JP7048716B2 - インフルエンザワクチン用のウイルスシードストックの製造方法、前記シードストックを用いたインフルエンザワクチンの製造方法及び前記方法で製造したウイルスのシードストック - Google Patents
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- 無血清培養及び浮遊培養に適応した細胞株をインフルエンザワクチン用ウイルスで感染させて培養し、得られたウイルス培養液を同一細胞株で繰返し継代することにより、インフルエンザワクチン製造用のウイルスシードストックを製造する方法において、
前記継代でウイルス感染に使用した複数の感染希釈倍数の培養液の中から細胞生存度(cell viability)が最も高い感染希釈倍数の培養液を選択するが、
細胞生存度がより低い培養液のHA(Haemagglutination assay)力価(ただし、0である場合を除く)が、細胞生存度が最も高い前記培養液のHA力価に比べて4倍以上高い場合には、前記細胞生存度がより低い培養液を選択して、その後の継代に使用することを含み、前記培養液の培養日数は1日~3日である、インフルエンザワクチン製造用のウイルスシードストックの製造方法。 - 前記無血清培養及び浮遊培養に適応した細胞株はMDCK細胞株であることを特徴とする、請求項1に記載のインフルエンザワクチン製造用のウイルスシードストックの製造方法。
- 前記MDCK細胞株は、MDCK B-702、MDCK KCLRF-BP-00297、MDCK Sky1023(DSM ACC3112)、MDCK Sky10234(DSM ACC3114)、またはMDCK Sky3851(DSM ACC3113)であることを特徴とする、請求項2に記載のインフルエンザワクチン製造用のウイルスシードストックの製造方法。
- 前記培養条件は、32℃~38℃の温度範囲、10rpm~150rpmの攪拌速度、1日~2日の培養期間であることを特徴とする、請求項1に記載のインフルエンザワクチン製造用のウイルスシードストックの製造方法。
- 選択された前記培養液を、その後連続して2回以上継代するか、又は-50℃~-80℃の温度範囲で冷凍保管した後に2回以上継代することを含む、請求項1に記載のインフルエンザワクチン製造用のウイルスシードストックの製造方法。
- 前記選択された培養液の細胞生存度は、50%以上であることを特徴とする、請求項1ないし5のいずれか一項に記載のインフルエンザワクチン製造用のウイルスシードストックの製造方法。
- 選択された前記培養液のHA(Haemagglutination assay)力価は、100HAU/50μl以上であることを特徴とする、請求項6に記載のインフルエンザワクチン製造用のウイルスシードストックの製造方法。
- 前記複数の感染希釈倍数は1/1倍~1/10,000倍であることを特徴とする、請求項1ないし5のいずれか一項に記載のインフルエンザワクチン製造用のウイルスシードストックの製造方法。
- 請求項1ないし5のいずれか一項に記載の製造方法によって製造したインフルエンザワクチン製造用のウイルスシードストックを大量生産し、前記大量生産したインフルエンザワクチン製造用のウイルスシードストックを弱毒化または不活性化させることを含む、インフルエンザ予防ワクチンの製造方法。
- 前記インフルエンザワクチン製造用のウイルスシードストックは継代前のインフルエンザワクチン用ウイルスに比べて感染力が増加したことを特徴とする、請求項9に記載のインフルエンザ予防ワクチンの製造方法。
- 無血清培養及び浮遊培養に適応した細胞株をインフルエンザワクチン用ウイルスに感染させて培養し、得られたウイルス培養液を同一細胞株で繰返し継代することによりインフルエンザワクチン製造用のウイルスシードストックを製造することを含み、
前記継代でウイルス感染に使用した感染希釈倍数の培養液の中から細胞生存度(cell viability)が最も高い感染希釈倍数の培養液を選択するが、
細胞生存度がより低い培養液のHA力価(ただし、0である場合を除く)が、細胞生存度が最も高い前記培養液のHA力価に比べて4倍以上高い場合には、前記細胞生存度がより低い培養液を選択してその後の継代に使用することを含み、前記培養液の培養日数は1日~3日である、インフルエンザワクチン製造用のウイルスシードストックの感染力を増加させる方法。 - 前記無血清培養及び浮遊培養に適応した細胞株はMDCK細胞株であることを特徴とする、請求項11に記載のインフルエンザワクチン製造用のウイルスシードストックの感染力を増加させる方法。
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