CN102791718A - 作为α-7 烟碱乙酰胆碱受体配体的奎宁环化合物 - Google Patents

作为α-7 烟碱乙酰胆碱受体配体的奎宁环化合物 Download PDF

Info

Publication number
CN102791718A
CN102791718A CN2009801632218A CN200980163221A CN102791718A CN 102791718 A CN102791718 A CN 102791718A CN 2009801632218 A CN2009801632218 A CN 2009801632218A CN 200980163221 A CN200980163221 A CN 200980163221A CN 102791718 A CN102791718 A CN 102791718A
Authority
CN
China
Prior art keywords
amine
azaspiro
oxazole
ring
methyl
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2009801632218A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102791718B (zh
Inventor
J.H.库克二世
I.M.麦克唐纳
D.金
R.E.奥尔森
王能辉
C.I.伊瓦格伍
F.C.祖西
J.E.马科
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Bristol Myers Squibb Co
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of CN102791718A publication Critical patent/CN102791718A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102791718B publication Critical patent/CN102791718B/zh
Expired - Fee Related legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D498/20—Spiro-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)

Abstract

本申请披露式I化合物，包括它们的盐，以及利用所述化合物的组合物和方法。所述化合物是烟碱α7受体的配体并可用于各种中枢神经系统的病症的治疗，尤其是情感性和神经变性障碍。

Description

作为α-7 烟碱乙酰胆碱受体配体的奎宁环化合物
背景技术
本公开主要涉及式I的化合物，包括其盐，及使用所述化合物的组合物及方法。所述化合物为烟碱α7受体的配体、激动剂及部分激动剂且可用于治疗各种中枢神经系统病症，尤其是情感障碍及神经变性病症。
精神分裂症为严重的精神病症，影响约1％的人口。其进行性病程导致精神及社会功能的严重损伤且通常导致其它病理学的发展。易感性通常在家族中传递，同时认为遗传因素与环境因素均很重要。该疾病的直接及间接费用经估算仅美国每年就有数百亿美元。
精神分裂症患者具有高自杀风险(约10％终生风险)。其在所有原因死亡率中增加2.5倍，导致期望寿命降低20％。疾病发作可导致一连串增加各种病状风险且因此增加死亡风险的不健康生活方式因素及行为。
精神分裂症最通常在青春期晚期或者成年早期发作，且在整个生命过程中反复发作。该疾病的特征在于以下三个独特症状域的表现：阳性、阴性及认知。精神病或者阳性症状包括错觉、幻觉、思想障碍及妄想。阴性症状包括消极情感、回避社交及快感缺乏。认知功能障碍包括注意力、工作记忆力及执行功能缺乏。然而，精神分裂症的病理生理学尚不十分明晰，大多数专家认为其为生物因素、遗传因素及环境因素发挥作用的多因素病症。大多数目前疗法靶向多巴胺能系统(dopaminergic system)且已导致过量多巴胺能神经传递为至少一些精神分裂症方面的基础的提议。该理论得到增加多巴胺水平的药物引起与该疾病的阳性症状类似的精神病的研究结果的进一步支持。而且，精神分裂症患者的脑的死后分析表明D2多巴胺受体的数目增加。虽然已在过去的十年里引入对若干其它神经递质受体具有活性的称为非典型抗精神病药的更新颖的抗精神病药，但所述药物仍共有针对D2多巴胺受体的功效。所有目前使用的药物也具有严重的限制性。虽然在大部分患者中阳性症状通常减少，但这些药物几乎不减轻常见且通常最能使人衰弱的阴性症状及认知缺乏。另外，抗精神病药具有许多不想要的且具限制性的副作用。
烟碱为对认知功能产生积极效应的极少数药物。许多精神分裂症患者吸烟；患者中的吸烟比率为普通人口的比率的2-4倍，且多达90％的已送进专门机构的精神分裂症患者吸烟。该吸烟习惯已成为自疗形式的特征。
烟碱乙酰胆碱受体(nAChR)为广泛表达于整个中枢及周围神经系统中的五聚体配体门控离子通道。这些通道为快速脱敏的钙通道，当开放时会增加细胞内Ca++离子浓度。虽然存在12种个别受体，但脑中最丰富的烟碱受体为α4β2及α7。已鉴别α4β2复合体为“高亲和力”烟碱位点。同源五聚体α7受体选择性结合天然产物α-银环蛇毒，此允许其相对容易的定位及量测。α7受体主要表达在皮质、海马及皮质下边缘区中，且通常存在于突触前。α7nAChR在涉及学习及记忆的区域中的定位已导致使用基因敲除小鼠与药理学操作的研究。其参与感觉门控、记忆及神经可塑性。α7激动剂已显示出可增加啮齿类动物中神经递质的释放，包括多巴胺、血清素、谷氨酸和GABA。可选择性地结合α7受体的化合物，如α7激动剂和部分激动剂，已显示出可在正常和老龄动物中提高学习和记忆功能、逆转东莨菪碱诱导的记忆缺陷、逆转NMDA拮抗剂诱导的认知方面的缺陷、逆转药理学诱导的门控缺陷，例如苯丙胺诱导的门控缺陷，以及具有某些抗焦虑的性质。本发明的α7激动剂有望用于精神分裂症和与精神分裂症有关的认知障碍的治疗。
阿尔茨海默病为进行性神经变性病症，导致认知功能全面丧失。发病率随年龄而增加，达到估算25-50％的所有超过85岁的个体患有一定程度的痴呆的程度。阿尔茨海默病的诊断暗示剩余预期寿命与正常成年人相比减少一半。
阿尔茨海默病的临床病征为进行性认知退化，执行日常生活的活动的能力降低及神经精神病学症状或者行为变化。在该疾病晚期阶段，肌肉组织及活动性的退化可导致不能自己进食，且最终导致患者变得卧床不起。语言变得严重混乱，且然后完全丧失。患者不能独立地执行甚至简单的任务且需要长期照顾。机构护理费用构成疾病费用的几乎70％。因此，迫切需要增强认知功能且延迟送进专门机构的疗法。
若干研究中已显示阿尔茨海默病伴随有皮质及海马中烟碱受体的减少。已报导烟碱注射或者烟碱皮肤贴片显著改善阿尔茨海默病患者的注意力、记忆力及学习力。虽然阿尔茨海默病病程期间存在进行性烟碱受体丧失，但与较丰富的α4受体相比，α7神经元相对贫乏。最近，已显示当给药长达8周时，给予选择性烟碱α7激动剂增强阿尔茨海默病患者的认知功能。该临床数据与临床前数据是一致的，表明α7激动剂和部分激动剂可在正常和老龄动物中提高学习和记忆功能以及逆转东莨菪碱诱导的记忆缺陷。因此，本发明的化合物可用于治疗和预防阿尔茨海默病。淀粉样肽Aβ42以显示出可与α7烟碱受体结合(Wang等人，J.Biol.Chem.，2000，275：5626-5632；J.Neurochem.2000，75：1155-1161)。该结合促进Aβ42的聚集，这被认为在Aβ42的毒性作用中是重要的，且还可通过α7烟碱受体引起信号失调。在阿尔兹海默病的小鼠模型中，α7受体基因的缺失可改善认知缺陷和突触病变(Dziewczapolski等人，J.Neuroscience，2009，pp 8805-8815)。本发明的化合物可干扰Aβ42和α7受体的相互作用。用α7激动剂和部分激动剂进行治疗代表了一种用于阿尔兹海默病的疾病治疗的方法。α7受体还在神经变性疾病如阿尔兹海默病中介导炎性过程(Conejero-Goldberg等人，Neurosci.and Biobehav.Rev.，2008，32，pp 693-706)。本发明的α7激动剂和部分激动剂可用于在神经变性疾病和病症如阿尔兹海默病中减轻炎性。
α7受体还显示出涉及通过迷走神经减轻炎症。此外，α7受体在来自RA和OA患者的滑膜细胞中表达，且α7激动剂已显示出对在类风湿性关节中发生的促炎症级联反应的抑制(Waldberger等人，Arthritis and Rheumatism，第58卷，pp 3439-3449)。因此，本发明的化合物可用于炎性病症如类风湿性关节炎和骨关节炎的治疗。
包含α7亚型的烟碱受体出现在粘膜的肥大细胞中，被认为涉及胃肠超敏反应(Kageyama-Yahara等人，Biochem and Biophys.Research Commun.，2008，v.377，pp321-325)。α7激动剂GTS-21抑制粘膜肥大细胞的抗原诱导的脱粒作用，表明α7激动剂可用于过敏性肠病如溃疡性结肠炎的治疗。
在最近的报道中(Marrero等人，JPET Fast Forward，9月28日，2009，DOI：10.1124/jpet.109.154633)，在II型糖尿病的小鼠模型中，α7激动剂显示出降低体重增加和食物摄入并减轻甘油三酯、葡萄糖、糖化血红蛋白和TNFa的升高的血浆水平(瘦蛋白受体有缺陷的db/db小鼠)。本发明的α7激动剂和部分激动剂可用于治疗糖尿病。
以下参考文献提供烟碱受体系统及α7受体及配体的全面回顾：Picciotto及Zoli，J.Neurobio.(2002)53：641-655；Brening等人，Ann.Reports in Med.Chem.(2005)40：3-16；Dani及Bertrand，Ann.Rev.Pharm.Tox.(2007)47：699-729；Olincy及Stevens，Biochem.Pharmacol.(2007)74：1192-1201；Broad等人，Drugs Future(2007)32(2)：161-70；de Jonge及Ulloa，Brit.J.Pharmacol.(2007)151：915-929；Romanelli等人，ChemMedChem(2007)2(6)：746-767。Lightfoot等人，Progress in Medicinal Chemistry(2008)，v 46，pp 131-171；Concotta等人，Current Opinion in Investigational Drugs(2008)，v 9，pp47-56；Leiser等人，Pharmacol.and Therapeutics(2009)，doi：10：1016/j.pharmthera.2009.03.009)。
烟碱α7受体的配体已在上述文献中公开，且也在美国专利申请公开U.S.2007004715、WO 2008/000469、WO 2003/092580、WO 2004/000,469、EP337,547、EP 452,101和C.J.Swain，等人，J.Med.Chem.，(1992)35：1019-1031中公开。
本发明提供技术优势，例如化合物为新颖的且为烟碱α7受体的配体并可用于中枢神经系统的各种病症特别是情感性和神经变性病症的治疗。另外，化合物提供药物用途优势，例如在其作用机制、结合、抑制功效、靶标选择性、溶解性、安全性分布或者生物利用度中的一个或者多个方面。
发明内容
本发明涵盖式I的化合物，包括药用盐，及使用这些化合物的组合物及治疗方法。所述化合物可用于治疗各种中枢神经系统病症：
本发明的一方面为式I的化合物或者其立体异构体或者其药用盐，
Figure BDA00001827380500041
其中：
R1选自异噁唑基、吡唑基、噁唑基、噻唑基、咪唑基、噁二唑基、噻二唑基、三唑基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶基、三嗪基、喹啉基、异喹啉基、四氢异喹啉基、喹喔啉基、喹唑啉基、二氮杂萘基、吲唑基、吲哚基、2-吲哚酮基、苯并异噁唑基、苯并异噻唑基、苯并噁唑基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、呋喃并吡啶基、噻吩并吡啶基、噻吩并嘧啶基、异噻唑并吡啶基、噻唑并吡啶基、噻唑并吡啶酮基、噻唑并吡嗪基、噻唑并嘧啶基、三唑并吡啶基、三唑并吡嗪基、吡咯并三嗪基、5，6-二氢苯并[h]喹唑啉基、5H-色烯并[4，3-d]嘧啶基、6，7-二氢-5H-环戊二烯并[d]嘧啶基、5，6，7，8-四氢喹唑啉基、7，8-二氢喹唑啉-5(6H)-酮基和四氢苯并噻唑基，且取代有独立选自下述的0-3个取代基：C1-4烷基、C3-7环烷基、C1-4卤代烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷氧基、C3-7环烷氧基、C1-4烷基硫基、苯氧基、苄氧基、卤素、羟基、氰基、硝基、C1-4烷基磺酰基、NR2R3、吡咯烷酮基、亚甲二氧基、呋喃基、噻吩基、吡唑基、咪唑基、噻唑基、三唑基、吡嗪基、嘧啶基、萘基、C1-4烷基酰氨基、CONR2R3、吡啶基、苯基和苄基，以及其中咪唑基、吡啶基、苯基和苄基取代有独立选自下述的0-2个取代基：卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷基、C1-4卤代烷氧基和NR2R3；
R2为氢、C1-4烷基、C1-4羟基烷基或C1-4氨基烷基；
R3为氢、C1-4烷基、C1-4羟基烷基或C1-4氨基烷基；
或者，R2和R3与它们所连接的氮原子一起为氮杂环丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、N-(C1-4烷基)哌嗪基、吗啉基或高哌啶基。
本发明的另一方面为式I化合物的立体异构体，其为式Ia：
Figure BDA00001827380500051
本发明的另一方面为式I或Ia的化合物或其药用盐，其中R1选自二甲基异噁唑基、(甲基)(苯基)异噁唑基、甲基吡唑基、二甲基吡唑基、噻吩基吡唑基、甲氧基苯基吡唑基、噻唑基、溴噻唑基、氰基噻唑基、甲基噻唑基、二甲基噻唑基、(甲基)(苯基)噻唑基、异丙基噻唑基、丁基噻唑基、苄基噻唑基、甲氧基苯基甲基噻唑基、苯基噻唑基、氯苯基噻唑基、甲氧基苯基噻唑基、(甲氧基苯基)(甲基)噻唑基、吡啶基噻唑基、(苯基)(甲基)咪唑基、甲基噁二唑基、乙基噁二唑基、甲基噻二唑基、氟苯基噻二唑基、呋喃基噻二唑基、(二甲基氨甲酰基)(甲基)噻唑基、(吡咯烷基CO)噻唑基、苯基三唑基、吡啶基、溴吡啶基、氯吡啶基、(氯)(氟)吡啶基、(氯)(甲基)吡啶基、二氯吡啶基、氟吡啶基、氰基吡啶基、(氰基)(甲基)吡啶基、(氰基)(二甲基)吡啶基、甲氧基吡啶基、(甲基吡咯烷基)吡啶基、苯基吡啶基、甲氧基吡啶基吡啶基、哒嗪基、溴哒嗪基、氯哒嗪基、甲基哒嗪基、甲氧基哒嗪基、甲基硫基哒嗪基、吡咯烷基哒嗪基、吡咯烷酮基哒嗪基、苯基哒嗪基、吡啶基哒嗪基、甲氧基吡啶基哒嗪基、嘧啶基、(溴)(异丙基)嘧啶基、(溴)(二甲基)嘧啶基、(溴)(环丙基)嘧啶基、(溴)(甲氧基)嘧啶基、(溴)(苯基)嘧啶基、(溴)(吡啶基)嘧啶基、氯嘧啶基、(氯)(二甲基)嘧啶基、(甲基)(甲氧基)嘧啶基、甲基嘧啶基、乙基嘧啶基、(甲基)(苯基)嘧啶基、二甲基嘧啶基、丁基嘧啶基、异丙基嘧啶基、环丙基嘧啶基、甲氧基嘧啶基、二甲氧基嘧啶基、异丙氧基嘧啶基、环戊氧基嘧啶基、二氟甲氧基嘧啶基、三氟乙氧基嘧啶基、苯氧基嘧啶基、甲基硫基嘧啶基、苯基嘧啶基、氯苯基嘧啶基、甲基苯基嘧啶基、甲氧基苯基嘧啶基、(苯基)(三唑基)嘧啶基、吡啶基嘧啶基、甲氧基吡啶基嘧啶基、甲氧基嘧啶基嘧啶基、萘基嘧啶基、吡嗪基、溴吡嗪基、(溴)(甲氧基)吡嗪基、氯吡嗪基、甲基吡嗪基、二甲基吡嗪基、丁基吡嗪基、氰基吡嗪基、甲氧基吡嗪基、异丙氧基吡嗪基、三氟甲基吡嗪基、苯基吡嗪基和二甲基三嗪基。
本发明的另一方面为式I或Ia的化合物或其药用盐，其中R1选自二甲基吡啶并异噁唑基、苯并噁唑基、氯苯并噁唑基、氟苯基苯并噁唑基、乙基苯基苯并噁唑基、二甲基氨基苯基苯并噁唑基、吡啶基苯并噁唑基、苯并噻唑基、乙酰氨基苯并噻唑基、溴苯并噻唑基、氯苯并噻唑基、(氯)(甲基)苯并噻唑基、(氯)(甲氧基)苯并噻唑基、氟苯并噻唑基、二氟苯并噻唑基、氰基苯并噻唑基、甲基苯并噻唑基、二甲基苯并噻唑基、(甲基)(甲氧基)苯并噻唑基、乙基苯并噻唑基、三氟甲基苯并噻唑基、羟基苯并噻唑基、甲氧基苯并噻唑基、乙氧基苯并噻唑基、异丙氧基苯并噻唑基、三氟甲氧基苯并噻唑基、二氟甲氧基苯并噻唑基、二甲氧基苯并噻唑基、吗啉基苯并噻唑基、(吡咯烷基CO)苯并噻唑基、甲基磺酰基苯并噻唑基、氯噻唑并吡啶基、二甲基噻唑并吡啶基、苄氧基噻唑并吡啶基、二氟甲氧基噻唑并吡啶基、苯并三唑基、吲哚酮基、吲唑基、溴吲唑基、氯吲唑基、氟吲唑基、(甲基)(甲氧基)吲唑基、甲氧基吲唑基、三氟甲基吲唑基、三氟甲氧基吲唑基、二氟甲氧基吲唑基、苯并咪唑基、氟苯并咪唑基、甲基苯并咪唑基、(甲基)(甲氧基)苯并咪唑基、甲氧基苯并咪唑基、四氢苯并噻唑基、呋喃并吡啶基、二甲基呋喃并嘧啶基、噻吩并嘧啶基、异丙基噻吩并嘧啶基、二甲基噻吩并嘧啶基、氯三唑并吡啶基、甲基三唑并吡啶基、三氟甲基三唑并吡啶基、甲氧基三唑并吡啶基、三唑并吡嗪基、溴吡咯并三嗪基、二甲基氨基噻唑并嘧啶基、噻唑并吡嗪基、溴噻唑并吡嗪基、甲氧基噻唑并吡嗪基、甲基硫基噻唑并吡嗪基、甲氧基噻唑并嘧啶基、(甲基)(甲氧基)噻唑并嘧啶基、喹啉基、溴喹啉基、氟喹啉基、甲基喹啉基、(甲基)(甲氧基)喹啉基、异喹啉基、溴异喹啉基、二氯异喹啉基、甲基异喹啉基、二甲基异喹啉基、喹喔啉基、氯喹喔啉基、甲基喹喔啉基、甲氧基喹喔啉基、喹唑啉基、溴喹唑啉基、二氮杂萘基、5，6-二氢苯并[h]喹唑啉基、5H-色烯并[4，3-d]嘧啶基、6，7-二氢-5H-环戊二烯并[d]嘧啶基、5，6，7，8-四氢喹唑啉基和7，8-二氢喹唑啉-5(6H)-酮基。
本发明的另一方面为式I或Ia的化合物或其药用盐，其中R1选自苯基噻唑基、(氯)(甲基)吡啶基、(溴)(苯基)嘧啶基、甲氧基嘧啶基、二氟甲氧基嘧啶基、二氟乙氧基嘧啶基、环戊氧基嘧啶基、(甲基苯基)嘧啶基、(甲氧基苯基)嘧啶基、溴吡嗪基、氯吡嗪基、甲基硫基吡嗪基、甲氧基苯并噻唑基、乙氧基苯并噻唑基、二氟甲氧基苯并噻唑基、噻唑并吡啶酮基、三氟甲基吲唑基、苯并咪唑基、异喹啉基和喹唑啉基。
本发明的另一方面为式I或Ia的化合物或其药用盐，其中R1选自溴吡啶基、二氯吡啶基、甲氧基吡啶基、(吡啶基)吡啶基、(苯基)嘧啶基、(甲氧基吡啶基)嘧啶基、(吡唑基)嘧啶基、氯吡嗪基、(溴)(氯)吡嗪基和氯苯并噻唑基。
本发明的另一方面为式I或Ia的化合物或其药用盐，其中R1选自噻唑基、吡啶基、哒嗪基、嘧啶基、吡嗪基、苯并噻唑基、噻唑并吡啶基、吲唑基、苯并咪唑基、异喹啉基和喹唑啉基，且取代有独立选自下述的0-3个取代基：C1-4烷基、C3-7环烷基、C1-4卤代烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷氧基、C3-7环烷氧基、C1-4烷基硫基、苯氧基、苄氧基、卤素、羟基、氰基、C1-4烷基磺酰基、NR2R3、吡咯烷酮基、亚甲二氧基、呋喃基、噻吩基、三唑基、嘧啶基、萘基、C1-4烷基酰氨基、CONR2R3、吡啶基、苯基和苄基，以及其中吡啶基、苯基和苄基取代有独立选自下述的0-2个取代基：卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷基、C1-4卤代烷氧基和NR2R3。
本发明的另一方面为式I或Ia的化合物或其药用盐，其中R1选自吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、噻唑并吡啶基和异喹啉基，且取代有独立选自下述的0-3个取代基：C1-4烷基、C3-7环烷基、C1-4卤代烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷氧基、C3-7环烷氧基、C1-4烷基硫基、苯氧基、苄氧基、卤素、羟基、氰基、C1-4烷基磺酰基、NR2R3、吡咯烷酮基、亚甲二氧基、呋喃基、噻吩基、三唑基、嘧啶基、萘基、C1-4烷基酰氨基、CONR2R3、吡啶基、苯基和苄基，以及其中吡啶基、苯基和苄基取代有独立选自下述的0-2个取代基：卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷基、C1-4卤代烷氧基和NR2R3。
本发明的另一方面为式I或Ia的化合物或其药用盐，其中R1选自吡啶基和异喹啉基，且取代有独立选自下述的0-3个取代基：C1-4烷基、C3-7环烷基、C1-4卤代烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷氧基、C3-7环烷氧基、C1-4烷基硫基、苯氧基、苄氧基、卤素、羟基、氰基、C1-4烷基磺酰基、NR2R3、吡咯烷酮基、亚甲二氧基、呋喃基、噻吩基、三唑基、嘧啶基、萘基、C1-4烷基酰氨基、CONR2R3、吡啶基、苯基和苄基，以及其中吡啶基、苯基和苄基取代有独立选自下述的0-2个取代基：卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、C1-4卤代烷基、C1-4卤代烷氧基和NR2R3。
本发明的另一方面为选自以下的化合物：
或其药用盐。
本发明的另一方面为选自以下的化合物：
Figure BDA00001827380500082
Figure BDA00001827380500091
或其药用盐。
本发明的另一方面为式I的化合物或其药用盐，其中R1选自噻唑基、噻二唑基、异噁唑基、噁唑基、吡唑基、咪唑基、吡啶基、吡嗪基、哒嗪基、嘧啶基、喹啉基、异喹啉基、喹喔啉基、吲唑基、吲哚基、2-氧代吲哚基、苯并噻唑基、苯并咪唑基、苯并噁唑基、苯并(d)异噻唑基、苯并异噁唑基、异噻唑并[5，4-b]吡啶基、(1，2，4)-三唑并[1，5-a]吡啶基、噻唑并[5，4-b]吡啶基和四氢苯并噻唑基，其中各基团任选取代有一个或两个选自下述的取代基：C1-4烷基、C1-4烷氧基、卤素、羟基、氰基、三氟甲基、二氟甲基、氟甲基、三氟甲氧基、二氟甲氧基、C1-4烷基磺酰基、呋喃基、吗啉代、亚甲二氧基、吡啶基、C1-4烷基苯基、卤代苯基、二甲基氨基苯基、C1-4烷基酰氨基、-CONR2R3，其中R2和R3各自独立为氢、C1-4烷基、羟基C1-4烷基、氨基C1-4烷基；或者R2和R3与它们所连接的原子一起为C3-6环烷基；苯基、取代的苯基、苯基甲基、取代的苯基甲基，其中所述取代的苯基和取代的苯基甲基取代有独立选自下述的取代基：卤素、C1-4烷基、C1-4烷氧基、三氟甲基和三氟甲氧基。
对于式I或Ia的化合物，包括R1、R2及R3的可变取代基的任何实例的范围可相对于可变取代基的任何其它实例的范围独立地使用。因此，本发明包括不同方面的组合。
除非另作说明，否则术语具有以下含义。“烷基”表示包含1至4个碳的直链或者支链烷基。“烯基”表示具有至少一个双键的包含2至4个碳的直链或者支链烷基。“炔基”表示具有至少一个叁键的包含2至4个碳的直链或者支链烷基。“环烷基”表示包含3至7个碳的单环系统。“卤代烷基”及“卤代烷氧基”包括自单卤代至全卤代的所有卤代异构体。具有烃部分(例如烷氧基)的术语包括该烃部分的直链及支链异构体。括号及多括号术语意欲向本领域技术人员阐明键合关系。例如，诸如((R)烷基)的术语表示进一步取代有取代基R的烷基取代基。
本发明包括化合物的所有药用盐形式。药用盐为那些抗衡离子不显著贡献化合物的生理活性或者毒性且本身充当药理学等价物的盐。这些盐可根据常规有机技术采用可商购试剂制备。一些阴离子盐形式包括乙酸盐、醋硬脂酸盐、苯磺酸盐、溴化物、氯化物、枸橼酸盐、反丁烯二酸盐、葡萄糖醛酸盐、氢溴酸盐、盐酸盐、氢碘酸盐、碘化物、乳酸盐、马来酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、双羟萘酸盐、磷酸盐、琥珀酸盐、硫酸盐、酒石酸盐、甲苯磺酸盐及昔萘酸盐。一些阳离子盐形式包括铵盐、铝盐、N，N′-双苄基乙撑二胺盐(benzathine)、铋盐、钙盐、胆碱盐、二乙胺盐、二乙醇胺盐、锂盐、镁盐、葡甲胺盐、4-苯基环己胺盐、哌嗪盐、钾盐、钠盐、氨丁三醇盐及锌盐。
一些本发明的化合物以立体异构形式存在。本发明包括化合物的所有立体异构形式，包括对映异构体及非对映异构体。制备及分离立体异构体的方法在本领域中已知。
本发明包括化合物的所有互变异构形式。互变异构对的实例如下显示。
Figure BDA00001827380500101
本发明意在包括出现在本发明化合物中的原子的所有同位素。同位素包括具有相同原子数但质量数不同的那些原子。例如但不限于此，氢的同位素包括氘和氚。碳的同位素包括13C和14C。经同位素标记的本发明化合物通常可通过本领域技术人员已知的常规技术或通过与本申请所述相似的方法使用经同位素标记的适当试剂代替未经标记的所用相应试剂来制备。上述化合物可具有多种潜在用途，例如在确定生物学活性中作为标准品和试剂。在同位素是稳定的情况下，上述化合物可具有使生物学性质、药理学性质或药物代谢动力学性质得以有利改变的潜力。
合成方法
化合物可由本领域已知的方法制备，所述方法包括下文所述的方法且包括在本领域的技术范围内的变化。一些试剂及中间体在本领域中已知。其它试剂及中间体可由本领域已知的方法使用容易获得的物质制备。用于描述化合物合成的变量(例如编号的“R”取代基)仅意欲示例说明如何制备化合物且不应与在权利要求中或者在说明书的其它部分中使用的变量混淆。以下方法仅用于示例说明的目的且不用于限制本发明的范围。
一些化合物可使用本部分中所述的反应及技术制备。反应在适于所用的试剂及物质的溶剂中进行且适于所实施的转化。有机合成领域的技术人员应理解的是，分子各部分上所存在的官能团必须与所建议的试剂及反应相容。所述对与反应条件相容的取代基的限制对本领域技术人员是显而易见的且因此须使用替代方法。
方案中所用的缩写通常遵循本领域所用的惯例。说明书及实施例中所用的化学物质缩写如下定义：“NaHMDS”是指二(三甲基甲硅烷基)酰胺钠；“DMF”是指N，N-二甲基甲酰胺；“MeOH”是指甲醇；“NBS”是指N-溴代琥珀酰亚胺；“Ar”是指芳基；“TFA”是指三氟乙酸；“LAH”是指氢化铝锂；“BOC”是指叔丁氧羰基、“DMSO”是指二甲基亚砜；“h”是指小时；“rt”是指室温或者保留时间(应视上下文而定)；“min”是指分钟；“EtOAc”是指乙酸乙酯；“THF”是指四氢呋喃；“EDTA”是指乙二胺四乙酸；“Et2O”是指二乙醚；“DMAP”是指4-二甲基氨基吡啶；“DCE”是指1，2-二氯乙烷；“ACN”是指乙腈；“DME”是指1，2-二甲氧基乙烷；“HOBt”是指1-羟基苯并三唑水合物；“DIEA”是指二异丙基乙胺；“Nf”是指CF3(CF2)3SO2-；及“TMOF”是指原甲酸三甲酯。
如本文所用的缩写如下定义：“1×”是指一次；“2×”是指两次；“3×”是指三次；“℃”是指摄氏度；“eq”是指当量；“g”是指克；“mg”是指毫克；“L”是指升；“mL”是指毫升；“μL”是指微升；“N”是指当量浓度；“M”是指摩尔浓度；“mmol”是指毫摩尔；“min”是指分钟；“h”是指小时；“rt”是指室温；“RT”是指保留时间；“atm”是指大气压；“psi”是指磅/平方英寸；“conc.”是指浓的；“sat”或者“sat’d”是指饱和；“MW”是指分子量；“mp”是指熔点；“ee”是指对映体过量；“MS”或者“Mass Spec”是指质谱；“ESI”是指电喷雾电离质谱；“HR”是指高分辨率；“HRMS”是指高分辨率质谱；“LCMS”是指液相色谱-质谱；“HPLC”是指高效液相色谱；“RP HPLC”是指反相HPLC；“TLC”或者“tlc”是指薄层色谱；“NMR”是指核磁共振光谱；“1H”是指质子；“δ”是指δ；“s”是指单峰；“d”是指二重峰；“t”是指三重峰；“q”是指四重峰；“m”是指多重峰；“br”是指宽峰；“Hz”是指赫兹；及“α”、“β”、“R”、“S”、“E”及“Z”为本领域技术人员熟知的立体化学命名。
方案1.
Figure BDA00001827380500121
式I化合物可按照反应方案1所述制备。式III的酮(3-奎宁环酮)是已知的，可商购获得或者可由本领域技术人员已知的方法制备。可使酮通过与氰化钠或者氰化钾加酸的反应转化为相应的式IV的氰醇。可使式IV的化合物通过与硼烷/四氢呋喃复合物的反应还原为相应的式V的氨基-甲基化合物(硼烷复合物)。
可使式V的化合物与异硫氰酸杂芳基酯直接在惰性溶剂中反应以得到式VI的硫脲。可供选择地，可使杂芳基胺与硫羰基二咪唑反应以得到经活化的物质，该经活化的物质不经分离即可用于将式V的化合物转化为式VI的化合物。杂芳基胺可由本领域技术人员已知的方法制备。
可使用例如二异丙基碳二亚胺使式VI的硫脲环化以得到式VII的噁唑啉，可经用酸处理使式VII的噁唑啉脱保护以得到式I的化合物的外消旋最终产物。可由本领域已知的方法(例如经手性色谱法)将式I的化合物拆分成式Ia和Ib的纯对映异构体化合物。
方案2.
Figure BDA00001827380500131
可供选择地，式V的奎宁环上的游离氨基可通过例如苄氧基羰基氯(“CBZ-Cl”)来封端，以生成式VIII的化合物，如反应方案2所示。
式VIII的外消旋化合物可拆分成其对映异构体，式IX和式X，例如通过手性色谱法。式IX或式X中任一种化合物，优选为式X化合物，可如反应方案2所示进行。
式X的化合物上的硼烷基团可例如通过用稀盐酸处理除去，苄氧基羰基基团可通过例如催化氢化法除去，以得到式XI的手性奎宁环胺。与反应方案1类似，可使式XI的胺盐与异硫氰酸酯反应以得到式VIa的硫脲，然后可使式VIa的硫脲与二烷基碳二亚胺或者混合硫脲(来自与硫羰基二咪唑的反应)反应以得到式Ia及其互变异构体IIa的手性噁唑啉奎宁环化合物。
方案2a.
可供选择地，可用盐酸除去V的硼烷基团以得到二盐酸盐XII，可在碱的存在下使二盐酸盐XII与异硫氰酸酯反应以得到中间体硫脲XIII，然后可如反应方案1-2中使硫脲XIII环化以得到I。式XII化合物也可通过其它方法，例如US Patent#5,137,895(8/11/1992)所引用的方法来制备。
方案3.
Figure BDA00001827380500142
另外，可使(杂)芳胺与二硫化碳、氢氧化钠及甲基碘反应以得到中间体二硫代亚氨碳酸二甲酯(carbonimidodithioate)XIV。使所述酯与二盐酸盐XI在碱的存在下反应以消除两摩尔的甲硫醇且直接产生所需产物Ia。
生物学方法
I)α7烟碱乙酰胆碱受体结合。使用稳定表达大鼠α7烟碱乙酰胆碱受体(大鼠α7nAChR)的HEK293细胞制备用于结合的膜。在4℃在由10mM Tris(pH7.4)、5mM EDTA及蛋白酶抑制剂组成的低渗溶胞缓冲液中，使细胞匀化且在32000×g离心20分钟。将沉淀团块在由50mM Tris(pH 7.4)、1mM EDTA及蛋白酶抑制剂组成的膜洗涤缓冲液中洗涤一次且在32000×g离心20分钟。然后将该沉淀团块再混悬在由50mM KH2PO4(pH值在25℃为7.4)、1mMEDTA、0.005％Triton-X 100及0.1％(v/v)Sigma蛋白酶抑制剂混合物(cocktail)组成的测定缓冲液中。然后将等分试样在干冰/乙醇中冷冻且保持在-80℃直到测定当天。
II)用于哺乳动物细胞中α-7烟碱乙酰胆碱受体通道功能的Ca2+敏感性的基于荧光的测定(“FLIPR”)。概述：评估先导化合物对哺乳动物HEK293细胞中所表达的烟碱ACh受体离子通道的α-7、α3β4、α4αβ2及α1β1δ1ε亚型的激动剂活性。由使用384孔FLIPR(荧光成像板读取器(Fluorescence ImagePlate Reader))进行的动态荧光Ca2+流入测量来确定激动剂效力及功效值。以荧光指示剂测量细胞内二价阳离子浓度(具体为Ca2+)的变化在药物发现中的用途已有完整记载(Rudiger，R.等人，Nature Reviews，2003，4：579-586；Gonzalez J.E等人，Receptors and Channels，2002，8：283-295)。在该测定中，向接种于384孔测定板中的表达通道的HEK细胞系中添加膜渗透荧光Ca2+指示剂染料，其响应于细胞内Ca2+浓度的升高而增加510nm绿色发射信号。实时监测来自细胞的基线荧光，接着迅速加入测试化合物。若化合物为任何非选择性阳离子通道的激动剂，则后者开放且允许细胞外Ca2+离子移动至细胞质中，其中其与Ca2+指示剂染料结合且增加荧光输出信号，该荧光输出信号经冷却的CCD成像摄影机检测。
材料及方法：试剂：Ca2+指示剂染料Fluo-4的乙酰基甲氧基(AM)酯由InVitrogen(Carlsbad，CA)得到。乙酰胆碱及所有缓冲液组份购自SigmaChemical Company，St.Louis，MO。G418及最低必需培养基购自InVitrogen LifeTechnologies，Carlsbad，CA。胎牛血清购自In Vitrogen，Carlsbad，CA。
细胞培养：使HEK-293细胞在37℃在5％CO2培养箱中在含有10％(v/v)胎牛血清的最低必需培养基中生长。使稳定表达离子通道的HEK-293细胞在加有500μg/ml G418的相同培养基中生长。
HEK-293细胞中所表达的Ca2+通道的Ca2+流入测定：将表达有关离子通道的HEK-293细胞于20μl含有10％(v/v)胎牛血清的最低必需培养基中以每孔约20,000个细胞的密度涂铺于经聚D-赖氨酸涂布的384孔黑色壁透明底板中且在29℃在5％CO2培养箱中孵育2天。在测定前，使细胞负载Fluo-4AM酯。通过除去培养基且用30微升/孔与含有20mM HEPES、2.5mM丙磺舒(probenecid)、0.5mM CaCl2、1mM MgCl2及10μM阿托品(atropine)的Hanks平衡盐溶液(Hanks Balanced Salt Solution)(#14175-095)混合的染料AM酯(5μM)置换来完成细胞负载。使染料负载在室温进行90分钟，此时除去染料负载溶液且用40微升/孔Hanks缓冲液置换。将负载有染料的细胞加载于FLIPR384(Molecular Devices，Sunnyvale，CA)上。使用氩激光器的488nm光线激发Fluo-4染料。使用540+/-30nm带通滤光器滤过发射。为使用Ca2+流入(flux)测定来评估测试化合物的作用，将待测试的化合物提供于测定即用型板中。对于烟碱受体离子通道表达细胞，通过加入20微升/孔含有测试化合物的Hanks缓冲液起始测定。对于所有测定，以1Hz采集数据10秒(基线)，此时加入含有化合物的刺激缓冲液，且进一步以0.33Hz采集测量值3分钟。
数据分析：由空白孔及所有孔确定烟碱受体Ca2+流入测定的统计学稳健性(statistical robustness)。所有孔定义各化合物测试板的最大通道活化(乙酰胆碱的最大有效剂量)，且仅含有匹配DMSO的空白孔定义零通道活化。由内部数据分析工具自动输出且处理FLIPR板读取器上所产生的原始荧光单元数据文档。使用MathIQ拟合机器(ID Business Solutions Limited，Surrey，UK)拟合测试化合物的各浓度的活化降低百分比数据。对于给定测试化合物条件的Ca2+流入，通过拟合荧光变化最大幅度分析数据。由来自二十点CRC的三个测定孔的平均值计算化合物的效力(EC50值)。相对于所有孔中对乙酰胆碱的最大响应表达测试化合物的功效值(Ymax值)。
III)Fos定量测定：用药物(1-10mg/kg)或者媒介物(2ml/kg)(皮下)处置雄性Wistar大鼠。处置后两小时，快速切下大鼠头部且在冰上分离有关的不连续脑区并称重且用液氮快速冷冻且在-80℃贮存。对用于核提取及Fos定量的脑组织的进一步处理根据市售的基于ELISA化学发光检测试剂盒(目录号89860，EZ-detect c-Fos Trans试剂盒，Pierce Biotechnology Inc.，Rockford，IL)所规定的方案。
IV)大鼠中的MK-801破坏的设定-迁移测定(Set-Shift Assay)：该测定使用Stefani等人(Behavioral Neuroscience，2003，117：728-737)描述的方案的修改方案。在该测定中评定测试化合物逆转MK-801诱发的效能缺乏的能力(0.03mg/kg，腹膜内，单次给药)。
表1中提供本文所述的且在以上测定(II)中测试的具体化合物的活性。
表1
Figure BDA00001827380500172
Figure BDA00001827380500181
Figure BDA00001827380500201
Figure BDA00001827380500211
Figure BDA00001827380500221
Figure BDA00001827380500241
Figure BDA00001827380500251
Figure BDA00001827380500261
Figure BDA00001827380500271
Figure BDA00001827380500281
Figure BDA00001827380500291
Figure BDA00001827380500301
Figure BDA00001827380500311
Figure BDA00001827380500321
Figure BDA00001827380500331
Figure BDA00001827380500341
Figure BDA00001827380500351
Figure BDA00001827380500361
Figure BDA00001827380500371
Figure BDA00001827380500381
Figure BDA00001827380500411
Figure BDA00001827380500421
a基于EC50nM值的活性：+++＝＜100nM；++＝100-1000nM；+＝1000-100000nM；bNT＝未测试；NA＝不具有活性(＞1000000nM).
表Ib
Figure BDA00001827380500431
Figure BDA00001827380500432
Figure BDA00001827380500441
Figure BDA00001827380500451
Figure BDA00001827380500461
Figure BDA00001827380500491
a基于EC50nM值的活性：+++＝＜100nM；++＝100-1000nM；+＝1000-100000nM；bNT＝未测试；NA＝不具有活性(＞1000000nM).
药物组合物及治疗方法
式I的化合物与α7结合且可用于治疗情感障碍及神经变性病症。因此，本发明的另一方面为包含式I的化合物或者其药用盐及药用载体的组合物。
本发明的另一方面为式I的化合物在制备用于治疗情感障碍或者神经变性病症的药物中的用途。
本发明的另一方面为式I的化合物在制备用于治疗精神分裂症或者阿尔茨海默病的药物中的用途。
本发明的另一方面为治疗情感障碍或者神经变性病症的方法，该方法包括给予患者治疗有效量的式I的化合物。
本发明的另一方面为治疗精神分裂症或者阿尔茨海默病的方法，该方法包括给予患者治疗有效量的式I的化合物。
本发明的另一方面为治疗精神分裂症的方法，该方法包括给予患者治疗有效量的式I的化合物。
本发明的另一方面为治疗阿尔茨海默病的方法，该方法包括给予患者治疗有效量的式I的化合物。
本发明的另一方面为治疗认知障碍的方法，该方法包括给予患者治疗有效量的式I的化合物。
本发明的另一方面为治疗类风湿性关节炎的方法，该方法包括给予患者治疗有效量的式I的化合物。
本发明的另一方面为治疗骨关节炎的方法，该方法包括给予患者治疗有效量的式I的化合物。
本发明的另一方面为治疗溃疡性结肠炎的方法，该方法包括给予患者治疗有效量的式I的化合物。
本发明的另一方面为治疗克罗恩病的方法，该方法包括给予患者治疗有效量的式I的化合物。
本发明的另一方面为治疗糖尿病的方法，该方法包括给予患者治疗有效量的式I的化合物。
“患者”表示在情感障碍及神经变性病症领域内的医师所理解的适于疗法的人。
“治疗”、“疗法”及相关术语如在情感障碍及神经变性病症领域内的医师所理解来使用。
本发明的化合物通常以包含治疗有效量的化合物或者其药用盐及药用载体的药物组合物形式给予且可含有常规赋形剂。药用载体为那些通常已知的具有可接受的安全性分布的载体。组合物涵盖所有常见固体及液体形式，包括(例如)胶囊剂、片剂、锭剂及粉末剂及液体混悬剂、糖浆剂、酏剂及溶液剂。组合物使用常规制剂技术制备，且常规赋形剂(诸如粘合剂及润湿剂)及媒介物(诸如水及醇)通常用于组合物。例如参见，Remington’sPharmaceutical Sciences，Mack Publishing Company，Easton，PA，第17版，1985。
固体组合物通常以剂量单位配制，且每剂量提供约1mg至1000mg活性成分的组合物是优选的。剂量的一些实例为1mg、10mg、100mg、250mg、500mg及1000mg。其它药物通常将存在于与临床上所使用的该类药物类似的单位范围内。其通常为0.25-1000毫克/单位。
液体组合物通常在剂量单位范围内。一般而言，液体组合物将在1-100mg/mL的单位剂量范围内。剂量的一些实例为1mg/mL、10mg/mL、25mg/mL、50mg/mL及100mg/mL。其它药物通常将存在于与临床上所使用的该类药物类似的单位范围内。其通常为1-100mg/mL。
本发明涵盖所有常规给药模式；口服及肠胃外给药方法是优选的。一般而言，给药方案将与临床上所使用的其它药物类似。每日剂量通常将为每日每公斤体重1-100mg。一般而言，口服给药需要较多化合物且肠胃外给药需要较少化合物。然而，特定给药方案将由医师使用合理医学判断确定。
具体实施方式
1H-NMR光谱在Bruker 500MHz、400MHz或者300MHz仪器上进行且化学位移是参考四甲基硅烷(δ＝0.0)以ppm(δ)报道。所有蒸发是在减压下进行。除非另作说明，否则LC/MS分析在Shimadzu仪器上使用Phenomenex-Luna4.6×50mm S 10反相柱采用4mL/min的流速使用在甲醇/水梯度[0-100％，3分钟；运行时间为4分钟]中的0.1％TFA进行且UV检测器设定为220nm，或者使用Gemini C184.6×50mm 5μ反相柱采用5mL/min的流速使用10mM乙酸铵乙腈/水梯度[5-95％，3分钟，运行时间为4分钟]进行且UV检测器设定为220nm(阴离子质谱)。除非另作说明，否则纯化可由制备性C-18柱采用含有0.1％三氟乙酸(TFA)的甲醇-水梯度且使用Shimadzu高效液体制备性色谱系统采用XTERRA 30×100mm S5柱在40mL/min流速以12分钟梯度进行。
实施例1
N-(苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500511
步骤A：N-(苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺
Figure BDA00001827380500512
向在乙腈(300mL)中的苯并[d]噻唑-2-胺(20g，133mmol)(加入1，1′-硫羰基二咪唑(30.8g，173mmol)。将反应混合物在50℃搅拌24小时。将反应混合物冷却至室温，以及过滤出沉淀物并且用乙腈洗涤(2x50mL)。将黄色粉末在真空炉(40℃)中干燥2小时。产物N-(苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(28.9g，111mmol)直接用于下一步骤，而没有进一步纯化。
步骤B：(3-((3-苯并[d]噻唑-2-基硫脲基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500513
向在N，N-二甲基甲酰胺(100mL)中的N-(苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(9.2g，35mmol)(加入(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(6.0g，35mmol)(其是根据Swain C.J.，et.al.，J.Med.Chem.，35：1019-1031(1992)合成的)。将反应混合物在65℃搅拌15小时。将反应混合物冷却，然后浓缩得到粗产物。粗物质经快速色谱纯化(50-100％乙酸乙酯/己烷)，得到第一斑点/级份，经TLC检测为产物。合并级份并浓缩，得到(3-((3-苯并[d]噻唑-2-基硫脲基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(10.6g，29.1mmol，产率83％)，为灰白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 11.88(s，1H)，10.30(s，1H)，7.94(d，J＝7.63Hz，1H)，7.55-7.74(m，1H)，7.37-7.53(m，J＝7.32，7.32Hz，1H)，7.16-7.37(m，J＝7.63，7.63Hz，1H)，5.39(s，1H)，3.85(d，2H)，2.65-3.08(m，6H)，1.99-2.22(m，1H)，1.79-1.97(m，2H)，1.66-1.79(m，1H)，1.08-1.63(m，4H)。MS(LC/MS)R.T.＝3.40；[M+H]+＝363.1
步骤C：(2-(苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500521
向在N，N-二甲基甲酰胺(100mL)中的(3-((3-苯并[d]噻唑-2-基硫脲基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(10.6g，29.1mmol)(加入N，N′-二异丙基碳二亚胺(11.4mL，72.8mmol)。将反应混合物在70℃搅拌4小时。将反应混合物浓缩，得到粗制的残余物。加入少量乙酸乙酯(20mL)，并对悬浮液进行超声处理。过滤出固体，并用少量乙酸乙酯(2x 10mL)洗涤。将固体在真空炉(80℃)中干燥，得到(2-(苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(6.83g，20.8mmol，产率72％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 9.09(br.s.，1H)7.81(d，J＝7.63Hz，1H)7.63(d，J＝7.93Hz，1H)7.30-7.40(m，1H)7.15-7.24(m，1H)3.88(d，J＝10.38Hz，1H)3.77(d，J＝10.38Hz，1H)3.25-3.37(m，1H)3.17(dd，J＝14.95，1.83Hz，1H)2.99-3.10(m，1H)2.79-2.98(m，3H)2.27(br.s.，1H)1.98-2.11(m，1H)1.71-1.88(m，3H)1.45(br.s.，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.44；[M+H-BH3]+＝315.1。
步骤D：N-(苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500531
向在丙酮(9mL)中的(2-(苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(6.6g，20.1mmol)加入3M HCl(50.3mL，151mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时。反应由TLC监测(较低的点)完成。加入乙酸乙酯，然后分离水层。水层用1N氢氧化钠中和。产物用乙酸乙酯萃取(2x150mL)。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后真空浓缩，得到白色粉末。将少量乙酸乙酯(20mL)加至所述粉末中。对固体进行超声处理，过滤，得到外消旋N-(苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(5.13g，16.3mmol，产率81％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 9.02(br.s.，1H)7.79(d，J＝7.02Hz，1H)7.62(d，J＝7.63Hz，1H)7.29-7.38(m，1H)7.15-7.22(m，1H)3.90(d，J＝10.07Hz，1H)3.65(d，J＝10.07Hz，1H)2.98-3.10(m，2H)2.73-2.88(m，2H)2.67(t，J＝7.78Hz，2H)2.07(br.s.，1H)1.93(br.s.，1H)1.42-1.67(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.15；[M+H]+＝315.3。
使用Chiralpak AD-H(3x25cm，5μM)柱分离对映异构体，流动相组成为CO2/(甲醇/ACN/DEA＝70/30/0.1(v/v/v))＝77/23。波长设定为300nM。对分离的峰产物进行真空浓缩，得到白色粉末。从柱分离的第一峰产物为(S)-N-(苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(1.45g，4.61mmol，产率29.4％)。(1a；S-异构体)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.03(br.s.，1H)7.78(d，J＝7.05Hz，1H)7.61(d，J＝7.55Hz，1H)7.27-7.37(m，1H)7.11-7.23(m，1H)3.89(d，J＝10.07Hz，1H)3.64(d，J＝10.07Hz，1H)2.96-3.09(m，2H)2.71-2.88(m，2H)2.66(t，J＝7.81Hz，2H)2.02-2.11(m，1H)1.85-1.97(m，1H)1.41-1.65(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.15；[M+H]+＝315.3。旋光性(1.23mg/mL，DMSO)＝+5.20°。第二峰产物为(R)-N-(苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(1.21g，3.85mmol，产率24.5％)。(1b；R-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 9.02(br.s.，1H)7.79(d，J＝7.32Hz，1H)7.62(d，J＝7.63Hz，1H)7.33(t，J＝7.63Hz，1H)7.18(t，J＝7.48Hz，1H)3.90(d，J＝10.07Hz，1H)3.65(d，J＝10.07Hz，1H)2.98-3.10(m，2H)2.73-2.87(m，2H)2.67(t，J＝7.63Hz，2H)2.08(br.s.，1H)1.93(br.s.，1H)1.42-1.67(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.15；[M+H]+＝315.3；旋光性(3.9mg/mL，DMSO)＝-3.92°。
实施例2
N-(5-甲氧基噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500541
步骤A：5-甲氧基噻唑并[5，4-b]吡啶-2-胺
Figure BDA00001827380500542
在配备有机械搅拌器、滴液漏斗和温度计的500ml三颈烧瓶中，加入乙酸(100mL)并且在冰浴中冷却。将硫氰酸钾(40g，412mmol)和6-甲氧基吡啶-3-胺(6.2g，49.9mmol)加至反应混合物中。将反应混合物在冰盐浴中冷却，直到反应温度达到低于0℃。历时2小时滴加溴(8mL，156mmol)于乙酸(30.0mL)中的溶液，滴加速率使得反应温度低于0℃。要求机械搅拌。在添加完成后，对混合物进行搅拌，并缓慢温热至室温，保持过夜。然后加入水(30mL)，然后将混合物在油浴中加热至85℃。然后趁热对该混合物进行过滤。使橙色滤饼返回至反应烧瓶中，加入额外的50ml乙酸。将混合物再次加热至85℃，然后再次趁热过滤。在冰浴中冷却合并的滤液，用浓氢氧化铵中和至pH值为8。过滤收集所形成的紫色沉淀，得到5g粗物质。该粗物质从甲醇(40mL)中重结晶，得到5-甲氧基噻唑并[5，4-b]吡啶-2-胺(3g，16.55mmol，产率33.1％)，为紫色晶体。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm 7.60(1H，d，J＝8.42Hz)，7.41(2H，s)，6.67(1H，d，J＝8.78Hz)，3.81(3H，s)。
步骤B：(3-羟基-3-((3-(5-甲氧基噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼
将5-甲氧基噻唑并[5，4-b]吡啶-2-胺(2.4g，13.24mmol)分装在5x20mL螺帽小瓶中。向各小瓶中加入乙腈(10mL)和硫羰基二咪唑(600mg)。将所有小瓶在60℃加热过夜。合并反应小瓶，浓缩，得到粗制的N-(5-甲氧基噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺产物。
将该粗产物悬浮在N，N-二甲基甲酰胺(50ml)中，然后加入(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(2.7g，15.88mmol)。将反应混合物在70℃加热4小时。LC/MS显示转化基本完成。将反应混合物冷却至室温，然后倾倒至水中。产物先后用甲苯和氯仿萃取。合并有机相，用水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到粗物质。该粗物质用快速色谱纯化(20-100％乙酸乙酯-己烷)。收集产物级份，并且真空浓缩，得到(3-羟基-3-((3-(5-甲氧基噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(1.36g，3.46mmol，产率26.1％)。1H NMR显示摩尔比为1∶0.55的(3-羟基-3-((3-(5-甲氧基噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(1.36g，3.46mmol，产率26.1％)和5-甲氧基噻唑并[5，4-b]吡啶-2-胺(.34g，1.876mmol，产率14.17％)。将该混合物直接用于下一步骤，而没有进一步纯化。MS(LC/MS)R.T.＝3.23；[M+H]+＝392.1。
步骤C：(2-(5-甲氧基-3a，7a-二氢噻唑并[5，4-b ]吡啶-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼
向在N，N-二甲基甲酰胺(10mL)中的(3-羟基-3-((3-(5-甲氧基噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(1.7g，3.46mmol)(加入N，N′-二异丙基碳二亚胺(1.89mL，12.10mmol)。将反应混合物在70℃搅拌2小时。对混合物进行冷却，然后倾倒至水中。产物用甲苯和氯仿萃取。合并有机层，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到粗物质。将该固体物质用乙醚(ether)研磨。然后过滤出固体，并且干燥，得到(2-(5-甲氧基-3a，7a-二氢噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(700mg，1.94mmol，产率56.0％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm 8.98(1H，s)，7.86(1H，d，J＝8.78Hz)，6.81(1H，d，J＝8.42Hz)，3.87(3H，s)，3.83(1H，s)，3.68-3.78(1H，m)，3.31(1H，s)，3.15-3.29(1H，m)，2.78-3.14(4H，m)，2.26(1H，br.s.)，2.04(1H，br.s.)，1.63-1.89(3H，m)。
步骤D：N-(5-甲氧基噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500561
向在丙酮(10mL)中的(2-(5-甲氧基噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(780mg，2.17mmol)加入3MHCl(10mL，329mmol)。将反应混合物在室温搅拌2小时。加入氯仿和水，然后分离水层。水层用碳酸氢钠中和。产物用氯仿萃取(2x)。合并有机相，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到外消旋N-(5-甲氧基噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(588mg，1.70mmol，产率78％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6δppm 8.90(1H，br.s.)，7.82-7.86(1H，m)，6.80(1H，d，J＝8.85Hz)，3.84-3.89(4H，m)，3.61(1H，d，J＝10.07Hz)，3.03(2H，d，J＝5.19Hz)，2.73-2.86(2H，m)，2.66(2H，t，J＝7.78Hz)，2.07(1H，br.s.)，1.92(1H，br.s.)，1.45-1.65(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.29；[M+H]+＝346.1。
使用Chiralpak AD-H(30x250mm，5μm)柱分离对映异构体，流动相组成为35％甲醇(0.1％DEA)/CO2。波长设定为300nM。对分离的峰产物进行真空浓缩，得到白色粉末。从柱分离的第一峰产物为(S)-N-(5-甲氧基噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(212mg，0.61mmol，产率36.1％)。(2a；S-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.89(1H，br.s.)，7.84(1H，d，J＝8.85Hz)，6.77-6.82(1H，m)，3.84-3.89(4H，m)，3.61(1H，d，J＝10.07Hz)，3.03(2H，d，J＝5.19Hz)，2.74-2.86(2H，m)，2.66(2H，t，J＝7.63Hz)，2.06(1H，br.s.)，1.92(1H，br.s.)，1.44-1.65(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.47；[M+H]+＝346.2。旋光性(3.57mg/ml，DMSO)＝-2.58°。第二峰产物为(R)-N-(5-甲氧基噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(242mg，0.70mmol，产率41.2％)。(2b；R-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.89(1H，br.s.)，7.84(1H，d，J＝8.85Hz)，6.79(1H，d，J＝8.55Hz)，3.82-3.90(4H，m)，3.61(1H，d，J＝10.07Hz)，3.03(2H，d，J＝5.49Hz)，2.74-2.86(2H，m)，2.66(2H，t，J＝7.78Hz)，2.06(1H，br.s.)，1.92(1H，br.s.)，1.42-1.67(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.30；[M+H]+＝346.2。旋光性(3.29mg/ml，DMSO)＝+2.43°。
实施例3
(2-(5H-1’-氮杂螺[噁唑-4，3’-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)苯并[d]噻唑-6-基)吡咯烷-1-基)甲酮
Figure BDA00001827380500571
步骤A：6-(吡咯烷-1-基羰基)苯并[d]噻唑-2-基氨基甲酸叔丁酯
Figure BDA00001827380500572
在250ml烧瓶中，加入2-(叔丁氧基羰基-氨基)苯并[d]噻唑-6-羧酸(1.0g，3.4mmol)和(吡咯烷(0.559mL，6.8mmol)于四氢呋喃(50mL)中的溶液。向该溶液中，加入EDC(1.3g，6.8mmol)、1-羟基苯并三唑(1.041g，6.8mmol)和许尼希碱(Hunig′s Base)(2.37mL，13.59mmol)。将反应混合物在25℃搅拌1小时。然后将反应混合物倾倒至水和二氯甲烷中。水相用二氯甲烷萃取三次，然后合并有机层并且浓缩。将残余物吸收在少量二氯甲烷中，用乙醚/己烷析出。将烧瓶放置在冷藏器中1小时，并且过滤。收集白色沉淀，得到6-(吡咯烷-1-基羰基)苯并[d]噻唑-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.09g，3.14mmol，产率92％)。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 11.95(s，1H)，8.14(s，1H)，7.61-7.77(m，J＝8.39，1.98Hz，1H)，7.46-7.63(m，1H)，3.39-3.63(m，4H)，1.74-2.00(m，4H)，1.45-1.62(m，9H)。MS(LC/MS)R.T.＝3.40；[M+H]+＝363.1。
步骤B：(2-氨基苯并[d]噻唑-6-基)(吡咯烷-1-基)甲酮
Figure BDA00001827380500573
将6-(吡咯烷-1-基羰基)苯并[d]噻唑-2-基氨基甲酸叔丁酯(1.09g，3.14mmol)溶于二氯甲烷(10mL)和TFA(3mL，38.9mmol)中，将反应混合物在25℃搅拌过夜。将反应混合物倾倒至分液漏斗中，并且小心地用碳酸氢钠中和。液体用氯仿/甲醇(4∶1)萃取三次。将有机层浓缩成白色残余物，用乙醚研磨。收集沉淀，得到(2-氨基苯并[d]噻唑-6-基)(吡咯烷-1-基)甲酮(0.497g，2.0mmol，64％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.86(d，J＝1.51Hz，1H)，7.65(s，2H)，7.35-7.46(m，1H)，7.26-7.35(m，1H)，3.41-3.57(m，4H)，1.64-1.97(m，4H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.39；[M+H]+＝248.1。
步骤C：(2-(5H-1’-氮杂螺[噁唑-4，3’-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)苯并[d]噻唑-6-基)吡咯烷-1-基)甲酮
Figure BDA00001827380500581
(2-(5H-1’-氮杂螺[噁唑-4，3’-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)苯并[d]噻唑-6-基)吡咯烷-1-基)甲酮如下制备：按照实施例1步骤A-D的一般操作，并且使用(2-氨基苯并[d]噻唑-6-基)(吡咯烷-1-基)甲酮(实施例3，步骤B)作为起始物质。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.05(br.s.，1H)7.99(d，J＝1.76Hz，1H)7.60(d，J＝8.31Hz，1H)7.48(dd，J＝8.31，1.76Hz，1H)3.90(d，J＝10.07Hz，1H)3.65(d，J＝10.07Hz，1H)3.42-3.52(m，4H)3.04(s，2H)2.75-2.87(m，2H)2.67(t，J＝7.81Hz，2H)2.08(br.s.，1H)1.76-1.98(m，5H)1.41-1.65(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.33；[M+H]+＝412.2。
实施例4
N-(5-苯基噻唑-2-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500582
步骤A：(3-羟基-3-((3-(5-苯基噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500583
向在乙腈(6mL)中的5-苯基噻唑-2-胺(0.52g，2.9mmol)(加入1，1′-硫羰基二咪唑(0.68g，3.8mmol)。将反应混合物在65℃搅拌2小时。过滤出沉淀并且用乙腈洗涤(2x20mL)，得到中间体N-(5-苯基噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺。将中间体吸收在N，N-二甲基甲酰胺(30mL)中，用(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.5g，2.9mmol)处理。将反应混合物在65℃搅拌5小时。将反应混合物真空浓缩，经硅胶色谱纯化(30-100％乙酸乙酯/己烷)。合并产物级份，然后真空浓缩，得到(3-羟基-3-((3-(5-苯基噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(.85g，2.19mmol，产率74.4％)，为白色粉末。LC/MS确认产物(在LC/MS条件下减去BH3)：保留时间3.26(M+1-BH3＝375.33)。
步骤B：(2-(5-苯基噻唑-2-基氨基)-4H-1’-氮鎓杂螺-[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛烷]-1’-基)三氢化硼
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(3-羟基-3-((3-(5-苯基噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.8g，2.1mmol)(加入N，N′-二异丙基碳二亚胺(1.12mL，7.2mmol)。将反应混合物在70℃搅拌4小时。将反应混合物真空浓缩，经硅胶色谱纯化(40-100％乙酸乙酯/己烷)。对合并的产物级份真空浓缩，得到(2-(5-苯基噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.51g，1.44mmol，产率70％)，为白色粉末。LCMS-质量对应于在LC/MS条件下减去BH3的质量：保留时间2.46(M+1-BH3＝341.36)。
步骤C：N-(5-苯基噻唑-2-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500592
向在丙酮(9mL)中的(2-(5-苯基噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.56g，1.58mmol)加入3M HCl(3.95mL，11.86mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时，然后用1N氢氧化钠中和。产物用乙酸乙酯萃取(2x20mL)，接着用氯仿萃取(2x20mL)。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后真空浓缩，得到白色粉末。粗产物经反相HPLC纯化(Phenomenex Luna 30X 100mm；220波长；梯度时间10分钟；流速40ml/分钟；溶剂A；10％甲醇-90％水-0.1％TFA，溶剂B；90％甲醇-10％水-0.1％TFA)。合并级份，用1N氢氧化钠中和，用乙酸乙酯(2x30mL)和氯仿(2x30mL)萃取。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后真空浓缩，得到N-(5-苯基噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.4g，1.175mmol，产率74.3％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.63(1H，br.s.)，7.71(1H，s)，7.52(2H，d，J＝7.32Hz)，7.37(2H，t，J＝7.78Hz)，7.25(1H，t，J＝7.32Hz)，3.82(1H，d，J＝10.07Hz)，3.57(1H，d，J＝9.77Hz)，3.02(2H，d，J＝4.27Hz)，2.79(2H，t，J＝7.63Hz)，2.66(2H，t，J＝7.63Hz)，2.04(1H，br.s.)，1.92-1.97(1H，m)，1.44-1.65(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.52；[M+H]+＝341.3。
使用Chiralpak AS-H(30x250mm，5μm)柱分离对映异构体，流动相组成为30％甲醇(0.1％DEA)/CO2，以及在300nm监测UV。分离的峰产物真空浓缩，得到白色粉末。从柱分离的第一峰产物产率为0.4g，1.15mmol，32.7％(4a，S-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.69(s，1H)，7.69-7.87(m，1H)，7.52-7.66(m，J＝10.99Hz，2H)，7.37-7.51(m，2H)，7.21-7.38(m，2H)，3.52-4.00(m，2H)，2.98-3.23(m，2H)，2.78-2.94(m，2H)，2.64-2.78(m，2H)，1.88-2.19(m，J＝60.43Hz，2H)，1.40-1.77(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.77；[M+H]+＝341.1。从柱分离的第二峰产物产率为0.4g，1.15mmol，32.7％。(4b，R-异构体)：L M.P.187-9℃。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.64(s，1H)，7.62-7.84(m，1H)，7.44-7.61(m，2H)，7.33-7.46(m，2H)，7.18-7.31(m，1H)，3.50-3.99(m，2H)，2.94-3.14(m，2H)，2.74-2.91(m，2H)，2.61-2.72(m，2H)，2.05(s，1H)，1.82-2.00(m，1H)，1.34-1.72(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.78；[M+H]+＝341.1。
实施例5
N-(6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：N-(6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺
Figure BDA00001827380500601
向在乙腈(20mL)中的6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-胺(0.53g，2.94mmol)(加入1，1′-硫羰基二咪唑(0.681g，3.82mmol)。将反应混合物在65℃搅拌24小时。过滤出沉淀并且用乙腈洗涤(2x20mL)，得到产物。将产物直接用于下一步骤，而没有进一步纯化或表征。
步骤B：(3-羟基-3-((3-(6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-基)-硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500611
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的N-(6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(.82g，2.82mmol)(加入(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.48g，2.82mmol)。将反应混合物在65℃搅拌6小时。将反应混合物真空浓缩，然后经硅胶色谱纯化(30％-100％乙酸乙酯/己烷)。合并纯级份，然后浓缩，得到(3-羟基-3-((3-(6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.7g，1.78mmol，产率63.2％)，为白色粉末。LC/MS确认产物(在LC/MS条件下减去BH3)：保留时间3.11(M+1-BH3＝379.4)。
步骤C：(2-(6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500612
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(3-羟基-3-((3-(6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.68g，1.73mmol)(加入N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.95mL，6.1mmol)。将反应混合物在70℃搅拌4小时。对反应混合物浓缩，并且经硅胶色谱纯化(40-100％乙酸乙酯/己烷)。合并产物级份，然后真空浓缩，得到(2-(6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.35g，0.98mmol，产率56.4％)，为白色粉末。LC/MS MH+-BH3＝345.2。
步骤D：N-(6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500621
向在丙酮(9mL)中的(2-(6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.33g，0.921mmol)加入3MHCl(2.30mL，6.91mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时，然后用1N氢氧化钠中和。产物用乙酸乙酯萃取(2x20mL)，然后用氯仿萃取(2x20mL)。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后真空浓缩，得到白色粉末。粗产物经反相HPLC纯化(Phenomenex Luna 30X 100mm；220波长；梯度时间10分钟；流速40ml/分钟；溶剂A；10％甲醇-90％水-0.1％TFA，溶剂B；90％甲醇-10％水-0.1％TFA)。合并级份，用1N氢氧化钠中和，然后用乙酸乙酯萃取(2x30mL)。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后真空浓缩，得到N-(6-甲氧基苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.25g，0.73mmol，产率79％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.88(1H，d，J＝1.22Hz)，7.48-7.52(1H，m)，7.40(1H，d，J＝2.75Hz)，6.92(1H，dd，J＝8.70，2.59Hz)，3.87(1H，d，J＝9.77Hz)，3.77(3H，s)，3.61(1H，d，J＝9.77Hz)，3.03(2H，s)，2.75-2.86(2H，m)，2.67(2H，t，J＝7.78Hz)，2.06(1H，br.s.)，1.91(1H，br.s.)，1.41-1.65(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.44；[M+H]+＝345.3。
使用Chiralpak AD-H(30x250mm，5μm)柱分离对映异构体，流动相组成为23％甲醇(0.1％DEA)/CO2，以及在220nm监测UV。分离的峰产物真空浓缩，得到白色粉末。从柱分离的第一峰产物产率为205.5mg，0.60mmol，34.1％。(5a，S-异构体)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.88(1H，br.s.)，7.50(1H，d，J＝8.81Hz)，7.40(1H，d，J＝2.52Hz)，6.92(1H，dd，J＝8.81，2.77Hz)，3.87(1H，d，J＝9.82Hz)，3.77(3H，s)，3.58-3.65(1H，m)，3.02(2H，s)，2.74-2.86(2H，m)，2.66(2H，t，J＝7.68Hz)，2.03-2.08(1H，m)，1.91(1H，br.s.)，1.39-1.65(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.40；[M+H]+＝345.2。从柱分离的第二峰产物产率为206.9mg，0.6mmol，34％。(5b，R-异构体)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.88(1H，br.s.)，7.50(1H，d，J＝8.56Hz)，7.40(1H，d，J＝2.52Hz)，6.93(1H，dd，J＝8.81，2.52Hz)，3.87(1H，d，J＝10.07Hz)，3.77(3H，s)，3.62(1H，d，J＝10.07Hz)，3.02(2H，s)，2.75-2.86(2H，m)，2.67(2H，t，J＝7.68Hz)，2.04-2.09(1H，m)，1.92(1H，br.s.)，1.42-1.66(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.70；[M+H]+＝345.1。
实施例6
N-(4-甲基苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500631
步骤A：N-(4-甲基苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺
Figure BDA00001827380500632
向在乙腈(30mL)中的4-甲基苯并[d]噻唑-2-胺(1.1g，6.7mmol)(加入1，1′-硫羰基二咪唑(1.552g，8.71mmol)。将反应混合物在50℃搅拌18小时。将反应混合物冷却至室温，以及过滤出沉淀物并且用乙腈洗涤(2x 50mL)。将所得的黄色粉末在真空炉(50℃)中干燥1小时，得到N-(4-甲基苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(900mg，3.28mmol，产率49％)，然后用于下一步骤而没有进一步纯化或表征。
步骤B：(3-羟基-3-((3-(4-甲基苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500633
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的N-(4-甲基苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(0.71g，2.59mmol)(加入(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.44g，2.59mmol)。将反应混合物在70℃搅拌4小时。对反应混合物浓缩，并且经硅胶色谱纯化(40-100％乙酸乙酯/己烷)。对产物级份进行真空浓缩，得到(3-羟基-3-((3-(4-甲基苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.65g，1.73mmol，产率66.7％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 11.93(1H，s)，7.74(1H，d，J＝7.63Hz)，7.22-7.26(1H，m)，7.19(1H，t，J＝7.63Hz)，3.75-3.93(2H，m)，2.72-2.95(6H，m)，2.56(3H，s)，2.03-2.14(1H，m)，1.95(1H，br.s.)，1.78-1.87(1H，m)，1.73(1H，ddd，J＝13.81，9.23，5.04Hz)，1.56(1H，td，J＝9.99，7.78Hz)，1.38(2H，br.s.)。(LC/MS)R.T.＝3.70；[M+H]+＝375.2。
步骤C：(2-(4-甲基苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂-螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500641
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(3-羟基-3-((3-(4-甲基苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.62g，1.65mmol)(加入N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.33mL，2.14mmol)。将反应混合物在70℃搅拌4小时。对反应混合物浓缩，并且经硅胶色谱纯化(40-100％乙酸乙酯/己烷)。对产物级份进行真空浓缩，得到(2-(4-甲基苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.4g，1.17mmol，产率70.9％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.90(s，1H)，7.61(d，J＝7.63Hz，1H)，7.13-7.17(m，1H)，7.09(t，J＝7.48Hz，1H)，3.90(d，J＝10.38Hz，1H)，3.77(d，J＝10.38Hz，1H)，3.32(s，3H)，3.30(d，J＝1.53Hz，1H)，3.13-3.20(m，2H)，3.00-3.09(m，1H)，2.85-2.94(m，4H)，2.57(s，4H)，2.28(s，1H)，2.06(s，1H)，1.75-1.83(m，4H)，1.45(s，1H)。(LC/MS)R.T.＝2.73；[M+H]+＝343.2。
步骤D：N-(4-甲基苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500642
向在丙酮(9mL)中的(2-(4-甲基苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.38g，1.11mmol)加入3MHCl(2.78mL，8.33mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时。加入乙酸乙酯，收集水层，并且用1N氢氧化钠中和。产物用乙酸乙酯萃取(2x40mL)。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到N-(4-甲基苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.195g，0.594mmol，产率53.5％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.84(s，1H)，7.60(d，J＝7.32Hz，1H)，7.13-7.17(m，1H)，7.08(t，J＝7.63Hz，1H)，3.92(d，J＝10.07Hz，1H)，3.66(d，J＝9.77Hz，1H)，3.04(s，2H)，2.76-2.85(m，2H)，2.68(t，J＝7.48Hz，2H)，2.56(s，3H)，2.09(s，1H)，1.93(s，1H)，1.61(d，J＝3.05Hz，1H)，1.60(s，1H)，1.50(dd，J＝7.17，2.59Hz，1H)。(LC/MS)R.T.＝1.76；[M+H]+＝329.2。
使用Chiralcel OJ-H(30x 250mm，5μm)柱分离对映异构体，流动相组成为30％甲醇(0.1％DEA)/CO2以及在300nm监测UV。对分离的峰产物进行真空浓缩，得到白色粉末。从柱分离的第一峰产物产率为0.07g，0.21mmol，38.9％。(6a，S-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.83(br.s.，1H)7.59(d，J＝7.63Hz，1H)7.11-7.18(m，1H)7.08(t，J＝7.63Hz，1H)3.92(d，J＝10.38Hz，1H)3.66(d，J＝9.77Hz，1H)3.04(s，2H)2.73-2.89(m，2H)2.61-2.72(m，2H)2.56(s，3H)2.09(br.s.，1H)1.93(br.s.，1H)1.43-1.71(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.75；[M+H]+＝329.1。从柱分离的第二峰产物产率为0.07g，0.21mmol，38.1％.(6b，R-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm8.84(br.s.，1H)7.59(d，J＝7.63Hz，1H)7.15(d，J＝7.20Hz，1H)7.08(t，J＝7.48Hz，1H)3.92(d，J＝9.77Hz，1H)3.66(d，J＝10.07Hz，1H)3.00-3.09(m，2H)2.73-2.87(m，2H)2.62-2.72(m，2H)2.56(s，3H)2.05-2.12(m，1H)1.93(br.s.，1H)1.56-1.67(m，2H)1.45-1.55(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.75；[M+H]+＝329.1。
实施例7
N-(4-氯苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500651
步骤A：N-(4-氯苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺
Figure BDA00001827380500652
向在乙腈(30mL)中的4-氯苯并[d]噻唑-2-胺(1.12g，6.07mmol)(加入1，1′-硫羰基二咪唑(1.405g，7.89mmol)。将反应混合物在50℃搅拌18小时。将反应混合物冷却至室温，以及过滤出沉淀物并且用乙腈洗涤(2x50mL)。将黄色粉末在真空炉(40℃)中干燥1小时，得到N-(4-氯苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(0.33g，1.12mmol，产率18.5％)，然后用于下一步骤中，而没有进一步纯化或表征。
步骤B：(3-((3-(4-氯苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的N-(4-氯苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(0.3g，1.018mmol)()加入(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.173g，1.018mmol)。将反应混合物在70℃搅拌4小时。对反应混合物浓缩，并且经硅胶色谱纯化(60-100％乙酸乙酯/己烷)。对产物级份进行真空浓缩，得到(3-((3-(4-氯苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.25g，0.63mmol，产率61.9％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 12.19(s，1H)9.72(br.s.，1H)7.93(d，J＝7.93Hz，1H)7.51(d，J＝7.93Hz，1H)7.26-7.32(m，1H)5.32(s，1H)3.88(dd，J＝13.73，4.88Hz，1H)3.75(dd，J＝13.73，4.88Hz，1H)2.73-2.95(m，6H)2.08(br.s.，1H)1.96(br.s.，1H)1.79-1.89(m，1H)1.68-1.78(m，1H)1.52-1.61(m，1H)1.39(br.s.，3H)。
步骤C：(2-(4-氯苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500662
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(3-((3-(4-氯苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.23g，0.58mmol)()加入N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.117mL，0.75mmol)。将反应混合物在70℃搅拌4小时。对反应混合物浓缩，并且经硅胶色谱纯化(40-100％乙酸乙酯/己烷)。对产物级份进行真空浓缩，得到(2-(4-氯苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.1g，0.27mmol，产率47.6％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-J＝d6)δppm 8.95(s，1H)7.79(d，J＝7.93Hz，1H)7.42(d，J＝7.63Hz，1H)7.18(t，J＝7.93Hz，1H)3.92(d，J＝10.38Hz，1H)3.77(d，J＝10.38Hz，1H)3.26-3.38(m，1H)3.19(dd，J＝15.26，1.53Hz，1H)3.01-3.11(m，1H)2.81-3.00(m，3H)2.31(br.s.，1H)2.03-2.15(m，1H)1.70-1.89(m，3H)1.45(br.s.，3H)。
步骤D：N-(4-氯苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
向在丙酮(9mL)中的(2-(4-氯苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.08g，0.221mmol))加入3MHCl(0.551mL，1.654mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时。加入乙酸乙酯，收集水层，用1N氢氧化钠中和。产物用乙酸乙酯萃取(2x40mL)。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到N-(4-氯苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.05g，0.14mmol，产率65.0％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.90(br.s.，1H)7.77(dd，J＝7.78，1.07Hz，1H)7.41(dd，J＝7.78，1.07Hz，1H)7.17(t，J＝7.78Hz，1H)3.94(d，J＝10.07Hz，1H)3.67(d，J＝10.07Hz，1H)3.00-3.11(m，2H)2.76-2.88(m，2H)2.68(t，J＝7.63Hz，2H)2.11(br.s.，1H)1.91-2.00(m，1H)1.47-1.67(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.11；[M+H]+＝349.1。
使用Chiralcel OJ-H(30x250mm，5μm)柱分离对映异构体，流动相组成为30％甲醇(0.1％DEA)/CO2。波长设定为220nM。分离的峰产物真空浓缩，得到白色粉末。从柱分离的第一峰产物为(S)-N-(4-氯苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.11g，0.30mmol，产率34.8％)。(7a，S-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.90(br.s.，1H)7.77(d，J＝7.32Hz，1H)7.41(d，J＝7.93Hz，1H)7.17(t，J＝7.93Hz，1H)3.94(d，J＝10.07Hz，1H)3.67(d，J＝10.07Hz，1H)3.00-3.11(m，2H)2.76-2.90(m，2H)2.68(t，J＝7.78Hz，2H)2.11(br.s.，1H)1.91-2.01(m，1H)1.47-1.68(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.06；[M+H]+＝349.1。第二峰产物为(R)-N-(4-氯苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.11g，0.30mmol，产率35.2％)。(7b，R-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.89(br.s.，1H)7.77(d，J＝7.93Hz，1H)7.40(d，J＝7.93Hz，1H)7.16(t，J＝7.93Hz，1H)3.94(d，J＝10.07Hz，1H)3.67(d，J＝10.07Hz，1H)2.99-3.11(m，2H)2.74-2.88(m，2H)2.68(t，J＝7.78Hz，2H)2.11(br.s.，1H)1.90-2.01(m，1H)1.44-1.68(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.07；[M+H]+＝349.1。
实施例8
N-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500681
步骤A：N-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺
向在乙腈(30mL)中的1H-苯并[d]咪唑-2-胺(1.28g，9.61mmol)(加入1，1′-硫羰基二咪唑(2.227g，12.5mmol)。将反应混合物在50℃搅拌18小时。将反应混合物冷却至室温，以及过滤出沉淀物并且用乙腈洗涤(2x 50mL)。将黄色粉末在真空炉(40℃)中干燥1小时，得到N-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(1.8g，7.4mmol，产率77％)，然后用于下一步骤中，而没有进一步纯化或表征。
步骤B：(3-((3-1H-苯并[d]咪唑-2-基硫脲基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500683
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的N-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(1.07g，4.4mmol)()加入(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.748g，4.4mmol)。将反应混合物在70℃搅拌4小时。对反应混合物浓缩，并且经硅胶色谱纯化(60-100％乙酸乙酯/己烷)。对产物级份进行真空浓缩，得到(3-((3-1H-苯并[d]咪唑-2-基硫脲基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(1.28g，3.71mmol，产率84％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 11.41(s，1H)，11.16(s，1H)，7.43(d，J＝3.05Hz，3H)，7.13(ddd，J＝9.46，3.81，3.51Hz，3H)，5.36(s，1H)，4.01-4.07(m，3H)，3.79(dd，J＝13.28，4.12Hz，1H)，2.83-2.92(m，6H)，2.71(d，J＝14.04Hz，2H)，2.04-2.13(m，2H)，1.89-1.94(m，3H)，1.74(td，J＝9.46，5.49Hz，2H)，1.51-1.59(m，2H)，1.38(s，2H)，1.31(s，1H)。LC/MS确认产物(在LC/MS条件下减去BH3)：保留时间2.75(M+1-BH3＝332.2)。
步骤C：(2-(1H-苯并[d]咪唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺-[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(3-((3-1H-苯并[d]咪唑-2-基硫脲基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(1.0g，2.9mmol)(加入N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.587mL，3.77mmol)。将反应混合物在70℃搅拌4小时。对反应混合物浓缩，并且经硅胶色谱纯化(40-100％乙酸乙酯/己烷)。对产物级份进行真空浓缩，得到(2-(1H-苯并[d]咪唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.81g，2.6mmol，产率90％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 7.29(s，1H)，6.99-7.05(m，2H)，3.90(t，J＝9.77Hz，1H)，3.75(d，J＝10.38Hz，1H)，3.26-3.35(m，1H)，3.13(dd，J＝14.95，1.53Hz，1H)，2.98-3.06(m，1H)，2.84-2.92(m，3H)，2.22(s，1H)，1.98-2.05(m，1H)，1.72-1.82(m，3H)，1.45(s，1H)。LC/MS确认产物(在LC/MS条件下减去BH3)：保留时间2.29(M+1-BH3＝298.2)。
步骤D：N-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺-[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500692
向在丙酮(9mL)中的(2-(1H-苯并[d]咪唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.77g，2.5mmol)加入3M HCl(6.2mL，18.6mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时。加入乙酸乙酯，收集水层，然后用1N氢氧化钠中和。产物用乙酸乙酯萃取(2x40mL)。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到N-(1H-苯并[d]咪唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.5g，1.68mmol，产率68％)，为白色粉末。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 11.45(s，1H)，9.20(s，1H)，7.32(s，1H)，7.00(dd，J＝5.65，2.90Hz，4H)，3.91(d，J＝10.07Hz，2H)，3.64(d，J＝10.07Hz，2H)，2.98-3.05(m，4H)，2.73-2.82(m，4H)，2.67(t，J＝7.63Hz，4H)，2.03(d，J＝2.75Hz，2H)，1.85-1.92(m，2H)，1.54-1.63(m，4H)，1.44-1.51(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.30；[M+H]+＝298.2。
使用Chiralpak AS-H(30x250mm，5μ)柱分离对映异构体，流动相组成为30％甲醇(0.1％DEA)/CO2，在330nm监测UV。分离的峰产物真空浓缩，得到白色粉末。从柱分离的第一峰产物产率为0.11g，0.36mmol，33.0％.(8a；R-异构体)：M.P.255℃(分解)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 11.43(br.s.，1H)9.16(br.s.，1H)7.14-7.53(m，2H)6.82-7.09(m，2H)3.91(d，J＝9.77Hz，1H)3.64(d，J＝10.07Hz，1H)2.96-3.09(m，2H)2.71-2.87(m，2H)2.62-2.73(m，2H)2.01-2.08(m，1H)1.81-1.97(m，1H)1.54-1.66(m，2H)1.40-1.53(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.26；[M+H]+＝298.2。从柱分离的第二峰产物产率为0.11g，0.36mmol，33.0％。(8b；S-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 11.43(br.s.，1H)9.20(br.s.，1H)7.10-7.60(m，2H)6.83-7.11(m，2H)3.91(d，J＝9.77Hz，1H)3.64(d，J＝9.77Hz，1H)2.94-3.16(m，2H)2.71-2.86(m，2H)2.59-2.72(m，2H)1.97-2.09(m，1H)1.81-1.95(m，1H)1.53-1.71(m，2H)1.41-1.53(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.28；[M+H+＝298.2。
实施例9
N-(6-氯苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500701
步骤A：N-(6-氯苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺
Figure BDA00001827380500702
向在乙腈(30mL)中的6-氯苯并[d]噻唑-2-胺(1.14g，6.17mmol)(加入1，1′-硫羰基二咪唑(1.43g，8mmol)。将反应混合物在50℃搅拌18小时。将反应混合物冷却至室温，以及过滤出沉淀物并且用乙腈洗涤(2x50mL)。将黄色粉末在真空炉(40℃)中干燥1小时，得到N-(6-氯苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(1.16g，3.9mmol，产率64％)，然后用于下一步骤中，而没有进一步纯化或表征。
步骤B：(3-((3-(6-氯苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500711
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的N-(6-氯苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(0.86g，2.9mmol)(加入(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.5g，2.9mmol)。将反应混合物在70℃搅拌4小时。对反应混合物浓缩，并且经硅胶色谱纯化(60-100％乙酸乙酯/己烷)。对产物级份进行真空浓缩，得到(3-((3-(6-氯苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.4g，1.01mmol，产率34.6％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 11.92(br.s.，1H)9.89(br.s.，1H)8.08(br.s.，1H)7.62(br.s.，1H)7.40-7.50(m，1H)5.40(br.s.，1H)3.88(d，J＝10.20Hz，1H)3.76(d，J＝10.20Hz，1H)2.67-3.02(m，6H)2.08(br.s.，1H)1.80-1.95(m，2H)1.73(br.s.，1H)1.01-1.63(m，4H)。MS(LC/MS)R.T.＝3.87；[M+H]+＝395.1。
步骤C：(2-(6-氯苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(3-((3-(6-氯苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.37g，0.93mmol)(加入N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.19mL，1.2mmol)。将反应混合物在70℃搅拌4小时。对反应混合物浓缩，并且经硅胶色谱纯化(40-100％乙酸乙酯/己烷)。对产物级份进行真空浓缩，得到(2-(6-氯苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.12g，0.33mmol，产率35.5％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 9.10(br.s.，1H)7.95(d，J＝2.14Hz，1H)7.60(d，J＝8.55Hz，1H)7.36(dd，J＝8.55，2.14Hz，1H)3.88(d，J＝10.38Hz，1H)3.76(d，J＝10.38Hz，1H)3.26-3.37(m，1H)3.17(dd，J＝14.95，1.83Hz，1H)3.00-3.11(m，1H)2.80-2.97(m，3H)2.28(br.s.，1H)2.00-2.11(m，1H)1.69-1.88(m，3H)1.46(br.s.，3H)。LC/MS：保留时间2.94(M+1-BH3＝349.1)。
步骤D：N-(6-氯苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500721
向在丙酮(9mL)中的(2-(6-氯苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.1g，0.28mmol)加入3M HCl(0.69mL，2.07mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时。加入乙酸乙酯，收集水层，然后用1N氢氧化钠中和。产物用乙酸乙酯萃取(2x40mL)。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到N-(6-氯苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.06g，0.17mmol，产率62.4％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 9.03(br.s.，1H)7.93(d，J＝2.14Hz，1H)7.58(d，J＝8.55Hz，1H)7.35(dd，J＝8.55，2.14Hz，1H)3.90(d，J＝10.07Hz，1H)3.65(d，J＝10.07Hz，1H)2.99-3.11(m，2H)2.73-2.89(m，2H)2.67(t，J＝7.63Hz，2H)2.08(br.s.，1H)1.82-1.99(m，1H)1.43-1.67(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.07；[M+H]+＝349.1。
使用Chiralpak AS-H(30x250mm，5μ)柱分离对映异构体，流动相组成为30％甲醇(0.1％DEA)/CO2，以及在220nm监测UV。分离的峰产物真空浓缩，得到白色粉末。从柱分离的第一峰产物产率为0.034g，0.10mmol，36.2％。(9a；S-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 9.02(br.s.，1H)7.93(d，J＝2.14Hz，1H)7.58(d，J＝8.55Hz，1H)7.35(dd，J＝8.55，2.14Hz，1H)3.90(d，J＝10.07Hz，1H)3.65(d，J＝10.07Hz，1H)2.97-3.11(m，2H)2.73-2.89(m，2H)2.67(t，J＝7.48Hz，2H)2.08(br.s.，1H)1.93(br.s.，1H)1.43-1.69(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.05；[M+H]+＝349.1。旋光性＝+4.00°。从柱分离的第二峰产物产率为0.037g，0.10mmol，39.4％。(9b；R-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 9.02(br.s.，1H)7.93(d，J＝2.14Hz，1H)7.58(d，J＝8.55Hz，1H)7.35(dd，J＝8.55，2.44Hz，1H)3.90(d，J＝10.07Hz，1H)3.65(d，J＝10.07Hz，1H)2.93-3.13(m，2H)2.72-2.91(m，2H)2.62-2.73(m，2H)2.08(br.s.，1H)1.93(d，J＝1.22Hz，1H)1.44-1.68(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.04；[M+H]+＝349.1。旋光性＝-3.74°。
实施例10
N-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500731
步骤A：N-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺
Figure BDA00001827380500732
向在乙腈(30mL)中的1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-胺(1.28g，8.7mmol)(加入1，1′-硫羰基二咪唑(2.015g，11.31mmol)。将反应混合物在50℃搅拌18小时。将反应混合物冷却至室温，以及过滤出沉淀物并且用乙腈洗涤(2x50mL)。将黄色粉末在真空炉(40℃)中干燥1小时，得到N-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(1.6g，6.22mmol，产率71.5％)，然后用于下一步骤中，而没有进一步纯化或表征。
步骤B：(3-羟基-3-((3-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500733
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的N-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(1.04g，4.04mmol)(加入(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.687g，4.04mmol)。将反应混合物在70℃搅拌4小时。对反应混合物浓缩，并且经硅胶色谱纯化(60-100％乙酸乙酯/己烷)。对产物级份进行真空浓缩，得到(3-羟基-3-((3-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(1.28g，3.56mmol，产率88％)，为白色粉末。LC/MS确认产物(在LC/MS条件下减去BH3)：保留时间3.01(M+1-BH3＝346.2)。
步骤C：(2-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500741
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(3-羟基-3-((3-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(1.19g，3.31mmol)(加入N，N′-二异丙基碳二亚胺(1.55mL，9.9mmol)。将反应混合物在70℃搅拌4小时。对反应混合物浓缩，并且经硅胶色谱纯化(40-100％乙酸乙酯/己烷)。对产物级份进行真空浓缩，得到(2-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.94g，2.9mmol，产率87％)，为白色粉末。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.36(br.s.，1H)7.34-7.44(m，1H)7.26-7.34(m，1H)7.00-7.12(m，2H)3.90(d，J＝10.32Hz，1H)3.77(d，J＝10.32Hz，1H)3.57(s，3H)3.28(dd，J＝14.86，2.27Hz，1H)3.13(dd，J＝14.86，1.51Hz，1H)2.95-3.08(m，1H)2.75-2.95(m，3H)2.22(br.s.，1H)1.96-2.11(m，1H)1.67-1.89(m，3H)1.43(br.s.，3H)。LC/MS：保留时间2.37(M+1-BH3＝312.2)。
步骤D：N-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500742
向在丙酮(9mL)中的(2-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.92g，2.8mmol)加入3MHCl(7.1mL，21.2mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时。加入乙酸乙酯，收集水层，然后用1N氢氧化钠中和。产物用乙酸乙酯萃取(2x40mL)。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后真空浓缩，得到N-(1-甲基-1H-苯并[d]咪唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.84g，2.7mmol，产率95％)，为白色粉末。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.24-9.39(m，1H)7.33-7.42(m，1H)7.25-7.33(m，1H)6.99-7.10(m，2H)3.92(d，J＝10.07Hz，1H)3.66(d，J＝10.07Hz，1H)3.57(s，3H)2.97-3.08(m，2H)2.78(t，J＝7.81Hz，2H)2.67(t，J＝7.81Hz，2H)2.01-2.09(m，1H)1.80-1.96(m，1H)1.40-1.66(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.49；[M+H]+＝312.2。
使用Chiralcel OJ-H(30x250mm，5μm)柱分离对映异构体，流动相组成为22％甲醇(0.1％DEA)/CO2以及在300nm监测UV。对分离的峰产物进行真空浓缩，得到白色粉末。从柱分离的第一峰产物产率为0.065g，0.205mmol，39.8％。(10a，R-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 9.31(br.s.，1H)7.35-7.45(m，1H)7.26-7.34(m，1H)7.00-7.15(m，2H)3.93(d，J＝10.10Hz，1H)3.67(d，J＝10.10Hz，1H)3.59(s，3H)2.93-3.13(m，2H)2.74-2.89(m，2H)2.61-2.74(m，2H)2.05(br.s.，1H)1.91(br.s.，1H)1.38-1.68(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.37；[M+H]+＝312.2。旋光性＝-16.02°。从柱分离的第二峰产物产率为0.06g，0.19mmol，36.8％。(10b；S-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 9.31(br.s.，1H)7.33-7.43(m，1H)7.25-7.33(m，1H)6.93-7.11(m，2H)3.93(dd，J＝9.92，3.20Hz，1H)3.67(dd，J＝9.92，3.20Hz，1H)3.58(s，3H)2.94-3.13(m，2H)2.74-2.85(m，2H)2.59-2.72(m，2H)2.04(br.s.，1H)1.90(br.s.，1H)1.37-1.70(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.37；[M+H]+＝312.2。旋光性＝+35.99°。
实施例11
N-(6-乙氧基苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：N-(6-乙氧基苯[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺
Figure BDA00001827380500752
在小瓶中放置在乙腈(15mL)中的6-乙氧基苯并[d]噻唑-2-胺(1.5g，7.72mmol)和二(1H-咪唑-1-基)甲硫酮(1.789g，10.04mmol)(。将反应混合物在80℃加热过夜。对反应混合物进行过滤，收集沉淀，得到2.4克(7.88mmol，102％)锈色固体。
步骤B：(3-((3-(6-乙氧基苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500761
在小瓶中放置在N，N-二甲基甲酰胺(8mL)中的N-(6-乙氧基苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(2.4g，7.88mmol)和(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(1.341g，7.88mmol)(。将反应混合物加热至80℃。2小时后，将反应混合物倾倒至水和氯仿中，萃取有机层，并且浓缩成红色油状物。将物质用于下一步骤中，而没有进一步纯化或表征。
步骤C：(2-(6-乙氧基苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺-[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500762
在烧瓶中放置在N，N-二甲基甲酰胺(10mL)中的(3-((3-(6-乙氧基苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)-甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(3.2g，7.9mmol)和N，N′-二异丙基碳二亚胺(4.3mL，27.6mmol)(。将反应混合物加热至70℃，保持2小时，然后倾倒至水和氯仿中。收集有机层，并且浓缩成残余物。将该残余物用乙醚研磨，通过真空过滤收集沉淀，得到1.11克(2.98mmol，37.8％)灰色粉末。
步骤D：N-(6-乙氧基苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
在小瓶中放置在丙酮(10mL)中的(2-(6-乙氧基苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(500mg，1.34mmol)和HCl(8.06mL，24.17mmol)。反应由HPLC监测。2小时后，反应由LC/MS监测完成。将反应混合物倾倒至水和氯仿中，将有机层闲置。中和水层，用氯仿萃取(2x)。将第二氯仿级份浓缩成白色残余物。将固体在乙醚中研磨，收集沉淀，得到314.4mg(0.877mmol，65.3％)期望的物质。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.89(1H，br.s.)，7.50(1H，d，J＝8.81Hz)，7.38(1H，d，J＝2.52Hz)，6.91(1H，dd，J＝8.81，2.52Hz)，4.03(2H，q，J＝7.05Hz)，3.87(1H，d，J＝10.07Hz)，3.62(1H，d，J＝10.07Hz)，3.02(2H，s)，2.78(2H，t，J＝7.81Hz)，2.66(2H，t，J＝7.68Hz)，2.05(1H，br.s.)，1.91(1H，br.s.)，1.42-1.67(3H，m)，1.33(3H，t，J＝7.05Hz)。MS(LC/MS)R.T.＝1.60；[M+H]+＝359.0。
使用Chiralpak AS-H(30x250mm，5μ)柱分离对映异构体，流动相组成为30％甲醇(0.1％DEA)/CO2以及在300nm监测UV。对分离的峰产物进行真空浓缩，得到白色粉末。从柱分离的第一峰产物产率为62.4mg，0.17mmol，31.2％。(11a；S-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.87(1H，br.s.)，7.49(1H，d，J＝8.55Hz)，7.38(1H，d，J＝2.44Hz)，6.91(1H，dd，J＝8.85，2.44Hz)，4.03(2H，q，J＝7.02Hz)，3.87(1H，d，J＝10.07Hz)，3.61(1H，d，J＝10.07Hz)，3.02(2H，s)，2.72-2.85(2H，m)，2.66(2H，t，J＝7.63Hz)，2.05(1H，br.s.)，1.91(1H，br.s.)，1.43-1.64(3H，m)，1.33(3H，t，J＝7.02Hz)。MS(LC/MS)R.T.＝1.81；[M+H]+＝359.1。从柱分离的第二峰产物产率为58.9mg，0.164mmol，29.5％。(11b；R-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.86(1H，br.s.)，7.48(1H，d，J＝8.85Hz)，7.37(1H，d，J＝2.44Hz)，6.91(1H，d，J＝2.75Hz)，4.02(2H，q，J＝7.02Hz)，3.86(1H，d，J＝9.77Hz)，3.61(1H，d，J＝9.77Hz)，3.01(2H，s)，2.72-2.85(2H，m)，2.62-2.69(2H，m)，2.04(1H，d，J＝2.44Hz)，1.90(1H，d，J＝4.27Hz)，1.42-1.63(3H，m)，1.29-1.35(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.52；[M+H]+＝359.1。
实施例12
N-(6-甲基苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500771
步骤A：N-(6-甲基苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺
Figure BDA00001827380500781
向在乙腈(30mL)中的6-甲基苯并[d]噻唑-2-胺(1.g，6.2mmol)(加入1，1′-硫羰基二咪唑(1.44g，8.1mmol)。将反应混合物在50℃搅拌18小时。将反应混合物冷却至室温，以及过滤出沉淀物并且用乙腈洗涤(2x50mL)。将黄色粉末在真空炉(40℃)中干燥1小时，得到N-(6-甲基苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(1.06g，3.86mmol，产率62％)，然后用于下一步骤中，而没有进一步纯化或表征。
步骤B：(3-羟基-3-((3-(6-甲基苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的N-(6-甲基苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(0.96g，3.5mmol)(加入(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.595g，3.5mmol)。将反应混合物在70℃搅拌4小时。将反应混合物浓缩，经硅胶色谱纯化(40-100％乙酸乙酯/己烷)。对产物级份进行真空浓缩，得到(3-羟基-3-((3-(6-甲基苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.88g，2.338mmol，产率66.8％)，为白色粉末。MS(LC/MS)R.T.＝3.71；[M+H]+＝375.2。
步骤C：(2-(6-甲基苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500783
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(3-羟基-3-((3-(6-甲基苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.86g，2.285mmol)(加入N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.288g，2.285mmol)。将反应混合物在70℃搅拌4小时。将反应混合物浓缩，并且加入乙酸乙酯。过滤出沉淀，用额外的乙酸乙酯洗涤。将粉末在真空炉(70℃)中干燥，得到(2-(6-甲基苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.65g，1.899mmol，产率83％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 9.03(1H，br.s.)，7.59(1H，s)，7.51(1H，d，J＝8.24Hz)，7.15(1H，d，J＝8.24Hz)，3.86(1H，d，J＝10.38Hz)，3.74(1H，d，J＝10.38Hz)，3.29(1H，dd，J＝15.26，1.83Hz)，3.14(1H，d，J＝15.26Hz)，2.99-3.09(1H，m)，2.80-2.95(3H，m)，2.36(3H，s)，2.25(1H，br.s.)，2.03(1H，t，J＝10.22Hz)，1.70-1.85(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝2.78；[M+H]+＝343.2。
步骤D：N-(6-甲基苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500791
向在丙酮(9mL)中的(2-(6-甲基苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.24g，0.70mmol)加入3MHCl(1.753mL，5.26mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时。加入乙酸乙酯，收集水层，然后用1N氢氧化钠中和。产物用乙酸乙酯萃取(2x40mL)。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤并真空浓缩，得到N-(6-甲基苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.19g，0.58mmol，产率83％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.96(1H，br.s.)，7.57(1H，s)，7.49(1H，d，J＝8.24Hz)，7.13(1H，d，J＝8.24Hz)，3.88(1H，d，J＝10.07Hz)，3.63(1H，d，J＝9.77Hz)，2.98-3.04(2H，m)，2.72-2.85(2H，m)，2.66(2H，t，J＝7.63Hz)，2.36(3H，s)，2.05(1H，d，J＝2.14Hz)，1.91(1H，br.s.)，1.53-1.64(2H，m)，1.42-1.53(1H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.79；[M+H]+＝329.2。
使用Chiralcel OJ-H(4.6x25cm，5μm)柱分离对映异构体，流动相为30％甲醇(0.1％DEA)/CO2以及在300nm监测UV。对分离的峰产物进行真空浓缩，得到白色粉末。从柱分离的第一峰产物产率为0.11g，0.34mmol，55％。(12a；R-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.95(s，1H)，7.57(s，2H)，7.48(d，J＝8.24Hz，2H)，7.13(d，J＝8.24Hz，2H)，3.89(d，J＝10.38Hz，2H)，3.63(d，J＝10.38Hz，2H)，2.99-3.06(m，4H)，2.75-2.84(m，4H)，2.67(t，J＝7.63Hz，4H)，2.37(s，7H)，2.06(s，2H)，1.92(s，2H)，1.55-1.64(m，4H)，1.49(dd，J＝9.77，2.44Hz，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.80；[M+H]+＝329.2。旋光性＝-4.52。从柱分离的第二峰产物产率为0.11g，0.34mmol，55％。(12b；S-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.96(s，1H)，7.58(s，1H)，7.49(d，J＝8.24Hz，1H)，7.14(d，J＝8.24Hz，1H)，3.89(d，J＝10.07Hz，1H)，3.63(d，J＝10.07Hz，1H)，3.03(d，J＝2.44Hz，2H)，2.75-2.84(m，2H)，2.67(t，J＝7.78Hz，2H)，2.37(s，3H)，2.06(s，1H)，1.92(s，1H)，1.55-1.64(m，2H)，1.49(dd，J＝9.77，2.75Hz，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.80；[M+H]+＝329.2。旋光性＝+10.08。
实施例13
2-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)苯并[d]噻唑-6-醇
Figure BDA00001827380500801
步骤A：N-(6-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺
Figure BDA00001827380500802
向在乙腈(30mL)中的6-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)苯并[d]噻唑-2-胺(如WO 2007/086800第102页所述制备)(3.1g，11.05mmol)(加入硫羰基二咪唑(2.56g，14.37mmol)。将混合物加热至70℃，保持过夜。将反应混合物冷却至室温，以及过滤出沉淀物并且用乙腈洗涤，得到黄色固体。产物N-(6-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(3.85g，9.86mmol，产率89％)直接用于下一步骤，而没有进一步纯化。MS(LC/MS)R.T.＝2.56；[M+H]+＝388.9。
步骤B：(3-((3-(6-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼
向在N，N-二甲基甲酰胺(40mL)中的N-(6-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(3.85g，9.86mmol)(加入(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(1.68g，9.86mmol)。将反应混合物在80℃加热2小时。将反应混合物冷却，然后倾倒至氯仿和水的混合物中。收集有机层，并且真空浓缩，得到(3-((3-(6-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(6.2g)，为黄色油状物。
步骤C：(2-(6-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500811
向在N，N-二甲基甲酰胺(10mL)中的(3-((3-(6-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(4.9g，9.9mmol)(加入1，3-二异丙基碳二亚胺(5.4mL，34.5mmol)。将混合物加热至80℃，并且由LC/MS监测。将反应混合物冷却，然后倾倒至氯仿和水的混合物中。收集有机层，并且真空浓缩。将残余物在乙醚中研磨。收集沉淀，得到(2-(6-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(3.28g，7.15mmol，产率72.6％)。MS(LC/MS)R.T.＝3.60；[M+H-BH3]+＝445.2。
步骤D：2-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)苯并[d]噻唑-6-醇
向在丙酮(10mL)中的(2-(6-(叔丁基二甲基甲硅烷基氧基)苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(3.2g，6.98mmol)加入HCl(8.14mL，24.43mmol)。将反应混合物在室温搅拌3小时。将混合物倾倒至水中，用饱和碳酸氢钠中和。然后水层用氯仿萃取。收集有机层，真空浓缩。将残余物在乙醚中研磨，得到外消旋的2-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)苯并[d]噻唑-6-醇(958mg，2.90mmol，产率41.5％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 9.36(1H，br.s.)，8.85(1H，br.s.)，7.41(1H，d，J＝8.85Hz)，7.12(1H，d，J＝2.44Hz)，6.78(1H，dd，J＝8.85，2.44Hz)，3.86(1H，d，J＝10.07Hz)，3.61(1H，d，J＝10.07Hz)，2.96-3.06(2H，m)，2.71-2.85(2H，m)，2.66(2H，t，J＝7.78Hz)，2.04(1H，br.s.)，1.90(1H，br.s.)，1.43-1.64(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.03；[M+H]+＝331.29。
使用Chiralpak AD-H(30x250mm，5μm)柱分离对映异构体，流动相组成为30％甲醇(0.1％DEA)/CO2。波长设定为300nM。对分离的峰产物进行真空浓缩，得到白色粉末。从柱分离的第一峰产物为(S)-2-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)苯并[d]噻唑-6-醇(395.2mg，1.19mmol，产率41.4％)。(13a，S-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 9.36(1H，br.s.)，8.84(1H，br.s.)，7.41(1H，d，J＝8.55Hz)，7.12(1H，d，J＝2.44Hz)，6.78(1H，dd，J＝8.55，2.44Hz)，3.86(1H，d，J＝9.77Hz)，3.61(1H，d，J＝10.07Hz)，2.96-3.05(2H，m)，2.72-2.84(2H，m)，2.65(2H，t，J＝7.63Hz)，2.04(1H，br.s.)，1.90(1H，br.s.)，1.52-1.64(2H，m)，1.43-1.52(1H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.30；[M+H]+＝331.4。第二峰产物为(R)-2-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)苯并[d]噻唑-6-醇(375mg，1.14mmol，产率39.3％)。(13b，R-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 7.40(1H，d，J＝8.55Hz)，7.11(1H，d，J＝2.44Hz)，6.77(1H，dd，J＝8.55，2.44Hz)，3.86(1H，d，J＝10.07Hz)，3.60(1H，d，J＝10.07Hz)，3.01(2H，s)，2.73-2.84(2H，m)，2.65(2H，t，J＝7.78Hz)，2.04(1H，br.s.)，1.90(1H，br.s.)，1.54-1.62(2H，m)，1.43-1.52(1H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.43；[M+H]+＝331.4。
实施例14
N-(4，5，6，7-四氢苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：N-(4，5，6，7-四氢苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺
向在乙腈(20mL)中的4，5，6，7-四氢苯并[d]噻唑-2-胺(0.5g，3.24mmol)(加入二(1H-咪唑-1-基)甲硫酮(0.58g，3.24mmol)。将反应混合物在50℃搅拌4小时。将反应混合物冷却，然后浓缩，得到粗产物。粗物质经快速色谱纯化(50-100％乙酸乙酯-己烷)，得到N-(4，5，6，7-四氢苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(0.60g，2.27mmol，产率70.0％)，为白色粉末。
步骤B：(3-羟基-3-((3-(4，5，6，7-四氢苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500831
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的N-(4，5，6，7-四氢苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(0.54g，2mmol)(加入(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.35g，2mmol)。将反应混合物在50℃搅拌3小时。将反应混合物冷却，然后浓缩，得到粗产物。粗物质经快速色谱纯化(50-100％乙酸乙酯-己烷)，得到第一斑点/级份(TLC)，为产物。合并级份并浓缩，得到(3-羟基-3-((3-(4，5，6，7-四氢苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.51g，1.39mmol，产率68.2％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 11.46(s，1H)，5.26(s，1H)，3.89(dd，J＝13.58，5.34Hz，1H)，3.68(dd，J＝13.73，4.88Hz，1H)，2.55-2.94(m，8H)，2.06(dd，J＝9.31，3.20Hz，1H)，1.66-1.90(m，6H)，1.21-1.59(m，4H)；[M+H]+＝365.1。
步骤C：(2-(4，5，6，7-四氢苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500832
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(3-羟基-3-((3-(4，5，6，7-四氢苯并[d]噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.5g，1.37mmol)(加入N，N-二异丙基碳二亚胺(0.74mL，4.78mmol)。将反应混合物在70℃搅拌4小时。将反应混合物浓缩，得到粗制的残余物。粗物质经快速色谱纯化(50-100％乙酸乙酯-己烷)，得到第二斑点/级份(TLC)，为产物。合并级份并浓缩，得到(2-(4，5，6，7-四氢苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.38g，1.14mmol，产率84％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.26-8.86(m，1H)，3.78(d，J＝9.46Hz，1H)，3.66(d，J＝9.77Hz，1H)，3.19-3.30(m，J＝14.95，2.14Hz，1H)，2.96-3.12(m，2H)，2.78-2.94(m，3H)，2.54-2.65(m，4H)，2.19(s，1H)，2.00(s，1H)，1.66-1.85(m，7H)，1.43(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.50；[M+H-BH3]+＝319.1。
步骤D：N-(4，5，6，7-四氢苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500841
向在丙酮(9mL)中的(2-(4，5，6，7-四氢苯并[d]噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.36g，1.08mmol)加入3MHCl(0.36mL，1.08mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时。反应由TLC监测(较低的点)完成。加入乙酸乙酯，然后分离水层。水层用1N氢氧化钠中和。产物用乙酸乙酯萃取(2x40mL)。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后真空浓缩，得到外消旋的N-(4，5，6，7-四氢苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.28g，0.84mmol，产率78％)，为白色粉末。1HNMHR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.30-8.75(br.s，1H)，3.79(d，J＝9.44Hz，1H)，3.55(d，J＝9.76Hz，1H)，2.90-3.03(m，2H)，2.54-2.84(m，8H)，2.00(s，1H)，1.81-1.93(m，1H)，1.75(d，J＝2.44Hz，4H)，1.36-1.67(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.39；[M+H]+＝319.1。
使用Chiralpak AD-H(30x250mm，5μm)柱分离对映异构体，流动相组成为23％甲醇(0.1％DEA)/CO2。波长设定为300nM。对分离的峰产物进行真空浓缩，得到白色粉末。从柱分离的第一峰产物为(S)-N-(4，5，6，7-四氢苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.1g，0.29mmol，产率36.8％)。(14a，S-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.29-8.89(br.s，1H)，3.80(d，J＝9.46Hz，1H)，3.54(d，J＝9.77Hz，1H)，2.94-3.04(m，2H)，2.55-2.85(m，8H)，2.00(s，1H)，1.85-1.94(m，1H)，1.70-1.81(m，J＝2.43Hz，4H)，1.39-1.65(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.54；[M+H]+＝319.1。第二峰产物为(R)-N-(4，5，6，7-四氢苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.11g，0.30mmol，产率38.2％)。(14b，R-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.24-8.96(br.s，1H)，3.79(d，J＝9.46Hz，1H)，3.52(d，J＝9.76Hz，1H)，2.95-3.08(m，2H)，2.55-2.80(m，8H)，2.00(s，1H)，1.85-1.90(m，1H)，1.70-1.79(m，J＝2.42Hz，4H)，1.39-1.63(m，3H)；[M+H]+＝319.1。
实施例15
N-(4-异丙基噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500851
步骤A：N-(4-异丙基噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺
Figure BDA00001827380500852
向在乙腈(30mL)中的4-异丙基噻唑-2-胺(1.04g，7.31mmol)(加入1，1-硫羰基二咪唑(1.7g，9.5mmol)。将反应混合物在50℃搅拌18小时。将反应混合物冷却至室温，以及过滤出沉淀物并且用乙腈洗涤(2x50mL)。将黄色粉末在真空炉(40℃)中干燥2小时。产物N-(4-异丙基噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(1.02g，4.04mmol，产率55.3％)直接用于下一步骤，而没有进一步纯化。
步骤B：(3-羟基-3-((3-(4-异丙基噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500853
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的N-(4-异丙基噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(0.57g，2.26mmol)(加入(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.38g，2.26mmol)。将反应混合物在70℃搅拌24小时。将反应混合物冷却，然后浓缩，得到粗产物。粗物质经快速色谱纯化(50-100％乙酸乙酯-己烷)，得到(3-羟基-3-((3-(4-异丙基噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.56g，1.58mmol，产率70.0％)，为白色粉末。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 11.62(s，1H)，6.70(s，1H)，5.31(s，1H)，3.58-3.96(m，2H)，2.63-3.11(m，7H)，2.00-2.22(m，1H)，1.65-1.97(m，3H)，1.16-1.61(m，10H)。MS(LC/MS)R.T.＝3.43；[M+H]+＝353.2。
步骤C：(2-(4-异丙基噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500861
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(3-羟基-3-((3-(4-异丙基噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.54g，1.52mmol)(加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(0.83mL，5.33mmol)。将反应混合物在50℃搅拌24小时。将反应混合物浓缩，得到粗制的残余物。粗物质经快速色谱纯化(50-100％乙酸乙酯-己烷)，得到第二斑点/级份(TLC)，为产物。合并级份并浓缩，得到(2-(4-异丙基噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.39g，1.22mmol，产率80％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 6.55(s，1H)，3.75(m，2H)，3.20-3.31(m，1H)，2.96-3.15(m，2H)，2.77-2.97(m，4H)，2.22(s，1H)，2.01(s，1H)，1.68-1.90(m，3H)，1.43(s，3H)，1.21(d，J＝7.02Hz，6H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.36；[M+H-BH3]+＝307.2。
步骤D：N-(4-异丙基噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500862
向在丙酮(9mL)中的(2-(4-异丙基噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.42g，1.31mmol)加入3M HCl(0.44mL，1.31mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时。反应由TLC监测(较低的点)完成。加入乙酸乙酯，然后分离水层。水层用1N氢氧化钠中和。产物用乙酸乙酯萃取(2x40mL)。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后真空浓缩，得到外消旋的N-(4-异丙基噻唑-2-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.34g，1.05mmol，产率80％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.20-8.91(m，1H)，6.52(s，1H)，3.83(d，J＝9.46Hz，1H)，3.57(d，J＝9.46Hz，1H)，2.99(s，2H)，2.58-2.92(m，5H)，2.02(s，1H)，1.82-1.96(m，1H)，1.38-1.66(m，3H)，1.20(d，J＝7.02Hz，6H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.27；[M+H]+＝307.1。
使用Chiralcel OJ-H(30x250mm，5μm)柱分离对映异构体，流动相组成为23％甲醇(0.1％DEA)/CO2。波长设定为300nM。对分离的峰产物进行真空浓缩，得到白色粉末。从柱分离的第一峰产物为(S)-N-(4-异丙基噻唑-2-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.01g，0.03mmol，产率2.95％)。(15a，S-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.35-8.95(m，1H)，6.52(s，1H)，3.82(d，J＝9.41Hz，1H)，3.57(d，J＝9.46Hz，1H)，2.99(s，2H)，2.60-2.88(m，5H)，2.02(s，2H)，1.82-1.96(m，1H)，1.38-1.65(m，3H)，1.20(d，J＝6.71Hz，6H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.38；[M+H]+＝307.1。第二峰产物为(R)-N-(4-异丙基噻唑-2-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.02g，0.05mmol，产率4.83％)。(15b，R-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.35-8.91(m，1H)，6.52(s，1H)，3.82(d，J＝9.44Hz，1H)，3.57(d，J＝9.46Hz，1H)，2.99(s，2H)，2.60-2.90(m，5H)，2.02(s，2H)，1.82-1.96(m，1H)，1.38-1.62(m，3H)，1.20(d，J＝6.78Hz，6H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.49；[M+H]+＝307.3。
实施例16
N-(噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500871
步骤A：N-(噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺
Figure BDA00001827380500881
向在乙腈(30mL)和四氢呋喃(5mL)中的噻唑-2-胺(2.12g，21.17mmol)((加入二(1H-咪唑-1-基)甲硫酮(4.90g，27.5mmol)。将反应混合物在60℃搅拌5小时。将反应混合物冷却至室温，以及过滤出沉淀物，用冷乙腈洗涤(2x15mL)，得到橙棕色粉末。将产物N-(噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(3.70g，17.60mmol，产率83％)直接用于下一步骤中，而没有进一步表征。
步骤B：(3-羟基-3-((3-噻唑-2-基硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500882
向在N，N-二甲基甲酰胺(30mL)中的N-(噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(1.7g，8mmol)(加入(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(1.37g，8mmol)。将反应混合物在50℃搅拌4小时。将反应混合物冷却，然后浓缩，得到粗产物。粗物质经快速色谱纯化(50-100％乙酸乙酯-己烷)，得到第一斑点/级份(TLC)，为产物。合并级份并浓缩，得到(3-羟基-3-((3-噻唑-2-基硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(1.5g，4.80mmol，产率59.8％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 11.64(s，1H)，7.42(d，J＝3.36Hz，1H)，7.14(m，1H)，5.32(s，1H)，3.78(dd，2H)，2.59-3.02(m，6H)，1.99-2.18(m，1H)，1.79-1.92(m，2H)，1.64-1.80(m，1H)，1.19-1.65(m，4H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.73；[M+H]+＝311.1。
步骤C：(2-(噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500883
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(3-羟基-3-((3-噻唑-2-基硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(1.2g，3.84mmol)(加入N，N′-二异丙基碳二亚胺(2.09mL，13.45mmol)。将反应混合物在50℃搅拌24小时。将反应混合物浓缩，得到粗制的残余物。粗物质经快速色谱纯化(50-100％乙酸乙酯-己烷)，得到第一斑点/级份(TLC)，为产物。合并级份并浓缩，得到(2-(噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.84g，3.02mmol，产率79％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm8.37-9.14(m，1H)，7.32(d，J＝3.66Hz，1H)，7.04(d，J＝3.66Hz，2H)，3.79(d，J＝10.07Hz，1H)，3.67(d，J＝10.07Hz，1H)，3.20-3.29(m，J＝14.95，2.14Hz，1H)，2.97-3.15(m，2H)，2.78-2.94(m，3H)，2.22(s，1H)，1.95-2.08(m，1H)，1.66-1.85(m，3H)，1.43(s，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.57；[M+H-BH3]+＝265.1。
步骤D：N-(噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500891
向在丙酮(9mL)中的(2-(噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.57g，2.05mmol)加入3M HCl(0.68mL，2.05mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时。反应由TLC监测(较低的点)完成。加入乙酸乙酯，然后分离水层。水层用1N氢氧化钠中和。产物用乙酸乙酯萃取(2x40mL)。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后真空浓缩，得到外消旋的N-(噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.4g，1.44mmol，产率70.2％)，为白色粉末。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.64(s，1H)，7.24(d，J＝3.74Hz，2H)，7.01(d，J＝3.75Hz，2H)，3.78(d，J＝9.80Hz，2H)，3.53(d，J＝9.80Hz，2H)，2.97-3.05(m，4H)，2.74-2.86(m，4H)，2.65(t，J＝7.84Hz，4H)，2.01(s，2H)，1.88(s，2H)，1.53-1.64(m，4H)，1.45-1.56(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.28；[M+H]+＝265.1。
使用Chiralcel OJ-H(30x250mm，5μm)柱分离对映异构体，流动相组成为23％甲醇(0.1％DEA)/CO2。波长设定为300nM。对分离的峰产物进行真空浓缩，得到白色粉末。从柱分离的第一峰产物为(S)-N-(噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.12g，0.43mmol，产率18.80％)。(16a，S-异构体)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.64(s，1H)，7.26(d，J＝3.75Hz，2H)，7.00(d，J＝3.77Hz，2H)，3.78(d，J＝9.81Hz，2H)，3.54(d，J＝9.82Hz，2H)，2.95-3.10(m，4H)，2.75-2.82(m，4H)，2.65(t，J＝7.80Hz，4H)，2.01(s，2H)，1.88(s，2H)，1.53-1.60(m，4H)，1.42-1.51(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.32；[M+H]+＝265.1。第二峰产物为(R)-N-(噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.15g，0.52mmol，产率22.96％)。(16b，R-异构体)：1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.64(s，1H)，7.25(d，J＝3.74Hz，2H)，7.00(d，J＝3.76Hz，2H)，3.78(d，J＝9.80Hz，2H)，3.53(d，J＝9.80Hz，2H)，2.95-3.08(m，4H)，2.75-2.84(m，4H)，2.65(t，J＝7.80Hz，4H)，2.01(s，2H)，1.88(s，2H)，1.54-1.62(m，4H)，1.43-1.53(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.28；[M+H]+＝265.3。
实施例17
N-(4-(4-甲氧基苯基)-5-甲基噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500901
步骤A：N-(4-(4-甲氧基苯基)-5-甲基噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺
Figure BDA00001827380500902
向在乙腈(25mL)中的4-(4-甲氧基苯基)-5-甲基噻唑-2-胺(0.98g，4.45mmol)(加入二(1H-咪唑-1-基)甲硫酮(1.03g，5.78mmol)。将反应混合物在50℃搅拌3小时。将反应混合物冷却至室温，然后过滤出沉淀物。粉末用乙腈洗涤(2x10mL)，干燥，得到外消旋的N-(4-(4-甲氧基苯基)-5-甲基噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(1.28g，3.87mmol，产率87％)，为黄色粉末。产物直接用于下一步骤中。
步骤B：(2-(4-(4-甲氧基苯基)-5-甲基噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500911
向N-(4-(4-甲氧基苯基)-5-甲基噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(0.44g，1.39mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(25mL)中的溶液中，加入(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.24g，1.39mmol)。将反应混合物在70℃搅拌2小时。加入N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.65mL，4.16mmol)，将反应混合物加热至75℃，保持2小时。将反应混合物冷却，然后浓缩，得到粗产物。粗物质经柱色谱纯化(60-100％乙酸乙酯/己烷)，得到(2-(4-(4-甲氧基苯基)-5-甲基噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.41g，1.029mmol，产率74.2％)，为黄色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 7.59(d，J＝7.63Hz，2H)，6.98(d，J＝8.55Hz，2H)，3.80(s，4H)，3.67(s，1H)，3.24-3.31(m，1H)，3.13(s，1H)，3.03(s，1H)，2.83-2.92(m，3H)，2.39(s，3H)，2.23(s，1H)，2.07(s，1H)，1.73-1.82(m，2H)，1.44(s，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.88；[M+H]+＝399.34。
步骤C：N-(4-(4-甲氧基苯基)-5-甲基噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500912
向在丙酮(9mL)中的(3-羟基-3-((3-(4-(4-甲氧基苯基)-5-甲基噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.08g，0.19mmol)加入2MHCl(0.09mL，0.19mmol)。将反应混合物在室温搅拌1小时。反应由TLC监测(较低的点)完成。加入乙酸乙酯，收集水层，然后用1N氢氧化钠中和。产物用乙酸乙酯萃取(2x40mL)。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后真空浓缩，得到外消旋的N-(4-(4-甲氧基苯基)-5-甲基噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.05g，0.12mmol，产率66.8％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 7.58(d，J＝8.24Hz，2H)，6.98(d，J＝8.55Hz，2H)，3.83(d，J＝9.16Hz，1H)，3.80(s，3H)，3.56(d，J＝9.46Hz，1H)，3.00(s，2H)，2.74-2.83(m，2H)，2.66(t，J＝7.63Hz，2H)，2.38(s，3H)，2.03(s，1H)，1.91(s，1H)，1.54-1.62(m，2H)，1.48(d，J＝7.02Hz，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.04；[M+H]+＝385.28。
实施例18
(E)-N-(1′-氮杂螺[噁唑烷-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-亚基)吡啶-3-胺
Figure BDA00001827380500921
步骤A：(3-羟基-3-((3-吡啶-3-基硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼
向(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(247mg，1.45mmol)于四氢呋喃(3mL)中的搅拌着的悬浮液中，加入3-异硫氰基吡啶(298mg，2.19mmol)于四氢呋喃(1.5mL)中的溶液，并且将反应混合物在室温搅拌过夜。对反应混合物进行真空蒸发，残余物(白色蜡状固体)经柱色谱纯化(3％甲醇/乙酸乙酯)，得到(3-羟基-3-((3-吡啶-3-基硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(294.6mg，0.96mmol，产率66.2％)，为白色泡沫状物。1H NMR(500MHz，MeOD-d4)δppm 8.56-8.70(m，1H)，8.24-8.36(m，1H)，8.08-8.16(m，1H)，7.32-7.48(m，1H)，4.02-4.18(m，1H)，3.67-3.77(m，1H)，3.53-3.62(m，1H)，2.88-3.11(m，3H)，2.70-2.88(m，1H)，2.15-2.29(m，1H)，1.92-2.12(m，2H)，1.73-1.89(m，1H)，1.54-1.69(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.00；[MH+-BH3]＝293.10。
步骤B：(E)-(2-(吡啶-3-基亚氨基)-1′-氮鎓杂螺[噁唑烷-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500931
向(3-羟基-3-((3-吡啶-3-基硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(294.6mg，0.96mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中，加入N，N′-甲二叉基二丙-2-胺(121mg，0.96mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(1mL)中的溶液，然后使反应混合物在室温静置7天。再加入133mg N，N′-甲二叉基二丙-2-胺于0.5mLN，N-二甲基甲酰胺中的溶液，使反应再继续进行7天。反应混合物经柱色谱纯化(5-10％甲醇/乙酸乙酯)，得到(E)-(2-(吡啶-3-基亚氨基)-1′-氮鎓杂螺[噁唑烷-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(134.3mg，0.49mmol，产率51.3％)。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 8.34-8.60(m，1H)，8.16(d，J＝4.27Hz，1H)，7.59-7.96(m，1H)，7.35(dd，J＝8.24，4.88Hz，1H)，3.89(br.s.，1H)，3.65(d，J＝9.46Hz，1H)，3.16-3.23(m，1H)，3.04-3.16(m，1H)，2.85-3.04(m，2H)，2.23(br.s.，1H)，1.74-1.97(m，4H)，1.36-1.70(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.65；[M+H-BH3]+＝259.21。
步骤C：(E)-N-(1′-氮杂螺[噁唑烷-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-亚基)吡啶-3-胺
Figure BDA00001827380500932
向(E)-(2-(吡啶-3-基亚氨基)-1′-氮鎓杂螺[噁唑烷-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(127mg，0.47mmol)于丙酮(5mL)中的悬浮液中，加入3M盐酸(2mL，6.00mmol)，使混合物在室温静置2小时。然后将其加至含有水和氯仿的分液漏斗中。分离各层，用碳酸钠溶液使水层呈碱性，再次用氯仿萃取混合物。最后，水层用乙酸乙酯洗涤。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后真空浓缩。残余物经柱色谱纯化(1％氢氧化铵/9％甲醇/90％二氯甲烷)，得到外消旋的(E)-N-(1′-氮杂螺[噁唑烷-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-亚基)吡啶-3-胺(19mg，0.074mmol，产率15.8％)，为白色固体。1H NMR(500MHz，MeOD-d4)δppm 8.39(br.s.，1H)，8.14(d，J＝4.27Hz，1H)，7.72(br.s.，1H)，7.34(dd，J＝8.24，4.88Hz，1H)，3.89(d，J＝9.77Hz，1H)，3.57(d，J＝10.38Hz，1H)，3.14-3.27(m，1H)，3.00-3.13(m，1H)，2.70-3.00(m，4H)，1.97-2.22(m，2H)，1.54-1.84(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.26；[M+H]+＝259.16。
实施例19
N-(吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：2-溴-6-异硫氰基吡啶
Figure BDA00001827380500942
合并6-溴吡啶-2-胺(253mg，1.46mmol)、氯仿(2mL)、碳酸氢钠(850mg，10.12mmol)和水(3mL)的混合物，并向其添加硫光气(190mg，1.65mmol)于氯仿(1mL)中的溶液。将反应混合物在室温搅拌4小时。将反应混合物转移至分液漏斗中，并且在乙酸乙酯和水之间分配。有机层用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤，并且蒸发溶剂，得到黄色固体。该固体经柱色谱纯化(5％乙酸乙酯/己烷)，得到2-溴-6-异硫氰基吡啶(281mg，1.31mmol，产率89％)，为白色固体。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 7.50-7.62(m，1H)，7.34-7.43(m，1H)，6.91-7.11(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.92；[M+H]+＝216.86。
步骤B：N-(6-溴吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
向2-溴-6-异硫氰基吡啶(281mg，1.31mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(8mL)和许尼希碱(0.6mL，3.44mmol)中的溶液中，加入(+/-)3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(300mg，1.31mmol)，并且将所生成的混合物加热至75℃，保持2.5小时。MS(LC/MS)R.T.＝1.04；[M+H]+＝373.01。向该反应混合物中加入二异丙基-碳二亚胺(523mg，4.14mmol)，并且在75℃继续加热2.25小时。将混合物冷却至室温过周末。对反应混合物进行真空浓缩。该物质经柱色谱纯化，然后经制备性HPLC纯化，得到N-(6-溴吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(291.5mg，0.86mmol，产率66.2％)，为黄色固体(含有杂质2-氨基-6-溴吡啶)。MS(LC/MS)R.T.＝0.65；[M+H]+＝337.0。
步骤C：N-(吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
在Parr装置中，将N-(6-溴吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(291mg，0.86mmol)在甲醇(20mL)中于10％钯/碳(23mg)上氢化2小时。过滤除去催化剂，对滤液进行真空浓缩。残余物经柱色谱纯化(0.7％氢氧化铵/6.3％甲醇/93％氯仿)，得到外消旋的N-(吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(41.3mg，0.16mmol，产率18.6％)。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 8.13-8.33(m，1H)，7.57-7.72(m，1H)，6.83-7.04(m，2H)，3.97(d，J＝10.07Hz，1H)，3.66(d，J＝10.07Hz，1H)，3.18-3.27(m，1H)，3.03-3.14(m，1H)，2.94(t，J＝7.63Hz，2H)，2.70-2.90(m，2H)，2.06-2.24(m，2H)，1.57-1.87(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.76；[M+H]+＝259.25。
实施例20
N-(4-(4-甲氧基苯基)噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500952
步骤A：N-(5-(4-甲氧基苯基)噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺
Figure BDA00001827380500953
向在乙腈(30mL)和四氢呋喃(5mL)中的5-(4-甲氧基苯基)噻唑-2-胺(1.07g，5.19mmol)((加入二(1H-咪唑-1-基)甲硫酮(1.20g，6.74mmol)。将反应混合物在60℃搅拌18小时。将反应混合物冷却至室温，然后过滤出沉淀物。粉末用冷乙腈洗涤(2x15mL)，然后干燥，得到N-(5-(4-甲氧基苯基)噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(0.59g，1.86mmol，产率35.9％)，为橙棕色粉末。该产物直接用于下一步骤而没有任何进一步表征。
步骤B：(3-羟基-3-((3-(4-(4-甲氧基苯基)噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500961
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的N-(4-(4-甲氧基苯基)噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(0.57g，1.82mmol)(加入(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.31g，1.82mmol)。将反应混合物在60℃搅拌4小时。将反应混合物冷却，然后浓缩，得到粗产物。粗物质经快速色谱纯化(60-100％乙酸乙酯-己烷)，得到第一斑点/级份(TLC)，为产物。合并级份，然后真空浓缩，得到(3-羟基-3-((3-(4-(4-甲氧基苯基)噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.6g，1.43mmol，产率79％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 11.74(s，1H)，7.91(d，J＝8.55Hz，2H)，7.43(s，1H)，6.97(d，J＝8.85Hz，2H)，5.50(s，1H)，3.62-3.98(m，5H)，2.70-3.10(m，6H)，2.13(s，1H)，1.94(s，1H)，1.66-1.91(m，2H)，1.11-1.62(m，4H)。MS(LC/MS)R.T.＝3.54；[M+H]+＝417.1。
步骤C：(2-(4-(4-甲氧基苯基)噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼
Figure BDA00001827380500962
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(3-羟基-3-((3-(4-(4-甲氧基苯基)噻唑-2-基)硫脲基)甲基)-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(0.59g，1.41mmol)(加入N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.66mL，4.23mmol)。将反应混合物在70℃搅拌24小时。真空除去溶剂，残余物经快速色谱纯化(50-100％乙酸乙酯-己烷)，收集第一组分为产物，得到(2-(4-(4-甲氧基苯基)噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.45g，1.17mmol，产率83％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.65(s，1H)，7.89(d，J＝7.32Hz，2H)，7.15-7.43(m，1H)，6.95(d，J＝8.85Hz，2H)，3.64-3.93(m，5H)，3.23-3.31(m，J＝1.53Hz，1H)，3.09-3.21(m，1H)，2.99-3.09(m，1H)，2.79-2.97(m，3H)，2.25(s，1H)，1.96-2.16(m，1H)，1.68-1.91(m，3H)，1.45(s，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.80；[M+H-BH3]+＝371.1。
步骤D：N-(4-(4-甲氧基苯基)噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380500971
向在丙酮(9mL)中的(2-(4-(4-甲氧基苯基)噻唑-2-基氨基)-4H-1′-氮鎓杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-1′-基)三氢化硼(0.41g，1.07mmol)加入3MHCl(0.36mL，1.07mmol)。将反应混合物在室温搅拌4小时。反应由TLC监测(较低的点)完成。加入乙酸乙酯，然后分离水层。水层用1N氢氧化钠中和。产物用乙酸乙酯萃取(2x40mL)。合并有机相，用硫酸镁干燥，过滤，然后真空浓缩，得到外消旋的N-(4-(4-甲氧基苯基)噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.3g，0.77mmol，产率72.1％)，为白色粉末。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.56(s，1H)，7.77-8.00(m，J＝8.55Hz，2H)，7.27(s，1H)，6.80-7.08(m，2H)，3.87(d，J＝9.77Hz，1H)，3.79(s，3H)，3.61(d，J＝9.77Hz，1H)，3.02(s，3H)，2.60-2.92(m，4H)，2.06(s，2H)，1.82-2.00(m，1H)，1.39-1.70(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.95；[M+H]+＝371.2。
使用Chiralpak AD-H(30x250mm，5μm)柱分离对映异构体，流动相组成为30％甲醇(0.1％DEA)/CO2。波长设定为220nM。分离的峰产物真空浓缩，得到白色粉末。从柱分离的第一峰产物为(S)-N-(4-(4-甲氧基苯基)噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.035g，0.09mmol，产率22.87％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.56(1H，br.s.)，7.86(2H，d，J＝8.55Hz)，7.25(1H，s)，6.93-6.96(2H，m)，3.86(1H，d，J＝9.77Hz)，3.78(3H，s)，3.60(1H，d，J＝9.46Hz)，3.01(2H，s)，2.72-2.84(2H，m)，2.62-2.71(2H，m)，2.05(1H，br.s.)，1.91(1H，br.s.)，1.55-1.64(2H，m)，1.44-1.52(1H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝2.03；[M+H]+＝371.3。第二峰产物为(R)-N-(4-(4-甲氧基苯基)噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.055g，0.15mmol，产率35.9％)。(21b，R-异构体)：1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.58(1H，br.s.)，7.87(2H，d，J＝8.55Hz)，7.26(1H，s)，6.92-6.97(2H，m)，3.86(1H，d，J＝9.77Hz)，3.78(3H，s)，3.60(1H，d，J＝9.77Hz)，3.01(2H，s)，2.73-2.85(2H，m)，2.63-2.71(2H，m)，2.05(1H，br.s.)，1.91(1H，br.s.)，1.54-1.64(2H，m)，1.43-1.53(1H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝2.03；[M+H]+＝371.3。
实施例21
(R)-N-(2-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)苯并[d]噻唑-6-基)乙酰胺
Figure BDA00001827380500981
步骤A：(3-((苄氧基羰基氨基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼
向在二氯甲烷(150mL)中的(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(10g，47.0mmol)(加入碳酸钠(200mL，200mmol)和氯甲酸苄酯(9.5mL，66.5mmol)。将反应混合物在室温搅拌40分钟。加入二氯甲烷和水，然后分离水层，并再次用二氯甲烷萃取(2x)。合并有机层，用硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。残余物经快速色谱纯化(12-100％乙酸乙酯-己烷)。合并产物级份并且浓缩，得到外消旋的(3-((苄氧基羰基氨基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(3g，9.86mmol，产率20.96％)，为透明油状物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 7.30-7.43(5H，m)，5.27(1H，br.s.)，5.12(2H，s)，3.36(2H，d，J＝6.04Hz)，2.76-3.21(6H，m)，2.21(1H，br.s.)，1.97(1H，br.s.)，1.71-1.86(2H，m)。
使用Chiralpak OJ-H(5x25)柱分离对映异构体，流动相组成为20％乙腈/甲醇(1∶1)/CO2。波长设定为210nM。从柱分离的第一峰产物为(R)-(3-(氨基甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(37.67g，123mmol)，为无色油状物。氯仿中的旋光性：+28.2，c＝2.9。从柱出来的第二峰产物为(S)-(3-((苄氧基羰基氨基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(46.82g，153mmol)，为浅琥珀色油状物。氯仿中的旋光性：-27.4，c＝2.5。
步骤B：(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇·2HCl
Figure BDA00001827380500991
在冰浴中冷却(S)-(3-((苄氧基羰基氨基)甲基)-3-羟基-1-氮鎓杂二环[2.2.2]辛-1-基)三氢化硼(20.5g，67mmol)于丙酮(120mL)中的溶液。历时2分钟，加入3M HCl水溶液(120mL，360mmol)。观察到了剧烈的鼓泡。10分钟后，移除冷冰浴，使混合物温热至室温。20分钟后，用甲醇(800mL)稀释，用氮气吹洗。加入钯/碳(2g，1.88mmol)，将反应混合物用氮气吹洗，并且装配氢气气囊。将反应混合物在室温搅拌过夜。然后用氮气吹洗，使用甲醇过滤经过硅藻土(Celite)垫。蒸发溶剂，得到粗制的黄色固体。将固体溶于水(25mL)中，然后加入乙醇(400mL)。立即形成白色晶体。过滤收集白色晶体，用乙醇洗涤，然后用乙醚洗涤。获得白色结晶固体(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇·2HCl(10.7g，46.7mmol，产率69.3％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm10.93(1H，br.s.)，8.24(3H，br.s.)，6.02(1H，s)，3.26(1H，d，J＝13.43Hz)，2.99-3.22(5H，m)，2.10-2.19(2H，m)，1.81-1.90(1H，m)，1.72-1.81(1H，m)，1.60-1.72(1H，m)。旋光性：[α]20 D＝-50.9(c＝6.4，水)。
步骤C：N-(2-(1H-咪唑-1-硫代甲酰氨基)苯并[d]噻唑-6-基)乙酰胺
向在乙腈(100mL)中的N-(2-氨基苯并[d]噻唑-6-基)乙酰胺(4g，19.3mmol)(加入二(1H-咪唑-1-基)甲硫酮(3.44g，19.30mmol)。将反应混合物在80℃搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，过滤出沉淀物。产物N-(2-(1H-咪唑-1-硫代甲酰氨基)苯并[d]噻唑-6-基)乙酰胺(3.6g，11.34mmol，产率58.8％)直接用于下一步骤，而没有进一步纯化。
步骤D：(R)-N-(2-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)苯并[d]噻唑-6-基)乙酰胺
Figure BDA00001827380501001
向在N，N-二甲基甲酰胺(10mL)中的N-(2-(1H-咪唑-1-硫代甲酰氨基)苯并[d]噻唑-6-基)乙酰胺(300mg，0.95mmol)(加入(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇·2HCl(238mg，1mmol)和三乙胺(0.39mL，2.84mmol)。将混合物加热至80℃，保持3小时。然后将N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.59mL，3.78mmol)加至反应混合物中。将混合物在80℃再加热2小时。冷却反应混合物，然后将氯仿和水加至混合物中。对有机层真空浓缩，得到粗产物。粗物质经快速色谱纯化(2-20％[10％氢氧化铵/甲醇-氯仿)。然后用乙醚研磨产物级份，得到(R)-N-(2-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)苯并[d]噻唑-6-基)乙酰胺(144.5mg，0.39mmol，产率41.2％)，为白色固体。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm 9.98(1H，s)，8.93(1H，br.s.)，8.12(1H，d，J＝1.83Hz)，7.52(1H，d，J＝8.42Hz)，7.38(1H，dd，J＝8.60，2.01Hz)，3.88(1H，d，J＝9.88Hz)，3.62(1H，d，J＝9.88Hz)，3.02(2H，s)，2.74-2.85(2H，m)，2.66(2H，t，J＝7.68Hz)，2.05(4H，s)，1.91(1H，br.s.)，1.41-1.64(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.55；[M+H]+＝372.2。
实施例22
(R)-N-(6-(二氟甲氧基)苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501002
步骤A：6-(二氟甲氧基)苯并[d]噻唑-2-胺
Figure BDA00001827380501003
向在乙酸(90mL)中的4-(二氟甲氧基)苯胺(9.55g，60mmol)加入硫氰酸钾(KSCN)(12.41mL，240mmol)。将混合物搅拌20分钟(KSCN溶于溶液中)。历时20分钟，向该混合物中滴加在乙酸(40mL)中的溴(3.08mL，60.0mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。然后将其倾倒至800ml的冰水和200ml饱和氢氧化铵的混合物中。产物用乙酸乙酯萃取(5x)。合并有机相，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到6-(二氟甲氧基)苯并[d]噻唑-2-胺(12.6g，52.4mmol，产率87％)，为黄色固体。
步骤B：N-(6-(二氟甲氧基)苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺
Figure BDA00001827380501011
向在乙腈(15mL)中的6-(二氟甲氧基)苯并[d]噻唑-2-胺(0.5g，2.3mmol)(加入1，1′-硫羰基二咪唑(0.49g，2.8mmol)。将反应混合物在70℃搅拌过夜。将反应混合物冷却至室温，以及过滤出沉淀物，得到N-(6-(二氟甲氧基)苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(500mg，1.53mmol，产率66.3％)，为黄色固体。
步骤C：(R)-N-(6-(二氟甲氧基)苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501012
向N-(6-(二氟甲氧基)苯并[d]噻唑-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(285mg，0.87mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(5mL)中的溶液中，加入(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇·2HCl(200mg，0.87mmol)和三乙胺(0.4mL，2.87mmol)。将反应混合物加热至70℃，保持2小时。然后将N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.4mL，2.57mmol)加至反应混合物中。将混合物在70℃再加热3小时。然后冷却，倾倒至甲苯/0.3M氢氧化钠中。产物用甲苯(4x)和氯仿(3x)萃取。合并有机相，用水(3x)洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，然后真空浓缩，得到粗产物。粗物质经快速色谱纯化(2-20％[10％氢氧化铵/甲醇]-氯仿)，得到(R)-N-(6-(二氟甲氧基)苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(186.2mg，0.49mmol，产率55.5％)，为白色粉末。M.P.223-5℃。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.99(1H，br.s.)，7.69(1H，d，J＝2.75Hz)，7.61(1H，d，J＝8.55Hz)，7.02-7.34(2H，m)，3.89(1H，d，J＝10.07Hz)，3.64(1H，d，J＝9.77Hz)，3.03(2H，d，J＝2.44Hz)，2.73-2.86(2H，m)，2.62-2.70(2H，m)，2.07(1H，br.s.)，1.92(1H，br.s.)，1.54-1.65(2H，m)，1.44-1.53(1H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.43；[M+H]+＝381.1。
实施例23
(R)-N-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501021
步骤A：4-异硫氰基-6-甲氧基嘧啶
Figure BDA00001827380501022
在室温向1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(1.86g，7.99mmol)于二氯甲烷中的亮橙色溶液中，加入6-甲氧基嘧啶-4-胺(1g，8mmol)。将橙色溶液在室温搅拌18小时。LC/MS显示期望的产物为主要峰之一。浓缩暗橙色溶液，过滤出残余物。滤液经硅胶色谱纯化(10-50％乙酸乙酯/己烷)，得到4-异硫氰基-6-甲氧基嘧啶(0.72g，4.3mmol，产率54％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.49(1H，d，J＝5.79Hz)，6.95(1H，d，J＝5.79Hz)，3.92(3H，s)。MS(LC/MS)R.T.＝3.15；[M+H]+＝168.1。
步骤B：(R)-N-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501023
向在N，N-二甲基甲酰胺(15mL)中的(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(来自实施例21步骤B)(0.34g，1.49mmol)加入Cs2CO3(1.22g，3.74mmol)和4-异硫氰基-6-甲氧基嘧啶(0.25g，1.5mmol)。将悬浮液在室温搅拌30分钟。然后加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(0.7mL，4.5mmol)，并且将混合物在室温搅拌18小时。浓缩混合物，经硅胶色谱(5-15％[9∶1甲醇∶氢氧化铵]/氯仿)纯化，得到(R)-N-(6-甲氧基嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.21g，0.72mmol，产率48.2％)，为白色固体。M.P.186-8℃。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.40(1H，s)，6.17(1H，br.s.)，3.92-4.04(1H，m)，3.89(3H，s)，3.68(1H，d，J＝10.32Hz)，3.12-3.23(1H，m)，2.98-3.12(1H，m)，2.67-2.97(4H，m)，2.11(2H，br.s.)，1.48-1.82(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝0.82；[M+H]+＝290.3。
实施例24
(R)-N-(6-甲氧基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501031
步骤A：5-甲氧基吡啶-2-胺乙氧基羰基硫脲
Figure BDA00001827380501032
向在二噁烷(40mL)中的5-甲氧基吡啶-2-胺(5g，40mmol)加入乙氧基羰基异硫氰酸酯(5.23mL，44.3mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜。将混合物真空浓缩，得到5-甲氧基吡啶-2-胺乙氧基羰基硫脲(10.28g，40.3mmol，产率100％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm 12.03(1H，br.s.)，11.37(1H，br.s.)，8.53(1H，br.s.)，8.11(1H，d，J＝2.93Hz)，7.50(1H，dd，J＝8.97，3.11Hz)，4.22(2H，q，J＝7.07Hz)，3.84(3H，s)，1.26(3H，t，J＝7.14Hz)。MS(LC/MS)R.T.＝2.40；[M+H]+＝256.1。
步骤B：6-甲氧基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-2-胺
Figure BDA00001827380501033
向在乙醇(57mL)和甲醇(57mL)中的5-甲氧基吡啶-2-胺乙氧基羰基硫脲(10.21g，40mmol)加入羟胺盐酸盐(14g，200mmol)和许尼希碱(21mL，120mmol)。将混合物在室温搅拌2小时，然后在60℃加热4小时。将反应混合物冷却至室温，过滤移除固体。将其真空浓缩，然后悬浮在氯仿中。过滤出固体，得到6-甲氧基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-2-胺(6.05g，33.2mmol，产率83％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm 8.30(1H，d，J＝1.83Hz)，7.24-7.32(1H，m)，7.16-7.23(1H，m)，5.82(2H，br.s.)，3.78(3H，s)。MS(LC/MS)R.T.＝0.53；[M+H]+＝165.2。
2克6-甲氧基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-2-胺经快速色谱纯化(2-20％[10％氢氧化铵/甲醇]/氯仿)，得到6-甲氧基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-2-胺(1.35g，8.22mmol，产率67.5％)。1H NMR(300MHz，DMSO-d6)δppm 8.29(1H，d，J＝2.20Hz)，7.24-7.30(1H，m)，7.15-7.22(1H，m)，5.79(2H，s)，3.78(3H，s)。
步骤C：2-异硫氰基-6-甲氧基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶
Figure BDA00001827380501041
向在二氯甲烷(15mL)中的6-甲氧基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-2-胺(0.3g，1.8mmol)加入1，1′-硫羰基二-2(1H)-吡啶酮(0.51g，2.2mmol)。将反应混合物在室温搅拌过夜，真空浓缩，经快速色谱纯化，得到2-异硫氰基-6-甲氧基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶(166mg，0.8mmol，产率44％)，为白色固体。1HNMR(300MHz，CDCl3)δppm 8.03(1H，d，J＝2.20Hz)，7.54(1H，d，J＝9.88Hz)，7.34(1H，dd，J＝9.51，2.56Hz)，3.88(3H，s)。
步骤D：(R)-N-(6-甲氧基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501042
向在N，N-二甲基甲酰胺(5ml)中的2-异硫氰基-6-甲氧基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶(160mg，0.78mmol)加入(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇·2HCl(178mg，0.78mmol)和三乙胺(0.32ml，2.33mmol)。将反应混合物在70℃搅拌1小时。然后将N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.36ml，2.33mmol)加至反应混合物。将混合物在70℃加热4小时，然后冷却，倾倒至碳酸氢钠水溶液/氯仿中。产物用氯仿萃取(3x)。合并有机层，用水洗涤(3x)，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，然后经快速色谱纯化(2-20％[10％氢氧化铵∶甲醇]/氯仿)，得到(R)-N-(6-甲氧基-[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺-[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(114.5mg，0.33mmol，产率42％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 8.51(1H，br.s.)，8.08(1H，d，J＝2.44Hz)，7.35(1H，d，J＝9.77Hz)，7.18(1H，dd，J＝9.46，2.44Hz)，3.92(1H，d，J＝8.85Hz)，3.84(3H，s)，3.58(1H，d，J＝8.85Hz)，3.36-3.41(1H，m)，2.72-3.05(4H，m)，2.18-2.26(1H，m，J＝13.26，9.98，3.66，3.49，3.49Hz)，2.13(1H，br.s.)，1.79(1H，br.s.)，1.67-1.76(1H，m，J＝13.96，9.84，4.27，4.27Hz)，1.45-1.63(2H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝0.86；[M+H]+＝329.2。
实施例25
(R)-N-(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501051
步骤A：5-(三氟甲基)吡嗪-2-胺
Figure BDA00001827380501052
向5，6-二氨基嘧啶-4-醇(18g，143mmol)于3M氢氧化钠(180mL，540mmol)中的冰浴冷却的溶液中，加入3，3-二溴-1，1，1-三氟丙-2-酮(25.2g，93mmol)。将反应混合物在环境温度搅拌3天。过滤出固体，溶于60％硫酸(140mL)中，并且在135℃搅拌8小时。将反应混合物冷却，倾倒至冰上，使其静置16小时。溶液用浓氢氧化铵中和至pH值为8，用乙酸乙酯萃取(5X100mL)，用硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。固体残余物从苯/己烷中重结晶，得到5-(三氟甲基)吡嗪-2-胺(2.28g，14mmol，产率15％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.32(1H，s)，7.99(1H，d，J＝1.26Hz)，5.02(2H，br.s.)。MS(LC/MS)R.T.＝1.56；[M+H]+＝164.03。
步骤B：(R)-N-(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501053
(R)-N-(5-(三氟甲基)吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：遵循实施例23步骤A-B的一般操作，以及使用5-(三氟甲基)吡嗪-2-胺(来自上述步骤A)作为起始物质。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm9.08(1H，br.s.)，8.35(1H，s)，8.32(1H，s)，3.95(1H，d，J＝9.57Hz)，3.61(1H，d，J＝9.57Hz)，3.30(1H，dd，J＝14.86，1.76Hz)，2.65-2.99(5H，m)，2.05-2.16(2H，m)，1.64-1.74(1H，m)，1.42-1.57(2H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.06；[M+H]+＝328.30。
实施例26
(R)-N-(6-氟-1H-吲唑-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：6-氟-1H-吲唑-3-胺
Figure BDA00001827380501062
向2，4-二氟苯甲腈(1.21g，8.70mmol)中加入一水合肼(8.46mL，174mmol)。将混合物加热回流5小时，然后倾倒至冰上。溶液用乙酸乙酯萃取，用硫酸镁干燥，过滤并且浓缩。残余物经柱色谱纯化(25-100％乙酸乙酯/己烷)，得到6-氟-1H-吲唑-3-胺(0.5g，3.3mmol，产率38％)，为淡黄色粉末。1HNMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 11.42(s，1H)，7.70(dd，J＝8.55，5.49Hz，1H)，6.97(dd，J＝10.07，1.83Hz，1H)，6.72-6.79(m，1H)，5.40(s，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.61；[M+H]+＝152.11。
步骤B：6-氟-3-异硫氰基-1H-吲唑
Figure BDA00001827380501063
向在二氯甲烷(15mL)中的6-氟-1H-吲唑-3-胺(0.32g，2.1mmol)加入1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.53g，2.30mmol)。将反应混合物在50℃搅拌3小时。将反应混合物冷却至室温，并且粗产物经柱色谱纯化(25％乙酸乙酯/己烷)，得到6-氟-3-异硫氰基-1H-吲唑(0.30g，1.53mmol，产率73.0％)，为淡黄色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 13.39(s，1H)，7.78(dd，J＝8.85，4.88Hz，1H)，7.41(dd，J＝9.31，1.68Hz，1H)，7.14(td，J＝9.16，1.83Hz，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝3.69；[M+H]+＝194.07。
步骤C：(R)-N-(6-氟-1H-吲唑-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
在室温，向在DMF(15mL)中的6-氟-3-异硫氰基-1H-吲唑(0.20g，1.04mmol)加入三乙胺(0.43mL，3.11mmol)和(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.26g，1.14mmol)。将反应混合物在70℃搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，然后用N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.48mL，3.11mmol)处理。接着将反应混合物加热至70℃，保持2小时。将反应混合物冷却至环境温度，然后浓缩。粗产物经柱色谱纯化(85％氯仿，14％甲醇，1％氢氧化铵)，得到(R)-N-(6-氟-1H-吲唑-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.22g，0.66mmol，产率64％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 12.16(s，1H)，8.00(s，1H)，7.59-7.67(m，1H)，7.09(dd，J＝9.77，2.14Hz，1H)，6.81-6.88(m，1H)，3.81(d，J＝9.16Hz，1H)，3.56(d，J＝8.85Hz，1H)，3.00(s，2H)，2.78(s，2H)，2.67(t，J＝7.32Hz，2H)，2.01(d，J＝2.44Hz，1H)，1.92(s，1H)，1.59(d，J＝5.80Hz，2H)，1.46(s，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.44；[M+H]+＝316.16。
实施例27
(R)-N-(呋喃并[3，2-c]吡啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501072
步骤A：呋喃并[3，2-c]吡啶-4-胺
Figure BDA00001827380501081
在氮气气氛下，向在甲苯中的4-氯呋喃并[3，2-c]吡啶(1g，6.5mmol)加入外消旋BINAP(0.243g，0.4mmol)、Pd2(dba)3(0.12g，0.13mmol)和叔丁醇钠(0.88g，9.1mmol)。加入二苯甲酮亚胺(Benzophenoneimine)(1.3mL，7.81mmol)，将混合物加热至80℃，保持3小时，然后冷却至室温。反应混合物用乙醚稀释，经硅藻土过滤，用乙醚洗涤。浓缩滤液，将暗橙色残余物吸收在甲醇(90ml)中，用羟胺(1.2mL，19.5mmol)处理。将混合物在环境温度搅拌18小时，然后浓缩。残余物经柱色谱纯化(95-100％乙酸乙酯/己烷)，得到呋喃并[3，2-c]吡啶-4-胺(776mg，5.79mmol，产率89％)，为暗橙色固体。MS(LC/MS)R.T.＝0.51；[M+H]+＝135.02。
步骤B：(R)-N-(呋喃并[3，2-c]吡啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501082
(R)-N-(呋喃并[3，2-c]吡啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：遵循实施例23步骤A-B的一般操作，使用呋喃并[3，2-c]吡啶-4-胺(上述步骤A)作为起始物质。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.08(1H，d，J＝5.79Hz)，7.69(1H，d，J＝2.01Hz)，6.99-7.13(2H，m)，4.00(1H，d，J＝10.07Hz)，3.69(1H，d，J＝10.07Hz)，3.19-3.26(1H，m)，3.05-3.13(1H，m)，2.93(2H，t，J＝7.43Hz)，2.73-2.87(2H，m)，2.08-2.24(2H，m)，1.52-1.82(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝0.68；[M+H]+＝299.19。
实施例28
(R)-N-(5-苯基吡啶-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：5-苯基吡啶-3-胺
将5-溴吡啶-3-胺(248mg，1.43mmol)、Pd(PPh3)4(50.4mg，0.04mmol)、甲苯(3mL)、碳酸钠(2M，3mL，6mmol)和苯基硼酸(195mg，1.60mmol)溶于乙醇(3mL)中的混合物在90℃的油浴中加热4小时，然后使其冷却至室温，保持16小时。将反应混合物转移至分液漏斗中，并且在乙酸乙酯和水之间分配。水相再用乙酸乙酯洗涤一次，合并的有机相用盐水洗涤，用硫酸镁干燥，过滤并且真空浓缩。残余物经柱色谱纯化(80％乙酸乙酯/己烷)，得到5-苯基吡啶-3-胺(31.9mg，0.19mmol，产率13％)，为白色固体。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 8.17-8.42(m，1H)，8.02-8.20(m，1H)，7.32-7.62(m，4H)，7.25(s，1H)，7.06-7.20(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.91；[M+H]+＝171.09。
步骤B：(R)-N-(5-苯基吡啶-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501092
(R)-N-(5-苯基吡啶-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：遵循实施例23步骤A-B的一般操作，使用5-苯基吡啶-3-胺(来自上述步骤A)作为起始物质。1H NMR(500MHz，MeOD-d4)δppm 8.40(br.s.，2H)，7.66(d，J＝7.32Hz，2H)，7.46-7.56(m，3H)，7.43(d，J＝7.32Hz，1H)，3.79-4.02(m，1H)，3.51-3.68(m，1H)，3.22(d，J＝14.95Hz，1H)，3.02-3.15(m，1H)，2.72-2.99(m，3H)，2.14(br.s.，2H)，1.76(dd，J＝9.31，4.12Hz，3H)，1.12-1.35(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.90；[M+H]+＝335.17。
实施例29
(R)-N-(2-苯基吡啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501101
(R)-N-(2-苯基吡啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例28步骤A-B的一般操作由2-溴吡啶-4-胺来制备。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 8.38(d，J＝5.49Hz，1H)，7.88(d，J＝7.93Hz，2H)，7.71-7.84(m，1H)，7.48(d，J＝7.63Hz，3H)，7.19-7.36(m，1H)，3.94-4.09(m，1H)，3.61-3.79(m，1H)，3.17-3.27(m，1H)，3.00-3.14(m，1H)，2.74-3.00(m，4H)，2.05-2.23(m，2H)，1.55-1.86(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.86；[M+H]+＝335.23。
实施例30
(R)-N-(6-苯基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501102
(R)-N-(6-苯基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例28步骤A-B的一般操作由6-溴吡啶-2-胺来制备。1H NMR(500MHz，MeOD-d4)δppm 7.91(d，J＝7.63Hz，2H)，7.71(t，J＝7.78Hz，1H)，7.32-7.55(m，5H)，4.04(d，J＝10.07Hz，1H)，3.72(d，J＝9.77Hz，1H)，3.23(d，J＝1.22Hz，1H)，3.12(s，1H)，2.95(s，2H)，2.84(s，2H)，2.16(br.s.，2H)，1.58-1.85(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.75；[M+H]+＝335.23。
实施例31
(R)-N-(6-(二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吲唑-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：6-(二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吲唑-3-胺
向4-(二氟甲氧基)-2-氟苯甲腈(1g，5.3mmol)中加入甲基肼(4.92g，107mmol)。将反应混合物加热至50℃，保持5小时，然后冷却至室温。粗产物经柱色谱纯化(40-100％乙酸乙酯/己烷)，得到6-(二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吲唑-3-胺(0.5g，2.35mmo1，产率44％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 7.70(d，J＝8.55Hz，1H)，7.14(s，1H)，6.73(d，J＝8.55Hz，1H)，5.49(s，1H)，3.70(s，3H)。
步骤B：(R)-N-(6-(二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吲唑-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501113
(R)-N-(6-(二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吲唑-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：遵循实施例23步骤A-B的一般操作，使用6-(二氟甲氧基)-1-甲基-1H-吲唑-3-胺(步骤A)作为起始物质。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 7.64(d，J＝8.55Hz，1H)，7.28(d，J＝5.19Hz，1H)，6.83(dd，J＝8.55，1.83Hz，1H)，3.88(s，3H)，3.77-3.84(m，1H)，3.51-3.64(m，1H)，3.00(s，2H)，2.72-2.84(m，2H)，2.67(t，J＝7.48Hz，2H)，2.02(br.s.，1H)，1.85-1.98(m，1H)，1.59(d，J＝5.80Hz，2H)，1.36-1.53(m，1H)，1.09(d，J＝6.41Hz，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.04；[M+H]+＝378.19。
实施例32
(R)-N-(5-(二氟甲氧基)噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：2-(二氟甲氧基)-5-硝基吡啶
Figure BDA00001827380501122
向在乙腈(500mL)中的2-羟基-5-硝基吡啶(7g，50mmol)加入硫酸钠(1.5g，10.6mmol)和2，2-二氟-2-(氟磺酰基)乙酸(6.2mL，60mmol)，然后使反应混合物在室温搅拌16小时。反应用饱和碳酸氢钠水溶液淬灭，然后真空除去乙腈。残余的含水成分用乙酸乙酯萃取，用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并且真空浓缩。浅褐色油状固体用乙醚/己烷研磨，过滤，并且将滤液浓缩，得到2-(二氟甲氧基)-5-硝基吡啶(4.7g，24.7mmol，产率49％)，为黄色油状物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.14(d，J＝2.76Hz，1H)，8.68(dd，J＝9.03，2.76Hz，1H)，7.98(s，0.5H)，7.62(s，0.5H)，7.34(d，J＝9.03Hz，1H)。
步骤B：6-(二氟甲氧基)吡啶-3-胺
Figure BDA00001827380501123
向在脱气的甲醇(100mL)中的2-(二氟甲氧基)-5-硝基吡啶(4.7g，24.7mmol)加入10％钯/碳(500mg，0.47mmol)，并且将反应混合物在环境压力氢化1小时。向其中加入乙酸(2.83mL，49.4mmol)，反应混合物经硅藻土过滤，真空浓缩，得到6-(二氟甲氧基)吡啶-3-胺(6.33g，25.9mmol，产率105％)，为橄榄绿色液体。1H NMR(400MHz，MeOD-d4)δppm 7.60(d，J＝2.76Hz，1H)，7.37(s，0.5H)，7.15(dd，J＝8.66，2.89Hz，1H)，7.00(s，0.5H)，6.71(d，J＝8.78Hz，1H)。
步骤C：5-(二氟甲氧基)噻唑并[5，4-b]吡啶-2-胺
Figure BDA00001827380501124
向冰浴冷却的乙酸(10mL)中加入硫氰酸钾(3.18g，32.8mmol)和6-(二氟甲氧基)吡啶-3-胺(1g，4.1mmol)。将反应混合物在冰盐浴中冷却，直到反应温度低于0℃。历时2小时，滴加溴(0.65mL，12.7mmol)于乙酸(3mL)中的溶液，滴加速度使得反应温度低于0℃。这生成了非常粘稠的混合物。在添加完成后，对混合物进行搅拌，并且使其缓慢温热至室温过夜。在搅拌过夜后，加入水(5mL)，将混合物在油浴中加热至85℃。然后趁热对该混合物进行过滤。将黄色滤饼返回至反应烧瓶中，再加入5mL乙酸。将混合物再次加热至85℃，然后趁热过滤。将合并的滤液在冰浴中冷却，用浓氢氧化铵中和至pH值为8。过滤收集所形成的黄色沉淀物。该粗物质经柱色谱纯化(12-100％乙酸乙酯/己烷)，得到5-(二氟甲氧基)噻唑并[5，4-b]吡啶-2-胺(321mg，1.48mmol，产率36.1％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.64-7.81(m，2H)，6.92(d，J＝8.53Hz，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.66；[M+H]+＝218.10。
步骤D：N-(5-(二氟甲氧基)噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺
Figure BDA00001827380501131
将5-(二氟甲氧基)噻唑并[5，4-b]吡啶-2-胺(310mg，1.43mmol)和二(1H-咪唑-1-基)甲硫酮(311mg，1.75mmol)溶于乙腈(5mL)中，并且在密封小瓶中加热至70℃，保持10小时。然后将小瓶储存在冷藏器中16小时。过滤收集固体并且用乙腈洗涤，得到N-(5-(二氟甲氧基)噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(296mg，0.72mmol，产率51％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.77(d，J＝4.77Hz，1H)，8.06(d，J＝8.53Hz，1H)，8.01(s，1H)，7.72(s，1H)，7.54(s，1H)，6.94-7.13(m，1H)。
步骤E：(R)-N-(5-(二氟甲氧基)噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501132
向密封小瓶内的在N，N-二甲基甲酰胺(4mL)中的N-(5-(二氟甲氧基)噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-1H-咪唑-1-硫代甲酰胺(296mg，0.72mmol)加入(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇·2HCl(175mg，0.76mmol)和三乙胺(0.3ml，2.2mmol)，然后将混合物加热至70℃，保持过夜。
向其中加入N，N′-二异丙基碳二亚胺(350μl，2.25mmol)并将混合物加热至70℃，保持6小时。将其冷却至环境温度，然后倾倒至水/氯仿中，用另外的氯仿萃取，并且真空浓缩。然后将残余物吸收在甲苯中，并用水洗涤以除去残余的N，N-二甲基甲酰胺。残余物经柱色谱纯化(2％-20％(10％氢氧化铵/甲醇)/氯仿)，得到(R)-N-(5-(二氟甲氧基)噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(104mg，0.27mmol，产率37％)，为浅奶油色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.99(d，J＝8.78Hz，1H)，7.68(s，1H)，7.03(d，J＝8.53Hz，1H)，3.87(d，J＝10.04Hz，1H)，3.62(d，J＝10.04Hz，1H)，3.03(d，J＝5.02Hz，2H)，2.80(d，J＝9.03Hz，2H)，2.65(t，J＝7.65Hz，2H)，2.08(br.s.，1H)，1.83-1.99(m，1H)，1.43-1.68(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.73；[M+H]+＝382.20。
实施例33
(R)-N-(6-异丙氧基苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
(R)-N-(6-异丙氧基苯并[d]噻唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例32步骤C-E的一般操作由4-异丙氧基苯胺来制备。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.49(d，J＝8.78Hz，1H)，7.38(d，J＝2.51Hz，1H)，6.90(dd，J＝8.78，2.51Hz，1H)，4.50-4.68(m，1H)，3.87(d，J＝10.04Hz，1H)，3.62(d，J＝9.79Hz，1H)，2.79(d，J＝9.03Hz，2H)，2.66(t，J＝7.78Hz，2H)，2.06(br.s.，1H)，1.85-1.96(m，1H)，1.42-1.67(m，3H)，1.17-1.34(m，6H)，0.96-1.19(m，2H)。
实施例34
(R)-N-(5-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：5-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-胺
将5-溴吡嗪-2-胺(1.2g，6.9mmol)和吡咯烷(4mL，48mmol)的混合物在180℃用200W微波处理2小时。将反应混合物稀释至125mL乙酸乙酯中，用水(3x50mL)和盐水(50mL)萃取。用硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。粗产物经柱色谱纯化(0至3％甲醇/二氯甲烷)，得到5-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-胺(495mg，3.mmol，产率43.7％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.52(1H，d，J＝1.51Hz)，7.36(1H，d，J＝1.76Hz)，5.21(2H，s)，3.24-3.29(4H，m)，1.90(4H，ddd，J＝6.48，3.53，3.34Hz)。MS(LC/MS)R.T.＝0.52；[M+H]+＝165.29。
步骤B：(R)-N-(5-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501152
(R)-N-(5-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例23步骤A-B的一般操作由5-(吡咯烷-1-基)吡嗪-2-胺来制备。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 8.51(1H，br.s.)，8.02(1H，s)，7.44(1H，d，J＝0.92Hz)，3.84(1H，d，J＝9.16Hz)，3.51(1H，d，J＝8.85Hz)，3.39-3.45(4H，m)，3.31(1H，dd，J＝14.80，1.07Hz)，2.69-3.04(5H，m)，2.15-2.25(1H，m)，2.09(1H，br.s.)，1.98-2.02(4H+HOD，m)，1.64-1.74(1H，m)，1.42-1.61(2H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝0.76；[M+H]+＝329.40。
实施例35
(R)-1-(5-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)吡嗪-2-基)吡咯烷-2-酮
步骤A：1-(5-氨基吡嗪-2-基)吡咯烷-2-酮
将5-溴吡嗪-2-胺(5g，29mmol)、吡咯烷-2-酮(11mL，144mmol)、碘化亚铜(I)(1.1g，5.75mmol)、碳酸钾(7.94g，57.5mmol)和(1R，2R)-环己烷-1，2-二胺(1.38mL，11.49mmol)的混合物在氮气气氛中于二噁烷(100mL)中回流18小时。冷却后，将200mL乙酸乙酯和20mL甲醇加至反应混合物中。经硅藻土过滤，浓缩，并且吸收至硫酸钠上，以经柱色谱纯化(0-5％甲醇/二氯甲烷)。将纯化的产物从乙醚/乙酸乙酯中重结晶，得到1-(5-氨基吡嗪-2-基)吡咯烷-2-酮(1.57g，8.81mmol，产率30.7％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.74(1H，d，J＝1.51Hz)，7.69(1H，d，J＝1.51Hz)，6.20(2H，s)，3.84(2H，t，J＝7.05Hz)，2.49(2H，t，J＝7.93Hz)，2.04(2H，dq，J＝7.68，7.51Hz)。MS(LC/MS)R.T.＝0.48；[M+H]+＝179.27。
步骤B：(R)-1-(5-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)吡嗪-2-基)吡咯烷-2-酮
Figure BDA00001827380501162
(R)-1-(5-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)吡嗪-2-基)吡咯烷-2-酮遵循实施例23步骤A-B的一般操作由1-(5-氨基吡嗪-2-基)吡咯烷-2-酮制备。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 9.20(1H，d，J＝1.22Hz)，8.91(1H，br.s.)，8.13(1H，s)，4.02(2H，t，J＝7.02Hz)，3.92(1H，d，J＝9.46Hz)，3.58(1H，d，J＝9.16Hz)，3.33(1H，dd，J＝14.95，1.53Hz)，2.71-3.01(5H，m)，2.63(2H，t，J＝8.09Hz)，2.08-2.23(4H，m)，1.66-1.76(1H，m)，1.42-1.61(2H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝0.67；[M+H]+＝343.30。
实施例36
(R)-N-(5-(吡啶-3-基)吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501171
步骤A：5-(吡啶-3-基)吡嗪-2-胺
将吡啶-3-基硼酸(307mg，2.50mmol)、5-溴吡嗪-2-胺(391mg，2.25mmol)和二氯双(三苯基膦)-钯(II)(88mg，0.13mmol)加至脱气的二噁烷(12mL)中，将混合物搅拌30分钟。然后加入碳酸钠(795mg，7.50mmol)和脱气的水(8mL)，将反应混合物在密封的反应小瓶中于100℃加热8小时。使反应混合物在环境温度静置过周末。然后稀释至乙酸乙酯(100mL)中，用盐水(3x 25mL)萃取。有机层用硫酸钠干燥，然后真空浓缩。粗产物经柱色谱纯化(0至5％甲醇/乙酸乙酯)，得到5-(吡啶-3-基)吡嗪-2-胺(235mg，1.37mmol，产率54.6％)。1HNMR(400MHz，丙酮)δppm 9.13(1H，d，J＝1.51Hz)，8.54(1H，d，J＝1.26Hz)，8.50(1H，dd，J＝4.78，1.51Hz)，8.22-8.28(1H，m)，8.07(1H，d，J＝1.26Hz)，7.39(1H，ddd，J＝7.87，4.72，0.76Hz)，6.05(2H，br.s.)。MS(LC/MS)R.T.＝0.58；[M+H]+＝173.20。
步骤B：(R)-N-(5-(吡啶-3-基)吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501173
(R)-N-(5-(吡啶-3-基)吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例23步骤A-B的一般操作由5-(吡啶-3-基)吡嗪-2-胺来制备。1HNMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.12(1H，dd，J＝2.27，0.76Hz)，9.08(1H，br.s.)，8.59(1H，dd，J＝4.78，1.76Hz)，8.55(1H，d，J＝1.51Hz)，8.45(1H，d，J＝1.26Hz)，8.25(1H，dt，J＝7.99，1.92Hz)，7.38(1H，ddd，J＝8.06，4.78，0.76Hz)，3.97(1H，d，J＝9.57Hz)，3.63(1H，d，J＝9.32Hz)，3.36(1H，dd，J＝14.86，1.76Hz)，2.69-3.06(5H，m)，2.14-2.24(1H，m)，2.12(1H，br.s.)，1.66-1.77(1H，m，J＝13.94，9.66，4.31，4.31Hz)，1.44-1.62(2H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝0.65；[M+H]+＝337.30。
实施例37
(R)-N-(5-(6-甲氧基吡啶-3-基)吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501181
(R)-N-(5-(6-甲氧基吡啶-3-基)吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例36步骤A-B的一般操作由5-溴吡嗪-2-胺来制备。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.04(1H，br.s.)，8.66(1H，d，J＝2.01Hz)，8.46(1H，d，J＝1.51Hz)，8.41(1H，d，J＝1.01Hz)，8.15(1H，dd，J＝8.81，2.52Hz)，6.82(1H，d，J＝8.31Hz)，3.97(3H，s)，3.95(1H，d，J＝9.57Hz)，3.61(1H，d，J＝9.32Hz)，3.35(1H，dd，J＝14.86，1.51Hz)，2.68-3.07(5H，m)，2.14-2.24(1H，m，J＝13.27，9.93，3.53，3.38，3.38Hz)，2.11(1H，br.s.)，1.67-1.77(1H，m)，1.45-1.61(2H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝0.81；[M+H]+＝367.40。
实施例38
(R)-N-(6-甲氧基喹喔啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501182
步骤A：7-甲氧基喹喔啉-2(1H)-酮和6-甲氧基喹喔啉-2(1H)-酮
Figure BDA00001827380501183
在环境温度，将2-氧代乙酸乙酯(18.47mL，93mmol)于甲苯中的50％溶液加至4-甲氧基苯-1，2-二胺(10.73g，78mmol)于乙醇(100mL)中的溶液中，并且将反应混合物回流2小时。将反应混合物真空浓缩，从乙醇中结晶，得到6-甲氧基喹喔啉-2(1H)-酮和7-甲氧基喹喔啉-2(1H)-酮的混合物(5.73g，32.50mmol，产率42％)。MS(LC/MS)R.T.＝0.68；[M+H]+＝177.10。
步骤B：2-氯-6-甲氧基喹喔啉
将6-甲氧基喹喔啉-2(1H)-酮和7-甲氧基喹喔啉-2(1H)-酮的混合物(5.67g，32.20mmol)在三氯氧化磷(120mL)中回流1小时。浓缩反应混合物，添加冰淬灭反应，然后用碳酸钠碱化，用乙酸乙酯萃取(3x200mL)。合并有机层，然后真空浓缩。将粗产物吸收至硫酸钠上，经柱色谱纯化(0至5％乙酸乙酯/己烷)，得到2-氯-6-甲氧基喹喔啉(2.21g，11.36mmol，产率35％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.69(s，1H)，7.88(d，J＝9.32Hz，1H)，7.43(dd，J＝9.32，2.77Hz，1H)，7.37(d，J＝2.77Hz，1H)，3.95(s，3H)。
步骤C：N-(2，4-二甲氧基苄基)-6-甲氧基喹喔啉-2-胺
Figure BDA00001827380501192
将2-氯-6-甲氧基喹喔啉(0.93g，4.77mmol)和(2，4-二甲氧基苯基)甲胺(2.2ml，14.64mmol)的混合物于二甲基亚砜(5mL)中在150℃微波处理30分钟。将反应混合物稀释至乙酸乙酯(250mL)中，然后用盐水(3x100mL)萃取。粗产物经柱色谱纯化(20至80％乙酸乙酯/己烷)，得到N-(2，4-二甲氧基苄基)-6-甲氧基喹喔啉-2-胺(1.46g，产率87％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm8.13(1H，s)，7.59-7.63(1H，m)，7.30(1H，d，J＝8.31Hz)，7.21-7.24(2H，m)，6.47(1H，d，J＝2.27Hz)，6.42(1H，dd，J＝8.31，2.27Hz)，5.10(1H，t，J＝5.92Hz)，4.61(2H，d，J＝5.79Hz)，3.88(3H，s)，3.84(3H，s)，3.78(3H，s)。MS(LC/MS)R.T.＝1.95；[M+H]+＝326.23。
步骤D：6-甲氧基喹喔啉-2-胺
Figure BDA00001827380501193
在环境温度，将N-(2，4-二甲氧基苄基)-6-甲氧基喹喔啉-2-胺(2.8g，8.61mmol)在TFA(10mL，130mmol)和二氯甲烷(10mL)中搅拌30分钟。真空除去溶剂。将饱和碳酸氢钠水溶液(200mL)加至红色残余物中，然后析出黄色固体。用二氯甲烷充分萃取混合物。有机层用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到6-甲氧基喹喔啉-2-胺(1.50g，8.56mmol，产率99％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.27(1H，s)，7.54-7.58(1H，m)，7.25-7.29(2H，m)，4.71(2H，br.s.)，3.90(3H，s)。MS(LC/MS)R.T.＝0.86；[M+H]+＝176.23。
步骤E：(R)-N-(6-甲氧基喹喔啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501201
(R)-N-(6-甲氧基喹喔啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例23步骤A-B的一般操作由6-甲氧基喹喔啉-2-胺来制备。1HNMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.61(1H，br.s.)，8.57(1H，s)，7.62(1H，d，J＝9.06Hz)，7.23-7.32(2H，m)，4.01(1H，d，J＝9.32Hz)，3.90(3H，s)，3.66(1H，d，J＝9.32Hz)，3.37(1H，dd，J＝14.86，1.51Hz)，2.68-3.08(5H，m)，2.15-2.25(1H，m)，2.10-2.14(1H，m)，1.67-1.77(1H，m)，1.42-1.63(2H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝0.81；[M+H]+＝340.30。
实施例39
(R)-N-(5-(二氟甲氧基)嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501202
步骤A：2-氯-5-(二氟甲氧基)嘧啶
将2-氯嘧啶-5-醇(1g，7.66mmol)和2-氯-2，2-二氟乙酸钠(3.50g，22.98mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(20mL)和水(0.2mL)中加热至90℃，保持24小时，然后真空浓缩。残余物经柱色谱纯化(5-30％乙酸乙酯/己烷)，得到2-氯-5-(二氟甲氧基)嘧啶(549mg，3.04mmol，产率39.7％)，为浅黄色油状物。MS(LC/MS)R.T.＝1.32；[M+H]+＝181.14。
步骤B：(R)-N-(5-(二氟甲氧基)嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501211
(R)-N-(5-(二氟甲氧基)嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例23步骤A-B的一般操作由2-氯-5-(二氟甲氧基)嘧啶来制备。1H NMR(400MHz，MeO-d4)δppm 8.46(2H，s)，6.85(1H，t)，4.02(1H，d，J＝10.07Hz)，3.73(1H，d，J＝10.32Hz)，3.28(1H，d，J＝1.01Hz)，3.16(1H，d)，2.81-3.05(4H，m)，2.08-2.25(2H，m)，1.46-1.89(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝0.53；[M+H]+＝326.30。
实施例40
(R)-N-(4，5-二甲基嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501212
步骤A：4，5-二甲基嘧啶-2-胺
Figure BDA00001827380501213
用氮气吹洗4-氯-5，6-二甲基嘧啶-2-胺(0.35g，2.22mmol)于2M 氨/甲醇(100ml)中的溶液，然后加入钯/碳(0.035g，0.33mmol)，接着用氮气吹洗，将反应混合物在1atm和环境温度氢化18小时。反应混合物用氮气吹洗，经硅藻土过滤，硅藻土垫用甲醇洗涤。将滤液真空蒸干，得到4，5-二甲基嘧啶-2-胺(0.35g，2.56mmol，产率90％)，直接使用而没有进一步纯化。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.89(1H，s)，6.19(2H，s)，2.18(3H，s)，1.99(3H，s)。MS(LC/MS)R.T.＝0.56；[M+H]+＝124.20。
步骤B：(R)-N-(4，5-二甲基嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501221
(R)-N-(4，5-二甲基嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例23步骤A-B的一般操作由4，5-二甲基嘧啶-2-胺来制备。1HNMR(400MHz，MeOD-d4)δppm 8.22(1H，s)，4.01(1H，d，J＝10.07Hz)，3.73(1H，d，J＝10.32Hz)，3.40(1H，d)，3.25(1H，d)，2.91-3.12(4H，m)，2.41(3H，s)，2.09-2.28(5H，m)，1.62-1.97(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝0.47；[M+H]+＝288.31。
实施例41
(R)-N-(6-苯基嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501222
步骤A：6-苯基嘧啶-4-胺
Figure BDA00001827380501223
将6-氯嘧啶-4-胺(0.32g，2.5mmol)、苯基硼酸(0.38g，3.13mmol)、饱和碳酸钠水溶液(0.80g，7.50mmol)和双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.035g，0.05mmol)的混合物悬浮在二甲氧基乙烷(15mL)/乙醇(2mL)/水(2mL)的混合物中。将混合物在微波炉中于125℃加热20分钟，然后真空浓缩。残余物经柱色谱纯化(10-60％乙酸乙酯/己烷)，得到6-苯基嘧啶-4-胺(167mg，0.98mmol，产率39％)，为灰白色固体。MS(LC/MS)R.T.＝0.99；[M+H]+＝172.23。
步骤B：(R)-N-(6-苯基嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501231
(R)-N-(6-苯基嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例23步骤A-B的一般操作由6-苯基嘧啶-4-胺来制备。1H NMR(400MHz，MeOD-d4)δppm 9.54(1H，d，J＝1.01Hz)，8.75-8.86(2H，m)，8.18-8.28(3H，m)，8.00(1H，br.s.)，4.70(1H，d，J＝10.32Hz)，4.43(1H，d，J＝10.58Hz)，3.72-3.88(2H，m)，3.41-3.63(4H，m)，2.63-2.87(2H，m)，2.18-2.48(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.36；[M+H]+＝336.24。
实施例42
(R)-N-(6-(4-甲氧基苯基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
(R)-N-(6-(4-甲氧基苯基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例41步骤A-B的一般操作由6-氯嘧啶-4-胺来制备。1HNMR(400MHz，MeOD-d4)δppm 8.72(1H，d，J＝1.26Hz)，7.90-8.00(2H，m)，7.16(1H，br.s.)，6.96-7.05(2H，m)，4.04(1H，d，J＝10.07Hz)，3.84(3H，s)，3.73(1H，d，J＝10.07Hz)，3.22(1H，d)，3.09(1H，d)，2.73-2.98(4H，m)，2.02-2.21(2H，m)，1.51-1.85(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.44；[M+H]+＝366.28。
实施例43
(R)-N-(6-(6-甲氧基吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
(R)-N-(6-(6-甲氧基吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例41步骤A-B的一般操作由6-氯嘧啶-4-胺来制备。1H NMR(400MHz，MeOD-d4)δppm 8.79(2H，dd，J＝19.01，1.89Hz)，8.27(1H，dd，J＝8.56，2.52Hz)，7.18(1H，br.s.)，6.89(1H，d，J＝8.81Hz)，4.05(1H，d，J＝10.32Hz)，3.96(3H，s)，3.74(1H，d，J＝10.32Hz)，3.23(1H，d)，3.10(1H，d)，2.73-2.99(4H，m)，2.02-2.21(2H，m)，1.53-1.84(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.34；[M+H]+＝367.25。
实施例44
(R)-N-(6-(萘-2-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501242
(R)-N-(6-(萘-2-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例41步骤A-B的一般操作由6-氯嘧啶-4-胺来制备。1H NMR(400MHz，MeOD-d4)δppm 8.83(1H，s)，8.56(1H，s)，7.83-8.13(4H，m)，7.49-7.58(2H，m)，7.37(1H，br.s.)，4.06(1H，d，J＝10.32Hz)，3.76(1H，d，J＝10.32Hz)，3.23(1H，s)，3.12(1H，d)，2.75-3.00(4H，m)，2.02-2.24(2H，m)，1.56-1.84(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.93；[M+H]+＝386.31。
根据实施例1的方法，使用合适的商购异硫氰酸酯或胺合成了表2中的化合物。根据实施例3所述的操作获得了含有酰胺的中间体。
表2。
Figure BDA00001827380501251
Figure BDA00001827380501252
Figure BDA00001827380501261
Figure BDA00001827380501271
Figure BDA00001827380501281
Figure BDA00001827380501291
Figure BDA00001827380501301
Figure BDA00001827380501311
Figure BDA00001827380501321
Figure BDA00001827380501331
Figure BDA00001827380501341
根据实施例21步骤C-D的方法，使用合适的商购异硫氰酸酯或胺和外消旋的3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇·2HCl合成了表3中的化合物。
表3
Figure BDA00001827380501342
Figure BDA00001827380501351
Figure BDA00001827380501361
根据实施例21步骤C-D的方法，使用合适的异硫氰酸酯或胺和(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇·2HCl合成了表4中的化合物。
表4
Figure BDA00001827380501371
Figure BDA00001827380501381
Figure BDA00001827380501391
Figure BDA00001827380501431
Figure BDA00001827380501441
Figure BDA00001827380501451
Figure BDA00001827380501461
Figure BDA00001827380501471
Figure BDA00001827380501491
Figure BDA00001827380501501
Figure BDA00001827380501511
Figure BDA00001827380501521
实施例218
(R)-N-(6-(甲氧基甲基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501522
步骤A：6-(甲氧基甲基)嘧啶-4-醇
Figure BDA00001827380501531
向4-甲氧基-3-氧代丁酸甲酯(3.54mL，26.5mmol)于甲醇(30ml)中的溶液中，加入乙酸甲脒(3.07g，29.2mmol)和甲醇钠(13mL，58.4mmol)。然后将混合物加热回流18小时，冷却至环境温度，接着浓缩。将残余物吸收至水中，使用1N HCl将pH值调节至7。含水混合物用氯仿萃取。合并的有机层用硫酸镁干燥，过滤，然后浓缩，得到6-(甲氧基甲基)嘧啶-4-醇(1.38g，9.85mmol，产率37.1％)。MS(LC/MS)R.T.＝0.19；[M+H]+＝141.20。
步骤B：4-氯-6-(甲氧基甲基)嘧啶
将6-(甲氧基甲基)嘧啶-4-醇(1.38g，9.85mmol)吸收在二氯甲烷(14ml)中，在环境温度加入三氯氧化磷(9mL，97mmol)。将混合物在环境温度搅拌18小时，然后浓缩。将残余物吸收至冰水中，使用1N氢氧化钠将pH值调节至7。混合物用氯仿萃取，用硫酸钠干燥，过滤并且真空浓缩。残余物经柱色谱纯化(5-10％乙酸乙酯/氯仿)，得到4-氯-6-(甲氧基甲基)嘧啶(1.2g，7.57mmol，产率77％)，为浅黄色油状物，其在静置时固化。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.88(1H，d，J＝1.01Hz)，7.52(1H，d，J＝1.01Hz)，4.53(2H，s)，3.50(3H，s)。MS(LC/MS)R.T.＝0.98；[M+H]+＝159.10。
步骤C：6-(甲氧基甲基)嘧啶-4-胺
Figure BDA00001827380501533
将4-氯-6-(甲氧基甲基)嘧啶(1.2g，7.57mmol)和氢氧化铵(20ml)的混合物在密封管中加热3小时。将混合物冷却至环境温度，然后浓缩。残余物用乙醚研磨，得到6-(甲氧基甲基)嘧啶-4-胺(0.50g，3.59mmol，产率48％)，为浅黄色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.47(1H，s)，6.55(1H，s)，5.12(2H，br.s.)，4.38(2H，s)，3.45(3H，s)。MS(LC/MS)R.T.＝0.42；[M+H]+＝140.20。
步骤D：4-异硫氰基-6-(甲氧基甲基)嘧啶
Figure BDA00001827380501534
在环境温度，向1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.84g，3.59mmol)于二氯甲烷中的亮橙色溶液中，加入6-(甲氧基甲基)嘧啶-4-胺(0.5g，3.59mmol)。将橙色溶液在环境温度搅拌18小时。溶液经柱色谱纯化(0-40％乙酸乙酯/己烷)，得到4-异硫氰基-6-(甲氧基甲基)嘧啶(0.32g，1.77mmol，产率49％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.91(1H，d，J＝1.26Hz)，7.19(1H，d，J＝1.01Hz)，4.52(2H，s)，3.49(3H，s)。MS(LC/MS)R.T.＝1.39；[M+H]+＝182.10。
步骤E：(R)-N-(6-(甲氧基甲基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501541
向在二甲基甲酰胺中的(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.39g，1.71mmol)加入碳酸铯(1.39g，4.28mmol)和4-异硫氰基-6-(甲氧基甲基)嘧啶(0.31g，1.71mmol)。将悬浮液在环境温度搅拌15分钟。向反应混合物中加入N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.80mL，5.13mmol)，并且将混合物搅拌过夜，然后浓缩。残余物经柱色谱纯化(在乙酸乙酯中的5-25％9∶1甲醇/氢氧化铵)，得到(R)-N-(6-(甲氧基甲基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.18g，0.58mmol，产率34％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz，MeOD-d4)δppm 8.65(1H，d，J＝1.01Hz)，6.92(1H，br.s.)，4.40(3H，s)，4.03(1H，d，J＝10.32Hz)，3.72(1H，d，J＝10.32Hz)，3.44(2H，s)，3.18-3.26(1H，m)，3.06-3.13(1H，m)，2.69-2.96(4H，m)，1.94-2.19(2H，m)，1.45-1.86(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝0.76；[M+H]+＝304.30。
实施例219
(R)-N-(5-(环戊基氧基)嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501542
步骤A：2-氯-5-(环戊基氧基)嘧啶
Figure BDA00001827380501551
将2-氯嘧啶-5-醇(1g，7.66mmol)、氯代环戊烷(2.39mL，22.98mmol)和碳酸钾(3.18g，22.98mmol)于N，N-二甲基甲酰胺中的混合物在65℃加热16小时。加入水，混合物用乙酸乙酯萃取。有机层用水和盐水洗涤，用硫酸钠干燥，然后真空浓缩。残余物经柱色谱纯化(0-25％乙酸乙酯/己烷)，得到2-氯-5-(环戊基氧基)嘧啶(831mg，4.18mmol，产率54.6％)，为白色固体。MS(LC/MS)R.T.＝2.32；[M+H]+＝199.23。
步骤B：5-(环戊基氧基)嘧啶-2-胺
Figure BDA00001827380501552
5-(环戊基氧基)嘧啶-2-胺遵循实施例218步骤C的一般操作由2-氯-5-(环戊基氧基)嘧啶来制备。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.99(2H，s)，6.18(2H，s)，4.54-4.75(1H，m)，1.30-1.91(8H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.47；[M+H]+＝180.24。
步骤C：(R)-N-(5-(环戊基氧基)嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501553
(R)-N-(5-(环戊基氧基)嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例23步骤A-B的一般操作由5-(环戊基氧基)嘧啶-2-胺来制备。1H NMR(400MHz，MeOD-d4)δppm 8.24(2H，s)，4.76-4.86(1H，m)，3.98(1H，d，J＝10.07Hz)，3.69(1H，d，J＝10.07Hz)，3.33(1H，d)，3.20(1H，d)，2.77-3.08(4H，m)，2.04-2.26(2H，m)，1.49-2.03(11H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.56；[M+H]+＝344.32。
根据实施例218的方法，使用如同实施例218步骤C的合适商购氯化物合成了表5中的化合物。
表5
Figure BDA00001827380501561
Figure BDA00001827380501571
实施例228
(R)-N-(6-(2，2，2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501572
步骤A：4-氯-6-(2，2，2-三氟乙氧基)嘧啶
Figure BDA00001827380501573
在0℃，将2，2，2-三氟乙醇(2.61g，26.10mmol)于四氢呋喃(12ml)中的溶液滴加至氢化钠(1.31g，32.60mmol)于四氢呋喃(48ml)中的悬浮液中。将混合物在0℃搅拌30分钟，然后在0℃加入4，6-二氯嘧啶(3.6g，24.16mmol)于四氢呋喃(12ml)中的溶液。将反应混合物在环境温度搅拌3小时，然后倾倒至饱和氯化铵水溶液中，接着用乙酸乙酯萃取。乙酸乙酯萃取物用水洗涤，用硫酸镁干燥，并且进行真空浓缩。橙色残余物经柱色谱纯化(10-40％乙酸乙酯/己烷)，得到4-氯-6-(2，2，2-三氟乙氧基)嘧啶(2.0g，2.41mmol，产率38.9％)，为浅黄色油状物。MS(LC/MS)R.T.＝2.78；[M+H]+＝213.12。
步骤B：6-(2，2，2-三氟乙氧基)嘧啶-4-胺
Figure BDA00001827380501581
6-(2，2，2-三氟乙氧基)嘧啶-4-胺遵循实施例218步骤C的一般操作由4-氯-6-(2，2，2-三氟乙氧基)嘧啶制备。MS(LC/MS)R.T.＝1.16；[M+H]+＝194.07。
步骤C：(R)-N-(6-(2，2，2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501582
(R)-N-(6-(2，2，2-三氟乙氧基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例23步骤A-B的一般操作由6-(2，2，2-三氟乙氧基)嘧啶-4-胺来制备。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.30(1H，br.s.)，8.39(1H，s)，6.38(1H，br.s.)，4.59-4.84(2H，m)，3.94(1H，d，J＝9.32Hz)，3.59(1H，d，J＝9.57Hz)，3.33(1H，d，J＝16.62Hz)，2.61-3.01(5H，m)，1.97-2.25(2H，m)，1.37-1.81(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.42；[M+H]+＝358.33。
实施例229
(R)-N-(5-溴-4-异丙基嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501583
步骤A：4-异丙基嘧啶-2-胺
Figure BDA00001827380501584
4-异丙基嘧啶-2-胺遵循实施例218步骤C的一般操作由2-氯-4-异丙基嘧啶制备。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)d ppm 8.10(1H，d，J＝5.04Hz)，6.45(3H，d，J＝5.04Hz)，2.59-2.80(1H，m)，1.15(6H，d，J＝7.05Hz)。MS(LC/MS)R.T.＝0.76；[M+H]+＝138.12。
步骤B：5-溴-4-异丙基嘧啶-2-胺
Figure BDA00001827380501591
将N-溴代琥珀酰亚胺(0.5g，2.8mmol)加至4-异丙基嘧啶-2-胺(0.39g，2.81mmol)于氯仿中的溶液中。将所生成的黄色溶液在环境温度搅拌1小时，然后真空浓缩。残余物经柱色谱纯化(在氯仿中的3-10％9∶1甲醇∶氢氧化铵)，得到5-溴-4-异丙基嘧啶-2-胺(0.69g，3.18mmol，113％)，为浅黄色固体。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.21(1H，s)，6.75(2H，s)，3.10-3.23(1H，m)，1.14(6H，d，J＝6.80Hz)。MS(LC/MS)R.T.＝2.58；[M]+＝216.09。
步骤C：(R)-N-(5-溴-4-异丙基嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501592
(R)-N-(5-溴-4-异丙基嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例23步骤A-B的一般操作由5-溴-4-异丙基嘧啶-2-胺来制备。1H NMR(400MHz，MeOD-d4)δppm 8.49(1H，s)，4.02(1H，d，J＝10.07Hz)，3.72(1H，d，J＝10.07Hz)，3.34-3.44(1H，m)，3.23(1H，s)，3.06-3.15(1H，m)，2.95(2H，t，J＝7.55Hz)，2.75-2.89(2H，m)，2.00-2.21(2H，m)，1.52-1.83(3H，m)，1.24(6H，d，J＝6.80Hz)。MS(LC/MS)R.T.＝1.84；[M+H]+＝382.24。
实施例230
(R)-N-(5-溴-4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
(R)-N-(5-溴-4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例229步骤B-C的一般操作由4-(吡啶-3-基)嘧啶-2-胺来制备。1H NMR(400MHz，MeOD-d4)δppm 8.92(1H，d，J＝1.51Hz)，8.73(1H，s)，8.64(1H，dd，J＝4.91，1.64Hz)，8.23(1H，dt，J＝8.06，1.89Hz)，7.56(1H，dd，J＝7.93，4.91Hz)，4.00(1H，d，J＝10.07Hz)，3.69(1H，d，J＝10.07Hz)，3.22(1H，d)，3.07(1H，d)，2.60-2.99(4H，m)，2.00-2.21(2H，m)，1.50-1.83(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝0.76；[M+H]+＝416.30。
实施例231
(R)-N-(6-(环戊基氧基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501602
步骤A：4-氯-6-(环戊基氧基)嘧啶
Figure BDA00001827380501603
在0℃，将环戊醇(2.25g，26.1mmol)于四氢呋喃(12ml)中的溶液滴加至氢化钠(1.31g，32.6mmol)于四氢呋喃(48ml)中的悬浮液中。将混合物在0℃搅拌30分钟，然后在0℃加入4，6-二氯嘧啶(3.6g，24.16mmol)于四氢呋喃(12ml)中的溶液。将反应混合物在环境温度搅拌3小时，然后倾倒至饱和氯化铵水溶液中，用乙酸乙酯萃取。有机层用水洗涤，用硫酸镁干燥，然后真空浓缩。橙色残余物经柱色谱纯化(10-40％乙酸乙酯/己烷)，得到4-氯-6-(环戊基氧基)嘧啶，为浅黄色油状物。将该物质直接用于下一反应。
步骤B：6-(环戊基氧基)嘧啶-4-胺
Figure BDA00001827380501611
6-(环戊基氧基)嘧啶-4-胺遵循实施例218步骤C的一般操作由4-氯-6-(环戊基氧基)嘧啶制备。MS(LC/MS)R.T.＝1.64；[M+H]+＝180.22。
步骤C：(R)-N-(6-(环戊基氧基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501612
(R)-N-(6-(环戊基氧基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例23步骤A-B的一般操作由6-(环戊基氧基)嘧啶-4-胺来制备。1H NMR(400MHz，MeOD-d4)δppm 8.37(1H，s)，6.16(1H，br.s.)，5.27(1H，br.s.)，3.98(1H，d，J＝10.32Hz)，3.67(1H，d，J＝10.32Hz)，3.15-3.24(1H，m)，3.02-3.12(1H，m)，2.71-2.97(4H，m)，2.01-2.14(2H，m)，1.87-2.00(3H，m)，1.49-1.84(8H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.96；[M+H]+＝344.34。
实施例232
(R)-N-(6-异丙氧基嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
(R)-N-(6-异丙氧基嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例231步骤A-C的一般操作由4，6-二氯嘧啶来制备。1H NMR(400MHz，MeOD-d4)δppm 8.37(1H，s)，6.13(1H，br.s.)，5.09-5.30(1H，m)，3.98(1H，d，J＝10.32Hz)，3.67(1H，d，J＝10.32Hz)，3.13-3.24(1H，m)，3.01-3.09(1H，m)，2.68-2.98(4H，m)，1.98-2.17(2H，m)，1.49-1.83(3H，m)，1.30(6H，d，J＝6.04Hz)。MS(LC/MS)R.T.＝1.36；[M+H]+＝318.24。
实施例233
(R)-N-(6-(2，2-二氟乙氧基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501621
(R)-N-(6-(2，2-二氟乙氧基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例231步骤A-C的一般操作由4，6-二氯嘧啶来制备。M.P.83-8℃。1H NMR(400MHz，MeOD-d4)δppm 8.42(1H，s)，5.93-6.37(2H，m)，4.52(2H，td，J＝13.98，3.78Hz)，3.99(1H，d，J＝10.32Hz)，3.68(1H，d，J＝10.32Hz)，3.19(1H，d)，3.07(1H，d)，2.67-2.97(4H，m)，1.99-2.19(2H，m)，1.51-1.82(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝0.99；[M+H]+＝340.26。
实施例234
(R)-N-(吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501622
(R)-N-(吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例19步骤C的一般操作由(R)-N-(6-溴吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(来自实施例155)制备。1H NMR(500MHz，MeOD-d4)δppm8.26(d，J＝4.88Hz，1H)，7.58-7.74(m，1H)，6.85-7.02(m，2H)，4.00(d，J＝10.07Hz，1H)，3.70(d，J＝10.07Hz，1H)，3.26-3.35(m，1H)，3.14-3.21(m，1H)，3.02(d，J＝8.24Hz，2H)，2.84-2.97(m，2H)，2.11-2.25(m，2H)，1.58-1.92(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.30；[M+H]+＝259.16。
实施例235
(R)-N-(吡啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501623
(R)-N-(吡啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例19步骤C的一般操作由(R)-N-(2-溴吡啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(来自实施例154)制备。1H NMR(500MHz，MeOD-d4)δppm8.31(d，J＝6.41Hz，2H)，7.39(d，J＝3.97Hz，2H)，4.01(d，J＝12.21Hz，1H)，3.70(d，J＝11.90Hz，1H)，3.37(s，1H)，3.29(s，1H)，3.18(d，J＝1.83Hz，1H)，3.15(d，J＝2.14Hz，1H)，2.86-3.09(m，3H)，2.02-2.20(m，1H)，1.59-1.88(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.22；[M+H]+＝259.16。
实施例236
(R)-N-(5-(苄氧基)噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501631
步骤A：5-(苄氧基)噻唑并[5，4-b]吡啶-2-胺
Figure BDA00001827380501632
将硫氰酸钾(12.42g，128mmol)悬浮在乙酸(45.0mL)中，并且冷却至0℃。加入6-(苄氧基)吡啶-3-胺(3.2g，15.98mmol)(根据WO2006/044707制备)。历时30分钟，滴加在乙酸(15mL)中的溴(2.55mL，49.5mmol)，在此期间反应混合物变得十分粘稠。使其缓慢温热至室温，并且搅拌过夜。
加入水(20ml)，并且将反应混合物加热至90℃，然后趁热过滤。保存滤液，将滤饼返回至反应烧瓶中，向其中加入额外40ml HOAc。将混合物再次加热至90℃，趁热过滤。将合并的滤液在冰浴中冷却，滴加NH4OH，直至pH＞8。过滤收集黄色沉淀物。将固体真空干燥1小时，得到5-(苄氧基)噻唑并[5，4-b]吡啶-2-胺(1.95g，7.58mmol，产率47.4％)，直接使用而没有进一步纯化。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 7.70(d，J＝8.78Hz，1H)7.48(d，J＝7.28Hz，2H)7.39(t，J＝7.28Hz，2H)7.30-7.36(m，1H)6.78(d，J＝8.78Hz，1H)5.39(s，2H)5.14(br.s.，2H)。
步骤B：5-(苄氧基)噻唑并[5，4-b ]吡啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380501641
向5-(苄氧基)噻唑并[5，4-b]吡啶-2-胺(800mg，3.11mmol)于DMF(3.1mL)中的悬浮液中，加入20.0M氢氧化钠(0.3mL，6.22mmol)。将混合物在室温搅拌10分钟，此时加入二硫化碳(0.47mL，7.77mmol)，然后将混合物搅拌10分钟。加入额外部分的20.0M氢氧化钠(0.3mL，6.22mmol)，再次将混合物搅拌10分钟。最后滴加碘甲烷(0.47mL，7.46mmol)。将混合物搅拌1小时，此时将其倾倒至水中，用EtOAc萃取(3x)。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并且真空浓缩。粗制的混合物经硅胶色谱纯化(2-20％EtOAc/CHCl3)，得到5-(苄氧基)噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(1.02g，产率91％)，为黄色结晶固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm8.02(d，J＝8.78Hz，1H)7.51(d，J＝7.28Hz，2H)7.38-7.45(m，2H)7.32-7.38(m，1H)6.89(d，J＝8.53Hz，1H)5.46(s，2H)2.65(s，6H)。
步骤C：(R)-N-(5-(苄氧基)噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
将5-(苄氧基)噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(500mg，1.38mmol)、(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(317mg，1.38mmol)和碳酸铯(1.0g，3.07mmol)于DMF(7mL)中的混合物加热至100℃，保持2小时。将反应混合物冷却至环境温度，倾倒至水中，然后用氯仿萃取(4x)。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并且真空浓缩。混合物经硅胶色谱纯化(2-20％[9∶1甲醇∶氢氧化铵]-氯仿)，得到(R)-N-(5-(苄氧基)噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(390mg，产率67％)。1HNMR(500MHz，CDCl3)δppm 9.18(br.s.，1H)7.76(d，J＝8.85Hz，1H)7.50(d，J＝7.32Hz，2H)7.41(t，J＝7.32Hz，2H)7.32-7.37(m，1H)5.42(s，2H)4.02(d，J＝9.46Hz，1H)3.68(d，J＝9.46Hz，1H)3.37-3.44(m，1H)2.75-3.06(m，5H)2.13-2.25(m，2H)1.73-1.82(m，1H)1.49-1.70(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.69；[M+H]+＝421.98。
实施例237
(R)-2-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)噻唑并[5，4-b]吡啶-5(4H)-酮
Figure BDA00001827380501651
(R)-N-(5-(苄氧基)噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(390mg，0.925mmol)溶于TFA中，然后使其在环境温度反应4小时，此时LCMS和TLC显示起始物质大部分被消耗。真空除去TFA，然后粗制的混合物经制备性HPLC纯化。将合并的产物级份真空浓缩，用乙醚研磨，得到(R)-2-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)噻唑并[5，4-b]吡啶-5(4H)-酮，TFA(164mg，0.368mmol，产率39.8％)。M.P.245(分解)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.99(br.s.，1H)9.05(br.s.，1H)7.81(d，J＝8.53Hz，1H)6.65(d，J＝8.78Hz，1H)3.96(d，J＝10.29Hz，1H)3.82(d，J＝10.54Hz，1H)3.63-3.78(m，2H)3.36-3.47(m，1H)3.16-3.34(m，3H)2.43(br.s.，1H)2.16(br.s.，1H)1.76-2.07(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.50；[M+H]+＝332.15。
实施例238
(R)-N-(6-(3-甲氧基苯基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501652
步骤A：6-(3-甲氧基苯基)嘧啶-4-胺
Figure BDA00001827380501653
将6-氯嘧啶-4-胺(0.324g，2.5mmol)、3-甲氧基苯基硼酸(0.475g，3.13mmol)、Na2CO3(0.795g，7.50mmol)和双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.035g，0.050mmol)的混合物悬浮于DME/EtOH/水(15∶2∶3mL)中，在微波合成器中于125℃加热20分钟，然后浓缩。残余物经硅胶色谱纯化(10-60％乙酸乙酯-己烷)，得到6-(3-甲氧基苯基)嘧啶-4-胺(0.35g，1.74mmol，产率70％)，为灰白色固体。LCMS R.T.＝1.28；[M+H]+＝201.98。
步骤B：4-异硫氰基-6-(3-甲氧基苯基)嘧啶
Figure BDA00001827380501661
在室温向1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.970g，4.17mmol)于二氯甲烷中的溶液中，加入6-(3-甲氧基苯基)嘧啶-4-胺(0.7g，3.48mmol)。将反应混合物在室温搅拌18小时。LC/MS显示期望的产物峰为主要峰。将深橙色的溶液浓缩，对残余物进行过滤。滤液经硅胶色谱纯化(0-10％乙酸乙酯-己烷)，得到4-异硫氰基-6-(3-甲氧基苯基)嘧啶(0.39g，4.31mmol，产率46％)，为黄色油状物。LCMS R.T.＝2.91；[M+H]+＝244.03。
步骤C：R)-N-(6-(3-甲氧基苯基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501662
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.363g，1.583mmol)加入Cs2CO3(1.289g，3.96mmol)和4-异硫氰基-6-(3-甲氧基苯基)嘧啶。将悬浮液在室温搅拌30分钟。然后加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(0.740mL，4.75mmol)，继续在室温将混合物搅拌18小时。将混合物浓缩，经硅胶色谱纯化(5-25％9∶1甲醇∶氢氧化铵-乙酸乙酯)，得到(R)-N-(6-(3-甲氧基苯基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.294g，0.788mmol，产率50％)，为浅黄色固体。M.P 80-5℃。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.77(1H，s)，7.47-7.58(2H，m)，7.39(1H，t)，7.20(1H，br.s.)，7.04(1H，dd)，4.05(1H，d)，3.85(3H，s)，3.74(1H，d)，3.23(1H，d)，3.10(1H，d)，2.71-3.00(4H，m)，2.03-2.22(2H，m)，1.53-1.85(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.58；[M+H]+＝366.15。
实施例239
(R)-N-(异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：3-异硫氰基异喹啉
Figure BDA00001827380501672
在室温，向1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.805g，3.47mmol)于二氯甲烷中的溶液中，加入异喹啉-3-胺(0.5g，3.47mmol)。将反应混合物在室温搅拌18小时。LC/MS显示期望产物峰为主要峰。将深橙色的溶液浓缩并且过滤。滤液经硅胶色谱纯化(0-40％乙酸乙酯-己烷)，得到4-异硫氰基-6-(3-甲氧基苯基)嘧啶(0.55g，2.96mmol，产率85％)，为白色固体。LCMS R.T.＝2.47；[M+H]+＝187.23。
步骤B：(R)-N-(异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501673
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.2g，0.873mmol)加入Cs2CO3(0.711g，2.182mmol)和3-异硫氰基异喹啉(0.163g，0.873mmol)。将悬浮液在室温搅拌30分钟。然后加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(0.408mL，2.62mmol)，并且将混合物在室温搅拌18小时。将混合物浓缩，并且经硅胶色谱纯化(5-25％[9∶1甲醇∶氢氧化铵]-乙酸乙酯)，得到(R)-N-(异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.16g，0.508mmol，产率58％)，为灰白色固体。M.P.196-200℃。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.00(1H，s)，7.92(1H，d)，7.71(1H，d)，7.59(1H，t)，7.20-7.45(2H，m)，3.96(1H，d)，3.65(1H，d)，3.22(1H，d)，3.08(1H，d)，2.66-3.00(4H，m)，2.05-2.23(2H，m)，1.50-1.86(3H，m)。R.T.＝1.37；[M+H]+＝309.31。
实施例240
(R)-N-(6-苯氧基嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501681
步骤A：6-苯氧基嘧啶-4-胺
Figure BDA00001827380501682
在55℃，将6-氯嘧啶-4-胺(3.00g，23.14mmol)加至钠(0.197g，8.57mmol)于苯酚(11.29g，120mmol)中的溶液中。将混合物在140℃加热2小时，然后在室温保持20小时。将反应混合物倾倒至于冰/水上的32％NaOH水溶液中，保持混合物温度低于20℃。混合物用氯仿萃取，有机萃取物经氯化钙干燥并且浓缩。残余物经硅胶色谱纯化(2-20％乙酸乙酯/己烷)，得到6-苯氧基嘧啶-4-胺(0.6g，3.21mmol，产率75％)，为白色固体。LCMS R.T.＝1.37；[M+H]+＝197.95。
步骤B：4-异硫氰基-6-苯氧基嘧啶
将6-苯氧基嘧啶-4-胺(0.288g，1.538mmol)和1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.357g，1.538mmol)于DCM中的混合物在室温搅拌18小时。浅橙色混合物经硅胶色谱纯化(5-35％乙酸乙酯-己烷)，得到4-异硫氰基-6-苯氧基嘧啶(0.55g，2.96mmol，产率85％)，为黄色油状物。LCMS R.T.＝2.78；[M+H]+＝229.94。
步骤C：(R)-N-(6-苯氧基嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501684
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.170g，0.742mmol)加入Cs2CO3(0.604g，1.854mmol)和4-异硫氰基-6-苯氧基嘧啶(0.17g，0.742mmol)。将悬浮液在室温搅拌30分钟。然后加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(0.347mL，2.225mmol)，将混合物继续在室温搅拌18小时。将混合物浓缩并且经硅胶色谱纯化(5-25％9∶1甲醇∶氢氧化铵-乙酸乙酯)，得到(R)-N-(6-苯氧基嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.21g，0.72mmol，产率48.2％)，为浅黄色固体。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 8.43(1H，s)，7.47(2H，t)，7.30(1H，t)，7.16(2H，d)，6.21(1H，br.s.)，4.03(1H，d)，3.72(1H，d)，3.22(1H，d)，3.11(1H，d)，2.73-2.99(4H，m)，2.00-2.18(2H，m)，1.54-1.88(3H，m)。LCMS R.T.＝1.46；[M+H]+＝352.19。
实施例241
(R)-N-(7-甲氧基喹喔啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501691
步骤A：N-(2，4-二甲氧基苄基)-7-甲氧基喹喔啉-2-胺
Figure BDA00001827380501692
将2-氯-7-甲氧基喹喔啉(0.51g，2.62mmol)(根据J.Chem.Soc.Perk Trans.1，2001，978-984制备)和(2，4-二甲氧基苯基)甲胺(1.181mL，7.86mmol)在DMSO(2.5mL)中于150℃微波处理30分钟。将其稀释至150mLEtOAc中，用100mL盐水萃取三次。粗产物经快速色谱在90g硅胶柱上纯化(用20-80％EtOAc/己烷以40mL/分钟的速度洗脱50分钟)，得到N-(2，4-二甲氧基苄基)-7-甲氧基喹喔啉-2-胺(795mg，2.443mmol，产率93％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.00(1H，s)，7.70(1H，d，J＝8.81Hz)，7.29(1H，d，J＝8.31Hz)，7.05(1H，d，J＝2.77Hz)，6.97(1H，dd，J＝9.06，2.77Hz)，6.47(1H，d，J＝2.27Hz)，6.43(1H，dd，J＝8.18，2.39Hz)，5.22(1H，t，J＝5.29Hz)，4.63(2H，d，J＝5.54Hz)，3.91(3H，s)，3.83(3H，s)，3.78(3H，s)
LCMS：RT＝1.91分钟，MH+＝326.15。
步骤B：7-甲氧基喹喔啉-2-胺2，2，2-三氟乙酸盐
将N-(2，4-二甲氧基苄基)-7-甲氧基喹喔啉-2-胺(0.79g，2.428mmol)在TFA(10mL，130mmol)/CH2Cl2(10mL)中于室温搅拌30分钟。在旋转蒸发器上除去溶剂。将饱和的NaHCO3水溶液(200mL)加至红色残余物中，析出黄色固体。将混合物用DCM充分萃取。有机层浓缩并且经真空干燥，得到7-甲氧基喹喔啉-2-胺2，2，2-三氟乙酸盐(0.70g，2.4mmol，产率99％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.10(1H，s)，7.63(1H，d，J＝9.07Hz)，6.95(1H，dd，J＝9.06，2.77Hz)，6.89(1H，d，J＝2.77Hz)，6.85(2H，br.s.)，3.84(3H，s)
LCMS：RT＝1.04分钟，MH+＝176.14。
步骤C：2-异硫氰基-7-甲氧基喹喔啉
Figure BDA00001827380501702
将7-甲氧基喹喔啉-2-胺2，2，2-三氟乙酸盐(578mg，2mmol)、三乙胺(335μL，2.400mmol)和1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(557mg，2.400mmol)的混合物在5mL DCM中搅拌24小时。直接将反应混合物在120g硅胶柱上使用0-25％EtOAc/己烷以35mL/分钟的速度洗脱25分钟，得到2-异硫氰基-7-甲氧基喹喔啉(84mg，0.387mmol，产率19％)。
LCMS：RT＝2.49分钟，MH+＝218.06。
步骤D：(R)-N-(7-甲氧基喹喔啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501703
(R)-N-(7-甲氧基喹喔啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺根据实施例23步骤B的方法合成。在120g硅胶柱上使用1-4％[9∶1MeOH/NH4OH]/CHCl3进行快速色谱纯化50分钟，得到24mg(产率17％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.73(1H，br.s.)，8.45(1H，s)，7.80(1H，d，J＝9.07Hz)，7.12(1H，dd，J＝9.06，2.77Hz)，7.03(1H，d，J＝2.52Hz)，4.02(1H，d，J＝9.32Hz)，3.90(3H，s)，3.67(1H，d，J＝9.32Hz)，3.36(1H，dd，J＝14.86，1.51Hz)，2.69-3.06(5H，m)，2.10-2.26(2H，m)，1.66-1.80(1H，m)，1.43-1.63(2H，m)
LCMS：RT＝0.835分钟，MH-＝338.2，MH+＝340.1。
实施例242
(R)-N-(6-甲基喹喔啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501711
步骤A：N-(2，4-二甲氧基苄基)-6-甲基喹喔啉-2-胺
Figure BDA00001827380501712
将2-氯-6-甲基喹喔啉(0.51g，2.86mmol)(根据J.Chem.Soc.1948，1310-1313制备)和(2，4-二甲氧基苯基)甲胺(1.29mL，8.57mmol)在DMSO(2.5mL)中于150℃微波处理30分钟。将其稀释至150mL EtOAc中，用100mL盐水萃取三次。粗产物经快速色谱于90g硅胶柱上纯化(使用20-60％EtOAc/己烷以40mL/分钟的速度洗脱50分钟)，得到N-(2，4-二甲氧基苄基)-6-甲基喹喔啉-2-胺(848mg，2.74mmol，产率96％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.12(1H，s)，7.60(1H，s)，7.59(1H，d，J＝5.79Hz)，7.38(1H，dd，J＝8.56，1.76Hz)，7.30(1H，d，J＝8.31Hz)，6.46(1H，d，J＝2.27Hz)，6.42(1H，dd，J＝8.18，2.39Hz)，5.20(1H，t，J＝5.41Hz)，4.62(2H，d，J＝5.54Hz)，3.83(3H，s)，3.77(3H，s)，2.46(3H，s)
LCMS：RT＝1.93分钟，MH+＝310.20。
步骤B：6-甲基喹喔啉-2-胺2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BDA00001827380501713
将N-(2，4-二甲氧基苄基)-6-甲基喹喔啉-2-胺(0.84g，2.72mmol)在TFA(10mL，130mmol)/CH2Cl2(10mL)中于室温搅拌30分钟。在旋转蒸发器上除去溶剂。将饱和的Na2CO3水溶液(200mL)加至红色残余物中，然后析出褐色固体。将混合物用DCM充分萃取。有机层用硫酸钠干燥，浓缩，然后经真空干燥，得到6-甲基喹喔啉-2-胺2，2，2-三氟乙酸盐(640mg，2.343mmol，产率86％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.24(1H，s)，7.55(1H，s)，7.34-7.45(2H，m)，6.82(2H，s)，2.41(3H，s)
LCMS：RT＝1.07分钟，MH+＝160.12。
步骤C：2-异硫氰基-6-甲基喹喔啉
Figure BDA00001827380501721
将6-甲基喹喔啉-2-胺2，2，2-三氟乙酸盐(546mg，2mmol)、三乙胺(243mg，2.400mmol)和1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(557mg，2.40mmol)的混合物在5mL DCM中搅拌4小时。直接将反应混合物在120g硅胶柱上使用0-25％EtOAc/己烷以35mL/分钟的速度洗脱25分钟，得到2-异硫氰基-6-甲基喹喔啉(153mg，0.760mmol，产率38％)。
LCMS：RT＝2.59分钟，MH+＝202.04
步骤D：(R)-N-(6-甲基喹喔啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
(R)-N-(6-甲基喹喔啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺根据实施例23步骤B的方法合成。在120g硅胶柱上使用1-4％[9∶1MeOH/NH4OH]/CHCl3进行快速色谱纯化50分钟，得到46mg(产率19％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.75(1H，br.s.)，8.57(1H，s)，7.71(1H，s)，7.60(1H，d，J＝8.56Hz)，7.42(1H，dd，J＝8.44，1.89Hz)，4.01(1H，d，J＝9.57Hz)，3.68(1H，d，J＝9.32Hz)，3.38(1H，dd，J＝14.86，1.01Hz)，2.73-3.08(5H，m)，2.50(3H，s)，2.16-2.26(1H，m)，2.14(1H，br.s.)，1.67-1.79(1H，m)，1.45-1.65(2H，m)。
LCMS：RT＝0.838分钟，MH-＝322.2，MH+＝324.2。
实施例243
(R)-N-(7-甲基喹喔啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501731
步骤A：N-(2，4-二甲氧基苄基)-7-甲基喹喔啉-2-胺
Figure BDA00001827380501732
将2-氯-7-甲基喹喔啉(0.51g，2.86mmol)(根据J.Chem.Soc.19481310-1313制备)和(2，4-二甲氧基苯基)甲胺(1.29mL，8.57mmol)在DMSO(2.5mL)中于150℃微波处理30分钟。将其稀释至150mL EtOAc中，用100mL盐水萃取三次。粗产物经快速色谱在90g硅胶柱上纯化(使用20-80％EtOAc/己烷以40mL/分钟的速度洗脱50分钟)，得到N-(2，4-二甲氧基苄基)-7-甲基喹喔啉-2-胺(860mg，2.78mmol，产率97％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.08(1H，s)，7.70(1H，d，J＝8.31Hz)，7.49(1H，s)，7.30(1H，d，J＝8.06Hz)，7.17(1H，dd，J＝8.31，2.01Hz)，6.47(1H，d，J＝2.52Hz)，6.42(1H，dd，J＝8.31，2.52Hz)，5.23(1H，t，J＝5.16Hz)，4.63(2H，d，J＝5.79Hz)，3.83(3H，s)，3.78(3H，s)，2.48(3H，s)。
LCMS：RT＝1.93分钟，MH+＝310.20。
步骤B：7-甲基喹喔啉-2-胺2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BDA00001827380501733
将N-(2，4-二甲氧基苄基)-7-甲基喹喔啉-2-胺(0.85g，2.75mmol)在TFA(10mL，130mmol)/CH2C12(10mL)中于室温搅拌30分钟。在旋转蒸发器上除去溶剂。将饱和的NaHCO3水溶液(200mL)加至红色残余物中，然后析出粉色固体。将混合物用DCM充分萃取。有机层用硫酸钠干燥，浓缩，真空干燥，得到7-甲基喹喔啉-2-胺2，2，2-三氟乙酸盐(640mg，2.34mmol，产率85％)。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.20(1H，s)，7.64(1H，d，J＝8.31Hz)，7.28(1H，s)，7.15(1H，dd，J＝8.31，1.76Hz)，6.89(2H，s)，2.42(3H，s)。
LCMS：RT＝1.07分钟，MH+＝160.12。
步骤C：2-异硫氰基-6-甲基喹喔啉
Figure BDA00001827380501741
将7-甲基喹喔啉-2-胺2，2，2-三氟乙酸盐(546mg，2mmol)78263-058-01、三乙胺(243mg，2.40mmol)和1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(557mg，2.40mmol)的混合物在5mL DCM中搅拌2小时。直接将反应混合物在120g硅胶柱上使用0-25％EtOAc/己烷以35mL/分钟的速度洗脱25分钟，得到2-异硫氰基-7-甲基喹喔啉(185mg，0.919mmol，产率46％)。
LCMS：RT＝2.58分钟，MH+＝202.04
步骤D：(R)-N-(7-甲基喹喔啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
(R)-N-(7-甲基喹喔啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺根据实施例23步骤B的方法合成。在120g硅胶柱上使用1-3％[9∶1MeOH/NH4OH]/CHCl3进行快速色谱纯化50分钟，得到22mg(产率7％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.80(1H，br.s.)，8.53(1H，s)，7.81(1H，d，J＝8.31Hz)，7.50(1H，s)，7.31(1H，dd，J＝8.56，1.76Hz)，4.01(1H，d，J＝9.57Hz)，3.66(1H，d，J＝9.32Hz)，3.36(1H，d，J＝14.86Hz)，2.70-3.04(5H，m)，2.50(3H，s)，2.15-2.24(1H，m)，2.13(1H，br.s.)，1.66-1.79(1H，m)，1.44-1.63(2H，m)
LCMS：RT＝8.67分钟，MH-＝322.6，MH+＝324.1。
实施例244
(R)-N-(6-(吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501743
步骤A：6-(吡啶-3-基)嘧啶-4-胺
Figure BDA00001827380501751
将6-氯嘧啶-4-胺(0.324g，2.5mmol)、吡啶-3-基硼酸(0.384g，3.13mmol)、Na2CO3(0.795g，7.50mmol)和双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.035g，0.050mmol)的混合物悬浮于DME/EtOH/水的混合物中。将混合物在微波合成器中于125℃加热20分钟，然后浓缩。残余物经硅胶色谱纯化(10-60％乙酸乙酯/己烷，然后5-25％9∶1甲醇∶氢氧化铵-乙酸乙酯)，得到6-(吡啶-3-基)嘧啶-4-胺(0.17g，0.987mmol，产率40％)，为灰白色固体。LCMS R.T.＝0.31；[M+H]+＝173.11。
步骤B：4-异硫氰基-6-(吡啶-3-基)嘧啶
Figure BDA00001827380501752
在室温，向1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.682g，2.94mmol)于二氯甲烷/N，N-二甲基甲酰胺中的溶液中，加入6-(吡啶-3-基)嘧啶-4-胺(0.337g，1.957mmol)。将混合物在60℃加热18小时。LC/MS显示期望的产物为主要峰。深橙色混合物经硅胶色谱纯化(1-40％乙酸乙酯-己烷)，得到4-异硫氰基-6-(吡啶-3-基)嘧啶(0.12g，0.56mmol，产率28.6％)，为橙色油状物。
步骤C：(R)-N-(6-(吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.13g，0.560mmol)加入Cs2CO3(0.46g，1.4mmol)和4-异硫氰基-6-(吡啶-3-基)嘧啶(0.12g，0.56mmol)。将悬浮液在室温搅拌30分钟。然后加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(0.26mL，1.7mmol)，并且将混合物在室温搅拌18小时。将混合物浓缩并且经硅胶色谱纯化(0-10％[9∶1甲醇∶氢氧化铵]-乙酸乙酯)，得到(R)-N-(6-(吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.182g，0.613mmol，产率35％)，为灰白色固体。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.13-9.21(1H，m)，8.82(1H，d)，8.63(1H，dd)，8.44(1H，dt)，7.56(1H，dd)，7.31(1H，s)，4.06(1H，d)，3.76(1H，d)，3.20-3.28(1H，m)，3.08-3.16(1H，m)，2.72-3.01(4H，m)，2.00-2.24(2H，m)，1.52-1.83(3H，m)。LCMS R.T.＝0.72；[M+H]+＝337.2。
实施例245
(R)-N-(2′-甲氧基-4，5′-联嘧啶-6-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501761
步骤A：2′-甲氧基-4，5′-联嘧啶-6-胺
将6-氯嘧啶-4-胺(0.35g，2.70mmol)、2-甲氧基嘧啶-5-基硼酸(0.520g，3.38mmol)、Na2CO3(0.859g，8.11mmol)和双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.038g，0.054mmol)悬浮在DME/EtOH/水(15∶2∶3mL)的混合物中。将混合物在微波合成器中于125℃加热20分钟，然后浓缩。残余物经硅胶色谱纯化(0-5％9∶1甲醇∶氢氧化铵-乙酸乙酯)，得到2′-甲氧基-4，5′-联嘧啶-6-胺(0.28g，1.378mmol，产率51％)，为灰白色固体。LCMS R.T.＝0.53；[M+H]+＝204.11。
步骤B：6-异硫氰基-2′-甲氧基-4，5′-联嘧啶
Figure BDA00001827380501763
在室温，向1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.832g，3.58mmol)于二氯甲烷/N，N-二甲基甲酰胺中的溶液中，加入2′-甲氧基-4，5′-联嘧啶-6-胺(0.56g，2.76mmol)。将橙色混合物于60℃加热18小时。LC/MS显示期望的产物为主要峰。深橙色混合物经硅胶色谱纯化(0-40％乙酸乙酯-己烷)，得到6-异硫氰基-2′-甲氧基-4，5′-联嘧啶(0.1g，0.408mmol，产率15％)，为橙色固体。LCMSR.T.＝2.29；[M+H]+＝246.03。
步骤C：(R)-N-(2′-甲氧基-4，5′-联嘧啶-6-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501771
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.093g，0.41mmol)加入Cs2CO3(0.33g，1mmol)和6-异硫氰基-2′-甲氧基-4，5′-联嘧啶(0.1g，0.41mmol)。将悬浮液在室温搅拌30分钟。然后加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(0.19mL，1.2mmol)，并且将混合物在室温搅拌18小时。将混合物浓缩并且经硅胶色谱纯化(5-25％[9∶1甲醇∶氢氧化铵]-乙酸乙酯)，得到(R)-N-(2′-甲氧基-4，5′-联嘧啶-6-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.072g，0.188mmol，产率46％)，为灰白色固体。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.19(2H，s)，8.80(1H，d)，7.24(1H，br.s.)，4.00-4.09(4H，m)，3.76(1H，d)，3.23(1H，s)，3.08-3.15(1H，m)，2.72-3.04(4H，m)，1.97-2.22(2H，m)，1.38-1.85(3H，m)。R.T.＝1.22；[M+H]+＝368.22。
实施例246
(R)-N-(6-(吡啶-4-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501772
步骤A：6-(吡啶-4-基)嘧啶-4-胺
将6-氯嘧啶-4-胺(0.324g，2.5mmol)、吡啶-4-基硼酸(0.384g，3.13mmol)、Na2CO3(0.795g，7.50mmol)和双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.035g，0.050mmol)悬浮在DME/EtOH/水(15∶2∶3mL)的混合物中。将混合物在微波合成器中于125℃加热20分钟，然后浓缩。残余物经硅胶色谱纯化(5-25％[9∶1甲醇∶氢氧化铵]-乙酸乙酯)，得到6-(吡啶-4-基)嘧啶-4-胺(0.15g，0.871mmol，产率35％)，为灰白色固体。LCMS R.T.＝0.30；[M+H]+＝173.11。
步骤B：4-异硫氰基-6-(吡啶-4-基)嘧啶
在室温，向1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.601g，2.59mmol)于二氯甲烷/N，N-二甲基甲酰胺中的溶液中，加入6-(吡啶-4-基)嘧啶-4-胺(0.297g，1.725mmol)。将橙色混合物于60℃加热18小时。LC/MS显示期望的产物为主要峰。深橙色混合物经硅胶色谱纯化(0-40％乙酸乙酯-己烷)，得到4-异硫氰基-6-(吡啶-4-基)嘧啶(0.055g，0.257mmol，产率15％)，为橙色固体。LCMS R.T.＝1.46；[M+H]+＝215.09。
步骤C：(R)-N-(6-(吡啶-4-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501782
向在N，N-二甲基甲酰胺(15mL)中的(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.059g，0.257mmol)加入Cs2CO3(0.209g，0.642mmol)和4-异硫氰基-6-(吡啶-4-基)嘧啶(0.055g，0.257mmol)。将悬浮液在室温搅拌30分钟。然后加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(0.12mL，0.77mmol)，并且将混合物在室温继续搅拌18小时。将混合物浓缩并且经硅胶色谱纯化(0-10％[9∶1甲醇∶氢氧化铵]-乙酸乙酯)，得到(R)-N-(6-(吡啶-4-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.014g，0.04mmol，产率16％)，为黄色膜状物。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.85(1H，d)，8.67(2H，dd)，8.04(2H，dd)，7.34(1H，br.s.)，4.06(1H，d)，3.76(1H，d)，3.23(1H，d)，3.10(1H，d)，2.70-2.99(4H，m)，2.01-2.22(2H，m)，1.53-1.86(3H，m)。LCMS R.T.＝0.42；[M+H]+＝337.14。
实施例247
(R)-6-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)-2-甲基吡啶-3-腈
Figure BDA00001827380501791
步骤A：6-异硫氰基-2-甲基吡啶-3-腈
Figure BDA00001827380501792
向在二氯甲烷(20mL)中的6-氨基-2-甲基吡啶-3-腈(0.41g，3.08mmol)加入1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.75g，3.23mmol)。将反应混合物在40℃搅拌3小时。将反应混合物冷却至室温。粗物质经色谱纯化(Biotage：25-100％乙酸乙酯/己烷)，得到6-异硫氰基-2-甲基吡啶-3-腈(0.52g，2.97mmol，产率96％)。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.36(d，J＝8.24Hz，1H)，7.39(d，J＝8.24Hz，1H)，2.65(s，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.09；[M+H]+＝176.0。
步骤B：(R)-6-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)-2-甲基吡啶-3-腈
在室温，向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的6-异硫氰基-2-甲基吡啶-3-腈(0.25g，1.43mmol)加入三乙胺(0.5mL，3.666mmol)和3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.33g，1.46mmol)。将反应混合物在70℃搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，然后真空浓缩。粗制的脲经色谱纯化(Biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)。然后产物用N，N-二甲基甲酰胺(20mL)和N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.67mL，4.28mmol)处理。将混合物加热至70℃，保持2小时。将反应混合物冷却至室温，然后真空浓缩，得到粗产物。粗产物经色谱纯化(Biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)，得到(R)-6-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)-2-甲基吡啶-3-腈(0.09g，0.3mmol，产率21％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 9.11(s，1H)，7.87(d，J＝7.93Hz，2H)，6.69(s，1H)，3.89(d，J＝10.38Hz，2H)，3.63(d，J＝10.38Hz，3H)，3.00(s，5H)，2.72-2.80(m，4H)，2.64-2.69(m，5H)，2.60(s，7H)，2.00(d，J＝2.14Hz，3H)，1.91(s，1H)，1.87(s，2H)，1.58(s，5H)，1.42-1.50(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.48；[M+H]+＝298.13。
实施例248
(R)-6-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)-2，4-二甲基吡啶-3-腈
Figure BDA00001827380501801
步骤A：6-异硫氰基-2，4-二甲基吡啶-3-腈
向在二氯甲烷(20mL)中的6-氨基-2，4-二甲基吡啶-3-腈(0.14g，0.95mmol)加入1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.23g，0.1mmol)。将反应混合物在40℃搅拌3小时。将反应混合物冷却至室温。粗物质经色谱纯化(Biotage：25-100％乙酸乙酯/己烷)，得到6-异硫氰基-2，4-二甲基吡啶-3-腈(0.15g，0.79mmol，产率83％)。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 7.37(s，1H)，2.63(s，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.40；[M+H]+＝190。
步骤B：(R)-6-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)-2，4-二甲基吡啶-3-腈
Figure BDA00001827380501803
在室温，向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的6-异硫氰基-2，4-二甲基吡啶-3-腈(0.09g，0.48mmol)加入三乙胺(0.17mL，1.19mmol)和3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.11g，0.49mmol)。将反应混合物在70℃搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，然后真空浓缩。粗制的脲经色谱纯化(Biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)。然后产物用N，N-二甲基甲酰胺(20mL)和N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.22mL，1.43mmol)处理。将混合物加热至70℃，保持2小时。将反应混合物冷却至室温，然后真空浓缩，得到粗产物。粗产物经色谱纯化(Biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)，得到(R)-6-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基氨基)-2，4-二甲基吡啶-3-腈(0.10g，0.32mmol，产率66％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 9.08(s，1H)，6.60(s，1H)，3.88(d，J＝10.38Hz，1H)，3.61(d，J＝10.38Hz，1H)，2.98(s，2H)，2.70-2.79(m，2H)，2.63-2.69(m，2H)，2.55-2.60(m，4H)，2.31-2.39(m，4H)，1.99(s，1H)，1.89(s，1H)，1.54-1.62(m，2H)，1.41-1.49(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.78；[M+H]+＝312.1。
实施例249
(R)-N-(6-苯基哒嗪-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：3-异硫氰基-6-苯基哒嗪
Figure BDA00001827380501812
3-异硫氰基-6-苯基哒嗪根据实施例23步骤B的方法合成。在120g硅胶柱上使用0-25％EtOAc/己烷以35mL/分钟的速度进行快速色谱纯化25分钟，得到420mg(产率49％)。
LCMS：RT＝2.17分钟，MH+＝214.06。
步骤B：(R)-N-(6-苯基哒嗪-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501813
(R)-N-(6-苯基哒嗪-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺根据实施例23步骤B的方法合成。在160g硅胶柱上使用1-4％[9∶1MeOH/NH4OH]/CHCl3以40mL/分钟的速度进行快速色谱纯化50分钟，得到67mg(R)-N-(6-苯基哒嗪-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(产率17％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.61(1H，br.s.)，7.95-7.99(2H，m)，7.74(1H，d，J＝9.32Hz)，7.39-7.52(3H，m)，7.22(1H，部分的d)，3.97(1H，d，J＝9.32Hz)，3.64(1H，d，J＝9.32Hz)，3.37(1H，dd，J＝14.73，1.38Hz)，2.69-3.06(5H，m)，2.16-2.26(1H，m)，2.14(1H，br.s.)，1.66-1.79(1H，m)，1.45-1.60(2H，m)
1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 7.87-8.02(3H，m)，7.44-7.55(3H，m)，7.13-7.29(1H，m)，4.05(1H，d，J＝9.82Hz)，3.74(1H，d，J＝10.07Hz)，3.17(2H，dd，J＝49.35，14.60Hz)，2.73-3.04(4H，m)，2.16(2H，br.s.)，1.55-1.85(3H，m)
LCMS：RT＝0.82分钟，MH-＝334.2，MH+＝336.2。
实施例250
(R)-N-(5-(甲基硫基)吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501821
步骤A：5-(甲基硫基)吡嗪-2-胺
Figure BDA00001827380501822
向5-溴吡嗪-2-胺(2g，11.49mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(20ml)中的溶液中，加入甲硫醇钠(1.611g，22.99mmol)。将混合物于100℃和氮气气氛中搅拌加热18小时，然后浓缩。残余物用水处理，接着将混合物用二氯甲烷萃取。合并的有机物经硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。残余物经硅胶色谱纯化(0-10％9∶1甲醇∶氢氧化铵-乙酸乙酯)，得到5-(甲基硫基)吡嗪-2-胺(0.15g，0.871mmol，产率35％)，为黄色固体。LCMS R.T.＝0.91；[M+H]+＝141.89。
步骤B：2-异硫氰基-5-(甲基硫基)吡嗪
Figure BDA00001827380501823
在室温，向1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(1.069g，4.60mmol)于二氯甲烷中的溶液中，加入5-(甲基硫基)吡嗪-2-胺(0.50g，3.54mmol)。将反应混合物在室温搅拌18小时。LC/MS显示期望的产物为主要峰。深橙色混合物经硅胶色谱纯化(0-40％乙酸乙酯-己烷)，得到2-异硫氰基-5-(甲基硫基)吡嗪(0.545g，0.257mmol，产率84％)，为橙色油状物。LCMS R.T.＝2.65；[M+H]+＝184.02。
步骤C：(R)-N-(5-(甲基硫基)吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501831
向在N，N-二甲基甲酰胺(15mL)中的(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.375g，1.637mmol)加入Cs2CO3(1.333g，4.09mmol)和2-异硫氰基-5-(甲基硫基)吡嗪(0.3g，1.637mmol)。将悬浮液在室温搅拌30分钟。然后加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(0.765mL，4.9mmol)，并且将混合物在室温继续搅拌18小时。将混合物浓缩并且经硅胶色谱纯化(5-25％9∶1甲醇∶氢氧化铵-乙酸乙酯)，得到(R)-N-(5-(甲基硫基)吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.014g，0.04mmol，产率16％)，为黄色固体。M.P.155-60℃。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.13(1H，d)，8.06(1H，s)，3.96(1H，d)，3.66(1H，d)，3.20(1H，d)，3.08(1H，d)，2.87-2.96(2H，m)，2.72-2.82(2H，m)，2.52(3H，s)，2.00-2.19(2H，m)，1.51-1.81(3H，m)。LCMS R.T.＝1.01；[M+H]+＝306.12。
实施例251
(R)-N-(5，6-二氯吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501832
步骤A：N-(5，6-二氯吡啶-2-基)特戊酰胺
Figure BDA00001827380501833
向N-(6-氯吡啶-2-基)特戊酰胺(根据J.Org.Chem 2005，70，1771合成)(1.02g，4.80mmol)于氯仿(25mL)中的溶液中，加入1-氯吡咯烷-2，5-二酮(0.62g，4.67mmol)，并且将混合物在油浴中回流3小时。使其冷却至室温过夜。对反应混合物进行真空蒸发，并且再次溶于DMF(15mL)中。再加入480mg 1-氯吡咯烷-2，5-二酮，将生成的溶液在95-100℃油浴中加热过夜，然后再次冷却至室温。真空除去溶剂，将残余物在水和乙酸乙酯之间分配。水相用乙酸乙酯洗涤两次，合并的有机相用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，并且进行真空蒸发。TLC(10％乙酸乙酯/己烷)显示Rf为0.6的粗点，以及Rf为0.4和0.2的较小的点。使物质经过Biotage柱(5-10％乙酸乙酯/己烷)，收集Rf为0.6的级份，得到790mg(66％)白色固体N-(5，6-二氯吡啶-2-基)特戊酰胺。1HNMR(500MHz，CDCl3)δppm 8.17(s，1H)，7.96(s，1H)，7.72(s，1H)，1.31(s，10H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.85；[M+H]+＝248.8。
步骤B：5，6-二氯吡啶-2-胺
Figure BDA00001827380501841
将N-(5，6-二氯吡啶-2-基)特戊酰胺(790mg，3.20mmol)、37％的盐酸(1.25mL)、水(1.25mL)和EtOH(3mL)的混合物在85-90℃的油浴中加热4小时。LCMS显示几乎完全转化为产物。将反应混合物冷却至室温，并且将反应混合物蒸发浓缩至小体积，然后转移至分液漏斗中，在分液漏斗中于碳酸钠水溶液和乙酸乙酯之间分配。分离各层，水相再次用乙酸乙酯洗涤，合并的有机相用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并且蒸发，得到白色固体。使该物质经过Biotage柱(20％乙酸乙酯/己烷)，收集主要成分。获得5，6-二氯吡啶-2-胺(0.49g，2.98mmol，93％)，为白色固体。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm7.44(d，J＝8.55Hz，1H)，6.36(d，J＝8.24Hz，1H)，4.58(s，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.28；[M+H]+＝164.8。
步骤C：5，6-二氯-2-异硫氰基吡啶
Figure BDA00001827380501842
向在二氯甲烷(25mL)中的5，6-二氯吡啶-2-胺(0.47g，2.88mmol)加入1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.68g，2.94mmol)。将反应混合物在40℃搅拌3小时，然后冷却至室温。粗物质经色谱纯化(Biotage：25-100％乙酸乙酯/己烷)，得到2，3-二氯-6-异硫氰基吡啶(0.48g，2.34mmol，产率81％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.26(d，J＝8.55Hz，1H)，7.47(d，J＝8.24Hz，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.83；[M+H]+＝204.8。
步骤D：(R)-N-(5，6-二氯吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
在室温，向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的2，3-二氯-6-异硫氰基吡啶(0.47g，2.29mmol)加入三乙胺(0.8mL，5.7mmol)和3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.54g，2.34mmol)。将反应混合物在70℃搅拌2小时，冷却至室温，然后真空浓缩。粗制的脲经色谱纯化(Biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)。然后产物用N，N-二甲基甲酰胺(20mL)和N，N′-二异丙基碳二亚胺(1.07mL，6.88mmol)处理。将反应混合物加热至70℃，保持2小时。将反应混合物冷却至室温，然后真空浓缩。粗产物经色谱纯化(Biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)，得到(R)-N-(5，6-二氯吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.36g，1.08mmol，产率47％)，为白色粉末。1HNMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.31(d，J＝1.22Hz，1H)，7.84(s，1H)，6.80(s，1H)，3.85(d，J＝10.07Hz，1H)，3.57(d，J＝10.38Hz，2H)，2.98(s，3H)，2.69-2.78(m，3H)，2.65(t，J＝7.78Hz，3H)，2.00(s，2H)，1.86(s，2H)，1.58(dd，J＝7.48，2.90Hz，2H)，1.56(s，1H)，1.41-1.49(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.81；[M+H]+＝327.1。
实施例252
(R)-N-(4，5-二氯吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501852
步骤A：4，5-二氯-2-异硫氰基吡啶
Figure BDA00001827380501853
向在二氯甲烷(25mL)中的4，5-二氯吡啶-2-胺(0.25g，1.53mmol)加入1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.36g，1.56mmol)。将反应混合物在40℃搅拌3小时，然后冷却至室温。粗物质经色谱纯化(Biotage：25-100％乙酸乙酯/己烷)，得到4，5-二氯-2-异硫氰基吡啶(0.26g，1.27mmol，产率83％)，为黄色粉末。产物直接用于下一步骤中。
步骤B：(R)-N-(4，5-二氯吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
在室温，向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的4，5-二氯-2-异硫氰基吡啶(0.25g，1.22mmol)加入三乙胺(0.43mL，3.05mmol)和(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.29g，1.24mmol)。将反应混合物在70℃搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，然后真空浓缩。粗制的脲经色谱纯化(Biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)。然后产物用N，N-二甲基甲酰胺(20mL)和N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.57mL，3.66mmol)处理。将反应混合物加热至70℃，保持2小时。将反应混合物冷却至室温，然后浓缩得到粗产物。粗产物经色谱纯化(Biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)，得到(R)-N-(4，5-二氯吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.09g，0.27mmol，产率22％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.81(s，1H)，8.32(d，J＝6.10Hz，1H)，7.03(s，1H)，3.83(d，J＝9.46Hz，1H)，3.57(d，J＝9.77Hz，1H)，2.98(s，2H)，2.71-2.79(m，2H)，2.65(t，J＝7.78Hz，2H)，1.99(s，1H)，1.86(s，1H)，1.53-1.61(m，2H)，1.41-1.49(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.78；[M+H]+＝327.0。
实施例253
(R)-N-(5-氯-4-甲基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501862
步骤A：5-氯-2-异硫氰基-4-甲基吡啶
Figure BDA00001827380501871
向在二氯甲烷(25mL)中的5-氯-4-甲基吡啶-2-胺(0.41g，2.88mmol)加入1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.70g，3.0mmol)。将反应混合物在40℃搅拌3小时。将反应混合物冷却至室温。粗制的混合物经色谱纯化(Biotage：25-100％乙酸乙酯/己烷)，得到5-氯-2-异硫氰基-4-甲基吡啶(0.45g，2.44mmol，产率85％)。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.45(s，1H)，7.47(s，1H)，2.37(s，3H)。LC/MS RT＝2.79；[M+H]+＝184.9。
步骤B：(R)-N-(5-氯-4-甲基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501872
在室温，向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的5-氯-2-异硫氰基-4-甲基吡啶(0.37g，2.0mmol)加入三乙胺(0.7mL，5.0mmol)和(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(来自实施例17的步骤B)(0.47g，2.0mmol)。将反应混合物在70℃搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，然后真空浓缩。粗制的脲经色谱纯化(Biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)。然后产物用N，N-二甲基甲酰胺(20mL)和N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.94mL，6.0mmol)处理。将反应混合物加热至70℃，保持2小时。将反应混合物冷却至室温，然后浓缩得到粗产物。粗产物经色谱纯化(Biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)，得到(R)-N-(5-氯-4-甲基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.19g，0.61mmol，产率30.3％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.79(s，1H)，8.08-8.15(m，2H)，6.78(s，1H)，3.82(d，J＝8.55Hz，2H)，3.55(d，J＝10.38Hz，2H)，2.93-3.02(m，5H)，2.71-2.80(m，5H)，2.66(t，J＝7.63Hz，4H)，2.23-2.29(m，7H)，1.94-2.02(m，2H)，1.92(s，1H)，1.86(s，2H)，1.53-1.62(m，5H)，1.41-1.49(m，J＝12.55，9.88，7.02，2.29Hz，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.72；[M+H]+＝307.1。
实施例254
(R)-N-(6-氯哒嗪-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：3-氯-6-异硫氰基哒嗪
Figure BDA00001827380501882
3-氯-6-异硫氰基哒嗪根据实施例218步骤D的方法合成。在120g硅胶柱上使用0-25％EtOAc/己烷以35mL/分钟的速度进行快速色谱纯化25分钟，得到213mg(产率31％)。
LCMS：RT＝1.25分钟，MH+＝172.00。
步骤B：(R)-N-(6-氯哒嗪-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501883
(R)-N-(6-氯哒嗪-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺根据实施例218步骤E的方法合成。在160g硅胶柱上使用1-3％[9∶1MeOH/NH4OH]/CHCl3以40mL/分钟的速度进行快速色谱纯化50分钟，得到29mg(产率8％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.27(1H，br.s.)，7.28(1H，d，J＝9.07Hz)，7.10(1H，d，J＝9.07Hz)，3.95(1H，d，J＝9.57Hz)，3.62(1H，d，J＝9.57Hz)，3.34(1H，dd，J＝14.98，1.64Hz)，2.67-3.04(5H，m)，2.14-2.21(1H，m)，2.12(1H，br.s.)，1.65-1.79(1H，m)，1.45-1.61(2H，m)。
LCMS：RT＝0.62分钟，MH-＝292.1，MH+＝294.1。
实施例255
(R)-N-(6-溴哒嗪-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：3-溴-6-异硫氰基哒嗪
Figure BDA00001827380501891
3-溴-6-异硫氰基哒嗪根据实施例218步骤D的方法合成。在120g硅胶柱上使用0-25％EtOAc/己烷以35mL/分钟的速度进行快速色谱纯化25分钟，得到364mg(产率42％)。
LCMS：RT＝1.34分钟，MH+＝215.92。
步骤B：(R)-N-(6-溴哒嗪-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501892
(R)-N-(6-溴哒嗪-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺根据实施例218步骤E的方法合成。在160g硅胶柱上使用1-3％[9∶1MeOH/NH4OH]/CHCl3以40mL/分钟的速度进行快速色谱纯化50分钟，得到211mg(产率37％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.23(1H，br.s.)，7.37(1H，d，J＝9.07Hz)，6.97(1H，d，J＝9.07Hz)，3.92(1H，d，J＝9.57Hz)，3.59(1H，d，J＝9.82Hz)，3.29(1H，dd，J＝14.98，1.64Hz)，2.63-2.99(5H，m)，2.04-2.19(2H，m)，1.59-1.74(1H，m)，1.39-1.58(2H，m)
LCMS：RT＝0.64分钟，MH-336.1，MH+338.0。
实施例256
(R)-N-(6-(4-氯苯基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：6-(4-氯苯基)嘧啶-4-胺
Figure BDA00001827380501901
将6-氯嘧啶-4-胺(0.324g，2.5mmol)、4-氯苯基硼酸(0.489g，3.13mmol)、Na2CO3(0.795g，7.50mmol)和双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.035g，0.050mmol)的混合物悬浮于DME/EtOH/水(15∶2∶3mL)的混合物中。将混合物在微波合成器中于125℃加热20分钟，然后浓缩。残余物经硅胶色谱纯化(2-15％9∶1甲醇∶氢氧化铵-乙酸乙酯)，得到6-(4-氯苯基)嘧啶-4-胺(0.3g，0.871mmol，产率58.4％)，为灰白色固体。LCMS R.T.＝1.42；[M+2H]+＝207.91。
步骤B：4-(4-氯苯基)-6-异硫氰基嘧啶
Figure BDA00001827380501902
在室温，向1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.666g，2.87mmol)于二氯甲烷/N，N-二甲基甲酰胺中的亮橙色溶液中，加入6-(4-氯苯基)嘧啶-4-胺(0.59g，2.87mmol)。将橙色混合物于60℃加热18小时。LC/MS显示期望的产物峰为主要峰。深橙色混合物经硅胶色谱纯化(0-40％乙酸乙酯-己烷)，得到4-(4-氯苯基)-6-异硫氰基嘧啶(0.322g，1.300mmol，产率45％)，为橙色油状物。LCMS R.T.＝2.82；[M]+＝248.03。
步骤C：(R)-N-(6-(4-氯苯基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501903
向在N，N-二甲基甲酰胺(15mL)中的(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.298g，1.300mmol)加入Cs2CO3(1.059g，3.25mmol)和4-(4-氯苯基)-6-异硫氰基嘧啶(0.322g，1.300mmol)。将悬浮液在室温搅拌30分钟。然后加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(0.608mL，3.90mmol)，并且将混合物在室温搅拌18小时。将混合物浓缩并且经硅胶色谱纯化(5-25％9∶1甲醇∶氢氧化铵-乙酸乙酯)，得到(R)-N-(6-(4-氯苯基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.104g，0.276mmol，产率21％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.54(1H，br.s.)，8.83(1H，d)，7.89-8.04(2H，m)，7.41-7.54(2H，m)，7.33(1H，br.s.)，4.02(1H，d)，3.71(1H，d)，3.42(1H，d)，2.73-3.15(5H，m)，2.10-2.31(2H，m)，1.46-1.89(3H，m)。LCMS R.T.＝1.92；[M]+＝370.35。
实施例257
(R)-N-(6-(3-氯苯基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：6-(3-氯苯基)嘧啶-4-胺
Figure BDA00001827380501912
将6-氯嘧啶-4-胺(0.324g，2.5mmol)、3-氯苯基硼酸(0.489g，3.13mmol)、Na2CO3(0.795g，7.50mmol)和双(三苯基膦)二氯化钯(II)(0.035g，0.050mmol)的混合物悬浮于DME/EtOH/水(15∶2∶3mL)混合物中。将混合物在微波合成器中于125℃加热20分钟，然后浓缩。残余物经硅胶色谱纯化(30-70％乙酸乙酯/己烷)，得到：6-(3-氯苯基)嘧啶-4-胺(0.47g，2.286mmol，产率91％)，为黄色固体。LCMS R.T.＝1.45；[M+2H]+＝208.05。
步骤B：4-(3-氯苯基)-6-异硫氰基嘧啶
Figure BDA00001827380501913
在室温，向1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.486g，2.091mmol)于二氯甲烷/N，N-二甲基甲酰胺中的亮橙色溶液中，加入6-(3-氯苯基)嘧啶-4-胺(0.43g，2.091mmol)。将橙色混合物于60℃加热18小时。LC/MS显示期望的产物峰为主要峰。深橙色混合物经硅胶色谱纯化(0-40％乙酸乙酯-己烷)，得到4-(3-氯苯基)-6-异硫氰基嘧啶(0.12g，0.484mmol，产率23％)，为橙色油状物。LCMS R.T.＝2.15；[M]+＝248.31。
步骤C：(R)-N-(6-(3-氯苯基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
向在N，N-二甲基甲酰胺(15mL)中的(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.111g，0.484mmol)加入Cs2CO3(0.395g，1.211mmol)和4-(3-氯苯基)-6-异硫氰基嘧啶(0.12g，0.484mmol)。将悬浮液在室温搅拌30分钟。然后加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(0.226mL，1.453mmol)，并且将混合物在室温继续搅拌18小时。将混合物浓缩并且经硅胶色谱纯化(5-25％，然后，2-10％9∶1甲醇∶氢氧化铵-乙酸乙酯)，得到(R)-N-(6-(3-氯苯基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.086g，0.221mmol，产率46％)，为黄色固体。1HNMR(400MHz，MeOD)δppm 8.82(1H，d)，8.05(1H，d)，7.93(1H，ddd)，7.43-7.52(2H，m)，7.35(1H，br.s.)，4.13(1H，d)，3.93(1H，d)，3.63-3.81(2H，m)，3.42-3.53(1H，m)，3.30-3.40(3H，m)，2.46(1H，d)，2.26-2.40(1H，m)，1.88-2.16(3H，m)。LCMS R.T.＝1.90；[M]+＝370.28。
实施例258
(R)-N-(5-甲基-1，3，4-噁二唑-2-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501922
步骤A：5-甲基-1，3，4-噁二唑-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380501931
历时10分钟，向5-甲基-1，3，4-噁二唑-2-胺(1.92g，20mmol)于DMF(10ml)中的溶液中，缓慢加入NaOH(20M，2ml)、CS2(3ml)、NaOH(20M，2ml)和碘甲烷(3ml)。将混合物在室温搅拌1小时，然后倾倒至20ml水中。过滤出析出的固体，用水洗涤，干燥，得到期望的产物5-甲基-1，3，4-噁二唑-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯，为白色固体(1.45g，35.7％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm2.63(s，6H)，2.50(s，3H)。LCMSR.T.1.66分钟；[M+H]＝203.91。
步骤B：(R)-N-(5-甲基-1，3，4-噁二唑-2-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501932
将5-甲基-1，3，4-噁二唑-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(260mg，1.28mmol)、(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(200mg，1.28mmol)和碳酸铯(876mg，2.69mmol)于DMF(5ml)中的混合物在室温搅拌过夜。将混合物浓缩，并且经Biotage硅胶柱纯化(100％乙酸乙酯，然后10-35％9∶1甲醇∶氢氧化铵-氯仿)，得到期望的产物(R)-N-(5-甲基-1，3，4-噁二唑-2-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺(192mg，54.1％)。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 4.05(d，1H)，3.74(d，1H)，3.25(d，1H)，3.15(d，1H)，2.94(m，2H)，2.85(m，2H)，2.43(s，3H)，2.19(m，1H)，2.10(m，1H)，1.6-1.8(m，3H)。MS(LCMS)[M+H]＝264.05.R.T.0.16分钟。
实施例259
(R)-N-(3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501933
步骤A：3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380501941
历时10分钟，向3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-胺(2.3g，20mmol)于DMF(10ml)中的溶液中，缓慢加入NaOH(20M，2ml)、CS2(3ml)、NaOH(20M，2ml)和碘甲烷(3ml)。将混合物在室温搅拌1小时，然后倾倒至20ml水中。过滤出析出的固体，用水洗涤，然后干燥，得到不纯的3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基二硫代亚氨碳酸二甲酯黄色固体(2.3g，52.5％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm2.67(s)，2.62(s)。MS[M+H]＝219.85。
步骤B：(R)-N-(3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501942
将3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(281mg，1.28mmol)、(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(200mg，1.28mmol)和碳酸铯(876mg，2.69mmol)于DMF(5ml)中混合物在室温搅拌过夜。将混合物浓缩，并且经Biotage硅胶柱纯化(100％乙酸乙酯，然后10-35％9∶1甲醇∶氢氧化铵-氯仿)，得到期望的产物(R)-N-(3-甲基-1，2，4-噻二唑-5-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺(147.8mg，40.5％)。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm4.01-3.99(d，1H)，3.72-3.70(d，1H)，3.27(d，1H)，3.16(d，1H)，3.01-2.9(m，2H)，2.86-2.83(m，2H)，2.43(s，3H)，2.21-2.0(m，2H)，1.81-1.75(m，1H)，1.75-1.70(m，2H)。MS(LCMS)[M+H]＝279.99；R.T.＝0.2分钟。
实施例260
(R)-N-(3-甲基-1，2，4-噁二唑-5-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501951
 步骤A：3-甲基-1，2，4-噁二唑-5-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380501952
 历时10分钟，向3-甲基-1，2，4-噁二唑-5-胺(490mg，4.94mmol)于DMF(5ml)中的溶液中，缓慢加入NaOH(20M，0.5ml)、CS2(1ml)、NaOH(20M，0.5ml)和碘甲烷(1ml)。将混合物在室温搅拌1小时。混合物变得粘稠，加入20ml水。过滤出固体，用水洗涤，然后干燥得到不纯的3-甲基-1，2，4-噁二唑-5-基二硫代亚氨碳酸二甲酯，为黄色固体(770mg，77％)。MS(LCMS)[M+H]＝203.91；R.T.＝1.84分钟。产物直接用于下一步骤中。
步骤B：(R)-N-(3-甲基-1，2，4-噁二唑-5-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501953
将3-甲基-1，2，4-噁二唑-5-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(280mg，1.37mmol)、(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(215mg，1.37mmol)和碳酸铯(942mg，2.89mmol)于DMF(5ml)中的混合物在室温搅拌过夜。将混合物浓缩，并且经Biotage硅胶柱纯化(100％乙酸乙酯，然后10-35％9∶1甲醇∶氢氧化铵-氯仿)，得到期望的产物(R)-N-(3-甲基-1，2，4-噁二唑-5-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺(198mg，51.9％)。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 4.1-4.0(d，1H)，3.8-3.7(d，1H)，3.4-3.2(d，1H)，3.2-3.1(d，1H)，3.0-2.9(m，2H)，2.9-2.8(m，2H)，2.27(s，3H)，2.2(m，1H)，2.2-2.0(m，1H)，1.9-1.6(m，3H)。MS(LCMS)[M+H]＝264.05；R.T.＝0.26分钟。
实施例261
(R)-N-(6-(甲基硫基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501961
步骤A：6-氯嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
历时15分钟的期限，向6-氯嘧啶-4-胺(1.295g，10mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(12mL)中的溶液中，滴加NaOH(1mL，20.00mmol，20M)、CS2(1.5mL，24.88mmol)、NaOH(1mL，20.00mmol，20M)和碘甲烷(1.5mL，23.99mmol)。继续搅拌1.5小时，然后将混合物倾倒至水中。分离出橙色固体，用水洗涤，干燥，从甲醇中重结晶，得到6-氯嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(0.966g，4.13mmol，产率41.3％)，为黄色固体。LCMS R.T.＝2.39；[M+H]+＝234.08。
步骤B：(R)-N-(6-(甲基硫基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501963
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.9g，3.93mmol)加入Cs2CO3(2.69g，8.25mmol)和6-氯嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(0.964g，4.12mmol)。将悬浮液在室温搅拌18小时，然后在100℃加热3小时。将混合物浓缩并且经硅胶色谱纯化(5-15％9∶1甲醇∶氢氧化铵-乙酸乙酯)，得到(R)-N-(6-(甲基硫基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.21g，0.72mmol，产率48.2％)，为浅黄色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.43(1H，br.s.)，8.55(1H，d)，6.78(1H，br.s.)，3.98(1H，d)，3.64(1H，d)，3.37(1H，dd)，2.72-3.06(5H，m)，2.51(3H，s)，2.08-2.24(2H，m)，1.69-1.81(1H，m)，1.41-1.64(2H，m)。LCMS R.T.＝0.93；[M+H]+＝306.29。
实施例262
(R)-N-([1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-3-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501971
步骤A：二(1H-咪唑-1-基)甲亚胺
向1H-咪唑(42g，617mmol)于二氯甲烷(1L)中的溶液中，加入溴化氰(22.5，212mmol)，并且将混合物加热回流30分钟，使其冷却至室温，过滤出白色固体。将滤液浓缩至100ml，在冷藏器中保存3天。过滤出析出的固体，得到8g二(1H-咪唑-1-基)甲亚胺(49.6mmol，8％)。1H NMR(500MHz，DMSO)δppm 8.09(s，1H)，7.55(s，1H)，7.13(s，1H)。
步骤B：[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-3-胺
Figure BDA00001827380501973
向2-肼基吡啶(5.2g，47.6mmol)于THF(70ml)中的溶液中，加入二(1H-咪唑-1-基)甲亚胺(7.8g，48.4mmol)。将混合物加热回流过夜。对粗制的混合物进行蒸发，并且经Biotage硅胶柱纯化(0-25％，甲醇-二氯甲烷)，收集紫色斑点[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-3-胺(4.7g，35mmol，73.5％)。1H NMR(500MHz，DMSO)δppm 8.05-8.0(m，1H)，7.44-7.40(m，1H)，7.08-7.0(m，1H)，6.74-6.70(m，1H)，6.35(s，2H)。MS(LCMS)[M+H]＝134.98；R.T.＝0.1分钟。
步骤C：[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-3-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380501974
向[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-3-胺(300mg，2.24mmol)于DMF(5ml)中的溶液中，历时10分钟缓慢加入NaOH(20M，0.25ml)、CS2(0.5ml)、NaOH(20M，0.25ml)和碘甲烷(0.5ml)。将混合物在室温搅拌1小时，然后将10ml水加至反应混合物中。过滤出析出的固体，用水(100ml)洗涤，干燥得到230mg[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-3-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(0.96mmol，43.1％)，为白色固体。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 8.17(d，1H)，7.7(d，1H)，7.24-7.22(t，1H)，6.84-6.80(t，1H)，2.71-2.68(d，6H)。MS(LCMS)[M+H]＝238.94；R.T.＝1.26分钟。
步骤D：(R)-N-([1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-3-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501981
将[1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-3-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(120mg，0.50mmol)、(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(120mg，0.76mmol)和碳酸铯(492mg，1.5mmol)于DMF(5ml)中的混合物在70℃加热6小时。将混合物浓缩，并且经Biotage硅胶柱纯化(100％乙酸乙酯，然后10-35％9∶1甲醇∶氢氧化铵-氯仿)，得到期望的产物(R)-N-([1，2，4]三唑并[4，3-a]吡啶-3-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺(97.2mg，61.5％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 8.2-8.1(d，1H)，7.6-7.5(d，1H)，7.2-7.1(t，1H)，6.7-6.6(t，1H)，4.1-4.0(d，1H)，3.7-3.6(d，1H)，3.5-3.4(m，1H)，3.1-2.7(m，5H)，2.4-2.2(m，2H)，1.8-1.7(m，1H)，1.7-1.5(m，2H)。MS(LCMS)[M+H]＝299.3；R.T.＝1.22分钟。
实施例263
(R)-N-(6-溴噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：6-溴噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
向6-溴噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-胺(700mg，3.03mmol)于DMF(3mL)中的悬浮液中，加入16.0M氢氧化钠(400μL，6.40mmol)。将该混合物在室温搅拌10分钟，此时加入二硫化碳(450μL，7.57mmol)，并且将所生成的赤褐色混合物搅拌10分钟。加入额外的16.0M氢氧化钠(400μL，6.40mmol)部分，将混合物再次搅拌10分钟。最后，滴加碘甲烷(450μL，7.27mmol)。将混合物搅拌5分钟，此时形成大量黄色析出物。将混合物倾倒至水中，过滤收集固体，得到6-溴噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(680mg，产率67％)，为黄色固体，其具有足够纯度以致于无需进一步纯化就使用。1HNMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.63(s，1H)2.68(s，6H)。
步骤B：(R)-N-(6-溴噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380501992
将6-溴噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(300mg，0.895mmol)、(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(210mg，0.895mmol)和碳酸铯(600mg，1.79mmol)于乙腈(25mL)中的混合物于开口烧瓶中在100℃油浴上加热2小时，在整个过程中用氮气鼓泡通过溶液，以有助于除去甲硫醇。在2小时之后，TLC显示反应完成，由此将混合物冷却至环境温度，用水稀释，并且真空浓缩。混合物用氯仿萃取(4x)。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，然后将粗制的残余物经硅胶色谱纯化(2-40％9∶1甲醇∶氢氧化铵-氯仿)。合并产物级份，并且真空浓缩，得到(R)-N-(6-溴噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(200mg，产率57％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.39(br.s.，1H)8.48(s，1H)4.05(d，J＝9.79Hz，1H)3.72(d，J＝9.79Hz，1H)3.42(dd，J＝15.06，1.76Hz，1H)2.73-3.08(m，5H)2.10-2.22(m，2H)1.73-1.84(m，J＝14.09，9.94，4.17，4.17Hz，1H)1.52-1.65(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.29；[M+H]+＝394.99。
实施例264
(R)-N-(6-(甲基硫基)噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
将6-溴噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(来自实施例263的步骤A)(100mg，0.298mmol)、(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(68mg，0.298mmol)和碳酸铯(100mg，0.60mmol)于DMF(1.5mL)中的混合物置于1打兰小瓶中，并且在100℃油浴上加热1小时，此时加入甲硫醇钠(100mg，1.43mmol)，并且将混合物加热过夜。将混合物冷却至环境温度，然后倾倒至水(20mL)中，过滤收集生成的固体，然后经硅胶色谱纯化(2-40％9∶1甲醇∶氢氧化铵-氯仿)。合并产物级份，并且真空浓缩，得到(R)-N-(6-(甲基硫基)噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(52mg，产率46％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 9.39(br.s.，1H)8.31(s，1H)4.03(d，J＝9.77Hz，1H)3.70(d，J＝9.77Hz，1H)3.41(dd，J＝14.95，1.83Hz，1H)2.73-3.10(m，5H)2.63(s，3H)2.10-2.25(m，2H)1.47-1.86(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.04；[M+H]+＝363.04。
实施例265
(R)-N-(5-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502002
步骤A：5-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-胺
Figure BDA00001827380502003
将5-氯噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酸乙酯(250mg，0.966mmol)悬浮于MeOH(10mL)中，加入25％(w/w)甲醇钠于甲醇中的溶液(10mL，46.3mmol)。将所生成的溶液回流过夜，冷却至环境温度，倾倒至等体积水中，用氯仿(4x)萃取。大量化合物仍然存在于水相中，因此将水相浓缩成残余物，然后溶于少量1N HCl中(但不足以使得所生成的溶液成为酸性)，接着再次用EtOAc(5x)萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并且真空浓缩。由此获得5-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-胺(144mg，0.790mmol，产率82％)，为白色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.43(s，1H)7.81(s，2H)3.90(s，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.73；[M+H]+＝183.03。
步骤B：5-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502011
向5-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-胺(911mg，5.00mmol)于DMF(5mL)中的悬浮液中，加入20.0M氢氧化钠(500μL，10.00mmol)。将混合物在室温搅拌10分钟，此时加入二硫化碳(750μL，12.50mmol)，并且将所生成的赤褐色混合物搅拌10分钟。加入额外部分的20.0M氢氧化钠(500μL，10.00mmol)，再次将混合物搅拌10分钟。最后滴加碘甲烷(750μL，12.00mmol)。将混合物搅拌5分钟，此时形成大量黄色析出物。将混合物倾倒至水中，过滤收集固体，得到黄色固体，将其经硅胶色谱(2-20％EtOAc/CHCl3)进一步纯化，得到5-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(380mg，产率27％)。
1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.90(s，1H)4.09(s，3H)2.66(s，6H)。
步骤C：(R)-N-(5-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
将5-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(100mg，0.349mmol)、(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(80mg，0.349mmol)和碳酸铯(228mg，0.698mmol)于DMF(1.7mL)中的混合物加热至100℃，保持2小时。反应混合物冷却至环境温度，然后倾倒至水中，过滤收集固体，得到(R)-N-(5-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(78mg，产率64％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 9.12(br.s.，1H)8.63(s，1H)3.95-4.18(m，4H)3.71(d，J＝9.77Hz，1H)3.41(d，J＝15.26Hz，1H)2.74-3.10(m，5H)2.11-2.27(m，2H)1.71-1.86(m，1H)1.50-1.70(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.66；[M+H]+＝347.0。
实施例266
(R)-N-(5-乙基-1，3，4-噁二唑-2-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502021
步骤A：5-乙基-1，3，4-噁二唑-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502022
历时10分钟，向5-乙基-1，3，4-噁二唑-2-胺(2.26g，20mmol)于DMF(10ml)中的溶液中，缓慢加入NaOH(20M，2ml)、CS2(3ml)、NaOH(20M，2ml)和碘甲烷(3ml)。将混合物在室温搅拌2小时，然后倾倒至30ml水中。过滤出所析出的黄色固体，用水洗涤，干燥，得到期望的产物5-乙基-1，3，4-噁二唑-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯，为白色固体(2.6g，59.8％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 2.86-2.83(q，2H)，2.63(s，6H)，1.3901.35(t，3H)。MS(LCMS)[M+H]＝217.95；R.T.＝1.93分钟。
步骤B：(R)-N-(5-乙基-1，3，4-噁二唑-2-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺
将5-乙基-1，3，4-噁二唑-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(327mg，1.5mmol)、(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(235mg，1.5mmol)和碳酸铯(1000mg，3.16mmol)于DMF(10ml)中的混合物在室温搅拌过夜。将混合物浓缩，并且经Biotage硅胶柱纯化(100％乙酸乙酯，然后10-35％9∶1甲醇∶氢氧化铵-氯仿)，得到期望的产物(R)-N-(5-乙基-1，3，4-噁二唑-2-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺(290mg，66％)。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 4.05(d，1H)，3.74(d，1H)，3.3-3.2(d，1H)，3.2-3.1(d，1H)，3.0-2.9(m，2H)，2.9-2.8(m，5H)，2.2(s，1H)，2.15-2.0(m，1H)，1.9-1.6(m，3H)，1.4-1.3(t，3H)。(m，2H)。MS(LCMS)[M+H]＝278.09；R.T.＝0.48分钟。
实施例267
(R)-N-(3，5-二氯吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502031
步骤A：3，5-二氯-2-异硫氰基吡啶
Figure BDA00001827380502032
向在二氯甲烷(25mL)中的3，5-二氯吡啶-2-胺(0.36g，2.209mmol)加入1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.523g，2.253mmol)。将反应混合物在40℃搅拌3小时。将反应混合物冷却至室温，然后粗物质经色谱纯化(Biotage：25-100％乙酸乙酯/己烷)，得到3，5-二氯-2-异硫氰基吡啶(0.4g，1.951mmol，产率88％)。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.50(t，J＝2.59Hz，1H)，8.45(t，J＝2.59Hz，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.07；[M+H]+＝204.8。
步骤B：(R)-N-(3，5-二氯吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502033
在室温，向在N，N-二甲基甲酰胺(10mL)中的3，5-二氯-2-异硫氰基吡啶(0.11g，0.55mmol)加入Et3N(0.17mL，1.21mmol)和(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.13g，0.56mmol)。将反应混合物在70℃搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，然后真空浓缩。粗制的脲经色谱纯化(Biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)。然后产物用N，N-二甲基甲酰胺(10mL)和N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.26mL，1.65mmol)处理。将反应混合物加热至70℃，保持2小时。将反应混合物冷却至室温，然后真空浓缩，得到粗产物。粗产物经色谱纯化(Biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)，得到(R)-N-(3，5-二氯吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.08g，0.24mmol，产率44％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.91(s，1H)，8.11-8.17(m，1H)，7.97(d，J＝2.44Hz，1H)，3.84(d，J＝9.77Hz，1H)，3.59(d，J＝9.77Hz，1H)，2.95-3.04(m，2H)，2.72-2.81(m，2H)，2.66(t，J＝7.63Hz，2H)，2.01(s，1H)，1.89(s，1H)，1.54-1.62(m，2H)，1.42-1.50(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.78；[M+]+＝326.1。
实施例268
(R)-N-(5-氯噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502041
步骤A：5-氯噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502042
向5-氯噻唑并[5，4-b]吡啶-2-胺(930mg，5.00mmol)于DMF(5mL)中的悬浮液中，加入20.0M氢氧化钠(500μL，10.00mmol)。将混合物在室温搅拌10分钟，此时加入二硫化碳(750μL，12.50mmol)，然后将混合物搅拌10分钟。加入额外部分的20.0M氢氧化钠(500μL，10.0mmol)，再次将混合物搅拌10分钟。最后滴加碘甲烷(750μL，12.00mmol)。在添加过程中，观察到了放热。将混合物搅拌15分钟，此时形成大量析出物。将混合物倾倒至水中，然后过滤收集固体。大多数所收集的固体为浅黄色和晶状的。也存在少数颜色稍深的胶状的橙色固体团块，手工除去这些团块并且抛弃。残余物为标题化合物，即5-氯噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(1.00g，产率69％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.04(d，J＝8.53Hz，1H)7.38(d，J＝8.53Hz，1H)2.66(s，6H)。
步骤B：(R)-N-(5-氯噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502051
将5-氯噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(100mg，0.35mmol)、(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(79mg，0.35mmol)和碳酸铯(225mg，0.69mmol)于DMF(1.7mL)中的混合物加热至100℃，保持2小时。将反应混合物冷却至环境温度，倾倒至水中，然后过滤收集固体。粗制固体经硅胶色谱(2-40％9∶1甲醇∶氢氧化铵-氯仿)纯化，得到(R)-N-(5-氯噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′二环[2.2.2]辛]-2-胺(62mg，产率51％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.13(br.s.，1H)7.93(d，J＝8.53Hz，1H)7.45(d，J＝8.28Hz，1H)3.92(d，J＝10.29Hz，1H)3.67(d，J＝10.29Hz，1H)3.00-3.14(m，2H)2.77-2.93(m，2H)2.69(t，J＝7.65Hz，2H)2.12(br.s.，1H)1.95(br.s.，1H)1.43-1.72(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.10；[M+H]+＝350.10。
实施例269
(R)-N5，N5-二甲基-N2-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-2，5-二胺
Figure BDA00001827380502052
步骤A：5-氯噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酸乙酯
Figure BDA00001827380502053
将乙氧基羰基异硫氰酸酯(4.32mL，36.6mmol)和2，4-5氯-嘧啶-5-基胺(3.00g，18.29mmol)净混合，并且超声处理5分钟，以有助于溶解。将混合物在环境温度搅拌10分钟，此时全部混合物固化。加入甲醇(100mL)，将混合物回流30分钟，冷却至环境温度，然后过滤收集固体，得到5-氯噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酸乙酯(3.8g，产率80％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm12.64(s，1H)9.05(s，1H)4.31(q，J＝7.19Hz，2H)1.32(t，J＝7.15Hz，3H)。
步骤B：5-(二甲基氨基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酸乙酯
Figure BDA00001827380502061
在压力容器中，将5-氯噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酸乙酯(300mg，1.16mmol)悬浮在二甲胺于甲醇中的2.0M溶液(5.0mL，10.00mmol)中，将其密封并且在75℃油浴中加热过夜。将混合物冷却至环境温度，蒸发掉溶剂，将残余物在碳酸氢盐水溶液和氯仿之间分配，萃取三次。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到5-(二甲基氨基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酸乙酯(236mg，产率99％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 11.97(s，1H)8.67(s，1H)4.26(q，J＝7.03Hz，2H)3.17(s，6H)1.16-1.40(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.88；[M+H]+＝268.09。
步骤C：N5，N5-二甲基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2，5-二胺
Figure BDA00001827380502062
将5-(二甲基氨基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酸乙酯(236mg，0.88mmol)悬浮于25％(w/w)甲醇钠于甲醇中的溶液(5mL，23.0mmol)中，将混合物加热回流过夜。将反应混合物蒸干，将残余物在水和氯仿之间分配，萃取三次。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并真空浓缩，得到N5，N5-二甲基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2，5-二胺(170mg，产率99％)，为白色固体。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.27(s，1H)7.44(s，2H)3.10(s，6H)。
步骤D：5-(二甲基氨基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502063
向N5，N5-二甲基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2，5-二胺(160mg，0.819mmol)于DMF(1mL)中的悬浮液中，加入20.0M氢氧化钠(100μL，2.00mmol)。将混合物在室温搅拌10分钟，此时加入二硫化碳(120μL，2mmol)，然后将所生成的赤褐色混合物搅拌10分钟。加入额外部分的20.0M氢氧化钠(100μL，2.0mmol，再次将混合物搅拌10分钟。最后滴加碘甲烷(120μL，1.9mmol)。将混合物搅拌5分钟，此时形成大量黄色析出物。将混合物倾倒至水中，过滤收集固体，得到5-(二甲基氨基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(194mg，产率79％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.75(s，1H)3.26(s，6H)2.64(s，6H)。
步骤E：(R)-N5，N5-二甲基-N2-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-2，5-二胺
将5-(二甲基氨基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(90mg，0.301mmol)、(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(83mg，0.361mmol)和碳酸铯(196mg，0.60mmol)于DMF(1.0mL)中的混合物加热至100℃，保持1.5小时。反应混合物冷却至环境温度，倾倒至水中，然后用氯仿萃取(4x)。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤，真空浓缩，并且粗制的残余物经硅胶色谱纯化(2-40％9∶1甲醇∶氢氧化铵-氯仿)，得到(R)-N5，N5-二甲基-N2-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛烷]-2-基)噻唑并[5，4-d]嘧啶-2，5-二胺(81mg，产率71％)，为褐色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.07(br.s.，1H)8.50(s，1H)4.01(d，J＝9.54Hz，1H)3.67(d，J＝9.54Hz，1H)3.39(dd，J＝14.93，1.63Hz，1H)3.23(s，6H)2.71-3.10(m，5H)2.10-2.24(m，2H)1.68-1.84(m，1H)1.46-1.68(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.87；[M+H]+＝360.23。
实施例270
(R)-N-([1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-2-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502081
步骤A：[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-2-胺
在室温，向吡嗪-2-胺(25g，260mmol)于二噁烷(300ml)中的溶液中，缓慢加入乙氧基羰基-异硫氰酸酯(37.9g，289mmol)。将混合物搅拌18小时，然后真空蒸发溶剂。将残余固体溶于甲醇(150ml)和乙醇(150ml)的混合物中。向该溶液中，加入TEA(109ml，780mmol)和羟胺盐酸盐(72.5g，1040mmol)。将混合物在室温搅拌2小时并且加热回流4小时。将该粗制的混合物冷却至室温，然后蒸发溶剂。残余固体经柱色谱纯化(0-20％甲醇/CH2Cl2)，得到白色固体(60g)。将固体吸收在EtOAc和水中。水层用EtOAc萃取两次。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，得到[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-2-胺，为白色固体(12g，88mmol，33％)。MS(LCMS)[M+H]＝135.96；R.T.＝0.21分钟。
步骤B：[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502083
历时10分钟，向[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-2-胺(676mg，5mmol)于DMF(10ml)中的溶液中，缓慢加入NaOH(20M，0.5ml)、CS2(1ml)、NaOH(20M，0.5ml)和碘甲烷(1ml)。将混合物在室温搅拌1小时，然后将10ml水加至反应混合物中，混合物变得浑浊。混合物用EtOAc萃取(100mlx3)。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并且蒸发。残余物经Biotage硅胶柱纯化(乙酸乙酯-己烷10-30％)，得到[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯，为黄色固体(720mg，3mmol，60％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 9.2(2，1H)，8.5(d，1H)，8.2(d，1H)，2.67(s，6H)。MS(LCMS)[M+H]＝239.92.[M+Na]＝261.89；R.T.＝1.55分钟。
步骤C：(R)-N-([1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-2-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺
将[1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(120mg，0.50mmol)、(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(120mg，0.76mmol)和碳酸铯(492mg，1.5mmol)于DMF(5ml)中的混合物在70℃加热6小时。将混合物浓缩，并且经Biotage硅胶柱纯化(100％乙酸乙酯，然后10-35％9∶1甲醇∶氢氧化铵-氯仿)，得到期望的产物(R)-N-([1，2，4]三唑并[1，5-a]吡嗪-2-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺(85mg，26.7％)，为白色固体。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 9.0(m，1H)，8.71-8.70(m，1H)，8.15-8.10(m，1H)，4.15-4.0(d，1H)，3.85-3.8(d，1H)，3.6-3.5(d，1H)，3.4-3.3(d，1H)，3.3-3.0(m，4H)，2.4-2.2(m，2H)，2.0-1.8(m，3H)。
MS(LCMS)[M+H]＝300.06；R.T.＝0.2分钟。
实施例271
(R)-N-(噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502092
步骤A：噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502093
向噻唑并[5，4-b]吡啶-2-胺(300mg，1.98mmol)于DMF(2mL)中的悬浮液中，加入20.0M氢氧化钠(200μL，4.0mmol)。将混合物在室温搅拌10分钟，此时加入二硫化碳(300μL，4.96mmol)，然后将所生成的赤褐色混合物搅拌10分钟。加入额外部分的20.0M氢氧化钠(200μL，4.0mmol)，再次将混合物搅拌10分钟。最后滴加碘甲烷(300μL，4.76mmol)。将混合物搅拌5分钟，此时形成大量黄色析出物。将混合物倾倒至水中，过滤收集固体，得到噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(190mg，产率38％)，为黄色固体，其具有足够的纯度无需进一步纯化就使用。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm8.47(d，J＝4.58Hz，1H)8.11(dd，J＝8.24，1.53Hz，1H)7.37(dd，J＝8.24，4.88Hz，1H)2.66(s，6H)。
步骤B：(R)-N-(噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
将噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(90mg，0.35mmol)、(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(97mg，0.42mmol)和碳酸铯(230mg，0.71mmol)于DMF(1mL)中的混合物加热至100℃，保持2小时。反应混合物冷却至环境温度，倾倒至水中，然后用氯仿萃取(4x)。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并且真空浓缩。混合物经硅胶色谱纯化(2-40％9∶1甲醇∶氢氧化铵-氯仿)。合并产物级份，并且真空浓缩，得到(R)-N-(噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(84mg，产率76％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.30(br.s.，1H)8.37(dd，J＝4.77，1.51Hz，1H)7.82(dd，J＝8.03，1.51Hz，1H)7.28(dd，J＝8.03，4.77Hz，1H)4.05(d，J＝9.54Hz，1H)3.70(d，J＝9.54Hz，1H)3.42(dd，J＝15.06，1.76Hz，1H)2.75-3.07(m，5H)2.14-2.26(m，2H)1.71-1.84(m，J＝13.99，9.79，4.17，4.17Hz，1H)1.48-1.68(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.64；[M+H]+＝316.15。
实施例272
(R)-N-(噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502102
将(R)-N-(6-溴噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(44mg，0.111mmol)悬浮于MeOH(50mL)中，加入3N HCl直到所有固体溶解(～10ml)。反应烧瓶用氮气吹洗，然后加入10％钯/碳(35mg)，接着将烧瓶配备氢气气囊。使混合物反应过夜，此时TLC显示起始物质消耗。烧瓶用氮气吹洗，经硅藻土过滤，用甲醇洗涤。将合并的滤液浓缩约90％，除去大部分甲醇，并且通过添加饱和碳酸氢钠溶液，使得溶液变成碱性。碱性水相用氯仿萃取(4x)。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并且真空浓缩。混合物经硅胶色谱纯化(2-40％[9∶1甲醇∶氢氧化铵]-氯仿)。合并产物级份，并且真空浓缩，得到(R)-N-(噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(24mg，0.075mmol，产率67.5％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.50(br.s.，1H)8.41(d，J＝2.76Hz，1H)8.27(d，J＝2.76Hz，1H)4.06(d，J＝9.79Hz，1H)3.72(d，J＝9.79Hz，1H)3.43(dd，J＝15.06，1.76Hz，1H)2.74-3.09(m，5H)2.12-2.25(m，2H)1.71-1.86(m，1H)1.49-1.67(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.75；[M+H]+＝317.13。
实施例273
(R)-N-(7-甲氧基-5-甲基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502111
步骤A：7-氯-5-甲基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酸乙酯
向4，6-二氯-2-甲基嘧啶-5-胺(1g，5.62mmol)和异硫氰基甲酸乙酯(O-ethyl carbonisothiocyanatidate)(0.66mL，5.62mmol)的混合物中，加入甲苯(2mL)以完全润湿固体。将该混合物置于100℃油浴中1.5小时，此时混合物聚集形成固体物质。将固体冷却至环境温度，用乙醚研磨，然后过滤收集所生成的固体，得到7-氯-5-甲基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酸乙酯(1.08g，3.96mmol，产率70.5％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 12.70(br.s.，1H)4.30(q，J＝7.19Hz，2H)2.69(s，3H)1.30(t，J＝7.15Hz，3H)。
步骤B：7-甲氧基-5-甲基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-胺
Figure BDA00001827380502121
将7-氯-5-甲基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基氨基甲酸乙酯(300mg，1.100mmol)悬浮于25％w/w甲醇钠于甲醇的溶液(5mL，23.14mmol)中，将混合物回流过夜。将混合物冷却至环境温度，用水稀释，接着用氯仿萃取(4x)。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并且真空浓缩，得到7-甲氧基-5-甲基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-胺(120mg，0.612mmol，产率55.6％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.71(s，2H)3.98(s，3H)2.52(s，3H)。
步骤C：7-甲氧基-5-甲基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
向7-甲氧基-5-甲基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-胺(100mg，0.51mmol)于DMF(0.5mL)中的悬浮液中，加入16.0M氢氧化钠(75μL，1.2mmol)。将混合物在室温搅拌10分钟，此时加入二硫化碳(80μL，1.27mmol)，然后将所生成的赤褐色混合物搅拌10分钟。加入额外部分的16.0M氢氧化钠(75μL，1.2mmol，再次将混合物搅拌10分钟。最后滴加碘甲烷(80μL，1.29mmol)。将混合物搅拌5分钟，此时形成大量黄色析出物。将混合物倾倒至水中，过滤收集固体，得到粗制的黄色固体，其经硅胶色谱(2-20％乙酸乙酯-氯仿)进一步纯化。合并产物级份，并且真空浓缩，得到7-甲氧基-5-甲基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(90mg，产率59％)，为黄色固体。1HNMR(400MHz，CDCl3)δppm 4.17(s，3H)2.71(s，3H)2.64(s，6H)。
步骤D：(R)-N-(7-甲氧基-5-甲基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502123
将7-甲氧基-5-甲基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(56mg，0.19mmol)、(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(51mg，0.22mmol)和碳酸铯(175mg，0.54mmol)于DMF(0.5mL)中的混合物加热至100℃，保持2小时。反应混合物冷却至环境温度，倾倒至水中，然后用氯仿萃取(4x)。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并且真空浓缩。混合物经硅胶色谱纯化(2-40％[9∶1甲醇∶氢氧化铵]-氯仿)。合并产物级份，并且真空浓缩，得到(R)-N-(7-甲氧基-5-甲基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(34mg，产率50％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.10(br.s.，1H)4.14(s，3H)4.03(d，J＝9.54Hz，1H)3.68(d，J＝9.54Hz，1H)3.39(dd，J＝14.93，1.63Hz，1H)2.74-3.07(m，5H)2.68(s，3H)2.04-2.28(m，2H)1.70-1.86(m，1H)1.44-1.67(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.10；[M+H]+＝361.32。
实施例274
(R)-N-(7-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502131
步骤A：7-甲氧基-5-甲基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502132
向7-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-胺(300mg，1.67mmol)于DMF(1.5mL)中的悬浮液中，加入16.0M氢氧化钠(210μL，3.4mmol)。将混合物在室温搅拌10分钟，此时加入二硫化碳(250μL，4.15mmol)，然后将所生成的赤褐色混合物搅拌10分钟。加入额外部分的16.0M氢氧化钠(210μL，3.4mmol，再次将混合物搅拌10分钟。最后滴加碘甲烷(250μL，4.00mmol)。将混合物搅拌10分钟，此时形成大量黄色析出物。将混合物倾倒至水中，过滤收集固体，得到7-甲氧基-5-甲基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(324mg，产率69％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 8.60(s，1H)4.20(s，3H)2.65(s，6H)。
步骤B：(R)-N-(7-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502141
将7-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(150mg，0.52mmol)、(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(132mg，0.58mmol)和碳酸铯(427mg，1.31mmol)于DMF(3mL)中的混合物加热至100℃，保持2小时。反应混合物冷却至环境温度，倾倒至水中，然后用氯仿萃取(4x)。合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并且真空浓缩。混合物经硅胶色谱纯化(2-40％[9∶1甲醇∶氢氧化铵]-氯仿)。合并产物级份，并且真空浓缩，得到(R)-N-(7-甲氧基噻唑并[5，4-d]嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(95mg，产率51％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.12(br.s.，1H)8.52(s，1H)4.16(s，3H)4.05(d，J＝9.54Hz，1H)3.70(d，J＝9.54Hz，1H)3.40(dd，J＝14.93，1.88Hz，1H)2.70-3.07(m，5H)2.08-2.27(m，2H)1.68-1.85(m，1H)1.48-1.66(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.90；[M+H]+＝347.34。
实施例275
(R)-2-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-基氨基)噻唑-5-腈
Figure BDA00001827380502142
(R)-2-(4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-基氨基)噻唑-5-腈根据实施例274的方法由2-氨基-5-氰基噻唑开始合成。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 9.05(s，1H)，8.13(s，1H)，3.86(d，J＝10.38Hz，1H)，3.61(d，J＝10.38Hz，1H)，3.01-3.10(m，2H)，2.83(t，J＝7.63Hz，2H)，2.62-2.71(m，2H)，2.09(s，1H)，1.90-1.97(m，2H)，1.54-1.62(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.52；[M+H]+＝290.0。
实施例276
(R)-N-(7-溴吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502151
(R)-N-(7-溴吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺根据实施例274的方法由7-溴吡咯并[1，2-f][1，2，4]三嗪-4-胺开始合成。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.13(1H，s)，7.04(1H，d，J＝4.53Hz)，6.77(1H，d，J＝4.53Hz)，4.09(1H，d，J＝10.32Hz)，3.79(1H，d，J＝10.58Hz)，3.24(1H，d)，3.12(1H，d)，2.70-3.00(4H，m)，2.06-2.25(2H，m)，1.52-1.86(3H，m)MS(LC/MS)R.T.＝1.62；[M+H]+＝377.2。
实施例277
(R)-N-(1，6-二氮杂萘-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502152
(R)-N-(1，6-二氮杂萘-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺根据实施例274的方法由1，6-二氮杂萘-2-胺开始合成。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.99(1H，s)，8.48(1H，d，J＝6.04Hz)，8.20(1H，d，J＝8.56Hz)，7.77(1H，d，J＝6.04Hz)，7.12(1H，d，J＝8.81Hz)，4.12(1H，d，J＝10.32Hz)，3.82(1H，d，J＝10.32Hz)，3.36(1H，d)，3.21(1H，d)，2.79-3.09(4H，m)，2.08-2.30(2H，m)，1.56-1.95(3H，m)。(LC/MS)R.T.＝0.38；[M+H]+＝310.3。
实施例278
(R)-N-(喹唑啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502153
(R)-N-(喹唑啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺根据实施例274的方法由2-氨基喹唑啉开始合成。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm9.27(1H，s)，7.72-7.99(3H，m)，7.47(1H，dd，J＝7.55，3.78Hz)，4.07(1H，d，J＝10.07Hz)，3.76(1H，d，J＝10.07Hz)，3.26(1H，br.s.)，3.13(1H，d)，2.70-3.03(4H，m)，2.17(2H，br.s.)，1.50-1.88(3H，m)。(LC/MS)R.T.＝1.11；[M+H]+＝310.3。
实施例279
(R)-N-(6，8-二氯异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502161
步骤A：N-(2，4-二氯苄基)-2，2-二乙氧基乙脒
Figure BDA00001827380502162
将(2，4-二氯苯基)甲胺(2g，11.4mmol)加至2，2-二乙氧基亚氨乙酸甲酯(2.04g，12.6mmol)于甲醇(10ml)中的溶液中。将混合物在70℃加热1小时。混合物经色谱纯化(Biotage：100％乙酸乙酯)。将期望的级份浓缩，得到N-(2，4-二氯苄基)-2，2-二乙氧基乙脒(2.8g，9.2mmol，产率72.7％)，为无色粘性油状物。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 7.27-7.70(m，3H)，4.77(s，1H)，4.14-4.35(m，2H)，3.45-3.68(m，4H)，1.09-1.29(m，6H)。LC/MS RT＝2.03；[M+H]+＝304.9。
步骤B：6，8-二氯异喹啉-3-胺
Figure BDA00001827380502163
在室温，向硫酸(4mL，75mmol)中加入N-(2，4-二氯苄基)-2，2-二乙氧基乙脒(2g，6.6mmol)。将反应混合物加热至40℃，保持18小时。TLC和LC/MS显示了产物的存在。将反应混合物冷却至室温，并且用NaOH水溶液(～15M)淬灭，直到反应混合物的pH值为约7。粗产物用乙酸乙酯萃取(2x50mL)，有机层用MgSO4干燥，过滤，然后真空浓缩，得到产物。粗产物经色谱纯化(Biotage：10-80％乙酸乙酯/己烷)，得到5，7-二氯异喹啉-1-胺(0.32g，1.50mmol，产率22.9％)，为暗黄色粉末。1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 8.99(s，1H)，7.64-7.73(m，1H)，7.30(d，J＝2.01Hz，1H)，6.61(s，1H)，6.43(s，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.40；[M+H]+＝213.1。
步骤C：6，8-二氯-3-异硫氰基异喹啉
Figure BDA00001827380502171
向在二氯甲烷(20mL)中的6，8-二氯异喹啉-3-胺(0.27g，1.28mmol)加入1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.30g，1.29mmol)，并且将反应混合物在40℃搅拌4小时。将反应混合物冷却至室温，然后经色谱纯化(Biotage：10-100％乙酸乙酯/己烷)，得到6，8-二氯-3-异硫氰基异喹啉(0.2g，0.78mmol，产率61.9％)，为粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 9.42(s，1H)，8.16(d，J＝1.83Hz，1H)，8.02(d，J＝2.14Hz，1H)，7.92(s，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝3.63；[M+H]+＝255.0。
步骤D：(R)-N-(6，8-二氯异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
在室温，向在DMF(10mL)中的6，8-二氯-3-异硫氰基异喹啉(0.17g，0.67mmol)加入碳酸铯(0.543g，1.67mmol)和(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.15g，0.67mmol)。将反应混合物在70℃搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，然后真空浓缩。产物用N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.31mL，2.0mmol)处理。将混合物加热至90℃，保持4小时。将反应混合物冷却至室温，然后浓缩得到粗产物。粗产物经色谱纯化(Biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)。将产物吸收在少量乙酸乙酯中，由此形成析出物。对其进行过滤，用少量乙酸乙酯洗涤，在真空炉干燥，得到(R)-N-(6，8-二氯异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.094g，0.24mmol，产率36.6％)，为白色粉末。1H NMR(400MHz，DMSO-D6)δppm 9.23(s，1H)，8.71-8.83(m，1H)，7.90-8.00(m，1H)，7.57-7.67(m，1H)，7.13-7.24(m，1H)，3.79-3.90(m，1H)，3.53-3.64(m，1H)，2.93-3.04(m，2H)，2.72-2.82(m，2H)，2.61-2.70(m，2H)，1.99(s，1H)，1.90(s，1H)，1.59(d，J＝4.78Hz，2H)，1.40-1.50(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.68；[M+H]+＝377.1。
实施例280
Figure BDA00001827380502181
(R)-N-(6，7-二氯异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502182
步骤A：N-(3，4-二氯苄基)-2，2-二乙氧基乙脒
Figure BDA00001827380502183
将(3，4-二氯苯基)甲胺(2g，11.4mmol)加至2，2-二乙氧基亚氨乙酸甲酯(2.04g，12.6mmol)于甲醇(10ml)中的溶液中。将混合物在70℃加热1小时。混合物经色谱纯化(Biotage：100％乙酸乙酯)。对期望的级份进行浓缩，得到N-(3，4-二氯苄基)-2，2-二乙氧基乙脒(2.8g，9.2mmol，产率72.7％)，为无色粘稠油状物。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 7.45(m，1H)，7.40(m，1H)，7.19(dd，J＝8.09，1.98Hz，1H)，4.94(s，1H)，4.43(s，2H)，3.47-3.77(m，4H)，1.41-1.79(m，6H)。LC/MS RT＝2.15；[M+H]+＝305.1。
步骤B：6，7-二氯异喹啉-3-胺和5，6-二氯异喹啉-3-胺
Figure BDA00001827380502184
在室温，向硫酸(4mL，75mmol)中加入N-(3，4-二氯苄基)-2，2-二乙氧基乙脒(2g，6.6mmol)。将混合物加热至40℃，保持49小时。TLC和LC/MS显示了产物的存在。将反应混合物冷却至室温，接着用NaOH水溶液(～15M)淬灭，直到反应混合物的pH值为约7。粗产物用乙酸乙酯萃取(2x50mL)，有机层用MgSO4干燥，过滤，然后真空浓缩，得到产物。粗产物经色谱纯化(Biotage：100％乙酸乙酯至[90/10％乙酸乙酯/MeOH])，得到区域异构体6，7-二氯异喹啉-1-胺和5，6-二氯异喹啉-3-胺的大约1∶1的混合物(1.2g，5.64mmol，产率86.0％)，为暗黄色粉末。区域异构体直接使用而没有分离。1H NMR：1HNMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.90(s，1H)，8.83(s，1H)，8.12(s，1H)，7.89(s，1H)，7.84(d，J＝8.54Hz，1H)，7.28(d，J＝8.85Hz，1H)，6.83(s，1H)，6.58(s，1H)，6.48(s，2H)，6.25(s，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.59；[M+H]+＝213.0。
步骤C：6，7-二氯-3-异硫氰基异喹啉和5，6-二氯-3-异硫氰基异喹啉
Figure BDA00001827380502191
向在二氯甲烷(20mL)中的6，7-二氯异喹啉-3-胺和5，6-二氯异喹啉-3-胺(0.410g，1.924mmol)加入1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.469g，2.021mmol)，并且将反应混合物在40℃搅拌4小时。将反应混合物冷却至室温，然后经色谱纯化(Biotage：10-100％乙酸乙酯/己烷)，得到分离的区域异构体6，7-二氯-3-异硫氰基异喹啉(0.2g，0.784mmol，产率40.7％)和5，6-二氯-3-异硫氰基异喹啉(0.23g，0.902mmol，产率46.8％)，为黄色固体。5，6-二氯-3-异硫氰基异喹啉：1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 9.10(s，1H)，7.87(d，J＝8.85Hz，1H)，7.82(s，1H)，7.66(d，J＝8.55Hz，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝3.63；[M+H]+＝255.0。6，7-二氯-3-异硫氰基异喹啉：1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 9.04(s，1H)，8.11(s，1H)，7.94(s，1H)，7.37(s，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝3.42；[M+H]+＝255.0。
步骤D：(R)-N-(6，7-二氯异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502192
在室温，向在DMF(10mL)中的6，7-二氯-3-异硫氰基异喹啉(0.13g，0.510mmol)加入碳酸铯(0.42g，1.27mmol)和(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.1l8g，0.515mmol)。将反应混合物在70℃搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，然后真空浓缩。粗制的脲经色谱纯化(Biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)。然后产物用DMF(10mL)和N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.238mL，1.529mmol)处理。将混合物加热至90℃，保持18小时。将反应混合物冷却至室温，然后浓缩得到粗产物，该粗产物经色谱纯化(Biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)，得到(R)-N-(6，7-二氯异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.12g，0.312mmol，产率61.2％)。1HNMR(500MHz，CDCl3)δppm 9.03(s，1H)，8.87(s，1H)，7.96(s，1H)，7.83(s，1H)，7.24(s，1H)，3.88-4.06(m，1H)，3.60-3.74(m，1H)，3.42(d，J＝14.65Hz，1H)，2.82-3.15(m，5H)，2.23-2.34(m，1H)，2.18(s，1H)，1.72-1.87(m，1H)，1.48-1.70(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.63；[M+H]+＝377.1。
实施例281
(R)-N-(5，6-二氯异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502201
在室温，向在DMF(10mL)中的5，6-二氯-3-异硫氰基异喹啉(0.11g，0.431mmol)加入碳酸铯(0.351g，1.078mmol)和(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.100g，0.435mmol)。将反应混合物在70℃搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，然后真空浓缩。粗制的脲经色谱纯化(Biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)。然后产物用DMF(10mL)和N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.202mL，1.293mmol)处理。将混合物加热至90℃，保持18小时。将反应混合物冷却至室温，然后浓缩得到粗产物。粗产物经色谱纯化(Biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)，得到(R)-N-(5，6-二氯异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.084g，0.218mmol，产率50.6％)，为黄色粉末。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 9.09(s，1H)，8.93(s，1H)，7.63-7.82(m，2H)，7.40(d，J＝8.55Hz，1H)，3.99(d，J＝9.16Hz，1H)，3.78(d，J＝8.85Hz，1H)，3.51(d，J＝14.65Hz，1H)，3.30(d，J＝14.65Hz，1H)，2.90-3.23(m，4H)，2.33-2.48(m，1H)，2.29(s，1H)，1.83-1.94(m，1H)，1.62-1.83(m，J＝42.12Hz，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.57；[M+H]+＝377.1。
实施例282
(R)-N-(3，4-二氯吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502211
(R)-N-(3，4-二氯吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例267的方法，由2-氨基-3，4-二氯吡啶开始制备。1HNMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 9.10(s，1H)，8.08(d，J＝5.49Hz，1H)，7.13(d，J＝5.49Hz，1H)，3.86(d，J＝9.77Hz，1H)，3.60(d，J＝9.77Hz，1H)，2.96-3.05(m，2H)，2.77(t，J＝7.63Hz，2H)，2.66(t，J＝7.78Hz，2H)，1.97-2.05(m，1H)，1.86-1.94(m，1H)，1.54-1.63(m，2H)，1.43-1.51(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.78；[M+H]+＝327.0。
实施例283
(R)-N-(3-氯吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502212
(R)-N-(3-氯吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例267的方法，由2-氨基-3-氯吡啶开始制备。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 9.06(s，1H)，8.14-8.19(m，1H)，7.74-7.79(m，J＝7.78，1.83，1.83，1.68Hz，1H)，6.86-6.91(m，1H)，3.81-3.89(m，1H)，3.55-3.63(m，1H)，2.96-3.04(m，2H)，2.78(t，J＝7.63Hz，2H)，2.67(t，J＝7.63Hz，2H)，1.96-2.02(m，1H)，1.86-1.92(m，J＝5.65，3.20Hz，1H)，1.54-1.63(m，J＝6.87，3.66，3.51Hz，2H)，1.42-1.49(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.26；[M+H]+＝293.0。
实施例284
(R)-N-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502221
(R)-N-(5-氯-3-氟吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例267的方法，由2-氨基-3-氟-5-氯吡啶开始制备。1HNMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.81(s，1H)，8.05(s，1H)，7.79(d，J＝10.07Hz，1H)，3.83(d，J＝9.46Hz，1H)，3.58(d，J＝9.46Hz，1H)，2.99(s，2H)，2.71-2.80(m，2H)，2.61-2.70(m，2H)，2.00(s，1H)，1.83-1.92(m，1H)，1.53-1.62(m，2H)，1.41-1.50(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.52；[M+]+＝311.0。
实施例285
(R)-N-(6-氯吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502222
(R)-N-(6-氯吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例267的方法，由2-氨基-6-氯吡啶开始制备。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.33-8.42(m，1H)，7.60-7.68(m，1H)，6.94(d，J＝7.02Hz，1H)，6.72-6.81(m，1H)，3.86(d，J＝9.46Hz，1H)，3.57(d，J＝10.07Hz，1H)，2.97(s，2H)，2.69-2.78(m，2H)，2.63-2.68(m，J＝7.63，7.63Hz，2H)，1.95-2.03(m，1H)，1.83-1.92(m，1H)，1.53-1.62(m，2H)，1.41-1.49(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.43；[M+H]+＝293.0。
实施例286
(R)-N-(4，6-二氯吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
(R)-N-(4，6-二氯吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例267的方法，由2-氨基-4，6-二氯吡啶开始制备。1HNMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.43(s，1H)，7.13(s，1H)，6.84(s，1H)，3.86(d，J＝9.77Hz，1H)，3.59(d，J＝10.07Hz，1H)，2.98(s，2H)，2.58-2.86(m，4H)，1.94-2.13(m，1H)，1.78-1.95(m，1H)，1.36-1.65(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.87；[M+H]+＝327.0。
实施例287
(R)-N-(2-甲氧基-3-4′-联吡啶-2′-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502231
步骤A：2-甲氧基-3，4′-联吡啶-2′-胺
向在DMF(25mL)中的4-溴吡啶-2-胺(0.5g，2.8mmol)、2-甲氧基吡啶-3-基硼酸(0.52g，3.4mmol)加入1N碳酸钠(10mL，2.3mmol)，接着加入1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物(0.21g，0.26mmol)。将反应混合物在85℃搅拌3小时，然后冷却至室温。产物用乙酸乙酯萃取(2x50mL，用MgSO4干燥，过滤，然后真空浓缩。粗产物经色谱纯化(Biotage：100至90/10％乙酸乙酯-乙酸乙酯/甲醇)，得到2-甲氧基-3，4′-联吡啶-2′-胺(0.53g，2.63mmol，产率93％)，为褐色粉末。产物直接用于下一步骤。
步骤B：2′-异硫氰基-2-甲氧基-3，4′-联吡啶
Figure BDA00001827380502233
向在二氯甲烷(20mL)中的2-甲氧基-3，4′-联吡啶-2′-胺(0.53g，2.63mmol)加入1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.62g，2.7mmol)，并且将反应混合物在40℃搅拌4小时。将反应混合物冷却至室温，然后经色谱纯化(Biotage：10-100％乙酸乙酯/己烷)，得到2′-异硫氰基-2-甲氧基-3，4′-联吡啶(0.46g，1.9mmol，产率71.8％)。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 8.67(d，J＝2.44Hz，1H)，8.26(dd，J＝4.88，1.53Hz，1H)，8.15(dd，J＝8.24，2.44Hz，1H)，7.89(dd，J＝7.32，1.53Hz，1H)，7.48(d，J＝8.24Hz，1H)，7.15(dd，J＝7.32，4.88Hz，1H)，3.91(s，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.87；[M+H]+＝244.9。
步骤C：(R)-N-(2-甲氧基-3-4′-联吡啶-2′-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502241
在室温，向在DMF(20mL)中的2′-异硫氰基-2-甲氧基-3，4′-联吡啶(0.09g，0.37mmol)加入Et3N(0.11mL，0.81mmol)和(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.09g，0.37mmol)。将反应混合物在70℃搅拌2小时。将反应混合物冷却至室温，然后真空浓缩。粗制的脲经色谱纯化(biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)，得到纯的脲中间体。然后产物用DMF(20mL)和N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.17mL，1.1mmol)处理。将混合物加热至90℃，保持18小时。将反应混合物冷却至室温，然后浓缩得到粗产物。粗产物经色谱纯化(Biotage：85％CHCl3，14％MeOH，1％NH4OH)，合并含有产物的级份。LC/MS和1H NMR显示，可能存在一些不纯物质。对不纯物质进行反相HPLC纯化，得到(R)-N-(2-甲氧基-3，4′-联吡啶-2′-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.02g，0.05mmol，产率14.05％)，为白色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-D6)δppm 9.07(s，1H)，8.43(s，1H)，8.17(dd，J＝4.73，1.68Hz，1H)，7.79(d，J＝7.32Hz，2H)，7.10(dd，J＝7.32，4.88Hz，1H)，6.79-6.92(m，1H)，3.76-3.97(m，4H)，3.51-3.66(m，1H)，2.92-3.09(m，2H)，2.59-2.82(m，4H)，1.85-2.03(m，2H)，1.53-1.71(m，2H)，1.35-1.49(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.05；[M+H]+＝366.1。
实施例288
(R)-N-(苯并[d]噁唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：苯并[d]噁唑-2-胺
Figure BDA00001827380502252
在室温，向干燥箱干燥的圆底烧瓶中加入二(1H-咪唑-1-基)甲亚胺(500mg，3.10mmol)、2-氨基苯酚(188mg，1.724mmol)和无水THF(20ml)。将所生成的悬浮液在N2气氛下回流2小时，基于LC/MS检测发现完全转化。真空除去溶剂，并且将残余物在Biotage Flash Collector上纯化(用30-80％EtOAc/己烷(1200ml)洗脱)，得到期望的产物苯并[d]噁唑-2-胺(200mg，1.5mmol，产率87％)，为白色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 6.20(br.s.，2H)7.02-7.11(m，1H)7.17-7.22(m，1H)7.29(d，J＝7.53Hz，1H)7.36(d，J＝7.03Hz，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.05；[M+H]+＝134.96。
步骤B：苯并[d]噁唑-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502253
向苯并[d]噁唑-2-胺(200mg，1.491mmol)于DMF(10ml)中的无色溶液中，加入氢氧化钠(20N，149μL，2.98mmol)，得到绿色悬浮液。将混合物在室温搅拌15分钟。加入二硫化碳(225μL，3.73mmol)，生成暗褐色溶液。将反应混合物在室温搅拌15分钟，接着加入氢氧化钠(20N，149μL，2.98mmol)，并且再搅拌10分钟。然后滴加碘甲烷(224μL，3.58mmol)。12分钟后，析出绿色固体。将反应混合物再搅拌2小时。过滤收集绿色固体，用DMF(2x1ml)、H2O(2x1ml)洗涤，经室真空(house vacuum)干燥30分钟，接着在真空炉中干燥过夜，得到期望的产物苯并[d]噁唑-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(258.5mg，1.085mmol，产率72.7％)，为白色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 2.70(s，6H)7.24-7.34(m，2H)7.45-7.50(m，1H)7.66-7.74(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.76，[M+H]+＝238.96。
步骤C：(R)-N-(苯并[d]噁唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
在室温，向10ml小瓶中加入(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇·2HCl盐(69.5mg，0.361mmol)、DMF(2ml)、DIEA(0.063mL，0.361mmol)和Cs2CO3(235mg，0.722mmol)，接着加入苯并[d]噁唑-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(86mg，0.361mmol)。将所生成的悬浮液在室温搅拌1小时。然后LC/MS显示，起始物质被消耗。混合物用MeOH稀释，经制备性HPLC纯化，得到期望的产物(R)-N-(苯并[d]噁唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(101.5mg，0.323mmol，产率90％)，为褐色胶状物。1H NMR(400MHz，丙酮-d6)δppm2.07-2.14(m，2H)2.20(ddd，J＝8.78，5.27，3.26Hz，2H)2.33-2.45(m，1H)2.62(d，J＝2.26Hz，1H)3.34-3.47(m，3H)3.48-3.58(m，1H)3.75-3.88(m，2H)4.15(d，J＝10.54Hz，1H)4.32(d，J＝10.54Hz，1H)7.13-7.26(m，2H)7.41(td，J＝3.70，1.63Hz，1H)9.24(br，s，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.792，[M+H]+＝299.17。
实施例289
(R)-N-(5-氯苯并[d]噁唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502261
步骤A：5-氯苯并[d]噁唑-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502262
向5-氯苯并[d]噁唑-2-胺(700mg，4.15mmol)于DMF(5ml)中的棕色溶液中，加入氢氧化钠(20N，415μL，8.30mmol)，得到灰色悬浮液。将混合物在室温搅拌15分钟。在室温加入二硫化碳(626μL，10.38mmol)，生成褐色溶液。将混合物在室温搅拌15分钟，接着加入氢氧化钠(20N，208μL，4.16mmol)。10分钟后，滴加碘甲烷(623μL，9.97mmol)。灰色固体从溶液中析出。将反应混合物在室温再搅拌2小时。过滤收集固体，用DMF/H2O(50∶50，2x2ml)洗涤，经室真空干燥30分钟，进一步在65℃的真空炉中干燥1.5小时，得到期望的产物5-氯苯并[d]噁唑-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(780mg，2.86mmol，产率68.9％)，为灰白色固体，其纯度足够用于下一步骤中。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 2.69(s，6H)7.37(dd，J＝8.53，2.26Hz，1H)7.66(d，J＝9.03Hz，1H)7.75(d，J＝1.76Hz，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.44；[M+H]+＝272.9。
步骤B：(R)-N-(5-氯苯并[d]噁唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502271
在室温，向10ml小瓶中填充(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇·2HCl盐(106mg，0.550mmol)、DMF(2ml)、DIEA(0.096mL，0.550mmol)和Cs2CO3(358mg，1.100mmol)，接着填充5-氯苯并[d]噁唑-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(150mg，0.550mmol)。将所生成的悬浮液在室温搅拌1小时。然后LC/MS显示，起始物质被消耗。反应混合物用MeOH稀释，经制备性HPLC纯化，得到期望的产物(R)-N-(5-氯苯并[d]噁唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(106.5mg，0.3mmol，产率53.0％)，为白色固体。1H NMR(400MHz，丙酮-d6)δppm 2.08-2.30(m，3H)2.35-2.48(m，1H)2.60-2.73(m，1H)3.48(qd，J＝7.53，7.28Hz，3H)3.54-3.68(m，1H)3.79-4.00(m，2H)4.18(d，J＝10.54Hz，1H)4.35(d，J＝10.54Hz，1H)7.19(dd，J＝8.53，2.01Hz，1H)7.30-7.47(m，2H)9.10(br.s.，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.56；[M+H]+＝333.13。
实施例290
(R)-N-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：噁唑并[4，5-b]吡啶-2-胺
Figure BDA00001827380502273
在室温，向干燥箱干燥的圆底烧瓶中加入二(1H-咪唑-1-基)甲亚胺(500mg，3.10mmol)、2-氨基吡啶-3-醇(171mg，1.551mmol)和无水THF(20ml)。将所生成的悬浮液在N2气氛下回流1小时。LC/MS显示，起始物质完全被消耗。真空除去溶剂，残余物用于下一步骤，而没有进一步纯化。MS(LC/MS)R.T.＝0.235；[M+H]+＝136.09。
步骤B：噁唑并[4，5-b ]吡啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502281
向在DMF(12ml)中的粗制的噁唑并[4，5-b]吡啶-2-胺(811mg，6mmol)(来自步骤A)加入NaOH(20N，600μL，12.00mmol)，得到褐色溶液，将该溶液在室温搅拌15分钟。然后加入二硫化碳(904μL，15.00mmol)，生成橙色溶液。将混合物在室温搅拌15分钟，接着加入NaOH(20N，600μL，12.00mmol)，继续搅拌10分钟，生成暗红色溶液。滴加碘甲烷(900μL，14.40mmol)，1小时后析出黄色固体，约80％的转化率。混合物用MeOH稀释，并且经制备性HPLC纯化，得到期望的产物噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(35mg，0.146mmol，产率2.4％)，为白色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 2.71(s，6H)7.22(dd，J＝8.03，5.02Hz，1H)7.72(dd，J＝8.03，1.25Hz，1H)8.49(dd，J＝5.02，1.51Hz，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.358；[M+H]＝240.04。
步骤C：(R)-N-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502282
在室温，向10ml小瓶中填充(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇·2HCl盐(8.53mg，0.044mmol)、DMF(2ml)、DIEA(7.74μL，0.04mmol)和Cs2CO3(28.9mg，0.089mmol)，接着填充噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(10.6mg，0.044mmol)。将所生成的悬浮液在室温搅拌1小时。LC/MS显示，起始物质完全被消耗。反应混合物用MeOH稀释，并且经制备性HPLC纯化，得到期望的产物(R)-N-(噁唑并[4，5-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺(13mg，0.038mmol，产率86％)，为白色固体。1H NMR(400MHz，丙酮-d6)δppm 1.54-1.60(m，1H)1.71-1.77(m，2H)2.16-2.24(m，1H)2.77-2.82(m，2H)2.89(t，J＝7.91Hz，4H)3.13-3.25(m，2H)3.90(d，J＝10.29Hz，1H)4.22(d，J＝10.29Hz，1H)7.13(dd，J＝8.03，5.02Hz，1H)7.70(dd，J＝7.91，1.13Hz，1H)8.27(dd，J＝5.14，1.13Hz，1H)9.11(br.s.，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.443；[M+H]+＝300.16。
实施例291
(2R)-N-(6，8-二甲基-3-异喹啉基)-4′H-螺[4-氮杂二环[2.2.2]辛烷-2，5′-[1，3]噁唑]-2′-胺
Figure BDA00001827380502291
步骤A：6-甲基异喹啉-3-胺
在室温，向2，2-二乙氧基亚氨乙酸甲酯(1.1g，6.82mmol)于甲醇(8mL)中的溶液中，滴加对甲苯基甲胺(0.788g，6.50mmol)。然后将反应烧瓶置于预热过的油浴中，在70℃搅拌16小时，然后移出并且冷却。减压除去挥发性物质，在环境温度将粗物质滴加至硫酸(5mL)中。将反应混合物搅拌72小时，然后将烧瓶置于冰水浴中，用水(50mL)稀释，然后用氢氧化钠(10N)缓慢中和至pH为10。当反应混合物变成碱性时，形成灰色析出物。过滤出该析出物，用水洗涤，干燥，得到6-甲基异喹啉-3-胺(0.65g，63％)，为灰色粉末。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.73(s，1H)，7.69(d，J＝8.28Hz，1H)，7.29(s，1H)，7.00(d，J＝8.28Hz，1H)，5.81(s，1H)，2.40(s，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.37；[M+H]+＝159.10。
步骤B：3-异硫氰基-6-甲基异喹啉
Figure BDA00001827380502293
在室温，向1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(220mg，0.948mmol)于二氯甲烷(10mL)中的溶液中，加入6-甲基异喹啉-3-胺(125mg，0.790mmol)。将反应混合物置于预热过的油浴中，在40℃搅拌18小时，然后移除油浴，冷却至环境温度。将混合物浓缩，并且粗物质经硅胶色谱纯化(5-30％乙酸乙酯/己烷)，得到3-异硫氰基-6-甲基异喹啉(75mg，0.375mmol，产率47.4％)，为灰白色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.03(s，1H)，7.88(d，J＝8.24Hz，1H)，7.56(s，1H)，7.46(dd，J＝8.24，1.53Hz，1H)，7.39(s，1H)2.57(s，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.92；[M+H]+＝201.13。
步骤C：(R)-N-(6-甲基异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502301
向在N，N-二甲基甲酰胺(6mL)中的(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(65.8mg，0.285mmol)加入三乙胺(0.090mL，0.63mmol)和3-异硫氰基-6-甲基异喹啉(57mg，0.285mmol)。将悬浮液置于预热过的油浴中，在70℃搅拌2小时30分钟。然后加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(0.177mL，1.14mmol)，并且将混合物在85℃搅拌16小时。将混合物浓缩并且经硅胶色谱纯化(0-40％[9∶1甲醇∶氢氧化铵]/氯仿)，接着经反相制备性HPLC纯化(0-40％TFA-甲醇-水)。将产物的溶液经UCT Clean-up CHQAX15M25柱过滤，用MeOH(3x10ml)洗脱，并且浓缩，得到期望的产物(S)-1-((3-羟基奎宁环-3-基)甲基)-3-(6-甲基异喹啉-3-基)硫脲，为褐色胶状物。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.11(s，1H)，8.02(d，J＝8.53Hz，1H)，7.80(s，1H)，7.74(s，1H)，7.47(d，J＝8.53Hz，1H)，4.47(d，J＝10.54Hz，1H)，4.31(d，J＝10.54Hz，1H)，4.10(d，J＝14.81Hz，1H)，3.92(d，J＝14.81Hz，1H)，3.53-3.71(m，2H)，3.27-3.51(m，3H)，2.84(br.s，1H)，2.55(s，3H)，2.48(m，1H)，)2.10-2.30(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.24；[M+H]+＝323.2。
实施例292
(R)-N-(6-溴异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502302
步骤A：N-(4-溴苄基)-2，2-二乙氧基乙脒
Figure BDA00001827380502303
将(4-溴苯基)甲胺盐酸盐(2.359g，10.39mmol)和甲醇钠(2.376mL，10.39mmol)加至2，2-二乙氧基亚氨乙酸甲酯(3.35g，20.78mmol)于甲醇(10ml)中的溶液中。将该浑浊的混合物在70℃加热1.5小时，对所生成的黄色混合物进行浓缩。残余物经硅胶色谱纯化(用100％乙酸乙酯洗脱)，得到黄色粘稠油状物(2.04g，62％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 7.47(2H，d，J＝8.56Hz)，7.23(2H，d，J＝8.06Hz)，6.76(1H，br.s.)，5.31(1H，br.s.)，4.94(1H，br.s.)，4.45(2H，br.s.)，3.47-3.77(4H，m)，1.26(6H，t，J＝7.05Hz)。LCMS：R.T.＝2.12；[M+2]+＝317.2。
步骤B：6-溴异喹啉-3-胺
Figure BDA00001827380502311
将在硫酸(4mL，95-98％)中的N-(4-溴苄基)-2，2-二乙氧基乙脒(1.53g，4.85mmol)在40℃加热14小时。混合物用1M NaOH中和至pH为7，并且对所生成的悬浮液进行过滤。残余物经硅胶色谱纯化(用20-55％乙酸乙酯/己烷洗脱)。对期望的级份进行浓缩，得到褐黄色固体(0.434g，40％)。LCMS：R.T.＝1.62；[M+2]+＝225.1。
步骤C：6-溴-3-异硫氰基异喹啉
在室温，向1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.251g，1.080mmol)于二氯甲烷中的溶液中，加入6-溴异喹啉-3-胺(0.241g，1.080mmol)。将溶液在室温搅拌3小时。LC/MS显示，期望产物的形成。深橙色溶液经硅胶色谱纯化(0-10％乙酸乙酯-己烷)，得到6-溴-3-异硫氰基异喹啉(0.1g，0.377mmol，产率35％)，为黄色油状物。R.T.＝2.54；[M+H]+＝267.04。
步骤D：(R)-N-(6-溴异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502313
向在N，N-二甲基甲酰胺(15mL)中的(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.086g，0.377mmol)加入Cs2CO3(0.307g，0.943mmol)和6-溴-3-异硫氰基异喹啉(0.1g，0.377mmol)。将悬浮液在室温搅拌30分钟。然后加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(0.176mL，1.132mmol)，并且将混合物再搅拌18小时。将混合物浓缩并且经硅胶色谱纯化(5-25％[9.5∶0.5甲醇∶氢氧化铵]-乙酸乙酯)，得到(R)-N-(6-溴异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.054g，0.135mmol，产率36％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm9.04(1H，s)，7.80-8.05(2H，m)，7.55(1H，dd，J＝8.81，1.76Hz)，7.37(1H，br.s.)，4.10(1H，d，J＝10.58Hz)，3.87(1H，d，J＝10.83Hz)，3.68-3.77(1H，m)，3.56-3.67(1H，m)，3.29-3.49(4H，m)，2.45(1H，br.s.)，2.28-2.41(1H，m)，1.86-2.15(3H，m)。LCMS：R.T.＝1.76；[M+]+＝387.21。
实施例293
(R)-N-(7-溴异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502321
步骤A：N-(3-溴苄基)-2，2-二乙氧基乙脒
Figure BDA00001827380502322
将(3-溴苯基)甲胺盐酸盐(3.62g，15.64mmol)和甲醇钠(3.58mL，15.64mmol)加至2，2-二乙氧基亚氨乙酸甲酯(5.042g，31.3mmol)于甲醇(15mL)中的溶液中。将该浑浊的混合物在70℃加热1.5小时，然后对所生成的黄色混合物进行浓缩。残余物经硅胶色谱纯化(用100％乙酸乙酯洗脱)。将期望的级份浓缩，生成黄色粘稠油状物(2.5g，51％)。LCMS：R.T.＝2.11；[M+2]+＝317.06。
步骤B：7-溴异喹啉-3-胺和5-溴异喹啉-3-胺
Figure BDA00001827380502323
将在硫酸(5mL，95-98％)中的N-(3-溴苄基)-2，2-二乙氧基乙脒(2.5g，7.93mmol)在40℃加热54小时。混合物用10M NaOH水溶液中和至pH为7，然后对所生成的悬浮液进行过滤。残余物经硅胶色谱纯化(用20-55％乙酸乙酯/己烷洗脱，然后用100％乙酸乙酯洗脱)。对级份进行浓缩，生成棕色固体，含有产物的混合物(1.0g，57％)。LCMS：R.T.＝1.56；[M+2]+＝225.1。该混合物用于下一步骤。
步骤C：7-溴-3-异硫氰基异喹啉和5-溴-3-异硫氰基异喹啉
Figure BDA00001827380502331
在室温，向1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮1.145g，4.93mmol)于二氯甲烷中的溶液中，加入7-溴异喹啉-3-胺和5-溴异喹啉-3-胺(来自步骤B)的混合物(1.0g，4.5mmol)。将橙色溶液在室温搅拌18小时。LCMS显示产物的形成。深橙色溶液经硅胶色谱纯化(0-5％乙酸乙酯-己烷)。合并第一产物级份，并且真空浓缩，得到7-溴-3-异硫氰基异喹啉(0.27g，0.377mmol，产率22％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz，丙酮)δppm 9.19(1H，s)，8.41(1H，s)，7.86-8.02(2H，m)，7.76(1H，s)。R.T.＝4.28；[M+H]+＝267.04。合并第二产物级份，并且真空浓缩，得到5-溴-3-异硫氰基异喹啉(0.25g，0.377mmol，产率21％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz，丙酮)δppm 9.24(1H，s)，8.23(1H，d)，8.15(1H，d)，7.81(1H，s)，7.64(1H，t)。LCMS：R.T.＝4.61；[M+H]+＝267.04。
步骤D：(R)-N-(7-溴异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502332
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.207g，0.905mmol)加入Cs2CO3(0.737g，2.263mmol)和7-溴-3-异硫氰基异喹啉(0.24g，0.905mmol)。将悬浮液在室温搅拌30分钟。然后加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(0.423mL，2.72mmol)，并且将混合物在室温搅拌18小时。将混合物浓缩并且经硅胶色谱纯化(使用5-15％[9∶1甲醇∶氢氧化铵]/乙酸乙酯)。对期望的级份进行浓缩，使用5-15％[9.5∶0.5甲醇∶氢氧化铵]/乙酸乙酯进一步纯化，得到((R)-N-(7-溴异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.061g，0.156mmol，产率17％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.96(1H，s)，8.12(1H，s)，7.66(2H，s)，7.32(1H，s)，4.01(1H，d)，3.73(1H，d)，3.35-3.42(1H，m)，3.22-3.29(1H，m)，2.84-3.17(4H，m)，2.13-2.35(2H，m)，1.62-1.96(3H，m)。LCMS：R.T.＝1.76；[M+]+＝387.21。
实施例294
(R)-N-(5-溴异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502341
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.207g，0.905mmol)加入Cs2CO3(0.737g，2.263mmol)和5-溴-3-异硫氰基异喹啉(0.24g，0.905mmol)。将悬浮液在室温搅拌30分钟。然后加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(0.423mL，2.72mmol)，并且将混合物在室温搅拌18小时。将混合物浓缩并且经硅胶色谱纯化(5-15％[9.5∶0.5甲醇∶氢氧化铵]-乙酸乙酯)。对期望的级份进行浓缩，使用5-15％[9.5∶0.5甲醇∶氢氧化铵]/乙酸乙酯进一步纯化，得到(R)-N-(5-溴异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(0.248g，0.634mmol，产率70％)，为黄色固体。
1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.99(1H，s)，7.91(2H，dd)，7.55(1H，br.s.)，7.28(1H，t)，3.96(1H，d)，3.65(1H，d)，3.17-3.26(1H，m)，3.03-3.13(1H，m)，2.70-2.99(4H，m)，2.03-2.30(2H，m)，1.47-1.87(3H，m)。LCMS：R.T.＝1.69；[M+2]+＝389.21。
实施例295
(2R)-N-(6，8-二甲基-3-异喹啉基)-4′H-螺[4-氮杂二环[2.2.2]辛烷[2，5′-[1，3]噁唑]-2′-胺
Figure BDA00001827380502342
步骤A：6，8-二甲基异喹啉-3-胺
Figure BDA00001827380502343
在环境温度，向2，2-二乙氧基亚氨乙酸甲酯(1.5g，9.3mmol)于甲醇(4.9mL)中的溶液中，滴加(2，4-二甲基苯基)甲胺(1.2g，8.9mmol)。然后将反应烧瓶置于预热过的油浴中并且在70℃搅拌16小时，然后冷却，减压除去挥发性物质。在环境温度，将粗物质滴加至硫酸(19.7mL)中，并且搅拌72小时。接着将烧瓶置于冰水浴中，用水(50mL)稀释，然后用氢氧化钠(10N)缓慢中和至pH值为10。当反应混合物变成碱性时，形成橙色析出物。过滤出该析出物，用水洗涤，干燥，得到6，8-二甲基异喹啉-3-胺(1.37g，7.95mmol，90％)。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.82(s，1H)，7.17(s，1H)，6.90(s，1H)，6.72(s，1H)，2.61(s，3H)，2.37(s，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.77；[M+H]+＝173.15。
步骤B：3-异硫氰基-6，8-二甲基异喹啉
Figure BDA00001827380502351
在环境温度，向1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(1.35g，5.8mmol)于二氯甲烷(19mL)中的溶液中，加入6，8-二甲基异喹啉-3-胺(1g，5.8mmol)。将反应混合物置于预热过的油浴中，并且在40℃搅拌18小时，然后冷却，浓缩，粗物质经硅胶色谱纯化(10-35％乙酸乙酯/己烷)，得到3-异硫氰基-6，8-二甲基异喹啉(93.7mg，0.437mmol，8％)，为黄色固体。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 9.20(s，1H)，7.36-7.44(m，2H)，7.23(s，1H)，2.75(s，3H)，2.51(s，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.03；[M+H]+＝215.1。
步骤C：(2R)-N-(6，8-二甲基-3-异喹啉基)-4′H-螺[4-氮杂二环[2.2.2]辛烷-2，5′-[1，3]噁唑]-2′-胺
Figure BDA00001827380502352
向在N，N-二甲基甲酰胺(1.4mL)中的(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(99mg，0.43mmol)加入三乙胺(0.18mL，1.3mmol)和3-异硫氰基-6，8-二甲基异喹啉(93mg，0.43mmol)。将悬浮物置于预热过的油浴中，并且在70℃搅拌2小时30分钟。然后加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(0.27mL，1.7mmol)，并且将混合物在85℃搅拌16小时。将混合物浓缩并且经硅胶色谱纯化(0-40％[9∶1甲醇∶氢氧化铵]/氯仿)，然后经反相制备性HPLC纯化(0-40％[0.1％TFA]-甲醇-水)，得到(2R)-N-(6，8-二甲基-3-异喹啉基)-4′H-螺[4-氮杂二环[2.2.2]辛烷-2，5′-[1，3]噁唑]-2′-胺，为三氟乙酸盐(24mg，0.053mmol，产率12％)，为白色固体。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm  9.29(s，1H)，7.54(s，1H)，7.43(s，1H)，7.34(s，1H)，4.38(d，J＝11.04Hz，1H)，4.17(d，J＝11.04Hz，1H)，3.94-4.10(m，1H)，3.86(dd，J＝15.06，2.26Hz，1H)，3.51-3.67(m，1H)，3.37-3.51(m，3H)，2.77(s，3H)，2.73(d，J＝3.51Hz，1H)，2.48-2.57(m，3H)，2.30-2.46(m，1H)，1.94-2.28(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.90；[M+H]+＝337.38。
实施例296
(R)-N-(3，4′-联吡啶-2′-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
(R)-N-(3，4′-联吡啶-2′-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例28步骤A-B的一般操作由4-溴吡啶-2-胺、吡啶-3-基硼酸和1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物来制备。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.95(br.s.，2H)，8.66(d，J＝4.6Hz，1H)，8.31(d，J＝5.5Hz，1H)，8.14(br.s.，1H)，7.54(d，J＝7.6Hz，1H)，7.26(br.s.，2H)，3.85(br.s.，1H)，3.58(s，1H)，3.00(br.s.，2H)，2.67(br.s.，4H)，1.90(br.s.，2H)，1.59(br.s.，2H)，1.45(br.s.，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.12；[M+H]+＝336.18。
实施例297
(R)-N-(5-氯-3，4′-联吡啶-2′-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502362
(R)-N-(5-氯-3，4′-联吡啶-2′-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例28步骤A-B的一般操作由4-溴吡啶-2-胺、5-氯吡啶-3-基硼酸和1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物来制备。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.92(s，2H)，8.71(d，J＝2.1Hz，1H)，8.19-8.39(m，2H)，7.30(d，J＝4.3Hz，2H)，3.77-3.95(m，1H)，3.59(d，J＝10.1Hz，1H)，3.01(d，J＝4.9Hz，2H)，2.61-2.86(m，4H)，2.00(s，1H)，1.83-1.96(m，1H)，1.55-1.68(m，2H)，1.40-1.54(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.91；[M+H]+＝370.09。
实施例298
(R)-N-(6-甲氧基-3，4′-联吡啶-2′-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502371
(R)-N-(6-甲氧基-3，4′-联吡啶-2′-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例28步骤A-B的一般操作由4-溴吡啶-2-胺、6-甲氧基吡啶-3-基硼酸和1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物制备。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.79-9.21(m，1H)，8.46-8.66(m，1H)，8.26(s，1H)，7.97-8.14(m，1H)，6.99-7.27(m，2H)，6.83-6.99(m，1H)，3.92(s，4H)，3.49-3.62(m，1H)，2.99(d，J＝4.3Hz，2H)，2.66(d，J＝7.6Hz，4H)，1.79-2.05(m，2H)，1.33-1.63(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.98；[M+H]+＝366.17。
实施例299
(R)-N-(6-氟-3，4′-联吡啶-2′-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502381
(R)-N-(6-氟-3，4′-联吡啶-2′-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例28步骤A-B的一般操作由4-溴吡啶-2-胺、2-氟-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂戊环-2-基)吡啶和1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物制备。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.90-9.17(m，1H)，8.57-8.71(m，1H)，8.31(d，J＝5.5Hz，2H)，7.31-7.40(m，1H)，7.01-7.29(m，2H)，3.76-3.95(m，1H)，3.59(d，J＝10.4Hz，1H)，3.01(br.s.，2H)，2.68(br.s.，4H)，1.95-2.05(m，1H)，1.81-1.95(m，1H)，1.59(br.s.，2H)，1.37-1.53(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.68；[M+H]+＝354.09。
实施例300
(R)-N-(4-(3-氯-4-氟-苯基)吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502382
(R)-N-(4-(3-氯-4-氟-苯基)吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例28步骤A-B的一般操作由4-溴吡啶-2-胺、3-氯-4-氟苯基硼酸和1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物制备。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.92-9.16(m，1H)，8.28(d，J＝5.2Hz，1H)，7.88-8.09(m，1H)，7.66-7.81(m，1H)，7.43-7.63(m，1H)，7.19-7.30(m，1H)，6.99-7.17(m，1H)，3.77-3.94(m，1H)，3.53-3.66(m，1H)，2.99(br.s.，2H)，2.67(br.s.，4H)，1.82-2.03(m，2H)，1.52-1.66(m，2H)，1.37-1.53(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.65；[M+H]+＝387.10。
实施例301
(R)-N-(4-间甲苯基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502391
(R)-N-(4-间甲苯基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例28步骤A-B的一般操作由4-溴吡啶-2-胺、间甲苯基硼酸和1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物制备。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.86-9.25(m，1H)，8.26(d，J＝5.5Hz，1H)，7.45-7.57(m，2H)，7.39(t，J＝7.5Hz，1H)，7.27(d，J＝7.3Hz，1H)，7.18(d，J＝4.3Hz，2H)，3.76-3.98(m，1H)，3.58(d，J＝10.4Hz，1H)，2.99(d，J＝5.8Hz，2H)，2.72-2.85(m，2H)，2.67(t，J＝7.6Hz，2H)，2.39(s，3H)，1.83-2.05(m，2H)，1.52-1.64(m，2H)，1.36-1.51(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.54；[M+H]+＝349.19。
实施例302
(R)-N-(4-苯基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502392
(R)-N-(4-苯基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例28步骤A-B的一般操作由4-溴吡啶-2-胺来制备。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.91-9.29(m，1H)，8.27(d，J＝5.5Hz，1H)，7.73(d，J＝7.3Hz，2H)，7.38-7.58(m，3H)，6.92-7.27(m，2H)，3.78-3.94(m，1H)，3.59(d，J＝10.4Hz，1H)，2.91-3.08(m，2H)，2.59-2.87(m，4H)，1.82-2.05(m，2H)，1.59(br.s.，2H)，1.36-1.53(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.24；[M+H]+＝335.15。
实施例303
(R)-N-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502401
(R)-N-(4-(1-甲基-1H-吡唑-4-基)吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例28步骤A-B的一般操作由4-溴吡啶-2-胺、1-甲基-4-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂戊环-2-基)-1H-吡唑和1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物制备。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.80-9.17(m，1H)，8.26(s，1H)，8.14(d，J＝5.2Hz，1H)，7.94(br.s.，1H)，7.06(d，J＝4.3Hz，2H)，3.88(s，4H)，3.56(d，J＝9.8Hz，1H)，2.98(br.s.，2H)，2.60-2.86(m，4H)，1.79-2.07(m，2H)，1.58(br.s.，2H)，1.46(dd，J＝9.6，2.6Hz，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.7；[M+H]+＝339.18。
实施例304
(R)-N-(4-噻唑-4-基)吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
(R)-N-(4-(噻唑-4-基)吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例28步骤A-B的一般操作由4-溴吡啶-2-胺、4-(三丁基甲锡烷基)噻唑和1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物制备。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 9.25(d，J＝1.8Hz，2H)，8.40(s，1H)，8.27(d，J＝5.5Hz，1H)，7.23-7.53(m，2H)，3.85(br.s.，1H)，3.58(d，J＝10.4Hz，1H)，3.00(d，J＝6.7Hz，2H)，2.73-2.85(m，2H)，2.68(t，J＝7.8Hz，2H)，1.84-2.04(m，2H)，1.53-1.68(m，2H)，1.47(d，J＝7.0Hz，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.78；[M+H]+＝342.17。
实施例305
(R)-N-(6-硝基-3，4′-联吡啶-2′-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502411
(R)-N-(6-硝基-3，4′-联吡啶-2′-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺遵循实施例28步骤A-B的一般操作由4-溴吡啶-2-胺、2-硝基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂戊环-2-基)吡啶和1，1′-双(二苯基膦基)二茂铁-二氯化钯(II)二氯甲烷络合物制备。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm9.06(br.s.，2H)，8.52-8.67(m，1H)，8.31-8.46(m，2H)，7.13-7.44(m，2H)，3.78-3.94(m，1H)，3.60(d，J＝10.1Hz，1H)，3.00(br.s.，2H)，2.59-2.84(m，4H)，2.00(br.s.，2H)，1.59(br.s.，2H)，1.38-1.53(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.81；[M+H]+＝381.2。
实施例306
(R)-N-(5-氯-6-甲基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502412
(R)-N-(5-氯-6-甲基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：遵循实施例23步骤A-B的一般操作，使用5-氯-6-甲基吡啶-2-胺作为起始物质。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.81(br.s.，1H)，7.59(br.s.，1H)，6.64(br.s.，1H)，3.82(br.s.，1H)，3.56(d，J＝10.4Hz，1H)，2.97(s，2H)，2.58-2.82(m，4H)，2.48(br.s.，3H)，1.98(br.s.，1H)，1.81-1.93(m，1H)，1.58(br.s.，2H)，1.28-1.51(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.89；[M+H]+＝307.08。
实施例307
(R)-N-(5-氟-4-甲基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛-2-胺
(R)-N-(5-氟-4-甲基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：遵循实施例23步骤A-B的一般操作，使用5-氟-4-甲基吡啶-2-胺作为起始物质。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.59-8.97(m，1H)，8.04(s，1H)，6.50-6.95(m，1H)，3.79(br.s.，1H)，3.53(d，J＝10.4Hz，1H)，2.96(br.s.，2H)，2.60-2.84(m，4H)，2.21(s，3H)，1.95(br.s.，2H)，1.52-1.66(m，2H)，1.45(ddd，J＝6.9，2.9，2.7Hz，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.63；[M+H]+＝291.12。
实施例308
(R)-N-(3，5-二氯-6-甲基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502422
(R)-N-(3，5-二氯-6-甲基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：遵循实施例23步骤A-B的一般操作，使用3，5-二氯-6-甲基吡啶-2-胺作为起始物质。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.83(br.s.，1H)，7.86(d，J＝2.1Hz，1H)，3.85(d，J＝9.8Hz，1H)，3.59(d，J＝10.1Hz，1H)，3.00(br.s.，1H)，2.73-2.84(m，1H)，2.67(t，J＝7.5Hz，1H)，2.49(dd，J＝14.5，2.0Hz，6H)，2.01(br.s.，1H)，1.89(br.s.，1H)，1.59(br.s.，2H)，1.37-1.51(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.07；[M+H]+＝341.06。
实施例309
(R)-N-(4，5-二甲基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502431
(R)-N-(4，5-二甲基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：遵循实施例23步骤A-B的一般操作，使用4，5-二甲基吡啶-2-胺作为起始物质。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.71-9.29(m，1H)，7.92(s，1H)，6.28-7.02(m，1H)，3.80(br.s.，1H)，3.53(d，J＝10.1Hz，1H)，2.87-3.03(m，2H)，2.59-2.85(m，4H)，2.04-2.26(m，6H)，1.80-1.99(m，2H)，1.33-1.64(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.67；[M+H]+＝287.20。
实施例310
(R)-N-(5-甲氧基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
(R)-N-(5-甲氧基吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：遵循实施例23步骤A-B的一般操作，使用5-甲氧基吡啶-2-胺作为起始物质。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.57-9.10(m，1H)，7.91(d，J＝3.1Hz，1H)，7.30(dd，J＝8.9，3.4Hz，1H)，6.54-7.04(m，1H)，3.72-3.85(m，4H)，3.52(d，J＝10.1Hz，1H)，2.88-3.03(m，2H)，2.76(d，J＝5.8Hz，2H)，2.66(t，J＝7.6Hz，2H)，1.81-2.02(m，2H)，1.51-1.64(m，2H)，1.38-1.49(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.46；[M+H]+＝289.17。
实施例311
(R)-N-(4-氯异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502441
步骤A：4-氯异喹啉-3-胺
在室温，向在甲醇(60mL)中的异喹啉-3-胺(2.02g，14.0mmol)加入N-氯代琥珀酰亚胺(2.19g，16.4mmol)。将反应混合物在室温搅拌3小时，然后真空浓缩。粗物质经色谱纯化(Biotage：10-100％乙酸乙酯/己烷)，得到4-氯异喹啉-3-胺(2.1g，11.8mmol，产率84％)，为固体。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.86(s，1H)，7.93(d，J＝7.6Hz，1H)，7.79(d，J＝8.5Hz，1H)，7.68(td，J＝6.7，1.8Hz，1H)，7.24-7.35(m，1H)，6.32(br.s.，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.50；[M+H]+＝178.96。
步骤B：(R)-N-(4-氯异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502443
(R)-N-(4-氯异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：遵循实施例267步骤A-B的一般操作，使用4-氯异喹啉-3-胺(来自上述步骤A)作为起始物质。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.98-9.10(m，1H)，8.57-8.95(m，1H)，7.99-8.18(m，2H)，7.79(s，1H)，7.51(s，1H)，3.84(d，J＝9.8Hz，1H)，3.35-3.51(m，1H)，3.02(d，J＝5.5Hz，2H)，2.78(s，2H)，2.61-2.73(m，2H)，2.00(s，2H)，1.55-1.65(m，2H)，1.42-1.54(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.92；[M+H]+＝343.09。
实施例312
(R)-N-(7-氯-8-氟异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛-2-胺
Figure BDA00001827380502451
步骤A：N-(3-氯-2-氟苄基)-2，2-二乙氧基乙脒
Figure BDA00001827380502452
将(3-氯-2-氟苯基)甲胺(1.0g，6.27mmol)加至2，2-二乙氧基亚氨乙酸甲酯(1.12g，6.96mmol)于甲醇(10ml)中的溶液中。将混合物在70℃加热1小时。混合物经色谱纯化(Biotage：100％乙酸乙酯)，得到N-(3-氯-2-氟苄基)-2，2-二乙氧基乙脒(1.3g，4.5mmol，产率65％)，为无色粘稠油状物。1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 7.23-7.40(m，2H)，7.07(t，J＝7.9Hz，1H)，4.93(s，1H)，4.54(s，2H)，3.50-3.74(m，4H)，1.18-1.35(m，6H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.78；[M+H]+＝289.17。
步骤B：7-氯-8-氟异喹啉-3-胺
Figure BDA00001827380502453
向N-(3-氯-2-氟苄基)-2，2-二乙氧基乙脒(0.97g，3.36mmol)中加入硫酸(4mL，75mmol)。将混合物加热至40℃，保持28小时。将反应混合物冷却至室温，并且用氢氧化钠水溶液(～15M)淬灭，直到反应混合物的pH值为约7。粗产物用乙酸乙酯萃取(2x50mL)，有机相用MgSO4干燥，过滤，然后真空浓缩。粗产物经色谱纯化(Biotage：100％乙酸乙酯至90/10％乙酸乙酯/MeOH)，得到7-氯-8-氟异喹啉-3-胺(0.58g，2.95mmol，产率88％)为粉末。1HNMR(500MHz，DMSO-d6)d ppm 8.97(s，1H)，7.47-7.57(m，1H)，7.38-7.45(m，1H)，6.67(s，1H)，6.33(s，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.18；[M+H]+＝196.95。
步骤C：(R)-N-(7-氯-8-氟异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502461
(R)-N-(7-氯-8-氟异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：遵循实施例267步骤A-B的一般操作，使用7-氯-8-氟异喹啉-3-胺(来自上述步骤B)作为起始物质。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 9.19(d，J＝2.1Hz，1H)，8.30-8.85(m，1H)，7.68(br.s.，2H)，6.93-7.43(m，1H)，3.73-4.10(m，1H)，3.48-3.70(m，1H)，3.02(br.s.，2H)，2.59-2.86(m，4H)，1.80-2.08(m，2H)，1.60(br.s.，2H)，1.37-1.53(m，1H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.22；[M+H]+＝361.06。
实施例313
(R)-N-(1-甲基异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502462
(R)-N-(1-甲基异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：遵循实施例312步骤A-C的一般操作，使用1-苯基乙胺作为起始物质。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 8.10(d，J＝8.2Hz，1H)，7.72(d，J＝8.2Hz，1H)，7.60(t，J＝7.5Hz，1H)，7.44(t，J＝7.6Hz，1H)，7.03-7.33(m，1H)，4.01(d，J＝10.1Hz，1H)，3.69(d，J＝10.1Hz，1H)，3.19-3.31(m，2H)，3.12(d，J＝15.0Hz，1H)，2.90-3.01(m，5H)，2.77-2.90(m，2H)，2.17(br.s.，2H)，1.58-1.87(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.09；[M+H]+＝323.16。
实施例314
(R)-N-(6-(4-氟苯基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502471
(R)-N-(6-(4-氟苯基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例256步骤A-C的方法，由6-氯嘧啶-4-胺和4-氟苯基硼酸开始制备。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.75(1H，s)，7.93-8.11(2H，m)，7.06-7.30(3H，m)，4.03(1H，d，J＝10.32Hz)，3.73(1H，d，J＝10.32Hz)，3.18-3.27(1H，m)，3.05-3.16(1H，m)，2.66-3.00(4H，m)，2.01-2.20(2H，m)，1.49-1.87(3H，m)。LC/MS RT＝1.53；[M+H]+＝354.24。
实施例315
(R)-N-(6-(3-氟苯基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502472
(R)-N-(6-(3-氟苯基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例256步骤A-C的方法，由6-氯嘧啶-4-胺和3-氟苯基硼酸开始制备。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.80(1H，d，J＝1.26Hz)，7.71-7.85(2H，m)，7.50(1H，td，J＝7.99，5.92Hz)，7.11-7.36(2H，m)，4.08(1H，d，J＝10.58Hz)，3.80(1H，d，J＝10.58Hz)，3.39-3.48(1H，m)，3.33(1H，s)，2.83-3.20(4H，m)，2.10-2.33(2H，m)，1.65-1.96(3H，m)。LC/MS RT＝1.59；[M+H]+＝354.24。
实施例316
(R)-N-(5-氟嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502473
(R)-N-(5-氟嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例231步骤B-C的方法，由2-氯-5-氟嘧啶开始制备。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.50(2H，d，J＝0.76Hz)，4.03(1H，d，J＝10.07Hz)，3.77(1H，d，J＝10.32Hz)，3.47-3.57(1H，m)，3.36-3.43(1H，m)，3.01-3.24(4H，m)，2.15-2.40(2H，m)，1.68-2.03(3H，m)。LC/MS RT＝0.30；[M+H]+＝278.19。
实施例317
(R)-N-(4-氯-5-甲氧基嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502481
(R)-N-(4-氯-5-甲氧基嘧啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例231步骤B-C的方法，由2，4-二氯-5-甲氧基嘧啶开始制备。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 7.99(1H，s)，4.13(1H，d，J＝10.83Hz)，3.91(4H，d，J＝10.83Hz)，3.76-3.84(1H，m)，3.64-3.71(1H，m)，3.30-3.51(4H，m)，2.43-2.52(1H，m)，2.37(1H，d，J＝3.27Hz)，2.09(1H，dd，J＝9.32，4.78Hz)，1.88-2.03(2H，m)。LC/MS RT＝0.30；[M+H]+＝278.19。
实施例318
(R)-N-(6，8-二氟异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502482
(R)-N-(6，8-二氟异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例279步骤A-D的方法，由(3，5-二氟苯基)甲胺开始制备。MS(LC/MS)R.T.＝1.42；[M+H]+＝345.26。
实施例319
(R)-N-(6，7-二氟异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502491
(R)-N-(6，7-二氟异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例279步骤A-D的方法，由(3，4-二氟苯基)甲胺开始制备。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 8.97(1H，s)，7.73-7.91(1H，m)，7.58(1H，dd，J＝11.14，7.78Hz)，7.30(1H，s)，4.01(1H，d，J＝10.07Hz)，3.71(1H，d，J＝10.07Hz)，3.31(1H，br.s.)，3.14-3.24(1H，m)，3.03(2H，d，J＝7.32Hz)，2.83-2.98(2H，m)，2.20(2H，br.s.)，1.61-1.91(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.45；[M+H]+＝345.26。
实施例320
(R)-N-(5，8-二氟异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502492
(R)-N-(5，8-二氟异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例279步骤A-D的方法，由(2，5-二氟苯基)甲胺开始制备。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 9.25(1H，s)，7.43(1H，br.s.)，7.20-7.34(1H，m)，6.91-7.12(1H，m)，4.04(1H，d，J＝10.07Hz)，3.74(1H，d，J＝10.07Hz)，3.30(1H，br.s.)，3.13-3.23(1H，m)，3.03(2H，d，J＝7.63Hz)，2.82-2.96(2H，m)，2.21(2H，br.s.)，1.58-1.92(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.37；[M+H]+＝345.33。
实施例321
(R)-N-(7-氟喹唑啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502501
(R)-N-(7-氟喹唑啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例239步骤A-B的方法，由7-氟喹唑啉-2-胺开始制备。1HNMR(400MHz，MeOD)δppm 9.22(1H，s)，7.95(1H，dd，J＝8.81，6.04Hz)，7.47(1H，dd，J＝10.45，2.14Hz)，7.24(1H，td，J＝8.75，2.39Hz)，4.07(1H，d，J＝10.07Hz)，3.77(1H，d，J＝10.07Hz)，3.25(1H，s)，3.07-3.17(1H，m)，2.89-3.02(2H，m)，2.75-2.88(2H，m)，2.04-2.26(2H，m)，1.50-1.85(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.06；[M+H]+＝328.33。
实施例322
(R)-N-(5-氯喹唑啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
(R)-N-(5-氯喹唑啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例239步骤A-B的方法，由5-氯喹唑啉-2-胺开始制备。1HNMR(400MHz，MeOD)δppm 9.53(1H，s)，7.62-7.84(2H，m)，7.47(1H，dd，J＝6.80，1.51Hz)，4.09(1H，d，J＝10.32Hz)，3.80(1H，d，J＝10.32Hz)，3.36(1H，s)，3.15-3.24(1H，m)，3.00(2H，t，J＝7.68Hz)，2.79-2.95(2H，m)，2.05-2.32(2H，m)，1.53-1.87(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.36；[M+H]+＝344.29
实施例323
(R)-N-(5-氟喹唑啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502503
(R)-N-(5-氟喹唑啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例239步骤A-B的方法，由5-氟喹唑啉-2-胺开始制备。1HNMR(400MHz，MeOD)δppm 9.46(1H，s)，7.77(1H，td，J＝8.18，6.30Hz)，7.63(1H，d，J＝8.56Hz)，7.00-7.20(1H，m)，4.08(1H，d，J＝10.07Hz)，3.77(1H，d，J＝10.07Hz)，3.25(1H，s)，3.07-3.17(1H，m)，2.94(2H，t，J＝7.68Hz)，2.72-2.88(2H，m)，2.05-2.21(2H，m)，1.48-1.83(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.10；[M+H]+＝328.33。
实施例324
(R)-N-(7-氟-4-甲基喹唑啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502511
(R)-N-(7-氟-4-甲基喹唑啉-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例239步骤A-B的方法，由7-氟-4-甲基喹唑啉-2-胺开始制备。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.13(1H，dd，J＝9.07，6.04Hz)，7.46(1H，dd，J＝10.45，2.64Hz)，7.22(1H，td，J＝8.81，2.77Hz)，4.06(1H，d，J＝10.07Hz)，3.75(1H，d，J＝10.07Hz)，3.23(1H，s)，3.06-3.15(1H，m)，2.94(2H，t，J＝7.68Hz)，2.73-2.88(5H，m)，2.06-2.24(2H，m)，1.51-1.86(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.25；[M+H]+＝342.29。
实施例325
(R)-N-(6-氟-1-甲基异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502512
(R)-N-(6-氟-1-甲基异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例279步骤A-D的方法，由(S)-1-(4-氟苯基)乙胺开始制备。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 8.23(1H，dd，J＝9.16，5.49Hz)，7.44(1H，dd，J＝9.92，2.59Hz)，7.22-7.38(2H，m)，4.17(1H，d，J＝10.99Hz)，3.94(1H，d，J＝10.68Hz)，3.71-3.79(1H，m)，3.61-3.69(1H，m)，3.39-3.49(1H，m)，3.33-3.39(3H，m)，2.95(3H，s)，2.49(1H，br.s.)，2.37(1H，tt，J＝10.07，3.36Hz)，2.05-2.16(1H，m)，1.93-2.05(2H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.47；[M+H]+＝341.25。
实施例326
(R)-N-(6-氯-1-甲基异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502521
(R)-N-(6-氯-1-甲基异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例279步骤A-D的方法，由1-(4-氯苯基)乙胺开始制备。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 8.23(1H，dd，J＝9.16，5.49Hz)，7.44(1H，dd，J＝9.92，2.59Hz)，7.22-7.38(2H，m)，4.17(1H，d，J＝10.99Hz)，3.94(1H，d，J＝10.68Hz)，3.71-3.79(1H，m)，3.61-3.69(1H，m)，3.39-3.49(1H，m)，3.33-3.39(3H，m)，2.95(3H，s)，2.49(1H，br.s.)，2.37(1H，tt，J＝10.07，3.36Hz)，2.05-2.16(1H，m)，1.93-2.05(2H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.79；[M+H]+＝357.28。
实施例327
(R)-N-(7-氟-1-甲基异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
(R)-N-(7-氟-1-甲基异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例279步骤A-D的方法，由1-(3-氟苯基)乙胺开始制备。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 7.55-7.81(2H，m)，7.38(1H，t，J＝7.55Hz)，7.16(1H，br.s.)，3.95(1H，d，J＝9.82Hz)，3.64(1H，d，J＝9.82Hz)，3.20(1H，d，J＝14.86Hz)，3.01-3.13(1H，m)，2.63-2.97(7H，m)，2.11(2H，br.s.)，1.41-1.81(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.63；[M+H]+＝341.32。
实施例328
(R)-N-(5，7-二氟-1-甲基异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502531
(R)-N-(5，7-二氟-1-甲基异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例279步骤A-D的方法，由1-(3，5-二氟苯基)乙胺开始制备。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 7.78(1H，d，J＝9.77Hz)，7.39-7.55(2H，m)，4.31(1H，d，J＝10.99Hz)，4.11(1H，d，J＝10.99Hz)，3.88-3.97(1H，m)，3.79-3.86(1H，m)，3.55(1H，t，J＝11.90Hz)，3.37-3.47(3H，m)，3.00(3H，s)，2.64(1H，br.s.)，2.32-2.45(1H，m)，2.18(1H，dddd，J＝11.71，7.13，6.94，6.56Hz)，1.99-2.13(2H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.67；[M+H]+＝359.22。
实施例329
(R)-N-(6-(6-(甲基硫基)吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502541
(R)-N-(6-(6-(甲基硫基)吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例261步骤A-B的方法，由6-(6-氟吡啶-3-基)嘧啶-4-胺开始制备。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.02(1H，d，J＝2.52Hz)，8.78(1H，s)，8.20(1H，dd，J＝8.44，2.39Hz)，7.36(1H，d，J＝8.56Hz)，7.26(1H，br.s.)，4.06(1H，d，J＝10.58Hz)，3.77(1H，d，J＝10.32Hz)，3.34(1H，s)，3.14-3.22(1H，m)，2.82-3.08(4H，m)，2.58(3H，s)，2.08-2.24(2H，m)，1.60-1.88(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝3.09；[M+H]+＝383.2。
实施例330
(R)-N-(6-(2-氟吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502542
步骤A：6-(2-氟吡啶-3-基)嘧啶-4-胺
将6-氯嘧啶-4-胺(1.5g，11.58mmol)、2-氟吡啶-3-基硼酸(2.039g，14.47mmol)和Na2CO3(3.68g，34.7mmol)的混合物悬浮于二噁烷(15mL)/EtOH(2mL)/水(3mL)的混合物中。将混合物在微波合成器中于125℃加热20分钟，然后浓缩，在硅胶柱上使用10-60％乙酸乙酯/己烷，接着使用5-25％9∶1甲醇∶氢氧化铵/乙酸乙酯进行纯化，生成灰白色固体(1.5g，789mmol，68％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.57(1H，ddd，J＝9.95，7.68，2.01Hz)，8.48(1H，d，J＝1.26Hz)，8.33(1H，td，J＝3.02，2.01Hz)，7.51(1H，ddd，J＝7.37，4.97，2.01Hz)，7.12(2H，br.s.)，6.96(1H，d，J＝1.26Hz)。MS(LC/MS)R.T.＝0.43；[M+H]+＝191.15。
步骤B：4-(2-氟吡啶-3-基)-6-异硫氰基嘧啶
Figure BDA00001827380502551
向6-(2-氟吡啶-3-基)嘧啶-4-胺(0.3g，1.577mmol)于DMF中的溶液中，加入NaH(0.126g，3.15mmol)。继续搅拌1.5小时，加入1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.366g，1.577mmol)。将混合物在室温搅拌2小时，在硅胶上使用10-15％乙酸乙酯/己烷纯化，生成橙色固体(0.133g，0.573mmol，36％)。MS(LC/MS)R.T.＝2.48；[M+H]+233.08。
步骤C：(S)-1-(6-(2-氟吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-3-((3-羟基奎宁环-3-基)甲基)硫脲
Figure BDA00001827380502552
向在N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的(4-(2-氟吡啶-3-基)-6-异硫氰基嘧啶(0.18g，0.775mmol)加入Cs2CO3(0.631g，1.938mmol)和(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.178g，0.775mmol)。将悬浮液在室温搅拌18小时，并且浓缩。残余物在硅胶上使用0-10％9.5∶0.5甲醇∶氢氧化铵/乙酸乙酯纯化，生成黄色固体(0.2g，0.515mmol，66％)。MS(LC/MS)R.T.＝1.82；[M+H]+＝389.27。
步骤D：(R)-N-(6-(2-氟吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
向((S)-1-(6-(2-氟吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-3-((3-羟基奎宁环-3-基)甲基)硫脲(0.2g，0.515mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(20mL)中的悬浮液中，加入Cs2CO3(0.168g，0.515mmol)和DIC(0.241mL，1.545mmol)。将悬浮液在室温搅拌18小时，然后在60℃搅拌3小时。将混合物浓缩，并且残余物在硅胶上使用2-7％9.5∶0.5甲醇∶氢氧化铵/乙酸乙酯纯化，得到(R)-N-(6-(2-氟吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺，为浅黄色固体(0.029g，0.081mmol，16％)。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.83(1H，d，J＝1.26Hz)，8.55(1H，ddd，J＝9.76，7.62，2.01Hz)，8.29(1H，dt，J＝3.02，1.51Hz)，7.46(1H，ddd，J＝7.37，5.10，1.89Hz)，7.33(1H，s)，4.06(1H，d，J＝10.32Hz)，3.76(1H，d，J＝10.32Hz)，3.25(1H，s)，3.09-3.19(1H，m)，2.95(2H，t，J＝7.68Hz)，2.74-2.91(2H，m)，2.04-2.26(2H，m)，1.55-1.87(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.24；[M+H]+＝355.28。
实施例331
(R)-N-(6-(6-氟吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502561
(R)-N-(6-(6-氟吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例330步骤A-D的方法，由6-氟吡啶-3-基硼酸开始制备。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.88(1H，d，J＝2.52Hz)，8.82(1H，s)，8.51-8.60(1H，m)，7.25(1H，s)，7.19(1H，dd，J＝8.56，2.52Hz)，4.06(1H，d，J＝10.32Hz)，3.76(1H，d，J＝10.32Hz)，3.22(1H，s)，3.07-3.14(1H，m)，2.86-2.98(2H，m)，2.70-2.87(2H，m)，2.03-2.20(2H，m)，1.54-1.87(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.21；[M+H]+＝355.28。
实施例332
(R)-N-(6-(5-氟吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502571
(R)-N-(6-(5-氟吡啶-3-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例330步骤A-D的方法，由5-氟吡啶-3-基硼酸开始制备。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.06(1H，d，J＝1.26Hz)，8.81(1H，d，J＝1.01Hz)，8.56(1H，d，J＝2.77Hz)，8.26(1H，dt，J＝9.82，2.27Hz)，7.30(1H，br.s.)，4.06(1H，d，J＝10.32Hz)，3.75(1H，d，J＝10.32Hz)，3.16-3.26(1H，m)，3.04-3.15(1H，m)，2.86-3.00(2H，m)，2.81(2H，t，J＝7.30Hz)，2.01-2.22(2H，m)，1.52-1.84(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.20；[M+H]+＝355.28。
实施例333
(R)-N-(6-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502572
((R)-N-(6-(1-甲基-1H-吡唑-5-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例330步骤A-D的方法，由1-甲基-5-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼杂戊环-2-基)-1H-吡唑开始制备。1HNMR(500MHz，MeOD)δppm 8.89(1H，s)，7.54(1H，d，J＝2.14Hz)，7.28(1H，br.s.)，6.84(1H，d，J＝2.14Hz)，4.23(3H，s)，4.18(1H，d，J＝10.99Hz)，3.98(1H，d，J＝10.68Hz)，3.81-3.88(1H，m)，3.72-3.80(1H，m)，3.53(1H，t，J＝11.75Hz)，3.34-3.46(3H，m)，2.53(1H，br.s.)，2.33-2.45(1H，m)，2.10-2.22(1H，m)，1.97-2.12(2H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.15；[M+H]+＝340.29。
实施例334
(R)-N-(6-(吡嗪-2-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502581
步骤A：6-[二(叔丁氧基羰基)氨基]-4-氯嘧啶
Figure BDA00001827380502582
将6-氯嘧啶-4-胺(4.1g，31.6mmol)悬浮于乙腈中。加入DMAP(0.966g，7.91mmol)和一缩二碳酸二叔丁基酯(14.74g，67.5mmol)，然后将混合物在室温搅拌3天。蒸发出溶剂，残余物在硅胶上使用0-15％乙酸乙酯/己烷纯化，生成6-[二(叔丁氧基羰基)氨基]-4-氯嘧啶，为白色固体(6.27g，19.01mmol，60％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.69(1H，d，J＝0.76Hz)，7.88(1H，d，J＝1.01Hz)，1.58(18H，s)。
步骤B：6-[二(叔丁氧基羰基)氨基]-4-(2’-吡嗪基)嘧啶
Figure BDA00001827380502583
将6-[二(叔丁氧基羰基)氨基]-4-氯嘧啶(1.608g，4.88mmol)、2-(三丁基甲锡烷基)吡嗪(1.5g，4.06mmol)和Pd(Ph3P)4(0.225g，0.195mmol)在甲苯中混合，用氮气吹洗，回流加热17小时，冷却至室温，浓缩，并且在硅胶上使用10％乙酸乙酯/己烷，接着使用20-50％乙酸乙酯/己烷纯化，生成黄色固体(0.94g，2.507mmol，62％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 9.67(1H，d，J＝1.01Hz)，9.05(1H，d，J＝1.26Hz)，8.60-8.77(3H，m)，1.59(18H，s)。
步骤C：6-(吡嗪-2-基)嘧啶-4-胺
Figure BDA00001827380502591
在室温，将三氟乙酸(2.77mL，36.0mmol)加至6-[双(叔丁氧基羰基)氨基]-4-(2’-吡嗪基)嘧啶(1.344g，3.60mmol)于二氯甲烷中的溶液中。将混合物在室温搅拌18小时，然后进行浓缩。将残余物吸收在乙酸乙酯中，仔细加入饱和NaHCO3。分离有机层，经Na2SO4干燥，然后浓缩。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.44(1H，d，J＝1.01Hz)，8.63-8.86(2H，m)，8.51(1H，d，J＝1.01Hz)，7.38(1H，d，J＝1.26Hz)，7.17(2H，br.s.)。MS(LC/MS)R.T.＝0.37；[M+H]+＝174.23。
步骤D：6-(吡嗪-2-基)嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502592
历时15分钟的期限，向6-(吡嗪-2-基)嘧啶-4-胺(0.2g，1.155mmol)于DMF中的溶液中，加入NaOH(0.115mL，2.310mmol)、CS2(0.174mL，2.89mmol)、NaOH(0.115mL，2.310mmol)和MeI(0.181mL，2.89mmol)。继续搅拌1.5小时，将混合物倾倒至水中。分离橙色固体，用水洗涤，干燥，生成亮黄色固体(0.14g，0.505mmol，44％)。MS(LC/MS)R.T.＝3.19；[M+H]+＝278.19。
步骤E：(R)-N-(6-(吡嗪-2-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502593
将6-(吡嗪-2-基)嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(0.139g，0.501mmol)、Cs2CO3(0.408g，1.253mmol)和(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(0.115g，0.501mmol)于N，N-二甲基甲酰胺(10ml)中的混合物在80℃加热3小时。将混合物浓缩，并且在硅胶上使用0-10％9.5∶0.5甲醇∶氢氧化铵/乙酸乙酯纯化，生成(R)-N-(6-(吡嗪-2-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺，为灰白色固体(0.066g，0.194mmol，39％)。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.46(1H，d，J＝1.51Hz)，8.83(1H，d，J＝1.26Hz)，8.67-8.72(1H，m)，8.66(1H，d，J＝2.52Hz)，7.77(1H，br.s.)，4.05(1H，d，J＝10.32Hz)，3.75(1H，d，J＝10.32Hz)，3.18-3.26(1H，m)，3.04-3.15(1H，m)，2.87-3.00(2H，m)，2.70-2.85(2H，m)，2.04-2.19(2H，m)，1.54-1.83(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝0.97；[M+H]+＝338.29。
实施例335
(2R)-N-(6，7-二甲基-3-异喹啉基)-4′H-螺[4-氮杂二环[2.2.2]辛烷-2，5′-[1，3]噁唑]-2′-胺
Figure BDA00001827380502601
步骤A：6，7-二甲基异喹啉-3-胺
Figure BDA00001827380502602
在环境温度，向2，2-二乙氧基亚氨乙酸甲酯(1.50g，9.32mmol)于甲醇(4.9mL)中的溶液中，滴加(3，4-二甲基苯基)甲胺(1.20g，8.88mmol)。然后将反应烧瓶置于预热过的油浴中，并且在70℃搅拌16小时，其后将烧瓶从油浴中移除，并且冷却至环境温度。减压除去挥发性物质，在环境温度将粗物质滴加至硫酸(19.7mL)中。将反应混合物搅拌72小时，然后将烧瓶置于冰水浴中，用水(50mL)稀释，用氢氧化钠(10N)缓慢中和至pH为10。当反应混合物变成碱性时，形成橙色析出物。过滤出析出物，用水洗涤，干燥，得到6，7-二甲基异喹啉-3-胺和5，6-二甲基异喹啉-3-胺的2∶1混合物(1.68g，9.75mmol，＞100％)。MS(LC/MS)R.T.＝0.32；[M+H]+＝173.13。
步骤B：3-异硫氰基-6，7-二甲基异喹啉
在环境温度，向1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(1.35g，5.81mmol)于二氯甲烷(19mL)中的溶液中，加入6，7-二甲基异喹啉-3-胺和5，6-二甲基异喹啉-3-胺的2∶1混合物(1.00g，5.81mmol)。将反应混合物置于预热过的油浴中，并且在40℃搅拌18小时，然后冷却，浓缩，经硅胶色谱纯化(10-35％乙酸乙酯/己烷)，得到3-异硫氰基-6，7-二甲基异喹啉和3-异硫氰基-5，6-二甲基异喹啉的2∶1混合物(186mg，0.869mmol，15％)，为黄色固体。MS(LC/MS)R.T.＝2.06；[M+H]+＝215.1。
步骤C：(2R)-N-(6，7-二甲基-3-异喹啉基)-4′H-螺[4-氮杂二环[2.2.2]辛烷-2，5′-[1，3]噁唑]-2′-胺
Figure BDA00001827380502612
向在N，N-二甲基甲酰胺(1.4mL)中的(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(99mg，0.43mmol)加入三乙胺(0.181mL，1.30mmol)和3-异硫氰基-6，7-二甲基异喹啉与3-异硫氰基-5，6-二甲基异喹啉的2∶1混合物(93mg，0.43mmol)。将悬浮液置于预热过的油浴中，并且在80℃搅拌2小时30分钟。然后加入N，N’-二异丙基碳二亚胺(0.270mL，1.74mmol)，并且将混合物在80℃搅拌16小时。将混合物浓缩并且经硅胶色谱纯化(0-40％9∶1甲醇∶氢氧化铵/氯仿)，接着经反相制备性HPLC纯化(0-40％TFA-甲醇-水)。合并产物级份，并且真空浓缩，得到(2R)-N-(6，7-二甲基-3-异喹啉基)-4′H-螺[4-氮杂二环[2.2.2]辛烷-2，5′-[1，3]噁唑]-2′-胺三氟乙酸盐和(2R)-N-(5，6-二甲基-3-异喹啉基)-4′H-螺[4-氮杂二环[2.2.2]辛烷-2，5′-[1，3]噁唑]-2′-胺三氟乙酸盐的2∶1混合物。使用ChiralpakAD-H(4.6x250mm，5μm)柱，分离两种区域异构体，流动相组成为40％甲醇(0.1％DEA)/CO2，在215nM检测，得到(2R)-N-(6，7-二甲基-3-异喹啉基)-4′H-螺[4-氮杂二环[2.2.2]辛烷-2，5′-[1，3]噁唑]-2′-胺，为白色固体(5.0mg，0.015mmol，产率3％)。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.87(1H，s)，7.90(1H，s)，7.67(1H，s)，7.50(1H，s)，3.97(1H，d，J＝10.0Hz)，3.65(1H，d，J＝10.0Hz)，3.19-3.27(1H，m)，3.04-3.17(1H，m)，2.94(2H，d，J＝7.5Hz)，2.76-2.90(2H，m)，2.38-2.50(6H，m)，2.11-2.21(2H，m)，1.57-1.85(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝0.92；[M+H]+＝337.22。
实施例336
(2R)-N-(6-甲基-1，3-苯并噁唑-2-基)-4′H-螺[4-氮杂二环[2.2.2]辛烷-2，5′-[1，3]噁唑]-2′-胺
步骤A：6-甲基苯并[d]噁唑-2-胺
Figure BDA00001827380502622
在环境温度，向干燥箱干燥的圆底烧瓶中填充二(1H-咪唑-1-基)甲亚胺(1.40g，8.69mmol)、2-氨基-5-甲基苯酚(713mg，5.79mmol)和无水THF(20ml)。将所生成的悬浮液在N2(g)气氛中回流2小时。真空除去溶剂，并且残余物经硅胶色谱纯化(0-30％9∶1甲醇∶氢氧化铵-氯仿)，得到6-甲基苯并[d]噁唑-2-胺(792mg，5.35mmol，产率92％)，为灰色固体。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 7.19-7.34(1H，m)，7.11(1H，s)，7.01(1H，d，J＝7.8Hz)，5.60(2H，br.s.)，2.43(3H，s)。MS(LC/MS)R.T.＝0.89；[M+H]+＝149.09。
步骤B：6-甲基苯并[d]噁唑-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502623
向6-甲基苯并[d]噁唑-2-胺(200mg，1.35mmol)于DMF(1.4mL)中的悬浮液中，加入20.0M氢氧化钠(135μL，2.70mmol)。将混合物在室温搅拌10分钟，然后加入二硫化碳(203μL，3.37mmol)，接着将混合物搅拌10分钟。加入额外部分的20.0M氢氧化钠(135μL，2.70mmol)，将混合物再搅拌10分钟。最后滴加碘甲烷(203μL，3.24mmol)。在添加完成后，将混合物搅拌15分钟，此时形成大量析出物。将混合物倾倒至水中，过滤收集固体，用水洗涤，干燥，得到6-甲基苯并[d]噁唑-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(289mg，1.14mmol，产率85％)，为棕色固体。MS(LC/MS)R.T.＝1.88；[M+H]+＝252.95。
步骤C：(2R)-N-(6-甲基-1，3-苯并噁唑-2-基)-4′H-螺[4-氮杂二环[2.2.2]辛烷-2，5′-[1，3]噁唑]-2′-胺
Figure BDA00001827380502631
在环境温度，向10ml小瓶中填充(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇·HCl(38.2mg，0.198mmol，DMF(2mL)、Cs2CO3(129mg，0.396mmol)和6-甲基苯并[d]噁唑-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(50mg，0.198mmol。将所生成的悬浮液搅拌1小时，然后用甲醇稀释，经反相制备性HPLC纯化(0-100％TFA-甲醇-水)，得到(2R)-N-(6-甲基-1，3-苯并噁唑-2-基)-4′H-螺[4-氮杂二环[2.2.2]辛烷-2，5′-[1，3]噁唑]-2′-胺，为三氟乙酸盐(55.3mg，0.123mmol，产率62％)，为褐色胶状物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm  9.89(br.s.，1H)，9.15(br.s.，1H)，7.33(d，J＝8.03Hz，1H)，7.31(s，1H)，7.06(d，J＝8.78Hz，1H)，4.00(d，J＝8.0Hz，1H)，3.88(d，J＝10.29Hz，1H)，3.64-3.80(m，2H)，3.34-3.44(m，1H)，3.20-3.34(m，3H)，2.44(br.s.，1H)，2.40(s，3H)，2.08-2.20(m，1H)，1.80-2.03(m，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.367，[M+H]+＝313.2。
实施例337
(2R)-N-(6-甲氧基-1，3-苯并噁唑-2-基)-4′H-螺[4-氮杂二环[2.2.2]辛烷-2，5′-[1，3]噁唑]-2′-胺
Figure BDA00001827380502632
步骤A：6-甲氧基苯并[d]噁唑-2-胺
Figure BDA00001827380502633
在环境温度，向干燥箱干燥的圆底烧瓶中填充二(1H-咪唑-1-基)甲亚胺(500mg，3.10mmol)、2-氨基-5-甲氧基苯酚-HCl(365mg，2.07mmol)、三乙胺(288μL，2.07mmol)和无水THF(20ml)。将所生成的悬浮液在N2(g)气氛下回流20小时，基于LC/MS监测发现完全转化。真空除去溶剂，并且残余物经硅胶色谱纯化(30-80％乙酸乙酯/己烷)，得到6-甲氧基苯并[d]噁唑-2-胺(307mg，1.87mmol，产率90％)，为棕色固体。1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 7.28(1H，d，J＝9.5Hz)，6.92(1H，d，J＝2.4Hz)，6.80(1H，dd，J＝8.5，2.1Hz)，5.28(2H，br.s.)。MS(LC/MS)R.T.＝1.51；[M+H]+＝165.00。
步骤B：6-甲氧基苯并[d]噁唑-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502641
向6-甲氧基苯并[d]噁唑-2-胺(238mg，1.45mmol)于DMF(2.0mL)中的悬浮液中，加入20.0M氢氧化钠(145μL，2.90mmol)。将混合物在室温搅拌10分钟，然后加入二硫化碳(219μL，3.62mmol)，接着将混合物搅拌10分钟。加入额外部分的20.0M氢氧化钠(145μL，2.90mmol)，将混合物再搅拌10分钟。最后滴加碘甲烷(218μL，3.48mmol)。将混合物再搅拌15分钟，此时形成大量析出物。将混合物倾倒至水中，过滤收集固体，用水洗涤，干燥，得到6-甲氧基苯并[d]噁唑-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯。该物质直接使用而没有表征。
步骤C：(2R)-N-(6-甲氧基-1，3-苯并噁唑-2-基)-4′H-螺[4-氮杂二环[2.2.2]辛烷-2，5′-[1，3]噁唑]-2′-胺
Figure BDA00001827380502642
在环境温度，向10ml小瓶中填充(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇·HCl(24.5mg，0.127mmol)、DMF(2mL)、Cs2CO3(83mg，0.25mmol)和6-甲氧基苯并[d]噁唑-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(34mg，0.13mmol)。将所生成的悬浮液在环境温度搅拌1小时，用甲醇稀释，经反相制备性HPLC纯化(0-100％TFA-甲醇-水)，得到(R)-N-(6-甲氧基苯并[d]噁唑-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺，为三氟乙酸盐(7.2mg，0.014mmol，产率11％)，为褐色胶状物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.95(br.s.，1H)，9.10(br.s.，1H)，7.34(d，J＝8.78Hz，1H)，7.17(d，J＝2.51Hz，1H)，6.84(dd，J＝8.53，2.51Hz，1H)，3.99(d，J＝10.54Hz，1H)，3.87(d，J＝10.54Hz，1H)，3.79(s，3H)，3.63-3.78(m，2H)，3.34-3.44(m，1H)，3.20-3.32(m，3H)，2.43(m，1H)，2.09-2.19(m，1H)，1.91-2.02(m，1H)，1.80-1.91(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.867，[M+H]+＝329.28。
实施例338A和338B
(R)-N-(5-氯异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(A)和(R)-N-(7-氯异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(B)
Figure BDA00001827380502651
步骤A：N-(3-氯苄基)-2，2-二乙氧基乙脒
Figure BDA00001827380502652
在氮气吹洗的密封试管中放置在甲醇(6mL)中的2，2-二乙氧基亚氨乙酸甲酯(2g，12.41mmol)和(3-氯苯基)甲胺(1.444mL，11.82mmol)。将试管封盖，并且在70℃加热。在18小时之后，将反应混合物冷却至室温，并且将反应混合物浓缩，得到N-(3-氯苄基)-2，2-二乙氧基乙脒(2.3克，8.5mmol，71％)，为黄色油状物。
1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 7.14-7.50(m，4H)4.80(br.s.，1H)4.29(br.s.，2H)4.05(q，J＝7.11Hz，1H)3.40-3.73(m，4H)2.01(s，1H)1.05-1.29(m，6H)LC/MS RT＝1.12分钟，[M+H]＝271.09。
步骤B：5-和7-氯-异喹啉-3-胺
Figure BDA00001827380502653
在烧瓶中放置N-(3-氯苄基)-2，2-二乙氧基乙脒(1.9g，7.02mmol)和硫酸(14mL，263mmol)。将其在室温搅拌24小时。使用10N NaOH，将反应混合物中和至pH值为9。将所生成的沉淀物溶于二氯甲烷中，水层用二氯甲烷洗涤。合并有机层并且浓缩，生成上述区域异构体(1.1克，6.1mmol，88％)，其中7-氯异喹啉-3-胺与5-氯异喹啉-3-胺的比例为2∶1。该区域异构体直接使用而没有进一步纯化。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.89(s，1H)8.81(s，2H)7.90(d，J＝2.26Hz，2H)7.82(d，J＝8.28Hz，1H)7.65(dd，J＝7.28，1.00Hz，1H)7.58(d，J＝9.03Hz，2H)7.44(dd，J＝9.03，2.26Hz，2H)7.07-7.19(m，1H)6.83(s，1H)6.64(s，2H)6.28(s，2H)6.05(s，4H)LC/MS R.T＝0.955分钟，[M+H]＝181.03。
步骤C：5-和7-氯-3-异硫氰基-异喹啉
Figure BDA00001827380502661
在小瓶中放置在二氯甲烷(10mL)中的7-氯异喹啉-3-胺/5-氯异喹啉-3-胺(550mg，3.08mmol)和1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(858mg，3.70mmol)。将反应混合物在室温搅拌。18小时之后，将反应混合物在硅胶柱上纯化(使用50％乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到7-氯-3-异硫氰基异喹啉和5-氯-3-异硫氰基异喹啉的混合物(400mg，1.8mmol，58％)，将其立即用于下一反应。LC/MS RT＝3.808分钟[M+H]＝221.0。
步骤D：(R)-N-(5-氯异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺和(R)-N-(7-氯异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502662
在小瓶中放置在DMF(8mL)中的7-氯-3-异硫氰基异喹啉/5-氯-3-异硫氰基异喹啉(400mg，1.813mmol)和(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇(340mg，2.175mmol)。向其中加入碳酸铯(1417mg，4.35mmol)。将反应混合物在50℃搅拌1小时，然后将N，N′-二异丙基碳二亚胺(0.847mL，5.44mmol)加至反应化合物中，将反应混合物搅拌过夜。18小时后，将反应混合物倾倒至水和氯仿中。收集有机相，浓缩，在Biotage柱上纯化(使用5-40％(10％NH4OH/甲醇)/氯仿洗脱)。收集产物区域异构体，并且使用制备性SFC分离，得到(R)-N-(5-氯异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(12.5mg)，为淡黄色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.14(s，1H)8.67(br.s.，1H)8.03(d，J＝8.28Hz，1H)7.82(d，J＝7.28Hz，1H)7.41(t，J＝8.03Hz，1H)3.90(br.s.，1H)3.63(br.s.，1H)2.91-3.16(m，2H)2.65-2.92(m，4H)1.85-2.19(m，2H)1.16-1.81(m，4H)LC/MS RT＝1.578分钟[M+H]＝343.08，以及(R)-N-(7-氯异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(54.9mg)分离为淡黄色固体。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.06(s，1H)8.43-8.93(m，1H)8.13(br.s.，1H)7.82(br.s.，1H)7.61(d，J＝8.28Hz，1H)3.89(br.s.，1H)3.61(br.s.，1H)3.31(br.s.，1H)2.90-3.18(m，2H)2.62-2.95(m，4H)1.82-2.13(m，2H)1.34-1.80(m，3H)LC/MS R.T＝0.898分钟[M+H]＝343.32。
实施例339
(R)-N-(6-氯噻唑并[4，5-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502671
步骤A：N-(3，5-二氯吡啶-2-基氨基硫羰基)苯甲酰胺
Figure BDA00001827380502672
向在丙酮(20mL)中的3，5-二氯吡啶-2-胺(3.87g，23.73mmol)加入苯甲酰异硫氰酸酯(3.2mL，23.73mmol)。将混合物在环境温度搅拌1小时，过滤收集所生成的沉淀物(3.89g)。将滤液返回至反应烧瓶中，并且加热回流1小时。此时反应混合物变得干燥。将固体悬浮在丙酮中，过滤收集，得到2.24gN-(3，5-二氯吡啶-2-基氨基硫羰基)苯甲酰胺(5.93g，18.18mmol，产率77％)。1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 12.78(br.s.，1H)9.25(br.s.，1H)8.46(br.s.，1H)7.94(d，J＝7.63Hz，2H)7.88(d，J＝2.44Hz，1H)7.69(t，J＝7.48Hz，1H)7.58(t，J＝7.78Hz，2H)。
步骤B：N-(6-氯噻唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酰胺
向在NMP(40mL)中的N-(3，5-二氯吡啶-2-基氨基硫羰基)苯甲酰胺(5.2g，16mmol)加入甲醇钠(1.73g，32.0mmol)。将混合物在120℃油浴中加热4小时，冷却至环境温度，倾倒至水中。过滤收集固体，经硅胶色谱纯化(0-5％(9∶1MeOH∶NH4OH)/氯仿)，得到N-(6-氯噻唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酰胺(364mg，1.256mmol，产率7.85％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 13.16(br.s.，1H)8.48-8.58(m，2H)8.13-8.23(m，2H)7.61-7.69(m，1H)7.56(t，J＝7.53Hz，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.8；[M+H]+＝290.1。
步骤C：6-氯噻唑并[4，5-b]吡啶-2-胺
将在H2SO4(4ml，75mmol)中的N-(6-氯噻唑并[4，5-b]吡啶-2-基)苯甲酰胺(364mg，1.256mmol)加热至120℃，保持30分钟，然后冷却至环境温度，用10N NaOH碱化，过滤收集所生成的固体，得到6-氯噻唑并[4，5-b]吡啶-2-胺(148mg，0.797mmol，产率63.5％)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.19-8.24(m，2H)8.09(br.s.，2H)。
步骤D：6-氯噻唑并[4，5-b]吡啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502683
将6-氯噻唑并[4，5-b]吡啶-2-胺(148mg，0.797mmol)悬浮于DMF(1ml)中，加入16N NaOH(0.100ml，1.595mmol)。将混合物在环境温度搅拌10分钟，此时加入CS2(0.120ml，1.993mmol)。将混合物在环境温度再搅拌10分钟，加入16N NaOH(0.100ml，1.595mmol)。将混合物在环境温度搅拌10分钟，此时加入碘甲烷(0.120ml，1.913mmol)。15分钟后，混合物用水稀释，过滤收集所生成的固体。滤液用氯仿萃取三次，经硫酸钠干燥。粗制的混合物经硅胶色谱纯化(2-50％EtOAc/CHCl3)，得到6-氯噻唑并[4，5-b]吡啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(50mg，0.173mmol，产率21.64％)。1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 8.57(s，1H)8.09(s，1H)2.66(s，6H)。
步骤E：(R)-N-(6-氯噻唑并[4，5-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502691
将6-氯噻唑并[4，5-b]吡啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(50mg，0.17mmol)、(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇·2HCl(40mg，0.17mmol)和碳酸铯(112mg，0.35mmol)悬浮在DMF(1mL)中，并且在开口烧瓶中于100℃油浴中加热。2.5小时之后，将混合物冷却至环境温度，然后倾倒至水中。混合物用氯仿萃取(4x)，用硫酸钠干燥，过滤，浓缩成残余物。粗制的残余物经硅胶色谱纯化(5-40％(9∶1MeOH/NH4OH)/CHCl3)，得到(R)-N-(6-氯噻唑并[4，5-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(20mg，0.056mmol，产率32.5％)，为白色粉末。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.31(d，J＝2.51Hz，1H)7.93(d，J＝2.26Hz，1H)3.99(d，J＝10.04Hz，1H)3.67(d，J＝10.04Hz，1H)3.20-3.39(m，2H)2.86-3.05(m，3H)2.67-2.87(m，2H)2.03-2.19(m，2H)1.74(ddd，J＝13.87，9.35，4.64Hz，1H)1.44-1.65(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.49；[M+H]+＝350.2。
实施例340
(R)-N-(5-氟噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502692
步骤A：5-氟噻唑并[5，4-b]吡啶-2-胺
Figure BDA00001827380502693
在0℃，将6-氟吡啶-3-胺(4g，35.7mmol)加至三颈烧瓶，所述三颈烧瓶含有硫氰酸钾(27.7g，285mmol)于乙酸(89mL)中的机械搅拌悬浮液。然后使烧瓶配备滴液漏斗，所述滴液漏斗填充有溴(5.70mL，111mmol)/乙酸(29.7mL)溶液。历时30分钟添加溴溶液，然后使溶液变成粘稠黄色混合物。在溴添加完成后，使反应混合物温热至环境温度，搅拌16小时。加入水(30mL)，将混合物加热至85℃，保持20分钟，然后过滤出固体，并且用水和甲醇洗涤，得到5-氟噻唑并[5，4-b]吡啶-2-胺(4.18g，24.71mmol，产率69.2％)，为黄色固体。
步骤B：5-氟噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502701
5-氟噻唑并[5，4-b]吡啶-2-胺(2.0g，11.8mmol)根据实施例339步骤D的方法合成，得到5-氟噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(2.17g，产率67％)，为黄色固体。1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 8.14(dd，J＝8.55，7.02Hz，1H)6.98(dd，J＝8.70，1.98Hz，1H)2.63(s，6H)。
步骤C：(R)-N-(5-氟噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502702
将5-氟噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(100mg，0.37mmol)、(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇·2HCl(84mg，0.37mmol)和碳酸铯(238mg，0.73mmol)悬浮在DMF(2mL)中，并且在开口烧瓶中于100℃油浴中加热。2.5小时之后，将混合物冷却至环境温度，然后倾倒至水中。混合物用氯仿萃取(4x)，用硫酸钠干燥，过滤并且浓缩。粗制的残余物经硅胶色谱纯化(5-40％(9∶1MeOH/NH4OH)/CHCl3)，得到((R)-N-(5-氟噻唑并[5，4-b]吡啶-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(85mg，产率66％)，为白色粉末。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 9.17(br.s.，1H)7.89(dd，J＝8.66，6.90Hz，1H)6.91(dd，J＝8.53，2.01Hz，1H)4.04(d，J＝9.54Hz，1H)3.73(d，J＝9.54Hz，1H)3.43(dd，J＝14.93，1.63Hz，1H)3.08(dd，J＝15.06，1.76Hz，1H)2.84-3.05(m，4H)2.16-2.28(m，2H)1.75-1.87(m，1H)1.53-1.70(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.37；[M+H]+＝334.2。
实施例341
(R)-N-(6-甲基噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502711
步骤A：3-溴-5-甲基吡嗪-2-胺
Figure BDA00001827380502712
向5-甲基吡嗪-2-胺(1.09g，10mmol)于氯仿(100mL)中的悬浮液中，加入吡啶(0.85mL，10.5mmol)。将混合物在箔片包裹的烧瓶中搅拌，所述烧瓶配备有滴液漏斗，历时10分钟滴加溴(0.54mL，10.5mmol)于氯仿(10mL)中的溶液。在添加完成后，使混合物再反应20分钟，然后倾倒至含有10mL水的滴液漏斗中。分离各相，有机相再次用水洗涤，用硫酸钠干燥，过滤并且真空浓缩。所生成红色油状物经硅胶色谱纯化(使用12-100％EtOAc/己烷洗脱)。收集主要UV活性峰产物，得到3-溴-5-甲基吡嗪-2-胺(1.06g，5.64mmol，产率56.4％)，为奶油色固体。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 7.85(s，1H)6.42(br.s.，2H)2.25(s，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.93；[M+H]+＝189.9。
步骤B：6-甲基噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基氨基甲酸乙酯
Figure BDA00001827380502713
向3-溴-5-甲基吡嗪-2-胺(850mg，4.52mmol)中加入乙氧基羰基异硫氰酸酯(0.51mL，4.52mmol)，接着加入甲苯(1mL)。将混合物置于预热过的100℃油浴中，在一分钟内，所有固体均溶解。15分钟后，聚集成固体物质。再过15分钟之后，加入甲醇(～5mL)，将混合物回流以溶解固体。5分钟后，将混合物冷却至室温，过滤收集固体，用甲醇洗涤，得到6-甲基噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基氨基甲酸乙酯(680mg，2.85mmol，产率63.1％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 12.48(br.s.，1H)8.48(s，1H)4.30(q，J＝7.03Hz，2H)2.56-2.65(m，3H)1.31(t，J＝7.15Hz，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝2.10；[M+H]+＝239.17。
步骤C：6-甲基噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-胺
Figure BDA00001827380502721
将6-甲基噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基氨基甲酸乙酯(660mg，2.77mmol)悬浮于1N NaOH(15ml，15.00mmol)中，在100℃油浴中加热4小时，然后冷却至环境温度。混合物用1N HCl酸化，并且过滤出所生成的沉淀物，用乙醚洗涤，得到6-甲基噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-胺(233mg，1.402mmol，产率50.6％)，为黄色粉末。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 8.26(s，2H)8.12(s，1H)2.43(s，3H)。MS(LC/MS)R.T.＝0.66；[M+H]+＝167.0。
步骤D：6-甲基噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502722
根据实施例339步骤D的方法，使6-甲基噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-胺(0.22g，1.32mmol)反应，得到6-甲基噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(265mg，产率59％)，为黄色固体。1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 8.45(s，1H)2.66-2.68(m，9H)。
步骤E：(R)-N-(6-甲基噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502723
将6-甲基噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(150mg，0.56mmol)、(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇·2HCl(140mg，0.61mmol)和碳酸铯(450mg，1.39mmol)悬浮在DMF(3mL)中，并且在开口烧瓶中于100℃油浴中加热。2.5小时之后，将混合物冷却至环境温度，并且倾倒至水中。混合物用氯仿萃取(4x)，用硫酸钠干燥，过滤并且浓缩成残余物。粗制的残余物经硅胶色谱纯化(5-40％(9∶1MeOH/NH4OH)/CHCl3)，得到(R)-N-(6-甲基噻唑并[5，4-b]吡嗪-2-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(51mg，产率27％)，为白色粉末。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 9.45(br.s.，1H)8.26(s，1H)4.02(d，J＝9.79Hz，1H)3.69(d，J＝9.79Hz，1H)3.39(dd，J＝14.93，1.63Hz，1H)2.72-3.06(m，5H)2.60(s，3H)2.11-2.22(m，2H)1.70-1.82(m，1H)1.49-1.64(m，2H)。MS(LC/MS)R.T.＝1.15；[M+H]+＝331.2。
实施例342
(R)-N-(6，7-二甲氧基异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：N-(3，4-二甲氧基苄基)-2，2-二乙氧基乙脒
将2，2-二乙氧基亚氨乙酸甲酯(294mg，1.824mmol)、(3，4-二甲氧基苯基)甲胺(312mg，1.866mmol)和MeOH(1.5mL)混合物在油浴中于70℃搅拌加热2小时，然后使其冷却至室温。真空除去挥发性组分。残余物直接使用而没有进一步纯化。LCMS RT 0.96分钟，MH+＝297.2，1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 6.79-6.93(3H，m)，4.94(1H，s)，4.41(2H，s)，3.84-3.90(6H，m)，3.52-3.70(4H，m)，1.19-1.28(6H，m)。
步骤B：6，7-二甲氧基异喹啉-3-胺
向N-(3，4-二甲氧基苄基)-2，2-二乙氧基乙脒(541mg，1.825mmol)中加入硫酸(0.95mL，1.825mmol)。冷却后，将反应混合物在环境温度静置过夜。将其滴加至冰中，然后所生成的溶液用浓NaOH中和，水相用乙酸乙酯萃取两次。合并的乙酸乙酯级份经硫酸镁干燥。过滤出干燥剂，蒸发出溶剂。残余物经柱色谱纯化(使用5％甲醇/乙酸乙酯洗脱)，收集主要组分。产率105.7mg，褐色固体(28％)。
LCMS RT 0.72分钟，MH+＝205.1；1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm8.59(1H，s)，7.03(1H，s)，6.80(1H，s)，6.70(1H，s)，4.00(3H，s)，3.98(3H，s)。
步骤C：3-异硫氰基-6，7-二甲氧基异喹啉
向1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(124.6mg，0.536mmol)于二氯甲烷(3mL)中的搅拌着的溶液中，加入6，7-二甲氧基异喹啉-3-胺(105mg，0.514mmol)于二氯甲烷(5mL)中的悬浮液。将反应混合物直接施用至Biotage柱(先后使用15-25％乙酸乙酯/己烷和100％乙酸乙酯洗脱)，得到3-异硫氰基-6，7-二甲氧基异喹啉，为白色固体。产率69.4mg(55％)NMR1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 8.81(1H，s)，7.31(1H，s)，7.16(1H，s)，6.98(1H，s)，3.99(6H，s)。
步骤D：(R)-N-(6，7-二甲氧基异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502742
向(S)-3-(铵基甲基)-3-羟基-1-氮鎓二环[2.2.2]辛烷氯化物(73mg，0.319mmol)和碳酸铯(221mg，0.678mmol)于DMF(5mL)中的搅拌着的悬浮液中，加入3-异硫氰基-6，7-二甲氧基异喹啉(69mg，0.280mmol)于DMF(1.5mL)中的溶液，使反应混合物在室温搅拌3天。然后向该溶液中，加入N，N′-甲二叉基二丙-2-胺(69mg，0.547mmol)于DMF(0.4mL)中的溶液，使反应混合物在室温静置14天。再加入于～0.4mL乙腈中的69mg二异丙基碳二亚胺，使反应混合物再静置一天，然后对其进行真空蒸发，对残余物进行制备性HPLC分析，得到(R)-N-(6，7-二甲氧基异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺20.9mg.(8％)LCMS RT 0.98分钟，MH+＝403.21H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 8.73(1H，s)，7.28(1H，s)，7.09(1H，s)，6.96(1H，s)，4.01(3H，s)，4.00(3H，s)，3.96(1H，d，J＝8.5Hz)，3.63(1H，d，J＝9.2Hz)，3.39(1H，d，J＝15.0Hz)，2.79-3.10(5H，m)，2.24(1H，br.s.)，2.15(1H，br.s.)，1.75(1H，dddd，J＝13.9，9.3，4.7，4.4Hz)，1.59-1.68(1H，m)，1.48-1.59(1H，m)。
实施例343
(R)-N-(5，6，7，8-四氢异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502751
步骤A：5，6，7，8-四氢异喹啉-3-胺
Figure BDA00001827380502752
将异喹啉-3-胺(239mg，1.66mmol)、氧化铂(IV)(28mg，0.123mmol)和TFA(6mL)的混合物在Parr装置中氢化3小时。借助于乙酸乙酯，对反应混合物进行过滤。对滤液进行真空蒸发，将残余物在10％碳酸钠水溶液和乙酸乙酯之间分配。分离各层，水相再次用乙酸乙酯洗涤，合并的有机层用盐水洗涤，经硫酸镁干燥。过滤出干燥剂，蒸发出溶剂。产物经柱色谱纯化(使用乙酸乙酯洗脱)，得到139.8mg(57％)5，6，7，8-四氢异喹啉-3-胺，为黄白色固体。LCMS RT 0.75分钟，MH+＝149.1 1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 7.78(1H，s)，6.26(1H，s)，4.29(2H，br.s.)，2.64(4H，ddd，J＝10.6，5.8，5.5Hz)，1.64-1.87(4H，m)。
步骤B：3-异硫氰基-5，6，7，8-四氢异喹啉
Figure BDA00001827380502753
向1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(222mg，0.956mmol)于二氯甲烷(5mL)中的搅拌着的溶液中，加入5，6，7，8-四氢异喹啉-3-胺(139mg，0.938mmol)于二氯甲烷(1.5mL)中的溶液，将所生成的溶液在室温搅拌过夜。将反应混合物直接施用至Biotage柱上(使用20-25％乙酸乙酯/己烷洗脱)，收集第一主要峰产物。产率141.8mg(79％)3-异硫氰基-5，6，7，8-四氢异喹啉。NMR  1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 8.10(1H，s)，6.84(1H，s)，2.74(4H，t，J＝6.3Hz)，1.81(4H，dd，J＝4.0，2.7Hz)。
步骤C：(S)-1-((3-羟基奎宁环-3-基)甲基)-3-(5，6，7，8-四氢异喹啉-3-基)硫脲
Figure BDA00001827380502754
向(S)-3-(铵基甲基)-3-羟基-1-氮鎓二环[2.2.2]辛烷氯化物(183mg，0.799mmol)和碳酸铯(550mg，1.688mmol)于DMF(10mL)中的搅拌着的悬浮液中，加入3-异硫氰基-5，6，7，8-四氢异喹啉(141mg，0.741mmol)于DMF(2mL)中的溶液，并且将反应混合物在室温搅拌10天。然后真空除去溶剂，将残余物吸收在甲醇中，然后经硅胶柱纯化(使用1％NH4OH/9％MeOH/90％CHCl3洗脱)，接着经制备性HPLC纯化。将分离的产物在碳酸钠水溶液和乙酸乙酯之间分配。水相再次用乙酸乙酯洗涤，合并的有机相用盐水洗涤，经硫酸镁干燥，过滤并且蒸发出溶剂。残余物再次经硅胶柱纯化(使用1％NH4OH/9％MeOH/90％CHCl3洗脱)，得到(S)-1-((3-羟基奎宁环-3-基)甲基)-3-(5，6，7，8-四氢异喹啉-3-基)硫脲，产率98mg(35％)。1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm12.02(1H，br s)，8.23(1H，br s)，7.88(1H，s)，6.41(1H，s)，4.08(1H，dd)，3.89(1H，dd)，3.46(2H，s)，3.05-2.80(5H，m)，2.69(4H，dt)，2.10(1H，br s)，1.93(1H，br s)，1.85(1H，m)，1.77(4H，m)，1.66(1H，m)，1.45(1H，m)；LCMSRT 1.11分钟，MH+＝447.1。
步骤D：(R)-N-(5，6，7，8-四氢异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环-[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502761
向(S)-1-((3-羟基奎宁环-3-基)甲基)-3-(5，6，7，8-四氢异喹啉-3-基)硫脲(98mg，0.283mmol)于DMF(2mL)中的溶液中，加入N，N′-甲二叉基二丙-2-胺(41mg，0.325mmol)于DMF(0.4mL)中的溶液，并且使所生成的溶液在室温静置7天。
再加入于约0.4mL乙腈中的53mg二异丙基碳二亚胺，并且使反应混合物再静置1天。然后对反应混合物进行真空蒸发，先后进行制备性HPLC纯化和硅胶色谱纯化(使用1％NH4OH/9％MeOH/90％CHCl3)洗脱)，得到(R)-N-(5，6，7，8-四氢异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺，产率6.4mg.(7％)。
LCMS RT 0.80分钟，MH+＝313.2；1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm7.91(1H，s)，6.75-6.95(1H，m)，3.91(1H，d，J＝9.5Hz)，3.60(1H，d，J＝9.5Hz)，3.38(1H，s)，2.93-3.13(4H，m)，2.86-2.93(2H，m)，2.69(4H，td，J＝11.4，6.1Hz)，2.21-2.32(1H，m)，2.16(1H，br.s.)，1.72-1.85(5H，m)，1.64(1H，dd，J＝7.2，4.4Hz)，1.56(1H，dt，J＝7.0，2.6Hz)。
实施例344
(R)-N-(6-氯-7-甲氧基异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502771
步骤A：N-(4-氯-3-甲氧基苄基)-2，2-二乙氧基乙脒
Figure BDA00001827380502772
向(4-氯-3-甲氧基苯基)甲胺(392mg，2.284mmol)(为盐酸盐形式)、许尼希碱(0.5mL，2.86mmol)和MeOH(2mL)的混合物中，加入2，2-二乙氧基亚氨乙酸甲酯(295mg，1.83mmol)于MeOH(1mL)中的溶液，将所生成的混合物在油浴中于70℃加热搅拌2小时，使其冷却至室温，保持3天。真空除去溶剂，并且使用残余物而没有进一步纯化。
步骤B：6-氯-7-甲氧基异喹啉-3-胺
Figure BDA00001827380502773
向冷的(0℃)硫酸(0.071mL，1.330mmol)中，逐渐加入N-(4-氯-3-甲氧基苄基)-2，2-二乙氧基乙脒(400mg，1.330mmol)于二氯甲烷(5mL)中的悬浮液，然后使所生成的混合物温热至室温过夜。接着将反应混合物缓慢加至碎冰中，然后通过加入浓NaOH溶液使得混合物变成强碱性，并且将有机组分萃取至乙酸乙酯中。有机级份经硫酸镁干燥，过滤，并且蒸发出溶剂。对残余物进行硅胶色谱纯化(使用乙酸乙酯洗脱)，得到110.8mg.(40％)6-氯-7-甲氧基异喹啉-3-胺.LCMS RT 0.95分钟，MH+＝209.0，211.0；1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 8.66(1H，s)，7.78(1H，s)，6.83(1H，s)，6.63(1H，s)，4.36-4.58(2H，m)，3.99(3H，s)。
步骤C：6-氯-3-异硫氰基-7-甲氧基异喹啉
Figure BDA00001827380502781
向1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(142mg，0.611mmol)于二氯甲烷(5mL)中的搅拌着的溶液中，加入6-氯-7-甲氧基异喹啉-3-胺(110mg，0.527mmol)于二氯甲烷(5.00mL)中的悬浮液，并且将反应混合物在室温搅拌过夜。将反应混合物直接施用至硅胶柱上(使用10％乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到106mg(80％)6-氯-3-异硫氰基-7-甲氧基异喹啉。1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm8.90(1H，s)，7.99(1H，s)，7.36(1H，s)，7.08(1H，s)，4.05(3H，s)。
步骤D：(S)-1-(6-氯-7-甲氧基异喹啉-3-基)-3-((3-羟基奎宁环-3-基)甲基)硫脲
Figure BDA00001827380502782
向(S)-3-(铵基甲基)-3-羟基-1-氮鎓二环[2.2.2]辛烷氯化物(111mg，0.484mmol)于DMF(3mL)中的搅拌着的悬浮液中，加入许尼希碱(0.5mL，2.86mmol)，并且将所生成的混合物在室温搅拌35分钟。然后加入6-氯-3-异硫氰基-7-甲氧基异喹啉(106mg，0.423mmol)于DMF(3mL)中的悬浮液，使反应混合物在室温搅拌过夜。真空蒸发出溶剂，使残余物经过硅胶柱(使用1％NH4OH/9％MeOH/90％CHCl3洗脱)，得到140.3mg(82％)，为白色固体，(S)-1-(6-氯-7-甲氧基异喹啉-3-基)-3-((3-羟基奎宁环-3-基)甲基)硫脲。LCMSRT 1.28分钟，MH+＝407.1，409.0，1H NMR(500MHz，氯仿-d)δppm 11.85(1H，t，J＝5.2Hz)，9.15(1H，br.s.)，8.63(1H，s)，7.76(1H，s)，6.92(1H，s)，6.89(1H，s)，4.14(1H，dd，J＝13.9，5.6Hz)，3.99(2H，s)，3.90(1H，dd，J＝14.0，5.2Hz)，3.46(3H，s)，2.89-3.01(2H，m)，2.75-2.88(3H，m)，2.03-2.15(1H，m)，1.89-1.96(1H，m)，1.77-1.88(1H，m)，1.63(1H，ddd，J＝13.4，6.1，3.4Hz)，1.32-1.45(1H，m)。
步骤E：(R)-N-(6-氯-7-甲氧基异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502783
向(S)-1-(6-氯-7-甲氧基异喹啉-3-基)-3-((3-羟基奎宁环-3-基)甲基)硫脲(140mg，0.344mmol)于DMF(2.5mL)中的溶液中，加入N，N′-甲二叉基二丙-2-胺(101mg，0.800mmol)于DMF(0.5mL)中的溶液，并且使所生成的混合物在室温静置10天。然后真空蒸发溶剂。将残余物溶于～5mL MeOH中(过滤出一些固体)，并且先后进行制备性HPLC纯化和硅胶色谱纯化(1％NH4OH/9％MeOH/90％CHCl3)，得到31mg(24％)(R)-N-(6-氯-7-甲氧基异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺。
LCMS RT 1.04分钟，MH+＝373.2，375.21H NMR(500MHz，MeOD)δppm 8.78-8.89(1H，m)，7.90-8.01(1H，m)，7.14-7.23(1H，m)，4.01(3H，s)，3.95-3.99(1H，m)，3.62-3.71(1H，m)，3.19-3.25(1H，m)，3.06-3.13(1H，m)，2.90-3.00(2H，m)，2.76-2.89(2H，m)，2.10-2.21(2H，m)，1.69-1.83(2H，m)，1.56-1.68(1H，m)。
实施例345
(R)-N-(5-氟异喹啉-3-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：7-氟异喹啉-3-胺和5-氟异喹啉-3-胺
Figure BDA00001827380502792
将2，2-二乙氧基亚氨乙酸甲酯(1.5g，10.2mmol)和(3-氟苯基)甲胺(1.275g，10.2mmol)在甲醇(10ml)中的混合物在70℃搅拌2小时。蒸发溶剂，形成油状物2，2-二乙氧基-N-(3-氟苄基)乙脒(2.5g.100％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 7.3-6.9(m，4H)，4.9(s，1H)，4.4(s，2H)，3.8-3.5(m，4H)，1.27-1.20(q，6H)。MS(LCMS，在乙酸铵系统中)[M+H]＝254.7。
在室温，向于CH2Cl2(3ml)中的上述制备的油状物(2.1g)中十分缓慢地加入2ml浓硫酸，然后在室温搅拌过夜。将混合物倾倒至冰水中，用NaOH(10N)中和至pH为8。混合物用EtOAc萃取(100mlx3)。合并有机层，用水和盐水洗涤，经Na2SO4干燥，得到了粗制固体1.05g，将其直接使用而没有进一步纯化。
步骤B：5-氟-3-异硫氰基异喹啉
Figure BDA00001827380502801
向上面粗制的混合物(1050mg，6.47mmol)于二氯甲烷(30ml)中的溶液中，加入1，1’-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(1500mg，6.5mmol)。将粉色溶液在室温搅拌2小时，然后蒸发出溶剂，得到了粗制的红色固体，将其在Biotage(0-25％乙酸乙酯-己烷)上纯化，分离第一峰产物，经鉴定为7-氟-3-异硫氰基异喹啉(635mg，3.11mmol，48％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm 9.08(s，1H)，7.9-7.8(m，1H)，7.7-7.6(m，1H)，7.6-7.5(m，2H)；以及第二异构体5-氟-3-异硫氰基异喹啉(27.5mg，0.135mmol，2.1％)。1H NMR(500MHz，CDCl3)δppm9.15(s，1H)，7.9-7.8(m，1H)，7.7(s，1H)，7.6-7.5(m，1H)，7.5-7.4(m，1H)。
步骤C：(R)-N-(5-氟异喹啉-3-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502802
向5-氟-3-异硫氰基异喹啉(27.5mg，0.135mmol)于DMF(5ml)中的溶液中，加入(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(25mg，0.160mmol)和碳酸铯(110mg，0.337mmol)。将混合物在40℃搅拌过夜。向该溶液中，加入N，N’-甲二叉基二丙-2-胺(0.12g，0.95mmol)，并且将混合物在40℃搅拌过夜。蒸发出溶剂，将粗制的固体在Biotage上纯化(首先用100％乙酸乙酯洗脱，然后在第二次运行中用0-25％9∶1甲醇∶氢氧化铵-氯仿洗脱)，得到(R)-N-(5-氟异喹啉-3-基)-4H-1’-氮杂螺[噁唑-5，3’-二环[2.2.2]辛]-2-胺(29.4mg，0.086mmol，64.1％)。1H NMR(500MHz，MeOD)δppm 9.09(s，1H)，7.80-7.75(d，1H)，7.50-7.30(m，3H)，4.02-4.00(d，1H)，3.70-3.60(d，1H)，3.4-3.2(m，1H)，3.2-3.1(m，1H)，3.1-2.9(m，2H)，2.9-2.8(m，2H)，2.2-2.1(m，2H)，1.8-1.6(m，3H)。MS(LCMS)[M+H]＝327.08。
实施例346
(R)-N-(8-溴-5-氟异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502811
步骤A：2，2-二乙氧基亚氨乙酸甲酯
Figure BDA00001827380502812
向甲醇钠(13.38g，248mmol)于MeOH(300mL)中的溶液中，滴加2，2-二乙氧基乙腈(17.22mL，124mmol)。将所生成的混合物在室温搅拌16小时。然后反应混合物用300mL水稀释，产物用Et2O萃取(3X250mL)。合并的Et2O层用100mL盐水洗涤，用硫酸钠干燥，蒸发，得到期望的产物，为无色液体(15.3g，95mmol，产率77％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 7.86(1H，br.s.)，4.77(1H，s)，3.78(3H，s)，3.55(4H，qd，J＝6.97，4.28Hz)，1.21(7H，t，J＝7.05Hz)。
步骤B：(2-溴-5-氟苯基)甲胺
Figure BDA00001827380502813
历时20分钟，向2-溴-5-氟苯甲腈(3.0g，15.00mmol)和NaBH4(1.419g，37.5mmol)于THF(30mL)中的溶液中，缓慢加入TFA(3.47mL，45.0mmol)。将所生成的混合物在室温搅拌16小时，然后加入MeOH(10mL)，接着将混合物再搅拌30分钟。将其用EtOAc(200mL)稀释，用水洗涤，经Na2SO4干燥并且蒸发。残余物经80g Thompson硅胶柱(3％至100％B/己烷，1200mL，B：10％MeOH/EtOAc洗脱)纯化。获得期望的产物，为无色油状物(1.70g，8.33mmol，产率55.5％)。LC/MS(0.647分钟，MH+：205.92)。1H NMR(500MHz，DMSO-d6)δppm 7.59(1H，dd，J＝8.85，5.49Hz)，7.43(1H，dd，J＝10.07，3.05Hz)，7.05(1H，td，J＝8.47，3.20Hz)，3.72(3H，s)，2.00(2H，br.s.)。
步骤C：N-(2-溴-5-氟苄基)-2，2-二乙氧基乙脒
Figure BDA00001827380502821
将2，2-二乙氧基亚氨乙酸甲酯(1.264g，7.84mmol)和(2-溴-5-氟苯基)甲胺(1.6g，7.84mmol)于MeOH(20mL)中的混合物在75℃搅拌2小时。蒸发出溶剂，得到粗产物，为浅黄色固体。N-(2-溴-5-氟苄基)-2，2-二乙氧基乙脒(2.61g，7.83mmol，产率100％)，将其直接用于下一步骤中。LC/MS(1.188分钟，MH+：334.92)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δppm 7.44(1H，dd，J＝8.69，5.16Hz)，7.15(1H，dd，J＝9.44，2.90Hz)，6.81(1H，td，J＝8.25，3.15Hz)，5.48(1H，br.s.)，4.90(1H，s)，4.42(2H，s)，3.49-3.67(4H，m)，1.17-1.25(6H，m)。
步骤D：8-溴-5-氟异喹啉-3-胺
Figure BDA00001827380502822
向N-(2-溴-5-氟苄基)-2，2-二乙氧基乙脒(1.6g，4.80mmol)和二氯甲烷(2mL)的混合物中，加入H2SO4(1.280mL，24.01mmol)。将反应混合物在80℃搅拌16小时，冷却至室温，用EtOAc(100mL)稀释，用冰水淬灭，用NaHCO3溶液中和。有机相用水洗涤，经Na2SO4干燥，并且蒸发。残余物经80gThompson硅胶柱(3％至100％EtOAc/己烷，1200mL)纯化。获得了期望的产物，为浅黄色固体(0.47g，1.950mmol，产率40.6％)。
LC/MS(1.052分钟，MH+：242.99)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm8.95(1H，s)，7.36(1H，dd，J＝8.06，4.53Hz)，7.23(1H，dd，J＝10.58，8.06Hz)，6.68(1H，s)，6.52(2H，s)，19F NMR(376MHz，DMSO-d6)δppm-126.83(1F，s)。
步骤E：8-溴-5-氟-3-异硫氰基异喹啉
Figure BDA00001827380502823
向8-溴-5-氟异喹啉-3-胺(0.30g，1.245mmol)和二氯甲烷(5mL)的混合物中，加入1，1′-硫羰基二吡啶-2(1H)-酮(0.318g，1.369mmol)。将所生成的混合物在室温搅拌3小时。产物直接在40g Thompson硅胶柱(3％至100％EtOAc/己烷，1200mL)上纯化。获得了期望的产物，为灰白色固体(0.23g，0.812mmol，产率65.3％)。LC/MS(2.098分钟，NH+：284.93)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.38(1H，s)，8.04(1H，dd，J＝8.31，4.78Hz)，7.96(1H，s)，7.67(1H，dd，J＝9.82，8.31Hz)。19F NMR(376MHz，DMSO-d6)δppm-122.13(1F，s)。
步骤F：(R)-N-(8-溴-5-氟异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502831
向8-溴-5-氟-3-异硫氰基异喹啉(0.22g，0.777mmol)和(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇·2HCl(0.196g，0.855mmol)于DMF(5mL)中的混合物中，加入Cs2CO3(0.633g，1.943mmol)。将所生成的混合物在40℃搅拌16小时。加入N，N′-甲二叉基二丙-2-胺(0.294g，2.328mmol)，在40℃再继续搅拌16小时。蒸发出溶剂。将产物直接在40g Thompson硅胶柱(3％至100％B/己烷，1500mL。B：20％MeOH/EtOAc)上纯化。产物进一步从EtOAc重结晶。获得了期望的产物，为灰白色固体(0.11g，0.261mmol，产率33.6％)。LC/MS(0.997分钟，MH+：406.98)。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.30(1H，s)，7.60(1H，dd，J＝8.18，4.66Hz)，7.22(1H，dd，J＝10.07，8.06Hz)，4.00(1H，d，J＝10.07Hz)，3.69(1H，d，J＝10.07Hz)，3.23(1H，d，J＝15.36Hz)，3.07-3.13(1H，m)，2.90-2.96(2H，m)，2.76-2.85(2H，m)，2.15(2H，br.s.)，1.69-1.81(2H，m)，1.58-1.67(1H，m)。19F NMR(376MHz，MeOD)δppm-126.72(1F，s)。
实施例347
(R)-N-(6-(1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502832
步骤A：4-氯-6-(1H-咪唑-1-基)嘧啶
将4，6-二氯嘧啶(5.96g，40mmol)、咪唑(2.72g，40.0mmol)和碳酸钾(5.53g，40.0mmol)的混合物在DMF(50mL)中于室温搅拌18小时。将反应混合物稀释至500mL水中，用150mL EtOAc萃取五次。合并的有机层经浓缩，并且经快速色谱在240g硅胶柱上纯化(使用0-10％甲醇/乙酸乙酯洗脱)，得到4-氯-6-(1H-咪唑-1-基)嘧啶(4.56g，产率63％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.85(1H，d，J＝0.76Hz)，8.45(1H，s)，7.62(1H，t，J＝1.51Hz)，7.34(1H，d，J＝0.76Hz)，7.23(1H，dd，J＝1.38，0.88Hz)。LCMS：RT＝0.47分钟，MH+＝181.1。
步骤B：6-(1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-胺
Figure BDA00001827380502842
将4-氯-6-(1H-咪唑-1-基)嘧啶(4.0g，22.1mmol)分成两等份，分别置于密封管中，管中含有7N氨在甲醇(40mL)中的溶液。将管密封，在65℃加热20小时，然后在室温静置3天。合并反应混合物，浓缩并且经快速色谱在240g硅胶柱上纯化(使用40-100％EtOAc/己烷洗脱，然后使用0-50％MeOH/EtOA洗脱)，得到6-(1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-胺(1.43g，40％)。LCMS：RT＝0.39分钟，MH+＝162.1。
步骤C：6-(1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502843
向6-(1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-胺(1.0g，6.2mmol)于DMF(18mL)中的溶液中，滴加10M NaOH(1.24mL，12.4mmol)，以及历时15分钟加入二硫化碳(0.93mL，16mmol)、NaOH(1.24mL，12.4mmol)和碘甲烷(0.97mL，16mmol)。继续搅拌2小时，然后将混合物倾倒至水中。将浑浊的溶液分配至EtOAc中，用水洗涤，浓缩，经快速色谱在110g硅胶柱上纯化(使用10至50％EtOAc/己烷洗脱)，得到6-(1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(411mg，产率25％)。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.79(1H，d，J＝1.01Hz)，8.65(1H，d，J＝1.01Hz)，7.96(1H，t，J＝1.51Hz)，7.33(1H，d，J＝1.01Hz)，7.12-7.19(1H，m)，2.58(6H，s)。LCMS：RT＝0.63分钟，MH+＝266.1。
步骤D：(R)-N-(6-(1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502851
将(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(419mg，1.8mmol)、6-(1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(404mg，1.5mmol)和碳酸铯(1.24g，3.8mmol)于DMF(3.8mL)中的悬浮液在75℃搅拌2小时。将反应混合物浓缩，并且经快速色谱在40g硅胶柱上纯化(使用0至3％[9∶1MeOH/NH4OH]/CHCl3洗脱)，得到(R)-N-(6-(1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(417mg，产率83％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm9.40(1H，br.s.)，8.60(1H，d，J＝1.01Hz)，8.37(1H，t，J＝1.01Hz)，7.55(1H，t，J＝1.39Hz)，7.16(1H，dd，J＝1.39，0.88Hz)，6.84(1H，br.s.)，3.98(1H，d，J＝9.57Hz)，3.64(1H，d，J＝9.57Hz)，3.34(1H，dd，J＝14.98，1.64Hz)，2.69-3.04(5H，m)，2.08-2.21(2H，m)，1.67-1.78(1H，m)，1.43-1.62(2H，m)。LCMS：RT＝0.26分钟，MH+＝326.2。
实施例348
(R)-N-(6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：4-氯-6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)嘧啶
Figure BDA00001827380502861
将4，6-二氯嘧啶(11.92g，80mmol)、4-甲基-1H-咪唑(6.57g，80mmol)和碳酸铯(26.1g，80mmol)在DMF(50mL)中的混合物在室温搅拌18小时。将反应混合物稀释至200mL水中，用200mL EtOAc萃取三次。对合并的有机层进行浓缩，经快速色谱在300g硅胶柱上纯化(使用25至75％乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到两种区域异构体产物的混合物。将所收集的级份浓缩成约200mL体积，并且冷却，得到4-氯-6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)嘧啶(5.70g，产率37％)。4-甲基咪唑区域异构体的位置鉴定通过NMR NOE性质实施。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.80(1H，d，J＝0.50Hz)，8.36(1H，d，J＝1.26Hz)，7.29-7.31(1H，m)，7.25(1H，d，J＝1.01Hz)，2.27(3H，d，J＝1.01Hz)。LCMS：RT＝0.50分钟，MN+＝195.1。
步骤B：6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-胺
Figure BDA00001827380502862
将4-氯-6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)嘧啶(1.18g，6.1mmol)于2M氨(20mL，40.0mmol)/异丙醇中的溶液在80℃于密封小瓶中加热18小时。冷却后，过滤出固体析出物，并且干燥，得到6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-胺(733mg，产率69.0％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.31(1H，d，J＝1.26Hz)，8.28(1H，d，J＝0.76Hz)，7.49(1H，t，J＝1.13Hz)，7.16(2H，s)，6.50(1H，d，J＝0.76Hz)，2.15(3H，d，J＝0.76Hz)。LCMS：RT＝0.39分钟，MN+＝176.1
步骤C：6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502863
历时15分钟，向6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-胺(700mg，4.00mmol)于DMF(12mL)中的溶液中，滴加10M NaOH(0.8mL，8mmol)、二硫化碳(0.60mL，10mmol)、NaOH(0.8mL，8mmol)和碘甲烷(0.62mL，10mmol)。继续搅拌2小时，然后将混合物倾倒至水中。将浑浊溶液用EtOAc分配，用水洗涤，浓缩，并且经快速色谱在110g硅胶柱上(使用50至100％EtOAc/己烷洗脱)纯化，得到6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(438mg，产率39％)。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.76(1H，d，J＝1.01Hz)，8.55(1H，d，J＝1.26Hz)，7.62-7.66(1H，m)，7.24(1H，d，J＝1.01Hz)，2.57(6H，s)，2.24(3H，d，J＝1.01Hz)。LCMS：RT＝0.66分钟，MH+＝280.1。
步骤D：(R)-N-(6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502871
将(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(412mg，1.80mmol)、6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(419mg，1.5mmol)和碳酸铯(1.22g，3.75mmol)于DMF(3.8mL)中悬浮液在75℃搅拌2小时。将反应混合物浓缩，并且经快速色谱在40g硅胶柱上纯化(使用预运行1％[95∶5MeOH/NH4OH]/EtOAc，然后1至2％[95∶5MeOH/NH4OH]/CHC13洗脱)，得到(R)-N-(6-(4-甲基-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(472mg，产率92％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 9.40(1H，br.s.)，8.56(1H，d，J＝1.01Hz)，8.28(1H，d，J＝1.26Hz)，7.21(1H，s)，6.76(1H，br.s.)，3.97(1H，d，J＝9.57Hz)，3.63(1H，d，J＝9.57Hz)，3.33(1H，dd，J＝14.86，1.76Hz)，2.62-3.05(5H，m)，2.24(3H，d，J＝1.01Hz)，2.03-2.19(2H，m)，1.65-1.81(1H，m)，1.39-1.62(2H，m)。LCMS：RT＝0.25，0.46分钟，MH+＝340.3。
实施例349
(R)-N-(6-(4-氯-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
步骤A：4-氯-6-(4-氯-1H-咪唑-1-基)嘧啶
Figure BDA00001827380502881
将4，6-二氯嘧啶(1.8g，12mmol)、4-氯-1H-咪唑(1.23g，12.00mmol)和碳酸铯(3.91g，12.00mmol)于DMF(8mL)中的混合物在室温搅拌18小时。将反应混合物稀释至水中，用EtOAc萃取。对合并的有机层进行浓缩，并且经快速色谱在120g硅胶柱上纯化(使用0至40％乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到4-氯-6-(4-氯-1H-咪唑-1-基)嘧啶(1.41g，产率54.6％)。4-氯咪唑区域异构体的位置鉴定通过NMR NOE性质实施。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.86(1H，d，J＝0.76Hz)，8.33(1H，d，J＝1.51Hz)，7.54(1H，d，J＝1.76Hz)，7.30(1H，d，J＝0.76Hz)。LCMS：RT＝0.81分钟，MH+＝215.1。
步骤B：6-(4-氯-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-胺
Figure BDA00001827380502882
将4-氯-6-(4-氯-1H-咪唑-1-基)嘧啶(0.99g，4.60mmol)于2M氨(20mL，40.0mmol)/异丙醇中的溶液在80℃于密封小瓶中加热18小时。冷却后，过滤出固体析出物，干燥，得到6-(4-氯-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-胺(884mg，产率98％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.44(1H，d，J＝1.51Hz)，8.32(1H，d，J＝0.76Hz)，7.96(1H，d，J＝1.51Hz)，7.30(2H，br.s.)，6.58(1H，d，J＝1.01Hz)。LCMS：RT＝0.57分钟，MH+＝196.1。
步骤C：6-(4-氯-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502883
历时15分钟，向6-(4-氯-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-胺(850mg，4.35mmol)于DMF(12mL)中的溶液中，滴加10M NaOH(0.87mL，8.7mmol)、二硫化碳(0.65mL，10.9mmol)、NaOH(0.87mL，8.7mmol)和碘甲烷(0.68mL，10.9mmol)。继续搅拌2小时，将混合物倾倒至水中。将浑浊溶液分配至EtOAc中，用水洗涤，浓缩，并且经快速色谱在110g硅胶柱上纯化(使用10至40％EtOAc/己烷洗脱)，得到6-(4-氯-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(558mg，产率43％)。1H NMR(旋转异构体的约9∶1混合物)(400MHz，MeOD)δppm8.80(0.8H，d，J＝0.76Hz)，8.79(0.2H，d，J＝0.50Hz)，8.59(1H，d，J＝1.51Hz)，8.50(0.1H，d，J＝1.26Hz)，7.97(0.9H，d，J＝1.51Hz)，7.84(0.1H，d，J＝1.51Hz)，7.32(0.9H，d，J＝0.76Hz)，2.63(0.6H，s)，2.58(5.4H，s)。LCMS：RT＝0.94分钟，MH+＝300.0。
步骤D：(R)-N-(6-(4-氯-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺]噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502891
将(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(412mg，1.800mmol)、6-(4-氯-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(450mg，1.5mmol)和碳酸铯(1.22g，3.75mmol)于DMF(3.8mL)中的悬浮液在75℃搅拌2小时。将反应混合物浓缩，并且经快速色谱在40g硅胶柱上纯化(使用预运行1％[95∶5MeOH/NH4OH]/EtOAc，然后1至2％[95∶5MeOH/NH4OH]/CHCl3洗脱)，得到(R)-N-(6-(4-氯-1H-咪唑-1-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(265mg，产率48％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 9.41(1H，br.s.)，8.60(1H，d，J＝1.01Hz)，8.25(1H，d，J＝1.51Hz)，7.44(1H，d，J＝1.51Hz)，6.78(1H，s)，4.00(1H，d，J＝9.82Hz)，3.67(1H，d，J＝9.57Hz)，3.36(1H，dd，J＝14.86，1.51Hz)，2.73-3.06(5H，m)，2.09-2.22(2H，m)，1.69-1.79(1H，m)，1.46-1.64(2H，m)。LCMS：RT＝0.54分钟，MH+＝360.2。
实施例350
(R)-N-(6-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502901
步骤A：4-氯-6-(1H-吡唑-1-基)嘧啶
Figure BDA00001827380502902
将4，6-二氯嘧啶(5.96g，40mmol)、1H-吡唑(2.72g，40.0mmol)和碳酸铯(13.03g，40.0mmol)于DMF(25mL)中的混合物在室温搅拌18小时。将反应混合物稀释至100mL水中，用EtOAc萃取。对合并的有机层进行浓缩，经快速色谱在240g硅胶柱上纯化(使用0至20％乙酸乙酯/己烷洗脱)，得到4-氯-6-(1H-吡唑-1-基)嘧啶(4.80g，产率66％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 8.77(1H，d，J＝0.76Hz)，8.55(1H，d，J＝2.77Hz)，7.96(1H，d，J＝1.01Hz)，7.80(1H，d，J＝1.01Hz)，6.51(1H，dd，J＝2.64，1.64Hz)。
LCMS：RT＝0.86分钟，MH+＝181.1。
步骤B：6-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-4-胺
Figure BDA00001827380502903
将4-氯-6-(1H-吡唑-1-基)嘧啶(1.31g，7.25mmol)于2M氨(20mL，40.0mmol)/异丙醇中的溶液在80℃于密封小瓶中加热24小时。将反应混合物在室温保藏4天。过滤出固体析出物，干燥，得到6-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-4-胺(1.15g，产率98％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 8.53(1H，dd，J＝2.52，0.50Hz)，8.30(1H，d，J＝0.76Hz)，7.82(1H，d，J＝1.01Hz)，7.19(2H，br.s.)，6.88(1H，d，J＝1.01Hz)，6.55(1H，dd，J＝2.64，1.64Hz)。LCMS：RT＝0.52分钟，MH+＝162.1。
步骤C：6-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
历时15分钟，向6-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-4-胺(1.0g，6.20mmol)于DMF(18mL)中的溶液中，滴加10M NaOH(1.24mL，12.4mmol)、二硫化碳(0.933mL，15.5mmol)、NaOH(1.24mL，12.4mmol)和碘甲烷(0.966mL，15.5mmol)。继续搅拌过夜，并且将混合物倾倒至水中。过滤出褐色析出物，用水洗涤，干燥，得到6-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(136mg，产率8％)。
1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 8.74(1H，d，J＝1.01Hz)，8.64(1H，d，J＝2.52Hz)，7.82(1H，d，J＝1.26Hz)，7.40(1H，d，J＝1.01Hz)，6.57(1H，dd，J＝2.64，1.64Hz)，2.58(6H，s)。LCMS：RT＝0.96分钟，MH+＝266.1。
步骤D：(R)-N-(6-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502912
将(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(135mg，0.59mmol)、6-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(130mg，0.49mmol)和碳酸铯(399mg，1.23mmol)于DMF(1.2mL)中的悬浮液在75℃搅拌2小时。将反应混合物浓缩，并且经快速色谱在40g硅胶柱上纯化(使用预运行1％[95∶5MeOH/NH4OH]/EtOAc，然后等梯度1％[95∶5MeOH/NH4OH]/CHCl3洗脱)，得到(R)-N-(6-(1H-吡唑-1-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(105mg，产率66％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 9.46(1H，br.s.)，8.58(1H，d，J＝1.01Hz)，8.50(1H，dd，J＝2.64，0.63Hz)，7.74(1H，d，J＝1.01Hz)，7.47(1H，br.s.)，6.44(1H，dd，J＝2.64，1.64Hz)，3.98(1H，d，J＝9.57Hz)，3.65(1H，d，J＝9.57Hz)，3.39(1H，dd，J＝14.86，1.51Hz)，2.71-3.09(5H，m)，2.10-2.26(2H，m)，1.69-1.80(1H，m)，1.48-1.64(2H，m)。LCMS：RT＝0.51分钟，MH+＝326.2。
实施例351
(R)-N-(6-(1H-1，2，4-三唑-1-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502921
步骤A：4-氯-6-(1H-1，2，4-三唑-1-基)嘧啶
Figure BDA00001827380502922
将4，6-二氯嘧啶(5.96g，40mmol)、1H-1，2，4-三唑(1.381g，20.00mmol)和碳酸铯(13.03g，40.0mmol)于DMF(25mL)中的混合物在室温搅拌16小时。反应混合物用100mL水稀释，用EtOAc萃取。对合并的有机萃取物进行浓缩，并且经快速色谱在160g硅胶柱上纯化(使用25至50％EtOAc/己烷洗脱)，得到4-氯-6-(1H-1，2，4-三唑-1-基)嘧啶(2.78g，产率38％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 9.21(1H，s)，8.87(1H，s)，8.15(1H，s)，7.91(1H，s)。LCMS：RT＝0.68分钟，MH+＝182.1。
步骤B：6-(1H-1，2，4-三唑-1-基)嘧啶-4-胺
Figure BDA00001827380502923
将4-氯-6-(1H-1，2，4-三唑-1-基)嘧啶(1.24g，6.83mmol)于2M氨(20mL，40.0mmol)/异丙醇中的溶液在80℃于密封小瓶中加热18小时。冷却后，过滤出固体析出物，干燥，得到6-(1H-1，2，4-三唑-1-基)嘧啶-4-胺(1.06g，产率96％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm 9.30(1H，s)，8.35(1H，s)，8.30(1H，s)，7.39(2H，br.s.)，6.83(1H，d，J＝0.76Hz)。LCMS：RT＝0.41分钟，MH+＝163.1。
步骤C：6-(1H-1，2，4-三唑-1-基)嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯
Figure BDA00001827380502924
历时15分钟，向6-(1H-1，2，4-三唑-1-基)嘧啶-4-胺(1.00g，6.17mmol)于DMF(18mL)中的溶液中，滴加10M NaOH(1.23mL，12.3mmol)、二硫化碳(0.927mL，15.4mmol)、NaOH(1.23mL，12.3mmol)和碘甲烷(0.96mL，15mmol)。继续搅拌2小时，然后将混合物倾倒至水中。浑浊溶液用EtOAc分配，用水洗涤，浓缩，并且经快速色谱在110g硅胶柱上纯化(使用10至50％EtOAc/己烷洗脱)，得到6-(1H-1，2，4-三唑-1-基)嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(541mg，产率33％)。1H NMR(旋转异构体的4∶1混合物)(400MHz，MeOD)δppm 9.42(0.74H，s)，9.40(0.35H，s)，9.04(0.32H，s)，8.84(0.76H，d，J＝1.01Hz)，8.81(0.33H，d，J＝1.01Hz)，8.23(1H，s)，7.42(0.75H，d，J＝1.01Hz)，2.64(1.2H，s)，2.59(4.8H，s)。LCMS：RT＝0.86分钟，MH+＝267.1。
步骤D：(R)-N-(6-(1H-1，2，4-三唑-1-基)嘧啶-4-基)-4H-1′氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502931
将(S)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐(412mg，1.800mmol)、6-(1H-1，2，4-三唑-1-基)嘧啶-4-基二硫代亚氨碳酸二甲酯(400mg，1.5mmol)和碳酸铯(1222mg，3.75mmol)于DMF(3.8mL)中的悬浮液在75℃搅拌2小时。将反应混合物浓缩，并且经快速色谱在40g硅胶柱上纯化(使用预运行1％[95∶5MeOH/NH4OH]/EtOAc，然后1至3％[95∶5MeOH/NH4OH]/CHCl3洗脱)，得到(R)-N-(6-(1H-1，2，4-三唑-1-基)嘧啶-4-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺(210mg，产率43％)。1H NMR(400MHz，氯仿-d)δppm 9.45(1H，br.s.)，9.14(1H，s)，8.61(1H，d，J＝1.01Hz)，8.08(1H，s)，7.39(1H，s)，4.00(1H，d，J＝9.57Hz)，3.67(1H，d，J＝9.57Hz)，3.38(1H，dd，J＝14.86，1.76Hz)，2.71-3.08(5H，m)，2.08-2.23(2H，m)，1.68-1.80(1H，m)，1.45-1.64(2H，m)。LCMS：RT＝0.46分钟，MH+＝327.2。
实施例352
(S)-N-(异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺
Figure BDA00001827380502932
(S)-N-(异喹啉-3-基)-4H-1′-氮杂螺[噁唑-5，3′-二环[2.2.2]辛]-2-胺如下制备：根据实施例239(步骤A-B)的方法，由(R)-3-(氨基甲基)奎宁环-3-醇二盐酸盐开始制备。1H NMR(400MHz，MeOD)δppm 9.00(1H，s)，7.91(1H，d，J＝8.06Hz)，7.70(1H，d，J＝8.31Hz)，7.58(1H，t，J＝7.18Hz)，7.40(1H，t，J＝7.05Hz)，7.30(1H，br.s.)，3.95(1H，d，J＝9.82Hz)，3.64(1H，d，J＝10.07Hz)，3.16-3.25(1H，m)，3.02-3.13(1H，m)，2.92(2H，t，J＝7.30Hz)，2.80(2H，t，J＝7.05Hz)，2.05-2.23(2H，m)，1.52-1.84(3H，m)。MS(LC/MS)R.T.＝1.39；[M+H]+＝309.21。
本领域技术人员应该理解的是，本申请公开的内容不限于上述示例性的实施例，且它可在不偏离其本质属性的情况下以其它具体形式来实施。因此，实施例无论如何都应该是示例性的而非限制性的，应该参考所附权利要求书而非上述实施例，因此在权利要求书的等价含义和范围内进行的所有变化都将涵盖在本申请中。

Claims (5)

1.化合物，选自：
Figure FDA00001827380400011
或其药用盐。
2.药物组合物，其包含治疗有效量的权利要求1的化合物或其药用盐，以及药用载体。
3.治疗精神分裂症、阿尔茨海默病、认知障碍、类风湿性关节炎、骨关节炎、溃疡性结肠炎、克罗恩病或糖尿病的方法，包括给予患者治疗有效量的权利要求1的化合物。
4.权利要求3的方法，涉及精神分裂症。
5.权利要求3的方法，涉及阿尔茨海默病。
CN200980163221.8A 2009-10-29 2009-10-29 作为α-7烟碱乙酰胆碱受体配体的奎宁环化合物 Expired - Fee Related CN102791718B (zh)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/US2009/062492 WO2011053292A1 (en) 2009-10-29 2009-10-29 Quinuclidine compounds as alpha-7 nicotinic acetylcholine receptor ligands

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102791718A true CN102791718A (zh) 2012-11-21
CN102791718B CN102791718B (zh) 2015-11-25

Family

ID=41361291

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN200980163221.8A Expired - Fee Related CN102791718B (zh) 2009-10-29 2009-10-29 作为α-7烟碱乙酰胆碱受体配体的奎宁环化合物

Country Status (14)

Country Link
EP (1) EP2493892B1 (zh)
JP (1) JP5619907B2 (zh)
KR (1) KR20120099060A (zh)
CN (1) CN102791718B (zh)
AU (1) AU2009354790A1 (zh)
BR (1) BR112012010054A2 (zh)
CA (1) CA2779177C (zh)
EA (1) EA201270610A1 (zh)
ES (1) ES2544970T3 (zh)
IL (1) IL219366A0 (zh)
MX (1) MX2012004560A (zh)
NZ (1) NZ600240A (zh)
TN (1) TN2012000191A1 (zh)
WO (1) WO2011053292A1 (zh)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ES2616238T3 (es) 2010-10-06 2017-06-12 Glaxosmithkline Llc, Corporation Service Company Derivados de bencimidazol como inhibidores de PI3 quinasa
AR090037A1 (es) 2011-11-15 2014-10-15 Xention Ltd Derivados de tieno y/o furo-pirimidinas y piridinas inhibidores de los canales de potasio
WO2014017643A1 (ja) * 2012-07-27 2014-01-30 佐藤製薬株式会社 ジフルオロメチレン化合物
WO2016073407A1 (en) * 2014-11-04 2016-05-12 Bristol-Myers Squibb Company Quinuclidine compounds as alpha-7 nicotinic acetylcholine receptor ligands
JP7032903B2 (ja) * 2016-10-12 2022-03-09 田辺三菱製薬株式会社 スルホンアミド化合物の製造方法

Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1129942A (zh) * 1993-07-20 1996-08-28 以色列国有生物学研究所 作用于胆碱能系统的具有毒蕈碱拮抗性的氮杂螺环化合物
WO2006065209A1 (en) * 2004-12-15 2006-06-22 Astrazeneca Ab Nicotinic acetylcholine receptor ligands
WO2008000469A2 (en) * 2006-06-30 2008-01-03 Universita Degli Studi Di Milano Nicotinic agonists selective for the alpha7 receptor subtype, the process for the preparation thereof and pharmaceutical compositions therefrom
CN102066384A (zh) * 2008-04-23 2011-05-18 百时美施贵宝公司 作为α-7烟碱乙酰胆碱受体配体的奎宁环化合物

Family Cites Families (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB8808433D0 (en) * 1988-04-11 1988-05-11 Merck Sharp & Dohme Therapeutic agents
IL97726A (en) * 1990-04-10 1994-12-29 Israel Inst Biolog Res Pharmaceutical preparations containing compounds with bridged and unbridged heterocyclic groups connected via spiro-atop with oxazoline and thiazoline groups, and sharp compounds

Patent Citations (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1129942A (zh) * 1993-07-20 1996-08-28 以色列国有生物学研究所 作用于胆碱能系统的具有毒蕈碱拮抗性的氮杂螺环化合物
WO2006065209A1 (en) * 2004-12-15 2006-06-22 Astrazeneca Ab Nicotinic acetylcholine receptor ligands
WO2008000469A2 (en) * 2006-06-30 2008-01-03 Universita Degli Studi Di Milano Nicotinic agonists selective for the alpha7 receptor subtype, the process for the preparation thereof and pharmaceutical compositions therefrom
CN102066384A (zh) * 2008-04-23 2011-05-18 百时美施贵宝公司 作为α-7烟碱乙酰胆碱受体配体的奎宁环化合物

Also Published As

Publication number Publication date
EP2493892B1 (en) 2015-07-01
AU2009354790A1 (en) 2012-06-14
KR20120099060A (ko) 2012-09-06
TN2012000191A1 (en) 2013-12-12
MX2012004560A (es) 2012-05-08
JP5619907B2 (ja) 2014-11-05
EP2493892A1 (en) 2012-09-05
EA201270610A1 (ru) 2013-02-28
CA2779177A1 (en) 2011-05-05
CN102791718B (zh) 2015-11-25
WO2011053292A1 (en) 2011-05-05
NZ600240A (en) 2014-04-30
BR112012010054A2 (pt) 2016-05-24
ES2544970T3 (es) 2015-09-07
JP2013509405A (ja) 2013-03-14
CA2779177C (en) 2016-08-30
IL219366A0 (en) 2012-06-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102066384B (zh) 作为α-7烟碱乙酰胆碱受体配体的奎宁环化合物
CN108137557B (zh) Nrf2调节剂
TWI730032B (zh) 作為ｒｏｃｋ抑制劑之螺庚烷水楊酸醯胺及相關化合物
EP3377482B1 (en) Modulators of ror-gamma
CN107873031B (zh) 作为tnf活性调节剂的苯并噁嗪酮衍生物及其类似物
CN110167935B (zh) 作为αV整合素抑制剂的3-经取代的丙酸
CN103025724B (zh) 哌啶衍生物
CN101528225B (zh) 作为5ht3调节剂的2-氨基苯并噁唑羧酰胺
CN102918043B (zh) 作为cdk4/6抑制剂的吡咯并嘧啶化合物
CN107820494B (zh) 核受体调节剂
CN104470925A (zh) 作为激酶抑制剂的咪唑并三嗪甲腈
TWI676618B (zh) 三環化合物
TW201444849A (zh) 經取代的7-氮雜雙環類及其作為食慾激素受體調節劑之用途
JP6843767B2 (ja) 抗がん剤としての三環式化合物
CN112055709A (zh) 吡嗪化合物和其用途
CN102171210A (zh) 咪唑并吡啶-2-酮衍生物
CN103554107A (zh) 氮杂金刚烷衍生物和应用方法
CN115734966A (zh) 杂环化合物及其用途
CN114341127A (zh) 作为hpk1抑制剂的氨基吡嗪化合物及其用途
CN109311872A (zh) 作为PDE1抑制剂的1H-吡唑并[4,3-b]吡啶
CN101981031A (zh) 具有促肾上腺皮质激素释放因子拮抗活性的三环化合物和含有它们的药物组合物
CN102791718B (zh) 作为α-7烟碱乙酰胆碱受体配体的奎宁环化合物
KR20200083529A (ko) 파르네소이드 x 수용체 조정제로서의 알켄 스피로시클릭 화합물
CN115867346A (zh) 激酶抑制剂
CN104024258B (zh) 吡咯并吡嗪激酶抑制剂

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee

Granted publication date: 20151125

Termination date: 20171029

CF01 Termination of patent right due to non-payment of annual fee