、次いで、減圧下で濃縮して粗生成物を得た。この物質を短いシリカパッドでヘキサン(100mL)、次いで酢酸エチル/ヘキサン(1:1、100mL)、酢酸エチル(100mL)およびアセトン(200mL)により溶離させて精製した。生成物を含む画分をプールし、濃縮して(4R,8S)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-1-メチル-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(400mg、83%)を白色の固体として得た。MS:461ES+(C16H28N6O6SSi)。
周囲温度の(4R,8S)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-1-メチル-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(130mg、0.28mmol)の酢酸エチル(15mL)溶液にHF.ピリジン(0.01mL、0.31mmol)を加えた。反応混合物を2時間攪拌した後、濃縮した。得られた固体を逆相クロマトグラフィー(Sepabeads、水100%)により精製して、(4R,8S)-8-((Z)-N’-ヒドロキシ-N-メチルカルバムイミドイル)-1-メチル-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素のピリジウム塩(71mg、59%)を白色の固体として得た。MS:345ES-(C10H14N6O6S)。
MS:345ES-(C10H14N6O6S)1HNMR(300MHz,D2O)δ:3.08(s,3H);3.46(m,1H);3.57(m,1H);3.61(s,3H);4.92(m,1H);5.75(s,1H);7.60(s,1H)。
0℃の(4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N’-ヒドロキシ-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(Int-12、15mg、0.042mmol)のDMF(2mL)溶液にNaH(2.53mg、0.063mmol、60%)を加えた。反応混合物を0℃で10分間攪拌した後、ヨウ化メチル(7.17mg、0.050mmol)を加えた。次いで、これを室温まで温め、室温で10分間攪拌した。酢酸エチルおよび飽和塩化アンモニウム溶液を加えた。有機層を分離し、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(DCM中0~100%のアセトン)により精製して(4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N’-メトキシ-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(8mg、収率51.3%)を白色の固体として得た。MS:371ES+(C18H22N6O3)。
(4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N’-メトキシ-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(Int-17、8mg、0.0216mmol)のMeOH(3mL)溶液に窒素を3回パージし、10%Pd/C(4.58mg、0.0043mmol)を加えた。反応混合物に窒素を3回パージし、次いで、水素雰囲気下、室温で2時間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮して(4R,8S,Z)-5-ヒドロキシ-N’-メトキシ-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(4.5mg、74.3%)を白色の固体として得た。MS:281ES+(C11H16N6O3)。
実施例4に示したものと同じ合成順序に従い、実施例6および7を合成した。表1の他の実施例については、当業者に容易にわかる同様の反応を用い、スキーム1と同じ方法で合成した。いずれの化合物もtransラセミとして単離した。
室温の(4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N’-ヒドロキシ-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(Int-12、229mg、0.64mmol)のDCE(15mL)溶液にDIEA(0.11mL、0.64mmol)および(4-ニトロフェニル)カルボノクロリダート(129.52mg、0.64mmol)を加えた。反応混合物を室温で2時間攪拌して(4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N,1-ジメチル-N’-(((4-ニトロフェノキシ)カルボニル)オキシ)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(Int19)の溶液を得た。
(4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N’-(カルバモイルオキシ)-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(Int-20、87mg、0.22mmol)のアセトン(10mL)溶液に窒素を3回パージし、10%Pd/C(23mg、0.022mmol)を加えた。反応混合物に窒素を3回パージし、次いで、水素雰囲気下周囲温度で2時間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮して((4R,8S,Z)-N’-(カルバモイルオキシ)-5-ヒドロキシ-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(66mg、67%)を白色の固体として得た。MS:310ES+(C11H15N7O4)。
スキーム3に従って、または当業者に容易にわかる同様の反応を用いて、表2の全化合物を合成した。いずれの化合物もtransラセミとして単離した。
室温の(E)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボアルデヒドオキシム(Int-10、88mg、0.27mmol)のクロロホルム(10mL)溶液にNCS(52mg、0.30mmol)およびピリジン(0.02mL、0.27mmol)を加えた。これを40℃で1時間攪拌し、室温まで冷却した。tert-ブチルプロパ-2-エノアート(0.04mL、0.30mmol)およびDIEA(0.06mL、0.32mmol)を加え、室温で30分間攪拌し、DCM(10mL)および飽和塩化アンモニウム溶液(10mL)を加えた。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(12gシリカゲル、ヘキサン中0~100%のEtOAc)により精製してtert-ブチル3-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-4,5-ジヒドロイソオキサゾール-5-カルボキシラート(51mg、41%)を白色の固体として得た。MS:454ES+(C23H27N5O5)。
tert-ブチル3-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-4,5-ジヒドロイソオキサゾール-5-カルボキシラート(Int-22、41mg、0.094mmol)のアセトン(10mL)溶液に窒素を3回パージし、10%Pd/C(1mg、0.001mmol)を加えた。反応混合物に窒素を3回パージし、水素雰囲気下、周囲温度で2時間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮してtert-ブチル3-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-4,5-ジヒドロイソオキサゾール-5-カルボキシラート(32mg、97%)を白色の固体として得た。MS:364ES+(C16H21N5O5)。
周囲温度のtert-ブチル3-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-4,5-ジヒドロイソオキサゾール-5-カルボキシラート(Int-23、32mg、0.088mmol)のピリジン(5mL)溶液に三酸化硫黄ピリジン錯体(112mg、0.70mmol)を加えた。反応混合物を一晩攪拌し、次いで、減圧下で濃縮して粗生成物を得た。これを逆相クロマトグラフィー(Sepabeads、20g、アセトニトリル/水=0/100~1/5)により精製してtert-ブチル3-((4R,8S)-1-メチル-6-オキソ-5-(スルホオキシ)-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-4,5-ジヒドロイソオキサゾール-5-カルボキシラート(17mg、43%)を白色の固体として得た。MS:442ES-(C16H21N5O8S)。
スキーム4に従って、または当業者に容易にわかる同様の反応を用いて、表3の全化合物を合成した。いずれの化合物もtransラセミとして単離した。
tert-ブチル3-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-4,5-ジヒドロイソオキサゾール-5-カルボキシラート(Int-22、90mg、0.198mmol)をMeOH(3mL)およびTHF(6mL)に溶かした-10℃の溶液にLiBH4(5.94mL、5.94mmol)のTHF(1N)溶液を加えた。反応混合物を-10℃で2時間攪拌した。DCM(50mL)および飽和塩化アンモニウム溶液(50mL)を加えた。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(12gシリカゲル、ヘキサン中0~100%のEtOAc)により精製して(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-(5-(ヒドロキシメチル)-4,5-ジヒドロイソオキサゾール-3-イル)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(40mg、52%)を白色の固体として得た。MS:384ES+(C19H21N5O4)。
室温の(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-(5-(ヒドロキシメチル)-4,5-ジヒドロイソオキサゾール-3-イル)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(Int-25、40mg、0.10mmol)のDCM(10mL)溶液に2,6-ルチジン(0.01mL、0.13mmol)およびtert-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホナート(0.03mL、0.11mmol)を加えた。反応混合物を35℃で2時間攪拌した。DCM(10mL)および飽和塩化アンモニウム溶液(10mL)を加えた。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(12gシリカゲル、ヘキサン中0~100%のEtOAc)により精製して(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-(5-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)メチル)-4,5-ジヒドロイソオキサゾール-3-イル)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(50mg、96%)を白色の固体として得た。MS:498ES+(C25H35N5O4Si)。
(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-(5-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)メチル)-4,5-ジヒドロイソオキサゾール-3-イル)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(Int-26、50mg、0.10mmol)のアセトン(10mL)溶液に窒素を3回パージし、10%Pd/C(1mg、0.001mmol)を加えた。反応混合物に窒素を3回パージし、次いで、水素雰囲気下、周囲温度で2時間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮して(4R,8S)-8-(5-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)メチル)-4,5-ジヒドロイソオキサゾール-3-イル)-5-ヒドロキシ-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(40mg、97%)を白色の固体として得た。MS:408ES+(C18H29N5O4Si)。
周囲温度の(4R,8S)-8-(5-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)メチル)-4,5-ジヒドロイソオキサゾール-3-イル)-5-ヒドロキシ-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(Int-27、40mg、0.098mmol)のピリジン(5mL)溶液に三酸化硫黄ピリジン錯体(125mg、0.785mmol)を加えた。反応混合物を一晩攪拌し、次いで、減圧下で濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、4g、ヘキサン中0~100%のEtOAc)により精製して(4R,8S)-8-(5-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)メチル)-4,5-ジヒドロイソオキサゾール-3-イル)-1-メチル-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(5mg、10%)を白色の固体として得た。MS:486ES-(C18H29N5O7SiS)。
Chiralpak AD-Hカラムを用い、CO2共溶媒の25%イソプロパノールを75g/分、システム圧力を120bar、カラム温度を25℃としたSFCによりtransラセミ(Z)-5-(ベンジルオキシ)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(Int-13、8g)を分離して、以下のものを得た:
Int-29:(4R*,8S*,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(キラル、3.06g、34%)。MS:471ES+(C23H34N6O3Si)1HNMR(300MHz,MeOD)δ:0.01(s,6H);0.81(s,9H);3.07(s,3H);3.32(m,1H);3.47(m,1H);3.62(s,3H);4.31(m,1H);4.95(m,2H);5.48(m,1H);7.35-7.44(m,6H)。ee>99%。
攪拌している0℃のtert-ブタノール(1.9mL、20mmol)のDCM(12mL)溶液にイソシアン酸クロロスルホニル(1.4mL、15mmol)を10分間にわたって滴加した。0℃で5分間攪拌した後、反応混合物を室温まで温め、20分間攪拌した。これを真空下で3分の1の体積になるまで濃縮した。フラスコを0℃の浴中に戻し、生成物が溶液から晶出した。50分後、生成物をろ過し、ヘキサン(20mL)で洗浄してtert-ブチル(クロロスルホニル)カルバマート(1.41g、40%)を白色の固体として得た。これをそのまま次の工程に使用した。
攪拌している0℃の(4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N’-ヒドロキシ-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(Int-12、248mg、0.696mmol)のDCM(30mL)溶液にtert-ブチル(クロロスルホニル)カルバマート(Int-31、225mg、1.044mmol)、次いでDIEA(0.36mL、2.09mmol)を加えた。反応混合物を0℃で16時間攪拌した。反応混合物に飽和塩化アンモニウム溶液(20mL)およびDCM(20mL)を加えた。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(4g、ヘキサン中0~100%のEtOAc)により精製してtert-ブチル(((((Z)-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)スルホニル)カルバマート(88mg、24%)を白色の固体として得た。MS:536ES+(C22H29N7O7S)。
tert-ブチル(((((Z)-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)スルホニル)カルバマート(Int-32、88mg、0.164mmol)のアセトン(20mL)溶液に窒素を3回パージし、10%Pd/C(1.7mg、0.0016mmol)を加えた。反応混合物に窒素を3回パージし、次いで、水素雰囲気下、周囲温度で2時間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮してtert-ブチル(((((Z)-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)スルホニル)カルバマート(60mg、82%)を白色の固体として得た。MS:446ES+(C15H23N7O7S)。
周囲温度のtert-ブチル(((((Z)-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)スルホニル)カルバマート(Int-33、60mg、0.135mmol)のピリジン(10mL)溶液に三酸化硫黄ピリジン錯体(172mg、1.078mmol)を加えた。反応混合物を一晩攪拌し、次いで、減圧下で濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(シリカゲル、4g、ヘキサン中0~100%のEtOAc、次いでアセトン)により精製して(4R,8S)-8-((Z)-N’-((N-(tert-ブトキシカルボニル)スルファモイル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-1-メチル-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(70mg、99%)を白色の固体として得た。MS:524ES-(C15H23N7O10S2)。
2000mLの丸底フラスコにtert-ブチル-4-[(ジメチルアミノ)メチリデン]-3,5-ジオキソピペリジン-1-カルボキシラート(Int-1、170g、633.60mmol)およびエタノール(675mL)を入れた。2-ヒドラジニルエタン-1-オール(48g、630.77mmol)を加えた。得られた反応混合物を室温で一晩攪拌した。これを真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル(2000mL)で希釈し、ブライン(2×500mL)で洗浄した。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮して粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムで酢酸エチル/石油エーテルを用いて溶離させて、tert-ブチル1-(2-ヒドロキシエチル)-4-オキソ-1,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6-カルボキシラート(95g、53%)を淡黄色の油として得た。MS:282ES+(C13H19N3O4)。
2000mLの丸底フラスコに1-(2-ヒドロキシエチル)-4-オキソ-1,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6-カルボキシラート(Int-35、95g、337.71mmol)、イミダゾール(46g、676.47mmol)およびDCM(1000mL)を0℃で入れた。tert-ブチル(クロロ)ジメチルシラン(66g、437.89mmol)のDCM(100mL)溶液を滴加した。反応混合物を室温で一晩攪拌した。得られた混合物をブライン(2×500mL)で洗浄した。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムにかけ、酢酸エチル/石油エーテルで溶離させてtert-ブチル1-(2-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)エチル)-4-オキソ-1,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6-カルボキシラート(130g、97%)を白色の固体として得た。MS:396ES+(C19H33N3O4Si)。
2000mLの丸底フラスコにtert-ブチル1-(2-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)エチル)-4-オキソ-1,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6-カルボキシラート(Int-36、73g、184.54mmol)、MeOH(365mL)およびTHF(730mL)を0℃で入れた。NaBH4(7g、185mmol)を加えた。得られた反応混合物を0℃で2時間攪拌した。次いで、これを水(1000mL)の添加により反応を停止させた。得られた溶液をEtOAc(3×1000mL)で抽出した。合わせた有機層をブライン(2×500mL)で洗浄し、分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮してtert-ブチル1-(2-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)エチル)-4-ヒドロキシ-1,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6-カルボキシラート(77.5g、定量的収率)を淡黄色の油として得た。MS:398ES+(C19H35N3O4Si)。
2000mLの丸底フラスコにtert-ブチル1-(2-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)エチル)-4-ヒドロキシ-1,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6-カルボキシラート(Int-37、51g、128mmol)、N-(ベンジルオキシ)-2-ニトロベンゼン-1-スルホンアミド(59g、191mmol)、PPh3(67g、255mmol)およびTHF(1000mL)を0℃で入れた。DIAD(52g、255mmol)のTHF(100mL)溶液を滴加した。得られた反応混合物を室温で一晩攪拌し、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムにかけ、酢酸エチル/石油エーテルで溶離させて、tert-ブチル4-((N-(ベンジルオキシ)-4-ニトロフェニル)スルホンアミド)-1-(2-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)エチル)-1,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6-カルボキシラート(68g、77%)を淡黄色の油として得た。MS:688ES+(C32H45N5O8SSi)。
2000mLの丸底フラスコにtert-ブチル4-((N-(ベンジルオキシ)-4-ニトロフェニル)スルホンアミド)-1-(2-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)エチル)-1,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6-カルボキシラート(Int-38、68g、98.85mmol)、DCM(680mL)およびZnBr2(67g、296.55mmol)を入れた。反応混合物を室温で2日間攪拌した。固体をろ過除去した。次いで、飽和塩化アンモニウム溶液(500mL)の添加により反応を停止させ、DCM(3×500mL)で抽出した。有機層を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムにかけ、酢酸エチル/石油エーテルで溶離させてN-(ベンジルオキシ)-N-(1-(2-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)エチル)-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-4-イル)-4-ニトロベンゼンスルホンアミド(55g、94.7%)を淡黄色の油として得た。MS:588ES+(C27H37N5O6SSi)。
2000mLの丸底フラスコにN-(ベンジルオキシ)-N-(1-(2-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)エチル)-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-4-イル)-4-ニトロベンゼンスルホンアミド(Int-39、53g、90.17mmol)およびDCM(530mL)を0℃で入れた。NCS(15.7g、117.22mmol)を加えた。反応混合物を室温で1.5時間攪拌した後、0℃に冷却した。DBU(20.6g、135.25mmol)を加え、反応混合物を放置して室温まで温め、さらに3時間攪拌した。得られた溶液をそれ以上精製せずに次の反応に使用した。MS:586ES+(C27H35N5O6SSi)。
N-(ベンジルオキシ)-N-(1-(2-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)エチル)-4,5-ジヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-4-イル)-4-ニトロベンゼンスルホンアミド(Int-40)の溶液にTMSCN(35.7g、360.7mmol)を加えた。反応混合物を室温で一晩攪拌した。これを飽和炭酸水素ナトリウム水溶液(500mL)で希釈し、DCM(2×500mL)で抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムにかけ、酢酸エチル/石油エーテルで溶離させてN-(ベンジルオキシ)-N-(1-(2-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)エチル)-7-シアノ-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-4-イル)-4-ニトロベンゼンスルホンアミド(46g、83%)を淡褐色の油として得た。MS:613ES+(C28H36N6O6SSi)。
1000mLの丸底フラスコにN-(ベンジルオキシ)-N-(1-(2-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)エチル)-7-シアノ-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-4-イル)-4-ニトロベンゼンスルホンアミド(Int-41、44.7g、72.95mmol)およびメタノール(450mL)を0℃で入れた。塩化アセチル(148g、1896mmol)を滴加した。得られた反応混合物を室温で1時間、次いで55℃で2時間攪拌した。これを室温まで冷却した。飽和炭酸水素ナトリウム水溶液で反応混合物のpH値を9に調整し、酢酸エチル(3×50mL)で抽出した。有機抽出物を合わせ、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮してメチル4-((N-(ベンジルオキシ)-4-ニトロフェニル)スルホンアミド)-1-(2-ヒドロキシエチル)-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-7-カルボキシラート(38g、98%)を褐色の油として得た。MS:532ES+(C23H25N5O8S)。
1000mLの丸底フラスコにメチル4-((N-(ベンジルオキシ)-4-ニトロフェニル)スルホンアミド)-1-(2-ヒドロキシエチル)-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-7-カルボキシラート(Int-42、38g、71.49mmol)、DCM(380mL)およびイミダゾール(9.7g、142.98mmol)を0℃で加えた。TBSCl(14g、92.94mmol)のDCM(50mL)溶液を滴加した。得られた反応混合物を室温で一晩攪拌した。これをブライン(2×500mL)で洗浄した。有機抽出物を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムにかけ、酢酸エチル/石油エーテルで溶離させてメチル4-((N-(ベンジルオキシ)-4-ニトロフェニル)スルホンアミド)-1-(2-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)エチル)-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-7-カルボキシラート(39g、85%)を黄色の油として得た。MS:646ES+(C29H39N5O8SSi)。
250mLの丸底フラスコに4-((N-(ベンジルオキシ)-4-ニトロフェニル)スルホンアミド)-1-(2-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)エチル)-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-7-カルボキシラート(Int-43、10g、15.48mmol)、DMF(100mL)、チオグリコール酸(3.56g、30.96mmol)およびLiOH(1.86g、77.40mmol)を入れた。反応混合物を室温で1時間攪拌し、EtOAc(200mL)で希釈した。これをブライン(200mL)で洗浄した。水層をEtOAc(100mL)で抽出し、有機層を合わせた。有機抽出物をブライン(5×100mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣をシリカゲルカラムにかけ、酢酸エチル/石油エーテルで溶離させてメチル4-((ベンジルオキシ)アミノ)-1-(2-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)エチル)-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-7-カルボキシラート(5.4g、76%)を黄色の油として得た。MS:461ES+(C23H36N4O4Si)。
2000mLの丸底フラスコにメチル4-((ベンジルオキシ)アミノ)-1-(2-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)エチル)-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-7-カルボキシラート(Int-44、27g、58.61mmol)、アセトニトリル(540mL)、DIEA(30g、234.44mmol)を0℃で入れた。反応混合物を攪拌しながらトリホスゲン(7g、23.44mmol)のアセトニトリル(100mL)溶液を2時間で滴加し、次いで4-ジメチルアミノピリジン(1.4g、11.72mmol)を滴加した。得られた反応混合物を室温で一晩攪拌し、真空下で濃縮した。これをEtOAc(500mL)で希釈し、ブライン(2×100mL)で洗浄した。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをシリカゲルカラムにかけ、酢酸エチル/石油エーテルで溶離させてメチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-(2-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)エチル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(16g、56%)を得た。MS:487ES+(C24H34N4O5Si)。
250mLの丸底フラスコにメチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-(2-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)エチル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(Int-45、3820mg、7.85mmol)、HF.ピリジン(0.32mL、8.63mmol)およびEtOAc(100mL)を入れた。反応混合物を室温で3時間攪拌した。飽和塩化アンモニウム水溶液(100mL)およびEtOAc(100mL)を加えた。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをEtOAc(20mL)で研和した。沈殿をろ過し、EtOAc(5mL)で洗浄してメチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-(2-ヒドロキシエチル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(2724mg、93%)を白色の固体として得た。MS:373ES+(C18H20N4O5)。
100mLの丸底フラスコにメチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-(2-ヒドロキシエチル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(Int-46、1910mg、5.13mmol)、DCM(30mL)を0℃で入れた。メタンスルホニルクロリド(0.48mL、6.16mmol)のDCM(5mL)溶液、次いでDIEA(1.34mL、7.69mmol)を加えた。反応混合物を0℃で20分間攪拌した。水(100mL)を加えた。0.5N HCl溶液の添加により混合物のpHを約3に調整した。混合物をEtOAc(3×100mL)で抽出した。有機抽出物をプールし、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮してメチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-(2-((メチルスルホニル)オキシ)エチル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(2070mg、89%)を白色で粘着性の泡状物質として得た。MS:451ES+(C19H22N4O7S)。
100mLの丸底フラスコにメチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-(2-((メチルスルホニル)オキシ)エチル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(Int-47、2070mg、4.6mmol)およびDMF(50mL)を入れた。アジ化ナトリウム(3584mg、55.14mmol)を加え、反応混合物を40℃で4時間、次いで室温で一晩攪拌した。反応混合物を水(200mL)とEtOAc(200mL)の間で分配した。有機層を分離し、水(100mL)、ブライン(100mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(40g、EtOAc/ヘキサンで溶離)で精製してメチル(4R,8S)-1-(2-アジドエチル)-5-(ベンジルオキシ)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(1810mg、99%)をオフホワイトの固体として得た。MS:398ES+(C18H19N7O4)。
メチル(4R,8S)-1-(2-アジドエチル)-5-(ベンジルオキシ)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(Int-48、354mg、0.89mmol)をメタノール(60mL)およびTHF(30mL)に溶かした-10℃の溶液にLiBH4(4.46mL、8.90mmol)のTHF溶液を加えた。得られた混合物を-10℃で2時間攪拌した。DCM(100mL)および飽和塩化アンモニウム水溶液(100mL)を加えた。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(40gシリカゲル、ヘキサン中0~100%のEtOAc、次いでアセトン100%)により精製して(4R,8S)-1-(2-アジドエチル)-5-(ベンジルオキシ)-8-(ヒドロキシメチル)-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(310mg、94%)を白色の固体として得た。MS:370ES+(C17H19N7O3)。
室温の(4R,8S)-1-(2-アジドエチル)-5-(ベンジルオキシ)-8-(ヒドロキシメチル)-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(Int-49、310mg、0.84mmol)のDCM(60mL)溶液にデス・マーチンペルヨージナン(427mg、1.01mmol)を加えた。反応混合物を2時間攪拌した。水(10mL)、飽和炭酸水素ナトリウム水溶液(30mL)および2N Na2S2O3溶液(50mL)を加え、5分間攪拌した。二相性の混合物を分離し、DCM(100mL)で水性抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して(4R,8S)-1-(2-アジドエチル)-5-(ベンジルオキシ)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボアルデヒド(300mg、97%)を無色の油として得た。MS:368ES+(C17H17N7O3)。
Int-10(スキーム1、工程10)に関して示したものと同じ反応条件に従い、(4R,8S)-1-(2-アジドエチル)-5-(ベンジルオキシ)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボアルデヒド(Int-50、300mg、0.816mmol)を基質に用いてInt-51を合成し、(E)-1-(2-アジドエチル)-5-(ベンジルオキシ)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボアルデヒドオキシム(283mg、91%)を白色の固体として得た。MS:383ES+(C17H18N8O3)。
Int-11(スキーム1、工程11)に関して示したものと同じ反応条件に従い、(E)-1-(2-アジドエチル)-5-(ベンジルオキシ)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボアルデヒドオキシム(Int-51、283mg、0.74mmol)を基質に用いてInt-52を合成し、(4R,8S,Z)-1-(2-アジドエチル)-5-(ベンジルオキシ)-N-ヒドロキシ-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルビミドイルクロリド(308mg、99%)を黄色の固体として得た。MS:417ES+(C17H17ClN8O3)。
Int-12(スキーム1、工程12)に関して示したものと同じ反応条件に従い、(4R,8S,Z)-1-(2-アジドエチル)-5-(ベンジルオキシ)-N-ヒドロキシ-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルビミドイルクロリド(Int-52、308mg、0.74mmol)を基質に用いてInt-53を合成し、(4R,8S,Z)-1-(2-アジドエチル)-5-(ベンジルオキシ)-N’-ヒドロキシ-N-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(247mg、81%)を白色の固体として得た。MS:412ES+(C18H21N9O3)。
Int-13(スキーム1、工程13)に関して示したものと同じ反応条件に従い、(4R,8S,Z)-1-(2-アジドエチル)-5-(ベンジルオキシ)-N’-ヒドロキシ-N-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(Int-53、247mg、0.60mmol)を基質に用いてInt-54を合成し、(4R,8S,Z)-1-(2-アジドエチル)-5-(ベンジルオキシ)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(308mg、97%)を白色の固体として得た。MS:526ES+(C24H35N9O3Si)。
(4R,8S,Z)-1-(2-アジドエチル)-5-(ベンジルオキシ)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(Int-54、308mg、0.586mmol)をメタノール(20mL)およびTHF(10mL)に溶かした-10℃の溶液にLiBH4(1.46mL、2.93mmol)の溶液およびCuSO4(93.52mg、0.59mmol)を加えた。これを-10℃で1時間攪拌した。Boc2O(127.87mg、0.59mmol)およびDIEA(0.1mL、0.59mmol)を加え、0℃で2時間攪拌した。飽和塩化アンモニウム溶液(20mL)を加え、5分間攪拌した。有機溶媒の大部分を除去した。DCM(100mL)および飽和塩化アンモニウム溶液(100mL)を加えた。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(20gシリカゲル、ヘキサン中0~50%のEtOAc)により精製してtert-ブチル(2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)エチル)カルバマート(86mg、24%)を無色の油として得た。MS:600ES+(C29H45N7O5Si)。
Int-14(スキーム1、工程14)に関して示したものと同じ反応条件に従い、tert-ブチル(2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)エチル)カルバマート(Int-55、86mg、0.14mmol)を基質に用いてInt-56を合成し、tert-ブチル(2-((4R,8S)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-5-ヒドロキシ-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)エチル)カルバマート(68mg、93%)を白色の固体として得た。MS:510ES+(C22H39N7O5Si)。
Int-15(スキーム1、工程15)に関して示したものと同じ反応条件に従い、tert-ブチル(2-((4R,8S)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-5-ヒドロキシ-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)エチル)カルバマート(Int-56、68mg、0.13mmol)を基質に用いてInt-57を合成し、(4R,8S)-1-(2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)エチル)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(78mg、99%)を白色の固体として得た。MS:588ES-(C22H39N7O8SSi)。
Int-16(スキーム1、工程16)に関して示したものと同じ反応条件に従い、(4R,8S)-1-(2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)エチル)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(Int-57、78mg、0.13mmol)を基質に用いてInt-58を合成し、(4R,8S)-1-(2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)エチル)-8-((Z)-N’-ヒドロキシ-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(31mg、49%)を白色の固体として得た。MS:474ES-(C16H25N7O8S)。
Int-55(スキーム9、工程10)に関して示したものと同じ反応条件に従い、(4R,8S,Z)-1-(2-アジドエチル)-5-(ベンジルオキシ)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(Int-54、89mg、0.17mmol)を基質に用い、Boc2Oを加えずにInt-59を合成し、(4R,8S,Z)-1-(2-アミノエチル)-5-(ベンジルオキシ)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(84mg、99%)を白色の固体として得た。MS:500ES+(C24H37N7O3Si)。
-10℃の(4R,8S,Z)-1-(2-アミノエチル)-5-(ベンジルオキシ)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(Int-59、84mg、0.17mmol)のピリジン(5mL)溶液に無水酢酸(0.01mL、0.17mmol)を加えた。これを-10℃で1時間攪拌した。飽和塩化アンモニウム溶液(20mL)およびDCM(20mL)を加えた。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(20gシリカゲル、ヘキサン中0~50%のEtOAc)により精製してN-(2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)エチル)アセトアミド(74mg、81%)を無色で粘着性の油として得た。MS:542ES+(C26H39N7O4Si)。
Int-56(スキーム9、工程11)に関して示したものと同じ反応条件に従い、N-(2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)エチル)アセトアミド(Int-60、74mg、0.136mmol)を基質に用いてInt-61を合成し、N-(2-((4R,8S)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-5-ヒドロキシ-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)エチル)アセトアミド(50mg、81%)を白色の固体として得た。MS:452ES+(C19H33N7O4Si)。
Int-57(スキーム9、工程12)に関して示したものと同じ反応条件に従い、N-(2-((4R,8S)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-5-ヒドロキシ-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)エチル)アセトアミド(Int-61、50mg、0.11mmol)を基質に用いてInt-62を合成し、(4R,8S)-1-(2-アセトアミドエチル)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(57mg、97%)を白色の固体として得た。MS:530ES-(C19H33N7O7SiS)。
Int-9(スキーム1、工程9)に関して示したものと同じ反応条件に従い、メチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-(2-ヒドロキシエチル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(Int-46、234.3mg、0.63mmol)を基質に用いてInt-63を合成し、メチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-(2,2-ジヒドロキシエチル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(244.3mg、100%)を淡黄色の固体として得た。MS:389ES+(C18H20N4O6)。
0℃のメチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-(2,2-ジヒドロキシエチル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(Int-63、244.3mg、0.63mmol)のピリジン(0.5mL)溶液にtert-ブチル(2-(アミノオキシ)エチル)カルバマート(110.84mg、0.63mmol)のピリジン(0.5mL)溶液を加えた。反応混合物を室温まで温め、15分間攪拌した後、酢酸エチル(50mL)で希釈し、飽和塩化アンモニウム(20mL)およびブライン(20mL)で洗浄した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー(0%~80%の酢酸エチル/ヘキサン)によりメチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-((E)-10,10-ジメチル-8-オキソ-4,9-ジオキサ-3,7-ジアザウンデカ-2-エン-1-イル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(241.1mg、73%)をオフホワイトの固体として得た。MS:529ES+(C25H32N6O7)。
メチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-((E)-10,10-ジメチル-8-オキソ-4,9-ジオキサ-3,7-ジアザウンデカ-2-エン-1-イル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(Int-64、248.5mg、0.47mmol)をTHF(4mL)および水(1mL)に溶かした0℃の溶液に水酸化リチウム(0.66mL、0.66mmol)を加えた。反応混合物を0℃で15分間攪拌した後、1N HClで中和した。THFを除去し、水層を凍結させ、凍結乾燥させて白色の固体を得た。この固体を水に溶かして、濁った溶液を得た。pHを約3~4に調整し、生成物を酢酸エチル(2×100mL)で抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-((E)-10,10-ジメチル-8-オキソ-4,9-ジオキサ-3,7-ジアザウンデカ-2-エン-1-イル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボン酸(236.4mg、98%)をオフホワイトの泡状物質として得た。MS:515ES+(C24H30N6O7)。
室温の(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-((E)-10,10-ジメチル-8-オキソ-4,9-ジオキサ-3,7-ジアザウンデカ-2-エン-1-イル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボン酸(Int-65,236.4mg、0.46mmol)のDCM(4mL)懸濁液にO-(tert-ブチルジメチルシリル)ヒドロキシルアミン(87.98mg、0.59mmol)およびEDC(105.63mg、0.55mmol)を加えた。反応混合物を室温で約2時間攪拌し、次いでジクロロメタンで希釈し、1:1のブライン:水で1回洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮した。白色の泡状物質としてシリカゲルクロマトグラフィー(0%~50%の酢酸エチル/ヘキサン)tert-ブチル(2-((((E)-2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)カルバモイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)エチリデン)アミノ)オキシ)エチル)カルバマート(148.2mg、50%)。MS:644ES+(C30H45N7O7Si)。
-78℃のtert-ブチル(2-((((E)-2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)カルバモイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)エチリデン)アミノ)オキシ)エチル)カルバマート(Int-66、141mg、0.22mmol)とトリエチルアミン(0.06mL、0.44mmol)のDCM(3mL)溶液にトリフルオロメタンスルホン酸無水物(0.07mL、0.44mmol)を加えた。反応混合物を5分間攪拌した。この溶液にメチルアミン(0.05mL、1.31mmol)を滴加した。次いで、反応混合物を放置して室温まで温め、1.5時間攪拌した。反応混合物をDCMで希釈し、飽和塩化アンモニウムで1回洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー(0%~50%の酢酸エチル/ヘキサン)によりtert-ブチル(2-((((E)-2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)エチリデン)アミノ)オキシ)エチル)カルバマートを白色の泡状物質として得た(60.6mg、42%)。MS:657ES+(C31H48N8O6Si)。
tert-ブチル(2-((((E)-2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)エチリデン)アミノ)オキシ)エチル)カルバマート(Int-67、60.6mg、0.09mmol)の酢酸エチル(3mL)溶液を窒素で脱気し、Pd/C(9.82mg、0.01mmol)を加えた。混合物を再び脱気し、水素バルーン下に置いた。反応混合物を2時間攪拌した。微量の生成物が観察された。反応混合物に窒素をフラッシュし、メタノールを加えた(1mL)。反応混合物を脱気した。Pd/C(9.82mg、0.01mmol)をさらに加え、再び反応混合物を脱気し、水素バルーン下に置いた。反応混合物を40分間攪拌した後、窒素をフラッシュし、ろ過して触媒を除去した。ろ液を濃縮してtert-ブチル(2-((((E)-2-((4R,8S)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-5-ヒドロキシ-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)エチリデン)アミノ)オキシ)エチル)カルバマート(52.28mg、100%)を無色の油として得た。MS:567ES+(C24H42N8O6Si)。
室温のtert-ブチル(2-((((E)-2-((4R,8S)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-5-ヒドロキシ-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)エチリデン)アミノ)オキシ)エチル)カルバマート(Int-68、52.2mg、0.09mmol)のピリジン(2mL)溶液に三酸化硫黄ピリジン錯体(87.96mg、0.55mmol)を加えた。反応混合物を一晩攪拌し、次いでDCMで希釈し、ろ過して固体を除去した。ろ液を濃縮し、真空下で乾燥させた。得られた油をDCMおよびアセトンで研和し、ろ過して固体を除去した。ろ液を濃縮して(4R,8S)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-1-((E)-10,10-ジメチル-8-オキソ-4,9-ジオキサ-3,7-ジアザウンデカ-2-エン-1-イル)-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(59.57mg、100%)をオフホワイトの泡状物質として得た。MS:645ES-(C24H42N8O9SiS)。
(4R,8S)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-1-((E)-10,10-ジメチル-8-オキソ-4,9-ジオキサ-3,7-ジアザウンデカ-2-エン-1-イル)-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(Int-69、59.57mg、0.09mmol)を酢酸エチル(2mL)およびTHF(1mL)に溶かした室温の溶液にHF.ピリジン(0.0026mL、0.10mmol)を加えた。反応混合物を30分間攪拌した。HF.ピリジン(0.0026mL、0.10mmol)をさらに加えた。さらに30分間攪拌した後、HFピリジン(0.0026mL、0.10mmol)をさらに加えた。30分後、反応混合物を濃縮して(4R,8S)-1-((E)-10,10-ジメチル-8-オキソ-4,9-ジオキサ-3,7-ジアザウンデカ-2-エン-1-イル)-8-((Z)-N’-ヒドロキシ-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(49mg、100%)を白色の固体として得た。MS:533ES+(C18H28N8O9S)。
1000mLの丸底フラスコにtert-ブチル4-[(ジメチルアミノ)メチリデン]-3,5-ジオキソピペリジン-1-カルボキシラート(Int-1、63g、234.80mmol)、エタノール(600mL)、NH2NH2.H2O(62g、992mmol)を入れた。得られた溶液を油浴中、53℃で一晩攪拌した。得られた混合物を真空下で濃縮した。MTBE(500mL)を加え、形成された固体をろ過により収集した。固体を減圧下、オーブンで乾燥させて、tert-ブチル(E)-4-hydrazineylidene-1,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6-カルボキシラート(40g、68%)を黄色の固体として得た。MS:252ES+(C11H17N5O2)。
2000mLの丸底フラスコにtert-ブチル4-ヒドラジニリデン-2H,4H,5H,6H,7H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6-カルボキシラート(Int-71、80g、318.36mmol)、アセトン(800mL)および塩化水素(1M)(800mL)を入れた。得られた溶液を室温で2時間攪拌した。水(700mL)を加え、反応混合物を酢酸エチル(3×500mL)で抽出した。有機層を合わせ、ブライン(3×2L)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮してtert-ブチル4-オキソ-1,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6-カルボキシラート(75g、99%)を黄色の油として得た。これを次の工程に直接使用した。MS:182ES+(C11H15N3O3)。
2000mLの丸底フラスコにtert-ブチル4-オキソ-1,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6-カルボキシラート(Int-72、75g、316.12mmol)、ジクロロメタン(750mL)、(クロロジフェニルメチル)ベンゼン(97g、347.95mmol)およびトリエチルアミン(38g、375.53mmol)を入れた。得られた溶液を室温で一晩攪拌した。次いで、水(6000mL)の添加により反応を停止させた。反応混合物をジクロロメタン(2×400mL)で抽出した。有機抽出物を合わせ、ブライン(3×100mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル/石油エーテル(1:10)を用いるシリカゲルカラムにかけた。収集した画分を合わせ、真空下で濃縮してtert-ブチル4-オキソ-2-トリチル-2,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6-カルボキシラート(50g、33%)を白色の固体として得た。1HNMR(400MHz,クロロホルム-d)δ7.96(s,1H);7.41-7.30(m,9H);7.20-7.12(m,6H);4.76(s,2H);4.22(s,2H);1.50(s,9H)。
1000mLの三つ口丸底フラスコに窒素の不活性雰囲気をパージし維持した。tert-ブチル4-オキソ-2-トリチル-2,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6-カルボキシラート(Int-73、46g、95.92mmol)、テトラヒドロフラン(460mL)およびメタノール(230mL)を加え、次いで、NaBH4(3.65g、96.48mmol)を10℃にて5分間で複数のバッチで加えた。得られた溶液を水/氷浴中、10℃で1時間攪拌し、水(500mL)の添加により反応を停止させた。得られた溶液を酢酸エチル(3×500mL)で抽出し、有機層を合わせた。有機抽出物をブライン(3×1000mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル/石油エーテル(1:10~1:0)を用いるシリカゲルカラムにかけた。収集した画分を合わせ、真空下で濃縮してtert-ブチル4-ヒドロキシ-2-トリチル-2,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6-カルボキシラート(33g、71%)を白色の固体として得た。1HNMR(300MHz,クロロホルム-d)δ7.41(s,1H);7.37-7.28(m,9H);7.21-7.11(m,6H);4.81(d,J=28.0Hz,2H);4.34(d,J=16.5Hz,1H);3.96(dd,J=13.7,4.3Hz,1H);3.50(dd,J=13.7,3.4Hz,1H);1.49(s,9H)。
1000mLの三つ口丸底フラスコに窒素の不活性雰囲気をパージし維持した。tert-ブチル4-ヒドロキシ-2-トリチル-2,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6-カルボキシラート(Int-74、18g、37.38mmol)およびテトラヒドロフラン(360mL)を加え、次いで、-30℃で攪拌しながらn-BuLi(22.5mL、56.13mmol)を5分間で滴加した。溶液を-20℃で20分間攪拌した。-30℃で攪拌しながらクロロトリメチルシラン(4.5g、41.42mmol)を5分間で滴加した。溶液を-20℃で30分間攪拌した。-50℃で攪拌しながら混合物にn-BuLi(45mL、112.3mmol)を10分間で滴加した。溶液を-50℃で2時間攪拌した。次いで、-50℃でCO2を反応中に20分間パージした。得られた溶液を室温で20分間攪拌した。次いで、水(1000mL)の添加により反応を停止させた。塩化水素(1mol/L)で溶液のpH値を3に調整した。得られた溶液を酢酸エチル(3×1000mL)で抽出し、有機層を合わせた。有機抽出物をブライン(2×2000mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣を石油エーテル(200mL)で研和した。固体をろ過除去し、乾燥させて6-(tert-ブトキシカルボニル)-4-ヒドロキシ-2-トリチル-4,5,6,7-テトラヒドロ-2H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-7-カルボン酸(19g、96.7%)を黄色の固体として得た。これを次の工程に直接使用した。
500mLの丸底フラスコに6-(tert-ブトキシカルボニル)-4-ヒドロキシ-2-トリチル-4,5,6,7-テトラヒドロ-2H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-7-カルボン酸(Int-75、19g、36.15mmol)、アセトン(190mL)、炭酸カリウム(7.5g、54.27mmol)、硫酸ジメチル(4.9g、38.85mmol)を入れた。得られた溶液を室温で一晩攪拌した。固体をろ過除去し、EtOAc(500mL)で洗浄した。ろ液を真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル/石油エーテル(1:10~1:3)を用いるシリカゲルカラムにかけた。収集した画分を合わせ、真空下で濃縮して6-(tert-ブチル)7-メチル4-ヒドロキシ-2-トリチル-2,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6,7-ジカルボキシラート(13.24g、68%)を白色の固体として得た。MS:562ES+1+Na(C32H33N3O5)。
500mLの三つ口丸底フラスコに窒素の不活性雰囲気をパージし維持した。6-(tert-ブチル)7-メチル4-ヒドロキシ-2-トリチル-2,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6,7-ジカルボキシラート(Int-76、8g、14.83mmol)およびジクロロメタン(160mL)を加え、次いで、-60℃で攪拌しながらトリエチルアミン(3g、29.65mmol)を2分間で滴加した。-60℃で攪拌しながら、これにメタンスルホン酸メタンスルホニル(5.2g、29.85mmol)のジクロロメタン(35mL)溶液を30分間で滴加した。溶液を-60℃で2時間攪拌した。-60℃で攪拌しながら混合物にO-ベンジルヒドロキシルアミン(5.5g、44.66mmol)のジクロロメタン(35mL)溶液を30分間で滴加した。得られた溶液を-60℃で30分間攪拌した。得られた溶液を室温で一晩攪拌し、次いで、水(500mL)の添加により反応を停止させた。得られた溶液をジクロロメタン(2×500mL)で抽出し、有機層を合わせた。有機抽出物をブライン(3×1000mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮した。残渣を酢酸エチル/石油エーテル(1:30~1:10)を用いるシリカゲルカラムにかけた。収集した画分を合わせ、真空下で濃縮した。6-(tert-ブチル)7-メチル4-((ベンジルオキシ)アミノ)-2-トリチル-2,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6,7-ジカルボキシラート(5.6g、58.6%)を白色の固体として得るため。MS:645ES+(C39H40N4O5)。
250mLの丸底フラスコに窒素の不活性雰囲気をパージし維持した。6-(tert-ブチル)7-メチル4-((ベンジルオキシ)アミノ)-2-トリチル-2,4,5,7-テトラヒドロ-6H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-6,7-ジカルボキシラート(Int-77、7g、10.86mmol)およびジオキサン(28mL)を加え、次いで、0℃で攪拌しながら塩化水素(ジオキサン中4M)(105mL)を20分間で滴加した。得られた溶液を室温で2時間攪拌した。沈殿をろ過により収集した。固体を減圧下で濃縮してメチル4-((ベンジルオキシ)アミノ)-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-7-カルボキシラート(2.81g、85.8%)を白色の固体として得た。MS:303ES+(C15H18N4O3)。
3000mLの三つ口丸底フラスコに窒素の不活性雰囲気をパージし維持した。メチル4-((ベンジルオキシ)アミノ)-4,5,6,7-テトラヒドロ-1H-ピラゾロ[3,4-c]ピリジン-7-カルボキシラート(Int-78、4.5g、12.03mmol)およびアセトニトリル(1350mL)を加えた。次いで、0℃で攪拌しながらトリエチルアミン(7.3g、72.14mmol)のアセトニトリル(36mL)溶液を5分間で滴加した。溶液を0℃で30分間攪拌した。0℃で攪拌しながら、これに炭酸ジトリクロロメチル(1.25g、4.21mmol)のアセトニトリル(125mL)溶液を5時間で滴加した。得られた溶液を室温で一晩攪拌した。反応混合物を真空下で濃縮し、EtOAc(1000mL)で希釈した。これをブライン(2×1000mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、真空下で濃縮して粗生成物を得た。これを1:10の比のEtOAc:MTBEから再晶出させて、メチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(1.3g、33%)を白色の固体として得た。MS:329ES+(C16H16N4O4)1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ7.80(s,1H);7.49-7.34(m,5H);5.02(s,1H);4.94-7.88(m,2H);4.57(s,1H);3.75(s,3H);3.44-3.35(m,2H)。
室温のメチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(Int-79,7530mg、22.92mmol)のDMF(210mL)溶液にブロモ酢酸tert-ブチル(33.89mL、229.34mmol)を加えた。反応混合物を100℃で約3時間加熱した。反応混合物を酢酸エチルで希釈し、水で2回洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー(0%~5%のアセトン/DCM)により両方の位置異性体(Int-80およびInt-81)を同時に得た。再精製して分離した(0%~5%のアセトン/DCM)。最初の溶離:メチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-(2-(tert-ブトキシ)-2-オキソエチル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(Int-80、2.928g、29%)、MS:443ES+(C22H26N4O6)。2番目の溶離:メチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-2-(2-(tert-ブトキシ)-2-オキソエチル)-6-オキソ-2,5,6,8-テトラヒドロ-4H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(Int-81、0.47g、5%)、MS:443ES+(C22H26N4O6)。
メチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-(2-(tert-ブトキシ)-2-オキソエチル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(Int-80、2928mg、6.62mmol)をTHF(40mL)および水(20mL)に溶かした0℃の溶液に1M水酸化リチウム(6.62mL、6.62mmol)を加えた。反応混合物を室温で1時間攪拌した。さらに0.5eqの水酸化リチウムを0℃で加えた。反応混合物を室温で2時間攪拌した。未だ出発物質のみであった。0.2eqの水酸化リチウムを1eqがさらに添加されるまで1時間毎に添加した。反応混合物を冷凍庫で一晩保管した。朝、生成物は未だ50%のみであった。さらに0.2eqのLiOHを加え、30分後、反応が約70~80%完了していた。室温で1時間攪拌し続けた。反応混合物を0℃まで冷却し、0.5N HClでpH約4まで酸性化し、酢酸エチルで4回抽出した。水層をさらにpH約2まで酸性化し、酢酸エチルで4回抽出した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-(2-(tert-ブトキシ)-2-オキソエチル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボン酸(1.953g、69%)を淡黄色の泡状物質として得た。MS:429ES+(C21H24N4O6)。
室温の(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-(2-(tert-ブトキシ)-2-オキソエチル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボン酸(Int-82、1453mg、3.39mmol)のDCM(30mL)懸濁液にO-(tert-ブチルジメチルシリル)ヒドロキシルアミン(599.42mg、4.07mmol)およびEDC(780.15mg、4.07mmol)を加えた。反応混合物を室温で1.5時間攪拌した。0.4eqのNH2OTBSをさらに加え、3時間攪拌した。反応混合物を濃縮し、シリカゲルクロマトグラフィーにより(0%~30%の酢酸エチル/ヘキサン)2回精製してtert-ブチル2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)カルバモイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)アセタート(369mg、20%)を白色の泡状物質として得た。MS:558ES+(C27H39N5O6Si)。
-78℃のtert-ブチル2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)カルバモイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)アセタート(Int-83、616.4mg,1.11mmol)とトリエチルアミン(0.15mL、1.11mmol)のDCM(12mL)溶液にトリフルオロメタンスルホン酸無水物(0.19mL、1.11mmol)を加えた。反応混合物を-78℃で5分間攪拌した。反応混合物にメチルアミン(6.63mL、13.26mmol)を加えた。反応混合物を室温まで温め、6時間攪拌した。これを濃縮し、フラッシュクロマトグラフィー(20gシリカゲル、0%~30%の酢酸エチル/ヘキサン)により精製してtert-ブチル2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)アセタート(138.5mg、22%)を得た。MS:571ES+(C28H42N6O5Si)。
0℃のtert-ブチル2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)アセタート(Int-84、138.5mg、0.24mmol)のDCM(2mL)溶液にTFA(1.02mL、13.35mmol)を加えた。反応混合物を室温まで温め、3時間攪拌した。反応混合物をDCMで2回濃縮し、得られた黄色の油を真空下で2時間乾燥させて黄色の固体を得た。これを1:1のACN/pH7リン酸緩衝液約2mLに溶かし、C18 ISCO(水100%、3分間、次いで50%ACN、4分間)により精製して2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((Z)-N’-ヒドロキシ-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)酢酸(67.9mg、70%)を淡黄色の固体として得た。MS:401ES+(C18H20N6O5)。
室温の2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((Z)-N’-ヒドロキシ-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)酢酸(Int-85、67.9mg、0.17mmol)のDMF(2mL)溶液に塩化アンモニウム(36.29mg、0.68mmol)、HATU(128.96mg、0.34mmol)およびDIEA(0.12mL、0.68mmol)を加えた。反応混合物を室温で15分間攪拌し、次いで酢酸エチルで希釈し、飽和炭酸水素ナトリウム溶液およびブライン/水(1:1)で洗浄した。水層を酢酸エチルで2回抽出した。有機層をプールし、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー(0%~90%のアセトン/DCM)により2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((Z)-N’-ヒドロキシ-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)アセトアミド(48.9mg、72%)を得た。MS:400ES+(C18H21N7O4)。
0℃の2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((Z)-N’-ヒドロキシ-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)アセトアミド(Int-86、48.9mg、0.12mmol)(純度約50~60%)のDCM溶液にtert-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホナート(0.03mL、0.12mmol)および2,6-ルチジン(0.01mL、0.12mmol)を加えた。反応混合物を室温で30分間攪拌した。出発物質、モノTBS保護体およびビスTBS保護体の混合物がみられる。tert-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホナート(0.03mL、0.12mmol)および2,6-ルチジン(0.01mL、0.12mmol)をさらに加えた。1時間後、主要生成物はビスTBS保護体である。再びtert-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホナート(0.03mL、0.12mmol)および2,6-ルチジン(0.01mL、0.12mmol)をさらに加えた。さらに1時間後、反応混合物をジクロロメタンで希釈し、飽和塩化アンモニウム溶液で洗浄した。有機層を硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー(0%~100%の酢酸エチル/ヘキサン)により2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)-N-(tert-ブチルジメチルシリル)アセトアミド(23.9mg、31%)を得た。MS:628ES+(C30H49N7O4Si2)。
2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)-N-(tert-ブチルジメチルシリル)アセトアミド(Int-87、31.1mg、0.05mmol)をメタノール(1mL)および酢酸エチル(1mL)に溶かした溶液に窒素をパージした。パラジウム炭素(5.27mg、0.005mmol)を加え、反応混合物に再びパージを実施し、水素バルーン下に置き、1時間45分攪拌した。反応混合物を0.45μmフィルターでろ過し、濃縮してN-(tert-ブチルジメチルシリル)-2-((4R,8S)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-5-ヒドロキシ-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)アセトアミド(24.5mg、92%)を得た。MS:538ES+(C23H43N7O4Si2)。
室温のN-(tert-ブチルジメチルシリル)-2-((4R,8S)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-5-ヒドロキシ-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)アセトアミド(Int-88、24.5mg、0.05mmol)のピリジン(1mL)溶液に三酸化硫黄ピリジン錯体(43.5mg、0.27mmol)を加えた。反応混合物を室温で3時間攪拌し、次いで濃縮し、真空下で乾燥させた。シリカゲルクロマトグラフィー(0%~100%のアセトン/ジクロロメタン)により(4R,8S)-1-(2-((tert-ブチルジメチルシリル)アミノ)-2-オキソエチル)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(Int-89)、MS:618ES+(C23H43N7O7Si2S)と、(4R)-1-(2-アミノ-2-オキソエチル)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(Int-90)(16.4mg、64%)、MS:504ES+(C17H29N7O7SiS)の1:1混合物を得た。
tert-ブチル(2-ホルミルチアゾール-4-イル)カルバマート(500mg、2.19mmol)をメタノール(100mL)およびTHF(50mL)に入れた-16℃の懸濁液にLiBH4(5.48mL、10.95mmol)のTHF溶液を滴加した。-16℃で2時間攪拌した後、飽和塩化アンモニウム溶液(100mL)で反応を停止させた。溶媒を除去した。残渣をDCM(100mL)と飽和塩化アンモニウム溶液(100mL)の間で分配した。有機層を収集し、水(50mL)、ブライン(50mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮した。残渣をEtOAcで研和してtert-ブチル(2-(ヒドロキシメチル)チアゾール-4-イル)カルバマート(504mg、99%)を白色の固体として得た。MS:231ES+(C9H14N2O3S)。
0℃のtert-ブチル(2-(ヒドロキシメチル)チアゾール-4-イル)カルバマート(Int-91、500mg、2.18mmol)のDCM(50mL)溶液にDIEA(0.76mL、4.36mmol)、次いでメタンスルホニルクロリド(0.19mL、2.4mmol)を加えた。反応混合物を0℃で2時間攪拌した。DCM(50mL)および飽和塩化アンモニウム溶液(100mL)を加えた。有機層を分離し、水(50mL)、ブライン(50mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)チアゾール-2-イル)メチルメタンスルホナート(673mg、99%)を白色の固体として得た。MS:309ES+(C10H16N2O5S2)。
0℃の(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)チアゾール-2-イル)メチルメタンスルホナート(Int-92、606mg、1.96mmol)のDMF(20mL)溶液にアジ化ナトリウム(255mg、3.93mmol)を加えた。反応混合物を室温で16時間攪拌した。DCM(100mL)および飽和塩化アンモニウム溶液(100mL)を加えた。有機層を分離し、水(50mL)、ブライン(50mL)で洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して粗生成物を得た。これをEtOAcで研和してtert-ブチル(2-(アジドメチル)チアゾール-4-イル)カルバマート(501mg、99%)を白色の固体として得た。MS:255ES+(C9H13N5O2S)。
Int-14(スキーム1、工程14)に関して示したものと同じ反応条件に従い、tert-ブチル(2-(アジドメチル)チアゾール-4-イル)カルバマート(Int-93、501mg、01.96mmo)を基質に、EtOHを溶媒に用いてInt-94を合成し、tert-ブチル(2-(アミノメチル)チアゾール-4-イル)カルバマート(380mg、84%)を白色の固体として得た。MS:230ES+(C9H15N3O2S)。
Int-14(スキーム1、工程14)に関して示したものと同じ反応条件に従い、メチル(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(Int-7、2298mg、6.71mmol)を基質に用いてInt-95を合成し、メチル(4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(722mg、42%)を得た。MS:253ES+(C10H12N4O4)。
メチル(4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(Int-95、406mg、1.61mmol)のDMF(5mL)懸濁液に炭酸セシウム(629.34mg、1.93mmol)および臭化アリル(0.14mL、1.61mmol)を加えた。反応混合物を室温で3時間攪拌した。水(20mL)およびEtOAc(50mL)を加えた。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(20gシリカゲル、ヘキサン中0~100%のEtOAc)により精製してメチル(4R,8S)-5-(アリルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(350mg、74%)を白色の固体として得た。MS:293ES+(C13H16N4O4)。
Int-8(スキーム1、工程8)に関して示したものと同じ反応条件に従い、メチル(4R,8S)-5-(アリルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(Int-96、350mg、1.19mmol)を基質に用いてInt-97を合成し、(4R,8S)-5-(アリルオキシ)-8-(ヒドロキシメチル)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(106mg、33%)を白色の固体として得た。MS:265ES+(C12H16N4O3)。
Int-9(スキーム1、工程9)に関して示したものと同じ反応条件に従い、(4R,8S)-5-(アリルオキシ)-8-(ヒドロキシメチル)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(Int-97、106mg、0.40mmol)を基質に用いてInt-98を合成し、(4R,8S)-5-(アリルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボアルデヒド(105mg、99%)を白色の固体として得た。MS:263ES+(C12H14N4O3)。
Int-10(スキーム1、工程10)に関して示したものと同じ反応条件に従い、(4R,8S)-5-(アリルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボアルデヒド(Int-98、647mg、2.467mmol)を基質に用いてInt-99を合成し、(E)-5-(アリルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボアルデヒドオキシム(684mg、99%)を白色の固体として得た。MS:278ES+(C12H15N5O3)。
Int-11(スキーム1、工程11)に関して示したものと同じ反応条件に従い、(E)-5-(アリルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボアルデヒドオキシム(Int-99、614mg、2.21mmol)を基質に用いてInt-100を合成し、(4R,8S,Z)-5-(アリルオキシ)-N-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルビミドイルクロリド(690mg、99%)を白色の固体として得た。MS:312ES+(C12H14ClN5O3)。
Int-12(スキーム1、工程12)に関して示したものと同じ反応条件に従い、(4R,8S,Z)-5-(アリルオキシ)-N-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルビミドイルクロリド(Int-100、470mg、1.51mmol)およびtert-ブチル(2-(アミノメチル)チアゾール-4-イル)カルバマート(Int-94、380mg、1.66mmol)を基質に用いてInt-101を合成し、tert-ブチル(2-(((4R,8S,Z)-5-(アリルオキシ)-N’-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド)メチル)チアゾール-4-イル)カルバマート(115mg、15%)を白色の固体として得た。MS:505ES+(C21H28N8O5S)。
Int-13(スキーム1、工程13)に関して示したものと同じ反応条件に従い、tert-ブチル(2-(((4R,8S,Z)-5-(アリルオキシ)-N’-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド)メチル)チアゾール-4-イル)カルバマート(Int-101、58mg、0.11mmol)を基質に用いてInt-102を合成し、tert-ブチル(2-((Z)-3-((4R,8S)-5-(アリルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-6,6,7,7-テトラメチル-5-オキサ-2,4-ジアザ-6-シラオクト-3-エン-1-イル)チアゾール-4-イル)カルバマート(65mg、92%)を白色の固体として得た。MS:619ES+(C27H42N8O5SiS)。
室温のtert-ブチル(2-((Z)-3-((4R,8S)-5-(アリルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-6,6,7,7-テトラメチル-5-オキサ-2,4-ジアザ-6-シラオクト-3-エン-1-イル)チアゾール-4-イル)カルバマート(Int-102、65mg、0.10mmol)のMeOH(5mL)溶液に1,3-ジメチルバルビツール酸(32.8mg、0.21mmol)およびテトラキス(トリフェニルホスフィン)パラジウム(0)(121.38mg、0.11mmol)を加えた。反応混合物を室温で1時間攪拌し、濃縮した。
Int-16(スキーム1、工程16)に関して示したものと同じ反応条件に従い、(4R,8S)-8-((Z)-N-((4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)チアゾール-2-イル)メチル)-N’-ヒドロキシカルバムイミドイル)-1-メチル-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(Int-103、54mg、0.082mmol)を基質に用いてInt-104を合成し、(4R,8S)-8-((Z)-N-((4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)チアゾール-2-イル)メチル)-N’-ヒドロキシカルバムイミドイル)-1-メチル-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(38mg、85%)を白色の固体として得た。MS:545ES+(C18H24N8O8S2)。
Int-20(スキーム3、工程1および2)に関して示したものと同じ反応条件に従い、tert-ブチル(2-(((4R,8S,Z)-5-(アリルオキシ)-N’-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド)メチル)チアゾール-4-イル)カルバマート(Int-101、52.3mg、0.10mmol)を基質に用いてInt-105およびInt-106を合成し、tert-ブチル(Z)-3-((4R,8S)-5-(アリルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-1-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)チアゾール-2-イル)-8,8-ジメチル-6-オキソ-5-オキサ-2,4,7-トリアザノン-3-エン-9-オアート(Int-105、18mg、25%)、MS:690ES+(C30H43N9O8S);およびtert-ブチル(2-((3-((4R,8S)-5-(アリルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-5-オキソ-1,2,4-オキサジアゾール-4(5H)-イル)メチル)チアゾール-4-イル)カルバマート(Int-106、27mg、49%)を得た。MS:531ES+(C22H26N8O6S)。
Int-103(スキーム15、工程7)に関して示したものと同じ反応条件に従い、tert-ブチル(Z)-3-((4R,8S)-5-(アリルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-1-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)チアゾール-2-イル)-8,8-ジメチル-6-オキソ-5-オキサ-2,4,7-トリアザノン-3-エン-9-オアート(Int-105、18mg、0.03mmol)を基質に用いてInt-107を合成し、tert-ブチル(Z)-1-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)チアゾール-2-イル)-8,8-ジメチル-3-((4R,8S)-1-メチル-6-オキソ-5-(スルホオキシ)-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-6-オキソ-5-オキサ-2,4,7-トリアザノン-3-エン-9-オアート(15mg、95%)を白色の固体として得た。MS:730ES+(C27H39N9O11S2)。
Int-107(スキーム16、工程2)に関して示したものと同じ反応条件に従い、tert-ブチル(2-((3-((4R,8S)-5-(アリルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-5-オキソ-1,2,4-オキサジアゾール-4(5H)-イル)メチル)チアゾール-4-イル)カルバマート(Int-106、27mg、0.05mmol)を基質に用いてInt-108を合成し、(4R,8S)-8-(4-((4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)チアゾール-2-イル)メチル)-5-オキソ-4,5-ジヒドロ-1,2,4-オキサジアゾール-3-イル)-1-メチル-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(13mg、99%)を白色の固体として得た。MS:571ES+(C19H22N8O9S2)。
室温の((4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルビミドイルクロリド(Int-11、500mg、1.38mmol)のDCM(8mL)溶液にシアン化トリメチルシリル(0.21mL、1.66mmol)およびDIEA(0.36mL、2.07mmol)を加えた。反応混合物を周囲温度で30分間攪拌した。飽和塩化アンモニウム溶液およびDCMを加えた。有機層を分離し、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。シリカゲルクロマトグラフィー(0%~50%の酢酸エチル/ヘキサン)により((4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルビミドイルシアニド(150mg、収率30.8%)を白色の固体として得た。MS:353ES+(C17H16N6O3)。
室温の((4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルビミドイルシアニド(Int-109、150mg、0.43mmol)のDCM(50mL)溶液にtert-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホナート(0.21mL、0.64mmol)および2,6-ルチジン(0.074mL、0.64mmol)を加えた。反応混合物を室温で30分間攪拌した。DCMおよび飽和塩化アンモニウム溶液を加えた。有機層を分離し、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー(0%~50%の酢酸エチル/ヘキサン)により((4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルビミドイルシアニド(120mg、収率60.4%)を白色の固体として得た。MS:467ES+(C23H30N6O3Si)。
0℃の((4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルビミドイルシアニド(Int-110、120mg、0.26mmol)と塩化ニッケル(II)六水和物(50.0mg、0.39mmol)のMeOH(10mL)混合物にNaBH4(77.8mg、2.06mmol)を加えた。反応混合物を0℃で30分間攪拌した。飽和塩化アンモニウム溶液を加えた。次いで、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗(4R,8S)-8-((E)-2-アミノ-1-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)エチル-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(80mg、収率66.1%)を白色の固体として得た。これを次の工程に直接使用した。MS:471ES+(C23H34N6O3Si)。
(4R,8S)-8-((E)-2-アミノ-1-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)エチル-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(Int-111、80mg、0.17mmol)のピリジン(3mL)溶液に4-エチル-2,3-ジオキソ-ピペラジン-1-カルボニルクロリド(41.7mg、0.20mmol)およびTEA(34.4mg、0.34mmol)を加えた。反応混合物を室温で20分間攪拌した。飽和塩化アンモニウム溶液を加えた。次いで、混合物を酢酸エチルで抽出した。有機層を分離し、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー(0%~100%の酢酸エチル/ヘキサン)によりN-((E)-2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-2-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)エチル)-4-エチル-2,3-ジオキソピペラジン-1-カルボキサミド(20mg、収率18.4%)を白色の固体として得た。MS:639ES+(C30H42N8O6Si)。
N-((E)-2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-2-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)エチル)-4-エチル-2,3-ジオキソピペラジン-1-カルボキサミド(Int-112、20mg、0.031mmol)をMeOH(2mL)および酢酸エチル(4mL)に溶かした溶液に窒素を3回パージし、10%Pd/C(9.02mg、0.0094mmol)を加えた。反応混合物に窒素を3回パージし、次いで水素雰囲気下、周囲温度で2時間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮してN-((E)-2-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)-2-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)エチル)-4-エチル-2,3-ジオキソピペラジン-1-カルボキサミド(15mg、収率87.3%)を白色の固体として得た。MS:549ES+(C23H36N8O6Si)。
周囲温度のN-((E)-2-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)-2-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)エチル)-4-エチル-2,3-ジオキソピペラジン-1-カルボキサミド(Int-113、15mg、0.0273mmol)のピリジン(2mL)溶液に三酸化硫黄ピリジン錯体(13.0mg、0.082mmol)を加えた。反応混合物を3時間攪拌し、次いで、減圧下で濃縮した。この物質をDCMで研和し、固体をろ過により除去した。ろ液を濃縮して粗生成物を得た。これをpH約7の緩衝液に溶かし、逆相クロマトグラフィー(Sepabeads、12g、0~50%のACN/水)により精製して(4R,8S)-8-((E)-1-(4-エチル-2,3-ジオキソピペラジン-1-イル)-7,7,8,8-テトラメチル-1-オキソ-6-オキサ-2,5-ジアザ-7-シラノン-4-エン-4-イル)-1-メチル-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(10mg、収率58.2%)を白色の固体として得た。MS:627ES-(C23H36N8O9SiS)。
攪拌している0℃の(4R,8S)-8-((E)-2-アミノ-1-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)エチル-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(Int-111、200mg、0.42mmol)のDCM(10mL)溶液にTEA(86.2mg、0.849mmol)およびtert-ブチル(クロロスルホニル)カルバマート(Int-29、109.9mg、0.509mmol)を加えた。反応混合物を室温で20分間攪拌した。反応混合物に飽和塩化アンモニウム溶液およびDCMを加えた。有機層を分離し、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中0~100%のEtOAc)により精製してtert-ブチル(N-((E)-2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-2-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)エチル)スルファモイル)カルバマート(50mg、収率18.1%)を白色の固体として得た。MS:648ES-(C28H43N7O7SiS)。
tert-ブチル(N-((E)-2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-2-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)エチル)スルファモイル)カルバマート(Int-115、50mg、0.0769mmol)を酢酸エチル(8mL)およびメタノール(4mL)に溶かした溶液に窒素を3回パージし、10%Pd/C(22.2mg、0.023mmol)を加えた。反応混合物に窒素を3回パージし、次いで水素雰囲気下、周囲温度で2時間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮してtert-ブチル(N-((E)-2-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ-2-(4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-)エチル)スルファモイル)カルバマート(38mg、88.2%)を白色の固体として得た。MS:560ES+(C21H37N7O7SiS)。
周囲温度のtert-ブチル(N-((E)-2-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ-2-(4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-)エチル)スルファモイル)カルバマート(Int-116、38mg、0.0679mmol)のピリジン(2mL)溶液に三酸化硫黄ピリジン錯体(32.4mg、0.204mmol)を加えた。反応混合物を室温で時間攪拌し、次いで、減圧下で濃縮した。この物質をDCMで研和し、固体をろ過により除去した。ろ液を濃縮した。得られた固体を逆相クロマトグラフィー(Sepabeads、0~50%のACN/水)により精製して(4R,8S)-8-((E)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)スルファモイル)アミノ)-1-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)エチル-1-メチル-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(30mg、69.1%)を白色の固体として得た。MS:638ES-(C21H37N7O10SiS2)。
攪拌している(4R,8S)-8-((E)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)スルファモイル)アミノ)-1-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)エチル-1-メチル-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(Int-117、20mg、0.0313mmol)のDCM(2mL)溶液にTBAT(20.2mg、0.0375mmol)を加えた。反応混合物を室温で3時間攪拌した。溶媒を除去した。得られた固体を逆相クロマトグラフィー(Sepabeads、0~50%のACN/水)により精製して(4R,8S)-8-((E)-2-((N-(tert-ブトキシカルボニル)スルファモイル)アミノ)-1-(ヒドロキシイミノ)エチル)-1-メチル-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素をテトラブチルアンモニウム塩(20mg、83.3%)として得た。MS:524ES-(C15H23N7O10S2)。
0℃の(4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N’-ヒドロキシ-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(Int-12、70mg、0.2mmol)のDMF(1mL)溶液にNaH(11.8mg、0.29mmol、60%)を加え、10分間攪拌し、2-ブロモアセトアミド(32.5mg、0.24mmol)を加えた。次いで、これを室温まで温め、10分間攪拌した。酢酸エチルおよび飽和塩化アンモニウム溶液を加えた。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(DCM中0~100%のアセトン)により精製して2-((((Z)-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)アセトアミド(58mg、収率71%)を白色の固体として得た。MS:414ES+(C19H23N7O4)。
2-((((Z)-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)アセトアミド(Int-119、58mg、0.14mmol)のMeOH(5mL)溶液に窒素を3回パージし、10%Pd/C(29.9mg、0.03mmol)を加えた。反応混合物に窒素を3回パージし、次いで水素雰囲気下、室温で2時間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮して2-((((Z)-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)アセトアミド(40mg、88.1%)を白色の固体として得た。MS:324ES+(C12H17N7O4)。
0℃の(4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N’-ヒドロキシ-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(Int-12、150mg、0.42mmol)のDMF(2mL)溶液にNaH(25.2mg、0.63mmol、60%)を加えた。0℃で10分間攪拌した後、ブロモ酢酸tert-ブチル(0.014mL、0.51mmol)を加えた。次いで、これを室温まで温め、10分間攪拌した。酢酸エチルおよび飽和塩化アンモニウム溶液を加えた。有機層を分離し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(DCM中0~100%のアセトン)により精製して2種類の生成物を得た。
Int-121:白色の固体のtert-ブチル2-((((Z)-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)アセタート(120mg、収率60%)。MS:471ES+(C23H30N6O5)。
Int-122:白色の固体の3-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-4-メチル-4H-1,2,4-オキサジアジン-5(6H)-オン(30mg、収率17.9%)。MS:397ES+(C19H20N6O4)。
スキーム21の工程1のInt-121およびInt-122に関して示したものと同じ反応に従い、tert-ブチル2-ブロモ-2-メチル-プロパノアートを用いて、tert-ブチル2-((((Z)-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)-2-メチルプロパノアート(Int-123)および3-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-4,6,6-トリメチル-4H-1,2,4-オキサジアジン-5(6H)-オン(Int-124)を合成した。
tert-ブチル2-((((Z)-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)アセタート(Int-121、100mg、0.21mmol)のDCM(3mL)溶液にTFA(0.81mL、10.63mmol)を加えた。反応混合物を室温で2時間攪拌した。TFAを除去して2-((((Z)-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)酢酸(88mg、収率99%)を白色の固体として得た。MS:415ES+(C19H22N6O5)。
2-((((Z)-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)酢酸(Int-125、30mg、0.07mmol)のDMF(1.5mL)溶液にHATU(55.1mg、0.14mmol)、tert-ブチル(2-アミノエチル)カルバマート(17.4mg、0.11mmol)およびヒューニッヒ塩基(0.03mL、0.14mmol)を加えた。反応混合物を室温で30分間攪拌した。酢酸エチルおよび飽和塩化アンモニウム溶液を加えた。有機層を分離し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(0~100%のEtOAc/ヘキサン)により精製してtert-ブチル((Z)-3-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-7-オキソ-5-オキサ-2,4,8-トリアザデカ-3-エン-10-イル)カルバマート(35mg、86.7%)を白色の固体として得た。MS:557ES+(C26H36N8O6)。
tert-ブチル((Z)-3-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-7-オキソ-5-オキサ-2,4,8-トリアザデカ-3-エン-10-イル)カルバマート(Int-126、35mg、0.06mmol)のMeOH(3mL)溶液に窒素を3回パージし、10%Pd/C(13.1mg、0.126mmol)を加えた。反応混合物に窒素を3回パージし、次いで水素雰囲気下、室温で2時間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮してtert-ブチル((Z)-3-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-7-オキソ-5-オキサ-2,4,8-トリアザデカ-3-エン-10-イル)カルバマート(25mg、85%)を白色の固体として得た。MS:467ES+(C19H30N8O6)。
室温のtert-ブチル((Z)-3-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-7-オキソ-5-オキサ-2,4,8-トリアザデカ-3-エン-10-イル)カルバマート(Int-127、25mg、0.05mmol)のピリジン(2mL)溶液に三酸化硫黄ピリジン錯体(25.6mg、0.16mmol)を加えた。反応混合物を6時間攪拌し、次いで、減圧下で濃縮して粗生成物を得た。この物質を逆相クロマトグラフィー(Sepabeads、0~50%のACN/水)により精製して(4R,8S)-8-((Z)-N’-(2-((2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)エチル)アミノ)-2-オキソエトキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-1-メチル-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(20mg、68.2%)を白色の固体として得た。MS:545ES-(C19H30N8O9S)。
上記に従い、または当業者に容易にわかる同様の反応を用いて表4の全化合物を合成した。いずれの化合物もtransラセミとして単離した。
tert-ブチル2-((((Z)-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)アセタート(Int-121、30mg、0.0638mmol)のMeOH(3mL)溶液に窒素を3回パージし、10%Pd/C(10mg、0.094mmol)を加えた。反応混合物に窒素を3回パージし、次いで水素雰囲気下、室温で2時間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮して溶液tert-ブチル2-((((Z)-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)アセタート(23mg、94.8%)を白色の固体として得た。MS:381ES+(C16H24N6O5)。
室温のtert-ブチル2-((((Z)-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)アセタート(Int-129、23mg、0.0605mmol)のピリジン(1mL)溶液に三酸化硫黄ピリジン錯体(28.87mg、0.181mmol)を加えた。反応混合物を16時間攪拌し、次いで、減圧下で濃縮して粗生成物を得た。これを逆相クロマトグラフィー(Sepabeads、0~50%のACN/水)により精製してtert-ブチル2-((((Z)-((4R,8S)-1-メチル-6-オキソ-5-(スルホオキシ)-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)アセタート(18mg、58.2%)を白色の固体として得た。MS:459ES-(C16H24N6O8S)。
3-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-4-メチル-4H-1,2,4-オキサジアジン-5(6H)-オン(Int-122、30mg、0.0757mmol)のMeOH(3mL)溶液に窒素を3回パージし、10%Pd/C(8.05mg、0.0076mmol)を加えた。反応混合物に窒素を3回パージし、次いで水素雰囲気下、室温で2時間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮して3-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-4-メチル-4H-1,2,4-オキサジアジン-5(6H)-オン(20mg、86.3%)を白色の固体として得た。MS:307ES+(C12H14N6O4)。
攪拌している0℃の(4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N’-ヒドロキシ-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(Int-12、50mg、0.143mmol)のDCM(25mL)溶液にヒューニッヒ塩基(0.029mL、0.168mmol)を加えた。トリホスゲン(20.8mg、0.701mmol)のDCM(15mL)溶液を滴加した。添加後、反応物を室温まで温め、室温で30分間攪拌した。反応物をDCMで希釈した。有機層を分離し、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(0~100%のEtOAc/ヘキサン)により精製して3-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-4-メチル-1,2,4-オキサジアゾール-5(4H)-オン(30mg、55.9%)を白色の固体として得た。MS:383ES+(C18H18N6O4)。
3-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-4-メチル-1,2,4-オキサジアゾール-5(4H)-オン(Int-132、15mg、0.0392mmol)のメタノール(3mL)溶液に窒素を3回パージし、10%Pd/C(4.17mg、0.0039mmol)を加えた。反応混合物に窒素を3回パージし、次いで水素雰囲気下、周囲温度で2時間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮して3-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-4-メチル-1,2,4-オキサジアゾール-5(4H)-オン(8mg、69.8%)を白色の固体として得た。MS:293ES+(C11H12N6O4)。
攪拌している0℃のtert-ブチル(4-ヒドロキシブチル)カルバマート(1.4g、7.4mmol)のDCM(50mL)溶液にTEA(2.04mL、14.6mmol)を加えた。メタンスルホニルクロリド(0.69mL、8.88mmol)を滴加した。添加後、反応混合物を室温まで温め、室温で3時間攪拌した。DCMを加えた。有機層を希HCl溶液、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮してInt-134の4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチルメタンスルホナート(1.8g、収率91%)を黄色の油として得た。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.30(s,9H);1.40-1.50(m,2H);1.60-1.70(m,2H);2.92(m,2H),3.15(s,3H);4.25(m,2H);6.79(m,1H)。
Int-134に関して示したものと同じ反応に従い、tert-ブチル(2-ヒドロキシエチル)カルバマートを基質に用いて2-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)エチルメタンスルホナートを合成した。1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:1.39(s,9H);3.15(s,3H);3.35(m,2H);4.25(m,2H);7.12(m,1H)。
攪拌している((4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルビミドイルシアニド(Int-110、100mg、0.214mmol)のトルエン(5mL)溶液にアセトアルデヒドオキシム(101.3mg、1.71mmol)およびInCl3(47.4mg、0.214mmol)を加えた。反応物を60℃で8時間加熱した。反応混合物を室温まで冷却した。反応混合物に飽和塩化アンモニウム溶液および酢酸エチルを加えた。有機層を分離し、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中0~100%のEtOAc)により精製して(Z)-2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-2-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)アセトアミド(32mg、収率30.8%)を白色の固体として得た。MS:485ES+(C23H32N6O4Si)。
(Z)-2-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-2-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)アセトアミド(Int-136、32mg、0.066mmol)を酢酸エチル(5mL)およびメタノール(2.5mL)に溶かした溶液に窒素を3回パージし、10%Pd/C(19.02mg、0.0198mmol)を加えた。反応混合物に窒素を3回パージし、次いで水素雰囲気下、周囲温度で30分間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮して(Z)-2-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)-2-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)アセトアミド(25mg、95.9%)を白色の固体として得た。MS:395ES+(C16H26N6O4Si)。
(Z)-2-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)-2-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)アセトアミド(Int-137、25mg、0.063mmol)のピリジン(2mL)溶液に三酸化硫黄ピリジン錯体(30.3mg、0.19mmol)を加えた。反応混合物を室温で3時間攪拌し、次いで、減圧下で濃縮した。この物質をDCMで研和し、固体をろ過により除去した。ろ液を濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(DCM中0~100%のアセトン)により精製して(4R,8S)-8-((Z)-2-アミノ-1-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシイミノ)-2-オキソエチル-1-メチル-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(20mg、66.5%)を白色の固体として得た。MS:473ES-(C16H26N6O7SiS)。
攪拌しているメチル((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(Int-79、700mg、2.13mmol)のDMF(8mL)溶液に4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチルメタンスルホナート(Int-134、1424mg、2.13mmol)およびCs2CO3(4.17g、12.8mmol)を加えた。反応物を80℃で20分間加熱し、室温まで冷却した。反応混合物に酢酸エチルおよび水を加えた。有機層を分離し、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(ヘキサン中0~100%のEtOAc)により精製してメチル((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(230mg、収率21.6%)を白色の固体として得た。MS:500ES+(C25H33N5O6)。
メチル((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシラート(Int-139、230mg、0.46mmol)をTHF(5mL)および水(1mL)に溶かした0℃の溶液に水酸化リチウム(0.48mL、0.48mmol)を加えた。反応混合物を室温まで温め、室温で1時間攪拌した。THFを除去した。水層に1N HClを加えてpH約3~4に調整し、生成物を酢酸エチルで抽出した。有機層を無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボン酸(200mg、89.5%)を白色の固体として得た。MS:486ES+(C24H31N5O6)。
室温の(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボン酸(Int-140、200mg、0.41mmol)のDCM(5mL)溶液にO-(tert-ブチルジメチルシリル)ヒドロキシルアミン(78.9mg、0.54mmol)およびEDC(94.8mg、0.49mmol)を加えた。反応混合物を室温で40分間攪拌した。反応混合物を直接シリカゲルにかけ、フラッシュクロマトグラフィー(20gシリカゲル、0%~50%の酢酸エチル/ヘキサン)により精製してtert-ブチル(4-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)カルバモイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)ブチル)カルバマート(103mg、40.6%)を白色の泡状物質として得た。MS:615ES+(C30H46N6O6Si)。
-78℃のtert-ブチル(4-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)カルバモイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)ブチル)カルバマート(Int-141、100mg、0.16mmol)とトリエチルアミン(0.090mL、0.65mmol)のDCM(2mL)溶液にトリフルオロメタンスルホン酸無水物(0.055mL、0.33mmol)を加えた。反応混合物を5分間攪拌した。この溶液にメチルアミン(0.36mL、0.72mmol、THF中2N)を滴加した。次いで、反応混合物を放置して室温まで温め、2時間攪拌した。反応混合物をDCMで希釈し、飽和塩化アンモニウム溶液で1回洗浄した。有機層を硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー(0%~50%の酢酸エチル/ヘキサン)によりtert-ブチル(4-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)ブチル)カルバマートを白色の泡状物質(18mg、17.7%)として得た。MS:628ES+(C31H49N7O5Si)。
tert-ブチル(4-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)ブチル)カルバマート(Int-142、18mg、0.0287mmol)の酢酸エチル(3mL)溶液を窒素で脱気し、Pd/C(3.6mg、0.0057mmol)を加えた。混合物を再び脱気し、水素バルーン下に置いた。反応混合物を2時間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮してtert-ブチル(4-((4R,8S)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-5-ヒドロキシ-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)ブチル)カルバマート(14mg、収率90.8%)を無色の油として得た。MS:538ES+(C24H43N7O5Si)。
室温のtert-ブチル(4-((4R,8S)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-5-ヒドロキシ-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-1-イル)ブチル)カルバマート(Int-143、14mg、0.03mmol)のピリジン(2mL)溶液に三酸化硫黄ピリジン錯体(33.15mg、0.21mmol)を加えた。反応混合物を室温で3時間攪拌し、次いでDCMで希釈し、ろ過して固体を除去した。ろ液を濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(DCM中0~100%のアセトン)により精製して(4R,8S)-1-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチル)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(13mg、80.8%)を無色の油として得た。MS:616ES-(C24H43N7O8SiS)。
(4R,8S)-1-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチル)-8-((Z)-N’-((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(Int-144、13mg、0.021mmol)を酢酸エチル(1mL)およびTHF(0.5mL)に溶かした室温の溶液にHF.ピリジン(0.0006mL、0.023mmol)を加えた。反応混合物を30分間攪拌した。30分後、反応混合物を濃縮して(4R,8S)-1-(4-((tert-ブトキシカルボニル)アミノ)ブチル)-8-((Z)-N’-ヒドロキシ-N-メチルカルバムイミドイル)-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(11mg、100%)を白色の固体として得た。MS:504ES+(C18H29N7O8S)。
攪拌している(4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N’-ヒドロキシ-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(Int-12、110mg、0.31mmol)のDCM(10mL)溶液にTEA(0.064mL、0.46mmol)および塩化アセチル(0.029mL、0.37mmol)を加えた。反応物を室温で30分間攪拌した。飽和塩化アンモニウム溶液を加えて反応を停止させた。有機層を分離し、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(DCM中0~100%のアセトン)により精製して(4R,8S,Z)-N’-アセトキシ-5-(ベンジルオキシ)-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(70mg、収率56.9%)を白色の固体として得た。MS:399ES+(C19H22N6O4)。
(4R,8S,Z)-N’-アセトキシ-5-(ベンジルオキシ)-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(Int-146、70mg、0.175mmol)のメタノール(5mL)溶液に窒素を3回パージし、10%Pd/C(12.9mg、0.012mmol)を加えた。反応混合物に窒素を3回パージし、次いで水素雰囲気下、周囲温度で30分間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮して(4R,8S,Z)-N’-アセトキシ-5-ヒドロキシ-N,1-ジメチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボキシイミドアミド(50mg、92.3%)を白色の固体として得た。MS:309ES+(C12H16N6O4)。
攪拌している0℃の(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルボアルデヒド(Int-9、200mg、0.64mmol)のTHF(10mL)溶液にMeMgBr(0.38mL、1.15mmol、Et2O中3N)を滴加した。反応物を0℃で4時間攪拌した。飽和塩化アンモニウム溶液を加えて反応を停止させた。酢酸エチルを加えた。有機層を分離し、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((R)-1-ヒドロキシエチル)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(100mg、47.6%)を白色の固体として得た。これを次の工程に直接使用した。MS:329ES+(C17H20N4O3)。
周囲温度の(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-((R)-1-ヒドロキシエチル)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(Int-148、100mg、0.30mmol)のジクロロメタン(10mL)溶液にデス・マーチンペルヨージナン(155mg、0.37mmol)を加えた。反応混合物を30分間攪拌した。反応混合物にチオ硫酸ナトリウム水溶液(1N)および飽和炭酸水素ナトリウム水溶液を加え、15分間攪拌した。二相性の混合物を分離し、ジクロロメタンで水性抽出した。合わせた有機層を無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、ろ過し、濃縮して粗生成物を得た。フラッシュクロマトグラフィー(0%~100%の酢酸エチル/ヘキサン)により(4R,8S)-8-アセチル-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(40mg、40.2%)を白色の固体として得た。MS:327ES+(C17H18N4O3)。
周囲温度の(4R,8S)-8-アセチル-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(Int-149、40mg、0.12mmol)のピリジン(2mL)溶液に塩酸ヒドロキシルアミン(10.2mg、0.15mmol)を加えた。反応混合物を30分間攪拌した。塩化アンモニウム水溶液および酢酸エチルを加えた。有機層を分離し、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮して(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-(E)-1-(ヒドロキシイミノ)エチル)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(30mg、71.7%)を白色の固体として得た。これを次の工程に直接使用した。MS:342ES+(C17H19N5O3)。
0℃の(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-(E)-1-(ヒドロキシイミノ)エチル)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(Int-150、30mg、0.088mmol)のDCM(5mL)溶液にtert-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホナート(0.022mL、0.097mmol)および2,6-ルチジン(0.012mL、0.11mmol)を加えた。反応混合物を室温まで温め、2時間攪拌した。DCMおよび飽和塩化アンモニウム溶液を加えた。有機層を分離し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(0~100%のEtOAc/ヘキサン)により精製して(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-(E)-1-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)エチル)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(25mg、62.4%)を白色の固体として得た。MS:456ES+(C23H33N5O3Si)。
(4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-8-(E)-1-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)エチル)-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(Int-151、25mg、0.055mmol)のMeOH(10mL)溶液に窒素を3回パージし、10%Pd/C(5.84mg、0.0055mmol)を加えた。反応混合物に窒素を3回パージし、次いで水素雰囲気下、周囲温度で1時間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮して(4R,8S)-8-((E)-1-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)エチル)-5-ヒドロキシ-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(17mg、84.7%)を白色の固体として得た。MS:366ES+(C16H27N5O3Si)。
周囲温度の(4R,8S)-8-((E)-1-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)エチル)-5-ヒドロキシ-1-メチル-1,4,5,8-テトラヒドロ-6H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-6-オン(Int-152、17mg、0.047mmol)のピリジン(2mL)溶液に三酸化硫黄ピリジン錯体(1338mg、8.41mmol)を加えた。反応混合物を一晩攪拌し、次いで、減圧下で濃縮して粗生成物を得た。この物質をDCMで研和し、固体をさらにろ過により除去した。ろ液を濃縮した。残渣をフラッシュクロマトグラフィー(0%~100%のアセトン/DCM)により精製して(4R,8S)-8-((E)-1-(((tert-ブチルジメチルシリル)オキシ)イミノ)エチル)-1-メチル-6-オキソ-4,8-ジヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-5(6H)-イル硫酸水素(18mg、86.9%)を白色の固体として得た。MS:446ES+(C16H27N5O6SSi)。
MS:332ES+(C10H13N5O6S)1HNMR(300MHz,DMSO-d6)δ:3.04(m,1H);3.25(m,1H);3.30(s,3H);3.54(s,3H);4.62(m,1H);5.23(s,1H);7.30(s,1H);11.16(s,1H)。
室温の((4R,8S,Z)-5-(ベンジルオキシ)-N-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-カルビミドイルクロリド(Int-11、80mg、0.221mmol)のDCM(10mL)溶液にtert-ブチルN-(メチルアミノ)カルバマート(48.5mg、0.332mmol)およびヒューニッヒ塩基(85.7mg、0.66mmo)を加えた。反応混合物を周囲温度で30分間攪拌した。飽和塩化アンモニウム溶液およびDCMを加えた。有機層を分離し、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮してtert-ブチル2-((Z)-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(ヒドロキシイミノ)メチル)-2-メチルヒドラジン-1-カルボキシラート(60mg、57.5%)を白色の固体として得た。これを次の工程に直接使用した。MS:357ES+(C22H29N7O5)。
0℃のtert-ブチル2-((Z)-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(ヒドロキシイミノ)メチル)-2-メチルヒドラジン-1-カルボキシラート(Int-155、60mg、0.127mmol)のDCM(8mL)溶液にtert-ブチルジメチルシリルトリフルオロメタンスルホナート(0.064mL、0.28mmol)および2,6-ルチジン(0.037mL、0.32mmol)を加えた。反応混合物を室温まで温め、室温で1時間攪拌した。DCMおよび飽和塩化アンモニウム溶液を加えた。有機層を分離し、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸ナトリウムで乾燥させ、濃縮した。シリカゲルクロマトグラフィー(0%~100%の酢酸エチル/ヘキサン)によりtert-ブチル(Z)-4-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-3,7,7,8,8-ペンタメチル-6-オキサ-2,3,5-トリアザ-7-シラノン-4-エノアート(30mg、収率40.2%)を白色の固体として得た。MS:586ES+(C28H43N7O5Si)。
tert-ブチル(Z)-4-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-3,7,7,8,8-ペンタメチル-6-オキサ-2,3,5-トリアザ-7-シラノン-4-エノアート(Int-156、28mg、0.0478mmol)をMeOH(2mL)および酢酸エチル(4mL)に溶かした溶液に窒素を3回パージし、10%Pd/C(10.1mg、0.0096mmol)を加えた。反応混合物に窒素を3回パージし、次いで水素雰囲気下、周囲温度で1時間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮してtert-ブチル(Z)-4-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-3,7,7,8,8-ペンタメチル-6-オキサ-2,3,5-トリアザ-7-シラノン-4-エノアート(Int-157)、MS:496ES+(C21H37N7O5Si)とtert-ブチル2-((Z)-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(ヒドロキシイミノ)メチル)-2-メチルヒドラジン-1-カルボキシラート(Int-158)の混合物を白色の固体(18mg)として得た。MS:382ES+(C15H23N7O5)。
周囲温度のtert-ブチル(Z)-4-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)-3,7,7,8,8-ペンタメチル-6-オキサ-2,3,5-トリアザ-7-シラノン-4-エノアート(Int-157)とtert-ブチル2-((Z)-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(ヒドロキシイミノ)メチル)-2-メチルヒドラジン-1-カルボキシラート(Int-158)の混合物(18mg)のピリジン(2mL)溶液に三酸化硫黄ピリジン錯体(17.3mg、0.11mmol)を加えた。反応混合物を一晩攪拌し、次いで、減圧下で濃縮して粗生成物を得た。これをDCMで研和し、固体をろ過により除去した。ろ液を濃縮した。残渣を逆相クロマトグラフィー(Sepabeads、0~50%のACN/水)により精製して((((Z)-(2-(tert-ブトキシカルボニル)-1-メチルヒドラジンイル)((4R,8S)-1-メチル-6-オキソ-5-(スルホオキシ)-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)メチレン)アミノ)オキシ)スルホン酸(18mg、86.9%)を白色の固体として得た。MS:539ES-(C15H23N7O11S2)。
0℃の2-((((Z)-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)酢酸(Int-125、60mg、0.14mmol)のDMF(3mL)溶液にHATU(110mg、0.29mmol)、O-(tert-ブチルジメチルシリル)ヒドロキシアミン(31.9mg、0.22mmol)およびヒューニッヒ塩基(0.050mL、0.299mmol)を加えた。反応混合物を室温まで温め、室温で30分間攪拌した。酢酸エチルおよび飽和塩化アンモニウム溶液を加えた。有機層を分離し、水、ブラインで洗浄し、無水硫酸マグネシウムで乾燥させ、濃縮して粗生成物を得た。これをフラッシュクロマトグラフィー(0~100%のアセトン/DCM)により精製して2-((((Z)-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)-N-ヒドロキシアセトアミド(30mg、収率48.3%)を白色の固体として得た。MS:430ES+(C19H27N3O5)。
2-((((Z)-((4R,8S)-5-(ベンジルオキシ)-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)-N-ヒドロキシアセトアミド(Int-160、25mg、0.058mmol)のMeOH(3mL)溶液に窒素を3回パージし、10%Pd/C(6.19mg、0.0058mmol)を加えた。反応混合物に窒素を3回パージし、次いで水素雰囲気下、室温で2時間攪拌した。反応混合物をセライトでろ過した。ろ液を濃縮してN-ヒドロキシ-2-((((Z)-((4R,8S)-5-ヒドロキシ-1-メチル-6-オキソ-4,5,6,8-テトラヒドロ-1H-4,7-メタノピラゾロ[3,4-e][1,3]ジアゼピン-8-イル)(メチルアミノ)メチレン)アミノ)オキシ)アセトアミド(16mg、80.9%)を白色の固体として得た。MS:338ES-(C12H17N7O5)。
BOCILLIN FLペニシリン蛍光異方性アッセイ法(Anal.Biochem.463,15-22(2014))を用いて、緑膿菌(P.aeruginosa)由来のPBP1a、PBP2およびPBP3のアシル化二次速度定数を測定した。いずれの場合もBOCILLIN FL(Thermo-Fisher Scientific社、ウォルサム、マサチューセッツ州)の濃度を30nMとした。PBP濃度については、緑膿菌(P.aeruginosa)PBP1aおよびPBP3を60nM、緑膿菌(P.aeruginosa)PBP2を300nMとした。アッセイ緩衝液は0.01%Triton X-100を含む0.1Mリン酸ナトリウムとした。pHについては、pHを6.2とした緑膿菌(P.aeruginosa)PBP2を除いて、いずれのPBPも7.0とした。化合物の連続2倍希釈を用い、緑膿菌(P.aeruginosa)PBPの濃度を328~0.02μMの範囲とした。下の表5に結果を示す。
臨床・検査標準協会ガイドライン(CLSI)のブロス微量希釈法(CLSI M07-A10)を用いて、緑膿菌(P.aeruginosa)および化合物に対する最小阻害濃度(MIC)値を求めた。結果を下の表6に示す。
実施例40は、類鼻疽菌(B.pseudomallei)、鼻疽菌(B.mallei)、野兎病菌(F.tularensis)、ペスト菌(Y.pestis)および炭疽菌(B.anthracis)に対して阻害活性(MIC<4mg/L)を示すことがわかった。
対照薬1(PBP2標的化合物)および本開示の実施例40の緑膿菌(P.aeruginosa)臨床分離株(ARC6347、AmpC+、PoxB+)に対するin vivo効果を好中球減少マウス大腿モデルで評価した。図1および2を参照されたい。実施例40と対照薬1との間の唯一の構造上の差は、アミノメチル基がN-メチル-アミドキシム基に置き換わっていることである。しかし、PBP2標的化合物(対照薬1)は活性を示さなかった(100%のMIC超過時間の曝露でも静止が得られなかった)が、PBP3阻害化合物(実施例40)は強力な効果(57%のMIC超過時間の曝露で2Log(CFU/g)を上回る低下)を示した。
Claims (25)
- 式:
Xが、H、CN、C(O)NR1R2、NR1R2または任意選択でNHC(O)RgもしくはS(O)NH2で置換された(C1~C6)アルキルであり;
YがNOR3であるか;結合している原子と一緒になったR3およびXが、それぞれが(C1~C6)アルキル、C=O、C(O)OHおよびC(O)O(C1~C6)アルキルから選択される1つまたは複数の基で任意選択で置換された4~6員ヘテロシクリルまたは5~6員ヘテロアリールを形成し、前記(C1~C6)アルキルが任意選択で、OH、(C1~C6)アルコキシ、フェニルおよび5~6員ヘテロアリールから選択される1つまたは複数の基で置換されており、前記5~6員ヘテロアリールが任意選択で、NH2、NH(C1~C6)アルキルおよびN((C1~C6)アルキル)2で置換されており;
R1およびR2がそれぞれ独立に、水素、シアノ、C(O)NH2、NH2、OH、(C1~C6)アルコキシまたは任意選択で1つもしくは複数のR7で置換された(C1~C6)アルキルであり;
R3が、水素、C(O)(C1~C6)アルキル、C(O)NRdRe、SO2NH2、SO2OHまたは任意選択で1つもしくは複数のR7で置換された(C1~C6)アルキルであり;
R4、R5およびR6がそれぞれ独立に、水素、(C1~C6)アルキルまたはC(O)NRaRbであり、R4、R5およびR6に関する前記(C1~C6)アルキルが任意選択で、1つまたは複数のR7で置換されており、ただし、R4およびR5のうち少なくとも一方が水素ではなく、R4およびR5が結合している対応する窒素が、隣接する環原子と二重結合を介して結合している場合、R4およびR5は存在せず;
R7がそれぞれ独立に、ハロ、OH、ORc、(C1~C6)アルコキシ、CN、4~6員ヘテロシクリル、5~6員ヘテロアリール、フェニル、C(=NH)NH2、NHC(=NH)NH2、NRdRe、C(O)OH、C=NO(C1~C6)アルキルNH2、NHC(O)(C1~C6)アルキル、C(O)NRdRe、SO2RfおよびS(O)Rfから選択され、前記5~6員ヘテロアリールが任意選択で、NH2で置換されており、前記フェニルが任意選択で、NH2で置換されており;
Ra、Rb、RdおよびReがそれぞれ独立に、水素、OH、(C1~C6)アルキル、(C1~C6)アルコキシ、フェニル、OSO2OH、4~6員シクロアルキル、4~6員ヘテロシクリル、または5~6員ヘテロアリールであり、Ra、Rb、RdおよびReに関する前記(C1~C6)アルキルおよび(C1~C6)アルコキシが任意選択でかつ独立に、OH、NH2、C(O)OH、C(O)O(C1~C6)アルキル、NHC(O)NH2、NHC(O)NH(C1~C6)アルキル、C(O)NH2、NHC(O)N((C1~C6)アルキル)2、NHC(O)(C1~C6)アルキル、NHC(O)ハロ(C1~C6)アルキル、4~6員ヘテロシクリル、5~6員ヘテロアリール、NH(C1~C6)アルキル、およびN((C1~C6)アルキル)2から選択される1つまたは複数の基で置換されており、Ra、Rb、RdおよびReに関する前記フェニル、4~6員ヘテロシクリル、4~6員シクロアルキルおよび5~6員ヘテロアリール、ならびにRa、Rb、RdおよびReの(C1~C6)アルキルおよび(C1~C6)アルコキシに関する前記5~6員の任意選択のヘテロアリール基が任意選択でかつ独立に、(C1~C6)アルキル、NH2、NH(C1~C6)アルキル、および-N((C1~C6)アルキル)2から選択される1つまたは複数の基で置換されており;
Rcが、C(=NH)NH2、C(=NH)NH(5~6員ヘテロシクリル)、C(=NH)NH(C1~C6)アルキル、NHC(=NH)NH2、-NRdRe、C(O)NRdRe、SO2RfおよびSORfから選択される1つまたは複数の基で任意選択で置換されたフェニルであり、前記基C(=NH)NH(C1~C6)アルキルの前記(C1~C6)アルキルが任意選択で、NH2、NH(C1~C6)アルキル、およびN((C1~C6)アルキル)2から選択される1つまたは複数の基で置換されており;
Rfが水素または(C1~C6)アルキルであり;
Rgが、C=Oおよび(C1~C6)アルキルから選択される1つまたは複数の基で任意選択で置換された4~6員ヘテロシクリルである、
化合物またはその薬学的に許容される塩。 - 前記化合物が式:
Xが、H、CN、C(O)NR1R2、NR1R2または(C1~C6)アルキルであり;
R1およびR2がそれぞれ独立に、水素、シアノまたは任意選択で1つもしくは複数のR7で置換された(C1~C6)アルキルであり;
R3が、水素または任意選択で1つもしくは複数のR7で置換された(C1~C6)アルキルであり;
R4、R5およびR6がそれぞれ独立に、水素、(C1~C6)アルキルまたはC(O)NRaRbであり、R4、R5およびR6に関する前記(C1~C6)アルキルが任意選択で、1つまたは複数のR7で置換されており、ただし、R4およびR5のうち少なくとも一方が水素ではなく、R4およびR5が結合している対応する窒素原子が、隣接する環原子と二重結合を介して結合している場合、R4およびR5は存在せず;
R7がそれぞれ独立に、ハロ、OH、ORc、(C1~C6)アルコキシ、CN、4~6員ヘテロシクリル、5~6員ヘテロアリール、フェニル、C(=NH)NH2、NHC(=NH)NH2、NRdRe、C(O)NRdRe、SO2RfおよびS(O)Rfから選択され;
Ra、Rb、RdおよびReがそれぞれ独立に、水素、(C1~C6)アルキル、(C1~C6)アルコキシ、フェニル、4~6員ヘテロシクリルまたは5~6員ヘテロアリールであり、Ra、Rb、RdおよびReに関する前記(C1~C6)アルキルおよび(C1~C6)アルコキシが任意選択でかつ独立に、NH2、NH(C1~C6)アルキルおよびN((C1~C6)アルキル)2から選択される1つまたは複数の基で置換されており、Ra、Rb、RdおよびReに関する前記フェニル、4~6員ヘテロシクリルおよび5~6員ヘテロアリールが任意選択でかつ独立に、(C1~C6)アルキル、NH2、NH(C1~C6)アルキルおよびN((C1~C6)アルキル)2から選択される1つまたは複数の基で置換されており;
Rcが、C(=NH)NH2、C(=NH)NH(C1~C6)アルキル、NHC(=NH)NH2、NRdRe、C(O)NRdRe、SO2RfおよびSORfから選択される1つまたは複数の基で任意選択で置換されたフェニルであり、前記基C(=NH)NH(C1~C6)アルキルの前記(C1~C6)アルキルが任意選択で、NH2、NH(C1~C6)アルキルおよびN((C1~C6)アルキル)2から選択される1つまたは複数の基で置換されており;
Rfが水素または(C1~C6)アルキルである、
請求項1に記載の化合物。 - R3が、水素または任意選択でアミノで置換された(C1~C6)アルキルである、請求項1~4のいずれか1項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
- R3が水素である、請求項1~5のいずれか1項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
- R1が水素であり、R2が(C1~C6)アルキルである、請求項1~6のいずれか1項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
- R1が水素であり、R2がメチルである、請求項1~7のいずれか1項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
- R6が、水素、C(O)NRaRbまたは任意選択でORcで置換された(C1~C6)アルキルである、請求項1~9のいずれか1項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
- Raが水素であり;Rbが、1つもしくは複数の(C1~C6)アルキルまたは任意選択でORcで置換された(C1~C6)アルキルで任意選択で置換された5~6員ヘテロアリールであり;Rcが、任意選択でC(=NH)NH(C1~C6)アルキルNH2で置換されたフェニルである、請求項1~10のいずれか1項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
- Raが水素であり、Rbが、任意選択で1つまたは複数の(C1~C6)アルキルで置換されたピラゾリルである、請求項1~11のいずれか1項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
- R4が、C(O)NRaRbまたは任意選択でNH2で置換された(C1~C6)アルキルであり;Raが水素であり;Rbが、任意選択でNH2で置換された(C1~C6)アルキルである、請求項1~9および13のいずれか1項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
- R4が(C1~C6)アルキルである、請求項1~9、13および14のいずれか1項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
- R4がメチルである、請求項1~9および13~15のいずれか1項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
- R5が、C(O)NRaRbまたは任意選択でNH2で置換された(C1~C6)アルキルであり;Raが水素であり;Rbが、任意選択でNH2で置換された(C1~C6)アルキルである、請求項1~9および17のいずれか1項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
- R5が(C1~C6)アルキルである、請求項1~9、17および18のいずれか1項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
- R5がメチルである、請求項1~9および17~19のいずれか1項に記載の化合物、またはその薬学的に許容される塩。
- 請求項1~22のいずれか1項に記載の化合物またはその薬学的に許容される塩と、薬学的に許容される担体とを含む、医薬組成物。
- 必要とする対象の細菌感染症を治療するための医薬であって、有効量の請求項1~22のいずれか1項に記載の化合物もしくはその薬学的に許容される塩または請求項23に記載の組成物を含む、医薬。
- 必要とする対象の細菌ペニシリン結合タンパク質3(PBP3)を阻害し、任意選択で細菌PBP1a/bを阻害するための医薬であって、有効量の請求項1~22のいずれか1項に記載の化合物、もしくはその薬学的に許容される塩、または請求項23に記載の組成物を含む、医薬。
Applications Claiming Priority (3)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US201762502867P | 2017-05-08 | 2017-05-08 | |
US62/502,867 | 2017-05-08 | ||
PCT/US2018/031593 WO2018208769A1 (en) | 2017-05-08 | 2018-05-08 | Compounds and methods for treating bacterial infections |
Publications (3)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
JP2020519687A JP2020519687A (ja) | 2020-07-02 |
JP2020519687A5 JP2020519687A5 (ja) | 2021-06-10 |
JP7058322B2 true JP7058322B2 (ja) | 2022-04-21 |
Family
ID=62223332
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
JP2020512769A Active JP7058322B2 (ja) | 2017-05-08 | 2018-05-08 | 細菌感染症を治療するための化合物および方法 |
Country Status (27)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US11046694B2 (ja) |
EP (1) | EP3630111B1 (ja) |
JP (1) | JP7058322B2 (ja) |
KR (1) | KR102611447B1 (ja) |
CN (1) | CN110709081B (ja) |
AU (1) | AU2018266640B2 (ja) |
BR (1) | BR112019023130A2 (ja) |
CA (1) | CA3059773A1 (ja) |
CY (1) | CY1125340T1 (ja) |
DK (1) | DK3630111T3 (ja) |
EA (1) | EA038393B1 (ja) |
ES (1) | ES2907858T3 (ja) |
HR (1) | HRP20220231T1 (ja) |
HU (1) | HUE057592T2 (ja) |
IL (1) | IL270380B (ja) |
LT (1) | LT3630111T (ja) |
MA (1) | MA48743A (ja) |
MX (1) | MX2019013291A (ja) |
MY (1) | MY201377A (ja) |
PE (1) | PE20200333A1 (ja) |
PH (1) | PH12019502509A1 (ja) |
PL (1) | PL3630111T3 (ja) |
PT (1) | PT3630111T (ja) |
SG (1) | SG11201909443YA (ja) |
SI (1) | SI3630111T1 (ja) |
TW (1) | TWI791018B (ja) |
WO (1) | WO2018208769A1 (ja) |
Families Citing this family (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US11905286B2 (en) | 2018-08-09 | 2024-02-20 | Antabio Sas | Diazabicyclooctanones as inhibitors of serine beta-lactamases |
CN111675641B (zh) * | 2020-06-04 | 2023-09-08 | 宁夏农林科学院农业资源与环境研究所(宁夏土壤与植物营养重点实验室) | 单环β-内酰胺类化合物、单环内酰胺类化合物盐及其制备方法 |
US11814385B2 (en) | 2021-06-25 | 2023-11-14 | University Of South Florida | Small molecule inhibitors targeting Clostridioides difficile sporulation |
Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2006512335A (ja) | 2002-12-06 | 2006-04-13 | アベンティス ファーマ ソシエテ アノニム | 新規複素環化合物、それらの調製、ならびに薬剤として、特に抗菌剤およびβ−ラクタマーゼ阻害剤としてのそれらの使用 |
JP2012505195A (ja) | 2008-10-10 | 2012-03-01 | ノベクセル | 化合物、化合物のプロセス、及び医薬品、薬学組成物 |
JP2014525434A (ja) | 2011-08-30 | 2014-09-29 | ウォックハート リミテッド | 1,6−ジアザビシクロ[3,2,1]オクタン−7−オン誘導体および細菌感染の処置におけるそれらの使用 |
Family Cites Families (31)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
BR9408450A (pt) | 1993-12-29 | 1997-08-05 | Pfizer | Antagonistas da neuroquinina diazabiciclicos |
FR2812635B1 (fr) | 2000-08-01 | 2002-10-11 | Aventis Pharma Sa | Nouveaux composes heterocycliques, preparation et utilisation comme medicaments notamment comme anti- bacteriens |
FR2825705B1 (fr) | 2001-06-08 | 2005-05-20 | Aventis Pharma Sa | Nouveaux composes heterocycliques, leur preparation et leur utilisation comme medicaments, notamment comme anti-bacteriens |
FR2835186B1 (fr) | 2002-01-28 | 2006-10-20 | Aventis Pharma Sa | Nouveaux composes heterocycliques, actifs comme inhibiteurs de beta-lactamases |
US7439253B2 (en) | 2002-12-06 | 2008-10-21 | Novexel | Heterocyclic compounds, their preparation and their use as medicaments, in particular as antibacterials and beta-lactamase inhibitors |
US7507727B2 (en) * | 2003-04-07 | 2009-03-24 | Cylene Pharmaceuticals, Inc. | Substituted quinobenzoxazine analogs and methods of using thereof |
FR2914923B1 (fr) | 2007-04-12 | 2013-06-14 | Novexel | Nouveaux composes heterocycliques azotes,leur preparation et leur utilisation comme medicaments antibacteriens. |
MY162532A (en) | 2008-01-18 | 2017-06-15 | Merck Sharp & Dohme | Beta-lactamase inhibitors |
FR2930553B1 (fr) | 2008-04-29 | 2010-05-21 | Novexel | Composes azabicycliques, leur preparation et leur utilisation comme medicaments, notamment inhibiteurs de beta-lactamases |
EP3260551A1 (en) | 2008-06-19 | 2017-12-27 | Astra Zeneca Holding France | Use of (1r,2s,5r) 1,6-diazabicyclo [3.2.1] octane-2-carboxamide, 7-oxo-6-(sulfooxy)-, monosodium salt as a diagnostic reagent for detecting serine beta-lactamases |
FR2936798B1 (fr) | 2008-10-03 | 2012-09-28 | Novexel | Nouveaux composes heterocycliques azotes, leur preparation et leur utilisation comme medicaments antibacteriens. |
FR2936951B1 (fr) | 2008-10-10 | 2010-12-03 | Novexel | Nouvelles combinaisons de composes heterocycliques azotes antibacteriens avec d'autres composes antibacteriens et leur utilisation comme medicaments |
FR2951171A1 (fr) | 2009-10-09 | 2011-04-15 | Novexel | Nouveau sel de sodium d'un compose azabicyclique sous forme enantiomere cristallisee et nouvelles formes polymorphes et pseudopolymorphes ainsi que leur preparation |
BR112013032711A2 (pt) | 2011-07-26 | 2017-01-17 | Wockhardt Ltd | composições farmacêuticas compreendendo sulbactam e inibidor de beta-lactamase |
JP5809750B2 (ja) | 2011-07-26 | 2015-11-11 | ウォックハート リミテッド | β−ラクタム抗生物質、スルバクタム及びβ−ラクタマーゼ阻害薬を含む医薬組成物 |
MX348974B (es) | 2011-08-27 | 2017-07-04 | Wockhardt Ltd | Derivados 1,6 - diazabiciclo [3,2,1] octan-7-ona y su uso en el tratamiento de infecciones bacterianas. |
AU2012310136B2 (en) | 2011-09-13 | 2016-07-07 | Wockhardt Limited | Nitrogen containing compounds and their use |
US8796257B2 (en) | 2011-12-02 | 2014-08-05 | Naeja Pharmaceutical Inc. | Bicyclic compounds and their use as antibacterial agents and β-lactamase inhibitors |
WO2013122888A2 (en) | 2012-02-15 | 2013-08-22 | Rempex Pharmaceuticals, Inc. | Methods of treating bacterial infections |
US8927724B2 (en) | 2012-03-30 | 2015-01-06 | Cubist Pharmaceuticals, Inc. | Isoxazole beta-lactamase inhibitors |
US8916709B2 (en) | 2012-03-30 | 2014-12-23 | Cubist Pharmaceuticals, Inc. | 1,2,4-oxadiazole and 1,2,4-thiadiazole β-lactamase inhibitors |
WO2013149121A1 (en) | 2012-03-30 | 2013-10-03 | Cubist Pharmaceuticals, Inc. | 1,3,4-oxadiazole and 1,3,4-thiadiazole beta-lactamase inhibitors |
US8969570B2 (en) | 2012-03-30 | 2015-03-03 | Cubist Pharmaceuticals, Inc. | Beta-lactamase inhibitors |
AR090539A1 (es) | 2012-04-02 | 2014-11-19 | Astrazeneca Ab | COMPUESTOS INHIBIDORES DE b LACTAMASA |
MX366948B (es) | 2012-05-30 | 2019-07-30 | Meiji Seika Pharma Co Ltd | Nuevo inhibidor de beta-lactamasa y proceso para prepararlo. |
BR112015003592B1 (pt) | 2012-08-25 | 2020-04-14 | Wockhardt Ltd | derivados de 1,6-diazabiciclo[3,2,1]octan-7-ona e seu uso no tratamento de infecções bacterianas |
US20150258072A1 (en) | 2012-09-03 | 2015-09-17 | Wockhardt Limited | Antibacterial compositions |
AU2014213795B2 (en) | 2013-02-06 | 2016-10-13 | Pfizer Anti-Infectives Ab | Combination therapy for the treatment of nosocomial pneumonia |
WO2014141132A1 (en) * | 2013-03-14 | 2014-09-18 | Naeja Pharmaceutical Inc. | NEW HETEROCYCLIC COMPOUNDS AND THEIR USE AS ANTIBACTERIAL AGENTS AND β-LACTAMASE INHIBITORS |
SI3221313T1 (sl) | 2014-11-17 | 2019-04-30 | Entasis Therapeutics Limited | Kombinacijska terapija za zdravljenje okužb z rezistentnimi bakterijami |
SG11201901658PA (en) | 2016-09-16 | 2019-04-29 | Entasis Therapeutics Ltd | Beta-lactamase inhibitor compounds |
-
2018
- 2018-05-08 DK DK18726702.6T patent/DK3630111T3/da active
- 2018-05-08 PT PT187267026T patent/PT3630111T/pt unknown
- 2018-05-08 EP EP18726702.6A patent/EP3630111B1/en active Active
- 2018-05-08 KR KR1020197035865A patent/KR102611447B1/ko active IP Right Grant
- 2018-05-08 US US16/611,065 patent/US11046694B2/en active Active
- 2018-05-08 MY MYPI2019006163A patent/MY201377A/en unknown
- 2018-05-08 TW TW107115559A patent/TWI791018B/zh active
- 2018-05-08 IL IL270380A patent/IL270380B/en unknown
- 2018-05-08 CN CN201880030289.8A patent/CN110709081B/zh active Active
- 2018-05-08 MA MA048743A patent/MA48743A/fr unknown
- 2018-05-08 WO PCT/US2018/031593 patent/WO2018208769A1/en unknown
- 2018-05-08 LT LTEPPCT/US2018/031593T patent/LT3630111T/lt unknown
- 2018-05-08 AU AU2018266640A patent/AU2018266640B2/en active Active
- 2018-05-08 JP JP2020512769A patent/JP7058322B2/ja active Active
- 2018-05-08 HU HUE18726702A patent/HUE057592T2/hu unknown
- 2018-05-08 EA EA201992370A patent/EA038393B1/ru unknown
- 2018-05-08 PE PE2019002309A patent/PE20200333A1/es unknown
- 2018-05-08 HR HRP20220231TT patent/HRP20220231T1/hr unknown
- 2018-05-08 MX MX2019013291A patent/MX2019013291A/es unknown
- 2018-05-08 SG SG11201909443Y patent/SG11201909443YA/en unknown
- 2018-05-08 CA CA3059773A patent/CA3059773A1/en active Pending
- 2018-05-08 SI SI201830571T patent/SI3630111T1/sl unknown
- 2018-05-08 BR BR112019023130-7A patent/BR112019023130A2/pt active Search and Examination
- 2018-05-08 ES ES18726702T patent/ES2907858T3/es active Active
- 2018-05-08 PL PL18726702T patent/PL3630111T3/pl unknown
-
2019
- 2019-11-08 PH PH12019502509A patent/PH12019502509A1/en unknown
-
2022
- 2022-02-23 CY CY20221100157T patent/CY1125340T1/el unknown
Patent Citations (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
JP2006512335A (ja) | 2002-12-06 | 2006-04-13 | アベンティス ファーマ ソシエテ アノニム | 新規複素環化合物、それらの調製、ならびに薬剤として、特に抗菌剤およびβ−ラクタマーゼ阻害剤としてのそれらの使用 |
JP2012505195A (ja) | 2008-10-10 | 2012-03-01 | ノベクセル | 化合物、化合物のプロセス、及び医薬品、薬学組成物 |
JP2014525434A (ja) | 2011-08-30 | 2014-09-29 | ウォックハート リミテッド | 1,6−ジアザビシクロ[3,2,1]オクタン−7−オン誘導体および細菌感染の処置におけるそれらの使用 |
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP7058322B2 (ja) | 細菌感染症を治療するための化合物および方法 | |
KR20160141770A (ko) | 항균 화합물 | |
AU2016257338B2 (en) | Heterocyclic compounds and their use in preventing or treating bacterial infections | |
CN102791718A (zh) | 作为α-7 烟碱乙酰胆碱受体配体的奎宁环化合物 | |
WO2017046605A1 (en) | Antibacterial compounds | |
US10487093B2 (en) | Heterocyclic compounds, in particular 2-oxo-4,4,5,5,6,6,7,7-octahydrobenzoxazole derivatives, and their use as antibacterial compounds | |
WO2016024096A1 (en) | Antibacterial compounds | |
WO2018129008A1 (en) | Compounds and methods for treating bacterial infections | |
WO2017137742A1 (en) | Antibacterial compounds | |
WO2017046603A1 (en) | Antibacterial compounds and new uses thereof | |
WO2017137743A1 (en) | Antibacterial compounds | |
WO2017046606A1 (en) | Antibacterial compounds |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
A521 | Request for written amendment filed |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A523 Effective date: 20210421 |
|
A621 | Written request for application examination |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A621 Effective date: 20210421 |
|
A977 | Report on retrieval |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A971007 Effective date: 20220324 |
|
TRDD | Decision of grant or rejection written | ||
A01 | Written decision to grant a patent or to grant a registration (utility model) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A01 Effective date: 20220408 |
|
A61 | First payment of annual fees (during grant procedure) |
Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: A61 Effective date: 20220411 |
|
R150 | Certificate of patent or registration of utility model |
Ref document number: 7058322 Country of ref document: JP Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R150 |